Ratlarda sisplatin ile oluşturulan nörotoksisiteye karşı protokateşuik asitin koruyucu etkisinin araştırılması
Investigation of the protective effect of protocatechuic acid against cisplatin-induced neurotoxicity in rats
Yazar: ÖZGE KEREM
Danışman: PROF. DR. HANDAN MERT ; DOÇ. DR. LEYLA MİS
Van Yüzüncü Yıl Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Veteriner Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2020
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Nörotransmitter ajanlar = Neurotransmitter agents ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Protokateşik asit = Protocatechuic acid ; Sisplatin = Cisplatin ; Sıçanlar = Rats ; Toksisite = Toxicity ; Toksisite testleri = Toxicity tests ; İnflamasyon = Inflammation

Özet:
Sisplatin, çeşitli malign tümörlerin tedavisinde yaygın olarak kullanılan kemoterapötik bir ajandır. Bu çalışmanın amacı başlıca antioksidan ve anti-inflamatuar özellikleri bulunan protokateşuik asitin ratlarda sisplatin ile oluşturulan nörotoksisitede beyin üzerindeki potansiyel koruyucu etkilerinin belirlenmesidir. Kırk adet rat dört gruba ayrıldı. 1-Kontrol grubu: 5 hafta boyunca fizyolojik tuzlu su (% 0.9) oral olarak verildi. 2-Protokateşuik asit (PCA) grubu: 5 hafta boyunca protokateşuik asit 100 mg/kg/gün dozunda oral olarak uygulandı. 3-Sisplatin (CIS) grubu: 5 hafta süresince, 2. haftadan itibaren haftada bir kez sisplatin 5 mg / kg/ hafta dozunda i.p. olarak uygulandı. 4-Protokateşuik asit+ Sisplatin (PCA+CIS) grubu: Ratlar 5 hafta boyunca günlük olarak protokateşuik asit oral olarak (100 mg/kg/gün dozunda) ve ilaveten 2. haftadan itibaren haftada bir kez sisplatin i.p. olarak (5 mg / kg/ hafta dozunda) uygulandı. Deneme sonunda dekapitasyon yoluyla sakrifiye edilen hayvanların beyin dokuları kafatasından çıkarıldı ve beyin sagital olarak ikiye bölündü. Bir yarısı histopatolojik incelemeler için, diğer yarısı ise ELISA'da TAC, TOS, TNF-α, IL-6, IL-1β, asetilkolinesteraz, glutamat, GABA, dopamin analizleri için kullanıldı. Alınan antikoagülanlı kanlarda hematolojik parametreler olarak WBC, RBC, hemoglobin ve hematokrit düzeylerine bakıldı. PCA+CIS grubunun CIS grubuna göre TOS (p<0.001), TNF-α (p<0.001), IL-6 (p<0.001), IL-1β (p<0.001), asetilkolinesteraz (p<0.001), glutamat (p<0.01), WBC (p<0.001) düzeylerinin önemle azaldığı, TAC (p<0.001), GABA (p<0.001) seviyelerinin ise istatistiksel olarak önemle yükseldiği saptandı. Bu çalışma ile protokateşuik asit sisplatin kaynaklı nörotoksisiteye karşı beyindeki oksidan/antioksidan durumdaki bozulmayı düzeltti, nöro-inflamasyonu baskıladı, nörotoksisite ile yükselen asetilkolinesteraz aktivitesini düşürdü, nörotransmitterleri kısmen normale döndürdü, artan WBC sayısını azalttı. Histopatolojik incelemelerde CIS grubunda görülen nekroz, PCA+CIS grubunda hiç görülmedi. Sonuçlar, protokateşuik asitin sisplatin ile beraber kullanıldığında terapötik fayda sağlayabileceğini düşündürmektedir.

Abstract:
Cisplatin is a chemotherapeutic agent widely used in the treatment of various malignant tumors. The aim of this study is to determine the potential protective effects of protocathechic acid, which has mainly antioxidant and anti-inflammatory properties, on the brain in neurotoxicity induced by cisplatin in rats. Forty rats were divided into four groups. 1-Control group: Physiological saline (0.9 %) was given orally for 5 weeks. 2- Protocatechuic acid (PCA) group: Protocatechuic acid was administered orally at a dose of 100 mg / kg / day for 5 weeks. 3-Cisplatin (CIS) group: 5 mg / kg / week of cisplatin was administered intraperiteonally once a week starting from the second week for 5 weeks. 4- Protocatechuic acid + Cisplatin (PCA + CIS) group: The rats were given protocatechuic acid orally (at a dose of 100 mg / kg / day) daily for 5 weeks and additionally, cisplatin i.p. (at a dose of 5 mg / kg / week) once a week starting from the second week. At the end of the experiment, the brain tissues of the animals sacrificed by decaptation were removed from the skull and the brain was divided into two as sagittal. One half was used for histopathological examinations and the other half was used for TAC, TOS, TNF-α, IL-6, IL-1β, acetylcholinesterase, glutamate, GABA, dopamine analyzes in ELISA. WBC, RBC, hemoglobin and hematocrit levels were measured as hematological parameters in the blood with anticoagulants. PCA + CIS group compared to CIS group TOS (p <0.001), TNF-α (p <0.001), IL-6 (p <0.001), IL-1β (p <0.001), acetylcholinesterase (p <0.001), glutamate ( p <0.01), WBC (p <0.001) levels decreased significantly, while TAC (p <0.001) and GABA (p <0.001) levels increased statistically significant. With this study, protocatechuic acid corrected the deterioration in the oxidant / antioxidant status in the brain against cisplatin-induced neurotoxicity, suppressed neuro-inflammation, decreased acetylcholinesterase activity, which increased with neurotoxicity, partially normalized neurotransmitters, and decreased the increased WBC count. Necrosis seen in the CIS group in histopathological examinations was never seen in the PCA + CIS group. As conclusion; protocatechuic acid may provide therapeutic benefit when used in conjunction with cisplatin.