Bazı biyoaktif peptidlerin insan serumundan saflaştırılananjiotensin konverting enzim (ace, e.c.3.4.15.1) aktivitesine etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of some bioactive peptides on the activity of angiotensin converting enzyme (ace, e.c.3.4.15.1) purified from human serum
Yazar: RESUL ADANAŞ
Danışman: PROF. DR. VEDAT TÜRKOĞLU
Van Yüzüncü Yıl Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2023
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
Biyoaktif peptidler, hipertansiyon tedavisinde kullanılan sentetik anjiotensin
konverting enzim (ACE) inhibitörlerine doğal ve önemli bir alternatiftir. Bu çalışmada
ACE, afinite kromatografisi işlemi ile insan serumundan tek adımda 3575 kat
saflaştırıldı. ACE enziminin molekül ağırlığı SDS-PAGE yöntemi ile 60 kDa ve 70 kDa
olmak üzere iki alt birim olarak belirlendi. Lineweaver-Burk grafiğinden Vmax ve KM
değerleri sırasıyla 96.15 (μmol/dk).mL-1
ve 0.2 mM olarak hesaplandı. Gly-Pro (GP),
Arg-Gly-Asp-Ser (RGDS) ve Ser-Asp-Gly-Arg-Gly (SDGRG) biyoaktif peptidlerinin
saflaştırılan ACE aktivitesi üzerine etkisi araştırıldı. Ayrıca spesifik bir ACE inhibitörü
olan lisinopril bileşiğinin inhibisyon etkisi belirlendi. İnsan serumundan saflaştırılan
ACE aktivitesi üzerine GP, RGDS ve SDGRG önemli ölçüde inhibitör etkisi gösterdi.
Bu peptidler için IC50 değerleri sırasıyla 184.71 μM, 107.16 μM ve 32.54 μM olarak
bulundu. Lineweaver-Burk grafikleri ile GP, RGDS ve SDGRG için Ki değerleri ve
inhibitör türü bulundu. Bu peptidler için inhibitör türü, dönüşümlü-yarışmalı inhibitör
olarak belirlendi. Ki değerleri GP, RGDS ve SDGRG için sırasıyla 260.02 μM, 63.44
μM ve 11.42 μM olarak hesaplandı. Lisinoprilin IC50 değeri 0.35 nM olarak bulundu.
Lisinoprilin inhibisyon tipi, dönüşümlü-yarışmasız inhibitör ve Ki değeri 0.15 nM
olarak belirlendi. Bu çalışmada GP, RGDS ve SDGRG peptidlerinin ACE aktivitesi
üzerine inhibitör etkisi göstermesi ile bu peptidlerin hipertansiyon tedavisinde alternatif
olabileceği sonucuna varıldı

Abstract:
Bioactive peptides are a natural and important alternative to synthetic
angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitors used in the treatment of hypertension.
In this study, ACE was purified 3575-fold from human serum in a single step by affinity
chromatography process. The molecular weight of the ACE enzyme by SDS-PAGE
method was determined as two subunits, 60 kDa and 70 kDa. Vmax and KM values with
the Lineweaver-Burk graph were determined as 96.15 (μmol/min).mL-1
and 0.2 mM,
respectively. The effect of Gly-Pro (GP), Arg-Gly-Asp-Ser (RGDS), and Ser-Asp-GlyArg-Gly (SDGRG) bioactive peptides on purified ACE activity was investigated. In
addition, the inhibition effect of lisinopril, a specific ACE inhibitor, was determined.
GP, RGDS, and SDGRG showed a significant inhibitory effect on ACE activity purified
from human serum. IC50 values for these peptides were found to be 184.71 μM, 107.16
μM, and 32.54 μM, respectively. Ki values and inhibitor type for GP, RGDS and
SDGRG were found with Lineweaver-Burk graphs. The inhibitor type for these
peptides was designated as a reversible-competitive inhibitor. Ki values were calculated
as 260.02 μM, 63.44 μM, and 11.42 μM for GP, RGDS, and SDGRG, respectively. The
IC50 value of lisinopril was determined as 0.35 nM. The type of inhibition of lisinopril
was determined as a reversible-non-competitive inhibitor and the Ki value was 0.15 nM.
In this study, it was concluded that GP, RGDS and SDGRG peptides may be an
alternative in the treatment of hypertension as they have inhibitory effects on ACE
activity.