Pestisit maruziyetine cevaben oluşabilecek DNA metilasyon değişiminin in vitro koşullarda araştırılması
Investigation of DNA methylation alterations in response  to pesticide exposure in vitro condition
Yazar: HACER ERGÜN
Danışman: DOÇ. DR. AKIN ÇAYIR
Çanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Sistem Biyolojisi Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2017
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: DNA = DNA ; Epigenez-genetik = Epigenesis-genetic ; Glifosat = Glyphosate ; Metilasyon = Methylation ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Pestisitler = Pesticides ; Tetraklorvinfos = Tetrachlorvinphos

Özet:
On  yılı  aşkın  süredir  gerçekleştirilen  bilimsel  çalışmalar,  çevresel  kirleticilerin 
genom ve/veya epigenom düzeyinde değişmelere neden olduğunu göstermiştir. Artan 
veriler çevresel kirleticilerin epigenetik modifikasyonları değiştirebildiğini göstermiştir. 
Epigenom düzeyinde meydana  gelen değişmelerin başta kanser olmak  üzere birçok 
hastalığın  etiyolojisinde  tek  başına  ve/veya  başka  mekanizmalarla  birlikte  rol 
oynayabileceği  bilinmektedir.  Bu  bağlamda,  çevresel  kirleticilerin  epigenetik 
mekanizmaları  değiştirerek/etkileyerek  bazı  hastalık  süreçlerini  değiştirebileceği 
düşünülmektedir. Tez çalışmasında, Uluslararası Kanser Araştırmaları Ajansı (IARC - 
The  International  Agency  for  Research  on  Cancer)  tarafından  insanda  karsinojen 
potansiyeli  yüksek  olarak  ilan  edilen  2  adet  pestisit  in  vitro  koşullarda  epigenetik 
modifikasyonlardan total DNA 5 metilsitozin (5mC) miktarını değiştirip değiştirmediği 
araştırılmıştır.  Bu  amaçla,  Glyphosate  ve  Tetrachlorvinphos  pestisitlerinin  çeşitli 
konsantrasyonları ile A549 hücreleri in vitro koşullarda muamele edilmiştir. 12 ve 24 
saat muamelelerin sonunda izole edilen DNA örnekleri ELISA yöntemine dayalı kit 
yardımıyla total 5mC miktarı belirlenmiştir.  
Elde edilen sonuçlara göre Glyphosate ile 12 ve 24 saat muamele sonucunda total 
5mC miktarı artmıştır. 24 saatlik muamelede, total 5mC miktarı istatistiksel olarak 
anlamlı bulunmuştur. Araştırılan konsantrasyonlar, sitotoksik olmayan dozlardır. Diğer 
taraftan, Tetrachlorvinphos ile muameleden sonra ölçülen total 5mC miktarı negatif 
kontrole göre artmıştır. Bu artışlar konsantrasyon artışı ile birlikte olup, en yüksek 
konsantrasyonların neden olduğu 5mC miktarının istatistiksel olarak anlamlı olmadığı 
görülmüştür. 
Bu  çalışma  ile  karsinojenik  olduğu  bildirilen  iki  pestisitin,  DNA  metilasyon 
miktarlarını  değiştirdiği  belirlenmiştir.  Total  5mC  miktarı,  bu  iki  pestisit  için  birer 
maruziyet  biyomarkırı  olabileceği  gibi  karsinojenite  için  de  bir  etki  mekanizması 
olabileceği önerilmektedir.

Abstract:
Scientific studies performed over a decade showed that environmental pollutants 
cause changes at the genome and / or epigenome level. Increased data have shown that 
environmental pollutants can alter epigenetic modifications. It is known that alteration 
occurring at the epigenome level can play a role in the etiology of many diseases, 
especially cancer, alone and / or with other mechanisms. In this context, it is thought 
that  environmental  pollutants  can  change  some  disease  processes  by  changing  / 
affecting the epigenetic mechanisms. In the thesis study, it was investigated whether the 
amount of total DNA 5 methylcytosine-5mC was changed as epigenetic modifications 
in response to two pesticides in vitro conditions, which were declared high human 
carcinogenic potential by the International Agency for Research on Cancer (IARC). For 
this purpose, A549 cells were treated with various concentrations of Glyphosate and 
Tetrachlorvinphos pesticides in vitro. At the end of 12 and 24 hour treatments, total 
5mC amount of DNA samples were determined by using kit based ELISA method. 
According to the results obtained, total amount of 5mC was increased as a result of 
treatment with Glyphosate for 12 and 24 hours. Treatment for 24 hours, total amount of 
5mC  was  found  statistically  significant.  The  concentrations  investigated  are  non-cytotoxic doses. On the other hand, the total amount of 5mC measured after treatment 
with Tetrachlorvinphos was increased relative to the negative control. These increases 
were accompanied by concentration increases, and the amount of 5mC caused by the 
highest concentrations was not found to be statistically significant. 
In this study, two pesticides reported to be carcinogenic changed DNA methylation 
quantities.  The  total  amount  of  5mC  is  suggested  to  be  an  action  mechanism  for 
carcinogenicity as well as exposure biomarkers for these two pesticides.