Çeşitli tam seramik sistemlerde; yüzey pürüzlülüğünün ve polisaj metotlarının bakteri adezyonuna etkisinin incelenmesi
The evaluation of effect of surface roughness and polishing methods in different all ceramic systems on bacterial adhesion
Yazar: NESLİHAN ÇÖKÜK
Danışman: PROF.DR. FİLİZ AYKENT
Selçuk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Protetik Diş Tedavisi Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry

Özet:
Bu çalışmanın amacı; beş farklı metal desteksiz seramik materyaline 4 farklı yüzey bitim ve polisajişlemi uygulanmasının yüzey pürüzlülüğüne etkisini karşılaştırmalı olarak değerlendirmek ve bu yüzeylere S.mutans bakteri tutunumu konfokal lazer mikroskobu ve görüntü analiz yöntemleri kullanılarak incelemektir.Çalışmada kullanılan IPS Empress, IPS Empress 2, In-Ceram (Vitadur Alpha) ve Finesse grubuörneklerin hazırlanmasında özel metal kalıplar kullanıldı. Cerec grubu örnekleri prefabrike blokların,ISOMET kesme cihazında belirlenen kalınlıkda kesilmesiyle elde edildiler. Elde edilen örneklere standarttesviye işlemlerinden sonra 600 gritlik zımpara ve glaze uygulandı.Glaze uygulanan örneklere önce 30 ?m ve 15 ?m' lik bitim frezleri uygulandı. Daha sonra örnekler hergrupta 10 adet olacak şekilde rastgele dört gruba ayrıldı. İlk gruptaki örnekler başka hiçbir işlermuygulanmadan ve frez grubu olarak ayrıldı. İkinci gruba sırasıyla kaba, orta ve ince Soflex parlatma diskleriuygulandı. Üçüncü gruba ise, Shofu porselen polisaj seti sırasıyla Dura-white stone, Standart Ceramiste,Ultra Ceramiste ve Ultra II Ceramiste taş ve lastikleri ile polisaj yapıldı. Son gruba ise keçe (Super Snap BuffDisk) ile elmas pasta (Diomand Stick) uygulandı. Yüzey işlemleri tamamlanan örnekler 15 dakika distilesuda ultrasonik temizlemeye tabii tutuldu.Örneklerin yüzey pürüzlülüğü ölçümü için Mitutoyo Surftest cihazı kullanıldı. Ayrıca taramalı elektronmikroskop ile yüzey incelemeleri yapıldı.Örnekler, S mutans bakteri adezyonu için otoklavda steril edildiler ve üzerlerine müsin içeren sentetiktükürükten 5 ml eklenerek pelikül oluşması için bir saat beklendi. Örnek yüzeyleri 5 ml serum fizyolojik ileyıkandıktan sonra steril petrilere alındı. Herbir örnek yüzeyine bakteriyal konsantrasyonu 109 CFU/ml olansüspansiyondan 100 ?l eklendi ve 15 dakika beklenerek bakterilerin pelikül tabakasına bağlanması sağlandı .Daha sonra her petriye örnek yüzeylerini tamamen kaplayacak şekilde 5 ml % 5 sukrozlu BHI eklendi ve 37oC'de % 5 CO2'de 24 saat süreyle bakteri inkübasyon için etüve yerleştirildiler.Bakteri adezyonu tamamlanan örnekler herbirinde 2 ml PBS bulunan tüplere yerleştirildi ve serbestbakterilerin uzaklaşması için 30 sn'ye vorteks cihazında karıştırıldı. Örnekler işlem uygulanmamışyüzeylerinden tırnak cilası ile lamlara yapıştırıldı. 1 ml serum fizyolojiğe 6 ?l fluorescein diacetate (FDA) ve3 ?l ethidium bromide (EB) eklendi. Örneklerin herbirinin yüzeyine 5 ?l boya damlatıldı ve yüzeylerkonfokal lazer mikroskopla incelendi. Canlı bakteri görüntüleri konfokal lazer mikroskobu ile alındı veClemex Vision Lite 3.5 görüntü analizi programı kullanılarak yeşil ve kırmızı görüntü odacıkları sayıldı.Çalışmada elde edilen veriler iki yönlü varyans analizi, tek yönlü varyans analizi ve takiben TukeyHSD testleri, korelasyon ve regresyon analizleri ile değerlendirildi.Seramik sistemleri yüzey pürüzlülüğü açısından değerlendirildiğinde gruplar arasındaki fark önemlibulundu. Cerec ve IPS Empress grupları en düşük yüzey pürüzlülüğü değerlerini gösterirken bunları sırası ileIn-Ceram, Finesse ve IPS Empress 2 grupları izlemiştir. Yine kullanılan polisaj metotları yüzey pürüzlülüğüaçısından değerlendirildi ve gruplar arasında farklar önemli bulundu. Soflex, Shofu uygulanan yüzeyler endüşük Ra değerini gösterdiler. Elmas pasta uygulanan grup ise yüzey pürüzlülük değeri ile bunlardan dahapürüzlü yüzeyler oluşturdu. Elmas frez uygulanan grup en yüksek yüzey pürüzlülük değerini verdi.Seramik sistemleri canlı bakteri tutunumu açısından değerlendirildi ve gruplar arasındaki fark önemlibulundu. En düşük canlı S mutans adezyonu In-Ceram grubunda görüldü. Bu grubu sırasıyla Cerec, Finesseve IPS Empress grupları takip etti. IPS Empress 2 grubunda ise en fazla canlı S mutans adezyonu belirlendi.Yine kullanılan polisaj metotlarının canlı bakteri tutunumuna etkiside önemli bulundu. Soflex ve Shofugruplarında en az canlı bakteri tutunumu görüldü. Elmas pasta ve bitim frezi uygulanan gruplarda en fazlacanlı bakteri tutunumu görüldü.Yüzey pürüzlülüğü ile canlı bakteri adezyonu arasında istatistiksel olarak önemli ve pozitif yönlü birilişki tespit edildi (p<0.05).Çalışmada Soflex ve Shofu polisaj sistemleri uygulanan örneklerin yüzeyleri, diğer yüzeylerden dahadüzgün bulundu, bu sonuç SEM ile yapılan yüzey incelemesin de doğrulandı. Aynı zamanda Soflex ve Shofupolisaj sistemleri uygulanan örneklerde en düşük canlı bakteri adezyonu görüldü.

