Rat larenksi üzerinde kurkuminin radyoprotektif etkisinin değerlendirilmesi
Evaluation of the radioprotective effect of curcumin on rat larynx
Yazar: FATMA CANER
Danışman: DOÇ. DR. YUSUF ÇAĞDAŞ KUMBUL
Süleyman Demirel Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kulak Burun Boğaz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2023
Konu: Kulak Burun ve Boğaz = Otorhinolaryngology (Ear-Nose-Throat)
Dizin: Antioksidanlar = Antioxidants ; Cerrahi-kulak-burun-boğaz = Surgery-otorhinolaryngologic ; İyonlaştırıcı ışınlar = Ionizing rays

Özet:
Larenks kanseri; baş-boyun kanserleri içerisinde ikinci sıradadır. En sık görülen histopatolojik alt tipi skuamöz hücreli kanserdir. Etiyolojide en önemli risk faktörü sigaradır. Larenks kanseri tedavisinde cerrahi ve radyoterapi olmak üzere iki ana tedavi yöntemi vardır. Erken evre larenks kanserinde, cerrahiyi kabul etmeyen hastalarda, ameliyat şansını yitiren hastalarda ve operasyon sonrasında cerrahi sınırlarda tümör kalan hastalarda radyoterapi tedavi seçeneği olarak kullanılabilir.
Kurkumin, Çin ve Hindistan'da yaygın olarak yetiştirilen, Zingiberaceae familyasına ait, sarıçiçekli ve büyük yapraklı 'Curcuma Longa' bitkisinin rizomlarından elde edilir. Kurkuminin, anti-inflamatuar, anti-oksidatif, radyoprotektif, kemoprotektif gibi birçok olumlu özelliği literatürde tanımlanmıştır. Ancak literatürde kurkuminin larenks dokusunda radyoprotektif bir özelliğe sahip olup olmadığını bildiren bir çalışma bulunmamaktadır. 
Çalışmamızda 40 adet Wistar Albino erkek rat gruplara randomize ve eşit şekilde dağıtılarak 4 grup oluşturulmuştur. Gruplar; RT (Grup 1),   Kurkumin+DMSO+RT(Grup 2), DMSO+RT(Grup 3), Kurkumin+DMSO (Grup 4) olarak belirlenmiştir. Kurkumin ve DMSO, RT uygulamasından 5 gün önce başlanılarak intraperitoneal yoldan verilmiştir. RT alan grupların boyun bölgelerine tek doz 16 Gy X ışını uygulanmıştır. Radyoterapi sonrası 3. Günde tüm gruplar sakrifiye edilmiştir. Sakrifikasyon sonrasında ratların larenks dokuları çıkarılıp histopatolojik (ödem, hiperemi, psödostratifikasyon, nekroz, silyalarda kayıp, inflamasyon açısından) ve immünohistokimyasal (TNF- α) değerlendirme yapılmıştır. Histopatolojik parametreler yok – hafif – orta - şiddetli (0, 1 pozitif, 2 pozitif,                   3 pozitif ) olarak değerlendirilmiştir. TNF- α ekspresyonun şiddeti ise 0-3 arasında skorlanmıştır (0= ekspresyon yok; 1=hafif ekspresyon; 2= orta şiddette ekspresyon; 3=şiddetli ekspresyon). Grupların verileri SPSS 24 programında istatistiksel olarak analiz edilmiştir.
Yapılan istatistiksel analizler sonucunda; kurkumin verilen Grup 2 ratlarında ödem, hiperemi, nekroz, psödostrafikasyon oluşumu ve TNF-α üretiminin Grup 1'e kıyasla istatistiksel açıdan anlamlı olacak şekilde azaldığı izlendi (p değerleri sırasıyla 0.001, 0.003, 0.004, 0.005, p: 0.009). Fakat inflamasyon ve silya kaybı parametrelerinde istatistiksel olarak anlamlı farklılık gözlenmedi (p değerleri sırasıyla 0.091, 0.055). Grup 1 ve 3 arasındaki karşılaştırmalarda ise; ödem, hiperemi, psödostratifikasyon, silya kaybı, inflamasyon ve TNF-α üretimi açısından anlamlı fark yoktu (p değerleri sırasıyla: 0.091, 0.143, 0.164, 1.000, 0.130, 0.407). Nekroz parametresinde ise anlamlı olarak farklılık izlendi (p:0.004). 
Çalışmamızda histopatolojik olarak kurkuminin ödem, hiperemi, nekroz, psödostratifikasyon oluşuma karşı etkin bir radyoprotektan ajan olduğu gözlenmiştir. İmmünohistokimyasal olarak da kurkuminin TNF-α düzeylerinde azalmaya yol açtığı gösterilmiştir. Gıdalarda bulunan, toksisite potansiyeli az, maliyeti düşük olan kurkumin; larenks kanseri olup tedavi yöntemi olarak RT'yi seçen hastalarda radyoprotektan ajan olarak umut ışığı olabilir. Bu çalışma, gelecekte yapılacak olan çalışmalarla desteklenmelidir.  

