Dupuytren hastalığında ex vivo hyalüronik asit uygulamasının miyofibroblastlar ve kollajen tiplerinin değişimi üzerindeki etkilerinin araştırılması
Dupuytren hastaliğinda ex vivo hyalüronik asit uygulamasinin miyofibroblastlar ve kollajen tiplerinin değişimi üzerindeki etkilerinin araştirilmasi
Yazar: CEM BERKAY SINACI
Danışman: DOÇ. DR. GAYE FİLİNTE
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / Dr. Lütfi Kırdar Kartal Eğitim ve Araştırma Hastanesi / Plastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2019
Konu: Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery
Dizin: Dupuytren kontraktürü = Dupuytren contracture ; Fibroblastlar = Fibroblasts ; Hyalüronik asit = Hyaluronic acid ; Kollajen = Collagen

Özet:
Amaç
Dupuytren hastalığı, palmar fasyanın anormal kalınlaşması sonucu fibrozis,
palmar nodüller ve parmaklarda kontraktürlerle sonuçlanan, yaygın görülen ve
tedavisi zor bir hastalıktır. El fonksiyonlarının yeniden kazandırılabilmesinden dolayı
hastalığın cerrahi tedavisinde tatmin edici sonuçlar elde edilmektedir. Kollajenaz ve
steroid enjeksiyonları gibi medikal tedavi modaliteleri de mevcut fakat nüks oranları
yüksektir. Son yıllarda kullanımı yaygınlaşan ve ekstraselüler matriksin önemli bir
komponenti olan hyalüronik asitin fibroblastlar ve kollajen üzerinde antifibrotik
etkileri olduğu görülmüştür. Yapılan araştırmalarda hyalüronik asitin fibroblast
proliferasyonunu azalttığı, tip1/tip3 kollajen oranını artıdığı ve miyofibroblast
aktivitesini sınırladığı gösterilmiştir. Dupuytren hastalığının patogenezinde artmış
fibroblast ve miyofibroblast aktivitesi ve tip3/tip1 kollajen oranında artış olmasından
yola çıkarak hyalüronik asitin bu hastalıkta kullanılabilecek medikal tedavi yöntemleri
arasına girebileceği, hastalığın erken evrelerinde uygulandığında cerrahi ihtiyacını
azaltabileceği ve ileri evrelerde cerrahiyle kombine şekilde uygulandığında nüks
oranlarını azaltabileceği düşünülmüştür.
Yöntem
Çalışma kliniğimizde ameliyat edilen 4 adet hasta ile gerçekleştirildi. Her
hastanın patolojik palmar fasyası ve sağlıklı ön kol yüzeyel kas fasyasından doku
örnekleri alınarak fibroblastlar kültüre edildi. Kültür ortamları daha sonra ikiye
bölünerek birer gruba 24 saat boyunca 100 μg/ml HA maruziyeti uygulandı. Ardından
western blot yöntemi ile α-SMA, kollajen tip1 ve kollajen tip3 ölçümleri yapıldı.
Bulgular
HA eklenen sağlıklı ve dupuytren hastalıklı dokularda kontrol gruplarına göre
kollajen tip3/tip1 oranında anlamlı düşüş saptandı. HA eklenen sağlıklı dokularda
kontrol gruplarına göre miyofibroblast tanısal markerı olan α-SMA nın anlamlı ölçüde
azalmadığı görüldü. HA eklenen dupuytren hastalıklı dokularda kontrol gruplarına
göre miyofibroblast tanısal markerı olan α-SMA nın istatistiksel olarak anlamlı ölçüde
azaldığı saptandı.
Sonuç
Yapmış olduğumuz çalışmanın sonucu hyalüronik asitin dupuytren
hastalığının patogenezinde rol oynayan tip3/tip1 kollajen artışı ve miyofibroblast
aktivitesi artışı gibi süreçleri geri çevirdiğini göstermiştir ve bu sayede hastalığın
cerrahi dışı tedavi seçenekleri arasında yeni bir seçenek olabileceği söylenebilir.
Anahtar Kelimeler: Dupuytren, hyalüronik asit, fibroblast, kollajen

Abstract:
Aim
Dupuytren's disease is a frequently seen condition with a difficult treatment,
manifests with fibrotic palmar nodules and contractures of the fingers as a result
of abnormal thickening of the palmar fascia. Surgery is a choice of treatment,
usually with satisfying results in terms of functional recovery of the hand. Various
non-surgical treatment modalities like collagenase and steroid injections have been
described but their recurrence rates are high. Hyaluronic acid, a major component
of the extracellular matrix, has become popular over the past several years. The
hypothesis of this research is based on the fact that HA reduces the fibroblast
proliferation, increases the type1/type3 collagen ratio and limits the myofibroblast
activity which has been proven by previous studies on the subject. The pathology
behind Dupuytren's disease is the very same condition of increased
myofibroblast/fibroblast activity and type3/type1 collagen ratio; therefore the
purpose of the research was to open the path on the way to define the usage of HA
as a new approach at medical treatment. As a treatment modality, it may diminish
the need for surgery when used at early stages of the disease and also may decrease
the recurrence incidence when used in combined with surgery at advanced stages.
Method
Our research has been done with 4 patients operated at our clinic. Each
patient's pathological palmar fascia and healthy superficial forearm fascia samples
were taken and obtained fibroblasts were cultivated. Each culture medium than
divided into two groups and 100 μg/ml of HA applied for the following 24 hours
to one of the groups. Collagen type1, collagen type3 and α-SMA measurements
were performed via western blot technique.
Results
Collagen type3/type1 ratio showed a significant decrease at HA applied
experiment groups, both healthy and pathological tissues, in comparison to control
groups. Myofibroblast diagnostic marker α-SMA was another parameter studied,
while HA administered healthy tissue groups didn't show any significant
difference regarding α-SMA; HA administered pathological tissue groups revealed
a statistically significant decrease at α-SMA levels.
Conclusion
Our results revealed that HA has reversing effects on the pathogenesis of
Dupuytren's disease; such as lowering type3/type1 collagen ratio and limiting
myofibroblast activity. Hence with further studies, HA may become a promising
non-surgical treatment modality.
Keywords: Dupuytren, hyaluronic acid, fibroblast, collagen