Akut lenfoblastik lösemi (ALL) olgularında myc gen bölgesindeki yeniden düzenlemelerin fluoresan ın situ hibridizasyon (FISH) yöntemi ile araştırılması
Detection of Myc Gene Rearrangements by Fluorescence In Sıtu Hybrizidation in Acute Lymphoblastic Leukemia Cases
Yazar: SEDA EREN
Danışman: PROF. DR. SENİHA HACIHANFİOĞLU
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2009
Konu: Genetik = Genetics ; Hematoloji = Hematology ; Onkoloji = Oncology
Dizin: FISH = FISH ; Genetik teknikler = Genetic technics ; Genler-MYC = Genes-MYC ; Kan hastalıkları = Hematologic diseases ; Kromozom bantlama = Chromosome banding ; Prekürsör hücreli lenfoblastik lösemi-lenfoma = Precursor cell lymphoblastic leukemia-lymphoma ; Sitogenetik = Cytogenetics

Özet:
ALL'de kromozomal anomalilerin tespiti tanıda, prognozda ve tedavide önemli rol oynamaktadır.Çalışmada 25 ALL hastasından alınan kemik iliği aspirasyon materyaline G-bantlama ve myc genindeki yeniden düzenlemelerin tespiti için FISH uygulandı.Olgularımız 14(%56) çocuk, 11(%44) erişkinden oluşmaktadır. Olgularımızın %58'inde sayısal ve/veya yapısal anomali tespit edildi.ALL'de prognostik değere sahip olduğu bilinen yapısal anomaliler; t(9;22)(%9), add(11)(q23)(%8), t(8;14)(%4), del(6q)(%8) olarak tespit edildi.Lösemi olgularında G bantlama için yeterli sayıda ve kalitede metafaz elde etmenin zorluğu bilinmektedir. Olgularımızın %92'sinde kromozom analizi gerçekleştirildi. Yeterli sayıda metafaz elde edilemediği durumlarda sayısal ya da yapısal anomaliler tespit edilememekte bu nedenle konvansiyonel sitogenetik yöntemlerin yanında FISH gibi moleküler sitogenetik yöntemler kullanılmaktadır.FISH uygulamaları hastalığın tanı ve takibinde ayrıca genetik değişimlerin bire bir her hücrede değerlendirilmesine olanak sağladığından minimal rezidüel hastalığın takibinde önemlidir. Kolay uygulanabilir, hızlı, duyarlı ve güvenirliği yüksek bir yöntemdir.8q24'te bulunan myc geni, hücre döngüsünün ilerlemesi, farklılaşma, metabolizma, apoptozis, ölümsüzlük ve adezyon gibi hücresel olayları etkiler. Bir protoonkogen olan myc; translokasyon, amplifikasyon ve mutasyon gibi çeşitli aktivasyon mekanizmalarıyla onkogenik özellik kazanır. ALL'de myc geninin karıştığı translokasyonların yaklaşık %85'ini t(8;14)(q24;q32), %10'unu t(2;8)(p11;q24) ve %5'ini t(8;22)(q24;q11) oluştur.25 hastaya uygulanan 33 FISH analizinin hepsinde myc geninin değişime uğradığı gözlendi.Elde ettiğimiz sonuçlar; hem interfaz hem de metafaz da inceleme olanağı sunan ve konvansiyonel sitogenetik yöntemlere göre daha hızlı ve hassas sonuçlara ulaşmamızı sağlayan FISH yönteminin bulgularının tanıda, prognozda ve tedavi protokolünün belirlenmesinde yol gösterici olduğunu kanıtlamaktadır.Anahtar Kelimeler : Akut lenfoblastik lösemi, myc geni, sitogenetik, FISH, G bantlamaBu çalışma, İstanbul Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Birimi tarafından desteklenmiştir. Proje No: T-1506

Abstract:
Detection of chromosomal anomalies associated with acute lymphoblastic leukemia (ALL) plays an essential role for diagnosis, prognosis and treatment.We investigate bone marrow aspiration material from 25 ALL patient. G banding and FISH were performed to detect myc gene rearrangements.Our case group include 14(%56) children and 11(%44) adults. Numerical and/or structural chromosomal anomalies were detected in%58 of cases.Structural anomalies which provide prognostic information about ALL are t(9;22)(%9), add(11)(q23)(%8), t(8;14)(%4), del(6q)(%8)Diffucullties in obtaining sufficent and qualified metaphases for G banding in leukemia cases have been known. G banding in study were succesfull %92 of cases. Conventional cytogenetic methods should be accompanied by more sensitive and specific molecular cytogenetic techniques, such as FISH when sufficient and qualified metaphases couldn?t be obtained.FISH technique is important for diagnosis and prognosis to provide detection of genetic changes for each cell. Additonally this technique is more sensitive and quick technique.MYC (avian myelocytomatosis viral oncogene homolog) gene is located on 8q24. The gene plays a role in cellular processes such as cell cycle progression, apoptosis, metabolism, immortality and adhesion. Myc is a protoonkogene and became an oncogene when translocation, amplification and mutations occur. Translocations involving MYC gene are t(8;14)(q24;q32) (%85), t(2;8)(p12;q24) (10%) and t(8;22)(q24;q11)(%5).Myc gene rearrangements were deteceted all 33 FISH analyses for 25 patient in our study.Our results showed that FISH technique is quicker and more sensitive than conventional cytogenetic methods additonally provides detection of genetic changes in both interphases and metaphases.Key Word: Acute lymphoblastic Leukemia, Myc gene, Cytogenetic, FISH, G bandingThe present work was supported by the Research Fund of Istanbul University. Project No. T-1506