Amyotrofik lateral skleroz modeli farelerde 7,8-Dihidroksiflavon'un alt ve üst motor nöronlar üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of 7,8-dihydroxyflavone on lower and upper motor neurons in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis
Yazar: ORHAN TANSEL KORKMAZ
Danışman: PROF. DR. VAROL ŞAHİNTÜRK
Eskişehir Osmangazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Disiplinlerarası Sinir Bilimleri Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2023
Konu: Fizyopatoloji = Physiopathology ; Moleküler Tıp = Molecular Medicine ; Nöroloji = Neurology
Dizin: Amyotrofik lateral skleroz = Amyotrophic lateral sclerosis

Özet:
Başlık: Amyotrofik lateral skleroz modeli farelerde 7,8-Dihidroksiflavon'un
alt ve üst motor nöronlar üzerine etkilerinin araştırılması
Amaç: Bu tez çalışmasında kronik 7,8-Dihidroksiflavon (DHF)
uygulamasının SOD1G93A ALS modeli farelerin sağkalım, alt ve üst motor
nöronlara etkilerinin araştırılması amaçlanmaktadır.
Yöntem: Bu çalışmada sadece erkek, toplam 60 adet SOD1G93A (35
transgenik) ve yabanıl tip (WT) (25 WT) fare kullanılmıştır. DHF gruplarına haftada
üç gün 5mg/kg (i.p.) DHF, diğer gruplara aynı hacimde SF verilmiştir. DHF'nin
sağkalıma etkilerinin araştırılması için P30'dan patolojinin terminal dönemine kadar
(P120+?) 2 grupta (ALS, ALS+DHF, n=15) SOD1G93A farelerde vücut ağırlığı
ölçümü ve motor fonksiyon testi gerçekleştirildi. Alt motor nörona etkilerini
araştırmak 3 grupta (WT kontrol, ALS, ALS+DHF, n=10) P30'dan P105'kadar DHF
uygulandı ve sakrifikasyon sonrası farelerin için M. spinalis lomber kısmında
moleküler, biyokimyasal ve apoptotik parametreler araştırıldı. Aynı grupların üst
motor nöronlarına DHF'nin etkilerini araştırmak için ise motor kortikal alanlarında
dentritik diken ve motor nöron yoğunluğu stereolojik olarak araştırıldı.
Bulgular: SOD1G93A farelere DHF uygulaması motor performansı artırdı,
vücut ağırlığının azalmasında latent bir döneme neden oldu ve sağkalımı anlamlı
derecede uzattı. Alt motor nöronlarda katalazı artırarak serbest radikalleri anlamlı
derecede baskılarken apoptotik parametrelere (kaspaz-3, sitokrom-C) anlamlı bir etki
göstermedi. Yine alt motor nöronda büyüme faktörleri (BDNF, FGF2, IGF1, GDNF)
ekspresyon düzeylerini anlamlı derecede artırdı, inflamatuar moleküllerin (IL-6, IL10, TNF-α, MCPT-1, NF-κB, CD11b) ve GFAP ekspresyonlarını anlamlı derecede
baskıladı, GLT1 ve GFAP ekspresyon düzeylerini anlamlı derecede artırdı. Üst
motor nöronlarda ise dentritik diken yoğunluğunu anlamlı derecede artırırken motor
nöron sayısında anlamlı bir değişikliğe neden olmamıştır.
Sonuç: SOD1G93A farelere DHF uygulaması sağkalımı artırmış ve bunu
bizim araştırdığımız parametreler bağlamında oksidatif stresi ve inflamasyonu
baskılayıp motor nöron bağlantıları ve sağkalımını indükleyerek gerçekleştirmiştir.
Anahtar kelimeler: Amiyotrofik lateral skleroz (ALS), SOD1G93A fare,
7,8-dihidroksiflavon, alt motor nöron, üst motor nöron

Abstract:
Title: Investigation of the Effects of 7,8-dihydroxyflavone on lower and upper motor
neurons in a mouse model of amyotrophic lateral sclerosis
Objective: The purpose of this study is to investigate the effects of chronic
administration of 7,8-dihydroxyflavone (DHF) on survival and lower and upper
motor neurons in SOD1G93A ALS model mice.
Methods: Only male mice were used for this study, a total of sixty mice, including
35 SOD1G93A transgenic mice and 25 wild-type mice (WT). The DHF groups
received 5mg/kg (i.p.) DHF three times a week, while the other groups received the
same amount of vehicle (SF). To investigate the effects of DHF on survival, body
weight measurements and motor function tests were performed in two groups (ALS,
ALS +DHF, N=15) of SOD1G93A mice from P30 to end stage pathology (P120+?).
To investigate the effects on lower motor neurons in three groups (WT control, ALS,
ALS +DHF, n=10) from P30 to P105, molecular, biochemical, and apoptotic
parameters were examined in the lumbar region of the spinal cord after sacrifice. The
effects of DHF on upper motor neurons in the same groups were assessed by
stereological examination of dendritic spine and density of motor neurons in motor
cortical areas.
Results: Administration of DHF to SOD1G93A mice improved motor performance,
induced a latent period of weight loss, and significantly prolonged survival. It
significantly suppressed free radicals by increasing catalase activity in lower motor
neurons but showed no significant effect on apoptotic parameters (caspase-3,
cytochrome-C). In addition, DHF significantly increased the expression of growth
factors (BDNF, FGF2, IGF1, GDNF) and suppressed the expression of inflammatory
molecules (IL -6, IL -10, TNF-α, MCPT-1, NFκB, CD11b) and GFAP in lower
motor neurons, whereas it significantly increased the expression of GLT1 and
GFAP. In upper motor neurons, DHF significantly increased dendritic spine density
but caused no significant change in the number of motor neurons.
Conclusion: Administration of DHF to SOD1G93A mice improved survival and
achieved this by suppressing oxidative stress and inflammation, improving
connections between motoneurons, and promoting survival within the parameters we
examined.Keywords: Amyotrophic lateral sclerosis (ALS), SOD1G93A mouse, 7,8-
dihydroxyflavone, lower motor neuron, upper motor neuron