Veratrum album bitkisinden saflaştırılan jervin'in varikosel oluşturulan rat modelinde testis dokusunda meydana gelen değişimler üzerindeki etkisinin incelenmesi
Examination the effect of jervin purified from the veratrum album on changes in testicular tissue of varicocele induced rats
Yazar: SERDAR YİĞİT
Danışman: DOÇ. DR. SEYİT ALİ BİNGÖL
Kafkas Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2021
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Jervin = Jervin ; Protein-P53 = Protein-P53 ; Sıçanlar = Rats ; Testis = Testis ; Tümör nekroz faktörü-alfa = Tumor necrosis factor-alpha ; Varikosel = Varicocele ; Veratrum L. = Veratrum L.

Özet:
Bu çalışmada varikosel rat modelinde veratrum album bitkisinden izole edilen
jervin'in testis dokusu üzerindeki etkilerinin histolojik, immunohistokimyasal,
biyokimyasal ve moleküler yöntemler kullanılarak incelenmesi amaçlanmıştır.
Deney hayvanı olarak 8 haftalık Sprague Dawley cinsi, ortalama ağırlıkları
180-200 g olan 40 adet erkek rat kullandı. Deney hayvanları rastgele 6 gruba ayrıldı;
kontrol, sham, sağlıklı+jervin (10 mg/kg), varikosel, varikosel+jervin (5 mg/kg),
varikosel+jervin (10 mg/kg)'dır. Hayvanlarda varikosel rat modeli oluşturuldu ve suda
çözdürülmüş jervin 4 hafta boyunca jervin gruplarındaki deney hayvanlarına gavaj
yoluyla verildi. Sol testis disseke edilip, eksize edildikten sonra histolojik,
biyokimyasal ve Real Time-PCR incelemeler için dokular alındı. Alınan dokular üç
parçaya ayrıldı. Her bir dokunun bir parçası histolojik incelemeler için % 10'luk
formaline alındı. Biyokimyasal ve Real Time-PCR çalışmaları için ayrılan doku
parçaları -80 °C saklandı.
Gruplar arasında yapılan karşılaştırmalarda canlı ve testis ağırlıkları
bakımından bir fark tespit edilmedi. Kontrol, sham ve sağlıklı+jervin (10 mg/kg)
gruplarında seminifer tübül yapısı normal görünümdeyken varikosel grubu ve
varikosel jervin gruplarında seminifer tübül yapılarında bozulmalar olduğu gözlendi.
Kontrol, sham ve sağlıklı+jervin (10 mg/kg) gruplarında intersitisiyel alanda bulunan
kan damalarının duvarında güçlü PAS pozitif reaksiyon gözlenirken, Leydig
hücrelerinin sitoplazmalarında zayıf PAS pozitif reaksiyon gözlendi. Varikosel+jervin
(10mg/kg) grubunda peritübüler interstisyel alanda, bazal membranda ve
spermatogenez aşamasındaki germ hücrelerinde PAS reaksiyonu kontrol grubuna
benzer düzeydeydi. Masson trikrome boyamada varikosel grubunda kan damarları
duvarında, tunika albugineada ve seminifer tübül duvarında kolajenin diğer gruplara
göre arttığı görüldü. Gruplar arasında sperm morfometrik ölçüm sonuçları benzerken
sperm baş ve kuyruk anomalileri bakımından farklılık olduğu görüldü.
TNF-α immunoreaktivitesinin varikosel grubunda daha güçlü olduğu görüldü.
Biyokimyasal olarak varikosel grubunda kontrol grubuna göre SOD enzim
aktivitesinin düşük CAT enzim aktivitesinin yüksek olduğu görüldü. Gruplar arasında
Real Time-PCR bulgularına göre hem TNF-α hem de p53 ekspresyon seviyelerinde
anlamlı fark tespit edildi. Jervinin varikoselde sperm anormalitesi üzerindeki
iyileştirici etkisi, testis dokusundaki antiinflamatuvar ve antioksidan düzenleyici
etkileri bulunmakla birlikte p53 üzerindeki inhibe edici etkiye sahip olduğu tespit
edildi. Jervinin, varikoselden kaynaklı sperm anormalitesi üzerinde iyileştirici bir
etkiye, testis dokusunda ise antiinflamatuvar ve antioksidan düzenleyici etkilere sahip
olduğu tespit edildi.
Anahtar Kelimeler: Jervin, p53, Testes, TNF-α, Varicocele,

Abstract:
In this study, it was aimed to investigate the effects of jervin, which was
isolated from Veratrum album, on testicular tissue obtained from induced varicocele
rats by using histological, immunohistochemical, biochemical and molecular
techniques.
In this experimental study, 40 male Sprague Dawley rats of 8-week-old with
an average weight of 180-200 g were used. Animals were randomly divided into 6
groups; control, sham, healthy+jervin (10 mg/kg), varicocele, varicocele+jervin (5
mg/kg) and varicocele+jervin (10 mg/kg). In varicocele groups varicocele was
surgically induced. Then jervin dissolved in water and this solution was given to
animals in the jervin groups via gavage for 4 weeks. After the left testes were dissected
and excised, tissues were divided into three parts for histological, biochemical and
Real Time-PCR examinations. A piece of each tissue was taken into %10 formalin for
histological examintion. The other tissue pieces for biochemical and Real Time-PCR
studies were stored at -80 °C. No difference was found in terms of body weight and
testicular weights among groups. It was observed that seminiferous tubules were
normal in the control, sham and healthy+jervin (10 mg/kg) groups but it was found
that seminiferous tubules were destroyed in the varicocele and varicocele+jervin
groups. In the wall of blood vessels in the interstitial tissue of testis in the control,
sham and healthy+jervin (10 mg/kg) groups was observed a strong PAS reaction,
while a weak PAS reaction was observed in the cytoplasm of Leydig cells. PAS
reaction in the interstitial area, basement membrane and germinal epithelium in the
varikosel+jervin (10mg/kg) group was similar to that of the control group. In Masson
trichrome staining, collagen amount increased in the wall of the blood vessels, tunica
albuginea and basement membrane of seminiferous tubules in varicocele group
compared to other groups. Morphometric results of sperm were similar among groups
but there was a difference among groups in terms of head and tail anomalies in sperms.
TNF-α immunoreactivity was stronger in the varicocele group than that of
others. It was found that SOD activity was decreased and CAT activity was increased
in varicocele group compared to the control group. It was determined that there was a
difference among groups in terms of TNF-α and p53 expression levels which obtained
by Real Time PCR. Jervin has an effect decreasing number of abnormal sperms in
varicocele and has effect regulating anti-inflammatory and antioxidant activity, but it
was determined that it has also an inhibitory effect on p53.
Keywords: Jervin, p53, Testes, TNF-α, Varicocele