Koyunlarda  chlamydia abortus'a karşı gelişen serolojik yanıtın değerlendirilmesinde bir ELISA prototipinin geliştirilmesi
To develop an enzyme lınked ımmuno sorbent assay (ELISA) prototype ın evaluating serological response against chlamydıa abortus in sheep
Yazar: GÜLNUR SAĞLAM
Danışman: PROF. DR. SEVİL ERDENLİĞ GÜRBİLEK
Harran Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Mikrobiyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine
Dizin: Abortus = Abortion ; Enzime bağlı immünosorbent testi = Enzyme-linked immunosorbent assay ; Klamidya = Chlamydia ; Koyunlar = Sheep ; Prototip = Prototype ; Seroloji = Serology ; Veteriner hekimlik = Veterinary medicine

Özet:
Koyunların Enzootik abortusu (KEA), dünyanın birçok yerinde yaygın olarak
görülen ciddi enfeksiyonlarla karakterize önemli bir zoonozdur. Hastalık hayvancılık
sektöründe büyük ekonomik kayıplar oluşturmaktadır.
Chlamydia abortus izolasyonun zor ve zaman alıcı olması nedeniyle
enfeksiyonun tanısında serolojik testlerden büyük ölçüde yararlanılmaktadır. Enzyme-
Linked Immunosorbent Assay (ELISA) testinin sensivitesi ve spesivitesinin diğer
serolojik testlerden yüksek olması nedeniyle yaygın olarak kullanılmaktadır.
Bu çalışmada serumda anti C. abortus antikorlarını saptamak için bir ELISA
prototipi geliştirilmesi hedeflenmiştir. Çalışmada Samsun Veteriner Kontrol Enstitüsü
(SVKE) Seroloji labaratuvarına, Samsun ili ve çevre illerden atık etkenlerinin tanısı
amacıyla gönderilen ve ticari (C. abortus Antibody kit, IDEXX) bir kit ile test edilen
serumlar iki ELISA sonuçlarını karşılaştırmak amacı ile kullanıldı ve iki test arasındaki
kappa değeri 0,95 olarak bulunarak iki test arasında yüksek bir uyum saptandı.
Çalışmada ayrıca, atık yapan hayvanın fötal dokularından (karaciğer, dalak, mide
içeriği) yapılan PCR ile KEA yönünden pozitif bulunan koyunlara ait serumlar gerçek
pozitif serum olarak kullanıldı. Çalışmada elde ettiğimiz sonuçlara göre, duyarlılık %90
[%95 GA (%80,36 - 99,9)] ve özgüllük (spesifisite) %96,6 [%95 GA (%85,16 - 99,47)]
olarak saptandı.
Çalışmanın sonunda elde ettiğimiz bulgular, indirekt antikor ELISA protipinin
oldukça duyarlı ve özgül olduğunu ortaya koymuş ve bu testin hastalığın serolojik
olarak yaygınlığının belirlenmesinde ucuz ve pratik bir alternatif olarak
kullanılabileceğini göstermiştir.

Abstract:
Enzootic abortion of ewes (EAE) is an important zoonosis which is commonly
seen in many parts of the world. It causes important economical losses in livestock
industry.
Isolation of Chlamydia abortus is highly difficult and time consuming.
Therefore, serological tests are widely used in diagnosis of the disease. Enzyme-Linked
Immunosorbent Assay (ELISA) has higher sensitivity and specificity than other tests
used in the serological diagnosis of EAE and thus, it is considered one of the best
choices in this purpose.
In this study, we plan to develop an in house ELISA to detect antibodies against
C. abortus. Sera sent to the Serology Laboratory of Samsun Veterinary Control Institute
(SVKE) from Samsun and surrounding provinces were tested both ELISA, which are a
commercial kit (C. abortus Antibody kit, IDEXX) and our in house ELISA prototype
for to compare the results of both ELISAs. The kappa value was detected as 0, 95
showing good compatibility between two tests. In order to determine specificity and
sensitivity of the in house ELISA, real positive sera were obtained from the sheep
aborted because of C. abortus. This condition was confirmed by PCR made from DNA
extracted from aborted foetal material of these aborted ewes. According to the results,
specificity and sensitivity of our in house ELISA were detected 96,6% [95% CI (85.16-
99.47%)] and 90 % [95% CI (80.36 - 99.9%)], respectively.
As conclusion, our in house indirect ELISA revealed good sensitivity and
specificity values. We thought that it can be used to determine serological positivity

12
rates of the disease as much cheaper and paractical alternative to its commercial
counterparts.