Coombs (-)ABO uyuzmazlığı ve nedeni bilinmeyen sarılığı olan yeni doğanlarda hiperbilirübinemi ile UDP glukuronil transferaz (UGT1A1) promoter polimorfizmi ilişkisinin değerlendirilmesi
An evaluation for the association of direct coombs (-) ABO incompatible and neonatal hyperbilirübinemia with UDP-glucuronsyltransferase (UGT1A1) gene polymorphism
Yazar: MEVLÜT BİCAN
Danışman: PROF.DR. HACER ERGİN
Pamukkale Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2006
Konu: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases

Özet:
Mevlüt BicanCOOMBS (-) ABO UYU MAZLI I VE NEDEN B L NMEYEN SARILI I OLANYEN DO ANLARDA H PERB L RÜB NEM LE UDP GLUKURON LTRANSFERAZ (UGT1A1) PROMOTER POL MORF ZM L KSNNDE ERLEND R LMESAmaç: Patolojik sarılık olu umunu ve süresini etkileyen bazı risk faktörleribilinmesine ra men olguların %50'sinde sebep bulunamaz. Asya ırkına sahip olma vekarde lerinde sarılık öyküsü bulunması gibi etnik ve ailevi özellikler sarılık geli imindegenetik faktörlerin rol oynadı ını dü ündürmektedir. Semptomatik ABO hemolitik hastalı ı,sıklıkla Coombs pozitifli iyle birliktedir. ABO uyu mazlı ı saptanan ancak direkt Coombs (-)olan yenido anların bir kısmında da patolojik sarılık saptanması genetik nedenlereba lanmı tır. Üridil difosfoglukuroniltransferaz (UGT1A1) enzim geninde promoter bölgedeve protein kodlayan bölgede olu an mutasyonların enzim aktivitesinde de i en oranlardaazalmaya ve sarılık riskinde artı a yol açtı ı rapor edilmektedir. UGT1A1 genindekimutasyon ve polimorfizmlerin ırklar arasında de i kenlik gösterdi i bilinmektedir. Buçalı mada yöremizde nedeni bilinmeyen patolojik sarılık ve direkt Coombs (-) ABOuyu mazlı ı olgularında iddetli sarılık olu umunda promoter polimorfizminin etkisiara tırıldı.Gereç ve yöntem: Bu çalı maya Ocak 2005 - Mayıs 2006 tarihleri arasında PamukkaleÜniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesi, Servergazi Devlet Hastanesi ve Denizli DevletHastanesi'nde do an, maternal diabet ve asfiksi öyküsü olmayan, Rh-subgrup uyu mazlı ı,G6PDH eksikli i, hemoliz, polisitemi, enfeksiyon, dehidratasyon bulguları, hipotirodi,karaci er hastalı ı, kromozom anomalisi saptanmayan ve anne sütüyle beslenen 104 termyenido an alındı. lk bir haftalık izlemde serum total bilirübin düzeyi (STB)â¥ 17 mg/dL olan26 bebek sarılık, direkt Coombs (-) ABO uyu mazlı ı ve serum total bilirübin düzeyi (STB)â¥17 mg/dL olan 24 bebek ABO(+) sarılık, STB< 12.9 mg/dL olan 26 bebek kontrol, STB<12.9 mg/dL ve direkt Coombs(-) ABO uyu mazlı ı olan 28 bebek ABO(+) kontrol gruplarınıolu turdu. Periferik kan örne inden DNA izolasyonu yapılıp, PCR amplifikasyonukullanılarak, UGT1A1 geninin promoter bölgesindeki A(TA)nTAA dizi analizi incelendi.PCR ürünleri DNA dizi analiz sistemi ile yorumlandı.Bulgular: Çalı maya alınan 104 olgunun 59'unda (%56.7) TA6/TA6 (homozigot normal)genotipi, 39'unda (%37.5) TA6/TA7 (heterozigot anormal) genotipi, 6'sında (%5.8) TA7/TA7(homozigot anormal) genotipi tespit edildi. Sarılık grubunda 26 yenido anın %26.9'undaTA6/TA6 genotipi, %65.4'ünde TA6/TA7 genotipi, %7.7'sinde ise TA7/TA7 genotipi saptandı.ABO (+) sarılık grubundaki 24 yenido anın %16.7'sinde TA6/TA6 genotipi, %66.7'sindeTA6/TA7 genotipi, %16.7'sinde ise TA7/TA7 genotipi saptandı. Sarılık gruplarında normalgenotipten heterozigot ve anormal homozigot genotipe do ru pik bilirübin düzeylerinin arttı ısaptandı (p<0.05). Kontrol grubundaki 26 vakanın %80.8'inde TA6/TA6 genotipi,%19.2'sinde TA6/TA7 genotipi, ABO (+) kontrol grubundaki 28 yenido anın %96.4'ündeTA6/TA6 genotipi, %3.6'sında TA6/TA7 genotipi saptandı. Kontrol gruplarında TA7/TA7genotipi tespit edilmedi. Heterozigot promoter polimorfizminin sarılık ve ABO (+) sarılıkgruplarında belirgin yüksek oldu u ve pik süresini kısalttı ı görüldü (p<0.05).Sonuç: Denizli yöresinde UGT1A1 geni promoter polimorfizmlerinin nadir olmadı ı; öncekiçalı maların aksine, anne sütüyle beslenen yenido anlarda UGT1A1 genindeki heterozigotpromoter polimorfizminin ek ikterojen olmaksızın nedeni bilinmeyen iddetli sarılıklarda vedirekt Coombs (-) ABO uyu mazlı ına ba lı sarılıklarda risk faktörü oldu u,hiperbilirübineminin iddetini arttırdı ı ve pik süresini kısalttı ı saptandı.

