Oral laktik asit bakterilerinin biyofilm ve halitosis üzerine etkilerinin in vitro araştırılması
In vitro investigation on the effects of oral lactic acidbacteria on biofilm and halitosis
Yazar: GİZEM ARIK
Danışman: PROF. DR. MERİH KIVANÇ ; PROF. DR. ZÜHAL KIRZIOĞLU
Eskişehir Teknik Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2019
Konu: Biyoloji = Biology ; Mikrobiyoloji = Microbiology

Özet:
Çocuklarda oral biyofilmin mekanik olarak temizlenmesindeki zorluklar ve bu
amaçla kullanılan kimyasalların bazı yan etkilere sahip olması probiyotik terapiyi ön
plana çıkarmıştır. Bu çalışmada özellikle çocukların ağız sağlığını geliştirmeye yönelik
etki sağlayacak antiadezyon, antibiyofilm aktivitelerine sahip, halitosis üzerine etkili oral
probiyotiklerin tanımlanması amaçlanmıştır. Bu amaçla sağlıklı çocukların diş
yüzeylerindeki biyofilm oluşan bölgelerden alınan örneklerin fakültatif anaerobik bakteri
ve maya çeşitliliği ortaya çıkarılmıştır. Bakteriler 16S rRNA gen dizisine göre, mayalar
Vitek-2 sistemi ile biyokimyasal olarak tanılanmıştır. Lactobacillus sp. olarak tanılanan
izolatların gastrointestinal şartlarda hayatta kalma oranları, antibiyotik duyarlılığı,
antioksidan ve enzim aktivitesi, agregasyon aktiviteleri, antimikrobiyal aktivitesi,
biyofilm oluşturma özellikleri belirlenmiştir. Seçilen laktik asit bakterilerinin tükürük
kaplı hidroksiapatit disklerde antiadezyon ve antibiyofilm aktiviteleri incelenmiştir. 16S
rRNA dizi analizi sonucunda mikrobiyal kompozisyonda Firmicutes (%83,4) baskın
filum, Lactobacillus ise baskın cins olarak tanımlanmıştır. Bu cins içinde L. rhamnosus,
L. fermentum, L. paracasei, L. casei, L. plantarum ve L. salivarus türleri tanılanmıştır.
Proteobacteria filumunda Neisseria, Actinobacteria filumunda Rothia baskın cinsler
olarak tanılanmıştır. Maya izolatları arasında Candida dubliniensis baskın olan tür
olmuştur. Laktik asit bakterilerinin gastrointestinal şartlara dirençli oldukları,
antioksidan, agregasyon aktiviteleri gösterdikleri, biyofilm üreticisi oldukları
saptanmıştır. Ancak seçilen oral mikroorganizmalara karşı antimikrobiyal aktivite
göstermedikleri belirlenmiştir. Seçilen bazı laktik asit bakterilerinin antiadezyon ve
antibiyofilm aktivitesi gösterdiği saptanmıştır. Duyusal analiz sonuçlarına göre L.
rhamnosus LAB1.2.A'nın halitosis üzerine etkili olabileceği saptanmıştır.

Abstract:
Difficulties in the mechanical cleaning of oral biofilm in children and some side
effects of the chemicals used for this purpose have highlighted probiotic therapy. The aim
of this study was to determine the oral probiotics which have antiadhesion, antibiofilm
activity and effects on halitosis. For this purpose, facultative anaerobic bacteria and yeast
diversity of the samples taken from the biofilm areas on the tooth surfaces of healthy
children were revealed. Bacteria were identified according to the 16S rRNA gene
sequence and yeasts were biochemically identified by Vitek-2 system. Survival rates at
gastrointestinal conditions, antibiotic susceptibility, antioxidant activity, aggregation
activities, antimicrobial activity and biofilm forming properties of isolates which
identified as Lactobacillus sp. were determined. Antiadhesion and antibiofilm activities
of selected lactic acid bacteria on saliva coated hydroxyapatite discs were investigated.
As a result of 16S rRNA sequence analysis, Firmicutes (83.4%) was the predominant
phylum in the microbial composition and Lactobacillus was defined as the dominant
strain. In this genus, L. rhamnosus, L. fermentum, L. paracasei, L. casei, L. plantarum ve
L. salivarus species were identified. Neisseria in Proteobacteria phylum, Rothia in
Actinobacteria phylum was identified as predominant genus. Candida dubliniensis was
found to be the dominant species among yeast isolates. Lactic acid bacteria were found
to be resistant to gastrointestinal conditions, showed antioxidant and aggregation
activities and were biofilm producers. However, they did not have antimicrobial activity
against selected oral microorganisms. Some selected lactic acid bacteria showed
antiadhesion and antibiofilm activity. According to the results of organoleptic analysis, it
was determined that L. rhamnosus LAB1.2.A could be effective on halitosis.