Monodüzlemde elde edilmiş otolog endometrial kokültür üzerinde geliştirilen embriyolar ile tekrarlayan implantasyon başarısızlığı olgularında artan gebelik ve hedef hasta grubunun belirlenmesi
Improvement of pregnancy and deci̇ded to target group of repeated implantation failure patients with the embryos from autologous monolayer endometrial coculture system
Yazar: HAZİKE SEMRA SÜMER
Danışman: PROF. DR. TÜLAY İREZ
Yeni Yüzyıl Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2015
Konu: Biyoloji = Biology
Dizin: Embriyo = Embryo ; Embriyo nakli = Embryo transfer ; Fertilizasyon-in vitro = Fertilization-in vitro ; Gebelik = Pregnancy ; Kadın ürogenital hastalıkları = Female urogenital diseases ; Kısırlık = Infertility ; Üreme teknikleri = Reproduction techniques

Özet:
AMAÇ: Günümüzde yardımcı üreme teknikleri laboratuarlarında uygulanan embriyo kültür sistemlerineki kaydedilen tüm gelişmelere rağmen halen başarı sağlanamamış bir grup bulunmaktadır ve embriyonun kendisinden kaynaklanan embriyolojik artıklar embriyo gelişiminde sorun yaratmaktadırlar.Tekrarlayan implantasyon başarısızlığının(TİB) nedenleri multifaktöryel görünmekle birlikte , son yıllarda yapılan bir çok çalışma otolog endometrial kokültürün TİB grubu hastaların embriyolarında embriyo kalitesini arttırmak suretiyle artan klinik gebelikler sağlandığını göstermiştir.Diğer yandan , zaman alıcı ve masraflı bir işlem olması nedeniyle TİB hastaları içinde asıl yararı görecek bir hedef endikasyon grubu yaratabilmek için gebelik sonuçlara parametrelere göre ayrılarak analiz edildi ve istatiksel anlamlılıkları karşılaştırıldı. 
Materyal ve Method: Toplamda , TİB (n≥3) endikasyonu taşıyan 678 olgu Mart 2010 ve Mayıs 2015 arasında gerçekleştirilmiştir. Hastalar retrospektif olarak kullanılan kültür sistemlerine göre sınıflandırılmışlardır.329 Olgu (Grup I) son denemelerini otolog kokültür üzerinde ve 349 olguda yine konvansiyonel kültür ortamı kullanılmıştır. Prezigot evresinden embriyo transferine dek , günlük embriyo gelişim parametrelerine göre skorlanarak ve klinik gebelik oranları karşılaştırılarak , kaın yaşı, önceki deneme sayıları ve elde edilen MII sayılarına göre sonuçlar analiz edilmiştir. 
Sonuçlar: Kokültür uygulanmış gruplarda konvansiyonel kültür grubuna göre avantajlı klinik gebelikler elde edilmekle birlikte özellikle 38 yaş ve üzeri gruplarda bu artış daha fazla yüzdeler göstermiştir. İstatiksel olarak anlamlılığı kazanması ise özellikle önceki başarısız denemesi 4 olan grup ile başlamıştır. 4 (p<0,05),5(p<0,01),6(p<0,01) başarısız denemeye sahip 38 yaş ve üzeri grupta istatiksel olarak anlamlı olarak kokültür grubunda gebelik oranı artışı sağlanmıştır. Altı denemeden sonraki artış ise değerlendirmenin altındadır (p<0,1). Aynı şekilde elde edilen MII oranlarının 5 MII'nin altına düşmesi ile kokültür grubu 38 yaş ve üzeri olgu grubunda anlamlı olarak daha yüksek gebelik göstermiştir (p<0,05).
3. gün embryo verileri	GRUP I	GRUP II	P
Pn Duraksama oranı(%)	2,62	7,04	P<0,01
3. Gün Duraksama oranı (%)	3,35	11,45	P<0,01
>6 blastomer oranı(%)	72,9	44,7	P<0,01
1.Kalite emb. Oranı(%)	68,5	54,2	NS
Fragmantasyon Oranı(%)	9,7	18,3	P<0,05

	KOKÜLTÜR (YAŞ 38≤)	%	KONVANSİYONEL (YAŞ≤38)	%	P ARALIĞI
2 DENEME	8/24	33,3	8/27	29,6	NS
3 DENEME	7/22	32	7/24	29,2	NS
4 DENEME	6/23	26	2/22	9,1	P<0,05
5 DENEME	5/13	38,5	1/18	5,6	P<0,01
6 DENEME	4/14	28,6	1/19	5,3	P<0,01
6< DENEME	2/11	18,2	1/16	6,3	P<0,1