Anahtar Kelimeler: Larinks, kurkumin, kanser, antioksidan, radyoterapi, radyoprotektif etki.

Abstract:
Laryngeal cancer; ranks second among head and neck cancers. The most common histopathological subtype is squamous cell cancer. The most important risk factor in etiology is smoking. There are two main treatment methods for laryngeal cancer: surgery and radiotherapy. Radiotherapy can be used as a treatment option in early stage laryngeal cancer, in patients who do not accept surgery, in patients who lose their chance for surgery, and in patients with tumor remaining at the surgical margins after the operation.
Curcumin is obtained from the rhizomes of the yellow-flowered and large-leaved 'Curcuma Longa' plant, which belongs to the Zingiberaceae family and is widely grown in China and India. Many positive properties of curcumin, such as anti-inflammatory, anti-oxidative, radioprotective and chemoprotective, have been described in the literature. However, there is no study in the literature reporting whether curcumin has a radioprotective property in laryngeal tissue.
In our study, 40 Wistar Albino male rats were distributed randomly and equally to 4 groups. Groups; was determined as RT (Group 1), Curcumin+DMSO+RT (Group 2), DMSO+RT (Group 3), Curcumin+DMSO (Group 4). Curcumin and DMSO were administered intraperitoneally, starting 5 days before RT administration. A single dose of 16 Gy X-ray was applied to the neck regions of the groups receiving RT. All groups were sacrificed on the 3rd day after radiotherapy. After sacrification, the laryngeal tissues of the rats were removed and histopathological (in terms of edema, hyperemia, pseudostratification, necrosis, loss of cilia, inflammation) and immunohistochemical (TNF-α) evaluations were performed. Histopathological parameters were evaluated as none - mild - moderate - severe (0, 1 positive, 2 positive, 3 positive). The intensity of TNF-α expression was scored between 0 and 3 (0 = no expression; 1 = mild expression; 2 = moderate expression; 3 = severe expression). The data of the groups were analyzed statistically in the SPSS 24 program.
As a result of the statistical analysis; It was observed that edema, hyperemia, necrosis, pseudostraphication formation and TNF-α production decreased statistically significantly in Group 2 rats given curcumin compared to Group 1 (p values 0.001, 0.003, 0.004, 0.005, p: 0.009, respectively). However, no statistically significant difference was observed in the parameters of inflammation and cilia loss (p values 0.091, 0.055, respectively). In comparisons between Groups 1 and 3; There was no significant difference in terms of edema, hyperemia, pseudostratification, cilia loss, inflammation and TNF-α production (p values: 0.091, 0.143, 0.164, 1.000, 0.130, 0.407, respectively). A significant difference was observed in the necrosis parameter (p:0.004).
In our study, it was observed histopathologically that curcumin is an effective radioprotectant agent against edema, hyperemia, necrosis and pseudostratification formation. Immunohistochemically, it has been shown that curcumin causes a decrease in TNF-α levels. Curcumin, which is found in foods, has low toxicity potential and low cost; It may be a ray of hope as a radioprotectant agent in patients with laryngeal cancer who choose RT as a treatment method. This study should be supported by future studies. 

Keywords: Larynx, curcumin, cancer, antioxidant, radiotherapy, radioprotective effect.