İnflamatuar bağırsak hastalığının hücresel ve hümoral immünite yönünden değerlendirilmesi
The evaluation of relationship inflammatory bowel diseases with cellular and humoral immunity
Yazar: PINAR GÜZELAY
Danışman: PROF.DR. SELİM BADUR
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2006
Konu: Allerji ve İmmünoloji = Allergy and Immunology ; Gastroenteroloji = Gastroenterology

Özet:
Çalısmamızda, gastrointestinal sistemin kronik inflamasyonlu hastalıkları olan Crohn hastalıgı(CH) ve ülseratif kolit (ÜK)'in hücresel ve hümoral immünitesi degerlendirilmis, bu hastalıkların tanısında,kolonoskopinin yerine CH'da ASCA ve eksokrin pankreas, ÜK'de p-ANCA ve intestinal goblet hücreantikoru gibi serolojik testlerin kullanılabilirligi incelenmistir. Bu amaçla gastroenteroloji endoskopilaboratuarına basvuran 11'i CH, 17'si ÜK ve 11'i kontrol (BH'lıgı olmayan fakat kolonoskopi yapılmasıgereken) olmak üzere toplam 39 hastadan kan ve doku örnekleri alınmıstır. Hümoral immünitenindegerlendirilmesi için, periferal-anti nötrofil sitoplazmik antikor, anti endomisyum, anti retikülin,pankreatik antikor, intestinal goblet hücre antikoru testleri için indirekt immünfloresan yöntemi, antigliadin IgA/IgG, ASCA IgA/IgG, anti doku transglutaminaz IgA/IgG testleri için ELISA yöntemikullanılmıstır. ASCA IgA/IgG antikorları için ise ELISA ve immünfloresan yöntemleri birlikte kullanılmısve bu testlerin duyarlık ve özgüllükleri karsılastırılmıstır. Periferik kan ve bagırsak dokusunda infiltreolmus lenfositler hücresel immünite yönünden flow sitometri yöntemi ile degerlendirilmistir.CH'da ASCA %81,8 (p=0,003), ÜK'de %58,8 (p=0,001) istatistiksel olarak anlamlı bulunmustur.CH'da 1 hastada p-ANCA, ÜK'de 4 hastada ASCA pozitif bulunmustur. PAB ve GHA sonuçlarındaistatistiksel olarak anlamlılık gözlenmemistir. Bu durumun hasta sayısının az olmasıyla iliskili oldugudüsünülmüstür. Kontrol ve hasta grubunda Çölyak hastalıgının tanısında kullanılan anti-gliadin IgA/IgG,anti-retikülin ve anti-endomisyum IgA negatif bulunmustur. Anti doku transglutaminaz IgA ÜK'de %35,3(p=0,033) istatistiksel olarak anlamlı bulunmustur. ASCA IgA/IgG antikorları ELISA ve immünfloresanyöntemiyle karsılastırıldıgında ASCA IgA için özgüllük %96,6, duyarlık %44,4, ppV %71,4; ASCA IgGiçin ise özgüllük %93,1, duyarlık %50, ppV %71,4 olarak bulunmustur.Periferik kan lenfositlerinde CD19 ve CD40, ÜK ve kontrol grubunda karsılastırıldıgındasırasıyla 5,12±9,77; 12,0±6,39 (p=0,001), 6,29±3,57; 12,73±5,16 (p=0,0001) istatistiksel olarak anlamlıbulunmustur. CD8+CD57+'ligi CH ve ÜK karsılastırıldıgında sırasıyla 11,09±7,99; 21,11±8,98 (p=0,01)istatistiksel olarak anlamlı bulunmustur.nfiltre olmus lenfositlerde ise CD11b ve CD5 ÜK ve CH'da karsılastırıldıgında ise sırasıyla32,24±30,55; 61,73±31,39 (p=0,016), 32,06±20,42; 11,0±12,17 (p=0,001). HLA-DR ÜK ve kontrol grubukarsılastırıldıgında 14,71±9,89; 4,82±4,73 (p=0,004) istatistiksel olarak anlamlı bulunmustur. TCR CHve kontrol grubu karsılastırıldıgında 8,09±6,77; 24,36±22,38 (p=0,015), ÜK ve kontrol grubukarsılastırıldıgında 7,47±5,09; 24,36±22,38 (p=0,005) istatistiksel olarak anlamlı bulunmustur.Ayrıca CD5+CD19+'ligi Student T testi ile degerlendirildiginde ÜK ve CH'da 5,23±3,05 ve2,90±2,35 (p=0,042), ÜK ve kontrol grubu karsılastırıldıgında 5,23±3,05 ve 2,90±2,38 (p=0,042) olarakanlamlı bulunmustur.infiltre lenfositlerde CD5+CD19+ 'ligi ÜK, CH ve kontrol grubunda ANCA'sı (+) olanlar veanca'sı (-) olanlarla karsılastırıldıgında sırasıyla 6,54±2,34; 2,89±2,39 (p=0,000) istatistiksel olarakanlamlıbulunmustur.Günümüzde BH tanısını koyduracak, CH ve ÜK'i kesin olarak birbirinden ayrımını saglayacakaltın standart test yoktur. Gastrointestinal dokudaki BH ile benzer klinik tablolar olusturan baskahastalıklardan (infeksiyöz, iskemik, neoplastik) dolayı tanı gecikebilmektedir. Bu testlerin endoskopik vehistolojik bulgulara yardımcı olarak tanıyı kolaylastırabilecegi düsünülmektedir.

