NADPH oksidaz enzim aktivitesinin aort anevrizması ile ilişkisi
Relationship between nadph oxidase enzyme activity and AORT aneurysm
Yazar: BİLGE BİNGÖL
Danışman: PROF. DR. NİHAT KALAY ; DR. ÖĞR. ÜYESİ DENİZ ELÇİK
Erciyes Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kardiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2018
Konu: Kardiyoloji = Cardiology
Dizin: Akım sitometrisi = Flow cytometry ; Aort = Aorta ; Aort anevrizmaları = Aortic aneurysm ; Aort hastalıkları = Aortic diseases ; Göğüs = Thorax ; Kök hücreler = Stem cells ; Nikotinamid = Nicotinamide ; Rodamin = Rhodamine ; Rodamin = Rhodamine

Özet:
Amaç: Aort anevrizmalarının gelişmesinde ana sebep damar duvarındaki hasar ve tamir mekanizmaları arasındaki dengenin bozulmasıdır. Anevrizmal formasyonda karakteristik olarak endotelyal bütünlüğün bozulduğu görülmüştür. Anevrizma formasyonunda oksidatif stresin önemli bir rolü olduğu gösterilmiştir. Bizde çalışmamızda oksidatif stres sonucu ortaya çıkan  Reaktif Oksijen ürünlerinin(ROS) sentezlenmesinde merkezi rol olan NADH/NADPH oksidaz enzim sisteminin ve  endotelyal progenitör hücrelerin (EPC) hastalık gelişimindeki rolünü değerlendirmeyi amaçladık.
Metod:Çalışmaya torasik aort anevrizması (TAA) olan hastalar (hasta grubu, n:30) ve TAA olmayan sağlıklı bireyler ( kontrol grubu, n:10) alındı. Katılımcıların kardiyak fonksiyonları ve torasik aort çapı ekokardiyografi ile değerlendirildi. Katılımcıların periferal kan örnekleri alındı. Hasta ve kontrol grubu kan örneklerinde, dihidrorodamin 123 testi (DHR123) ile NADPH Oksidaz enzim aktivitesi değerlendirildi. Ayrıca akım sitometri ile EPC sayımı ve karekterizasyonu (belirteçler yardımıyla) yapıldı. EPC belirteci olarak CD34/CD133, CD34/CD309, CD34/CD146, CD146/CD144, CD133, CD309 ve CD34 kullanıldı.
Bulgular: Hasta ve kontrol grubununda DHR 123 testi sonuçları normal sınırlar arasında bulundu (stimülasyon indeksi (SI): 50-100). Kontrol grubunda ortalama SI değeri 75.10±5.21 olarak tespit edildi. Hasta grubunda ise bu değer 60.40± 7.86 olarak hesaplandı. Ortalama SI değeri hasta grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak düşük bulundu (p<0.01). Ayrıca çalışmada endotelyal koloni düzenleyici hücrelerin yüzey belirteci olan CD34+/CD146+ hücrelerin akım sitometrik sayımında hasta grubunda (41.5) kontrol grubuna (20.5) göre anlamlı oranda artış saptandı (p<0.01). ayrıca TAA hastalarında CD309+ hücrelerin sayısı kontrol grubuna göre anlamlı olarak yüksekti (p=0.024). Diğer yüzey belirteçlerinin sayısı ise her iki gruptada benzerdi.
Sonuç: TAA hastalarında EPC sayısı ve fonksiyonları etkilenmektedir. Bu sonuç EPC'lerin  TAA gelişmesinde potansiyel bir rolünün olduğunu göstermektedir.

Anahtar Kelimeler: Akım sitometri; dihidrorodamin 123; endotelyal progenitör hücreler; torasik aort anevrizması

Abstract:
Objective: The main reason for the development of aortic aneurysms is the deterioration of the balance between damage and repair mechanisms in the vessel wall. In the aneurysmal formation, endothelial integrity found to be impaired. Oxidative stress has been shown to play an important role in the aneurysm formation. In our study, we aimed to evaluate NADH / NADPH oxidase enzyme system which has a central role in synthesizing Reactive Oxygen products (ROS) resulting from oxidative stress and endothelial progenitor cells in the development of thoracic aortic aneurysm (TAA).
Methods: In this study, patients with TAA (group of patients, n: 30) and healthy individuals without TAA (control group, n: 10) were included. All participants were evaluated for cardiac functions and thoracic aortic diameter with echocardiography. Also, peripheral blood samples were taken from the participants. NADPH Oxidase enzyme activity was evaluated by dihydrorodamine 123 test (DHR123) in patient and control group blood samples. EPCs counting and characterization (scanning of the markers) was performed by flow cytometry. CD34/CD133, CD34/CD309, CD34/CD146, CD146/CD144, CD133, CD309 and CD34 was used as a marker of EPCs.
Results: DHR 123 test result was found to be a normal cut-off values in  the patient and control groups (stimulation index (SI): 50-100). The mean SI was found to be 75.10±5.21 in the control groups. The result of DHR 123 test SI value found in 60.40± 7.86 in patient group. The mean SI revealed signiﬁcantly lower values when compared with control group (p<0.01). In this study, the results of flow cytometric analysis of CD34+/CD146+ cell surface markers as endothelial colony forming cells showed that these cells count increased in the patient group (41.5) compared to the control group (20.50), (p<0.01). Also, TAA patients had a significantly higher levels of CD309+ cells than the control group (p=0.024). Other markers of EPCs were similar between the groups. 
Conclusion: The number and function of EPCs (especially CD34+/CD146+ cells) were impaired in TAA patients, suggesting their potential role in TAA.
Key words: Flow cytometr ; dihydrorodamine 123; endothelial progenitor cell; thoracic aortic aneurysms;