Deneysel sepsis modellerinde Morus Nigra (Kara Dut)'nın sepsis tedavisi ve mortalitesindeki etkisi
Effect of Morus Nigra (Black Mulberry) on sepsis treatment and mortality in experimental sepsis models
Yazar: MURAT ALİ ŞEN
Danışman: PROF. DR. MURAT ERSEL
Ege Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Acil Tıp Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2019
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology ; Patoloji = Pathology ; İlk ve Acil Yardım = Emergency and First Aid
Dizin: Histopatoloji = Histopathology ; Karadut = Black mullberry ; Ligasyon = Ligation ; Mortalite = Mortality ; Morus nigra L. = Morus nigra L. ; Perforasyon = Perforation ; Sepsis = Sepsis ; Tedavi = Treatment ; Çekum = Cecum

Özet:
AMAÇ: Sepsis yüzyıllardır süregelen bir morbidite ve mortalite sorunudur. Sepsis tedavisinde mevcut patojene yönelik çeşitli tedavi yöntemleri kullanılsa da, tedavide kesin ve etkili denebilecek bir yöntem mevcut değildir. Morus nigra, içerdiği fluvanoidler ve antioksidan kapasitesi ile hem tıbbi, halk arasında şifalı olduğuna inanıldığı için hem de toplumsal olarak alternatif bir tedavi yöntemi olabileceğini düşündürttüren özelliklere sahiptir.
Yapılan literatür taramalarında, direkt olarak Morus nigra'nın sepsis üzerindeki etkilere ya da antibakterisidal özelliklere değinilen bir çalışmaya rastlanılmamıştır. Bu nedenle içerdiği özellikler sebebiyle sepsis tedavisinde ve mortalitesinde Morus nigra'nın etkilerini gösteren bir çalışma yapmayı amaçladık.
YÖNTEM: Ege Üniversitesi Labaratuar Hayvanları Uygulama ve Araştırma Merkezi'nden (EGEHAYMER) temin edilen, seksüel olgunluğa erişmiş, ağırlıkları 220 ile 300 gram arasında değişen Wistar Albino tipi her iki eşeyden 28 adet sıçan, 22C oda ısısında, % 45-75 nemde, karanlık ve aydınlık gün geçirme saatleri 12 saatlik eşit döngülerde olacak şekilde, serbest su ve gıda desteği sağlanarak araştırmaya alındılar. 7 günlük planlanan çalışmada gruplar belirlendi. Grup I (Kontrol grubu) herhangi bir tedavi almadı. Diğer gruplara ait sıçanlara 0.günde CLP işlemi uygulandı. Grup II (CLP grubu) sadece CLP işlemi geçirip 7.güne kadar takibi sağlandı. Grup III (CLP+SF) grubu, CLP işlemi sonrası 24 saatte 1 olacak şekilde, 7 gün boyunca, Morus nigra'nın çözücüsü 3mL intraperitoneal SF enjeksiyonu aldı. Grup IV (Kara dut grubu) ise CLP sonrası 7 gün boyunca 24 saatte 1 3mL kara dut çözeltisi aldı. 7.günün sonunda denekler, böbrek ve karaciğer biyopsilerinin alınması için sakrifiye edildi. Alınan örnekler H&E, Mallory azan, Anti-enos, Anti-inos, Anti-gfap boyamalara tabii tutuldu. Preparatlar ışık mikroskopu altında x4, x20 ve x40 büyütmelerinde incelendi. Toplanan veriler GraphPad Prism 6.0 programı ile istatistiksel olarak değerlendirildi.
