TRPC gen ailesinin yaşa bağlı ayrımsal ekspresyonu ve değişen vasküler reaktivite profilleri
Age-dependent differential expression of TRPC gene family and altered vascular reactivity profiles
Yazar: YASEMİN ERAÇ
Danışman: DOÇ.DR. METİNER TOSUN
Ege Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Yaşlanma = Aging

Özet:
Bu çalışma sıçan torasik aortundaki yaşlanmaya-bağlı vasküler reaktivite kalıplarındaki değişimlerinTRPC kanal proteinlerinin ekspresyon düzeyleri ile ilişkili olup olmadığını araştırmaktadır. Fenilefrin ileön kastırma yapılmış damar dokularının asetilkolin ve siklopiazonik asit ile uyarılması ile oluşanendotele-bağlı gevşeme yanıt kalıpları belirlenmiştir. TRPC'lerin mRNA ve protein düzeyindekiayrımsal ekspresyonları sırasıyla gerçek zamanlı nicel polimeraz zincir reaksiyonu ve Western blotaracılığı ile saptanmıştır. TRPC proteinlerin vasküler yerleşimleri immünohistokimyasal yöntemleincelenmiştir. TRPC1, C3, C4 ve C6 vasküler düz kasta yaşlanma sürecinde transkripsiyonel düzeydedeğişmezken endotelyal TRPC3 ve C4 mRNA düzeyleri sırasıyla yaklaşık olarak 3 ve 9 kat azalmıştır.TRPC5 mRNA her iki dokuda da belirlenememiştir. İfade edilen protein bakımından, TRPC6 sağlamaortta artmıştır (P<.05). İstatistiksel olarak anlamlı olmamakla beraber, TRPC1, C3 ve C4 proteindüzeyleri yaşlanmayla azalmıştır. İmmünohistokimyasal çalışmalarda tüm TRPC'ler için gerekvasküler düz kas gerekse de endotelde pozitif boyama gözlenmiştir. TRPC1 ve C4'ün depo-kontrollükanalları oluşturduğu düşünüldüğünden yaşlanmaya bağlı azalan asetilkolin ve siklopiazonik asit ileuyarılan endotel-kaynaklı gevşemelerin söz konusu proteinlerin sentezindeki azalmayla ilişkili olduğugörünmektedir. TRPC6 ifadesindeki artış fenilefrin duyarlığındaki artışla ilişkili olabilir ve bu ?1-adrenerjik reseptör-aracılı aktive olan Ca+2 kanallarındaki temel işleve ek bir kanıt oluşturabilir.TRPC'lerin gerek vasküler düz kastaki gerekse de endoteldeki ifade kalıpları bu kanal proteinlerininyaşlanma sürecinde Ca+2 homeostazı ve kan basıncının kontrolünde yaygın bir işlevi olduğunuönerebilir.

Abstract:
This study investigates whether age-dependent vascular reactivity profile is associated with theexpression of canonical transient receptor potential channel proteins in rat thoracic aort. Endotheliumdependentrelaxation patterns were determined by acetylcholine- and cyclopiazonic acid-inducedrelaxations in phenylephrine-precontracted tissues. Differential expressions of TRPCs in terms ofmRNA and protein levels were assessed by quantitative real time-PCR and Western Blot, respectively.Vascular distributions of TRPC proteins were analyzed by immunohistochemistry. Transcriptionallevels of TRPC1, TRPC3, TRPC4 and TRPC6 did not change in vascular smooth muscle whileendothelial TRPC3 and TRPC4 decreased (app. three- and nine-fold, respectively) by aging. TRPC5mRNA was not detected in either tissues. However, in terms of protein levels, TRPC6 increased(P<.05) in intact aort. Although not significant, TRPC1, TRPC3 and TRPC4 protein levels wereattenuated by aging. In immunohistochemical studies, positive staining observed both in vascularsmooth muscle and endothelium for all TRPCs. Since TRPC1 and TRPC4 are assumed to form storeoperatedchannels, impaired acetylcholine- and cyclopiazonic acid-induced endothelium-derivedrelaxations are apparently associated with down-regulation of these proteins in aging. IncreasedTRPC6 expression may be correlated with enhanced phenylephrine potency that present furtherevidence for its essential role in ?1-adrenergic receptor-activated Ca+2 -permeable cation channel.Expression patterns of TRPCs in both vascular smooth muscle and endothelium may suggest aubiquitous role of these channel proteins in Ca+2 homeostasis and control of blood pressure duringaging.