Etanollü Türk propolis ekstraktının T-BHP ile uyarılmış oksidatif hasara karşı koruyucu etkisinin incelenmesi
Investigation of protective effects of ethanolic extract of Turkish propolis against oxidative damage induced BY T-BHP
Yazar: PINAR AYGÜN
Danışman: PROF. DR. ORHAN DEĞER
Karadeniz Teknik Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2018
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Antioksidanlar = Antioxidants ; Eritrositler = Erythrocytes ; Etanol = Ethanol ; Oksidatif hasar = Oxidative damage ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Propolis = Propolis

Özet:
Propolis bal arıları tarafından değişik bitkilerden toplanarak üretilen yapışkan reçinemsi bir maddedir. Propolisin etkisi arıların bitkilerden topladığı antioksidan etkili bileşenlerine bağlıdır. Propolis içeriğinin önemli bir bölümünü flavonoidler, fenolik bileşikler ve esansiyel yağlar oluşturmaktadır. Fenolik bileşikler antioksidan özellikler göstermektedir. Polifenoller indirgeyici ajan olma, metal şelatlama ve serbest radikal süpürücü özellik gösterir. Araştırmalar sonucu eritrosit membranlarının dış yüzeyinde bulunan proteinler serbest radikaller için kolay hedeftir. Ayrıca eritrosit eldesinin kolay olması ve çalışmalarda hücre model olarak kullanılmasından dolayı oksidatif hasar vermek için etkin bir modeldir. Organik bir hidroperoksit olan t-BHP, oksidatif hücre hasarı mekanizmalarını kapsayan çalışmalarda sıklıkla kullanılan bir bileşiktir. Bu çalışmadaki amaç etanollü propolis ekstraktının hasarlanmış eritrosit hücre modellerini kullanarak koruma kapasitesini araştırmaktır. Sağlıklı bireylerden etik kurul onayı ile alınan kanlardan eritrosit hücreleri izole edildi. Elde edilen eritrosit paketi kontrol, etanollü Türk propolis ekstraktı, pozitif kontrol (kuersetin) ve negatif kontrol (t-BHP) olarak dört gruba ayrıldı. Eritrosit paketlerine öncelikle ekstrakt muamelesi ve ardından t-BHP muamelesi uygulandı. Daha sonra negatif kontrolde oluşacak hasara karşı etanollü Türk propolisinin koruyucu etkilerini görmek için malondialdehit (MDA), toplam antioksidan kapasite (TAK), toplam oksidan kapasite (TOK), süperoksit dismutaz (SOD) ve katalaz (CAT) enzim aktiviteleri çalışıldı. Etanollü Türk propolis grubunda MDA ve SOD değerleri negatif kontrole göre anlamlı derecede düşük bulunmuştur (p<0.05). Etanollü Türk propolis grubunda TAK ölçümleri, negatif kontrole göre anlamlı derecede yüksek bulunmuştur (p<0.05). Bu çalışmada ilk olarak etanollü Türk propolis ekstraktının t-BHP tarafından indüklenen eritrosit hücrelerinde in vitro koşullarda oluşan oksidatif hasara karşı koruyucu etkisinin olduğunu gözlemledik. Bu çalışmanın gelecekte yapılacak in vitro ve in vivo deneylerde yol gösterici olacağı düşünülmektedir.

Anahtar Kelimeler: Antioksidan, Eritrosit, Oksidatif Stres, Propolis, t-BHP

Abstract:
Propolis is an adhesive resinious matter produced by bees picking from various plants. Major parts of propolis contain flavonoids, phenolic compounds and essential oils. Phenolic compounds exhibit antioxidant properties. Polyphenols have reductive agent property, metal chelating and free radical scavenging properties. The proteins on the outer surface of the resultant erythrocyte membranes are easy to target by free radicals. It is also an efficient model for the oxidative damage due to the ease of erythrocyte elution and its use as a cell model in studies. Tertiary butylated hydroperoxide (t-BHP) is a substance used in studies on mechanism of oxidative cell damage.  The aim of this study is to investigate the protective capacity of ethanolic propolis extract using damaged erythocyte cell models. Erythrocyte cells were isolated from blood taken by healthy ethics committee approval. The obtained erythrocyte package was divided into four groups as control, ethanol extracted Turkish propolis extract, positive control (quercetin) and negative control (t-BHP). Erythrocyte packages were first treated with extract and then with t-BHP treatment. Malondialdehyde (MDA), total antioxidant capacity (TAC), total oxidant capacity (TOC), superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) enzyme activities were evaluated to determine the protective effects of the ethanolic Turkish propolis against the negative control. MDA and SOD values were significantly lower in the ethanolic Turkish propolis extract group than the negative control group (p<0,05). In the ethanol extracted Turkish propolis group, TAK measurements were significantly higher than the negative control (p<0,05). In this study, we first observed that the ethanolic Turkish propolis extract was protective against oxidative damage caused by in vitro conditions in t-BHP-induced erythrocyte cells. It is thought that this work will guide future in vitro and in vivo experiments

Key Words: Antioxidants, Erythrocyte, Oxidative Stress, Propolis, t-BHP