Ailesel akdeniz ateşi hastalarında toll like reseptör 2 ve 4 ekspresyon düzeyinin akut atak ile ilişkisinin incelenmesi
The investigation of relationship between toll like receptor 2 and 4 expression levels and acute attacks of Familial mediterranean fever
Yazar: MELİA ZENGİN KARAKÖSE
Danışman: PROF. DR. ULUS SALİH AKARCA
Ege Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2011
Konu: Gastroenteroloji = Gastroenterology ; Romatoloji = Rheumatology
Dizin: Ailesel akdeniz ateşi = Familial mediterranean fever ; Amiloidoz = Amyloidosis ; Hastalık = Disease ; Reseptörler = Receptors ; Reseptörler-toll like = Receptors-toll like ; Sağlık = Health

Özet:
GirişToll Like Reseptörler (TLR) doğal immün sistemin bir parçasıdır. Bugüne kadar TLR ailesinde 13 üye saptanmıştır. TLR-4 Gram (?) bakterilerin lipopolissakkaridlerini tanırken, TLR-2 Gram (+) bakterilerdeki lipoteikoik asid gibi mikrobiyal ürünleri ve endojen inflamatuar mediatörleri tanır. AAA'nin patogenezindeki araştırmalarda ilerleme kaydedilmesine rağmen atakların kendi kendini sınırlayan doğası ve periyoditesi hala aydınlatılamamıştır. Eksternal bir antijenin etkisi olmadığı düşünülen AAA hastalığında doğal immün sistemin en önemli elemanlarından olan TLR'lerin rolü bilinmemektedir. Bu çalışmadaki amacımız AAA tanılı hastalarda atak sırasında ve ataksız dönemde TLR-2 ve TLR-4 gen ekspresyon düzeylerini değerlendirerek atakların doğasına ışık tutmaktır.Materyal ve MetodÇalışmaya EÜTF Hastanesi İç Hastalıkları Anabilim Dalında AAA tanısıyla izlenmekte olan 30 hasta (18 bayan, 12 erkek) dahil edildi. AAA atağı sırasında akut inflamatuar yanıtı değerlendirmek için C?reaktif protein (CRP), eritrosit sedimentasyon hızı (ESR), fibrinojen, lökosit düzeyleri bakıldı ve kan, idrar ve boğaz kültürleri yapıldı. Akut atak sırasında Light Cycler cihazı (Rosh Diagnostik, model: LC versiyon 3.0, seri no: 1400933) kullanılarak Real time PCR yöntemi ile Beta Aktin geni ekspresyonları ile mukayese edilmek suretiyle TLR-2 ve TLR- 4 gen ekspresyonları ölçüldü. Akut ataktan 20 gün sonra (atağın olmadığı dönemde) bazal inflamatuar yanıtı değerlendirmek için tekrar TLR-2 ve TLR-4 gen ekspresyon düzeyleri ölçüldü. Sağlıklı kontrol grubu olarak 20 gönüllü çalışmaya alındı ve TLR-2 ve TLR-4 gen ekspresyon düzeyleri değerlendirildi. Gruplar arasındaki ekspresyon düzeyleri arasındaki farklılıklar Mann Whitney U ve Kruskal Wallis testi ile karşılaştırıldı ve p<0.05 değerleri anlamlı kabul edildi.BulgularHastalığın ortalama başlangıç yaşı 17,33 ± 9,5 yıl ve tanı konma yaşı 24,4 ± 9 yıl olarak bulunmuştur. Hastaların ortanca TLR-2 gen ekspresyon düzeyleri atak sırasında 9,2x10-3 (alt-üst sınır:1,4x10-3?20x10-3), ataktan 20 gün sonra 7,9x10-3 (alt-üst sınır:0?30x10-3), sağlıklı kontrol grubunda ise 5,6x10-3 (alt-üst sınır:2,1x10-3?30x10-3) saptandı. Ortanca TLR-4 gen ekspresyon düzeyleri atak sırasında 4,6x10-3 (alt-üst sınır:0?640x10-3), ataktan 20 gün sonra 4,4x10-3 (alt-üst sınır:0?3320x10-3), sağlıklı kontrol grubunda ise 9,9x10-3 (alt-üst sınır:2,1x10-3?80x10-3) saptandı. Üç grup arasında TLR-2 ve TLR-4 gen ekspresyon düzeyleri açısından istatistiksel olarak