Aristolochia bodamae Dingler (Aristolochiaceae) kök ekstraktlarının ın vıtro antioksidan, antibakteriyel ve enzim inhibisyon aktivitelerinin araştırılması
The investigation of in vitro antioxidant, antibacterial and enzyme inhibition activities of Aristolochia bodamae Dingler (Aristolochiaceae) root extracts
Yazar: NESLİHAN BORA
Danışman: PROF. DR. TEVFİK ÖZEN
Ondokuz Mayıs Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
Aristolochia bodamae Dingler Aristolochiaceae familyasına ait bir türdür. Tez çalışmasında, Aristolochia bodamae Dingler kökünün (ABK) metanol (ABKME), etanol (ABKET), su (ABKSU), aseton (ABKAS), etilasetat (ABKEA) ve hekzan (ABKHE) ekstraktların kimyasal içerik analizleri, in vitro inhibisyon potansiyeli, antioksidan ve antibakteriyal aktivite testleri gerçekleştirildi. Ekstrelerin fenolik bileşenleri spektrofotometrik olarak belirlendi. Ekstraktların antioksidan aktivitesi yaygın olarak kullanılan in vitro aktivite testlerden toplam antioksidan aktivite, indirgeme gücü, lipid peroksidasyon inhibisyonu, metal şelat, deoksiriboz koruma, serbest radikal, H2O2, ABTS•+ ve süperoksit anyonu giderme aktiviteleri test edildi ve askorbik asit, α-tokoferol, troloks, bütillenmiş hidroksianisol (BHA), bütillenmiş hidroksitoluen (BHT), tert-bütilhidroksikinon (TBHQ) ve EDTA ile karşılaştırıldı. In vitro üreaz, asetilkolin ve bütirilkolin esteraz inhibisyon potansiyeli IC50 değerleri ile belirlendi. Ekstraktların antibakteriyel aktivitesi disk difüzyon ve mikrodilüsyon yöntemleriyle test edildi. Aktivite sonuçları SPSS (Statistical Packages for the Social Sciences) 20.000 paket programıdaki ANOVA ve Tukey testleri kullanılarak sonuçlar arasında anlamlı bir fark olup olmadığı belirlendi.
ABKME ekstraktının ekstraksiyon verimi (% 27.10), toplam fenolik (47.53±2.94 mg gallik asit eşdeğeri/g kuru bitki) ve toplam flavonoid (9.74±0.09 mg kuersetin eşdeğeri/g kuru bitki) içeriğine göre diğer ekstraktlardan daha yüksek olduğu gözlendi. ABK ekstraktlarının antioksidan aktiviteleri artan konsantrasyona bağlı olarak artış gözlendi ve ABKME ekstraktının diğer ekstraktlara daha etkili antioksidan etkiye sahip olduğu görülmüştür (p<0.05). Ayrıca ABKME' nin lipid peroksidasyon inhibisyonu (35.94±4.55 µg/mL), H2O2 giderme (3.98±0.62 µg/mL) ve süperoksit giderme (45.15±0.92 µg/mL) aktivitelerinin EC50 değerleri diğer ekstraktlardan daha etkili bulunmuştur. ABKET ekstraktının indirgeme gücü A0.5 değeri 48.77±0.11 µg/mL olarak belirlendi. Asetilkolin esteraz inhibisyonu ve bütirilkolin esteraz inhibisyonu testlerinde ABKAS (IC50= 2.76±1.53 µg/mL) ve ABKEA (IC50= 0.63±0.06 µg/mL) ekstraktları galantaminden daha etkili inhibisyon düzeyi belirlenmiştir. Üreaz enzimi inhibisyonunda ise ABKME (IC50= 188.42±30.74 µg/mL) ekstraktı tiyoüreden daha etkili olduğu bulunmuştur. ABKET ekstraktının inhibisyon zonu değeri S. aureus için 14,4 mm olarak tespit edildi. ABKET ekstraktlarının B. cereus' a karşı en düşük inhibisyon konsantrasyonu 128 µg/mL dır. 
Bu in vitro çalışmalarda, A. bodamae kök ekstraktlarının fenolik bileşenleri ile birlikte değerlendirildiğinde iyi bir antioksidan kaynağı olduğu, iyi bir antibakteriyel kaynağı olduğu, iyi bir asetilkolin esteraz, bütirilkolin esteraz ve üreazın inhibe etme özelliğine sahip olduğu görülmüştür.

Abstract:
Aristolochia bodamae Dingler is a species belonging to the Aristolochiaceae family. In the thesis study, the methanol (ABKME), ethanol (ABKET), water (ABKSU), acetone (ABKAS), ethylacetate (ABKEA) and hexane (ABKHE) extracts extracted from Aristolochia bodamae Dingler root (ABK) have been performed for their chemical contents, inhibition potential, antioxidative and antimicrobial activities. The phenolic components of extracts were tested spectrophotometrically. The antioxidant activity of the extracts was tested from the widely used in vitro activity assays such as total antioxidant activity, reduction power, lipid peroxidation inhibition, metal chelate, deoxyribose protection, free radical, H2O2, ABTS•+ and superoxide anion removal activities, and also compared with ascorbic acid, α-tocopherol, trolox, butylated hydroxyanisole (BHA), butylated hydroxytoluene (BHT), tert-butylhydroxycinone (TBHQ) and EDTA. In vitro urease, acetylcholine and butyrylcholine esterase inhibition potential were determined with IC50 values spectrophotometrically. Antibacterial activity of extracts was determined by disc diffusion and microdilution methods. It was determined whether there was a significant difference between the results using ANOVA and Tukey tests in the 20.000 package program.
The extraction yield (27.10%), total phenolic (47.53±2.94 mg gallic acid equivalent/g dry plant) and total flavonoid (9.74±0.09 mg quercetin equivalent/g dry plant) content of ABKME extract was higher than other extracts. The antioxidant activity of ABK extracts increased with increasing concentration and it was observed that ABKME extract had a more effective antioxidant effect on other extracts (p <0.05).  In addition, EC50 (35.94±4.55) values of lipid peroxidation inhibition of ABKME (35.94±4.55), H2O2 scavenging (3.98±0.62) and superoxide scavenging (45.15±0.92) activities were found to be more effective than other extracts. The reduction force A0.5 was determined as 48.77±0.11 µg/mL. For acetylcholine esterase inhibition and butyrylcholine esterase inhibition tests, ABKAS (IC50= 2.76±1.53 µg/mL) and ABKEA (IC50= 0.63±0.06 µg/mL) extracts were determined to be more effective than galantamine. In the inhibition of the urease enzyme, the extract of ABKME (IC50= 188.42±30.74 µg/mL) was found to be more effective than thiouria. The inhibition zone of ABKET extract was determined as 14.4 mm for S. aureus. The lowest inhibition concentration of ABKET extract against B. cereus was 128 µg/mL. 
In these in vitro studies, it has been found that A. bodamaeroot extracts are a good source of antioxidants, have a good antibacterial source, and have a good acetylcholine esterase, butyrylcholine esterase and urease inhibiting properties when evaluated together with phenolic compounds.