Deneysel donma yanığı modelinde kök hücre etkilerinin araştırılması
Research of stem cell effects on an experimental frostbite model
Yazar: ÇAĞATAY ÖNER
Danışman: PROF. DR. SEMRA KARŞIDAĞ ; DOÇ. DR. FATİH IRMAK
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / İstanbul Şişli Hamidiye Etfal Eğitim ve Araştırma Hastanesi / Plastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2020
Konu: Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery
Dizin: Adipoz doku = Adipose tissue ; Donma = Freezing ; Kök hücreler = Stem cells ; Yanıklar = Burns ; Yara iyileşmesi = Wound healing

Özet:
AMAÇ
	Donma yanığı, güncel tedavi yöntemlerine rağmen yol açabildiği fonksiyonel morbiditelerden dolayı kötü prognozlu bir yaralanma tipidir. Stromal vasküler fraksiyon, birçok deneysel ve klinik çalışmada yara iyileşmesi ve vaskülogenezi arttırıcı özelliği kanıtlanmış, otolog bir bileşendir. Çalışmamız deneysel donma yanığı iyileşmesinde stromal vasküler fraksiyon uygulamasının etkilerini ortaya koymayı amaçladı.

GEREÇ VE YÖNTEMLER
	Çalışmada toplam 25 sıçan kullanıldı. 5 sıçan bilateral inguinal yağ dokusundan stromal vasküler fraksiyon hazırlanması için kullanılıp, sakrifiye edildi. 20 adet sıçan 10'ar adetlik 2 gruba bölünerek, her sıçanın sırt bölgesinde 18 mm çapında likit nitrojenle soğutulmuş (-196 derece Celsius) yuvarlak prob kullanılarak donma yanığı oluşturuldu. Deney grubundaki donma yanığı oluşturulan alanlara subkutan olarak daha önce hazırlanmış stromal vasküler fraksiyon enjekte edildi. Kontrol grubundaki aynı alanlara, stromal vasküler fraksiyon ile aynı miktarda fosfat tamponlu tuz çözeltisi enjekte edildi. 5. ve 14. günlerde histopatolojik ve immünohistokimyasal değerlendirmeler için biyopsiler alındı. Makroskopik değerlendirme için aynı günlerde yara alanı fotoğrafları çekildi. 14. gün her 2 gruptaki doku perfüzyonu indosiyanin yeşili anjiyografi (SPY sistemi) ile değerlendirildi.

BULGULAR
	Deney ve kontrol grubu ortalama doku perfüzyon artışı sırası ile %373.3 (+/-32.1) ve %123.8 (+/-16.3) olarak hesaplandı (p<0.001). Makroskopik yara küçülme oranı deney ve kontrol grubunda sırası ile 5. gün %25.5 (+/-19.1) ve %18.0 (+/-5.9), 14. gün %78.2 (+/-9.2) ve %57.3 (+/-16.7) olarak hesaplandı (p=0.007; p=0.003). Deney grubunda kontrol grubuna göre akut enflamasyon ve fibrozis anlamlı olarak düşük (14. gün için sırası ile p=0.004 ve p=0.054), granülasyon dokusu miktarı, reepitelizasyon ve neovaskülarizasyon anlamlı yüksek izlendi (14. gün için sırası ile p=0.006, p=0.010 ve p=0.021).

SONUÇ
	Stromal vasküler fraksiyon donma yanığı iyileşmesini; doku perfüzyonu, neovaskülarizasyon ve reepitelizasyonu arttırıp, akut enflamasyon ve fibrozisi de modüle ederek arttırmaktadır.

Anahtar kelimeler: adipöz kaynaklı kök hücre, donma yanığı, stromal vasküler fraksiyon, yanık iyileşmesi.

Abstract:
BACKGROUND
	Despite current treatment modalities, frostbite is still a bad prognosis injury which may cause functional morbidities. Several experimental and clinical studies demonstrated that stromal vascular fraction is an autologous mixture, improving wound healing and vasculogenesis. Our study aims to show beneficial effects of stromal vascular fraction on experimental frostbite healing.

METHODS
	5 rats were used to harvest stromal vascular fraction after excision of their inguinal fat pads, and sacrificed. 20 rats were divided to 2 groups of 10. A frostbite injury was created on each rat using a cryoprobe of 18 mm diameter frozen with liquid nitrogen (-196 degrees Celcius). SVF group received stromal vascular fraction whereas control group received phosphate-buffered saline. All injections were performed subcutaneously within the frostbite injury area. Biopsies were performed on 5th and 14th days for histopathologic and immunochemical evaluations. Photographs were taken on same days for macroscopic analysis. Both groups' tissue perfusion rate were assessed on 14th day with indocyanine green angiography (SPY system).

RESULTS
	SVF and control groups' mean tissue perfusion increase were respectively 373.3% (+/-32.1) and 123.8% (+/-16.3) (p<0.001). Macroscopic wound reduction rates of SVF and control groups were respectively 25.5% (+/-19.1) and 18.0% (+/-5.9) on day 5, 78.2% (+/-9.2) and 57.3% (+/-16.7) on day 14 (p=0.007; p=0.003). Acute inflammation and fibrosis gradient were significantly decreased on SVF group compared to control group (respectively p=0.004 and p=0.054 for day 14), while granulation tissue quantity, reepithelialization score and neovascularization were significantly increased (respectively p=0.006, p=0.010 and p=0.021 for day 14). 
CONCLUSION
	Stromal vascular fraction increases frostbite wound healing by increasing tissue perfusion rate, neovascularization and reepithelialization, and modulating acute inflammation and fibrosis.

Keywords: adipose derived stem cell, burn healing, frostbite, stromal vascular fraction.