Allerjik astımda T hücrelerde kemokin ekspresyonu ve sitokinler
Chemokine expression and cytokines on T cells in allergic asthma
Yazar: LAÇİN CEVHERTAŞ
Danışman: DOÇ. DR. GAYE ERTEN
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / İmmünoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Allerji ve İmmünoloji = Allergy and Immunology
Dizin: Alerjenler = Allergens ; Astım = Asthma ; Hipersensitivite = Hypersensitivity ; Kemokinler = Chemokines ; Sitokinler = Cytokines ; İmmünositokinler = Immunocytokines ; İnterlökin 10 = Interleukin 10 ; İnterlökin 4 = Interleukin 4 ; İnterlökin 5 = Interleukin 5

Özet:
Allerjik ve allerjik olmayan astım gelişiminde T hücre alt grupları önemli rol oynamaktadır. Bu çalışmada GINA 2014 Rehberine göre en az 1 yıl önce astım tanısı konulmuş, orta-yüksek doz inhale steroid ve uzun etkili beta agonist tedavisine yanıtsız, FEV1 değeri < %80 olan ve sigara içmeyen veya 10 yıl altında içip en az 6 ay önce bırakmış olan allerjik (n:4, yaş ort. 47,2±8,6) ve nonallerjik (n:5, yaş ort. 47,25±10,3) bireylerde periferik kan mononükleer hücrelerin (PKMH) hücre yüzey belirteçleri (CD4, CD8, CCR3, CCR4, CXCR3) ve hücre içi sitokin (IFN-g, IL-4 ve IL-10) düzeyleri PMA/iyonomisin uyarımlı ve uyarımsız olarak akan hücre ölçer ile değerlendirilmiştir. Uyarım sonrasında, allerjik astımlı hastalarda yardımcı T (Th) hücre  CXCR3+IFN-g, CXCR3+IL-4, CCR3+ IFN-g, CCR3+IL-4, CCR3+IL-10, CCR4+IL-10; allerjik olmayan astımlılarda ise CXCR3+IFN-g, CXCR3+IL-4, CXCR3+IL-10, CCR3+IFN-g, CCR3+IL-4 ve CCR3+IL-10 ekspresyonu artmıştır. Sitotoksik T hücreler uyarıldığında ise; CCR3+IFN-g, CCR3+IL-4, CCR3+IL-10, CCR4+ IL-4, CCR4+IL-10 ekspresyonunda artış saptanmıştır. Allerjik olmayan astımda ise hem CD8+CXCR3+IFN-g hem de CD8+CXCR3+IL-10 seviyelerinde artış gözlenmiştir. Çalışmamızda, sitokin içerikleri açısından gruplar arasında anlamlı fark saptanmamasına karşılık düzeylerde artma eğilimi gözlenmiştir. Hasta grupları karşılaştırıldığında, allerjik astımda CCR3+ ve CCR4+ yardımcı T hücrelerinin uyarım sonrasında CD4+CXCR3+ hücrelere kıyasla daha fazla IL-10 içerdikleri; allerjik astımda uyarımsız CD4+CCR4+ hücrelerin IFN-g seviyelerinin; allerjik olmayan astımlılarda ise IL-10 içeriğinin yüksek olduğu saptanmıştır.
Çalışmamız astım patogenezinde T hücrelerinin önemli rolünü göstermekle beraber, hastalık gelişiminin sadece Tip 1 ve 2 paradigması kullanılarak açıklanamayacağını ortaya koymaktadır.

Abstract:
T cell subgroups are known to play important roles in pathogenesis of allergic and non-allergic asthma. The study group consisted of allergic (n:4, mean age 47,2±8,6) and nonallergic (n:5, mean age 47,25±10,3) patients with asthma diagnosed according to GINA criteria (disease duration ≥1 year, FEV1<80%, resistant to moderate-high dose inhaled steroids/long acting beta agonists; nonsmokers or quitted smoking at least 6 months ago after ≤10 years smoking). In this study the expression of surface markers including CD4, CD8, CCR3, CCR4, CXCR3 and intracytoplasmic cytokines (IFN-g, IL-4 and IL-10) of PBMCs in stimulated (PMA/ionomicin) and unstimulated conditions in both groups were investigated by flow cytometry. Stimulated Th cells increased their CXCR3+IFN-g, CXCR3+IL-4, CCR3+IFN-g, CCR3+IL-4, CCR3+IL-10, CCR4+IL-10 expressions in allergic asthma; but CXCR3+IFN-g, CXCR3+IL-4, CXCR3+IL-10, CCR3+IFN-g, CCR3+IL-4 and CCR3+IL-10 in non-allergic asthma. Tc cells in allergic asthma expressed higher CCR3+IFN-g, CCR3+IL-4, CCR3+IL-10, CCR4+ IL-4, CCR4+IL-10 after stimulation. CD8+CXCR3+IFN-g and CD8+CXCR3+IL-10 increased in non-allergic asthma under the same stimulation.
In our study T cells tended to elevate their intracellular cytokine levels in all groups under both conditions. Comparing allergic and non-allergic asthma patients, CCR3+ and CCR4+ Type 2 Th cells produced higher amounts of IL-10 compared to Type 1 CD4+CXCR3+ cells in allergic asthma. CD4+CCR4+ cells expressed higher IFN-g and IL-10 without stimulation in allergic and non-allergic asthma respectively.
In summary, our results indicate the role of T cells in pathogenesis of allergic/non-allergic asthma, but also the complexity of disease which can not be explained by using only  Th1/Th2 paradigma.