Ratlarda kardiyak iskemi reperfüzyon hasarında Silostazol'un etkisinin araştırılması
Pathologic investigation of the effect of Silostazol on the myocardial ischemia-reperfusion injury of rats
Yazar: ANAR AMRAHOV
Danışman: PROF. DR. MEHMET ARSLAN
GATA / Tıp Fakültesi / Kalp ve Damar Cerrahisi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2011
Konu: Göğüs Kalp ve Damar Cerrahisi = Thoracic and Cardiovascular Surgery
Dizin: Antitrombinler = Antithrombins ; Kalp hastalıkları = Heart diseases ; Miyokardial reperfüzyon = Myocardial reperfusion ; Miyokardial reperfüzyon lezyonu = Myocardial reperfusion injury ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Sıçanlar = Rats ; İskemi = Ischemia

Özet:
Miyokarda oksijen sunumu ve ihtiyacı arasındaki dengesizlik sonucu oluşan miyokardiyal iskemi, dokularda hızlı bir metabolik ve yapısal bozulmaya yol açar. İskemi sonrası reperfüzyonla beraber aerobik metabolizmaya tekrar geçiş ile ortaya çıkan substratlar zincirleme olayları başlatarak doku hasarına neden olur. Bu olaya ''iskemi reperfüzyon hasarı `' denir.Çalışmamızda deneysel kardiyak iskemi - reperfüzyon hayvan modelinde silostazolun İR hasarındaki etkisi araştırıldı. Çalışmada deney hayvanı olarak kullanılan Wistar Albino tipi erkek ratlar; iskemi (n=8), sham (n=8), silostazol (n=8) olmak üzere üç gruba ayrıldı. Silostazol 20 mg/kg/gün 1X1 oral gavaj yardımıyla 14 gün verildi. Bölgesel miyokard iskemi modelinde LAD koroner arteri proksimalden 45 dk. oklüde edildi ve daha sonra oklüzyon kaldırılarak üç saat reperfüzyon yapıldı. Hemodinamik parametreler kaydedildi. Biyokimyasal parametre olarak CK-MB, troponin-I değeri iskeminin 180.dk`da alınan kanda bakıldı. Miyokardiyal iskemi alanı evans mavisi (EM) ve enfarkt alanı triphenyltetrazolium chloride (TTC) boyama tekniği ile ölçüldü.İşleme başlarken, LAD okluzyon öncesinde, okluzyonun 25, 60 ve 120. dakikasında kan basıncı ve kalp hızı açısından tüm gruplarda istatistiksel olarak anlamlı fark yoktu.Çalışmadaki kesitlerden elde edilen toplam alan, etkilenen alan ve nekroz alanları kullanılarak; Etkilenen alan oranı = Etkilenen alan / Toplam alan x100, Nekroz alanı oranı = Nekroz alanı / Toplam alan x100 ve Nekroz alanın Etkilenen alana oranı = Nekroz alanı / Etkilenen alan x100 formülleri ile etkilenen ve nekroz alanı oranları hesaplandı.Etkilenen alanın toplam alana oranında İR grubu Silostazol grubundan istatistiksel olarak anlamlı miktarda yüksek ortalamaya sahiptir (t=8.965; p<0.001). Benzer şekilde nekroz alanının toplam alana oranında IR grubu silostazol grubundan yüksek ortalamaya sahiptir (t=5.870; p<0.001). Nekroz alanının etkilenen alana oranında ise IR ve Silostazol grupları arasında anlamlı bir farklılık bulunamamıştır (t=0.245; p=0.810).CK-MB enziminde IR ile silostazol grubu arasındaki istatistiksel olarak anlamlı miktarda farklılığın olmadığı (Z=0.382; p=0.721) görüldü.Troponin enziminde IR ile Silostazol arasındaki sonuçların bir-birine çok yakın olduğu ve farklılığın ise önemli olmadığı (Z=0.630; p=0.574) görüldü.Çalışmadaki kesitlerden alınan patolojik örnekler; ödem, miyositolizis, PMNL ve hemoraji açısından değerlendirildi. Silostazol ve İR gruplarında ödem, ( ? 2=0.567; p=0.753), miyositolizis ( ? 2=1.259; p=0.533), PMNL infiltrasyonu ( ? 2=2.786; p=0.248) ve Hemoraji skoru benzer ( ? 2=2.134; p=0.344) olarak bulundu.MDA enzimi ortancasının ( ? 2=19.046; p<0.001) tüm gruplarda istatistiksel olarak bir-birinden farklı oldukları (p<0.001) görüldü. MDA enzim ortancası büyükten küçüğe göre sıralandığında; İR, Silostazol ve Sham sıralaması oluşmaktadır.SOD enziminde (F=5.910; p=0.009). Sham grubunun İR grubundan istatistiksel olarak da anlamlı miktarda daha düşük SOD ortalamasına sahip olduğu (p=0.008), Sham ile Silostazol ve İR ile Silostazol arasındaki farklılığın ise önemli olmadığı (p>0.05) görüldü.GPSH-Px ( ? 