Meme kanserli hastalarda GGT5 ve GGT7 ekspresyonlarının incelenmesi
Investigation of GGT5 and GGT7 expressions in breast cancer patients
Yazar: DİLEK GÜNGÖR
Danışman: PROF. DR. SEVGİ AKAYDIN
Gazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2018
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Gama glutamil transferaz = Gamma glutamyl transferase ; Gen ifadesi = Gene expression ; Genler = Genes ; Kanser hastaları = Cancer patients ; Meme neoplazmları = Breast neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms

Özet:
Gama-glutamiltransferaz (GGT) düzeylerinde yükselme olan bireylerde meme kanseri riskinde artış olduğu bildirilmiştir. Genom araştırmaları, GGT1'in yanı sıra, insan genomunun ek ilgili genler veya diziler içerdiğini göstermiştir. Amino asit dizileri açısından, GGT1'e önemli benzerlik gösteren genler (GGT5 ve GGT7) tanımlanmıştır. Bu çalışmanın amacı, meme kanserinin moleküler alt tiplerinde GGT5 ve GGT7 gen ekspresyonlarını değerlendirmektir. Bu amaçla, meme kanseri tanısı konmuş 58 hastadan meme dokusu örnekleri alındı. Bu hastalar, östrojen reseptörü (ER), progesteron reseptörü (PR), İnsan epidermal büyüme faktör reseptör 2 (HER2) ve Ki67 antijeni moleküler belirteçleri kullanılarak; Luminal A, Luminal B, HER2(+), Luminal B-HER2(+) ve triple negatif olmak üzere beş alt gruba ayrıldı. Kontrol dokusu olarak, meme küçültme ameliyatı için kliniğe başvuran 8 sağlıklı kişiden alınmış meme dokuları da çalışmaya dahil edildi. Meme kanseri hastalarının ve sağlıklı kontrollerin normal ve tümörlü doku örneklerinde GGT5 ve GGT7 mRNA ekspresyonları qRT-PCR yöntemi ile incelenmiştir. Ayrıca, serum örneklerinde GGT aktivitesi ve glutatyon (GSH) düzeyleri sırasıyla spektrofotometrik ve ELISA yöntemleriyle ölçülmüştür. Tümör dokularının tamamında GGT5 ve GGT7'nin mRNA ekspresyonlarının aynı hastaların sağlıklı meme dokularındaki ekspresyondan fazla olduğu belirlendi (sırasıyla p <0.145 ve p <0.003). Moleküler alt tipler arasında, GGT7 ekspresyonlarının Luminal A grubundaki hastaların tümör dokularında normal dokularına göre anlamlı derecede yüksek olduğu anlaşılmıştır. (p <0.009). Ayrıca, GGT enzim aktivitesi kontrollere göre hastalarda belirgin derecede yüksekti (p <0.05) ve hem kontrollerde hem de hastalarda GSH düzeyleri ile pozitif olarak ilişkiliydi. (sırasıyla p <0.05 ve p <0.0001). Öte yandan, GGT genleri ile ne GGT ne de GSH arasında herhangi bir korelasyon bulunmamıştır. Bildiğimiz kadarıyla, çalışmamız meme kanserinde GGT5 ve GGT7 mRNA ekspresyonlarını gösteren ilk çalışmadır. Sonuçlarımıza göre, meme kanserinde, özellikle de luminal A grubunda, GGT7'nin marker potansiyeli gösterebileceğini öngörüyoruz. Bulgularımız, protein ekspresyonlarının ve bu genlerin olası işlevlerinin incelenmesi gerektiğini göstermektedir.

Abstract:
An increased risk of breast cancer has been reported in individuals with elevated levels of gamma-glutamyl transferase (GGT). Genome research indicated that besides GGT1, the human genome contains additional related genes or sequences. From the perspective of amino acid sequences, genes with substantial similarity (GGT5 and GGT7) to GGT1 have been identified. The aim of this study was to evaluate the gene expressions of GGT5 and GGT7 in molecular subtypes of breast cancer. For that purpose, tissue samples were taken from 58 patients diagnosed with breast cancer. These patients were divided into five subgroups using molecular markers of estrogen receptor, progesterone receptor, human growth factor receptor 2, and Ki67 antigen: Luminal A, Luminal B, HER (+), Luminal B-HER (+) and triple negative. As controls, 8 healthy persons admitted to the clinic for breast reduction surgery were also included to the study. mRNA expressions of GGT5 and GGT7 in normal and tumour tissue samples of breast cancer patients and healthy controls examined by qRT-PCR method. In addition, GGT activity and glutathione (GSH) levels in serum samples were measured by spectrophotometric and ELISA methods, respectively. In totally, mRNA expressions of GGT5 and GGT7 increased in tumor tissues than those in normal tissues of the same patients (p<0.145 and p<0.003, respectively). Among molecular subtypes, GGT7 expressions were significantly higher in tumor tissues than those in normal tissues of the patients in Luminal A group (p<0.009).  Also, GGT enzyme activity was significantly higher in patients than those in controls (p<0.05) and it was positively correlated with GSH levels in both controls and patients (p<0.05 and p<0.0001, respectively). On the other hand, we did not find any correlation between neither GGT nor GSH and GGT genes. As far as we know, our study is the first showing GGT5 and GGT7 mRNA expressions in breast cancer. According to our results, we suggest that GGT7 may have marker potency in breast cancer, especially in the luminal A group. Our results show that protein expressions and then potential functions of these genes need to be studied.