Deneysel mantar keratitinde korneal kollajen çapraz bağlama ve vorikonazol tedavilerinin karşılaştırılması
Comparison of voriconazole and corneal collagen cross-linking treatments in A model of fungal keratitis
Yazar: HÜSEYİN BARAN ÖZDEMİR
Danışman: PROF. DR. MUSTAFA KAMİL BİLGİHAN
Gazi Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2016
Konu: Göz Hastalıkları = Eye Diseases
Dizin: Antifungal ajanlar = Antifungal agents ; Antifungal ajanlar = Antifungal agents ; Candida albicans = Candida albicans ; Fusarium solani = Fusarium solani ; Göz hastalıkları = Eye diseases ; Keratit = Keratitis ; Kornea = Cornea ; Mantarlar = Fungi ; Metalloproteinazlar = Metalloproteinases ; Çapraz bağlama yöntemi = Cross linking methods

Özet:
Amaç: Tavşan kornealarında deneysel oluşturulmuş Fusarium solani ve Candida albicans keratit modellerinde %0.25 riboflavin konsantrasyonu kullanılan PACK-CXL ile topikal antifungal tedavinin etkinliklerinin kontrol grubuyla ve kendi aralarında klinik, mikrobiyolojik ve patolojik incelemelerle karşılaştırılmasıdır.
Gereç ve Yöntem: Çalışmaya, etik kurul onayı alındıktan sonra, 28 adet Yeni Zelanda tavşanının her iki gözü dâhil edilmiştir. Keratitli vakalardan elde edilen, Fusarium solani (FS) ve Candida albicans (CA) suşlarından 10⁵ CFU/ml konsantrasyonda mantar süspansiyonları 0.1 ml dozda intrastromal enjekte edilerek 3. günde keratit oluştuğu gözlenmiştir. FS grubu kontrol (Grup 1A), PACK-CXL (Grup 1B), Vorikonazol (Grup 1C) ve PACK-CXL ile kombine vorikonazol (Grup 1D) grupları olarak 4 gruba ayrılmıştır. CA grubunda da aynı sırayla grup 2A, 2B, 2C ve 2D olarak grupları oluşturulmuştur. PACK-CXL hızlandırılmış Dresden protokolünde (toplam UV-A dozu 5,4 J/cm²) %0.25 riboflavin kullanılarak uygulanmıştır. Vorikonazol, %1 (10 mg/ml) dozda, 3.günden itibaren topikal 7x1 olarak uygulanmıştır. 10. gün korneal butonlar eksize edilerek her alt grupta 7 korneal butonun 6'sı kültür ekimi ile koloni sayımı yapılmıştır. Kalan korneal butona patolojik inceleme yapılmıştır.
Bulgular: Grup 1B, 1C ve 1D'de grup 1A'ya göre daha az mantar üremiştir (p<0,001). Grup 2B, 2C ve 2D'de grup 2A'ya göre daha az mantar üremiştir (p<0,001). Grup 1B ve 1D'de grup 1C'ye göre daha az mantar üremiştir (p<0,001). Grup 2D'de grup 2B ve 2C'ye göre daha az mantar üremiştir(p<0,001). Grup 1B, 1C ve 1D'de grup 1A'ya göre daha düşük keratit skoru bulunmuştur (p<0,001).  Grup 2B, 2C ve 2D'de grup 2A'ya göre daha düşük keratit skoru bulunmuştur (p<0,001).  Bütün gruplarda 3. gün ile 10. gün keratit skorları açısından anlamlı fark bulunamamıştır (p>0.05). İncelenen patolojik kesitlerde Grup 1B, 1D, 2B ve 2D'de daha az hif ve nonspesifik stromal değişiklikler görülmüştür. 
Sonuç: %0.25 riboflavin ile yapılmış PACK-CXL tedavisinin gerek tek başına gerekse antifungal ilaçlarla kombine tedavi ile fungal keratitlerde medikal antifungal tedaviye göre başarılı fungal öldürme oranlarına sahiptir. PACK-CXL tedavisinin, özellikle antifungal ilaçlar ile kombine edilerek erken dönemde uygulanması şeklinde, fungal keratit tedavi algoritmasının içine girmesinin uygun olduğu düşünülmüştür.

Abstract:
Purpose: We aim to compare the antifungal efficacy of PACK-CXL with 0.25% riboflavin concentration and voriconasole with clinical, microbiological and pathological examinations, and investigate MMP-9 and MMP-13 levels in all experimental groups in the rabbit model of Fusarium and Candida keratitis.
Methods: 32 rabbits included to the study after approval of ethical commitee. 0.1 cc suspension prepared from 10⁵ CFU/ml concentration of Fusarium solani (FS) and Candida albicans (CA) strains which obtained from clinical keratitis cases, injected intrastromal. Keratitis has been observed at third day. FS group divided into four subgroups. Group 1A was control group and left untreated, group 1B was treated with PACK-CXL, group 1C was treated with voriconazole, group 1D was treated with PACK-CXL and voriconazole. CA group was divided into four subgroups same as FS (Group 2A, 2B, 2C and 2D). PACK-CXL was applied with 0.25% riboflavin in accelerated Dresden protocol (total UV dose was 5,4 J / cm²). 0,1% voriconazole (10 mg/ml) drops was administered as topical 7x1. All corneal buttons excised at 10th day after ophthalmological examination. 6 of 7 corneal buttons were cultivated for microbiological examination. Remaining corneal button was prepared for pathological examination.
Results: Fungal cell counts were determined in all groups. CFU counts were statistically significant lower at group 1B, 1C and 1D compared to group 1A (p<0,001). CFU counts were statistically significant lower at group 1B and 1D compared to group 1c (p<0,001). CFU counts were statistically significant lower at group 2B, 2C and 2D compared to group 2A (p<0,001). CFU counts were statistically significant lower at group 2D compared to group 2B and 2C (p<0,001). Clinical keratitis score was statistically significant lower at group 1B, 1C and 1D compared to group 1A (p<0,001). Clinical keratitis score was statistically significant lower at group 2B, 2C and 2D compared to group 2A (p<0,001). The difference in clinical scores between day 3 and 10 at all groups was not statistically significant (p>0,05). At pathological fewer Fusarium hyphae and nonspecific stromal changes were observed in group 1B, 1D, 2B and 2D
Conclusion: PACK-CXL with 0,25% riboflavin either alone or combined with antifungal drops has better fungal killing rate compared to medical antifungal treatment It is appropriate to add PACK-CXL treatment, especially combined with antifungal drops, into fungal keratitis algorithm at the early stage of the disease.