Sıçanlarda oluşturulan renal iskemi reperfüzyon modelinde askorbik asit ve magnezyumun etkinliğinin karşılaştırılması
Comparison of the effectiveness of ascorbic acid and magnesium in renal ischemia reperfusion model in rats
Yazar: URAL CAN EKMEKÇİ
Danışman: PROF. DR. SANİYE DENİZ ÖZZEYBEK
Dokuz Eylül Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2020
Konu: Anestezi ve Reanimasyon = Anesthesiology and Reanimation
Dizin: Akut böbrek hasarı = Acute kidney injury ; Askorbik asit = Ascorbic acid ; Böbrek = Kidney ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Magnezyum = Magnesium ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Sıçanlar = Rats ; İskemi = Ischemia

Özet:
Amaç: Cerrahi girişimler sırasında iskemi reperfüzyon hasarından en çok etkilenen organlardan biri böbrektir. Bu çalışmanın amacı; sıçanlarda oluşturulan renal iskemi reperfüzyon hasarı modelinde iskemi öncesi uygulanan askorbik asit ve magnezyumun ayrı ayrı ve birlikte uygulanmasının etkinliğinin araştırılmasıdır.
Gereç ve Yöntem: DEÜ Hayvan Deneyleri Yerel Etik Kurulu onayının ardından ağırlıkları 250-300 g arasında değişen 35 adet Wistar albino cinsi erkek sıçan 5 gruba ayrıldı. Sham Grubu (n=7)'na laparotomi, diğer gruplara 45 dak iskemi ve 240 dak reperfüzyon uygulandı. İR Grubu (n=7)'na ilaç uygulanmadı. Askorbik Asit Grubu(n=7)'na iskemiden 1 saat önce 250 mg/kg askorbik asit, Magnezyum Grubu (n=7)'na iskemiden 1 saat önce 200 mg/kg magnezyum sülfat, Askorbik Asit + Magnezyum Grubu) (n=7)'na iskemiden 1 saat önce aynı dozlarda askorbik asit ve magnezyum sülfat intraperitoneal olarak uygulandı. Alınan renal dokularda MDA ve GSH konsantrasyonları belirlendi, kan örneklerinde serum BUN ve Kreatin düzeyleri ölçüldü. Histolojik incelemeler için H&E ve PAS boyamaları, apopitotik hücre incelemeleri için TUNEL immünohistokimyasal boyaması yapıldı. p<0.05 değeri istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.
Bulgular: BUN değeri Askorbik Asit + Magnezyum grubunda İR grubuna kıyasla anlamlı düşük bulundu (p:0,021). Kreatinin değeri Magnezyum grubunda İR grubuna kıyasla anlamlı düşük bulundu (p:0,002). MDA değeri Askorbit Asit (p:0,034) ve Askorbik Asit + Magnezyum (p:0,001) grubunda İR grubuna kıyasla anlamlı düşük bulundu. GSH değeri Magnezyum (p<0.001) ve Askorbik asit+ Magnezyum (p<0.001) gruplarında diğer gruplara kıyasla anlamlı olarak yüksek bulundu. H&E ve PAS boyamaları sonucunda ilaç uygulanan gruplarda daha az hasar tespit edildi ancak birlikte uygulamanın ayrı ayrı uygulamaya göre bir avantaj oluşturmadığı gözlendi. Askorbik Asit + Magnezyum grubunun TUNEL sayımları İR grubu sayımlarından anlamlı olarak düşük bulundu (p:0,005).
Sonuç: Elde edilen veriler doğrultusunda sıçan renal İR modelinde iskemi öncesi uygulanan 250 mg/kg askorbik asit ve 200 mg/kg magnezyum sülfatın ayrı ayrı ve birlikte uygulanmasının İR hasarının azalttığı kanısına varılmıştır.

Abstract:
Background: Kidney is one of the most affected organs of ischemia reperfusion injury during surgical procedures. The aim of this study is to determine effectiveness of ascorbic acid and magnesium administration seperately or combined before ischemia on the rat model of renal ischemia and reperfusion damage.
Materials and Methods: After the approval of the DEU Local Ethics Board of Animal Experiments, 35 Wistar albino male rats ranging in weight from 250-300 g were divided into 5 groups. The Sham Group (n=7) was a laparotomy, 45 min ischemia and 240 min reperfusions were applied to other groups. No drugs were applied to the IR Group (n=7). 250 mg/kg ascorbic acid 1 hour before ischemia in the Ascorbic Acid Group (n=7), Magnesium Group (n=7) was administered to 200 mg/kg magnesium sulfate 1 hour before ischemia, ascorbic acid and magnesium sulfate intraperitoneal in the same doses 1 hour before ischemia (n=7). MDA and GSH levels were determined in the renal tissues received, serum BUN and creatine levels were measured in blood samples.  H&E and PAS paintings for histological examinations, TUNEL immunohistochemical staining for apoptotic cell examinations. p<0.05 value was considered statistically significant.
Results: The BUN value was found significantly lower in the Ascorbic Acid + Magnesium group compared to the IR group (p:0.021). The value of creatine was found significantly lower in Magnesium group compared to the IR group (p:0,002). The MDA value was found significantly lower in the Group of Askorbit Acid (p:0.034) and  Group of Askorbic Acid + Magnesium (p:0.001) compared to the IR group. GSH value of Group of  Magnesium (p<0.001) and Group of Ascorbic Acid  + Magnesium (p<0,001) were significantly higher in other groups. Less damage was detected in the groups applied to the drug as a result of H&E and PAS paintings, but together it was observed that the application did not constitute an advantage over the individual application. TUNEL counts of the Group of Ascorbic Acid + Magnesium was found significantly lower than the IR group counts (p:0,005).
Conclusions:  According to the data obtained, it was concluded that the separate and combined of 250 mg/kg ascorbic acid and 200 mg/kg magnesium sulfate applied before ischemia in the rat renal IR model reduces the damage of the kidney.