Subkronik p-dimetil aminoazobenzen (p-DAB) uygulanan sıçanlarda İnositol 6-fosfat ve Retinil Asetat'ın karaciğer dokusu üzerindeki etkileri
The effects of Inositol 6-phosphate and Rethinyl acetate on liver tissue of subchronically p-dimethyl aminoazobenzene (p-DAP) treated rats
Yazar: ÖZLEM AYDIN
Danışman: YRD. DOÇ. DR. FAHRETTİN AKYÜZ
Eskişehir Osmangazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2010
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Karaciğer = Liver ; Retinoidler = Retinoids ; İnositol = Inositol

Özet:
Subkronik p-dimetilaminoazobenzen (DAB) ve 2,3,7,8, tetraklorodibenzo-p-dioksin (TCDD) vererek deneysel kanser modeli oluşturmayı hedeflediğimiz çalışmamızda, antiproliferatif ve apoptotik özelliklere sahip inositol 6 fosfat (IP6) ile retinil asetat (RA)'ın karaciğer dokusundaki koruyucu rollerini değerlendirdik.Çalışmamızda Spraque dawley erkek sıçanlar her grupta 30 adet olacak şekilde 6 gruba ayrıldı. Kontrol hayvanları (grup 1 ve 2) standart laboratuvar diyeti ile beslendiler. Grup 2'ye diyetin yanı sıra gavajla mısır yağı (0,25 mL/100 g vücut ağırlığı, haftada 5 gün) da verildi. Grup 3'teki hayvanlara yemleriyle DAB (%0,06) ve gavajla TCDD (70 ng/100 g vücut ağırlığı, haftada 1 gün) verildi. DAB + TCDD verilen diğer üç grup sırayla IP6 (%0,5, içme suyunda), RA (1 mg/100 g vücut ağırlığı, haftada 5 gün) ve IP6 + RA aldı. Tüm maddeler başlandıktan sonra 15., 30., 60., 90. ve 120. günlerde her gruptan 6 sıçanın kan ve doku örnekleri alındı. Serumda ALT, AST, ALP, LDH; plazmada VEGF, MMP-2; karaciğerde MDA, Sitokrom c, DNA Fragmantasyonu ölçüldü. CYP1A1 western blot ile belirlendi. Karaciğer dokuları histopatolojik olarak değerlendirildi.Grup 3'ün 90. ve 120. gün örneklerinde VEGF ve MMP-2 değerleri artarken, Sitokrom c ve DNA fragmantasyonu değerleri ile CYP1A1 enzim ekspresyonu azalmıştı. Yine grup 3'ün 90. ve 120. gün örneklerinde preneoplastik fokus bulgusu mevcuttu. Grup 4, 5 ve 6'da istatistiksel olarak preneoplastik fokusa rastlanmadı.Karaciğer kanser modeli oluşturmak için DAB'ın başlatıcı (initiator) ve TCDD'nin promotör olarak kullanıldığı bu deneysel çalışmada DAB + TCDD kombinasyonunun karaciğerde preneoplastik fokus oluşumunu tetiklediği gösterildi. Bu süreçte IP6 ve RA'nın preneoplastik dönüşümü büyük oranda engelleyerek koruyucu rol oynadığı belirlendi.

Abstract:
We evaluated the protective roles of antiproliferative and apoptotic substances inositol hexaphosphate (IP6) and retinyl acetate (RA) on the liver tissue with an experimental cancer model formed by subchronic administration of p- dimethylaminoazobenzene (DAB) and 2,3,7,8, tetrachlorodibenzo-p-dioxin (TCDD).Spraque dawley male rats were randomized into 6 group each consist of 30 rats. Control animals (group 1 and 2) were fed a standard laboratory diet. Group 2 was received corn oil (0,25 mL/100 g body weight, 5 days/week) by gavage along with diet. Group 3 animals was allowed DAB (0,06%) by food and TCDD (70 ng/100 g body weight, once a week) by gavage. Three other groups of DAB + TCDD treated animals received IP6 (0,5%) in drinking water, RA (1 mg/100 g body weight, 5 days/week) and IP6 + RA, respectively. After the beginning of the study, blood and tissue samples were taken from 6 rats /group by 15., 30., 60., 90., and 120. days. ALT, AST, ALP, LDH levels were measured in serum; VEGF, MMP-2 in plasma; MDA, Cytochrome c, DNA fragmentation in liver. CYP1A1 was determined by western blot. Liver tissues were evaluated histopathologically.Plasma VEGF and MMP-2 levels were increased and cytochrome c and DNA fragmentation levels and expression of CYP1A1 were decreased in group 3 at 90., and 120. day samples. Preneoplastic foci were found at 90., and 120. day samples of group 3. In contrast there were no preneoplastic foci in group 4, 5, and 6 statistically.DAB + TCDD combination was shown to trigger preneoplastic foci formation in this study which uses DAB as an initiator and TCDD as a promoter for formation liver cancer model. IP6 and RA have protective roles in this process by inhibiting preneoplastic transformation.