Homosistein uygulanan sıçan vasküler düz kas hücrelerinde anjiyotensin reseptörlerinin hücre proliferasyonuna etkisi
Effect of angiotensin receptors on cell proliferation in homocysteine-treated rat vascular smooth muscle cells
Yazar: ZEHRA GÜL YAŞAR
Danışman: PROF. DR. AYŞE DOĞAN
Çukurova Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2018
Konu: Fizyoloji = Physiology
Dizin: Anjiyotensin II = Angiotensin II ; Anjiyotensinler = Angiotensins ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Homosistein = Homocysteine ; Hücre çoğalması = Cell proliferation ; Kan damarları = Blood vessels ; Kas-düz-vasküler = Muscle-smooth-vascular ; Reseptörler-anjiotensin = Receptors-angiotensin ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Vasküler düz kas hücre (VDKH) proliferasyonunun, arteriyal duvarın kalınlaşmasına neden olarak miyokard enfarktüsü,  abdominal aort anevrizması ve ateroskleroz gibi kardiyovasküler patolojilerin gelişmesinde önemli olduğu kabul edilmektedir. Diğer bir risk faktörünün de yükselmiş plazma homosistein (Hcy) düzeyi olduğu ileri sürülmektedir. Hiperhomosisteinin (HHcy) neden olduğu bu patolojiler ile renin anjiyotensin sistemi (RAS) arasında bir etkileşim olduğu düşünülmekte ancak bu etkileşimin mekanizması bilinmemektedir. Bu nedenle, Hcy ile anjiyotensin II (Ang II) tip 1 reseptörü (AGTR1) ve tip 2 reseptörü (AGTR2)  arasındaki ilişkinin araştırılması, kardiyovasküler hastalıkların fizyopatolojisinin açıklanmasına katkı sağlayacaktır.
Bu amaçla, sıçan torasik aortasından kültüre edilen VDKH'lere Hcy, Hcy+AGTR1 antagonisti (olmesartan), Hcy+AGTR2 agonisti (CGP42112A) ve Hcy+AGTR1 antagonisti+AGTR2 agonisti uygulaması yapılarak 24 saat sonunda MTT ile hücre proliferasyonu değerlendirildi. Bu uygulamaların yapıldığı gruplarda protein izolasyonu sonrası Western blot ile AGTR1 ve AGTR2 protein ekspresyonları, RT-PCR ile de AGTR1 ve AGTR2 mRNA ekspresyonları yapıldı. 
 Hcy doza bağlı olarak VDKH'lerde proliferasyonunu artırdı(p<0,01); AGTR1 antagonisti ve AGTR2 agonisti ise bu proliferasyonu azalttı(p<0.005). Hcy, VDKH'de AGTR1 proteininin ve mRNA'sının ekspresyonunu artırırken, Hcy+AGTR1 antagonist uygulaması ise protein ve mRNA ekspresyonunu azalttı. Bununla birlikte Hcy, AGTR2 proteininin ve mRNA'sının ekspresyonunu azaltırken, Hcy+AGTR2 agonisti uygulaması bu ekspresyonları artırdı. 
Sonuç olarak Hcy, AGTR1 ve AGTR2'ler üzerinden VDKH proliferasyonu artırılabilir; bu proliferasyon AGTR1 antagonist/AGTR2 agonist uygulaması ile azaltılabilir.


Anahtar sözcükler: Anjiyotensin II tip 1 reseptörü, anjiyoteinsin II tip 2 reseptörü,
homosistein, vasküler düz kas hücresi.

Abstract:
Vascular smooth muscle cell (VSMC) proliferation is accepted to be important in the development of thickness of arterial wall and then causing miyocardial infrarction, abdominal aortic aneurysm and atherosclerosis. Another risk factor is asserted that to be the elevated plasma homocysteine (Hcy) level. It is thought that there is an interaction between these pathologies, which are caused by hyperhomocysteinemia (HHcy), and the renin angiotensin system (RAS), but the mechanism of this interaction is unknown. Therefore, the investigation of the relationship between Hcy and angiotensin II (Ang II) type 1 receptor (AGTR1) and type 2 receptor (AGTR2) be able to contribute to the explanation of the pathophysiology of cardiovascular diseases. 
For this purpose, Hcy, Hcy + AGTR1 antagonist (olmesartan), Hcy + AGTR2 agonist (CGP42112A) and Hcy + AGTR1 antagonist + AGTR2 agonist were treated to VSMC cultured from rat thoracic aorta and cell proliferation was evaluated by MTT after 24 hours. In these groups, after protein isolation, AGTR1 and AGTR2 protein expressions were determined by Western blotting, and level of treated AGTR1 and AGTR2 mRNA expressions were detected by RT-PCR.
Hcy increased the proliferation of VSMC depending on the dose (p <0.01); AGTR1 antagonist and AGTR2 agonist reduced this proliferation (p <0.005).While Hcy increased the expression of AGTR1 protein and mRNA in VSMC, Hcy + AGTR1 antagonist treatment reduced protein and mRNA expression. However, whereas Hcy reduced AGTR2 protein and mRNA expression, Hcy + AGTR2 agonist treatment increased these expressions.
As a result, Hcy can be increased VSMC proliferation through AGTR1 and AGTR2; this proliferation can be reduced by the treatment of the AGTR1 antagonist / AGTR2 agonist.


Key words: Angiotensin II type 1 receptor, angiotensin II type 2 receptor,
homocysteine, vascular smooth muscle cell.