Tekrarlayan gebelik kayıpları olgularında embriyoların morfokinetik özelliklerinin incelenmesi ve anöploidi taraması için yapılan pre-implantasyon genetik tanı sonuçları ile karşılaştırılması
A morphokinetic investigation of embryos belonging to patvents having recurrent pregnancy losses and a comparison with their results of pre-implantation genetic testing for aneuploidy
Yazar: TUTKU MELİS AYGÜN
Danışman: PROF. DR. TÜLAY İREZ
İstanbul Yeni Yüzyıl Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Klinik Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology

Özet:
Tekrarlayan gebelik kaybı (TGK), yardımla üreme tekniklerine (YÜT) başvuran kadınlar arasında en sık görülen üreme sorunlarından biridir. Çalışmamızda TGK ve Açıklanamayan İnfertilite (Aİ) grupları arasında öploid ve anöploid embriyolara ait morfokinetik parametreleri karşılaştırmayı amaçladık.Çalışma Memorial Şişli Hastanesi, ART ve Genetik Merkezi'ne başvuran Sürekli Embriyo İzleme Sistemleri (SEİS) nde takip edilen 190 vaka (100 TGK, 90 Aİ) ve 1704 embriyo (TGK:1169, Aİ:535) ile yapılan karşılaştırmalı bir analizdi. 38 yaş üstü, endometriyal veya uterin anomalili ve sperm parametreleri anormal olan vakalar çalışmaya dahil edilmedi. Vakalar kadın vücut kitle indeksine göre göre alt gruplara ayrıldı (<25, 25-29,9, ≥30). Embriyo sınıflandırmasında Gardner sınıflandırması kullanıldı. PGT-A analizi için Yeni Nesil Dizileme (NGS) yöntemi kullanıldı. Çalışma grupları arasındaki morfokinetik karşılaştırmalar için öploid ve anöploid embriyolar değerlendirildi. Morfokinetik parametreler Student's t-test; kategorik parametreler ise Ki-kare testi kullanılarak karşılaştırıldı. p>0,05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. Çalışma gruplarının demografik ve klinik özellikleri; yaş, AMH, bazal FSH, over stimülasyon süresi, total ve matür oosit, 2PN, blastülasyon açısından benzerdi. TGK vakalarında öploid embriyo varlığı kontrol grubuna göre anlamlı derecede düşük bulundu. (sırasıyla %43,5 ve %52,3 (p=0,018)). VKİ <25 olarak değerlendirildiğinde istatistiksel anlamlılık daha belirgindi (TGK-Öploid: %40,9, Aİ-Öploid: %56,2, p=0,001). Vakalar VKİ açısından değerlendirilip karşılaştırıldığında embriyo kalitesi açısından istatistiksel anlamlılık görülmedi. (p>0,05). Blastosistlerde direkt klivaj ve ayrı blastomer varlığı iki grupta da benzer bulundu (p>0,05). Öploid embriyo morfokinetiğine bakıldığında, TGK vakalarının embriyolarında tSC-tM aralığı kontrol grubuna kıyasla daha kısa gözlendi (sırasıyla 9,3±4,8'e karşı 17,0±25,5 (p<0,001).Çalışmamızda ileri maternal yaş ve şiddetli erkek faktörü dışlandığında, TGK vakalarında anöploidi prevalansı Aİ grubundaki vakalara göre daha yüksek prevelansa sahipti. Embriyo morfolojisi, blastosistlerdeki direkt klivaj ve ayrı blastomer varlığı çalışma gruplarında benzerdi. TGK grubuna ait öploid embriyoların morulaya ulaşma süresinin Aİ grubundaki öploid embriyolara göre daha kısa olduğu belirlenmiştir. Anöploidi, TGK vakalarındaki kayıpların ana nedenlerinden biri olarak bulunduğundan endometriyal faktörlerin dışlandığı TGK olgularına PGT-A önerilmesi faydalı olabilir. Sonuçlarımızın ileri çalışmalarla doğrulanması gerekmektedir.

Abstract:
Recurrent pregnancy loss (RPL) is one of the most common reproductive problems among women who applied for ART treatment. Studies investigating the embryo related factors in RPL patients are limited in the literature. Thus, in this study, we aimed to compare embryo related factors such as morphokinetics and euploid embryo frequency between RPL and unexplained infertility (UEI) groups. This was a comparative analysis with 190 patients (100 RPL, 90 UEI) and 1704 embryos (RPL:1169, UEI:535) that were incubated at Time-Lapse Monitoring System (TLM) in Memorial Sisli Hospital, ART and Genetics Center. Patients with >38 years of age, endometrial or uterine abnormalities and abnormal sperm parameters were excluded from the study. Patients subgrouped according to maternal BMI (<25, 25-29.9, ≥30). Gardner's classification was used for embryo grading. Next Generation Sequencing (NGS) method was used for PGT-A analysis. Euploid embryos were selected for morphokinetic comparisons between study groups. Morphokinetic parameters were compared using Student's t-test. Categorical parameters were compared with Chi-square. p>0.05 was considered statistically significant. Demographic and clinical characteristics of the study groups were similar in terms of age, AMH, basal FSH, duration of ovarian stimulation, total and mature oocytes, 2PN, blastulation. Frequency of euploid embryos were significantly lower in RPL patients than UEI group (43.5% vs 52.3%, respectively (p=0.018)). The statistical significance was more pronounced when BMI was selected as <25 (RPL-Euploid: 40.9%, UEI-Euploid: 56.2%, p=0.001). No statistical significance was obtained in terms of embryo quality when patients were grouped according to BMI (p>0.05). The occurence of direct cleavage and separate blastomere in the blastocysts was found to be similar in each group (p>0.05). Regarding euploid embryo morphokinetics, embryos reached to morula after starting compaction (tSC-tM) faster in RPL patients than in UEI patients (9.3±4.8 vs 17.0±25.5 respectively (p<0.001). In this study, aneuploidy prevalance was higher in RPL patients than UEI patients when advanced maternal age and severe male factor were excluded. Embryo morphology, frequencies of direct cleavage and separate blastomere in the blastocysts were similar in study groups. Euploid embryos showed faster development to morula stage in RPL than UEI patients. Since the aneuploidy is found one of the main causes of RPL patients, it may be useful to offer PGD-A to RPL patients whose endometrial factors are excluded. Our results should be confirmed with further studies.