Metaplastik meme karsinomlarında klinikopatolojik korelasyon ve immünhistokimyasal analiz ile patogenezin aydınlatılması
Clinicopathologic correlation in metaplastic breast carcinomas and enlightening pathogenesis via immunohistochemical analysis
Yazar: YASEMİN ŞAHİN
Danışman: DOÇ. DR. MERİH GÜRAY DURAK
Dokuz Eylül Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Tıbbi Patoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2015
Konu: Patoloji = Pathology
Dizin: Hastalık = Disease ; Karsinoma = Carcinoma ; Meme neoplazmları = Breast neoplasms ; Neoplazm kök hücreleri = Neoplastic stem cells ; Neoplazm metastazları = Neoplasm metastasis ; Neoplazmlar = Neoplasms ; İmmünohistokimya = Immunohistochemistry

Özet:
Amaç:
Metaplastik meme karsinomları (MK), tüm meme kanserlerinin %1'den azını oluşturan
heterojen bir grup tümördür. Patogenezleri henüz tam olarak aydınlatılamamış nadir görülen
bu tümörlerin hedefe yönelik tedavisi için son dönemlerde literatürde çok sayıda çalışma
bulunmaktadır. Çalışmamızın amacı, bölümümüzde MK tanısı almış olgularımızı yeniden
gözden geçirerek, tümör boyutu, tümörün histolojik türü ve derecesi, lenfovasküler, perinöral
invazyon durumu, aksiller lenf nodlarına metastaz, perikapsüler invazyon gibi patolojik
parametreleri değerlendirmek; immunhistokimyasal analiz ile hormon reseptörleri ve cerb-B2
durumu yanı sıra bazal-benzeri fenotip oranını belirlemek; bu tümörlerin patogenezlerini
açıklamaya yönelik literatürde yer alan teorileri immunhistokimyasal belirteçlerle
değerlendirmek; ve benzer evredeki invaziv duktal karsinomlarla (İDK) karşılaştırarak
klinikopatolojik korelasyon ile hastalarımızın hastalıksız yaşam ve sağkalım oranlarını
saptamaktır. Tümör hücrelerinin immunhistokimyasal profilini değerlendirerek
patogenezlerini açıklamaya yönelik teorileri tartışmak ve hedefe yönelik tedavi için literatüre
katkı sağlamak hedeflenmektedir.
Gereç ve Yöntem:
Retrospektif olarak patoloji arşivinden taranarak bulunan, 1994 yılından günümüze kadar
bölümümüzde tanı almış 30 MK hastası ile benzer evredeki 30 İDK hastasının hematoksileneozin
boyalı doku kesitleri yeniden değerlendirildi. Uygun tümörlü bloklar seçilerek
immunhistokimyasal boyalar (ER, PR, c erb-B2, EGFR, CK5/6, CD24, CD44, e-kaderin, p63,
Snail) uygulandı. MK olgularında üçlü negatif ve bazal benzeri fenotipe sahip olanların oranı
belirlendi. Tüm veriler dahil edilerek elde edilen prognostik ve prediktif parametreler ile
istatistiksel inceleme yapıldı.
