İnvertazın değişik desteklere immobilizasyonu
Immobilization of invertase onto various supports
Yazar: CEYLAN HEPOKUR
Danışman: DOÇ. DR. H. NURSEVİN ÖZTOP
Cumhuriyet Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Hidrojeller = Hydrogels ; Kompozitler = Composites ; Sepiyolit = Sepiolite ; İmmobilizasyon = Immobilization ; İnvertaz = Invertase

Özet:
nvertaz immobilizasyonu için akrilamid-sepiyolit (AAm-Sep) veakrilamid-sepiyolit-maleik asit (AAm-Sep-MA) kompozit hidrojelleri hazırlandı.Kompozit hidrojellerin karakterizasyonu için spektrofotometrik ve termal analizyöntemleri kullanıldı. Bu kompozit hidrojellere sisme ve difüzyon denemeleriuygulandı. AAm-Sep-MA'in suda 25 oC ve 60 oC sıcaklıklarda AAm-Sep'tandaha fazla sistigi bulundu. Suyun hidrojellere difüzyonu non-Fickiankarakterdedir. nvertaz AAm-Sep ve AAm-Sep?MA'e immobilize edilerekAAm-Sep-Inv ve AAm-Sep-MA-Inv olusturuldu. pH ve sıcaklıkla aktivitedegisimi, termal kararlılık, kullanım kararlılıgı, pH kararlılıgı ve saklamakararlılıgı incelendi. Optimum pH degeri serbest enzim için 5.0, AAm-Sep-Inviçin 5.5 ve AAm-Sep-MA-Inv için 6.0 olarak bulundu. Optimum sıcaklık degeriserbest enzim için 30 oC, AAm-Sep-Inv için 50 oC ve AAm-Sep-MA-Inv için 40oC olarak bulundu. Km ve Vmax degerleri serbest enzim, AAm-Sep-Inv ve AAm-Sep-MA-Inv için sırasıyla 11.3 mM ve 2.0 ?mol dk-1, 41 mM ve 8.1 ?mol dk-1,34.1 mM ve 13.9 ?mol dk-1 olarak bulundu. AAm-Sep-Inv ve AAm-Sep-MA-Inv25 ardısık kullanım sonunda aktivitesinin % 50-60'sını korudu. AAm-Sep-Inv veAAm-Sep-MA-Inv yüksek pH-kararlılıgı, sıcaklık kararlılıgı ve saklamakararlılıgı gösterdi.Anahtar Kelimeler: nvertaz, kompozit, hidrojel, immobilizasyon, akrilamid,sepiyolit

Abstract:
Acrylamide-sepiolite (AAm-Sep) and acrylamide-sepiolite-maleic acid(AAm-Sep-MA) hydrogel composites were prepared. Spectrophotometer andthermal analysis methods were used for characterization of hydrogel composites.These hydrogel composites were used in experiments of swelling and diffusion. Itwas observed that the swelling of AAm-Sep-MA was greater than the swelling ofAAm-Sep in water at 25 oC and 60 oC. Diffusion of water within hydrogel wasfound to be non-Fickian in character. Invertase was immobilized onto/into AAm-Sep and AAm-Sep-MA and AAm-Sep-Inv and AAm-Sep-MA-Inv were prepared.Various characteristics of imobilized invertase such as the pH-activity curve, thetemperature-activity curve, thermal stability, operational stability, pH stability,and storage stability were evaluated. Optimum pH value was fond to be 5.0, 5.5,and 6.0 for free invertase, AAm-Sep-Inv and AAm-Sep-MA-Inv respectively.Optimum temperature was 30 oC, 50 oC and 40 oC for free invertase, AAm-Sep-Inv and AAm-Sep-MA-Inv respectively. It was found as Km = 11.3 mM, Vmax =2.0 ?mol min-1 for free invertase, Km = 41 mM, Vmax = 8.1 ?mol min-1 for AAm-Sep-Inv and Km = 34.1 mM, Vmax = 13.9 ?mol min-1 for AAm-Sep-MA-Invrespectively. After 25 consecutive cycles AAm-Sep-Inv and AAm-Sep-MA-Invretained 50-60 % of its initial activity. AAm-Sep-Inv and AAm-Sep-MA-Invshowed excellent pH, temperature and storage stability.Key Words: Invertase, composite, hydrogel, immobilization, acrylamide,sepiolite