İntrauterin inseminasyon (IUI) sonucu'nun tahmininde spermatozoa DNA fragmantasyon seviyesi (SCD) ile anılin mavi boyama (ABT) testlerinin yeri
Aniline blue staining (ABT) tests with spermatozoa DNA fragmentation level (SCD) to estimating the result of intrauterine insemination (IUI)
Yazar: TALAL ZAID MOHAMMED ALDARAWSHA
Danışman: PROF. DR. TÜLAY İREZ
İstanbul Yeni Yüzyıl Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı / Klinik Embriyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Anilin bileşikleri = Aniline compounds ; DNA = DNA ; DNA hasarı = DNA damage ; Dölleme = Insemination ; Dölleme-yapay = Insemination-artificial ; Kısırlık = Infertility ; Sperm = Spermatozoa

Özet:
Giriş: Temel erkek ve kadın kısırlık sorunu her geçen gün artmakta ve erkek 
kısırlığı çiftlerin% 20'sinden fazlasını kapsamaktadır. Sperm kalitesinin 
değerlendirmesinde , DSÖ yönergelerine göre standart bir meni incelemesi yapılır. 
Ancak meni incelemesi, sperm DNA hasarı ve kromatin matüritesi ile ilgili yeterli 
bilgi sağlamaz.
 Rutin analize dayalı olarak, ileriye dönük yapılan gözlemsel çalışmalar , 
intrauterin inseminasyon (IUI) prosedürüne başlamadan önce sperm DNA 
fragmantasyonu ve kromatin olgunlaşması düzeyinde sperm fonksiyon testleri 
gerçekleştirmenin faydasını ortaya koymuştur.
Amaç: İntrauterin inseminasyon'a (IUI) başlamadan önce rutin semen analizi, sperm 
DNA fragmantasyonu ve sperm fonksiyon testlerinin kromatin olgunlaşma 
seviyesinde yapılması ve intrauterin inseminasyon (IUI) tedavisi görenlerde gebeliğin 
değerlendirilmesi amaçlandı.
Gereç ve yöntem: Bu prospektif çalışmada, Kasım 2020 ile Şubat 2021 arasında Al 
Farah tüp bebek ve yardımcı üreme merkezine başvuran açıklanamayan infertilite 
hastalarında intrauterin inseminasyon (IUI) uygulanan 111 çift değerlendirildi. Bu 
çalışmada, normozoospermik ve açıklanamayan infertiliteye sahip tüm erkekler, 
intrauterin tohumlama (IUI) ile devam etmeye karar vermeden önce bir androloji 
laboratuvarını ziyaret etti. Semen analizi Dünya Sağlık Örgütü (WHO4
1999) 
yönergelerine göre yapıldı. Ayrıca sperm DNA fragmantasyonu (halo testi) ve sperm 
olgunlaşması asidik anilin mavisi (ABT) ile gerçekleştirildi. İstatistiksel analizde 
(erkek yaşı, vücut kitle indeksi, Progresif sperm motilitesi, Sperm konsantrasyonu ve 
gebelik sonucu) SCD ve ABT arasındaki parametrik olmayan (Pearson ki-kare 
testleri) ve (Spearman's Rho korelasyon ) korelasyon kullanılmıştır. Tüm istatistiksel 
analizler, Statistical Package for Social Sciences (SPSS) software version 26.0 (IBM, 
USA) kullanılarak yapıldı. P <0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.
Bulgular: SCD ile sperm konsantrasyonu arasında korelasyon saptanmıştır (rs =-
0.212; p= 0.025). Sperm konsantrasyonu arttıkça SCD azalmaktadır. SCD ile sperm 
morfolojisi arasında korelasyon saptanmıştır (rs =-0.196; p= 0.039). Sperm 
konsantrasyonu arttıkça SCD azalmaktadır. Sperm morfolojisi arttıkça SCD 
azalmaktadır. ABT ile yaş , VKİ, Sperm konsantrasyonu, Sperm morfolojisi, Sperm 
hareketliliği arasında korelasyon saptanmamıştır. SCD ile Erkek yaşı, VKİ, Sperm 
hareketliliği arasında korelasyon saptanmamıştır.
