Trinitrobenzensülfonik asit ile oluşturulan deneysel kolit modelinde quercetin kullanımının otofajik sürece etkisi
The effects of quercetin on autophgy in experimentalcolitis induced by trinitrobenzene sulfonic acid
Yazar: ZEYNEP MERCAN
Danışman: DOÇ. DR. YETER TOPÇU TARLADAÇALIŞIR
Trakya Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Morfoloji (Histoloji ve Embriyoloji) Ana Bilim Dalı / Histoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Kolit = Colitis ; Kuersetin = Quercetin ; Otofaji = Autophagy ; Sıçanlar = Rats ; Trinitrobenzensulfonik asit = Trinitrobenzenesulfonic acid ; İnflamatuar bağırsak hastalıkları = Inflammatory bowel diseases

Özet:
Ülseratif kolit ve Crohn hastalığını kapsayan inflamatuvar bağırsak hastalıkları (İBH);
son yıllarda dünya çapında insidansı gittikçe artan, kronik ve tekrarlayan inflamatuvar bir
bozukluktur. Bu çalışmada, 2,4,6 trinitrobenzen sülfonik asit (TNBS) ile kolit oluşturulmuş
şıçanların kolon dokusunda, quercetin kullanımının otofajik süreç üzerindeki etkisi ile kolon
dokusunda meydana gelen histopatolojik hasarları önleyici/azaltıcı rolü araştırıldı.
Bu amaçla 24 adet Wistar Albino sıçandan rastgele 3 grup (Kontrol, kolit ve
kolit+quercetin) oluşturuldu. Kolit indüksiyonu; 24 saat öncesinde aç bırakılmış kolit ve
kolit+quercetin grubu deneklere, 0,25 ml %30 luk etanol içerisinde hazırlanmış, 25 mg
TNBS'in intrarektal yoldan verilmesiyle gerçekleştirildi. Kolit indüksiyonundan hemen sonra
başlayarak 7 gün boyunca, kolit+quercetin grubu deneklerine, intragastrik yoldan 100
mg/kg/gün quercetin verildi. Deneklerin günlük olarak vücut ağırlığı ve dışkı takibi yapıldı.
Işık mikroskobik incelemeler (mikroskobik skor, Goblet hücre sayısı, mast hücre sayısı,
morfometrik ölçümler) ile kolon histopatolojisinin yanı sıra, mukozal Beclin-1 ve p62
immünoreaktivitesi ile de otofaji değerlendirildi.
Deneklere TNBS'in rektal yoldan uygulanması; şiddetli diyare ile birlikte belirgin kilo
kaybı ile kendini gösteren kolit gelişimine neden oldu. Histopatolojik olarak kolon dokusunda
gözlenen; yaygın inflamatuvar hücre infiltrasyonu ile birlikte transmural inflamasyon, yer yer
kanama alanları, yüzey epitelinde kayıp ve bozulmalar, Goblet hücre sayısında azalma,
kriptlerde yapısal değişiklikler ve kript kaybı ile birlikte atlamalı olarak seyreden mukozal
ülserasyon ve erozyon nedeniyle, kolit grubunda yüksek mikroskobik hasar skoru tespit edildi.Ayrıca, baskılanmış otofaji nedeni ile mukozal Beclin-1 immünoreaktivitesinde azalma, p62
immünoreaktivitesinde artış gözlendi. Quercetin tedavisi, kolon dokusunda ortaya çıkan
histopatolojik ve otofajik değişiklikleri önemli ölçüde önledi.
Bu çalışmanın bulguları; quercetinin, TNBS ile indüklenen kolite bağlı olarak ortaya
çıkan otofajik ve inflamatuvar değişiklikleri düzenlemek suretiyle, İBH gelişimini önlemede
faydalı olabileceğini göstermektedir.

Abstract:
Inflammatory bowel diseases (IBD) including ulcerative colitis and Crohn's disease, is
a chronic and recurrent inflammatory disorder of the digestive tract and the incidence of IBD
is increasing worldwide. In this study, the effect of quercetin on the autophagic process and its
role in preventing / reducing histopathological damage in the colon tissue of rats treated with
2,4,6 trinitrobenzene sulfonic acid (TNBS) were investigated.
Twenty-four Wistar albino rats divided from randomly 3 groups (control, colitis and
colitis + quercetin). For the colitis induction, TNBS (25 mg) was prepared in 0.25 ml of 30%
ethanol and then intrarectally was administered to fasted colitis and colitis + quercetin group of
animals for 24 hours. Beginning immediately after the induction of colitis, intragastrically, 100
mg/kg per day quercetin was given for 7 days. Following colitis induction, all rats were
monitored daily for body weight and stool consistency. At the end of the experiment, colon
tissues were removed and evaluated the colon histopathology by light microscopic examination
(microscopic score, Goblet cell count, mast cell count, morphometric measurements), and the
autophagy by immunohistochemically mucosal Beclin-1 and p62.
Rectal administration of TNBS to rats was caused severe diarrhea accompanied by
marked weight loss. Histopathologically; transmural inflammation with diffuse inflammatory
cell infiltration, occasional hemorrhagic areas, loss and deterioration of surface epithelium,
decrease in number of Goblet cells, crypt distortion, crypt loss and patch-like ulceration were
observed in colon of colitic rats. As a result, high microscopic damage score was determined in colitis group. As indicator of suppressed autophagy, we also shown that a decrease in mucosal
Beclin-1 immunoreactivity and an increase in p62 immunoreactivity. Quercetin treatment
significantly prevented histopathological and autophagic changes in colon tissue of TNBSinduced
colitic rats.
The findings of this study suggested that quercetin may be useful in preventing and
treatment of IBD by regulating autophagic and inflammatory changes in colon.