Serviks kanser hücre hattında timokinonun sisplatin sitotoksisitesine etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effects of thymoquinone on cisplatin cytotoxicity in cervical cancer cell lines
Yazar: SONGÜL YILMAZ
Danışman: DOÇ. SEVTAP AYDIN
Hacettepe Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmasötik Toksikoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2018
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Hücre dizisi = Cell line ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Nigella sativa L. = Nigella sativa L. ; Sisplatin = Cisplatin ; Sitotoksisite = Cytotoxicity ; Timokinon = Thymoquinone ; Uterin servikal hastalıklar = Uterine cervical diseases ; Uterin servikal neoplazmlar = Uterine cervical neoplasms ; Çörekotu = Nigella ; İn vitro = In vitro

Özet:
Timokinon Türkiye'de çörek otu olarak bilinen Nigella sativa L. tohumlarının uçucu yağından elde edilen monoterpen bir molekül ve biyoaktif bir bileşiktir. Yüzyıllardır gıda olarak tüketilmekle beraber, timokinonun başlıca antioksidan özelliği ve özellikle glutatyon mekanizması üzerindeki etkisi sayesinde antikanser etkisinden, antialerjik etkisine kadar çok geniş bir koruyucu yelpazesine sahip olduğu iddia edilmektedir. Platin bazlı bir antikanser ajanı olan sisplatin; over, serviks, testis,  prostat, mesane, akciğer kanserleri gibi solid tümörlerin tedavisinde uzun yıllardır kullanılmaktadır ve mekanizması iyi bilinmektedir. Kemoterapide kullanılan ilaçların yan etkilerini azaltmak ve vücut içi etkilerini arttırmak amacıyla kombine olarak bitki ekstraktlarının kullanımı araştırılmaktaktadır. Bu tez çalışmasında önemli biyolojik etkileri olduğu bilinen ve son yapılan çalışmalarda önemi gittikçe artan timokinonun antikanser ilaç olan sisplatinle birlikte kombine kullanımının serviks kanser hücreleri (HeLa) üzerindeki sitotoksik etkileri MTT yöntemi ile araştırılmıştır. Sisplatin ve timokinonun farklı zamanlarda sitotoksisite profili belirlendikten sonra geniş doz ranjında timokinonun sisplatinin IC50 değeri üzerine etkileri incelendi. HeLa hücrelerinde 24 ve 48 saatlik inkübasyonlarında timokinonun IC50 değeri sırasıyla 143,7 μM ve 67,5 μM olarak ve sisplatinin IC50 değeri sırasıyla 20,3 μM ve 12,9 μM olarak belirlendi. HeLa hücrelerinde timokinonun 24 saatlik inkübasyonlarında 7,8-250 μM doz aralığında ve 48 saatlik inkübasyonlarında  15,6-250 μM doz aralığında sisplatinin IC50 değerini doz bağımlı  istatistiksel anlamlı azalttığı gösterilmiştir. Sonuç olarak, bulgularımız HeLa hücrelerinde timokinonun sisplatin sitotoksisitesini arttırabileceğini göstermektedir ve dolayısıyla timokinonun sisplatinin antikanser etkisini arttırabileceği düşünülmektedir; ancak bu etkilerin doğrulanması ve antikanser ilaçlar ile etkileşmelerini belirlemek üzere daha ileri in vitro ve in vivo çalışmalar gereklidir.

Abstract:
Thymoquinone, derived from the volatile oil of Nigella sativa L. seed known as black seed "çörek otu" in Turkey, is a monoterpene molecule and a bioactive compound. Along with being consumed as food for centuries, thymoquinone has been suggested to have a wide range of protection from anticancer effect to antiallergic effect due to mainly its antioxidant properties and especially its effect on glutathione mechanism. Cisplatin, a platinum-based anticancer agent, as been over, has been used for many years in the therapy of the solid tumours such as cervix, testis, prostate, bladder, lung cancers, and its mechanism is well known. The use of plant extracts in combination with chemotherapeutic drugs has been investigated in order to reduce the side effects of the drugs used in the chemotherapy and to increase their effects on the body. In this thesis study, the cytotoxic effects of the use of thymoquinone, which is known to be significant biological effects and of which the importance has been increasingly in recent studies, were investigated in combination with anticancer drug cisplatin in the cervical cancer cells (HeLa) using MTT method. After determination of the cytotoxicity profiles of cisplatin and thymoquinone at different times, the effects of  thymoquinone in a wide dose range on the IC50 values of cisplatin were investigated. In HeLa cells, for 24 h and 48 h incubations, IC50 values of thymoquinone were found to be 143.7 μM and 67.5 μM, respectively and IC50 values of cisplatin were found to be 20.3 μM and 12.9 μM, respectively. Thymoquinone at the concentration range of 7.8-250 μM for 24 h incubation and 15.6-250 μM for 48 h incubation, has been shown to statistically significant decrease the IC50 values cisplatin in a dose-dependent in HeLa cells. In conclusion, our findings indicate that thymoquinone may increased the cytotoxicity of cisplatin in HeLa cells, and therefore thymoquinone may increase the anticancer effect of cisplatin; however  to confirm these effects and to determine its interactions with anticancer drugs, the advanced in vitro and in vivo studies are needed.