Yaşa bağlı makula dejenerasyonlu olgularda prokoagülan aktiviteye sahip olan mikro vezikül (MPs) fonksiyonel düzeylerinin biyobelirteç olarak klinik önemi
Clinical importance of microvesicular (MPs) functionalities in procoagulant activity in age releated macular dejeneration
Yazar: ŞEHİDE BAZ
Danışman: DOÇ. DR. HALE ARAL
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / İstanbul Eğitim ve Araştırma Hastanesi / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı / Biyokimya Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2017
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Anjiyogenez inhibitörleri = Angiogenesis inhibitors ; Biyobelirteçler = Biomarkers ; Diabetik retinopati = Diabetic retinopathy ; Koagülantlar = Coagulants ; Makula dejenerasyonu = Macular degeneration ; Mikroparçacıklar = Microparticles ; Neovaskülarizasyon = Neovascularization ; Trombin = Thrombin ; Vezikül = Blister ; Yaş faktörleri = Age factors

Özet:
Mikro Vezikül (Microparçacıklar: MPs), hücre aktivasyonu veya apoptoz sırasında
hücre membranından ekzositozla oluşan, prokoagülan özelliği bulunan, küçük membran
vezikülleridir.
Yaş tip yaşa bağlı makula dejenerasyonunda (YBMD) neovaskülarizasyon görülür
ve göz-içi anti-Vascular Endothelial Growth Factor (anti-VEGF) tedavi vasküler büyümede
supresyona neden olmaktadır. İçinde bulunduğumuz laboratuvar koşullarında, yaş tip
YBMD olgularda plazma MPs fonksiyonel düzeylerinin biyobelirteç olarak klinik
değerinin araştırılmasını amaçladık.
Göz hastalıkları polikliniklerinde izlenmekte olan hastalar çalışmaya alınmıştır.
Hastalık ve ilaç/sigara/hastalık öyküsü, demografik bilgiler, bel çevresi, boy-ağırlık, kan
basıncı ölçümleri ve göz kliniği ölçümleri kaydedilmiştir. Plateletten fakir plazma (PPP)
örnekleri -80°C'de hemen dondurulmuştur.
Tüm olgular 4 gruba ayrılarak incelenmiştir; grup-1 (kontrol grubu): diyabetik
olmayan sağlıklı bireyler (N=37); grup-2: diyabetik retinopati tanısı almış hastalar (N=40);
grup-3: kuru tip yaşa bağlı makula dejenerasyonu tanısı almış hastalar (N=41); grup-4: yaş
tip yaşa bağlı makula dejenerasyonu tanısı almış hastalar (N=40).
Rutin biyokimya testlerine ilaveten, mikroparçacıklar trombin oluşum yöntemiyle
Calibrated Automated Thrombography (Stago Diagnostics, Fransa) cihazında fonksiyonel
olarak belirlenmiştir.
Günümüzde, trombin oluşumunun değerlendirilmesi çeşitli hemostatik bozukluklar
için tarama, tanı ve tedavi takibinde çok yararlı bir araç olarak görülmektedir. Elde edilen
'trombogram eğrisi' zaman içerisinde oluşan thrombin miktarını gösterir, bu sayede çok
sayıda yararlı parametreler sağlanır, biz bunlardan beşini değerlendirdik; lag time (dakika),
endojen thrombin potansiyeli (ETP) olarak bilinen eğrinin altında kalan alan
(nmol/L•dakika), Peak yüksekliği (nmol/L), tepe yüksekliğine gelme süresi olan ttPeak
(dakika), eğrinin tamamlandığı süre startTail (dakika).xi
Çalışmamızda, diyabetiklerde BMI değerleri, kontrol olgulardan daha yüksek ve
ETP değerleri daha düşük bulundu. Hastaların obezite derecesi veya diyabet durumu (yaşı)
buna yol açmış olabilir. DM hastalarda görülen hiperaktif platelet fenotipine yol açan çok
sayıda mekanizma bulunmaktadır.
Yaş tip YBMD olgularında, inflamasyon zemininde MPs fonksiyonel düzeylerini
ölçtük ve TGT parametrelerinden üçü (ETP, Peak, statTail) ile serum CRP değerleri
arasında korelasyon görüldü. Yine yaş tip YBMD olgularında göz kliniği ölçüm
parametreleri ile MPs parametreleri arasında ilişki bulundu. MPs fonksiyonel düzeyleri
için kritik değerlerin belirlenmesinde ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.

Abstract:
Micro vesicles (Microparticles: MPs) with procoagulant properties are small
membrane vesicles composed by exocytosis during cell activation or apoptosis.
Neovascularization is seen in wet type age-related macula degeneration (AMD),
and intraocular anti-Vascular Endothelial Growth Factor (anti-VEGF) therapy is used to
supress vascular growth. We aimed to investigate whether determination of plasma MPs
functional levels have any clinical value as a biomarker for neovascularization in wet type
AMD, in our laboratory conditions.
Patients followed up at our ophtalmology out-patient clinics were included our
study. Data including drug/smoking/illness history, demographic information, waist
circumference, height-weight, blood pressure measurements and ophthalmic measurements
were all recorded. Platelet poor plasma (PPP) samples were stored immediately at -80°C.
All the cases were investigated in four different groups; group 1 (control group):
non-diabetic healthy individuals (N=37); group 2: patients diagnosed diabetic retinopathy
(N=40); group 3: patients diagnosed dry type AMD (N=41); group 4: patients diagnosed
wet type AMD (N=40).
In addition to the routine biochemistry tests, microparticles have been detected
functionally using thrombin generation method at Calibrated Automated Thrombography
(Stago Diagnostics, France).
The assessment of thrombin generation is currently regarded as a useful tool for
screening, diagnosis, and therapeutic monitoring of a variety of hemostatic disorders. The
resulting 'thrombogram curve' expresses the amount of thrombin generated over time, and
also provides several useful parameters, we used five of them; the lag time (minute), and
the area under the curve (nmol/L•minute), which is conventionally referred to as
endogenous thrombin potential (ETP), the Peak height (nmol/L), the time to peak: ttPeak
(minute), the time of the completion of the curve startTail (minute).
In our study, diabetics had significantly higher BMI values than controls and less
ETP values than controls. The differences in the degree of obesity or diabetic status (age) 
xiii
of patients would be causative factors. Several mechanisms are involved in the
hyperreactive platelet phenotype characterizing DM patients.
We measured MPs functional levels under inflammatory status, and found
significant correlation between three TGT parameters of ETP, Peak, statTail and serum Creactive
protein levels in wet type AMD. There was also correlation between the
ophtalmological parameters and MPs parameters in wet type AMD. Further investigations
are needed to estimate critical values of MPs functional levels.