Investigation of the apoptotic effect of vulpinic acid on the melanoma cancer cell
Melanom kanser hücreleri üzerine vulpinik asitin apoptotik etkisinin araştırılması
Yazar: SEVCAN YANGIN
Danışman: PROF. DR. EMİNE SÜMER ARAS
Ankara Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Biyoteknoloji = Biotechnology

Özet:
Melanom kanseri, deri kanserleri arasında en ölümcül olan alt tipdir. Melanom kanseri 
geleneksel tedavi yöntemlerine karŞı direnç göstermektedir ve bunun için anti-proliferatif 
aktiviteye sahip toksik etkisi olmayan terapötik ajanların tedavi de kullanılmasına ihtiyaç 
duyulmaktadır. Liken sekonder metabolitlerinden biri olan vulpinik asit'in anti-proliferatif etkisi 
daha önceki çalıŞmalarla belirlenmiŞtir. Tez kapsamında gerçekleŞtirilen vulpinik asit'in A-375 
melanom hücre hattı ve insan epidermal melanosit hücresi üzerinde anti-proliferatif ve apoptotik 
etkisinin belirlendiği ilk çalıŞmadır. Vulpinik asit'in A-375 melanom ve melanosit hücre 
hattında anti-proliferatif etkisinin değerlendirilmesinden sonra spektofotometrik yöntemlerle 
Kaspaz-3 aktivitesi belirlenmiŞtir. Apoptotik etkinin hücresel boyutta araŞtırılmasından sonra 
mRNA boyutunda gen ifade seviyelerinin araŞtırılması için qRT-PCR analizi yapılmıŞtır. Elde 
edilen sonuçlarla vulpinik asit uygulaması sonucunda A-375 melanom hücre hattı için IC50 
değeri 125 μM, melanosit hücre hattı için IC50 değeri 25 μM hesaplanmıŞtır. Apoptotik etkinin 
belirlenmesi analizleri sonucunda vulpinik asitin'in A-375 melanom hücre hattında hücre ölüm 
yollarından apoptozun birçok farklı yolağını etkilediği aynı zamanda otofaji ile de iliŞkili 
olduğu belirlenmiŞtir. Tez kapsamında elde edilen verilere göre vulpinik asit'in ilaç adayı 
molekülü olarak deri kanseri tedavisinde alternatif bir doğal bileŞik olarak topikal ve 
transdermal yolla kullanılması için ileri araŞtırmalara önemli bir adım oluŞturmuŞtur.

Abstract:
Melanoma cancer is the deadliest subtype of skin cancers. Melanoma cancer is resistant to 
traditional treatment methods and there is a need for the use of non-toxic therapeutic agents with 
anti-proliferative activity. The anti-proliferative effect of vulpinic acid, one of the secondary 
metabolites of lichen, has been determined in previous studies. This is the first study in which 
the anti-proliferative and apoptotic effect of vulpinic acid on the A-375 melanoma cell and 
human epidermal melanocyte cell was evaluated within the scope of the thesis. After evaluating 
the anti-proliferative effect of vulpinic acid in A-375 melanoma and melanocyte cell line, 
Caspase-3 activity was determined by spectrophotometric methods. After investigating the 
apoptotic effect at the cellular level, qRT-PCR analysis was performed to investigate the gene 
expression levels in mRNA level. As a result of vulpinic acid application, the IC50 value was 
calculated as 125 μM for the A-375 melanoma cell and 25 μM for the melanocyte cell. As a 
result of the analysis of the apoptotic effect, it was determined that vulpinic acid affects many 
different pathways of apoptosis in A-375 melanoma cells and is also associated with autophagy. 
According to the data obtained within the scope of the thesis, it has been an important step in 
further research for the use of vulpinic acid as a drug candidate molecule as an alternative 
natural compound in the treatment of skin cancer for topical and transdermal purposes.