Tiroid kanseri tanısında TSH reseptör ve E-kaderin gen metilasyonunun sitolojik ve histopatolojik olarak araştırılması
Investigating the role of TSH receptor and E-cadherine gene methylation status in diagnosis of thyroid malignancies
Yazar: KİNYAS KARTAL
Danışman: PROF. DR. Z. VOLKAN KAYNAROĞLU
Hacettepe Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2013
Konu: Genel Cerrahi = General Surgery
Dizin: Cadherinler = Cadherins ; Genler = Genes ; Histopatoloji = Histopathology ; Metilasyon = Methylation ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Reseptörler-tiroid hormon = Receptors-thyroid hormone ; Sitolojik teknikler = Cytological technics ; Tiroid bezi = Thyroid gland ; Tiroid hormonları = Thyroid hormones ; Tiroid neoplazmları = Thyroid neoplasms

Özet:
GİRİŞ: Tiroid kanserlerini de içeren birçok kanser türünün onkogenezinde gen
metilasyonlarının önemli bir rol oynadığı bilinmektedir. Bu çalışmada tiroid spesifik
genler arasında bulunan Tiroid Uyarıcı Horman reseptörü (TSHr) ve Epitelyal
Kaderin (EKAD) reseptör genlerinde metilasyon varlığının tiroid kanseri
gelişimindeki yeri araştırılmış ve tiroid nodüllerinde benign-malign ayrımının
güçleştiği durumlarda TSHr ve EKAD gen metilasyonlarının klinik öneminin
saptanması hedeflenmiştir.
MATERYAL METOD: 2007- 2011 yılları arasında tedavi gören 4355 nodüler
guatr tanısı bulunan hasta içerisinden 76 hasta seçilmiş; ince iğne aspirasyon
biyopsisi ile elde edilen sitoloji örneklerinden deoksiribonükleik asit (DNA) izole
edilmiştir. İzole edilen DNA?lardan metilasyon spesifik polimerize zincir tepkimesi
(M- PCR) yöntemi ile TSHr ve EKAD genlerinin promotör bölgelerindeki
metilasyon varlığı araştırılmıştır. Ayrıca metilasyon varlığının cinsiyet, yaş, nodül
boyutu ve kan tiroglobulin düzeyi ile olan ilişkisi de incelenmiştir.
BULGULAR: Çalışma sonucunda TSHr metilasyon oranı papiller tiroid kanserli
hastalarda %87.5, önemi belirsiz atipiye sahip hastalarda %58,1, foliküler neoplazi
şüphesi bulunan hastalarda %41,7 iken benign nodüler guatrlı hastalarda ise %47,1
olarak saptanmıştır (p<0,05).
SONUÇ: Metilasyon varlığının kanserli hasta grubunda yüksek saptanmış olması
TSHr metilasyonun bir kanser belirteci olarak kullanılabileceği yönündeki hipotezi
desteklemektedir. Mevcut bulgular ışığında TSHr metilasyon varlığının önemi
belirsiz atipi ve foliküler neoplazi şüphesine sahip hasta gruplarında, benign- malign
ayrımı açısından belirleyici bir faktör olmadığı sonucuna varılmıştır. Ayrıca
metilasyon varlığının yaş, cinsiyet, nodül boyutu ve kan tiroglobulin düzeyi ile
anlamlı bir istatistiksel bağının olmadığı saptanmıştır. Kötü prognoza sahip olduğu
bilinen hastaların tümünde TSHr metilasyon varlığının saptanması prognostik bir
faktör olarak TSHr metilasyonun araştırılabileceğini göstermiştir. Hasta gruplarının
hiç birisinde EKAD gen reseptör metilasyonu ile ilgili istatistiksel ve matematiksel
olarak anlamlı sonuç alınamamıştır. EKAD geni ile ilgili teknik yetersizlik nedeniyle
anlamlı sonuç alınamamıştır. Bu çalışma literatürde TSHr metilasyon varlığını
sitolojik olarak araştıran tek çalışmadır.

Abstract:
INTRODUCTION: It is determined by the researchers that tumor supresor genes
are found in methylated forms in the cancer onkogenesis of thyroid malignancies.
TSH receptor and ECAD receptor genes can be classifed as thyroid specific genes. In
this experimental study the methylation status of these thyroid specific genes and
their clinical use in the differantiation of benign and malign thyroid nodules are
investigated.
MATERIAL METHOD: Of the 4355 patients with nodular goiter, who have been
treated between 2007 and 2011, 76 patients were selected. Deoxyribonucleic acids
(DNA) were isolated from the cytology specimens obtained by fine needle aspiration
biyopsy. After isolation of the DNAs, the methylation status of TSHr and ECAD
receptor promoter regions were investigated by methylation specific polymerase
chain reaction (M- PCR). Also the relation between methylation status of the genes
and gender, age, size of the nodules and blood thyroglobulin levels of the patients
were studied.
RESULTS: The ratio of methylated TSHr was found 87,5% of patients with
papillary thyroid cancer, 58,1% of patients with have cytological features of atypia of
undetermined significance, 41,7% of patients with suspected cytological features for
a follicular neoplasm and 47,1% of patients with benign nodular guatr (p< 0.05).
CONCLUSION: The ratio of TSHr methylation in papillary thyroid carcinoma
group adduced that TSHr methylation status can be utilised as a tumor marker for
papillary cancer. It is shown that the methylation status of TSHr genes have no role
in determining the malignant potential for the nodules which are cytologically
classified as atypia of undetermined significance and for the nodules which are
cytologically found to be suspicious for a follicular neoplasm. There was no
statistical discrepancy between TSHr methylation status and gender, age, size of the
nodules and blood thyroglobulin levels of the patients. TSHr of patients who with
poor prognostic factors for papillary thyroid cancer (9 patient) were all in methylated
form. This study shows that more clinical studies are needed for searching TSHr
metyhlation as a prognostic factor. No significant results were determined about the
ECAD receptor gene methylation. Acording to our knowledge this study is the first
try in the medical literature which searches the TSHr methylation status from
cytologically derived DNA.