İskemi reperfüzyonla indüklenen rat over hasarı üzerine timokinonun biyokimyasal ve histopatolojik etkisi
Biochemical and histopathological effects of timokinone on ischemia- reperfusion-induced rat ovarian injury
Yazar: ÖZGE NUR TÜRKERİ
Danışman: PROF. DR. NURİ BAKAN
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2019
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Histopatoloji = Histopathology ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Over hastalıkları = Ovarian diseases ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Sıçanlar = Rats ; Timokinon = Thymoquinone ; İskemi = Ischemia

Özet:
Amaç: Çalışmamızda timokinonun, iskemi reperfüzyon oluşturulan rat overlerinde meydana gelen hasara karşı koruyucu etkinliği olup olmadığını saptamak amacıyla over dokusunda otofaji yolakları, oksidan-antioksidan ve inflamasyon belirteçlerine bakıldı.
Materyal ve Metot: Rastgele 5 gruba bölünen ve overlerinde iskemi reperfüzyon oluşturulan ratlara belirlenen dozlarda timokinon uygulandı. Cerrahi işlem ile elde edilen over dokularından SOD, GSH, TAS, TOS, MDA, IL-1β ve TNF-α gibi belirteçler spektrofotometrik olarak tayin edildi. Histopatolojik olarak Caspase-3, LC3B ve NF-Kβ1 antikorları ile yapılan immunohistokimyasal boyamalardan sonra ışık
mikroskobu altında incelenen dokular immunpozitiflik açısından değerlendirildi.
Bulgular: : İskemi/reperfüzyon gruplarında doku MDA, TOS ve OSİ düzeyleri kontrol grubuna göre anlamlı derecede yüksekken uygulanan TQ ile MDA, TOS ve OSİ düzeyleri anlamlı derecede düşmüştür (p<0.05). Doku GSH, SOD ve TAS düzeyleri I/R grubunda anlamlı derecede düşükken tedavi sonrası anlamlı derecede yükselmiştir (p<0.05). Doku IL-1β ve TNF-α I/R gruplarında kontrol grubuna göre anlamlı olarak yüksekken tedavi sonrasında anlamlı derecede düşmüştür (p<0.05). Caspase 3 ve NF-
Kβ1 immunpozitifliği Sham ve deneme gruplarında tespit edilemezken LC3B immunpozitifliği açısından gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı fark (p<0.05) belirlenmiştir.
Sonuç: Uygulanan timokinonun I/R hasarı ile düşen TAS, GSH, SOD seviyelerinde anlamlı bir artışa ve I/R hasarı yükselen MDA, IL-1β, TNF-α seviyelerinde anlamlı bir düşüşe sebep olarak dokuları iskemik hasardan koruduğu kanaatine varılmıştır. Histopatolojik sonuçlarda Caspase 3 ve NF-Kβ1 immunpozitifliği açısından gruplar arasında anlamlı bir fark tespit edilemezken otofajinin belirteci olan LC3B immunpozitifliği açısından gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı fark tespit
edilmiştir.

Abstract:
Aim: In our study, the autophagy pathways, oxidant-antioxidant and inflammation markers of ovarian tissue were investigated in order to determine whether thymokinone has a protective effect against experimentally induced ischemia-reperfusion in rat ovaries.
Material and Method: The rats, which randomly divided into 5 groups and were experimentally induced ischemia-reperfusion in their ovaries, were administered timokinon at the determined doses. The markers such as SOD, GSH, TAS, TOS, MDA, IL-1β and TNF-α were determined spectrophotometrically from ovarian tissues obtained by surgical procedure., Tissues examined histopathologically under light
microscopy were evaluated for immunopositivity after immunohistochemical staining with Caspase-3, LC3B and NF-Kβ1 antibodies.
Results: While MDA, TOS and OSI levels in tissue were significantly higher in ischemia/reperfusion groups compared to the control group, TQ and MDA, TOS and OSI levels were significantly decreased (p<0.05). GSH, SOD and TAS levels in tissue were significantly lower in the I/R group but after treatment they increased significantly (p<0.05) IL-1β and TNF-α in tissue were significantly higher in I/R groups than control group but after treatment they decreased significantly (p<0.05). While Caspase 3 and NF-Kβ1 immunopositivity could not be detected in Sham and experimental groups, statistically significant difference (p<0.05) was determined between the groups in terms
of LC3B immunopositivity.
Conclusion: It was concluded that thymokinone protected the tissues from ischemic damage by causing significant increase in TAS, GSH and SOD levels that were decreased by I/R injury and significant decrease in elevated levels of MDA, IL-1β and TNF-α that were increased by I/R injury. As a histopathological result, while there was no statistically significant difference between the groups in terms of the immunopositivity of Caspase3 and NF-Kβ1, a statistically significant difference was
found between the groups in terms of the immunopositivity of LC3B which is a marker of autophagy.