Sıçan mezenterik arterinde Rho-kinaz enzim ekspresyonu ve damar yatağı perfüzyon basıncının kontrolüne Rho/Rho-kinaz yolağının katkısı
Expression of Rho-kinase and its contribution to the control perfusion pressure in the isolated perfused rat mesenteric vascular bed
Yazar: ONUR ARIKAN
Danışman: DOÇ.DR. KANSU BÜYÜKAFŞAR
Mersin Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2004
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology

Özet:
ÖZET Sıçan Mezenterik Arterinde Rho-kinaz Enzim Ekspresyonu ve Damar Yatağı Perfüzyon Basıncının Kontrolünde Rho/Rho-kinaz Yoiağmın Katkısı Rho-kinaz enziminin sıçan mezenterik arterindeki ekspresyonu ve onun inhibiîörleri olan Y-27632 ve fasudilin, a adrenerjik reseptör agonisti olan fenilefrin ile ETa, ve ETr reseptör agonisti olan endotelin-1 (ET-1) ile arttırılmış perfüzyon basıncı üzerindeki etkileri araştırıldı. Servikal dislokasyonla öldürülen sıçanların karınları süratle açıldı, superior mezenterik arteri hızla kanüle edilip izole edildikten sonra sıcaklığı 37 "C'de sabit tutulmuş bir hazne içine yerleştirildi ve bir perfüzyon pompası aracılığıyla sabit hızda (5-5.5 ml/dk) perfüze edildi. Damar yatağı perfüzyon basıncı fenilefrinle veya ET-1 ile artırıldı. ET-1, fenilefrine göre daha düşük konsantrasyonlarda vazokonstriksiyon oluşturdu. Y-27632 ve fasudil, perfüzyon basıncında konsantrasyon bağımlı bir azalma meydana getirdi. Eenilefrinle arttırılan perfüzyon basıncı üzerinde bu inhibitor ajanlar daha belirgin bir vazodilatasyon oluşturdular. Eenilefrinle kastırılmış mezenterik damar yatağı 10"' M konsantrasyonda Y-27632 ile % 85.8±3.7 oranında gevşerken, ET-1 ile perfüzyon basıncı arttırılmış damar yataklarında 10 M konsantrasyonda Y-27632 ile % 48.H5.4 oranında vazodilatasyon meydana geldi (/><0.001). Vasküler endotelyumu uzaklaştırmak için mezenterik damar yatağı saponin (100 mg/1, 10 dk boyunca) ile perfüze edildi ve endotelyuma bağımlı asetilkolin gevşemeleri önemli ölçüde azaldı. Buna karşılık endotelyumu uzaklaştırılmış damarlarda Y-27632 ile oluşturulan gevşeme, endotclyum varken elde edilen gevşemeden farklı değildi. Western blot deneyleri, yaklaşık 1 60 kDa ağırlığında olan Rho-kinazm sıçan mezenterik arterinde eksprese edildiğini göstermiştir. Bu sonuçlar sıçan mezenterik arterinde Rho-kinaz enziminin eksprese edildiğini ve vasküler direncin kontrolüne katkı sağladığını gösterir. Dahası, endotelyumun uzaklaştırılması Y-27632 ile oluşan vazodilatasyon üzerinde belirgin bir etki göstermemiştir. Ayrıca. ET-1 ile indüklenen vazokonstriksiyonun Rho-kinaz, inhibitörlerine olan duyarlığı fenilefrine oranla daha azdı ve bu durum olasılıkla cndotclin-1 reseptörleri (ETa ve ETb) ve a-adrenerjik reseptörlerin bu sinyal transdüksiyon yolağı ile farklı düzeylerde ilişkili olabileceğini önerebilir.

Abstract:
ABSTRACT Expression of Rho-kinasc and Its Contribution to the Control of Perfusion Pressure in the Isolated Perfused Rat Mesenteric Vascular Bed Rho-kinase expression was investigated in the rat mesenteric artery and effects of its inhibitors, (+)-(R)-trans-4-(l-aminoethyl)-N-(4-pyridyi) cyclohexanecarboxamide dihydrochloride monohydrate (Y-27632), fasudil (HA-1077) were examined on the perfusion pressure which was elevated by two different receptor agonists, namely a- agonist, phenylephrine and, ETa and KTB receptor agonist, endothelin-1. Y-27632 and fasudil produced concentration dependent decrease in perfusion pressure. There was no difference between concentration-response lines of these two inhibitors. Maximum decrease in the perfusion pressure induced by 10" M Y-27632 was 85.8±3.7 % when the tone was increased by phenylephrine. However it was 48.1±5.4 % (/><0.001) following the perfusion pressure was elevated by endothelin-1. Saponin perfusion (100 mg/1, for 10 min), which abolished acetylcholine-induced relaxation, did not significantly modify Y-27632-elicited relaxation. Western blot analysis revealed that rat mesenteric artery expresses Rho-kinase protein with the molecular weight of approximately 160 kDa. These results show that Rho-kinase enzyme is expressed in rat mesenteric artery and it contributes to the control of vascular resistance. Moreover, endothelium removal had no marked effect on the vasodilatation induced by Y-27632. In addition. endothelin-1 induced vasoconstriction was more resistant to the Rho-kinase inhibitors than that by phenylephrine, probably since endothelin-1 receptors may be associated with this signal transduction pathway with different level compared to a-adrenergic receptors.