Köpeklerin erken gebelik döneminde matriks metalloproteinazların ve doku uyuşum antijenlerinin uterus ve plasentada belirlenmesi
The uterine and placental expression of matrix metalloproteinases and major histocompatibility complex during early canine pregnancy
Yazar: HAKKI BÜLENT BECERİKLİSOY
Danışman: PROF.DR. SELİM ASLAN
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Doğum ve Jinekoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine

Özet:
76ÖZETKöpeklerin Erken Gebelik Döneminde Matriks Metalloproteinazlarınve Doku Uyuşum Antijenlerinin Uterus ve Plasentada BelirlenmesiBu çalışmada MMP-2, MMP-9 ve MHC-I, II moleküllerinin uterus dokusunun değişikbölümlerinde, gebeliğin değişik dönemlerindeki miktarları ve aktiviteleri araştırıldı.Çalışma materyalini toplam 36 dişi köpek oluşturdu. Köpeklerin gebelik dönemlerinegöre, pre implantasyon dönem (Grup 1, n=11), implantasyon dönem (Grup 2, n=9),plasentasyon dönemde (Grup 3, n=9) ovariohisterektomi operasyonları yapılarak uterusdokuları alındı. Metaöstrustaki 4 köpeğe ait uterus dokuları da kontrol grubunu (Grup 4)oluşturdu. MMP aktivitelerinin ortaya konulduğu analizlerde bu gruplara ek olarak plasentallabirent grubu (Grup 5, n=3) oluşturuldu. MMP-2, MMP-9 ve MHC-I, MHC-II'nin dokulardabelirlenmesi amacıyla immunohistokimyasal boyamalar, MMP aktivitelerinin belirlenmesi içinde jelatin zimografi tekniği kullanıldı. Sayısal veriler zimografi jel görüntülerinin bilgisayaraaktarılmasıyla elde edildi. MHC-II pozitif hücreler ışık mikroskobu altında sayıldı.MMP-2 aktivitesinin endometriyum ve miyometriyumda gebe olmayan köpeklereoranla istatistiksel yönden yüksek olduğu saptandı. Pre implantasyon (%23,2) ve plasentalgruplara (%33,3) ait MMP-9 aktivitesi, implantasyon (%8,1) ve post implantasyon (%13,2)gruptan ve kontrol grubundan (%11,8) önemli düzeyde farklı bulundu (p<0,05). MHC-II pozitifhücrelerin ortalama değerlerinin, salpinksteki kesitlerde (grup1, 1,62; grup 2, 2,36; grup 3,1,64) kontrol grubundan (0,55) istatistiksel yönden önemli ölçüde farklı olduğu ortaya kondu(p<0,05). Regresyon analizi ile yapılan istatistiksel hesaplamalar, apeks ve korpusbölgesinden alınan dokularda gebelik dönemleri ile (Grup 1, Grup 2, Grup 3) bu günlere göreMHC-II pozitif hücre artışı arasında önemli pozitif bir ilişki olduğunu (r2=0,796/byx;2r =0,809/byx) gösterdi. MMP-2, MMP-9 ve progesteron değerleri arasında yüksek düzeyde (-0,988; -0,854) ve önemli derecede (p<0,03; p<0,05) negatif bir korelasyon olduğu bulundu.Sonuç olarak MMP-2, MMP-9 aktivitelerinin ve MHC-I, MHC-II pozitif hücresayılarının köpekte embriyonik dönem ve diğer gebelik dönemleri arasında önemli düzeydefarklı olduğu ve bu farklılığın gebe ve gebe olmayan köpekler arasında da bulunduğu ortayakonuldu.Anahtar Sözcükler: Dişi köpek, erken gebelik, immunohistokimya, MHC-I, II, MMP-2, 9

Abstract:
77SUMMARYThe Uterine and Placental Expression of Matrix Metalloproteinases andMajor Histocompatibility Complex During Early Canine PregnancyIn the present study, the amounts and activities of MMP-2, MMP-9 and MHC-I, II moleculeswere investigated in different uterus sites at different pregnancy stages.The material of the study included 36 bitches. Uterine tissues were removedaccording to pregnancy stages at preimplantation stage (Group 1, n=11), implantation stage(Group 2, n=9), placentation stage (Group 3, n=9). Moreover, uterus of 4 bitches inmetoestrus stages constitute control group. Additionally placental labyrinth group (Group 5,n=3) was formed for MMP activity analysis. Immunohistochemical staining was used todetermine MMP-2, MMP-9 and MHC-I, MHC-II in tissue samples, gelatine zymographytechnic was used to determine MMP activities. Numeric data was obtained from transferringzymography gel images to computer. MHC-II positive cells were counted under a stereomicroscope.MMP-2 activity in endometrium and myometrium in comparison with nonpregnantanimals was found statistically important. MMP-9 activities of preimplantation (23.2%) andplacental groups (33.3%) were found different than implantation (8.1%), postimplantation(13.2%) and control groups (11.8%) (p<0.05). Average numbers of MHC-II positive cells insalpix sites (group1, 1.62; group 2, 2.36; group 3, 1.64) were found different than controlgroup (0.55) (p<0.05). Regression analyses showed a positive relation between pregnancystages (Group 1, Group 2, Group 3) and enhancement of MHC-II positive cell number inapex and corpus sites of uterus (r2=0.796/byx; r2=0.809/byx). High significant (p<0.03;p<0.05) negative correlation (-0.988; -0.854) was found between MMP-2, MMP-9 andprogesterone levels.In conclusion, MMP-2, MMP-9 activities and MHC-I, MHC-II positive cell numbers inembryonic stages and other pregnancy stages were found different. Moreover thesedifferences were found between pregnant and nonpregnant bitches.Key Words: Bitch, early pregnancy, immunohistochemistry, MHC-I, II, MMP-2, 9