Hepatosellüler karsinomada glukoz metabolizması ve c-met yolağının etkileşiminin irdelenmesi
Investigating the crosstalk of glucose metabolism and c-met pathway in hepatocellular carcinoma
Yazar: YELİZ YILMAZ
Danışman: PROF. DR. SAFİYE NEŞE ATABEY ; PROF. DR. SULTAN CİNGÖZ
Dokuz Eylül Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2020
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Glükoz = Glucose ; Karaciğer hastalıkları = Liver diseases ; Karaciğer neoplazmları = Liver neoplasms ; Karsinoma = Carcinoma ; Karsinoma-hepatoselüler = Carcinoma-hepatocellular ; Reseptörler-insülin = Receptor-insulin ; İnsülin = Insulin

Özet:
Amaç: Bu tez çalışması kapsamında hepatosellüler karsinoma (HCC) hücrelerinde yüksek glukoz ve insülin uyarımı sonucu c-Met ve insülin reseptörü karşılıklı etkileşiminin HCC hücrelerinin biyolojik yanıtlarına etkisinin araştırılması amaçlanmıştır.
Yöntem: Bu araştırmada immünblotlama ve immünfloresans, birlikte-immünçökeltme, kantitatif polimeraz zincir reaksiyonu, gerçek zamanlı hücre adezyon ve proliferasyon testi, motilite ve invazyon analizi, Seahorse hücre metabolizması analizi ve zebrabalığı zenograft modelinde metastaz testi yöntemleri kullanılmıştır.
Bulgular: Yüksek glukoz ve yüksek insülin ile uyarılan HCC hücrelerinde c-Met'in ekspresyonunda ve aktivasyonunda artış olduğu belirlenmiştir. Bu uyarımlar ile c-Met altında yer alan proteinlerin aktive olduğu gösterilmiştir. HCC hücre metabolizmasının c-Met inhibisyonundan etkilendiği görülmüştür. c-Met'in insülin reseptörü ile karşılıklı etkileşimi incelenmiş, yüksek glukoz ve insülin uyarımı sonucu iki reseptörün daha yüksek oranda etkileştiği saptanmıştır. HCC hücrelerinin proliferasyon, adezyon, migrasyon ve invazyon yeteneklerinin yüksek glukoz ve insülin varlığında arttığı, c-Met inhibisyonu ile baskılandığı görülürken, ilaveten insülin reseptörü inhibisyonu ile bu özelliklerin daha da baskılandığı belirlenmiştir.
Sonuç: Bu çalışma ile ilk kez yüksek glukoz ve insülin varlığında insülin reseptörü ve c-Met'in etkileştiği, bu etkileşimin daha metastatik HCC hücrelerinin oluşumunu sağladığı belirlenmiştir. İki reseptörün inhibisyonu ise HCC hücrelerinin bu kabiliyetlerini sınırlamaktadır ve özellikle obezite temelinde gelişen HCC'de iyi birer tedavi adayı olarak önerilmektedir.

Abstract:
Objective: In the context of this study, investigating the crosstalk of c-Met and insulin receptor under high glucose and insulin induction and the effect of this interaction on HCC cell biology is aimed.
Methods: Immunoblotting and immunoflourescence, co-immunoprecipitation, quantitative polymerase chain reaction, real time cell adhesion and proliferation, motility and invasion analysis, Seahorse cell metabolism assay and metastasis analysis in zebrafish xenograft model were used in this study.
Results: c-Met expression and activation are elevated under high glucose and insulin conditions. Besides downstream molecules are also activated as a result. HCC cell metabolism is affected when c-Met is inhibited. The interaction of c-Met with insulin receptor is increased when cells are treated with high glucose and insulin. Cell adhesion, proliferation, motility and invasion are increased with high glucose and insulin induction. The effects are reversed with c-Met inhibition and even more together with insulin receptor inhibition.
Conclusion: It has been shown for the first time that c-Met and insulin receptor are interacting as a result of high glucose and insulin induction, which helps HCC cells to gain more metastatic abilities. However these effects are suppressed when both receptors are inhibited, and both receptors are suggested as valuable therapeutic targets  especially in HCC developed in the background of obesity.