Pinealektomi (PINX) yapılmış ratlarda CCL4 indükte edilmesiyle karaciğer dokusunda oluşan morfolojik değişiklikler üzerine melatoninin rejeneratif etkilerinin araştırılması
Investigation of the regenerative effects of melatonin on morphological changes in liver tissue by inducing CCL4 in pinealectomy (PİNX) rats
Yazar: DERYA ACAR
Danışman: PROF. DR. TUNCAY ÇOLAK
Kocaeli Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Anatomi Ana Bilim Dalı / Anatomi Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Anatomi = Anatomy
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Karaciğer = Liver ; Karaciğer hastalıkları = Liver diseases ; Melatonin = Melatonin ; Pinealektomi = Pinealectomy ; Rejenerasyon = Regeneration ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Amaç: Çalışmamızdaki amacımız pinealektomi işlemi yapılmış ve CCL4 ile karaciğer hasarı modeli oluşturulmuş ratlarda meydana gelen karaciğer hasarını gözlemlemek ve en güçlü antioksidanlardan biri olan melatoninin karaciğer hasarı üzerinde iyileştirici etkilerinin olup olmadığını histolojik ve biyokimyasal açıdan incelemektir.
Gereç ve Yöntem: Çalışmamız 250-300 gr ağırlığında 56 adet wistar albino cinsi erkek sıçan üzerinde gerçekleştirilmiştir. Sıçanlar 7 gruba ayrılmıştır (Kontrol, Sham PINX+mısır yağı, CCL4 (model), PINX, PINX+CCL4, PINX+melatonin, PINX+CCL4+melatonin grup) (n:8). PINX işlemi, deneyin ilk gününde gerçekleştirilmiştir. Melatonin uygulamaları 15 gün boyunca günlük verilmiştir. CCL4 uygulaması 15 gün boyunca gün aşırı devam etmiştir. 16.gün anestezi altında kesim yapılarak karaciğer dokuları alınmıştır. Biyokimyasal olarak MDA, GSH, CAT, SOD, TAS, TOS, OSI, AST, ALT, ALP, IL-6, IL-1B değerlerine bakılmıştır. Histolojik olarak TGF-1B düzeyi ele alınmıştır. İstatiksel analizler IBM SPSS 14 ile yapılmış ve p<0.05 istatistiksel manada anlamlı olarak kabul edilmiştir.
Bulgular: CCL4 grupları, PINX grupları MDA seviyelerinin yükseldiği, CAT ve SOD seviyelerinin azaldığı, TAS düzeylerinin azaldığı, TOS ve OSI değerlerinde dramatik artışların olduğu ve AST, ALT ve ALP değerlerinin artışı yönünde anlamlı farklılık olduğu bulunmuştur (p<0.05). IL-6 ve IL-1beta değerlerinde CCL4 ve PINX gruplarında artış yönünde anlamlı faklılık bulunmuştur (p<0.05). Melatonin verilen grupların tamamında, melatoninin iyileştirici etkisi görülmüştür. CCL4 uygulaması sonrası histopatolojik bulgular incelendiğinde hepatositlerde konjesyon, nekroz ve hücre infiltrasyonları tespit edilmiştir. Melatonin uygulamasının ise bu histopatolojik bulguları azalttığı saptanmıştır. PINX+CCL4 grubunda TGF-1B expresyonu en fazla iken PINX+CCL4+melatonin gruplarında daha az olduğu istatiksel olarak görülmüştür (p<0.05). 
Sonuç: Çalışmamızda yapmış olduğumuz biyokimyasal, histopatolojik ve immünohistokimyasal incelemeler sonucu melatoninin antioksidan ve antienflamatuar etkisiyle CCL4 gibi kanserojen etkili faktörlere rağmen karaciğer dokusu üzerinde iyileştirici özelliğinin olduğu gözlemlenmiştir.

Abstract:
Objective: The aim of this study is to observe liver damage in rats that underwent pinealectomy and in which liver damage model was created with CCL4, and to examine whether melatonin, one of the strongest antioxidants, has curative effects on liver damage histologically and biochemically. 
Material and Method: Our study was carried out on 56 Wistar albino male rats weighing 250-300 g. Rats were divided into 7 groups (Control, Sham PINX+corn oil, CCL4 (model), PINX, PINX+CCL4, PINX+melatonin, PINX+CCL4+melatonin group) (n:8). PINX procedure was performed on the first day of the experiment. Melatonin applications were given daily for 15 days. CCL4 administration continued every other day for 15 days. On the 16th day, the liver tissues were taken by cutting under anesthesia. Biochemically, MDA, GSH, CAT, SOD, TAS, TOS, OSI, AST, ALT, ALP, IL-6, IL-1B parameters were examined. TGF-1B level was evaluated histologically. Statistical analyzes were made with IBM SPSS package program v14 and p<0.05 was accepted as statistically significant.
Results: MDA levels increased, CAT and SOD levels decreased, TAS levels increased, TOS and OSI values increased dramatically, and AST, ALT and ALP values were significantly increased in the CCL4 groups and PINX groups biochemically examined. There were significant increases in IL-6 and IL-1beta values in the CCL4 and PINX groups. In the groups given melatonin, the melatonin-improving effect was observed. When histopathological findings after administration of CCL4 were observed congestion, necrosis and cell infiltrations were detected in hepetocytes. Melatonin application was found to reduce these histopathological findings. While TGF-1B expression was the highest in PINX+CCL4 group, it was less in PINX+CCL4+melatonin groups. 
Conclusion: As a result of biochemical, histopathological and immunohistochemical studies conducted in our study, we observed that melatonin has a healing effect on liver tissue due to its antioxidant and anti-inflammatory effect.