Bıldırcın ve ratların karın boşluğunda lokal savunma odaklarının araştırılması.
Local immune focuses in the peritoneal cavity of the rats and quails.
Yazar: SENEM SAYDAM
Danışman: PROF.DR. ÜLKER EREN
Adnan Menderes Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology

Özet:
Bu amaçla 48 adet 8 haftalık eriskin erkek Wistar rat ve 48 adet 8 haftalık Japonbıldırcını (Coturnix coturnix japonica) kullanıldı. Birinci gruptaki hayvanlara intraperitonealolarak, 0.1 ml %0.9 NaCl'de 80 mg BSA (Bovine serum albumin-BSA-Sigma) eritilerekhazırlanan stok solusyondan, 80 mg/kg olacak sekilde enjekte edildi. Aynı islem ikinci grupolan ratlara aynı oranda sadece %0.9 NaCl verilerek gerçeklestirildi.Enjeksiyondan 1, 3, 6, 24 saat ve bir hafta sonra, her seferinde altısar adet hayvanöldürülerek, bıldırcınlarda parietal periton, mezenter; ratlarda parietal periton, mezenter veomentum majus örnekleri toplandı. Aynı islem %0.9 NaCl verilen grupta da her defasında üçhayvanda gerçeklestirildi. Rat ve bıldırcınlarda herhangi bir uygulama yapılmayan üçüncügruptan da üçer hayvandan doku örnekleri alındı. Hazırlanmıs bloklardan 50 ?m ara ile 6 ?mkalınlıgında alınan seri kesitlere Üçlü Boyama teknigi, Periodic Acid Schiff (PAS)reaksiyonu, Metyl Green Pyronin, Toluidin blue (pH:2,5) boyama metodu, ve makrofajlarındemonstrasyonu için Strept Avidin-Biotin Peroksidaz Kompleks boyama yöntemi uygulandı.Ratlarda omentum ve bıldırcınlarda mezenter kesitlerinde lenfoid hücre birikimlerininalanı, X40'lık büyütme kullanılarak görüntü analiz sistemi (Leica DMLB arastırmamikroskobu ve DC 200 CCD kamera ile Q Win Standart görüntü analiz programı) yardımıylainteraktif yolla hesaplandı.Hazırlanan preparatlar ısık mikroskopik düzeyde incelenerek gerekli görülenkısımların fotografları alındı.Ratlarda omentum, mezenter ve parietal peritonda; bıldırcınlarda ise sadece mezenterdelenfoid hücre birikimleri halinde lokal savunma odaklarına rastlandı.Ratların omentum örneklerinde lenfoid hücre birikimlerinin bir kapsül ile sarılıolmadıkları, kapilar damarların bulundugu, az miktarda bag doku içermekle birliktebünyelerinde yag hücrelerini içerdikleri gözlendi. Boyutlarının yaklasık 12193,42±25 ?m2oldugu belirlendi. Mezenter ve parietal periton örneklerinde ise lenfoid hücre birikimlerine azsayıda ve daha küçük boyutlarda rastlandı. PAS reaksiyonu sonucunda lenfoid hücrebirikimlerinin bulundugu bölgelerde bazal laminaya rastlanmadı. Omentum, mezenter veparietal periton örneklerinde lenfoid hücre birikimlerinde lenfositler, makrofajlar, plazmahücreleri, mast hücreleri, tespit edildi.Ratlarda BSA enjekte edilen grupta farklılıgın 6. ve 24. saatte anlamlı oldugu tespitedildi (p<0,001).Bıldırcınların mezenter örneklerinde lenfoid hücre birikimlerinin yaklasık 2492,14±32?m2 oldugu belirlendi. Parietal periton örneklerinde ise lenfoid hücre birikimlerinerastlanmadı. PAS reaksiyonu sonucunda lenfoid hücre birikimlerinin bulundugu bölgelerdebazal laminaya rastlanmadı. Mezenter örneklerinde belirlenen hücre birikimlerinde plazmahücreleri ayırt edilemedi. Lenfositler, mast hücreleri ve makrofajlar belirlendi.Periton bosluguna BSA enjekte edilen grupta, enjeksiyondan bir saat sonra kontrolgrubuna göre lenfoid hücre birikim alanlarının arttıgı (p<0,01) görüldü.Sonuç olarak; ratlarda ve bıldırcınlarda karın boslugunda (omentum, mezenter veparietal peritonda) lenfoid hücre birikimlerinin bulundugu ve antijenik uyarıma cevap verdigitespit edildi. Ratlarda bu odakların sekonder nitelikte olduguna, bıldırcınlardaki bu odaklarınniteliginin kesinlestirilebilmesi için farklı antijenlerle yapılacak çalısmalara gereksinimolduguna karar verildi

