Sıçan alt ekstremite iskemi reprfüzyon modelinde MESNA (2-merkapto-etan-sülfonat)'nın etkileri
The effects of MESNA (2-merkapto-ethane-sulfonate) on the rat lower extremity ichemia reprusion model
Yazar: ÜMMÜ GÜLSÜM BARUTCU
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ SERKAN ERBATUR
Dicle Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Plastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery
Dizin: Alt ekstremite = Lower extremity ; Cerrahi-plastik = Surgery-plastic ; Ekstremiteler = Extremities ; Kaslar = Muscles ; MESNA = MESNA ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Sıçanlar = Rats ; İskemi = Ischemia

Özet:
Plastik cerrahide flep cerrahisi, ekstremitelerde kısmi veya tam kopmalar sonrası replantasyonlar, transplantasyonlar güncel pratikte yoğun uğraş verilen alanlardır. Bu tür cerrahilerin başarı oranı iskemi/reperfüzyon(İ/R) hasarı ile yakından ilişkilidir.

Farklı dokularda, iskemi reperfüzyon hasarını azaltmaya yönelik bir çok endojen ve eksojen madde araştırılmış ve araştırılmaya devam edilmektedir. Ancak halen İ/R hasarını tamamen engelleyen farmakolojik ajan bulunamamıştır.  2- merkaptoetan sodyum sülfonat(MESNA) iyofosfamid ve siklofosfamid gibi kemoterapötik ajanlara bağlı gelişen hemorajik sistit tedavisinde kullanılan bir ilaçtır. Farklı deneysel çalışmalarda, akciğer, böbrek, over, barsakta İ/R hasarına karşı koruyucu etkileri denesel olarak gösterilmiştir. Ancak alt ekstremite ve iskelet kasında iskemi reperfüzyon hasarı üzerine herhangi bir çalışma bulunmamaktadır. Bir çok organda İ/R hasarı üzerine olumlu etkileri göserilen Mesna'nın, alt ekstremite İ/R hasarına olumlu etkileri olabileceği hipoteziyle bu çalışma planlanmıştır.

Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda herbir grup 8 adet rattan oluşmak üzere 24 adet Sprague Dawley cinsi erkek rat kullanıldı. Gruplar, kontrol grubu, İ/R grubu ve İ/R + Mesna olacak şekilde üç gruba ayrıldı. Kontrol grubuna herhangi bir işlem uygulanmadı. Diğer iki gruba sağ ekstremite trochanter majusun proksimalinden turnike ile 4 saat iskemi ve 4 saat reperfüzyon ugulandı. İ/R grubuna iskemiden 15 dk ve reperfüzyon anında serum fizyolojik, İ/R+Mesna grubuna ise aynı zamanlarda Mesna 150mg/kg/doz'dan intraperitoneal olarak uygulandı. I/R tamamlandıktan denekler derin anestezi altında intrakardiyak kan alınarak sakrifiye edildi. Daha sonra tüm ratların sağ taraf gastrokinemius kaslarından histopatolojik ve biyokimyasal inceleme için doku örneği alındı. 
Bulgular: Kontrol grubu ile İ/R ve İ/R+Mesna gruplarında ekstravaze eritrosit varlığı, enine çizgilenme kaybı, çekirdeğin merkeze göçü, kas liflerinde ayrılma, bağ doku artışı, interselüler/interfasiküler ödem ve pnml sayısı istatiksel olarak anlamlı(p<0,001)  olmasına rağmen, IR ve IR+Mesna grubu istatiksel olarak aynıdır. Sonuç olarak histolojik olarak ve sayısal ölçümlerde Mesna uygulanan grubun dejeneratif değerlerde düşme sağladığı halde bunun istatiksel olarak anlamlı düzeyde olmadığı bulunmuştur. Kontrol ve deney grupları arasında lipid peroksidasyonun göstergesi olan MDA (p=0.860) enzimi ve antioksidan aktivite açısından değerlendirlmeye dahil edilen MPO açısından anlamlı bir fark bulunamadı(p=0,539).

           Sonuç: Yaptığımız çalışma sonucunda elde ettiğimiz bulgular, Mesna nın alt ekstremite kas dokusunda iskemi reperfüzyon hasarını istatiksel olarak anlamlı ölçüde azaltmadığıdır.  

Anahtar Kelimeler: Kas dokusu, Mesna, iskemi reperfüzyon

Abstract:
In plastic surgery, flap surgery, replantations after partial or complete ruptures in the extremities, and transplantations are areas of intense concern in current practice. The success rate of such surgeries is closely related to ischemia/reperfusion (I/R) injury.
Many endogenous and exogenous substances have been investigated and continue to be investigated to reduce ischemia-reperfusion injury in different tissues. However, there is still no pharmacological agent that completely prevents I/R damage. 2-mercaptoethane sodium sulfonate (MESNA) is a drug used in the treatment of hemorrhagic cystitis due to chemotherapeutic agents such as iophosphamide and cyclophosphamide. In different experimental studies, its protective effects against I/R damage in the lung, kidney, ovary, and intestine have been experimentally demonstrated. However, there are no studies on ischemia-reperfusion injury in lower extremity and skeletal muscle. This study was planned with the hypothesis that Mesna, which has shown positive effects on I/R damage in many organs, may have positive effects on lower extremity I/R damage.
Materials and Methods: In our study, 24 male Sprague Dawley rats, each group consisting of 8 rats, were used. The groups were divided into three groups as control group, I/R group and I/R + Mesna group. No procedure was applied to the control group. In the other two groups, 4 hours of ischemia and 4 hours of reperfusion was applied with a tourniquet from the proximal of the right extremity trochanter majus. In the I/R group, physiological saline was administered for 15 minutes after ischemia and at the time of reperfusion, and 150mg/kg/dose Mesna was administered intraperitoneally to the I/R+Mesna group at the same time. After I/R was completed, the subjects were sacrificed by taking intracardiac blood under deep anesthesia. Tissue samples were then taken from the right gastrocnemius muscles of all rats for histopathological and biochemical examination.
Results: Presence of extravasated erythrocytes, loss of transverse striation, migration of nuclei to the center, separation of muscle fibers, increase in connective tissue, intercellular/interfascicular edema and pnml number in the control group and I/R and I/R+Mesna groups were statistically significant(p<0.001) Although the IR and IR+Mesna groups are statistically the same. As a result, it was found that although the group in which Mesna was applied histologically and numerically, decreased degenerative values, this was not at a statistically significant level. There was no significant difference between the control and experimental groups in terms of MDA (p=0.860), which is an indicator of lipid peroxidation, and MPO, which was included in the evaluation in terms of antioxidant activity (p=0.539).

Conclusion: The findings we obtained as a result of our study are that Mesna did not statistically significantly reduce ischemia-reperfusion injury in the lower extremity muscle tissue.

Keywords: Muscle tissue, Mesna, ischemia reperfusion