Oligospermik hastalarda nükleer faktör-kappa ve nükleer faktör-kappa B1 inhibitörünün apoptoz üzerine etkisi
The effect of nuclear factor-kappa and nuclear factor-kappa b1 inhibitor on apoptosis in oligozoospermic patients
Yazar: RAŞİT BURAK TEK
Danışman: PROF. DR. HAMDİ ÖZKARA
İstanbul Üniversitesi / Cerrahpaşa Tıp Fakültesi / Üroloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2015
Konu: Üroloji = Urology

Özet:
Nükleer faktör-kappaB(NF-κB)  ve inhibitörü olan  NF-κB inhibitor(IκB)  ile fertiliteyi etkileyebilen germ hücre apoptozu arasında bir ilişki olduğu bilinmektedir. Her iki molekülün birkaç genetik varyantının çeşitli apoptozla ilişkili hastalıkla bağlantısı göz önüne alınarak, bu çalışmada en sık görülen  NF-κB1 -94ins/delATTG (rs28362491) ve  NF-κBIA 3'UTR A→G (rs696) polimorfizmlerinin oligospermi ve sperm apoptozisi ile bir ilişkisi olabileceği hipotezi üzerinden çalışmamızı şekillendirdik. 
Bu hipotezimizi sorgulamak için 114 idyopatik oligospermik hastanın ve 130  normospermik hastanın kanlarından elde edilen genomik DNA'dan ilgili genler için genotipler PZR-RFLP  yöntemi ile  tespit edildi. 
	Genotip dağılımları istatistiksel olarak değerlendirildiğinde, NF-κB1-94ins/delATTG polimorfizminde ID genotipinın oligospermi riskini 2,4 kat azalttığı görüldü (Bonferroni düzeltmesi p=0.006; 95% güven aralığı =1.34-4.13). Ancak NF-κBIA 3'UTR A→G polimorfizmi ile ilgili değerlendirnede oligospermik ve normospermik grupta alel ve genotip sıklıkları arasında istatistiksel farklılık bulunmadı.
Her iki polimorfizmin (rs28362491/rs696) genotip kombinasyonları da değerlendiridiğinde, oligospermik hastalar ile normospermik hastalar arasında anlamlı bir fark saptanmamıştır. Aynı zamanda TUNEL boyama metodu ile sperm apotoz oranları tespit edildi ve genotip gruplarına göre istastiksel farklılık sorgulandı. Çalışmamızın sonucunda hasta grubunda sperm apoptoz indeksinin yüksek olmasına rağmen her iki polimorfizminde sperm apoptozisi üzerine etkisi gösterilememiştir (p<0.05). Çalışmamızın sonuçlarından NF-κB1 genindeki rs28362491 heterozigotisenin oligospermiye karşı koruyucu bir etkiye sahip olabileceğini ileri sürülebilir.

Abstract:
Nuclear factor-kappaB(NF-κB) activation and its inhibition by NF-κB inhibitor(IkB) have been functionally linked to germ cell apoptosis, which may affect human infertility. We hypothesized a possible relationship between the NF-κB1-94ins/del ATTG (rs28362491) and NF-κB1A 3'UTR A→G (rs696) polymorphism, which are common polymorphisms and the susceptibility to oligospermia in the context of the sperm apoptosis. 
In order to evaluate this association, we studied the polymorphisms and sperm apoptosis rates of 114 men with idiopathic oligospermia, as well as 130 men with normospermic, using PCR-RFLP and TUNEL staining methods, respectively. Univariate analysis revealed that heterozygous ID genotype at the NF-κB1-94ins/del ATTG polymorphism is associated with about 2.4 fold reduced risk for oligospermia (Bonferroni corrected p=0.006, 95% confidential interval=1.34-4.13). However, the genotype and allele frequencies of NF-κB1 3'UTR A→G polymorphism, and the genotype frequencies of all possible rs28362491/rs696 genotype combinations did not show any statistically significant differences between oligospermic and normozoospermic men. Furthermore, both polymorphisms did not appear to affect sperm apoptosis, although the sperm apoptosis index was detected to be significantly higher in the total patients compared with those in the controls (p<0.05). Although this study did not demonstrate an association between NF-κB1 rs28362491 polymorphism and NF-κBIA rs696 polymorphism, and the increased apoptosis in oligospermia, our findings suggested that the heterozygosity of rs28362491 in the NF-κB1 gene may have a protective effect against oligospermia and could modify the susceptibility of oligospermia in a group with idiopathic male infertility in a Turkish population.