Endotoksemide ADMA, L-Arginin, NO seviyeleri ve Arginaz aktivitesi ilişkilerinin karaciğer ve böbrekte incelenerek karşılaştırılması
The comparition of relationships of ADMA, L-Arginine, NO levels and Arginase activity in kidney and liver in endotoxemia
Yazar: NİHAL ŞAHİN
Danışman: PROF. DR. NURTEN TÜRKÖZKAN
Gazi Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2009
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: ADMA = ADMA ; Arjinaz = Arginase ; Arjinin = Arginine ; Böbrek = Kidney ; Endotoksinler = Endotoxins ; Karaciğer = Liver ; Kromatografi-yüksek basınçlı-sıvı = Chromatography-high pressure-liquid ; Nitrik oksit = Nitric oxide

Özet:
Bu çalışmada endotoksin verdikten sonraki 6. saatte kobaylarda, karaciğer ve böbrekteki arjinin-NO yolunun yanısıra arjinin-ADMA yolunun ve her ikisinin ilişkisini ve ayrıca bu iki yolun merkezi olarak regülasyonundan sorumlu tutulabilecek arjinin miktarı ve arjinaz aktivitesi ölçülerek, bulunan sonuçlar her iki dokuda karşılaştırıldı.Bu amaçla her bir grupta 10 adet olacak şekilde 2 ayrı kobay grubu oluşturuldu. Endotoksemi grubuna 4 mg/kg endotoksin ( E. Coli 0111:B4 suşu ), kontrol grubuna da aynı miktarda serum fizyolojik intraperitoneal olarak enjekte edildi. Uygulamadan 6 saat sonra her 2 grubun karaciğer ve böbrek dokuları alınarak , total protein , nitrit, nitrat miktarı ve arjinaz aktivitesi spektrofotometre ile ; L-arjinin ve ADMA seviyeleri HPLC metodu ile ölçüldü.Çalışmamızın sonucunda endotoksemide karaciğerde; ADMA (p<0,05) ve arjininin (p<0,05) azaldığını, arjinaz aktivitesinin (p<0,05) ve NOx'in (p<0,05) arttığını, böbrekte; ADMA (p<0,05) ve arjinaz (p<0,05) aktivitesinin arttığını, NOx'in (p<0,05) azaldığını, arjininin (p>0,05) ise anlamlı olmasa da hafif artışını tespit ettik.Çalışmamızın sonuçları 4 mg/kg endotoksin verildikten sonraki 6. saatte arjinin-NO, arjinin-ADMA yolunun ve arjinaz aktivitesinin endotoksemi aracılıklı karaciğer ve böbrek dokusu bozukluklarında önemli bir faktör olduğunu göstermiştir. arjinin ?NO, arjinin-ADMA yollarında gözlenen değişimler birbirine terstir. Endotoksemiden sonra ADMA karaciğerde azalıp NO artarken, böbrekte ADMA artmış ve NO azalmıştır. Bunun bu iki dokunun fonksiyon farklılıklarından ve bu parametreleri etkileyen faktörlerin bir sonucu olduğunu düşünüyoruz. Ancak kesin olan bulgu doku arjinin miktarının arjinin-NO ve arjinin-ADMA yollarının her ikisinin regülasyonunda merkezi bir rol oynamasıdır. Ayrıca arjinaz aktivitesi içinde arjinin gereklidir. Arjinaz her iki dokuda artış göstermiş ancak bu artış 6. saatte böbrekte karaciğere göre daha yüksektir. Bunun da arjinaz enziminin endotoksemide karaciğer ve böbrek için farklı fonksiyonlara sahip olmasından kaynaklandığını düşünüyoruz.

Abstract:
The aim of this study was to investigate the relation between arginine-NO and arginine ?ADMA pathways in the kidney and the liver in guinea pigs 6 hours after the administration of endotoxin, to measure the amount of arginine and arginase activity which may be responsible for the central regulation of this pathway and to compare the results between kidney and liver.With this aim, 2 different groups of guinea pigs were formed with 10 subjects in each group. Endotoxemia group was administered 4mg/kg (E. Coli 0111:B4 type) and control group was administered the same amount of serum physiological intraperitoneally. 6 hours after administration, kidney and liver tsissues of both groups were removed and total protein, nitrite, nitrate amount and arginase activities were measured with spectrophotometer and L-arginine and ADMA levels with HPLC method.In the result of our study, it was established that, ADMA (p<0,05) and arginine (p<0,05) decreased and arginase activity (p<0,05) and NOx (p<0,05) increased in the liver and ADMA (p<0,05) and arginase activity (p<0,05) increased, NOx (p<0,05) decreased and arginine (p>0,05) increased,if not significantly, in the kidney, in endotoxemia.The findings of our study demonstrated that arginine-NO, arginine- ADMA pathway and arginase activity at 6 hours after the administration of 4mg/kg endotoxin is an important factor in endotoxin mediated liver and kidney tissue impairment. The changes observed in arginine-NO and arginine-ADMA pathways are opposite of each other. After endotoxemia, ADMA decreased and NO increased in the liver whereas ADMA increased and NO decreased in the kidney. We believe that this is the result of the functional differences in these tissues and factors influencing these parameters. However, definite finding is that arginine plays a central role in the relation between NO and ADMA formation in both tissues. In addition, arginine is necessary for arginase acivity as well. Arginase increased in both tissues, but this increase was higher in the kidney than in liver at 6 hıour. This may result from the different functions arginase enzyme may have for kidney and liver in endotoxemia.