Diyabetin fare sertoli hücreleri arasındaki sıkı bağlantı kompleksleri üzerine etkisinin immünohistokimyasal ve elektron mikroskobik olarak incelenmesi
Immunohistochemical and ultrastructural examination of the effects of diabetes on tight junctional complexes between the sertoli cells of mice
Yazar: MİKAİL SAUTOĞLU
Danışman: PROF. DR. ŞAKİR NECAT YILMAZ
Mersin Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2015
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Claudin = Claudin ; Diabetes mellitus = Diabetes mellitus ; Fareler = Mice ; Mikroskopi-elektron = Microscopy-electron ; Sertoli hücreleri = Sertoli cells ; Testis = Testis ; İmmünohistokimya = Immunohistochemistry

Özet:
Diyabetin fare Sertoli hücreleri arasındaki sıkı bağlantı kompleksleri
üzerine etkisinin immünohistokimyasal ve elektron mikroskobik olarak
incelenmesi
Diabetes mellitus (DM), tüm toplumda görülebilen, komplikasyonları
nedeniyle yaşam kalitesini ve süresini etkileyen, kronik metabolik bir hastalıktır.
Diyabet geniş anlamda erkek infertilitesi üzerine ciddi zararlı etkilere sahip
olmakla birlikte diyabete bağlı olarak infertilite sık rastlanan sorunlardan biridir.
Daha önce diyabetin testis üzerindeki patolojik mekanizmaları açıklanmış olmakla
birlikte, diyabetin fare Sertoli hücreleri arasıdaki sıkı bağlantı kompleksleri
hakkında fazla bilgi verilmemiştir. Biz bu çalışmamızda, diyabetin fare Sertoli
hücreleri arasında bulunan ve sıkı bağlantı kompleksleri olan Claudin-11 ve
Zonula occludens-2 (ZO-2) üzerindeki etkilerini ve Kan tesis bariyerine verdiği
hasarı Lanthanum nitrat ile göstermeye çalıştık.
Çalışmada 27 adet 8 haftalık Balb/C erkek fare kullanıldı ve her grupta 9
hayvan olacak şekilde 3 gruba ayrıldı. Kontrol farelere deney süresince hiçbir
işlem yapılmadı. Sham grubundaki farelere 4 ardışık gün boyunca, aynı saate 0.5
ml sitrat tampon intraperitoneal (i.v.) enjekte edildi. Diyabet grubundaki farelere
4 ardışık gün boyunca 50 mg/dl sitrat tampon (pH:4,6) içerisinde çözündürülmüş
streptozotosin verildi. Kan glikoz değerleri 200 mg/dl'dan yüksek olanlar diyabet
kabul edildi. Son enjeksiyondan 4 hafta sonra tüm fareler sakrifiye edildi. Elde
edilen testis dokuları Claudin-11 ve ZO-2 immünohistokimya ve elektron
mikroskobik incelemeler için takip edildi.
Diyabetik farelerde Claudin-11 ve ZO-2 immün işaretlenme yoğunluğunun
diğer gruplara göre anlamlı olarak azaldığı saptandı (sırasıyla p<0,05 ve p<0,05).
Diyabet grubunda, diğer gruplara göre hem toplam hem de testis ağırlıklarında 
xiii
azalma görüldü. Bunun yanı sıra Johnsen skorlamasıyla seminifer tübüllerin
kalitesinin azaldığı izlenmiştir. Ayrıca diyabet grubuna ait testis dokusunun
elektron mikroskobik değerlendirilmesinde Sertoli hücreleri arasındaki sıkı
bağlantı kompleksleri hasara uğradığı ve kan testis bariyterinin bozulduğu
Lanthanum nitrat adı verilen izleyiciyle görülmüştür.
Sonuç olarak; Diyabet Claudin-11 ve ZO-2 ekspresyonlarının azalmasının,
Sertoli hücreleri arasındaki sıkı bağlantıyı bozduğu ve Kan testis bariyerini hasara
uğratarak erkeklerde subfertilite veya infertiliteye yol açabilceği düşünülmüştür.
Anahtar kelimeler: Diabetes mellitus, Diyabet, Kan testis bariyeri, Claudin-11,
Zonula Occludens-2

Abstract:
Analysis of how diabetes influences the tight junctional complexes of mice
Sertoli cells in an immunohistochemical and electron microscopic way.
Diabetes mellitus (DM) is a chronical and metabolic disease, that could
appear in any society and that affects quality and length of life due to its
complications. Diabetes can have significant influence on male infertility in a
broad sense, as well as is one of the frequent problems. The pathological
mechanism of diabetes on testicles has been explicated previously as well as no
information was given about the tight junctional complexes between diabetes and
mouse Sertoli cells. In this study, we have tried to show the influence of diabetes on
Claudin-11 and Zonula occludens-2 (ZO-2), which are tight junction complexes
and are found in mouse Sertoli cells, and show the damage it causes on blood testis
barrier with the help of Lanthanum nitrate.
In this study, 27 male 8-week mice were used and were splitted into 3
groups with 9 animals each. No action was taken on the control mice during the
experiment. 0.5 ml citrate tampon intraperitoneal has been injected into the mice
of group Sham on 4 consecutive days at the same time. STZ that was solved in 50
mg/dl citrate buffer (pH:4,6) was injected to the diabetic mice during 4 days.
Whose blood glucose values are higher than 200 mg/dl were considered diabetic. 4
weeks after the last injection all mice were sacrificed. The testis tissues Claudin-11
and ZO-2 obtained were followed for immunohistochemistry and electron
microscopic surveys.
It has been detacted that the immune stainig density of Claudin-11 and ZO-
2 on the diabetic mice has been decreased expressively comparing to the other
groups (respectively p<0,05 and p<0,05). In the Diabetes group, a decrease has
been seen both in total and in the testis weight comparing to the other groups. In 
xv
addition to this, regarding Johnsen scoring a decrease in the quality of
seminiferous tubules has been followed. Besides, regarding to Diabetes group it has
been found, in the electron microscopic evaluation of testis tissue with the tracer
named Lanthanum nitrate, that the tight junction complexes between the sertoli
cells have been damaged and that the blood testis barrier has been destroyed.
As a result: It is considered that due to the decrease of expressions of
Claudin-11 and ZO-2, diabetes ruins the tight junction between Sertoli cells and
damages the blood barriers and these can cause subfertility and infertility on
males.
Key words: Diabetes mellitus, Diabetes, Blood testis barrier, Claudin-11, Zonula
Occludens-2