Tinidazol ve lidokainin yüksek performanslı sıvı kromatografisi yöntemi ile yanyana analizleri
Simultaneous determination of tinidazole and lidocaine by high performance liquid chromatography
Yazar: DERYA GÖNÜLLÜ AYHAN
Danışman: PROF. DR. SERAP SAĞLIK ASLAN
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Analitik Kimya Ana Bilim Dalı / Analitik Kimya Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Bakteriler = Bacteria ; Bakteriler-aerobik = Bacteria-aerobic ; Bakteriler-anaerobik = Bacteria-anaerobic ; Kromatografi-yüksek basınçlı-sıvı = Chromatography-high pressure-liquid ; Lidocaine = Lidocaine ; Tinidazol = Tinidazole ; Vajina = Vagina ; Vajinoz-bakteryel = Vaginosis-bacterial

Özet:
Tinidazol protozoalara ve anaerobik bakterilere karşı sahip olduğu etki mekanizması ile Trichomonas vaginalis, Giardia lamblia ve Entamoeba histolytica  ile anaerobik bakteriler ve Gardnerella vaginalis'in çoğunda etkili olmaktadır. Lidokain tedavi  boyunca sinir iletimini nöron membranını stabilize ederek bloke eder  ve lokal anestetik etki ile yanma ve kaşıntı hissiyatını azaltır. Tinidazol ve Lidokain  etken maddelerini içeren farmasötik preparatlar; bayanlarda bakteriyel vajinozis  ve trikomoniazis (trikomonas vajiniti)  tedavisi üzerine etkilidir.
Bu tez çalışmasında, tinidazolun ve lidokainin ovül dozaj formunda  yeni, basit ve spesifik  olacak şekilde  yanyana analizi için ters faz yüksek performanslı sıvı kromatografisi kullanılmıştır. Bu şekilde yöntem geliştirilip valide edilmiştir. Geliştirilen bu yöntem ile C18 (250x4,6mm,5µm) ters faz silika HPLC kolonu, hareketli faz olarak 10mM potasyum fosfat tampon(pH: 3.0), asetonitril gradiyent elüsyonu kullanılarak, 1.0 mL/dk akış hızında çalışma yapılmıştır. Kolon sıcaklığı ve numune bölme(oto örnekleyici) sıcaklığı 25Cº olarak belirlenmiştir. İki etken maddenin  birbirinden ayrılması 220 nm dalga boyunda sağlanmıştır. Alıkonma zamanları lidokain için 6.5 dakika tinidazol için 8.2 dakikadır. Yöntemde fotodiyot array dedektör kullanılarak, herbir preparatın saflığı değerlendirilmiştir. Maddelerin doğrusallık aralıkları Tinidazol için 75-195 µg/mL ve Lidokain için 25-65 µg/mL şeklinde tayin edilmiştir. Gözlemlenebilme(LOD) ve tayin sınırları(LOQ) ise sırası ile; Tinidazol için 0.05625 µg/mL ve 0.225 µg/mL, Lidokain  için 0.01875 µg/mL ve 0.075 µg/mL olarak bulunmuştur. Tinidazol ile lidokainin yanyana analizlerinde basit, duyarlı  ve tekrarlanabilir olacak şekilde yöntem geliştirilerek  başarılı bir şekilde uygulanmıştır.
Anahtar Kelimeler : Tinidazol, Lidokain, Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografisi, Validasyon, Ovül analizleri.

Abstract:
Tinidazole is effective in most of the anaerobic bacteria and Gardnerella vaginalis with Trichomonas vaginalis, Giardia lamblia and Entamoeba histolytica  with its mechanism of action against protozoa and anaeorabic bacteria. Lidocaine stabilizes the neuron membrane during therapy and blocks nerve conduction and reduces the sensation of burning and itching by acting as a local anesthetic. The pharmaceutical preparation consisting  the active agents Tinidazole and Lidocaine; It is effective on the treatment of  bacterial vaginasis and trichomoniasis (trichomonas vaginitis)   in the vagina.
A selective, simple and new reversed phase high performance liquid chromatographic method was developed and validated for determination  of tinidazole  and  lidocaine simultaneously  in the ovule  dosage form for this study. Developed method was performed with gradient elution by getting C18 (250x4.6mm,5µm) reversed phase HPLC column, mobile phase containing 10mM potassium phosphate buffer(pH3.0), acetonitrile at 1.0 mL/min. Temperature for  column  and autosampler were adjusted at 25Cº. The chromatographic seperation was done at 220 nm  wavelenght. Retention times were found as 6.5 min for lidocaine and 8.2 min. for tinidazole. The purity of each preparation was evaluated  getting a photodiode array detector. The  linearity ranges  were 75-195 µg/mL for tinidazole and 25-65 µg/mL for  Lidocaine. The  limit of dedection(LOD) and  the  limit of quantitation (LOQ)  results were  0.05625 µg/mL and 0.225 µg/mL for Tinidazole,  0.01875 µg/mL ve 0.075 µg/mL for Lidocaine.  The simple, sensitive and   reproducible method was developed and  performed  for  tinidazole and lidocaine  simultaneous  analysis successfully.
Keywords:  Tinidazole, Lidocaine, High Performance Liquid Chromatography, Validation, Ovule analysis.