Pirüvat kinaz izoenzim M2 aktivitesi üzerinde bazı polifenol 
bileşiklerin etkilerinin araştırılması
Investigate of effects of some polyphenol compounds on pyruvate kinase isoenzyme M2 activity
Yazar: MERT OKTAY BAYKAN
Danışman: YRD. DOÇ. DR. ŞEVKİ ADEM
Çankırı Karatekin Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2017
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
Hızla gelişmekte olan tümör ve cenin gibi dokuların metobolik düzenleri normal
hücrelerden farklıdır. Bu iki hücre tipleri arasındaki en önemli fark, beslenme ve enerji
ihtiyacı farkıdır. Bu iki hücre tipleri arasındaki en önemli fark, beslenme ve enerji ihtiyacı
farkı olup, kanserli hücrenin hızlı gelişen bir yapıya sahip olmasından
kaynaklanmaktadır. Kanserli hücrelerin hızlı gelişen yapısı için artan enerji gereksinimi
glikolizi hızlandırmaktadır. Glikolizin hızlanması ile birlikte glikolitik enzimlerin bir
veya daha fazla izoformlarının kanserli hücrelerdeki ekspresyon durumu veya aktivitesi
değişmektedir. Tümör hücrelerindeki enzimatik mutasyonlar kanser tedavisi için
potansiyel hedefolması seçenektir. PKM2 izoenziminin glikolitik yolunda anahtar görevi
görmesi ve kanserli hücrelerde aşırı sentezlendiği tespit edilmiştir. Glikolizin ATP
üretmek veya biyosentetik blokların üretimine yönlendirilmesinde temel belirleyici
enzim PKM2'dir. PKM2'nin glikolizde aldığı bu görev kanser tedavisinde kilit bir nokta
oluşturmaktadır. Kemoterapötik ajan veya hücrede oluşan kemoterapötik direnci yenmek
için PKM2 inhibitör kombine kemoterapötik ajan olarak kullanılabilir. Bu enzimin
inhibitör tespit edilmesi bu sebepten önemlidir.
Yapılan bu çalışma ile birlikte 17 fenolik bileşiğin PKM2 enzim aktivitesindeki etkisi
araştırıldı. Enzim aktivitesi üzerinde inhibe etkisi oluşturan bileşiklerin inhibisyon gücü
IC50 ve Ki değerlerinin hesaplanması ile tespit edildi. Laktat dehidrogenaz kullanılarak
340 nm de absorbans düşüşü ile NADH' ın NAD+ ya dönüşümü takip edilerek enzim
aktivitesi ölçüldü.

Anahtar Kelimeler: Pirüvat Kinaz M2, İnhibitör, Kanser

Abstract:
Metabolic regulation in rapidly growing tissues such as fetal tissues and tumours is
different from that in most adult tissues. One of the most prominent distinctions between
healthy and cancerous tissues is the differing energetic and nutritional needs associated
with the rapid proliferative nature of cancer cells. In cancer cells glycolysis frequently is
increased for generation of ATP to meet their energy needs. Also one or more isoforms
of glycolytic enzymes have altered expression patterns or activities in cancer cells. It is
option that enzymatic mutation in the tumor cells could be used as a potential target for
cancer chemotherapy. In the cancer cells are characterized by an over expression of the
pyruvat kinase isoenzyme type M2 (PKM2) which plays a key role in the glycolytic
pathway. PKM2 is a master switch orienting glycolysis to ATP synthesis or to the
production of biosynthetic blocks. For this reason it is an important target for anticancer
treatments. PKM2 inhibitors and activators can be used as chemotherapeutic drug or
combining chemotherapeutic drug to overcome drug resistance. As such, the discovery
of new inhibitors/activators for his enzyme is very significant.
In this study was investigated the effects on PKM2 enzyme activity of 1 7 phenolic
compounds. Inhibition strength of compounds were identified by calculating IC50 and Ki
values for substances that showed inhibition effects on this enzyme activity. IC50 values
were calculated for substances that show activition effects. Enzyme activity was assayed
by converting from NADH to NAD+ using lactate dehydrogenase(LDH) resulting in a
decrease in absorbance at 340 nm.

Key Words: Pyruvat kinase M2 inhibitor, activator, cancer