Subkronik 1800 MHZ elektromanyetik alan uygulanmış sıçanların testis dokusunda parikalsitol'un etkisinin incelenmesi
The investigation of paricalcitol effects on testicular tissue exposed to BY subchronic 1800 MHZ electromagnetic field
Yazar: BURCU DEMİRBAĞ
Danışman: DOÇ. DR. SAVAŞ AKTAŞ
Mersin Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Antioksidanlar = Antioxidants ; Elektromanyetik alanlar = Electromagnetic fields ; Genler-P63 = Genes-P63 ; Ki-67 = Ki-67 ; Sperm = Spermatozoa ; Spermatogenez = Spermatogenesis ; Sıçanlar = Rats ; Testis = Testis ; Vitamin D = Vitamin D

Özet:
Elektromanyetik alan (EMA) maruziyetinin testiste morfolojik ve fonksiyonel değişiklikler yaparak erkek infertilitesine neden olabileceği bildirilmiştir. Bu nedenle çalışmamızda 1800 MHz EM dalgaların testiküler morfoloji ve fonksiyonundaki değişiklikler üzerine parikalsitolun etkisinin gösterilmesi planlandı. 
Çalışmamızda 28 adet 8-10 haftalık Wistar Albino erkek sıçan kullanıldı. Denekler; kontrol (K), parikalsitol (P), elektromanyetik alan (EMA) ve elektromanyetik lan+parikalsitol (EMA+P) grupları olmak üzere 4 gruba ayrıldı. K grubuna (n=7) hiç bir işlem yapılmadı. P grubuna, 0,2 µg/kg parikalsitol (haftada 3 kez/30 gün) subkutan (s.c.) olarak enjekte edildi. EMA grubuna, 1800 MHz EMA (günde 1 saat/30 gün) uygulandı. EMA+P grubuna, 1800 MHz EMA (30 gün boyunca günde 1 saat) ve 0,2 µg/kg parikalsitol (haftada 3 kez/30 gün) verildi. Deney sonunda sakrifiye edilen deneklerden elde edilen testis dokularında, seminifer tübül çapları, germinal epitel kalınlığı ve Johnsen skorlaması, Ki67, p63 immün işaretlenmesi, malondialdehit (MDA) düzeyi, süperoksit dismutaz (SOD) ve katalaz (CAT) enzim aktivitesi gösterildi.
Jonhsen skorlamalarının EMA+P grubunda K grubuna benzer olduğu ve EMA grubuna göre anlamlı bir artış (p<0,001) gösterdiği belirlendi. EMA+P grubunda Ki67 ve p63 immünoreaktivite skorları (IRS) birbirine benzerdi ve EMA grubuna göre anlamlı olarak artış göstermekteydi (sırasıyla p<0,001 ve p=0,002), bu artış K grubuna göre de farklılık gösterdi (sırasıyla p=0,013 ve p=0,005).  MDA düzeyi, EMA+P grubunda K grubundan anlamlı bir farklılık göstermemekteyken (p=0,593), EMA grubuna göre anlamlı olarak azaldı (p=0,002). CAT aktivitesi ise EMA+P grubunda, EMA grubuna göre anlamlı bir artma (p<0,001) gösterirken, K grubu ile karşılaştırıldığında anlamlı bir farklılık saptanmadı (p=0,120).
Sonuçlar parikalsitolun, EMA'nın spermatogenezdeki olumsuz etkilerine karşı p63, Ki67 ve antioksidan kapasite mekanizmaları aracılığıyla koruyucu olabileceğini düşündürmektedir.

Abstract:
It is well-known that exposure to electromagnetic field (EMF) may lead to male in fertility by causing changes in the testicular morphology and function. The present study aimed to investigate the effect of paricalcitol on the testicular morphology and function after exposure to 1800 MHz electromagnetic field. 
In our study we used twenty eight male Wistar Albino rats (8 to 10 weeks of age) and they were divided into four groups; as control (C), paricalcitol (P), electromagnetic field (EMF) and electromagnetic field+paricalcitol (EMF+P). No treatment was applied to control group (n=7). P group was injected with 0,2 µg/kg paricalcitol (three times in thirty days) subcutaneously. EMF group was exposed to electromagnetic field of 1800 MHz one hours daily for thirty days. EMF+P group was both exposed to electromagnetic field of 1800 MHz (one hour in a day for thirty days) and injected with 0,2 µg/kg paricalcitol (three times in thirty days). At the end of the experiment, testicular sections was evaluated by measuring the diamater of seminiferous tubular, thickness of germinal epithelium thickness and they were correlated with both Johnsen scoring and immunohistochemical staining for Ki67 and p63. The enzyme levels of malondialdehyde, superoxide dismutase and catalase was also assayed biochemically.
Johnsen's scoring of EMF+P and control groups were similar while there was a significant increase compared to EMF group (p<0,001).The immunreactivity scoring of Ki67 and p63 in EMF+P group were similar to each other  whereas a significant increase was found compared to EMF (sırasıyla p<0,001 ve p=0,002 )and it was found different from control group (p=0,013 and p=0,005 accordingly). While the difference in the level of MDA was insignificant for the EMF+P and C groups (p=0,593), there was a significant decrease for the MDA level for EMF+P group compared to EMF group (p=0,002). The difference in the CAT activity was also insignificant for the EMF+P and C groups (p<0,001), there was a significant increase for the CAT activity for EMF+P group compared to EMF group (p=0,120).
These results suggest that paricalcitol may be protective against the detrimental effects of electromagnetic field on spermatogenesis via p63, Ki67 and antioxidant capacity mechanisms.