Oriyentin ve visenin'nin anti kanser ajan olarak akciğer kanser hücre hatlari üzerinde  etkisinin incelenmesi  ve sema 3F, NP-2 ve  VEGF üzerinden araştirilmasi
Orientin and vicenin effects on lung cancer cells and it's relationship with sema 3F , nuerophillin and VEGF
Yazar: HUDA AL CHAIB
Danışman: PROF. DR. SEMA USLU ; DOÇ. DR. GÜLŞEN AKALIN ÇİFTÇİ
Eskişehir Osmangazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Akciğer hastalıkları = Lung diseases ; Akciğer neoplazmları = Lung neoplasms ; Antineoplastik ajanlar = Antineoplastic agents ; Hücre dizisi = Cell line ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Orientin = Orientin ; Vasküler endotel büyüme faktörleri = Vascular endothelial growth factors ; Visenin = Vicenin

Özet:
Orientin (ot) ve vicenin-2'nin (vc) akciğer kanser hücre hatları üzerinde etkisinin incelenmesi ve Sema 3F, NP-2 ve  VEGF üzerinden araştırılması
Amaç: Akciğer kanseri, erkeklerde kansere bağlı ölümlerin önde gelen nedenidir ve kadınlarda meme kanserinden sonra ikinci sıradadır. Akciğer kanseri etiyolojisi, sigaranın neden olduğu esas olarak genetik ve epigenetik hasardır. Son araştırmalara göre, Hint Kutsal Fesleğeninden elde edilen suda çözünür iki flavonoid olan orientin (Ot) ve vicenin-2 (Vc), anti-proliferatif ve anti-anjiyojeniklerin yanı sıra apoptozu indüklemeyi durdurarak antitümör olarak işlev görebilir. Çalışmanın amacı orientin ve vicenin-2'in A549 hücrelerinin büyümesi ve apoptozisi üzerindeki etkisini araştırmak ve Sema 3F, VEGF ve Np-2 üzerindeki etkilerini incelemektir.
 Material metod: Bileşiklerimizin A549 (kanser hücre hattı) ve CCD-19 ve L929'a (normal hücre hatları) karşı sitotoksisitesi MTT testi ile, apoptotik etkileri ise akış sitometri metotları ile belirlenmiş. Bileşiklerimizin A549 hücrelerinde apoptotik ve hücre proliferasyonunda yer alan genlerin ekspresyon seviyeleri üzerindeki etkisi gerçek zamanlı PCR ile çalışılmıştır. 
Sonuçlar: Bu çalışmada orientin ve vicenin-2, A549 hücre hattına karşı antikanser aktivite gösterdi, a) A549 hücrelerinin canlılığını önemli ölçüde azaltmıştır (p <0.001), b) sağlıklı hücreler üzerinde MTT testlerinde düşük toksisite göstermiştir c) akış sitometri deneylerinde hem erken hem de geç apoptozu indüklediği gözlenmiştir. Orientin ile muamele edilmiş hücrelerde apoptozla ilişkili proteinlerin Bax ekspresyonları artarken, antiapoptotik Bcl-2 ekspresyonu azalmıştır, e) Orientin, artan hücre göçü ve metastaz ile ilişkili VEGF etkisini de bloke edebilen tümör baskılayıcı gen SEMA3f'yi yukarı düzenlemiştir. f) Orientin'in akciğer kanserinde aşırı eksprese edilen Nörofilin-2'yi önemli ölçüde aşağı regüle ettiği gösterilmiştir. g) PERK ve ERK genlerini de aşağı regüle ettiği gösterilmiştir. Bu sonuçlar, orientin'in ve  daha az ölçüde vicenin-2 antitümör, özellikle de apoptotik etkilerine in vitro kanıtlar sağlamıştır. Akciğer kanserinde anti-kanser ajan olarak maksimum potansiyeli daha fazla araştırmak için orientin ve vicenin-2 üzerinde daha fazla preklinik denemelere ihtiyaç duyulmaktadır

Abstract:
Investigation of Orientin and Vicenin-2's effect on Lung cancer cell lines as anticancer agents and their relationship with Sema 3F, NP-2 and VEGF
Aim:  Lung cancer is the leading cause of cancer-related deaths in males and second after breast cancer in females. Lung cancer etiology is mainly genetic and epigenetic damage caused by smoking. According to recent studies, orientin (Ot) and vicenin-2 (Vc), two water-soluble flavonoids extracted from Indian Holy Basil, can function as antitumor by stopping inducing apoptosis, as well as anti-proliferative and anti-angiogenic. The aim of the study was to investigate the effect of orientin and vicenin-2  on the growth and apoptosis of A549 cells and to study their effect on Sema 3F, VEGF and Np-2.
 Material methods: The cytotoxicity of our compounds against A549 (cancer cell line) and CCD-19 and L929 (normal cell lines) was determined by MTT assay and their apoptotic effects were determined by flow cytometry methods. Our compunds effect on expression levels of genes involved in apoptotic and cell proliferation on A549 cells was studied with Real time PCR. 
Results: In this study, orientin and vicenim demonstrated anticancer activity against the A549 cell line, a) significantly reduced viability of A549 cells (p <0.001), b) low toxicity in MTT tests on healthy cells c) inducing both late and early apoptosis by flow cytometry experiments has been observed. In oreintin treated cells  Bax expressions of apoptosis-related proteins increased, while antiapoptotic Bcl-2 expression decreased, e) orientin up-regulates tumor suppressor gene Sema 3F, which can also block VEGF effect associated with increased cell migration and metastasis. f) orientin has also been shown to significantly down-regulate nueruphilin- 2, which is overexpressed in lung cancer. g) It has also been shown to down-regulate the PERK and ERK genes. These results provided in vitro evidence of  orientin's and to a lesser ectent vicenin's antitumor particularly apoptotic effects. Further preclinical trials on the orientin and the vicenin-2 are needed to further investigate the maximum potential as an anti-cancer agent in lung cancer.