İskemi-Reperfüzyon hasarlı rat ovaryumunda albümin uygulamasının sitokrom-c1 üzerindeki etkilerinin incelenmesi
Investigation of the effect of albumin administration on cytochrome-c1 in ischemia-reperfusion damaged rat ovary
Yazar: ALİ ALPER KAHRAMAN
Danışman: DOÇ. SEYİT ALİ BİNGÖL
Kafkas Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Albüminler = Albumins ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Over = Ovary ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Serum albümin-insan = Serum albumin-human ; Sıçanlar = Rats ; İmmünohistokimya = Immunohistochemistry ; İskemi = Ischemia

Özet:
Bu çalışma rat ovaryumunda gerçekleştirilen iskemi-reperfüzyon modelinde albümin uygulamasının biyokimyasal, histolojik ve immünohistokimyasal yöntemler kullanılarak incelenmesini amaçlamıştır. Çalışmamızda 32 adet, 8-12 haftalık Wistar albino dişi rat kullanıldı. Deney hayvanları rastgele 4 gruba ayrıldı. Bu gruplar kontrol, iskemi-reperfüzyon, SF ve albümin olarak belirlendi. Kontrol grubunda sağlıklı ovaryum dokuları bilateral alındı. Kontrol grubu hariç diğer gruplara bilateral ovaryumlara 2 saatlik iskemi ve 2 saatlik reperfüzyon uygulaması gerçekleştirildi. Albümin grubunda reperfüzyondan 30 dk önce intraperitoneal 12,5 ml/kg albümin (2,5 g/kg, %20'lik albümin), SF grubunda ise albümin uygulamasıyla aynı hacimde (12,5 ml/kg) reperfüzyondan 30 dk önce intraperitoneal serum fizyolojik uygulandı. İki saatlik reperfüzyon sonrasında bu üç gruptan da ovaryumlar bilateral olarak alındı. Tüm dokular histolojik ve immünohistokimyasal incelemeler için %10'luk formaldehite konuldu. Biyokimyasal analizler için tüm hayvanlardan alınan kan örnekleri de uygun tüplere alınıp serumları elde edildikten sonra -20oC'de saklandı. Total Oksidan Durumu ve Oksidatif Stres İndeksi değerleri bakımından gruplar arasında yapılan istatistiksel analizlerde İR grubu sonuçlarının kontrol ve albümin gruplarından belirgin seviyede yüksek olduğu görüldü (p<0,05). Ovaryumdaki İR'nin gruplar arasında kan serumundaki albümin ve kalsiyum seviyeleri üzerinde değişikliğe neden olmadığı belirlendi. Histolojik incelemelerde folikül dejenerasyonu, ödem, vasküler konjesyon ve hemorajinin değerlendirilmesiyle elde edilen toplam skor sonucunun İR grubunda kontrol grubundan belirgin düzeyde daha yüksek olduğu tespit edildi (p<0,05). İmmünohistokimyasal inceleme sonuçlarına göre İR ve SF gruplarındaki CYC1 immünoreaktiviteleri kontrol ve albümin gruplarından istatistiksel fark oluşturacak seviyede daha güçlü olduğu gözlendi (p<0,05). Sonuç olarak, albüminin CYC1, ROS ve oksidatif stres düzeylerini azalttığını bu nedenle İR tedavi sürecinde yardımcı bir rol oynayacağını düşünmekteyiz.

Abstract:
This study aimed to examine the effects of albumin application on ischemia-reperfusion in the rat ovary by using biochemical, histological and immunohistochemical methods. In our study, 32 female Wistar albino rats (8-12 weeks old) were used. Experimental animals were randomly divided into 4 groups. These groups were determined as control, ischemia-reperfusion, placebo and albumin. In the control group, healthy ovarian tissues were taken bilaterally. Except for the control group, 2 hours of ischemia and 2 hours of reperfusion were applied to the bilateral ovaries in the other groups. In the albumin group, 12,5 ml/kg albumin (2,5 g/kg, 20% albumin) albumin was administered intraperitoneally 30 minutes before the reperfusion, and same volume of saline (12,5 ml/kg) in albumin group was administered intraperitoneally to placebo group 30 minutes before the reperfusion. After 2 hours of reperfusion, ovaries were taken bilaterally from these three groups. Taken tissues were put into 10% formaldehyde for histological and immunohistochemical examinations. Serum of blood samples was obtained from all animals was put into appropriate tubes and stored at -20oC for biochemical analysis. Total Oxidant Status and Oxidative Stress Index values in IR group were statistical significantly higher than control and albumin groups (p<0.05). It was determined that IR in ovary did not have effect on serum albumin and calcium levels between groups. In the histological examination, total score obtained from evaluating follicle degeneration, edema, vascular congestion and hemorrhage was found to be significantly higher in the IR group than that of the control group (p<0.05). It was observed that CYC1 immunoreactivity in IR and placebo groups was significantly stronger than control and albumin groups at a level to make statistical difference (p<0.05). In conclusion, albumin reduces CYC1, ROS and oxidative stress levels, therefore we think that it will play an auxiliary role in the IR treatment process.