Lökosit adezyon defekti tanısında genetik ve akım sitometrik testlerin uygulanması
Diagnosis of leukocyte adhesion deficiency genetic and flow cytometry tests
Yazar: SONGÜL GÜNGÖR
Danışman: PROF. DR. MUSTAFA YAVUZ KÖKER
Erciyes Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / İmmünoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Allerji ve İmmünoloji = Allergy and Immunology
Dizin: Adezyonlar = Adhesions ; Akım sitometrisi = Flow cytometry ; Dizi analizi = Sequence analysis ; Genetik = Genetics ; Hücre adezyon molekülleri = Cell adhesion molecules ; Lökosit adezyon defekti 1 = Leukocyte adhesion defeciency ; Lökositler = Leukocytes ; Nötrofiller = Neutrophils ; Teşhis = Diagnosis ; Teşhis testleri = Diagnostic tests

Özet:
Lökosit adezyon defekti, nötrofillerin enflamasyon bölgesine göçünde ve damar endotel yüzeyine yapışmasında rol alan adezyon moleküllerinin eksikliği ile karakterize otozomal resesif geçişli bir primer immün yetmezlik hastalığıdır. Adezyon moleküllerinden ITGB2 geni tarafından kodlanan β2 integrin (CD18) sentezinin olmaması veya fonksiyon kaybı lökosit adezyon defekti 1(LAD-1) olarak isimlendirilir. LAD-1 laboratuvar tanısında nötrofillerde CD18/CD11b  ekspresyon kaybının akım sitometri ile gösterilmesi  gereklidir.
Çalışmamız gerekli onamlar alındıktan sonra, ERÜ Tıp Fakültesi İmmünoloji Anabilim Dalı İmmün Yetmezlik Araştırma Laboratuvarına, ülkemizdeki çeşitli merkezlerden gönderilen ve LAD-1 şüphesi bulunan (veya daha önce LAD-1 tanısı alan) 10 hasta ve 10 kontrol kan örneği ile yürütüldü. Örneklerde akım sitometri ile CD18 ve CD11b ölçümü yapılarak moleküler testler uygulandı.
Hastaların tamamında CD18 ve CD11b ekspresyon kaybı olduğu akım sitometri ile gösterildi. ITGB2 geni hedeflenerek yapılan moleküler çalışmalar sonucunda 10 hastada homozigot olarak 5 farklı mutasyonun yer aldığı ve ebevenylerde heterezigot taşıyıcılık olduğu gözlendi. 
Nadir hastalıklar grubunda yer alan LAD-1 tanılaması yeterli alt yapı ve deneyimli personel bulunmaması nedeniyle sınırlı sayıda merkezde yapılabilir. Merkezimizde LAD-1 gibi nadir bir hastalıkta 10 hasta ile uygulamalı olarak fonksiyonel ve moleküler çalışma eşgüdüm içinde uygulandı ve diğer nadir hastalıkların tanısında da kullanılabilecek bir alt yapı oluşturulmuştur

Anahtar kelimeler:  LAD-1, akım sitometri, nötrofil, dizi analizi.

Abstract:
Leukocyte adhesion deficiency is an autosomal recessive primary immunodeficiency disease characterised by the absence or malfunction of adhesion molecules involved in the migration of neutrophils to the inflammation site and their adhesion to the vascular endothelial surface. The adhesion molecules affected are integrin and selectin receptors.
The absence and deficiency of β2 integrin (CD18) receptor synthesis from these molecules causes the disease called leukocyte adhesion defeciency 1 (LAD-1). For LAD-1 identification, loss of CD18/CD11b expression in neutrophils was determined by flow cytometry.
The study was conducted with 10 patients with suspected LAD-1 (or previously diagnosed with LAD) and 10 control blood samples sent from various centres in our country to the Immunodeficiency Research Laboratory of ERU Faculty of Medicine, Department of Immunology, after obtaining the necessary consents. In the samples, mutation screening was performed by measuring CD18 and CD11b by flow cytometry and DNA separation.
CD18 and CD11b expression loss was detected in all patients. As a result of molecular studies, it was observed that 5 different mutations were homozygous in 10 patients and heterozygous carriers were observed in the parents.
Since LAD-1 is in the rare diseases group, many centres cannot provide sufficient infrastructure for diagnostic studies.  ort he first time in our centre, functional and molecular studies were applied for rare diseases such as LAD-1 in a coordinated manner in a wide range of patients.
Key words: LAD-1, flow cytometry, neutrophil, sequence analysis.