 ABT gruplari gebelik sonucu bakiminda karşilaştirilmiş; normal ABT grubunda 
pozitif gebelik oraninin daha yüksek olduğu saptanmiştir (p=0,0005). ayraca SCD 
gruplari gebelik sonucu bakiminda karşilaştirilmiş; normal SCD grubunda pozitif 
gebelik oraninin daha yüksek olduğu saptanmiştir (p=0,017).
Tartışma: Bu çalışma, intrauterin inseminasyon vakalarında rutin semen analizi ile 
birlikte DNA fragmantasyon (SCD) ve sperm olgunlaşma testleri (ABT) kullanımının 
IUI sonuçlarına önemli katkı sağlayacağını göstermektedir. Bu testlerin uygulaması 
aynı zamanda progresif sperm hareketliliği ile sperm olgunlaşması arasındaki ilişkiyi 
de gösterir.

Abstract:
Introduction: The basic male and female infertility problem is increasing day by 
day and male infertility covers more than 20% of couples. In the evaluation of sperm 
quality, a standard semen examination is performed according to WHO guidelines. 
However, semen analysis does not provide sufficient information about sperm DNA 
damage and chromatin maturity.
 Based on routine analysis, prospective observational studies have 
demonstrated the benefit of performing sperm function tests at the level of sperm 
DNA fragmentation and chromatin maturation before starting the intrauterine 
insemination (IUI) procedure.
Objective: Before starting intrauterine insemination (IUI), it was aimed to perform 
routine analysis, sperm DNA fragmentation and sperm function tests at the chromatin 
maturation level and to evaluate pregnancy in patients undergoing intrauterine 
insemination (IUI).
Materials and methods: In this prospective study, 111 couples who underwent 
intrauterine insemination (IUI) in unexplained infertility patients admitted to Al Farah 
IVF and assisted reproductive center between November 2020 and February 2021 
were evaluated. In this study, all men with normozoospermic and unexplained 
infertility visited an andrology laboratory before deciding to proceed with intrauterine 
insemination (IUI). Semen analysis was performed according to the World Health 
Organization (WHO4
1999) guidelines. In addition, sperm DNA fragmentation (halo 
test) and sperm maturation were performed with Acidic Aniline Blue (ABS). Nonparametric (Pearson's chi-square tests) and (Spearman's Rho correlation) correlations 
between SCD and ABS were used in statistical analysis (male age, body mass index, 
Progressive sperm motility, sperm concentration and pregnancy outcome). All 
statistical analyzes were performed using the Statistical Package for Social Sciences 
(SPSS) software version 26.0 (IBM, USA). P <0.05 was considered statistically 
significant.
Results: Correlation was found between SCD and sperm concentration (rs = -0.212; p 
= 0.025). As the sperm concentration increases, the SCD decreases. Correlation was 
found between SCD and sperm morphology (rs = -0.196; p = 0.039). As the sperm 
concentration increases, the SCD decreases. As sperm morphology increases, SCD 
decreases. No correlation was found between ABS and age, BMI, sperm 
concentration, sperm morphology, sperm motility. No correlation was found between 
SCD and male age, BMI, sperm motility.
ABS groups were compared in terms of pregnancy outcome; positive 
pregnancy rate was found to be higher in the normal ABS group (p=0.0005). In 
addition, SCD groups were compared in terms of pregnancy outcome; positive 
pregnancy rate was found to be higher in the normal SCD group (p=0.017).
Discussion: This study shows that the use of DNA fragmentation (SCD) and sperm 
maturation tests (ABT) together with routine semen analysis in intrauterine 
insemination cases will make a significant contribution to IUI results. The application 
of these tests also shows the relationship between progressive sperm motility and 
sperm maturation.