Antitiroid bir ilaç olan metimazolün farmasötik preparatlarda ve plazmada miktar analizi
Quantitative analysis in pharmaceutical preparations and human plasma of the methimazole which is used as an antithyroid drug.
Yazar: FATMA KATANALP
Danışman: PROF.DR. YÜCEL KADIOĞLU
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2006
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology ; Kimya = Chemistry

Özet:
Metimazol, hipertiroidizm tedavisinde kullanılan tiyoüre türevi olan antitiroid birilaçtır. Farmasötik preparatlarda ve plazmada Metimazol'ün analizi için UV-Görünürbölge spektrofotometrisi, 1.türev spektrofotometrisi ve HPLC-DAD yöntemlerigeliştirildi ve geçerliliği test edildi. Spektrofotometrik çalışmada optimum koşullarbelirlendi. Metimazol, UV-Görünür bölge spektrofotometrisinde 259nm'de maksimumabsorbsiyon gösterdi. Gözlenebilme alt sınırı (LOD) değeri 0.1 ?g ml-1 ve tayin alt sınırı(LOQ) 0.2 ?g ml-1 olarak belirlendi. Gün içi ve günler arası kesinlik değerlerinin yüzdebağıl standart sapması (%RSD) %4'den küçük ve doğruluk değerinin standart sapmasıda (SD) 0.1'den küçük olduğu tespit edildi. Metimazol Standard çözeltileri insanplazmasına eklendi ve ekstrakte edildi. LOD değeri 0.9 ?g ml-1 ve LOQ değeri 1 ?g ml-1olarak belirlendi. Gün içi ve günler arası kesinlik değerlerinin %RSD'si %5'den küçükve doğruluk değerinin SD'da 0.4'den küçük olduğu tespit edildi. Plazmadan yöntemingeri kazanım değeri %61-87 arasında değiştiği belirlendi. Metimazol 1.türevspektrofotometrisinde 252 nm'de bir maksimum 275 nm'de bir de minimum olmaküzere iki pik verdiği tespit edildi. Kalibrasyon eğrisinin çizimi ve diğer ölçümler 252nm dalga boyunda yapıldı. LOD değeri 0.1 ?g ml-1 ve LOQ değeri 0.2 ?g ml-1olarakbelirlendi. Gün içi ve günler arası kesinlik değerlerinin %RSD'si %1.3'den küçük vedoğruluk değerinin SD'da 0.15'den küçük olduğu tespit edildi. Plazma çalışmasında,LOD değeri 0.9 ?g ml-1 ve LOQ değeri 1 ?g ml-1 olarak belirlendi. Gün içi ve günlerarası kesinlik değerlerinin %RSD'si %0.9'dan küçük ve doğruluk değerinin SD'da0.4'den küçük olduğu tespit edildi. Plazmadan yöntemin geri kazanım değeri %57-85arasında değiştiği belirlendi. HPLC-DAD yönteminde çalışma parametreleri, ters fazC18 (5mm,250x 4.60mm) kolon, metanol+su (40:60 h/h) mobil fazı, değişken kolonsıcaklığı, 1ml/dk akış hızı, 254 nm dalga boyu, 10ml enjeksiyon hacmi olarak belirlendi.Standart çözeltiler için, yöntemin LOD değeri 0.1 ?g ml-1 LOQ değeri 0.25 ?g ml-1 vegün-içi günler-arası kesinlik değerlerinin %RSD'si %2.5'dan küçük ve doğrulukdeğerinin SD'da 0.2'den küçük olduğu tespit edildi. Plazma çalışmalarında LOD değeri0.4 ?g ml-1 ve LOQ değeri 0.5 ?g ml-1 ve gün-içi günler-arası kesinlik değerlerinin%RSD'si % 3'den küçük ve doğruluk değerinin SD'da 0.18'den küçük olduğu tespitedildi. Plazmadan yöntemin geri kazanım değeri %43-57 arasında değiştiği belirlendi.Metimazol'ün ticari preparatda (thyromazol) miktar analizi için her üç yöntemin deuygun olduğu, plazmada miktar analizi için ise UV-Görünür bölge spektrofotometrisive birinci derece türev spektrofotometrisi yönteminin uygulanabileceği bu çalışmaylagösterilmiştir.Anahtar Kelimeler: Metimazol, HPLC, Spektrofotometri, Plazma, Validasyon.

Abstract:
Metimazol is a thioure derivative medicine which is used in hyperthyroidismtreatment. UV-Visible spectrophotometry, first derivative spectrophotometry and HPLCDADmethods have been developed and validated for determination of Methimazole inpharmaceticul preparation and plasma. Optimum conditions in spectrophotometric studyhave been determined. Metimazol showed absorptsion in 259 nm wavelength. Limit ofdetection (LOD) and limit of quantification (LOQ) as 0.1 ?g ml-1 and 0.2 ?g ml-1,respectively. Values of intra-day and inter-day precision were determined as less thanrelative standard deviation (RSD%) 4% and standard deviation of accuracy value wasdetermined as less than 0.1. Methimazole was spiked into human plasma and extracted.LOD and LOQ values were determined as 0.9 ?g ml-1 and 1 ?g ml-1, respectively. Thevalues of intra-day and inter-day precision were determined as less than RSD% 5 %andless than 0.4 of value of standard deviation of accuracy. The recovery of method fromplasma was determined between 61-87%.In first derivative spectrophotometry methods,two peaks were showed as one maximum in 252 nm and one minimum in 275nm.Drawing of the calibration curve and other measurements were made on 252 nmwavelenght. LOD and LOQ values were determined as 0.1 ?g ml-1 and 0.2 ?g ml-1,respectively. The values of intra-day and inter-day precision were determined as lessthan RSD% 1.3% and standard deviation of accuracy value as less than 0.15. In plasmastudy, LOD and LOQ values were determined as 0.9 ?g ml-1 and 1 ?g ml-1, respectively.The values of intra-day and inter-day precision were determined as less than relativestandard deviation (RSD %) 0.9% and less than 0.4 of value of standard deviation ofaccuracy. The recovery of method from plasma was determined between 57-85%.Thestudy parameters in HPLC-DAD method have been determined as Reversed phase C18(5mm,250x 4.60mm) column, methanol+su (40:60 h/h) as mobile phase, ambient columntemperature, flow rate 1ml dk-1, 254 nm wavelength,, injection volume 10ml. ForStandard solutions, LOD and LOQ values were determined as 0.1 ?g ml-1 and 0.25 ?gml-1, respectively. The values of intra-day and inter-day precision were determined asless than relative standard deviation (RSD%) 2.5% and less than 0.2 of value of standarddeviation of accuracy. In plasma study, LOD and LOQ values were determined as 0.4 ?gml-1 and 0.5 ?g ml-1, respectively. The values of intra-day and inter-day precision weredetermined as less than RSD% 3% and less than 0.18 of value of standard deviation ofaccuracy. The recovery of method from plasma was determined as between 43-57 %. Inthis study, it was shown that three application methods are suitable for the quantitativeanalysis of Methimazole in commercial preparation (Thyromazol) and also UV-Visiblespectrophotometry and first order spectrophotometry methods are suitable for thequantitative analysis of plasma.Key Words: Methimazole, HPLC, Spectrophotometry, Plasma, Validation