Rat iskemik yara modelinde l-arginin tedavisinin yara iyileşmesi üzerine etkilerinin değerlendirilmesi
Evaluation of effects of l-arginine on wound healing in rat ischemic wound model
Yazar: ONUR EVREN YILMAZ
Danışman: PROF. ERDEM YORMUK
Ufuk Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2012
Konu: Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery
Dizin: Arjinin = Arginine ; Sıçanlar = Rats ; Yara iyileşmesi = Wound healing ; Yaralar ve yaralanmalar = Wounds and injuries ; İskemi = Ischemia

Özet:
ÖZETGiriş: Normal koşullarda yetişkinler için non-esansiyel olan Arginin, çocuklar ve gençler için esansiyel bir amino asittir. L-Arginin gereksinimi büyüme döneminde, travma ya da enfeksiyon durumunda artar. Bu bağlamda argininin ?koşullara bağlı essansiyel bir amino asit? olarak değerlendirilmesi daha doğaldır. L-Argininin oral yoldan yara iyileşmesi üzerine olan etkilerinin değerlendirilmesi amacıyla daha önce Rees ve ark. tariflediği ``rat bipediküllü dorsal flebi'' ile kronik bir yara ortamına benzer bir model hazırlanarak makroskopik, histopatolojik, biyomekanik ve biyokimyasal incelemeler yapılmıştır. Gereç ve Yöntemler: Çalışmada, deney hayvanı olarak toplam 20 adet (186-213) gram agırlığında dişi Sprague-Dawley cinsi rat kullanıldı. Sağlıklı grupta 4, kontrol ve deney grubunda 8'er adet olacak şekilde rastgele seçilen hayvanlardan 3 adet grup oluşturuldu. Kontrol ve deney grubunda rat dorsumunda 10x4 cm'lik bipediküllü flepler iskemik yara oluşturmak üzere, pannikulus karnosusu da içerecek şekilde eleve edildi. 4 gün sonra hazırlanmış flep üzerine 6 adet 6 mm'lik punchlarla tam katyaralar oluşturuldu. Sağlıklı gruptaki ratların dorsalinde bipediküllü flep hazırlanmadan 4.günde diğer guplarla beraber punchlarla yaralar oluşturuldu ve herhangi bir tedavi verilmedi. Kontrol grubunda bipediküllü flep oluşturulup, yaralar oluşturuldu ve herhangi bir tedavi verilmedi. Deney grubu bipediküllü flep oluşturulduktan sonra ve deney süresince %2'lik L-Argjinin içme suyuna karıştırılarak oral yoldan verildi. Yara yüzey alanını değerlendirmek için 1,3,5,8,10 ve 12. günlerde flep alanlarının görüntüleri alındı. 16. gün insizyon hattından alınan örneklerin biyomekanik ölçümleri tensiometri cihazı ile yapıldı. Her üç gruptan da 12. gün sonunda santral yaralarından alınan dokuda hidroksiprolin ölçümü yapıldı. Oluşturulan yaraların, yara kenarını ve yara zeminini içeren her gruba ait 3, 5, 8. ve 12. günlerdeki doku örnekleri histopatolojik olarak incelendi.Bulgular: 1.günde kontrol ve deney grubunun yara alanları arasında fark yoktu (p=0.356). 3-5-8-10 ve 12. günlerin tümünde deney grubundaki sefalik santral ve kaudal yara alanları kontrol grubundakilere göre anlamlı olarak daha küçüktü (p<0.001). Ortalama gerim direnci kontrol grubunda 81.93 g/mm2, deney grubunda ise 121,81 g/mm2 ölçüldü. Deney grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha fazla olduğu saptandı (p=0.003, t=3.631). 12. gün sonunda alınan örneklerdeki değerler hesaplandığında; sağlıklı grupta hidroksiprolin değeri, 70.71 mg/L/g/doku, kontrol grubunda 81,71 mg/L/g/doku olarak ölçüldü. Deney grubunda ise hidroksiprolin değeri 176,6 mg/L/g/doku olarak ölçülmüştür. Ortalama hidroksiprolin düzeyi deney grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha fazla idi (p=0.004, t=3.437). Aynı şekilde ortalama hidroksiprolin düzeyi deneygrubunda sağlıklı gruba göre anlamlı olarak daha fazla idi (p=0.004, t=3.722). Kontrol grubu ile sağlıklı grubun hidroksiprolin değerleri arasında fark yoktu (p=0.715, t=0.376). Sağlıklı grupta 8. Günde tamamlanan reepitelizasyona karşılık deney grubunda 10. günde epitelizasyon düzenli bir şekilde tamamlanmıştı. 12. günde kontrol grubunda yaranın reepitelizasyonu düzensiz ve fragmante görünümde izlendi. Santral ülserasyon devam etmektedir. Sonuç: Arginin kollajen yapısında bulunan prolin için substrat görevi görmektedir. Kollajen sentezini prolin üzerinden artırmaktadır. Büyüme hormonu benzeri etkileri vardır. Arginin poliamin sentezinde ve Nitrik Oksit sentezinde de substrat görevi görmektedir. Deney grubundaki yara iyileşmesindeki artışın bu yolaklar üzerinden olduğunu düşünmekteyiz. Literatürde yapılan çalışmaların büyük bir kısmını destekleyici sonuçlar elde ettik. Kronik iskemik bir yarada L-Arginin desteğinin yara iyileşmesini olumlu yönde etkilediği, klinik kullanımda ek bir destek tedavi olabileceği kanaatindeyiz.Anahtar Kelimeler: Yara iyileşmesi, L-Arginin, iskemi

