Akut miyeloid lösemilerin akım sitometri ile karakterizasyonu ve blastlarda endotel kök hücre oranının araştırılması
Characterization of acute myeloid leukemia by current cytometry and investigation of endothelot stem cell rate in blasts
Yazar: SİNAN KÜTÜK
Danışman: PROF. DR. MUSTAFA YAVUZ KÖKER
Erciyes Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / İmmünoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Allerji ve İmmünoloji = Allergy and Immunology
Dizin: Akım sitometrisi = Flow cytometry ; Endotelyal hücreler = Endothelial cells ; Gen ifadesi = Gene expression ; Genler = Genes ; Kök hücreler = Stem cells ; Lösemi-miyeloid-akut = Leukemia-myeloid-acute

Özet:
Endotel kök hücre (EKH) akut myeloid lösemi (AML) hastalarında metastatik olma özelliği ile ilişkili bir prognostik markırdır. Çalışmamızda kemik iliği (Kİ) ve periferik kan örneğinden yapılan akım sitometrik immün-fenotiplendirme ile EKH ve AML blastik hücre ilişkisini araştırdık.
Bu amaçla kemik iliği örneğinde blast hücrelerin oranı > %50 den fazla olan, yeni tanı 24 erişkin AML hastası çalışmaya dâhil edildi. Ayrıca normal kemik iliği olarak blast olmayan 24 örnek kontrol örneği olarak seçildi. AML hasta örneklerinde blastik hücreler kapılanarak 1x106 blast sayımı yapıldı. Blastlar EKH belirteçleri olan CD31, CD133, C144, CD309, CD146 ile işaretlenerek ekspresyon düzeyleri ve hücre sayıları akım sitometri ile ölçüldü. Ayrıca blastlardaki lösemik kök hücre sayısına CD38-, CD34+ hücre sayıları ölçüldü.
Hasta grubunda CD146+, CD144+ EKH sayısı 65.0 (40.0-203.0) kontrol grubunda ise 10.5 (6.3-29.0) olarak bulundu (p<0.001). Hasta grubunda CD309+ EKH sayısı 92.0 (60.0-187.0) kontrol grubunda ise 6.0 (3.0-10.0) olarak bulundu (p<0.001). Hasta grubu CD34+, CD31+, CD146+ EKH sayısı 73.0 (47.0-153.0) iken kontrol grubunda 11.0 (6.3-30.0) olarak bulundu (p<0.001). Hasta örneğinde CD38-, CD34+ lösemik kök hücre sayısı 610 (61,5-1550)  bulundu. Bu değer AML blastların %0.06 sını lösemik kök hücrenin oluşturduğunu gösterdi.
Sonuç olarak çalışmamız ile AML kemik iliği blast örneklerinde %0.06 oranında lösemik kök hücre olduğu ve %0.009 EKH olduğunu anlaşıldı. Bu veriler ışığında AML örneklerinde prognoz izlemi mümkün olabilir.
Anahtar Kelimeler:	CD34, CD133, AML,EKH

Abstract:
Endotelial stem cell (ESC) is a prognostic marker associated with metastasis in patients with acute myeloid leukemia (AML). In our study, we investigated the relationship between and ESC and AML blastic cell from bone marrow (BM) and peripheral blood sample by flow cytometric immunophenotyping.
For this purpose, 24 adult AML patients with a diagnosis of blast cells> 50% in the bone marrow sample were included in the study. In addition, 10 non-blast specimens were selected as normal bone marrow as control samples. 1x106 blast enumeration by flow cytometry were performed by counting blastic cells in AML patient samples. Blasts were labeled with ESC markers CD31, CD133, C144, CD309, CD146 and expression levels and cell numbers were measured by flow cytometry. In addition, CD38-, CD34 + cell counts were measured on the number of leukemic stem cells in blasts.
The number of CD146 +, CD144 + ESCs was 65.0 (40.0-203.0) in the patient group and 10.5 (6.3-29.0) in the control group (p <0.001). The number of CD309 + ESCs was 92.0 (60.0-187.0) in the patient group and 6.0 (3.0-10.0) in the control group (p <0.001). The number of CD34 +, CD31 +, CD146 + ESCs was 73.0 (47.0-153.0) in the patient group and 11.0 (6.3-30.0) in the control group (p <0.001). In the patient sample, the number of CD38-, CD34 + leukemic stem cells was found to be 610 (61.5-1550). This value showed that leukemic stem cells accounted for 0.06% of AML blasts.
As a result, in our study, it was found that 0.06% leukemic stem cells and 0.009% ESCs were found in AML bone marrow blast samples. In the light of these data, prognosis monitoring may be possible in AML samples.
Keywords: CD34, CD133, AML, EKH