Karaciğer dokusunda karbon tetraklorür ile oluşturulan hasara karşı beta glukan'ın  etkisi
A research on effects of beta glucan on carbon tetrachloride-induced hepatic damage
Yazar: SUNAY ÜNALMIŞ
Danışman: DOÇ. DR. ARZU HANIM YAY
Erciyes Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2019
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Glukanlar = Glucans ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Karaciğer = Liver ; Karaciğer hastalıkları = Liver diseases ; Karbon tetraklorür = Carbon tetrachloride ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Karaciğerde birden fazla ksenobiyotik hasar oluşturabilir ve bunlardan biri de karbon tetraklorür (CCl4)'dür. İmmün sistem modülatörüolan Beta glukan (β-glukan) güçlü bir antioksidandır. Bu çalışmada CCl4 ile karaciğer dokusunda oluşturulan hasar üzerine β-glukan'ın olası etkilerininin histopatolojik ve biyokimyasal yöntemler kullanılarak araştırılması amaçlandı.
Çalışmada, 48 adet 2 aylık Wistar albino türü erkek sıçan kullanıldı. Deney grupları şu şekilde belirlendi: Grup I (n=10): kontrol grubu, Grup II (n=12): 0,2 ml/kg/gün CCl4 intraperitoneal (ip) uygulanan grup, Grup III  (n=14): 0,2 ml/kg/gün CCl4 (ip) + 50 mg/kg/gün β-glukan oral gavaj yoluyla uygulanan grup, Grup IV (n=12):  50 mg/kg/gün β-glukan oral gavaj yoluyla uygulanan grup. Deneyin 11. günü denekler dekapite edilerek kanları ve karaciğer dokuları alındı. Karaciğer doku örneklerinde histopatolojik incelemeler için Hematoksilen&Eozin, Masson Trikrom ve Periodik Asit Schiff boyama metodları kullanılırken, PCNA, iNOS, HIF-1α ve İrisin immünreaktivitelerini belirlemek için ise immunohistokimya boyama metodu kullanıldı. Apoptotik hücre sayılarını belirlemek için TUNEL boyama yöntemi kullanıldı. Ayrıca serumda biyokimyasal parametreler  incelendi.
Çalışma bulgularına göre, kontrol ve β-glukan gruplarında karaciğerler normal doku yapısında gözlenirken, CCl4 ve CCl4+β-glukan uygulanan gruplarında mikro ve makro veziküler yağlanma, portal bölgede çoğunluğunu lenfosit mononüklear hücre infiltrasyonları gözlendi. PCNA, iNOS, HIF-1α ve İrisin ekspresyonu, CCl4+β-glukan uygulanan grupta kontrole göre artış gösterdi. İrisin, MPO, IL6, IL1, AST ve ALT seviyelerinin CCl4+β-glukan grubunda diğer deney gruplarına göre istatistiksel olarak anlamlı bir fark olduğu gözlendi. Apoptotik indeks CCl4+β-glukan ve  CCl4 uygulanan gruplarda diğer gruplara göre istatistiksel olarak anlamlı bir fark olduğu gözlendi.
Sonuç olarak CCl4 uygulamasının karaciğer dokusunda çok ciddi histopatolojik değişiklikler oluşturduğu, β-glukan'ın ise bu hasar üzerine koruyucu bir role sahip olmadığı hatta bu hasarı arttırıcı yönde aracılık ettiği gözlenmiştir.
Anahtar Kelimeler: Karbon Tetraklorür; Beta Glukan; Karaciğer; Sıçan

Abstract:
More than one xenobiotic damage can occur in the liver and and one of them is carbon tetrachloride (CCl4). Beta glucan (Β-glucan) is an immune system modulator and a powerful antioxidant. The aim of this study was to investigate the possible effects of β-glucan on liver tissue damage with CCl4 by using histopathological and biochemical methods.
In this study, 48 male Wistar albino rats were used for 2 months. Group I (n=10): control group, Group II (n=12):  0,2 ml/kg/day of carbon tetrachloride injected intraperitoneally (ip), Group III (n=14): 0,2 ml/kg/day of carbon tetrachloride + 50 mg/kg/day of β-glukan oral gavaje, Group IV (n=12): 50 mg/kg/day of β-glukan oral gavaje. Animals xylazine and ketamine were decapitated under anesthesia and taken their blood and livers on 11th day of study. Paraffin-embedded liver sections were stained with Hematoxylin&Eosin, Masson Trikrom and Periodik Asit Schiff. Immunohistochemistry staining method was used to determine PCNA, iNOS, HIF-1α and Irisin immunoreactivity. TUNEL method was used to evaluate apoptosis. All liver tissues were examined serum biochemical parameters.
According to the study findings showed that, in the control and β-glucan groups livers that were observed in normal tissue structure, micro and macro vesicular lubrication in CCl4 and CCl4 + β-glucan applied groups, the majority of the portal area was observed lymphocyte mononuclear cell infiltrations. PCNA, iNOS, HIF-1α and Irisin expression showed that in CCl4 + β-glucan treated group increased compared to control. Irisin, MPO, IL6, IL1, AST and ALT levels showed that were significantly different in statistics CCl4 + β-glucan group compared to the other experimental groups. There was showed a statistically significant difference in apoptotic index CCl4 + β-glucan and CCl4 groups compared to other groups.
As a result, it was observed that CCl4 administration caused very serious histopathological changes in liver tissue and β-glucan did not have a protective role on this damage and enhancing even mediated this damage.
Keywords: Carbon  Tetrachloride; Beta Glucan; Liver; Rat.