Abstract:
For this purpose, 8 weeks old 48 male Wistar rats and Japanese quails (Coturnixcoturnix japonica) were used. Animals of both arts divided into subgroups. One groupsreceived 80 mg BSA (Bovine serum albumin-BSA-Sigma) dissolved in 0.1 ml 0.9% NaClintraperitoneally. Second groups received the same amount NaCl solution. Another groupswith no application of BSA or NaCl served as controls.At the 1, 3, 6 and 24 h after injections 6 animals from BSA injected groups and 3animals from NaCl injected groups from both species were scarified. Parietal peritoneum andmesentery samples from quails, and parietal peritoneum, mesentery and omentum majussamples from rats were collected. Similarly, tissue samples from 3 animals in control groupswere also taken. Triple staining technique, Periodic Acid Schiff (PAS) reaction, Methyl GreenPyronin, Toluidin blue (pH:2,5) staining method, and for the demonstration of macrophagesStrept Avidin-Biotin Peroxidase Compleks method were applied on the 6 ? thick serialsections with 50 ? intervals taken from prepared blocks.The aggregation areas of the lymphoid cells were calculated on the omentum sectionsof rats and mesentery sections of quails at X40 magnification with help of the system (LeicaDMLB research microscopy and DC 200 CCD camera with Q Win Standard image analyzerprogram) by the interactive rout.Prepared sections were investigated with light microscopy, and if necessary,photographed by the research microscopy with help of image analyzer system attached to it.Local immune focuses were seen as locale lymphoid cell aggregations in the omentum,mesentery and parietal peritoneum in rats, whereas in quails they were only seen inmesentery.It was observed that in omentum samples of rats the lymphoid cell aggregates were notsurrounded by a capsule, there were capillaries, they had some connective tissue and includedfatty cells in their structure. There dimension was in mean 12193.42±25 ?m2. On contrary,lesser lymphoid cell aggregates with smaller dimensions were observed on mesentery andparietal peritoneum. PAS reaction revealed the absence of the basal laminain the regions where lymphoid cell aggregates were located. Lymphocytes, macrophages,plasma cells and mast cells were detected on the lymphoid cell aggregates of omentum,mesentery and parietal peritoneum samples.In BSA-injected group of rats the differences were significant at the 6th and 24thhours (p<0,001).The dimensions of the lymphoid cell aggregates on the mesentery samples of quailswere in mean 2492,14±32 ?m2. There was no lymphoid cell aggregate on parietal peritoneumsamples. PAS reaction revealed the absence of the basal lamina in the regions wherelymphoid cell aggregates were located. In the cell aggregates found on mesentery samples noplasma cell was detected, but lymphocytes, mast cells and macrophages were.It was seen that when compared to controls the lymphoid cell aggregates increased inBSA-injected group of quails after 1 hour of injection (p<0,01).As a result, it was determined that both in rats and quails lymphoid cell aggregates arepresent in the abdominal cavity (in omentum, mesentery and parietal peritoneum) and theyreact to antigenic stimulation. It was decided that these focuses are of secondarycharacteristic. However, studies with different antigens have been seen as necessary to make adefinite decision in quails.