Melanom hücre hatlarında borik asit uygulamasının tirozinaz enzim aktivitesi üzerine etkisinin incelenmesi
The effect of boric acid on tyrosinase activity in melanoma cell lines
Yazar: ŞERİFE KILIÇ
Danışman: PROF. DR. ÖZEN ÖZENSOY GÜLER
Ankara Yıldırım Beyazıt Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Borik asit = Boric acid ; Enzimler = Enzymes ; Hücre dizisi = Cell line ; Melanom = Melanoma ; Tirozin = Tyrosine

Özet:
Malign melanom; cilt, göz ve saç rengini belirleyen nöral krest kökenli melanin üreten
melanosit hücrelerinin malign tümörü olup görülme sıklığı hızla artış gösteren ve mortalitesi 
yüksek olan bir kanser türüdür. Tirozinaz enzimi (EC.1.14.18.1) melanositlerde melanin 
oluşumundan sorumlu enzim olup melanom kanserinde aktivitesinin arttığı gösterilmiştir.
Tirozinaz enzimi yıllardır melanom teşhisinde biyobelirteç olarak kullanılmaktadır. Tirozinaz 
enziminin inhibitörlerinin melanom hücrelerindeki tirozinaz enzim aktivitesini inhibe etmesiyle
hücrelerin apoptoz yolağına girdiğinin anlaşılması melanom tedavisinde son derece önemli bir 
yaklaşımı beraberinde getirmiştir.
Borik asidin (BA, H3BO3) kanser hücre hatlarında oksidatif strese, hücre büyümesinin 
inhibisyonuna, apoptoza ve hücre morfolojisinde değişikliklere neden olduğu bilinmektedir. Bu 
çalışmanın amacı, SK-MELL-30 ve WM115 melanom hücre hatlarında BA'nın, tirozinaz 
enzim aktivitesi üzerindeki etkisinin araştırılmasıdır.
Söz konusu çalışmamızda SK-MELL-30 ve WM115 hücre hatlarına 2,5-250 mM
arasında 6 farklı konsantrasyonda borik asit uygulanmıştır. L-DOPA tirozinaz enziminin 
substratı olarak kullanılmıştır. Tirozinaz enzim aktivitesi 475 nm dalga boyunda 
spektrofotometrik olarak tespit edilmiştir. BA uygulaması tirozinaz enziminin bilinen en iyi
inhibitörü Kojik asit (KA) ile karşılaştırma yapıldığında ise, WM115 hücre hattında anlamlı 
bir inhibisyon göstermiştir (p=0,046) SK-MELL-30 hücre hattında ise anlamlı bir sonuç elde 
edilememiştir (p=0,085). BA kullanımının tirozinaz enzimi üzerindeki inhibisyon 
mekanizmalarını geniş çapta aydınlatmak için analitik yöntemlerin kullanılması ve 
mekanizmaların açıklığa kavuşturulması bir sonraki deneysel çalışmalarımızın hedefini 
oluşturmuştur.
Anahtar kelimeler: Borik Asit, Kanser, Melanom, Tirozinaz

Abstract:
Malignant melanoma; It is a malignant tumor of melanin-producing melanocyte cells 
originating from the neural crest, which determines skin, eye and hair color, and is a cancer 
type with a rapidly increasing incidence and high mortality.The enzyme tyrosinase 
(EC.1.14.18.1) is the enzyme responsible for the formation of melanin in melanocytes, and its 
activity has been shown to be increased in melanoma cancer. The enzyme tyrosinase has been 
used for years as a biomarker in the diagnosis of melanoma. The finding that cells enter the 
apoptosis pathway by inhibiting the activity of the tyrosinase enzyme in melanoma cells by 
inhibitors of the tyrosinase enzyme brought an extremely important approach to the treatment 
of melanoma.
Boric acid (BA, H3BO3) is known to cause oxidative stress, inhibition of cell growth, 
apoptosis, and changes in cell morphology in cancer cell lines. The aim of this study is to 
investigate the effect of BA on tyrosinase enzyme activity in SK-MELL -30 and WM115 
melanoma cell lines.
In our study, boric acid was applied to SK-MELL -30 and WM115 cell lines at 6 
different concentrations between 2.5-250 mM. It was used as a substrate of the enzyme LDOPA tyrosinase. Tyrosinase enzyme activity was determined spectrophotometrically at a 
wavelength of 475 nm. When comparing the use of BA with kojic acid (KA), the best known 
inhibitor of the tyrosinase enzyme, there was significant inhibition in cell line WM115 
(p=0.046), but no significant result in cell line SK-MELL -30 (p=0.085). The use of analytical 
methods to comprehensively elucidate the inhibition mechanisms of the use of BA on the 
enzyme tyrosinase and the elucidation of the mechanisms were the goal of our next 
experimental studies.