Non-obstrüktif azospermik ve şiddetli oligospermik infertil erkeklerde MTHFR geni metilasyon değişimlerinin araştırılması
Investigation of the methylation patterns of MTHFRgene in infertile males with non-obstructive azoospermia and severe oligozoospermia
Yazar: TUBA KULAÇ
Danışman: DOÇ. DR. SEZGİN GÜNEŞ
Ondokuz Mayıs Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2013
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Azospermi = Azoospermia ; DNA = DNA ; Genler-MTHFR = Genes-MTHFR ; Kısırlık = Infertility ; Kısırlık-erkek = Infertility-male ; Metilasyon = Methylation ; Oligospermi = Oligospermia

Özet:
Amaç: Erkek infertilitesi, genlerin yanı sıra epigenetik faktörlerin de önemli rol oynadığı kompleks bir hastalıktır. Azospermik ve şiddetli oligospermik erkeklerde karyotip anomalileri, Y kromozomu mikrodelesyonları ve Kistik fibrosiz transmembran düzenleyici (Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator; CFTR) geni mutasyonları en iyi bilinen genetik nedenler arasındadır. Bazı spesifik mutasyonlar tespit edilmesine rağmen sperm kusurlarından sorumlu diğer nedenler bilinmemektedir. Çalışmamızda infertil erkeklerde Metilentetrahidrofolat Redüktaz (MTHFR) geni promotor bölgesi metilasyon profillerini belirlemeyi amaçladık.
Materyal ve Metot: Çalışmamıza 31 azospermik, 46 oligospermik hastalar ve yaş açısından eşleneği olan 49 normospermik erkek dahil edildi. DNA, azospermik erkeklerin testis biyopsisi örneklerinden, oligospermik ve normospermik erkeklerin ejakulat sıvısından izole edildi. Örneklerin MTHFR geni metilasyon durumları metilasyona spesifik PCR (MSP) ile analiz edildi.
Bulgular: Azospermik ve oligospermik infertil hastalar ve normospermik erkekler arasında MTHFR geni promotor profilleri açısından ilişki gözlenmedi (p=0,625). Metilasyon sıklığı azospermik hastalarda %48,4, oligospermik erkeklerde %58,7 normospermik erkeklerde ise %51,0 olarak tespit edildi. 
Sonuç: Bizim verilerimiz, MTHFR geni promotor metilasyon değişimleri ve erkek infertilitesi arasında ilişki olmadığını göstermiştir.

Anahtar Kelimeler: DNA metilasyonu; Epigenetik; Erkek İnfertilitesi; MTHFR

Abstract:
Aim: Infertility is a complex disorder with both genetic and environmental causes. Karyotypic abnormalities, microdeletions on Y chromosome and cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) mutations are well known genetic causes in azoospermic and severely oligozoospermic men.  Although some specific mutations have been identified, others responsible for sperm defects remain unknown.  We aimed to investigate the methylation patterns of the promotor of methylenetetrahydrofolate reductase (MTHFR) gene in infertile males.
Material and Method: Thirty one azoospermic and 46 oligozoospermic infertile patients constituted the study group and were compared with 49 age matched normospermic males.   DNA was isolated from testicular tissue of azoospermic males and ejaculate samples of normospermic and oligozoospermic males. The methylation status of the MTHFR gene was analyzed by methylation spesific polymerase chain reaction (MSP) in samples.
Results: No association was observed in the methylation profile of the MTHFR promoter region among both azoospermic and oligozoospermic infertile patients and normospermic males (p=0.625). Hypermethylation of MTHFR gene was detected in 48.4% and 58.7% of azoospermic and oligozoospermic patients, respectively. Additionally, hypermethylation was observed in 51.0 % of normospermic males. 
Conclusion: Our data indicate that there was no association between the methylation pattern of  MTHFR gene and male infertility.

Keywords: DNA methylation; Epigenetics; Male infertility; MTHFR gene.