Ratlarda periferal sinir hasar ve rupturlarında sinir rejenerasyonu üzerine kök hücre etkilerinin araştırılması
Research of the effects of stem cells on nerve regeneration in peripheral nerve damage and rupture in rats
Yazar: SEMA DİLAN KAYAPINAR
Danışman: PROF. DR. MEHMET CENGİZ HAN
Fırat Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Cerrahi Hastalıklar Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Nöroşirürji = Neurosurgery
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Kök hücreler = Stem cells ; Periferik sinir hasarları = Peripheral nerve injuries ; Periferik sinir sistemi hastalıkları = Peripheral nervous system diseases ; Periferik sinirler = Peripheral nerves ; Sinir dejenerasyonu = Nerve degeneration ; Sinir rejenerasyonu = Nerve regeneration ; Siyatik sinir = Sciatic nerve ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Kök hücre tedavisi cerrahi ve medikal olarak tedavi edilemeyen perifer sinir yaralanmalarında potensiyel bir tedavi yöntemidir. Bu çalışmada siyatik sinir hasar ve rupturlarında kök hücrenin iyileşme üzerine etkilerini deneysel rat modelinde araştırılması amaçlandı.
Çalışmada yaklaşık 250 gr ağırlığında, yaşları 2 aylık olan 56 adet winstar albino dişi rat kullanıldı. Ratlar, her bir grupta 14 adet rat olacak şekilde 4 gruba ayrıldı. Ratlar genel anesteziye alındı. Sol arka bacak dorsalinde gluteal kasların hemen üzerinden 2 cm uzunluğunda bir ensizyon oluşturuldu. Gluteal kaslar küt olarak ayrılacak ve siyatik sinire ulaşıldı. 1. ve 2. Grupta hemostatik pens yardımıyla siyatik sinir 1 dk boyunca sıkılarak hasar oluşturuldu, 3. ve 4.  ise siyatik sinirde tam katlı ruptur oluşturuldu. Kesilen siyatik sinir epineuriumu karşı karşıya sütur edildikten sonra 1. ve 3. Grup ratlara epineurium içerisine subparaneural 2,5 x105 kök hücre enjekte edildi. Yaralar basit ayrı sütur ile kapatıldı. Postoperatif olarak ratlar günlük gözlemleri yapıldı. Bunun yanında on beş günlük aralıklarla 8 hafta boyunca kavrama testi, adım izi testleri uygulandı. Son hafta hot plate testi ve EMG testi yapıldı.
Kök hücre uygulanan grupların kontrol gruplarına göre istatiksel olarak anlamlı farklılıklar bulunurken, tüm grup içerisinde postoperatif yapılan testlerde hasar oluşturulmuş kök hücre grubunun diğer gruplardan, istatiksel olarak anlamlı farklılık gösterdiği belirlendi.
Postoperatif 8 hafta sonunda sonra ötenazi edilen ratların lezyonlu sinir dokuları histopatolojik değerlendirmede kök hücre uygulanan grupların kontrol gruplarına anlamlı farklılıklar görüldü. Sonuç olarak periferik sinir hasarlarının onarımında, kemik kaynaklı mezenkimal kök hücre uygulaması (yapılan motor fonksiyon ve histolojik değerlendirmeye göre) olumlu etki göstermektedir.
Anahtar Kelimeler: Siyatik Sinir, Dejenerasyon, Kök Hücre, Rat

Abstract:
Stem cell therapy is a potential treatment method for peripheral nerve injuries that cannot be treated surgically or medically. 
In this study was aimed to investigate the effects of stem cells on healing in sciatic nerve damage and ruptures in an experimental rat model.
In the study, 56 winstar albino female rats, weighing approximately 250gr and aged 2 months, were used. Rats were randomly divided into 4 groups with 14 rats in each group. Rats were placed under general anesthesia. A 2 cm long incision was made just above the gluteal muscles in the dorsal left hind leg. The gluteal muscles will be divided bluntly and the sciatic nerve has been reached. In the 1st and 2nd groups, damage was created by squeezing the sciatic nerve for 1 minute with the help of hemostatic forceps, and a full-fold rupture was created in the sciatic nerve in the 3rd and 4th. After suturing the epineurium of the cut sciatic nerve, subparaneural 2.5 x105 stem cells were injected into the epineurium of the 1st and 3rd group rats. The wounds were closed with simple separate sutures. Daily observations of the rats were made postoperatively. In addition, grasping test and step-track tests were applied for 8 weeks at 15-day intervals. Hot plate test and EMG test were performed in the last week.
While there were statistically significant differences in the stem cell applied groups compared to the control groups, it was determined that the damaged stem cell group in the postoperative tests showed a statistically significant difference from the other groups.
In the histopathological evaluation of the lesioned nerve tissues of the rats, which were euthanized after 8 weeks postoperatively, significant differences were observed between the stem cell applied groups and the control groups. 
As a result, bone-derived mesenchymal stem cell application has a positive effect on peripheral nerve repair (according to motor function and histological evaluation).
Keywords: Sciatic Nerve, Stem Cell, Degeneration, Rat