The effect of ankaferd blood stopper on damage caused in vascular structures of rats given cadmium
Kadmiyum verilen sıçanların damar yapılarında oluşan hasara karşı ankaferd blood stoper'n etkisi
Yazar: NALAN SÜNBÜLCÜ
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ İBRAHİM AYDIN CANDAN
Alanya Alaaddin Keykubat Üniversitesi / Lisansüstü Eğitim Enstitüsü / Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine
Dizin: Ankaferd kanama durdurucu = Ankaferd bloodStopper ; Kadmiyum = Cadmium ; Kan damarları = Blood vessels ; Sıçanlar = Rats ; Toksisite = Toxicity

Özet:
Amaç: Çalışmamızda sıçanlarda kadmiyum (Cd) toksititesinin damarlarda oluşturduğu hasara karşı Ankaferd Blood Stoper (ABS)'ın etkisini göstermeyi amaçladık.
Materyal ve Metod: Çalışmamızda kiloları 350-450 gr aralığında, toplam 32 tane Wistar Albino cinsi erkek sıçan kullanıldı. Her grupta 8 sıçan olacak şekilde (n=8) Kontrol, Cd, ABS, Cd+ABS grupları oluşturuldu.Kontrol grubuna 0,5 ml serum fizyolojik, Cd grubuna 0,5 ml CdCl2, ABS grubuna 0,5ml ABS, Cd+ABS grubuna 0,5 ml CdCl2+ABS intraperitonel (ip) yoldan uygulandı. 6 saat sonra sıçanlar anestezi altında sakrifiye edilerek histopatolojik çalışmalar için damar dokuları ve biyokimyasal analizler için kanları alındı.Histolojik doku takipleri yapılıp histokimyasal ve immunohistokimyasal boyamalar gerçekleştirildi. 
Bulgular:Çalışmamızın histopatolojik incelemeleri sonucunda kontrol grubuna aitsıçanların aort dokusunda herhangi bir histopatolojik bulguya rastlanılmamıştır. Kontrol grubuna benzer şekilde ABS grubunda da histopatolojik bulgulara çok az rastlanmış ve sadece damar yapılarında hemoraji ve mononüklear hücre infiltrasyonu artışı gözlemlenmiştir. Cd verilen grubun aort dokularının incelenmesi neticesinde mononüklear hücre infiltrasyonu, endotel hücre hasarı, damarlarda konjesyon ve hemoraji, düz kaslarda ve elastik liflerde hasarlanma tespit edilmiş ve kontrol ve ABS grubuna göre anlamlı olduğu görülmüştür (p<0,005). Cd+ABS verilen grubun preparatlarının incelenmesi sonucunda Cd grubuna kıyasla mononüklear hücre infiltrasyonu, endotel hücre hasarı, düz kaslarda ve elastik liflerde hasarlanma bulgularında anlamlı azalmalar gözlemlenmiştir.
İmmunohistokimyasal incelemeler sonucunda kontrol ve ABS gruplarına ait boyamaların incelenmesi sonucunda eNOS, TNF-α ve E-kaderin boyamalarının negatif olduğu tespit edildi ve görüntülendi.Cd grubuna ait aort dokularının eNOS, TNF-α ve E-kaderin antikorlarıyla boyanması neticesinde kontrol ve ABS gruplarından istatistiksel açıdan farklı olduğu ve sentezlerinin yüksek olduğu tespit edildi (p<0,005). Özellikle eNOS ve TNF-α sentezlerinin oldukça arttığı gözlemlendi.Cd+ABS grubuna ait preparatların immünohistokimyasal boyamalarının değerlendirilmesi ve incelenmesi neticesinde Cd grubuna göre eNOS, TNF-α ve E-kaderin sentezlerinin azaldığı tespit edildi. eNOS ve TNF-α düzeylerinin istatiksel açıdan da anlamlı derecede azaldığı tespit edildi (p<0,005).
Çalışmamızın biyokimyasal analiz kısmında oksidatif stres parametreleri çalışılmıştır.Cd grubundaki ratların kanlarındaki total tiyol (TT) ve native tiyol (NT) değerleri kontrol grubuna göre anlamlı olarak azaldı (sırasıyla p=0,002 ve p=0,001). ABS ile tedavi edilen gruplarda TT ve NT değerleri Cd grubuna göre anlamlı olarak arttı (sırasıyla p=0.041 ve p=0.020).Sadece ABS uygulanan grupta TT ve NT değerleri diğer gruplara göre anlamlı olarak arttı (tümü için p≤0,001).Grupların karşılaştırılmasında disülfid bağ seviyelerinde önemli bir değişiklik olmadığı saptanmıştır.
Sonuç:Sonuç olarak Cd'a bağlı toksisitenin sıçanların damar dokusunda hasarlar meydana getirdiği, ABS'nin dokuları bu hasardan koruduğunu gösterdik. Çalışmamızın Cd toksititesine maruz kalan bireylerin korunmasına katkı sağlayacağını umut ediyoruz.
Anahtar kelimeler: Kadmiyum, Ankaferd Blood Stoper, Damar, Toksisite.

