Polifenolik bileşenlerin hormon pozitif ve negatif meme kanseri hücre hatlarında migrasyon ilişkili JAM-A, LFA-1 ve VLA-4 gen ekspresyonlarına etkilerinin araştırılması
Investigating the effect of polyphenolic compounds on gene expression of migration related genes JAM-A, LFA-1 and VLA-4 in hormon positive and negative breast cancer cell lines
Yazar: GÜLÇİN ÖZKARA
Danışman: PROF. DR. HÜLYA YILMAZ AYDOĞAN
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı / Moleküler Tıp Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2019
Konu: Genetik = Genetics ; Moleküler Tıp = Molecular Medicine
Dizin: Fenolik bileşikler = Phenolic compounds ; Gen ifadesi = Gene expression ; Hücre dizisi = Cell line ; Meme hastalıkları = Breast diseases ; Meme neoplazmları = Breast neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Polifenol = Polyphenol

Özet:
Meme kanseri kadınlarda en sık görülen kanser tipi olup dünya çapında kanserden ölümlerin önde gelen nedenidir ve vakaların %90'nında ölüm nedeni metastazdır. Hücre migrasyonunu yöneten proteinler kanser metastazının ortaya çıkmasında rol oynamaktadır. İntegrinler ve hücreler arası bağlantılar kanser proliferasyonu ve metastazında çok önemlidir. Polifenolik bileşenlerin kanser hücreleri üzerine sitotoksik ve apoptotik etkileri önceki çalışmalardan bilinmektedir. Tez projemizde polifenolik bileşenlerden oluşan kokteylin hücre migrasyonuna ve tümör metastazında birlikte etkileşim gösteren VLA-4 (very late antigen-4, α4β1, ITGA4, CD49d/CD29) ve LFA-1 (Lymphocyte function-associated antigen-1, αL/β2, ITGAL, CD11a/CD18) integrinleri ve hücreler arası sıkı bağlantı proteinlerinden biri olan Jam-A (junctional adhesion molecule-A, F11R) genlerinin ekspresyonlarına etkisi ER+ MCF-7, triple-negatif MDA-MB-231 ve fibrokistik meme epiteli hücresi MCF-10A üzerinde araştırılmıştır. Polifenolik kokteylin %20'lik dozunun hücre kültürünün 48. saatinde MCF-7 ve MCF-10A hücrelerinde Jam-A ekspresyonunda azalmaya (p<0,001), MDA-MB-231 ve MCF-10A hücrelerinde LFA-1 ekspresyonunda artışa (p<0,001), MDA-MB-231 ve MCF-10 hücrelerinde VLA-4 ekspresyonunda azalmaya (p<0,0001) neden olduğu bulunmuştur. Aynı zamanda polifenolik kokteylin çalışmadaki hücre hatlarının herbirinde doz bağımlı şekilde hücre migrasyonunu azalttığı belirlenmiştir. Polifenolik kokteylin %35'lik doz verilen MDA-MB-231 hücrelerinde hücre migrasyonunun tamamen durduğu gözlenmiştir. Polifenolik kokteylin anti-migratif etkisi MCF-7 hücrelerinde ise daha düşük dozlarda (%10) gerçekleşmiştir. Sonuçlarımız polifenolik bileşenlerin meme kanseri tümör hücreleri üzerine sitotoksik ve apoptotik etkilerinin yanında anti-metastatik özelliklerinin de olduğunu ve polifenolik bileşenlerin kanser tedavisinin bir parçası olarak düşünülebileceğini belirtmektedir.

Abstract:
Breast cancer is the most common type of cancer occurring in the women and leading cause of cancer mortality worldwide. Metastasis is the cause of cancer death in 90% of the cases. Proteins managing the cell migration play role in the occurrence of cancer metastasis. Integrins and cell junctions have crucial importance in cancer proliferation and metastasis. Cytotoxic and apoptocic effects of polyphenolic compounds on cancer cells have been known from the previous studies. In our thesis project, the effect of the cocktail consisting of polyphenolic compounds on the cell migration and gene expression of VLA-4 (very late antigen-4, α4β1, ITGA4, CD49d/CD29) and LFA-1 (Lymphocyte function-associated antigen-1, αL/β2, ITGAL, CD11a/CD18) integrins and Jam-A (junctional adhesion molecule-A, F11R) which is one of the tight junctions, that interact with each other in the tumor metastasis were investigated in ER+ MCF-7, Triple-negative MDA-MB-231 and fibrocystic breast epithelial cell MCF-10A. Polyphenolic cocktail with 20% dose was found to cause a reduction in Jam-A gene expression in MCF-7 ve MCF-10A (p<0,001), an increase in LFA-1 gene expression in MDA-MB-231 and MCF-10A (p<0,001), a reduction in VLA-4 gene expression in MDA-MB-231 and MCF-10A (p<0,0001) cells at 48th hour of cell culture. Moreover, it was determined that polyphenolic cocktail decreased the cell migration in each and every cell in the study. It was observed that cell migration was totally arrested in MDA-MB-231 cells which were treated with 35% polyphenolic cocktail. Anti-migratory effect of the polyphenolic cocktail was occurred with lower doses (10%) in MCF-7 cells. Our results indicate that polyphenolic compounds have anti-metastatic effects in addition to their cytotoxic and apoptotic effects on breast cancer and might be considered as a part of cancer treatment.