Meme kanserlerinde CLCA4 ekspresyonunun prognostik parametreler ve sağkalım ile ilişkisinin araştırılması
Investigating the relationship CLCA4 expression and prognostic and survival in  breast canser patients
Yazar: RAMAZAN ARSLAN
Danışman: DOÇ. DR. İLKNUR ÇALIK
Fırat Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Tıbbi Patoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Patoloji = Pathology
Dizin: Gen ifadesi = Gene expression ; Meme hastalıkları = Breast diseases ; Meme neoplazmları = Breast neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Prognoz = Prognosis ; Sağkalım = Survival

Özet:
Meme kanserleri kadınlarda 2020 verilerine göre dünyada ve Türkiye'de en fazla görülen kanserdir. Kadınlarda kansere bağlı ölümlerin %15'ni oluşturmaktadır. Son yıllarda görüntüleme ve tarama sistemlerinin gelişmesi ve hedefe yönelik moleküler tedavilerin gelişmesi ile mortalitede düşüş görülmektedir. 
Meme kanseri prognozunu etkileyen birçok faktör bulunmaktadır. Bu föktörlerin başlıcaları yaş, tümör boyutu, histolojik grade, tümörün histolojik tipi, hormon reseptör durumu, lenfovasküler invazyon, lenf nodu metastazı ve uzak organ metastazıdır.
Kalsiyum ile active klorür kanalı düzenleyicileri (CLCA) amino grubunun uç kuyruğunda simetrik homosistein motifine sahip proteinlerdir. CLCA proteinleri epitel hücrelerinde klorür etkinliğinde önemli rol oynarlar. Epitelden mezenkimal geçiş (EMT), epitel hücrelerinin hücre-hücre bağlantılarını aşaği reğüle ettiği, iğsi hücre morfolojisi kazandığı ve hücresel hareketlilik sergilediği gelişimsel bir programdır. Meme kanserinde EMT çevre dokulara invazyonu kolaylaştırır, kanser metastazı ve nüks ile yakından ilişkili olduğu düşünülmektedir. CLCA4' ün PI3K/ATK sinyal yolaği ile epitelden mezenkimal geçişi baskılayarak hücre göçünü ve metastazı inhibe ettiği düşünülmektedir.
Çalişmamıza Fırat Üniversitesi hastanesi Tıbbi Patoloji Anabilim Dalı Laboratuvarı'na Ocak 2010-Haziran 2016 Yılları arasında gönderilmiş mastektomi materyallerinde invaziv meme karsinomu-NOS (invaziv ductal karsinom) tanısı alan 90, invaziv lobüler karsinom tanısı alan 30 ve mikst meme karsinomu tanısı alan 30 olmak üzere toplamda 150 olgu alınmıştır. Bu olgular içinde tümör dışı alanlarında yeterli meme dokusu bulunan 10 olgudan da kontrol dokusu seçilmiştir. Hastalara ait yaş, aksiller lenf nodu metastazı, tümör çapı, bloom richarddson skor ve sağ kalım durumlarının dijital arşivleme sisteminden ulaşıldı. Seçilen olgulara ait parafin bloklardan yapılan kesitlere immünhistokimyasal CLCA4 boyası uygulandı. CLCA4 immün skoru ve diğer prognostik değerler istatiksel olarak karşilaştrıldı.
Gruplar arasında CLCA4 İmmün skoru açısından anlamlı farklılık görülmüştür (p<0,001). Normal meme dokuları ile tümör alanları arasında immün skorda anlamlı farklılıklar izlenmiş olup normal dokuda daha yüksek eksprese edildiği görülmüştür. CLCA4 skoru ile tümör çapı arasında negatif yönde anlamlı bir korelasyon tespit edilmiştir. Ölmüş olanların CLCA-4 İmmün skor sonucu (p=0,005) ve takip süresi (p<0,001) sağ olanlardan anlamlı şekilde düşük bulunmuştur. CLCA4 skoru ile diğer prognostik faktörler arasında anlamlı ilişki bulunmamiştir. 
Sonuç olarak CLCA4'ün ekspresyonunun azalmasının EMT'yi aktive ettiği ve tümör yayılımının arttığını gözlemledik. Bu çalışma tümör çapı ve sağ kalım ile negatif korelasyon göstermesi prognozda etkin bir belirteç olabileceğini ve çoklu değişkenli yapılan sağ kalım analizlerine katkı sağlayabileceğini göstermiştir.

Abstract:
Breast cancer is the most common cancer in women in the world and in Turkey, according to 2020 data. It accounts for 15% of cancer-related deaths in women. In recent years, because of development of imaging and scanning systems and targeted molecular therapies, decrease in mortality is observed. There are many factors that affect the prognosis of breast cancer. The main ones of these factors are age, tumor size, histological grade, histological type of tumor, hormone receptor status, lymphovascular invasion, lymph node metastasis, and distant organ metastasis. Calcium-activated chloride channel (CLCA) is protein that have a symmetrical homocysteine motif in the terminal tail of the amino group. CLCA proteins play an important role in chloride effectiveness in epithelial cells. Epithelial-to-mesenchymal transition (EMT) is developmental program that down-regulates cell-cell connections, acquires spindle cell morphology and exhibits cellular mobility. EMT in breast cancer facilitates invasion of surrounding tissues and also is thought to be closely related to cancer metastasis and recurrence. CLCA4 is thought to inhibit cell migration and invasion by suppressing mesenchymal transition from epithelium via PI3K/ATK signaling pathway.
Our study includes 150 cases that 90 cases diagnosed with invasive breast carcinoma-NOS (invasive ductal carcinoma), 30 case diagnosed with invasive lobular carcinoma, 30 cases diagnosed with mixed breast cancer in mastectomy materials sent to Fırat University Hospital Medical Pathology Department Laboratory between January 2010-June 2016. Control tissues is chosen from 10 cases among these 150 cases with sufficient breast tissue in non-tumor areas. Age of the patients, axillary lymph node metastasis, tumor diameter, bloom Richardson score and survival status were accessed from the digital archiving system. Immunohistochemical CLCA4 staining was applied to the sections made from selected paraffin blocks. CLCA4 immune score and other prognostic values were compared statistically. There was a significant difference between CLCA4 immune score of the groups (p<0.001). Significant differences in immune score were observed between normal breast tissues and tumor areas and it was found to be expressed higher in normal tissue. A negative significant correlation was found between CLCA-4 scores and tumor diameter. In dead patients, CLCA4 immune score (p=0.005) and follow-up time (p<0.001) were significantly lower than survived patients. Significant correlation is not found between CLCA4 score and other prognostic factors. 
In conclusion; we observed that decreased expression of CLCA4, activates EMT and increases tumor diffusion. This study proved that CLCA4 may be an effective predictor of prognosis and multivariate survival analysis because of negative correlations of tumor diameter and survival.