Paklitaksel ile uyarılan nörotoksik etkilere karşı krosinin koruyucu etkileri
Protective effects of crocin on paclitaxel-induced neurotoxic effects
Yazar: YÜCEL CAN MUTLU
Danışman: DOÇ. DR. TAMER AKKAN ; DOÇ. DR. ADEM GÜNER
Giresun Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Biyoloji = Biology ; Biyoteknoloji = Biotechnology ; Genetik = Genetics
Dizin: Krosin = Crocin ; Nöronlar = Neurons ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Paklitaksel = Paclitaxel ; Toksisite = Toxicity

Özet:
Paklitaksel farklı kanser tedavilerinde kullanılan önemli bir kemoterapötik ajan olup, tedavide kullanımının yanısıra aynı zamanda kas, sinir, karaciğer gibi birçok dokuda ciddi sitotoksik etkilere neden olmaktadır. Krosin doğal bir karotenoid bileşiktir ve safran (Crocus sativus L.)'ın altın sarısı-turuncu rengini meydana getirmektedir. Aynı zamanda güçlü bir antioksidan özelliğe sahip olup, antitümör, antidepresan, hipotensiv gibi bazı tıbbi uygulamalarda kullanılmaktadır. Bu çalışmada paklitaksel ile uyarılan sinir hücrelerindeki toksisiteye karşı krosinin koruyucu etkilerinin olup olmadığının ortaya konulması amaçlanmıştır. 
Çalışma kapsamında sitotoksik etkiler, insan nöroblastoma hücre hattında (SH-SY5Y) hücre canlılığı (MTT) ve laktat dehidrogenaz (LDH) denemeleri ile belirlenmiştir. Oksidan/antioksidan durum, total antioksidan kapasite (TAK) ve total oksidatif durum (TOD) ile ortaya koyulmuştur. Bununla birlikte, uygulamalar sonrası mikroçekirdek (MÇ) ve kardeş kromatit değişimi (KKD), DNA fragmentasyonu ve kaspaz 3/7 aktiviteleri değerlendirilmiştir. 
Sonuçlarımız, paklitaksel ile muamele edilen hücrelerde krosinin ortamdaki hücre canlılığını koruduğu; hücre membran hasarının belirtilerinden olan LDH salınımını önemli derecede (p<0,05) azalttığını göstermiştir. Krosin, paklitaksel ile uyarılan TOD seviyelerini önemli derecede (p<0,05) azaltırken, TAK kapasitelerini önemli derecede (p<0,05) arttırmıştır. Bununla birlikte oksidatif stres ile indüklenen DNA fragmentasyonundaki ve lipid peroksidayonu son ürünü olan malondialdehit konsantrasyonundaki artışı inhibe etmiştir. Krosinin paklitaksel ile kombinasyon uygulaması, yalnız krosin uygulamalarına kıyasla kaspas 3/7 ekspresyonu artışları aracılığıyla apoptozu aktive etmiştir. Sonuç olarak, bu çalışmada paklitaksel ile uyarılan nörotoksisiteye karşı krosinin önemli derecede koruyucu etki gösterdiği tespit edilmiştir.

Abstract:
Paclitaxel is an important chemotherapeutic agent used in different cancer treatments, and its use also causes serious cytotoxic effects on muscle, nervous, liver, and others tissues. Crocin, a natural carotenoid compound, and creates the golden-orange color of saffron (Crocus sativus L.). It is also used in some medical applications such as antitumor, antidepressant, hypotensive, and has a strong antioxidant property. The present study aimed to demonstrate the protective effects of crosin against paclitaxel-induced neurotoxicity. 
In the present study, cytotoxic effects were determined by cell viability (MTT) and lactate dehydrogenase (LDH) assays in human neuroblastoma cell line (SH-SY5Y). The oxidant/antioxidant status was demonstrated by total antioxidant capacity (TAC) and total oxidative status (TOS). Micronuclei (MN) and Sister Chromatid Exchange (SCE), DNA fragmentation, and caspase 3/7 activities were evaluated. 
Our results showed that combination treatment of paclitaxel and crocin significantly (p<0.05) ameliorated the cell viability while significantly (p<0.05) reducing LDH release which is sign of cell membrane damage. Crocin significantly (p<0.05) decreased paclitaxel-induced TOS levels while significantly (p<0.05) increasing TAC levels. The increase in DNA fragmentation and the increase in malondialdehyde concentration, the end product of lipid peroxidation, induced by oxidative stress was inhibited. Combination administration of crocin and paclitaxel activated apoptosis via increases in caspase 3/7 expression compared to cisplatin alone. As a result, it was demonstrated that crocin has a significant protective effect against paclitaxel-induced neurotoxicity.