Bulgular:
Çalışmaya dahil edilen 60 invaziv meme kanseri olgusunun 59'u kadın 1'i erkek olup, yaş
ortalaması MK olgularında 54,8, İDK olgularında 56,7 dir. Ortalama tümör boyutu MK
olgularında 28,3 mm, İDK olgularında 21,5 mm dir. MK olgularının 14'ü (%46,6) skuamöz,
4'ü (%13,4) kondroid, 3'ü (%10,0) adenoskuamöz, 2'si (%6,6) karsinosarkom, 1'i (%3,3)
osteoklastik, 1'i (%3,3) sarkomatöz ve nöroendokrin diferansiyasyon göstermekte olup,
5'inde (%16,6) nonspesifik özellikler izlenmiştir. MK olgularının çoğu (%83,3) derece III,
İDK olgularının çoğu ise (%60,0) derece 1 veya 2'dir. Hem MK hem de İDK olgularının
9'unda (%30,0) lenf nodu metastazı izlenmektedir. MK olgularının 16'sında (%53,3), İDK
olgularının 17'sinde (%56,7) lenfatik invazyon; MK olgularının 11'inde (%36,7), İDK
olgularının ise 7'sinde (%23,3) vasküler invazyon vardır. MK olgularının 16' sı(%53,3) ER,
PR ve c erb-B2 negatiftir (üçlü-negatif). Bazal benzeri fenotip (EGFR ve/veya CK5/6
pozitifliği) MK olgularının 26'sında (%86,6) izlenmektedir. MK olgularının 19'unda
(%63,3)p63, 16'sında (%53,3) CD24 ile boyanma vardır. MK olgularının tümünde CD44,
İDK olgularının tümünde ise CD24 ile boyanma izlenmiştir. Hem MK (%90,0) hem de İDK
(%96,7) olgularının çoğunda e-kaderin ile boyanma vardır. Snail ile her iki grupta boyanma
görülmemiştir. MK ve İDK olguları arasında tümör derecesi (p=0,001), ER, PR, p63, EGFR,
CK5/6, CD24 ve CD44 ekspresyonu (p<0,001) açısından istatistiksel olarak anlamlı fark
vardır. Bununla birlikte, tümör boyutu, lenfovasküler ve perinöral invazyon durumu, lenf
nodu tutulumu, perikapsüler invazyon, cerb-b2 ve e-kaderin ekspresyonu açısından anlamlı
ilişki bulunmamıştır. Düzenli takip verisi bulunan 23 MK olgusunda ortalama 58,3 aylık takip
sonrası %33,3 ex izlenirken, 23 İDK olgusunda ortalama 42,2 aylık takip sonrası %13,3 ex
vardır. Genel sağ kalım açısından, MK ve İDK olguları arasında istatistiksel olarak anlamlı
fark izlenmiştir (p=0,036).
Sonuç:
MK'lu hastalarımızın %86,6'sında bazal benzeri fenotip izlenmekte olup, üçlü-negatiflik oranı
%53,3'tür. MK olgularının % 46,7'sinde, İDK'lara göre (olguların hiçbirinde CD44+/CD24-
fenotip izlenmedi) istatistiksel olarak anlamlı oranda farklı CD44+/CD24- immunfenotip
olması, benzer şekilde myoepitelyal belirteç olan p63 ile de MK olgularında anlamlı düzeyde
yüksek pozitiflik izlenmesi, bu olguların patogenezinde kök hücrelerinin ve myoepiteliyal
hücrelerin rolünü desteklemektedir. E-kaderin ile olguların çoğunda ekspresyon kaybının
izlenmemesi, Snail ile de hiçbir olguda boyanma görülmemesi, olgu grubunun küçük
olmasına bağlı olabilir. Dolayısıyla, olgu grubumuz epitelyal mezenkimal geçiş teorisini
değerlendirmek için yeterli değildir. Düzenli takibi olan hastaların genel sağ kalım
oranlarındaki istatistiksel olarak anlamlı fark, MK'ların daha agresif davranış ve klinik
gidişatını göstermektedir.

Anahtar Sözcükler: Metaplastik karsinom, üçlü-negatif meme karsinomu, patogenez,
epitelyal-mezenkimal geçiş, kanser kök hücresi

Abstract:
Aim:
Metaplastic breast carcinomas (MC) are heterogeneous group of tumors that constitute less
than 1% of all breast cancers. There are various studies in the literature about targeted
therapies of these rare tumors,in whichthe pathogenesis is stillunclear. The aim of this study is
to evaluate the pathological parameters such as; tumor size, histologic type and grade of
tumor, lymphovascular, perineural invasion, axillary lymph node status and pericapsular
invasion; and to determine basal-like phenotype ratio, in addition to hormone receptor and cerb
B2 status, by immunohistochemical analysis in patients with metaplastic carcinoma. We
have also aimed to evaluate the theories about the pathogenesis of these tumors using
immunohistochemical markers and to investigate both disease-free and overall survival of
these patients by clinocopathological correlation. We evaluated invasive ductal carcinoma
(IDC) patients of similar stage, as a control group. Therefore, our objective is to discuss
theories about the pathogenesis of these tumors by evaluating immunohistochemical profile
and to contribute to literature about the targeted treatment of metaplastic carcinomas.
