Mesane kanseri hastalarında PD-1 ve PD-L1 ekspresyonlarının prognostik öneminin incelenmesi
Investigation of the prognostic importance of expressions of PD1 and PD-L1 in bladder cancer patients
Yazar: SÜMEYYE DURUR
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ HATİCE SEVİM NALKIRAN
Recep Tayyip Erdoğan Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Gen ifadesi = Gene expression ; Mesane hastalıkları = Urinary bladder diseases ; Mesane neoplazmları = Urinary bladder neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; PD-1 = PD-1 ; PD-L1 = PD-L1 ; Prognoz = Prognosis ; İmmünoterapi = Immunotherapy

Özet:
Mesane Kanseri Hastalarında PD-1 ve PD-L1 Ekspresyonlarının Prognostik Öneminin İncelenmesi
Mesane kanseri, dünya çapında en yaygın görülen ilk 10 kanser arasındadır. Ülkemizde mesane kanseri; kanserler arasında en yaygın 6. kanser olup insidans ve mortalitesi erkeklerde kadınlara oranla yaklaşık 6 kat fazladır. İleri veya metastatik mesane kanserli hastaların standart tedavi yöntemleri ile medyan genel sağkalımı tanıdan itibaren yaklaşık 15 aydır. Son yıllarda yapılan bazı çalışmalarda, PD-L1/PD-1 moleküllerinin immün baskılama ve tümörlerin immün-kaçış mekanizmalarında önemli aracılar olduğu belirtilmektedir. Ayrıca PD-L1'in, mesane kanseri de dahil çeşitli malignitelerde yüksek seviyede eksprese edildiği bildirilmiştir. Bu çalışmada, mevcut mesane kanseri hasta kohortuna ait tümör dokularında PD-L1/PD-1 ekspresyon seviyelerinin prognostik öneminin araştırılması amaçlanmıştır. Bu kapsamda, PD-L1/PD-1 ekspresyonlarının tümör derecesi, kanser evresi alt gruplarındaki değişimi ve genel sağkalım ile ilişkisi incelendi. Mesane kanseri tanısı almış 48 hastanın parafin bloklarından monofazik fenol ve guanidin izotiyosiyanat metodu ile elde edilen RNA'lar kullanılarak qRT-PCR yöntemiyle gen ekspresyon seviyeleri belirlendi. İmmünohistokimyasal inceleme için optimizasyon çalışmaları yapıldı. Yüksek dereceli tümör grubunda istatistiksel olarak anlamlı seviyede artmış PD-L1 ekspresyonu görüldü (p<0.05). Ancak PD-L1 ekspresyon seviyesi kanser evreleri (pTa, pT1, pT2) arasında anlamlı bir fark göstermedi. Ayrıca; tümör derecesi, kanser evresi ve PD-L1 ekspresyonu alt grupları arasında genel sağkalımdaki fark anlamlı bulunmadı. PD-1 için amplifikasyon kanserli dokuda sınırlı sayıda gözlemlendiğinden gruplar arası analizler gerçekleştirilemedi. İmmünohistokimyasal inceleme için gerçekleştirilen optimizasyon çalışmaları non-spesifik boyanma ile sonuçlandı. Sonuçlarımız literatürle uyumlu olarak, mevcut mesane kanseri hasta kohortumuzda PD-L1'in yüksek ekspresyonunun tümörün agresifliği ve tümör derecesi ile ilişkili bir biyobelirteç olabileceğini göstermektedir. Ayrıca tümör dokularında yüksek PD-L1 ekspresyonu belirlenen mesane kanseri hastalarında, standart tedaviye alternatif anti-PD-L1 immünoterapi seçeneğinin önerilmesi konusunda rasyonel bir temel sağlayabileceği düşünülmektedir.

Abstract:
Investigation of the Prognostic Importance of Expressions of PD-1 and PD-L1 in Bladder Cancer Patients
Bladder cancer is among the ten most common cancers worldwide. It is the 6th most common cancer and its incidence and mortality is approximately 4 times higher in men than in women in Turkey. The median overall survival of patients with advanced or metastatic bladder cancer treated with standard therapy is approximately 15 months from diagnosis. In some recent studies, it has been stated that PD-L1/PD-1 molecules are important mediators in immune suppression and immune-escape mechanisms of tumors. It has been reported that PD-L1 is highly expressed in various malignancies, including bladder cancer. In this study, it was aimed to investigate the prognostic significance of PD-L1/PD-1 expression levels in tumor tissues of the current bladder cancer patient cohort. In this context, the variation of PD-L1/PD-1 expressions in tumor grade and stage subgroups and their relationship with overall survival were examined. RNA isolation was performed from FFPE tumor tissues of 48 patients diagnosed with bladder cancer using the monophasic phenol and guanidine isothiocyanate method. Total RNA was converted to cDNA and gene expression levels were analyzed by qRT-PCR. Optimization experiments were performed for immunohistochemical examination. Statistically significantly increased PD-L1 expression was observed in the high-grade tumor group (p<0.05). However, no significant difference in PD-L1 expression was found among the three tumor stages (pTa, pT1, pT2) . In addition, the difference in overall survival was not significant between tumor grade, tumor stage, and PD-L1 expression subgroups. We were unable to perform PD-1 gene amplification analysis between groups since the expression was observed in a limited number of tumor tissues. Optimization studies performed for immunohistochemical examination resulted in non-specific staining. In line with the previous literature, our results showed that high expression of PD-L1 in bladder cancer may be a biomarker associated with tumor aggressiveness and tumor grade. In addition, these results may provide a rational basis for recommending anti-PD-L1/PD-1 immunotherapy as an alternative to standard therapy in bladder cancer patients with high PD-L1 expression in tumor tissues.