Ovcar-3 over kanser hücrelerinde bor mineralinin apoptoz ve gen expresyon üzerine etkileri
Effects of boron minerals on apoptosis and gene expression in ovcar-3 over cancer cells
Yazar: AYSHAN GULMALIYEVA
Danışman: DOÇ. DR. NUR SELVİ GÜNEL
Ege Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Onkoloji = Oncology ; Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Bor = Boron ; Bor mineralleri = Boron minerals ; Gen ifadesi = Gene expression ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Over hastalıkları = Ovarian diseases ; Over neoplazmları = Ovarian neoplasms

Özet:
Over kanseri, jinekolojik maligniteler arasında en ölümcül kanserdir ve kadın
kanserleri arasında 5. en önemli ölüm sebebidir. Hayat boyu bir kadında görülme riski
1/54-1/70 olarak bildirilmektedir. Hastalığın erken dönemde bulgu vermemesi ve etkin
bir tarama yönteminin olmaması nedeniyle hastaların %70'i ileri evrede tanı
almaktadır. Tedavide tam remisyon elde edilen ileri evre olgularda, 2 yıl içinde %40-
50 oranında rekürrens görülmektedir. Tedavinin temelini sitoredüktif cerrahi ve
kemoterapi oluşturmaktadır. Kemoterapide platin ve taksol temelli ajanlar
kullanılmakla birlikte, platin dirençli olgular oldukça kötü seyretmekte ve bu olgularda
etkin bir tedavi yaklaşımı ne yazık ki bulunamamaktadır.
Ülkemizde, dünyanın en zengin rezervlerini barındırdığımız Bor minerali, besinlerle
alınan eser elementler arasında bulunmakla birlikte, son zamanlarda gıda takviyesi
olarak da kullanılmaktadır.
Son yıllarda yapılan moleküler çalışmalarda gerek kemoterapi etkinliğini artırmak
gerekse etkin dozu azaltıp ilaç yan etkisini önleyebilmek amacıyla, hedefe yönelik
tedaviler üzerinde durulmaktadır. Over kanserinde bu anlamda birçok çalışma
olmasına rağmen, onay alabilmiş yalnızca iki ajan mevcuttur (VEGF monoklonal
antikoru ve PARP inhibitörü).
mTOR sinyal yolağı; kanser hücrelerinde, sinyal iletiminde rol oynayan sitoplazmik
kinazları (serin/tirozin kinazlar gibi) tetikleyen reseptör tirozin kinazların (RTK)
aktivasyonunu içerir. Bu aktivasyonu sayesinde mTOR sinyal yolağı kanser
hücrelerinin dönüşünü sağlamaktadır.
Birçok Bor bileşiklerinin antikanser özelliği gösterilmiş çalışmalar bulunmaktadır.
Ancak mevcut literatür bilgisine göre DPD'nin over kanseri üzerindeki etkilerini
gösteren çalışma bulunmamaktadır.
Çalışmamızda, DPD nin OVCAR-3 hücre hattı üzerindeki sitotoksik, apoptotik ve
mTOR yolağı üzerindeki gen ekspresyonları üzerindeki etkileri araştırdık.
Sitotoksisite çalışmalarında OVCAR-3 hücrelerine 0,01-5 mM konsantrasyon
aralığında DPD uygulaması sonucunda IC50 değerleri 24. saatte 6,7 mM, 48. saatte
5,6 mM, 72. saatte 5,2 mM olarak bulunmuştur.
IV
Apoptoz deneylerinde 48 saat 5,6 mM DPD maddesi uygulanan OVCAR-3
hücrelerinde kontrol grubuna göre karşılaştırıldıgında apoptozun Annexin V boyama
yöntemine göre 2,2 kat arttığı gösterilmiştir.
mTOR mekanizmalarla ilişkili 84 gen ifadesi değişimleri gerçek zamanlı qRT–PCR
ile tespit edilmiştir. Gen ekspresyonu analizi sonucuna göre 27 gende anlamlı
ekspresyon değişiklikleri tespit edilmiş, ileri moleküler çalışmalara yol gösterici
olarak literatüre katkıda bulunacağını öngörmekteyiz.
Anahtar Kelimeler; Over kanseri, Bor, OVCAR hücre hattı, metastaz, proliferasyon

Abstract:
Ovarian cancer is the deadliest cancer among gynecological malignancies and the 5th
most important cause of death among female cancers. The lifetime risk in a woman is
reported as 1/54-1/70. Since the disease does not show symptoms in the early period
and there is no effective screening method, 70% of the patients are diagnosed in the
advanced stage. Recurrence is seen at a rate of 40-50% within 2 years in advanced
stage cases in which complete remission is achieved in treatment. The mainstay of
treatment is cytoreductive surgery and chemotherapy. Although platinum and taxolbased agents are used in chemotherapy, platinum-resistant cases progress very poorly
and an effective treatment approach is unfortunately not found in these cases.
Boron mineral, which we have the richest reserves in the world in our country, is
among the trace elements taken with food, but it is also used as a food supplement
recently. When we look at the field of health, it is seen that boron compounds are used
in osteoporosis and rheumatoid arthritis treatments, burn treatments, wound healing,
antiseptic lens solutions, ointments, mouthwashes and eye drops.
In our study, we investigated the effects of DPD on the cytotoxic, apoptotic and mTOR
pathway gene expressions on the OVCAR-3 cell line. In cytotoxicity studies, IC50
values were found to be 3,2 mM at 24th hour, 1.4 mM at 48th hour, and 1,5 mM at
72nd hour as a result of DPD application to OVCAR-3 cells in a concentration range
of 0.01-5 mM.
In apoptosis experiments, it was shown that apoptosis increased 2.2 times according
to the Annexin V staining method when compared to the control group in OVCAR-3
cells, which were applied 1.4 mM DPD substance for 48 hours.
Expression changes of 84 genes related to mTOR mechanisms were detected by realtime qRT–PCR. According to the results of the gene expression analysis, significant
expression changes were detected in 27 genes and contributed to the literature as a
guide to further molecular studies.
Keywords; Ovarian cancer, Boron, cell line, metastasis, proliferation