Obezitenin insan sperm fosfolipaz C zeta aktivasyonu üzerine etkisi
Effect of obesity on human sperm phospholipase C zeta activation
Yazar: SERPİL SUDE YERLİKAYA
Danışman: DOÇ. DR. NAZLI ÇİL
Pamukkale Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı / Histoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2024
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology

Özet:
Obezite erkeklerde düşük doğurganlık potansiyeli ile ilişkilidir. Artan visseral yağlanma, steroidogenezi ve spermatogenezi lokal ve periferik etkiler. Ca2+ salınımlarının,Fosfolipaz C-Zeta(PLC-Zeta) olarak adlandırılan sperme özgü bir PLC izoformunun oosit sitoplazmasına girişine izin veren, sperm oosit membran füzyonundan sonra tetiklendiği bilinmektedir. Obezite ve sperm parametreleri, obezite ve sperm DNA hasarı daha önceki çalışmalarda gösterilmiştir. Amacımız obez ve obez olmayan erkeklerde sperm parametreleriyle birlikte sperm PLC-Zeta ekspresyon değişimini incelemektir.
              Pamukkale Üniversitesi Hastanesi Androloji Laboratuvarına başvuran hastalardan onay alındıktan sonra hastaların demografik özellikleri sorgulandı. Çalışmaya dahil edilen hastalar iki gruba ayrıldı:  Kontrol grubu: Obez olmayan Vücut Kitle İndeksi (BMI)<30 olan spermiogram analizi veren hastalar (n: 49); Obez Grubu:BMI≥30 olan spermiogram analizi veren hastalar (n=18)  olarak belirlendi. Grupların semen analizleri yapıldı. Semen örnekleri, 2021 Dünya Sağlık Örgütü (WHO) kriterlerine göre değerlendirildi. PLC-Zeta ekspresyonu için RT-PCR analizi ve immünohistokimyasal olarak histopatolojik değerlendirme yapıldı.
              Kontrol grubunun testosteron düzeyleri obez gruba göre istatistiksel olarak daha fazla olduğu saptandı (sırasıyla 4,8±1,28; 3,6 ± 1,61) (p<0,05). Prolaktin düzeyleri Kontrol grubunda 12,6±7,2 bulunurken obez grubunda bu değerin 17,15±9,28 olarak yükseldiği görüldü ve istatistiksel olarak anlamlıydı (p=0,031). Semen analizlerinde gruplar arasında anlamlı bir fark saptanmadı. PLC-Zeta ekspresyonunun obez hastalarda kontrol grubuna göre 1,69 kat arttığı belirlendi. Bu artısın zıttı olarak immünohistokimyasal boyamada obez hastalarda ekspresyonunun düştüğü görüldü.
            Sonuçta çalışmamız obezitenin mRNA ekpresyon düzeyinde değil, protein sentezinde, translasyon aşamasında PLC-Zeta ekspresyonunda bozukluğa neden olabileceğini gösterdi.  Fakat net bilgileri elde edebilmek için hasta sayısının arttırıldığı daha ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.

Abstract:
Obesity is associated with low fertility potential in men. Increased visceral adiposity affects steroidogenesis and spermatogenesis locally and peripherally. Ca2+ oscillations are known to be triggered after sperm oocyte membrane fusion, which allows entry of a sperm-specific PLC isoform, termed PLC-Zeta, into the oocyte cytoplasm. Obesity and sperm parameters, and obesity and sperm DNA damage have been shown in previous studies. Our aim was to examine sperm PLC-Zeta expression changes in obese and non-obese men along with sperm parameters.
After obtaining consent from the patients who came to Pamukkale University Hospital Andrology Laboratory, the demographic characteristics of the patients were questioned. The patients included in the study were divided into two groups:  Control group: Non-obese patients (BMI<30) who gave spermiogram analysis (n: 49) and the Obese Patient Group (BMI≥30) n=18). Semen analysis of the groups was performed. Semen samples were evaluated according to 2021 World Health Organization (WHO) criteria. rt-PCR analysis for PLC-Zeta expression and histopathologic evaluation by immunohistochemistry were performed.
Testosterone levels in the control group were statistically higher than in the obese group (4.8±1.28; 3.6±1.61, respectively) (p<0.05). Prolactin levels were 12.6±7.2 in the control group and 17.15±9.28 in the obese group, which was statistically significant (p=0.031). No significant difference was detected between the groups in semen analysis. PCR determined that PLC-Zeta expression increased 1.69 times in obese patients compared to the control group. This increase was opposite of our findings by immunohistochemical staining which showed a decrease of PLC-Zeta in obese patients.
In conclusion, our study showed that obesity may cause a defect in PLC-Zeta expression at the protein synthesis and translation stage, but not at the mRNA expression level.  However, further studies with an increased number of patients are needed to obtain clear information