Ratlarda deneysel ovaryantorsiyon - detorsiyon hasarında g-csf vemetilprednizolon tedavisinin over rezerviüzerine etkisi
The effect of g-csf and methylprednisolone treatmenton ovarian reserve in rats with ovarian torsiondetorsion injury
Yazar: ELİF USLU
Danışman: PROF. DR. FİSUN VURAL
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / İstanbul Haydarpaşa Numune Eğt. ve Arş. Hastanesi / Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2024
Konu: Kadın Hastalıkları ve Doğum = Obstetrics and Gynecology

Özet:
Amaç: Ratlarda over torsiyon ve detorsiyon işleminde G-CSF ve
metilprednizolon birlikte ve ayrı ayrı kullanımının over rezervi üzerine etkisini
araştırmak amaçlanmıştır.
Gereç ve Yöntem:Toplam 39 adet Sprague-Dawley cinsi sağlıklı, gebe
olmayan200-250 gr ağırlığındaki dişi rat, 5 gruba ayrıldı; kontrol (7),torsiyondetorsiyon (8), filgrastim (8), metilprednizolon (8), ve kombine tedavi (8) grupları.
Kontrol grubuna sadece laparotomi yapıldı, adneksler değerlendirildi, 6 saat sonra sol
ooferektomi yapıldı. İskemi-reperfüzyon grubunda sol over torsiyonu oluşturuldu, 3
saat iskemi süresi boyunca batın kapatıldı, ardından relaparatomi yapılarak
reperfüzyon sağlandı ve 3 saat sonra sol over dokusu alındı. Diğer gruplarda
torsiyondan 2,5 saat sonra ilaç tedavisi uygulandı. İlaçlar intraperitoneal olarak grup
3'e 100 µg/kg dozunda Filgrastim, grup 4'e 30 mg/kg metilprednizolon, Tedaviden 30
dakika sonra relaparatomi yapılarak tedavi gruplarına da sol ooferektomi yapıldı.
Biyokimyasal incelemede serumda İnhibin B, E2, AMH düzeyleri ölçüldü. Sol over
dokuları ise histolojik inceleme ve apopitozun değerlendirildiği TUNEL incelemesi
için -70 °C'de saklandı. Histolojik incelemede hematoksilen-eozin ile boyanan over
dokularında folikül dejenerasyonu, interstisyel ödem, vasküler dilatasyon, hemoraji,
PNL infiltrasyonuna bakıldı.
Bulgular: Filgrastim grubunda histolojik skorlardan istatistiksel olarak
anlamlı olanlar vasküler dilatasyon ve PNL infiltrasyonu hasar skorlarında azalmadır
(p<0,001). Metilprednizolon tedavisi uygulanan grupta folikül dejenerasyonu hasar
skorunda ise istatistiksel olarak anlamlı derecede azalma izlenmiştir. (p<0,001).
Kombine tedavi uygulanan grupta histolojik olarak yine tüm parametrelerde tedavi
uygulanmayan gruba göre istatistiksel olarak hasar skorları anlamlı derecede düşük
bulunmuştur (p<0,001). Yine kombine tedavi grubunda histolojik bulgular
x
değerlendirildiğinde ise folikül dejenerasyon ve hemoraji hasar skoru diğer tedavi
gruplarıyla karşılaştırıldığında anlamlı düzeyde daha düşük bulunmuştur (p<0,001).
Biyokimyasal incelemelerde over rezervini belirlemek için serumda ölçülen İnhibinB, E2, AMH düzeylerinin hepsinde tedavi verilen gruplarda istatistiksel olarak anlamlı
fark saptanmıştır (p<0,001). Kontrol gruplarında serumda ölçülen düzeyler en yüksek
sonuçlardayken bu grubu sırasıyla kombine tedavi, metilprednizolon ve Filgrastim
grubu izlemiştir. TUNEL bulguları incelendiğinde metilprednizolon tedavisinin
apoptozu azaltmada etkili olduğu gözlemlenmiştir (p=0.048).Filgrastim tedavisinin
apoptozu azaltmada belirli bir etkisi olduğu ancak istatistiksel olarak anlamlı olmadığı
gözlemlenmiştir (p=0.108). Kombine tedavi grubunda apoptoz oranları düşük
olmasına rağmen, kontrol grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı bir fark
bulunmamıştır (p=0.329).