Abstract:
Objective: In our study, we aimed to show the effect of Ankaferd Blood Stopper (ABS) against the damage caused by cadmium (Cd) toxicity in the vessels, especially in the endothelial tissue in rats.
Materials and Methods: In our study, a total of 32 Wistar Albino male rats weighing 350-450 gr were used. Control, Cd, ABS, Cadmium+ABS groups were formed with 8 rats in each group (n=8). Ml of physiological saline, 0.5 ml of CdCl2 to the Cd group, 0.5 ml of ABS to the ABS group, and 0.5 ml of CdCl2+ABS to the Cd+ABS group were administered intraperitoneally. After 6 hours, the rats were sacrificed under anesthesia and their vascular tissues were taken for histopathological studies and their blood was taken for biochemical analysis. Histological tissue follow-ups were performed and histochemical and immunohistochemical stainings were performed.
Results: As a result of histopathological examinations at the end of our study, no histopathological findings were found in the aortic tissue of the rats belonging to the control group. Similar to the control group, histopathological findings were very rare in the ABS group, and hemorrhage and increased mononuclear cell infiltration were observed only in the vascular structures. As a result of the examination of the aortic tissues of the Cd group, mononuclear cell infiltration, endothelial cell damage, congestion and hemorrhage in the vessels, damage to smooth muscles and elastic fibers were detected and it was found to be significantly compared to the control and ABS groups (p<0.005). As a result of the examination of the preparations of the Cd+ABS group, significant reductions were observed in the findings of mononuclear cell infiltration, endothelial cell damage, damage to smooth muscles and elastic fibers compared to the Cd group.
As a result of immunohistochemical examinations, eNOS, TNF-α and E-cadherin stainings were found to be negative as a result of the stainings of the control and ABS groups. It was determined that they were different in terms of terms and their synthesis was high (p<0.005). It was observed that especially eNOS and TNF-α synthases increased considerably. As a result of the evaluation and examination of the immunohistochemical staining of the preparations belonging to the Cd+ABS group, it was determined that the eNOS, TNF-α and E-cadherin synthases were decreased compared to the Cd group. eNOS and TNF-α levels were also found to be statistically significantly decreased (p<0.005).
In the biochemical analysis part of our study, oxidative stress parameters were studied. The TT and NT values in the blood of the rats in the CD group were significantly decreased compared to the control group (p=0.002 and p=0.001, respectively). Total thiol (TT) and native thiol (NT) values increased significantly in the ABS treated groups compared to the Cd group (p=0.041 and p=0.020, respectively). It was determined that there was no significant change in disulfide bond levels.

Conclusion: As a result, we showed that Cd causes damage to the vascular tissue of rats, and ABS protects the tissues from this damage. We hope that our study will contribute to the treatment or protection of individuals exposed to Cd toxicity.
Keywords: Cadmium, Ankaferd Blood Stopper, Endothelium, Toxicicity.