Periodontal olarak sağlıklı bireylerde günlük içilen sigara miktarına bağlı hipoksiyle indüklenen faktör (HİF) sinyal yolağının araştırılması
Investigation of the hypoxia induced factor (HİF) signal pathwayassociated with daily smoking amounts in periodontal healthyindividuals
Yazar: ÖZGE YÜKSEKKAYA
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ MEHMET MURAT TAŞKAN ; DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZKAN KARATAŞ
Tokat Gaziosmanpaşa Üniversitesi / Diş Hekimliği Fakültesi / Periodontoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Diş Hekimliği Uzmanlık, 2020
Konu: Diş Hekimliği = Dentistry
Dizin: HIF = HIF ; Hipoksi = Hypoxia ; Patojenler = Pathogens ; Periodonti = Periodontics ; Polimeraz zincirleme reaksiyonu = Polymerase chain reaction ; Sigara içme = Smoking ; Sinyal nakli = Signal transduction ; Vasküler endotel büyüme faktörleri = Vascular endothelial growth factors

Özet:
Amaç: Periodontal olarak sağlıklı bireylerde günlük içilen sigara miktarı ile
oluşan hipoksik ortamın hipoksiyle indüklenebilen sinyal yolağı biyobelirteçleri ve
periodontopatojenlerin miktar ve içeriğine etkisinin araştırılması amaçlanmıştır.
Yöntem: Bu çalışma kontrol grubu (n=20): Sigara kullanmayan ve hayatı
boyunca hiç sigara kullanmamış bireyler, 1. grup (n=20): Günlük 5 veya daha az sayıda
sigara tüketen bireyler 2. grup (n=20): Günlük 6-10 sigara tüketen bireyler, 3. grup
(n=20): Günlük 11-19 sigara tüketen bireyler ve 4. grup (n=20): Günlük 20 veya daha
fazla sigara tüketen bireylerden oluşmak üzere toplamda 100 bireyden oluşan 5 grupta
yapılmıştır. Hastaların mevcut dişlerinin hepsinden periodontal klinik parametreler
ölçülmüş, sağ maksilla 16 nolu dişten eğer yoksa 15 veya 17 nolu dişlerinden diş eti
oluğu sıvısı (DOS) alınmıştır. Bakteri varlığının tespiti için için her bireyde belirlenmiş
olan gingival sulkustan 2 adet kağıt şerit ile subgingival plak örneği alınmıştır. Diş eti
örnekleri gingivektomi veya kron boyu uzatma operasyonu endikasyonu olan kişilerden
alınmıştır. Diş eti ve dental plak örneklerine Polimeraz Zincir Reaksiyonu (PZR), DOS
örneklerine ise Enzime Bağlı İmmünosorban Deneyi (ELISA) yöntemiyle bakılmıştır.
DOS içindeki HIF-1α, HIF-1β, PHD 1 diş etinde HIF-1α, VEGF seviyelerine
bakılmıştır. Subgingival dental plak örneklerinde A. actinomycetemcomitans, P.
gingivalis, T. forsythia, T. denticola, P. intermedia, P. micros, F. nucleatum, C. recta,
E. nodatum, E. corrodens ve C. gingivalis/ochracea/sputigena periodontopatojenlerine
bakılmıştır.
Bulgular: Yaşa bağlı dağılımlarda gruplar arasında istatistiksel olarak fark
yoktur (p>0,05). Gruplar arası plak indeksleri, gingival indeksler ve gingival sulkus
derinliği değerlendirildiğinde de istatistiksel olarak anlamlı farklılık bulunmamıştır.
(p>0,05). Sigara sayısı bütün gruplar arasında istatistiksel olarak farklıdır (p<0,05).
ELISA sonuçlarına göre ise HIF-1α değerlerine bakıldığında grup 1, grup 2 ve grup
4'ten anlamlı derece yüksek bulunmuştur (p<0,05). Grup 5 ise grup 1, grup 2 ve grup
4'ten anlamlı derecede yüksek bulunurken grup 3'ten anlamlı derecede düşük
bulunmuştur (p<0,05). HIF-1β değerinde gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı
fark yoktur (p>0,05). Grup 5'in PHD-1 değerlerine bakıldığında grup 1, grup 2 ve grup
3'ten istatistiksel olarak anlamlı derecede yüksek bulunmuştur (p<0,05). HIF-1α'nın
PZR sonuçları ise kontrol geni (GAPDH) sabit tutularak değerlendirildiğinde sigara
içen gruplar arasında fark yokken, sigara içenlerde içmeyenlere göre yaklaşık 2 kat artış
göstermiştir. VEGF'nin PZR sonuçları ise sigara içenler arasında 20 adet üstü sigara
içen grupta artış varken diğer sigara içen gruplar arasında fark yoktur. Sigara içenlerde
içmeyenlere göre ise yaklaşık 2 kat artış vardır. Bütün gruplarda T. forsythia, T.
denticola, P. intermedia, P. micros, F. nucleatum, C. recta, E. corrodens, C.
gingivalis/ochracea/sputigena tespit edilmiştir. 0-5 arası sigara içen grupta E. nodatum
tespit edilmemiştir. 20 üstü sigara içen grupta ise A. actinomycetemcomitans ve sigara
içmeyen grupta P. gingivalis tespit edilmemiştir.
