Toluen inhalasyonuna bağlı olarak sıçanlarda testis ve epididimiste meydana gelen yapısal değişikliklere E vitamininin etkisi
The effect of Vitamin E depending toluene inhalation occurs structural changes in rats testes and epididymis
Yazar: MÜGE ÇETİNKAYA
Danışman: PROF. DR. M. TAHİR HATİPOĞLU
Gazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2010
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Askorbik asit = Ascorbic acid ; Epididimis = Epididymis ; Solunum = Respiration ; Sıçanlar = Rats ; Testis = Testis ; Toluen = Toluene ; Vitamin E = Vitamin E ; Vitamin E = Vitamin E

Özet:
Organik çözücüler günlük yaşantımızda evlerde ve endüstride oldukça yaygın kullanılan maddelerdir. Bir organik çözücü olarak sık kullanılan toluen başlıca; boyalar, boya incelticiler, vernik, pas önleyiciler, yapıştırıcılar, solvent tabanlı temizleyicilerde ve ayrıca kozmetik ürünlerde bulunur.Solunum yolu ile alınan toluenin vücut metabolizması üzerindeki zararlı etkilerinin yanı sıra serbest radikal oluşumunu arttırdığı da bilinmektedir. Vücut metabolizması üzerindeki toksik etkileri reaktif oksijen bileşiklerinin [(Reaktif Oksijen Türleri (ROS)] aşırı miktarlarda oluşması şeklinde ortaya çıkmaktadır. ROS' nin oluşturacağı zararlı etkiler antioksidan enzimlerle ve bunlara destek olarak enzimatik olmayan antioksidanlarla giderilmeye çalışılır. E vitamini ve C vitamini enzimatik olmayan antioksidanlardandır.Bu çalışmada toluene soluma yoluyla etkin bırakılmış sıçanların testis ve epididimislerinde oluşabilecek yapısal değişikliklere, antioksidan özellikteki E vitamini ile E ve C vitaminlerinin birlikte uygulanmasının koruyucu etkilerinin incelenmesi amaçlandı. Organların değerlendirilmesi amacıyla dokulara histokimyasal olarak HE ve immunohistokimyasal olarak kaspaz 9 boyaması yapıldı.Yapılan değerlendirmelerde toluen uygulaması yapılan gruptan alınan testis örneklerinde seminifer tübül yapısında bozulmalar ve yer yer nekrotik değişiklikler izlendi. Ara bağ dokusundaki ödem ilgiyi çekiyordu. Aynı grupta yapılan Kaspaz 9 boyamasında tutulumun belirgin olduğu saptandı. Tutulum özellikle seminifer tübül epiteli ve Leydig hücrelerinde belirgindi.Toluen uygulaması yapılan gruba ait epididimis örneklerinde ise epitel normal yapıda izlenmesine karşın yüzey farklanmalarının belirsizliği dikkati çekti. Bazı epitel hücrelerinde apoptozis belirgindi.E vitamini uygulaması yapılan grupta, testis dokusunda bazı tübüllerde toluen grubuna eş görünüm izlenirken bazılarında daha normal görünüm ayırt edildi. Bu gruba ait Epididimis örneklerindeki bulgularda kontrol grubuna benzerdi.E ve C vitamini uygulamasının birlikte yapıldığı grupta ise testis dokusundaki görünüm kontrol grubuna eşdeş olmakla birlikte, kontrol grubundan ayrıcalıklı olarak bağ dokudaki ödem belirgindi. Epididimiste kanal epiteli kontrole benzer olmakla birlikte yüzey farklanmalarının belirsizliği ayırt edildi.Çalışmamızın istatistiksel sonuçları değerlendirildiğinde; kontrol grubunun seminifer tübül duvar kalınlığı düzeyi sırasıyla Toluen uygulaması yapılan deney grubu; Toluen + E vitamini uygulaması yapılan deney grubu; Toluen + E vitamini + C vitamini uygulaması yapılan deney grubuna göre istatistiksel olarak daha yüksek ve anlamlıydı (p<0.001)Seminifer tübül çapları değerlendirildiğinde; kontrol grubu tübül çapı değerleri, Toluen + E vitamini + C vitamini uygulaması yapılan deney grubuna göre istatistiksel olarak daha yüksek ve anlamlıydı (p<0.001).Sonuç olarak E vitamini uygulamasının toluen aracılığıyla oluşan yapısal hasarları engelleyebileceği, başlatıcı kaspazlardan kaspaz 9 salınımını baskılayabileceği, ancak E ve C vitamininin birlikte uygulamasının E vitamini uygulaması kadar etkili olamayacağı, iki antioksidan arasındaki etki mekanizmasının ve dokulardaki biyosentezinin bu süreçte etkili olabileceği kanısına varıldı.

Abstract:
Organic solvents are substances commonly used in daily life in homes and industry. Often used as an organic solvent toluene, the major, paints, paint thinners, varnish, rust inhibitors, adhesives, solvent-based cleaners, and also found in cosmetic products.With respiratory tract, as well as the harmful effects of toluene on the metabolism of the body is also known to increase free radical formation. Toxic effects on the body metabolism of reactive oxygen compounds [(Reactive Oxygen Species (ROS)] is emerging as the formation of excessive amounts. ROS? s constitute harmful effects of antioxidant enzymes and non-enzymatic antioxidants are trying to go to them as support. Vitamin E and vitamin C are non-enzymatic antioxidants.In this study our aim is to investigate the damage that exposure toluene inhalation may wreak on the structure of testis and epididimis tissues in rats and also we aimed to prove the potential protective effects of vitamin E and together with vitamin E and C known with their antioxidant properties performed by histochemical HE staining and immunohistochemical Caspase 9 staining.As a result of in the toluene exposure group; histochemical assesments of the structure of seminiferous tubules in testis samples showed necrotic changes. Oedema in connective tissue is attracted attention. İn the same group was found to be significant involvement of caspase 9 staining in seminiferous tubule epithelium, and particularly in Leydig cells.Despite monitoring the ephitelium set in normal structure in the epididymis samples of toluen exposured group, uncertainty of surface differentiations drew attention. Apoptosis was evident in some epithelial cells.İn vitamin E treated group, some tubules in testicular tissue have observed co-appearance with toluene exposure group and some of the tubules have more normal appearance. Epididymis samples?s findings belonging to this group, were similar with the control group.The appearence of testicular tissue observed in vitamin E and C treated group is same with the control group, privileged as the oedema in the connective tissue was evident. Although the channel epithelium in findings of epididymis samples are similar to the control group, the uncertainty of surface differentiation was identified.Statistical results of our study evaluated the level of wall thickness of seminiferous tubules in the control group, respectively, the experimental group were applied Toluene, Toluene + Vitamin E application of the experimental group; Toluene + vitamin E + vitamin C according to the application of the experimental group a statistically significant and higher (p <0.001 )İn the evaluation of the seminiferous tubule diameters, the tubule diameters of the control group were statistically significant and higher than the Toluene + vitamin E + vitamin C applied experimental groups (p <0.001).As a result of our study it is concluced that vitamin E may prevent the structural damagecaused by toluene exposure and may inhibit the release of caspase 9 which is one of the initiator caspases. But the effection of applying both vitamin E and C can not be as effective as applying vitamin E. The mechanism of action between the two antioxidants and biosynthesis in tissues may be effective in this process.