Polikistik over sendromlu hastalarda irisin düzeyinin önemi
The significance of irisin levels in patients with polycystic ovary syndrome
Yazar: ATAHAN TOYRAN
Danışman: PROF. DR. HACER CAVİDAN GÜLERMAN
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / Ankara Bilkent Şehir Hastanesi / Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2021
Konu: Kadın Hastalıkları ve Doğum = Obstetrics and Gynecology
Dizin: Polikistik over sendromu = Polycystic ovary syndrome ; İnsülin direnci = Insulin resistance ; İrisin = Irisin

Özet:
AMAÇ: Bu çalışmanın amacı PKOS'lu hastalar ile sağlıklı gönüllü bireylerde irisin düzeyinin belirlenmesi, irisinin PKOS tanısında kullanılıp kullanılamayacağının gösterilmesi, irisin düzeyi ve insülin rezistansı arasında ilişki olup olmadığının belirlenmesi ve irisinin PKOS patofizyolojisindeki yerinin daha iyi anlaşılmasıdır. 
MATERYAL ve METOD: Çalışmamız hastanemiz İnfertilite / PKOS polikliniğine başvuran Rotterdam kriterlerine göre PKOS tanısı almış 72 hastayı ve benign nedenlerle reprodüktif endokrinoloji polikliniğine başvuran 72 sağlıklı gönüllü kadını kapsamaktadır. Çalışmamızın tasarımı prospektif, kesitsel, vaka-kontrol, gözlemsel bir araştırma olarak yapılmıştır. Çalışma ile ilgili bilgilendirildikten sonra araştırmaya katılmaya gönüllü olan, sözlü ve yazılı onamları alınan PKOS hasta grubundan ve kontrol grubundan irisin düzeylerinin belirlenmesi amacıyla serum örnekleri alınmıştır. Her katılımcının menstrüel periyodunun 2. veya 3. gününün sabahı, 8 saatlik açlık periyodunu takiben antekübital venöz kan örnekleri (yaklaşık 10 cc) alınmıştır. Katılımcılardan alınan kan örnekleri 30 dakika içinde santrifüj cihazında santrifüj edilerek, serum kısmı ayrıldıktan sonra serum örnekleri eppendorf tüplerine alınarak çalışma gününe kadar -80 °C'de saklanmıştır. Power analizi sonucu belirlenen çalışma örneklem büyüklüğüne ulaşılınca hasta alımına son verilmiştir. PKOS ve kontrol grubundan alınan kan örneklerinde ELISA tekniği kullanılarak serum irisin düzeyi ölçülmüştür. Sonuçlar ng/ml biriminde raporlanmıştır. Total testosteron, DHEA-S, SHBG, HbA1c, açlık glukozu, açlık insülini, 25-hidroksi vitamin D, FSH, LH, estradiol, AMH seviyeleri ve lipid parametreleri hastane bilgi yönetim sisteminden bulunarak araştırma formlarına dahil edilmiştir. Bahsi geçen değerlerin hepsi Ankara Şehir Hastanesi Merkez Laboratuvarlarında çalışılmıştır. İnsülin rezistansının hesaplanması için homeostatik model formülü HOMA-IR kullanılmıştır. İstatistiksel analizler için NCSS (Number Cruncher Statistical System) Statistical Software (Utah, USA) programı kullanılmıştır. Araştırmamız Sağlık Bilimleri Üniversitesi Ankara Şehir Hastanesi Tıpta Uzmanlık Eğitimi Kurulu'nun 02/09/2020 tarihli E1-20-1039 sayı numaralı kararı ile onay almıştır.
