Askorbik asidin hücre yaşlanması üzerine etkisi
The effect of ascorbic acid on cell aging
Yazar: NİHAL ALEM
Danışman: YRD. DOÇ. DR. K. BARBAROS BALABANLI
Gazi Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Biyokimya = Biochemistry ; Biyoloji = Biology ; Kimya = Chemistry

Özet:
Serbest oksi jen radikal leri çesitli hastalıkların patogenezinde veyaslanma sürecinde rol oynayan kararsız, yüksek reaktivi telimoleküllerdir. Serbest oksi jen moleküllerinin yanı sıra bas ta nitrikoksit (NO) olmak üzere reaktif nitrojen türleri de hücrelerin lipit,DNA, karbonhidrat ve enzim gibi tüm önemli bilesiklerine etkiederek hücrelerin yapı ve islevlerini bozmaktadırlar. Lipitperoksidasyonu, hücrelerde ve dokularda serbest radikallerinmeydana getirdigi oksidatif stresin bir göstergesidir. Lipitperoksidasyonu seviyelerinin ölçülmesinde bir peroksidasyonürünü olan malondialdehi t (MDA) kul lanılmaktadır. Serbestradikallerin hücrelerde meydana getirdigi bu degisiklikler, hücreyaslanmasındaki önemli faktörlerden biridir. Askorbik asit (AA)ise özellikle süperoksit ve hidroksil radikalleri ile reaksiyonagirerek serbest radikallerin hücrelerde olusturdugu hasarıönleyebilen güçlü bir antioksidandır.Bu çalısmada farklı AA konsantrasyonlarının hücre metabolizmasıüzerindeki etkisinin ve hücre yaslanmasına yol açan oksidatifstresle mücadelede AA'nın rolünün arastırılması amaçlanmıstır.Bu amaçlar dogrultusunda f ibroblast hücre kül türlerine (L-929cell line) 100-1000 ?M arasında degisen farklı konsantrasyonlardaAA, 100 nM bir NO inhibitörü olan N-Nitro-L-Arjinin Metil Ester(L-NAME) ve 1 mM H2O2 uygulanmıs ve bu hücre kül türlerindeNO düzeyleri spektrofotometrik olarak, AA ve MDA seviyeleri iseHPLC'de ölçülmüstür.Sonuç olarak AA, olusturulan tüm gruplarda doz bagımsız olarakNO miktarını azaltmıstır. AA ve L-NAME birlikte uygulandıgındabu iki bilesigin birbirlerinin etkilerini sadece düsük dozlardaantagonize et tigi tespi t edilmistir. H2O2'nin ise MDA seviyeleriniarttırdıgı, oksidati f stresi önlemeye çalısan AA seviyelerini iseazalt tıgı saptanmıstır.

Abstract:
Free oxygen radicals are highly reactive and unstable moleculeswhich play role in aging and pathogenesis of various diseases. Freeradicals and reactive ni trogen species especial ly ni tric oxide (NO)ef fect to al l important cel l compounds such as l ipids, DNA,proteins, enzymes and these species impair cel l structure andfunction. These changes that are occured by free radicals are veryimportant factors for cel l aging.Ascorbic acid (AA) is a powerful antioxidant that reacts wi thespecially superoxide and hydroxyl radicals and prevents theformation of free radicals in cel l . In this study, i t is aimed toresearch the metabol ism of AA on cel ls in various concentrationsand the role of AA on preventing oxidative stres which causes cel laging.In this direction, L-929 f ibroblast cel l cul tures were appl ieddif ferent concentrations of AA, a NO inhibi tor N-Nitro-L-argininemethyl ester (L-NAME) and H2O2 . NO levels were measured byspectrophotometer, AA and MDA levels were measured by HPLCin these cel l cul tures.As a resul t, AA decreased the amounts of NO in a doseindependentmanner in all groups. We determined that when AAand L-NAME were appl ied together, these two compoundsantagonised the ef fects of each other only in low doses. H2O2increased MDA levels and decreased AA.