Oleuropeinin miktar tayininin gerçekleştirilmesi için kantitatif ince tabaka kromatografisi yönteminin geliştirilmesi
Development of quantitative thin layer chromatography method for quantification of oleuropein
Yazar: İREM DALMAN
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ İSMAİL HAKKI AKGÜN
Ege Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyomühendislik Ana Bilim Dalı / Biyomühendislik Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2024
Konu: Biyomühendislik = Bioengineering

Özet:
Tez çalışması kapsamında kurutulmuş ve öğütülmüş zeytin yapraklarından
elde edilen oleuropeinin kolay ve hızlı bir şekilde miktar tayininin
gerçekleştirilmesi için ince tabaka kromatografisi yönteminin geliştirilmesi
amaçlanmıştır.
Çalışma amacı doğrultusunda zeytin yapraklarının metanol ile ekstraksiyonu
gerçekleştirilmiş ve ardından vakum sıvı kromatografisi ve yarı-preparatif HPLC
yöntemleri kullanılarak oleuropein standardı elde edilmiştir. Elde edilen
oleuropein standardı farklı konsantrasyonlarda hazırlanarak İTK ile kalibrasyon
grafiği oluşturulmuş ve buna göre miktar tayini gerçekleştirilmiştir. Bunun için
örnekler TLC silika jel 60 F254 tabakaya yüklenmiş ve etil asetat:metanol:su
(8:1:0,5) mobil faz bileşiminde yürütüldükten sonra Camag UV kabinde
görüntülenmiştir. Oleuropein miktarının belirlenmesinde ucuz, basit ve hızlı bir
yöntem olarak İTK yönteminin kullanılabilirliğini araştırmak amacıyla, farklı katı
fazlar, solvent bileşimleri, türevlendirme ajanları ve görüntüleme yöntemleri
kullanılarak diğer zeytin metabolitlerinden en yüksek çözünürlükte ayrılması
işlemi gerçekleştirilmiştir. Gerçekleştirdiğimiz çalışmada cep telefonu yardımıyla
oleuropeinin İTK görüntüsü elde edilmiş, ImageJ yazılımı kullanılarak
kalibrasyon grafiği oluşturulmuş, analitik metot geliştirme parametreleri dikkate
alınarak miktar tayini gerçekleştirilmiştir.

Anahtar sözcükler: Oleuropein, İnce tabaka kromatografisi, miktar tayini, doğal ürünler

Abstract:
Within the scope of the thesis study, it was aimed to develop a thin-layer
chromatography method for the easy and rapid quantification of oleuropein
obtained from dried and ground olive leaves.
For the purpose of the study, olive leaves were extracted with methanol and
then the oleuropein standard was obtained using vacuum liquid chromatography
and semi-preparative HPLC methods. The obtained oleuropein standard was
prepared at different concentrations, a calibration chart was created with TLC, and
the amount was determined. For this, the samples were loaded onto a TLC silica
gel 60 F254 layer and imaged in a Camag UV cabine after running in the mobile
phase composition of ethyl acetate:methanol:water (8:1:0.5). In order to
investigate the usability of the TLC method as a cheap, simple, and fast method
for determining the amount of oleuropein, its separation from other olive
metabolites at the highest resolution carried out using different solid phases,
solvent compositions, derivatization agents, and imaging methods. In our study,
the TLC image of oleuropein was obtained with the help of a mobile phone, a
calibration chart was created using ImageJ software, and quantification was
carried out by taking into account the analytical method development parameters.

Keywords: Oleuropein, Thin layer chromatography, quantification, natural products