Ratlarda oluşturulan parietal defektlerde humik asitin kemik rejenerasyonu üzerine etkisinin araştırılması
Investigation of the effect of humic acid on bone regeneration in parietal defects formed in rats
Yazar: MUHAMMET ŞENGÜL
Danışman: DOÇ. DR. VİLDAN BOSTANCI
Sivas Cumhuriyet Üniversitesi / Diş Hekimliği Fakültesi / Periodontoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Diş Hekimliği Uzmanlık, 2021
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Hümik asit = Humic acid ; Kemik defektleri = Bone defects ; Kemik rejenerasyonu = Bone regeneration ; Kemik ve kemikler = Bone and bones ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Çalışmamızın amacı, otojen kemik grefti uygulamalarında lokal humik asitin erken dönem oluşan yeni kemik miktarı üzerine etkisinin araştırılmasıdır. Denek olarak 12 haftalık, ortalama ağırlıkları 230-250 g olan Wistar Albino cinsi 24 adet rat kullanılmıştır. Deney hayvanları 4 gruba ayrılmıştır ve her grup 6 deney hayvanından oluşmaktadır. Bunlar kontrol grubu, sadece otojen greft uygulanan grup, lokal 100 mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft grubu ve lokal 200 mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft grubu şeklinde belirlenmiştir. Deney hayvanlarının parietal kemiğinde kritik boyutta 5mm çapında bikortikal kemik fragmanı automax frez kullanarak serum fizyolojik irrigasyonu altında çıkarılmıştır. Defektli bölgeye oluşturulma esnasında elde edilen otojen greft ilgili deney gruplarına uygulanmıştır. Lokal humik asit uygulanacak ratlar için uygun humik asit konsantrasyonu hazırlanmıştır. Lokal uygulama yapılacak gruplar için belirlenen humik asit miktarı otojen greftle karıştırılarak uygulanmıştır. Deney hayvanları işlem sonrası 28.günde sakrifiye edilmiştir. Daha sonra greftlenen defekt bölgesi mikro-bilgisayarlı tomografi (Mikro- BT) ile değerlendirilmiştir.
 Trabeküler kalınlık (Tb.Th) ve kemik hacminin doku hacmine oranı (BV/ TV) değerlerinde en yüksek değer lokal 100mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft grubunda bulunmuştur. Tb.Th ve BV/ TV   değerlerinde humik asit uygulaması olumlu etkisi görülmesine rağmen doz artırılması olumsuz etkilemiştir.
Kemik hacmi (BV) değişkeninde en yüksek değer sadece otojen greft uygulanan grupta tespit edilmiştir. Gruplar ikişerli olarak karşılaştırıldığında kontrol grubu ile diğer gruplar arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur (p<0.05). Çalışmamızın sonucuna göre humik asit uygulandığında BV değerinde olumlu etkisi görülmemiştir.
Kemik yüzey alanı (BS) değişkeni için gruplar ikişerli olarak karşılaştırıldığında kontrol grubuyla sadece otojen greft uygulanan grup ve lokal 100mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft grubu arasında istatistiksel olarak anlamlı fark bulunmuştur (p<0.05). Aynı zamanda lokal 100mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft grubu ile lokal 200mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft grubu karşılaştırıldığında lokal 100mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft grubunda BS değeri daha yüksek bulunmuştur. BS değerinde de doz artırılması olumsuz etkilemiştir. 
Kemik yüzey alanının kemik hacmine oranı (BS/BV) değerinde kontrol grubu ile diğer gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı fark bulunmuştur (p<0.05). Lokal 100mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft gruba göre lokal 200mg/kg humik asitle uygulanan otojen greft grubunda BS/BV değeri daha yüksek bulunmuştur. Bu sonuca göre doz artırılması BS/BV değerinde olumlu etkisi görülmüştür.
Humik asitin kemik rejenarasyonuna hangi mekanizma veya yollar üzerinden gerçekleştiğinin araştırılması için ileri çalışmalara gereksinim vardır. Bu çalışmadan elde ettiğimiz sonuçlar doğrultusunda humik asitin klinik kullanımı konusunda literatüre katkı sağlayacağı kanaatindeyiz.

Abstract:
The aim of our study is to investigate the effect of local humic acid on the amount of new bone formed in the early period in autogenous bone graft applications. Twenty-four Wistar Albino rats, 12 weeks of age, with an average weight of 230-250 g, were used as subjects. Experimental animals are divided into 4 groups and each group consists of 6 experimental animals. These were determined as the control group, the autogenous graft group only, the autogenous graft group applied with local 100 mg/kg humic acid and the autogenous graft group applied with local 200 mg/kg humic acid. In the parietal bone of the experimental animals, a 5mm diameter bicortical bone fragment of critical size was removed under physiological saline irrigation using an automax drill. The autogenous graft obtained during the formation of the defected area was applied to the relevant experimental groups. The appropriate humic acid concentration was prepared for the rats to be treated with local humic acid. The amount of humic acid determined for the groups to be applied locally was mixed with the autogenous graft. Experimental animals were sacrificed on the 28th day after the procedure. Then, the grafted defect area was evaluated by micro-computed tomography.
The highest values in trabecular thickness (Tb.Th) and bone volume to tissue volume (BV/TV) values were found in the autogenous graft group applied with local 100mg/kg humic acid. Although the application of humic acid had a positive effect on Tb.Th and BV/TV values, increasing the dose had a negative effect.
The highest value in the bone volume (BV) variable was determined only in the autogenous graft group. When the groups were compared in pairs, the difference between the control group and the other groups was statistically significant (p<0.05). According to the results of our study, there was no positive effect on BV value when humic acid was applied.
When the groups were compared in pairs for the bone surface area (BS) variable, a statistically significant difference was found between the control group and the autogenous graft group applied only and the autogenous graft group applied with local 100mg/kg humic acid (p<0.05). At the same time, when the autogenous graft group applied with local 100mg/kg humic acid and the autogenous graft group applied with local 200mg/kg humic acid were compared, the BS value was found to be higher in the autogenous graft group applied with local 100mg/kg humic acid. Increasing the dose also affected the BS value negatively.
A statistically significant difference was found between the control group and the other groups in the ratio of bone surface area to bone volume (BS/BV) (p<0.05). The BS/BV value was found to be higher in the autogenous graft group applied with local 200mg/kg humic acid compared to the autogenous graft group applied with local 100mg/kg humic acid. According to this result, increasing the dose has a positive effect on the BS/BV value.
Further studies are needed to investigate the mechanism or pathways of humic acid in bone regeneration. In line with the results we obtained from this study, we believe that it will contribute to the literature on the clinical use of humic acid.