Blastocystis hominis'in in vitro kültürü ve antiprotozoal ilaçların in vitro etkilerinin araştırılması
In vitro culture of blastocytis hominis and investigation of in vitro effects of antiprotozoal drugs
Yazar: BERNA HAMAMCI
Danışman: PROF. DR. İZZET ŞAHİN
Erciyes Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Parazitoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2003
Konu: Parazitoloji = Parasitology

Özet:
IV BLASTOCYSTIS HOMINIS'İN IN VITRO KÜLTÜRÜ VE ANTIPROTOZOAL İLAÇLARIN IN VITRO ETKİLERİNİN ARAŞTIRILMASI ÖZET Blastocystis hominis özellikle tropikal ve subtropikal bölgelerde olmak üzere bütün dünyada yaygın olarak bulunan bir protozoondıır. Potansiyel patojen olarak düşünülen bu protozoon, özellikle immun yetmezlik söz konusu olduğunda çeşitli gastro intestinal şikayetlere sebep olmaktadır. Çalışmada, B. hominis üzerine in vitro ortamda, ornidazol, metronidazol, Trimethoprim- sülfametaksazol (TMP-SMX), azitromisin ve itrakonazol'ün farklı konsantrasyonlardaki (100, 50, 25, 12.5 ve 6 u.g/ml) etkisi araştırılmıştır. Çalışmada kullanılan parazit izolatları, Erciyes Üniversitesi Parazitoloji Anabiliın Dalına başvuran ve B. hominis saptanan hastalardan temin edilmiş ve Robinson besiyerine ekimleri yapılarak üretilmiştir. Daha sonra oluşturulan ana besiyerinde izolatların üretilmesine devam edilmiş ve son yoğunluğun mm3'de 1,1x1 05 olduğu saptanmıştır. Pasajlarda kullanılan 20 ml'Iik vida kapaklı 85 tüp içerisindeki 6 mi Robinson besiyeri üzerine ana besiyerinde üretilen izolatların ekimleri yapılmıştır. İlaçlar Dimethyle sulfoxide (DMSO) ve potassium fıtalat içerisinde çözdürülerek 5 farklı konsantrasyonda (100, 50, 25, 12.5 ve 6 |ig/ml) hazırlanmıştır. İlaç konsantrasyonlarından üçer seri, hazırlanan besiyeri içerisine her birinden 60 |al eklenmiştir. Thoma lamı kullanılarak 36, 48, 72, 168, 216. saatlerde ve üçer gün arayla iki kez kontrol edilerek parazit sayımları yapılmıştır. Her bir konsantrasyonda ilaçların etkileri saatlere göre karşılaştırıldığında B. hominis üzerine en iyi sonuç veren ilaç konsantrasyonun 100 ug/ml olduğu saptanmıştır. En etkili ilacın ornidazol olduğu ve bunu metronidazol, azitromisin, itrakonazol ve TMP- SMX'in izlediği gözlenmiştir. Ornidazol ile metronidazolün parazit üzerine etkileri arasındaki farkın istatistiksel olarak anlamlı olmadığı buna karşın her iki ilacın etkileri ile diğer ilaçlar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulunduğu saptanmıştır (p<0.05, F: 6.528). Anahtar Kelimeler: Blastocystis hominis, Robinson besiyeri, In vitro kültür, Antiprotozoal ilaçlar.

Abstract:
V IN VITRO CULTURE OF BLASTOCYSTIS HOMINIS AND INVESTIGATION OF IN VITRO EFFECTS OF ANTIPROTOZOAL DRUGS ABSTRACT Blastocystis hominis is a protozoon, with a worldwide distribution, especially in tropical and subtropical regions. B. hominis, as a protozoon, is considered to cause gastro intestinal symptoms especially in immune failure or disjunction. In this study, in vitro effects of ornidazole, metronidazole, trimethoprim- sulphamethaxazole (TMP-SMX), azitromisine and itrakonazole on B. hominis in various concentrations (100, 50, 25, 12,5 and 6 ug/ml) were investigated. All the stool samples were collected from the patients with blastocystosis who applied the Parazitology Department of Erciyes University, and cultured in the Robinson's medium. Then the isolates were developed in the mother culture and it was determined to contain a 1.1><1055. hominis/mm3. 85 screw tapped 20-ml tubes which contain 6 ml Robinson's medium each, were passeged from mother culture. Then the drugs were prepared in 5 different concentrations (100, 50, 25, 12,5 and 6 ug/ml) by dissolving them in Dimethyl sulphoxide (DMSO) and potassium fitalate. Each concentration of the each drugs was added at a volume of 60 ml to the tubes, which were prepared in three series. The tubes were checked in every 36., 48., 72., 168 and 216. hour and after this period in every 3 days periodically and their haemocytometer counts were examined. By comparing the effects of the drugs due to the hours, it is determined that the most effective drug concentration on B. hominis is 100 u.g/ml. Moreover, in term of effectivity drugs were ornidazole, azitromisine, itrakonazole and TMP-SMX, respectively. Comparing the effects of the drugs on parasite, ornidazole and metronidazole were significantly different from all other drugs whereas there was no significant difference between each other. Key Words: Blastocystis hominis, Robinson's medium, In vitro culture, Antiprotozoal drugs.