Glycyrrhetinic asit, streptococcus thermophilus ve lactobacillus casei'nin helicobacter pylori'ye karşı in-vitro, in-vivo etkinliği ve moleküler mekanizmaları
In-vitro, in-vivo activity and molecular mechanisms of glycyrrhetinic acid, streptococcus thermophilus and lactobacillus casei against helicobacter pylori
Yazar: ERHAN TEK
Danışman: PROF. DR. NİZAMİ DURAN
Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Glisiretinik asit = Glycyrrhetinic acid ; Helicobacter pylori = Helicobacter pylori ; Lactobacillus casei = Lactobacillus casei ; Moleküler yapı = Molecular structure ; Streptococcus thermophilus = Streptococcus thermophilus ; İn vitro = In vitro ; İn vivo = In vivo

Özet:
Giriş & Amaç: H. pylori insanlarda gastrit, doudenal ülser ve gastrik kanserle
ilişkilendirilen dünya nüfusunun yaklaşık yarısından fazlasında bulunan bir patojendir. Biz
bu çalışmada H. pylori'ye karşı G. asit, S. thermophilus ve L. casei'nin
biyokomponentlerinin AGS hücre hattında ve deneysel olarak oluşturulmuş sıçan gastrit
modelinde etkinliklerinin araştırılmasını amaçladık.
Yöntem: Bileşiklerin anti-H. pylori etkinliği, hastalığın progresyonunda önemli etkinlikleri
olduğu bilinen NF-κB, IL-1B, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α, COX-2, FOX-M1 ve IL-33
genlerinin ekspresyonları seviyeleri RT-PCR yöntemiyle belirlenerek araştırıldı. Ayrıca H.
pylori ile deneysel olarak oluşturulmuş sıçan gastrit modelinde bileşiklerin ve farklı
kombinasyonlarının etkinliği standart tedavi grubuyla kıyaslı olarak mikrobiyolojik ve
histopatolojik olarak da değerlendirildi.
Bulgular: Deneylerde S. thermophilus tedavi grubunda NF-kB, TNF-α, COX-2 ve IL-1B,
IL-6, IL-33, FOX-M1 ve IL-8 gen ekspresyonları anlamlı derecede azaldığı, IL-10
ekspresyonunun ise anlamlı düzeyde arttığı tespit edilmiştir. Gen ekspresyonları üzerindeki
bu etkinliklerin S. thermophilus artı L. casei artı antibiyotik ve S.thermophilus artı G.asit artı
antibiyotik tedavi grupları ile S. thermophilus artı L. casei artı G. asit artı antibiyotik dörtlü
kombine tedavi gruplarında güçlü sinerjistik etkilerle ortaya çıktığı saptanmıştır. S.
thermophilus tedavi grubunda hayvanlarda H. pylori eradikasyonu S. thermophilus tedavi
grubunda tam olarak sağlanırken, G. asit grubunda eradikasyon oranı %60, ve L. casei ve
antibiyotik tedavi grubunda ise %80 idi. S. thermophilus tedavi grubunda ödem ve lökosit
infiltrasyonu görülmezken, diğer gruplarda lenfosit ve lökosit infiltrasyonu ile hafif ödem
varlığı da tespit edildi. Üçlü kombine tedavi gruplarında anti-H. pylori etkinliği ikili
kombine tedavi gruplarında bakteri eradikasyonu açısından daha etkili idi. Üçlü kombine
tedavi uygulanan iki grupta da (S. thermophilus artı L. casei artı antbiyotik ve S.
thermophilus artı G. asit artı antibiyotik tedavi grupları) hayvanların mide dokularında H.
pylori'ye rastlanmazken, her ki grupta da orta düzeyde lenfosit infiltrasyonu ile hafif ödem
ve düşük lökosit infiltrasyonu tespit edildi. S. thermophilus artı L. casei artı G. asit artı
antibiyotik kombinasyonundan oluşan dörtlü tedavi grubunda ise H. pylori eradikasyonunun
tam olduğu, mide dokusunda lökosit infiltrasyonuna ve ödeme rastlanmadığı, sadece hafif
lenfosit infiltrasyonun olduğu tespit edildi.
