Ailevi Akdeniz Ateşi hastalarında S100a12 ile sRAGE protein ve gen ekspresyon düzeylerinin belirlenmesi ve inflamasyon belirteçleri ile ilişkisi
Determination of S100a12 and sRAGE protein and gene expression levels in Familial Mediterranean Fever patients and their relationship with inflammation markers
Yazar: FİLİZ KAÇMAZ
Danışman: DOÇ. DR. OĞUZHAN ÖZCAN ; DOÇ. DR. HÜSEYİN ÖZKAN
Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Biyokimya ve Genetik Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2023
Konu: Biyokimya = Biochemistry ; Genetik = Genetics ; Romatoloji = Rheumatology

Özet:
Bu çalışma Ailevi Akdeniz Ateşi (FMF) hastalarında S100A12 proteininin hastalıktaki inflamasyon ile ilişkisini aydınlatmak ve S100A12'nin çözünür reseptörü olan sRAGE'nin inflamasyonun engellenmesindeki rolünü tespit etmek amacıyla yapılmıştır.
Çalışmada kontrol, remisyon ve atak olmak üzere üç ayrı grup oluşturulmuştur. Kontrol grubu sağlıklı gönüllülerden, remisyon ve atak grubu ise M694V mutasyonu taşıyan gönüllü FMF hastalarından oluşmuştur. Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi Sağlık Uygulama ve araştırma Hastanesi Romatoloji Polikliniği'ne başvuran gönüllü hastalardan alınan kanlardan rutin biyokimya ve hemogram parametreleri yanı sıra ELISA yöntemi ile TNF-α, IL-1β, NF-κβ, S100A12, AGE ve sRAGE protein düzeyleri belirlenmiştir. Ayrıca alınan tam kan örneklerinden izole edilen lökositten TNF-α, IL-1β, NF-κβ, S100A12 ve RAGE genlerine ait mRNA düzeyleri RT-qPCR teknolojisi ile analiz edilmiştir. Atak grubunda TNF-α, S100A12 ve sRAGE protein düzeyleri anlamlı olarak artarken, IL-1β seviyelerinin remisyon grupta en yüksek olduğu görülmüştür (p<0,05). Atak grubunda TNF-α, IL-1β ve S100A12 genlerinin ekspresyon seviyelerinde anlamlı kat değişimleri mevcuttur. Yapılan karşılaştırmalarda S100A12 gen ekspresyonu ile NF-κβ gen ekspresyonu arasında pozitif korelasyon (r: 0,924***; p<0,001) tespit edilirken RAGE gen ekspresyon düzeyinde anlamlı değişiklik yoktu. sRAGE protein düzeyinde ise atak grubunda anlamlı artış görülmüştür (p<0,05). Tüm hastalarda protein düzeyindeki korelasyonlar incelendiğinde S100A12 ile CRP arasında pozitif korelasyon (r: 0,547***; p<0,001) görülmüştür. Ancak atak ve remisyon grupları kendi içinde değerlendirildiğinde anlamlı korelasyon saptanmamıştır.
Elde edilen bulgular, S100A12'nin FMF'teki inflamatuvar süreçlerle ilişkili olduğunu göstermiştir. Ayrıca S100A12 artışının RAGE reseptörünün metalloproteazlar tarafından kesimini artırabileceği ve bu nedenle S100A12'nin sRAGE oluşumunda düzenleyici rolü olan faktörlerden biri olabileceği düşünülmüştür. sRAGE miktarının artması ile FMF hastalarında inflamasyondan korunmada sRAGE'nin önemli rol oynayabileceği anlaşılmıştır.

Abstract:
This study was conducted to elucidate the relationship of S100A12 protein with inflammation in patients with Familial Mediterranean Fever and to determine the role of sRAGE, the soluble receptor of S100A12, in the prevention of inflammation.
In the study, three different groups were formed as control, remission and attack. The control group consisted of healthy volunteers, and the remission and attack group consisted of voluntary FMF patients carrying the M694V mutation. Routine biochemistry and hemogram parameters and TNF-α, IL-1β, NF-κβ, S100A12, AGE and sRAGE protein levels were measured from blood samples taken from volunteer patients who applied to Hatay Mustafa Kemal University Health Practice and Research Hospital Rheumatology Polyclinic. In addition, mRNA levels of TNF-α, IL-1β, NF-κβ, S100A12 and RAGE genes were investigated by RT-qPCR technology in leukocytes isolated from whole blood samples.
Plasma IL-1β levels was found to be highest in the remission group and plasma protein levels of TNF-α, S100A12 and sRAGE were increased significantly in the attack group (p<0,05). A significant fold changes in gene expression levels of TNF-α, IL-1β and S100A12 was detected in the attack group. A positive correlation was found between S100A12 and NF-κβ gene expression levels (r: 0,924***; p<0,001). Additionally, a positive correlation was observed between S100A12 protein and CRP (r: 0,547***; p<0,001) levels. There was a significant increase in the sRAGE protein level in the attack group without any change in the RAGE gene expression level.
These results show that S100A12 is associated with inflammatory processes in FMF. In addition, it was thought that the increase in S100A12 may lead to the cleavage of the RAGE receptor by metalloproteases and thus it can play a regulatory role in the formation of sRAGE. The increase in the amount of sRAGE shows that sRAGE is an important protein in prevention of inflammation.