Alloimmünizasyonla oluşan anti-HLA antikorlarının mikrolenfositotoksisite yöntemi ile belirlenmesi
Identification of anti-hla antibodies produced by alloimmunization BY microlymphocytotoxicity method
Yazar: CEREN YÜKSEL
Danışman: PROF. DR. İBRAHİM PİRİM
İzmir Katip Çelebi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Böbrek hastalıkları = Kidney diseases ; Böbrek nakli = Kidney transplantation ; Böbrek yetmezliği-kronik = Kidney failure-chronic ; Gref reddi = Graft rejection ; HLA A antijenleri = HLA A antigens ; Sitotoksisite = Cytotoxicity ; Toksisite = Toxicity ; İmmünizasyon = Immunization

Özet:
Bu çalışmada anti-HLA antikoru oluşum sebeplerinden kan transfüzyonu, gebelik ve
transplantasyon öyküsüne sahip olan KBY hastalarından alınan serum örneklerinin fizyolojik
şartlara yakın ortamda antikor antijen etkileşimi gözlemlenebilen mikrolenfositotoksisite
yöntemi ile panel reaktif antikor taraması yapıldı. Bunun için laboratuvarımıza rutin anti-HLA
antikoru taraması için başvuran KBY hastalarının arasından Luminex PRA tarama
sonuçlarındaki HLA sınıf I ve HLA sınıf II pozitifliğine göre hastalar seçildi. Ardından 21
seruma sınıf I tanımlama, 8 seruma sınıf II tanımlama, 13 seruma hem sınıf I hem sınıf II
Luminex PRA tanımlama testi yapılmıştır. Elde edilen sonuçlara göre 5 farklı temada terasaki
plakları düzeninde serumlar laboratuvarımıza başvuran doku tipi bilinen verici adaylarından
elde edilen lenfositler serumların üzerine eklenerek mikrolenfositotoksisite yöntemi ile
testlendi. Sentetik boncukların üzerine HLA fragmentlerinin yerleştirilmesi ile antikor
tanımlaması yapılan Luminex PRA yönteminin fizyolojik şartlarda gerçek hücre üzerindeki
HLA antijenleri ile antikor birleşmesi sağlayan mikrolenfositotoksisite yöntemi ile her zaman
aynı antikorları saptamadığı görüldü.

Abstract:
In this study, panel reactive antibodies were screened in Chronic Kidney Disease (CKD) patient
sera samples who had blood transfusion, pregnancy, and previous transplantation history by
microlymphocytotoxicity method which was performed under conditions similar to
physiological conditions. For this purpose, the samples were selected from the patients, who
applied to our laboratory for routine anti-HLA antibody screening test, according to their
Luminex PRA class I and II positive results. 21 sera samples were identified for class I PRA, 8
samples were identified for class II PRA, and 13 samples were identified for both class I and
class II PRA by Luminex PRA identification method. These sera were then added on the wells
of Terasaki plates which were designed in 5 different theme according to the identification
results. The lymphocytes obtained from donors, whose HLA tissue types were known, were
tested by adding on the sera samples on Terasaki plate for microlymphocytotoxicity method. In
conclusion, it was determined that the results obtained from antibody identification by HLA
fragments attached to synthetic beads for Luminex PRA identification method were not always
the same as the results obtained from identification under physiological conditions.