Sisplatin ile uyarılan kas toksisitesine karşı ligandrolün koruyucu etkileri
Protective effects of ligandrol against cisplatin-induced muscle toxicity
Yazar: ZİŞAN ÜSTÜN
Danışman: DOÇ. DR. TAMER AKKAN ; DR. ÖĞR. ÜYESİ ADEM GÜNER
Giresun Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Biyoloji = Biology ; Biyoteknoloji = Biotechnology

Özet:
Sisplatin, farklı kanser tedavilerinde kullanılan önemli bir kemoterapötik ajandır. Sisplatin kullanımı aynı zamanda kas, sinir, böbrek ve kan sistemleri üzerinde ciddi sitotoksik etkilere neden olmaktadır. Ligandrol, kasları güçlendirme amacıyla geliştirilmiş, yeni bir nonsteroid oral seçici androjen reseptör modülatörüdür (SARM). Mevcut çalışma sisplatin ile uyarılan kas toksisitesine karşı ligandrolün koruyucu etkilerini ortaya koymayı amaçlamıştır. 
Çalışma kapsamında sitotoksik etkiler, fare kas hücre hatlarında (C2C12) hücre canlılığı (MTT) ve laktat dehidrogenaz (LDH) denemeleri ile belirlenmiştir. Oksidan/antioksidan durum, total antioksidan kapasite (TAK) ve total oksidatif durum (TOD) ile ortaya koyulmuştur. Aynı zamanda, uygulamalar sonrası hücre döngüsü analizleri, DNA fragmentasyonu, kaspaz 3/7 aktiviteleri, lipid peroksidasyonu ve intrasellüler kalsiyum konsantrasyon seviyeleri değerlendirilmiştir. Bununla birlikte, irritant/antirritant etkiler yumurta koryoallantoyik membran (HET-CAM) metodu ile tespit edilmiştir. 
Sonuçlarımız, sisplatin ile muamele edilen hücrelerde ligandrolün ortamdaki hücre canlılığını koruduğu; hücre membran hasarının belirtilerinden olan LDH salınımını ve intrasellüler kalsiyum konsantrasyonunu önemli derecede (p<0,05) azalttığını göstermiştir. Ligandrol, sisplatin ile uyarılan TOS seviyelerini önemli derecede (p<0,05) azaltırken, TAK kapasitelerini önemli derecede (p<0,05) arttırmıştır. Bununla birlikte oksidatif stres ile indüklenen DNA fragmentasyonundaki ve lipid peroksidayonu son ürünü olan malondialdehit konsantrasyonundaki artışı inhibe etmiştir. Ligandrolün sisplatin ile kombinasyon uygulaması, yalnız sisplatin uygulamalarına kıyasla kaspas 3/7 ekspresyonu artışları aracılığıyla apoptozu aktive etmiştir. HET-CAM irritasyon denemesinde güçlü irritant etkilere yol açan sisplatinin etkinliği, ligandrol uygulamaları ile önemli derecede (p<0,05) zayıflatılmıştır. 
Sonuç olarak, sisplatin ile uyarılan kas toksisitesine karşı ligandrolün önemli derecede koruyucu etki gösterdiği ilk kez olarak bu çalışmada ortaya konulmuştur.

Abstract:
Cisplatin is an important chemotherapeutic agent used in different cancer treatments. Cisplatin use also causes serious cytotoxic effects on muscle, nervous, kidney, and blood systems. Ligandrol is a new nonsteroidal oral selective androgen receptor modulator (SARM) developed for muscle strengthening. The present study aimed to demonstrate the protective effects of ligandrol against cisplatin-induced muscle toxicity. 
In the present study, cytotoxic effects were determined by cell viability (MTT) and lactate dehydrogenase (LDH) assays in mouse muscle cell lines (C2C12). The oxidant/antioxidant status was demonstrated by total antioxidant capacity (TAC) and total oxidative status (TOS). Cell cycle analysis, DNA fragmentation, caspase 3/7 activities, lipid peroxidation, and intracellular calcium concentration levels were evaluated. Irritant/antirritant effects were determined by the egg chorioallantoic membrane method (HET-CAM). 
Our results showed that combination treatment of cisplatin and ligandrol significantly (p<0,05) ameliorated the cell viability while significantly (p<0,05) reducing LDH release and intracellular calcium concentration which are signs of cell membrane damage. Ligandrol significantly (p <0,05) decreased cisplatin-induced TOS levels while significantly (p<0,05) increasing TAC levels. The increase in DNA fragmentation and the increase in malondialdehyde concentration, the end product of lipid peroxidation, induced by oxidative stress was inhibited. Combination administration of ligandrol and cisplatin activated apoptosis via increases in caspase 3/7 expression compared to cisplatin alone. The effectiveness of cisplatin, which showed strong irritant effects in the HET-CAM irritation trial, was significantly weakened after ligandrol applications.
As a result, it was demonstrated for the first time with this study that ligandrol has a significant protective effect against cisplatin-induced muscle toxicity.