	KOKÜLTÜR (YAŞ 38≤)	%	KONVANSİYONEL (YAŞ 38≤)	%	P ARALIĞI
<5 MII OOSİT	18/52	34,6	11/48	22,9	P<0,05
5-10MII OOSİT	28/67	41,8	27/67	40,3	NS
10-15 MII OOSİT	31/65	47,7	24/69	34,8	NS
15< MII OOSİT	17/38	44,7	13/41	31,7	NS
Tartışma: Bu durumda 38 yaş altı tüm gruplarda ve 38 yaşın üzerindeki 2,3 ve altının üzerinde başarısız denemesi olan veya ileri yaştaki kötü over reservi yanıtı olan hastalar dışındaki tüm gruplarda kokültür tekniği yapmak klinik gebelik yönünden istatiksel olarak anlamlı bir başarı sağlamamaktadır.
Bu tekniğin uygulanarak yarar sağlanacak hedef grubun belirlenmesi, hem otolog kokültür tekniğinin yararları yada yararsızlığı hakkındaki bir çok tartışmanın sonlanması hemde gerçekten yarar görecek hedef grubun bilgilendirilmesi ve gebeliklerinin arttırılması yönünden önemlidir.

Abstract:
Objective: Although tremendous improvements have been implemented in current embryo culture systems, embryo wastage is still a major concern during extended culture. Although the cause of repeated implantation failure (RIF) seems to be multifactorial, several studies have indicated a possible beneficial role of endometrial coculture systems on RIF cases via improving embryo quality and viability. On the other hand, coculture preperation is time consuming and costly procedure, for this reason we want to narrowing the group to determine a clearer indication of this RIF cycles. This study is undertaken to analyze the cumulative contribution of endometrial coculture (EC) in such cases compare with convantional culture results and to determine the most effective features to work.
Materials & Methods: Overall, 678 cycles in which coculture with the indication of recurrent implantation failure (n≥3) have been performed were included in the study between March 2010 and May 2015. Patients were retrospectively grouped according to culture media systems used. In 329 patients (group I) endometrial coculture has been of choice throughout the culture period and in 349 cycles convational culture media has been utilized. From pre-zygote stage to embryo transfer, daily embryo growth parameters were scored and clinical pregnancy rates compared between groups according to female age, the number of previous attempts and number of mature oocytes obtained.
Results: No statistically significant difference in main patient and cycle parameters such as female age, male age, BMI, gonadotrophine ampoules used, MII oocytes collected and fertilized were found between groups. However, when embryo development characteristics were compared, PN arrest, cleavage arrest and 3 rd day blastomer number and embryo fragmantation rates. 
3 rd day embryo growing outputs	GROUP I	GROUP II	P
Pn arrest rate(%)	2,62	7,04	P<0,01
3rd day arrest rate (%)	3,35	11,45	P<0,01
>6 blastomer rate(%)	72,9	44,7	P<0,01
1st grade emb. rate(%)	68,5	54,2	NS
Fragmantation rate(%)	9,7	18,3	P<0,05

	GROUP I (AGE38≤)	%	GROUP II (AGE≤38)	%	P 
2ND TRIAL	8/24	33,3	8/27	29,6	NS
3RD TRIAL	7/22	32	7/24	29,2	NS
4TH TRIAL	6/23	26	2/22	9,1	P<0,05
5TH TRIAL	5/13	38,5	1/18	5,6	P<0,01
6TH TRIAL	4/14	28,6	1/19	5,3	P<0,01
6< TRIAL	2/11	18,2	1/16	6,3	P<0,1

	GROUP I (AGE38≤)	%	GROUP II (AGE≤38)	%	P 
<5 MII OOCYTE	18/52	34,6	11/48	22,9	P<0,05
5-10MII OOCYTE	28/67	41,8	27/67	40,3	NS
10-15 MII OOCYTE	31/65	47,7	24/69	34,8	NS
15< MII OOCYTE	17/38	44,7	13/41	31,7	NS

Conclusions: Our results show that culturing embryos on endometrial monolayer cells seems to increase the cleavage rate and the quality of embryos in recurrent implantation failure cases. Furthermore, by comparing all of the results the main target group of this coculture patients defined (older than 38 age and higher than 2 items ) is very important for identified in order to assure the usefulness of coculture.