İnsan granüloza hücresi mitokondriyon fonksiyonu ile AMH ve östrojen ilişkisi
Relationship between human granulosa cell mitochondrial function and AMH - estrogen
Yazar: DENİZ EKİN ERBAŞ
Danışman: PROF. DR. LALE KARAKOÇ SÖKMENSÜER
Hacettepe Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2021
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Antimüllerian hormon = Antimullerian hormone ; Fertilite = Fertility ; Granüloza hücreleri = Granulosa cells ; Mitokondriler = Mitochondria ; Östrojenler = Estrogens

Özet:
Anti-Müllerian Hormon (AMH) ve östrojen, insan ovaryan folikülogenezinde esansiyel hormonlardır. AMH ve östrojeni, granüloza hücreleri üretmektedir. İnsan granüloza hücrelerindeki mitokondriyonların oosit kalitesi için önemli olduğu bilinmektedir. Çalışmamızın amacı granüloza hücresi mitokondriyon fonksiyonunun AMH ve östrojen üretimi ile ilişkisini ortaya koymaktır. Çalışmaya dahil edilen infertilite tedavisi gören yirmi kadının folikül sıvılarından granüloza hücreleri izole edilmiştir. Çalışmada insan granüloza hücre hattı HGL5, AMH ve östrojen düzeyleri normal olan hastalara ait granüloza hücreleri ve AMH ve östrojen düzeyleri düşük olan hastalara ait granüloza hücreleri kullanılmıştır. İmmunfloresan işaretleme (JC-1 katyonik boyası) ile granüloza hücresi mitokondriyonlarının membran potansiyeli ölçülmüştür ve mitokondriyonların morfolojik özellikleri elektron mikroskobu ile gösterilmiştir. İstatistiksel analiz için Kruskal Wallis ve Mann-Whitney U testi kullanılmıştır. İstatistiksel anlamlılık için toplam tip-1 hata düzeyi %5 olarak belirlenmiştir. İmmünfloresan işaretlemelerinde AMH ve östrojen değerleri normal olan kadınların granüloza hücrelerinin mitokondriyonlarının JC-1 değeri, AMH ve östrojen değerleri düşük olan kadınların granüloza hücrelerinin mitokondriyonlarının JC-1 değerinden istatistiksel olarak anlamlı şekilde yüksek bulunmuştur (p<0.016). AMH ve östrojen düzeyi düşük olan grubun sitoplazmasında C şeklinde, yüzük şeklinde, şapkalı ve şişmiş mitokondriyonlar izlenmiştir. Çalışmamızda mitokondriyon aktivitesi ile serum AMH ve östrojen düzeyi arasında korelasyon bulunmuştur. AMH ve östrojen düzeyi düşük olan grupta mitokondriyal membran potansiyeli düşük ve mitokondriyon morfolojisi bozuk olarak gözlenmiştir.

Abstract:
Anti-Müllerian Hormone (AMH) and estrogen are essential hormones in human ovarian folliculogenesis. AMH and estrogen are produced by granulosa cells. It is known that mitochondria in human granulosa cells are important for oocyte quality. The aim of our study is to reveal the relationship between granulosa cell mitochondrial function and AMH and estrogen production. Granulosa cells were isolated from the follicular fluids of twenty women undergoing infertility treatment included in the study. Human granulosa cell line HGL5, granulosa cells of patients with normal AMH and estrogen levels and granulosa cells of patients with low AMH and estrogen levels were studied in the study. The membrane potential of granulosa cell mitochondria was measured by immunofluorescence labeling (JC-1 cationic dye) and the morphological properties of mitochondria were demonstrated by electron microscopy. Kruskal Wallis and Mann-Whitney U tests were used for statistical analysis. For statistical significance, the total type-1 error level was determined as 5%. In the immunofluorescence labeling, the JC-1 value of the mitochondria of the granulosa cells of women with normal AMH and estrogen values was found to be statistically significantly higher than the JC-1 value of the granulosa cells of the women with low AMH and estrogen levels (p <0.016). C-shaped, ring-shaped, hooded and swollen mitochondria were observed in the cytoplasm of the group with low AMH and estrogen levels. In our study, a correlation was found between mitochondrial activity and serum AMH and E2. In the group with low AMH and E2 levels, it was observed that mitochondrial membrane potential was low and mitochondrial morphology was impaired.