Proliferatif vitreoretinopati tedavisinde doğal molekül hispidulin kullanımının in vitro modelde araştırılması
Investigation of the use of natural molecule hi̇spi̇duli̇n i̇n the treatment of proliferative vitreoretinopathy i̇n an i̇n vi̇tro model
Yazar: SULTAN KAYA
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ RÜVEYDE GARİP
Trakya Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Göz Hastalıkları = Eye Diseases
Dizin: Epitel = Epithelium ; Göz hastalıkları = Eye diseases ; Retina = Retina ; Retina dekolmanı = Retinal detachment ; Retina hastalıkları = Retinal diseases ; Retina pigmentleri = Retinal pigments ; Vitreografi = Vitreography ; Vitreus = Vitreous

Özet:
Proliferatif vitreoretinopati fibroselüler membranlar ve intraretinal fibrozisin gelişmesi
ile oluşan ve yırtıklı retina dekolmanı cerrahisi sonrasında gelişen nüks retina dekolmanı
olgularının en önemli nedenidir. Regmatojen retina dekolmanı meydana geldiğinde proliferatif
vitreoretinopati başlatıcı iki ana olay meydana gelir. Bunlar retina hipoksisi ve kan retina
bariyerinin bozulmasıdır. Yapılan çalışmalarda proliferatif vitreoretinopatili gözlerde alınan
vitreus örneğinde normal gözlere orana dönüştürücü büyüme faktör-beta seviyesi daha yüksek
bulunmuştur. Son yıllarda proliferatif vitreoretinopatinin patofizyolojisini anlama yönündeki
bilgiler artmıştır. Proliferatif vitreoretinopatinin medikal tedavisinde en fazla çalışılmış
maddelerden birisi bir kemoterapi ajanı olan 5-fluorourasildir. Fluorourasilin hayvan
modellerinde proliferatif vitreoretinopati oranını azaltmada etkili olduğu gösterilmiştir.
Proliferatif vitreoretinopatinin hücre biyolojisi ve moleküler mediyatörleri halen incelenmeye
devam etmektedir.
Hispidulin çeşitli bitkilerde bulunan antioksidatif, antiinflamatuar, antimutajenik,
antiproliferatif ve antineoplastik özellikleri ile anjiogenezi baskılayan bir flavonoiddir. Bu
araştırmada, hispidulin molekülünün proliferatif vitreoretinopati etiyolojisinde rol oyanayan
proliferasyon, migrasyon ve anjiogenez yolağı üzerinde olası etkisinin belirlenmesi amaçlandı.
Bu amaçla insan retina pigment epitel hücre serilerinden insan retinal pigment epitel hücre hattı-
19 hücrelerinde 10 ng/ml dönüştürücü büyümef faktör-b2 kullanılarak in vitro bir proliferatif
vitreoretinopati modeli oluşturularak 48 saat boyunca 3 uM hispidulin ve 1uM hispidulin ile 5-
fluorourasil ile kombinasyonun etkinliğine bakıldı. Araştırmada proliferatif vitreoretinopati
gelişiminden sorumlu mekanizmada önemli yer tutan hücre proliferasyonu ve epitelyal
mezenkimal geçiş sonucu gelişen hücre migrasyonunu inhibe edici etkinliği, olası terapötik
potansiyelinin belirlenmesi ve tabanında yatan moleküler mekanizmaların aydınlatılması
hedeflendi. Çalışmada hücre proliferasyon, hücre göçü deneyleri ve gerçek zamanlı polimeraz
zincir reaksiyon yöntemi ile bu olaylarda rol alan bazı transkripsiyon faktörleri ile hedef
genlerin kantitatif mesajci ribonükleik asit transkripsiyon değişimleri analiz edildi.
Çalışmanın istatiksel analizinde gruplar arasındaki farklılıklar için varyans analizi
(ANOVA) ve ardından çoklu karşılaştırmalar için de Duncan'ın çoklu karşılaştırma testi
kullanıldı.
Anahtar Kelimeler: Epitelyal-mezenkimal transformasyon, Hispidulin, Proliferatif
vitreoretinopati, Retina pigment epitel hücresi

Abstract:
Proliferative vitreoretinopathy is characterized by fibrocellular membranes and
intraretinal fibrosis and the most important cause of recurrent retinal detachment after
rhegmatogenous retinal detachment surgery. When rheumatogenic retinal detachment occurs,
two main proliferative vitreoretinopathy initiating events occur. These are retinal hypoxia and
disruption of the blood retinal barrier. In previous studies, Transforming growth factor-beta
level was found to be higher in vitreous samples taken from eyes with proliferative
vitreoretinopathy compared to normal eyes. In recent years, knowledge about the
pathophysiology of proliferative vitreoretinopathy has increased. One of the most studied
substances in the medical treatment of proliferative vitreoretinopathy is 5-fluorouracil, which
is a chemotherapic agent.
Hispidulin is a flavonoid, which found in various plants, that suppresses angiogenesis
with its antioxidative, anti-inflammatory, antimutagenic, antiproliferative and antineoplastic
properties. In this study, it was aimed to determine the possible effect of hispidulin molecule
on proliferation, migration and angiogenesis pathway that play a role in the etiology of
proliferative vitreoretinopathy. For this purpose, an in vitro proliferative vitreoretinopathy
model will be created using 10 ng/ml Transforming growth factor-b2 in A human retinal
pigment epithelium cell line-19 cells from human retinal pigment epithelium cell lines and
efficacy of 3uM hispidulin and combination of 1 uM hispidulin with 5-fluorouracil for 48 hours
examinated. The aim of the study was to determine the therapeutic potential and to elucidate
the underlying molecular mechanisms, inhibiting cell proliferation and cell migration resulting
from epithelial-mesenchymal transition, which play an important role in the mechanism
responsible for proliferative vitreoretinopathy development. In this study, cell proliferation cell
migration assays and messenger ribonucleic acid transcription changes will be analyzed by realtime
polimeraz chain reaxion method and the expressions of some proteins involved in these
events will be analyzed by Western blot technique.
In the statistical analysis of the study, analysis of variance (ANOVA) was used for the
differences between the groups, followed by Duncan's multiple comparison test for multiple
comparisons.
Keywords: Epithelial–mesenchymal transition, Hispidulin, Proliferative
vitreoretinopathy, Retina pigment epihelial cells