Sonuç: Klinik parametrelerde gruplar arasında anlamlı farklılıklar yoktur.
Günlük tüketilen sigara miktarına bağlı olarak hipoksinin artacağı öngörülse de,
çalışmamızda hipoksinin günlük tüketilen sigara miktarından bağımsız olarak
değişebileceği görülmüştür.
Anahtar kelimeler: Sigara; HIF-1α; HIF-1β; VEGF; PHD-1; Periodontopatojen

Abstract:
Objective: It was aimed to investigate whether the hypoxic environment
caused by the amount of cigarettes smoked daily in periodontal healthy
individuals affects the amount and content of signal pathway biomarkers and
periodontopathogen bacteria that can be induced by hypoxia.
Method: This study was conducted on 100 individuals in 5 groups as
Control Group (n = 20): Individuals who do not smoke and have never smoked
during their lifetime, Group 1 (n = 20): Individuals who consumed 5 or fewer
cigarettes daily Group 2 (n = 20): Individuals who consumed 6 -10 cigarettes
daily, Group 3 (n = 20): Individuals who consumed 11-19 cigarettes daily, and
Group 4 (n = 20): Individuals who consumed 20 or more cigarettes daily.
Periodontal clinical parameters were measured from all existing teeth of the
patients and gingival crevicular fluid (GCF) was taken from the right maxilla
teeth 16, if they were not present in the oral cavity, from teeth 15 or 17. For the
determination of bacterial presence, subgingival plaque samples were collected
from the gingival sulcus for each individual with paper strips 2 times. Gingival
samples were collected from subjects with an indication for gingivectomy or a
crown lengthening operation. Gingiva and dental plaque samples were analyzed
by Polymerase Chain Reaction (PCR), and GCF samples by Enzyme Linked 
Immunosorbent Assay (ELISA) method. HIF-1α, HIF-1β, PHD-1 in GCF were
examined and HIF-1α, VEGF amounts were examined in the gingiva. In
subgingival dental plaque samples, A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, T.
forsythia, T. denticola, P. intermedia, P. micros, F. nucleatum, C. recta, E.
nodatum, E. corrodens and C. gingivalis / ochracea / sputigena
periodontopathogens were examined.
Results: There was no statistical difference between groups at age
(p>0.05). When plaque indexes, gingival indexes and gingival sulcus depth
evaluated, there was no statistically significant difference between groups
(p>0.05). The number of cigarettes is statistically different among all groups
(p<0.05). According to ELISA results, when the HIF-1α values are analyzed, it
was found significantly higher than group 1, group 2 and group 4 (p<0.05).
Group 5 was found significantly higher than group 1, group 2 and group 4, but
significantly lower than group 3 (p<0.05). There was no statistical difference
between the groups in HIF-1β value (p>0.05). Considering PHD 1 values, it was
found that Group 5 was statistically higher than group 1, group 2 and group 3
(p<0.05). When the PZR results of HIF-1α were evaluated by keeping the
control gene (GAPDH) constant, there was no difference among smokers and
smokers showed 2 times increase compared to non-smokers. PZR results of
VEGF showed an increase among smokers in the group with over 20 smokers,
but there was no difference between other smoker groups. There was a 2 times
increase in smokers compared to non-smokers. T. forsythia, T. denticola, P.
intermedia, P. micros, F. nucleatum, C. recta, E. corrodens, C. gingivalis /
ochracea / sputigena were detected in all groups. E. nodatum was not detected 
in the 0-5 smoker group. A. actinomycetemcomitans was not detected in the
group of smokers more than 20 and P. gingivalis in the non-smoker group.
Conclusion: There were no significant differences in clinical parameters
between groups. Although it was hypothesed that hypoxia will increase
depending on the amount of cigarettes consumed daily, it was detected in our
study that hypoxia may change regardless of the amount of cigarettes consumed
daily.
Keywords: Cigarette, HIF-1α, HIF-1β, VEGF, PHD-1,
Periodontopathogen