RAW 264.7 makrofaj hücrelerinde nitrik oksit sentezi üzerine L-karnitinin etkisi
The effect of L-carnitine on the synthesis of nitric oxide by inos in RAW 264.7 murine macrophage cell line
Yazar: ASLI KOÇ
Danışman: PROF. DR. FÜGEN AKTAN
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2011
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Enzimler = Enzymes ; Karnitin = Carnitine ; Lipopolisakkaritler = Lipopolysaccharides ; Makrofaj aktivasyonu = Macrophage activation ; Makrofajlar = Macrophages ; Nitrik oksit = Nitric oxide

Özet:
L-karnitin, çeşitli hücrelerde apoptozu engellediği, antioksidan enzimlerin konsantrasyonunu artırdığı ve oksidatif stres markerlarının seviyelerini düşürdüğü bilinen, antioksidan etkilere sahip bir bileşiktir. Bu çalışmada LPS ile uyarılan RAW 264.7 makrofaj hücrelerinde L-karnitinin nitrik oksit sentezi üzerindeki etki mekanizması araştırıldı. Hücreler 1?g/ml LPS ile 20 saat uyarıldığında kontrol ve LPS grubunun nitrit konsanrasyonları arasında anlamlı fark görüldü (3,71 ± 0,05 mM ve 8,48 ± 0,15mM sırasıyla) (p<0,001). Hücreler LPS ile uyarılmadan önce 20 saat L-karnitin ile inkübe edildiğinde, L-karnitinin nitrik oksit konsantrasyonlarını anlamlı derecede azalttığı (p<0,01) ve bu durumun iNOS protein ekspresyonundaki azalmadan kaynaklandığı görüldü. L-karnitin LPS ile indüklenen NF?B aktivitesini inhibe ettiğinden dolayı, iNOS protein ekspresyonu üzerindeki inhibitör etki transkripsiyon seviyesindedir. Ayrıca, 1?g/ml LPS ile nitrik oksit sentezi indüklendikten sonra ortama ilave edilen L-karnitin ile hücrelerin inkübasyonu sonucunda da nitrik oksit konsantrasyonlarının anlamlı olarak azaldığı görüldü (p<0,001). Bu çalışmadan elde edilen sonuçlar göstermiştir ki, RAW 264.7 makrofaj hücrelerinde L-karnitin doz bağımlı olarak NF ?B aktivitesini ve iNOS protein ekspresyonunu azaltarak, nitrik oksit sentezi üzerinde inhibitör etkiye sahiptir.

Abstract:
L-carnitine is a compound that is known to have anti-oxidant effects, preventing apoptosis in various cells, increasing antioxidant enzyme concentration and decreasing oxidative stress markers. In this study, the effect mechanisms of L-carnitine on nitric oxide synthesis in LPS induced RAW 264.7 macrophage cells have been researched. When the cells are induced by 1?g/ml LPS for 20 hours, it has been observed that a meaningful difference exists between the nitrite concentrations of the control group and LPS group. When the cells are incubated for 20 hours with L-carnitine before inducing with LPS, it has been observed that L-carnitine is decreasing the nitric oxide levels meaningfully and this decrease is caused by the decrease of iNOS protein expression. Since the L-carnitine is inhibiting the activity of LPS induced NF?B activity, the inhibitor effect on the iNOS protein expression is at the transcription level. Also, when L-carnitine added to the cell culture after the LPS stimulation (1?g/ml), it was seen that nitrite concentrations were decreased (p<0,001). The results from this study showed that, L-carnitine in RAW 264.7 macrophage cells have an inhibitor effect on the nitric oxide synthesis by decreasing the NF?B activity and iNOS protein expression dose dependently.