Aşil tendon rüptürü oluşturulan ratlarda pentoksifilin ve alfa tokoferol tedavisinin iyileşme üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of pentoxifylline and alpha tocopherol treatment on healing in rats with achilles tendon rupture
Yazar: MUSTAFA TOKER
Danışman: DOÇ. DR. ZEKERİYA OKAN KARADUMAN
Düzce Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Ortopedi ve Travmatoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Ortopedi ve Travmatoloji = Orthopedics and Traumatology
Dizin: Aşil tendonu = Achilles tendon ; Pentoksifilin = Pentoxifylline ; Rüptür = Rupture ; Sıçanlar = Rats ; Tedavi = Treatment ; Tendonlar = Tendons ; Tokoferoller = Tocopherols ; Vitamin E = Vitamin E ; Yara iyileşmesi = Wound healing

Özet:
Amaç: Aşil tendon hasarı oluşturulan sıçanlar üzerinde pentoksifilin ve alfa tokoferol tedavilerinin ayrı ayrı ve birlikte kullanıldıklarında gösterdikleri etkileri incelemeyi hedefledik.
Gereç ve Yöntem: Çalışmada 230±30 gr ağırlığında 48 adet Wistar türü dişi rat kullanılmıştır. Hayvanlar, kontrollü sıcaklık (23-25 ° C), 60± 5% nem ve 12:12 saatlik açık / kapalı döngüsü olan bir odada kafeste olacak şekilde yerleştirildi. Sıçanlar, her grupta 6 hayvan olacak şekilde randomize olarak 8 gruba ayrıldı. Bir haftalık iklimlendirme periyodundan sonra, her bir sıçana 10 mg/kg ksilazin hidroklorür ve 50 mg/kg ketamin HCl'nin intraperitoneal enjeksiyonuyla anestezi uygulandı. Anestezi sonrası tüm ratlara aşilotomi sonrası uç uca (end to end) yöntemle primer tendon süturasyonu uygulandı. Postoperatif grup 2a ve 2b'ye pentoksifilin (PTX), grup 3a ve 3b'ye alfa-tokoferol (aTP), grup 4a ve 4b'ye her iki ilaç intraperitoneal yoldan uygulanmaya başlandı. Pentoksifilin 50 mg/kg/gün ve alfa-tokoferol 100 mg/kg/gün dozlarında verildi. Deney boyunca kontrol grubuna herhangi bir ilaç verilmedi. 14. gün sonunda grup 1a, 2a, 3a ve 4a grubundaki sıçanlar servikal dislokasyon uygulanarak sakrifiye edildi ve aşil tendonları rezeke edildi. Bu tendonlar histopatolojik incelemeye gönderildi. 2b, 3b, 4b grubundaki sıçanlara aynı dozlarda ilaç verilmeye devam edildi.  28. gün sonunda kalan 4 grup aynı şekilde sakrifiye edilerek tendonları toplandı ve histopatolojik incelemeye gönderildi.
Bulgular: Yapılan istatistiksel analiz sonucunda 14. gün PTX grubunun vaskülarite değerleri kontrol, aTP ve PTX+aTP gruplarından istatistiksel olarak anlamlı derecede yüksek bulunmuştur (p=0,018, p=0,027 , p=0,029). 14. gün  PTX ve aTP gruplarının kollajen dizilimi kontrol grubundan daha sıkı ve düzgün bulunmuştur (p=0,043, p=0,019). 28. gün PTX grubunun kollajen dizilimi aTP, PTX+aTP ve kontrol gruplarından daha sıkı ve düzgün bulunmuştur (p=0,003, p=0,016, p=0,03).
Sonuç: Pentoksifilin hem erken dönemde neovaskülarizasyon ile hem de geç dönemde kollajen dizilimini düzelterek tendon iyileşmesini katkıda bulunurken, alfa tokoferol erken dönemde kollajen dizilimini olumlu etkilemiş fakat geç dönemde bu etkisini yitirmiştir. Pentoksifilin ve alfa-tokoferol birlikte kullanıldığında ise erken ve geç dönemde tendon iyileşmesine olumlu bir etki sağlamamıştır. Bu kombinasyon tedavisinin tendon iyileşmesi üzerine etkilerinin anlaşılması için ileri araştırmalara ihtiyaç olduğunu düşünmekteyiz.

Anahtar Kelimeler: Pentoksifilin, alfa tokoferol, E vitamini, aşil tendonu, tendon iyileşmesi

Abstract:
Objective : We aimed to investigate the effects of pentoxifylline and alpha-tocopherol treatments, when used separately and together, on rats with Achilles tendon injury.
Materials and Methods: 48 Wistar female rats weighing 230±30 g were used in the study. Animals were housed in a cage in a room with controlled temperature (23-25°C), 60±5% humidity, and a 12:12 hour on/off cycle. Rats were randomly divided into 8 groups with 6 animals in each group. After one week acclimatization period, each rat was anesthetized by intraperitoneal injection of 10 mg/kg xylazine hydrochloride and 50 mg/kg ketamine HCl. After anesthesia, primary tendon repair was applied to all rats with end-to-end method after achilotomy. Postoperatively, pentoxifylline (PTX) was administered to groups 2a and 2b, alpha-tocopherol (aTP) to groups 3a and 3b, and both drugs to groups 4a and 4b were started to be administered intraperitoneally. Pentoxifylline was given at doses of 50 mg/kg/day and alpha-tocopherol at doses of 100 mg/kg/day. No drug was given to the control group throughout the experiment. At the end of the 14th day, the rats in groups 1a, 2a, 3a and 4a were sacrificed by applying cervical dislocation and their Achilles tendons were resected. These tendons were sent for histopathological examination. The rats in groups 2b, 3b, and 4b continued to be given the same doses of the drug. At the end of the 28th day, the remaining 4 groups were sacrificed in the same way, their tendons were collected and sent for histopathological examination.
Results: As a result of the statistical analysis, the vascularity values of the 14th day PTX group were found to be statistically significantly higher than the control, aTP and PTX+aTP groups (p=0.018, p=0.027 , p=0.029). On the 14th day, the collagen arrangement of the PTX and aTP groups was found to be tighter and smoother than the control group (p=0.043, p=0.019). On the 28th day, the collagen sequence of the PTX group was found to be tighter and smoother than the aTP, PTX+aTP and control groups (p=0.003, p=0.016, p=0.03).

Conclusion: Pentoxifylline contributed to tendon healing both by neovascularization in the early period and by correcting the collagen arrangement in the late period, while alpha tocopherol positively affected the collagen arrangement in the early period, but lost its effect in the late period. When pentoxifylline and alpha-tocopherol were used together, it did not provide a positive effect on tendon healing in the early and late periods. We think that further research is needed to understand the effects of this combination therapy on tendon healing.

Keywords: Pentoxifylline, alpha tocopherol, vitamin E, achilles tendon, tendon healing