Kardiyotrofin-1 (CTF-1)'in doksorubisin ile indüklenen senesent kanser hücrelerinde ekspresyon ve sekresyonunun değerlendirilmesi
Assessment of expression and secretion of Cardiotrophin-1 (CTF-1) in doxorubicin-induced senescent cancer cells
Yazar: TUĞÇE TAYYAR
Danışman: PROF. DR. AYSUN ÖZDEMİR
Gazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2024
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology

Özet:
Hücresel senesens, geri dönüşümsüz hücre döngüsü durması ile karakterize bir durumdur. 
Hücre döngüsünden çıkmalarına rağmen metabolik olarak aktif kalırlar. Replikatif 
senesensin yanı sıra, çeşitli intrinsik ve ekstrinsik stres faktörlerine bağlı olarak gelişen 
"stresle indüklenen prematür senesens" (stress-induced premature senescence) olarak 
adlandırılan farklı senesens türleri tanımlanmıştır. Senesent hücreler, büyümüş, yassılaşmış 
ve çok çekirdekli bir morfolojiye sahiptir. Senesent hücreler, senesens ile ilişkili sekretuvar 
fenotip (SASP) adı verilen, çeşitli sitokinleri, kemokinleri, proteazları ve büyüme 
faktörlerini içeren bir dizi proinflamatuvar faktör salgılar. SASP faktörleri, tümör 
oluşumunun çeşitli yönlerini güçlendirebilen proinflamatuvar ve immün modüle edici 
moleküller içerir. Kardiyotrofin-1 (CTF-1), IL-6 ailesine ait bir sitokin olarak, meme 
kanserinden izole edilen karsinomla ilişkili fibroblastlarda (CAF'ler) yeni bir otofaji 
aktivatörü olarak belirlenmiştir. Östrojen reseptörü pozitif MCF-7 ve T47D meme kanseri 
hücrelerinden sekrete edilen CTF-1'in fibroblastlarda otofajiyi indüklediğini
göstermişlerdir. Bu tez çalışmasında, standart kemoterapötik bir ajan olan doksorubisin (300 
nM) ile indüklenen üç farklı kanser hücresinde (meme adenokarsinom MCF7 hücre hattı, 
serviks adenokarsinom HeLa hücre hattı, akciğer adenokarsinom A549 hücre hattı) senesens 
sonrası sekrete edilen IL-6 ve CTF-1 seviyeleri ölçülüp hücreler arası farklılıkların 
incelenmesi amaçlanmıştır. Bulgularımızda, 300 nM doksorubusin ile indüklenen senesent 
MCF7 hücre sekretomunda IL-6 sekresyonu görülmezken, CTF-1 sekresyonunda anlamlı 
bir artış görülmüştür. Buna karşın Hela ve A549 hücre sekretomlarında IL-6 sekresyonunda 
anlamlı bir artış gözlemlenirken, CTF-1 sekresyonu görülmemektedir. Bu veriler, çeşitli 
kanser hücrelerinin sekretuvar aktivitesindeki farklılıkları ve hücre-spesifik tedavi şekli 
geliştirmenin önemini göstermektedir. Ayrıca CTF-1'in hücre spesifik bir hücresel senesens 
biyobelirteci olabileceğini düşündürmektedir.

Abstract:
Cellular senescence is a condition characterized by irreversible cell cycle arrest. Although 
they exit the cell cycle, they remain metabolically active. In addition to replicative 
senescence, different types of senescence have been described, termed "stress-induced 
premature senescence", which develops due to various intrinsic and extrinsic stress factors. 
Senescent cells have an enlarged, flattened and multinucleated morphology. Senescent cells 
secrete a set of proinflammatory factors called senescence-associated secretory phenotype 
(SASP), which includes various cytokines, chemokines, proteases and growth factors. SASP 
factors contain proinflammatory and immune-modulating molecules that can potentiate 
various aspects of tumorigenesis. Cardiotrophin-1 (CTF-1), a cytokine belonging to the IL6 family, was identified as a novel autophagy activator in carcinoma-associated fibroblasts 
(CAFs) isolated from breast cancer. They showed that CTF-1 secreted from estrogen 
receptor positive MCF-7 and T47D breast cancer cells induced autophagy in fibroblasts. In 
this thesis, we aimed to measure the levels of IL-6 and CTF-1 secreted after senescence in 
three different cancer cells (breast adenocarcinoma MCF7 cell line, cervical adenocarcinoma 
HeLa cell line, lung adenocarcinoma A549 cell line) induced by doxorubicin (300 nM), a 
standard chemotherapeutic agent, and to examine the differences between cells. In our 
findings, no IL-6 secretion was observed in 300 nM doxorubicin-induced senescent MCF7 
cell secretome, whereas a significant increase in CTF-1 secretion was observed. In contrast, 
Hela and A549 cell secretomes showed a significant increase in IL-6 secretion, but not CTF1 secretion. These data demonstrate the differences in the secretory activity of various cancer 
cells and the importance of developing cell-specific therapies. They also suggest that CTF1 may be a cell-specific biomarker of cellular senescence.