Bir fiberle güçlendirilmiş kompozitin yirmi yaş dişinden izole edilen pulpal kök hücreler üzerindeki sitotoksisitesinin incelenmesi
Examination of the cytotoxicity of A fiber- reinforced composite on pulpal stem cells isolated from wisdom tooth
Yazar: ZELİHA MERVE DEMİRAY
Danışman: DOÇ. DR. BAŞAK YAZKAN
Pamukkale Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Kök Hücre Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Biyoloji = Biology ; Diş Hekimliği = Dentistry
Dizin: Ağız mukozası = Mouth mucosa ; Dental materyaller = Dental materials ; Dental pulpa = Dental pulp ; Kompozit malzemeler = Composite materials ; Kök hücreler = Stem cells ; Sitotoksisite = Cytotoxicity

Özet:
Dental materyaller, klinik kullanıma girmeden önce, materyalin ağız dokuları üzerindeki potansiyel zararlı etkileri, in vitro testlerle değerlendirilmeli ve sonrasında yapılacak hayvan deneylerinden elde edilecek sonuçlarla, ilgili materyalin toksisitesi tespit edilmelidir. Bu çalışmada insan yirmi yaş dişi dental pulpasından kök hücre elde edilerek farklı tip akışkan kompozit rezinlerin elde edilen kök hücreler üzerindeki sitotoksisitesinin araştırılması amaçlanmıştır.
Etik kurul onayı alındıktan sonra sağlıklı bir gönüllüden steril koşullar altında insan yirmi yaş dişi alınarak, pulpa dokusu çıkarılıp eksplant metodu ile kültüre edildi. Üç pasajlamanın ardından mezenkimal kök hücre tayini için akım sitometri analizi yapıldı. Bununla birlikte, mezenkimal kök hücreleri karakterize etmek amacıyla adipojenik, kondrojenik ve osteojenik faklılaştırma deneyleri uygulandı. Akım sitometri analizi ve farklılaştırma deneyleri sonucunda elde edilen kök hücrelerin mezenkimal kök hücre olduğu belirlendi.
Fiberle güçlendirilmiş bir kompozit rezin, yüksek vizkoziteli bir akışkan kompozit rezin ve düşük vizkoziteli bir akışkan kompozit rezinin materyal ekstraktları elde edildi. Dental pulpa kök hücreleri (DPKH), 24, 48 ve 72 saat olmak üzere hazırlanan materyal ekstraktlarına maruz bırakıldı. Sitotoksiste değerlendirmesi BrdU test yöntemiyle yapıldı ve hücre canlılık yüzdeleri hesaplandı. İstatistiksel değerlendirme tek yönlü ANOVA ve post hoc Duncan testi kullanılarak yapıldı (p <0.05).
Tüm inkübasyon periyotlarında ve tüm seyreltme konsantrasyonlarında hücre canlılık değerlerinin; yüksek vizkoziteli akışkan kompozit> fiberle güçlendirilmiş kompozit> düşük vizkoziteli akışkan kompozit sırasında istatististiksel olarak anlamlı derecede azaldığı belirlenmiştir (p˂0.05).
Bu çalışmanın sonuçları dahilinde derin kavitelerde kaide olarak fiberle güçlendirilmiş kompozit rezinin düşük sitotoksisite göstermiş olması nedeniyle klinikte güvenle kullanılabileceği söylenebilir.
Anahtar Kelimeler: Sitotoksisite, Dental Pulpa Kök Hücresi, Kök hücre, Farklılaştırma
Bu çalışma, Pamukkale Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Koordinatörlüğü tarafından (Proje no: 2020SABE025) desteklenmiştir.

Abstract:
Dental materials, before entering clinical use, the potential harmful effects of the material on oral tissues should be evaluated by in vitro tests, and then the toxicity of the relevant material should be determined by the results of animal experiments to be performed. In this study, it was aimed to investigate the cytotoxicity of different types of flowable composite resins on stem cells obtained by stem cells from a human wisdom tooth dental pulp.
After receiving the approval of the ethics committee, a human wisdom tooth was taken from a healthy volunteer under sterile conditions, pulp tissue was removed and cultured using the explant method. After three passages, flow cytometry analysis was performed to determine mesenchymal stem cells. Adipogenic, chondrogenic, and osteogenic differentiation experiments were performed to characterize mesenchymal stem cells. As a result of flow cytometry analysis and differentiation experiments, it was determined that the stem cells obtained were mesenchymal stem cells.
Material extracts of a fiber-reinforced composite resin, a high-viscosity flowable composite resin and a low-viscosity flowable composite resin were obtained. Dental pulp stem cells (DPKH) were exposed to the prepared material extracts for 24, 48 and 72 hours. Cytotoxicity assessment was done by BrdU test method and cell viability percentages were calculated. Statistical evaluation was performed using one-way ANOVA and post hoc Duncan test (p <0.05).
It was determined that the cell viability values decreased statistically significantly at all incubation periods and at all dilution concentrations; high viscosity fluid composite> fiber reinforced composite > low viscosity fluid composite (p<0.05).
Within the results of the present study, it can be said that fiber reinforced composite resin can be safely used in the clinic as a base in deep cavities due to its low cytotoxicity.
Keywords: Cytotoxicity, Dental pulp stem cell, Stem cell, Differentiation
This study was supported by Pamukkale University Scientific Research Projects Fund (Project no: 2020SABE025).