Mezopotamya yayın balığı (S. triostegus, H. 1843) spermasının dondurulmasında sulandırıcıya katılan sükrozun çözüm sonrası sperma kalitesine etkileri
Effects of sucrose added to diluent in cryopreservation of Mesopotamian catfish (S. triostegus, H. 1843) semen quality after thawing
Yazar: AHMET İLKER MERMER
Danışman: DOÇ. DR. ZAFER DOĞU
Harran Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Zootekni Ana Bilim Dalı / Su Ürünleri Yetiştiriciliği Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Su Ürünleri = Aquatic Products
Dizin: DNA = DNA ; Kriyoprezervasyon = Cryoprezervation ; Sakaroz = Sucrose ; Silurus triostegus = Silurus triostegus

Özet:
Bu çalışmada Mezopotamya yayın balığı (S.triostegus) spermaları farklı kriyoprotektanlara (DMSO, methanol, metilglikol) eklenen sükroz ile oluşturulan kriyoprezervasyon medyumu ile 1/3 oranında seyreltilerek dondurulmuş ve çözüm sonrası sperma kalitesi üzerine etkileri, DNA hasar düzeyleri incelenerek, fertilizasyon oranları test edilmiştir. Bu amaçla 4-5 yaşlarında 5 adet erkek, 3 dişi kullanılmıştır. Çözüm sonrası sperma kalitesi değerlendirilirken spermatozoamotilite oranı ve motilite süresi belirlenmiştir. DNA hasar düzeyleri 8-Hidroksideoksiguanozin (8-OHdG) Ölçümü ve CometAssay yöntemi ile tespit edilmiştir. Bunlara ilaveten apoptotikspermatozoa incelenmiştir. Son olarak da çalışılan sperma örneklerinin çözüm sonrası fertilizasyon oranları belirlenmiştir.Sperma kalitesi değerlendirme sonuçlarına göre, yalnız DMSO içeren sperma sulandırıcısı %30,00±3,51 ile en yüksek spermatozoamotilite oranı göstermiştir (P<0,05). DMSO kontrol grubu (45,00±6,50 s) ve DMSO±Sükroz (50,00±10,51 s) katılan sulandırıcı grubunda motilite süreleri önemli (P<0,05) şekilde yüksek bulunmuştur. 8-Hidroksideoksiguanozin ölçümünde, Methanol+Sükroz grubu 123,86±4,08 ng/ml ile en yüksek DNA hasarı göstermiştir (P<0,05). Metilglikol kontrol grubu hariç, DMSO, Methanol ve Sükroz kontrol gruplarında en düşük DNA hasarı (59,13±0,77-60,80±1,11) belirlenmiştir (P<0,05).Yalnız DMSO (2,23±0,13) ve DMSO+Sükroz (2.02±0.12) içeren medyum en yüksek apoptotik DNA fragmantasyonuna sahip olmuş (P<0,05), en düşük apoptotik DNA fragmantasyonu ise methanol kontrol grubunda (1,17±0,11) ve methanol+Sükroz (1.15±0.10) deneme grubunda belirlenmiştir(P<0,05). En yüksek fertilizasyon oranı kontrol gruplarından DMSO (%24,66±3,51) ve metilglikol (%20,66±1,15); deneme gruplarından DMSO+Sükroz (%20,33±1,52) içeren medyumunda tespit edilmiştir (P<0,05). Bu sonuçlar DMSO ve sükroz karışımının sperma dondurma için sulandırıcılara birlikte katılmasının metilglikol ve methanol'e göre uygun olduğunu göstermiştir.

Abstract:
Inthisstudy, Mesopotamiancatfish (S.triostegus) semen was frozen bydiluting 1/3 with a cryopreservationmediumcreatedwithsucrosesupplementationtodifferentcryoprotectants (DMSO, Methanol, Methylglycol). Then,itseffects on post-thaw semen quality, DNA damagelevels, andfertilizationratesweretested. Forthispurpose, 5 malesand 3 femalesaged 4-5 yearswereused. Whileevaluatingthe semen qualityafterthawing, sperm motility rate andmotilityduration, DNA damagelevelsweredeterminedby 8-Hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) measurementandCometAssaymethod. Inaddition, apoptoticspermatozoawereexamined. Finally, the post-solutionfertilizationrates of thestudied semen samplesweredetermined.Accordingtothe semen qualityevaluationresults, semen extendercontainingonly DMSO showedthehighest sperm motility rate with 30.00±3.51% (P<0.05). Motilitydurationsweresignificantlyhigher (P<0.05) in the DMSO controlgroup (45.00±6.50 h) andtheextendergroupsupplementedwithDMSO±Sucrose (50.00±10.51 h). Inthemeasurement of 8-Hydroxydeoxyguanosine, methanol+sucrosegroupshowedthehighest DNA damagewith 123.86±4.08 ng/ml (P<0.05). Exceptthemethylglycolcontrolgroup, thelowest DNA damage (rangedbetween 59.13±0.77 and 60.80±1.11) wasdetermined in the DMSO, methanolandsucrosecontrolgroups (P<0.05). The media containing only DMSO (2.23±0.13) and DMSO+sucrose (2.02±0.12) groups had the highest apoptotic DNA fragmentation (P<0.05), while the lowest apoptotic DNA fragmentation was found in the methanol (1.17±0.11) and methanol+sucrose (1.15±0.10) (P<0.05) groups.Thehighestfertilization rate wasfound in DMSO (24.66%±3.51%) andmethylglycol (20.66±1.15%)groups.Theseresultsshowedthattheaddition of DMSO andsucrosemixturetoextendersfor semen freezing is moresuitablethanmethylglycolandmethanol.