Bronkoalveolar lavaj sıvısında hücre sayımının farklı metotlar arasında karşılaştırılması
Comparison of the different methods for counting cell in the bronchoalveolar lavage fluid
Yazar: OYTUN AYDOĞAN
Danışman: DOÇ. DR. BÜLENT ALTINSOY
Zonguldak Bülent Ecevit Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Göğüs Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2018
Konu: Göğüs Hastalıkları = Chest Diseases
Dizin: Akım sitometrisi = Flow cytometry ; Bronkoalveolar lavaj = Bronchoalveolar lavage ; Bronkoalveolar lavaj sıvısı = Bronchoalveolar lavage fluid ; Göğüs hastalıkları = Thoracic diseases ; Hücre farklılaşması = Cell differentiation ; Mikroskopi = Microscopy ; Mikroskopi-ışık = Microscopy-polarization ; Teşhis = Diagnosis ; Teşhis teknikleri ve prosedürleri = Diagnostic techniques and procedures

Özet:
Amaç: Bronkoalveolar lavaj (BAL) sıvısı diferansiyel hücre paterni, diffüz parankimal akciğer hastalıklarının tanısal yaklaşımında ve ayırıcı tanıları daraltmada kullanılmaktadır. Bu çalışmanın amacı optik mikroskopiye göre daha hızlı ve daha objektif bir yöntem olan akım sitometri (FCM) ile BAL hücresel profilinin elde edilmesi ve sonuçlarının optik mikroskopi ile elde edilenle karşılaştırılarak optik mikroskopi yerine kullanımının uygunluğunu ya da üstünlüklerini belirleyebilmekti.
Gereç ve Yöntem: Araştırma 2017 ve 2018 yılında difüz parankimal akciğer hastalığı nedeni ile tanı amaçlı bronkoalveolar lavaj uygulanan ve BAL sıvıları hem optik mikroskopta hem de FCM cihazında analiz edilen hastalar geriye dönük olarak incelenerek yapıldı.
Bulgular: Wilcoxon işaretli sıra testi ile FCM ve optik mikroskopideki lenfosit ve eozinofil sayıları arasındaki farkların anlamlı olduğu görüldü (sırasıyla p=0.005, p=<0.001). Bununla birlikte hem alveolar makrofajlar hem de nötrofillerde FCM ve optik mikroskopi arasındaki fark anlamlı değildi (sırasıyla p=0.820, p=0.280). Bland-Altman analizi ile akım sitometrinin optik mikroskopi ile karşılaştırıldığında lenfosit sayılarını %34.4 oranında ve yine nötrofil sayısını %14 oranında düşük tahmin ettiğini belirledik. Bununla birlikte alveolar makrofaj popülasyonlarının dağılımı homojendi. Çok değişkenli nokta ve çizgi diyagramları, sayılan eozinofiller hesaba katıldığında eozinofiller için akım sitometri ile optik mikroskopi arasında belirgin bir fark olmadığını gösterdi.
Sonuç: Çalışmamız, uygun klinik şartlar ve ulaşılabilirlik durumunda daha hızlı sonuç veren ve alveolar hücre popülasyonunu daha iyi yansıtabilen FCM nin BAL sıvısının diferansiyel hücre profili analizinde güvenli olarak kullanabileceğini işaret etmektedir.

Anahtar Kelimeler: Bronkoalveolar lavaj, diferansiyel hücre sayımı, optik mikroskopi, akım sitometr

Abstract:
Objectives: Differential cell pattern of bronchoalveolar lavage (BAL) fluid is used in the diagnostic approach of diffuse paranchymal lung diseases and in narrowing the differential diagnoses. The purpose of this study is to obtain the cellular profile of the BAL fluid by flow cytometry which is faster and more objective compared to optical microscopy and to determine the suitability or advantage of using flow microscopy instead of optical microscopy.
Materials and Methods: The study was performed by retrospectively reviewing on patients who underwent bronchoalveolar lavage for diagnostic purpose due to diffuse parenchymal lung disease between 2017 and 2018, and whose BAL fluids were analyzed both in optical microscopy and in flow cytometry device.
Findings: Wilcoxon signed rank test showed significant differences between FCM and optical microscopy in terms of the number of lymphocyte and eosinophil (p=0.005, p=<0,001 respectively). However, the difference between FCM and optical microscopy interms of both the number of alveolar macrophages and the number of neutrophils is not significant (p=0.820, p=<0,280 respectively). With Bland-Altman analysis, we found that flow cytometry predicts the number of lymphocyte by 34.4% and the number of neutrophil by 14% lower, when compared to optical microscopy. However, the distribution of alveolar macrophage populations was homogeneous. Multivariate point and line diagrams show that there is no significant difference between flow cytometry and optical microscopy for eosinophils when eosinophils are considered.
Results: Our study indicates that in the case of appropriate clinical conditions and accessibility, FCM which provides faster results and better reflect the alveolar cell population can be used safely in differential cell profile analysis of BAL fluid.

Keywords: Bronchoalveolar lavage, differential cell count, optical microscopy, flow cytometry