Toxoplasma gondii antijenlerinin karakterizasyonu
Characterization of toxoplasma gondii antigens
Yazar: KEREM YAMAN
Danışman: PROF.DR. ÇİĞDEM GÜNGÖR
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Parazitoloji = Parasitology
Dizin: Antijenler = Antigens

Özet:
Toxoplasma gondii dünyada yaygın olarak görülen ve toksoplamoza yol açanparazittir. T. gondii zorunlu hücre içi yerlesim göstermektedir ve insanlar dahil tümsıcak kanlıları enfekte etmektedir. nsanlarda özellikle immun yetmezligi olanlardaciddi klinik belirtiler meydana getirmektedir. Konjenital bulas sonucundaolusabilecek hidrosefali, intrakranial kalsifikasyon ve korioretinit gibi önemli kliniktablolarla gelecek nesli tehdit etmektedir. Hayvanlarda meydana getirdigi düsüklerlede hayvancılıgın yaygın oldugu ülkelerde ekonomik kayıplara yol açmaktadır. Tanısıdirekt olarak PCR ile yapılırken, dolaylı tanı referans test olan Sabin-Feldman boyatesti, IHA, ELISA ve IFA gibi serolojik testlerle konmaktadır. Serolojik testlerdesaptanan antikorların titresi, sentezlenmelerine yol açan antijen yapısıyla iliskilidir,bu yüzden farklı suslardaki antijen yapılarının incelenmesi önem tasımaktadır.Bu çalısmada T. gondii'nin üç susu kullanılmıstır ve aralarındaki farklılıklarincelenmistir. Çalısmada kullanılan suslar RH, Ankara ve TS-4 suslarıdır. RH veAnkara susu virulan olup fare peritonu içine inoküle edilerek üretilmislerdir. TS-4susu avirulan olup, Vero hücre kültüründe üretilmistir. Yeterli miktarda üremeolduktan sonra takizoitler alınmıs ve parçalanmıstır. Parçalanan takizoitlerin proteiniçerikleri Bradford yöntemiyle saptanmıstır. Yogunlastırmak amacıyla liyofilizeedilen suslar ardından SDS- PAGE ile yürütülmüslerdir. Yürütülen antijenlergümüsleme ile boyanmıs ve ortaya çıkan bantlar standart protein ladder ilekarsılastırılmıstır.Karsılastırma sonucunda RH ve Ankara suslarının aynı antijenik yapılarıiçerdigi gözlenmistir. Avirulan TS-4 susu ise daha farklı ve genel olarak diger ikivirulan susa oranla daha az miktarda antijen yapısına sahiptir.Anahtar Kelimeler: Toxoplasma gondii, Antijen

Abstract:
Toxoplasma gondii is a worldwide parasite causing toxoplasmosis. T. gondii isan intracellular protozoon that infects all warm blooded animals including humans. tmay cause severe clinical disorders especially in immunsupressed humans.Congenital transmission of T. gondii may result in severe clinical symptoms likehydrocephalus, intracranial calsification and chorioretinitis threatening newgenerations. Economical losses in stockbreeding countries may be seen because ofabortus in animals. Direct diagnostic method is PCR and indirect methods areserological tests such as IHA, IFA, ELISA and a known reference test Sabin-Feldman dye test. As detected antibody titers in serological tests are correlated withantigens that cause synthesis of antibodies, it is important to know antigenicstructure of different strains.In this study three strains of T. gondii were used and differences wereexamined. RH, Ankara and TS- 4 strains were used. RH and Ankara strains whichare virulent were inoculated to peritoneal cavity of mice. TS- 4 strain is avirulent andproduced in Vero cell culture. After enhanced growth tachyzoites were taken andbroken down. Protein concentration was detected by Bradford method. Afterconcentration by lyophilisation they were run on SDS- PAGE gel. Afterpolichromatic silver stain antigens were compared by using a standard proteinladder.After comparison RH and Ankara strains were seen to have the same antigenicstructure. Avirulent TS-4 strain is different from the others and has much lessquantity of antigens.Key Words: Toxoplasma gondii, Antigen