ALS hastalarının regülatör T lenfositlerinde otofaji düzensizliğinin araştırılması
Investigation of autophagy irregularity in regulator T lymphocytes of ALS patients
Yazar: ASEF AZAD
Danışman: DOÇ. DR. AYŞE ESRA MANGUOĞLU
Akdeniz Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı / Tıbbi Genetik Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2024
Konu: Biyoloji = Biology ; Genetik = Genetics ; Moleküler Tıp = Molecular Medicine

Özet:
ÖZET
Amaç: Nöroinflamasyon, amyotrofik lateral skleroz (ALS) hastalığının ayırt edici özelliğidir. Regülatör T hücreleri (Treg'ler), bağışıklık toleransı ve nöroinflamasyonun önlenmesinde önemli rol oynamaktadır. ALS hastalarında regülatör Thücresi ve FoxP3 proteininin ekspresyonunda önemli bir azalmanın gözlendiği gösterilmiştir. ALS'de FoxP3+ regülatör Thücresi kaybının ana nedeni bilinmemektedir. Bu çalışmada, ALS'de FoxP3+ regülatör T hücresinde otofaji düzensizliğinin rolü araştırıldı.
Yöntem: Çalışmaya 23 ALS hastası ve 24 sağlıklı kontrol dahil edildi. Periferik kandan mononükleer hücreler (MNC'ler) elde edildi, ardından regülatör T hücreleri izole edildi. İzole edilmiş regülatör T hücreleri, FoxP3 ve LC3 antikorları ile boyandı ve hastalarda ve kontrollerde FoxP3+ regülatör T hücresindeki otofaji seviyelerini belirlemek için LC3 belirteci, akış sitometrisi ile incelendi.
Bulgular: FoxP3+ LC3+ hücrelerinin ortalaması hastalarda ve kontrollerde sırasıyla 0,47 ve 0,45 idi. FoxP3+ LC3- hücrelerinin ortalaması hastalarda 0,15 ve kontrollerde 0,20 idi, p = 0,030 (p<0,05). Hastalarda ALSFRS-R düşüş oranı ile otofaji düzeyi arasında anlamlı bir ilişki saptanmadı. Ayrıca hızlı ilerleyen ALS hastaları ile yavaş ilerleyen ALS hastaları arasında FoxP3+ regülatör T hücresindeki otofaji düzeyinde anlamlı bir fark bulunmadı.
Sonuç: ALS hastalarında FoxP3+ regülatör T hücresindeki aşırı otofaji seviyeleri, artan hücre ölümünün bir açıklaması olabilir ve nöroinflamasyonun kötüleşmesine ve hastalık başlangıcına neden olabilir. Ancak hastalığın ilerlemesi ile FoxP3+ regülatör T hücresindeki otofaji düzeyi ilişkili bulunmadı.
Anahtar Kelimeler: ALS, Regülatör T hücreleri, Otofaji, Nöroinflamasyon

Abstract:
ABSTRACT
Objective: Neuroinflammation is a hallmark of amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Regulatory T cells (Tregs) are essential in immune tolerance and prevention of neuroinflammation. It has been shown that a significant decrease in regulatory T cell and FoxP3 protein expression is observed in ALS patients. The primary cause of FoxP3+ regulatory T cell loss in ALS is unknown. In this study, the role of autophagy dysregulation in FoxP3+ regulatory T cells in ALS was investigated.
Method: A total of 23 ALS patients and 24 healthy controls were included in the study. Mononuclear cells (MNCs) were obtained from peripheral blood, then regulatory T cells were isolated. Isolated regulatory T cells were stained with FoxP3 and LC3 antibodies and analyzed by flow cytometry to determine autophagy levels in FoxP3+ regulatory T cells in patients and controls.
Results: The mean of FoxP3+ LC3+ cells were 0.47 and 0.45 in patients and controls, respectively. The mean of FoxP3+ LC3- cells was 0.15 in patients and 0.20 in controls, p = 0.030 (p<0.05). No significant association between ALSFRS-R decay rate and autophagy level in patients was found. Additionally, there was no significant difference between the autophagy levels in FoxP3+ regulatory T cells in patients with rapidly progressing ALS and in patients with slowly progresing ALS.
Conclusion: Excessive levels of the autophagy in FoxP3+regulatory T cells in ALS patients could potentially be an explanation for increased cell death, worsening of neuroinflammation and could potentially have been a contributing factor to the initiation of the disease. However, disease progression cannot be attributed to the level of autophagy in FoxP3+ regulatory T cells.

Key words: ALS, Regulatory T Cells, Autophagy, Neuroinflamation