Alabalıklarda (Oncorhynchus mykiss, walbaum) enfeksiyöz pankreatik nekrozis (IPN) hastalığının teşhisinde enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) yönteminin geliştirilmesi
Development of enzyme linked immunosorbant assay (ELISA)method for diagnosis of infectious pancreatic necrosis disease in rainbow trout (Oncorhynchus mykiss, walbaum)
Yazar: BUKET ÖZKAN ÖZYER
Danışman: PROF. DR. HAŞMET ÇAĞIRGAN
Ege Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Su Ürünleri Yetiştiriciliği Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Bilim ve Teknoloji = Science and Technology ; Su Ürünleri = Aquatic Products ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine

Özet:
Enfeksiyöz pankreatik nekrozis (IPN), genç salmonid balıklarda yüksekmortalite ile seyreden ve önemli ekonomik kayıplara neden olan akut bulaşıcıviral bir hastalıktır. Bu tezde hastalığının teşhisinde standart bir metot olan enzimlinked immunosorbent assay (ELISA) yönteminin geliştirilmesi ve IPNhastalığının teşhisi için kullanılması amaçlanmıştır.Enfeksiyöz pankreatik nekrozis virusunun (IPNV) teşhisi hücre kültüründeizolasyonu takiben serolojik tekniklerle identifikasyon ile yapılmaktadır. Buçalışmada indirekt çift antikor ELISA yöntemi kullanılmıştır. Bunun içinIPNV'nin VR 299, Sp ve Ab serotipleri pürifiye edilmiş ve bu serotiplere karşıtavşan ve kobaydan hiperimmun serum elde edilmiş ve bu antikorlar testtekullanılmıştır.Testin spesifitesini belirlemek için salmonid balıklarda hastalığa neden olandiğer viruslardan enfeksiyöz hematopoetik nekrozis virus (IHNV) ve viralhemorajik septisemi virusu (VHSV) kullanılmış ve çapraz reaksiyongörülmemiştir. Testin sensitivitesi VR299serotipi için DKID50 değeri 10 6,6 /ml,Ab serotipi için DKID50 değeri 10 6,8 /ml ve Sp serotipi için DKID50 değeri 10 7,3 /mlolarak tespit edilmiştir.VISonuç olarak IPN hastalığının teşhisi için geliştirilen ELISA yöntemininhızlı, basit ve ekonomik bir yöntem olarak kullanılabileceği düşüncesinevarılmıştır.Anahtar sözcükler: Balık hastalıkları, IPN, ELISA, salmonid balıklar , teşhis

Abstract:
Infectious pancreatic necrosis (IPN) is an acute contagious disease andcauses high mortality and significant economic losses in young salmonid fish. Inthis thesis, ELISA that is used as a standart method was developed to be used fordiagnosis of IPN.The diagnosis of IPN virus is made by virus isolation followed byserological identification technics. In this study sandwich ELISA technics wasused. Fort his purpose VR299,Sp, and Ab serotypes of infectious pancreaticnecrosis virus was purified and then hiperimmun sera were produced in rabbitand gine pigs against these serotypes. Finally these antibodies were used in thetest.Other viruses like infectious hematopoietic necrosis virus and viralhemorrgagic septisemia virus that cause diseases in salmonid fish were used todetermine the specificity of the test and cross reaction was not seen. Sensitivity ofthe test was found to be TCID50 10 6.6 /ml, 10 6.8 /ml, and 10 7.3 /ml for VR299,Aband Sp respectively.VIIIAs a result, development of ELISA method was considered to be simple,rapid, and economic method to be used for diagnosis of ınfectious pancreaticnecrosis disease.Key words: Viral fish disease, IPN, ELISA, salmonid fish, diagnosis