Kudret narı (Momordica charantia)'nın in vitro yara iyileşme sürecine etkisinin incelenmesi
Examination of the effect of pomegranate (Momordica charantia) on the wound healing process
Yazar: RAMAZAN OĞUZHAN NALDÖVEN
Danışman: DOÇ. DR. ASLI SEMİZ
Pamukkale Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2024
Konu: Mühendislik Bilimleri = Engineering Sciences

Özet:
Yaralar, bazı travmalar neticesinde ya da çeşitli ajanların hasarı sonucu 
oluşan doku, organ veya organizmaların olağan durumunu yitirmesidir. 
Yaraların iyileşme aşaması ise, birçok sistemi barındıran hücresel, 
biyokimyasal ve fizyolojik olayların rol aldığı biyolojik bir süreçtir. Biyolojik 
süreçlerde çok sayıda biyolojik ajan ve sistem görev alır. İyileşme sürecinde 
bozulan yaralı bölgenin eski haline en yakın şekilde geri dönmesi ve sürecin 
hızlı gerçekleşmesi önemlidir. Sürece Momordica charantia ekstresi etki
edebilir. Ürün genellikle tropikal bölgelerde yerel halk tarafından yara 
iyileşmesi de dahil olmak üzere çok sayıda hastalığın tedavisinde 
kullanılmaktadır. Bu çalışmada M. charantia bitki ekstresinin yara iyileşme 
sürecine etkisi fare fibroblast hücre hattı (3T3-L1) kullanılarak araştırılmıştır. 
Bileşiğin 3T3-L1 hücre hattı üzerinde EC25 ve EC50 dozları sırasıyla 1,43 
mg/ml ve 3,82 mg/ml olarak belirlendi. Belirlenen dozlarda M. charantia bitki 
ekstresi hücrelere uygulandı ve hücrelerden total RNA'lar izole edildi. Her gen 
için qRT-PCR analizi gerçekleştirildi. Bileşiğin KGF-1, COL1 ve EGFR 
ekspresyon seviyesi üzerindeki etkisinin analizi gerçekleştirildi. Bu genlerden 
EGFR için M. charantia bitki ekstresinde mRNA ekspresyon düzeylerinde
EC25 (1,43 mg/ml) dozunda 5,32 kat artma görülürken, EC50 (3,82 mg/ml)
dozunda 7,15 kat artma görüldü. Yara iyileşmesi ile ilgili bir diğer gen olan 
KGF-1 için M. charantia bitki ekstresinde mRNA ekspresyon düzeyleri analiz 
edildiğinde EC25 (1,43 mg/ml) dozunda 1,75 kat artış görüldü. Analizlerin 
devamında ise KGF-1 geni için EC50 (3,82 mg/ml) dozunda 3,09 kat artış 
görüldü. Bir diğer gen olan COL-1 için yapılan analizlerde EC25 (1,43 mg/ml)
dozunda 1,89 kat artış görüldü. Aynı gen için EC50 (3,82 mg/ml) dozunda 5,22 
kat artış görüldü. Hücre migrasyonu için çizik yara tahlili yapılarak, yara 
alanlarındaki yüzdesel değişimler analiz edildi. Elde edilen verilerle 3T3-L1 
hücre hattı ile gerçekleştirilen çalışmalar neticesinde M. charantia bitki 
ekstresinin yara iyileşmesine katkı sağlayabileceğini söyleyebiliriz. İlerleyen 
süreçte hayvan deneyi çalışmaları ile M. charantia bitki ekstresinin yara 
iyileşmesi ile ilgili işleyiş mekanizması daha net sonuçlar ile ortaya 
konulabilir.

Abstract:
Wounds are the loss of normal state of tissues, organs or organisms that 
occur as a result of some trauma or damage by various agents. The healing 
phase of wounds is a biological process involving many systems, in which 
cellular, biochemical and physiological events take part. Many biological 
agents and systems are involved in biological processes. It is important that the 
injured area returns to its original state as closely as possible during the healing 
process and that the process occurs quickly. Momordica charantia extract may 
affect the process. The product is often used by local people in tropical regions 
to treat numerous diseases, including wound healing. In this study, the effect of 
M. charantia plant extract on the wound healing process was investigated using 
the mouse fibroblast cell line (3T3-L1). The compound's EC25 and EC50 
doses on the 3T3-L1 cell line were determined to be 1,43 mg/ml and 3,82
mg/ml, respectively. The M. charantia plant extract was applied to the cells at 
the specified doses, and total RNA was isolated from the cells. The qRT-PCR 
analysis was performed for each gene. Analysis of the effect of the compound 
on the expression level of KGF-1, COL1 and EGFR was performed. For the 
EGFR gene among these genes, 5,32 fold increase in mRNA expression levels 
was observed in M. charantia plant extract at the EC25 (1,43 mg/ml) dose, 
while 7,15 fold increase was seen at the EC50 (3,82 mg/ml) dose. When 
mRNA expression levels were analyzed in M. charantia plant extract for KGF1, 
another gene related to wound healing, a 1.75-fold increase was observed at 
the EC25 (1,43 mg/ml) dose. In the continuation of the analysis, a 3,09 fold
increase was observed in the EC50 (3,82 mg/ml) dose for the KGF-1 gene.
Analyzes for another gene, COL-1, showed 1,89 fold increase in the EC25 
(1,43 mg/ml) dose. For the same gene, 5,22 fold increase was seen at the EC50 
(3,82 mg/ml) dose. Cell migration was assessed using a scratch wound assay, 
and the percentage changes in the wound area were analyzed. As a result of the 
data obtained and the studies carried out with the 3T3-L1 cell line, we can say 
that M. charantia plant extract can contribute to wound healing. In times to 
come, animal studies could provide more precise insights into the mechanism 
by which M. charantia plant extract influences wound healing.