Parsiyel
total nefrektomi yapılan sıçanlarda ipsilateral ve 
kontralateral böbrekteki kök hücre rezervinin değerlendirilmesi / Assessment of cell reserve in the ipsilateral and contralateral kidney after partial / total nephrectomy
Yazar: SONGÜL ARABUL AYDOĞDU
Danışman: PROF. DR. MUSTAFA MELİKOĞLU
Akdeniz Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Çocuk Cerrahisi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2016
Konu: Çocuk Cerrahisi = Pediatric Surgery
Dizin: Böbrek = Kidney ; Böbrek fonksiyon testleri = Kidney function tests ; Böbrek hastalıkları = Kidney diseases ; Kök hücreler = Stem cells ; Nefrektomi = Nephrectomy ; Sıçanlar = Rats ; Yaş faktörleri = Age factors

Özet:
Bu çalışma, renal doku kaybı sonrasında böbrekteki kök hücrelerle ilişkili adaptasyon mekanizmasını anlamak amacıyla yapıldı. Bu amaca yönelik olarak farklı oranlarda yapılan parsiyel / total nefrektominin ve yaş faktörünün böbrek fonksiyonları, kök hücre rezervi ve parankimal hücre proliferasyona etkisi sıçanlarda oluşturulan deneysel bir model üzerinde araştırıldı. 
Çalışmamızda sütten kesilmiş 3 haftalık yavru sıçanlar ve 8 haftalık ergin genç sıçanları içeren 2 ana grup oluşturuldu. Her grubun kendi içerisinde kontrol ve deney grubu mevcuttu. Kontrol grupları kendi yaş grubu içerisinde 3 gruba ayrıldı ve her bir kontrol grubunda 10 erkek sıçan kullanıldı. Deney grubu ise kendi yaş grubu içerisinde 9 gruba ayrılıp, her grupta 6 erkek sıçan kullanıldı. Sıçanlara tek taraflı total nefrektomi, 1/3 nefrektomi ve 5/6 nefrektomi yapılarak postoperatif 15, 30 ve 60. gün değerlendirmeleri yapıldı. Deneyin başlangıcında ve sonunda sıçanların ağırlıkları ölçüldü. Deney sonlandırılmadan kan ve böbrek örnekleri alınarak biyokimyasal ve immünohistokimyasal değerlendirilmeleri yapıldı. Biyokimyasal parametre olarak kan örneklerinde BUN ve kreatinin ölçümleri yapıldı ve istatistiksel olarak karşılaştırıldı. Doku örneklerinde ise kök hücre rezervi immünfloresan çift boyamayla (CD90 ve CD105), proliferasyon ise immünohistokimyasal olarak Ki67 boyamasıyla vizüel olarak değerlendirildi. 
Çalışmamızda kontrol grubundaki sıçanları ağırlık değişimleri hem yaşlara hem de nefrektomi türlerine göre anlamlı değişiklik göstermedi. Deney grubunun preoperatif ve postoperatif ağırlık ölçümlerinde sıçanlarda ağırlık artışı kontrollere göre daha az olmakla birlikte farklar istatistiksel olarak anlamlı idi (p<0.05). 5/6 nefrektomi yapılan hem 3 haftalık hem de 8 haftalık sıçanların 60. gündeki ağırlıkları 1/3 ve tek taraflı total nefrektomi yapılanlar ile karşılaştırıldığında anlamlı olarak düşük bulundu (p<0.05). 
Parsiyel/total nefrektomi sonrasında BUN değerleri tüm nefrektomi gruplarında, kontrol gruplarına göre artış göstermekle birlikte bu artış yalnızca 1/3 nefrektomi yapılan sıçanlarda anlamlı olarak bulunmadı. 5/6 nefrektomi grubunda BUN değerindeki artış postoperatif 15. gün diğer gruplara göre daha belirgindi. Deney gruplarının kreatinin değerleri ise sıçanların yaşları ve nefrektomi tekniklerinden bağımsız olarak tüm postoperatif dönemlerde kontrol gruplarındakiler ile karşılaştırıldığında aralarında anlamlı farklılık bulunmadı (p>0.05).
