Sıçanlarda pentilentetrazol ile oluşturulan deneysel epilepsi modelinde vetiver bitkisinin (vetiveria zizanioides) etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of vetiver plant (vetiveria zizanioides) in an experimental model of epilepsy induced with pentylenetetrazole in rats
Yazar: GURBET PINAR POLAT
Danışman: PROF. DR. NURHAN GÜMRAL
Süleyman Demirel Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Fizyoloji = Physiology
Dizin: Epilepsi = Epilepsy ; GABA = GABA ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Pentilentetrazol = Pentylenetetrazole ; Reseptörler-GABA = Receptors-GABA ; Sıçanlar = Rats ; Vetiveria zizanioides = Vetiveria zizanioides

Özet:
Epilepsi dünyada %1 prevelansa sahip olduğu öngörülen, yaygın ve ciddi nörolojik bir bozukluktur. Vetiver bitkisinin, antioksidan ve antiepileptik olduğu bilinmektedir. Çalışmamızda pentilentetrazol (PTZ) uygulanarak epilepsi oluşturulan sıçanların kan, serebral korteks ve hipokampusunda olası hasarları ve vetiver yağının etkilerini araştırmayı amaçladık.
Sıçanlar; kontrol, PTZ, VET-200 ve VET-400 olarak dört gruba ayrıldı. Kontrol grubu sıçanlara 7 gün boyunca 1 ml/kg salin solüsyonu oral olarak verildi, 8. gün PTZ miktarına eş değer salin solüsyonu i.p. olarak uygulandı. PTZ grubu sıçanlara 7 gün boyunca 1 ml/kg salin solüsyonu oral olarak verildi, 8. gün tek doz PTZ 60 mg/kg i.p. olarak uygulandı. VET-200 ve VET-400 grubundaki sıçanlara vetiver yağı 7 gün boyunca sırasıyla 200 mg/kg ve 400 mg/kg oral olarak verildi, 8. gün tek doz PTZ 60 mg/kg i.p. olarak uygulandı. Nöbet latans süreleri kaydedildi ve skorlama yapıldı. Daha sonra anestezi altında EEG kayıtları alındı. Sıçanlar dekapite edilerek serebral korteks, hipokampus ve kan örnekleri alındı. TAS, TOS, OSİ bakımından biyokimyasal analizler yapıldı. Beyin ve hipokampus dokuları histopatolojik ve immunhistokimyasal olarak incendi. 
VET-200 ve VET-400 grupları latans süreleri bakımından PTZ grubuyla karşılaştırıldığında, VET-200 grubunda azalma görüldü (p<0,05). VET-400 grubundaki hayvanların Racini skorlaması PTZ grubuna göre anlamlı biçimde düşük, EEG bulgularına göre ilk epileptik spike (İES) gecikme süreleri anlamlı olarak yüksek bulundu. Hem VET-200 hem de VET-400 gruplarında toplam epileptik spike sayısı PTZ grubuna göre anlamlı olarak azaldı (p<0,05).
 VET-200 grubunda PTZ grubuna göre hem serebral kortekste hem de serumda TAS değerlerinde anlamlı artış gözlemlenirken, VET-400 grubundaki sıçanların sadece serumunda TAS değeri bakımından anlamlı artış gözlemlendi. Her iki grubun TOS ve OSİ değerlerinde ise anlamlı derecede azalma görüldü (p<0,05).
PTZ grubuna göre VET-200 ve VET-400 gruplarında; serebral korteks ve hipokampus dokularının histopatolojik incelemelesi sonucu hasar belirtilerinin azaldığı,  siklin B1, GABAA reseptör, Bcl-2, TUNEL pozitif hücre sayısı bakımından immuno ekspresyonların azaldığı, beta tubulin immuno ekspresyonlarının da arttığı saptandı (p<0,001).
Sonuç olarak, hem VET-200 hem de VET-400 grubuna ait değerlerin kontrol grubuna yaklaşma eğiliminde olduğu görülmektedir. Nöbet şiddetini azaltmada ve nöbetin başlama süresini geciktirmede VET-400'ün daha etkili olduğu gözlendi.

Abstract:
Epilepsy is a common and serious neurological disorder with a prevalence of 1% worldwide. Vetiver plant is known to be antioxidant and antiepileptic. In our study, we aimed to investigate possible damage to the blood, cerebral cortex and hippocampus of rats with epilepsy by the application of pentylenetetrazole (PTZ) and the effects of vetiver oil.
Rats; divided into four groups as control, PTZ, VET-200 and VET-400. Control group rats were given 1 ml/kg saline solution orally for 7 days, saline solution equivalent to PTZ amount was given i.p. on the 8th day. PTZ group rats were given 1 ml/kg saline solution orally for 7 days, on the 8th day a single dose of PTZ was applied as 60 mg/kg i.p. Vetiver oil was given orally 200 mg/kg and 400 mg/kg for 7 days to rats in VET-200 and VET-400 groups, respectively, on the 8th day a single dose of PTZ was applied as 60 mg/kg i.p. Seizure latency times were recorded and scored. Then, EEG recordings were taken under anesthesia. The rats were decapitated and their cerebral cortex, hippocampus and blood samples were taken. Biochemical analyzes were performed in terms of TAS, TOS, and OSI. Brain and hippocampus tissues were examined histopathologically and immunohistochemically.
When the VET-200 and VET-400 groups were compared with the PTZ group in terms of latency times, a decrease was observed in the VET-200 group (p<0.05). Racini scoring of the animals in the VET-400 group was significantly lower than in the PTZ group, and the latency of the first epileptic spike (IES) according to the EEG findings was found to be significantly higher. The total number of epileptic spikes was significantly decreased in both VET-200 and VET-400 groups compared to the PTZ group (p<0.05).
While a significant increase was observed in TAS values in both the cerebral cortex and serum in the VET-200 group compared to the PTZ group, a significant increase was observed in the TAS value only in the serum of the rats in the VET-400 group. A significant decrease was observed in TOS and OSI values of both groups (p<0.05).
According to the PTZ group, in VET-200 and VET-400 groups; as a result of the histopathological examination of the cerebral cortex and hippocampus tissues, it was determined that the signs of damage decreased, immuno-expressions decreased in terms of cyclin B1, GABAA receptor, Bcl-2, TUNEL positive cells, and beta-tubulin immuno-expressions increased (p<0.001).
As a result, it is seen that the values of both VET-200 and VET-400 groups tend to approach the control group. VET-400 was observed to be more effective in reducing the severity of the seizure and delaying the onset of the seizure.