Ratlarda deneysel olarak oluşturulan alt ekstremite iskemi-reperfüzyon hasarında Aposinin'in koruyucu etkisinin araştırılması
The investigation of apocynin' protective effect of experimental lower extremity ischemia reperfusion in rats
Yazar: SELÇUK ALBAYRAK
Danışman: DOÇ. DR. BETÜL APAYDIN YILDIRIM
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine
Dizin: Alt ekstremite = Lower extremity ; Antioksidanlar = Antioxidants ; Aposinin = Apocynin ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Sıçanlar = Rats ; İskemi = Ischemia

Özet:
Amaç: Bu çalışmada, ratlarda deneysel olarak oluşturulan alt ekstremite iskemi- reperfüzyon hasarında Aposinin'in koruyucu ve tedavi edici etkisinin olup olmadığı araştırıldı. 

Materyal ve Metot: Bu çalışmada, 250-300 gram ağırlığında Sprague-Dawley cinsi 32 adet erkek rat her grupta 8 rat olacak şekilde Kontrol, İskemi Reperfüzyon (İ/R), Aposinin (AP) ve AP+İ/R Grubu olmak üzere 4 gruba ayrılarak kafeslere yerleştirildi. Tüm ratlar Ketamin (60mg/kg) ve Ksilazin (8mg/kg) anestezisi altına alınıp, kontrol ve AP grupları hariç diğer 2 gruba anestezi altında sol alt ekstremiteye turnike uygulanıp 2 saat iskemi oluşturuldu (ısının düşük olması ve pençelerin siyanotik olması iskeminin oluştuğu anlamına geldi), ardından turnikeler açılıp 2 saatlik reperfüzyon oluşturuldu (pençelerin pembeleşmesi ve ısı artışı reperfüzyonun sağlandığını gösterdi). Reperfüzyon sonunda ratlar sakrifiye edilerek kan ve Gastrocnemius dokusu örnekleri alındı. Plazmada MDA, SOD, CAT, GSH, GPx, İMA ve AOPP düzeylerine, Gastrocnemius kasında MDA, SOD, CAT, GSH ve GPx aktivitesine bakıldı.

Bulgular: Plazma ve Gastrocnemius dokusu SOD, CAT, GSH düzeyi ve GPx aktivitesi İ/R grubunda diğer gruplara göre önemli oranda azalırken plazma ve Gastrocnemius dokusu MDA ve plazma İMA ve AOPP düzeyleri İ/R grubunda diğer gruplara göre önemli oranda artış gösterdi (P<0.001). İ/R grubuna göre AP+İ/R grubunda plazma ve Gastrocnemius dokusu SOD, CAT, GSH düzeyi ve GPx aktivitesi önemli oranda artarken plazma ve Gastrocnemius dokusu MDA ve plazma İMA ve AOPP düzeyleri önemli oranda azaldı (P<0.001).

Sonuç: Biyokimyasal ve histopatolojik bulgular doğrultusunda AP'nin alt ekstremite İ/R oluşturulan ratlarda lipid peroksidasyonunu azalttığı, antioksidan enzim düzeylerini önemli oranda arttırdığı, oluşan oksidatif stresi önlediği, oluşan kas dokusu striasyon kaybını, hemorajiyi, konjesyonu, zenker nekrozunu, hiyalin dejenerasyonunu ve mononükleer hücre infiltrasyonunu azalttığı görülmektedir. AP'nin alt ekstremite İ/R oluşturulan ratlarda oluşan hasarı azaltarak tedavi edici ve koruyucu etkisinin olduğu belirlendi.

Anahtar Kelimeler: Antioksidan, Aposinin, İskemi-Reperfüzyon, Oksidatif stres, Rat

Abstract:
Aim: In this study, it was investigated whwether Apocynin' has protective and therapeutic effect on experimental lower extremity ischemia-reperfusion in rats. 

Material and Method: In this study, a total of 32, 250-300 gram Sprague-Dawley male rats were randomly divided into four equal groups containing of 8 rats per group as Control;Ischemia/Reperfusion (I/R);Apocynin (AP) and AP+I/R and placed in cages. All rats were anesthetized with xylazine (8 mg/kg) and ketamine (60 mg/kg). Except for the control and AP group, the left lower limbs of the other 2 groups were applied to 2 hours of ischemia (low temperature and cyanotic claw marks the occurrence of ischemia) and 2 hours of reperfusion (the pinking of the claws and the increase in temperature indicate reperfusion) with tourniquet. Prior 30 minutes to ischemia, rats were given 0.5 mL 10% DMSO i.p. (one times) for control and I/R groups. Prior 30 minutes to ischemia, rats were given AP 20 mg/kg/i.p. (one times) (It was dissolved in 10% DMSO) by intraperitoneal for AP and AP+I/R groups. All of rats were sacrificed after reperfusion, taken blood and dissected Gastrocnemius tissues. MDA, SOD, CAT, GSH, GPx, IMA and AOPP levels were measured in the plasma; the levels of MDA, SOD, CAT, GSH and GPx were determined in Gastrocnemius muscle.

Results: Plasma and Gastrocnemius tissue SOD, CAT, GSH levels and GPx were significantly lower in the I/R group than the other groups but plasma and tissue MDA, plasma IMA and AOPP levels were significantly higher in the I/R group than in the other groups (P<0.001). The levels of plasma and Gastrocnemius tissue SOD, CAT, GSH levels and GPx were significantly increased in the AP+I/R group according to I/R group (P<0.001). The levels of plasma and tissue MDA levels, plasma IMA and AOPP levels were significantly decreased in the AP+I/R group according to I/R group (P<0.001).

Conclusion: According to the biochemical and histopathological findings, it is seen that AP reducing of the lipid peroxidation, increased antioxidant enzyme levels, prevented oxidative stress; loss of striation in muscle fibers, hemorrhage, congestion, Zenker's necrosis, hyaline degeneration and mononuclear infiltration experimental lower extremity I/R in rats. It has been determined that apocynin has protective and treatment effect and decrease the injury occured in experimental lower extremity İ/R injury in rats

Keywords: Antioxidant, Apocynin, Ischemia-Reperfusion, Oxidative stress, Rat