Koyun ve farelerde kist hidatik proteinlerinin karşılaştırmalı analizi ve antijenik proteinlerde glikoprotein varlığının değerlendirilmesi
Comparative analysis of sheep and mice hydatid cyst proteins and evaluation of the glycoprotein occurence in the antigenic proteins
Yazar: SERAP ÜNÜBOL AYPAK
Danışman: DOÇ.DR. HAMDİ UYSAL
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Biyokimya = Biochemistry ; Parazitoloji = Parasitology
Dizin: Koyunlar = Sheep

Özet:
Hidatik kist hastalıgı, Echinococcus cinsine baglı türler tarafından olusturulan, insanve hayvan saglıgına verdigi önemli zararların yanı sıra sebep oldugu ekonomikkayıplar nedeniyle de güncelligini ve önemini koruyan paraziter bir zoonotikhastalıktır.Bu çalısmada koyun ve farelerde kist hidatik proteinlerinin, antijenik proteinler veantijenik glikoproteinler yönünden karsılastırılması amaçlanmıstır. Bu amaçla 20'seradet enfekte ve 10'ar adet saglıklı koyun ve fare kullanıldı. Hidatidosisli koyunlardanve deneysel enfekte farelerden elde edilen kist sıvısı, kist membranı veprotoskolekslere ait proteinler SDS-PAGE yöntemi ile ayırt edildi. Ayırt edilenproteinlerden hangilerinin hastalıga spesifik antijenler içerdigi (hastalık pozitifserumlar kullanılarak) immunblotting teknigi ile belirlendi. Koyun kist sıvısı, membranve protoskolekslerde 116 kDa ile 26 kDa arasında, fare kist sıvısı ve membranlarında106 ile 30 kDa arasında degisik sayılarda antijenik bantlar tespit edildi. Koyun kistsıvısı ile fare kist sıvısı arasındaki ortak antijenik bantların 40 ve 26 kDa, koyun kistmebranı ile fare kist mebranı arasındaki ortak antijenik bantların 48 ve 40 kDa oldugubelirlendi. Belirlenen antijenik proteinlerden, glikoprotein yapı-sında olanlar vebunların hangi sekerleri bulundurdukları ``Dig-Glycan Detection ve Dig-GlycanDifferentiation kitleri'' ile belirlenmistir. Koyunlarda her üç kist materyalinde de (kistsıvısı, kist membranı, protoskoleks) 116, 68, 48 kDa'luk proteinlerin, farelerde her ikikist materyalinde de (kist sıvısı, kist membranı) 106, 48 ve 40 kDa'luk proteinlerinortak glikoproteinler oldugu tespit edilmistir. Bu glikoproteinlerin mannoz, galaktoz, Nasetilgalaktozamin, sialik asit gibi sekerlerden bir yada bir kaçını içerdikleribelirlenmistir.Koyun ve farelerin kist sıvısı ve kist membranı açısından yapılan genelkarsılastırmasında ortak bantların, molekül büyüklügü, glikoprotein varlıgı ve sekeryapıları yönünden benzerlikler ve farklılıklar gösterdigi görülmüstür.Anahtar sözcükler: antijenik protein, fare, glikoprotein koyun, kist hidatik

Abstract:
Hydatid cyst disease (Hydatidosis) is a parasitic disease which is formed byEchinococcus genus belonging species and it is important and gives serious harmson human and animal health as well as its economic losses.The aim of this study is to compare the hydatid cyst proteins of mice andsheep in terms of antigenic proteins and antigenic glycoproteins. For this reason 20each infected sheep and mice and 10 each healthy sheep and mice were used. Cystfluid, cyst membrane and proteins from protoscolex which were derived fromhydatidosis infected sheeps and experimentaly infected mice were separated bySDS-PAGE. Antigenic proteins were determined by immunblotting technique.Moleculer weights of antigenic proteins from cyst fluid, cyst membrane andprotoscolex of sheep were determined in size between 116 kDa and 26 kDa by SDSPAGE.In mice cyst fluid and cyst membrane, molecular weights of antigenic proteinswere found between 106 kDa and 30kDa. Common antigenic bands of hydatid fluidfrom sheep and mice were found to be 40 and 26 kDa. Common antigenic bands ofhydatid membrane from sheep and mice found to be 48 and 40 kDa. Sugars ofantigenic proteins in glycoprotein structure were determined by Dig-Glycan detectionand Dig-Glycan differentiation kits. Glycan Analysis of samples showed that 116, 68and 48 kDa proteins in each three cyst material (cyst fluid, cyst membrane andprotoscolex) obtained from sheep were found to be common glycoproteins. Inaddition to this, 106 , 48 and 40 kDa proteins in each two cyst material (cyst fluid,cyst membrane) obtained from mice were also found to be common glycoproteins. Itwas determined that these glycoproteins include one or more sugar structures suchas mannose, galactose, N-acetyl galactosamine and sialic acid.In the context of sheep and mice cyst fluid and cyst membrane comparison, itwas determined that common proteins shows similarities and dissimilarities inmolecular weight, glycoprotein and sugar structures in general.Key words: antigenic protein, cyst hydatid, glycoprotein, mice, sheep