Safra yolu obstruksiyonuna bağlı hepatik fbroziste ozon tedavisinin rolü
Effect of ozone in experimental obstructive jaundice
Yazar: OSMAN HAKAN KOCAMAN
Danışman: DOÇ. DR. FERYAL GÜN
İstanbul Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Çocuk Cerrahisi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2013
Konu: Çocuk Cerrahisi = Pediatric Surgery
Dizin: Kolestaz = Cholestasis ; Kolestaz-ekstrahepatik = Cholestasis-extrahepatic ; Ozon = Ozone ; Safra kanal hastalıkları = Bile duct diseases ; Safra kanalları = Bile ducts ; Tedavi = Treatment

Özet:
Yenidoğan sarılığı dışında çocukluk çağında görülen sarılıkların önemli bir bölümü tıkanma sarılıklarıdır. Tıkanma sarılığında gelişen hepatik hasarın patogenezini açıklamaya çalışan birçok teori vardır. Safra yolu obstrüksiyonlarında reaktif oksijen radikallerinin hepatik hasarda önemli rolü olduğu gösterilmiştir. Medikal ozon uygulamasının nitrik oksit (NO) düzeyinde artış ve iskemik alanlarda vazodilatasyona neden olarak hipokside azalma, süperoksit dismutaz (SOD) aktivasyonu ve glutatyon seviyesinde azalma sonucu oksidatif stresi azalttığı gösterilmitir. Bu deneysel çalımada safra yolu obstruksiyonuna bağlı hepatik fibroziste ozon tedavisinin rolü araştırılmıştır. Her grupta 7 sıçan olmak üzere toplam 21 adet erkek Sprague-Dawley sıçan kullanıldı. Deney grubuna laparotomi yapılıp koledok kanalı bağlandıktan sonra 21 gün boyunca 1 mg/kg dozda, 50 ?g/ml konsantrasyonda rektal ozon uygulaması yapıldı. Kontrol grubuna laparotomi yapılıp koledok kanalı bağlandıktan sonra herhangi bir tedavi verilmedi. Sham grubuna ise sadece laparotomi yapılıp karın içi 1cc serum fizyolojik ile yıkandı. Tüm hayvanlar post operatif 21.günde relaparotomi yapılarak histopatolojik değerlendirme için karaciğer doku örneği ve karaciğer fonksiyon testleri için intrakardiyak kan örneği alındı. Çalışmamızda AST, ALT, total bilurubin ve direk bilirubin değerlerinde düşüş saptamakla beraber deney ve kontrol grupları karşılatırıldığında sadece total bilirubin seviyesinde anlamlı azalma saptadık. Sıçan karaciğerlerinin histopatolojik incelenmesinde hepatik fibrozisin ve periportal inflamasyonun deney grubunda daha düşük olduunu saptadık. Kontrol grubundaki sıçanların
%57,1?inde inkomplet siroz saptanırken, deney grubunda siroza rastlanmadı. Deney grubundaki 7 sıçanın 3?ünde periportal inflamasyon varken kontrol grubundaki sıçanların hepsinde periportal inflamasyon saptandı. İmmunohistokimyasal olarak kontrol grubunda vasküler düz kas hücrelerinde, sinüzoidlerde, fibrotik septalar ve prolifere safra duktuslarında a-SMA ile pozitif reaksiyon izlenmiştir. Ozon verilen grupta pozitif a-SMA reaksiyonunda
belirgin azalma olduğu saptandı. Çalışmamızda ozonun tıkanma sarılığı modelinde karaciğer harabiyetini gösteren AST, ALP, total bilirubin ve direk bilirubin değerlerinde düşüş; hepatik fibrozisi, periportal inflamasyonu ve hepatik stellat hücrelerin a-SMA ile pozitif reaksiyonunu azalttığını saptadık. Ancak ozonun klinik kullanımı için daha fazla sayıda sıçanla çalışma yapılması gerekmektedir.

Abstract:
As a surgical point of view, a significant portion of childhood jaundice is obstructive. There are may different theories trying to explain hepatic damage pathogenesis caused by extrahepatic cholestasis. Reactive oxygen radicals have been shown to play an important role in hepatic damage in bile duct obstructions. Medical ozone application has been shown to raise nitric oxide (NO) levels and cause an increase in hypoxic vasodilation in ischemic areas. That in turn causes a decrease in hipoxide and oxidative stress related to reduced levels of glutathione and an activation of superoxide dismutase (SOD). In this experimental study we investigated the role of ozone therapy in hepatic fibrosis caused by biliary obstruction. A total of 21 male Sprague-Dawley rats, seven rats in each group were used. In the experimental group after common bile duct ligated by laparotomy, 1 mg / kg dose, 50 mg / ml concentration of ozone was applied rectally for 21 days. In the control group, no treatment was given after the binding of common bile duct with laparotomy. In the sham group, only laparotomy was performed and intraperitoneal cavity is washed with 1 cc of saline. Hepatic tissue sample and intra-cardiac blood samples were collected from all animals at post-op 21st day with relaparatomy. In our study, we detected a decrease in AST, ALT, total bilirubin and direct bilirubin levels however when we compared the experiment and control groups, we found a value of p = 0.025 in Mann-Whitney U-test with Bonferroni
correction which is close to the limit of significance of p<0,0167. Histopathological examination of hepatic fibrosis and inflammation in the livers of rats in the experimental group was lower than periportal lesions. In the control group incomplete cirrhosis was detected in 57.1% of the rats, when in the experimental group no cirrhosis was detected. Periportal inflammation was seen in 42.9% of the in the experiment group and 100% in the control group. In control group a positive reaction was observed with a-SMA in vascular smooth muscle cells sinusoids, fibrotic septa and proliferating bile ducts immunohistochemically. A significant decrease in positive -SMA- reaction was
observed in ozone-treated group. We suggest that ozone can decrease the hepatic destruction levels in biliary diseases such as biliary atresia, bile duct cyst, primary biliary cirrhosis, cholangitis resulting in hepatic fibrosis and delay liver transplantation. However, for clinical use and for significant results, more studies should be performed.