Kemoterapik bir ajan olan paklitakselin obezite ile ilişkili genler üzerindeki etkisinin in vitro araştırılması
A chemotherapic agent paclitaxel's the effect of obesity-related genes in vitro research
Yazar: ÖMER FARUK ÇEKİLMİŞ
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ CEYDA OKUDU
Haliç Üniversitesi / Lisansüstü Eğitim Enstitüsü / Beslenme ve Diyetetik Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Beslenme ve Diyetetik = Nutrition and Dietetics
Dizin: Eşleşme bozucu proteinler = Uncoupling proteins ; Genetik = Genetics ; Genler = Genes ; Leptin = Leptin ; Obezite = Obesity ; Paklitaksel = Paclitaxel ; Polimeraz zincirleme reaksiyonu = Polymerase chain reaction ; İn vitro = In vitro

Özet:
Obezite, vücutta depolanan yağ dokusunun toplam vücut kütlesine oranının
artışı olarak tanımlanabilir. Bireyde sadece fazla kilo olarak algılansa da beraberinde
tip 2 diyabet , hipertansiyon, kardiyovasküler hastalıklar, kanser gibi bir çok sağlık
problemini getirir. Obeziteye moleküler boyutta bir çok faktör etki eder. Leptin iştah
azaltıcı nöronları uyarır ve iştah artırıcı nöronları baskılar. Bireyin iştahını kontrol
ettiği için obezite üzerinde etkisi vardır. UCP-1 kahverengi yağ dokusundan yüksek
miktarda salgılanır. Vücut ısısının korunmasında, yani termogenezde çok önemli bir
rol üstlenir. Termogenez vücudun ihtiyaç duyduğu kalori miktarını etkilediği için
obezite üzerinde etkisinin olduğu kabul edilir. C/EBP- β adipogenez sırasında birçok
sürece katılmaktadır. Kanser tedavisinde kemoterapi sık kullanılan bir yöntemdir.
Paklitakselde bu kemoterapik ajanlardan birisidir. Bu çalışmada, paklitakselin leptin,
UCP-1 ve C/EBP- β genleri üzerindeki etkisi araştırılmıştır. Çalışmada, insan
preadiposit hücreleri 37°C ve %5 CO2 şartlarında ticari olarak satın alınan
preadiposit büyüme besiyerinde çoğaltılmıştır. Çoğalan hücreler 12 kuyucuklu hücre
kültür tabaklarına 105 hücre/kuyu olacak şekilde ekilmiş ve farklılaşmanın
tamamlanma süreci olan 15 gün boyunca 3 gün ara ile 50 nM paklitaksel +
farklılaşma besiyeri uygulanmıştır. Uygulama zaman bağımlı olarak 0.gün, 3.gün,
6.gün, 9.gün ve 12.gün paklitaksel + farklılaşma besiyeri şeklinde yapılmıştır.
Paklitakselin sitotoksik etkisini ölçmek için MTT testi uygulanmıştır. Gen ifade
analizi için total RNA (ribonükleik asit) izolasyonu yapılmıştır. Adipogenez
sürecinde zaman bağımlı olarak uygulanan paklitakselin leptin, UCP-1 ve C/EBP- β
gen ifadesine etkisi GZ-PZR Sonuç olarak, paklitakselin lipit birikimi baskılayarak
kanser kaşeksisinde adipoz doku kaybına katkı sağlayabileceği ancak bu süreçte
obezite ilişkili leptin, UCP-1 ve C/EBP- β ifade düzeylerinde gösterdiği değişimin
daha fazla çalışma ile analiz edilmesi gerektiği tespit edilmiştir.

Abstract:
Obesity can be defined as the increase in the ratio of the fat tissue stored in
the body to the total body mass. Although it is perceived as only overweight in the
individual, it brings with it many health problems such as type 2 diabetes,
hypertension, cardiovascular diseases and cancer. Many factors affect obesity at the
molecular level. Leptin stimulates appetite-reducing neurons and suppresses appetiteenhancing
neurons. It has an effect on obesity as it controls the appetite of the
individual. UCP-1 is secreted in high amounts from brown adipose tissue. It plays a
very important role in maintaining body temperature, that is, in thermogenesis. Since
thermogenesis affects the amount of calories the body needs, it is considered to have
an effect on obesity. C/EBP-β participates in many processes during adipogenesis.
Chemotherapy is a frequently used method in cancer treatment. Paclitaxel is one of
these chemotherapeutic agents. In this study, the effect of paclitaxel on leptin, UCP-1
and C/EBP-β genes was investigated. In the study, human preadipocyte cells were
grown in commercially purchased preadipocyte growth medium at 37°C and 5%
CO2. Proliferating cells were seeded in 12-well cell culture dishes at 105 cells/well
and 50 nM paclitaxel + differentiation medium was applied at 3 days intervals for 15
days, which is the completion process of differentiation. The application was done as
paclitaxel + differentiation medium on day 0, day 3, day 6, day 9 and 12 depending
on time. MTT test was used to measure the cytotoxic effect of paclitaxel. Total RNA
was isolated for gene expression analysis. The effect of paclitaxel administered timedependently
during adipogenesis on leptin, UCP-1 and C/EBP-β gene expression
was analyzed by RT-PCR. As a result of the study, it was determined that paclitaxel
given during the adipogenesis process suppressed differentiation and lipid
accumulation in human preadipocytes (p<0.01). As a result of gene expression
analysis, there was no significant change in the expression of leptin (p>0.05). There
was no significant change in UCP-1 gene expression (p>0.05). There was a
significant change in C/EBP-β gene expression (p<0.05). As a result, it was
determined that paclitaxel may contribute to adipose tissue loss in cancer cachexia by
suppressing lipid accumulation, but the change in obesity-related leptin, UCP-1 and
C/EBP-β expression levels in this process should be analyzed with further studies.