2-hidroksiizokaproik asidin(HICA) gingival fibroblast ve periodontal ligament fibroblast üzerindekisitotoksisitesinin ve yara iyileşmesineetkisinin değerlendirilmesi
Evaluation of the cytotoxicity of 2-hydroxyisocaproicacid (hica) on gingival fibroblasts and periodontalligament fibroblasts and its effect on wound healing
Yazar: HANDE GÜL KELEKÇİ
Danışman: PROF. DR. HÜLYA TOKER
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / Gülhane Diş Hekimliği Fakültesi / Periodontoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Diş Hekimliği Uzmanlık, 2024
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry

Özet:
Amaç: Antiinflamatuar, antibakteriyel ve antifungal etkisi bilinen HICA'nın,
insan gingival(HGF) ve periodontal ligament fibroblast hücreleri (HPdLF) üzerindeki
sitotoksisitesini araştırmak, P.gingivalis lipopolisakkaridi ile stimüle edilen ve
edilmeyen hücrelerin migrasyonuna etkisini değerlendirmek ve hücrelerden salınan
IL-1β seviyelerine etkisini in vitro ortamda incelemektir.
Gereç ve Yöntem: HGF ve HPdLF farklı HICA konsantrasyonlarına (20-10-
5-2,5-1 mg/ml) maruz bırakılarak 24,48 ve 72. saatte XTT test" "le hücre canlılıkları
değerlendirildi. XTT testi sonucunda her hücre için üç farklı konsantrasyon seçildi.
Pg-LPS ile stimüle edilen hücrelerde migrasyona etkisini değerlendirmek için yara
çizik modelleri kullanıldı ve bu hücrelerden salınan IL-1β seviyeleri ELISA kiti
kullanılarak tespit edildi.
Bulgular: HICA'nın HGF için 5 mg/ml ve HPdLF 10 mg/ml ve üzerindeki konsantrasyonlar
sitotoksik etki gösterdi. HGF ve HPdLF'nin IC50 değerleri sırasıyla
3.56 ve 5.28 mg/ml olarak hesaplandı. Yara çizik modelinde HGF hücrelerinde
migrasyonu en fazla artıran konsantrasyon 3 mg/ml HICA olarak tespit edildi
(p<0,05). HPdLF hücrelerinde ise gruplar arasında anlamlı farklılık saptanmadı. Grup
içi karşılaştırmalarda Pg-LPS + 5 mg/ml HICA uygulaması 0-24 saatte hücre
migrasyonunu artırdı (p<0,05). LPS+5 mg/ml HICA grubu, LPS grubu ile
karşılaştırıldığında HGF hücrelerinden salınan IL-1β seviyelerinde istatistiksel olarak
anlamlı azalma sağladı (p<0,05) ancak HPdLF hücrelerinden salınan IL-1b seviyeleri
anlamlı farklılık göstermedi (p>0,05).
Sonuç: Çalışmanın sınırlamaları dahilinde, HGF hücreleri için 5 mg/ml,
HPdLF hücreleri için 10 mg/ml ve daha yüksek konsantrasyonlardaki HICA sitotoksik olup HGF hücreleri LPS + 3 mg/ml HICA uygulaması kontrol grubu ile benzer hücre migrasyonu sağlamıştır. Bununla
beraber terapötik bir ajan olarak HICA'nın diğer periodontal hücrelere ve periodontal
mikrobiyotaya etkileri detaylıca incelenmeli ve periodontal hastalık patogenezindeki
rolü araştırılmalıdır.

Abstract:
Aim: This study investigated the cytotoxicity of HICA, known for its anti-inflammatory, antibacterial, and antifungal effects, on human gingival (HGF) and
periodontal ligament fibroblast cells (HPdLF). It also evaluated HICA's effects on the
migration of P. gingivalis lipopolysaccharide (Pg-LPS)-stimulated and non-stimulated
cells and examined its influence on IL-1β levels released in vitro.
Materials and Methods: HGF and HPdLF cells were treated with varying
concentrations of HICA (20-10-5-2.5-1 mg/ml), and cell viability was assessed using
the XTT assay at 24, 48, and 72 hours. Three concentrations were selected for further
testing based on XTT results. A wound scratch model was employed to assess cell
m"grat"on, and IL-1β levels were measured via ELISA.
Results: HICA concentrations of 3 5 mg/ml for HGF and 3 10 mg/ml for HPdLF
showed cytotoxic effect. IC50 values of HGF and HPdLF were calculated as 3.56 and
5.28 mg/ml, respectively. In the wound scratch model, the concentration that increased
the migration of HGF cells the most was found to be 3 mg/ml HICA (p<0.05). No
significant difference was found between the groups in HPdLF cells. In intragroup
comparisons, Pg-LPS + 5 mg/ml HICA treatment increased cell migration at 0-24
hours (p<0.05). The LPS+5 mg/ml HICA group resulted in a statistically significant
decrease in IL-1 β levels released from HGF cells compared to the LPS group (p<0.05),
but IL-1 β levels released from HPdLF cells did not differ significantly (p>0.05).
Conclusion: HICA concentrations of ≥ 5 mg/ml for HGF and ≥10 mg/ml for HPdLF
were cytotoxic. HGF cells treated with LPS + 3 mg/ml HICA showed comparable
migration to the control group. Further research is needed to explore HICA's
therapeutic potential in periodontal treatment.