Kızgınlık gösteren ineklerin serumunda bulunan östradiol-17beta düzeylerinin inek oositlerinin in vitro olgunlaşma ve döllenmesine etkisi
The effects of estradiol-17beta levels in estrous cow sera on in vitro maturation and fertilization of cow oocytes
Yazar: NUMAN AKYOL
Danışman: PROF.DR. NESRİN SULU
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2004
Konu: Fizyoloji = Physiology ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine

Özet:
Kızgınlık Gösteren İneklerin Serumunda Bulunan Östradiol -170 Düzeylerinin İnek Oositlerinin İn vitro Olgunlaşma ve Döllenmesine Etkisi Bu çalışmanın amacı, östradiol 17-B düzeyleri saptanan östrustaki sığır serumlarının (ECS); mezbahadan toplanan inek oositlerinin maturasyon, fertilizasyon ve morula-blastosit oluşumuna etkilerinin, FCS ile karşılaştırılmasıdır. Serum kaynağı olarak Lalahan Hayvancılık Merkez Araştırma Enstitüsünde barındırılan, 3 Siyah Alaca düveden östruslarının ilk 3 saati içerisinde alınan kanların serumları ile stok serumların içerdikleri östradiol-17B düzeyleri. RIA yöntemiyle belirlendi. Ovaryumlardan aspirasyon ve ovaryum dilimlenmesi teknikleri yardımıyla oositler elde edildi. Oositlerin, morfolojik kalite sınıflamasına göre 1 ve 2. kalite olanları seçilerek kullanıldı. Stok serum, % 5. % 10 ve % 20 oranlarında olacak şekilde maturasyon ortamlarına ilave edildi. Kontrol grubunda, aynı oranlarda FCS kullanıldı. Çalışma bütün serum katılım oranlan için tekrarlandı. Veriler varyans analizi kullanılarak test edildi. Çalışma sonucunda düvelerin serumlarında sırasıyla; Düvel =18.4 pg/ml. Düve2=20.1 pg/ml, Düve3=21.8 pg/ml; stok serum bileşiminde ise 19.9 pg/ml östradiol 17-(3 (E2) ölçüldü. Fötal Buzağı Serumu içerisinde. 34.8 pg/ml östradiol-178 düzeyi tespit edildi, östrustaki inek serumunun % 5, % 10 ve % 20 katılım düzeylerine göre sırasıyla, 0.78±0.010a, 0.84±0.009b, 0.86±0.012b maturasyon oranı elde edildi (p<0.01). Kontrol grubunda ise sırasıyla, 0.77±0.010a, 0.82±0.008a, 0.85±0.010b maturasyon (p<0.01); 0.51±0.020a, 0.51±0.023a, 0.59±0.017b fertilizasyon (p<0.01) oranına ulaşıldı. Serumların ortalama değerleri açısından: yalnızca % 20 serum katılım düzeyinde, morula-blastosit olma yönüyle önemli düzeyde fark saptanmış ve FCS, ECS'ye göre üstün olduğu görülmüştür (p<0.05). Sonuç olarak, östrustaki düvelerden elde edilen serumların (ECS) inek oositlerinin in vitro maturasyonunda ekonomik bir şekilde kullanılabileceği, % 10 ve % 20 düzeylerinde katılan ECS ve FCS'nin % 5'e göre daha yüksek maturasyon ve fertilizasyon sonucu verdiği, FCS'nin morula-blastosit elde etmede ECS'ye göre daha üstün olduğu görülmüştür. Anahtar sözcükler: In vitro, Fertilizasyon, Oosit, Serum, ECS, İnek.

Abstract:
The Effects of Estradiol-1 7p Levels in Estrous Cow Sera on In vitro Maturation and Fertilization of Cow Oocytes The aim of this study was to compare influence of Estradiol-17p levels measured in estrous heifers sera (ECS) on oocytes from slaughtered in vitro maturation, fertilization and morulae-blastocyst development with FCS. Three Holstein Fresian heifers, housed in Lalahan Central Livestock Research Institute were used for source of the sera. Blood was collected in the first 3 hours of the estrous from heifers and sera was decomposed from the blood then sera were mixed and stock serum was obtained. Level of estradiol-17p in all the sera was analized by Radio Immuno Assay. Ooocytes have been collected by aspiration and ovary mincing methods. Oocytes were selected and used as 1 and 2. quality grade morphologically. Stock serum was added in the maturation media 5 %, 10 % and 20 %. The same proportions of FCS were added in the control group. The process was repeated for each group. Data were tested by ANOVA. Estradiol-17(3 (E2) levels in the heifers blood sample were found 18.4 pg/ml, 20.1 pg/ml, 21.8 pg/ml and 19.9 pg/ml for Heiferl, Heifer2 and Heifer3 and stock sera respectively. Estradiol 17-p was also measured 34.8 pg/ml in the FCS. For adding 5 %, 10 % and 20 % proportions of ECS stock serum to maturation medium, maturation persentages were found 0.78±0.010a, 0.84±0.009b, 0.86±0.012b respectively (p<0.01). The maturation results of FCS in the control group were found 0.77±0.010a, 0.82±0.008b, 0.85±0.010b for 5 %, 10 % and 20 % sera levels respectively (p<0.01). The fertilization results of FCS in the control group were found 0.51±0.020a, 0.51±0.023a, 0.59±0.017b for the same sera levels respectively (p<0.01). Between two serum group averages were compared and FCS superior effected for developing morulae-blastocyst stage according to ECS their level of 20 % serum addition (p<0.05). As a result, estrous cow serum can be used economically for in vitro cow oocytes maturation. When ECS and FCS 10 % and 20 % were added in the maturation media, more better maturation and fertilization results were found according to 5 % ECS and FCS. FCS is superior than ECS to development morulae- blastocyst stage. Key words: : In vitro, Fertilization, Oocyte, Serum, ECS, Cow.