Thymus vulgaris'in meme kanseri hücre soyları ve kanser kök hücreleri üzerine antiproliferatif ve apoptotik etkilerinin incelenmesi
The investigation of the antiproliferative and apoptotic effects of thymus vulgaris on breast cancer cell lines and cancer stem cells
Yazar: YASİN ÇELİKOK
Danışman: PROF. DR. IŞIL ALBENİZ
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyofizik Ana Bilim Dalı / Biyofizik Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Biyofizik = Biophysics
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Hücre dizisi = Cell line ; Meme kanseri =   ; Sitotoksik etki = Cytotoxic effect ; Thymus vulgaris L. = Thymus vulgaris L.

Özet:
Bu çalışmada, Thymus vulgaris bitkisinden elde edilen Petrol Eteri ve Etanol özütlerinin MCF-7 ve MDA-MB-231 meme kanseri hücre soyları üzerindeki sitotoksik ve apoptotik etkileri ve MDA-MB-231 meme kanseri hücre soyundan elde edilen CD24-/CD44+ olan meme kanseri kök hücrelerine özütlerin sitotoksik etkileri incelendi. Bitki özütlerinden hazırlanan 6 farklı konsantrasyonun hücre indeksi üzerine etkileri ve etken dozun belirlenmesi çalışmaları iCELLigence sistemi ile araştırıldı. Etken sitotoksik doz üzerinden TUNEL yöntemi ve DAPI nukleus immunfloresan boyası ile apoptotik nukleus görüntüleri elde edildi. Özütlerin MCF-7, MDA-MB-231 ve meme kanseri hücre soyları üzerine sitotoksik etkilerini 45 μg/mL konsantrasyonunda gösterdiği saptandı. Zaman ve hücre indeks değerleri arasında istatistiksel açıdan anlamlı bir ilişki olduğu gözlemlendi (p<0,01). İki farklı özüt uygulandıktan sonra da hücre indeksi zamana bağlı değişimin anlamlı olduğu görüldü (p<0,01).
Etken doz belirlendikten sonra yapılan apoptoz çalışmalarında ise etken dozun uygulandığı hücrelerde gelişen apoptotik etkinlik ile kontrol grubu olarak kullanılan ve doz uygulanmayan grup arasında ileri derecede anlamlı olduğu belirlendi (p<0,0001). Thymus vulgaris özütlerinin her iki meme kanseri hücre soyu ve kanser kök hücresi üzerindeki sitotoksik etkilerinin apopototik hücre ölümünü arttırdığı yönde bir rol oynadığı saptandı.
Aynı zamanda Thymus vulgaris'in antioksidan etkinliği çeşitli metotlarla araştırıldı. Yapılan antioksidan aktivite tayini ile güçlü bir antioksidan aktivite içerdiği saptandı. Bu bilgiler ışığında, Thymus vulgaris bitkisinin ve elde edilen özütlerin  kanser tedavisinde kullanılabilecek doğal bir kaynak olabileceği kanısına varıldı.

Abstract:
In this study, to investigate the cytotoxic and apoptotic effects of the ethanol and petroleum ether extract of Thymus vulgaris on MCF-7 and MDA-MB-231 breast cancer cell lines. Also we aimed that the cytotoxic effects of the ethanol and petroleum ether extracts of Thymus vulgaris on the stem cells derived from MDA-MB-231 breast cancer line which has CD24-/CD44+. First we prepared 6 different concentrations of the plant's extract and then to investigate these concentrations' effects on cell index value and determination of the effective doses, we use iCELLigence system. When we determined effective cytotoxic dose we used TUNEL method and DAPI immunofloresans staining to observe apoptotic nucleus morphology. The cytotoxic effects of the extracts have shown at the dosage of 45 μg/mL both breast cancer cell lines MCF-7 and MDA-MB-231. We observed that between time and cell index value had statistically meaningful (p<0,01). After the administration of two different extracts between time and cell index value have shown statistically differences (p<0,01). Also the effective doses had signicantly different apoptotic morphological changes between the control groups and the experimental groups (p<0,0001).
We also used different methods to determined to the antioxidant activity of Thymus vulgaris. The extracts of Thymus vulgaris have shown strong capacity of antioxidant activity. The cytotoxic effects of the extract of Thymus vulgaris on both breast cancer cell lines and cancer stem cells thought us that it increased the apoptotic cell death. As a result, Thymus vulgaris plant can be used in cancer treatment as a natural source.