Endemik Centaurea nerimaniae ekstresinin kanser hücre soylarında sitotoksik ve apoptotik etkileri
The cytotoxic and apoptotic effects of the endemic Centaurea nerimaniae plant extract on cancer cell cines
Yazar: NİRVA SERA KAYACAN
Danışman: PROF. DR. MELEK ÖZTÜRK SEZGİN
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2015
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Adenokarsinom = Adenocarcinoma ; Antineoplastik ajanlar = Antineoplastic agents ; Apoptozis = Apoptosis ; Bitki özütü = Plant extract ; Centaurea nerimaniae = Centaurea nerimaniae ; Meme neoplazmları = Breast neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Sitotoksisite = Cytotoxicity ; Tıbbi bitkiler = Plants-medicinal ; Uterin servikal neoplazmlar = Uterine cervical neoplasms

Özet:
Bu çalışmada, Türkiye'ye endemik bir bitki türü olan Centaurea nerimaniae'nin metanol özütünün HeLa (serviks adenokarsinomu) ve MDA-MB-231 (meme adenokarsinomu) hücreleri üzerindeki sitotoksik ve apoptotik etkilerinin araştırılması amaçlandı. Bitki özütünden hazırlanan 8 farklı konsantrasyonun hücre indeksi üzerine etkileri ve etken dozların belirlenmesi xCELLigence sistemi ile araştırıldı. Etken sitotoksik dozların apoptotik hücre ölümü üzerindeki etkilerinin incelenmesi için TUNEL yöntemi ve DAPI nukleus immünfloresan boyama yöntemi, ayrıca aktif kaspaz-3 tayini için de immünhistokimya yöntemi kullanıldı. C. nerimaniae bitki özütünün HeLa (1,42 mg/ml) ve MDA-MB-231 (3,67 mg/ml) hücrelerinde etken doz ve zamana bağlı olarak önemli derecede etkili olduğu gözlemlendi (p<0.001). C. nerimaniae özütünün HeLa ve MDA-MB-231 hücrelerine özgü etken dozlarının her iki hücre grubunda da apoptotik indeksin özüt uygulanmayan kontrol gruplarına göre belirgin olarak arttığı (p<0.0001) saptandı. HeLa ve MDA-MB-231 soylarında aktif kaspaz-3 immünpozitif hücre sayısının kontrol gruplarıyla karşılaştırıldığında anlamlı olarak arttığı tespit edildi (sırasıyla, p<0.0001, p<0.001). C. nerimaniae özütünün HeLa ve MDA-MB-231 hücrelerindeki sitotoksik etkisinin, apoptotik hücre ölümünü uyarmada etkin bir rolü olduğu belirlendi. C. nerimaniae'nin kanser tedavisinde yeni bir doğal kaynak olarak dikkate alınabileceği düşünüldü.

Abstract:
The aim of this study, to investigate the cytotoxic and apoptotic effects of the methanol extract of Centaurea nerimaniae, which is an endemic species of Turkey, on HeLa (cervical adenocarcinoma) and MDA-MB-231 (breast adenocarcinoma) cells. The cells were treated with 8 different concentrations of C. nerimaniae over different time periods. The cytotoxic effects of the plant extract on cells were measured by using xCELLigence system. TUNEL assay and DAPI immunoflourescence staining of nuclei were used to examine plant extract effects on the apoptotic cell death with the effective cytotoxic doses, also immunohistochemistry method was used for the determination of active caspase-3. The results showed that the effective doses of C. nerimaniae could significantly inhibit the growth of HeLa (1,42 mg/ml) and MDA-MB-231 (3,67 mg/ml) cells in a dose and time dependent manner (p<0.001). The apoptotic cell index on HeLa and MDA-MB-231 cells which were treated with effective doses of C. nerimaniae plant extract, were significantly increased compared with control groups (p<0.0001). Immunohistochemistry results showed that after treatment of effective doses, caspase-3 immune positive cells were increased in extract treatment groups of HeLa and MDA-MB-231 cells with significant differences compared to control group (p<0.0001, p<0.001, respectively). As a result, the treatment of the effective doses of C. nerimaniae extract induces apoptotic cell death on HeLa and MDA-MB-231 cells and it was considered that can be a novel promising candidate for the treatment of cancer.