Silodosin etkin maddesinin farklı ortamlarda miktar tayini için yeni analitik yöntemlerin geliştirilmesi ve validasyonlarının yapılması
Development and validation of new analytical methods for the quantitative determination of the silodosin in different media
Yazar: SİNAN YERLİ
Danışman: PROF. DR. YÜCEL KADIOĞLU
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Analitik Kimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2018
Konu: Kimya = Chemistry
Dizin: Kromatografi = Chromatography ; Kromatografi-sıvı = Chromatography-liquid ; Miktar tayini = Determination ; Silodosin = Silodosin ; Spektrofotometri = Spectrophotometry

Özet:
Amaç: α1 adrenoreseptör blokeri olan silodosinin farmasötik preparatlarda ve plazmada miktar tayini için literatürdeki mevcut yöntemlere alternatif olarak basit, hassas ve yeni bir UV-Görünür Bölge Spektrofotometri ve LC-MS/MS yöntemleri geliştirilip geçerlilik testlerinin yapılması ve daha sonra Benign Prostat Hiperplazisi tanısı almış hastaların plazmalarında silodosinin miktar tayinlerinin gerçekleştirilmesi amaçlanmıştır. Materyal ve Metot: UV-Görünür Bölge Spektrofotometri yönteminde, 272 nm dalga boyunda çözücü olarak metanol kullanıldı. LC-MS/MS yönteminde ise asetonitril-10 mM amonyum asetat(asetik asit ile pH 4.5'a ayarlanan) (40:60, h/h) hareketli fazı, C8 kolon, 0,4 mL/dk akış hızı, MS dedektör, pozitif iyonizasyon, internal standart olarak karbamazepin kullanıldı. MS spektrumlarında silodosin ve karbamazepin için moleküler iyon değerleri sırasıyla 496 ve 237 olarak belirlendi. 
 Bulgular: Plazmaya katılım yapılan numunelerde güniçi- günlerarası doğruluk ve kesinlik değerleri UV-Görünür Bölge sıfırıncı türev yöntemi için sırasıyla %1.59 – 2.04, %0.67 – 1.4 ve %-0.76 – 3.88, %0.98 – 3.67 aralığında, birinci türev spektrofotometri yöntemleri için %-1.56 – 4.72, %0.98 – 2.10 ve %-1.47 – 3.72, %1.51 – 3.63 aralığında bulundu. LC-MS/MS yönteminin güniçi- günlerarası doğruluk ve kesinlik değerleri sırasıyla %-4.3 – 7.4, %1.5 – 5.3 ve %0.4 – 2.7, %-2.5 – 1.4 aralığında bulundu. Plazmadan geri kazanım değerleri ise LC-MS/MS yöntemi için ortalama %97, UV-Görünür Bölge Spektrofotometri yöntemi için ortalama %98.7 olarak belirlendi.  Sonuç: Geliştirilip geçerlilik testleri yapılan her üç yöntem ile piyasada tek mevcut farmasötik preparatta ve plazmada silodosin miktar tayinleri yapıldı. Benign Prostat Hiperplazisi tanısı konulan dört hastanın plazmasında LC-MS/MS yöntemiyle silodosin miktar tayinleri gerçekleştirildi. Çalışma sonucunda, her iki yöntemin kalite kontrol ve klinik çalışmalarında başarıyla uygulanabileceği sonucuna varıldı.  
 
 Anahtar Kelimeler: LC-MS/MS, silodosin, spektrofotometri

Abstract:
Aim: It was aimed to develop and validate a simple, sensitive and novel UVVisible Spectrophotometric and LC-MS/MS methods to determination of silodosin which is α1 adrenoreceptor blocker in pharmaceutical preparation and biological media as an alternative to present methods in the literature, and than apply this proposed methods on to the plasma samples collected from patients diagnosed with Benign Prostat Hyperplasia disorder. 
 Material and Method: Methanol was used as the solvent at a wavelength of 272 nm in UV-Vis Spectrophotometry. In LC-MS/MS method, acetonitrile-10 mM ammonium acetate (adjusted to pH 4.5 with acetic acid) (40:60, v/v) as mobile phase, C8 column, 0.4 mL/min flow rate, MS detector, positive ionization and carbamazepine parameters were prefered. Molecular ion for silodosin and carbamazepine were detected 496 and 237 respectively. Results: The intraday- interdays accuracy and precision values of the UVVisible Region zeroth derivative for the samples participating in the plasma were found to be between 1.59 – 2.04%, 0.67 – 1.4% and -0.76 – 3.88%, 0.98 – 3.67% respectively. The intraday- interdays accuracy and precision of the first derivative method of UVVisible region were found between  -1.56 – 4.72%, 0.98 – 2.10% and -1.47 – 3.72%, 1.51 – 3.63% respectively. The intraday- interdays accuracy and precision of the LCMS/MS method were found between -4.3– 7.4%, 1.5 – 5.3% and 0.4 – 2.7%, -2.5 – 1.4%  respectively. Plasma recovery values were found 97% for LC-MS/MS method and 98.7% for UV-Visible Spectrophotometry method. Conclusion: Quantative determination of silodosin in the only existing pharmaceutical preparation and plasma samples were performed by both of three methods which are developed and validated. Silodosin quantification was performed by LC-MS/MS method on the plasma of four patients diagnosed with benign prostatic hyperplasia. As a result of the study, it was concluded that both methods could be successfully applied in quality control and clinical studies. 
 
Key Words: LC-MS/MS, silodosin, spectrophotometry