Normal erkek ve varikosel hasta gruplarında sperm DNA fragmantasyonu, sperm kromatin kondensasyonu ve sperm mitokondriyal membran potansiyelinin incelenmesi
Investigation of sperm DNA fragmantation, sperm chromatin condensation and sperm mitocondrial membrane potential in normal male and varicocele patient groups
Yazar: BAHAR SARIKAYA
Danışman: PROF. DR. TÜLAY İREZ
Biruni Üniversitesi / Lisansüstü Eğitim Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı / Klinik Embriyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: DNA hasarı = DNA damage ; Kromatin = Chromatin ; Mitokondriler = Mitochondria ; Propidyum = Propidium ; Rodamin = Rhodamine ; Sperm = Spermatozoa ; Varikosel = Varicocele

Özet:
Varikosel olgularında testis hasarı ile ilgili mekanizmalar halen tartışmalıdır. Sperm DNA hasarlarının infertilitenin nedeni olduğu pek çok çalışma ile gösterilmiştir. Bu çalışmada varikosel olgularında sperm DNA fragmantasyonunun kromatin kondansasyonu, sperm apoptozu ve sperm mitokondriyal membran potansiyelinin incelenmesi amaçlanmıştır.
Bu çalışmada; Biruni Üniversite Hastanesi Üroloji polikliniğine başvuran hastalardan semen analizi normal (n:22) grup ve klinik varikosel (n:22) hasta gruplarında WHO kriterlerine uygun standart semen analizi uygulandı. Sperm maturasyonu asidik anilin blue (mavisi) boyama yöntemi ile ve CMA3 floresan boya yöntemi ile, sperm DNA fragmantasyonu Akridin oranj floresan boyama yöntemi ile ve rhodamine123/propidyum iyodür boyama yöntem ile sperm mitokondri membran potansiyeli ve apoptotik spermler değerlendirilmiştir. Değerlendirme sonuçları gruplar arasında karşılaştırılmıştır. 
Çalışmamızda varikosel olguları normal olgular ile kıyaslandığında,  sperm morfolojisi ve sperm motilitesinin istatistiki olarak anlamlı bir azalma gösterdiği görülmüştür (p<0,0001,). Sperm boyun anomalilerinin varikosel olgularında daha yüksek olduğu görülmüştür (p<0,0001). Sperm immaturasyonunun ve DNA fragmentasyonunun varikosel olgularında daha yüksek olduğu görülmüştür (p<0,0001). Rhodamine 123 ile ölçülen sperm mitokondri membran potansiyeli ve apoptotik sperm oranının (propidyum iyodür ile ölçülen) varikosel olgularında yüksek olduğu gösterilmiştir (p<0,0001). Varikoselin sperm maturasyonu ve mitokondri fizyolojisi üzerine negatif etkileri görülmüştür (p<0,0001). Varikosel olgularında yüksek oranda apoptotik sperm bulunmuştur (p<0,0001). 
Sonuç olarak testis venlerinin dilatasyonu ve testis temperatürünün yükselmesi ile karakterize olan varikosel ; sperm maturasyonu , sperm DNA'sını  ve mitokondriyel aktiviteyi olumsuz etkilemiştir.

Abstract:
The mechanisms of testicular damage in varicocele cases are still controversial. Many studies have shown that sperm DNA damage is the cause of infertility. In this study, we aimed to investigate the chromatin condensation, sperm apoptosis and sperm mitochondrial membrane potential of sperm DNA fragmentation in varicocele cases. In this study; Standard semen analysis was performed in patients who applied to Biruni University Hospital Urology Outpatient Clinic in normal (n: 22) group and clinical varicocele (n: 22) group according to WHO criteria. Sperm maturation was evaluated by acidic aniline blue (blue) staining method and CMA3 fluorescent dye method, sperm DNA fragmentation by acridine orange fluorescent staining method and rhodamine123 / propidium iodide staining method and sperm mitochondria membrane potential and apoptotic sperms were evaluated.  Evaluation results were compared between groups.In our study, it was observed that sperm morphology and sperm motility showed a statistically significant decrease when varicocele cases were compared with normal cases (p <0.0001,). Sperm neck anomalies were higher in varicocele cases (p <0.0001). Sperm immaturation and DNA fragmentation were higher in varicocele cases (p <0.0001). Sperm mitochondria membrane potential and apoptotic sperm ratio (measured by propidium iodide) measured by Rhodamine 123 was shown to be high in varicocele cases (p <0.0001). Varicocele had negative effects on sperm maturation and mitochondrial physiology (p <0.0001). A high rate of apoptotic sperm was found in varicocele cases (p <0.0001). As a result, varicocele characterized by dilatation of testicular veins and elevated testicular temperature; sperm maturation  sperm DNA and mitochondrial activity have been affected negatively.