Obsesif-kompülsif bozukluk ile NLRP3 inflamazom aktivitesi arasındaki olası ilişkinin araştırılması
Investigation of the relationship between obsessive-compulsive disorder and NLRP3 inflammasome activity
Yazar: MELİKE TETİK OKTAY
Danışman: PROF. DR. TUNÇ ALKIN
Dokuz Eylül Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Sinir Bilimi Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2018
Konu: Psikiyatri = Psychiatry ; Psikoloji = Psychology
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Biyobelirteçler = Biomarkers ; Kaspazlar = Caspases ; Obsessif kompülsif bozukluk = Obsessive compulsive disorder ; İnflamazom = Inflammasome

Özet:
Giriş: Obsesif kompulsif bozukluk (OKB) tanılı hastalarda ve sağlıklı kontrollerde yapılan çalışmalarda belli başlı pro-inflamatuar ve anti-inflamatuar sitokinlerin kandaki düzeyleri incelenmiş ve nöroinflamatuar düzensizliklere işaret edebilecek ipuçları elde edilmiştir. Ancak OKB patogenezinde inflamasyonun yeri tartışmalıdır. 
Amaç ve Hipotez: Araştırmanın amacı, OKB patofizyolojisinde rol oynadığı düşünülen inflamatuar süreçlerde NLRP3 inflamazomunun olası rolünün ortaya çıkarılması ve klinik özelliklerle ilişkisinin değerlendirilmesidir. Araştırmanın hipotezi, OKB etiyolojisinde rol oynadığı düşünülen inflamasyonun, NLRP3 inflamazomu aracılığıyla etkili olduğudur.
Yöntem: Çalışmaya, DSM-IV'e göre OKB tanısı almış, 18-45 yaş arasındaki 51 hasta ve yaş ve cinsiyet olarak eşleştirilmiş psikiyatrik bir hastalığı bulunmayan, 52 sağlıklı kontrol dahil edilmiştir. Tüm katılımcılara "Yapılandırılmış Klinik Görüşme", "Yale Brown Obsesyon ve Kompulsiyon Ölçeği", "Hamilton Depresyon Ölçeği" ve "Hewitt Mükemmeliyetçilik Ölçeği" uygulanmıştır. 
Periferik kan örneklerinden mononükleer hücrelerden (PKMH) RNA ve protein elde edilerek, NLRP3 inflamazomonu oluşturan proteinleri kodlayan NLRP3, Kaspaz-1 ve ASC genleri ile bu inflamazomun aktivitesini düzenleyen NEK7 geninin mRNA ifade seviyeleri gerçek-zamanlı kantitatif PCR (qRT-PCR) yöntemiyle, protein seviyeleri ise Western Emdirim (blotlama) yöntemiyle belirlenmiştir. Serum IL-1beta ve IL-18 sitokin seviyeleri ELISA yöntemiyle belirlenmiştir. 
Bulgular: NEK7 ve Kaspaz-1 mRNA ifade seviyelerinin OKB hastalarında kontrollere kıyasla daha yüksek olduğu belirlendi. Regresyon analizi sonucunda, NEK7 mRNA ifade seviyesinin hasta ve sağlıklı grupları ayırıcı olduğu belirlendi. İnflamazom alt birimleri ile OKB alt grupları arasındaki ilişki incelendiğinde, ASC mRNA seviyeleri ile OKB Dini-cinsel obsesyon-kompulsiyon alt grupları arasında ilişki saptandı. 
Sonuç: Kandaki NEK7 ve Kaspaz-1 gen ifade seviyeleri OKB'de biyobelirteç olarak kullanılabileceği gibi, OKB'deki inflamatuar değişimleri açıklamaya yardımcı olabilir.

Anahtar Kelimeler: Obsesif kompulsif bozukluk, NLRP3, inflamazom, Kaspaz-1, ASC,
NEK7

Abstract:
Introduction: In the studies performed in patients with obsessive-compulsive disorder (OCD) and in healthy controls, the levels of the major pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines in the blood were examined and clues were obtained that suggested neuroinflammatory irregularities. However, the role of inflammation in the pathogenesis of OCD is controversial.
Aim and Hypothesis: The aim of this study was to determine the possible role of NLRP3 inflammasome in the inflammatory processes that are thought to play a role in OCD pathophysiology and to evaluate its relationship with clinical features. The hypothesis of this study is that inflammation in OCD, which is thought to play a role in its etiology, is effective through NLRP3 inflammasome.
Methods: The study included 51 patients aged between 18-45 years who were diagnosed with OCD according to DSM-IV, and 52 healthy age and gender matched controls with no history of psychiatric disease. "Structured Clinical Interview", "Yale Brown Obsession and Compulsion Scale", "Hamilton Depression Scale" and "Hewitt Perfectionism Scale" were applied to all participants.
RNA and protein were extracted from the peripheral blood mononuclear cells (PKMH) isolated from patients and control blood samples. mRNA and protein expression levels of the NLRP3 inflammasome components NLRP3, Kaspaz-1 and ASC genes, as well as that of NEK7 gene, which regulate the activity of NLRP3, was determined by quantitative real-time PCR (qRT-PCR) and Western blotting methods, respectively. Serum IL-1beta and IL-18 cytokine levels were determined by ELISA method.
Results: NEK7 and Kaspaz-1 mRNA expression levels were higher in OCD patients compared to healthy controls. Regression analysis suggested that, NEK7 mRNA expression level can discriminate patient and healthy groups. When the relationship between inflammasome subunits and OCD subgroups was examined, ASC mRNA level was correlated with religious-sexual obsession-compulsion subgroup of OCD.
Conclusion: NEK7 and Kaspaz-1 gene expression levels in the blood can be used as biomarkers in OCD, and may help explain inflammatory changes in OCD.

Keywords: Obsessive compulsive disorder, NLRP3, İnflammasome, Kaspaz-1, ASC, NEK7
genes