Tip 1 diyabetlilerde IL-22 ve IL-9 immün cevabının değerlendirilmesi
Evaluation of immune response of IL-22 and IL-9 in patients with TYPE 1 diabetes mellitus
Yazar: ÇAĞDAŞ UĞUR ADAŞ
Danışman: PROF. DR. ALİ OSMAN GÜROL
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / İmmünoloji Ana Bilim Dalı / İmmünoloji Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2020
Konu: Endokrinoloji ve Metabolizma Hastalıkları = Endocrinology and Metabolic Diseases
Dizin: Diabetes mellitus = Diabetes mellitus ; Diabetes mellitus-tip 1 = Diabetes mellitus-type 1 ; T lenfositleri = T lymphocytes ; İnterlökin 22 = Interleukin 22 ; İnterlökin 9 = Interleukin 9

Özet:
Tip 1 Diabetes Mellitus (T1DM), pankreas beta hücre tahribatına sebep olan çeşitli mekanizmalara bağlı metabolik hastalıktır. T lenfositleri alt grubu olan Th22, Th9, Tc22 ve Tc9 lenfositlerinin immün cevabının hastalık patogenezinde önemli bir rol alabileceği düşünülmektedir. Hastalık, bu hücrelerin arasındaki dengenin bozularak pankreatik beta hücrelerine immün atağın başlamasıyla meydana gelen bir süreç olarak bilinmektedir. Çalışmamıza katılan gönüllülerin  (n:20 T1DM'li ve n:10 sağlıklı kontrol) periferik kan örneklerinden elde edilen periferik kan mononükleer hücreler (PKMH'ler), PMA ve iyonomisin ile 5 saat kültüre edilerek CD3+CD4+ (T yardımcı), CD3+CD8+ (T sitotoksik) hücrelerinin yüzey molekül ekspresyonları, hücre içi IL-22 ve IL-9 sitokin sıklığı ve bu sitokinlerin plazma konsantrasyonları akım sitometrik olarak değerlendirilmiştir. IL-22 ve IL-9 gen ekspresyonları kantitatif gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu ile analiz edilerek 2-ΔΔCt formülü ile hesaplanmıştır. Hasta grupları ve sağlıklı kontroller karşılaştırıldığında, Tip 1DM'li hastalarda Th22, Th9 hücre yüzdesi ile IL-22 ve IL-9 plazma konsantrasyonları sağlıklı bireylere göre anlamlı derecede yüksektir (sırasıyla; p<0,001, p=0,002, p=0,001, p=0,02). IL-22 ve IL-9 gen ekspresyonları incelendiğinde IL-22 gen ekspresyonunun T1DM'li hastalarda sağlıklılara göre yaklaşık 2 kat daha fazla olduğu gözlenmiştir. Th22 hücre sıklığı ile plazma IL-22 konsantrasyon arasındaki korelasyon (p=0,011; R=0,456) pozitif yönde anlamlı derecede korelasyon göstermişlerdir. Bu sonuçlar, T hücre alt grupları ile ürettikleri IL-22 ve IL-9'un T1DM patogenezinde önemli bir role sahip olabileceğini düşündürmektedir.

Abstract:
Type 1 Diabetes Mellitus(T1DM) is a metabolic disease due to various mechanisms leading to pancreatic beta cell destruction. It is thought that the immune response of the subgroup of T lymphocytes, Th22, Th9, Tc22 and Tc9, can play an important role in the pathogenesis of the disease. The disease is known as a process that occurs when the immune attack begins with pancreatic beta cells by disrupting the balance between these cells. Peripheral blood mononuclear cells(PBMCs) obtained from the volunteers (n:20 patients with T1DM and n:10 healthy controls) participating in our study were cultured for 5 hours with PMA and ionomycin, Surface molecule expressions, intracellular IL-22 and IL-9 cytokine frequency of CD3+CD4+(T helper) and CD3+CD8+ cells(T cytotoxic)  were evaluated by using flow cytometry as well as concentrations of plasma IL-22 and IL-9 cytokines. IL-22 and IL-9 gene expressions were analyzed by quantitative Real-Time PCR (qRT-PCR) and calculated by the formula 2-ΔΔCt. When compared patient groups and healthy controls, Th22, Th9 cell percentage and IL-22 and IL-9 plasma concentrations were significantly higher in patients with T1DM than in healthy individuals (p<0.001, p=0.002, p=0.001, p=0.02, respectively). When IL-22 and IL-9 gene expressions were examined, it was observed that IL-22 gene expression was approximately 2 times higher in T1DM patients than in healthy subjects. Th22 cell frequency/concentration of plasma IL-22 correlation (p=0.011; R=0.456) showed a positive correlation. These results suggest that T cell subsets and their products, IL-22 and IL-9, may play an important role in the pathogenesis of T1DM.