Postmenopozal osteoporotik kadınlarda mikroRNA ekspresyonu ve kırık riski ile ilişkisi
Micro expression and its relationship with fracture risk in postfracture osteoporotic women
Yazar: ELİF GÜLER ÖZGÜL
Danışman: DOÇ. DR. YASEMİN ÖZKAN
Adnan Menderes Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Fiziksel Tıp ve Rehabilitasyon Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Fiziksel Tıp ve Rehabilitasyon = Physical Medicine and Rehabilitation
Dizin: Gen ifadesi = Gene expression ; Kadınlar = Women ; Kırıklar-kemik = Fractures-bone ; Menopoz = Menopause ; Mikro RNA = Micro RNA ; Osteoporoz-postmenopozal = Osteoporosis-postmenopausal ; RNA = RNA ; Ölçekler = Scales

Özet:
Amaç: Bu çalışmadaki asıl amacımız hasta grubumuz olan postmonepozal kadınlar ve
kontrol grubu olan osteopenik/sağlıklı kadınlar'da mir-133a ve mir-335-5p'nin ekspresyon
düzeylerinin karşılaştırılmasıdır. Aynı zamanda miRNA'ların, osteoporoz tanısı koymada
biyomarker olarak kullanılabilirliğini ve gelecekte gelişme ihtimali olan kırık tahminine
katkısını araştırmaktır.
Gereç ve Yöntemler: Çalışma başlatıldığı andan itibaren Adnan Menderes Üniversitesi
Uygulama ve Araştırma Hastanesine başvuran WHO kriterlerine göre postmenopozal
osteoporoz tanısı almış 49 osteoporoz hastası ve postmenopozal osteoporoz taraması sonrası
osteoporoz saptanmayan 20 gönüllü osteopenik/sağlıklı kişi çalışmaya alınmıştır. Hastaların
yazılı onamları alındıktan sonra yaş, cinsiyet, boy, kilo, vücut-kitle indeksi (VKİ), öğrenim
durumu, mesleği, medeni durumu, mevcut şikayetlerinin süresi, sigara kullanımı, alkol
tüketimi ve aile öyküleri, osteoporotik kırık öyküsü (klinik ve asemptomatik vertebral kırıklar
dahil), ailede kalça kırığı öyküsü, glukokortikoid kullanımı, sekonder osteoporoz nedenleri
ve kullandıkları ilaçlar sorgulandı ve BMD, LT/FN skoru, FRAX skorları hesaplanarak kayıt
altına alındı. Hastalardan biyokimya/hemogram analizi ve miRNA ekpsresyonlarınısaptamak
üzere periferik kan örnekleri toplandı. Fluidigm Biomark microfluidic platformu kullanılarak
Fluidigm Real-Time PCR ile mir-133a ve mir-335-5p ekspresyonları saptandı. Data analizi
https://geneglobe.qiagen.com/us/analyze adresinde data analiz yazılımı kullanilarak
çevrimiçi olarak yapıldı.
Bulgular: Değerlendirilmeye alınan hastalar 49'u osteoporoz tanısı almış hasta grubu ve
20'si osteopenik/sağlıklı kişileri oluşturan kontrol grubu olarak iki gruba ayrıldı. Gruplar arası
temel özellikler karılaştırıldığında yaş, boy, kilo ortalaması, hipertansiyon/diyabet tanısı olan
hasta sayısı iki grup arasında istatiksel açından farklı değildi. Ortalama BMİ hasta grubunda,
kontrol grubuna göre daha yüksek saptandı (p:0,06). Kan analizleri incelendiğinde ortalama
kalsiyum değeri osteopenik/sağlıklı hasta grubunda yüksek izlendi (p:<0,05). Diğer
parametlerde istatiksel açıdan anlamlı bir farklılık yoktur. mir-133a ekspresyon seviyeleri
istatiksel açından iki grup arasında farklı bulunmamasına rağmen, fold regülasyon değeri hasta grubunda, kontrol grubuna göre up regüle saptandı (p=0,078; fold regülasyon: 2.4). mir335-5p gruplar arası ekspresyon seviyesinde istatiksel açından benzerdi; fakat kontrol
grubunda hasta gruba göre fold regülasyon değeri down regüle olma eğiliminde saptandı
(p:0,68; fold regülasyon: -1,1). Ortalama Lomber BMD değerleri hasta grupta düşük saptandı;
fakat femur BMD değerleri arasında anlamlı bir fark izlenmedi (sırasıyla p:<0,01; p:0,21).
Hasta grupları korelasyon analizinde değerlendirildiğinde mir-133a, Lomber BMD ile
arasında negatif korelasyon, FRAX kalça skoru ile pozitif korelasyon saptandı (Sırasıyla r:-
,309, p:<0,05 ; r: 341, p:<0,01). mir-335-5p ile BMD değerleri arasında herhangi bir
korelasyon izlenmedi; FRAX kalça skoru ile arasında negatif korelasyon saptandı (r:-,354,
p<0,01).
Sonuç: Postmenopozal kadınların en sık sorunlarından olan osteoporoz hastalığı tanı ve
tadavisi güç ve karmaşık bir patolojidir. Biz çalışmamızda postmenopozal osteoporozda
mikroRNA'ların klinik heterojenitedeki rolünü, biyobelirteç olarak kullanılabilirliğini ve yeni
bir terapötik hedef olasılığı amacıyla kullanılabilirliğini gösterdik. Kemik ilişkili
miRNA'larda deneysel kanıtlar kısıtlı olduğundan, ossifikasyon sürecince rol aldığı
düşünülen miRNA'ların incelendiği daha çok çalışmaya ihtiyaç duyulmaktadır.