2=7.440; p=0.024). Sham ile İR arasındaki farklılığın anlamlı olduğu (Z=2.731; p=0.005), Sham ile Silostazol ve İR ile Silostazol arasındaki farklılıkların ise anlamlı olmadıkları (p>0.05) görüldü.Veriler incelendiğinde silostazolün kardiyak iskemi-reperfüzyon hasarında iskemik hasarı azaltıcı nekroz alanını etkilemediği planimetrik olarak ve iskemik dokulardan çalışılan enzimlerle gösterdik. Bu durum silostazolun miyokard iskemi reperfüzyon hasarında koruyucu etkisi olabileceğini göstermektedir.Anahtar kelimeler: Silostazol, miyokard, iskemi reperfüzyon hasarı

Abstract:
Myocardial ischemia, occurring as a consequence of imbalance between oxygen supply and demand, causes a rapid metabolic and structuralimpairment within the tissue. After a period of ischemia, sudden onset of reperfusion causes a transition to aerobic metabolism within living cells. Afterwards, emerging substrates initiate a chain of reactions leading to tissue injury. This situation is called ?ischemia reperfusion injury?. Despite all technical advancements in anesthesia, myocardial protection and cardiac surgical techniques, we still face the clinical reflections of ischemia reperfusion (İR) injury.The protective effect of cilostasole on İR injury in an animal model of experimental myocardial ischemia and reperfusion was investigated. In this regional myocardial ischemia model, male Wistar-Albino rats were used as subjects and they were allocated into three groups; ischemia (n=8), sham (n=8), and cilostazole (n=8). LAD was occluded for 45 minutes, and then reperfused for three hours. Rats received Cilostazole 20 mg/kg/d by gastric gavage once daily. During I/R; hemodynamic parameters were recorded. Serum analysis for CK-MB and Troponin I were analysed at 180th minute of ischemia. Ischemic zone was measured by dying with Evans Blue and infarct area was measured by dying with triphenyltetrazolium chloride.The total area, affected area and necrotic area were calculated by using formulas; affected area ratio= affected area/total area X 100, necrotic area ratio = necrotic area/total affected area X 100, necrotic area and affected area ratio = necrotic area /affected area X 100. Affected area and total area ratio was significantly higher in İR group, compared with cilostazole group (t=8.965; p<0.001). Similarly, necrotic area and total area ratio was higher in IR group, compared with cilostazole group (t=8.965; p<0.001). The necrotic area and affected area ratios were similar in IR and cilostazole groups (t=0.245; p=0.810).CK-MB level differences were not statistically significant between two groups (Z=0.382; p=0.721).Troponin levels were similar between IR and cilostazole groups and the difference was not statistically significant (Z=0.630; p=0.574).Pathological specimens of the heart were scanned for myocytolysis, PMNL and hemorrhage. The difference between mean value of MDA enzyme levels were statistically significant (p<0.001) between all groups. MDA enzyme levels, from higher to lower was İR, cilostazole and Sham group. SOD levels (F=5.910; p=0.009) were significantly lower in Sham group when compared with İR group (p=0.008). The differences between Sham and cilostazole groups and İR and cilostazole gropus were not statistically significant (p=0.008).According to planimetric values and enzyme levels, cilostazole was found to be effective in reducing the ischemic zone, without effecting the necrotic zone in cardiac ischemia reperfusion damage. Therefore cilostazole has protective effects agains ischemia reperfusion damage.Key Words: Silostazol, Myocard, İschemia reperfusion injury