Seminal plazmadaki anti müllerian hormonun sperm morfolojisi ve sperm DNA hasarıyla ilişkisi
Relationship of seminal plasma anti mullerian hormone concentration with sperm morphology and sperm dna damage
Yazar: GÜRKAN TURHAN
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ NAZLI ÇİL
Pamukkale Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2020
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Antimüllerian hormon = Antimullerian hormone ; DNA = DNA ; DNA hasarı = DNA damage ; Morfoloji = Morphology ; Plazma = Plasma ; Sperm = Spermatozoa

Özet:
Bu tezde seminal Anti Müllerian Hormon (AMH) düzeyleri ile Kruger morfolojik
sınıflamasına göre baş, boyun ve kuyruk anomalili ve normal morfolojili spermlerin
karşılaştırılması amaçlanmıştır. Ayrıca sperm DNA fragmantasyonu Terminal
Deoxynucleotidyl transferase dUTP nick-end labeling (TUNEL) yöntemiyle incelenmiş
ve sonuçlar AMH düzeyleri ve Kruger morfolojisiyle karşılaştırılmıştır.
Gönüllü hastalardan toplanan semen ve kan örnekleri alınmıştır. Semen analizi
sonuçlarına göre hastalar normozoospermi (n=46), oligoastenoteratozoospermi (n=18),
azospermi (n=19), teratozoospermi (n=68) olarak dört gruba ayrılmıştır. Kan FSH, LH
ve Testosteron düzeyleri biyokimyasal olarak ve kan ve semen AMH düzeyleri ELISA
yöntemiyle ölçülmüştür. Hastaların ejekülatlarından hazırlanan yayma preparatlarına
TUNEL boyaması yapılmıştır ve apopitotik indeks hesaplanmıştır. Elde edilen veriler
istatistiksel olarak değerlendirilmiştir ve p<0,05 istatistiksel olarak anlamlı kabul
edilmiştir.
Gruplar kendi aralarında karşılaştırıldığında sperm volümünün azospermik grupta
normozoospermik gruba göre anlamlı olarak düşük olduğu saptanmıştır (P= 0,0001).
Total motil sperm sayısı, total progresif motil sperm sayısı normozoospermik grupta
diğer bütün gruplara göre istatiksel olarak fazla bulunmuştur. Hareketsiz sperm oranı
oligoastenoteratozoospermik grupta anlamlı olarak en yüksek bulunmuştur. Kruger
morfolojisi değerlendirmesinde baş anomalisi teratozoospermik grupta anlamlı olarak
yüksek bulunmuştur (P=0,0001). Bu hastalarda baş anomalisi oranı ile TUNEL (+)
hücre varlığı arasında (-) korelasyon varken, boyun ve kuyruk anomalisi arasında (+)
korelasyon saptanmıştır. FSH ve LH düzeyleri azospermik grupta anlamlı olarak
yüksek bulunmuştur. Kan ve semen AMH düzeyleri azospermik grupta en yüksekti ve
istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur. TUNEL pozitif hücre sayısının
normoozoospermik hastalarda yüksek çıkması, Tüp Bebek Merkezlerine gelen normal
sperm parametrelerine sahip olgularda da sperm DNA hasarı olabileceğini
göstermektedir. Bu da sperm DNA kırıklarının idiopatik infertilite nedenlerinden biri
olduğunun kanıtıdır. Çalışmamızda AMH'nın Kruger morfolojisi ve sperm DNA
kırıklarıyla ilişkisi bulunmamıştır.

Abstract:
In this thesis, we aimed to compare seminal Anti Müllerian Hormone (AMH) levels
with head, neck and tail anomalies and normal morphology sperm according to Kruger
morphological classification. We also analyzed the relationship between these
parameters and sperm DNA fragmentation studied by Terminal deoxynucleotidyl
transferase dUTP nick end labeling (TUNEL) assay.
Semen and blood samples collected from volunteer patients. According to semen
analysis results, patients were divided into four groups as normozoospermia (n=46),
oligoastenoteratozoospermia (n=18), azospermia (n=19) and teratozoospermia (n=68).
Blood FSH, LH and Testosterone levels were measured biochemically and blood and
semen AMH levels were measured by ELISA. TUNEL staining was performed on
smear preparations prepared from ejaculates of patients and apoptotic index was
calculated. Appropriate statistical analysis was carried out and the p-value was set to <
0.05 for statistical significance.
Sperm volume was significantly lower in the azoospermic group compared to the
normozoospermic group (p=0,001). Total motile sperm count and total progressively
motile sperm count were statistically higher in the normozoospermic group than in all
other groups. The immotile sperm ratio was found to be significantly higher in the
oligoasthenoteratozoospermic group. In the morphological evaluation of sperm
performed according to Kruger strict criteria, the head anomaly was found to be
significantly higher in the teratozoospermic group (p=0,001). A negative correlation
between head anomaly rate and TUNEL (+) cell presence was found in these patients.
Also, there was a positive correlation between neck and tail anomaly and TUNEL (+)
cell presence. FSH and LH levels were significantly higher in the azoospermic group.
Blood and seminal plasma AMH levels were most elevated in the azoospermic group
and were statistically significant. The high number of TUNEL positive cells in
normoozoospermic patients indicates that sperm DNA damage may also occur in
subjects with normal sperm parameters coming to IVF Centers. This is proof that
sperm DNA damage is one of the causes of idiopathic infertility. In our study, we
couldn't find any association between seminal plasma AMH was not associated with
sperm morphology and sperm DNA damage.