Sıçanlarda Subhipnotik Doz Kronik Desfluran Maruziyetinde, DNA Hasarının Araştırılması
Investıgatıon of DNA Damages ın Rats ın Chronıcally Exposed To Sub-Hypnotıc Desflurane
Yazar: NURAY ALTAY
Danışman: DOÇ. MUSTAFA CENGİZ
Harran Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2007
Konu: Anestezi ve Reanimasyon = Anesthesiology and Reanimation

Özet:
Bu uzmanlık tezi çalışmasında, subhipnotik dozda, kronik desfluran gazına maruzkalan sıçanlardaki DNA hasarının araştırılması amaçlandı.Deneysel çalışma, Harran Üniversitesi Tıp Fakültesi Etik Kurulu izni sonrasında aynıfakültenin Farmakoloji Laboratuarında yapıldı. Çalışma için 200-230gr ağırlığında 18 adetdişi Wistar türü albino sıçan kullanıldı. Sıçanların çalışma öncesi ve sonrasındaki beslenme vebakımları, Harran Üniversitesi Deney Hayvanları Laboratuarında yapıldı.Sıçanlar rasgele 2 gruba ayrıldı (Grup I=Desfluran, Grup II= Kontrol). Anestezik gazverme sistemi için, özel olarak tasarlanmış plastik kaplar kullanıldı. Grup I' de sıçanlara,Datex-Ohmeda Tec6 Plus vaporizatörü ile hipnoz oluşturmayacak dozlarda (%0.5-1)desfluran verildi. Grup II'de de aynı düzenek kullanıldı, ancak desfluran vaporizatörü kapalıtutuldu. Her iki grupta deney düzeneğine %50 oksijen-hava karışımı 5 litre /dakika taze gazakışı hızında verildi. Ortamdaki desfluran ve oksijen konsantrasyonları bir anestezik gazmonitörü (Criticare ®) ile sürekli olarak ölçüldü.Çalışma gazlarına maruz kalma durumu 5 gün boyunca günde 1 saat olacak şekildetekrarlandı. Deney dışındaki saatlerde sıçanlar kendi kafeslerinde oda şartlarında bakıldılar.Beşinci günün sonunda 50 mg/kg intraperitoneal pentothal ile anestezisi sağlanan sıçanlar,supin pozisyonunda ekstremitelerden masaya tespit edildi. Sıçanlardan intrakardiak girişimlekan örnekleri alındı. Alınan kanlar heparinli tüplere aktarılarak özel bir kap içerisinde, soğukortamda, en kısa sürede Harran Üniversitesi Tıp Fakültesi Biyokimya Anabilim DalıLaboratuarına ulaştırıldı. Deney hayvanları kan alındıktan sonra sakrifiye edilip, üzerlerinekireç kaymağı dökülüp toprağa gömüldüler. Alınan kanlardaki mononükleer lökositlerindenComet Assay yöntemi ile DNA hasarları ölçüldü. Ayrıca aynı kan örneklerinden, antioksidankapasite ve oksidatif stres indeks değerleri analiz edildi.Deneysel çalışma sırasında hiçbir sıçanda genel anestezi durumu oluşmazken, tümsıçanlar 5 gün boyunca normal aktivitelerini sürdürdüler. Kan örneklerinden çalışılan DNAhasarı, antioksidan kapasite ve oksidatif stres indeks değerleri, her iki grupta benzer bulundu.Kronik olarak desflurana maruz kalan sıçanlarda, kontrol grubuna göre, belirgin birDNA hasarının oluşmadığı sonucuna varıldı.

Abstract:
In this thesis we aimed to investigate the DNA damage in rat whose chronicallyexposed to sub-hypnotic doses of desflurane vapor.This experimental study was started after approval of Harran University MedicalSchool?s Ethics Committee and it was performed in Pharmacology Laboratory of the sameFaculty. We used 18 female albino wistar species rats weighted between 200-230 gr. The ratswere fattened in Harran University Experimental Animal Laboratory during the study period.Rats dived randomly in two groups (Group I: Desflurane, Group II: Control). Foranesthesia gas delivering system we used specially designed plastic boxes and a Datex-Ohmeda Tec 6 plus vaporizer. Fifty percent air-oxygen mixture with 5 L/min fresh flow wasdelivered to this anesthesia system. In the Group-I sub-hypnotic doses of desflurane (0.5-1 %)vapor were delivered to the rats throughout one hour period. In the Group-II same systemwas used but desflurane vaporizer was not opened. Desflurane and oxygen concentrations ofthe inhaled air were measured continuously by an anesthesia gas monitor (Criticare ®).We repeated the study for gas exposure through five day. The rats were lived in theircages in room?s conditions except experimental study hours. At the end of fifth day, rats wereanesthetized with 50 mg/kg intra-peritoneal Pentothal and their extremities fixed to a table insupine position. Blood samples were taken via intra-cardiac route. These samples werestored in heparinated tubes in cold storage conditions and were analyzed in Harran University,Medical School Biochemistry Laboratory. The rats were scarified after blood samples takenand than they were buried with lime. The laboratory was analyzed DNA damages usingcomets assay method for mononuclear leukocytes in blood samples. In addition bloodantioxidant capacity and oxidative stress index were measured.During the study period, non of the rats were achieved general anesthesia level andal of the subjects lived their normal day life activity. Measured DNA damages antioxidantcapacity and oxidative stress index values were found similar between two groups.In conclusion, we found that chronically sub-hypnotic doses of desflurane exposuredid not increase DNA damages in respect of control group