Deneysel UVB ışınına bağlı korneal hasar modelinde citicoline içeren damlanın antioksidan mekanizmalar üzerinden yara  iyileşmesine etkisinin ve hücre sağ kalımındaki rolünün klinik ve histopatolojik olarak araştırılması
Clinical and histopathological investigation of the effect of citicoline on wound healing with antioxidant mechanisms in the UVB-induced corneal damage model
Yazar: ECEM ÖNDER TOKUÇ
Danışman: PROF. DR. NURŞEN YÜKSEL
Kocaeli Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2019
Konu: Göz Hastalıkları = Eye Diseases
Dizin: Keratit = Keratitis ; Oksidatif hasar = Oxidative damage ; Sitidin difosfat kolin = Cytidine diphosphate choline ; Ultraviyole ışınlar = Ultraviolet rays ; İnflamasyon = Inflammation

Özet:
Amaç: Ultraviyole B (UVB) hasarına bağlı fotokeratit modelinde citicoline tedavisinin
oksidatif hasar ve inflamasyon mekanizmaları üzerine koruyucu etkisini incelemek.
Gereç ve Yöntem: Korneal oksidatif hasar ratların , 560 μW / cm2'de UVB ışınına
maruz kalması ile oluşturuldu. 30 adet ratın sol gözleri çalışmaya alındı ve denekler sham ,
citicoline ve tedavi grubu olmak üzere 3 gruba ayrıldı. Sham ve tedavi grubuna UVB hasar
modeli oluşturuldu. Tedavi ve citicoline grubundaki ratlara hasar modeli oluşturulmadan 1 gün
önce başanarak citicoline damla günde 3 kez 7 gün süreyle damlatıldı. Tüm deneklerin 3. ve 8.
Gün epitel defekti ve opasifikasyon (OP) değerlendirilmesi amacıyla ön segment (ÖS)
fotoğrafları çekildi. 8. gün denekler sakrifiye edildi ve alınan kornealar histoloji , biyokimya ve
genetik laboratuvarında değerlendirildi.
Bulgular: Tedavi ve sham grubunun epitel defektleri karşılaştırıldığında, tedavi
grubunda ilk vizitten itibaren daha az epitel defekti oluştuğu ve epitel iyileşmesinin daha hızlı
olduğu görüldü (p:0.038 , p:0,013). Deney süresince korneal OP tedavi grubunda sham grubuna
göre klinik olarak anlamlı olacak şekilde daha az olduğu görüldü ( p: 0.037 ). HP incelemede;
epitel kaybı, vaskularizasyon, ödem, inflamasyon , epitelyal proliferasyon tedavi grubunda
sham grubuna göre daha azdı (p< 0.001). Konfokal mikroskop ile yapılan immün floresan
incelemede kaspaz 3 , MMP-2, MMP-9 boyamalarda tedavi grubunda sham grubuna göre
anlamlı fark vardı. VEGF, IL1b ve TGFb gen ekspresyon analizinde tedavi grubunda
inflamasyon markerları sham grubuna göre daha düşüktü (p<0.05, p< 0.01, p:<0.01).
Biyokimyasal incelemelerde Malondialdehit (MDA) , glutatyon ( GSH) , süperoksit dismutaz
( SOD) düzeyleri incelendi . GSH , SOD tedavi grubunda , sham grubuna oranla daha yüksek
bulundu ( p<0.05 , p<0.05) . MDA düzeyi shame grubunda diğer gruplara göre daha yüksekti (
p<0.05).
Sonuç: Citicoline tedavisinin birçok dokuda antioksidan aktiviteyi arttırdığı literatürde
belirtilmiş ancak kornea dokusunda yara iyileşmesi üzerine etkisi henüz gösterilmemiştir.
Çalışmamızda citicoline tedavisinin UVB korneal hasarı sonrası oksidatif stresin baskılaması
ve iflamasyon kontrolü açısından etkili olabileceğini gösterildi.

Abstract:
Purpose: The aim of the present study was to investigate the protective effects
citicoline on UVB radiation–induced corneal oxidative damage in rat model
Materials and Methods: Corneal oxidative damage was induced by exposure to
UVB radiation at 560 μW/cm2. The left corneas of 30 albino rats were included in the study.
The animals were divided three equal groups; Shame group, Citicoline group, and treatment
group. The healthy corneas of 10 randomly selected animals were also considered as healthy
group. To induce disorders in the corneal tissues, the eyes of the animals in shame and treatment
groups were exposed to UVB irradiation. Citicoline ophthalmic solution was instilled in rat eye
immediately before UVB-exposure and for the following 7 days every 8 hours starting 1 hour
after exposure. Anterior segment corneal photographs were taken to evaluate epithelial healing,
opacification of all subjects on days 3 and 8. After the last visit on day 8, the animals were
sacrificed and their corneas were removed from limbus border. The removed corneas were sent
to the histology laboratory , biochemistry and genetics.
Results: When the epithelial defects of the treatment and sham groups were
compared, it was observed that less epithelial defects were formed and epithelial healing was
faster in the treatment group from the first visit (p:0.038 , p:0,013). Corneal opacification was
less in the treatment group than in the shame group ( p: 0.037 ). İn the histopathological
examination epithelial loss, vascularization, edema, inflammation, epithelial proliferation were
less than in the shame group (p< 0.001). Immunofluorescence examination with confocal
microscopy showed a significant difference in caspase 3, MMP-2, MMP-9 staining compared
to shame group. In VEGF, IL1b and TGFb gene expression analysis, inflammation markers
were lower in the treatment group than in the sham group (p<0.05, p< 0.01, p:<0.01).
Malondialdehyde (MDA), glutathione (GSH) and superoxide dismutase (SOD) levels were
examined in biochemical examinations. GSH and SOD were higher in the treatment group than
in the sham group (p<0.05 , p<0.05) . MDA level was higher in shame group than other groups
( p<0.05).
Conclusions: It has been reported in the literature that Citicoline treatment increases
antioxidant activity in many tissues. However, its effect on wound healing in corneal tissue has
not yet been demonstrated. In our study, it was shown that citicoline treatment may be effective
in suppressing oxidative stress and controlling inflammation after UVB corneal injury