Her iki yaş grubu ve tüm postoperatif dönemler göz önüne alındığında, en fazla kök hücre rezervinin 5/6 nefrektomi yapılan 8 haftalık sıçanlarda olduğu bulundu. Çalışmamızda, en yüksek proliferatif aktivite tek taraflı total nefrektomi ve 5/6 nefrektomi yapılan gruplarda saptandı. Bu artış postoperatif 15. günde tubüllerde başlamış, 60. günde en yüksek düzeyine ulaşarak glomerül ve interstisyel hücrelerde de görülmüştür. Yaş gruplarına göre yapılan değerlendirmede proliferatif aktivitenin 3 haftalık sıçanlarda daha fazla olduğu bulundu.
Bu deneysel çalışma, böbreklerin doku/volüm kaybına kendisinde var olan kök hücre rezervi üzerinden rejeneratif yanıt verebileceğini desteklemiştir. Bu yanıt, böbreği ilgilendiren ve doku/volüm kaybına yol açan klinik durumların önlemesi ve giderilmesi için bir potansiyel taşımaktadır. Ancak bu bulguların daha ileri deneysel ve klinik araştırmalarla irdelenmesine gereksinim vardır.

Abstract:
In this study, In order to understand the adaptation mechanism of the kidney after partial / total nephrectomy performed at different rates, The effect of age factor on reserve and proliferation was evaluated experimentally to determine whether the stem cell reserve increased in the renal compensatory mechanism and whether there was a difference in the effect of nephrectomy on reserve and proliferation.
In our study, 2 main groups were formed, including 3 week old pups and 8 week old rats. Each group had its own control and experiment group. Control groups were divided into 3 groups in their age group and 10 male rats were used in each control group. Experimental group was divided into 9 groups in their age group and 6 male rats were used in each group. The rats underwent single-sided total nephrectomy, 1/3 nephrectomy and 5/6 nephrectomy, and post-operative 15, 30 and 60 day evaluations were performed. The weights of the rats were measured at the beginning and end of the experiment. Biochemical and immunohistochemical evaluations of blood and kidney samples were made before the end of the experiment. BUN and creatinine measurements were done as biochemical parameters and statistically compared. In the tissue samples, the stem cell reserve was evaluated by immunofluorescence double staining (CD90 and CD105), and the proliferation was visualized by immunohistochemical Ki67 staining.
In our study, weights of rats in the control group did not show any significant change with respect to both age and nephrectomy types. The preoperative and postoperative weight measurements of the experimental group were significantly lower than the weight increase controls (p <0.05). Weights on day 60 of both 3-week and 8-week rats with 5/6 nephrectomy were significantly lower than 1/3 and unilateral total nephrectomy (p <0.05).
BUN values after partial/total nephrectomy increased in all nephrectomy groups compared to control groups, but this increase was not found significant in only 1/3 nephrectomized rats. The increase in BUN in the 5/6 nephrectomy group was more prominent on the 15th postoperative day than in the other groups. Creatinine values of the experimental groups were not significantly different in all postoperative periods, regardless of the age of the rats and nephrectomy techniques, when compared to the control groups (p> 0.05).
Given both age groups and all post-operative periods, we found that the most stem cell reserve was in 8-week-old rats with 5/6 nephrectomy. In our study, the highest proliferative activity was detected in unilateral total nephrectomy and 5/6 nephrectomy groups. This increase was observed in glomeruli and interstitial cells, reaching the highest level on day 60, in tubules at postoperative 15th day. Proliferative activity was found to be higher in the 3-week-old rats than in the age-matched rats.
This experimental study supports that the kidneys may respond to tissue / volume loss regeneratively through its own stem cell reserve. This response has potential for prevention and treatment of kidney-related and clinical conditions leading to tissue / volume loss. However, these findings need further experimental and clinical investigations.