Antiproliferatif etkili bileşiklerle statik manyetik alan uygulamasının kanser hücre serilerine etkisi
Effect of static magnetic field with antiproliferative compounds on cancer cell lines
Yazar: GÜLSÜM TEKİN
Danışman: DOÇ. DR. BAHADIR ÖZTÜRK
Selçuk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2017
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Flavonoidler = Flavonoids ; Hücre dizisi = Cell line ; Manyetik alanlar = Magnetic fields ; Neoplazmlar = Neoplasms

Özet:
Statik manyetik alan (SMA) son zamanlarda bazı hastalıkların tedavisinde kullanılmaya başlanmış olup, diğer tedavilere alternatif güvenilir bir yöntem olabileceği düşünülmüştür. SMA'nın, özellikle kanser hücre proliferasyonunu inhibe ettiği ve antiproliferatif bileşiklerle beraber uygulandığında daha etkili olabildiği söylenmektedir. Bu çalışmanın amacı, antiproliferatif flavonoidlerle beraber SMA'nın kombine uygulamasının, MCF–7 ve MDA MB-231 meme kanseri hücre hatlarında hücre proliferasyonuna, apopitoza, proapoptotik ve antiapoptotik protein ekspresyonlarına ve oksidatif stres parametrelerine etkisinin ortaya konulmasıdır. 
Çalışmamızda kuersetin (10-1000μM aralığında) ve hesperetinin (10-1000μM aralığında) belirlenen doz ve zaman aralıklarında meme kanseri hücre serilerinin proliferasyonuna etkileri MTT hücre canlılık testi ile analiz edildi ve IC50 değerleri hesaplandı. Hücrelere 48 saat boyunca SMA (174mT)+hesperetin ve SMA (174mT)+kuersetin ile birleşik tedavi uygulandı. Flow sitometri ile apopitoz, Western Blot ile Bax/Bcl–2 protein ekspresyonları ve OSİ hesaplanarak oksidatif stres kapasiteleri sadece SMA ve flavonoid uygulanan gruplarla ve kontrol grubu ile karşılaştırıldı. İstatistiksel analizler SPSS (version 21) programında One-Way Anova analizleriyle gerçekleştirildi. 
SMA ve flavonoidler hem tek başına hem de beraber uygulandıklarında MCF–7ve MDA MB–231 hücrelerinin apopitozunu, kontrol grubuna göre artırmıştır (P<0,001). SMA her iki hücre hattında da kontrol grubuna göre Bax ekspresyonunu artırırken (P<0,001) Bcl-2 ekspresyonunu da azaltmıştır (P<0,001). SMA'nın flavonoidler üzerindeki etkisi bakımından, SMA ve flavonoidlerin beraber uygulanması her iki hücre hattında, Bax ekspresyonunda önemli derecede artışa yol açarken, Bcl–2 ekspresyonunda azalma gözlenmiştir (P<0,001). Oksidatif stres kapasitelerine bakıldığında ise her iki hücre hattında SMA'nın flavonoidlerle beraber uygulanması ile OSİ değerlerinde azalma görülmüştür (P<0,001).
Sonuç olarak, her iki hücre hattında da SMA ve flavonoidler beraber uygulandığında flavonoidlerin etkisi artmıştır. Reseptör negatif ve reseptör pozitif meme kanseri hücrelerinde SMA'nın antitümöral etkinliğinin değerlendirildiği bu in vitro çalışma, ileride yapılacak olan daha kapsamlı ve detaylı biyomanyetizm çalışmalarına destek ve yol gösterici olabilir.

Anahtar Sözcükler: Flavonoid; MCF-7; MDA MB-231; Statik Manyetik Alan.

Abstract:
Static magnetic field (SMF) has recently begun to be used in the treatment of some diseases and it has been thought that it may be a reliable alternative to other treatments. It is said that SMF is particularly effective when inhibited by cancer cell proliferation and administered together with antiproliferative compounds. The aim of this study is to demonstrate the effect of SMF combination treatments with antiproliferative flavonoids on cell proliferation, apoptosis, proapoptotic and antiapoptotic protein expression and oxidative stress parameters on MCF-7 and MDA MB-231 breast cancer cell lines.
In our study, the effects on the proliferation of breast cancer cell lines at doses and time intervals of quercetin (range 10-1000 μM) and hesperetin (range 10-1000 μM) were analyzed by MTT cell viability test and IC50 values calculated. Cells were treated with combined treatment with SMF (174mT)+hesperetin and SMF (174mT)+quercetin for 48 hours. Compared between the groups (only SMF, flavonoids and control groups) were done with apoptosis by flow cytometry, Bax / Bcl-2 protein expression by Western Blot, and oxidative stress capacities by calculated OSI.
When SMF and flavonoids were increased administered both alone and together on MCF-7 and MDA MB-231 cells apoptosis compared with the control group (P<0,001). SMF increased in Bax expression (P <0.001) and decreased in Bcl-2 expression (P <0.001)  in both cell lines compared with the control group. For the by synergistic effect of SMF on flavonoids, co-administration of SMA and flavonoids led to a significant increase in Bax expression (P <0.001) and decrease in Bcl-2 expression P<0,001) in both cell lines. When oxidative stress capacities were examined, OSI values (P <0.001) decreased with the application of SMF with flavonoids in both cell lines.
As a result, when SMF and flavonoids were applied together in both cell lines, the effect of flavonoids was increased. This in vitro study, which assesses the antitumoral activity of SMF on receptor-negative and receptor-positive breast cancer cells, may provide more comprehensive and detailed biomagnetism in the future as research support and guidance.

Key words: Flavonoid; MCF-7; MDA MB-231; Static Magnetic Field.