Folikül yıkama uygulamasının oosit eldesi ve indeks oositten gelişen embriyonun kalitesine etkisi: prospektif kohort çalışma
Effect of follicular flushing on oocyte retrieval rate and the quality of embryos derived from index oocytes: a prospective cohort study
Yazar: ARİF CAN ÖZSİPAHİ
Danışman: PROF. DR. ŞAFAK OLGAN
Akdeniz Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2024
Konu: Kadın Hastalıkları ve Doğum = Obstetrics and Gynecology

Özet:
Amaç: İlk aspirasyondan ve sadece yıkamadan ile elde edilecek oositlerin
ayrı gruplarda izole edilerek, folikül yıkama uygulamasının hastalardan elde
edilecek oosit miktarına etkisinin incelenmesi ve yıkama sonucunda elde edilen
oositten gelişen embriyo kalitesinin yıkama yapılmayan grup ile karşılaştırılarak
yıkama uygulamasının embriyoya verebileceği potansiyel zararların araştırılması.
Gereç ve Yöntem: Prospektif kohort çalışma planı dahilinde Akdeniz
Üniversitesi Üremeye Yardımcı Tedaviler Merkezinde Haziran 2021 ve Haziran
2022 tarihleri arasında kontrollü ovaryan hiperstimülasyon sonrası tek klinisyen
tarafından OPU uygulanan tüm hastalar çalışmaya dahil edilmiştir. Çalışma her bir
hastanın sadece tek bir folikülünde inceleme yapılacak şekilde dizayn edilmiş olup
OPU işleminin hemen öncesinde, herhangi bir overdeki ilk 12 mm üzerindeki
ulaşılabilir folikül indeks folikül olarak belirlenmiş ve boyutları (yükseklik x en x
derinlik) milimetrik olarak ölçülerek kayıt altına alınmıştır. OPU işleminde saf
folikül sıvısının tamamı ilk değerlendirme için IVF laboratuvarına ulaştırılmış ve
sıvı miktarı ile COC varlığı kaydedilmiştir. Gönderilen ilk örnek içerisinde COC
gözlenmemesi durumunda ek yıkama işlemine geçilmiştir. Yıkama-aspirasyon
işlemi sonrası elde edilen ek örnek, sıvı miktarı kaydedilerek IVF laboratuvarına
ulaştırılmış ve COC varlığı tekrar araştırılmıştır. Direkt aspirasyonda ya da yıkama
sonrasında oosit elde edilmesine göre her bir oosit bireysel olarak ICSI sonrası takip
edilmiş ve her aşama için grup kıyaslamaları yapılmıştır.
Bulgular: Toplam 850 hastanın 336'sında (%39,5) ilk aspirasyonda COC
elde edilmiş, ilk etapta COC elde edilemeyen 514 hastanın 267'sinde (%31,4)
yıkama işlemi sonucunda COC elde edilmiştir. 247 (%29,1) hastada ise hiç oosit
elde edilememiştir. Persentil alt gruplarına göre folikül yıkamanın etkisinin
incelenmesi için yapılan analizde folikül yıkama işlemi, tüm persentil alt
gruplarında COC eldesini anlamlı olarak artırmıştır. ≤10 persentil alt grubunda ilk
aspirasyon sonrası folikül başına COC eldesinin başarısı %24,2 iken folikül yıkama
işlemi sonrası bu oran %55,8'e yükselmiştir. Aynı başarı oranları 11-49 persentil
alt grubunda %36,5'ten %73,3'e; 50-89 persentil alt grubunda %45,2'den %72,4'e
ve ≥90 persentil alt grubunda %45,1'den %71,4'e yükselmiştir ve bu artışların tümü
istatistiksel olarak anlamlıdır (p=0,001). Elde edilen sonuçlarda tüm hasta alt
grupları içerisinde 850 folikülden toplam 336 COC ilk aspirasyonda elde edilirken
folikül yıkama uygulaması ile ekstra olarak 267 COC kazancı sağlanmıştır. 50-89
ve ≥90 persentil alt gruplarında ilk aspirasyon ile eşit derecede COC elde edilirken;
COC elde edilemeyen foliküle yıkama yapıldığında ≤10 ve 11-49 persentil alt
gruplarında istatistiksel olarak ilk aspirasyona kıyasla daha yüksek COC elde
oranları tespit edilmiştir (sırasıyla p=0,016, p=0,01).Folikül yıkama işleminin MII
oosit, 2PN, D3 ve D5 orta-iyi kalite embriyo eldeleri üzerine etkisinin incelenmesi
için yapılan analize göre ilk aspirasyon grubu ile yıkama grubu arasında istatistiksel
olarak anlamlı bir farklılık bulunmamaktadır (p>0,05). Buna karşın yaş, VKİ,
Tetikleme tipi, tetikleme günündeki maksimum folikül çapı ve hastanın overindeki
toplam 17 mm'den büyük folikül sayısı gibi alt gruplar arasında anlamlı ve
sonuçları etkileyebilecek etkenlerin de aynı model içerisinde değerlendirildiği ikili
regresyon analizinin sonucunda; hiçbir persentil grubunda MII oosit, 2PN, orta-iyi
kalite D3 ve D5 embriyo eldelerinin yıkama ile olumsuz yönde etkilenmediği
gösterilmiştir. İlk aspirasyonda oosit elde edilen grup ile yıkamada oosit elde edilen
grup arasındaki β-hCG pozitifliği, klinik gebelik ve canlı doğum başarı oranları
arasında anlamlı fark tespit edilmemiştir.
Sonuç: Folikül yıkama uygulaması tüm folikül boyutlarında elde edilen oosit
miktarını anlamlı derecede artırmaktadır. Özellikle 6 cc altındaki folikül
hacimlerinde yalnızca aspirasyon uygulamasına kıyasla yıkama ile anlamlı olarak
daha yüksek oosit eldesine ulaşılmaktadır. Elde edilen oositlerden MII oosit
saptanma oranlarında, 2PN, orta iyi kalite D3 ve D5 embriyo gelişiminde anlamlı
fark bulunmamaktadır. Bu durum folikül yıkama uygulamasının elde edilen oosite
zarar vermediğinin kanıtı durumundadır.
Anahtar Sözcükler: OPU, Oosit Toplama, Folikül Yıkama, Oosit Eldesi, Embriyo
Kalitesi

