Meme kanseri hücrelerinde karnosik asit ve oleuropeinden zengin bitki özütleri ve salisilik asitin sitotoksik ve apoptotik etkilerinin araştırılması
Investigation of cytotoxic and apoptotic effects of carnosic acid and oleuropein-rich plant extracts and salicylic acid in breast cancer cells
Yazar: FUNDA PEHLEVAN
Danışman: PROF. DR. OĞUZ ÖZTÜRK
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine
Dizin: Karnozik asit = Carnosic acid ; Meme hastalıkları = Breast diseases ; Meme neoplazmları = Breast neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Oleuropein = Oleuropein ; Salisilik asit = Salicylic acid

Özet:
Meme kanseri kadınlarda en sık görülen kanser çeşididir. Üçlü negatif olarak adlandırılan agresif meme kanserinin standart tedavi seçenekleri reseptör kayıpları ve tümör homejenitesi sebebi ile çok etkin sonuçlar vermemekte veya kısa sürede direnç oluşmaktadır. Bitkilerin ikincil metabolitleri ve bitki özleri ile yapılan bazı çalışmalarda agresif kanser hücrelerinde hücre çoğalmasının azalması ve hücre ölümüne gidişin artması gözlemlenmiştir. Çalışmamızda üçlü negatif meme kanserini temsil eden MDA-MB-231 hücre hattı ve fibroblast benzeri MCF-10A kontrol hücre hatlarına Karnosik asit ve Oleuropeinden zengin bitki özütleri ve Salisilik asit bireysel ve kombin olarak uygulanmış ve sitotoksik etkileri değerlendirilmiştir. WST-1 analizi ile yapılan analizde sözkonusu maddelerin bireysel uygulamalarının sitotoksisite ile sonuçlandığı gözlenmiştir (p<0,0001). Tekli IC50 değerlerine göre oluşturulan 3'lü karışımın IC50 değeri ba zalınarak (%50) yapılan analizde kombin madde uygulanması da MDA-MB-231 hücrelerinde sitotoksisite ile sonuçlanmıştır. Annexin V deneyleri sitotoksik etkinin apoptoz kaynaklı olduğunu doğrulamıştır (p<0,005). Uygulanan 3'lü karışımın hücre apoptoz ve hücre döngüsü yolağında görev yapan APAF-1, BCL-2, BAX ve CDK2 ekspresyon değişimleri RT-PCR yöntemi ile belirlenmiştir. MDA-MB-231 hücrelerinde APAF-1de 17,5 kat olmak üzere BCL-2 12,2 kat, BAX 2,7 ve CDK2 2,1 kat olarak ekspresyonlarında artış gözlemlenmiştir. Karnosik asit, Oleuropeinden zengin bitki özütleri ve Salisilik asit'in bireysel ve kombin uygulamalarının agresif meme kanseri hücre hattında etkin sitotoksik potansiyelini gösteren bulgularımız sözkonusu doğal biyoaktif maddelerin kemoterapiye yardımcı ve preventif olarak kullanılabileceğini de vaat etmektedir.

Anahtar Kelimeler: Agresif Meme Kanseri, Karnosik asit, Oleuropein, Salisilik asit, MDA-MB-231
Bu çalışma, İstanbul Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Birimi tarafından desteklenmiştir. Proje No: 32461

Abstract:
Breast cancer is the most common type of cancer in women. Standard treatment options for the most aggressive breast cancer, triple negative, do not give very effective results due to loss of receptors and tumor homogeneity, or resistance occurs shortly. In some studies with secondary metabolites of plants and plant extracts, a decrease in cell proliferation and an increase in cell death have been observed in aggressive cancer cells. In our study, Carnosic acid and Oleuropein rich plant extracts and Salicylic acid were applied individually and in combination to MDA-MB-231 cell line representing triple negative breast cancer and fibroblast-like MCF10-A cell line as control to evaluate their cytotoxic effects. WST-1 analysis showed that the individual applications of these substances resulted in cytotoxicity (p<0.0001). In the analysis based on the IC50 value of the triple mixture formed according to the single IC50 values (50%), the application of the combined substance also resulted in cytotoxicity in MDA-MB-231 cells. Annexin V analysis confirmed that the cytotoxic effect was due to apoptosis (p<0.005). The expression changes of APAF-1, BCL-2, BAX and CDK2, which are involved in the cell apoptosis and cell cycle pathway, induced by the applied triple mixture were determined by RT-PCR method. In MDA MB 231 cells, increase in the expression of APAF-1 was observed as 17.5 fold, BCL-2 as 12.2 fold, BAX 2.7 and CDK2 as 2.1 fold. Our findings showing the effective cytotoxic potential of individual and combined applications of carnosic acid, Oleuropein-rich plant extracts and Salicylic acid in aggressive breast cancer cell line also indicate that these natural bioactive substances can be used as an adjunct and preventive to chemotherapy.
Key Words: Aggressive Breast Cancer, Carnosic acid, Oleuropein, Salicylic acid, MDA-MB-231 
The present work was supported by the Research Fund of Istanbul University. Project No. 32461