Prenatal uygulanan diklofenak sodyumun postnatal sıçan duktus epididimis ve duktus deferenslerinde COX-2 dağılımına etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of diclofenac sodium administered prenatal on COX-2 expressions in postnatal rat ductus epididymis and ductus deferens
Yazar: OĞUZHAN KUŞCU
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ FİKRET ALTINDAĞ
Van Yüzüncü Yıl Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Diklofenak sodyum = Diclofenac sodium ; Epididimis = Epididymis ; Gen ifadesi = Gene expression ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Sıçanlar = Rats ; Vas deferens = Vas deferens

Özet:
Çalışmamızda prenatal dönemde sıçanlara diklofenak sodyum uygulanarak diklofenak sodyumun postnatal erişkin yavruların duktus epididimis ve duktus (vas) deferens dokularındaki COX-2 dağılımına etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Bu amaçla çalışmada ağırlıkları 200-300 gr arasında olan, 8 adet erişkin Wistar Albino türü gebe olmayan dişi sıçan ve 2 adet damızlık erkek sıçan kullanıldı. Sıçanlar bir gece boyunca çiftleşmeye bırakıldı ve gebe kaldığı belirlenen sıçanlar Sham (S) ve diklofenak sodyum (DS) olmak üzere 2 gruba ayrıldı. S grubuna gebeliğin 5-15. günleri arası 10 gün süre ile 1 ml/kg/gün serum fizyolojik IM yolla, DS grubuna ise 6.1 mg/kg/gün DS, IM yolla enjekte edildi. Doğan erkek yavrulardan her bir grup için 7 adet sıçan kullanıldı. Sıçanların kan örneklerinden serum testesteron seviyeleri belirlendi. Stereolojik olarak mast hücrelerinin sayısal yoğunluğunun hesaplanması için fiziksel disektör sayım metodu uygulandı. Dokulardaki COX-2, Kaspaz-3, Kaspaz-8, Kaspaz-9, TNF-α ve IL-10 ekpresyonları immünohistokimyasal olarak değerlendirildi. Çalışmanın sonuçlarına göre, DS grubuna ait sekiz haftalık yavru sıçanların serum testesteron seviyelerinin S grubuna kıyasla istatistiksel açıdan anlamlı derecede azaldığı (p<0.05) gözlenirken; DS grubuna ait yavruların epididimis ve vas deferenslerindeki mast hücre sayısında S grubuna kıyasla anlamlı bir artış olduğu (p<0.05) belirlendi. DS grubuna ait yavruların epididimis ve vas deferenslerinin bağ dokularında S grubuna kıyasla fibrotik kalınlaşma gözlendi. S grubuna ait yavruların kaput epididimislerinde orta, kauda epididimislerinde güçlü COX-2 ekspresyonu gözlenirken, DS grubuna ait yavruların kaput ve kauda epididimislerinde COX-2 ekspresyonunun azaldığı gözlendi. S ve DS gruplarına ait yavru sıçanların korpus epididimis ve vas deferenslerinde COX-2 ekspresyonu gözlenmedi. S ve DS grubuna ait yavru sıçanların epididimis ve vas deferenslerinde Kaspaz-3, Kaspaz-8, Kaspaz-9 ve TNF-α ekpresyonu gözlenmedi. S grubu ve DS grubuna ait yavru sıçanların kaput ve kauda epididimislerinde orta, korpus epididimisleri ile vas deferenslerinde ise zayıf IL-10 ekpresyonu gözlendi. Çalışmamızın bulgularına göre uzun süreli maternal DS kullanımının postnatal erkek fertilitesini olumsuz etkileyebileceği söylenebilir.

Abstract:
In our study, it was aimed to investigate the effects of diclofenac sodium on the distribution of     COX-2 in the ductus epididymis and ductus (vas) deferens tissues of postnatal adult offspring of rats by administering diclofenac sodium to rats during the prenatal period. For this purpose, 8 adult Wistar Albino non-pregnant female rats and 2 breeding male rats weighing between 200-300 g were used in the study. The rats were let for copulation for a whole night and the rats determined to be pregnant were divided into 2 groups as Sham (S) and diclofenac sodium (DS). S group was injected with 1 ml/kg/day saline IM for 10 days between the 5th and 15th days of pregnancy, and 6.1 mg/kg/day DS was injected IM to the DS group. 7 male offspring of postnatal were used in each group. Serum testosterone levels were determined from blood samples of rats. Physical dissector counting method was applied to calculate the numerical density of mast cells stereologically. Expressions of COX-2, Caspase-3, Caspase-8, Caspase-9, TNF-α and IL-10 in tissues were evaluated immunohistochemically. According to the results of the study, it was observed that serum testosterone levels of eight-week-old offspring rats belonging to the DS group were statistically significantly decreased (p<0.05) compared to the S group. It was determined that there was a significant increase in the number of mast cells in the epididymis and vas deferens of the offspring of the DS group compared to the S group (p<0.05). Fibrotic thickening was observed in the connective tissues of the epididymis and vas deferens of the offspring of the DS group compared to the S group. While moderate COX-2 expression was observed in the caput epididymis and strong COX-2 expression in the cauda epididymis of the offspring belonging to group S, it was observed that COX-2 expression decreased in the caput and cauda epididymis of the the DS group. COX-2 expression was not observed in the corpus epididymis and vas deferens of the offspring rats belonging to the S and DS groups. Caspase-3, Caspase-8, Caspase-9, and TNF-α expression were not observed in the epididymis and vas deferens of the offspring rats belonging to the S and DS groups. Moderate IL-10 expression was observed in the caput and cauda epididymis of the offspring rats belonging to the S group and DS group, and weak IL-10 expression was observed in the corpus epididymis and vas deferens. According to the findings of our study, it can be said that long-term maternal DS use may adversely affect postnatal male fertility.