İn vitro sıçan mesane kasılmaları üzerine melatonin reseptörlerinin rolü
Effect of melatonin receptors on in vitro rat bladder 
contractions
Yazar: FATMA NUR TAKI
Danışman: PROF. DR. SELİM KUTLU
Necmettin Erbakan Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2017
Konu: Fizyoloji = Physiology
Dizin: Agomelatin = Agomelatine ; Kas kontraksiyonu = Muscle contraction ; Kas-düz = Muscle-smooth ; Kaslar = Muscles ; Melatonin = Melatonin ; Mesane = Urinary bladder ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Amaç: Bu tez çalışmasının amacı, in vitro mesane kasılmaları üzerine melatonin
reseptörlerinin olası etkilerinin ve bu etkilerin meydana gelmesinde reseptör agonist ve antagonistinin
rollerinin araştırılmasıdır.
Yöntem: Deneysel çalışmalar, Necmettin Erbakan Üniversitesi KONÜDAM Deneysel Tıp
Araştırma ve Uygulama Merkezi ile Necmettin Erbakan Üniversitesi Meram Tıp Fakültesi Fizyoloji
Anabilim Dalı Laboratuvarı'nda gerçekleştirildi. Çalışmada Wistar cinsi 5-6 aylık, 200–250 g arası 24
adet dişi sıçan kullanıldı. Eter sedasyonunu takiben servikal dislokasyon yöntemi ile sıçanlar ötenazi
edildi. Abdomen medyan hattan açılarak mesane çıkarıldı ve Krebs solüsyonu içine alındı. Mesane
boyun kısmından apex yönünde longitudinal bir kesi ile açılarak mesaneden vertikal yönde 2X10 mm
ebadında iki kas şeridi hazırlandı. Şeritler izole organ banyosundaki cam hazneler içerisindeki
düzeneğe 1 g gerim uygulanarak yerleştirildi. Kas şeritlerine melatonin, melatonin reseptör agonist ve
antagonisti ve bunların çözücüleri kümülatif olarak uygulandı. 45 dakikalık bir uyum periyodunu
takiben spontan kasılma gösteren bütün mesane şeritlerine 10-5 M asetilkolin (ACh) uygulanarak
kasılmalar indüklendi. Kümülatif olarak agomelatin (10-8 M-10-3 M), melatonin (0.01 mM, 0.1 mM, 1
mM, 2.5 mM) ve melatonin 2 reseptör antagonisti 4PPDOT (0.01 mM, 0.1 mM) uygulamaları yapıldı
ve genlik üzerinde oluşan etkiler kayıt altına alındı.
Bulgular: Agomelatin 10-8 M-10-5 M doz aralığında uygulanmasıyla önemli bir etki
oluşmazken, 10

-4 M ve 10-3 M dozlarında istatistiksel olarak anlamlı bir inhibisyon gözlendi (p<0.01
ve p<0.001, sırasıyla, n=7). Melatonin benzer şekilde, 0.01 mM ve 0.1 mM dozlarının ACh ile
indüklenen mesane düz kas kontraksiyonları üzerine etkili olmadığı fakat 1 mM ve 2.5 mM dozlarda
kontraksiyonları kontrol grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde azalttığı belirlendi
(p<0.001). 0,01 mM ve 0.1 mM 4P-PDOT ise 2 mM melatonin uygulanmasıyla oluşan inhibisyonu
geri döndürmedi.
Sonuç: Agomelatin ve melatonin in vitro sıçan mesane düz kas kontraksiyonları üzerinde

belirgin inhibitör etki göstermektedir. Bu etkiler doz bağımlı olarak ortaya çıkmaktadır. Ancak 4P-
PDOT in vitro sıçan mesane düz kas kontraksiyonlarını etkilememektedir. Bu da mesane kasılmaları

üzerindeki melatoninin oluşturduğu inhibisyonun muhtemelen melatonin 2 reseptörü aracılı olarak
ortaya çıkmadığını göstermektedir.
Anahtar Kelimeler: Agomelatin; Melatonin; Mesane; Sıçan; 4P-PDOT.

Abstract:
Aim: The objective of this thes is was to investigate the possible effects of melatonin
receptors on bladder contractions in vitro and roles of agonist and antagonist in emergence of these
effects.
Method: Experimental studies were carried out in KONUDAM Experimental Medicine
Research and Application Center and the Laboratory of Physiology Department in Necmettin Erbakan
University. 24 female Wistar rats (5-6 mount age) weighing 200-250 g have been used in this study.
Rats were euthanized by cervical dislocation after light ether sedation. The abdomen was opened by
median line and the bladder was removed and taken into the Krebs solution. The bladder was opened
with a longitudinal incision in the direction of the apex from the neck to prepare two muscular strips
of 2x10 mm in the vertical direction. The strips were placed by applying 1 g of tension to the
assembly in the isolated organ bath. Melatonin, melatonin receptor agonist and antagonist and their
solubilizers were cumulatively applied to the muscles trips in organ bath. Following a 45-minute equal
ibrati on period, tonic contractions were induced by application of acethylcholin (ACh) at 10-5 M
concentration. Agomelatin (10-8 M-10-3 M), melatonin (0.01 mM, 0.1 mM, 1 mM, 2.5 mM) and
4PPDOT (a selective melatonin receptor 2 antagonist, 0.01 mM, 0.1 mM) were applied and the effects
on contraction amplitudes were recorded.
Results: Agomelatin had no effect between 10-8 M and 10-5 M level but there was significant
inhibitory effect at the other doses (p<0.01 and p<0.001 respectively, n=7). Similarly, there was no
significant effect on bladder smooth muscle contractions after application of 0.01 mM and 0.1 mM
melatonin concentrations, whereas melatonin administration both 1 mM and 2.5 mM significantly
inhibited the contraction compared to control (p<0.001). 4P-PDOT administration at 0.01 and 0.1 mM
concentrations failed to reverse the inhibition occured by 2 mM melatonin application.
Conclusion: Agomelatin and melatonin have significant inhibitory effects on rat bladder
smooth muscle contractions in vitro. These effects are dose-dependent. However, 4P-PDOT does not
have a significant effect on rat bladder smooth muscle contractions. These results show that the
inhibition of melatonin on bladder contraction is not mediated by melatonin 2 receptor.
Keywords: Agomelatin; Bladder; Melatonin; Rat; 4P-PDOT.