Rutaekarpinin metastatik prostat kanseri hücrelerinde potansiyel terapötik etkisinin incelenmesi
Investigation of the potential therapeutic effect of rutaekarpin on metastatic prostate cancer cell lines
Yazar: MEHMET ABDULKADİR ŞEKEROĞLU
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ ERDEM ÇOKLUK
Sakarya Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Hücre dizisi = Cell line ; Neoplazm metastazları = Neoplasm metastasis ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Prostat = Prostate ; Prostat neoplazmları = Prostatic neoplasms ; Ruteakarpin = Rutaecarpine ; Terapötik yöntemler = Therapeutics

Özet:
GİRİŞ VE AMAÇ: Prostat kanseri Dünya'da ve Türkiye'de giderek artan insidansı ile halk sağlığını tehdit eden malignitelerden birisidir. Özellikle metastatik prostat kanseri birden fazla kemoterapotik ilacın kombine kullanımına ek olarak radyoterapi ve destek tedavilerine rağmen erkeklerde önemli bir ölüm nedenidir. Bu nedenle metastatik prostat kanseri hastalarında daha etkin yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesine ihtiyaç duyulmaktadır. Mevcut tez çalışmasında, hem COX-2'yi hem de topoizomerazları inhibe ederek antikanserojen etki gösterdiği bilinen ruteakarpinin prostat kanseri tedavisinde sitotoksik ve apoptotik etkisinin incelenmesi ve potansiyel terapötik etkisinin araştırılması amaçlanmıştır.
GEREÇ VE YÖNTEM: Rutekarpinin PC-3 insan metastatik prostat kanseri hücre hattı hücrelerinde terapötik etkisi canlılık (WST-1), apoptoz (annexin V), hücre döngüsü, AO boyama ve kaspas-3 (ELISA) analizleri ile değerlendirilmiştir.
BULGULAR: Rutekarpininfarklı konsantrasyonlarının (5, 10, 20 ve 40 μM) PC-3 hücrelerine 24 ve 48 saat muamelesi sonrası canlılık yüzdeleri kontrol grubu ile karşılaştırıldığında 48 saat boyunca 20 ve 40 μM rutaekarpin uygulamasının en etkin şekilde hücre canlılığını azalttığı belirlenmiştir (p<0.05). 48 saat muamele sonunda artan doza bağlı olarak erken ve geç apoptoz oranın kontrol grubuna göre anlamlı bir şekilde arttığı hem Annexin V, hem de AO boyama ile gözlenmiştir (p<0.05). Ayrıca ELISA analizi ile rueakarpinin artan konsantrasyonuna bağlı olarak PC-3 hücrelerinde aktif kaspaz-3 miktarını anlamlı bir şekilde arttığı da tespit edilmiştir (p<0.05). 
SONUÇ: Bu çalışmada ruteakarpinin, PC-3 hücreleri üzerinde sitotoksik ve apoptotik etkiye sahip olduğu, potansiyel terapötik bir ajan olabileceği gösterilmiştir. Yapılacak invivo çalışmalarla anti-tümör etkinin saptanması durumunda; ruteakarpinin tek başına ya da rutin kemoterapötik ajanlarla kombine kullanımının tedaviyi destekleyebileceği kanısındayız. 
Anahtar kelimeler:  Apoptoz, Canlılık Analizi, Metastatik Prostat Kanseri, PC-3 Hücre Hattı, Ruteakarpin

Abstract:
Investigation of the Potential Therapeutic Effect of Rutaekarpin on Metastatic Prostate Cancer Cell Lines
INTRODUCTION AND OBJECTIVE: Prostate cancer with an increased incidence in the world and Turkey is one of the public health-threatening malignancies. In particular, metastatic prostate cancer is an important cause of death in men despite the combined use of more than one chemotherapeutic drug in addition to radiotherapy and supportive treatments. Therefore, there is a need to develop more effective new treatment strategies in metastatic prostate cancer patients. In this study, it was aimed to investigate the cytotoxic and apoptotic effect of ruteakarpine, which is known to have an anticarcinogenic effect by inhibiting both COX-2 and topoisomerases, and to investigate its potential therapeutic effect.
MATERIAL AND METHOD: The therapeutic effect of rutecarpine on the PC-3 human metastatic prostate cancer cell line was evaluated by viability (WST-1), apoptosis (annexin V), cell cycle, AO staining and caspas-3 (ELISA) assays.
RESULTS: When compared to the control group, the viability percentages of different concentrations of rutecarpine (5, 10, 20 and 40 μM) after 24 and 48 hours treatment of PC-3 cells, it was determined that administration of 20 and 40 μM rutaecarpine for 48 hours most effectively decreased cell viability (p <0.05) . After 48 hours of treatment, it was observed that early and late apoptosis rate increased significantly compared to the control group due to the increasing dose by both Annexin V analysis and AO staining (p <0.05). In addition, the amount of active caspase-3 increased significantly in PC-3 cells due to the increasing concentration of ruteakarpine by ELISA analysis (p <0.05).
CONCLUSION: In this study, it has been shown that ruteakarpine has a cytotoxic and apoptotic effect on PC-3 cells and may be a potential therapeutic agent. In case an anti-tumor effect is detected by in vivo studies; We believe that the use of ruteakarpine alone or in combination with routine chemotherapeutic agents may support the treatment.
Keywords: Apoptosis, Metastatic Prostate Cancer, PC-3 Cell Line, Rutecarpine, Viability Analysis,