Sitagliptin tedavisi uygulanan deneysel obezite modelinde farklı dokularda GLP-1 gen ifadesinin analizi
Sitagliptin treatment is applied in experimental obesity modelanalysis of GLP-1 gene expression in different tissues
Yazar: NESLİHAN ÇEVİK
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ GÜLPER NACARKAHYA ; DR. ÖĞR. ÜYESİ SERKAN GÜRGÜL
Gaziantep Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı / Tıbbi Biyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Dipeptidil peptidazlar ve tripeptidil peptidazlar = Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases ; Gen ifadesi = Gene expression ; Glukagon benzeri peptid-1 = Glucagon-like peptide-1 ; Obezite = Obesity ; Sitagliptin = Sitagliptin

Özet:
Obezite dünya çapındaki hastalıklar arasında en büyük beşinci risk faktörü olup Türkiye, obezitenin en çok görüldüğü üçüncü ülkedir. Obeziteye eşlik eden birçok hastalık bulunmaktadır. Bu nedenle obeziteye neden olan ve obeziteyi geriye çevirecek olan moleküler ve genetik mekanizmalar ortaya konulmalıdır.
Glukagon benzeri peptit 1 (GLP-1) ve glukozedine bağlı insülinotropik peptit (GIP), glikoz regülasyonunda yer alan başlıca inkretinler olup insülin salınımını uyarmak için salgılanır. GLP-1 glukagon seviyelerini baskılar, gastrik boşalmayı geciktirir ve tokluğu arttırır. GLP-1 ve GIP'in in vivo etkileri, bu hormonların dipeptidil peptidaz-4 (DPP-4) enzimi tarafından hızlı bozunması ve baskılanması nedeniyle kısa ömürlüdür. DPP-4 inhibitörleri olan vildagliptin ve sitagliptin şu anda çok sayıda ülkede tip 2 diyabet tedavisi için onaylanmış ve geliştirilmekte olan oral ajanlardır. 
Bu çalışmada kas, karaciğer ve yağ dokusunda insülin salınımının pozitif düzenleyicisi olan GLP-1 geninin ekpresyon düzeyleri; Obez, Obez + Sitagliptin   Kontrol, Kontrol + Sitagliptin gruplarına ayrılan doku gruplarında kantitatif real-time PCR yöntemi kullanılarak araştırıldı.
Çalışmamızda 32 adet wistar albino sıçandan 24 'ünün dokuları kullanılmıştır. Doku örnekleri ile total RNA izolasyonu ve cDNA sentezi gerçekleştirilerek gen ekspresyon düzeyleri analiz edildi. Elde edilen sonuçlar qiagen veri analiz sistemi kullanılarak ve student t testi baz alınarak istatiksel olarak değerlendirildi. 
Araştırma sonuçlarımıza göre, karaciğer dokusunda obez grubuna göre  obez+sitagliptin GLP-1 gen ekpresyon düzeyinin artmış olduğunu ve gözlenen bu farkın istatiksel olarak anlamlı olduğunu saptadık (p=0.02), yine karaciğer dokusunda K+Stg-Ob kıyaslandığında; GLP-1 gen ifadesinde 12.52 kat anlamlı bir artış saptadık (p=0.01)
Kas ve yağ dokusu gruplarında gen ekspresyon düzeylerinde anlamlı bir farklılık saptanmamış olup nedeninin bireysel farklılıktan veya diğer etkenlerden  kaynaklanabileceği düşünülmektedir.
Sonuç olarak obezitede, sitagliptin tedavisi kullanılarak insülin salınımının uyarılma mekanizmasının transkripsiyonel düzenleyicisi olan GLP-1 geninin ekspresyon düzeyinin incelenmesi, obezitenin altında yatan olayların daha iyi anlaşılmasına ve obezitede sitagliptin tedavisinin nasıl hedeflenebileceğinin anlaşılması üzerine katkı sağlayacaktır.

Abstract:
Obesity is the fifth biggest risk factor among diseases worldwide and Turkey is the third country with the highest obesity rate. There are many diseases accompanying obesity. For this reason, molecular and genetic mechanisms that cause obesity and will reverse obesity should be revealed. Glucagon-like peptide 1 (GLP-1) and glucosedine-dependent insulinotropic peptide (GIP) are the major incretins involved in glucose regulation and are secreted to stimulate insulin secretion. GLP-1 suppresses glucagon levels, delays gastric emptying and increases satiety. The in vivo effects of GLP-1 and GIP are short-lived due to the rapid degradation and suppression of these hormones by the enzyme dipeptidyl peptidase-4 (DPP-4). The DPP-4 inhibitors vildagliptin and sitagliptin are oral agents currently approved and in development for the treatment of type 2 diabetes in many countries. In this study, expression levels of the GLP-1 gene, which is a positive regulator of insulin secretion in muscle, liver and adipose tissue; The tissue groups divided into Obese, Obese + Sitagliptin Control, Control + Sitagliptin groups were investigated using quantitative real-time PCR method. 
Tissues of 24 of 32 wistar albino rats were used in our study. Gene expression levels were analyzed by performing total RNA isolation and cDNA synthesis with tissue samples. The obtained results were statistically evaluated using the qiagen data analysis system and based on the Student's t test. According to our research results, we found that the obese+sitagliptin GLP-1 gene expression level was increased in the liver tissue compared to the obese group and this difference was statistically significant (p=0.02), when K+Stg-Ob was compared in liver tissue; We found a 12.52-fold significant increase in GLP-1 gene expression (p=0.01). 
There was no significant difference in gene expression levels in muscle and adipose tissue groups, and it is thought that the reason may be due to individual differences or other factors.
As a result, examining the expression level of the GLP-1 gene, which is the transcriptional regulator of the mechanism of stimulation of insulin secretion using sitagliptin therapy in obesity, will contribute to a better understanding of the underlying events of obesity and how sitagliptin therapy can be targeted in obesity.