Sıçanlarda deneysel testiküler iskemi reperfüzyon hasarında oltipraz (nükleer faktör eritroid-2 (NRF-2) aktivatörü)'ın koruyucu etkisi
Protective effect of oltipraz on experimental testiculars ischemia reperfusion injury in rats
Yazar: OSMAN CAN
Danışman: DOÇ. DR. ALPER ÖTÜNÇTEMUR
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / İstanbul Okmeydanı Eğitim. ve Araştırma. Hastanesi / Üroloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2020
Konu: Üroloji = Urology
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; NRF2 = NRF2 ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Spermatik kord torsiyonu = Spermatic cord torsion ; Sıçanlar = Rats ; Testiküler hastalıklar = Testicular diseases ; Testis = Testis ; İskemi = Ischemia

Özet:
Amaç: Testis torsiyonu teşhis sonrasında hızlı şekilde tedavi gerektiren ve testiste ileri düzeyde iskemiye sebep olan akut seyirli ürolojik acillerden birisidir. Torsiyon tedavisi olarak detorsiyon işlemi sonrasında meydana gelen iskemi-reperfüzyon (İ/R) süreçleri testiküler hasara neden olur. Çalışmamızın amacı oltiprazın, testiküler İ/R hasarında etkisini araştırmaktır.
Gereç ve yöntem: 28 adet Wistar-Albino sıçan randomize edilerek 4 eşit gruba ayrıldı. Grup A İ/R (7), Grup B İ/R+50 mg/kg Oltipraz (7), Grup C İ/R+150 mg/kg Oltipraz (7), Grup D Sham operasyonu (7) olarak gruplandırıldı. İ/R grubu 2 saat torsiyon sonrası detorsiyone edildi ve 4 saatlik reperfüzyon değerlendirildi, İ/R+Oltipraz tedavi gruplarından birisine İ/R grubuna ek olarak reperfüzyondan 30 dakika öncesinde intraperitoneal yoldan 50 mg/kg Oltipraz, diğer gruba ise 150 mg/kg Oltipraz uygulandı. Biyokimyasal olarak; testis dokusunda Transforme Edici Büyüme Faktörü (TGF-β1), Malondialdehid (MDA), Süperoksit dismutaz (SOD), Glutatyon (GSH) ve E-Kaderin ile değerlendirildi. Histopatolojik olarak Hematoksilen&Eozin (H&E) boyası ile boyandı ve ışık mikroskobik bulguları incelendi. Testiste spermatogenezis faaliyetini değerlendirmek için Johnsen Skoru uygulandı. İmmunohistokimyasal olarak da Apoptoz proteaz aktive edici faktör 1 (Apaf-1) ve indüklenebilir nitrik oksit sentetaz (iNOS) aktivitesi değerlendirildi. Sonuçlar Kruskal Wallis ve Mann Whitney-U testi ile karşılaştırıldı.
Bulgular: Biyokimyasal değerlendirmede; MDA(Malondildehit) ve Transforme Edici Büyüme Faktörü (TGF-β1) seviyeleri İ/R grubunda Sham grubuna göre anlamlı şekilde yüksek bulunurken oltipraz tedavi gruplarında TGF-β1 (Transforme Edici Büyüme Faktörü) ve MDA (Malondildehit) seviyesinde istatistiksel olarak anlamlı iyileşme saptanmıştır (p<0.05). Glutatyon (GSH), Süperoksit Dismutaz (SOD) ve E-kaderin seviyeleri İ/R grubunda tedavi ve Sham gruplarına göre daha düşük saptandı. Oltipraz tedavi gruplarındaki bu farklar Glutatyon düzeyinde anlamlı iken E-kaderin ve Süperoksit Dismutaz seviyelerinde anlamlı fark saptanmadı. Johnsen skorunun Sham grubuna göre İ/R grubunda daha düşük seviyede olduğu gözlendi (p<0.05). İmmunohistokimyasal değerlendirmede; Apaf-1 ve iNOS aktivitesinin; İ/R grubunda Sham grubuna kıyasla arttığı gözlendi, ayrıca İ/R grubuna oltipraz tedavisinin eklenmesiyle azaldığı gözlendi. Ayrıca İ/R+150 mg/kg Oltipraz tedavi grubunun iNOS boyanması İ/R grubuna göre anlamlı derecede düşük bulundu.
Sonuç: Tek taraflı testis torsiyonunda oltipraz tedavisinin iskemi reperfüzyon hasarına karşı koruyucu etkisi olduğunu söylenebilir. Bu koruyucu etkinin oltiprazın nükleer düzeydeki antiinflamatuar, antioksidan ve antiapoptotoik etkilerinden kaynaklandığını düşünmekteyiz.

Abstract:
Aim: Testicular torsion is an urgent urological condition requiring rapid treatment in the testis with acute onset that leads to advanced level of ischemia. Ischemia-reperfusion (I/R) processes that occur after detorsion as a torsion therapy cause testicular injury. The aim of our study is to investigate the effect of Oltipraz on testicular I/R injury.
Material-Methods: Twenty-eight Wistar-Albino rats were randomized into 4 groups. Sham (7), I/R (7); After 2 hours of torsion, detorsion was performed and 4 hours of reperfusion was assessed. I/R + oltipraz 50 mg/kg (7), I/R + oltipraz 150 mg/kg (7); Oltipraz treatment groups were administered as intraperitoneal 50 mg/kg oltipraz and 150 mg/kg oltipraz, 30 min before reperfusion. Biochemically; malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), glutathione (GSH), Transforming Growth Factor-β1 (TGF-β1) and E-Cadherin levels were evaluated in the testis tissue. Hematoxylin & eosin (H&E) stain was histopathologically stained and microscopic findings of light were examined. The Johnsen Score was applied to assess spermatogenesis activity in the testis. Apoptosis protease activating factor 1 (Apaf-1) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) activity were also evaluated immunohistochemically. Results were compared with Kruskal Wallis and Mann Whitney-U test.
Results: In biochemical evaluation; MDA and TGF-β1 levels were significantly increased in the I/R group compared to the Sham group; MDA and TGF-β1 levels were significantly decreased with the addition of oltipraz treatment groups (p <0.05). GSH, SOD and E-cadherin levels were found lower in the I/R group compared to oltipraz treatment groups and Sham group. This difference on GSH values was statistically significant in the oltipraz treatment groups, however SOD and E-cadherin levels were not statistically significant. The Johnsen score was the lower in the I/R group compared to Sham group (p <0.05). Johnsen scores of oltipraz treatment groups were higher from I/R group. On the immunohistochemical evaluation; Apaf-1 and iNOS activity; It was observed that I/R group increased significantly compared to Sham group, and it was observed that I/R group decreased with the addition of oltipraz treatment.
Conclusions: It can be said that oltipraz treatment is a protective effect against ischemia reperfusion injury in unilateral testicular torsion. We believe that this protective effect is due to the antiinflammatory, antioxidant and antiapoptotic properties of oltipraz.