Kronik myelojenik lösemili hastalarda wt1 gen ekspresyonu ve genetik değişikliklerin araştırılması
Wt1 gene expression and genetic alternations in patients with chronic myelogenous leukemia
Yazar: EVA SHYQYRİU
Danışman: PROF.DR. SENİHA HACIHANEFİOĞLU
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2006
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine ; Onkoloji = Oncology ; Tıbbi Biyoloji = Medical Biology

Özet:
Kronik myeloid lösemi (KML) günümüzde en çok arastırılan kanserlerdenbiridir. Wilms' tümör geni 1 (WT1) mezotelyal dokularda ve ürogenital organlarıngelisiminde rol oynayan, çinko-parmak yapısına sahip bir transkripsiyon faktörüdür.mmatür hematopoetik öncül hücrelerde yüksek seviyede ifade edilmesine vefarklılasma sırasında ekspresyonunda görülen azalmaya dayanarak WT1 genininhematopoezde etkili olabilecegi düsünülmüstür. Akut lösemilerde, yüksek seviyedeifade edilmesi ve somatik mutasyonlarının görülmesi nedeniyle WT1 geninin lösemigelisiminde etkili olabilecegi öne sürülmüstür. WT1 gen ekspresyonunun KMLprognozu ile iliskisi halen arastırılmaktadır. Bu çalısmada 57 KML hastası ve 50saglıklı bireyden olusan gruplarda WT1 gen ekspresyonu nested RT-PCR yöntemi iledegerlendirilmistir. Kontrol geni olarak GAPDH geni kullanılmıstır. KML hastalarının%85,9'unda (49/57) WT1 ekspresyonu pozitif bulunmustur. WT1 ekspresyonu saglıklıbireylerin %38'inde (19/50) pozitif bulunmustur. WT1 geninin KML hastaları ilekontrol grubunda tespit edilen ekspresyon degerleri arasında istatistiksel olarak anlamlıfark gözlenmistir (p < 0,001).KML hastalarının %95'inde görülen t(9;22)(q34;q11) Philadelphiakromozomunun varlıgı BCR ve ABL genlerinin füzyonuna neden olmaktadır. BCRABLfüzyonunun periferik kan yaymasında flüoresan in situ hibridizasyon (PK-FISH)yöntemi ile degerlendirilmesi hastaların takibinin daha sık ve pratik bir sekildeyapılması için yeni bir yaklasım olabilir. Bu çalısmada degisik klinik fazlarda bulunan35 KML hastasının periferik kan yaymasından BCR-ABL füzyonu degerlendirilmistir.Hastalıgın klinik fazı ile PK-FISH sonuçları arasında anlamlı iliski bulunmustur (p <0,001). FISH ile yapılan inceleme sonucunda belirlenen Philadelphia yüzdesinin WT1ekspresyonu ile karsılastırılması istatistiksel olarak anlamlı bulunmustur (P = 0,0488).Sonuç olarak, çalısmamızda WT1 gen ekspresyonunun lösemide ve daha az ölçüde denormal hücrelerde proliferasyonun moleküler belirteci olabilecegi öne sürülmüstür.

Abstract:
Chronic myelogenuos leukemia (CML) is probably the most extensivelystudied human malignancy. The Wilms? tumor gene 1 (WT1) is a zinc-fingertranscription factor involved in the development of urogenital organs and mesothelialtissues. Based on the fact that WT1 is highly expressed in immature hematopoieticprogenitor cells, followed by a rapid downregulation during differentiation, a role ofWT1 in hematopoiesis was suggested. Overexpression of WT1 and presence of somaticmutations are frequently found in acute leukemia, indicating that WT1 may be involvedin the pathogenesis of leukemia. In CML patients, the WT1 expression pattern and itscorrelation with disease progression have not been well documented. Herein WT1expression was assessed by nested RT-PCR technique relative to the control geneGAPDH in 57 CML patients and 50 healthy volunteers. WT1 expression was detectedin 85,9% (49/57) of the CML patients. WT1 expression was detectable in 38% (19/50)of volunteers. The difference was highly significant (p < 0,001).The Philadelphia translocation t(9;22)(q34;q11) is present in 95% of KMLpatients and results in the fusion of the BCR and ABL genes. Evaluation of the BCRABLfusion using interphase fluorescence in situ hybridization on peripheral bloodsmears (PB-FISH) might be another approach allowing more frequent and reliablefollow-up of the patients. In this study the BCR-ABL fusion was evaluated in peripheralblood smears of 35 CML patients at different clinical phases. A significant correlationwas found between PB-FISH results and the clinical phase (p < 0,001). Also the ratio ofPhiladelphia chromosome, calculated by FISH analysis correlated with WT1 expression(P = 0,0488). In conclusion, our results support the view that WT1 gene is a surrogatemarker of proliferation in CML and to a lesser degree in normal hematopoiesis.