Echinococcus granulosus protoskolekslerinin in vitro ortamda gelişimi ve protein yapılarının sds-page yöntemi ile belirlenmesi
Development of echinococcus granulosus protoscoleces in vitro and determination of protein structures by sds-page
Yazar: CENK SONER BÖLÜKBAŞ
Danışman: PROF.DR. AHMET DOĞANAY
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Parazitoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Parazitoloji = Parasitology ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine
Dizin: Elektroforez-poliakrilamid jel = Electrophoresis-polyacrylamide gel

Özet:
Hidatidozis, Echinococcus cinsine ait türlerin larva sekillerinin (metacestod)insan ve hayvanlarda olusturdugu, hem saglık hem de ekonomik yöndenoldukça önemli, zoonotik bir hastalıktır. Türkiye'de hidatidozdan sorumluEkinokok türlerinden en yaygın olanı Echinococcus granulosus'dur.Bu çalısmada koyun kökenli hidatik kistlerden elde edilenprotoskolekslerin monofazik in vitro kültürde kistik yönde gelisimininincelenmesi ve in vitro kültür sonucunda elde edilen mikrokistlerin proteinyapılarının SDS ? PAGE yöntemiyle belirlenmesi amaçlandı. Çalısmada invitro kültür ortamında protoskolekslerden veziküler ve arka keseli formlarıngelistigi, daha sonra bu iki formunda etrafında laminar tabakanın sekillenerekformların mikrokist haline geldikleri gözlendi. n vitro kültürde gelisen formlar152 gün boyunca takip edildi ve kültür sonunda çapları ortalama 2561 ?molan mikrokistler elde edildi. Çalısmada kültürde gelistirilen mikrokistlerin kistsıvısı ve koyunlardan elde edilen hidatik kistlerin sıvısı SDS ? PAGEyöntemiyle elektroforeze tabi tutularak protein yapıları ortaya kondu ve iki kistformunun protein yapıları karsılastırıldı. n vitro kültürde gelistirilenmikrokistlerin elektroforezinde daha önceki çalısmalarda hastalıga spesifikolarak bulunan ve koyun kökenli hidatik kistlerde de bulunan 8, 20, 45, 68,116 kDa'luk protein bantlarına rastlanılması, in vitro kültürde elde edilenmikrokistlerin de antijenik degerinin yüksek oldugunu ve çesitli teshismetotlarında ve ası gelistirme çalısmalarında iyi bir antijen kaynagı olarakkullanılabilecegini ortaya koymustur. Ayrıca pek çok çalısmada model olarakkullanılabilecek in vitro kültürde gelistirilmis bu kistler arakonaklardan kistbulma zorlugununda asılmasını ve deney hayvanı kullanımının azaltılmasınakatkı saglayacaktır.Anahtar Kelimeler: Echinococcus granulosus, protoskoleks, in vitro kültür,SDS ? PAGE.

Abstract:
Hidatidosis is economically very important zoonotic disease and also atmedical aspects that is occured by larval stages of Echinococcus spp. InTurkey, Echinococcus granulosus is the most common species releated tohidatidosis.In this study it?s aimed that inspection of cystic development ofprotoscoleces in monophasic in vitro culture and determination of proteinstructures extracted from microcysts at the end of the in vitro culture by SDSPAGE.It?s monitored that vesicular and posterior bladder forms aredeveloped from protoscolex in vitro culture, and these two forms aredeveloping to microcysts by covering with laminated membran. Developingforms in vitro culture were observed 152 days and end of the culture,microcysts were obtained with 2561 ?m awarage diameter. In the study, theprotein structure of cystic fluid of microcysts developed in vitro culture and ofhidatic cysts develop in sheeps were determined by SDS-PAGE and theirprotein aspects were compared. In the protein structure analysis ofmicrocysts, the protein bands in 8, 20, 45, 68, 116 kDa weight were seemedobserved also in hidatic cysts of sheeps exemined in the several researchs;this result indicated that microcysts are very important antigenic source thatcan be used for investigation of detection methods and vaccinationprograms. In addition, microcysts production by in vitro cultivation provideeasier alternative to cyst production in laboratory animals and to cystscollection from intermediated hosts that has mostly difficulty in these aspect.Keywords: Echinococcus granulosus, protoscoleces, in vitro cultivation,SDS ? PAGE.