Materials and methods:
Hemotoxylin-eosine stained tissue sections of 30 MC patients and 30 IDC patients of similar
stage were selected from our pathology archieve, diagnosed between 1994 and 2014, and
retrospectively evaluated. Appropriate paraffin blocks containing tumor tissue were selected,
and immunohistochemical staining (ER, PR, c erb-b2 , P63, EGFR, CK5/6, e-kaderin, Snail,
CD24 and CD44) was performed. In MC cases, triple negativity and basal-like phenotype
ratio was determined. Statistical analysis was performed using prognostic and predictive
parameters of the data.
Results:
Of 60 patients with invasive breast carcinoma included in the study, 59 were female and 1
was male. Mean age was 54,8 years in MC and 56,7 years in IDC patients. Mean tumor size
was 28,3 mm in MC and 21,5 mm in IDC patients. Of 30 MC patients, 14 (46,6 %) had
squamous, 4 (13,4%) had chondroid, 3 (10,0 %) had adenosquamous differentiation, 2 (6,6%)
were carcinosarcoma, 1 (3,3%) had osteoclastic and 1 (3,3%) had sarcomatous and
neuroendocrine differentiation. In 5 (16,6%) patients no differentiation was noted. Most of the
cases with MC (83,3%) were grade 3 and most IDC cases (60,0%) were either grade 1 or 2.
Lymph node metastases was observed in 9 (30,0%) cases in both MC and IDC groups. 16
(53,3%) of MC cases and 17 (56,7%) of IDC cases had lymphatic invasion and 11 (36,7%) of
MC cases and 7 (23,3%) of IDC cases had vascular invasion. 16 (53,3%) of MC cases were
ER, PR and c erb-B2 negative (triple negative). Basal-like phenotype (EGFR and/or CK5/6
positivity) was observed in 26 (86,6%) of cases with MC. Of 30 MC cases, 19 (63,3%)
showed p63 staining, 16 (53,3%) showed CD24 staining. All MC cases were stained with
CD44, while all cases of IDC were stained with CD24. E-cadherin staining was present in
most MC (90,0%) and most IDC (96,7%) cases. No staining with Snail was displayed in both
groups. Statistically significant difference was observed with respect to tumor grade
(p=0,001), ER, PR, P63, EGFR, CK5/6, CD24 and CD44 expressions (p<0,001) between MC
and IDC groups.There was no statistically significant correlation with respect to tumor size,
lymphovascular and perineural invasion, lymph node involvement, cerb b2 and e-cadherin
expression. Of the 23 MC cases which had regular follow-up data, after a mean follow-up of
58,3 months, exitus was observed in 33,3%, while in 23 IDC cases, after a mean follow-up of
42,2 months exitus was observed in 13,3%. Statistically significant difference was found
between MC and IDC groups with respect to overall survival rate (p=0,036).
Conclusion:
In our MC cases, basal-like phenotype was observed in 86,6%, and triple-negativity in 53,3%
of the cases. CD44+/CD24- phenotype was observed in 46,7% of MC cases compared to none
in IDC cases, which was statistically significant. This difference in CD44+/CD24-
immunophenotype, as well as high rate of P63 positivity in MC cases, support both the roles
of stem cells and myoepithelial cells in the pathogenesis of metaplastic carcinomas. High
rates of e-cadherin positivity in most of the cases and Snail negativity in all cases may be due
to the small patient population of our study. Therefore, our patient population may not be
ideal to evaluate the epithelial mesenchymal transition theory. Statistically significant
difference between MC and IDC groups with respect to overall survival, supports more
agressive behaviour and clinical progress of metaplastic carcinomas, when compared to
invasive ductal carcinomas.

Key Words: Metaplastic carcinoma, triple-negative breast carcinoma, pathogenesis,
epithelial- mesenchymal transition, cancer stem cell.