Tigesiklin etken maddesinin HPLc ile  farmasötik preparatlarda  miktar tayini
Quantification of tigecycline active ingredient in pharmaceutical preparations by HPLC
Yazar: VAHYETTİN ÇELİK
Danışman: PROF. DR. ALPTUĞ ATİLA
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2024
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology ; Farmasötik Toksikoloji = Pharmaceutical Toxicology ; Kimya = Chemistry

Özet:
Amaç: Bu çalışmada tigesiklin etken maddesinin farmasötik preparatlarda miktar tayini için HPLC yöntemi geliştirildi. Geliştirilen yönten validasyon parametrelerine göre valide edildikden sonra farmasötik preparatlarda tigesiklinin miktar tayini yapıldı.
Materyal ve Metot: Bu çalışmada geliştirilen HPLC yönteminde C18 kolon (Kinetex Core-Shell ;250 x 4.6 mm, 5 μm) kolonu, acetonitril-su (0.01 M Asetik asit)(60:40, V:V)'dan oluşan hareketli faz, 0.6 mL /dk akış hızı, 247 nm dalga boyu ve 20 μL enjeksiyon hacminden oluşan çalışma parametreleri kullanıldı. Yönteminin 0.5-20 μg/mL derişim aralığında doğrusal olduğu belirlendi. Stok çözeltiden 0.5, 1, 3 5, 10, 15 ve 20 μg/mL derişimlerinde bir seri standart tigesiklin çözeltisi hazırlandı ve HPLC'de kromatogramları alındı. 
Bulgular: Her bir çözeltinin derişimine karşı tigesiklin pik alanını grafiğe geçirilerek kalibrasyon eğrisi elde edildi. Kalibrasyon eğrisinin regrasyon analizinden, regrasyon doğrusunun denklemi y = 82120x + 47673; tigesiklin etkin maddesi için korelasyon katsayısı (r) 0,9996 olarak belirlendi. Yöntemin LOD değeri 0.2 ve LOQ değeri 0.5 olarak belirlenmiştir. Gün içi doğruluk ve kesinlik çalışmalarında %BH ve %BSS sırasıyla % 6.5 ve %2.91 olduğu belirlendi. Geçerlilik testleri yapılan yöntemin tigesiklin içeren Tygpol kapsül uygulaması ile geri kazanım değerleri %100.25 olduğu bulunmuştur. 
Sonuç: HPLC ile gerçekleştirilen çalışmalarda tigesiklin etkin maddesinin farmasötik preparatlarda miktar tayini başarılı bir şekilde yapıldı ve bu yöntemler geliştirilip geçerlilik testleri yapıldı. Hassas, duyarlı, seçici, doğru ve kesin olduğu validasyon çalışmalarıyla gösterildiğinden dolayı yöntemlerin farmasötik preparatlarda kalite kontrol amaçlı çalışmalarda başarıyla uygulanabilir olduğu sonucuna varıldı. 
Anahtar Kelimeler: HPLC, tigesiklin, validasyon

Abstract:
Aim: In this study, an HPLC method was developed for the determination of tigecycline active ingredient in pharmaceutical preparations. After the developed method was validated according to the validation parameters, tigecycline was determined in pharmaceutical preparations.
Material and Method: In the HPLC method developed in this study, the working parameters of C18 column (Kinetex Core-Shell; 250 x 4.6 mm, 5 μm), mobile phase consisting of acetonitrile-water (0.01 M Acetic acid) (60:40, V:V), 0.6 mL / min flow rate, 247 nm wavelength and 20 μL injection volume were used. It was determined that the method was linear in the concentration range of 0.5-20 μg/mL. A series of standard tigecycline solutions were prepared from the stock solution at concentrations of 0.5, 1, 3 5, 10, 15 and 20 μg/mL and their chromatograms were obtained on HPLC.
Results: Calibration curve was obtained by plotting the tigecycline peak area against the concentration of each solution. From the regression analysis of the calibration curve, the equation of the regression line was determined as y = 82120x + 47673; the correlation coefficient (r) for the active substance tigecycline was determined as 0.9996. The LOD value of the method was determined as 0.2 and the LOQ value as 0.5. In the intraday accuracy and precision studies, %BH and %BSS were determined as 6.5% and 2.91%, respectively. The method, whose validity tests were performed, was found to have recovery values of 100.25% with the application of Tygpol capsule containing tigecycline.
Conclusion: In studies conducted with HPLC, the quantification of tigecycline active ingredient in pharmaceutical preparations was successfully performed and these methods were developed and their validity tests were performed. Since validation studies showed that the methods were sensitive, sensitive, selective, accurate and precise, it was concluded that the methods could be successfully applied in quality control studies in pharmaceutical preparations.
Keywords: HPLC, tigecycline, validation