Anahtar Kelimeler: BMD, FRAX skoru, mir-133a, mir-335-5p, Osteopeni, Postmenopozal
osteoporoz

Abstract:
Aim: Our main aim in this study is to compare the expression levels of mir-133a and mir335-5p in our patient group, postmonopausal women, and control group, osteopenic/healthy
women. At the same time, it is to investigate the utility of miRNAs as biomarkers in
diagnosing osteoporosis and their contribution to the prediction of fractures that may develop
in the future.
Material and Methods: From the beginning of the study, 49 osteoporosis patients diagnosed
with postmenopausal osteoporosis according to WHO criteria, who applied to Adnan
Menderes University Application and Research Hospital, and 20 volunteer osteopenic/healthy
individuals who were not found to have osteoporosis after postmenopausal osteoporosis
screening were included in the study. After obtaining the written consent of the patients, age,
gender, height, weight, body-mass index (BMI), education level, occupation, marital status,
duration of current complaints, smoking, alcohol consumption and family histories,
osteoporotic fracture history (clinical and asymptomatic vertebral shards included ), family
history of hip fracture, use of glucocorticoids, causes of secondary osteoporosis and the drugs
they used were questioned, and BMD, LT/FN score, and FRAX scores were calculated and
recorded. Blood samples were taken from the patients to be used in blood
biochemistry/hemogram analysis and miRNA analysis by real-time PCR method.
Result: The patients included in the study were divided into two groups as the patient group,
49 of whom were diagnosed with osteoporosis, and the control group, which consisted of 20
osteopenic/healthy individuals. When the basic characteristics between the groups were
compared, age, height, mean weight, number of patients with hypertension/diabetes diagnosis
were not statistically different between the two groups. The mean BMI was found to be higher
in the patient group than in the control group (p=0.06). When the blood analyzes were
examined, the mean calcium value was found to be high in the osteopenic/healthy patient
group (p:<0,05). There is no statistically significant difference in other parameters. Although
mir-133a expression levels were not statistically different between the two groups, fold
regulation value was found to be upregulated in the patient group compared to the control group (p=0.078; fold regulation: 2.4). mir-335-5p was statistically similar at expression level
between groups; however, the fold regulation value tended to be down-regulated in the control
group compared to the patient group (p: 0.68; fold regulation: -1.1). Mean Lumbar BMD
values were low in that patient group; however, no significant difference was observed
between the femoral BMD values (p:<0.01; p:0.21, respectively). When the patient groups
were evaluated in the correlation analysis, a negative correlation was observed between mir133a, Lumbar BMD and a positive correlation with the FRAX hip score (r:-.309, p:<0.05,
respectively; r: .341, p<0.01) No correlation was observed between mir-335-5p and BMD
values. A negative correlation was found between FRAX hip score and (r:-.354, p<0.01).
Conclusion: Osteoporosis, one of the most common problems of postmenopausal women, is
a difficult and complex pathology to diagnose and treat. In our study, we demonstrated the
role of microRNAs in clinical heterogeneity in postmenopausal osteoporosis, their usability
as a biomarker, and their usability for the possibility of a new therapeutic target. Since
experimental evidence for bone-associated miRNAs is limited, more studies are needed to
examine miRNAs thought to be involved in the ossification process.

Key Words: BMD, FRAX score, mir-133a, mir-335-5p, Osteopenia, Postmenopausal
osteoporosis.