Koroner arter hastalarında MDR-1 gen polimorfizmi ve trombosit aktive edici faktör (PAF) düzeylerinin hastalıkla olan ilişkisinin araştırılması
Association of MDR-1 gene polymorphism and platelet activating factor (PAF) levels in patients with coronary artery disease
Yazar: GÜLSEL AYAZ
Danışman: PROF. DR. TURGUT ULUTİN
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2011
Konu: Genetik = Genetics ; Kardiyoloji = Cardiology ; Moleküler Tıp = Molecular Medicine ; Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Genler = Genes ; Haplotipler = Haplotypes ; Koroner hastalık = Coronary disease ; Polimorfizm-genetik = Polymorphism-genetic ; Trombosit aktivasyon faktörü = Platelet activating factor ; Trombosit aktivasyonu = Platelet activation ; İlaçlara direnç = Drug resistance

Özet:
Proiflamatuvar bir mediatör olan Trombosit Aktive Edici Faktör (PAF), trombosit aktivasyon ve agregasyonunda rol alır. Koroner Arter Hastalığında (KAH) serum PAF düzeylerinin yüksek olduğu gösterilmiştir. ATP Bağlayıcı Kaset (ABC) taşıyıcı ailesinin bir üyesi olan ve birçok bileşik ile ksenobiyotiği, hücre dışına taşıyan Çoklu İlaç Dirençliliği-1 (MDR-1) proteini aynı zamanda PAF'ında hücre dışına taşınmasını sağlar. MDR-1 geninde bugüne kadar birçok Tek Nükleotid Polimorfizm (SNP) bildirilmiştir. Amino asit değişimine yol açmayan Ekson 26'daki C3435T polimorfizminin, MDR-1'in substratlarına karşı olan afinitesini etkilediği bildirilmiştir. Ekson 21'deki G2677A/T polimorfizmi amino asit değişimine yol açarak proteinin yapısını ve fonksiyonunu değiştirir. Bu polimorfizmler ile PAF'ın taşınma hızı arasındaki ilişkinin ne olduğu bilinmemektedir.Çalışmadaki amacımız, KAH olgularında yüksek olduğu bildirilen PAF düzeyleri ile MDR-1 C3435T ve G2677A/T polimorfizmleri arasındaki ilişkiyi araştırmaktı. Anjio olan 198 kişi çalışmaya dahil edildi. Anjio sonucuna göre damar tıkanıklığı olmayan 85 kişi kontrol grubu olarak, 113 kişi ise (1 damar=43, 2 damar= 36, 3 damar=34 ) hasta grubu olarak ayrıldı. Genotipleme PCR-RFLP yöntemleri ile, plazma PAF düzeyleri ise ELİSA yöntemi ile tespit edildi. Kan örneklerinde aynı zamanda ADP uyaranı verilerek trombosit foksiyonları değerlendirildi.MDR-1 C3435T ve G2677A/T polimorfizmleri açısından hasta ve kontrol gruplar arasında herhangi bir fark tespit edilmedi (p>0.05). Yüzde agregasyon düzeyleri ile hastalık şiddeti arasında bir ilişki bulunmamakla birlikte (p>0.05), plazma PAF düzeyleri ile hastalık şiddeti arasında ilişki bulundu (p<0.05). Hasta ve kontrol gruplarının PAF ve agregasyon düzeylerinin C3435T ve G2677A/T genotiplerine göre karşılaştırılmasında bazı gruplar arasında anlamlı farklılıklar bulundu. (ANOVA, p<0.05). Sonuçlarımız, C3435T ve G2677A/T polimorfizminin plazma PAF ve agragasyon düzeyleri üzerine etkili olabileceğini düşündürmektedir. Ancak farklı gruplarda, MDR-1 geninin 2 polimorfik bölgesinin (C3435T ve G2677A/T) genotiplerine göre PAF düzeyleri ve trombosit agregasyon parametreleri değerlendirildiğinde; benzerlikler ve farklıklar mevcuttur. Bu değişkenliğin sebebinin genotiplerden kaynaklanıp kaynaklanmadığını tam olarak açıklayabilmek için denek sayısı arttırılarak değerlendirilmelidir.Anahtar Kelimeler: Trombosit Aktive Edici Faktör (PAF), Çoklu İlaç Dirençliliği-1 (MDR-1), Koroner Arter Hastalığı (KAH), Triallelik polimorfizm G2677A/T, Haplotip. Bu çalışma, İstanbul Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Birimi tarafından desteklenmiştir. Proje No: T-7883/05072010

Abstract:
Platelet activating factor (PAF) is a proinflammatory mediator which plays major roles in activation and aggregation of platelets. High levels of PAF has been shown to be related to coronary artery disease (CAD). MDR-1 protein, which is a member of ABC transporters family, takes place in transport of several proteins and xenobiotics as well as PAF. Several SNPs have been reported in MDR-1 gene so far. C3435T polymorphism in Ekson 26, which do not cause an amino acid change, have been reported to effect the affinity of MDR-1 to its substrates. G2677A/T polymorphism in Ekson 21 alters protein functions and structure as a result of amino acid change. Association of these polymorphisms with PAF transport rate is not known.Our goal in this study was to investigate the correlation of plasma PAF levels (which is known to be high in patients with CAD) with MDR-1 C3435T and G2677A/T polymorphisms. Study population was composed of 198 patients undergoing coronary angiography. Patients with normal coronary arteries (n=85) formed the control group and patients coronary artery disease (n=113) formed the study group. Patients with CAD were further divided into 3 groups according to the number of vessels involved (one vessel disease=43, two vessels disease=36 and three vessel disease =34). PCR-RFLP and ELISA was used for genotyping and plasma PAF level measurement. Percentage platelet aggregation was also studied by ADP stimulation of blood samples.MDR-1 C3435T and G2677A/T polymorphisms revealed no difference between patient and control groups (p>0.05). Extent of CAD according to the number of involved vessels was not associated with the percentage aggregation levels (p>0.05), however plasma PAF levels was found to be correlated with the extension of disease (p<0.05). Patient and control groups PAF and aggregation levels showed significant differences with regard to C3435T and G2677A/T genotypes (p<0.05). Ours findings suggest that C3435T and G2677A/T polymorphisms may be associated with plasma PAF and aggregation levels however similarities and differences are found when PAF levels and platelet aggregation parameters were evaluated according to MDR-1 genes 2 polymorphic regional genotypes (C3435T ve G2677A/T) in different groups. More patients are required to demonstrate the role of genotypes in this differentiation.Key Words: Platelet Activating Factor (PAF), Multi Drug Resistance-1(MDR-1), Coronary Artery Disease (CAD),Triallelic polymorphism G2677A/T, Haplotype.The present work was supported by the Research Fund of Istanbul University. Project No. T-7883/05072010