Hepatopankreatobilier tümörlerde düzenleyici T lenfositler ve prognostik önemi
Regulatory T cells and thei̇r prognosti̇c value in hepatopancreatobi̇li̇er tumours
Yazar: HALİL HAKAN ÖZGÜR
Danışman: PROF. DR. SAFİYE AKTAŞ
Dokuz Eylül Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı / Onkoloji Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2014
Konu: Onkoloji = Oncology
Dizin: Antijenler-CD4 = Antigens-CD4 ; Antijenler-CD8 = Antigens-CD8 ; Karaciğer neoplazmları = Liver neoplasms ; Lenfositler = Lymphocytes ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Pankreas neoplazmları = Pancreatic neoplasms ; Prognoz = Prognosis ; Safra kesesi = Gallbladder ; Safra kesesi neoplazmları = Gallbladder neoplasms

Özet:
Amaç: Prognostik olarak zayıf gidişli Safra Kesesi, Pankreas ve Karaciğer kanser olgularında regulator T hücreler (Treg), CD4 T hücreler ve CD8 T hücrelerin intratümöral ve peritümöral dağılımlarının bulunması, Treg hücrelerin intratümöral miktarlarının prognostik parametrelerle ve sağ kalımla olan ilişkilerinin belirlenmesi.
Yöntem: Radikal cerrahi rezeksiyon sonrası elde edilen 20 Safra Kesesi, 25  Pankreas ve 8 Karaciğer kanser olgularının tümör parafin bloklarına ait kesitlerinin Foxp3, CD4 ve CD8 monoklonal antikorları ile immünhistokimyasal (IHK) olarak boyanması ve sonrasında histopatolojik ve klinik prognostik parametreler elde edilmesi ile oluşturulmuştur. Daha sonra intratümöral ve peritümöral alanlardaki Foxp3, CD4 ve CD8 yoğunlukları istatistiksel olarak karşılaştırılmıştır. Son olarak, intratümöral Foxp3 miktarları prognostik parametrelerle istatistiksel olarak karşılaştırılmıştır. 0,05'in altındaki p değerleri istatistiksel olarak anlamlı olarak değerlendirildi.
Bulgular: Safra Kesesi, Pankreas ve Karaciğer kanser olgularının her üçünde de Foxp3, CD4, 	CD8 miktarlarının peritümöral alanlarda, intratümoral alanlara göre daha yoğun miktarlarda bulunduğu görülmüştür (Hepsi için p<0,05). Her üçünde de, intratümöral Foxp3/CD4 pozitivite oranı, peritümöral alana göre belirgin olarak yüksek bulunmuştur (Hepsi için p<0,05). Safra Kesesi kanser olgularında  ileri evre ile yüksek CD4+, CD8+ ve Foxp3+  (p<0,05), yüksek Foxp3 pozitivitesi ile  az diferansiye tümörler arasında (p=0,023), Yüksek Foxp3 ve CD8 pozitivitesi ile lenfovasküler invazyon varlığı arasında (p<0,05), CD8 pozitivitesi ile perinöral invazyon varlığı (p=0,028) arasında anlamlı bir ilişki izlenmektedir.  Pankreas kanser olgularında, yüksek intratümöral Foxp3 pozitivitesi 75 yaş üzeri olgularda daha yüksek oranda izlenmiştir (p=0,046). Karaciğer kanser olgularında, intratümöral Foxp3 yüksekliği ile lenfovasküler invazyon varlığı arasında belirgin bir ilişki izlenmektedir (p=0,040). Her üç kanserde de intratümöral Foxp3 pozitivite miktarı ile prognostik olarak kötü olarak değerlendirilen olgular arasında belirgin ilişki izlenmektedir (p<0,05), hastalıksız sağ kalım ile Safra Kesesi ve Panreas olgularında ilişki bulunurken (p<0,05), Karaciğer kanser olgularında ilişki bulunamamıştır (p>0,05).
Sonuç: Tümör infiltre eden Foxp3/CD4 Treg hücrelerin sıklığı tumor mikroçevresinde peritümöral Alana gore intratümöral alanda önemli oranda daha yüksektir. Sonuçlarımız, antitumor immün yanıtların baskılanmasında CD4 Treg hücrelerin önemli rolünü desteklemiştir.

Abstract:
Objective: The aim of this study was to determine the prognostic values of intratumoural and peritumoural distrubutions of Foxp3+ Treg cells, CD4+ Tcells and CD8+ T cells in cancer cases of gallbladder, pancreas and liver.
Methods: This study included  20 patients with gallbladder cancer, 25 patients with pancreatic cancer  and  8 patients with liver cancer after radical surgery resection. The paraffin embedded archive tissue sections of these cases were immunohistochemically stained by Foxp3, CD4 and CD8 monoclonal antibodies and afterwards we evaluated all results with histopathological and clinical prognostic parameters.  Then, we compared the intensity differences of Foxp3, CD4 ve CD8 between frequences intratumoral and peritumoral areas statistically. Finally, Foxp3 levels were compared statistically with prognostic parametres. P values <0.05 were considered statistically significant.
Results: Foxp3, CD4 and CD8 expression levels were significantly higher in peritumoral areas than in intratumoral areas in patients with gallbladder, pancreas, liver cancers (p<0,05). Foxp3+/CD4+ were significantly higher in intratumoral areas than in peritumoral areas in all three cancer types (p<0,05 for all). There were a statistically significant associations between high positivity of Foxp3, CD4 and CD8 and advanced stage (p<0,05), between high positivity of Foxp3 and poorly differentiate tumors, between high positivity of Foxp3 (p=0,023), CD8 and presence of lymphovascular invasion (p<0,05), between high positivity of CD8 and presence of perineural invasion in patients with gallbladder cancer (p=0,028). There was a significant association between high positivity of Foxp3 and advanced age (over 75 years) in patients with pancreatic cancer (p=0,046). There was a association between high positivity of Foxp3 and presence of lymphovascular invasion in patients with liver cancer (p<0,05) There was a significant association between high positivity of Foxp3  and adverse prognosis according to clinical characteristics in patiens with gallbladder, pancreas and liver cancers. Gallbladder and pancreas cancer patients with high positivity of Foxp3, had a shorter disease free survival (p<0,05). 
Conclusion: The intensity of tumor-infiltrating FOXP3/CD4 Treg cells was significantly higher in the intratumoral area than peritumoral area within the tumor microenvironment. Our results had supported  to significant role of CD4 Treg cells in suppressing antitumor immune responses.