XIV
Sonuç: S.thermophilus tedavi grubunda birçok yangısal sitokinin gen ekspresyon
düzeylerinde azalma tespit edilirken dörtlü kombinasyon grubunda önemli sinerjistik etkiler
belirlenmiştir. Ayrıca S.thermophilus tedavi grubu ile dörtlü tedavi grubunda gerek H.pylori
eradikasyonunun ve gerekse de histolojik açıdan doku iyileşmesinin tam olması sebebiyle
hem yeni tedavi yaklaşımlarının oluşturulmasında hem de mevcut terapötik yöntemlerin
iyileştirilmesi açısından oldukça önemli olabileceğini düşünmekteyiz.
Anahtar kelimeler: H. pylori, AGS hücre hattı, Glycyrrhetinic asit, sekonder biyoaktif
metabolit, gen ekspresyonu.

Abstract:
Introduction & Aim: H. pylori is a pathogen associated with gastritis, doudenal ulcer and
gastric cancer in humans and is present in more than half of the world's population. In this
study, we aimed to investigate the efficacy of G. acid, S. thermophilus and L. casei
biocomponents against H.pylori in AGS cell line and rat gastritis model.
Method: The anti-H. pylori activity of the compounds was determined by PCR and the
expressions of NF-κB, IL-1B, IL-6, IL-8, IL-10, TNF-α, COX-2, FOX-M1 and IL-33 genes.
These genes have important activities in the progression of the disease. In addition, the
treatment success of these compounds and their different combinations in the rat gastritis
model experimentally induced with H. pylori was also evaluated microbiologically and
histopathologically compared to the standard antibiotic treatment group.
Results: The levels of NF-kB, TNF-α, COX-2 and IL-1B, IL-6, IL-33, FOX-M1 and IL-8
gene expressions were significantly decreased in the S. thermophilus treatment group, the
level of IL-10 expression increased significantly. These activities on gene expressions
appeared with strong synergistic effects in the S. thermophilus plus L. casei plus antibiotic
and S. thermophilus plus G. acid plus antibiotic treatment groups and the S. thermophilus
plus L. casei plus G. acid plus antibiotic quadruple combined treatment groups. While H.
pylori eradication was completely achieved in the S. thermophilus treatment group, the
eradication rate was 60% in the G. acid group and 80% in the L. casei and antibiotic
treatment group. No edema and leukocyte infiltration were detected in the S. thermophilus
treatment group, whereas other groups had mild edema with lymphocyte and leukocyte
infiltration. Anti-H. pylori efficacy in triple combined treatment groups was more effective
when evaluated in terms of bacterial eradication than in dual combined treatment groups. H.
pylori was not detected in the gastric tissues of animals in both groups treated with triple
combined therapy (the S. thermophilus plus L. casei plus antibiotic and S. thermophilus plus
G. acid plus antibiotic treatment groups), whereas both groups had mild edema with
moderate lymphocyte infiltration and low leukocyte infiltration. In the quadruple treatment
group consisting of the combination of S. thermophilus plus L. casei plus G. acid plus
antibiotic, H. pylori eradication was complete, there was no leukocyte infiltration and edema
in the stomach tissue, only mild lymphocyte infiltration.
Conclusion: While gene expression levels of many inflammatory cytokines were decreased
in the S. thermophilus treatment group, significabt synergistic effects were also detected in
the quadruple combination group. In addition, we think that it may be very important in
XVI
terms of both the creation of new treatment approaches and the improvement of existing
therapeutic methods, since both the eradication of H. pylori and the complete healing of the
tissue in terms of histology in the S. thermophilus treatment group and the quadruple
treatment group.
Keywords: H. pylori, AGS cell line, Glycyrrhetinic acid, secondary bioactive metabolite,
gene expression.