BULGULAR: Çalışmamızda PKOS grubu olguların irisin düzeyi, kontrol grubu olgularına göre istatistiksel olarak anlamlı düzeyde düşük saptanmıştır (p=0,006; p<0,01). PKOS grubu olguların VKİ, total testosteron, LH/FSH oranı, DHEA-S, AMH, açlık glukozu ve HOMA-IR değerleri kontrol grubuna göre istatiksel olarak anlamlı yüksek saptanmışken, yaş ve SHBG değerleri istatiksel olarak anlamlı düşük saptanmıştır. PKOS ve kontrol grubu olgularda insülin direnci görülme oranları arasında istatistiksel olarak anlamlı farklılık saptanmamıştır. Olguların VKİ, HOMA-IR ölçümleri ile irisin düzeyleri arasında negatif yönlü istatistiksel olarak anlamlı ilişki bulunmuşken, 25-hidroksi vitamin D, SHBG, total kolesterol ve HDL ölçümleri ile irisin düzeyleri arasında pozitif yönlü istatistiksel olarak anlamlı ilişki bulunmuştur. İnsülin direncine göre olguların irisin düzeyleri arasında istatistiksel olarak anlamlı farklılık saptanmamıştır. Çalışmamızda irisin için olan anlamlılıktan yola çıkarak hastalığı saptamak için bir cut-off noktası hesaplanması düşünüldü. PKOS durumuna göre cut-off noktası saptamada ROC analizi ve tanı tarama (sensivite, spesifite) testleri kullanıldı. Değerlendirmeler sonucunda irisin için elde edilen cut-off noktası 16,2 ng/ml olarak saptanmıştır. İrisinin 16,2 ng/ml cut-off değeri için; duyarlılık %87,5; özgüllük %38,89; pozitif kestirim değeri %58,90 ve negatif kestirim değeri %75,70'tir. Elde edilen ROC eğrisinde altta kalan alan %63,2 standart hatası %4,6 olarak saptanmıştır. 
SONUÇ: 72 PKOS'lu hasta ve 72 sağlıklı gönüllü üzerinde serum irisin düzeyini incelediğimiz çalışmamızda, serum irisin düzeyi PKOS grubunda kontrol grubuna göre istatiksel anlamlı düşük bulunmuştur. PKOS'lu hasta grubunda ve kontrol grubunda insülin direnci görülme oranları arasında farklılık saptanmamıştır ve insülin direncine göre olguların irisin düzeyleri arasında anlamlı fark saptanmamıştır. Bu açıdan çalışmamız insülin direncinden bağımsız olarak PKOS'lu hastalarda irisin düzeyinin düşük olduğunu göstermektedir. İrisinin PKOS için tanı tarama (sensivite, spesifite) testi sonuçları çalışmamız sonucunda anlamlı çıkmıştır fakat literatürde PKOS'lu hastalarda irisin düzeyi ile ilgili çelişkili sonuçlar olması nedeniyle irisinin PKOS'ta bir tanı belirteci olarak kullanması için daha geniş hasta ve kontrol gruplarında geniş ölçekli çalışmalar yapılması gerektiği görüşündeyiz. Serum irisin düzeyinin PKOS patofizyolojisindeki yerinin daha iyi anlaşılabilmesi için çalışmamızın daha büyük hasta gruplarında yapılacak çalışmalarla desteklenmesi gerekmektedir. Çalışmamız sonucunda PKOS hastalarında irisin düzeyinin kontrol grubuna kıyasla düşük bulunması ve literatürde rekombinant teknoloji ile üretilen irisinin fare modellerinde kilo verdirici ve kaliteli folikül artırıcı etkisinin gösterilmesi ile çalışmamız irisinin PKOS'ta terapötik amaçla kullanımı için hayvan modellerinde daha çok çalışma yapılmasını destekler niteliktedir.

Abstract:
The Significance of Irisin levels in Patients with Polycystic Ovary Syndrome
OBJECTIVE: The purpose of this study is to compare the level of irisin in patients with PCOS and healthy individuals in order to establish whether irisin can be used in the diagnosis of PCOS and to determine if there is a relationship between irisin levels and insulin resistance, and to better understand the role of irisin in PCOS pathophysiology.
