Plağa bağlı gingivitis, kronik periodontitis ve agresif periodontitisli bireylerde dişeti dokusunda nükleer faktör-kappa B (NF-KB) ve inhibitör kappa B(IKB) seviyelerinin immunohistokimyasal ve stereolojik olarak incelenmesi ve değerlendirilmesi
Immunohistochemical and stereologic analysis and evaluation of nuclear factor-­kappa B (NF-KB) and inhibitor kappa B(IKB) levels in gingival tissue of the patients with plaque-­induced gingivitis, chronic periodontitis and aggressive periodontitis
Yazar: TANER ARABACI
Danışman: PROF. DR. YASİN ÇİÇEK
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Periodontoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2009
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry

Özet:
Bu çalışmanın amacı; plağa bağlı gingivitisli, kronik periodontitisli ve agresif
periodontitisli bireylerin gingival dokularında Nükleer Faktör kappa B (NF-­B)
proteinlerinden p50 ve p65 alt ünitelerinin nükleer ve sitoplazmik ekspresyonunun
ve NF-­?B inhibitörü olan İnhibitör kappa B?nin (IB) sitoplazmik ekspresyonunun
immunohistokimyasal ve stereolojik olarak araştırılmasıdır.
Çalışmaya Atatürk Üniversitesi Diş Hekimliği Fakültesine değişik nedenlerle
müracaat eden toplam 62 birey dahil edildi. Çalışma protokolü gereği bireyler 4
gruba ayrıldı. Periodontal olarak sağlıklı 15 birey kontrol grubu olan I. Grubu, plağa
bağlı gingivitisli 16 hasta II. Grubu, kronik periodontitisli 16 hasta III. Grubu ve
agresif periodontitisli 15 hasta IV. Grubu oluşturdu. Araştırma kapsamına alınan
bireylerin periodontal durumlarını belirlemek amacıyla klinik ve radyografik
incelemeler yapıldı. Çalışmamıza katılan tüm bireylere çalışmanın yöntem ve amacı
hakkında sözlü ve yazılı bilgi verildikten sonra katılım için imzalı onayları alındı.
Tüm bireylerden lokal anestezi altında dişlerin bukkal dişeti bölgesinden biyopsi ile
1?2 mm diş eti dokusu alındı. Alınan dişeti dokuları hemen % 10luk nötral
tamponlu formalin içerisine atıldı ve sonra immunohistokimyasal boyamaya
gönderildi. Elde edilen kesitler stereo mikroskop altında incelendi ve stereolojik
yöntem kullanılarak boyanan hücre sayısal yoğunluk değerleri hesaplandı. Grupların
birbirleri ile karşılaştırmalarında Tek Yönlü Varyans Analizi ve Çoklu
karşılaştırmalı en küçük önemli fark (LSD) testi (p=0,05) kullanıldı.
Bu çalışmadan elde edilen bulgulara göre, periodontal olarak hastalıklı gruplarda
kontrol grubuna kıyasla p65 ile sitoplazmik pozitif boyama gösteren hücre sayısal
yoğunluk değerlerinde istatistiksel olarak anlamlı bir artış gözlenmiştir (p0,02).
p65 ile nükleus boyama gösteren hücre sayısal yoğunluk değerleri açısından ise
kontrol ile plağa bağlı gingivitis grupları ve kronik ile agresif periodontitis grupları
arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulunmazken (p>0,05), diğer grup
karşılaştırmaları arasında istatistiksel anlamlı farklılıklar bulundu (p?0,02). p50
sitoplazmik boyanan gösteren hücre sayısal yoğunluk değerleri açısından kontrol ile
kronik periodontitis grupları ve plağa bağlı gingivitis ile kronik periodontitis
grupları arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlıydı (p0,03). Fakat diğer gruplar
arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulunamadı (p>0,05). Yine p50 ile
nükleus boyama gösteren hücre sayısal yoğunluk değerleri açısından kontrol ile
plağa bağlı gingivitis grupları ve plağa bağlı gingivitis ile kronik periodontitis
grupları arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulunmazken (p>0,05), diğer
gruplar arasında anlamlı farklılıklar bulundu (p?0,02). IkB ile yapılan boyamaların
stereolojik değerlendirmelerinde ise sitoplazmik pozitif boyanan hücre sayısal
yoğunluk değerleri açısından periodontal olarak hastalıklı gruplarda kontrol
grubuyla kıyasladığımızda istatistiksel olarak anlamlı bir artış bulunmuştur
(p0,001).
