U-937 insan makrofajlarının candida albicans ile infekte edilmesi sonrası uygulanan levamizolün immun yanıta ve oksidatif strese etkisinin araştırılması
A study on the effects of levamisole treatment following infection of u-937 human macrophages with candida albicans upon immune response and oxidative stress
Yazar: MUSTAFA BUĞRA ÜSTÜNDAĞ
Danışman: YRD. DOÇ. DR. ESMA KAYA
Erciyes Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmasötik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2010
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Candida albicans = Candida albicans ; Hücre kültürü = Cell culture ; Levamizol = Levamisole ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Sitokinler = Cytokines ; İmmünite = Immunity

Özet:
ÖZETCandida albicans, mortalitesi yüksek, yaygın infeksiyonlara yol açan fırsatçı bir fungal patojendir. Antifungallerin, profilaksi ve tedavi amacıyla uzun süreli yaygın kullanımı sonucu dirençli kandida türlerinin görülmeye başlamasıyla antifungal tedavide başarı oranları düşmeye başlamıştır. Bu nedenle antifungal tedaviye katkı sağlayacak yeni bileşikler üzerinde çalışılmaktadır. Birçok hastalıkta immünmodülatör etkisi gösterilmiş olan levamizolün, hücresel aracılı immün defekte yol açan mantar infeksiyonlarında yararlı olabileceği düşünülebilir. Bu çalışmada levamizolün, in vitro olarak tek başına ve C.albicans uyarısı eşliğinde insan makrofaj hücre kültürüne uygulanması halinde, sitokin ve antioksidan düzeylerinde yaptığı değişiklikler belirlenerek, ilacın immün yanıta ve oksidatif strese etkisinin araştırılması amaçlanmıştır.Bu çalışmada levamizol, U-937 insan makrofaj hücrelerine C.albicans ile infeksiyonundan önce, infeksiyon ile eş zamanlı ve infeksiyondan sonra uygulandı. Hücre süpernatanlarında IL- ???? IL-12, IL-18, TNF ?? sitokinleri ve süperoksit dismutaz enzim düzeyleri ELISA cihazı yardımıyla ölçüldü. Levamizolün in vitro ortamda C.albicans uyarısı eşliğinde makrofaj hücrelerinden IL-12, IL- ??? ve IL-18 üretimini anlamlı bir şekilde arttırdığı tespit edildi (p<0,05). Levamizolün, C.albicans infeksiyonu öncesinde uygulandığında makrofaj hücrelerinden IL-12 ve IL- ??? üretimini anlamlı bir şekilde arttırdığı görüldü (p<0,05). Ayrıca levamizolün, C.albicans ile infekte edilen makrofaj hücrelerine eş zamanlı uygulanması ve C.albicans ile infekte edilmeden önce uygulanması durumunda, C.albicans'ın TNF ?? üretimini arttırıcı etkisini baskıladığı bulundu (p<0,05). Levamizolün, C.albicans ile uyarılmış ve uyarılmamış insan makrofaj hücrelerinde SOD üretimine anlamlı bir etkisi bulunmadı.Sonuç olarak, C.albicans infeksiyonlu hastaların tedavisinde ya da bu fungal patojen ile infeksiyon açısından risk altında olan kişilerin korunmasında, levamizolün immünmodülasyon etkilerinden faydalanılabileceği düşünüldü. Bu konuda yapılacak deneysel ve klinik çalışmalara ihtiyaç vardır.

Abstract:
ABSTRACTCandida albicans is an opportunistic fungal pathogen with high mortality rates causing extensive infections. As a result of the long and widespread use of antifungals for prophylactic and treatment purposes, resistant strains have developed, leading to lower success rates in antifungal treatment. Therefore, there is ongoing research on new compounds that will contribute to antifungal treatment. With proven immunomodulatory effect in many diseases, levamisole may also be useful in fungal infections causing cell-mediated immune defect. This study aimed to determine the changes in cytokine and antioxidants levels when levamisole is applied to human macrophage cell culture separately in vitro and accompanied by C.albicans stimulation and investigate its effect on immune response and oxidative stress.In this study, levamisole treatment was performed before, during and after infecting U-937 human macrophage cells with C.albicans. In cell supernatants, IL- ???? IL-12, IL-18, TNF ?? cytokines and superoxide dismutase enzyme levels were measured using an ELISA device. It was found that in vitro levamisole treatment accompanied by C.albicans stimulation significantly increased IL-12, IL- ??? and IL-18 production in macrophage cells (p<0.05). It was observed that when administered before C.albicans infection, levamisole significantly increased IL-12 and IL- ??? production in macrophage cells (p<0.05). Another finding was that when applied simultaneously to macrophage cells infected with C.albicans and before infection with C.albicans, levamisole suppressed the TNF ??? production stimulating effect of C.albicans (p<0.05). We found no significant effect of levamisole on SOD production in human macrophage cells stimulated and not stimulated with C.albicans.As a result, it is believed that immunomodulatory effects of levamisole could be useful in treating patients infected with C.albicans or in protecting individuals under the risk of being infected with this fungal pathogen. There is a need for further experimental and clinical studies on the issue.