Lakkazın kızılçam kraft ve atık kağıt hamuru üzerindeki etkilerinin araştırılması
Studyi̇ng the effects of laccase on red pine kraft and waste paper pulp
Yazar: MİRAY ŞAHİNKAYA
Danışman: PROF. DR. ALİ OSMAN BELDÜZ
Karadeniz Teknik Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Biyoloji = Biology

Özet:
Lakkaz enzimi,kofaktör olarak oksijen molekülünü kullanarak fenolik bileşikleri oksitleyen ve sonunda serbest radikaller üreten bir enzimdir. Ayrıca katalitik bölgesi, çok iyi korunmuş olan üç tip bakır merkezi içerir.Diğer avantajları arasındaher türlü ortamda çok çeşitli organizmalarda bulunabilirliği ve geniş substrat aralığına sahip oluşu yer alır. Bu avantajları sebebiyle lakkaz, endüstrininçeşitli alanlarında kullanılmaktadır. 
	Bu çalışmadabakteriyal kaynaklı bir lakkaz enziminin, kağıt hamurunun ağartılmasındaki etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Kağıt hamuru uygulamalarından evvel, lakkaz, pMA0911 vektörüne klonlandı, Bacillus subtilis WB800 hücresine transforme edildi ve ekspresyonu yapıldı. Optimum sıcaklığı 60ºC ve optimum pH'sı 4,5 olarak belirlendi ve enzim Kızılçam ağaçlarından elde edilen Kraft hamuruna ve atık kağıt hamuruna uygulandı. Kızılçam Kraft ve atık kağıt hamuru uygulamaları için, ağartma çalışmaları yapıldı. Degredasyon zonu, degredasyon oranı ve delignifikasyon dereceleri analiz edildi. Atık kağıdının delignifikasyon derecesi %5,15 kızılçam Kraft hamurununki ise %5,5 olarak belirlendi. Enzim uygulanan kağıtlara yırtılma, çekme, patlama indisi, gramaj, kalınlık, yoğunluk, kopma uzunluğu ve hacimlilik gibi fiziksel testler, ve optik testleri yapıldı. Lakkaz enzimi uygulamaları sonrasında, kağıdın parlaklığı Kappa numarası 12,97 olarak %56,86, atık kağıtta ise %56,77 arttırdığı görüldü. Lakkazın lignini zayıflatıcı etkisi, SEM görüntüleriyle de incelendi.

Abstract:
Laccase is an enzyme that oxidizing phenolic substrates via using oxygen as a cofactor. The catalytic region of the enzyme includes three different types of coppermolecules that highly conserved. The stability of the laccase is quite higy because of the carbohydrates included in the enzyme structure. Some of the most important advantages of the laccase are existing in many different types of organisms and environments, and wide range of substrat specificity. These specificities make laccase an important enzyme for industrial applications. 
In this work we aimed to determine the effects of a bacterial laccase on bleaching of paper pulp. Cloning and expression of laccase into pMA0911 vector followed by paper bleaching analyses. Optimum temperature and pH of the enzyme was 60ºC and 4.5 respectively. Bleaching analyses were carried out with red pine Kraft pulp and waste paper pulp. Degredation zone, degredation rate and delignification rate were analysed. Delignification degree of waste water pulp was %5,1 and pine kraft pulp was  %5,5. Some physical tests as laceration, soaking, blow out, grammage, thickness, intensity, rupture lenght and volume and optical tests were performed.  The brightness of the paper was increased 56.86% for pine craft pulp and 56.77% for waste water pulp based on 12,97 kappa number. SEM was used for investigating the reducing effects of laccase on lignin.