Spektroflorimetrik metotla insan serum albumin proteini ile neohesperidin dihidrokalkon ve maprotilin hidroklorür arasındaki etkileşimlerin incelenmesi
Investigation of the interactions of neohesperidin dihydrochalcone and maprotiline hydrochloride with human serum albumin protein by spectrofluorimetric method
Yazar: BAHAR KANCI BOZOĞLAN
Danışman: DOÇ. DR. SİBEL TUNÇ
Akdeniz Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2012
Konu: Kimya = Chemistry
Dizin: Serum albümin-insan = Serum albumin-human

Özet:
Bu çalışmada, kan plazmasında en fazla miktarda bulunan protein olan insan serum albumin proteini (HSA) ile neohesperidin dihidrokalkon (NHD) antioksidan maddesi ve maprotilin hidroklorür (MHC) ilaç maddesi arasındaki etkileşimler floresans ve dairesel dikroizm spektroskopisi ile incelenmiştir. Floresans ölçümleri, dört farklı sıcaklıkta (15 °C, 25 °C, 37 °C ve 45 °C'de) ve fizyolojik pH değeri olan pH 7,4'te gerçekleştirilmiştir. Floresans ölçümlerinden, HSA ile MHC arasında değil, HSA ile NHD arasında bir etkileşim var olduğu bulunmuştur. NHD'nin HSA proteinine bağlanması prosesi için Stern-Volmer sönümleme sabiti, sönümleme hız sabiti, bağlanma sabiti, bağlanma yeri sayısı ve termodinamik parametre (?H, ?S ve ?G) değerleri hesaplanmıştır.HSA-NHD sisteminin sönümleme mekanizmasında statik sönümleme etkindir. HSA-NHD sisteminin bağlanma sabitlerinin 15 °C, 25 °C, 37 °C ve 45 °C'de sırası ile 4,01x104 M-1, 2,79x104 M-1, 2,11x104 M-1 ve 1,16x104 M-1 olduğu bulunmuştur. Sıcaklıktaki bir artış bağlanma sabiti değerinde bir azalmaya yol açmıştır. Ayrıca, HSA proteini üzerinde bir adet NHD bağlanma yeri vardır. Bağlanma prosesi kendiliğinden gerçekleşmiştir ve ekzotermiktir. Termodinamik parametre değerleri, HSA ve NHD molekülleri arasındaki esas etkileşim kuvvetlerinin hidrojen bağı oluşumu ve van der Waals kuvvetleri olduğunu göstermiştir. Ayrıca; NHD'nin HSA'ya bağlanması, proteinin sekonder yapısında bir değişikliğe neden olmuştur. Dairesel dikroizm analizi, HSA proteinindeki ?-heliks miktarının artan NHD konsantrasyonuyla azaldığını belirtmiştir.

Abstract:
In this study, the interactions of neohesperidin dihydrocalcone (NHD) antioxidant substance and maprotilin hydrochloride (MHC) drug substance with human serum albumin (HSA) protein, the most abundant protein in blood plasma, were investigated by fluorescence and circular dichroism spectroscopy. Fluorescence measurements were carried out at four different temperatures (15 °C, 25 °C, 37 °C and 45 °C) and at physiological pH value of 7.4. It was found from florescence measurements that there was an interaction between HSA and NHD, on the contrary to HSA-MHC system. Stern-Volmer quenching constant, quenching rate constant, binding constant, number of binding site and thermodynamic parameter (?H, ?S and ?G) values were calculated for the binding process of NHD to HSA protein.Static quenching was effective for the quenching mechanism of HSA-NHD system. Binding constants of HSA-NHD system were found to be 4.01x104 M-1, 2.79x104 M-1, 2.11x104 M-1 and 1.16x104 M-1 at 15 °C, 25 °C, 37 °C and 45 °C, respectively. This result indicated that an increase in the temperature led to a decrease in the binding constant value. Furthermore, there was one NHD binding site on HSA protein. Binding process occured spontaneously and was exothermic. Thermodynamic parameter values showed that the main interaction forces between HSA and NHD molecules were the formation of hydrogen bonding and van der Waals forces. In addition, the binding of NHD to HSA caused a change in the secondary structure of protein. Circular dichroism analysis indicated that the amount of ?-helix in HSA protein decreased with increasing NHD concentration.