Kronik lenfositik lösemili (KLL) hastalarda STAT3  protein ve IL-10 sitokin düzeylerinin araştırılması
Investigation of il-10 cytokine and stat3 protein levels in chronic lymphocytic leukemia (CLL)
Yazar: ÖZDEN ÖZCAN
Danışman: PROF. DR. MELİH AKTAN
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / İmmünoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2018
Konu: Biyoloji = Biology
Dizin: Lösemi = Leukemia ; Lösemi-lenfositik-kronik-B hücreli = Leukemia-lymphocytic-chronic-B-Cell ; Sitokinler = Cytokines ; Transkripsiyon faktörleri = Transcription factors ; İnterlökin 10 = Interleukin 10

Özet:
Kronik lenfositik lösemi (KLL) kemik iliği ve kanda CD5+CD19+ B hücrelerinin birikimiyle karakterizedir. Güncel çalışmalar KLL'li hastalarda IL-10, AID ve mir-155 gibi genlerin ekspresyon düzeylerinin arttığını göstermektedir. STAT3 her üç genin de ekspresyonlarının düzenlenmesinde rol almaktadır. CD5+CD19+ regülatör B (Breg) hücreleri IL-10 salgılayarak immün sistemi baskılarlar. KLL hücreleri Breg hücreler ile benzer immünfenotipik özellik göstermekle birlikte aynı zamanda fonksiyonel olarak da benzediği düşünülmektedir. Çalışmamızda KLL hasta periferik kan örneklerinde STAT3 ve IL-10 içeren içeren CD5+CD19+ hücrelerin düzeyleri araştırılmıştır. KLL tanısı almış 24 hasta ve 14 sağlıklı birey çalışmaya dahil edilmiştir. Periferik kandan elde edilen mononükleer hücreler (1x106 cell/ml) IL-10 düzeyinin belirlenmesi için 48 saat CpG (Sitozin Fosfat Guanozin) (1 ug/ml)  ile,  STAT3 düzeyinin belirlenmesi için ise PMA (20 ng/ml) ile 15 dakika uyarılmıştır. STAT3 ve IL-10 seviyeleri akan hücre ölçer ile araştırılmış, sonuçlar istatiksel olarak değerlendirilmiştir. Sağlıklılarla karşılaştırıldığında lenfosit popülasyonunda elde edilen IL-10+, IL-10+CD19+, STAT3+CD19+ hücre oranları arttı. KLL hastaların CD19+ B hücrelerinde IL-10+ hücre oranlarının artmış olduğu görüldü. Benzer şekilde CD5+CD19+ hücrelerinde IL-10 seviyeleri yüksek bulunurken, STAT3 düzeyleri daha düşük bulundu.
Bu sonuçlar bize, KLL hücrelerindeki IL-10 ve STAT3 ekspresyon düzeylerinin, normal B lenfositlerinden farklı olduğunu ve KLL'nin biyolojisinde bir role sahip olabileceği düşüncesini sağladı. Sunulan verilerin, KLL hücrelerinin Breg hücrelerine benzerliğini inceleyen çalışmalara katkıda bulunacağına inanılmaktadır.

Anahtar Kelimeler: KLL, IL-10, STAT3

Abstract:
Chronic Lymphocytic Leukaemia (CLL) is characterized by the accumulation of CD5+CD19+ B cells in the bone marrow and peripheral blood. Recent studies indicated that expression of IL-10, AID and mir-155 which are regulated by STAT3 are increased in CLL patients. CD5+CD19+ regulator B (Breg) cells secrete IL-10 and suppress the immune system. While the CLL cells show similar immunophenotypic properties to Breg cells, they are also thought to be functionally similar. In this study, STAT3 and IL-10 levels of CLL patients were investigated. Peripheral blood samples obtained from patients (n: 24) and healthy subjects (n: 14). Peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) were isolated by Ficoll gradient method. PBMCs (1x106 cell/ml) were cultured for 48 hours in the presence and absence of CpG (1 ug/ml) for IL-10 expression and for STAT3 expression cultured with and without PMA (20 ng/ml) for 15 min. IL-10 and STAT3 expression were analysed using anti-CD5, anti-CD19, anti-CD38, anti-STAT3 and anti-IL-10 monoclonal antibodies by flow cytometry. Compared to healthy subjects, in lymphocyte population increased IL-10+, IL-10+CD19+, STAT3+CD19+ were obtained. CD19+ B cells of CLL patients showed increased IL-10+. Similarly increased IL-10 levels were found in CD5+CD19+ cells, whereas lower STAT3 levels were found.  These results made us thought that the levels of IL-10 and STAT3 expression in CLL B cells is clearly different from normal B lymphocytes might have a role in the biology of CLL. It is believed that the presented data will contribute to the studies that scrutinize the similarity of CLL cells to Breg cells.


Keyword: CLL, IL-10, STAT3