Sıcak güta perka tekniklerinin sementoblastlar ve periodontal ligament hücreleri üzerine etkisinin incelenmesi
Evaluation of the effect of warm gutta percha techniques on periodontal ligament cells and cementoblasts
Yazar: NAZİFE TUĞBA AZMAZ
Danışman: PROF. DR. SEMA BELLİ
Selçuk Üniversitesi / Diş Hekimliği Fakültesi / Endodonti Ana Bilim Dalı
Derece: Diş Hekimliği Uzmanlık, 2019
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry
Dizin: Dental bonding = Dental bonding ; Dental materyaller = Dental materials ; Dental çimentolar = Dental cements ; Hücreler = Cells ; Kök kanal dolgu materyalleri = Root canal filling materials ; Kök kanal tedavisi = Root canal therapy ; Kök kanalını tıkama = Root canal obturation ; Periodontal ligament = Periodontal ligament

Özet:
Bu çalışmanın amacı, sıcak güta perka dolum tekniklerinden "Devamlı Isı ile Obturasyon
Tekniği" ve "Termoplastik Güta perka Enjeksiyonu" uygulanması sırasında diş köklerinin apeksinde
oluşan yüksek ısının insan periodontal ligament mezenkimal hücreleri (iPDL-MKH) ve fare
sementoblast (OCCM.30) hücreleri üzerine olası etkisini incelemektir.
Yetmiş adet tek ve düz kanallı insan premolar dişlerinin apekslerinden 1mm elmas
separe yardımı ile uzaklaştırıldıktan sonra hücre kültür ortamına adapte edildi. Hücre canlılık
deneyleri için kullanılacak olan 50 diş, 10 mm olacak şekilde; mRNA ekspresyon deneylerinde
kullanılacak olan 20 diş, 14 mm olacak şekilde kronlarından kesildikten sonra çalışma boyunda
ProTaper Next X5 eğesine kadar her eğe arasında 2ml NaOCl solüsyonu ile irrigasyon yapılarak
genişletildi. Hücre kültürü ortamı için steril hale getirilen dişler rasgele 6 farklı gruba ayrıldı: dişsiz
kontrol 1 (K1); sadece diş kontrol 2 (K2) ; sadece AH Plus kanal patı (KP); tek kon (TK); devamlı ısı
ile obturasyon tekniği (DIOT); termoplastik güta perka enjeksiyonu (TGE). Deney düzeneğine
yerleştirilen örneklerin iPDL-MKH ve OCCM.30 hücrelerinin canlılığına etkisi MTT hücre canlılık
deneyleri ile analiz edildi. Ayrıca HSP-27, HSP-70, HSP-90 heat-shock proteinleri ile mineralize
doku belirteçleri Bone sialoprotein (BSP), osteokalsın (OCN), runt-related transcription factor-2
(Runx2), tip I kolajen (COL I), alkalen fosfataz (ALP) mRNA ekspresyon düzeyleri Real time
polymerase chain reaction (RT-PCR) ile değerlendirildi.
Çalışma sonuçları kontrol grupları hariç tüm gruplarda iPDL-MKH ve OCCM.30
hücrelerinin canlılığının etkilendiğini gösterdi. Tek kon tekniği ile DIOT ve TGE grupları ayrıca
karşılaştırıldığında, ısının anlamlı derecede hücre canlılığına negatif etkisi olduğu gözlendi (p<0.05).
Kontrol 1 grupları hariç tüm gruplarda BSP, OCN, Runx2, COL 1, ALP mineralize doku belirteçleri
ve HSP27, HSP70, HSP90 gibi heat-shock proteinlerinin mRNA ekspresyon düzeyleri etkilendi
ancak bu olumsuz etki ısı uygulanan gruplarda daha fazla gözlendi (p<0.05).
Bu çalışma sıcak güta perka dolum tekniklerinin iPDL-MKH, OCCM.30 hücreleri üzerine
etkisini inceleyen ilk ve tek çalışmadır. Bu çalışmanın limitasyonları dahilinde, ısının hücre
canlılığına ve mineralizasyon belirteçlerinin mRNA ekspresyonlarına olumsuz etkileri olduğu
sonucuna varılmıştır. Bu konuda farklı deney modellerinde daha çok çalışma yapılması gereklidir.

Abstract:
The aim of this study was to determine the effect of heat released during the continuous wave
of condensation techniques (CWCT) and thermoplastic gutta percha injection techniques (TGE) on
the human periodontal ligament mesenchymal cells (iPDL-MSC) and mouse cementoblast
(OCCM.30).
Seventy human premolar teeth with single and straight canals were adapted to the cell culture
medium after removal of 1 mm from the apex using a diamond saw. The crowns were removed and
10 mm long fifty teeth were used for cell viability experiments and 14 mm long 20 teeth were used in
the mRNA expression experiments. The root canals were prepared up to the ProTaper Next X5 file.
Two ml NaOCl solution was used between each file. Teeth were sterilized first for the cell culture
medium and then randomly divided into 6 different test groups: control 1 (no root, K1); control 2
(with roots K2); AH Plus group (KP); single cone technique (TK); continuous wave of condensation
technique (DIOT); thermoplastic gutta-percha injection technique (TGE). The viability of the iPDLMSC and OCCM.30 cells was analyzed by MTT cell viability experiments. Furthermore, HSP-27,
HSP-70, HSP-90 heat shock proteins and mineralized tissue markers bone sialoprotein (BSP),
osteocalcin (OCN), runt-related transcription factor-2 (Runx2), type I collagen (COL I), alkaline
phosphatase (ALP) mRNA expression levels were evaluated by Real time polymerase chain reaction
(RT-PCR).
The results of the study showed that the viability of iPDL-MSC and OCCM.30 cells were
affected in all groups except the control groups. When single cone technique and DIOT and TGE
groups were compared, it was observed that heat had a significant negative effect on cell viability (p
<0.05). In all groups except control group 1, BSP, OCN, Runx2, COL 1, ALP mineralized tissue
markers and mRNA expression levels of heat-shock proteins such as HSP27, HSP70, HSP90 were
affected, but this negative effect was higher in the heat treated groups (p <0.05).
This is the first and only study to investigate the effect of heated gutta-percha filling
techniques on iPDL-MSC OCCM.30. Within the limitations of this study, it was concluded that heat
has negative effects on cell viability and mRNA expression of mineralization markers. Further studies
are needed in different experimental models.