Sonuç olarak, periodontal olarak hastalıklı bireylerde sağlıklı bireylerle
kıyasladığımızda NF-­?B?nin hem sitoplazmada hem de çekirdekte daha fazla aktive
olduğu görülmüştür. Bu artış plağa bağlı gingivitisli hastalarda daha az iken
periodontitisli gruptaki hastalarda daha fazla görülmüştür. Bu çalışma
periodontitisin ilerleyişini önlemek için NF?B inhibisyonunda kullanılmak üzere
spesifik inhibitörlerin üretileceği gelecek stratejilere temel oluşturmaktadır.

Abstract:
The purpose of this study was immunohistochemical and stereologic investigation
of nuclear and cytoplasmic expression of the p50 and p65 subunits of Nuclear
Factor kappa B (NF-­B) and the cytoplasmic expression of the Inhibitor kappa B
(IB), the inhibitor of NF-­?B, in the gingival tissues of subjects with plaque-­induced
gingivitis, chronic periodontitis and aggressive periodontitis.
The subject population was consisted of 62 volunteers which were attended
University of Ataturk, Faculty of Dentistry for different causes. According to the
study protocol the subjects were divided to four groups. Group I was consisted of 15
periodontally healthy subjects, whereas 16 subjects with plaque-­induced gingivitis
were classified as Group II, 16 subjects with chronic periodontitis were classified as
Group III and 15 subjects with aggressive periodontitis were classified as Group IV.
Clinic and radiographic examinations were performed to determine the periodontal
conditions of each individual consisted to the study. After the protocol of
investigation was explained to each individual the signature approval of them was
received.
1 to 2 mm of gingival tissue was taken via biopsy from the buccal side of the
teeth of all individuals. Tissues were immediately transferred to 10% neutral
buffered formalin and were then sent to immunohistochemical staining. The
obtained sections were examined under stereomicroscope and the numerical density
values of the stained cells were computed using stereologic method.
One-­way analysis of variance (ANOVA) and Multiple Range least significant
difference (LSD) was used for intergroup comparison (p=0,05).
According to the findings of this study, statistically significant increasing was
found in numerical density values of the cytoplasmic positive stained cells of p65 in
periodontally diseased groups compared to control group (p?0,02). There was no
statistically significant difference between control and plaque-­induced gingivitis
groups, and between chronic and aggressive periodontitis groups according to
numerical density values of the nuclear stained cells of p65 (p>0,05), whereas there
were statistically significant differences between the other group comparisons
(p?0,02). Statistically significant differences were found between control and
chronic periodontitis groups, and between plaque-­induced gingivitis and chronic
periodontitis groups in numerical density values of the cytoplasmic stained p50
(p?0,03). But no statistically significant difference was found among the other
groups (p>0,05). No statistically significant difference was found between control
and plaque-­induced gingivitis groups, and between plaque-­induced gingivitis and
chronic periodontitis groups in numerical density values of the stained cells of
nuclear p50 (p>0,05), whereas statistically significant differences were found among
the other groups (p0,02). On the stereologic evaluation of the numerical density
values of the cytoplasmic positive stained cells with IkB, statistically significant
increasing was found in periodontally diseased groups when compared to control
group (p0,001).
In conclusion, it was shown that NF-­?B was highly activated in both cytoplasma
and nucleus in periodontally diseased groups when compared to healthy group. This
increasing was shown highly in periodontitis groups (chronic and aggressive), while
it was less in plaque-­induced group. The present study forms the basis for future strategies that will generate specific inhibitors using for NF-­?B inhibition to prevent
the progressing of periodontitis.