Meme kanseri hücre hatlarında EGFR (Epidermal büyüme faktörü reseptörü) gen ekspresyonunun plazmid-bazlı mikrorna-7/kitozan kompleksleri ile baskılanmasına ilişkin in vitro çalışmalar
In vitro studies on impression of EGFR (Epidermal growth factor receptor) gene expression with plasmid-based microrna-7 / chitosan complexes in breast cancercell lines
Yazar: PELİN BULUT
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ SUNA ÖZBAŞ TURAN
Marmara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Biyoteknoloji = Biotechnology ; Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Epidermal büyüme faktörü = Epidermal growth factor ; Gen ifadesi = Gene expression ; Hücre dizisi = Cell line ; Kitosan = Chitosan ; Meme neoplazmları = Breast neoplasms ; Mikro RNA = Micro RNA ; Neoplazmlar = Neoplasms

Özet:
Amaç: Pek çok miRNA'nın etkinlik gösterdiği meme kanserinde, miRNA-7, tümör supresör
olarak kabul edilen önemli bir miRNA grubu olarak tanımlanmıştır. Ancak, miRNA'ların
hedef hücrelere herhangi bir biyodegresyona uğramadan transferinde bazı zorluklar
mevcuttur. Bu çalışmadaki amaç, doğal bir biyopolimer olan ve çeşitli araştırmalar sonucunda
etkinliği yüksek gen taşıyıcı sistem olarak kabul edilen kitozan kullanılarak hazırlanan
miRNA-7/kitozan komplekslerinin MCF-7 ve MDA-MB-231 meme kanseri hücre hatlarında
EGFR gen ekspresyonunun baskılanmasına ilişkin etkisini araştırmaktır.
Gereç ve Yöntem: MDA-MB-231 ve MCF-7 hücre hatlarında EGFR gen ekspresyonunu
baskılayabilecek miRNA-7/kitozan kompleksleri basit kompleksasyon yöntemiyle
hazırlanarak stabilite çalışmaları, partikül boyutu, zeta potansiyeli gibi karakterizasyonları
yapıldı. Komplekslerin kanser hücre hatlarına transfeksiyonu sonrası hücre proliferasyon
testleri yapıldı.
Bulgular: miRNA-7'nin %0,25'lik kitozan çözeltisi kullanılarak farklı oranlarda hazırlanan
formülasyonlarla tam kompleks oluşumu ve komplekslerin MDA-MB-231 ve MCF-7 meme
kanseri hücre hatlarına in vitro transfeksiyonu sağlanmıştır.
Sonuçlar: Çalışma sonucunda komplekslerin hücrelere stabil olarak taşındığı, kanser
hücrelerinin yayılımını azalttığı, EGFR gen ekspresyonunun baskılandığı ve kitozan
komplekslerinin miRNA için etkinliği yüksek ve güvenilir bir gen taşıyıcı sistem olduğu
gösterilmiştir.

Anahtar Sözcükler: plazmid DNA, miRNA-7, kitozan, meme kanseri, miRNA taşıyıcı
sistem

Abstract:
Objective: In a large number of miRNA-driven breast cancers, the miR-7 family has been
identified as an important miRNA group with tumor suppressor activity. However, there are
some difficulties in transferring miRNAs to target cells without any biodegression. Purpose
of this study is to investigate the effect of miRNA-7/chitosan complexes prepared by using
chitosan on MDA-MB-231 and MCF-7 breast cancer cell lines in vitro on EGFR gene
expression suppression.
Material and Method: MiRNA-7 / chitosan complexes capable of suppressing EGFR gene
expression in MCF-7 and MDA-MB-231 cell lines were prepared by simple complexation
method and their characterizations such as stability studies, zeta potential particle size studies
were performed. After transfection of complexes to cancer cell lines, cell proliferation tests
were performed.
Result: miRNA-7 using 0.25% chitosan solution in different ratios prepared with the full
complex formation of the complex and MDA-MB-231 and MCF-7 in vitro transfection of
breast cancer cell lines were provided.
Conclusion: The result of the study, it has been proven that complexes are transported to cells
stably, decrease the invasiveness of cancer cells, repress EGFR gene expression and chitosan
complexes are a safe and effective carrier system for miRNA.

Key Words: plasmid DNA, miRNA-7, chitosan, breast cancer, miRNA delivery system