Beyaz çay (Camellia sinensis L.)'ın Drosophila melanogaster'de bazıantineoplastiklerin neden olduğu mutajenik etki üzerine koruyucu etkisinin araştırılması
Research of white tea's (Camellia sinensis L.) protective effect on Drosophila melanogaster, regarding mutagenic effect caused by certain antineoplastics
Yazar: MEHMET FİDAN
Danışman: YRD. DOÇ. DR. ARİF AYAR
Amasya Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2017
Konu: Biyoloji = Biology

Özet:
Beyaz çay, dünyada sudan sonra en fazla tüketilen içecek olan çay (Camellia sinensis L.) bitkisinin henüz tam olarak olgunlaşıp açılmamış beyaz tüylerle kaplı yapraklarından soldurma, fırınlama ve fermantasyon gibi işlemlerden geçmeden hazırlanan formudur. Bu çalışmada Drosophila melanogaster'de Somatik Mutasyon ve Rekombinasyon Testi (SMART) ile Beyaz Çay (BÇ)'ın Streptozotosin (STZ) ve Siklofosfamid (SF) isimli iki farklı alkilleyici özellikteki antineoplastik kanser ilacının oluşturduğu genotoksik etkiye karşı antigenotoksik etkinliğinin belirlenmesi amaçlanmıştır. SMART uygulanırken D. melanogaster'in genomunda çekinik flare (flr3) ve çoklu kanat kılı (mwh) belirleyici genlerini taşıyan iki farklı mutant soyu kullanılmıştır. Bu iki mutant soy arasında yapılan çaprazlamalar sonucu elde edilen 72±4 saatlik trans-heterozigot larvalar, farklı konsantrasyonlarda (0,625; 1,25; 2,50 ve 5 mg/mL) beyaz çay ekstresi ile kronik olarak beslenmiştir. Yapılan bu ön çalışma sonucunda beyaz çayın hiçbir konsantrasyonda genotoksik etki göstermediği belirlenmiştir. Çalışmamızın diğer bölümünde LD50 değerleri (STZ:0,25 mg/mL, SF:2,5 mg/mL) bulunan iki ilacın da oldukça yüksek genotoksik etkiye sahip oldukları belirlenmiştir (p<0,05). Daha sonra farklı konsantrasyonlarda BÇ ekstresi ile kanser ilaçları eş zamanlı olarak larvalara uygulanmıştır. Elde edilen verilerden BÇ ekstraktının konsantrasyon artışına bağlı olarak kanatlarda benek oluşumunu sağlayan mutasyonları baskılayarak Klon İndüksiyon Frekanslarını (KİF) tüm uygulama gruplarında önemli derecede azalttığı belirlenmiştir. Ayrıca beyaz çayın kanser ilaçlarının oluşturduğu genotoksik etkiyi hangi oranlarda azalttığının tespiti için yapılan %İnhibisyon oranları incelendiğinde 0,25STZ+2,5BÇ uygulama grubunda bu oranın %55,79; 2,5SF+5BÇ uygulama grubunda ise %60,00 olduğu tespit edilmiştir. Sonuç olarak kanser tedavilerinde kullanılan Streptozotosin ve Siklofosfamid ilaçlarının sağlıklı hücrelerde de genotoksik etkiler yaratabileceği bu etkilerin ise beyaz çay tüketimi ilavesiyle azaltılabileceği kanaatine varılmıştır.

Abstract:
White tea is a form of the world's most popular non-water beverage, tea plant (Camellia sinensis L.),  made from buds and immature tea leaves picked before the buds have fully opened, before the leaves have lost their white hair, without being subjected to procedures such as withering, drying and fermentation. In the present study, it has been aimed to determine the antigenotoxic activity of White Tea, against the genotoxic effect caused by two different alkylating antineoplastic cancer drugs Streptozotocin (STZ) and Cyclophosphamide (CP) in Drosophila melanogaster through the Somatic Mutation and Recombination Test (SMART). During the application of SMART, two different mutant strains were used in the genome of D. melanogaster, with the determinant genes being respectively recessive flare (flr3) and multiple wing hairs (mwh). Trans-heterozygote larvae of 72± hours, obtained through crossbreeding of these two mutant strains, were chronically fed with white tea extract of different concentrations (0,625; 1,25; 2,50 and 5 mg/mL). In consequence of the relevant preliminary study performed, it was determined, white tea displayed no genotoxic effect, regardless of the concentration. In our study, the LD50 values of the relevant drugs were also found (STZ: 0,25 mg/mL, CP: 2,5 mg/mL), and it was determined, both drugs have a fairly high genotoxic effect (p<0,05). Afterwards, white tea extracts of different concentrations were applied to larvae simultaneously with cancer drugs. From the data obtained, it was determined that white tea extract, significantly reduced the Clone Induction Frequencies (CIF) in all treatment groups, by suppressing mutations enabling the formation of spots in wings, in parallel with increasing concentration. Also, when the Inhibition percentage rates were subjected to examination in order to determine white tea's reduction rate of genotoxic effect caused by cancer drugs, it was determined that the relevant rate was 55,79% in the 0,25STZ+2,5White Tea treatment group, and 60,00% in the 2,5SF+5White Tea treatment group. In conclusion, it was satisfied that, Streptozotocin and Cyclophosphamide drugs used in cancer treatments may create genotoxic effects even in healthy cells, and these effects may be reduced by additional white tea consumption.