Meme kanseri tedavisinde kemoterapötik tedavi desteği olarak bifidobacterium infantis suşlarının kullanım potansiyelinin in vivo olarak araştırılması
In vivo investigating the chemotherapeutic treatment supportive potential of bifidobacterium infantis in breast cancer treatment
Yazar: MELTEM DOĞAN
Danışman: DOÇ. DR. AYŞE NALBANTSOY ; PROF. DR. DUYGU KIŞLA
Ege Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2018
Konu: Biyomühendislik = Bioengineering ; Gıda Mühendisliği = Food Engineering

Özet:
Kanserin en tehlikeli en ölümcül hastalıklardan biri olmasının yanı sıra meme kanseri de
kadınlarda teşhis edilen en yaygın kanser tipidir ve akciğer kanserinden sonra, kanser
kaynaklı ölümler sıralamasında, ikinci sırada yer almaktadır. Meme kanserinde kullanılan
tedaviler, cerrahi müdahale, radyoterapi, kemoterapi, hormon terapisi, hedef odaklı terapi ve
immünoterapiyi içermektedir. Immünoterapi, hastalığın stabilizasyonunu sağlamak ya da
objektif bir yanıt elde etmek için immün sistemi aktive etmekte ya da baskılamaktadır.

Bu çalışmada Bifidobacterium infantis'in kemoterapi desteği olarak kullanımı, fare meme
kanseri modellerinde in vivo olarak araştırılmıştır. İlk olarak, in vitro denemeler
gerçekleştirilmiş ve doksorubisinin 4T1 hücreleri için IC50 değeri 0,053 μg / mL bulunmuştur.
Ardından, in vivo denemelerde, 4T1 hücreleri enjekte edilen (2x10^4 hücre / fare) Balb/c farelere, 14 gün boyunca B.infantis sütü (10^8 kob / ml) gavaj yolu ile verilmiştir ve 5 ile 10. günlerde doksorubisin enjeksiyonu gerçekleştirilmiştir. Çalışma süresince fare ağırlıkları
ölçülmüştür. On beşinci gün fareler sakrifiye edilmiş ve tümör boyutları kumpas ile
ölçülmüştür. Farelerden alınan splenositlerin proliferasyonları analiz edilmiştir. Splenosit ve
4T1 hücre kültürü ile ko-kültür hazırlanmış ve sitotoksik etki mikroskop yardımı ile
gözlenmiştir. CD8+ T hücre yanıtı, akıĢ sitometrisi ile analiz edilmiştir. Sonuçlar kontrol
grubuna göre değerlendirilmiĢtir. Splenosit proliferasyonu ve CD8+ T hücre analizleri
birbirlerini destekler niteliktedir. En iyi anti-tümör etki B.infantis doksorubisinin birlikte
kullanıldığı grupta gözlenmiştir.

Abstract:
While cancer is the one of the most dangerous, deadly diseases, breast cancer is the most
frequently diagnosed among cancer types in women and second among causes for cancer
related death in women after lung cancer. Treatments for breast cancer includes surgery,
radiotherapy, chemotherapy, hormone therapy, targeted therapy and immunotherapy.
Immunotherapy activates or suppress immune system to provide objective response and
disease stabilization.

In this thesis, the antitumor effect of Bifidobacterium infantis strain in the mouse breast
cancer model as a support for chemotherapeutic treatments was investigated in vivo. Firstly in
vitro experiments were carried out and the IC50 value of doxorubicin for 4T1 cell line was
determined as 0.053 μg / mL. Subsequently, in in vivo experiments Balb/c mice injected with
4T1 cells (2x10^4 cells / mouse) were fed with/without gavage B.infantis milk (10^8
cfu / ml) for 14 days and treated with doxorubicin on 5th and 10th days. During the study the weights of
the mice were weighed. On 15th day, mices were sacrificed and the tumor sizes were
measured with caliper. The proliferation of splenocytes which collected from mice was
analyzed. Co-culture was prepared with spleen cell culture and 4T1 cell culture and cytotoxic
effect was observed with microscope. CD8+ T cell response was analyzed by flow cytometry.
The results were determined according to the control group (K1). Splenocyte proliferation and CD8+
T cell analysis confirm these results. The best anti-tumor effect was obtained by the
combined use of B.infantis and doxorubicin.