Abstract:
The aim of this study was to evaluate the effect of four different surface finishing and polishingtreatments on the surface roughness and S mutans adhesion of five different all ceramic materials, by usingconfocal laser microscope and image analysis method.In this study, a special metal mold was used in preparation of IPS Empress, IPS Empress 2, In-Ceram(Vitadur Alpha) and Finesse ceramic specimens. Cerec specimens were prepared by cutting the prefabricatedblocks with ISOMET cutting machine. After standard grinding procedure, samples were polished with 600grit sandpaper and then glazed.Glazed surface of specimens were removed with 30 ?m finishing bur and then and 15 ?m bur. Thenspecimens were randomly divided into four groups of 10 each. First group was left without any procedure asa bur group. In the second group specimens were polished with coarse, medium and fine Soflex discs. In thethird group Shofu Porcelain Polishing kit; Dura White Stone, Standard Ceramiste, Ultra Ceramiste and UltraII Ceramiste polishing stone and rubber were used respectively to polish the specimens. The last groupspecimens were polished with diamond paste and Super Snap Buff disks. After surface treatment, all sampleswere cleaned for 15 minutes with ultrasonic cleaner.Mitutoyo Surftest Analyzer Machine was used to determine the surface roughness and surface ofspecimens were examined with scanning electron microscope.Before bacterial adhesion, specimens were sterilized in autoclave at 121 Co for 15 minutes. 5 mlartificial saliva with mucine was added on the specimens placed in the petri and were left for 1 h to produce apellicle layer. Then the specimens were washed with 5 ml saline and placed into sterilized petri disks. 100 ?lof the bacterial suspension including 109 CFU/ml was added to each samples surface and the bacterialattachment was provided to the pellicle layer for 15 minute. BHI with 5 % sucrose was added to each petri forcovering all samples surfaces and petries were placed into the incubator to obtain the bacterial incubation for24 h at 37 Co with 5 % CO2.After 24 h, the specimens were placed into tubes containing 2 ml PBS and mixed with vortex for 30seconds to separate the free bacteria. Unpolished surface of specimens were bonded with nail polish on to thelams.6 ?l of the Fluorescent Diacetate (FDA) stock solution and 3 ?l of the Ethidium Bromide (EB) weremixed with 1 ml of cold saline. 5 ?l of the final solution was dropped on the each sample surface and coveredwith lamel to examine with confocal laser microscope. The images of vital bacteria were taken with confocallaser microscope and then green and red points were counted with Clemex Vision Lite 3.5 image analyzingprogram.The results of this study were evaluated with two way ANOVA, one way ANOVA and followed byTukey HSD tests, correlation and regression analysis.When the surface roughness of ceramic systems were evaluated, the difference between groups wasfound significant. While the Cerec and IPS Empress groups were showed the minimum surface roughnessvalues, In-Ceram, Finesse and IPS Empress 2 groups were following respectively. Polishing methods used instudy were evaluated for surface roughness, and differences between groups were found significant. Soflex,Shofu treated surfaces exhibited the minimum Ra values. Diamond paste used group accomplished morerough surfaces. Diamond bur group was shown the maximum surface roughness value.Ceramic systems were evaluated for vital bacterial adhesion, and the difference between groups wasfound significant. Lowest vital S mutans adhesion was seen at In-Ceram group. Cerec, Finesse and IPSEmpress groups were followed this group respectively. Most vital S mutans adhesion was determined at IPSEmpress 2 group. Then polishing methods affect at vital bacterial adhesion were found significant. Minimumbacterial adhesion was found at Soflex and Shofu groups. Maximum vital bacterial adhesion was found atdiamond paste and finishing bur used groups.A statistically significant and positive relation was found between surface roughness and vital bacterialadhesion (p<0.05).The surfaces of specimens of Soflex and Shofu polishing systems used groups were found smootherthan other surfaces, and this result was validated by surface evaluation via SEM. At the same time, minimumvital bacterial adhesion was found at specimens treated by Soflex and Shofu polishing systems.