Bir süt sığırcılığı işletmesinde BoHV-1 ıgG antikor aviditesinin araştırılması
Detection of BoBV-1 igG antibody avidity in a dairy herd
Yazar: AYŞE BAŞAK DEMİR
Danışman: PROF. DR. YILMAZ AKÇA
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Viroloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2006
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine

Özet:
ÖZETBir Süt Sığırcılığı İşletmesinde BoHV-1 IgG Antikor Aviditesinin AraştırılmasıBu çalışmada, BoHV-1 enfeksiyonun başlangıç döneminde ve ilerleyen dönemlerindeki antikoraviditelerini ayrıca primer ve sekonder veya tekrarlayan enfeksiyonlardan sonra antikor aviditesindekideğişimleri belirlemek için BoHV-1 IgG avidite ELISA tekniği geliştirilmiştir.Bu amaçla, daha önce yapılan bir çalışmada, tüzel nitelikli bir süt sığırcılığı işletmesindekihayvanlardan 2 yıl boyunca 3'er ay aralıklarla toplanan kan serumu örnekleri ile bu çalışmadaki sonörneklemeden 1,5 yıl sonra ve bunu takiben 1. yıl sonunda alınan kan serumu örnekleri kullanılmıştır.Çeşitli parametreler yönünden değerlendirilip optimizasyonu sağlanan bir indirekt ELISAsistemi ile, ilk örnekleme dönemindeki hayvanların tümü BoHV-1 antikor negatif tespit edilmiştir.İkinci örnekleme döneminden itibaren hayvanların serokonverte olduğu tespit edilmiş, avidite ELISAtesti, antikor pozitif olarak bulunan hayvanlara uygulanmıştır.Avidite ELISA testi sonucunda bulunan avidite indeksi (A.I.) değerleri, örneklemelerbazında, logaritmik A.I. ortalamaları Â± SD olarak değerlendirilmiştir. Bu verilerin analizi sonucunda,örneklemeler arasında A.I. değerleri bakımından istatistiksel olarak anlamlı bir fark olduğubulunmuştur (p<0,001).Örnekleme dönemlerine göre A.I. (%) değerleri incelendiğinde, 2. örnekleme döneminde A.I.%65'in altında kalan hayvanların oranı %38-57 arasında değişirken, 3. örneklemede bu oran % 0-4seviyesine düşmüş, 4. örneklemeden itibaren ilerleyen örneklemelerde %65'in altında A.I. tespitedilmemiştir. %75'in üzerinde A.I. değerine sahip hayvanların oranı ise, 2. örnekleme döneminde %5-12 oranında iken, 3. örneklemede %48-69 seviyesine yükselmiş, 4. örneklemede %81-88 olarak tespitedilmiş olup, bundan sonraki dönemlerde ise bu oran %90-100 düzeyine ulaşmıştır. Araştırmada,düşük ve yüksek antikor aviditesi sırasıyla AI<%65 ve A.I.>%75 olarak belirlenmiştir. %65 ile %75arası değerlerdeki avidite indeksleri şüpheli aralık (orta düzeyde avidite) olarak kabul edilmiştir. A.I.değerlerinde örneklemeler arasındaki artış anlamlı bulunmuştur (p<0,001).Elde edilen verilere göre, örneklenen popülasyonda zaman içerisinde aviditenin çeşitlinedenlere bağlı matürasyonu ortaya konmuştur. Bunun yanı sıra BoHV-1 enfeksiyonunun başlangıçdöneminde ve ilerleyen dönemlerindeki antikor düzeyleri ile aviditeleri ayrıca primer ve sekonderenfeksiyonlar ile reaktivasyonların sonrasında antikor aviditesindeki değişimler ortaya konmuştur.Gerekli parametreler test edilip optimizasyon sağlandığı taktirde, indirekt ELISA testinin IgG antikortanısına yönelik uygun bir test olduğu ve bu test kullanılarak geliştirilen BoHV-1 IgG avidite testininlongitudinal çalışmalar veya taramalarda, primer ve tekrarlayan virus enfeksiyonlarında oluşan bağışıkyanıtın incelenmesi amacıyla kullanılabilecek uygun bir araç olduğu sonucuna varılmıştır.Anahtar Sözcükler: avidite, BoHV-1, ELISA, IgG antikor aviditesi , süt sığırcılığı83

Abstract:
SUMMARYDetection of BoHV-1 IgG Antibody Avidity In a Dairy HerdIn this study, a BoHV-1 IgG avidity ELISA test was developed to detect the antibody avidity at theearly and late phases of BoHV-1 infection and to determine the changes in the antibody avidity afterprimary and secondary or recurrent infections.For this purpose, sera collected at 2 years period at 3 months intervals from a dairy herd in apast study and sera collected 1,5 and following 1 year after the last sampling of this study were used.Using an Indirect ELISA, which were evaluated according to various parameters andoptimised, all of the animals at the first sampling were found antibody negative for BoHV-1 infection.Beginning from the second sampling, the animals were seroconverted and avidity ELISA test wereapplied to the animal which were found antibody positive for BoHV-1.The avidity index (A.I.) values, which were found in the Avidity ELISA test were logtransformed and presented as mean A.I. Â± SD. When the data were analyzed, the A.I. values betweenthe sampling periods were found significantly different (p<0,001).When the A.I. (%) values according to sampling periods were investigated, at the secondsampling, the animals which have A.I. values below 65% ranged between 38% and 57%, at the thirdsampling this range decreased to 0-4% and from the fourth sampling on, none of the animals werefound having A.I. below 65%. The range of the animals, which show A.I. values above 75% werefound 5-12% for the second sampling, 48-69% for the third sampling, 81-88% for the fourth samplingand for the following sampling periods this range increased to the level of 90-100%. In this study, thelow and high antibody levels were determined as <65% and >75% respectively. The avidity indicesranged between 65-75% were accepted as moderate avidity (grey zone). Increasing in the A.I. valuesbetween the progressive sampling periods were found statistically significant (p<0,001).According to data, the avidity maturation were established in this population with time duringthe sampling periods. Besides this, the antibody levels and avidities in the primer and followinginfection periods and changes in antibody avidities after the primary and secondary or recurrentinfections were determined. It was found that, when the parameters which were required for theIndirect ELISA were evaluated and optimized, this test is suitable for the detection of IgG antibodyand BoHV-1 IgG avidity ELISA is a useful tool for screening the antibody response after primer andrecurrent viral infections in the longitudinal surveys.Key Words: avidity, BoHV-1, ELISA, IgG antibody avidity, dairy herd84