Adriamisin ilişkili deneysel nefrotik sendrom modelinde oktreotidin serbest oksijen radikalleri aracılığıyla böbrek patolojisi üzerine olan etkisi
The effect of octreotide on adriamycin induced experimental nephrotic syndrome model on renal pathology through oxygen free radicals
Yazar: SİBEL ÇAVDAR
Danışman: PROF. DR. SONER DUMAN
Ege Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2014
Konu: Nefroloji = Nephrology
Dizin: Doksorubisin = Doxorubicin ; Nefrotik sendrom = Nephrotic syndrome ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Oktreotid = Octreotide ; Serbest radikaller = Free radicals

Özet:
Amaç: Nefrotik sendrom (NS) oluşum nedeni tam olarak aydınlatılamamış, ancak
serbest oksijen radikalleri (ROS) ve antioksidan koruyucu mekanizmalar arası
dengesizliğin patogenezde önemli olduğu düşünülmektedir. Somatostatinler vücutta
doğal olarak bulunan ve birçok fizyolojik fonksiyonun düzenlenmesinde rol alan
nöropeptidlerdir. Bir somatostatin analoğu olan oktreotidinin (OCT) oksidatif organ
hasarında faydalı antioksidan etkileri bildirilmiştir.
Bu çalışmanın amacı adriamisin (ADR) ile oluşturulan deneysel NS modelinde,
etyopatogenezde yer alan ROS üzerine OCT'nin etkisini araştırmak ve yeni tedavi
seçenekleri ortaya sunmaktır.
Yöntem: Yirmi dört adet non-üremik wistar albino erkek sıçan 3 gruba ayrıldı.
Başlangıç günü (0. Gün): Kontrol grubuna %0.9 NaCl 2 cc (im); Nefrotik sendrom
grubuna Adriamisin 5mg/kg (iv); Nefrotik sendrom tedavi grubuna (ADR+OCT)
Adriamisin 5mg/kg (iv) ve Oktreotid 200 mcg/kg (im) uygulandı.
Gruplar 21 günün sonunda 24 saatlik idrar örneği toplandıktan sonra
intrakardiyak ponksiyonla kan örnekleri alınarak sakrifiye edildi. Kan kreatinin düzeyi
ve 24 saatlik idrar örneklerinden proteinüri düzeyleri ölçüldü. Böbreklerden birisi
histolojik değerlendirme için % 10 formalinle sabitlendi, diğeri doku enzim düzeyleri
çalışılmak üzere saklandı. Lipid peroksidasyon ürünleri ve antioksidan enzim düzeyleri
böbrek dokusundan ve plazmadan çalışıldı. Eritrosit içi ve doku katalaz, Tiobarbitürik
asit reaktif substans (TBARS) düzeyleri bakıldı. Histolojik olarak hematoksilen-eosin
boyası uygulandı. Örnekler grup bilgisi olmadan aynı patolog tarafından inflamasyon,
rejenerasyon ve dejenerasyon açısından semikantitatif olarak değerlendirildi.
İstatistiki değerlendirmede nonparametrik testler (Kruskall Wallis, Man Witney
U testi) kullanıldı. P< 0.05 anlamlı kabul edildi.
Bulgular: İdrar protein atılımı NS grubunda kontrol grubuna göre istatiksel olarak
anlamlı daha yüksek, tedavi grubunda NS grubuna göre istatiksel olarak anlamlı daha
düşük bulunmuştur. Plazma kreatinin değerleri açısından, NS grubunda ve tedavi
grubunda kontrol grubuna göre istatiksel anlamlı bir fark yoktu. Kreatinin düzeyleri her
3 grupta da benzerdir. Eritrosit içi katalaz ve TBARs değerlerinde 3 grup için de anlamlı
bir farklılık yoktur. Böbrek dokusunda TBARs, NS grubunda kontrol grubuna göre
artmış, tedavi grubunda NS grubuna göre azalmıştı. Ancak bu fark istatiksel olarak
anlamlı değildi. Böbrek dokusu katalaz düzeyi NS grubunda kontrol grubuna göre
istatiksel anlamlı olarak azalmış, tedavi grubunda NS grubuna göre istatiksel anlamlı
artmış saptandı. Böbreğin histolojik olarak değerlendirilmesinde tubul ve interstisyel
yapılarda 3 grup arasında anlamlı fark saptanmadı. Glomerüler patoloji skoru, NS
grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak artmış, tedavi grubunda NS grubuna göre
anlamlı olarak azalmıştır.
