4-amino-3,5-dimetil pirazol den türeyen bazı tiyoüre bileşiklerinin in vivo metabolizması
In vivo metabolism of some thioureas compounds from 4-amino-3,5 dimethyl pyrazole
Yazar: UFUK YILMAZ
Danışman: DOÇ.DR. BEDİA KAYMAKÇIOĞLU
Marmara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmasötik Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology

Özet:
Tiyoüre türevleri son yıllarda gösterdikleri antitüberküler, antibakteriyel,antifungal, anti HIV, antihipertansif ve özellikle antikonvulsan gibi önemli biyolojikaktiviteler nedeniyle dikkat çekmektedirler. Ancak çok sayıda biyolojik aktiviteçalısması olmasına ragmen bu bilesiklerin metabolizmaları ile ilgili yayınlar oldukça azsayıdadır. Bu nedenle daha önce tarafımızdan sentezlenen ve antikonvulsan aktivitegösteren N-fenil?N'-(3,5-dimetilpirazol-4-il)tiyoüre üzerinde in vivo metabolizmaçalısması yapılmıstır. Bu arastırmada substratın plazmada büyük ölçüde degismedenkaldıgı tespit edilmistir. Ayrıca düsük konsantrasyonda bilinmeyen iki metabolit dahasaptanmıstır. Bu çalısmada aromatik halka üzerinde sübstitüent tasıyan tiyoürebilesikleri seçilerek in vivo metabolizma yolları ayrıntılı olarak incelenmistir.Substratlar, N-(4-fluoro/klorofenil)?N'-(1,3,5-trimetilpirazol-4-il)tiyoüre (T2 veT3) ve ilgili metabolitleri sentez edilerek yapı tayinleri elemental ve spektral analizlerile yapılmıstır. Substratlar %5'lik arap zamkında çözülmüs ve sıçanlara 100 mg/kg dozve 0.1 ml hacimde olacak sekilde intraperitonal olarak uygulanmıstır. Kan örneklerisubstrat verilmeden ve verildikten sonra 30 dakika, 1., 2., 4., 8., 12. ve 24. saatlerdealınmıstır. Substrat ve ilgili metabolitlerinin kromatografik ayrımları Hichromchromasil C18 kolonda yapılmıstır. En uygun mobil faz bilesimi metanol ve suyundegisik oranlardaki karısımlarında saglanmıstır. Tiyoüre bilesiklerinin metabolizmaçalısmalarında N-dealkilasyon metabolitleri olan N-(4-fluoro/klorofenil?N'-(3,5-dimetilpirazol-4-il)tiyoüre (T1 ve T4) ve plazmada degismeden kalan substrat (T2 veT3) referans standartları ile kıyaslanarak HPLC-UV/DAD ile tespit edilmistir. Ayrıcaplazmada desülfürasyon metabolitleri saptanmamıstır. Bu bulgular farmakolojik aktifolan tiyoüre fonksiyonel grubunun desülfürasyon ile üreye dönüsmeyerek degismedenplazmada kaldıgını kanıtlamıstır.Anahtar kelimeler: 4-amino-3,5-dimetil pirazol, tiyoüre, in vivo metabolizma.

Abstract:
Thiourea derivatives have attracted attention during the last decades due to theirsignificant biological activities as antitubercular, antibacterial, antifungal, anti-HIV-I,antihypertensive as well as good anticonvulsant properties. However among numerousstudies, there are very few concerning the metabolism of thioureas. We thereforeinvestigated the in vivo metabolism of N-phenyl-N'-(3,5-dimethylpyrazole-4-yl)thioureaas potent anticonvulsant. In this investigation, the previous results had showed that thesubstrate was metabolized largely unchanged in the plasma. Only two unknownmetabolites were determined with low concentration. So we choosed the bearingsubstituted phenyl ring at thiourea compounds and in vivo metabolism pathway wasstudied in details in this study.Substrates, N-(4-fluoro/chlorophenyl)-N'-(1,3,5-trimethylpyrazole-4-yl)thioureas(T2 and T3), and their possible metabolites were synthesized and the structures of thecompounds were elucidated by spectral and elemental analysis. Substrates weredissolved in 5% gum arabica and administered intraperitoneally at 100 mg/kg doses inapproximately 0.1 ml volume. Blood samples were withdrawn before and 30 min, 1., 2.,4., 8., 12. and 24. h after dosing. Chromatographic separation of substrate and itsmetabolites were performed using a Hichrom chromasil C18 column (150 mm x 4.6 mmi.d., 5?m particle size), made of stainless steel. The optimal composition of the mobilphase was achieved by different mixtures of pure methanol and water. From thebiotransformation of these thiourea compounds, N-dealkylation metabolites N-(4-fluoro/chlorophenyl)-N'-(3,5-dimethylpyrazole-4-yl)thioureas (T1 and T4) wereidentified together with unchanged substrate (T2 and T3) in plasma by comparing theirto reference standards by HPLC-UV/DAD. Furthermore the desulfuration metaboliteswere not determined in plasma samples. These results proved that pharmacologicalactive of thiourea functional group was unchanged in plasma due to not desulfuration tourea group.Key words: 4-amino-3,5-dimethyl pyrazole, thiourea, in vivo metabolism.