Sıçanlarda isoprotrenol ile oluşturulan miyokard infarktüsü modelinde DNA hasarı ve oksidatif stres üzerine lasidipin, ramipril ve valsartan'nın etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effects of lacidipine, ramipril and valsartan on DNA damage and oxidative stress in isoproterenol-induced myocardial infarct model of rats
Yazar: YASİN BAYIR
Danışman: DOÇ. DR. MEVLÜT SAİT KELEŞ
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2008
Konu: Biyokimya = Biochemistry ; Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology

Özet:
Bu çalışmada, lasidipin, ramipril ve valsartan'nın sıçanlarda Isoprotrenolle (ISO) oluşturulan Miyokard İnfarktüsü (MI) modelinde gelişen DNA hasarı ve oksidatif stres üzerine etkileri incelendi. Lasidipin, ramipril ve valsartan sırasıyla 3, 3 ve 30 mg/kg dozlarda oral sonda ile 30 gün boyunca verildi. MI oluşturmak için oral ilaç uygulamalarını takip eden son 2 günde sıçan gruplarına 180 mg/kg dozda ISO 24 saat aralıklarla iki kez subkutan enjeksiyonla verildi. Son ISO uygulamasını takip eden 24. saatte yüksek doz anestezik maddeyle gruptaki tüm ratlar ötanazi edildi. Bu süreç sonunda ratların kanından elde edilen serumlarda MI'nin rutin biyokimya göstergeleri olan Aspartat amino transferaz (AST), Kreatin kinaz (CK), Kreatin kinaz-MB (CK-MB), Troponin I (TnI) ve aynı zamanda Nitrik oksit (NO) ölçüldü. Tam kanda DNA hasarı seviyesi [8-hidroksi guanin (8-OHGua)] belirlendi. MI indikatörleri ile MI belirlendikten sonra ratların kalp dokusu homojenatlarından elde edilen süpernatantlarda katalaz (CAT), süperoksit dismutaz (SOD), miyeloperoksidaz (MPx) aktiviteleri ve glutatyon (GSH), lipit peroksidasyonu (LPO) seviyeleri literatürlere dayalı uygun metotlarla ölçüldü. Bulgular, kontrol grupları ile karşılaştırılarak değerlendirildi. Sağlıklı kontrol grubuna göre ISO uygulanmış kontrol grubunu istatistiksel olarak mukayese ettiğimizde, MI'ın biyokimyasal kardiyak belirteçlerinden AST, CK, CK-MB ve TnI'da artış, NO seviyesinde azalış, 8-OHGua'nın seviyesinde artış, SOD ve CAT aktivitelerinde azalış, MPx aktivitesinde artış, GSH seviyesinde azalış ve LPO seviyesinde artış belirlendi (p<0.05). ISO uygulanmış kontrol grubuna göre ilaç grupları mukayese edildiğinde ilaçların ISO uygulanmasına bağlı gelişen tüm olumsuz değişiklikleri engellediği belirlendi. MI uygulaması yapılamayan sadece ilaç uygulaması yapılan gruplarda ise sağlıklı kontrol gruba göre istatistiksel olarak önemli bir değişiklik belirlenmedi. Lasidipin, ramipril ve valsartanın ISO ile indüklenen MI modelinde kalp doku hasar belirteçlerini düzelttikleri, antioksidan sistem üzerine olumlu etki gösterdikleri ve DNA hasarı göstergesi olan 8-OHGua seviyesini kontrole göre düzelttikleri belirlendi. İlaç grupları arasında ise tüm parametrelerde herhangi bir farklılık belirlenmedi.Sonuç olarak, ISO ile oluşturulan MI modelinde serbest radikallerin üretildiği ve bu radikallerin DNA'ya kadar sıçrayarak hasar verdiği belirlendi. Lasidipin, ramipril ve valsartanın antioksidan savunma sistemini olumlu etkileyerek MI'da bozulan oksidan, antioksidan ve kardiyak enzim parametrelerini düzelttikleri aynı zamanda DNA hasarını azalttıkları belirlendi.

Abstract:
In this study, the effects of lacidipine, ramipril and valsartan on DNA damage and oxidative stress occurred after isoproterenol (ISO)-induced myocardial infarct (MI) were investigated in rats. Lacidipine, ramipril and valsartan were administered by oral gavage at 3, 3 and 30 mg/kg doses, respectively during 30 days. To induce MI, at the last two days of drug administration, 180 mg/kg dose of ISO was administered to rat groups twice in 24 hour intervals via subcutaneous injection. At the 24th hour after the last ISO administration, all rats were euthanatized via high dose anesthetic agent. After this period, routine biochemistry indicators of MI, Aspartate aminotransferase (AST), Creatine kinase (CK), Creatine kinase-MB (CK-MB), Troponine I (TnI) and also Nitric oxide (NO) were measured in the sera obtained from rats? blood. The level of DNA damage [8-hydroxy guanine (8-OHGua)] was determined in whole blood. After MI diagnosis with MI indicators, catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and myeloperoxidase (MPx) activities and glutathione (GSH), and lipid peroxidation (LPO) levels were measured in the supernatants obtained from rats? tissue homogenates in accordance with the present literatures. Results were evaluated by comparing with those of the control groups. When we compare ISO-induced MI control group with the healthy group, increases in the biochemical cardiac MI indicators (AST, CK, CK-MB, TnI), decreases in NO level, increases in 8-OHGua level, decreases in SOD and CAT activities, increases in MPx activities, decreases in GSH level and increases in LPO level were determined (p<0.05). When we compared the drug groups with the ISO-administered control group, the drugs were determined to prevent all negative effects related to ISO application. There was no significant difference in the rat groups which received drugs without MI induction in comparison to healthy rat group. We observed that lacidipine, ramipril and valsartan improved heart tissue damage indicators, exerted positive effects on antioxidant system, and improved the level of 8-OHGua level, the indicator of DNA damage in ISO-induced MI model when compared to control group. There was no difference in none of the parameters of the drug groups when compared each other.In conclusion, it was determined that reactive oxygen species were produced after ISO-induced MI model and these radicals damaged even DNA. Lacidipine, ramipril and valsartan were determined to improve the antioxidant and cardiac enzyme parameters which impaired after MI, and decrease DNA damage by affecting antioxidant defense system positively.