Roflumilastın tayini için yeni bir yüksek performanslı sıvı kromatografisi yönteminin geliştirilmesi ve validasyonu
Development and validation of a new high performance liquidchromatography method for the determination of roflumilast
Yazar: ULVI MEHDIZADE
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ PELİN KÖSEOĞLU YILMAZ
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Analitik Kimya Ana Bilim Dalı / Analitik Kimya Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2020
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology ; Kimya = Chemistry
Dizin: Antiinflamatuar ajanlar-nonsteroid = Anti inflammatory agents-nonsteroidal ; Fosfodiesteraz = Phosphodiesterase ; Kromatografi-sıvı = Chromatography-liquid ; Roflumilast = Roflumilast ; Yöntem geliştirme = Method developing ; İlaç değerlendirme = Drug evaluation ; İrbesartan = Irbesartan

Özet:
Roflumilast kronik obstrüktif akciğer hastalığı tedavisinde kullanılan non-steroidal antienflamatuvar bir fosfodiesteraz-4 inhibitörüdür. Bu yüksek lisans tezi kapsamında roflumilastın tablet formülasyonlarda miktar tayini için yeni bir floresans dedektörlü yüksek performanslı sıvı kromatografisi yönteminin geliştirilmesi ve valide edilmesi amaçlandı. Ayırma işlemleri 40ºC'de bir C18 analitik kolon (250 × 4,6   mm, 5 µm) ile gerçekleştirildi. Mobil faz olarak %20 sulu o-fosforik asit çözeltisi (0,08%) ve %80 metanol içeren bir sistem kullanıldı ve izokratik elüsyon uygulandı. Eksitasyon ve emisyon dalga boyları sırasıyla 290 ve 380 nm olarak belirlendi. Doğrusal aralık 1,25-10,00 μg/mL olarak tespit edildi. İç standart olarak ırbesartan kullanıldı. Gözlenebilme ve tayin sınırları sırası ile 0,07 μg/mL ve 0,22 μg/mL olarak hesaplandı. Yöntemin kesinlik ve doğruluğu 1,25, 5,00 ve 10,00 μg/mL konsantrasyonlarındaki standart çözeltiler ile belirlendi. Yüzde geri kazanım düşük, orta ve yüksek konsantrasyonlarda standart eklenen tablet çözeltilerinin analiz sonuçları ile hesaplandı. Yöntemin sağlamlığı, akış hızı, mobil faz bileşimi ve kolon sıcaklığı parametreleri ile incelendi. Önerilen metot roflumilastın tablet formülasyonlarda yüksek kesinlik ve doğruluk ile tayini için başarılı bir şekilde uygulandı.

Abstract:
Roflumilast is a non-steroidal anti-inflammatory phosphodiesterase-4 inhibitor used in the treatment of chronic obstructive pulmonary disease. In this MSc thesis, it was aimed to develop and validate a novel high performance liquid chromatography method with fluorescence detection for the quantification of roflumilast in tablet formulations. Separations were achieved by a C18 analytical column (250 × 4.6   mm, 5 µm) at 40ºC. Isocratic elution was applied with a mobile phase consisting of 20% aqueous o-phosphoric acid solution (0.08%) and 80% methanol. The excitation and the emission wavelengths were 290 and 380 nm, respectively. The linear range was 1.25-10.00 μg/mL. Irbesartan was used as the internal standard. Limits of detection and quantification were 0.07 μg/mL and 0.22 μg/mL, respectively. The precision and the accuracy of the method was determined at the concentrations of 1.25, 5.00 and 10.00 μg/mL. The recovery percent was calculated by the tablet solutions spiked at low, middle and high concentrations. The robustness of the method was tested in terms of flow rate, mobile phase composition and column temperature. The proposed method was successfully applied for the determination of roflumilast in tablet formulations with high precision and accuracy.