Aşırı halofil Archaea suşlarının ?-amilaz, glukoz oksidaz, ß-galaktosidaz ve amiloglikosidaz aktivitelerinin tayini
?-amylase, glucose oxidase, ß-galactosidase and amyloglucosidase activities of halophilic isolates
Yazar: ÇİĞDEM SAĞER
Danışman: PROF. DR. AYŞE OGAN ; PROF. DR. MERAL BİRBİR
Marmara Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Kimya Ana Bilim Dalı / Biyokimya Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Alfa amilaz = Alpha amylase

Özet:
Günümüzde, endüstride uygulanan doğal olmayan ortamlarda etkin olan, yüksek tuz konsantrasyonlarında, yüksek ısıda veya organik çözücülerde etki edebilen enzimlere veya mikroorganizmalara gereksinim duyulmaktadır. Bu nedenle çalışmamızda ülkemizin zengin mikrobiyal biyoçeşitliliğinin avantajını kullanarak farklı tuzlu ortamlarda karbonhidrat sindirebilen enzimleri üreten aşırı halofil Arkebakteri izolatları incelenmiştir.Tuz Gölü, Tuzköy, Kaldırım Tuzlası ve Kayacık Tuzlası araştırma bölgelerinden ayrımı yapılan 30 aşırı halofil izolatın ?-amilaz, glukoz oksidaz, ß-galaktosidaz ve amiloglikosidaz aktiviteleri belirlenmiştir. İzolatların tamamı cc-amilaz enzimi üretmiştir. Tuz Gölü izolatlarının a-amilaz aktivitesinin; 0,82-6,02 Ünite, Tuzköy Tuz Madeni izolatlarının; 1,62-5,77 Ünite, Kaldırım Tuzlası izolatlarının; 0,18-5,08 Ünite ve Kayacık Tuzlası izolatlarının; 1,46-3,28 Ünite arasında değiştiği saptanmıştır. Kalitatif olarak glukoz oksidaz ve ß-galaktosidaz aktivitesi gösteren izolatların kantitatif olarak kayda değer miktarda glukoz oksidaz ve ß-galaktosidaz enzimi üretmedikleri saptanmıştır. Amiloglikosidaz enzimi için yapılan ölçümlerde önemli miktarda bir aktivite saptanmamıştır.Aşırı halofil Arkebakterilerin enzim aktiviteleri üzerine farklı tuz konsantrasyonlarının etkisi incelenmiştir ve bu suşların yüksek enzimatik aktiviteleri için optimal inkübasyon süresi tayin edilmiştir. Bu suşlar için yüksek enzimatik aktivite, %25 NaCI içeren besiyerinde ve 4 haftalık inkübasyon süresi sonunda elde edilmiştir.Tuz Gölü ve Tuzköy tuz madeni suşlarının en etkili karbonhidrat sindiren enzimlere sahip olduğu bulunmuştur.

Abstract:
Nowadays, industrial applications are demanding enzymes or microorganismsthat can act in nonconventional media such as high salt concentration, hightemperature or organic solvents. Taking the advantage of microbial biodiversity ofour country, we examined extremely halophilic Archaea which can produce enzymesdigesting carbonhydrates in different saline environments. The -amylase, glucoseoxidase, -galactosidase and amyloglucosidase activities of 30 halophilic strainsisolated from Tuz Lake, Tuzköy Salt Mine, Kaldırım and Kayacık Salterns weredetermined.The effect of different salt concentrations and the optimal incubation time onenzymatic activities of extremely halophilic Archaea were determined. a-Amylaseactivities were found as; 0,82-6,02 and 1,62-5,77 units for Tuz Lake and TuzköySalt Mine, 0,18-5,08 and 1,46-3,28 units for Kaldırım and Kayacık Saltern isolatesrespectively. Although, all the isolates showed glucose oxidase and -galactosidaseactivity qualitatively but they did not produce recordable amounts of glucose oxidaseand -galactosidase enzymes. Considerable amount of amyloglucosidase activity wasnot determined for the isolates. Highest enzymatic activities for the isolates wereattained at growth medium containing 25% NaCI after four weeks of incubationtime.It was concluded that the strains of Tuz Lake and Tuzköy Salt Mine have themost potent carbohydrate degrading-enzymes.