Sonuç: Over torsiyon-detorsiyon modelinde uygulanan Filgrastim,
metilprednizolon, Filgrastimve metilprednizolon kombine tedavisi over rezervini
korumada olumlu etki göstermiştir. Filgrastim ve metilprednizolon kombine
tedavisinin over rezervini korumada daha etkin olduğu gösterilmiştir.
Anahtar Kelime: Over torsiyonu, G-CSF, metilprednizolon, over rezervi

Abstract:
Objective: The aim was to investigate the effect of the combined and separate
use of G-CSF and methylprednisolone on ovarian reserve in rats undergoing ovarian
torsion and detorsion.
Materials and Methods: A total of 39 healthy, non-pregnant female SpragueDawley rats weighing 200-250 grams were divided into 5 groups: control (7), torsiondetorsion (8), Filgrastim (8), methylprednisolone (8), and combined treatment (8)
groups. All groups were anesthetized, placed in a supine position, and the abdominal
skin was shaved. A 2 cm incision was made on the midline of the abdomen. Only
laparotomy was performed in the control group, the adnexa were evaluated, and left
oophorectomy was performed after 6 hours. In the ischemia-reperfusion group, left
ovarian torsion was created, the abdomen was closed during the 3-hour ischemia
period, then relaparotomy was performed to allow reperfusion, and the left ovarian
tissue was removed 3 hours later. In the other groups, drug treatment was administered
2.5 hours after torsion. The drugs were administered intraperitoneally: 100 µg/kg
Filgrastim to group 3, 30 mg/kg methylprednisolone to group 4, and combined
treatment in the same doses to group 5. Relaparotomy was performed 30 minutes after
treatment, and left oophorectomy was also performed in the treatment groups. Before
sacrifice, 3 cc of intracardiac blood was taken from all rats and stored under
appropriate conditions for biochemical analysis. Serum levels of Inhibin B, E2, and
AMH were measured in the biochemical analysis. The left ovarian tissues were stored
at -70°C for histological examination and TUNEL assay to assess apoptosis. In the
histological examination, follicular degeneration, interstitial edema, vascular
dilatation, hemorrhage, and PNL infiltration were observed in ovarian tissues stained
with hematoxylin-eosin.
xii
Results: In the group treated with Filgrastim, statistically significant
reductions were observed in the histological scores for vascular dilatation and PNL
infiltration damage scores (p<0.001). In the group treated with methylprednisolone,
there was a statistically significant decrease in the follicular degeneration damage
score (p<0.001). In the combined treatment group, histological scores for all
parameters were significantly lower compared to the untreated group (p<0.001). When
histological findings were evaluated in the combined treatment group, follicular
degeneration and hemorrhage damage scores were significantly lower compared to the
other treatment groups (p<0.001). In biochemical analyses, statistically significant
differences were found in all serum levels of Inhibin-B, E2, and AMH measured to
determine ovarian reserve in the treated groups (p<0.001). The control group had the
highest serum levels, followed by the combined treatment, methylprednisolone, and
Filgrastim groups, respectively. When examining TUNEL findings, it was observed
that methylprednisolone treatment was effective in reducing apoptosis (p=0.048).
Filgrastim treatment showed a certain effect in reducing apoptosis, but it was not
statistically significant (p=0.108). Although apoptosis rates were low in the combined
treatment group, there was no statistically significant difference compared to the
control group (p=0.329).
Conclusion: In the ovarian torsion-detorsion model, Filgrastim,
methylprednisolone, and the combined treatment of Filgrastim and
methylprednisolone showed a positive effect in preserving ovarian reserve. It has been
shown that the combined treatment of Filgrastim and methylprednisolone is more
effective in preserving ovarian reserve.
Key words: Ovarian torsion, G-CSF, methylprednisolone, ovarian reserve