Deneysel diyabetik sıçan böbrek dokusunda matrix metalloproteinase 9 ve apoptozis üzerine vitamin D'nin etkileri
The effects of vitamin D on matrix metalloproteinase 9 and apoptosis on experimental rat kidney tissue
Yazar: FATİH GENÇ
Danışman: YRD. DOÇ. DR. NEVZAT GÖZEL
Fırat Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2016
Konu: Nefroloji = Nephrology
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Böbrek = Kidney ; Diabetes mellitus = Diabetes mellitus ; Diabetes mellitus-deneysel = Diabetes mellitus-experimental ; Diabetik nefropatiler = Diabetic nephropathies ; Matriks metalloproteinaz 9 = Matrix metalloproteinase 9 ; Matriks metalloproteinaz 9 = Matrix metalloproteinase 9 ; Sıçanlar = Rats ; Vitamin D = Vitamin D

Özet:
Diyabetik nefropati, son dönem böbrek hastalığının en önemli nedenidir ve diyabete bağlı ölüm nedenlerinde ilk sıralarda yer almaktadır. Matriks metalloproteinazlar (MMP) ekstrasellüler matriksin parçalanması ve dönüşümünde rol oynamaktadır. Bu çalışmada deneysel diyabetik sıçan böbrek dokusunda MMP 9 ve apoptozis üzerine vitamin D' nin etkilerinin incelenmesi amaçlanmıştır. 
Çalışmamızda erişkin Wistar albino erkek sıçanlar kullanıldı. Deney hayvanları her grupta 7 hayvan olmak üzere 5 eşit gruba ayrıldı. Kontrol grubuna 8 hafta boyunca herhangi bir işlem yapılmadı. Tampon grubuna tek doz fosfat-sitrat tamponu intraperitoneal (i.p) olarak, Vitamin D grubuna ise vitamin D 50 IU/gün oral yolla damlalık aracılığıyla verildi. Diyabet grubuna 50 mg/kg tek doz Streptozotosin (STZ) fosfat-sitrat tamponunda çözdürülerek i.p olarak uygulandı. Diyabet+Vitamin D grubuna ise 50 mg/kg tek doz STZ i.p olarak verilmesinden sonra diyabetin oluşumunu takiben vitamin D 50 IU/gün oral olarak verildi. 
Deney sonunda sıçanlar dekapite edilip böbrek dokuları çıkartıldı. Rutin histolojik takipler yapılarak parafin bloklara gömüldü. Parafin bloklardan alınan kesitlere MMP 9 için immünohistokimyasal, apoptozis için TUNEL boyama yapıldı. Biyokimyasal total antioxydant status (TAS) ve total oxydant status (TOS) çalışma için örnekler -80 Co'de saklandı.
Apoptozis, TAS, TOS, MMP 9 değerleri Kontrol, Tampon ve Vitamin D gruplarında benzerdi. Kontrol grubuyla kıyaslandığında Diyabet grubunda TOS, apoptozis ve MMP 9 değerleri artmış izlenirken TAS değerleri azalmış olarak izlendi. Diyabet grubu ile kıyaslandığında ise Diyabet + Vitamin D grubunda TOS, apoptozis ve MMP 9 değerleri azalmış gözlenirken TAS değerleri artmıştı.
Sonuç olarak; diyabetik nefropati patogenezinde oksidatif stres ile MMP 9 arasında ilişkinin aydınlatılabilmesi için gelecekte farklı yapılacak çalışmalara ihtiyaç olduğu ve diyabetin komplikasyonlarını önlemek amacıyla vitamin D ile ilişkili tedavi yaklaşımlarının denenebileceği kanaatine varılmıştır.

Abstract:
Diabetic nephropathy is the most important reason of the end stage kidney disease and it has a major place about the cause of death related to diabetes. Matrix metalloproteinases (MMP) plays a role on disintegration and transformation of extracellular matrix. In this study, it was intended to examine the effects of vitamin D on matrix metalloproteinase 9 and apoptosis on experimental rat kidney tissue. 
Our study was made with Male Wistar albino rats. They are divided to 5 equal groups which contains 7 members. Any process was made to Control group during 8 weeks. It were given to Buffer group that one dose of phosphate-cytrate buffer intraperitoneally (i.p) and also 50 IU/day vitamin D orally with dropper to Vitamin D group. One dose of 50 mg/kg streptozotocin (STZ) which was dissolved at phosphate-cytrate buffer was given i.p to Diabetes group. Also to the Diabetes+Vitamin D group, after it was given one dose of 50 mg/kg STZ i.p and the next the diabetes develops; 50 IU/day vitamin D was given orally. 
Rats were sacrified, kidneys were removed at the end of the study. Tissues was burried into paraffin blocks and routine histological follow up was made.  İmmunhistochemical tests for MMP 9, TUNEL tests for apopitosis was made to the section of paraffin blocks. Samples were stored at -80 Co for biochemical tests total antioxydant status (TAS) and total oxydant status (TOS).
Apoptosis, TAS, TOS, MMP 9 results for the group of Control, Buffer and Vitamin D were the same. When compared with the Control group; TOS, apoptozis and MMP 9 values were seemed increased on Diabetes group althought TAS values were decreased. Comparing with Diabetes group; TOS, apoptosis and MMP 9 values of Diabetes+Vitamin D group were decreased and TAS valuse were increased.
In conclusion, our data revealed that it was needed to make further studies to understand the correlation between oxydative stres and MMP 9 on diabetic nephropathy pathogenesis and it can be tested which vitamin D related therapies to prevent the complication of diabetes.