Kolon kanseri hücre hattında (Caco-2) irisinin antiproliferatif ve antikanser etkileri
Antiproliferative and anticancer effects of irisin in the colon cancer cell line (Caco-2)
Yazar: ELİF ZEYNEP ÖZTÜRK
Danışman: PROF. DR. EBUBEKİR BAKAN
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı / Tıbbi Biyokimya Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Antineoplastik ajanlar = Antineoplastic agents ; Hücre dizisi = Cell line ; Hücre çoğalması = Cell proliferation ; Kolon hastalıkları = Colonic diseases ; Kolon neoplazmları = Colonic neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; İrisin = Irisin

Özet:
Egzersizle salınan bir miyokin olan irisinin, glukoz metabolizması üzerinde
olumlu etkileri vardır. Kanser dahil olmak üzere birçok hastalıkta irisin artmasının olumlu
etkileri olduğu gösterilmiştir. Çalışmamızın amacı Caco-2 Kolon Kanseri hücre hattına
çeşitli konsantrasyonlarda irisin uygulanarak, irisinin antiproliferatif etkilesinin yanı sıra
apoptotik ve antiinflamatuvar etkisinin araştırılmasıdır. Bu çalışma Caco-2 kolon kanseri hücre hattında in vitro olarak
yürütüldü. Hücreler irisinle 48 saat inkübe edildikten sonra CVDK-8 sitotoksisite kitiyle
canlılık ölçümü spektrofotometrik yöntemler kullanılarak yapıldı. TNF-alfa, NF-kB,
Kaspaz- 3, IL-6 seviyeleri ELISA metoduyla spektrofotometrik olarak ölçüldü.İrisin uygulanan ve uygulanmayan kontrol grubunda canlılık değerleri 5
nM grubunda istatistiksel olarak anlamlıydı (p<0.05), 10,50,100 nM gruplarında istatistiksel
olarak anlamlı değildi (p>0.05).TNF-alfa düzeyleri (5,10,50,100 nM) gruplarda istatistiksel
olarak farklı değildi (p>0.05). IL-6 değerlerinde, 100 nM irisin uygulanan grup ile kontrol
grubu arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlı bulundu (p<0.05) ve 100 nM irisin
grubunda kontrol grubuna göre yüksekti. Kaspaz-3 düzeylerinde 100 nM irisin uygulanan
grup ile kontrol grubu arasındaki fark ve 10 nM ile 100 nM irisin uygulanan grup arasındaki
fark istatistiksel olarak anlamlı bulundu (p<0.05).
İrisin in vitro ortamda kolon kanserinde direkt antikanser etki
göstermemektedir. Kaspaz-3 seviyesi 100 nM olan grupta yüksek çıkmıştır, bu da apoptozu
indüklediğini göstermektedir, NF-kB düzeyleri de yüksek bulunmuştur. Bu sonuçta, irisinin
antikanser etkinliğinin NF-kB tarafından azaltıldığını göstermektedir. Ayrıca IL-6 düzeyleri
100 nM olan grupta yüksek çıkması indirekt karsinogenezi desteklediğini göstermektedir.
Bunun yanısıra 10 nM ile 100 nM irisin uygulanan gruplar arasında Kaspaz-3 ve NF-kB
düzeyleri yüksek bulunmuştur. Kaspaz-3 ve NF-kB parametrelerinin irisinin dozuna bağlı
olduğu gösterilmiştir. Elde edilen bulgular in vitro ortamda irisinin kanser tedavisinde etkin
olabileceğini desteklemektedir, bu konuda ileri araştırmalar yapılmasına ihtiyaç vardır.

Abstract:
Irisin, an exercise-released myokine, has positive effects on glucose
metabolism. Increased irisin levels have been shown to have positive effects in many
diseases, including cancer. The aim of our study is to investigate the antiproliferative
effect of irisin as well as its apoptotic and anti-inflammatory effects by applying irisin at
various concentrations to the Caco-2 Colon Cancer cell line. This study was conducted in vitro on the Caco-2 colon
cancer cell line. After the cells were incubated with irisin for 48 hours, viability was
measured with the CVDK-8 cytotoxicity kit using spectorometric methods. TNF-alpha,
NF-kB, caspase 3, and IL-6 levels were measured spectrophotometrically by ELISA
method.
Viability values in the control group with and without irisin were
statistically significant in the 5 nM group (p<0.05), but not in the 10,50,100 nM groups
(p>0.05). TNF-alpha levels (5,10,50,100 nM) were statistically significant in the
groups. was not different (p>0.05). The difference in IL-6 values between the 100 nM
irisin applied group and the control group was statistically significant (p<0.05), and it
was higher in the 100 nM irisin group compared to the control group. The difference in
caspase-3 levels between the 100 nM irisin applied group and the control group, and the
difference between 10 nM and 100 nM irisin applied groups were statistically
significant (p<0.05).
Irisin does not show a direct anticancer effect in colon cancer in
vitro. Caspase-3 level was higher in the 100 nM group, indicating that it induces
apoptosis, and NF-kB levels were also found to be high. This result indicates that the
anticancer activity of irisin is reduced by NF-kB. In addition, the fact that IL-6 levels
were higher in the group with 100 nM indicates that it supports indirect carcinogenesis.
In addition, Caspase-3 and NF-kB levels were found to be high between the groups
treated with 10 nM and 100 nM irisin. Caspase-3 and NF-kB parameters have been
shown to be dose dependent. The findings support that irisin may be effective in cancer
treatment in vitro, further research is needed on this subject.