TNF-Alfa ile indüklenmiş insan umbilikal ven endotel hücre kültüründe (HUVEC) amentoflavonun antiinflamatuar etkinliğinin araştırılması.
Investigation of antiinflammatory activity of amentoflavone in TNF-α-induced human umbilical vein endothelial cell culture (HUVEC).
Yazar: FATİH CAN TÜRK
Danışman: PROF. DR. SİBEL ÖZYAZGAN
İstanbul Üniversitesi-Cerrahpaşa / Lisansüstü Eğitim Enstitüsü / Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı / Farmakoloji Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2020
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology ; Kardiyoloji = Cardiology
Dizin: Adezyon molekülleri = Adhession moleculs ; Amentoflavon = Amentoflavon ; Antiinflamatuar ajanlar = Anti inflammatory agents ; Diyet-aterojenik = Diet-atherogenic ; Hücre adezyon molekülleri = Cell adhesion molecules ; Hücre kültürü = Cell culture ; Nükleer faktör-kappa B = Nuclear factor-kappa B ; Tümör nekroz faktörü-alfa = Tumor necrosis factor-alpha ; Umbilikal arterler = Umbilical arteries ; İnflamasyon = Inflammation

Özet:
Amaç: TNF-α ile indüklenip inflamasyon ve ateroskleroz modeli oluşturulan insan umbilikal ven endotelyal hücre kültüründe (HUVEC), amentoflavonun antiinflamatuar ve anti aterosklerotik etkinliğinin göstergesi olarak ICAM-1, VCAM-1, NF-κB, IL-6 ve IL-8 üzerine etkilerinin araştırmak.
Materyal ve Metod: TNF-α ile indüklenip inflamasyon ve ateroskleroz modeli oluşturulan insan umbilikal ven endotelyal hücre kültüründe, 10 ng/ml dozunda TNF-α uygulamasının 6 saat öncesinde, 10 ng/ml TNF-α uygulaması ile eş zamanlı ve 10 ng/ml TNF-α uygulamasından 6 saat sonra olmak üzere her gruba 20'şer mikromolar amentoflavon uygulandı. Toplamda 24 saat inkübasyondan sonra endotel hücrelerindeki ICAM-1, VCAM-1, NF-κB, IL-6 ve IL-8 göreceli mRNA ve protein ekspresyon düzeyleri qRT-PCR ve ELISA metodları kullanılarak ölçümlendi. İstatistik testi olarak ANOVA ve Tukey-Kramer testleri uygulandı.
Bulgular: TNF-α uygulanan grupta; ICAM-1, VCAM-1, NF-κB, IL-6 ve IL-8 göreceli mRNA ve protein ekspresyon düzeyleri kontrol grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı derecede yüksek bulundu. TNF-α uygulanan gruba kıyasla, amentoflavon uygulanan her üç grupta da bu parametreler açısından istatistiksel olarak anlamlı düşüş gözlemlendi (p<0.05)
Sonuçlar: Kontrol grubuna kıyasla, TNF-α uygulanan grupta tüm inflamatuar mediatörlerin artışı, HUVEC kültüründe inflamasyon gelişimi ve ateroskleroz modelinin başarı ile oluşumu lehine yorumlandı. Amentoflavon uygulanan üç grupta da bu parametrelerin TNF-α grubuna kıyasla anlamlı olarak düşüşü amentoflavonun inflamasyon ve ateroskleroz gelişimi üzerine hem profilakside hem hastalık başladığında progresyonunu önlemede hem de tedaviye yönelik olumlu etkileri olabileceği yönünde değerlendirildi.
Anahtar Kelimeler: Amentoflavon, HUVEC, İnflamasyon,  NF-κB, Adezyon Molekülleri
Bu çalışma, İstanbul Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Birimi tarafından desteklenmiştir. Proje No: TDK-2019-33971

Abstract:
Objective: To investigate the antiinflammatory and anti atherosclerotic effects of amentoflavone on ICAM-1, VCAM-1, NF-κB, IL-6 and IL-8 in TNF-α induced human umbilical vein endothelial cell culture (HUVEC) atherosclerosis and inflammation model.
Material and Method: Human umbilical vein endothelial cell culture was induced with 10 ng/ml TNF-α. 20 micromolar amentoflavone was applied to each group; 6 hours before TNF-α administration / simultaneously with TNF-α administration / 6 hours after TNF-α administration. The relative mRNA and protein expression levels of ICAM-1, VCAM-1, NF-κB, IL-6 and IL-8 in endothelial cells after 24 hours of incubation were measured using the qRT-PCR and ELISA methods. ANOVA and Tukey-Kramer tests were used as statistical tests.
Results: The relative mRNA and protein expression levels of ICAM-1, VCAM-1, NF-κB, IL-6 and IL-8 were significantly higher in the TNF-α treated group compared to the control group. Compared to the group treated with TNF-α, there was a statistically significant decrease in these parameters at the groups which amentoflavone was applied (p <0.05)
Results: Compared to the control group, the increase of all inflammatory mediators in the TNF-α treated group was interpreted in favor of the development of inflammation and atherosclerosis model in HUVEC culture. Compared to the TNF-α group, all three groups administered with amentoflavone showed significant decrease in the relative mRNA and protein expression levels of ICAM-1, VCAM-1, NF-κB, IL-6 and IL-8. Amentoflavone seemed to have positive effects to prevent the development of inflammation and atherosclerosis, preventing its progression when the disease started and at the treatment of  atherosclerosis and vascular injury.
Key Words: Amentoflavone, HUVEC, Inflammation, TNF-α, Adhesion molecules
The present work was supported by the Research Fund of Istanbul University. Project No: TDK-2019-33971