Abstract:
Objective: To investigate the effect of follicular flushing on the number of
oocytes obtained from patients by isolating the oocytes obtained from the first
aspiration and only flushing in separate groups, and to investigate the potential
damages of flushing application on the embryo by comparing the quality of the
embryo developed from the oocyte obtained as a result of flushing with the group
without flushing.
Materials and Methods: Within the scope of a prospective cohort study,
all patients who underwent OPU by a single clinician after controlled ovarian
hyperstimulation at the Akdeniz University Assisted Reproductive Treatments
Center between June 2021 and June 2022 were included in the study. The study
was designed to examine only a single follicle of each patient, and immediately
before the OPU procedure, the first accessible follicle over 12 mm in any ovary
was determined as the index follicle, and its dimensions (height x width x depth)
were measured and recorded in millimeters. During the OPU procedure, the entire
amount of pure follicular fluid was delivered to the IVF laboratory for initial
evaluation, and the amount of fluid and the presence of COC were recorded. If
COC was not observed in the first sample sent, an additional flushing procedure
was performed. The additional sample obtained after the flushing-aspiration
procedure was delivered to the IVF laboratory, and the presence of COC was reinvestigated. Each oocyte was individually followed up after ICSI, and group
comparisons were made for each stage according to whether oocytes were
obtained in direct aspiration or after flushing.
Results: COC was obtained in the first aspiration in 336 (39.5%) of the total
850 patients, and COC was obtained as a result of the flushing procedure in 267
(31.4%) of the 514 patients who did not initially obtain COC. In 247 (29.1%)
patients, no oocytes were obtained. In the analysis conducted to examine the effect
of follicular flushing according to percentile subgroups, follicular flushing
58
significantly increased COC retrieval in all percentile subgroups. In the ≤10
percentile subgroup, the success of COC retrieval per follicle after the first
aspiration was 24.2%, while this rate increased to 55.8% after the follicular
flushing procedure. The same success rates increased from 36.5% to 73.3% in the
11-49 percentile subgroup; from 45.2% to 72.4% in the 50-89 percentile
subgroup, and from 45.1% to 71.4% in the ≥90 percentile subgroup, and all these
increases were statistically significant (p=0.001). In the obtained results, while a
total of 336 COCs were obtained from 850 follicles in all patient subgroups in the
first aspiration, an additional 267 COCs were obtained with the application of
follicular flushing. While equal amounts of COC were obtained in the first
aspiration in the 50-89 and ≥90 percentile subgroups; when flushing was
performed on follicles where no COC was obtained, higher COC retrieval rates
were found compared to the first aspiration in the ≤10 and 11-49 percentile
subgroups (p=0.016, p=0.01, respectively). According to the analysis conducted
to examine the effect of follicular flushing on MII oocyte, 2PN, D3, and D5
moderate-good quality embryo retrievals, there was no statistically significant
difference between the first aspiration group and the flushing group (p>0.05).
However, in the binary regression analysis where significant factors among
subgroups such as age, BMI, trigger type, maximum follicle diameter on the
trigger day, and the total number of follicles over 17 mm in the ovary of the patient
were evaluated within the same model; it was shown that MII oocyte, 2PN,
moderate-good quality D3, and D5 embryo retrievals were not adversely affected
by flushing in any percentile group. There was no significant difference in β- hCG
positivity, clinical pregnancy, and live birth success rates between the group
where oocytes were obtained in the first aspiration and the group where oocytes
were obtained in flushing.
Conclusion: The application of follicular flushing significantly increases
the number of oocytes obtained in all follicle sizes. Especially in follicle volumes
below 6 cc, significantly higher oocyte retrieval is achieved with flushing
compared to aspiration only. There is no significant difference in the detection
rates of MII oocytes, 2PN, moderate-good quality D3, and D5 embryo

development from the obtained oocytes. This situation proves that the follicular
flushing application does not harm the obtained oocyte.
Keywords: OPU, Oocyte Retrieval, Follicular Flushing, Oocyte Yield, Embryo
Quality