Deneysel kornea damarlanması modelinde Siklosporin A'nın etkinliğinin incelenmesi
Investigation of the effect of Cyclosporine A in an experimental model of corneal neovascularization
Yazar: YASİN YÜCEL BUCAK
Danışman: DOÇ. DR. MESUT ERDURMUŞ
Abant İzzet Baysal Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2012
Konu: Göz Hastalıkları = Eye Diseases
Dizin: Siklosporinler = Cyclosporins

Özet:
AMAÇ: Bu çalışmada; topikal % 0,05 siklosporin A'nın immün aracılı deneysel kornea neovaskülarizasyonu üzerine olan inhibitör etkilerini saptamak ve siklosporin A ile topikal % 0,1 deksametazon ve topikal % 0,5 bevacizumabın etkinliğinin karşılaştırılması amaçlanmıştır.METOD: Sığır serum albümini kullanılarak 36 tavşanda immün aracılı kornea neovaskülarizasyonu oluşturuldu. Daha sonra, tavşanlar topikal tedaviye göre randomize olarak dört gruba ayrıldı. Grup I; % 0,05 siklosporin A, Grup II; 0,1 deksametazon, Grup III; % 0,5 bevacizumab ve Grup IV; izotonik tuz çözeltisi tedavilerini 14 gün boyunca aldı. Vaskülarizasyonla kaplanmış kornea yüzeyinin total kornea alanına oranı fotoğraflar üzerinden ölçüldü. Tavşanlar sakrifiye edildikten sonra korneaları eksize edildi. Parafine gömülen kesitler, hematoksilen-eozin ve terminal deoksinükleotid transferaz aracılı dUTP-biotin uç etiketleme yöntemi (TUNEL) ile boyandı. Kornea dokusunda vasküler endotel büyüme faktörü (VEGF) ve CD31 immunohistokimyasal boyamalarının yoğunluğu semikantitatif bir yöntemle hesaplandı. İnflamatuar yanıt, inflamatuar hücre infiltrasyon miktarına göre; yok (0), hafif (1), orta (2) ve şiddetli (3) olarak sınıflandırıldı.SONUÇ: Grup I, II, III ve IV'te ortalama kornea neovaskülarizasyonu alanı yüzdeleri sırasıyla % 24,4, % 5,9, % 37,1 ve % 44,1 idi. Topikal % 0,05 siklosporin A'nın inhibitör etkileri, topikal % 0,5 bevacizumab ve kontrol grubuna göre daha üstün bulundu (sırasıyla, p=0,03 and p=0,02). Topikal % 0,05 siklosporin A'nın kornea neovakülarizasyonunu inhibe edici etkisi, topikal % 0,1 deksametazona göre anlamlı olarak düşük bulundu (p<0.001). Apoptotik hücre yoğunluğu grup III (22,7 hücre/mm2) ve grup IV'de (21,7 hücre/mm2), grup I (10,6 hücre/mm2) ve grup II' ye (11 hücre/mm2) göre daha yüksek bulundu. Apoptotik hücre yoğunluğu açısından grup I ve grup II arasında anlamlı fark saptanmadı (p=0,7). İnflamasyon skoru, grup I ve grup III arasında anlamlı fark göstermemekteydi (p=0,13). En düşük inflamasyon skoru grup II'de idi.TARTIŞMA: Bu tavşan modelinde, topikal % 0,05 siklosporin A'nın immün aracılı kornea neovaskülarizasyonu üzerine inhibitör etkileri olduğu gösterilmiştir. Topikal % 0,05 siklopsorin A ile apoptoz inhibisyonu, topikal % 0,1 deksametazon ile karşılaştırılabilir düzeyde bulunmuştur.ANAHTAR KELİMELER: Arthus reaksiyonu, kornea neovaskülarizasyonu, siklosporin A.

Abstract:
PURPOSE: We aimed to study the inhibitory effects of topical 0.05 % cyclosporine A on immune-mediated experimental corneal neovascularization and to compare its efficacy with those of topical 0.1 % dexamethasone and 0.5 % bevacizumab.METHODS: Immune-mediated corneal neovascularization was created by bovine serum albumin in 36 rabbits. The rabbits were then randomized into four groups according to topical treatment. Group I received 0.05 % cyclosporine A, Group II received 0.1 % dexamethasone, Group III received 0.5 % bevacizumab and Group IV received isotonic saline for 14 days. The corneal surface covered with neovascular vessels was measured on the photographs as the percentage of the total area of the cornea. The rabbits were then sacrificed and the corneas excised. Paraffin-embedded sections were stained with hematoxylin-eosin (HE) and terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling assay (TUNEL). The intensity of vascular endothelial growth factor (VEGF) and CD31 immunostainings in corneal tissue was performed in a semiquantitative fashion. Inflammatory response was classified as none (0), mild (1), moderate (2) or severe (3) according to the amount of inflammatory cell infiltration.RESULTS: The means of percent area of corneal neovascularization in Group I, II, III and IV were 24.4 %, 5.9 %, 37.1 %, and 44.1 %, respectively. The inhibitory effects of 0.05 % cyclosporine A was found to be better than 0.5 % bevacizumab and control groups (p=0.03 and p=0.02, respectively). Topical 0.05% cyclosporine A was found to be significantly lesser inhibitory effects on corneal neovascularization than the topical 0.1 % dexamethasone (p<0.001). Apoptotic cell density was higher in group III (22.7 cells/mm2) and group IV (21.7 cells/mm2) than group I (10.6 cells/mm2) and group II (11 cells/mm2). There was no difference between the group I and group II in terms of apoptotic cell density (p=0.7). Inflammation score was not significantly different between the group I and the group III (p=0.13). The lowest inflammation score was in the group II.CONCLUSION: Topical % 0,05 cyclosporine A was shown to have an inhibitoryeffects on immune-mediated corneal neovascularization in this rabbit model. Inhibition of apoptosis with topical 0.05 % cyclosporine A was comparable to that of topical 0.1 % dexamethasone.KEYWORDS: Arthus reaction, corneal neovascularization, cyclosporine A.