Doksorubisin ile oluşturulan deneysel böbrek hasarında oksolamin'in etkilerinin incelenmesi
The investigation of effects of oxolamine on doxorubicin induced experimental renal damage
Yazar: ZEYNEP KILINÇ
Danışman: PROF. DR. BİLGE AYGEN
Fırat Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2015
Konu: Nefroloji = Nephrology
Dizin: Böbrek = Kidney ; Böbrek fonksiyon testleri = Kidney function tests ; Böbrek hastalıkları = Kidney diseases ; Doksorubisin = Doxorubicin ; Matriks metalloproteinaz 2 = Matrix metalloproteinase 2 ; Matriks metalloproteinaz 9 = Matrix metalloproteinase 9 ; Oxolamine = Oxolamine

Özet:
Doksorubisin, antrasiklin türevi, antineoplastik bir ajandır. Klinik etkinliğini doza bağlı toksik yan etkileri sınırlandırır. Kalp, böbrek ve karaciğerde toksik yan etkileri görülmektedir. Oksolamin, antitusif bir ajandır. Oksolamin ayrıca analjezik, antiinflamatuar, lokal anestezik ve antispazmodik özelliklere sahiptir. Bu çalışmada doksorubisin ile oluşturulan böbrek hasarına karşı oksalaminin etkilerinin incelenmesi amaçlandı.
Çalışmada 24 yetişkin erkek Wistar albino cinsi rat kullanıldı. Grup I (Kontrol, n=6), Grup II (Doksorubisin, n=6), Grup III (Doksorubisin+oksolamin, n=6), Grup IV (Oksolamin, n=6) olmak üzere 4 gruba ayrıldı. Doksorubisin grubuna tek doz doksorubisin 15 mg/kg i.p. olarak verildi. Doksorubisin+oksolamin grubuna tek doz doksorubisin 15 mg/kg i.p ve daha sonra 7 gün süresince oksolamin 50 mg/kg/gün i.p. olarak verildi. Oksolamin grubuna ise deney süresince oksolamin 50 mg/kg/gün i.p. olarak verildi. İlaçların uygulanmasını takiben ratlardan alınan böbrek kesitleri % 10'luk nötral tamponlanmış formalinde tespit edildi. Alınan doku örnekleri hematoksilen-eozin (H&E) ile boyandıktan sonra ışık mikroskobu altında incelendi. TUNEL boyama ile apoptoz değerlendirildi. Spektrofotometrik yöntemle MDA düzeyleri değerlendirildi. ASIC3, MMP-2, MMP-9 immünreaktivitesi için immünohistokimyasal boyama yapılıp renal doku örnekleri ışık mikroskopi altında incelendi.
Doksorubisin grubunda hem glomerüler hem tübüler apoptotik indeks kontrol grubuna göre anlamlı olarak yüksek saptandı (p<0.05). Doksorubisin grubuna göre, doksorubisin+oksolamin grubunda glomerül ve tübülde apoptotik indeks daha düşük düzeyde bulundu. Doksorubisin grubunda renal doku MDA düzeyi kontrol grubuna göre anlamlı olarak daha yüksek saptandı. Doksorubisin grubuyla karşılaştırıldığında doksorubisin+oksolamin grubu renal doku MDA düzeyinde anlamlı değişiklik izlenmedi. Kontrol grubuyla karşılaştırıldığında doksorubisin grubunda böbrek doku MMP-2, MMP-9 ve ASIC3 düzeyleri anlamlı olarak yüksek bulundu. Doksorubisin+oksolamin grubunda renal doku MMP-2, MMP-9 ve ASIC3 düzeyleri doksorubisin grubuna göre anlamlı olarak daha düşük saptandı. 
Sonuç olarak doksorubisin uygulanan ratlara oksolamin verilmesi renal doku MMP-2, MMP-9 ve ASIC3 düzeylerini ve apoptotik indeksi anlamlı şekilde azaltarak doksorubisin nefrotoksisitesi gelişimini önlemede olumlu etkiler sağlayabilir.
Anahtar Kelimeler: Doksorubisin, oksolamin, ASIC3, MMP-2, MMP-9

Abstract:
ABSTRACT
THE INVESTIGATION OF EFFECTS OF OXOLAMINE ON DOXORUBICIN INDUCED EXPERIMENTAL RENAL DAMAGE
Doxorubicin is an anthracycline derivative and is antineoplastic agents. Clinical effectiveness is restricted due to dose-limiting toxic side effects. Toxic side effects is seen in cardiac, renal and liver. Oxolamine is a antitussive agent. Oxolamine also possesses analgesic, antiinflammatory, local anaesthetic and antispasmodic properties. The aim of present study was to investigate the effects of oxolamine in doxorubicine induced kidney injury.
Twentyfour adult, male Wistar albino rats were used and were divided into four groups: I, control (n=6); II, doxorubicin (n=6); III, doxorubicine+oxolamine, (n=6); IV, oxolamine (n=6). In the doxorubicin group; the animals were treated with single dose 15 mg/kg/i.p. doxorubicin. In the doxorubicin+oxolamine group; the animals were treated with single dose 15 mg/kg/i.p. doxorubicin and also during experiment rats are treated oxolamine 50 mg/kg/i.p. dose per day total 7 day. In the oxolamine group were treated with oxolamine 50 mg/kg/i.p. dose per day during experiment. After administration of the drugs, the rats were decapitated and their kidneys were removed and fixed in 10% neutral buffered formalin. Tissue samples were stained with H&E (Hematoxylin-Eosin) and histological examined with light microscopy. Apoptosis was evaluated with TUNEL staining. MDA levels were evaluated with spectrophotometric method. Immunohistochemical stain is done for ASIC3, MMP-2, MMP-9 and investigate by light microscopy.
Both glomerular and tubular apoptotic index in doxorubicin group was significantly higher than the control group (p<0.05). Glomerular and tubular apoptotic index in doxorubicin+oxolamine group was lower than doxorubicin group. Renal tissue MMP-2, MMP-9 and ASIC3 levels in doxorubicin group was significantly higher comparared to control group. Renal tissue MMP-2, MMP-9 and ASIC3 levels in doxorubicin+oxalamine group was significantly lower comparared to doxorubicin group.
As a result giving oxolamine to doxorubicin applied rats can provide positive effects in preventing the development of doxorubicin nephrotoxicity via significantly lowering renal tissue MMP-2, MMP-9 and ASIC3 levels and also apoptotic index. 

Key words: Doxorubicin, oxolamine, ASIC3, MMP-2, MMP-9