Türkiye'de yetişen ceviz ağaçlarındaki juglon ekstraksiyonu ve kromatografik yöntemle analizi
Extraction of juglone from walnut trees grown in turkey and the analysis of juglone by chromatographic method
Yazar: MERVE YURTCU
Danışman: PROF. DR. GÜLER YALÇIN
Marmara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Eczacılık Bölümü / Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2014
Konu: Kimya = Chemistry
Dizin: Bitki özütü = Plant extract ; Ceviz = Walnut ; Ceviz ağacı = Walnut tree ; Juglon = Juglone ; Kromatografi-yüksek basınçlı-sıvı = Chromatography-high pressure-liquid ; Türkiye = Turkey

Özet:
Bu çalışmada Türkiye'de yetişen ceviz ağaçlarının bazı türlerinde bulunan juglon, hızlandırılmış solvent ekstraksiyonu (ASE) kullanılarak ekstrakte edilmiş, miktarları ters fazlı-yüksek performanslı sıvı kromatografisi ve diyod dizi dedektör (HPLC-DAD) yardımıyla kalitatif ve kantitatif olarak tayin edilmiştir.
Çalışmada hareketli faz olarak % 0.5 asetik asit içeren su çözeltisi ve % 0.1 asetik asit içeren metanol kullanılıp izokratik elüsyon yapılmıştır. Kromatografik koşullar; Phenomenex Luna C8, 150 mm × 4.6 mm, 5 µm özellikte kolon, bant genişliği 4 nm, dalga boyu (λ) 252.4 nm ve juglonun alıkonma zamanı 6.1 dak olarak belirlenmiştir. 
Hızlandırılmış solvent ekstraksiyonunda çözücü olarak metanol (%100) kullanılmıştır. Cihazdaki koşullar sıcaklık 25 oC, statik zaman 10 dakika, temizleme hacmi % 60, yıkama zamanı 90 saniye, statik devir 3 olarak ayarlanmıştır.
Bu çalışmalar sonucunda Türkiye'de yetişen ceviz ağacı türleri Şebin (Örnek 1), Yalova 1 (Örnek 5), Yalova 2 (Örnek 3), Yalova 3 (Örnek 6), 198/110 (Örnek 2) yapraklarında bulunan juglon hızlandırılmış çözücü ektraksiyonu (ASE) yöntemi ile ekstrakte edilerek, ters fazlı-yüksek basınçlı sıvı kromatografisi (HPLC) ile tayin edilmiştir. Bu türlerde 1 g yaş yaprakta 0.134- 1.230 mg aralığında juglon bulunmuştur. ASE yöntemi ile geri kazanım değeri ortalama % 93 (RSD = 1.35) olarak belirlenmiştir. Hızlı ve etkin bir ekstraksiyon yöntemi olan ASE'nin önceki çalışmalardan farklı olarak, juglonu bozundurmadığı kanıtlanmıştır.
Anahtar Sözcükler: 	Hızlandırılmış Çözücü Ekstraksiyonu (ASE), HPLC, Ceviz Yaprağı, Juglon, Kalitatif Analiz, Kantitatif Analiz

Abstract:
The juglone in the leaves of  some walnut species grown in Turkey has been extracted, identified and assayed by Reverse Phase-High Performance Liquid Chromatography (HPLC-DAD) in this study.  

The mobile phase is % 0.5 Asetic Acid in ultra distiled water (A) and % 0.1 Asetic Acid in methanole (B) with volume percentage of 45:55 (A:B) and isocratic elution has been applied. Chromatographic conditions are determined as Phenomenex Luna C8,  150 mm  ×  4.6 mm, 5 µm column, bandwidhts 4 nm, λ=252.4 nm, the retention time of Juglon is 6.1 min. 

Methanole has been used as solution in Accelerated Solvent Extraction (ASE). The conditions of ASE; temperature 25oC, static duration 10 minutes, purge volume % 60, washing duration 90 seconds, static cycle 3.
The juglone in the leaves of the walnut species of Şebin (Sample 1), Yalova 1 (Sample 5), Yalova 2 (Sample 3), Yalova 3 (Sample 6), 198/110 (Sample 2) grown in Turkey has been extracted, identified and assayed by RP-HPLC-DAD. Juglone  founded between 0.134- 1.230 mg/1 g wet leaves. Recovery was found % 93 (RSD = 1.35). It was proved that the juglone is not degraded during extraction with ASE which is an an efficient and fast method of isolation. 
Key Words: Accelerated Solvent Extraction (ASE), HPLC, Walnut Leaf, Juglone, Qualitative Analysis, Quantitative Analysis