Çeşitli yumuşak astar maddelerinin zamana bağlı olarak yüzeylerinden izole edilen Candida albicans hücrelerinde ALS1 adezyon geninin ekspresyonundaki değişimin incelenmesi
A study into the changes in ALS1 adhesion gene levels in Candida albicans cells isolated from various soft lining materials in different time periods
Yazar: KAAN YERLİYURT
Danışman: PROF. DR. DİLEK  NALBANT
Gazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Protetik Diş Tedavisi Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2011
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry
Dizin: Adezyonlar = Adhesions ; Candida albicans = Candida albicans ; Gen ifadesi = Gene expression ; Kuluçka = Incubation ; Takma diş astarlayıcıları = Denture liners ; Takma dişler = Dentures ; İn vitro = In vitro

Özet:
Bu çalışmada; in vitro hızlandırılmış eskitme işlemi uygulanmış ve uygulanmamış dört farklı yumuşak astar maddesinin C. albicans hücreleri ile 12 ve 24 saat süreyle inkübasyonunun ardından, bu yumuşak astar maddelerinin yüzeylerinden izole edilen hücrelerdeki ALS1 geni mRNA ekspresyonunun kantitatif olarak araştırılması amaçlanmıştır.Çalışmada; oda sıcaklığında polimerize olan akril esaslı yumuşak astar maddesi olarak Visco Gel, ısıyla polimerize olan akril esaslı yumuşak astar maddesi olarak Vertex Soft, oda sıcaklığında vulkanize olan silikon esaslı yumuşak astar maddesi olarak Dentusil ve ısıyla vulkanize olan silikon esaslı yumuşak astar maddesi olarak Molloplast-B kullanılmıştır. Her bir maddeden 40'ar adet olmak üzere toplam 160 adet örnek hazırlanmıştır. Her bir maddeden hazırlanan örneklerin 20 tanesine Atlas UV2000 Hızlandırılmış Hava Koşullandırma Test Cihazında hızlandırılmış eskitme işlemi uygulanmıştır. Ardından her bir yumuşak astar maddesinden hazırlanan eskitme işlemi uygulanan ve uygulanmayan 10'ar tane olmak üzere toplam 20 örnek 12 saat, diğer 20 tane örnek ise 24 saat süreyle C. albicans hücreleriyle inkübe edilmişlerdir. Örneklerin yüzeyinde oluşan biyofilm kütlesi kazınmış ve mRNA'ları izole edilmiştir. Bu mRNA'lar cDNA'ya çevrilmiş ve Real-time PZR ile kantitatif analizleri yapılmıştır.In vitro hızlandırılmış eskitme işlemi uygulanmamış ve uygulanmış maddelerde ortalama gen ekspresyonları incelendiğinde en az gen ekspresyonu Dentusil maddesinde bulunmuştur.Eskitilmiş maddelerin ortalama değerleri incelendiğinde Molloplast-B maddesinde diğer maddelere göre istatistiksel olarak anlamlı miktarda fazla gen ekspresyonu görülmüştür (p<0.05).Bu araştırma sonucunda yumuşak astar maddesi türünün, maddenin kullanım süresi ve C. albicans hücreleriyle inkübasyon sürelerinin ALS1 geni ekspresyonu üzerinde etkili olduğu görülmüştür.Anahtar Kelimeler: Candida albicans, adezyon, ALS1, gen ekspresyonu, yumuşak astar maddeleri, hızlandırılmış eskitme işlemi

Abstract:
The aim of this study was to investigate the quantitative expression of ALS1 gene mRNA isolated from the surface of the soft lining materials, after the incubation of four different soft lining materials subjected to a process of in vitro accelerated aging and of the ones not subjected with C. albicans cells for 12 and 24 hours.In this study, Visco Gel (room temperature curing acrylic based soft lining material), Vertex Soft (heat-cured acrylic based soft lining material), Dentusil (room temperature vulcanized silicone based soft lining material) and Molloplast-B (heat-vulcanized silicone based soft lining material) were used . 40 specimens from each material were prepared so as to obtain totally 160 specimens. Of 40 specimens, 20 were subjected to accelerated aging process by using Atlas UV2000 Accelerated Air Conditioning Test Device and the other 20 were not subjected to aging process. 10 of the 20 specimens which were subjected to accelerated aging were incubated with C. albicans for 12 hours and the other 10 specimens were incubated with C. albicans for 24 hours. And 10 of the 20 specimens which were not subjected to accelerated aging were incubated with C. albicans for 12 hours and the other 10 specimens were incubated with C. albicans for 24 hours. The biofilm layer occured on the surfaces of the specimens were excavated and mRNAs were isolated. The mRNAs were converted into cDNA and quantitative analyses were performed with real-time PCR.When the average gene expressions obtained from the in vitro accelerated aging process applied and not applied materials were evaluated, the least gene expression was found in Dentusil.The most statistically significant gene expression was observed in the Molloplast-B, when the average values of the materials were evaluated (p<0.05) .As a result of this study, we observed that the types of soft lining materials, duration of the material usage and the incubation period of C. albicans influenced the expression of ALS1 gene.Keywords: Candida albicans, adhesion, ALS1, gene expression, soft lining materials, accelerated aging