Kan kültürlerinden izole edilen candida türlerinin virülans faktörlerinin araştırılması
Investigation of virulance factors of candida species from the blood cultures
Yazar: GÜLŞEN ÇETİN
Danışman: PROF. DR. ASUMAN BİRİNCİ
Ondokuz Mayıs Üniversitesi / Lisansüstü Eğitim Enstitüsü / Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Biyofilmler = Biofilms ; Esterazlar = Esterases ; Fosfolipazlar = Phospholipases ; Kan kültürü = Blood culture ; Kandida = Candida ; Peptid hidrolazlar = Peptide hydrolases ; Virülans = Virulence ; Virülans faktörleri = Virulence factors

Özet:
Candida türleri, deri ve mukoza florasının normal üyesi olan ancak cilt ve 
mukoza bütünlüğünün bozulmasıyla yüzeyel ve invaziv enfeksiyonlara neden olabilen 
fırsatçı fungal patojenlerdir. Candida türlerinin en önemli virülans faktörleri arasında 
hif oluşumu, dimorfizm, hidrolitik enzimler ve biyofilm oluşumu gibi faktörlerin 
olduğu görülmektedir. Çalışmamızda kan kültürü örneklerinden izole edilen Candida 
izolatlarının asit proteinaz, fosfolipaz, esteraz aktiviteleri ve biyofilm oluşumlarının 
araştırılması amaçlanmaktadır. 
Çalışmaya çeşitli servislerden gönderilen kan kültürü örneklerinden izole edilen 
90 Candida izolatı dâhil edilmiştir. İzolatların identifikasyonu konvansiyonel 
yöntemler ve otomatize sistemler kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Çalışmaya dâhil 
edilen izolatların asit proteinaz aktiviteleri %1'lik sığır serum albümin çözeltili agar 
besiyeri, fosfolipaz aktiviteleri yumurta sarılı agar besiyeri, esteraz aktiviteleri Tween 
80'li agar besiyeri kullanılarak plaka yöntemiyle çalışılmış ve her bir izolat pozitif 
standart suşu ile karşılaştırılarak değerlendirilmiştir. İzolatların biyofilm oluşturma 
yetenekleri ise mikrotitrasyon plak yöntemiyle çalışılmış ve elde edilen absorbans 
değerleri, standart suşların absorbans değerleri ile karşılaştırılarak kantitatif olarak 
derecelendirilmiştir.
Çalışılan izolatların 35 (%38,8)'i C. albicans, 29 (%32,2)'u C. parapsilosis, 17 
(%18,9)'si C. glabrata, 6 (%6,7)'sı C. krusei, 3 (%3,4)'ü C. tropicalis olarak 
tanımlanmıştır.
Enzimatik aktivitesi araştırılan 35 C. albicans izolatının 35 (%100)'inin 
proteinaz, 29 (%82,8)'unun fosfolipaz, 33 (%94,2)'ünün esteraz aktivitesi olduğu 
gözlemlenmiştir. Non-albicans izolatlarının (n:55) ise 54 (%98)'ünün proteinaz, 8
(%14,5)'inin esteraz aktivitesinin olduğu, fosfolipaz aktivitesinin olmadığı 
belirlenmiştir. 
Biyofilm oluşturma yetenekleri araştırılan 35 C. albicans izolatının 4 
(%11,4)'ünün zayıf, 1 (%2,8)'inin orta derece biyofilm oluşturduğu gözlemlenmiştir. 
Non-albicans izolatlarının (n:55) ise 7 (%12,7)'sinin zayıf, 2 (%3,6)'sinin orta, 16 
(%29)'sının güçlü derece biyofilm oluşturduğu gözlemlenmiştir.
Sonuç olarak çalışmamıza dâhil ettiğimiz C. albicans izolatlarının fosfolipaz ve 
esteraz aktivitesinin non-albicans'lara oranla daha fazla olduğu görülmüştür. Nonalbicans izolatlarının ise C. albicans'lara göre yüksek derece biyofilm oluşturduğu
saptanmıştır.

Abstract:
Candida species are opportunistic fungal pathogens that are normal members of 
the skin and mucosal flora, but can cause superficial and invasive infections with 
disruption of skin and mucosal integrity. It is seen that the most important virulence 
factors of Candida species are hyphae formation, dimorphism, hydrolytic enzymes and 
biofilm formation. In our study, it is aimed to investigate acid proteinase, 
phospholipase, esterase activities and biofilm formation of Candida isolates isolated 
from blood culture samples.
In the study were included 90 Candida isolates isolated from blood culture 
samples sent from various services. Identification of the isolates was carried out using 
conventional methods and automated systems. The acid proteinase groups of the 
isolates included in the study were studied using 1% bovine serum albumin thawed 
agar medium, phospholipase weights were studied on egg yolk agar medium, esterase 
operations were studied using the plate method using Tween 80 agar medium and each 
isolate was evaluated by comparing it with a positive standard strain. The biofilm 
forming abilities of the isolates were studied with the microtitration plate method and 
the absorbance values obtained were quantitatively graded by comparing the 
absorbance values of the standard strains.
Of the studied isolates, 35 (38.8%) were C. albicans, 29 (32.2%) were C. 
parapsilosis, 17 (18.9%) were C. glabrata, 6 (6.7%) were C. krusei and 3 (3.4%) were 
identified as C. tropicalis.
It was observed that 35 (100%) of the 35 C. albicans isolates whose enzymatic 
activities were investigated had proteinase activity, 29 (82.8%) had phospholipase 
activity, and 33 (94.2%) had esterase activity. It was determined that 54 (98%) of the 
non-albicans isolates (n:55) had proteinase activity, 8 (14.5%) had esterase activity 
and had no phospholipase activity.
It was observed that 4 (11.4%) of 35 C. albicans isolates, whose biofilm forming 
abilities were investigated, formed a weak biofilm and 1 (2.8%) formed a moderate 
biofilm. It was observed that 7 (12.7%) of the non-albicans isolates (n:55) formed 
weak biofilms, 2 (3.6%) moderate biofilms, and 16 (29%) strong biofilms.
As a result, it was observed that the phospholipase and esterase activities of 
C.albicans isolates included in our study were higher than non-albicans. It was 
determined that non-albicans isolates formed a higher degree of biofilm compared to 
C. albicans.