Deneysel olarak geliştirilmiş MTA materyallerinin balb c3 fare fibroblastlarının canlılık, apoptoz ve proliferasyon oranı üzerindeki etkilerinin değerlendirilmesi
Effects of experimental mta materials on viability, apoptosis rate and proliferation rate of balb C3 mouse fibroblasts
Yazar: AYŞEGÜL ÖZCAN
Danışman: PROF. DR. RÜSTEM KEMAL SÜBAY
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Endodonti Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2015
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry
Dizin: Akım sitometrisi = Flow cytometry ; Apoptozis = Apoptosis ; Biyouyumluluk = Biocompatibility ; Fareler = Mice ; Fibroblastlar = Fibroblasts ; Hücre kültürü = Cell culture ; Kök kanal dolgu materyalleri = Root canal filling materials ; Kök kanal tedavisi = Root canal therapy ; Sitotoksisite = Cytotoxicity

Özet:
Çalışmanın amacı, deneysel olarak geliştirilmiş MTA materyallerinin (DMTA-1 bizmut oksitli ve DMTA-2; kalsiyum tungstenli), piyasada satılan bir MTA (ProRoot MTA) ve ZOE içerikli bir materyal (IRM) ile karşılaştırmalı olarak sitotoksisitenin değerlendirilmesidir. 
Çalışmada, 3T3 fare fibroblast hücreleri kullanılmıştır. Hücreler üzerinde, doğrudan temas yöntemiyle 24, 48 ve 72 saatlerde, canlılık ve apoptoz belirtimi yapılmıştır. Hücrelerin çoğalma paterni, histokimyasal olarak belirlenmiş ve istatistiksel olarak değerlendirilmiştir (p <0.05). Çalışmada, çoğalma paterni, canlılık ve apoptoz tayinleri ayrıca flow sitometrik analizle de incelenmiştir.
IRM grubunda, S fazında boyanan hücre saptanmamıştır. 24-saat sonunda çoğalma paterni açısından, gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı fark bulunmamıştır (p=0.25, p>0.05). 48 saatte, ikili karşılaştırmalarda Kontrol grubu, DMTA-1 ve DMTA-2 arasında istatiksel olarak fark bulunmazken (p>0.05); ProRoot MTA, diğer 3 gruba kıyasla anlamlı derecede iyi sonuçlar göstermiştir (p<0.05). 72 saatte, DMTA-1 ve DMTA-2, Kontrol grubuna kıyasla anlamlı derecede daha iyi sonuçlar göstermiştir (p<0.001). ProRoot ve Kontrol arasında anlamlı fark görülmemiştir.
Flow sitometrik çoğalma paterni analizinde, 24 saatte S fazındaki hücrelerin yüzdeleri sırasıyla %12.90, %12.98, %11.59 ve %15.54'tür (Kontrol, ProRoot MTA, DMTA-1, DMTA-2). 48 saatte %20.85, %20.43, %20.22, %20.37; 72 saatte %23.95, %24.91, %16.13, %11.75'tir. 
Canlılık 24 saatte %67.03, %30.38, %54.83, %37.71 ve IRM için %3.55 ve apoptoz ise %20.44, %33.79, %27.04, %38.87, %35.49'dur. 48 saatte canlılık; %53.15, %33.95, %26.05, %18.82, %0.27 ve apoptoz %35.85, %45.56, %45.04, %39.02, %27.67'dir. 72 saatte %27.95, %13.52, %17.31, %16.27, %0.20 ve apoptoz %41.46, %59.54, %58.37, %50.13 ve %41.78'dir. 
Sonuç olarak, IRM'nin sitotoksik olduğu, D-MTA materyallerinin hücre proliferasyonunu olumsuz etkilemediği ve ProRoot MTA ile benzer sitotoksik özelliklere sahip olduğu görülmüştür. 

Anahtar Kelimeler: Mineral trikoksit agregat, biyouyumluluk, retrograt dolgu materyali, hücre kültürü, flow sitometri, sitotoksisite.

Abstract:
The purpose of this study was to evaluate cytotoxicity of experimental MTAs (DMTA-1, DMTA-2), compared with ProRoot MTA and IRM.
Materials were tested in set states. The growing pattern, viability and apoptosis rate of 3T3 fibroblast cells were assessed after 24, 48 and 72 hours by flow cytometry. The growing pattern of cells was also determined immunohistologically and analysed statistically.  
In IRM group, there was no stained cell in S phase. At 24 hours, there was no statistically difference betwen groups (p>0.05). At 48 hours, there was no statistically significant difference between DMTA-1 and DMTA-2 (p>0.05); ProRoot MTA showed significantly better results when compared with the other groups (p<0.05). At 72 hours, Experimental MTAs showed significantly better results comparing with Control (p<0.001). No statistically difference was seen between ProRoot and Control. 
In flow cytometric analysis, percentage of cells in S phase were %12.90, %12.98, %11.59, %15.54 at 24 hours (Control, ProRoot MTA, DMTA-1, DMTA-2); were %20.85, %20.43, %20.22, %20.37 at 48 hours; were  %23.95, %24.91, %16.13, %11.75 at 72 hours. Viability rates were %67.03, %30.38, %54.83, %37.71 and for IRM %3.55 at 24 hours; were %53.15, %33.95, %26.05, %18.82, %0.27 at 48 hours; were %27.95, %13.52, %17.31, %16.27, %0.20 at 72 hours. Apoptosis rates were %20.44, %33.79, %27.04, %38.87, %35.49 at 24 hours; were %35.85, %45.56, %45.04, %39.02, %27.67 at 48 hours; were %41.46, %59.54, %58.37, %50.13, %41.78 at 72 hours. 
IRM exerts severe cytotoxic effects. Experimental MTAs have no negative effects on cell proliferation and showed cytotoxic effects similar to ProRoot MTA. 

Key Words: Mineral trioxide aggregate, biocompability, retrograde filling material, cell culture, flow cytometry, cytotoxicity.