Renal iskemi hasarında eritropoietinin koruyucu etkisinde Atp bağımlı K kanallarının katılımı: HIF-1 mRNA ekspresyonlarına etkisi
Participation of ATP dependent K channels to the renal ischemia injury under the effect of erytropoietin: HIF-1 mRNA expression changes
Yazar: TONGUÇ UTKU YILMAZ
Danışman: DOÇ. DR. AYDIN DALGIÇ
Gazi Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2009
Konu: Genel Cerrahi = General Surgery
Dizin: Böbrek fonksiyon testleri = Kidney function tests ; Böbrek tübülleri = Kidney tubules ; Böbrek yetmezliği = Kidney failure ; Eritropoietin = Erythropoietin ; HIF-1a = HIF-1a ; Mikro RNA = Micro RNA ; Potasyum kanalları = Potassium channels ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; İskemi = Ischemia

Özet:
Eritropoietin (EPO) hipoksiye cevap olarak yapılan ve salınan sitoprotektif bir sitokindir. EPO reseptörleri böbrek de dahil olmakla beraber pek çok dokuda bulunur. EPO'nun koruyucu etkisi farklı iskemi reperfüzyon (I/R) hücre ve doku modelleriyle gösterilmiştir. I/R hasarının önlenmesinde önşartlanma benzeri etki potasyum (K) kanal açıcılarla da sağlanmaktadır. I/R hasarında hipoksi ile uyarılabilen faktör (HIF) aktive olmakta. EPO'nun sitoprotektif etkisi ile K kanalları arasındaki ortak noktalar olup bu çalışma I/R'de K kanal açıcı ve inhibitörleri ile EPO'nun kullanımının sonuçlarını göstermek amacıyla yapılmıştır.Normal ve hipoksik şartlarda EPO, K kanal açıcı diazoksit, K kanal inhibitörü glibenklamid ve 5-hidrokidekanoat etkisinde hücre kültüründe çoğaltılan renal proksimal tübül hücre kültürüne uygulandı. EPO 1, 5, 10, 50 iu/ml dozlarda, glibenklamid 10, 100 ?M, diazokside 10, 100 ?M dozlarda, EPO ve Glibenklamid beraber gruplarda hücrelerin proliferasyonu MTT yöntemi ile, apoptozisi kaspaz-3 ile ve HIF mRNA ekspresyonları polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) ile incelendi. Sonuçlar tek yönlü ANOVA ile karşılaştırıldıEritropoietin (20 iu/ml) uygulaması hücrelerde proliferatif etki yaparken, glibenklamid uygulanan hücrelerde hücre sayısı belirgin azalmıştır (p<0.001). EPO ile beraber glibenklamid uygulaması ise glibenklamid uygulamasının neden olduğu hücre sayısındaki azalmayı kısmen düzeltmiştir. Hipoksi sırasında EPO uygulaması koruyucu etki yapmıştır. Diazoksit hipoksiye bağlı hücre ölümünden koruyucudur (p<0.001EPO'nun I/R'de koruyucu etkisinde K kanalları belirgin rol oynamaktadır. EPO uygulaması glibenklamidin olumsuz etkilerini önlemektedir. Bu nedenle özellikle renal transplantasyon hastalarında EPO kullanımı, K kanal inhibitörlerinin kullanılmaması etkin olabilir.

Abstract:
Erytropoietin (EPO) is a protective cytokine which is secreted against hypoxia. Receptors of EPO is found in many tissues. Protective effects of EPO were showed in different ıschemia reperfusion (I/R) cell or tissue models. Potassium (K) channel openers act as ischemic preconditioning like effect in I/R. In I/R ınjury hypoxia inducable factor (HIF) is activated. Because of the common pathways of EPO and K channel, we aimed to study the effects of EPO and K channel inhibitors (glibenclamid) of openers (diazoxide) in I/R.Under normal and hypoxic conditions, EPO, diazoxide, glibenclamid were used in kidney proximal tubule cell culture. Cell groups cmposed of EPO with doses of 1, 5, 10, 50 iu/ml, diazoxide with doses of 10, 100 ?M, glibenclamid with doses of 10, 100 ?M and both EPO and glibenclamid. Cell proliferation, apoptosis and HIF mRNA expression were evaluated by MTT, Kaspaz-3 and polymerase chain reaction (PCR) respectively. Results were evaluated by oneway ANOVA testProliferative effect was seen with EPO, decreased cell was seen in glibenclamid usage (p<0.001). Usage of EPO and glibenclamid together slightly corrected the decreased cell number occured by glibenclamid. EPO was protective in hypoxia. Diazoxide is also protective for hypoxic cell death (p<0.001There is a significant role of K channels in the protective effects of EPO for I/R. Usage of EPO is inhibiting the detrimental effects of glibenclamid. For this reason usage of EPO and avoidance of K channel blockers in renal transplantation may be useful.