BULGULAR: Işık mikroskopu altında incelenen preparatlarda, ITO hücre miktarına, gruplar arası cast formasyonu mevcudiyetine, eritrosit ekstravazasyonuna, fırçamsı kenar kaybına, hepatik sinuzoidlerde dilatasyona ve konjesyona, portal alanda inflamasyona, tubuler dilatasyona ve vena centraliste konjesyona bakıldı. Yapılan değerlendirme ve istatiksel analiz sonucu, Kara dut ekstresi alan deneklerde CLP ve CLP+SF gruplarındaki deneklere oranla, ITO hücre miktarında p<0.0001, cast formasyonunda p<0.0001, eritrosit ekstravazasyonunda p<0.0001 olacak şekilde istatiksel anlamlı üstünlük saptandı. Kara dut grubunda fırçamsı kenar kaybı ise CLP grubuna p<0.0001, CLP+SF grubuna p<0.001 olacak şekilde istatistiksel bir anlam ifade etti. Kara dut grubunda bakılan hepatic dilatasyon ve konjesyon, portal alanda inflamasyon, tubuler dilatasyon CLP ve CLP+SF gruplarına oranla p<0.0001 olarak istatistiksel olarak anlamlı belirlendi. Deneklerden alınan örneklerde incelenen vena centralis konjesyonununda Kara dut grubu ile CLP ve CLP+SF gruplarına karşı yapılan değerlendirme sonucu p<0.001 olarak belirlendi. Kontrol grubu ile Kara dut grubu arasında yapılan karşılaştırılmada ise, gruplar arası cast formasyonunda, fırçamsı kenar kaybında, hepatik venlerde dilatasyon ve konjesyonda, portal alanda inflamasyonda ve tubuler dilatasyon değerlendirilmelerinde Kontrol grubunun Kara dut grubuna p<0.01 olacak şekilde anlamlı istatiksel üstünlük saptadığı belirlendi. Kontrol ve Kara dut grubu arasında yapılan incelemeler sonucu, vena centraliste konjesyon, eritrosit ekstravazasonu, ITO hücre miktarı parametrelerinde Kontrol grubunun Kara dut grubuna anlamlı istatistiksel üstünlük sağladı görüldü. (p<0.001)
SONUÇ: Yapılan bu tez çalışmasında, CLP yöntemi ile oluşturulmuş deneysel sepsis modellerinde, intraperitoneal yoldan uygulanana Morus nigra tedavisinin, böbrek ve karaciğer dokularından alınan örneklerde, inflamatuar ve nekrotik etkileri azalttığı görüldü. Ancak dokulardaki akut evre etkileri istatistiksel ve histopatolojik olarak azalttığı, dokuların tamamen normale dönmesini sağlamakta ise başarısız olduğu görüldü.

Abstract:
PURPOSE: Sepsis is a problem of morbidity and mortality that has been going on for centuries. Although various treatment methods for the pathogen are used in the treatment of sepsis, there is no definite and effective method in the treatment of sepsis. Morus nigra, with its fluvanoids and antioxidant capacity, has features that make it possible to think that it can be an alternative treatment method both in the medical literature and because it is believed to be healing among the society. 
In the literature review, no direct study was performed on the effects of Morus nigra on sepsis or antibactericidal properties. Therefore, we aimed to investigate the effects of Morus nigra in the treatment and mortality of sepsis due to its features.
METHOD: 28 healthy Wistar-albino rats, which were obtained from Ege Universtiy Experimental Animals Application and Reserch Center, wew of sexual maturity, of weight 220-300 grams, of both sex, were subjected to study. Rats were seperated 4 groups. After anesthesia, we do nothing on Group I, and performed CLP procedure Group II,III,IV at day zero. Then, we just observed Group II and named  CLP group, to see the effects of CLP procedure on liver and kidneys. We did daily injections of 3 ml salin intraperitonally on Group III and we did daily injections of 3 ml intraperitonally black mulberry solution on Group IV. At the day 7, all animals sacrifed for harvesting kidney and liver's histological examples. All examples evaluated under light microscope. The data from this evalution, entered to the GraphPad Prism 6.0 database and statistical analyze performed also with this program.
FINDINGS:  In the preparations examined under light microscope, ITO cell amount, presence of intergroup cast formation, erythrocyte extravasation, brushy side loss, dilatation and congestion of hepatic sinusoids, portal area inflammation, tubular dilatation and congestion in the vena centralis were examined. As a result of the evaluation and statistical analysis, statistically significant superiority was found in Group 4 subjects, p <0.0001 in ITO cell amount, p <0.0001 in cast formation, p <0.0001 in erythrocyte extravasation compared to group II and group III subjects. Also, the loss of brushy sides in the Group 4 was statistically significant as p <0.0001 over the Group 2 and p <0.001 over the Group 3. Hepatic dilatation and congestion, inflammation in portal area, tubular dilatation in the Group 4 were statistically significant at p <0.0001 compared to Group 2 and Group 3. In the evaluation of congestion of vena centralis in the samples taken from the subjects, the result of the evaluation of Group 4 against Group 3 and Group 2 was determined as p <0.001 which is statistically meaningful. In the comparison between the Group I and the Group 4, it was determined that the Group 1 had significant statistical superiority to the Group 4 in the cast formation, brushy side loss, dilatation and congestion in hepatic veins, inflammation in the portal area and tubular dilatation which it was resulted as p<0.01. As a result of the examinations between Group 1 and Group 4, at the parameters like, congestion on vena centralis, erythrocyte extravasation, ITO cell quantity, Group 1 showed significant statistical superiority to the Group 4. (P <0.001)
RESULT: In this study, it was seen that intraperitoneal administration of Morus nigra treatment in experimental sepsis models created by CLP method decreased inflammatory and necrotic effects in samples taken from kidney and liver tissues. However, black mulberry has been shown to reduce the acute stage effects in tissues, but failed to returning tissues to normal.