Mastitisli sütlerden izole edilen stafilokoklarda koagulaz (COA) ve protein A (SPA) virulens genlerinin araştırılması
Investigation of coagulase (COA) and protein A (SPA) virulence genes in staphylococci isolated from mastitis milk
Yazar: ÖNDER DUMAN
Danışman: PROF. DR. SERAP SAVAŞAN
Aydın Adnan Menderes Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı / Mikrobiyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine
Dizin: Genler = Genes ; Koagülaz = Coagulase ; Meme hastalıkları = Breast diseases ; Protein A = Protein A ; Proteinler = Proteins ; Staphylococcus = Staphylococcus ; Virülans = Virulence ; Virülans faktörleri = Virulence factors

Özet:
Amaç: Bu çalışma ile mastitisli sütlerden izole edilen stafilokoklardan koagulaz (coa) ve protein A (spa) virulens genlerinin belirlenmesi amaçlanmıştır.
Gereç ve Yöntem: Özel süt işletmelerinden toplanan 100 süt örneği, Adnan Menderes Üniversitesi Veteriner Fakültesi Mikrobiyoloji Anabilim Dalı laboratuvarına soğuk zincirde teslim edilerek, besiyerlerine ekimi yapılarak inkubasyona bırakıldı. Çalışmada stafilokok olarak tespit edilen izolatların koagulaz (coa) ve protein A (spa) virülens genleri PCR yöntemi ile belirlenecektir (Çiftci ve diğerleri, 2009).
Bulgular: Araştırmada kullanılan 100 adet süt numunesi besiyerlerine yapılan ekimler sonucunda, 37°C'de 18 saat boyunca inkube edildi. izolatların tümünde bakteriyel üreme görüldü. Gram pozitif koklar tespit edildi. 33 tanesi Gram pozitif kok olarak tespit edildi. Katalaz testi sonucunda 25 tanesi pozitif tespit edildi. Katalaz pozitif 25 örneğe koagulaz testi yapıldı ve 11 örnek pozitif olarak değerlendirildi. Katalaz pozitif numuneler Staphylococcus spp. ve Staphylococcus aureus yönünden değerlendirmek üzere PCR yapıldı. PCR sonucunda katalazı pozitif 25 izolat Staphylococcus spp. ve 7 izolat Staphylococcus aureus olarak tespit edildi. Spa ve coa gen varlığına bakıldığında Staphylococcus spp. olan 25 izolattan coa gen varlığı 7 izolatta tespit edilirken, 11 izolatta spa gen varlığı tespit edildi.	
Sonuç: 100 adet süt numunesinden Staphylococcus spp. ve S. auresus identifikasyonı yapıldı ve sonucunda 25 izolat Staphylococcus spp., 11 izolat Staphylococcus aureus olarak tespit edildi. Staphylococcus spp. olarak tespit edilen izolatlarda protein A (spa) ve koagulaz (coa) gen varlığına PCR yöntemiyle bakıldı. 25 izolattan 11 tanesi spa gen varlığı olarak pozitif tespit edilirken coa genine sahip 7 izolat tespit edildi.

Abstract:
Objective: In this study, it was aimed to determine coagulase (coa) and protein A (spa) virulence genes from staphylococci isolated from milk with mastitis.
Materials and Methods: Materials and Methods: 100 milk samples collected from private dairy farms were delivered to Adnan Menderes University Veterinary Faculty Microbiology Department laboratory in cold chain, sown in media and left for incubation. The coagulase (coa) and protein A (spa) virulence genes of the isolates identified as staphylococci in the study will be determined by PCR method (Çiftci et al. 2009).
Results: 100 milk samples used in the research were incubated at 37°C for 18 hours as a result of sowing on the media. Bacterial growth was observed in all isolates. Gram-positive cocci were detected. 33 of them were detected as Gram positive cocci. As a result of the catalase test, 25 of them were positive. Coagulase test was performed on 25 catalase positive samples and 11 samples were evaluated as positive. PCR was performed to evaluate the catalase positive  samples for Staphylococcus spp. and Staphylococcus aureus. As a result of PCR, 25 isolates of catalase positive were detected as Staphylococcus spp. and 7 isolates as Staphylococcus aureus. When the presence of spa and coa genes was examined, the presence of coa gene was detected in 7 isolates from 25 isolates with Staphylococcus spp., while the presence of spa gene was detected in 11 isolates.
Conclusion: Staphylococcus spp. and S. aureus were identified from 100 milk samples and 25 isolates were identified as Staphylococcus spp., 11 isolates as Staphylococcus aureus. The presence of protein A (spa) and coagulase (coa) genes in isolates detected as Staphylococcus spp. was analyzed by PCR method. While 11 of 25 isolates were positive for the presence of spa gene, 7 isolates with coa gene were detected.