Abstract:
SUMMARYIntroduction: Under normal conditions arginine is a non-essential amino acid for adults, that is essential for children and adolescents. L-Arginine requirement increases, in case of trauma, infection or in growth. In this context, arginine is an "essential amino acid depending on the conditions " to be considered natural. Oral administration of L-Arginine in order to evaluate the effects on wound healing was studied in Rees et al. bipedicle rat dorsal flap definition, a similar model to the chronic wound environment, macroscopic, histological, biomechanical and biochemical investigations were carried out.Materials and Methods: In this study, a total number of 20 test animals (186-213) grams female Sprague-Dawley rats were used. From the healthy group 4, from the control and the experimental group 8 rats were randomly selected to make 3 groups. In the control and the experimental groups 10x4 cm bipedicle flaps which includes panniculus carnosus were elevated on the dorsum of the rats to make ischemic wound model and four days after the flaps were designed 6 full-thickness 6 x 6 mm wounds were created with punchs and no remedy was given. In healty group without harvesting bipedicle flaps on the same fourth day similiar wounds were created on the dorsum without giving treatment. L-Argjinin 2% mixed with drinking water was given to the experimental group by oral during the whole experiment. To evaluate the wound surface area in the 1,3,5,8,10 and 12th days the flaps photos were taken. In the 16th day, samples taken from the incision lines were evaluated by tensiometry to determine the biomechanical measurements. In each of the three group wounds tissuehydroxyproline content was measured at the end of the 12th day. Tissue samples which includes wound edges and grounds from each group were examined histopathologically in the 3, 5, 8 and 12th days.Findings: There was no difference in scar areas between control and experimental group initially 1st day (p = 0356). 3-5-8-10 and 12 central cephalic and caudal wound areas in all of the days in the experimental group was significantly lower than in the control group (p <0.001). Average tensile strength was 81.93 g/mm2 in the control group and was 121.81 g/mm2 in the experimental group. In the experimental group was significantly higher than the control group (p = 0.003, t = 3.631). At the end of the 12th day values were calculated from the samples of healthy group value of hydroxyproline, 70.71 mg / L / g / tissue in the control group, 81.71 mg / L / g /tissue, respectively. In the experimental group, hydroxyproline value was 176.6 mg / L / g / tissue. Average hydroxyproline levels were significantly higher in the experimental group than the control group (p = 0.004, t = 3.437). Likewise, the average hydroxyproline levels were significantly higher in the experimental group compared to healthy group (p = 0.004, t = 3.722). Hydroxyproline levels were not differ between the control group and the healthy group (p = 0715, t = 0.376). In healthy group epithelialization was completed by day 8, in the experimental group completed in the 10 day. In the twelfth day, irregular and fragmented view ofreepithelialization was observed in the control group wounds. Central ulceration was persisted.Conclusion: Arginine serves as a substrate for proline in the structure of collagen. It increases collagen synthesis by effecting proline. Arginine has the Growth hormonelike effects. In the polyamine and Nitric Oxide synthesis arginine serves as a substrate. We suggest that these pathways increase the wound healing in the experimental group. Our results support a large part of the studies in the literature. In chronic ischemic wounds L-Arginine supplementation has a positive effect on wound healing, this treatment can make an additional support in clinical practice.Keywords: Wound healing, L-Arginine, ischemia