Kömür tozunun neden olduğu pnömokonyozda rol oynayan sitokinlerin genotipik ve fenotipik analizleri
Genotypic and phenotypic analysis of cytokines related with coal dust- induced pneumoconiosis
Yazar: İLKER ATEŞ
Danışman: PROF.DR. ASUMAN KARAKAYA
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2005
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology

Özet:
ÖZETKömür Tozunun Neden Olduğu Pnömokonyozda Rol Oynayan SitokinlerinGenotipik ve Fenotipik AnalizleriBu çalışma, KİP'e neden olan TNF-Î±, IL-1Î±, IL-1Î², IL-1ra, IL-6 ve TGF-Î² gibisitokinlerin ülkemizdeki kömür işçilerindeki profilini ortaya koymak amacı ileyapılmış olan genotipik ve fenotipik analizleri kapsamıştır. Bireysel duyarlıkta etnikfarklılıkların büyük öneminin bulunduğu göz önüne alındığında elde edilecek olananaliz sonuçları işçi sağlığı riskinin değerlendirilmesi açısından önemlidir.Genotipleme çalışmalarından sonra in vitro olarak mutant ve mutant olmayanişçilerin monositlerinden TNF-Î±, IL-1Î±, IL-1Î², IL-1ra sitokinlerinin salınımıölçülmüş ve bu sitokinlerin genlerindeki polimorfizmlerin salınım üzerinegösterdikleri etkiler incelenmiştir.Hasta grubunu uzun süre kömür madencisi olarak çalışmış ve KİP hastalığınayakalanmış emekli 56 işçi oluştururken buna karşılık kontrol grubu ise 11'i emekli,88'i ise çalışan kömür işçisi olmak üzere toplam 99 işçiden oluşturulmuştur.Genotipleme deneyleri PCR-RFLP yöntemleri ile yapılırken, monositlerden salınımölçümleri ise incelenen sitokinlere özgü ELISA kitleri ile yapılmıiştır.Genotipleme deneyleri sonucunda hastalık geneli açısından KİP gelişimiüzerinde en fazla etki gösteren sitokin polimorfizmleri, TNF-Î± (-238) polimorfizmiile IL-1Î² (+3953) polimorfizmleridir (1,52 kat). Hastalık şiddeti açısındanincelendiğinde ise PMF'li hastalarda KİP gelişim riskin arttıran sitokinpolimorfizmlerinin TNF-Î± (-238) (3,56 kat), TGF-Î² (Kodon 10) (2,64 kat) ve TNF-Î±(-308) (1,83 kat) polimorfizmleri olduğu gözlenmiş iken, BP'li hastalarda ise IL-1Î²(+3953) (1,67 kat), IL-1Î± (+4845) (1,45 kat) ve IL1-ra (+2018) (1,27 kat) sitokin genpolimorfizmlerinin hastalık riskini arttırdığı saptanmıştır.Monositlerden sitokin salınım ölçümlerinde ise TNF-Î± sitokininin mutantbireylerde salınımı, mutant olmayanlara göre anlamlılık göstermiştir (P<0,001). Buda TNF-Î± polimorfizminin TNF-Î± sitokinin üretimini arttırarak monositlerdensalınan düzeylerini de arttırdığını göstermiştir. IL-1Î±, IL-1Î² ve IL-1ra sitokinlerininmutant ve mutant olmayan işçilerin monositlerden salınım düzeyleri arasında ise biranlamlılık bulunmamıştır. Ancak salınımları ölçülen dört sitokinde de, aktif kömürve LPS stimülasyonuyla salınan monosit düzeyleri, spontan salınan monositdüzeylerine göre anlamlı çıkmıştır (P<0,001). LPS stimülasyonu ile salınan sitokinmiktarı en üst düzeyde olup, aktif kömürle salınan sitokin düzeyi ile de arasındaanlamlılık bulunmuştur (P<0,001). Sigara içimin ile ne KİP gelişimi üzerinde ne demonositlerden sitokin salınım düzeyleri üzerine herhangi bir etkisi bulunamamıştır.Anahtar Sözcükler: KİP, sitokin polimorfizmi, monositlerden sitokin salınımı

Abstract:
SUMMARYGenotypic and Phenotypic Analysis of Cytokines Related with Coal Dust-Induced PneumoconiosisIn our study, we aimed to investigate CWP-related cytokines TNF-Î±, IL-1Î±, IL-1Î²,IL-1ra, IL-6 and TGF-Î² to point out the cytokine profile of Turkish coal miners byperforming genotypic and phenotypic analysis. It has been shown that ethnicaldifferences are playing role in individual sensitivity so that our results are importantto evaluate the health risks of coal miners. After genotyping, the in vitro release ofTNF-Î±, IL-1Î±, IL-1Î², IL-1ra cytokines from blood monocytes of mutant and non-mutant workers was investigated. Afterwards, the effects of the cytokinepolymorphisms on the amounts of cytokines released from monocytes wereevaluated.Patient group was selected of 56 retired workers suffering from CWP, on theother hand control group included 11 retired and 88 active workers having nofindings of CWP. Genotyping experiments were performed with PCR-RFLPmethods and cytokines released from monocytes were measured with cytokinespesific ELISA kits.According to genotyping results, in all patients, TNF-Î± (-238) and IL-1Î²(+3953) polymorphisms affected CWP progression more than the other cytokinepolymorphisms (OR= 1,52). On the other hand, in PMF patients, It was found thatTNF-Î± (-238) (OR= 3,56), TGF-Î² (Codon 10) (OR= 2,64) ve TNF-Î± (-308) (OR=1,83) gene polymorphisms to have increased risks on the progression of the disease.Meanwhile, in BP patients, IL-1Î² (+3953) (OR= 1,67), IL-1Î± (+4845) (OR= 1,45)and IL1-ra (+2018) (OR= 1,27) gene polymorphisms had augmenting effects on therisk of the progression of CWP.The level of TNF-Î± released from the monocytes of mutant workers wassignificantly increased compared to the levels released from the non-mutant workers?monocytes (P<0,001). This result showed that, TNF-Î± gene polymorphism had anaugmenting effect on the production of this cytokine so the levels released from themonocytes were increased due to this effect. On the other hand IL-1 genepolymorphisms (IL-1Î±, IL-1Î² ve IL-1ra) had no effect on the amounts of cytokinesreleased from monocytes in mutant and non-mutant workers. However, in allcytokines investigated in our study demonstrated a common result that the levels ofcytokines released from monocytes by stimulation of coal and LPS were significantlyincreased compared with spontaneous release (P<0,001). The amount released withthe stimulation of LPS was the highest and it was also significant copared with coalstimulation (P<0,001). Smoking had no significant effect on the progression of CWPand the amounts of cytokines released from monocytes.Key words: CWP, cytokine polymorphism, release of cytokines fom monocytes