Bitkisel ve antioksidan içerikli vital pulpa tedavi ajanlarının sitotoksisite ve alkalen fosfataz düzeylerinin değerlendirilmesi
The assessment of cytotoxicity and alkaline phosphatase levels of herbal and antioxidant based vital pulp therapy agents
Yazar: DİLARA DİNÇ
Danışman: PROF. DR. OYA AKTÖREN
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Pedodonti Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2020
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry
Dizin: Alkalen fosfataz = Alkaline phosphatase ; Antioksidanlar = Antioxidants ; Dental pulpa = Dental pulp ; Kurkumin = Curcumin ; Mineral trioksit agregat = Mineral trioxide aggregate ; Pedodonti = Pedodontics ; Sitotoksisite = Cytotoxicity

Özet:
Amaç: Bu çalışma, bitkisel ajanlardan Curcuma longa ve Aloe vera bitkilerinin özütleri
kurkumin ve aloin, antioksidan karışım ve mineral trioksit aggregatın (MTA) insan dental
pulpa kök hücreleri üzerindeki sitotoksisite ve alkalen fosfataz (ALP) aktivitesi
düzeylerinin değerlendirilmesi amacı ile gerçekleştirildi. Gereç ve Yöntem: Çalışmada,
insan dental pulpa kök hücreleri (Lonza Group,İsviçre), kurkumin (Sigma-Aldrich,ABD),
aloin (Sigma-Aldrich,ABD), vitamin-mineral içerikli antioksidan karışım (BayerAG,
Almanya), ProRoot MTA (Dentsply,ABD) kullanıldı. Kurkumin ve aloin dozları 2,5-
6,75-12,5-25-50 µg/ml, antioksidan karışım ve MTA konsantrasyonları %25-50-75-100
olarak hazırlandı; materyallerle etkileşime girmeyen insan dental pulpa hücreleri kontrol
grubu olarak değerlendirildi. Sitotoksisite, materyallerin tüm doz/konsantrasyonlarında
1.,2.,3.,7. günlerde WST-1 testi ile; 2,5-6,75 µg/ml kurkumin ve aloin, %25-50'lik
antioksidan karışım ve MTA'ın ALP aktivitesi 7. ve 14. günlerde ELISA testi ile
incelendi. Elde edilen bulgular Tek Yönlü Anova, Tukey ve Sidak testleri ile istatistiksel
olarak Graphpad Prism 6 programında analiz edildi. Bulgular: 2,5 µg/ml kurkumin,
aloinin tüm dozları, %25-50'lik MTA'ın 1.günde hücre proliferasyonunu anlamlı
derecede (p<0,05) arttırdığı ve doz/konsantrasyon, materyal-pulpa etkileşim süresinin
artması ile pulpa hücrelerinde proliferasyonun azaldığı; antioksidan karışımın anlamlı
derecede sitotoksik etki (p<0,05) gösterdiği belirlendi. ALP aktivitesinin incelenmesinde
ise hiçbir materyalin 7 ve 14 günde anlamlı derecede etki (p>0,05) oluşturmadığı
saptandı. Sonuç: 2,5-6,75 µg/ml kurkumin ve aloinin, %25-50'lik MTA'nın kısa zaman
sürelerinde sitotoksik etki oluşturmadığı, antioksidan karışımın tüm
konsantrasyon/zamanlarda yüksek sitotoksisite gösterdiği ve hiçbir materyalin ALP
aktivitesini 14 günde anlamlı derecede artırmadığı belirlendi. Günümüzde alternatif
pulpa tedavi ajanı olarak önerilen kurkumin ve aloinin sitotoksisite ve ALP aktivitesi
düzeylerinin uzun dönemde gelecek in-vitro çalışmalarla incelenmesine ve formulasyon
içeriklerinin geliştirilmesine gereksinim olduğu sonucuna varıldı.

Abstract:
Aim: The objective of this in-vitro study was to assess the cytotoxicity and alkaline
phosphatase (ALP) activity of curcumin and aloin extracted from Curcuma longa and
Aloe vera, an antioxidant mix (AM) and mineral triokside aggregate (MTA) on human
dental pulp stem cells. Material-Methods: Human dental pulp stem cells (Lonza Group,
Switzerland),curcumin(Sigma-Aldrich,USA),aloin(Sigma-Aldrich,USA),AM(BayerAG,
Germany), ProRoot MTA (Dentsply,USA) were used in the study. 2.5-6.75-12.5-25-50
µg/ml's of curcumin/aloin, 25-50-75-100 %'s of AM/MTA were prepared; unincubated
pulp cells were assessed as controls.Cytotoxicity of all doses/concentrations was analyzed
at 1,2,3,7 days by WST-1 test; and 2.5-6.75 µg/ml's of curcumin and aloin, 25-50%'s of
AM/MTA were assessed for ALP activity at 7-14 days by ELISA test. Data was
statistically analyzed by OneWayAnova, Tukey and Sidak tests at Graphpad Prism 6.
Results: The findings have shown that 2.5 µg/ml of curcumin, all doses of aloin, 25-50
%'s of MTA increased the cell proliferation significantly (p<0.05) on 1st day. Curcumin,
aloin, MTA inhibited the cell viability as dose/concentration and exposure time have
increased; and AM has exhibited cytotoxic effects (p<0.05) at all concentrations/time
intervals. No significant increases (p>0.05) in ALP assays of all materials were found at
7-14 days. Conclusion: Data of this study revealed that 2.5-6.75 µg/ml's of
curcumin/aloin and 25-50 %'s of MTA have increased pulp cell proliferation; and none
of the materials have increased ALP activity significantly at 7-14 days. It's concluded
that future in-vitro tests analyzing the long-term cytotoxicity and ALP activity of
curcumin and aloin, recommended as alternative vital pulp agents, are needed.