Fare korpus kavernosum düz kasında hidrojen sülfür'ün gevşetici etki mekanizmasının araştırılması
The investigation of the relaxant mechanism of hydrogen sulfide in isolated corpus cavernosum
Yazar: FATMA AYDINOĞLU
Danışman: PROF. DR. NURAN ÖĞÜLENER
Çukurova Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı / Farmakoloji Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2013
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Corpus cavernosum = Corpus cavernosum ; Fareler = Mice ; Hidrojen sülfür = Hydrogen sulfide ; Kas-düz = Muscle-smooth ; Relaksasyon = Relaxation ; Sistein = Cysteine

Özet:
Çalışmamızda, izole fare korpus kavernosum dokusunda hidrojen sülfür (H2S)?ün gevşetici etki mekanizması araştırıldı. Bu amaçla, fenilefrin ile kastırılmış izole fare korpus kavernosum dokularında L-sistein (10-6-10-3) ve H2S donörü sodyum hidrojen sülfür (NaHS;10-6-10-3) ile gevşeme yanıtları oluşturuldu. L-sistein (10-3 M) ile oluşan gevşeme yanıtları sistation beta sentaz inhibitörü aminooksiasetik asid ile etkilenmezken, sistation gama liyaz enzim inhibitörü D,L-proparjil glisin ile anlamlı olarak azaldı. Endotelyumsuz dokularda, NaHS ile oluşan gevşeme yanıtlarında bir değişiklik gözlenmedi. Nitrik oksid sentaz inhibitörü N?-nitro-L-arjinin (10-4 M), guanilil siklaz inhibitörü ODQ (10-4 M) ve bu inhibitörlerin kombinasyonu NaHS ile oluşan gevşeme yanıtlarını artırdı. Fosfodiesteraz inhibitörleri zaprinast ve sildenafil NaHS gevşeme yanıtlarını azalttı. Adenilil siklaz inhibitörleri NEM (2.5x10-5 M) veya SQ22536 (10-4 M) ile NaHS gevşeme yanıtlarında anlamlı bir azalma gözlendi. NaHS gevşemeleri, yüksek K+ (50mM), voltaja-bağımlı K+ kanal inhibitörü 4-aminopiridin (10-3 M), ATP?ye duyarlı-K+ kanal inhibitörü glibenklamid (10-5 M) ve içeri doğrultucu K+ kanal inhibitörü baryum klorür (10-5 M) varlığında anlamlı bir şekilde azaldı. Ancak, küçük kondüktanslı Ca2+ ile aktive edilen K+ kanal blokörü apamin, orta ve yüksek kondüktanslı Ca2+ ile aktive edilen K+ kanal blokörü karibdotoksin ve apamin + karibdotoksin kombinasyonu, NaHS ile dokularda oluşan gevşeme yanıtlarında bir değişiklik oluşturmadı. L-tipi Ca2+ kanal inhibitörü nifedipin (10-6 M) ve muskarinik reseptör blokörü atropin (10-6 M) NaHS gevşemelerini inhibe etti. Ancak, Na+-K+-ATPaz inhibitörü uvabain (10-4 M)  NaHS gevşemelerini etkilemedi. Sonuç olarak, fare korpus kavernosum dokusunda endojen olarak H2S?in L-sistein?den , sistation gama liyaz enzimi aracılığıyla sentezlendiği, gevşetici etkisini endotelyum?dan bağımsız olarak direkt düz kas üzerinden; i)adenilil siklaz/cAMP, ii) K+ kanalları, iii)  L-tipi voltaja-bağımlı Ca2+ kanalları ve iv) muskarinik reseptörler aracılığıyla gerçekleştirebileceği ve bu etkisinin NO/sGMP tarafından baskılandığı düşünülmektedir.

Abstract:
In the present study, the relaxant mechanism of hydrogen sulfide was investigated in isolated corpus cavernosum tissue., L-cystein- and sodium hydrogen sulfide- (NaHS; H2S donor; 10-6-10-3) induced relaxant responses on the isolated mouse corpus cavernosum tissue which was pre-contracted by phenylephrine. L-cystein-induced relaxations significantly was reduced by D,L-propargylglycine, cystathionine gama lyase  inhibitor whereas not influenced by  aminooxyacetic acid, cystathionine beta synthase inhibitor. The relaxant response to NaHS did not change in endotheium-denuded tissues. Nitric oxide synthase inhibitor N?-nitro-L-arginin (10-4 M), guanylyl cyclase inhibitor ODQ (10-4 M) and combination of these inhibitor increased the relaxant response to NaHS. NaHS-induced relaxant response was inhibited by zaprinast (5x10-6 M) and sildenafil (10-6 M), phosphodiesterase inhibitors. NaHS-induced relaxation was significantly reduced by N-Ethylmalemeid (2.5x10-5 M) and SQ22536 (10-4 M), adenylyl cyclase inhibitors. Also, NaHS-induced relaxation was reduced in the presence of high potassium (50 mM), voltage-gated potassium channel inhibitor 4-aminopyridine, ATP-sensitive potassium channel inhibitor glibenclamide (10-5 M), inward rectifier potassium channel inhibitor barium chloride (10-5 M). However, NaHS-induced relaxation was not influenced by small conductance calcium activated potassium channel inhibitor apamin (10-6 M), intermediate and large conductance calcium activated potassium channel inhibitor charybdotoxin (10-7 M) and combination of apamin and charybdotoxin. L-type calcium channel blocker nifedipine and muscarinic receptor blocker atropine inhibited relaxant response to NaHS. However, NaHS-induced relaxation was not influenced by ouabain (10-4 M). We conclude that, in mouse corpus cavernosum tissue H2S may be produced endogenously from L-cysteine by cystathionine gama lyase enzyme; the relaxant effect of H2S endothelium-independent and directly acts on smooth muscle via; i) adenylyl cyclase/cAMP ii) potassium channels iii) L-type calcium channel and iv) muscarinic receptors and, this relaxant effect may be suppressed by NO/sGMP.