anlamlı fark saptanmadı(p>0,05). Ataktan 20 gün sonra bakılan TLR-2 ve TLR-4 gen ekspresyon düzeyleri birbiriyle korele saptandı (p<0,05). Kadın hastalarda atak sırasındaki TLR-4 gen ekspresyonun erkek hastalara göre daha yüksek olduğu izlendi (p<0,05). Ataktaki TLR-2 gen ekspresyonu ile şikayetlerin başlama yaşı arasında ve TLR-4 gen ekspresyonu ile hemoglobin ve hematokrit değerleri arasında negatif koralasyon saptandı (p<0,05).TartışmaAAA hastalarında atak sırasında ve remisyon döneminde TLR-2 ve TLR-4 gen ekspresyon düzeylerini sağlıklı kontrol grubundan farklı bulmadık (p>0,05). Ataklar sırasındaki ekspresyon düzeyleri de remisyon dönemlerinden farklı değildi (p>0,05). Hastalarda atak sırasında ve ataksız dönemde TLR-2 ve TLR-4 gen ekspresyon düzeyleri arasında istatiksel açıdan anlamlı fark çıkmamasının olası nedenleri 1- Atak nedenleri enfeksiyon dışı faktörler olabilir ve bu nedenle her üç grup arasında fark tespit edilmeyebilir. Nitekim AAA ataklarını tetikleyen faktörler arasında infeksiyonlar nadiren yer almaktadır. 2- AAA hastalarında TLR-2 ve TLR-4 dışı birtakım inflamatuar yolaklar aktive oluyor olabilir. Ataklar sırasında bir takım inflamatuvar mediatörlerin ekspresyon ve salınımının arttığı kesin olmakla beraber bu yolakların muhtemelen TLR ekspresyonu ile bir ilişkisi yoktur. Literatürde bu verileri karşılaştıracak herhangi bir çalışma bulunmamaktadır.Atak sırasındaki TLR-2 ve TLR-4 ekspresyon düzeyleri ile atak sırasında bakılan CRP, ESR, fibrinojen, lökosit, trombosit düzeyleri arasında istatistiksel açıdan anlamlı bir ilişki gözlenmedi. Akut faz reaktanları çeşitli immün uyarıların sonunda artan nonspesifik göstergelerdir. Yukarıda da bahsettiğimiz gibi TLR-2 ve TLR-4 ekspresyonlarının AAA atakları sırasındaki immün aktivasyonla bir ilişkisi yoktur. Doğal olarak artan akut faz reaktanları ile de bir ilişki olması beklenmemektedir. Daha geniş hasta grupları ile yapılacak çalışmalar bu konuya ışık tutabilir

Abstract:
IntroductionThe role of TLR?s in FMF diesease which is thought to be not influenced by external antigens, are unidentified. The aim of the study is to evaluate the TLR-2 and TLR-4 gene expression levels during the attacks and out of attack periods in FMF patients for to illuminate the nature of attacks.Material and MethodThe study included 30 patients (18 female, 12 male) who were diagnosed with FMF and 20 healthy volunteers. TLR-2 and TLR-4 gene expressions were measured during acute attack and aftrer twenty days the attack and in control subjects. TLR gene expression levels are measured by comparing Beta Actin gene expressions using Light Cyler device (Roch Diagnostic, model: LC version 3.0, serial number: 1400933).ResultsThere was no statisticaly significant difference between three groups (during attack, out of attack and healthy controls) according to TLR -2 and TLR- 4 gene expression levels ( p>0,05) .DiscussionIn conculision, with the light of our results we could say that there was not a correlation between TLR-2 and TLR-4 gene expression levels and FMF disease and its attacks. The other components of immune system probably take part in FMF attacks.