Kolorektal adenomların malign transformasyonunda tümör mikroçevresinin ve mikroçevre ile ilişkili faktörlerden CD204, MFAP5 ve TİP 11 kollajen ekspresyonunun önemi
The importance of the tumor microenvironment and the microenvironment-related factors CD204, MFAP5 and TYPE 11 collagen expression in the malign transformation of colorectal adenomas
Yazar: EVRİM EREL AKTÜRK
Danışman: DOÇ. DR. HÜSNİYE ESRA PAŞAOĞLU
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / Bağcılar Eğitim ve Araştırma Hastanesi / Tıbbi Patoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2021
Konu: Patoloji = Pathology
Dizin: Adenomlar = Adenoma ; Gen ifadesi = Gene expression ; Kollajen = Collagen ; Kolorektal neoplazmlar = Colorectal neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Tümör mikroçevresi = Tumor microenvironment

Özet:
Amaç: Kolorektal adenomların kansere dönüşüm sürecinde tümör mikroçevresinin rolünü ortaya koymak için mikroçevrenin önemli komponentlerinden olan tümör ilişkili makrofajlarda CD204'ün, kanser ilişkili fibroblastlarda COL11A1'in, kanser ilişkili fibroblastlarda ve ekstrasellüler matrikste MFAP5'in ve kolorektal poliplerde P53'ün ekspresyon durumunu araştırmayı amaçladık.
Gereç ve yöntem: 50 düşük dereceli displazili adenom (DDDA), 50 yüksek dereceli displazili adenom (YDDA), 29 intramukozal karsinom içeren adenom ve 25 malign polip (MP) olgusu çalışmaya dahil edildi. MFAP5 ile fibroblastlar ve ekstrasellüler matrikste gözlenen immünreaktivite komplet boyanma, fokal boyanma ve boyanma kaybı olarak 3 grupta değerlendirildi. CD204 ile en yoğun boyanmanın olduğu 1 mm²'lik alanda CD204 pozitif makrofaj sayısı belirlendi. COL11A1 ile 20'lik objektifte en yoğun boyanma alanında pozitif boyanma gösteren fibroblastların yüzdesi belirlendi. P53 ile %25 ve daha fazla hücrenin nükleer boyandığı polipler P53 pozitif olarak değerlendirildi.
Bulgular: MP grubunda MFAP5 boyanma kaybı daha sık görülürken YDDA grubunda boyanma kaybı olmaması durumu daha sık saptanmıştır (p<0,001). MFAP5 ile psödoinvazyon görülen adenomların hiçbirinde boyanma kaybı saptanmamıştır. MP grubunun diğer 3 gruptan daha yüksek iCD204 pozitif makrofaj sayısına sahip olduğu saptanmıştır (p'ler<0,001). DDDA grubunun diğer 3 gruptan daha düşük pCD204 pozitif makrofaj sayısına sahip olduğu (p'ler<0,001) ayrıca MP grubunun YDDA grubundan anlamlı ölçüde yüksek pCD204 pozitif makrofaj sayısına sahip olduğu saptanmıştır (p<0,001). Tüm olgular değerlendirildiğinde iCD204 pozitif makrofaj sayısı ile polip boyutu arasında istatistiksel olarak anlamlı, zayıf, aynı yönde bir korelasyon olduğu, pCD204 pozitif makrofaj sayısı ile polip boyutu arasında istatistiksel olarak anlamlı, zayıf, aynı yönde bir korelasyon olduğu saptanmıştır (sırasıyla r=0,218; p=0,007, r=0,391; p<0,001). Tüm olgular değerlendirildiğinde iCD204 pozitif makrofaj sayısı ile P53 ekspresyon durumu arasında, pCD204 pozitif makrofaj sayısı ile P53 ekspresyon durumu arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki saptanmıştır (sırasıyla p=0,003, p<0,001). Çalışma grupları COL11A1 boyanması açısından değerlendirildiğinde istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır (p=0,405). Çalışma grupları P53 immünreaktivitesi açısından değerlendirildiğinde istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmış olup DDDA grubundan MP grubuna doğru gidildikçe p53 pozitifliğinin arttığı saptanmıştır (p<0,001).
Sonuç: Yapılacak geniş kapsamlı çalışmalar ile desteklendiği takdirde MFAP5, kolorektal adenomlarda tanı zorluğuna neden olan psödoinvazyonun gerçek invazyondan ayrımında kullanılabilecek bir biyobelirteç olabilir. CD204 pozitif makrofajlar kolorektal adenomun karsinoma progresyonunda önemli bir role sahip olabilir ve tümör gelişiminin inhibe edilmesinde etkili olabilecek M2 fenotip makrofajların M1 fenotip makrofajlara dönüştürülmesini hedefleyen terapötik yaklaşımlarda kullanılabilir.

Abstract:
Aim: In this study, we aimed to investigate the expression status of CD204 in tumor-associated macrophages, COL11A1 in cancer-associated fibroblasts, MFAP5 in cancer-associated fibroblasts and extracellular matrix, which all three are important components of the microenvironment, and P53 in colorectal polyps to reveal the role of tumor microenvironment in the transformation process of colorectal adenomas into cancer.
Materials and methods: 50 colorectal adenomas with low-grade dysplasia (ALGD), 50 colorectal adenomas with high-grade dysplasia (AHGD), 29 adenomas with intramucosal carcinoma and 25 malignant polyps (MP) cases were included in the study. The immunoreactivity observed in fibroblasts and extracellular matrix with MFAP5 was evaluated in 3 groups as complete staining, focal staining and staining loss. The CD204 positive macrophage number was determined in the 1 mm² area where the most intense staining with CD204 was. The percentage of fibroblasts that showed positive staining in the most intense staining area was determined with COL11A1 in a 20x lens. The polyps that having cells that show 25% or more nuclear staining with P53 have been assessed as P53 positive.
Results: In MP group, while the MFAP5 loss of staining is observed more frequently, in AHGD group the state of no loss of staining has been detected more frequently (p<0,001). No staining loss was detected in any of the adenomas with pseudoinvasion with MFAP5. It was determined that the MP group had higher iCD204 positive macrophage count than the other 3 groups (p-values<0,001). It was determined that the ALGD group had lower pCD204 positive macrophage count than the other 3 groups (p-values<0,001), and the MP group had a significantly higher pCD204 positive macrophage count than the AHGD group (p<0,001). When all cases were evaluated, it was determined that there was a statistically significant, weak, positive correlation between iCD204 positive macrophage count and polyp size, and a statistically significant, weak, positive correlation between pCD204 positive macrophage count and polyp size (r=0,218; p=0,007, r=0,391; p<0,001 respectively). When all cases were evaluated, a statistically significant correlation was found between iCD204 positive macrophage count and P53 expression status, and between pCD204 positive macrophage count and P53 expression status (p=0,003, p<0,001 respectively). When the study groups were evaluated in terms of COL11A1 staining, no a statistically significant difference was found (p=0,405). When the study groups were evaluated in terms of p53 immunoreactivity, a statistically significant difference was found, and p53 positivity increased as one went from the ALGD group to the MP group (p<0,001).
Conclusion: If supported by extensive studies, MFAP5 may be a biomarker that can be used to differentiate pseudoinvasion, which causes diagnostic difficulties in colorectal adenomas, from true invasion. CD204 positive macrophages may have an important role in the progression of colorectal adenoma to carcinoma and can be used in therapeutic approaches targeting the conversion of M2 phenotype macrophages to M1 phenotype macrophages, which may be effective in inhibiting tumor growth.