Deneysel parkinson fare modelinde oridoninin oksidatif stres parametreleri üzerine etkisi
Effect of oridonin on oxidative stress parameters inexperimental parkinson's mouse model
Yazar: KÜBRA YİĞİT
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ NADİDE ÖZKUL DOĞRU ; DOÇ. DR. SONGÜL ÇERİBAŞI
Gaziantep Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Fizyoloji = Physiology
Dizin: Fareler = Mice ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; MPTP = MPTP ; Nörodejeneratif hastalıklar = Neurodegenerative diseases ; Nükleer faktör-E2-ilişkili faktör 2 = Nuclear factor-E2-related factor 2 ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Oridonin = Oridonin ; Parkinson hastalığı = Parkinson disease

Özet:
Dopaminerjik nöronların ilerleyici kaybıyla oluşan Parkinson hastalığı dünyada en sık
görülen ikinci nörodejeneratif hastalıktır. L-dopa tedavisi ile semptomatik tedavi edilmesi
dışında bilinen kesin bir tedavisi yoktur ancak hastaların hayat kalitesini arttırmak
amacıyla çeşitli tedavi yöntemlerinin varlığı daima araştırılmaktadır. Rabdosia
rubescens'ten elde edilen oridonin anti-inflamatuar, antibakteriyel, antitümoral gibi
çeşitli farmakolojik ve biyolojik aktivitelere sahip bir bileşiktir. Alzheimer üzerine
etkisinin incelendiği birkaç çalışmada, oridoninin sinaptik kayıpları önlediği, uzamsal
öğrenmeyi ve hafıza bozukluklarını iyileştirdiği bildirilmiştir. Bununla birlikte, PC12
hücrelerinde MPTP ile indüklenen hasara karşı etkisi araştırılmış ve oridoninin reaktif
oksijen türlerinin sayısını azalttığı, glutatyon seviyesini yükselttiği, antioksidan enzim
aktivitelerini arttırdığı bulunmuştur. Biz de bu çalışma ile MPTP ile indüklenmiş
Parkinson fare modelinde, oridoninin motor ve motor olmayan semptomlar ile oksidatif
stres üzerindeki etkisini incelemeyi amaçladık. Bu çalışmada, 8-10 haftalık, C57BL/6
erkek fareler (n=6) 3 gruba ayrıldı: 1) Sham grubuna yalnızca oridonin çözücüsü verildi,
2) MPTP grubuna MPTP (intraperitonel) verilerek Parkinson hastalık modeli oluşturuldu,
3) MPTP+oridonin grubuna önce MPTP verilerek Parkinson hastalık modeli oluşturuldu,
daha sonra 15 gün boyunca 10 mg/kg oridonin verildi. Motor semptomlar ve bradikinezi
değerlendirmesi rotarod performans testi ve çubuk testi ile, anksiyete ve depresyon ise
yükseltilmiş artı labirent testi ve açık alan testi ile yapıldı. Deney sonunda striatum
dokusunda SOD, GSHPx, Nrf-2 ve MDA seviyeleri ELISA yöntemiyle belirlendi.
Striatum ve substantia nigra bölgelerinde hematoksilen eozin boyama ile hücre sayıları,
hücresel bozulmalar incelendi. Sonuçlarımızda, Parkinson fare modelinde oridonin
tedavisinin, lokomotor aktivite ile anksiyete, depresyon benzeri davranışlar üzerinde
iyileştirici etkisinin bulunmadığı ancak oridonin tedavisi alan grupta antioksidan
seviyelerinin, MPTP grubuna göre arttığı ve oksidatif hasar belirteçlerinin azaldığı
belirlenmiştir. Histopatolojik bulgularımız ise MPTP uygulanan farelerin nöronlarında
nörofaji ve dejenerasyonun görüldüğünü, substantia nigra ve striatumdaki hücre
sayılarında önemli derecede azalma olduğunu, ayrıca MPTP+oridonin grubunda nörofaji
görülmemekle birlikte, MPTP grubuna göre daha hafif şiddette nöronal dejenerasyon
izlendiğini gösterdi. Sonuç olarak, oridoninin parkinsonun motor ve motor olmayan
semptomlarında belirgin bir iyileşme sağlayamadığı ancak oksidatif stresi azaltabileceği
ve oksidatif stres sonucu oluşan hasara karşı nöroprotektif bir ajan olabileceği
gösterilmiştir.

Abstract:
Parkinson's disease, caused by the progressive loss of dopaminergic neurons, is the
second most common neurodegenerative disease in the world. There is no known
definitive treatment except symptomatic treatment with L-dopa therapy, but the existence
of various treatment methods is always being investigated in order to increase the life
quality of patients. Oridonin obtained from Rabdosia rubescens is a compound with
various pharmacological and biological activities such as anti-inflammatory, antibacterial
and antitumoral. In several studies examining its effect on Alzheimer, it has been reported
that oridonin prevents synaptic losses, improves spatial learning and memory disorders.
However, its effect against the damage induced with MPTP in PC12 cells was
investigated and it was found that oridonin decreased the number of reactive oxygen
species, increased the glutathione level, increased antioxidant enzyme activities. In this
study, we aimed to investigate the effect of oridonin on motor and non-motor symptoms
and oxidative stress in MPTP-induced Parkinson's mouse model. For this, 8-10 weeks
old, C57BL/6 male mice (n=6) were divided into 3 groups: 1) Sham group was given only
oridonin solvent, 2) MPTP group was given MPTP (intraperitoneal) to form Parkinson's
disease model, 3 The MPTP+oridonin group was first given MPTP to create a Parkinson's
disease model, then 10 mg/kg oridonin was given for 15 days. Motor symptoms and
bradykinesia were evaluated with the rotarod performance test and stick test, and anxiety
and depression with the elevated plus maze test and open field test. At the end of the
experiment, SOD, GSHPx, Nrf-2 and MDA levels in striatum tissue were determined by
ELISA method. Cell numbers and cellular deterioration were examined by hematoxylineosin staining in the striatum and substantia nigra regions In our results, it was determined
that oridonin treatment did not have a curative effect on locomotor activity, anxiety and
depression-like behaviors in the Parkinson's mouse model, but antioxidant levels
increased and oxidative damage markers decreased in the oridonin treatment group
compared to the MPTP group. Our histopathological findings showed that neurophagia
and degeneration were observed in the neurons of MPTP-treated mice, there was a
significant decrease in the number of cells in the substantia nigra and striatum, and
neurophagia was not observed in the MPTP+oridonin group, but milder neuronal
degeneration was observed in the MPTP group. As a result, it has been shown that
oridonin cannot provide a significant improvement in motor and non-motor symptoms of
Parkinson's, but it can reduce oxidative stress and be a neuroprotective agent against
damage caused by oxidative stress.