Oleuropein'in neuroblastoma hücreleri üzerindeki sitotoksik ve morfolojik etkilerinin incelenmesi
Investigation of the cytotoxic and morphological effects of oleuropein on neuroblastoma cells
Yazar: ŞERİFE KARAKAYA
Danışman: PROF. DR. VAROL ŞAHİNTÜRK
Eskişehir Osmangazi Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2020
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Hücre kültür teknikleri = Cell culture techniques ; Nöroblastom = Neuroblastoma ; Oleuropein = Oleuropein ; Sitotoksisite = Cytotoxicity

Özet:
Nöroblastom sempatik sinir sisteminden kaynaklanan bebeklik çağında en sık görülen solid tümördür. Gelişimini ve farklılaşmasını tamamlamamış nöral krest prekürsör hücrelerinden kaynaklandığı düşünülmektedir. Oleuropein antioksidan, antienflamatuvar, antitümöral, antidiyabetik, antiaterojenik, antihipertansif, hipolipidemik bir maddedir. Ayrıca hepatoprotektif, neuroprotektif ve kardiyoprotektif etkisi de vardır. Yapılan deneylerimizde nöroblastoma hücrelerinde Oleuropein'in nöroblastom hücreleri üzerindeki etkilerini inceledik.Hücre kültürü çalışmamızda SHSY-5Y hücre hattını kullandık. DMEM high glukoz ve F12 besiyerlerinin karışımı içine %10 FBS ve %1 penisilin-streptomisin eklenerek elde edilen besiyerinde bu hücreler çoğaltıldı. Oleuropeinin 206 mM stok solüsyonu hazırlandı. Oleuropein'in bu hücreler üzerine etkisini sitotoksisite testleri (MTT, Nötral red, Sulforhadamine B), ışık mikroskop incelemeleri (Hematoksilen-Eozin boyama, immünhistokimyasal boyama), inverted mikroskop incelemeleri, yara iyileşmesi testi ve western blot analizleri ile araştırdık.Yaptığımız deneylerde Oleuropein'in artan dozlarında hücre canlılığının azaldığı, çekirdek ve sitoplazma morfolojisinin bozulduğu, apoptotik yolaklarda görev alan proteinlerin ifadesinin arttığı ve anti-apoptotik olanın ise azaldığı tespit edildi.Sonuç olarak, Oleuropein'in nöroblastom hücreleri üzerindeki etkileri nedeniyle nöroblastom tedavisi açısından incelenmesi gerektiğini düşünüyoruz.
Anahtar Kelimeler: Oleuropein, Nöroblastom, SHSY-5Y, Hücre Kültürü
Destekleyen Kurumlar: ESOGÜ Bilimsel Araştırma Projeleri Komisyonu tarafından B tipi proje olarak 2019-2457 kodu verilerek desteklenmiştir

Abstract:
Neuroblastoma is the most common solid tumor originating from the sympathetic nervous system. It is thought to be caused by neural crest precursor cells that have not completed development and differentiation. Oleuropein is an antioxidant, anti-inflammatory, antitumoral, antidiabetic, antiatherogenic, antihypertensive, hypolipidemic substance. It also has hepatoprotective, neuroprotective and cardioprotective effects. In our experiments, we examined the effects of Oleuropein on neuroblastoma cells. We used SHSY-5Y cell line in our cell culture study. These cells were grown in the medium obtained by adding 10% FBS and 1% penicillin-streptomycin into a mixture of DMEM high glucose and F12 media. 206 mM stock solution of Oleuropein was prepared. We investigated the effect of oleuropein on these cells with cytotoxicity tests (MTT, Neutral red, Sulforhadamine B), light microscope examinations (Hematoxylin & Eosin staining, immunhistochemical staining), inverted microscope examinations, wound healing test and western blot analysis. In our experiments, it was determined that the cell viability decreased in the increasing doses of Oleuropein, the nucleus and cytoplasm morphology deteriorated, the expression of the proteins involved in the apoptotic pathways increased and the anti-apoptotic one decreased In conclusion, we think that Oleuropein should be examined in terms of neuroblastoma treatment due to its effectsonneuroblastomacells..

Key Words: Oleuropein, Neuroblastoma, SHSY-5Y, Cell Culture
Supporting Institutions: This study was supported by ESOGU Scientific Research Projects Commission by giving the 2019-2457 code as a type B project.