Deneysel sıçan vankomisin rezistan enterokok kolonizasyon modelinde lactobacillus rhamnosus, pediococcus acidilactici ve saccharomyces boulardiiprobiyotiklerinin etkisinin histolojik ve mikrobiyolojik olarak incelenmesi
Examination of lactobacillus rhamnosus gg, saccharomyces boulardii, and pediococcus acidilacticii c69 probiotics' histological and microbiological effects on the vancomycin-resistant enterococci colonization in a rat model
Yazar: SEVGİ TOPAL
Danışman: PROF. DR. İLKER DEVRİM
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / İzmir Dr.Behçet Uz Çocuk Hastalıkları Ve Cerrahisi Eğt. ve Arş. Hast. / Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2015
Konu: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases

Özet:
Bu çalışmada VRE gastrointestinal kolonizasyonu sonrasında probiyotiklerin etkili 
olup olmayacakları, eğer etkili ise çeşitli probiyotik grupları arasında fark olup olmayacağının 
mikrobiyolojik ve histopatolojik olarak araştırılması amaçlandı.
Öncelikle literatürde sıçanlarda VRE ile kolonizasyon oluşturulduğuna dair bulgu 
olmadığından 3 sıçan ile bir pilot çalışma yapıp kolonizasyon oluşturulabileceği gösterildi. 
Sonrasında rastgele seçilen 28 sıçan daha çalışmaya dahil edilerek hepsi de 5x109
CFU/ml 
VRE içeren 1,5 mg/ml konsantrasyonunda serum fizyolojik (%0,9 NaCI) solüsyonu verilerek 
kolonize edilmişlerdir. Kolonizasyon işleminden sonra hepsinden dışkı örneği alınarak 
kolonizasyon işlemi yapılan 4 ayrı grup ve yapılmayan 1 grup yani toplamda 5 grup 
oluşturulmuştur. KG kolonizasyon işlemi yapılmayan ve herhangi bir şey uygulanmayan 
kontrol grubu, SF grubu oral gavajla SF uygulanan grup, LR grubu oral gavajla Lactobacillus 
rhamnosus uygulanan grup, PA grubu oral gavajla Pediococcus acidilactici uygulanan grup, 
SB grubu ise oral gavajla Saccharomyces boulardii uygulanan grup. KG'deki sıçanlar 
histopatolojik verileri karşılaştırmak üzere kontrol grubu olarak alınmıştır. SF,LR,PA ve SB 
gruplarındaki sıçanların hepsinden 3.gün, 5.gün ve 9.gün VRE yükü ; 5.gün ve 9.gün 
probiyotik yükü tayini için dışkı örnekleri alınmıştır. En son dışkı örneklerinden sonra ise tüm 
sıçanlar yüksek doz genel anestezi ile sakrifiye edildiler. Terminal ileum, çekum ve kolonu 
içeren doku örnekleri histopatolojik olarak değerlendirildi. 
 Araştırma sonuçlarının istatistik analizi, SPSS için Windows istatistik programının 
16.0 versiyonu kullanılarak Kruskal-Wallis testi ile (nonparametrik bir test) değerlendirilme 
yapılıp, 'p' değerinin 0,05 in altında olması anlamlı kabul edildi. Ayrıca gruplar ikişerli 
olarak Mann Whitney U testi ile karşılaştırılarak bakıldı.
Sonuçlar değerlendirildiğinde gerek VRE yükünün azalması gerek histopatolojik 
olarak, probiyotiklerin SF uygulanan gruba göre iyileşme sağlayıcı olduğunu göstermiştir. 
Ancak Lactobacillus rhamnosus uygulanan gruptaki sıçanların yanıt düzeyleri Pediococcus 
acidilactici ve Saccharomyces boulardii grubuna göre kısmi olarak daha azdır. Pediococcus 
acidilactici ve Saccharomyces boulardii grubundaki sıçanların VRE yükleri arasında sadece 
5.gün sonuçlarında anlamlı farklılık vardır ve bu probiyotik yükü karşılaştırılması 
değerlendirildiğinde Saccharomyces boulardii grubunun daha hızlı yüksek kolonizasyon 
değerine ulaşabilmesine bağlanmıştır. Ayrıca histopatolojik değerlendirmelerde de 
2
Saccharomyces boulardii grubunun incelenen tüm segmentlerde (terminal ileum, 
çekum,kolon) diğer probiyotiklerden daha etkili olduğu gösterilmiştir.
Bu çalışma ile gastrointestinal sistemin VRE ile kolonizasyonu sonrasında probiyotik 
uygulamasının iyileşme üzerine olumlu etki oluşturulabileceği sonucuna varılmıştır

Abstract:
In this study, we have aimed to investigate if probiotics are effective or not after 
gastrointestinal colonization of VRE and if they are effective, we have aimed to investigate if 
there is a difference between different probiotics groups microbiologically and 
histopathologically. 
First of all, we have made a pilot study about rats by using 3 rats and this study showed 
us that rats could be colonized by VRE. Because there was no study about it Than we have 
chosen 28 rats randomly. We have given all rats 5x109
CFU/ml VRE containing in 1,5 
mg/ml concentration serum (%0,9 NaCI) to colonize. After the colonization procedure, we have 
taken gaita samples from 5 groups( 4 of 5 colonized, 1 of 5 non-colonized). Group CG was 
non-colonized as a control group, in group SF we have applied serum (%0,9 NaCI) by oral 
gavage, in group LR we have applied Lactobacillus Rhamnosus by oral gavage, in group PA 
we have applied Pediococcus Acidilactici by oral gavage and finally, in group SB we have 
applied Saccharomyces Boulardii by oral gavage. We chose group CG as a control group 
to compare histopathologic results. We have taken gaita samples from all rats in groups SF, LR, 
PA, SB on 3th, 5th, and 9th days for VRE loads and 5th, 9th days for probiotics loads. 
After we take all the samples, all rats have been sacrificed under high-dose general anesthesia. 
And we have examined ileum, caecum, and colon histopathologically. 
 We have used SPSS version 16.0 for Windows with the Kruskal-Wallis test (a non-parametric test) to analyze the results of our study. We have accepted it as meaningful when 'p' 
value was under 0.05. We have also used the Mann-Whitney U test to compare groups couples 
by a couple. 
When we have evaluated the results probiotics have better results about decreasing of 
VRE load and histopathologically healing than serum (%0,9 NaCI). However Lactobacillus 
Rhamnosus applied rats have less response level than Pediococcus Acidilactici and
Saccharomyces Boulardii applied rats. Between Pediococcus Acidilactici and Saccharomyces 
Boulardii applied rats, there was a meaningful difference only on the 5th day. And we thought 
that this was due to the rapidly reaching high colonization value of Saccharomyces Boulardii
applied rats. Also, histopathologic evaluations have shown us that Saccharomyces 
Boulardii was more effective than other probiotics in all segments(terminal ileum, caecum, and colon).
This study has shown that probiotics usage could have a positive effect on healing after 
VRE colonization of the gastrointestinal tract.