Kı̇myasal şaperonların in vitro ortamda sıçan pankreas adacık hücre canlılığına etkisi
The effect of chemical chaperones on the viability of rat pancreatic islet cells in vitro medium
Yazar: MÜRSEL ÇALIŞKAN
Danışman: PROF. DR. AHMET YAŞAR
Gazi Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Pankreas = Pancreas

Özet:
Hücresel şaperonlar, protein sentezi sonrası hücre içinde sentezlenen bu proteinlerin görev- lerini yerine getirebilmesi için kritik bir öneme sahip üç boyutlu şekillerini almalarını sağla- yan biyolojik moleküllerdir. Bu çalışmanın amacı, kimyasal şaperonlardan Tauroursodeok- sikolik Asit (TUDCA) ve 4-Fenilbütirat (4-PBA) biyolojik şaperonların çalışma mekaniz- masına benzer bir şekilde sıçan pankreas adacık hücre canlılığı üzerindeki etkilerini araştır- maktır. Sıçanlardan izole edilen adacık hücreleri 250-1500 μM aralığındaki belli derişimde TUDCA ve 4-PBA kimyasal maddeleri ile kültüre edildi. Sonra, adacık hücrelerinin canlılığı floresein diasetat (FDA) ve propidyum iyodür (PI) boyaları kullanılarak floresan mikros- kobu ile değerlendirildi. 24. Saat ve 48. saatlerde 1mM'lık derişimdeki TUDCA kimyasal maddesi eklenen hücreler ile 0,5mM'lık derişimdeki 4-PBA kimyasal maddesi eklenen hüc- reler, kontrol grubundaki hücreler ile kıyas edildiğinde canlılık yüzdeleri istatiksel açıdan anlamlı derecede yüksek bulundu (P<0,05). Canlılık oranındaki bu artışın, hücre kültürüne eklenen yukarıda belirtilen derişimdeki kimyasal şaperonların, hücrelerdeki endoplazmik re- tikulum (ER) stresini azaltarak hücre ölüm oranında düşüşe neden olmasından kaynaklandığı gözlenmiştir. Dünyada, tip1 diyabetli hastalara alternatif bir tedavi seçeneği olarak uygula- nan adacık hücre naklinde, hücresel düzeyde bu kimyasallar ile yapılacak bir tedavi edici uygulamanın, nakil öncesi dönemde nakledilecek adacık hücrelerinin canlılığında ve uzun vadeli fonksiyonelliğinde iyileştirme sağlayabileceği öngörülmektedir.

Abstract:
Chaperones are biological molecules, which give the proteins their three-dimensional struc- tures in order to perform their duties with in the cell after the synthesis of those proteins. The purpose of this study was to investigate the effects of Tauroursodeoxycholicacid (TUDCA) and 4- Phenylbutyrate (4-PBA) chemical chaperones on the rat pancreatic islet cell viability. Islet cells isolated from rats were cultured with in a certain concentration of range from 250 to 1500 μM TUDCA and 4-PBA chemicals. Then, the viability of islet cells was determined by the fluorescence microscopy using fluorescein diacetate (FDA) and propidium iodure (PI) dyes. 1 mM concentration of TUDCA and 0,5 mM concentration of 4-PBA chemicals were added to isolated islets, and after 24th and 48th hours of cultivation, the viability of those cells was evaluated. When we compared the chaperone added group with the control group, chaperone added cells were significantly higher percentage of cell viability than the control group in statistical terms (P <0.05). The viability of islet cells was increased due to reduced endoplasmic reticulum (ER) stress by adding mentioned chemical chaperones at defined concentrations. In islet cell transplantation, as an alternative treatment for type 1 diabetes, at cell level a therapeutic application with those chemical chaperones for isolated islet cells before transplantation might have positive effect on the viability and the functionality of those islet cells in the post-transplantation period.