Sıçanlarda zimosan ile oluşan hipotansiyona dalak tirozin kinazının katkısının araştırılması
Investigation of the contribution of spleen tyrosine kinase on zymosan-induced hypotension in rats
Yazar: DEMET ÜNSAL
Danışman: DOÇ. DR. SEYHAN ŞAHAN FIRAT
Mersin Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2013
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Dalak = Spleen ; Hipotansiyon = Hypotension ; Sıçanlar = Rats ; Tirozin = Tyrosine ; Tümör nekroz faktörleri = Tumor necrosis factors ; Zimosan = Zymosan ; İnflamasyon = Inflammation

Özet:
Bu çalışmada, zimosanın neden olduğu hipotansiyona dalak tirozin kinazı 
(Dtk)'nin katkısı seçici Dtk inhibitörü BAY 61-3606 uygulanan sıçanlarda 
vazodilatör ve proenflamatuvar mediyatörlerin oluşumu ile ilişkilendirilerek 
araştırıldı. Deneylerde kontrol grubu olarak serum fizyolojik (SF) ve septik
olmayan şok grubu olarak zimosan, deney grubu olarak da tek başına veya 
zimosan ile birlikte BAY 61-3606 uygulanan erkek Wistar sıçanlar kullanıldı. BAY 
61-3606 sıçanlara SF veya zimosan enjeksiyonundan 1 saat sonra uygulandı. 
Sıçanlara SF veya zimosan enjeksiyonundan hemen önce ve enjeksiyondan 1, 2, 3 
ve 4 saat sonra kuyruktan OAB ve kalp hızı (KH) kayıtları alındı. Deneyler 
sonunda öldürülen sıçanlardan alınan kanlardan hazırlanan serum örneklerinde 
nitrit; böbrek, kalp, torasik aort (TA) ve süperiyor mezenterik arterleri (SMA)'da
Dtk, fosforile Dtk, κB inhibitörü (IκB)-α, fosforile IκB-α, nükleer faktör κB (NF-
κB) p65, fosforile NF-κB p65, indüklenebilir nitrik oksit sentaz (iNOS) ve
siklooksijenaz (COX)-2 protein ekspresyonları ölçüldü. Aynı dokularda nitrit, 
nitrotirozin (NT), tümör nekroze edici faktör (TNF)-α ve 6-keto-PGF1α düzeyleri 
ile miyeloperoksidaz (MPO) etkinliğine bakıldı. Sıçanlara zimosan 
uygulanmasından 4 saat sonra OAB 60 mmHg azaldı, KH 94 atım/dakika arttı. 
Dtk ekspresyonu zimosan uygulaması ile değişmezken; IκB-α protein ekspresyonu 
azaldı. Dtk ve IκB-α fosforilasyonu, NF-κB p65 ekspresyonu ve fosforilasyonu, 
iNOS ve COX-2 protein ekspresyonları ise zimosan ile arttı. Zimosan serum 
ve/veya dokularda ölçülen nitrit, NT, TNF-α ve 6-keto-PGF1α düzeyleri ile MPO 
etkinliğinde artmaya nedne oldu. Zimosanın neden olduğu tüm bu değişiklikler 
BAY 61-3606 ile geri çevrildi. Bu çalışmanın bulguları, zimosan ile oluşan NO, 
peroksinitrit, prostasiklin ve TNF-α oluşumunda artma ile belirgin enflamasyonun 
eşlik ettiği hipotansiyona Dtk'nin katkıda bulunabileceğini gösterdi.

Anahtar kelimeler: Zimosan, hipotansiyon, enflamasyon, Dtk, BAY 61-3606

Abstract:
In this study, contribution of spleen tyrosine kinase (Syk) to zymosan 
induced hypotension in relation with vasodilator and proinflammatory mediator 
production, was investigated in selective Syk inhibitor, BAY 61-3606-injected rats. 
In the experiments, saline-, zymosan-, BAY 61-3606- and/or zymosan+ BAY 61-
3606-injected male Wistar rats were used as control, non-septic shock and
experimental group, respectively. BAY 61-3606 was administered 1 hour after 
injection of saline or zymosan. MAP and heart rate (HR) were measured from rats 
received either saline or zymosan at time points of 0, 1, 2, 3 and 4 hours by tail cuff 
method. At the end of the experiments, rats were euthanized and serum nitrite
levels and protein expression and/or phosphorylation of Syk, nuclear factor κB 
(NF-κB) p65, inhibitor of κB α (IκB)-α, inducible nitric oxide synthase (iNOS) and 
cyclooxygenase (COX)-2 were measured in kidney, heart, thoracic aorta (TA) and 
superior mesenteric artery (SMA). Nitrite, nitrotyrosine (NT), tumor necrosis 
factor (TNF-α), and 6-keto-PGF1α levels and myeloperoxidase (MPO) activity were 
measured in the same tissues. MAP fell by 60 mmHg and HR rose by 94 beats/min 
at 4 hours after zymosan administration. Although, tissue protein expression of 
Syk did not change, protein expression of IκB-α was decreased after zymosan 
administration. Phosphorylation of Syk and IκB-α, expression and 
phosphorylation of NF-κB p65, and protein expression of iNOS and COX-2 were 
increased after zymosan administration. Serum and/or tissue nitrite, NT, 6-ketoPGF1α, and TNF-α levels as well MPO activity were increased. The zymosaninduced changes were reversed by BAY 61-3606. The results of this study 
demonstrated that, Syk could contribute to the zymosan-induced hypotension and 
inflammation associated with increased production of NO, peroxynitrite, 
prostacyclin, and TNF-α.

Key Words: Zymosan, hypotension, inflammation, Syk, BAY 61-3606