Düşük yoğunluklu lazer uygulamasının tavşan kraniyal defektlerinde kemik rejenerasyonu üzerine etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effects of low level laser therapy in boneregeneration at rabbit cranial defects
Yazar: BİRTAN TOLGA YILMAZ
Danışman: DOÇ. DR. ABDULLAH CEVDET AKMAN
Hacettepe Üniversitesi / Diş Hekimliği Fakültesi / Periodontoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry

Özet:
Daha sonra doldurulacaktır.Bu çalışmanın amacı, düşük yoğunlukta (diod) lazerin farklı uygulama protokollerinin tavşanlarda oluşturulan deneysel kraniyal defektlerinin iyileşmesine etkilerinin histolojik, histopatolojik ve mikroBT incelemeleri ile değerlendirilmesidir. Ayrıca, 2. hafta sonunda yapılan histolojik ve immunohistokimyasal incelemeler ile diod lazer uygulamasının biyolojik etki mekanizmalarının belirlenmesi hedeflendi. Çalışmada 2,5-3,5 kg arasında 26 adet Yeni Zelanda Beyaz Tavşan'ı kullanıldı. Bunun için öncelikle, tavşan kafalarında anestezi altında gerçekleştirilen cerrahi işlemle 8 mm çapında defektler hazırlandı. Tavşanlara post operatif (ameliyat günü) dahil olmak üzere gün aşırı olarak 10 gün boyunca toplam beş defa lazer uygulaması yapıldı. Her hayvanda oluşturulan 4 farklı defektin biri kontrol grubu olarak kullanıldı. Deney grubunda kullanılan diğer defektlere ise 4 j/cm2,  6 j/cm2 veya 8 j/cm2 enerjiyle diod lazer uygulaması yapıldı. İkinci hafta sonunda histopatolojik, immunohistokimyasal ve mikroBT analizler için 5 tavşan sakrifiye edildi. Dördüncü ve 8. haftalarda ise 10'ar hayvan olmak üzere 20 tavşan mikro BT, histopatolojik ve immünohistokimyasal analizler için sakrifiye edildi. İncelenen toplam tavşan sayısı 26'dır. Mikro BT görüntüleme inceleme sonuçları; düşük yoğunluklu lazer uygulaması yapılan tüm gruplarda kontrol grubuna kıyasla istatistiksel anlamlı olarak daha fazla yeni kemik oluşumu görüldü (p<0.0001). Lazer grupları arasında etkinliği en yüksek kemik oluşumu 6 jul düşük yoğunluklu lazer uygulaması yapılan grupta saptanırken, bu fark istatistiksel olarak anlamlı bulunmadı. Bu veriyle uyumlu olarak; hematoksilen eozin ve masson trikrom boyamalarında ikinci haftada sakrifiye edilen hayvanlar incelendiğinde kontrol gruplarına kıyasla test gruplarında defekt çeperinde daha çok kemik adaları izlendi ve bu kemik adaları çevresinde aktif osteoblastik aktivite tespit edildi. Sırasıyla 2., 4., 8. hafta grupları arasında konak kemikle yeni kemik formasyonu arasında daha geniş alanlarda füzyon görüldü. İkinci haftada sakrifiye edilen hayvanlar üzerinde yapılan immunohistokimyasal değerlendirmede BMP-2 seviyesinin 4 jul grubunda daha yüksek olduğu saptandı. Ancak bu fark istatistiksel olarak anlamlı bulunmadı. Osteokalsin boyamasında ise 4 jul grubunda daha fazla osteokalsin ekspresyonu istatistiksel olarak anlamlı ölçüde yüksek bulundu (P<0.0833, n=5). Çalışmadan elde ettiğimiz bulgular, düşük yoğunluklu lazer uygulamasının tavşan kraniyal defektlerinde yeni kemik formasyonunu olumlu şekilde etkilediğini göstermektedir. 4 j/cm2 ve 6 j/cm2 dozlarının yüksek etkinlikleri klinik uygulamalarda düşük yoğunluklu lazer uygulamasının, periodontal rejenerasyon, kret arttırma işlemleri ve diş implantı uygulaması gibi erken dönem iyileşmenin önem arz ettiği uygulamalar açısından umut verici olduğu düşünülmektedir.

Abstract:
The aim of this study is to determine the levels of bone filling and bone formation with histological, histopathologic and microCT examinations at the 4th and 8th weeks of rabbit cranial defects of different application protocols of low density (diode) laser. In addition, histological and immunohistochemical evaluations at the end of the second week are aimed to determine the mechanism of the diode laser. In this study 26 New Zealand White Rabbits were used between 2,5-3,5 kg. Firstly, 8 mm diameter defects were prepared by surgical procedure performed under anesthesia in rabbit calvarias. The rabbits received a total of five laser treatments for 10 days, including postoperative day. The laser doses tested were 4 joules, 6 joules and  8 joules. At the end of the second week, 5 rabbits were sacrificed for histological, immunohistochemical and microCT analyzes. At the 4th and 8th weeks, 20 rabbits were sacrificed for microCT, histopathologic and immunohistochemical analysis. The total number of rabbits was 26. Findings of micro CT evaluation revealed , more bone fill  found in test  treated groups compared to non-treated group (p<0.0001). The most effective group among laser groups was the 6 joules low intensity laser application group. Histopathological examination revealed more bone islands in the defect wall compared to the control defects. Osteoblastic activity was detected around the bone islands. BMP-2 levels were higher in 4 joule group by immunohistochemical evaluation on sacrificed animals at 2nd weeks. However, this difference is not statistically significant. In osteocalcin staining, osteocalcin expression was significantly higher in 4 joule groups. In the light of these findings, low-intensity laser application positively affects new bone formation in rabbit cranial defects. The high efficacy of doses of 4 j/cm2 and 6 j/cm2 is thought to be promising in applications.  Stimulation with diode laser during the early phases  of clinical applications such as periodontal regeneration, crest augmentation procedures, and dental implant surgery  can be useful to modify and enhance wound healing and regeneration.