Ratlarda oluşturulan deneysel peritonit modelinde intraperitoneal hipokloröz asit (HOCL)'nin bakteriyel translokasyona etkisi
The effect of intraperitoneal hypochlorous acid ( HOCL ) on bacterial translocation in an experimental model of peritonitis in rats
Yazar: AHMET CONTARLI
Danışman: ÖĞR. GÖR. İSMAİL ZİHNİ
Süleyman Demirel Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Genel Cerrahi = General Surgery
Dizin: Bakteriyel translokasyon = Bacterial translocation ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Hipokloröz asit = Hypochlorous acid ; Periton hastalıkları = Peritoneal diseases ; Peritonit = Peritonitis ; Sıçanlar = Rats ; Tümör nekroz faktörü-alfa = Tumor necrosis factor-alpha ; İnterleukin 6 = Interleukin 6

Özet:
Peritonit ve sonrasında gelişebilecek sepsis mortalitesi yüksek olan klinik durumlardan birisidir. Sitokin fırtınası ve sepsisin oluşturduğu organ hasarı bu sürece etki eder. Sistemik inflamatuar yanıt sendromunda etkili olan; ilk olarak salgılanan ve en etkin olan madde TNF-alfa dır. Uzak organ hasarına sebep olan mediatörlerden en önemlisi ise IL-6'dır. Sepsisin oluşturduğu organ disfonksiyonu da çoklu organ yetmezliğine ve ölüme neden olabilir. Hipokloröz asit (HOCl) geniş antibakteriyel, antiviral, antiseptik ve dezenfektan özellikleriyle birçok alanda kullanılmaktadır. Son yıllarda yapılan çalışmalar sonucunda HOCl' nin; Mikroorganizmalara karşı hızlı (12 saniye) ve düşük dozlarda (3-4 ppm) etkin olduğu, mikroorganizmaların oluşturdukları biyofilm tabakasını eradike ettiği ve biyofilm altındaki mikrorganizmaları öldürdüğü, yaranın iyileşmesinde yer alan fibroblast ve keratinositlerin proliferasyonunu arttırarak yara iyileşmesini hızlandırdığı gösterilmiştir. Bu çalışmada HOCl' nin, ratlarda deneysel olarak oluşturulmuş peritonit modelinde; Sham, kontrol, CLP+SF, CLP+HA gruplarında 11' er rat dahil ederek toplamda 44 rat ile çalışıldı. Kontrol grubundaki 1 rat exitus olduğu için çalışma dışı bırakıldı. Çalışmada; özellikle batın içi irrigasyonda rutin olarak kullandığımız serum fizyolojik ile gelecekte klinik pratikte kullanılmasının uygun olacağını düşündüğümüz HOCl karşılaştırıldı. CLP+SF ile CLP+HA grubundaki ratlar arasında karaciğer doku kültürü, dalak doku kültürü, mezenter lenf nodu doku kültürü bakımından istatistiksel olarak anlamlı bir farklılık olduğu gözlendi (sırasıyla p<0,001, p=0,004, p=0,001). Ancak CLP+SF ile CLP+HA grubundaki ratlar arasında kan kültürü bakımında anlamlı bir fark olmadığı tespit edildi (p=0,181). Kan kültüründe sayısal olarak bakteri üremesini azaltmasına rağmen CLP+HA grubuyla diğer gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki olmadığının saptanması örneklem büyüklüğünün kısıtlılığına ve deneyin peritonit/sepsis modeli olması nedeniyle deney süresinin kısalığına bağlandı. Bununla birlikte alınan kan örneklerinden çalışılan ELISA sonuçlarında inflamasyon belirteçleri olan TNF-alfa ve IL-6 ortalama değerlerinin deneydeki rat gruplarına göre istatistiksel olarak anlamlı ölçüde farklılık göstermediğini ve böylece HOCL 'nin inflamasyonu baskılamadan bakteriyel translokasyonu belirgin düzeyde azalttığı bulundu. Klinik pratikte HOCl' nin kullanımının yaygınlaşmasıyla perforasyona sekonder peritonit/karın içi sepsiste mortalite ve morbiditenin düşeceği, hastanede yatış süresinin kısalacağı, artan medikal tedavi masraflarının düşeceği ve sağlık alanında ülke ekonomisine katlı sağlayacağı öngörülmektedir.


Anahtar kelimeler: Hipokloröz asit, peritonit, bakteriyel translokasyon, IL-6, TNF- alfa

Abstract:
Peritonitis and sepsis that may develop afterwards is one of the clinical conditions with high mortality. Organ damage caused by cytokine storm and sepsis affect this process. Effective in systemic inflammatory response syndrome; TNF- alpha is the first secreted and the most active substance. The most important  mediator that causes distant organ damage is IL-6. Organ dysfunction caused by sepsis can also cause multiple organ failure and death. Hypochlorous acid (HOCl) is used in many fields with its broad antibacterial, antiviral, antiseptic and disinfectant properties. As a result of studies conducted in recent years, Hypochlorous acid; It has been shown that it is effective against microorganisms quickly (12 seconds) and at low doses (3-4 ppm), eradicates the biofilm layer formed by microorganisms and kills the microorganisms under the biofilm, and accelerates wound healing by increasing the proliferation of fibroblasts and keratinocytes involved in wound healing. In this study, in the experimentally created peritonitis model of hypochlorous acid in rats; A total of 44 rats were studied, including 11 rats each in the Sham, control, CLP+SF, and CLP+HA groups. One rat in the control group was excluded from the study because it was exitus. In the study; In particular, we compared the saline that we routinely use for intra-abdominal irrigation with hypochlorous acid, which we think will be suitable for use in clinical practice in the future. A statistically significant difference was observed between the rats in the CLP+SF and CLP+HA groups in terms of liver tissue culture, spleen tissue culture, and mesentery lymph node tissue culture (p<0.001, p=0.004, p=0.001, respectively). However, there was no significant difference in  blood culture care between the rats in the CLP+SF and CLP+HA groups (p=0.181). The fact that there was no statistically significant relationship between the CLP+HA group and the other groups, although it reduced bacterial growth in blood culture numerically, was attributed to the limited sample size and the short duration of the experiment since the experiment was a peritonitis/sepsis model. However, in the ELISA results studied from blood samples, it was found that the mean values of TNF-alpha and IL-6, which are inflammation markers, did not differ statistically from the rat groups in the experiment, and thus HOCL significantly reduced bacterial translocation without suppressing inflammation. With the widespread use of hypochlorous acid in clinical practice, it is predicted that mortality and morbidity will decrease in peritonitis/intra- abdominal sepsis secondary to perforation, the length of hospital stay will be shortened, the increasing medical treatment costs will decrease and it will contribute to the national economy in the field of health.


Keywords: Hypochlorous acid, peritonitis, bacterial translocation, IL-6, TNF-alpha