Amniyon sıvı incelenmesinde down sendromu tespit edilmiş gebelerde oksidan/antioksidan sistem, IL-6 ve IL-10 parametrelerinin değerlendirilmesi
Evaluation of oxidant / antioxidant system parameters, IL-6 and IL-10 levels  in amniotic fluid of pregnancies with down sydrome
Yazar: SEDA BAHSİ
Danışman: PROF. DR. BERRİN İMGE ERGÜDER
Ankara Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2014
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Amniotik sıvı = Amniotic fluid ; Antioksidanlar = Antioxidants ; Down sendromu = Down syndrome ; Oksidanlar = Oxidants ; Prenatal teşhis = Prenatal diagnosis ; Süperoksit dismutaz = Superoxide dismutase ; İnterlökin 10 = Interleukin 10 ; İnterlökin 6 = Interleukin 6

Özet:
Down Sendromu genetik kaynaklı mental retardasyonun en sık nedeni olup, birçok
klinik ve dismorfolojik bulgularla kendini gösteren önemli bir sağlık sorunudur.
Down Sendromu açısından riskli popülasyona invaziv tanı testleri uygulanarak
prenatal tanı konabilmektedir. Bu invaziv tanı testlerinden en çok kullanılan ise
amniyosentezdir. Amniyosentez ile alınan amniyon sıvısı örneğinde fetal kromozom
analizi, enzimatik çalışmalar, DNA analizleri yapılabilir ve bize gebelik hakkında
bilgi verebilir. Down Sendromlu bebek sahibi gebelerde oksidatif stres belirteçlerinin
yükseldiği daha önce gösterilmiştir. Bu araştırma amniyosentez ile DS tanısı konmuş
bebek sahibi gebelerin amniyon sıvılarında oksidan/antioksidan sistem ve interlökin-
6 (IL-6)/interlökin-10(IL-10)düzeylerinin durumunun ortaya konması amaçlanmıştır.
Bu amaçla Zekai Tahir Burak Kadın Sağlığı Eğitim ve Araştırma Hastanesi Genetik
Merkezi'ne başvurup amniyosentez yapılan gebelerin amniyon sıvılarının genetik
inceleme sonuçlarına göre DS'lu bebeğe sahip olan 18 gebenin amniyon sıvısı ve
sağlıklı bebeğe sahip 36 gebenin amniyon sıvısı çalışma kapsamına alınarak iki grup
oluşturulmuştur. Alınan örneklerde malondialdehit (MDA), süperoksit dismutaz
(SOD), glutatyon peroksidaz (GSH-Px) ve ksantin oksidaz (XO), katalaz (CAT),
adenozin deaminaz (ADA), nitrik oksit (NO), nitrik oksit sentaz (NOS)
spektofotometrik yöntemlerle IL-6 ve IL-10 testlerinin ölçümleri ise ELISA
yöntemiyle belirlenmiştir. İstatiksel değerlendirmede Student t testi ve spearman
korelasyon analizi kullanılmıştır. P<0,05 için sonuçlar istatistiksel olarak anlamlı
kabul edilmiştir.
Araştırmanın bulgularına göre çalışma grubunda SOD düzeyi, kontrol grubuyla
karşılaştırıldığında istatiksel olarak anlamlı derecede artmıştır (p<0,05). Bununla
birlikte çalışma grubunda CAT ve IL-6, kontrol grubuyla karşılaştırıldığında
istatiksel olarak anlamlı derecede azalmıştır (p<0,05). Her iki grup arasında MDA,
GSH-Px, XO, NO, NOS, ADA ve IL-10 düzeyleri bakımından anlamlı bir farklılık
gözlenmemiştir (p>0,05). Sonuç olarak DS'lu grupta SOD enzim aktivitesi artmış olarak bulunmuştur. Bu sonuca 21. kromozom üzerinde yer almakta olan SOD geninin neden olduğunu
düşünmekteyiz. Ayrıca kontrol grubuna kıyasla DS'lu bebeğe sahip gebelerin
amniyon sıvılarında SOD enziminin aktivitesi sonucunda oluşan aşırı miktardaki
H2O2'i temizleyecek düzeyde CAT ve GSH-Px'ın bulunmaması ciddi bir oksidatif
strese yol açmaktadır. Bu veriler doğrultusunda SOD enzimini prenatal tanıda
belirteç olarak kullanmak yararlı bir yaklaşım olabilir. Bu amaçla daha yüksek sayıda
yapılmış çalışmaların gerçekleştirilmesi gerekmektedir

Anahtar Sözcükler: Down Sendromu, interlökin-6/ interlökin-10, Oksidan/antioksidan sistem, prenatal tanı, SOD.

Abstract:
Down sydrome (DS) is a genetic disorder that is the most commonly recognized
genetic cause of mental retardation and it presents with many clinical and
dismorphologic findings. Down sydrome can be diagnosed at high-risk of down
syndrome pregnancies by invasive prenatal testing. The most common invasive
prenatal test for diagnosis of DS is amniocentesis. Amniotic fluid sampling can
provide a lot of data by allowing analysis of fetal chromosomes, fetal DNAs and
enzymatic activity. It is previously shown that oxidative stress marker levels are
statistically elevated in amniotic fluid samples of pregnancies with DS. In this study
we aimed to demonstrate antioxidant/oxidant system markers, IL6 and IL10 levels in
amniotic fluid samples of pregnancies affected by DS.
For this purpose we collected amniotic fluid samples from 18 pregnancies affected
by down sydrome and 36 normal healthy pregnancies who applied to Zekai Tahir
Burak Research and Training Hospital Genetic Center and were proceeded with
amniocenthesis. In the amniotic fluid samples; malondialdehyde (MDA), superoxide
dismutase (SOD), glutathion peroksidase (GSH-Px) xhantine oksidase (XO), catalase
(CAT), adenozine deaminase (ADA), nitrik oxide (NO), nitrik oxide senthase (NOS)
enzymatic activities were evaluated by spectrophotometric methods, IL6 and IL10
levels are evaluated by ELISA. For statistical analysis Student's t–test and Spearman
corralation analusis are used.
It was found that SOD levels are significantly elevated in study group compared to
control group (p<0,05). Besides this, in study group, CAT and IL-6 levels are found
singnificantly lower than control group (p<0,05). We couldn't find any significant
difference between two groups in terms of MDA, GSH-Px, XO, NO, NOS, ADA ve
IL-10 levels (p>0,05).
As a consequence, SOD enzyme activity was found to be increased what we think is
caused from SOD gene on 21 st chromosome. Also not having enough CAT and GSH-Px to clear up the high H2O2 increase because of the high SOD enzyme activity
in DS pregnancies causes a real oxidative stress. Based on these results, SOD
enzyme can be used as a marker for prenatal diagnosis of DS. For this purpose these
experiments should be tried on larger sample groups.

Keywords: Down syndrome, interleukin-6/interleukin-10, oxidant/antioxidant system, prenatal diagnosis, superoxide dismutase