Balon anjiyoplasti uygulanan tavşanlarda taurinin LOX-1 reseptör ekspresyonu üzerine etkileri
Effects of taurin on LOX-1 receptor expression in rabbits underwent balloon angioplasty
Yazar: GÖKSEL GÖKÇE
Danışman: PROF. DR. ZELİHA KERRY
Ege Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2008
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology

Özet:
Lektin benzeri okside düşük yoğunluklu lipoprotein reseptörü (LOX-1), yüksek oranda aterojenik LDL'nin damar endotel hücrelerine bağlanması ve internalize olmasından sorumlu temel reseptördür. Bu çalışma, balon hasarı ve oksidatif stresin tavşan ilyak arterinde LOX-1 ekspresyonu üzerine etkilerinin, ve bu etkilerin taurin tarafından düzenlenmesinin incelenmesi amacıyla gerçekleştirilmiştir.Balon hasarı, ilyak arterde aortik bifurkasyonun 2-3 mm önünde oluşturulmuştur. Oksidatif stres, özgül bir glutatiyon sentez inhibitörü olan butiyonin sülfoksiminin (BSO, 75 mg/kg b. wt., s.c) 15 gün uygulanmasıyla oluşturulmuştur (BSO grubu, n = 5). Taurin, içme suyu içinde % 1 oranında (ağ / hac) tek başına ya da BSO varlığında uygulanmıştır (Taurin Gubu ve BSO+taurin grubu, n = 5). Plasebo grubuna ve sadece taurin uygulanan gruba BSO çözücüsü olarak 4 ml % 0.9 NaCl verilmiştir. Orta kulak arteri kanüle edilerek hayvanların kan basınçları ölçülmüştür. Kan örneklerinde glutatiyon, okside glutatiyon, glutatiyon peroksidaz, katalaz ve malondialdehid düzeyleri spektrofotometrik olarak ölçülmüştür. Neointimal hiperplazinin büyüklüğü hematoksilin ve eozin ile boyanmış arter segmentlerinde incelenmiştir. Düz kas hücreleri intimal alandaki varlığı ?-aktin antikoru ile saptanmıştır. LOX-1 ekspresyonu, immunohistokimyasal olarak belirlenmiş, LOX-1 protein ve gen ekspresyon düzeyleri Western Blot analizi ve kantitatif RT-PCR ile hesaplanmıştır.Taurin, BSO tarafından baskılanan plazma antioksidanlarının düzeylerini geriye çevirmiştir ve BSO'nun kan basıncında oluşturuduğu artışı baksılamıştır. Plasebo grubunda % 29,9 olan stenoz yüzdesi BSO grubunda % 72'ye çıkmıştır. Bu artışı, taurin % 42'ye geriletmiştir (ANOVA; BSO ve BSO+taurin; P <0,001; n =5). LOX-1 reseptörünün BSO grubunda hem intimal hem de medyal alanda eksprese olduğu gösterilmiştir. Taurin, BSO grubunda LOX-1 gen ekspresyonundaki artışı azaltmıştır. (ANOVA; BSO ve BSO+taurin; P <0.01; n = 5).Sonuçlarımız balon hasarı oluşturulmuş tavşan ilyak arterinde stenoz yüzdesi ve LOX-1 ekspresyonunun oksidatif stresteki artışla korelasyon içinde olduğunu göstermiştir. Taurinden restenozun önlenmesinde terapötik olarak faydalanılabilir.

Abstract:
Lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1 (LOX-1) is the major reseptor for binding and internalization of atherogenic oxidized LDL (Ox-LDL) to vascular endothelial cells. This study was designed to determine the effects of balloon injury and oxidative stress on LOX-1 expression in rabbit iliac artery and its modulation by taurine.Balloon injury was performed in the iliac artery, 2-3 mm beyond the aortic bifurcation. Oxidative stress was induced by buthionine sulfoximine (BSO, 75 mg/kg b. wt., s.c), a specific inhibitor of glutathione synthesis, for 15 days (BSO Group). Rabbits were given 1 % taurine (w/v) in drinking water in the presence and int absence of BSO (Taurine and BSO+taurine Group; n = 5). Rabbits given 4 ml of saline (s.c) served as placebo. Changes in blood pressure were evaluated by canulating middle ear artery. Serum glutathione, glutathione peroxidase, catalase and malondialdehyde levels were measured spectrophotometrically. Intimal hyperplasia was quantitated in hematoxylin and eosin-stained segments. Myocytic nature of neointimal hyperplasia was tested by ?-actin. LOX-1 expression was examined by immunohistochemistry, Western Blot analysis and quantitative RT-PCR.Taurine reverted the supressed levels of plasma antioxidants by BSO (ANOVA followed by Tukey?s Test; P <0.001, n = 5). Stenosis rate of 29.89 % in placebo group increased up to 72.17 % in BSO Group, which is then significantly reduced to 42.22 % by taurine (P <0.001, n = 5). LOX-1 was shown to be localized in both intimal and medyal area. Taurine reduced the fold induction in LOX-1 expression in BSO Group (ANOVA; BSO ve BSO+taurin; P <0.01; n = 5).Stenosis rate and LOX-1 expression in balloon-injuried rabbit iliac arteries are correlated with oxidative status. Taurine may have therapeutical benefits in prevention of restenosis.