Allojenik kemik iliği nakli yapılan hastalarda kimerizm, (MDSC) ve sağkalım ile miyeloid kökenli baskılayıcı hücreler (mdsc) arasındaki ilişkinin araştırılması
Investigation of relationship between chimerism, gvhd and survival and myeloid derived suppressor cells (MDSC) in patients with allogenic bone marrow transplantation
Yazar: BURÇİN ERDEM KINAŞ
Danışman: PROF. DR. MUSTAFA ÇETİN
Erciyes Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Kök Hücre Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Genetik = Genetics
Dizin: Greft versus host hastalığı = Graft versus host disease ; Kemik iliği = Bone marrow ; Kemik iliği nakli = Bone marrow transplantation ; Kimerizm = Chimerism ; Sağkalım = Survival

Özet:
Miyeloid kökenli baskılayıcı hücreler (MDSC), myeloid hücrelerin tam olarak tanımlanmış bir alt grubu olmaktan ziyade matür hücrelere farklılaşmaları engellenmiş aktive immatür hücrelerin oluşturduğu, monosit ve granülosit alt kümeleri içeren heterojen bir topluluktur. Miyeloid türevli baskılayıcı hücreler (MDSC), efektör T hücresi tepkilerini baskılayabilen ve düzenleyici T hücrelerinin (Treg) gelişimini teşvik edebilen düzenleyici hücre popülasyonlarıdır.
Nakil sonrası miyeloid hücrelerin hızlı genişlemesi göz önüne alındığında, doğuştan gelen bağışıklık sisteminin bu üyelerinin, nakil sonrası erken bağışıklık ortamına önemli katkıları olabileceği düşünülmüştür. Bu çalışmada, Allojenik kemik iliği nakli yapılan hastalarda donör kaynaklı kök hücre yapılanma (kimerizm) oranı, GVHD ve sağkalım ile miyeloid kökenli baskılayıcı hücreleri arasındaki ilişkinin araştırılması amaçlanmıştır.
Çalışmaya Erciyes Üniversitesi Tıp Fakültesi, Hematoloji Bilim Dalı  Kemik İliği Nakil Ünitesinde Aralık 2017- Eylül 2018 tarihleri arasında Allojenik kemik iliği nakli (AKHN) yapılan 15 hasta dahil edilmiştir. Çalışmamızda 15 hastanın engrafman (e) sonrası e0., e30., e60., ve e90. günlerinde alınan kanlarından akım sitometri cihazı ile CD11b, HLA-DR, CD14, CD66b, CD15, CD33, CD45 antikorları kullanılarak PMN-MDSC ve M-MDSC hücrelerin  analizi fenotipik olarak yapılmıştır.
Çalışmamızda 100 günlük sağkalımı tamamlayan hastalarda, M-MDSC değişkeninde engrafmanın e30. gün ölçümünün ortanca değeri engrafmanın gerçekleştiği e0. gün ölçümünün ortanca değerinden anlamlı düzeyde yüksek olduğu gözlenmiştir (p<0.005). Aynı zamanda Lenfosit değişkeninde e60. gün ölçümünün ortanca değerinin e0. gün ölçümünün ortanca değerinden anlamlı düzeyde yüksek olduğu gözlenmiştir. Ayrıca M-MDSC ve lenfosit parametresinde GVHD gelişmeyen grupta e0.gün ölçümünün ortanca değerinin, GVHD gelişen grupta e0.gün ölçümünün ortanca değerinden anlamlı düzeyde yüksek olduğu gözlenmiştir. Kimerizm sonuçlarına göre değişkenler arasında fark saptanmamıştır. Örneklem büyüklüğünün yetersizliğine bağlı olarak sağ kalım değişkenine göre istatistiki olarak anlamlı bir fark bulunmamasına karşılık, yapılan tanımlayıcı istatistik tablosuna göre sağ kalım grubunda M-MDSC ve G-MDSC değerlerinin 0.,30. ve 60. günlerde artma eğilimde olduğu, ölen grupta ise 30. günden sonra belirgin azalma olduğu gözlenmiştir.
Çalışmamıza göre özellikle  nakil sonrası  e0., e30. ve e60. Günler arasında daha sık aralıklarla bakılmak üzere  MDSC hücreleri analizinin başlangıçta  fenotipik olmak üzere, baskılayıcı aktivitelerine  ve biyokimyasal  analizlerine göre yapılması önerilmektedir. Sonuç olarak MDSC hücrelerinin, nakil sonrası düzenleyici hücre populasyonuna katkıları ve özellikle GVHD gelişimini öngörebildiği zamanın ve zamanlar arası oranların belirlenebilmesi için daha büyük örneklem grubunda çalışılması gerekmektedir.

Anahtar Kelimeler: Allojenik kemik iliği nakli, Kimerizm, Graft Versus Host Hastalığı (GVHD), Miyeloid kökenli baskılayıcı hücreler (MDSC)

Abstract:
Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) are a heterogeneous collection of monocyte and granulocyte subsets of activated immature cells that are prevented from differentiating into mature cells rather than a fully defined subset of myeloid cells. Myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) are regulatory cell populations capable of suppressing effector T cell responses and promoting the development of regulatory T cells (Tregs).
Taken into account the rapid expansion of myeloid cells after transplantation, it was thought that these members of the innate immune system could have important contributions to the early immune setting after transplantation. The aim of this study was to investigate the relationship between donor stem cell structure (chimerism) rate, GVHD and myeloid suppressor cells with survival in patients with allogeneic bone marrow transplantation.
Fifteen patients who had allogeneic bone marrow transplantation  between December 2017 and September 2018 in the Department of Hematology  Bone Marrow Transplant Unit of Erciyes University Faculty of Medicine were included in the study. In our study, taken 15 patients' blood in the days of e0., e30., e60., and e90 after engrafment (e) by using the flow cytometric device ,PMN-MDSC and M-MDSC cells were analyzed phenotypically using CD11b, HLA-DR, CD14, CD66b, CD15, CD33, CD45 antibodies.
In our study, in patients completing a 100-day survival, in M-MDSC variable engraftment e30. the median value of the day measurement e0 at which the engraftment day measurement was observed to be significantly higher than the median value.(p<0.05) At the same time in the lymphocyte variable e60. the median value of the day measurement e0. day measurement was significantly higher than the median value. In addition, in the M-MDSC and lymphocyte parameters, the median value of day e0 in the group without GVHD was significantly higher than the median value of day e0 in the group with GVHD. There was no difference between the variables according to kimerizm results. Although there was no statistically significant difference for survival variable depending on the sample size, according to the descriptive statistics table, M-MDSC and G-MDSC values of survival group tend to increase 0.,30. and on the 60th day, there was a significant decrease in the group that died after the 30th day.
According to our study, it is suggested that MDSC cells analysis should be performed at baseline phenotypic, suppressive activities and biochemical analyzes, especially at the more frequent intervals between days 0, 30 and 60 after transplantation. In conclusion, in order to determine the contribution of MDSC cells to the post-transplant regulatory cell population and the time and intertemporal rates in which it can estimate the development of GVHD, it should be studied in a larger sample group.

Keywords: Allogenic bone marrow, Graft versus host disease (GVHD), Myeloid derived suppressor cell (MDSC)