Holştayn ırkı ineklerde aynı süperovulasyon protokolü üzerinde uygulanan iki farklı foliküler dalga senkronizasyon yönteminin embriyo verimi ve kalitesi üzerine etkisinin araştırılması
The effect of two different follicular wave synchronization methods applied on the same superovulation protocol on embryo yield and quality in Holstein breed cows
Yazar: HASAN MUTLU
Danışman: PROF. DR. CENGİZ YILDIZ
Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Doğum,Jinekoloji ve Suni Tohumlama (Veterinerlik) Anabilim Dalı
Derece: Doktora, 2024
Konu: Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine

Özet:
Süperovulasyon ve embriyo transferi, genetik ilerleme hızını artırma ve arzu edilen fenotiplerin daha hızlı çoğaltılması amacıyla kullanılan önemli bir hayvansal üretim programıdır. Bu çalışmanın amaçları; 1) iki farklı foliküler dalga senkronizasyon yönteminin (GnRH enjeksiyonu ve folikül aspirasyonu) elde edilen embriyo sayı ve kalitesi üzerine etkisini karşılaştırmak ve 2) süperstimülasyon uygulamasının antimüllerian hormon (AMH) seviyesine etkisinin araştırılmasıdır.
	Çalışmada her biri 10 Holştayn inekten oluşan üç grup hayvan (n=30) kullanıldı. Araştırma gurupları; presenkronizasyon + PRID-PG + 7. gün GnRH +48 saat sonra FSH (grup 1-modifiye GnRH), presenkronizasyon + PRID-PG + 7. gün foliküler aspirasyon + 48 saat sonra FSH (grup 2-modifiye folikül aspirasyon), ve PRID-PG + 7. gün GnRH + 36 saat sonra FSH (grup 3-orijinal GnRH) olarak oluşturuldu. Toplam 500 μg FSH azalan dozlarda 12 saat arayla 8 enjeksiyonla yapıldı. AMH için kan alımları, FSH enjeksiyonlarına başlamadan hemen önce (AMH1) ve süperstimülasyon bittikten 24 saat sonra (AMH2) gerçekleştirildi. Grup 1 ve 2'de süperovulasyona cevabı gösteren CL sayıları grup 3'ten yüksek bulundu (p<0.05). Grup 2'de fertilize olmamış oosit (UFO) (p<0.05), anovule folikül ve 4. kalite embriyo sayıları (p<0.01) ile 4. kalite embriyo (%) ve UFO (%) değerleri (p<0.05) grup 1ve 3'ten yüksek bulundu. Grup 1 ve 3'te ise transfer edilebilir embriyo (%) ve fertilize oosit (%) oranları (p<0.05) grup 2'den yüksek bulundu. Grup 3'te %71.42±22.91 kompakt morula kazanımı ile grup 1 ve 2'ye göre daha toplu gelişim aşamasında embriyo elde edildi (p<0.01). Dolaşımdaki AMH seviyesi artışının, FSH enjeksiyonlarına başlamadan hemen önce (AMH1) ile süperstimülasyon sonrası dönem (AMH2) arasında önemli düzeyde olduğu ortaya konuldu (p<0.05). 
Sonuç olarak, GnRH ile foliküler dalga senkronizasyon yönteminin kullanım kolaylığı, fertilize ve transfer edilebilir embriyo (%) oranlarının daha yüksek, 4.kalite (dejenere embriyo + UFO) embriyo sayısı ve (%) oranlarının daha düşük olmasından dolayı folikül aspirasyon yönteminden daha iyi olduğu tespit edildi. Süperstimülasyon sonrası ölçülen AMH değerlerinin de güvenilir bir indikatör olamayabileceği anlaşıldı.

Abstract:
Superovulation and embryo transfer is an important animal production program used to increase the rate of genetic progress and to reproduce desirable phenotypes faster. The objectives of this study are; 1) to compare the effect of two different follicular wave synchronization methods (GnRH injection and follicle aspiration) on the number and quality of embryos obtained, and 2) to investigate the effect of superstimilation application on the level of antimullerian hormone (AMH).
	 Three groups of animals (n=30) each consisting of 10 Holstein cows were used in the study. The research groups were as follows; presynchronization + PRID-PG + GnRH on day 7 + FSH after 48 hours (group 1-modified GnRH), presynchronization + PRID-PG + follicular aspiration on day 7 + FSH after 48 hours (group 2-modified follicular aspiration), and PRID-PG + GnRh on day 7 + FSH after 36 hours (group 3-original GnRH). A total of 500 μg FSH was administered in 8 injections 12 hours apart in decreasing doses. Blood sampling for AMH was performed immediately before starting FSH injections (AMH1) and 24 hours after the end of superstimulation (AMH2). CL numbers indicating response to superovulation were higher in groups 1 and 2 than that of in group 3 (p<0.05). The number of unfertilized oocytes (UFO) (p<0.05), anovulated follicles and 4th quality embryos (p<0.01), 4th quality embryos (%) and UFO (%) values (p<0.05) were higher in group 2 than groups 1 and 3. In groups 1 and 3, transferable embryo (%) and fertilized oocyte (%) rates (p<0.05) were higher than group 2. In group 3, 71.42±22.91% compact morula and embryos at a more collective stage of development were obtained compared to groups 1 and 2 (p<0.01). The increase in circulating AMH levels was found to be significant (p<0.05) between the period just before the start of FSH injections (AMH1) and the period after superstimulation (AMH2).

In conclusion, it was determined that the follicular wave synchronization method with GnRH was better than the follicle aspiration method due to its ease of use, higher fertilized and transferable embryo (%) rates, and lower number and (%) of 4th quality (degenerate embryo + UFO) embryos. It was also understood that AMH values measured after superstimulation may not be a reliable indicator.