Çıkarsama: Adriamisine bağlı oluşan NS' de doku antioksidan kapasitesinin anlamlı
olarak azalması histolojik olarak glomeruler patoloji ile birliktelik göstermektedir.
Oktreotid tedavisi böbrek dokusu antioksidan düzeylerini ve histolojisini kısmen
düzeltmektedir. Eritrosit içi ROS düzeyleri bu tedaviden daha az etkilenmektedir. Bu
alanda OCT yeni bir tedavi seçeneği olabilir.

Abstract:
Objective: The nephrotic syndrome (NS) has not been fully clarified, but the free
oxygen radicals (ROS) and the antioxidant protective mechanisms thought to be
important in the pathogenesis. Somatostatins are found as neuropeptide structures
naturally in the body and involved in the regulation of many physiological functions.
Octreotid (OCT) which is a somatostatin analogue has been reported having beneficial
antioxidant effects on oxidative organ damage.
The aim of this study was to investigate the effect of OCT on ROS which take place in
the ethyopathogenesis of NS, in the experimental NS model induced by adriamycin, and
to provide new treatment options.
Methods: Twenty-four non-uremic Wistar albino male rats weighing 200-250 grams
were divided into 3 groups. At the beginning (Day 0): Control group, 0.9% NaCl 2 cc
(im); Nephrotic syndrome group: Adriamycin 5mg/kg (iv), Nephrotic syndrome
treatment group (ADR + OCT): Adriamycin 5mg/kg (iv) and Octreotide 200 mcg/kg
(im) was administered.
At the end of 21 days: 24-hour urine sample collected and rats were sacrificed after the
intracardiac puncture by taking blood samples. Creatinine and protein levels were
measured in 24-hour urine samples. One of the kidneys fixed by 5% formalin for
histological evaluation and the other is reserved for analyzing tissue enzyme levels.
Lipid peroxidation and antioxidant enzyme levels were studied in renal tissue and
plasma. Erythrocyte and tissue catalase, thiobarbituric acid reactive substance (TBARS)
were measured. Histologically, hematoxylin-eosin (HαE) dye was applied.
Cross-sections were evaluated semi-quantitatively for inflammation, regeneration and
degeneration by the same pathologist blindly.
Statistical evaluation, nonparametric tests (Kruskal Wallis, Man Whitney U test). P
<0.05 was considered as significant.
Results: Urinary protein excretion of NS group was significantly higher than control
group and when it was compared with treatment group, urinary protein excretion was
significantly lower in the treatment group. Serum creatinin levels were similar between
3 groups. There was no significant difference between 3groups in terms of CAT and
TBARs measured in the erithrocytes. Renal tissue TBARs level was higher in NS group
compared with control group and it was lower in the treatment group compared with
NS group. But it has no statistical significance. Renal tissue CAT level was lowest in
NS group, and it was significantly lower than the control group. In treatment group
CAT level significantly increased compared with NS group. In terms of renal histology,
tubuler and interstitial evaluation were similar between 3 groups. Glomerular pathology
score was significantly higher in NS group compared with control group and it was
significantly decreased in treatment group compared with NS group.
Discussion: Adriamycin-induced NS in the tissue antioxidant capacity is associated
with a significant reduction in the histological glomerular pathology. Octreotide
treatment partially improves renal tissue antioxidant levels and histology. ROS levels in
red blood cells less affected by this treatment. OCT may be a new treatment option in
this area.