HUVEC hücre hattında LPS ile indüklenen enflamatuvar yanıtta ürotensin reseptörlerinin etkilerinin Kalsinörin/NFATc/İL-2 yolağı üzerinden incelenmesi
Investigation of the effects of urotensin receptors on LPS-induced enflammatory response in HUVEC cell line viacalcineurin/NFATc/IL-2 pathway
Yazar: ZEKAİ HALICI
Danışman: PROF. DR. VEDAT BULUT
Gazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / İmmünoloji Ana Bilim Dalı / İmmünoloji Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Allerji ve İmmünoloji = Allergy and Immunology
Dizin: Endotelyal hücreler = Endothelial cells ; Hücre dizisi = Cell line ; Lipopolisakkaritler = Lipopolysaccharides ; Polisakkaritler = Polysaccharides ; Umbilikal kord = Umbilical cord ; Ürotensinler = Urotensins ; İnterlökin 2 = Interleukin 2

Özet:
Bu çalışmada amacımız LPS ile indüklenen HUVEC hücrelerindeki enflamatuvar yanıtta
ürotensin II reseptörlerinin yerini incelemektir. Aynı zamanda LPS'ye bağlı oluşan
enflamatuvar yanıtta Kalsinörin/NFATc/IL-2 sistemi ile ürotensin II reseptörlerinin
arasındaki muhtemel etkilerin gösterilmesi de çalışmamızın önemli bir aşamasıdır. Her
kuyucuğa 5.000 HUVEC hücresi ekildikten 24 saat sonra LPS ile hasar oluşturuldu. LPS
uygulandıktan 60 dk. sonra ürotensin II agonisti olarak HU-II, ürotensin II reseptör
antagonisti olarak da palosuran uygulandı. Kalsinörin inhibitörü olarak takrolimus
uygulandı. Hücre canlılığı analizleri sonucundan elde edilen sonuçlara göre moleküler
analizler gerçekleştirildi. Hücre canlılığı analizlerinde agonist uygulanan gruplarda azalma
gözlenirken takrolimus ile birlikte verilen grupta ise hücre canlılığının arttığı
görülmektedir. Antagonist uygulanan grupta hücre canlılığı LPS grubuna kıyasla
korunurken takrolimus verilen grupta bu etkinin arttığı görülmektedir. LPS gruplarında,
ürotensin II reseptörü, kalsinörin, NFATc, IL-2R, IL-6 ve NF-κB mRNA ekspresyon
düzeylerinde artış görülürken bu etki agonist uygulaması ile daha artmıştır. Agonistin
gösterdiği bu etki ortamda kalsinörin inhibitörü varlığında ortadan kalkmıştır. Bu durum
kalsinörin/NFATc/IL-2 yolu ile ürotensin II arasında önemli bir ilişkinin olabileceğini
desteklemektedir. Nitekim antagonist uygulaması ile azalan enflamatuvar yanıtın ve buna
paralel olarak ürotensin II reseptör ekspresyonundaki azalma, kalsinörin inhibitörü
varlığında agonist uygulanması ile de ortaya çıkması ürotensin II'nin enflamasyon
üzerindeki etkilerinin kalsinörin/NFATc/IL-2R sistemi üzerinden olabileceğini
göstermektedir.

Abstract:
Our aim in this study is to examine the role of urotensin II receptors in enflammatory
response in LPS-induced HUVEC cells. In particular, an important stage of our study is to
demonstrating the possible effects between the calcineurin/nfatc/IL-2 system and the
urotensin II receptors in the enflammatory response caused by LPS. Damage was caused
by LPS 24 hours after 5,000 HUVEC cells were planted in each well. HU-II as urotensin II
agonist and palosuran as urotensin II receptor antagonist were administered 60 minutes
after LPs administration. Takrolimus was applied as an inhibitor of calcineurin. Molecular
analyses were performed according to the results obtained from cell viability Analyses. In
cell viability analyses, a decrease was observed in the agonist-administered groups, while
in the group given together with takrolimus, cell viability was increased. In the Antagonist
group, cell viability was maintained compared to the LPS group, while in the takrolimus
group, this effect was increased. In LPS groups, urotensin II receptor, calcineurin, NFATc,
IL-2R, IL-6 and NF-kB mRNA expression levels were increased, while this effect was
increased with agonist administration. This effect shown by the agonist was eliminated in
the presence of a calcineurin inhibitor in the environment. This supports the possibility of
an important relationship between calcineurin/NFATc/IL-2 pathway and urotensin II. As a
matter of the fact that the decreased enflammatory response with antagonist administration
and, in parallel, the decrease in urotensin II receptor expression also occurs with agonist
administration in the presence of a calcineurin inhibitor suggests that the effects of
urotensin II on enflammation may be through the calcineurin/NFATc/IL-2R system.