Meme karsinomu olgularında HER2/neu durumunun belirlenmesinde kullanılan immunohistokimya ve in situ hibridizasyon 
yöntemlerinin [fluoresan in situ hibridizasyon (FISH) ve sılver 
enhanced in situ hibridizasyon (SISH)] 
güvenilirliğinin karşılaştırılması
Comparison of HER2 status determination methods: Immunohistochemistry, Fluorescent in situ hybridization (FISH) and Dual silver enhanced in situ hybridization (SISH)
Yazar: BURÇİN PEHLİVANOĞLU
Danışman: PROF. DR. NECMETTİN ÖZDEMİR
Ege Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Patoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Yan Dal Uzmanlık, 2014
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine ; Patoloji = Pathology
Dizin: Epidermal büyüme faktörü = Epidermal growth factor ; ErbB reseptörleri = ErbB receptors ; FISH = FISH ; Histopatoloji = Histopathology ; Meme = Breast ; Meme kanseri =   ; Meme neoplazmları = Breast neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Patoloji = Pathology

Özet:
HER2 amplifikasyonu invaziv meme karsinomlarının %15 ila %25'inde
gösterilmiş olup immunohistokimyasal olarak ve in situ hibridizasyon
yöntemleriyle değerlendirilebilir. Bu çalışmada, immünohistokimyasal olarak
HER2 (2+) saptanmış meme karsinomlarında dual SISH'in FISH ile uyumu
karşılaştırılmış ve günlük pratikte dual SISH yönteminin uygulanabilirliği
değerlendirilmiştir.
Ocak 2009 ile Şubat 2013 tarihleri arasında merkezimizde tanı almış ve FISH
uygulanmış 60 ardışık HER2 (2+) tümör rezeksiyon materyali çalışmaya
alınmıştır. Demografik, histolojik ve immunohistokimyasal özellikler ile FISH
sonuçları hasta dosyalarından toplanarak kaydedilmiş ve bu bulgular dual SISH
sonuçları ile karşılaştırılmıştır.
Rezeksiyon materyallerinden 9'u (%15) değerlendirilebilir SISH sinyali elde
edilemediği için istatistiksel analiz dışında bırakılmıştır. HER2 boyanma
yüzdeleri %20-80 arasında değişkenlik göstermektedir. HER2 amplifikasyonu
FISH ve SISH yöntemleriyle, sırasıyla, 7 (%13,7) ve 8 (%15,7) olguda
saptanmıştır. FISH ve SISH yöntemleri arasında çok iyi uyum izlenmiştir (kappa
değeri 0,92). HER2 boyanma yüzdesi ile FISH pozitifliği arasında anlamlı
korelasyon izlenirken, HER2 yüzdesi ile SISH pozitifliği arasında anlamlı ilişki
saptanmamıştır (p=0,012'ye karşı p= 0,069).
Bulgularımız literatürle uyumlu olup HER2 durumunun belirlenmesinde dual
SISH'in kullanılabileceğini göstermektedir. Ancak preanalitik ve analitik
sorunların değerlendirilebilir sinyal elde edilmesini engellediği durumlarda
sonuçları yorumlamak mümkün olmayabilir. Bu nedenle bulgularımız,
standardizasyon ve kalite kontrol programlarının önemini bir kez daha
vurgulamaktadır.

Abstract:
HER2 amplification has been demonstrated in 15-25% of invasive breast
carcinomas and can be assessed using immunohistochemical and in situ
hybridization methods. Here, we compared the accuracy of dual SISH to FISH
in HER2 (2+) breast carcinoma and evaluated the feasibility of dual SISH
method in routine practice.
Sixty HER2 (2+) consecutive tumor samples diagnosed between January
2009 and February 2013 were selected. Demographic, histological and
immunohistochemical features and FISH results were recruited from patient
records and compared to dual SISH results.
Nine (15%) of the 60 tumor samples were excluded from statistical analysis
due to lack of interpretable SISH signals. HER2 staining percentages differed
between 20-80%. HER2 amplification was shown in 7 (13,7%) and 8 (15,7%)
patients by FISH and SISH, respectively. Very good agreement was observed
between FISH and SISH methods (kappa value: 0,92). Significant correlation
was found between HER2 staining percentage and FISH positivity, in contrast
to SISH positivity (p=0,012 vs. p= 0,069).
Our results are consistent with previously reported literature, indicating SISH
can be used to determine HER2 status. However, preanalytical and analytical
problems may cause inadequate or uncountable signals, making interpretation
impossible for the pathologist and highlighting the importance of standardization
and quality control programs.