Cu2+  takılı O-karboksimetil kitosan Schiff bazı kompleksleri gömülü kompozit membranların hazırlanması ve protein adsorpsiyon davranışlarının incelenmesi
Preparation of composite membrane embedded with Cu2+ attached O-carboxymethly chitosan Schiff base complexes and investigation for protein adsorption performance
Yazar: ÖMÜR ACET
Danışman: DOÇ. DR. MEHMET ODABAŞI
Aksaray Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2015
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
Bu çalışma kapsamında, lizozimin etkin bir şekilde ayrılması için afinite
kromatografisi yöntemleri arasında, son yıllarda yoğun bir uygulama alanı bulan,
İmmobilize Metal Afinite Kromatografisi (İMAK) kullanılmıştır. Bu amaçla, suda
çözünebilir O-karboksimetil kitosan Schiff bazı-4a kompleksleri sentezlenmiştir ve
Cu2+ iyonu takılmıştır. Monomer olarak poli(2-hidroksietil metakrilat), çapraz
bağlayıcı olarak N,Nˈ-metilen-bis-akrilamid, başlatıcı/aktivatör olarak N,N,N´,N´-
tetrametilen diamin (TEMED)/amonyum persülfat (APS) kullanılmış ve radikal kriyokopolimerizasyon
yöntemiyle 5 mL'lik plastik tüplerde sentezlenmiştir. Hazırlanan
Cu2+ takılı O-karboksimetil kitosan Schiff bazı kompleksleri gömülü kompozit
kriyojel şişme testleri, taramalı elektron mikroskobu (SEM), FT-IR ile karakterize
edilmiştir. Sulu çözeltiden lizozim adsorpsiyonuna pH'nın, başlangıç protein
derişiminin, akış hızının, iyonik şiddetin ve sıcaklığın etkisi incelenmiştir. Maksimum
adsorpsiyon pH 8 fosfat tamponunda, 3 mg/mL başlangıç lizozim derişiminde, 0,5
mL/dak akış hızında ve 25
oC ortam sıcaklığında 103,3 mg/g partikül olarak
gerçekleşmiştir. Ayrıca, süpermakro-gözenekli kriyojellere proteinin defelarca
adsorplanıp desorplanabildiği belirlenmiştir.

Anahtar Kelimeler: Afinite, Lizozim, Kriyojel, İMAK, Karboksimetil Kitosan,
Adsorpsiyon

Abstract:
In this study, Immobilized Metal Affinity Chromatograph (IMAC) finding a wide
application area among affinity chromatography methods was used for removal of
lysozyme efficiently from aqueous solutions. For this purpose, water soluble Ocarboxymethyl
chitosan complexes was synthesised, Cu2+ ions was attached onto
them. The composite cryogels were prepared by free radical polymerization using
N,N,N´,N´-tetramethylene diamine (TEMED) and ammonium persulfate (APS) as
initiator/activator pair, N,N´-methylene-bis-acrylamide (MBAAm) as cross-linker in a
plastic syringe of 5 mL. Prepared composit cryogel embedded with Cu2+
-attached Ocarboxymethyl
chitosan Schiff base complexes was characterized by FT-IR, SEM,
swelling tests measurements. The effect of pH, ionic strength, initial lysozyme
concentration, temparature and flow rate on adsorption were investigated. The
maximum amount of lysozyme adsorption from aqueous solution was at 103,3 mg/g
particles in phosphate buffer at pH 8 with initial lysozyme concentration of 3 mg/mL.
On the other hand, the most efficent adsorption was carried out at 0,5 mL/min, at 25oC
temparature. It was also observed that enzyme could be repeatedly adsorbed and
desorbed on the Cu2+ attached O-carboxymethyl chitosan Schiff base complexes
croygels.

Keywords: Lysozyme, Cryogel, Affinity, IMAC, Carboxymethyl Chitosan,
Adsorption