Kök hücre ve karaciğer transplantasyon hastalarında toxoplasmosisin gerçek zamanlı polimeraz zincir reaksiyonu ve nested polimeraz zincir reaksiyonu yöntemleri ile takibi
Screening hematopoietic stem cell and liver transplant recipients for toxoplasmosis by using real time polymerase chain reaction and nested polymerase chain reaction
Yazar: AYŞE CANER
Danışman: PROF.DR. ADNAN YÜKSEL GÜRÜZ
Ege Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Parazitoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine ; Parazitoloji = Parasitology
Dizin: Toksoplazmoz = Toxoplasmosis ; Transplantasyon = Transplantation

Özet:
Toxoplasmosis organ ve kemik iliği transplantasyonu, kanser kemoterapisigerektiren hastalıklar, kortikosteroid tedavisi gibi immun sistemi baskılananhastalarda sıklıkla reaktive olarak, nadiren de primer enfeksiyon sonrası hayatı tehditeden ciddi klinik tablo yaratmaktadır. Hastaların çoğunda uygulanan immunbaskılayıcı tedavi sırasında Graft Versus Host hastalığı geçirmesi ile immunbaskılayıcı tedavinin yoğunlaştırılması toxoplasmosis sıklığını arttırmaktadır. Buçalışmada Ege Üniversitesi Tıp Fakültesi Onkoloji Anabilim Dalı ve KaraciğerTransplantasyon Ünitesinde immun baskılanma uygulanan 30'ar hasta ve donörlerinetransplantasyon öncesi ve sonrası dört ay boyunca düzenli aralıklarla standart olaraktoplanan kan örneklerine eşzamanlı olarak Real Time ve Nested PZR, Sabin FeldmanDye Test, EIA IgM ve ISAGA IgM testleri uygulanmıştır. Transplantasyon öncesiseropozitif olan veya donörü seropozitif olan seronegatif alıcılar olan risk grubuhastalar çalışmaya seçilmiştir. Toxoplasmosis sıklığının her iki PZR testinin bir aradakullanılmasıyla kök hücre transplantasyon hastalarında % 23.3 (7/30) ile literatürdekien yüksek oranda bulunması ve karaciğer transplantasyon hastalarında elde edilen %10'luk (3/30) oranın bu konuda elde edilen ilk veri olarak literatüre geçmesisağlanmıştır. İlginç olarak, yapılan tarama sırasında pozitif saptanan 10 hastanın 3'üReal Time PZR, 3'ü Nested PZR yöntemi ve kalan 4 hasta her iki PZR yöntemi ilesaptanmıştır. PZR pozitif saptanan hastaların % 20'sinde IgG, % 30'unda da IgMpozitifliği saptanabilmiştir. Allojenik KHT hastalarının üçünde akut Graft VersusHost hastalığı gelişmesiyle uygulanan yoğun immun baskılayıcı tedavi ve TMP-SMXprofilaksisinin kesilmesini takiben bu hastalarda PZR pozitifleşmiş, profilaksinintekrar başlanması ile PZR negatifleşmiştir. Sonuç olarak bu çalışmada transplantasyonhastalarında toxoplasmosis profilaksisinin herhangi bir sebeple kesilmesiyle hastalarındüzenli aralıklarla Real Time ve Nested PZR ile birlikte izlenmesinin erken tanı,tedavi ve tedavinin etkinliğinin izlenmesinde fayda sağlayacağı, immun sistemibaskılanmış hastalarda serolojik takipten ziyade PZR sonuçlarının ön plandatutulmasının hasta lehine yarar sağlayacağı ortaya konulmuştur.

Abstract:
Toxoplasmosis is a serious health problem in immun suppressed patientswhich may lead to death. The clinical presentation of toxoplasmosis in high riskgroups, such as organ, bone marrow transplant recipients or patients withmalignancies is usually reactivation of the latent infection, rarely primary T. gondiiinfection. In most of these patients, toxoplasmosis incidence is high because ofimpaired cellular and humoral immune response due to intense immunosuppressivetherapy which may be become heavier in case of graft versus host disease. In thepresent study, 60 immunosuppressed patients? blood samples were collected by EgeUniversity Medical School, Department of Oncology and Liver Transplantation Unitand screened for four months at fixed time intervals by Real Time and Nested PCR,and Sabin Feldman Dye Test, EIA IgM, and ISAGA IgM. Using both PCR methods,the incidence of toxoplasmosis in stem cell recipients is found to be 23.3% (7/30)which is the highest ratio in the literature. The ratio 10% (3/30) found in livertransplantation patients is the first data given for this group of patients. Interestingly,among these 10 patients, 3 patients were positive by Real Time PCR, 3 patients werepositive using Nested PCR, and only 4 patients were positive by both PCR methods.IgG increase was detected in two PCR positive patients (20 %), IgM antibodies weredetected only in three PCR positive patients (30 %). PCR results became positive inthree allogeneic hematopoietic stem cell patients who got more immunosuppressivetherapy because of acute graft versus host disease and ceased anti-Toxoplasmaprophylaxis during that period. As prophylaxis restarted, PCR became negative. Inconclusion, the present study showed that toxoplasmosis has to be considered in apatient whose anti-toxoplasmosis prophylaxis was interrupted. In addition, screeningof the high risk patient groups such as transplant recipients by both Real Time PCRand Nested PCR periodically may be beneficial for the diagnosis, treatment andfollow-up of the efficacy of the therapy. Finally, the present study highlighted theimportance of prioritizing PCR screening in patients taking immunosuppressivetherapy instead of serological screening.