Nikotin ile oksidatif strese maruz bırakılan farelerde curcuminin testis üzerine etkileri
Effects of curcumine to the nicotine induced oxidative stress in mice testis
Yazar: GÜLFİDAN COŞKUN
Danışman: YRD. DOÇ. DR. HÜLYA ÖZGÜR
Çukurova Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2011
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Kurkumin = Curcumin ; Mikroskopi-elektron = Microscopy-electron ; Nikotin = Nicotine ; Testis = Testis ; Testosteron = Testosterone

Özet:
Sigaranın major toksik bileşenlerinden biri olan nikotinin erkek üreme sistemi üzerine toksik etkisi bilinmektedir. Asya ve Afrika ülkelerinde boya, baharat ve tıbbi bitki olarak kullanılan curcuminin, antiinflamatuvar, antiseptik, antioksidan, antikarsinojenik ve hipokolesterolemik etkileri rapor edilmiştir. Bu çalışmada, nikotin alımının testiste oluşturduğu oksidatif strese karşı, curcuminin etkisinin araştırılması amaçlanmıştır.Çalışmamızda Swiss albino tip 60 erkek fare her bir grupta 12 hayvan olmak üzere 5 gruba ayrıldı. 1. grup kontrol grubu olarak değerlendirildi. 2. ve 3. grupta yer alan 12'şer fareye sırasıyla 14 ve 28 gün boyunca günde tek doz intraperitonel olarak nikotin (0,4mg/kg/gün) uygulandı. 4. ve 5. gruptaki 12'şer fareye ise sırasıyla 14 ve 28 gün boyunca nikotin (0,4mg/kg/gün) ve gavajla mısır yağında çözdürülen curcumin (200mg/kg/gün) verildi. Her bir grupta yer alan 12 fareden 6 tanesi uygulama süreleri sonunda sakrifiye edilirken, kalan 6 tanesi 28 gün hiçbir işlem yapılmadan normal şartlarda yaşatıldıktan sonra sakrifiye edildi. Sakrifiye edilen farelerden alınan kan örneklerinin testosteron seviyeleri ölçüldü, testis doku örnekleri, ışık ve elektron mikroskobik düzeyde incelendi.Işık mikroskobik düzeyde; 2. ve 3. grup farelerin testislerinde seminiferöz epitelde dökülme ve lümende immatür hücre birikimi ile interstisyel alanda ödem izlendi. Nikotin ve curcumin uygulanan 4. ve 5. grup farelerde kontrol grubuna benzer nitelikte düzenli görünüme sahip seminiferöz tübüller ve interstisyum gözlendi. Elektron mikroskobik incelemede; 2. ve 3. grupta membrana propria total kalınlığında artış, elektron dens Sertoli hücre sitoplazmasında vakuolizasyon, lipid damlacıkları, dejeneratif mitokondriyonlar ve litik spermatojenik hücrelere rastlanıldı. Sertoli hücreleri ve spermatojenik hücreler arasında geniş boşluklar dikkat çekti. Elektron dens Leydig hücrelerinde dejeneratif mitokondriyonlar, boyutu ve sayısı artmış lipid damlacıkları gözlendi. 28 gün hiçbir işlem yapılamadan takibe alınan bu gruplardaki farelerde dejenerasyonun devam ettiği fark edildi. 2. ve 3. grup farelerin testosteron seviyeleri de kontrol grubundan belirgin şekilde düşük ölçüldü. Nikotin ve curcumin uygulanan 4. ve 5. deney gruplarına ait örneklerde membrana propria, seminiferöz tübül epiteli ve interstisyum yapısında anlamlı bir düzelme gözlendi. 4. ve 5. grup farelerden uygulama sonrası hiçbir işlem yapılmadan bekletilenlerde ise nikotin uygulanan farelere benzer özellikler izlendi. 4. ve 5. grup testosteron seviyelerinde ise artış gerçekleşti.Nikotinin özellikle membrana propria, Sertoli hücreleri ve spermatojenik hücrelerde dejeneratif değişikliklere neden olduğu belirlendi. Kronik nikotin alımına karşı curcuminin tedavi süreci boyunca, testiste anlamlı bir koruyucu etkisinin bulunduğu sonucuna varıldı.

Abstract:
Effects of curcumine to the nicotine induced oxidative stress in mice testisIt is known that nicotine, which is one of the major hazardous components of cigarette, have toxic effects on male reproductive system. Curcumine which is commonly used as a dye, a spice and a medicine in Asia and Africa, is reported to have anti-inflammatory, antiseptic, antioxidant and hypocholesterolemic properties. The aim of this study was to determine the effect of curcumine against oxidative stress on testis caused by nicotine intake.In this study adult Swiss Albino type 60 male mice were divided into five groups each containing 12 mice. The first group was used as control. The second and third groups were injected with nicotine at a dose of 0,4mg/kg/day respectively for 14 and 28 days. The fourth and fifth groups were injected with nicotine 0,4mg/kg/day and orally treated with curcumine (200mg/kg) solved in corn oil respectively for 14 and 28 days. 6 mice of each groups were sacrified at the end of the application periods. Others were sacrified after keeping alive for 28 days in each groups. Testosteron levels were measured from the blood samples and testis tissues were processed and inspected by light and electron microscopy.Light microscopic examination showed exfoliation of germinal epithelial cells and cumulation of immature cells in the lumen of tubules of the second and third groups. Additionally edema at the interstitial area were also seen. Besides that tubules which have the similar composition of normal control tubules were viewed at the fourth and fifth groups. Furthermore, vacuolisation, giant lipid droplets, degenaration of mitochondria, nuclear indentation, increase in electron density of cytoplasm in Sertoli cells were observed at the electron microscopy of the second and third groups. Moreover, thickening of the membrana propria and lytic spermatogenic cells between seminiferous tubule epitel cells were also seen. Additionally, Leydig cells were showed increasing size and number of the mitochondria in second and third groups. While median levels of testosteron has significantly lowered in second and third groups in comparison with controls, Fourth and fifth groups showed significant improvement in membrana propria, seminiferous tubules and interstitium. Furthermore decreasing in vacuolization and electron density of cytoplasm in Sertoli cells, absence of the giant intercellular space were also seen in fourth and fifth groups. Mice which were sacrified after keeping alive for 28 days in fourth and fifth groups were showed similar degeneration like nicotine groups. Decrease of the blood testosteron level were measured in fourth and fifth groups.Degenerative changes were observed in membrana propria and testicular cells in nicotin induced group. On the other hand, the treatment of curcumine on the testicular cells has significant protective effect during chronic nicotine intake.