Abstract:
In our study was evaluated cellular and humoral immunity of Crohn?s disease (CD) and ulcerativecolitis (UC), which are chronic inflammatory diseases of gastrointestinal tract and beside colonoscopy theavailability ratio of serological tests, which are like ASCA and exocrine pancreas in CD and p-ANCA andintestinal goblet cell antibody in UC was studied. For this aim blood and tissue samples were taken from 39patients, who applied to gastrointestinal endoscopy laboratory. 11 patients were CD, 17 patients UC and 11patients control group (they had no inflammatory bowel diseases but they had to be made colonoscopy).For the evaluation of humoral immunity p-ANCA, anti endomysial, anti reticulin, pancreatic antibody(PAB) were used, for the tests of intestinal goblet cell antibody (IGCA) indirect immunofluorescent methodwas used, for the tests of anti gliadin IgA/IgG and anti tissue transglutaminase IgA/IgG ELISA method wasused. ELISA and immunofluorescent methods were used together for the antibody of ASCA IgA/IgG andthe sensitivity and specificity of these methods were compared. Of cellular immunity?s aspect lymphocytes,which were in peripheral blood and infiltrated in intestinal tissue were evaluated by flowcytometry.ASCA was 81.8% (p=0.003) in CD and 58.8% (p=0.001) in UC, these results were found statisticallysignificant. p-ANCA was positive in 1 patient of CD, ASCA was positive in 4 patiens of UC. Statisticalsignificant results weren?t observed in PAB and IGCA. This result was thought to be caused by not enoughnumber of patients. Anti-gliadin IgA/IgG, anti-reticulin and anti-endomysial, which are used in thediagnosis of coeliac disease, were found negative in control and patient group. Anti tissue transglutaminaseIgA was 35.3% (p=0.033) in UC, this result was found statistically significant. ASCA IgA/IgG antibodieswere compared to ELISA and immunofluorescent methods. And sensitivity 44.4%, specificity 96.6%, ppV80% were found for ASCA IgA. Sensitivity 50%, specificity 93.1%, ppV 71.4% were found for ASCAIgG.As CD19 and CD40 in peripheral blood lymphocytes were compared in UC and in control group5.12±9.77, 12.0±6.39 (p=0.001), 6.29±3.57, 12.73±5.16 (p=0,0001) were found respectively and alsostatistically significant. As CD8+CD57+ was compared in CD and UC 11.09±7.99, 21.11±8.98 (p=0,01)were found respectively and also statistically significant.As CD11b and CD5 in infiltrated lymphocytes were compared in UC and in control group32.24±30.55, 61.73±31.39 (p=0,016), 32.06±20.42, 11.0±12.17 (p=0,001) were found respectively. AsHLA-DR was compared in UC and in control group 14.71±9.89, 4.82±4.73 (p=0,004) were foundstatistically significant. As TCR was compared in CD and in control group, and in UC and in controlgroup, 8.09±6.77, 24.36±22.38 (p=0.015), 7.47±5.09, 24.36±22.38 (p=0.005) were found respectively andstatistically significant. Further, as CD5+CD19+was compared in UC and in CD, in UC and in controlgroup, 5.26±3.05, 2.90±2.35 (p=0.042), 7.47±5.09, 24.36±22.38 (p=0.005) were found respectively andstatistically significant. As CD5+CD19+in infiltrated lymphocytes were compared in UC, in CD and incontrol group that are ANCA(+) and ANCA(-), 6.54±2.34, 2.89±2.39 (p= 0.000) were found respectivelyand statistically significant.There is no golden standard test for diagnosis of inflammatory bowel disease, for separation CD fromUC definitively. Some diseases (infectious, ischemic, neoplastic) may have the same clinical symptomslike inflammatory bowel disease and that can cause delay in diagnosis. It is thought that these tests mayhelp in diagnosis beside endoscopic and histological findings.