Hormon reseptör pozitif meme kanseri hücrehattında propolis ve fitokimyasalların intrensek östrojen yolağı üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation effects of propolis and phytochemicals on the intrinsic estrogen pathway in hormone receptor positive breast cancer cell line
Yazar: İNCİLAY ÇELİK
Danışman: PROF. DR. OĞUZ ÖZTÜRK
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı / Moleküler Tıp Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2024
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine

Özet:
Meme kanseri insidansı 2004 yılından itibaren yılda %0,5 oranında artmaktadır. Meme
kanserinin en yaygın hormon pozitif tipini modelleyen MCF-7 hücrelerinde endokrin
tedaviye zamanla gelişen direncin hücre reseptör değişimi ve sinyal yolaklarıyla ilişkisi
gösterilmiştir. MCF-7 hücrelerinde orta derecede büyüme faktörü reseptörü (EGFR)
eksprese edildiği bilinmektedir. EGFR yolağı ve HER ailesi reseptörleri kazanılmış
dirençte rol oynamaktadır. Bitkilerin doğal ikincil metaboliti olarak antioksidan, antiinflamatuar,
anti-kanser özellikleriyle polifenolik bileşiklerin bazı kemoterapötikler gibi
direnç oluşturma potansiyeli bilinmemektedir. Çalışmamızda propolis ve propolis
içeriğinden zengin fenolik madde kombinasyonunun (PFK5120) EGFR sinyal yolağına
ve HER2 protein ekspresyonuna etkileri araştırılarak bu yolaklar aracılığıyla meme
kanseri endokrin tedavilerine karşı direnç mekanizmalarına potansiyel etkilerinin
araştırılmıştır. Hücre kültürü ortamında MCF-7 hücreleri 6,5-13-26 μg/mL doğal
propolis ve %3-6-12 PFK5120'ye maruz bırakılmıştır. EGFR yolağındaki mRNA
ekspresyon seviyelerine etkileri gerçek-zamanlı PCR tekniğiyle analiz edilmiştir. HER2
protein ekspresyonu western blotlama tekniği ve immünohistokimyasal boyama ile
değerlendirilmiştir. Hem propolis hem de PFK5120 muamelesi sonucu EGFR panelindeki
genlerin çoğunda mRNA ekspresyon seviyelerinde azalma görülmüştür. HER2 protein
ekspresyonlarında PFK5120 %12 doz 48 saatinde anlamlı bir artış görülürken, diğer
dozlarda ve zaman aralıklarında anlamlı değişim izlenmemiştir bu bulguları
immünohistokimyasal boyama sonuçları doğrulamıştır.
Sonuç olarak bulgularımız "propolis ve polifenolik karışımların çoklu biyolojik
mekanizmaları düzenleme kabiliyetleriyle kanser tedavisinde önemli kaynak
olabilecekleri öngörüsünü" EGFR yolağı ve HER2 ekpresyonu üzerindeki etkileriyle
teyit etmiştir. Bu verilerimiz ayrıca, doğal polifenollere kıyasla standardize polifenol
dolu kapsüller ve/veya nanoparçacıklarla yapılacak ileri çalışmalarla, kanser tedavisinde
yeni terapötik ajanlar olarak daha işlevsel, daha etkin ve geleneksel kanser ilaçlarına
alternatif olarak yan etkisi- az hatta olmayan doğal tedaviyi vaat etmektedir.

Abstract:
The incidence of breast cancer with an increase of 0.5% per year since 2004. MCF-7
cells have been shown to develop resistance to endocrine therapy over time and to be
associated with cell receptor alteration and signalling pathways. It is known that MCF-7
cells moderately express EGFR and the EGFR pathway play a role in acquired
resistance. The potential of polyphenolic compounds, which anti-cancer properties as
natural secondary metabolites of plants, to cause resistance, like some
chemotherapeutics, is unknown. This study aimed to investigate the effects of propolis
and a combination of propolis-rich phenolic substances (PFK5120) on the EGFR
signalling pathway and the HER2 protein expression, as well as to examine the potential
impact on resistance mechanisms against endocrine therapies for breast cancer. MCF-7
cells were exposed to doses of natural propolis and PFK5120 in cell culture medium, with
concentrations ranging from 6.5 to 13 μg/mL and 3 to 12%, respectively. The effects on
mRNA expression levels in the EGFR pathway were analysed by QPCR. HER2 protein
expression was evaluated by western blotting and immunohistochemical staining. Both
substances treatment resulted decrease in mRNA expression levels for the majority of
genes in the EGFR panel. HER2 protein expression was observed to be significantly
increased at 48 hours of PFK5120 12% dose, while no significant change was observed at
other doses. These findings were confirmed by immunohistochemical staining results.
Our findings confirmed 'the prediction that propolis and polyphenolic substance
mixtures may be important sources for cancer treatment with their ability to regulate
multiple biological mechanisms'. Our findings also indicate that further studies
comparing standardised polyphenol-filled capsules and/or nanoparticles with natural
polyphenols may yield more effective and less or even no side-effect natural treatments
as new therapeutic agents in cancer treatment, potentially offering an alternative to
traditional cancer drugs.