Geç neonatal sepsisin erken tanısında lökosit yüzey belirteç değişikliklerinin akan hücre ölçer (flow cytometry) ile değerlendirilmesi
Evaluation of changes in leukocyte surface markers in the early diagnosis of late neonatal sepsis through flow cytometry
Yazar: EFSUN KORKMAZ SEVEN
Danışman: PROF. DR. CUMHUR AYDEMİR
Zonguldak Bülent Ecevit Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2020
Konu: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases
Dizin: Akım sitometrisi = Flow cytometry ; Bebek-yenidoğmuş = Infant-newborn ; C reaktif protein = C reactive protein ; Erken teşhis = Early diagnosis ; HLA C antijenleri = HLA C antigens ; HLA DR antijenleri = HLA DR antigens ; HLA antijenleri = HLA antigens ; Kalsitonin = Calcitonin ; Lökositler = Leukocytes ; Sepsis = Sepsis

Özet:
Sepsis yenidoğan bebekler için önemli bir morbidite ve mortalite nedenidir, bu nedenle tanı ve tedavisi acildir.  Kan kültüründe bakteri üremesinin gösterilmesi ile kesin tanısı konulur. Fakat sepsis belirti ve bulgularının nonspesifik olması, kan kültür testlerinin sonuçlanması için en az 48-72 saate ihtiyaç duyulması ve yanlış negatif sonuçlanabilmesi tanıyı güçleştirmektedir. Daha hızlı ve kesin tanı koyabilmek için çeşitli laboratuvar yöntemleri geliştirme çabaları devam etmektedir. Bu çalışmada lökosit yüzey belirteç değişikliklerinin akan hücre ölçer (flow cytometry) ile değerlendirilmesinin geç neonatal sepsisin erken tanısında kullanılabilirliğini değerlendirmeyi amaçladık.
Çalışma Zonguldak Bülent Ecevit Üniversitesi Sağlık Uygulama ve Araştırma Merkezi Yenidoğan Yoğun Bakım Ünitesinde Mart 2019 – Şubat 2020 tarihleri arasında yürütüldü. Çalışmaya hasta grubu olarak YYBÜ'nde izlenen geç sepsis tanısı alan yenidoğan bebekler alındı. Kontrol grubu olarak yenidoğan servisinde yatarak izlenen fakat enfeksiyon bulgusu olmayan bebekler alındı. Sepsis bulguları olan 22 bebek ve kontrol grubu olarak da 22 bebek çalışmaya dahil edildi. Yaşamın ilk 72 saatinden sonra sepsis tanısı düşünülen her hastadan sepsis incelemeleri için gereken rutin tetkikler yapıldı ve lökosit yüzey belirteçlerinin çalışılması amacıyla antibiyotik tedavisi başlanmadan önce kan örnekleri alındı.
Sepsis grubunda ortalama gebelik haftası ve doğum ağırlığı sırasıyla 30,1±3,7 hafta ve 1535±713 gram ve yaş ortalamaları 13,7±8,6 gündü. Hastaların demografik özellikleri açısından, iki grup arasında anlamlı bir fark yoktu.
Sepsis ve kontrol grubundan lökosit yüzey belirteçleri CD64, CD63, CD62L, CD16, CD11b, HLA-DR'nin sepsis başlangıcındaki, bulundukları hücrelere göre lenfosit, monosit ve nötrofiller üzerindeki ekspresyonları değerlendirildi. Sepsis ve kontrol grubu arasında CD63, CD62L, CD11b, HLA-DR arasında istatistiksel olarak anlamlı farklılık görülmedi ancak monosit ve nötrofiller üzerinde bulunan CD16 ve CD64 açısından anlamlı farklılık saptadık. Çalışmamızdaki cut-off, duyarlılık, özgüllük, pozitif ve negatif prediktif değerleri sırasıyla; nötrofil CD64 için %53,9, %72, %91, %75, %55, monosit CD64 için %73,2,  %68, %73, %71, %69, nötrofil CD16 için %81,1, %77, %64, %68 %73, monosit CD16 için %26,2, %68, %68,%69, %67 olarak tespit ettik. 
Çalışmamızın sonucunda lökosit yüzey belirteçlerinden nötrofil ve monositler üzerinde bulunan CD64 ve CD16'nın geç yenidoğan sepsisinin erken tanısında yararlı olabilecek testler olduğu sonucuna varıldı.

Abstract:
Sepsis is a major cause of newborn morbidity and mortality; thus its diagnosis and treatment are urgent. The final diagnosis is established by demonstrating the growth of bacteria in the blood culture. However, the symptoms and findings of sepsis being nonspecific, the blood culture tests requiring at least 48-72 hours to complete and the possible false negative results, may lead to a difficult diagnosis. Efforts to develop various laboratory methods to establish a faster and definitive diagnosis, are ongoing. In this study, our objective is to evaluate the availability of the changes in leukocyte surface markers in the early diagnosis of late neonatal sepsis through flow cytometry.
The study was conducted at Zonguldak Bülent Ecevit University Health Application and Research Center Neonatal Intensive Care Unit between March 2019 - February 2020. Newborns diagnosed with late onset neonatal sepsis cared for at the NICU were included in the study, as patient group. As a control group, inpatient infants monitored at the neonatal service, not showing any findings of infection were included. 22 infants with clinical sepsis as well as 22 infants as a control group were included in the study. Routine investigations required for sepsis investigations were conducted for every patient considered having a diagnosis of sepsis after the initial 72 hours of the life and blood samples were taken prior to starting antibiotic treatment in order to study the leukocyte surface markers.
The average gestational week and birth weight in the sepsis group were 30,1±3,7 weeks and 1535±713,2 grams respectively, and the average age was 13,7±8,6 days. There was no significant difference between the two groups in terms of demographic characteristics of the patients. 
The expressions of leukocyte surface markers CD64, CD63, CD62L, CD16, CD11b from sepsis and control group, expressions of HLA-DR at the onset of sepsis on lymphocytes, monocytes and neutrophils according to the cells in which they were found were evaluated. No statistically significant difference in terms of CD63, CD62L, CD11b, HLA-DR between the sepsis and the control group was observed, but a significant difference in terms of CD16 and CD64 on monocyte and neutrophils was detected. In our study, cut-off, sensitivity, specificity, positive and negative predictive values were respectively; for neutrophil CD64 %53,9, 72%, 91%, 75%, 55%, for monocyte CD64 %73,2, %68, %73, %71, %69, for neutrophil CD16 %81,1, %77, %64, %68, %73, for monocyte CD16 %26,2, %68, %68, %69, %67 was determined.
As a result of our study, it was concluded that CD64 and CD16, which are on leukocyte surface markers on neutrophils and monocytes, are useful tests in the early diagnosis of late neonatal sepsis.