Büyüme hormonu gen anlatımı arttırılmış meme kanseri hücrelerinde curcuminin apoptotik hücre ölümü üzerine etkisinde inflamasyonun rolü
The investigation of the role of inflammation in the curcumin induced apoptotic cell death in autocrine growth hormone induced breast cancer cell
Yazar: BUSE ÖZAKALTUN
Danışman: DOÇ. DR. AJDA ÇOKER GÜRKAN
İstanbul Kültür Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı / Moleküler Biyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2018
Konu: Biyoloji = Biology ; Moleküler Tıp = Molecular Medicine

Özet:
Dünya genelinde kadınlarda en sık görülen kanser türü meme kanseridir. Kanser
kaynaklı ölümler arasında meme kanseri akciğer kanserinden sonra kadınlarda ikinci
sırada gelmektedir. Meme kanseri gelişiminde HER2/neu (insan epidermal büyüme
faktörü reseptörü 2) gibi büyüme faktörleri, östrojen ve prolaktin (PRL) gibi
hormonların etkisi bilinmektedir. Son zamanlarda yapılan çalışmalara göre postnatal
dönemde hipofiz bezinden salınan BH'nin meme tümör biyopsi örneklerinde normal
meme epitel hücresine kıyasla artmış olduğu belirlenmiştir. Akromegali hastalığı gibi
malign durumların sıklıkla görüldüğü endokrin bozuklukların meme kanseri gelişimini
tetiklediği ve BH meme bezi gelişiminde prolaktin gibi indükleyici etkisi olduğu tespit
edilmiştir. Otokrin BH anlatımı kazandırılan meme kanseri hücre hatlarında hücre
invazyon, metastaz ve kanserojenik artış belirlenmiştir. Curcumin,
"Curcuma longa'' bitkisinin kökünden üretilen doğal bir bileşik olup, prostat, kolon,
servikal, melanoma, pankreas ve meme kanserleri üzerinde anti-oksidan, antiinflammatuar, anti-proliferatif ve anti-kanserojenik etkisi olduğu görülmüştür. In vitro
ve in vivo kanser modellerinde curcuminin kanser hacmini azalttığı, metastazı
engellediği gösterilmiş olsada klinik çalışmalar curcuminin stabilite kaynaklı etkisini
azaldığını ifade etmektedir. Ancak NF-B inhibitörü gibi görev yapan curcuminin
klinik çalışmalarda bazı kemotörapatik ilaçların (5-FU, docetaksel, gemsitamib)
karsinojenik etkisini arttırdığı pankreas, kolon ve meme kanseri vakalarında
gösterilmiştir. BH sinyalinde anahtar moleküllerden sinyal transdüseri ve
transkripsiyon aktivatörü 3 (STAT-3)'ün inhibitörü olarak görev yapan atiprimod,
anti-inflamatuar, anti-anjiyogenenik ve anti-karsinojenik ajan olarak meme kanseri,
melanoma ve hepatosellüler karsinomada etkisi gösterilmiştir. Bu tez ile amacımız,
otokrin BH anlatımı kazandırılan MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 ve T47D
meme kanseri hücre hatları üzerinde atiprimod'un curcumin uygulamasına bağlı
apoptotik hücre ölümü üzerine etkisinin irdelenmesidir. Atiprimod, MCF-7, MDAMB-231, MDA-MB-453 ve T47D hem doğal tip hem de BH anlatımı kazandırılan
meme kanseri hücrelerinde curcumin uygulaması kaynaklı hücre canlılığına ket vurma
potansiyelini arttırdığı tespit edilmiştir. Ayrıca atiprimodun, curcumin kaynaklı hücre
ölümü, mitokondri membran potansiyeline ket vurma potansiyelini ve apoptotik
ölümü tüm meme kanseri modellerinde BH anlatımına bağlı kalmadan arttırdığı PI,xvi
DAPI, DiOC6 floresan boyamaları, PI ve Annexin V/PI hücre akış sitometresi ile
gösterilmiştir. Böylece atiprimod uygulamasının otokrin BH bağlı curcumine karşı ilaç
direncini MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 ve T47 meme kanseri hücrelerinde
apoptotik hücre ölüm mekanizmasını aktive ederek gerçekleştirildiği tespit edilmiştir

Abstract:
The most common cancer type in women worldwide is breast cancer. Among cancerrelated deaths, breast cancer is the second most common cancer after lung cancer in
women. Growth factors such as HER2/neu in the development of breast cancer, the
effects of hormones such as estrogen and prolactin (PRL) are known. According to
recent studies, growth hormone (GH) released from the pituitary gland in the postnatal
period was found to be increased in breast tumor biopsy specimens compared to
normal breast epithelial cells. Malignant conditions, such as acromegaly, are
frequently observed in endocrine disorders, leading to breast cancer development. Like
prolactin, GH is found to be an inducer in mammary gland development. Forced GH
expression in breast cancer cell lines induced cell invasion, metastasis and
carcinogenesis. Curcumin is a natural compound produced from the root of ''Curcuma
Ionga'' and has anti-oxidant, anti-inflammatory, anti-proliferative and anticarcinogenic effects on prostate, colon, cervical, melanoma, pancreas and breast
cancers. Although curcumin has been shown to reduce cancer volume, inhibit
metastasis in vitro and in vivo cancer models, clinical studies suggest that the anticarcinogenic effect of curcumin is declined because of its stability problem in serum
sampels. However, in clinical trials curcumin, which acts as an NF-B inhibitor, has
been shown in the pancreatic, colon, and breast cancer cases to increase the
carcinogenic effect of some chemotherapeutic drugs (5-FU, docetaxel, gemcitabine).
Atiprimod, which acts as an inhibitor of STAT-3 from key molecules in the GH signal,
has been shown to be effective in breast cancer, melanoma and hepatocellular
carcinoma as anti-inflammatory, anti-angiogenic and anti-carcinogenic agents. The
purpose of this thesis is to investigate the effect of atiprimod on curcumin-induced
apoptotic cell death on autocrine GH expressing MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-
453 and T47D breast cancer cell lines. Atiprimod significantly increased cell viability
induced by curcumin MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 and T47D wild type and
GH+ breast cancer cells. It has also been shown that atiprimod has the potential to
inhibit curcumin-induced cell death, mitochondrial membrane potential loss, and
apoptotic death regardless of GH expression in all breast cancer models according to
PI, DAPI, DiOC6 staining, PI cell cycle and Annexin V/PI apoptotic cell death
analysis. Thus, it has been determined that atiprimod exposure increased the curcuminxviii
induced apoptotic cell death in MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-453 and T47D
GH+ breast cancer cells