Ratlarda oluşturulan enkapsüle peritoneal fibrozis üzerine vasküler endotelyal büyüme faktör inhibitörü bevacizumab'ın etkisi
The effect of vascular endothelial growtt factor inhibitor (bevacizumab) on sclerosing encapsulated fibrosis model in rats
Yazar: SİBEL ADA
Danışman: PROF. DR. AYKUT SİFİL
Dokuz Eylül Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı / Nefroloji Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2011
Konu: Nefroloji = Nephrology
Dizin: Periton diyalizi = Peritoneal dialysis ; Periton diyalizi-sürekli ambülatuar = Peritoneal dialysis-continuous ambulatory ; Peritonit = Peritonitis

Özet:
Sklerozan enkapsüle peritonit (SEP) periton diyalizi hastalarında ortaya çıkan oldukça nadir; fakat ölümle sonuçlanabilen ciddi bir komplikasyondur. Periton zarında pekçok nedenden dolayı etkilenme sonucu mezotel hücrelerinde (MC) dökülme, neovaskülarizasyon ve peritoneal fibrozis gelişir. Bevacizumab vasküler endotelyal büyüme faktörüne (VEGF) karşı oluşturulmuş monoklonal antihuman antikor olup damar gelişimini önlemesi ile fibrozisi azaltabilir. Metastatik kolon ve meme kanserlerinde kullanılmaktadır ancak peritoneal fibrozisteki etkinliğini gösteren bir çalışma yoktur.Amaç: SEP oluşturulan sıçan modelinde Bevacizumab'ın peritoneal fibrozisi üzerine etkisini araştırmak amaçlanmıştır.Gereç yöntem: 41 adet dişi wistar albino sıçan 6 gruba ayrıldı. Birinci gruptaki kontrol grubu (K) altı sıçana periton içine %0.9'luk serum fizyolojik (2ml/gün) 21 gün boyunca uygulandı. İkinci gruptaki klorheksidin grubu (KH) yedi sıçana karın içine tuzlu su içinde erimiş %15 etil alkol ve %0.1 klorheksidin(CG) 2ml/gün 21 gün boyunca verildi. Üçüncü gruptaki dinlenme grubu (D) yedi sıçana CG 2ml/gün 21 gün boyunca karın içine verildi. Dördüncü gruptaki bevacizumab1 grubu (B1) yedi sıçana CG 2ml/gün 21 gün Bevacizumab 21.gün 2.5mg/kg karın içine bir kez uygulandı. Beşinci gruptaki bevacizumab2 grubu (B2) yedi sıçana CG 2ml/gün 21 gün, Bevacizumab 0. ve 21.günlerde 2.5mg/kg karın içine verildi. Altıncı gruptaki bevacizumab3 grubu (B3) yedi sıçana 0. ve 21.gün bevacizumab 2.5mg/kg karın içine uygulandı. K ve KH grubu 21.günde; diğer gruptaki sıçanlar 42.günde sakrifiye edildi.Paryetal periton için karın sol ön duvarından, visseral periton için karaciğer üzerinden örnekler alındı. Patolojik inceleme için Hematoksilen&Eosin(HE) ve Von Gieson (VG) boyası kullanıldı. Işık mikroskopi ile paryetal ve visseral peritonun kalınlığı, damar çoğalması, fibrozis ve yangı değerlendirildi.Bulgular: Histopatolojik değerlendirmede H&E ve Von Gieson boyamayla B1 ve B2 grubunda paryetal ve visseral periton kalınlık azalması D grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı bulundu (p<0.05). Paryetal peritonda yangı skorlaması açısından gruplar arasında bir fark saptanmadı . KH ve D grubunda visseral peritondaki enflamasyon K grubuna göre anlamlı artmıştı . Paryetal ve visseral periton fibrotik alan yüzdesi açısından KH ve D grubunda fibrozis saptandı . B1 grubundaki gerileme anlamlı iken B2 grubundaki anlamlı değildi . Damarlanma skoru açısından paryetal peritonda KH , D ve B1 grubunda, visseral peritonda ise B2 grubunda artış saptandı.Sonuç: Bevacizumab; KH ile oluşturulan kimyasal peritonit sonrasında histopatolojik olarak peritoneal fibrozis gelişimini azaltmaktadır. Bevacizumab'ın peritoneal fibrozisine neden olmadığı ve periton fibrozisini engelleyebileceği söylenebilir. Ancak bu konuda gerek doz gerekse süre ile ilgili geniş çaplı deneysel ve klinik araştırmalara gerek vardır.Anahtar kelimeler: Sklerozan enkapsüle peritonit, Bevacizumab, VEGF

Abstract:
Sclerosing encapsulated peritonitis (SEP) is a rare but a serious complication that may cause death occurring in peritoneal dialysis patients. Many factors may cause mesothelial cell ( MC) denution, neovascularization and peritoneal fibrosis at peritoneal membrane. Bevacizumab is a monoclonal antihuman antibody against vascular endothelial growth factor, and prevents new vessel formation and hence decreases fibrosis. It is commonly used in colorectal and breast cancers. There has been no reported study on its effects on peritoneal fibrosis.Objective : In this study it is aimed to determine the effect of Bevacizumab on peritoneal fibrosis in rat models.Materials and methods : 41 Wistar albino rats were divided into six groups : control group (K) consisted of six rats that were given isotonic serum (2 ml/day) intraperitoneally (i.p) for 21 days; chlorhexidine gluconate (CG) group (KH) (7 rats) that were given 0.1 % CG and 15 % ethyl alcohol dissolved in saline (i.p) for 21 days; rest group (D, 7 rats) and received CG (2 ml/d) for 21 days ; Bevacizumab1 (B1, 7 rats) group was given initially CG (2ml/d) for 21 days, and at day 21 Bevacizumab was applied in a dosage of 2.5 mg/kg i.p; Bevacizumab 2 ( B2, 7 rats) group received CG for 21 days and Bevacizumab two times at day 0 and 21 days of beginning of CG; Bevacizumab 3 (B3, 7 rats) group was given only Bevacizumab at day 0 and 21 in a dosage of 2.5 mg/kg. K and KH groups were sacrified at day 21, and other at day 42. Pathological specimens were taken from left anterior abdominal wall for parietal peritoneum, and from liver for visceral peritoneum. Materials were stained by Hematoxylen & Eosin (HE) and Von Gieson (VG) and examined under light microscopy for presence of peritoneal thickness, vascular proliferation, and inflammation.Results: The decrease in parietal and visceral peritoneal thicknesses were significant in both B1 and B2 groups compared to D group (p<0.05). There were no significant difference regarding parietal peritoneal inflammation in all groups. Visceral peritoneal inflammation was significantly increased in both KH and D groups compared to K group. Significant fibrosis was shown in both parietal and visceral peritoneum in KH and D groups. Attenuation of fibrosis was significant in B1 group whereas not in B2 group. Vascular scoring was increased significantly at parietal peritoneum in KH, D, abd B1 groups, and at visceral peritoneum in B2 group.Conclusion: Bevacizumab decreased histopathological peritoneal fibrosis in CG induced chemical peritonitis. We may suggest that Bevacizumab itself did not induce peritoneal fibrosis , but can prevent peritoneal fibrosis. Regarding dose and duration of therapy large-scale experimental and clinical studies are required.Key words : sclerosing encapsulated peritonitis, VEGF, bevacizumab