Sığır embriyosunun in vitro üretimi ve vitrifikasyonunda sitokin (LIF) ve büyüme faktörünün (IGF-1) etkileri
Effects of cytokine (LIF) and growth factor (IGF-1) on in vitro production and vitrification of bovine embryos
Yazar: ALPER KOÇYİĞİT
Danışman: DOÇ. DR. MESUT ÇEVİK
Ondokuz Mayıs Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı​
Derece: Doktora, 2014
Konu: Biyoteknoloji = Biotechnology ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine
Dizin: Blastocystis = Blastocystis ; Büyüme ve embriyonik gelişme = Growth and embryonic development ; Embriyo = Embryo ; Fertilizasyon-in vitro = Fertilization-in vitro ; Sitokinler = Cytokines ; Sığırlar = Cattles ; Vitrifikasyon yöntemi = Vitrification method ; İnsülin benzeri büyüme faktörü I = Insulin like growth factor I

Özet:
Amaç: Sığır embriyolarının in vitro kültür medyumlarına yapılacak IGF–1 ve LIF ilavesinin, embriyo gelişim oranları, TE ve ICM hücre dağılımı ve dondurma sonrası yaşama gücü açısından etkisinin araştırılmasıdır.
Materyal ve Metot: Çalışmada elde oositler IVM ve IVF basamaklarından geçerek BSA, IGF, LIF, IGF-LIF gruplarında kültüre alındı. Kültür sonrası toplam 217 blastosist diferansiyel boyanarak hücre sayı ortalamaları belirlendi. Diğer yandan aynı deneme gruplarında kültüre alınan 163 blastosist ise 	vitrifikasyona tabi tutulup çözündürüldükten sonra diferansiyel boyandı. Vitrifikasyon işlemi uygulanan ve uygulanmayan blastosistlerin canlılık oranları ve hücre dağılımları karşılaştırıldı.
Bulgular: Vitrifikasyon uygulanmayan gruplarda en yüksek blastosist oranı LIF ve LIF-IGF gruplarında elde edildi. Vitrifikasyon işlemi sonrası en yüksek re-ekspansiyon oranı IGF ve IGF-LIF gruplarında elde edildi. Hücre sayılarının IGF'in tek başına ve LIF ile beraber kullanıldığı gruplarda en az değişim gösterdiği belirlenmiştir.
Sonuç: İn vitro embriyo üretiminde LIF ve IGF'in hem blastosist gelişimi hem de vitrifikasyon sonrası canlılık oranlarına olumlu etkisinin olduğu görülmüştür.

Anahtar kelimeler: Blastosist; diferansiyel boyama;  IGF-1; in vitro fertilizasyon; LIF; vitrifikasyon

Abstract:
Aim: The aim of the study was to evaluate the effects of LIF and IGF-1during bovine embryo culture on blastocyst development, TE and ICM cell allocation and cryotolerance.  
Material and Method: Embryos were transferred into five groups BSA, IGF, LIF, IGF-LIF. At termination of the culture, 217 embryos were stained used the differential staining protocol for determination of cell number. In addition 163 embryos were cultured in the same groups.  After a culture period, embryos were cryopreserved by vitrification. After a vitrification and thawing, embryos were stained. Viability and cell allocation of vitrified and non-vitrified embryos were compered.
Results: Embryos in the culture medium containing IGF or IGF-LIF had increased rate and cell counts when compared to embryos cultured in other 	groups. Blastocyst cell counts were showed minimum variation in IGF and IGF-LIF groups.
Conclusions: This study demonstrates that the addition of LIF and IGF to culture medium markedly improves the developmental potential and 	cryotolerance of embryos produced in vitro.

Keywords: Blastocyst; differential staining; IGF-1; in vitro fertilization; LIF; vitrificaiton