MATERIAL and METHODS: Our study includes 72 patients who were diagnosed with PCOS according to the Rotterdam criteria who applied to our hospital's Infertility / PCOS outpatient clinic and 72 healthy volunteer women who applied to the reproductive endocrinology outpatient clinic for benign reasons. Our study was conducted as a prospective, cross-sectional, case-control, observational study. After being informed about the study, serum samples were taken from both the PCOS patient group and the control group, who volunteered to participate in the study and whose verbal and written consents were obtained, in order to determine irisin levels. Antecubital venous blood samples (approximately 10 cc) were taken on the morning of the 2nd or 3rd day of each participant's menstrual period, following an 8-hour fasting period. The blood taken from the participants was centrifuged in the centrifuge device in the laboratory within 30 minutes of the sample being taken and the samples were placed into eppendorf tubes and stored at -80 ° C until the day of study. The patient intake was terminated when reaching the sampling size determined as a result of the Power analysis. Serum irisin levels in the blood samples taken from the PCOS and control groups were measured with the ELISA technique. Results are reported in unit ng / ml. Total testosterone, DHEA-S, SHBG, HbA1c, fasting glucose, fasting insulin, 25-hydroxy vitamin D, FSH, LH, estradiol, AMH levels and lipid parameters of all individuals participating in the study were found in the hospital information management system and included in the research forms. All of the mentioned values have been studied in Ankara City Hospital Central Laboratories. The homeostatic model formula HOMA-IR was used to calculate the insulin resistance. The gathered data were statistically analyzed via NCSS (Number Cruncher Statistical System) Statistical Software (Utah, USA). The research approval was obtained from the University of Health Science Ankara City Hospital Ethics Committee (E1-20-1039) on 19 September 2020.
RESULTS: In our study, the irisin level of the PCOS group cases was found to be statistically significantly lower than the control group cases (p=0,006; p<0,01).  In patients with PCOS, BMI, total testosterone, LH / FSH ratio, DHEA-S, AMH, fasting insulin and HOMA-IR were statistically significantly higher than control group cases; age and SGBH levels were found to be statistically significantly low. No statistically significant difference was found between the rates of insulin resistance in the cases according to the groups. While the negative correlation between irisin and BMI, HOMA-IR was found statistically significant in the correlation analysis, a positive correlation was found between irisin and 25-hydroxy vitamin D, SHBG, total cholesterol, and HDL. No statistically significant relationship was found between irisin levels of the cases according to insulin resistance. ROC analysis and diagnostic screening tests were used to determine the cut-off point according to the PCOS status. The cut off point obtained for irisin was determined as 16.2. For 16.2 cut-off value of the irisin; sensitivity was %87,5, and the specificity was %38,89; the positive predictive value was %58,90 and the negative predictive value was %75,70. The area under the ROC curve was %63,2 and the standard error was %4,6. 
CONCLUSION: In our study where we examined the serum irisin level on 72 PCOS patients and 72 healthy individuals, serum irisin levels were found to be statistically significantly lower in the PCOS group compared to the control group. There was no significant difference in insulin resistance rates between the PCOS patient group and the control group, and there was no significant difference between the irisin levels of the cases according to insulin resistance. In this respect, our study shows that irisin level is low in patients with PCOS, regardless of insulin resistance. The results of the diagnostic screening test of irisin for PCOS were found to be significant as a result of our study, but we believe that large-scale studies should be conducted in larger patient and control groups to use irisin as a diagnostic marker in PCOS due to conflicting results in the literature regarding the level of irisin in patients with PCOS. In order to better understand the role of serum irisin level in the pathophysiology of PCOS, our study should be supported by studies to be conducted in larger patient groups. As a result of our study, the low irisin level in PCOS patients compared to the control group and the demonstration of the weight-losing and quality follicle enhancing effect of irisin produced with recombinant technology in mouse models in the literature supports the further studies in animal models for the therapeutic use of irisin in PCOS.