Caco-2 epitel hücresi ve THP-1 makrofaj hücrelerinin Streptococcus pyogenes ve Escherichia coliye karşı bakterisidal etki, nitrik oksit ve sitokin yanıtlarının araştırılması
Investigation of bactericidal effect, nitric oxide and cytokine responses of Caco-2 epithelial cells and THP-1 macrophage cells against Streptococcus pyogenes and Escherichia coli
Yazar: DERYA BİRİKEN SALIN
Danışman: PROF.DR. SULHİYE YILDIZ
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmasötik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Makrofajlar = Macrophages ; Nitrik oksit = Nitric oxide

Özet:
Epitel hücresi ve makrofajlar doğal immun cevaba hücreler arası iliskiler ve inflamatuvarmediatörlerin salınımı yoluyla katkıda bulunduklarına inanılmaktadır. Bu çalısmada, Caco-2ve THP-1 hücrelerinin ayrı ayrı, birlikte ve temasın engellenmesi durumunda farklımikroorganizmalarla uyarılması sonucu olusan bakterisidal etki, NO ve sitokin üretimininkarsılastırılması amaçlanmıstır. Caco-2 epitel hücresi, THP-1 makrofaj hücresi ayrı ayrı,birlikte ve temasın engellenmesi durumunda 1/1 E/H oranında S. pyogenes'e karsı 5. saattegöstermis olduğu bakterisidal etki yüzdeleri sırası ile %21,96, %27,73, %24,36, %31,83 ve%27,55; yine aynı hücrelerin E. coli'ye karsı 5 saatte göstermis olduğu bakterisidal etkiyüzdeleri sırası ile %36,22, %63,87, %55,68, %30,51 ve %43,65 olarak saptanmıstır. 5. ve 24.saat sonunda epitel ve makrofaj kültür süpernatantlarında NO yanıtında kontrol hücrelerinegöre istatistiksel olarak anlamlı olarak yüksek bulunmustur (p<0,05). Caco-2 epitel hücrelerive THP-1 makrofaj hücreleri invitro kosullarda ayrı ayrı, birlikte ve temasın engellenmesidurumunda 5. ve 24. saatte S. pyogenes'e karsı sitokinlerin seviyelerinde, IL-6 ve TNF-? dahücrelerin birlikte olduğu durumlar dısında farkedilir bir değisiklik olmazken (p>0,05), E. coliile uyarılmıs hücrelerde 5. ve 24. saatte IL-6, IL-8 ve TNF-? seviyelerinde istatistiksel olarakanlamlı bir artıs gözlenmistir (p?0.05). Makrofajın bakterisidal etki ve sitokin yanıtıyönünden epitel hücresine göre daha etkin rol oynadığını ayrıca makrofajla epitelin teması ilebirbirlerini aktive ederek, temasın önlendiği ve tek basına yapılan kültürlere göre daha fazlabir etkiye sahip olduğu saptanmıstır.Anahtar sözcükler: Epitel hücresi, Makrofaj, Bakterisidal etki, Nitrik oksit, IL-6, IL-8, TNF-?, INF-?

Abstract:
Epithelial cells and macrophages cells are believed to contribute to innate immune responseby intercellular communications and secretion of inflammatory mediators. In this study, it wasaimed to compare bactericidal capacity, NO and cytokine production of macrophages andepithelial cells alone, mixed and separated, against different bacteria. We found the meanvalues for bactericidal effects of Caco-2 cells and THP-1 cells alone, mixed and seperated bya filter insert as 21,96%, 27,73%, 24,36%, 31,83%, 27,55% on S. pyogenes and as 36,22%,63,87%, 55,68%, 30,51%, 43,65% on E. coli, respectively. Our results showed a statisticallysignificant increase in NO levels in epithelial and/or macrophage cell culture supernatantscollected after 5 h exposure compared to control cells (p<0.05). When Caco-2 epithelial cellsand THP-1 macrophages were incubated in vitro with S. pyogenes alone, mixed and separatedfor 5 and 24 hours, there were no statistically significant changes in the levels of cytokinesexcept for IL-6 and TNF-? when the cells were mixed (p>0,05). On the other hand, cellswhich were stimulated with E. coli showed statistically higher levels of IL-6, IL-8 and TNF-?at 5 and 24 hours (p?0.05). Macrophages play a more active role than epithelial cells inbactericidal effect and cytokine response. Besides, epithelial cells and macrophages activateeach other when mixed more than alone or separated.Keywords: Epithelial cell, Macrophage, Bactericidal effect, Nitric oxide, IL-6, IL-8, TNF-?,INF-?