Sıçanlarda deneysel testiküler iskemi reperfüzyon hasarında hidrojen sülfit'in koruyucu etkisi
Protective effect of hydrogen sulphite on experimental testiculars ischemia reperfusion in rats
Yazar: MUAMMER BOZKURT
Danışman: DOÇ. DR. ALPER ÖTÜNÇTEMUR
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / İstanbul Okmeydanı Eğitim. ve Araştırma. Hastanesi / Üroloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2018
Konu: Üroloji = Urology
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Hidrojen sülfür = Hydrogen sulfide ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Spermatik kord torsiyonu = Spermatic cord torsion ; Sıçanlar = Rats ; Testiküler hastalıklar = Testicular diseases ; Testis = Testis ; İskemi = Ischemia

Özet:
Amaç: Testis torsiyonu testiste ileri düzeyde iskemiye sebep olan akut seyirli ve teşhis sonrasında hızlı şekilde tedavi gerektiren acil ürolojik bir durumdur. Torsiyon tedavisi olarak detorsiyon işlemi sonrasında meydana gelen iskemi-reperfüzyon (I/R) süreçleri testiküler hasara neden olur. Çalışmamızın amacı Hidrojen Sülfit'in (H2S), testiküler I/R hasarında etkisini araştırmaktır.
Gereç ve Yöntem: 38 adet Wistar-Albino sıçan randomize edilerek 6 gruba ayrıldı. Kontol (6), Sham (6), IR-E (6); 2 saat torsiyon sonrası detorsiyone edildi ve 4 saatlik reperfüzyon değerlendirildi, IR-E+H2S (6); IR-E grubuna ek olarak reperfüzyondan 30 dakika öncesinde intraperitoneal yoldan 75 µmol/kg Sodyum hidrojen sülfit (NaHS) uygulandı, IR-G (7); 2 saat torsiyon sonrası detorsiyone edildi ve 24 saatlik reperfüzyon değerlendirildi, IR-G+H2S (7); IR-G grubuna ek olarak reperfüzyondan 30 dakika öncesinde intraperitoneal yoldan 75 µmol/kg NaHS uygulandı. Biyokimyasal olarak; testis dokusunda Nitrik Oksit (NO), Malondialdehid (MDA), Süperoksit Dismutaz (SOD) ve Redükte Glutatyon (GSH), Tümör Nekroz Faktör-alfa (TNF-α) düzeyleri ölçüldü. Ayrıca serumda TNF-α değerlerine bakıldı. Histopatolojik olarak Hematoksilen&Eozin (H&E) boyası ile boyandı ve ışık mikroskobik bulguları incelendi. Testiste spermatogenez faaliyetini değerlendirmek için Johnsen Skoru uygulandı. İmmunohistokimyasal olarak da Apoptoz proteaz aktive edici faktör-1 (Apaf-1) ve İndüklenebilir nitrik oksit sentaz (iNOS) aktivitesi değerlendirildi. Sonuçlar ki-kare ve one way varyans analizi (ANOVA) testi ile karşılaştırıldı.
Bulgular: Biyokimyasal değerlendirmede; MDA ve NO seviyelerinin IR-G grubunda Sham grubuna kıyasla anlamlı olarak arttığı gözlendi ve ayrıca IR-G grubuna H2S tedavisinin eklenmesiyle bu değerlerin azaldığı gözlendi (p<0.05). GSH ve SOD değerlerinin IR-G grubunda Sham grubuna kıyasla sayısal olarak azaldığı gözlendi ve ayrıca IR-G grubuna H2S tedavisinin eklenmesiyle bu değerlerin sayısal olarak arttığı gözlendi. Fakat bu ilişkiler istatiksel olarak anlamlı değildi (p>0.05). Doku ve serum TNF-α değerlerinin IR-E grubunda Sham grubuna kıyasla anlamlı olarak arttığı gözlendi ve ayrıca IR-E grubuna H2S tedavisinin eklenmesiyle bu değerlerin azaldığı gözlendi (p<0.05). Jonhson skorunun IR-G grubunda en düşük seviyede olduğu gözlendi (p<0.05). İmmunohistokimyasal değerlendirmede; Apaf-1 ve iNOS aktivitesinin; IR-G grubunda Sham grubuna kıyasla anlamlı olarak arttığı gözlendi, ayrıca IR-G grubuna H2S tedavisinin eklenmesiyle bu değerlerin azaldığı gözlendi (p<0.05).
Sonuç: Testis torsiyonunda H2S tedavisinin iskemi reperfüzyon hasarına karşı koruyucu etkisi olduğunu söyleyebiliriz. Bu koruyucu etkinin H2S'in antiinflamatuar, antioksidan ve antiapoptotoik özelliğinden kaynaklandığını düşünmekteyiz.

Anahtar kelimeler: Hidrojen sülfit, İskemi Reperfüzyon, Testis torsiyonu

Abstract:
Aim: Testicular torsion is an urgent urological condition, which is acute onset and can be lead to advanced level of ischemia in the testis and requires rapid diagnosis and treatment. Ischemia-reperfusion (I/R) processes that occur after detorsion as a treatment for torsion are caused by testicular injury. The aim of our study is to investigate the effect of hydrogen sulphite (H2S) on the testicular ischemia reperfusion injury.
Material and Methods: 38 Wistar-Albino rats were divided randomly into 6 groups. Control (6), Sham (6), IR-E (6); 2 hours of torsion and 4 hours of reperfusion, IR-E + H2S (6); in addition to the IR-E group, 75 μmol/kg sodium hydrogen sulphide (NaHS) was administered intraperitoneally 30 min before reperfusion, IR-G (7); 2 hours of torsion and 24 hours of reperfusion, IR-G + H2S (7); in addition to the IR-G group, 75 μmol/kg NaHS was administered intraperitoneally 30 min before reperfusion. Biochemically; Nitric Oxide (NO), Malondialdehyde (MDA), Superoxide dismutase (SOD) and Reductive Glutathione (GSH) and Tumor TNF-α levels were measured in the testes. Serum TNF-α levels were also measured. Hematoxylin & Eosin (H & E) was histopathologically stained and microscopic findings were examined. The Johnsen Score was performed to assess spermatogenesis activity in the testis. Apoptosis protease activating factor-1 (Apaf-1) and inducible nitric oxide synthase (iNOS) activity were also evaluated immunohistochemically. Statistical analyses were made by the Chi-square test and one-way analysis of variance (ANOVA).
Results: In biochemical evaluation; MDA and NO levels were significantly increased in the IR-G group compared to Sham and which decreased by the addition of H2S treatment to the IR-G group (p<0.05). GSH ve SOD levels were decreased in the IR-G group compared to Sham and which increased by the addition of H2S treatment to the IR-G group, but this correlations was not statistically significant (p> 0.05). Tissue and serum TNF-α levels were significantly increased in the IR-E group compared to Sham and which decreased by the addition of H2S treatment to the IR-E group. Jonhson score was lowest in IR-G group (p <0.05). In immunohistochemical evaluation; Apaf-1 and iNOS activity were significantly increased in the IR-G group compared to Sham and which decreased by the addition of H2S treatment to the IR-G group (p<0.05).
Conclusions: We can say that H2S treatment is protective against ischemia reperfusion injury in testicular torsion. We believe that this protective effect is due to the antiinflammatory, antioxidant and antiapoptotic properties of H2S.

Keywords: Hydrogen sulphite, Ischemia Reperfusion, Testicular torsion