Goji berrynin, lityum klorür birlikte kullanımının gram-pozitif ve gram-negatif bakteri popülasyonu üzerine etkilerinin araştırılması
The investigation of the effects of the combined use of goji berry and propolis on gram-positive and gram-negative bacteria population
Yazar: ENES ÇILDIR
Danışman: PROF. DR. MİNE ERGÜVEN
İstanbul Aydın Üniversitesi / Lisansüstü Eğitim Enstitüsü / Gıda Güvenliği ve Beslenme Ana Bilim Dalı / Gıda Güvenliği Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Beslenme ve Diyetetik = Nutrition and Dietetics ; Halk Sağlığı = Public Health ; Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Antibakteriyel etkiler = Antibacterial effects ; Goji berry = Goji berry ; Gıda takviyesi = Food supplement ; Lityum klorür = Lithium chloride

Özet:
Amaç: Amacımız antibakteriyel etkilere sahip, besin takviyesi olarak sıkça tercih edilen  kırmızı goji berry ile bipolar bozukluk ve kanser tedavisinde kullanılan lityum klorürün (LiCl)  birlikte kullanımının birbirlerinin antibakteriyel etkilerini gram-pozitif ve gram negatif bakterilerde nasıl etkilediğini araştırmaktı.  
Materyal ve metod: Bu çalışmada  Escherichia coli  (E.coli) ve Salmonella typhi (S. typhi) gram-negatif bakteri ve Staphylococcus aureus  (S. aureus) gram-pozitif bakteri olarak kullanıldı. Bakteriler, Amerikan Tip Kültür Koleksiyonu'dan satın alındı. Bu bakteriler seçici-besiyerlerinde üretildi. Goji berry ve lityum klorürün makrodilüsyon testi ile her bir bakteri soyundaki minimum inhibitör konsantrasyon 90 (MİK90) değeri, bakterilerin duyarlı oldukları antibiyotiklerdeki MİK90 değerleri ise mikrodilüsyon testi ile saptandı. Buna göre her bakteri suşu kontrol grubu (K), goji berry grubu (G), lityum klorür (L) grubu, kombinasyon grubu (G+L) ve antibiyotik grupları (Amoksisilin, Amfisilin, Vankomisin) olarak ayrıldı. Test maddelerinin bakteri kolonilerinin sayısını değiştirip değiştirmediği agar-dilüsyon testi kullanılarak değerlendirildi. Her test grubu (n:3) 3  defa tekrar edildi. Biyoistatistik analiz Annova testi ve Tamhane's T2 post-hoc testi kullanılarak yapıldı. P<0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. 
Bulgular: Makrodilüsyon yöntemine göre goji berrynin MİK90 değerleri sırasıyla E.coli'de (ATCC25922), S.typhi'de (ATCC39183) ve S.aerus'da (ATCC14222),  ≥50 mg/ml, ≥50 mg/ml ve ≥100 mg/ml olarak belirlendi. LiCl'ün MİK90 değerleri sırasıyla E.coli'de, S.typhi'de ve S.aerus'da  ≥100mM, ≥150 mM ve 500 mM olarak belirlendi. Antibiotikler olan vankomisinin S.aerus'da  ≥1.5 µg/ml, amoksisilinin S.typhi'de ≥10 µg/ml ve amfisilinin E.coli'de ≥8 µg/ml şeklinde  MİK90 değerleri saptandı. Kontrol grubuna göre kıyaslandığında tüm grupların, bakteri koloni sayılarını azalttığı görüldü (p<0.05). Koloni sayıları  sırasıyla K, G, LiCl, G+LiCl gruplarında  E.coli'de  300±7, 79±2, 72±3; S. typhi'de 300±6, 67±1,78±5, 77±3 ve S. aeurus'da 300±4, 116±6, 102±10, 101±5 olarak belirlendi. LiCl'e en dirençli bakterinin S. aeurus, en duyarlı bakterinin ise E.Coli olduğu saptandı. 
Sonuç: Bu çalışmada tek başına lityum klorür veya goji berry  kullanımını test edilen tüm  bakteri türlerinin çoğalmasının inhibisyonu için yeterli olduğu, ikisinin bir arada antagonist etki gösterdiği saptandı.

Abstract:
Objectives: Our aim was to investigate how the combined use of red goji berry, which has antibacterial effects and is frequently preferred as a nutritional supplement, and lithium chloride (LiCl) which is used in the treatment of bipolar disorder and cancer, affect the antibacterial effects of each other on gram-positive and gram-negative bacteria.
Materials and methods: In this study, Escherichia coli (E.coli) and Salmonella typhi (S. typhi) were used as gram-negative bacteria and Staphylococcus aureus (S. aureus) as gram-positive bacteria. Bacteria were purchased from the American Type Culture Collection. These bacteria were grown on selective-mediums. The minimum inhibitory concentration 90 (MIC90) values of each bacterial strain were determined by the macrodilution test of goji berry and lithium chloride, and the MIC90 values of the antibiotics to which the bacteria were sensitive were determined by the microdilution test. Accordingly, each bacterial strain was divided into the control group (C), the goji berry group (G), the lithium chloride (LiCl) group, the combination group (G+LiCl) and the antibiotic groups (Amoxicillin, Ampicillin, Vancomycin). Whether the test substances changed the number of bacterial colonies was evaluated using the agar-dilution test. Each test group (n:3) was repeated 3 times. Biostatistical analysis was evaluated using Annova test and Tamhane's T2 post-hoc test. P<0.05 was considered statistically significant.
Results: According to the macrodilution method, MIC90 values of goji berry were determined as ≥50 mg/ml, ≥50 mg/ml and ≥100 mg/ml in E.coli (ATCC25922), S.typhi (ATCC39183) and S.aerus (ATCC14222), respectively. MIC90 values of LiCl were determined as ≥100mM, ≥150mM and ≥500mM in E.coli, S.typhi and S.aerus, respectively. MIC90 values of antibiotics as vancomycin were ≥1.5 µg/ml in S.aerus, amoxicillin ≥10 µg/ml in S.typhi, ampicillin ≥8 µg/ml E.coli. When compared to the control group, it was seen that all groups decreased the number of bacteria colonies (p<0.05). The colony numbers were determined as 300±7, 79±2, 72±3 in E.Coli,  300±6, 67±1,78±5, 77±3 in S. typhi, and 300±4, 116±6, 102±10, 101±5 in S. aureus for C, G,LiCl, G+LiCl groups, respectively.It was determined that the most resistant bacteria to LiCl was S.aerus, and the most sensitive bacteria was E.coli.
Conclusion: In this study, it was determined that the use of lithium chloride or goji berry alone was sufficient for the inhibition of the proliferation of all tested bacterial species and they showed an antagonistic effect.