Abstract:
Mevlüt BicanAN EVALUATION FOR THE ASSOCIATION OF DIRECT COOMBS (-) ABOINCOMPATIBLE AND NEONATAL HYPERB L RUB NEMIA WITH UDP-GLUCURONOSYLTRANSFERASE(UGT1A1) GENE POLYMORPHISMAim: Although some risk factors that affect the development and duration ofpathologic jaundice are known, the reasons for it cannot be found in 50% of the cases. Theethnic and familial properties like belonging to the Asian race and having a jaundice story inbrothers/sisters are thought that genetic factors have a role in developing jaundice.Symptomatic ABO hemolytic disease usually occurs with Coombs positive status. It isreported that the mutations which develop at the protein enhancer and promoter region ofUGT1A1 enzyme gene cause a decrease in the enzyme activity and an increase in jaundicerisk at various ratios. It is known that the mutations and polymorphisms at UGT1A1 genechange among ethnic groups. In this study, the effect of promoter polymorphism at thedevelopment of severe jaundice has been observed in our region. This affect has beenobserved in the cases that have idiopatic pathologic jaundice and direct Coombs (-) ABOincompatible.Method:ParticipantsOne hundred and four full term newborn babies have been included in this study interms of the following criteria: The newborn babies were born between January 2005-May2006 in Pamukkale University, The Research Hospital of The Faculty of Medicine,Servergazi State Hospital and Denizli State Hospital. They were fed with mother milk andthey did not have Rh subgroup incompatible, hemolysis, polistemia, asphyxia, infection,dehydration symptoms, G6PDH defect, hypothyroidism, liver disease, chromozomal anomaliaor maternal diabetes.In the first week, depending on the test results, we have formed the experiment andcontrol groups. We have formed the jaundice group with 26 babies whose serum totalbilirubin levels were higher than 17 mg/dL, the ABO + jaundice group with 24 babies whohad direct Coombs (-) ABO incompatible and whose serum total bilirubin levels were higherthan 17 mg/dL, the control group with 26 babies whose serum total bilirübin levels werelower than 12.9 mg/dL, and the ABO incompatible group with 28 babies who had directCoombs (-) ABO incompatible and whose serum total bilirubin levels were lower than 12.9mg/dL. DNA isolation was performed from peripheral blood sample. Then, A(TA)nTAAsequence analysis at the promoter region of UGT1A1 gene was observed by using PCRamplification. The PCR products were interpreted with DNA sequence analysis system.Result:Among the 104 cases in the study, the following genotypes were detected: 59 cases(56.7%) with TA6/TA6 genotype (homozygot normal genotype), 39 cases (37.5%) withTA6/TA7 genotype (heterozygot abnormal genotype), and 6 cases (5.8%) with TA7/TA7genotype (homozygot abnormal genotype). Among the 26 newborns in the jaundice group,the following genotypes were detected: 26.9% TA6/TA6 genotype, 65.4% TA6/TA7 genotype,and 7.7% TA7/TA7 genotype. Among the 24 newborns in the ABO (+) jaundice group, thefollowing genotypes were detected: 16.7% TA6/TA6 genotype, 66.7% TA6/TA7 genotype, and16.7% TA7/TA7 genotype. In the jaundice groups, peak biluribin levels increased from thenormal genotype to heterozygot and abnormal homozygot genotype (p<0.05). Among the 26cases in the control group, the following genotypes were found: 80.8% TA6/TA6 genotype and19.2% TA6/TA7 genotype. Among the 28 newborns in the ABO (+) control group, thefollowing genotypes were found: 96.4% TA6/TA6 genotype, 3.6% TA6/TA7 genotype. On theother hand, TA7/TA7 genotype was not detected in the control groups. In the jaundice and theABO (+) jaundice groups, ıt was seen that the heterozygot promoter polymorphismsignificiantly higher and ıt decreases the peak time (p<0.05).Conclusion:According to the results, the UGT1A1 gene promoter region polymorphisms are notseldom in Denizli region. In contrast with the recent studies, in newborns feeding withmother milk, the heterozigot promoter polymorphisms at UGT1A1 gene was a risk factorfor the ethiology idiopatic severe jaundices without additional icterogenic factor and incases with direct Coombs (-) ABO incompatible and it increases severity ofhyperbilirubinemia and decreases peak time of hyperbilirubinemia.