Otozomal resesif geçişli retinitis pigmentosa' nın patolojisinden sorumlu rpe65 geni' nin moleküler analizi
Molecular analysis of rpe65 gene in charge of pathology of autosomal recessive inherited retinitis pigmentosa
Yazar: ÖZGE SARICA YILMAZ
Danışman: YRD. DOÇ. DR. NURAY ALTINTAŞ
Celal Bayar Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2015
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology

Özet:
Kalıtsal retina distrofilerinden biri olan Retinitis pigmentosa (RP), gece körlüğüne,
periferik görme alanının ilerleyen kaybına ve son aşamada merkezi görüşün tamamen
ortadan kalkmasına neden olur. Kliniği ve genetiği oldukça heterojen olan bu hastalık grubu ile ilgili ülkemizde yapılan temel bilimsel çalışmalar yurt dışına kıyasla oldukça azdır. Türk hastalarda kalıtsal göz hastalıklarının moleküler açıdan değerlendirilmesi,
toplumumuza ait genetik bilgilerin elde edilmesi ve veri tabanı oluşturulabilmesi için
oldukça önemlidir.
Retina pigment epitelinde ifade olan, 14 ekzonu bulunan RPE 65 geni mutasyonları otozomal resesif çocukluk çağı retina distrofilerine (%2) ve Leber congenital amaurosis (LCA)' e (%16) neden olur.
Bu çalışmanın amacı, Ege Bölgesi'nde Manisa ve yöresinde, otozomal resesif kalıtıma sahip Retinitis pigmentosa' lı bireylerde, DNA dizi analizi ile, en sık mutasyon rastlanan 4,5,10,11 ve 13. ekzonlarının taranmasıdır.
Çalışmamızda, 2010-2013 yılları arasında, klinik tanısı Manisa Devlet Hastanesi Göz Hastalıkları Kliniği'nde onaylanmış, otozomal resesif geçişli olduğu saptanan 50 RP'lı birey çalışma grubunu oluşturmuştur. RP öyküsü, RP tanısı raporu olmayan, sağlıklı gönüllü 50 birey kontrol grubunu oluşturmuştur. Kandan genomik DNA izolasyon kiti ile izole edilen DNA'lar PZR işlemine alınmış, daha sonra ABI Prism Genetik Analizör 310 cihazı ile dizi analizi yapılmıştır.
Çalışmamızın sonucunda 1 hasta bireyde (% 2) RPE65 geninin Ekzon 4'ünde G>A
R91Q heterozigot mutasyonu, 7 hasta bireyde (% 14) RPE65 geninin Ekzon 10'unda G>A
E352E polimorfizmi saptanmıştır. Sonuçlarımız Ege Bölgesi Manisa ve yöresinde, bu konuda araştırılmış ilk kaynaktır.

Abstract:
Retinitis pigmentosa which is on of the inherited retinal dystrophies leads to night blindness, progressive loss of peripheral visual field and the complete elimination of central vision at the last stage. Performed fundamental scientific studies in our country are very low than abroad with this disease grup that is clinical and genetically highly heterogeneous. It's very important to evaluate hereditery eye diseases in Turkish patients
from molecular aspect, to obtain the genetic informations of our society and in order to
establish database.
RPE 65 gene which is expressed in the retinal pigment epithelium containing 14 exons cause to autosomal recessive childhood retinal dystrophy (%2) and Leber congenital amaurosis (%16).
The aim of this study, screening the 4,5,10,11 and 13th exons that are commonly mutations seen exons at individuals who have autosomal recessive retinitis pigmentosa by
DNA sequencing analysis at Manisa province in the Aegean region.
In our study, 50 individuals who had autosomal recessive inheritance RP and whose clinical diagnosis were approved in Manisa State Hospital Eye Clinic were consisted the study group between 2010-2013 years. 50 healthy volunteer individuals who had without RP anamnesis and RP diagnostic report were consisted the control group. DNAs which
were isolated with DNA isolation kit from blood samples, were amplified with PCR after then were sequenced with ABI Prism 310 Genetic Analyzer instrument.
As a result of our study, G>A R91Q heterozygote mutation in Exon 4 of RPE65 gene in
1 individual patient (% 2), G>A E352E polymorphism in Exon 10 of RPE65 gene in 7 individual patients (% 14) were detected. Our results are firstly source which were obtained from Manisa province in the Aegean region.