Ovaryan hiperstimülasyon sendromu modelinde mezenkimal kök hücre etkisinin incelenmesi
Investigation of the effects of mesenchymal stem cells in ovarian hyperstimulation syndrome model
Yazar: IŞIL TUĞÇE TURAN
Danışman: PROF. DR. BİRKAN YAKAN ; DOÇ. DR. ZEYNEP BURÇİN GÖNEN
Erciyes Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı / Histoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2023
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology

Özet:
ÖZET
Amaç: Bu çalışma yardımcı üreme tekniklerinde daha fazla oosit toplamak amacıyla yapılan kontrollü ovaryum stimülasyonu tekniğinin iyatrojenik ve hayatı tehdit eden bir komplikasyonu olan ovaryan hiperstimülasyon sendromu (OHSS) modelinde, mezenkimal kök hücre (MKH) uygulamasının hem tedavi edici hem de önleyici etkisini histomorfolojik ve histopatolojik tekniklerle incelemeyi hedeflemektedir.
Gereç ve yöntem: 50 adet 21 günlük immatür dişi Wistar Albino sıçan, her grupta 10 adet olacak şekilde rastgele 5 gruba (Kontrol, OHSS, MKH, MKH+OHSS ve OHSS+MKH) ayrıldı. Ovaryum dokusunun histomorfolojik olarak incelenmesi için Hematoksilen-Eozin, Masson&Trikrom; protein ekspresyonunun değerlendirilmesi için immünohistokimyasal boyama yapıldı. Kuyruk veninden sistemik olarak enjekte edilen kök hücrelerin hedef dokuya yerleşimini doğrulamak için floresan işaretli MKH'ler uygulandı. Gruplar arasında vücut ağırlıkları, ovaryum morfolojisi, folikül sayıları, ovaryumda VEGF, PEDF, IL-6 immünreaktiviteleri primer, preantral ve antral foliküllerdeki AMH ifadesi karşılaştırıldı.
Bulgular: OHSS modeli öncesi ve sonrasında MKH verilen iki grupta da hedef dokuda MKH'in varlığını gösteren bulgular elde edildi. OHSS grubunun ovaryum kesitlerinde foliküllerin kistik genişlemesi, artmış korpus luteum ve atretik folikül sayıları gözlendi. MKH verilen gruplarda kistik folikül sayısı OHSS grubuna göre azaldı (OHSS+MKH; p<0,01ve MKH+OHSS; p=0,03), ovaryum bütünlüğü korundu ve aşırı vaskülarizasyon azaldı. Çalışmada VEGF düzeyleri OHSS grubunda diğer gruplara göre yüksek (p<0,01), PEDF düzeyleri ise düşük bulundu (p<0,01). Hasar sonrası MKH verilen grupta VEGF immünreaktivitesinin düştüğü (p<0,01), PEDF immünreaktivitesinin yükseldiği bulundu (p<0,01). Proinflamatuar bir belirteç olan IL- 6'nın OHSS grubunda yükseldiği (p<0,01), hasar sonrası MKH verilen grupta OHSS grubuna göre düştüğü bulundu (p<0,01). Ovaryum rezervini gösteren AMH düzeyi ise OHSS grubunda diğer tüm gruplara göre düşük bulundu. (p<0,01).
Sonuç: MKH'lerin OHSS tedavisinde etkin olduğu bulundu. MKH'nin profilaksi amaçlı ve OHSS tedavisinde kullanımıyla ilgili ileri çalışmalar yapılabilir.
Anahtar Kelimeler: Ovaryan hiperstimülasyon sendromu, mezenkimal kök hücre, sıçan, umbilikal kord, deneysel çalışma

Abstract:
ABSTRACT
Objective: This study aims to investigate the therapeutic and preventive effects of mesenchymal stem cell (MSC) application in the histomorphological and histopathological aspects of ovarian hyperstimulation syndrome (OHSS), an iatrogenic and life-threatening complication of controlled ovarian stimulation techniques used to collect more oocytes in assisted reproductive technologies.
Materials and Methods: Fifty 21-day-old immature female Wistar Albino rats were randomly divided into five groups (Control, OHSS, MSC, MSC+OHSS, and OHSS+MSC), with 10 rats in each group. Hematoxylin-Eosin, Masson's Trichrome staining were performed for histomorphological evaluation of ovarian tissue, and immunohistochemical staining was conducted to assess protein expression. Fluorescently labeled MSCs were administered to confirm the targeting and localization of MSCs injected systemically from the tail vein to the target tissue. Body weights, ovarian morphology, follicle numbers, VEGF, PEDF, IL-6 immunoreactivities, and AMH expression in the primary, preantral, and antral follicles were compared among the groups.
Results: Evidence of MSC presence in the target tissue was observed in both MSC-treated groups before and after the OHSS model. Ovarian sections from the OHSS group exhibited cystic follicle enlargement, increased corpus luteum and atretic follicle numbers. The MSC-treated groups showed a decrease in cystic follicle numbers compared to the OHSS group (OHSS+MSC; p<0.01 and MSC+OHSS; p=0.03), maintained ovarian integrity, and reduced excessive vascularity. VEGF levels were higher in the OHSS group than in other groups (p<0.01), while PEDF levels were lower (p<0.01). After MSC treatment, VEGF immunoreactivity decreased (p<0.01) and PEDF immunoreactivity increased (p<0.01). The pro-inflammatory marker IL-6 increased in OHSS group (p<0.01) and decreased in the MSC-treated group post-injury compared to OHSS group (p<0.01). Anti-Mullerian hormone (AMH), an indicator of ovarian reserve, was lower in the OHSS group compared to all other groups (p<0.01).
Conclusion: MSCs were found to be effective in the treatment of OHSS. Further studies can be conducted regarding the prophylactic and therapeutic use of MSCs in OHSS.
Keywords: Ovarian hyperstimulation syndrome, mesenchymal stem cells, rats, umbilical cord, experimental study.