Buğday çimi (Triticum Aestivum L.) ekstraktının MCF-7 hücre serisinde apoptotik ve antiproliferatif etkilerinin incelenmesi
Antiproliferative and apoptotic effects of wheat grass (Triticum Aestivum L.) extract on MCF-7 cell line
Yazar: SEZEN ÇOLAKOĞULLARI
Danışman: PROF. DR. İLKER DIBIRDIK
Trakya Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoteknoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Biyoteknoloji = Biotechnology ; Genetik = Genetics
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Elektron nakil kompleksi IV = Electron transport complex IV ; Genler-Bax = Genes-Bax ; Genler-Bcl-2 = Genes-Bcl-2 ; Genler-P53 = Genes-P53

Özet:
Bu çalışmada, buğday çim ekstresi (BÇE)'nin farklı konsantrasyonlarının MCF-7 insan meme kanser hücre dizisinde sitotoksik ve apoptotik etkileri araştırıldı. Ekstrenin sitotoksik etkileri MTT yöntemi ile değerlendirildi. Apoptotik aktivitesi Tali yöntemi kullanılarak belirlendi. Apoptotik etkinin detaylanması amacıyla MCF-7 hücre hatlarında P53, Bax, Bcl-2, Sitokrom-c, Apaf-1 ve Kaspaz-3 gen ekspresyonları RT-PCR ile incelendi.
Hem 24 hem de 48 saat uygulanan BÇE'nin konsantrasyona bağlı olarak MCF- 7 hücreleri üzerinde önemli sitotoksik aktivite gösterdiği belirlendi. Apoptotik aktivite de, sitotoksik aktiviteye paralel olarak 24 ve 48nci saatlerde 20k ve 40k dilue BÇE konsantrasyonlarında önemli artış gösterdi. RT-PCR'da elde edilen sonuçlar, BÇE'nin mitokondrial apoptozisi indüklediğini destekler yöndedir. BÇE ile muamele edilmiş MCF-7 hücrelerindeki en önemli gen ekspresyonu değişiminin 48 saatlik periyot için Apaf-1 ve Kaspaz-3 gen ifadelerinin artışı yönünde iken, 24 saatlik periyot için ise Bcl-2 gen ifadesinin azalışı (P<0.05) yönünde olduğu gözlendi.
Bu sonuçlar, BÇE'nin anti-kanser potansiyelinin apoptoz indüksiyonu ve antiproliferatif özellikleri nedeniyle olabileceğini düşündürmektedir. Ancak, moleküler düzeyde ileri çalışmalar BÇE'nin meme kanseri üzerindeki kemoterapötik etkisini detaylandırmak için gereklidir.

Abstract:
In this study, we investigated cytotoxic and apoptotic effects of different dilutions of wheatgrass extract (BÇE) on MCF-7 cells. Cytotoxic effects of BÇE on MCF-7 cells were determined by MTT assays. Apoptotic activity was measured by Tali assays. In order to detail the apoptotic effect, P53, Bax, Bcl-2, Apaf-1, Cytochrome-c, Caspase-3 gene expressions of the MCF-7 cells were examined by RT-PCR.
24 and 48 hour BÇE treatment showed statistically significant concentration-dependent cytotoxic effect on MCF-7 cancer cells. As well as antiproliferative activity, apoptotic activity of BÇE was detected at 20k and 40k diluted concentrations by 24- and 48-hours. RT- PCR results indicated that BÇE-induced apoptosis was via mitochondrial pathway. The most important BÇE-induced gene expression variations in MCF-7 cells were observed for both Apaf-1 and Caspase-3 genes as an increment for 48-hour period; and for Bcl-2 gene as a decrement for 24-hour period (P<0.05).
These results suggest that the anti-cancer potential of BÇE may be due to its apoptosis induction and anti-proliferative properties. However, further studies at molecular level are required to elucidate chemotherapeutic effect of BÇE on breast cancer.