Sıçanda jejunal flep modelinde prostasiklin ve iskemik ön koşullandırmanın iskemi reperfüzyon hasarı üzerine etkisi
The effect of ischemic pre-conditioning and iloprost on ischemia reperfusion injury in jejunal flaps: A rat model
Yazar: FATMA BETÜL TUNCER
Danışman: YRD. DOÇ. DR. FATMA NİHAL DURMUŞ KOCAASLAN
Marmara Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Plastik Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2017
Konu: Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery
Dizin: Bağırsaklar = Intestines ; Cerrahi flepler = Surgical flaps ; Epoprostenol = Epoprostenol ; Jejunum = Jejunum ; Reperfüzyon = Reperfusion ; Reperfüzyon lezyonu = Reperfusion injury ; Sıçanlar = Rats ; İloprost = Iloprost ; İskemi = Ischemia

Özet:
ÖZET
Amaç: Jejunal flep özofagus rekonstrüksiyonunda en sık kullanılan fleplerden biridir.
Ancak jejunum flebinin aktarımı sırasında görülen sıcak iskemi ve devamında
reperfüzyon hasarı flebin kullanımını kısıtlamaktadır. Çünkü jejunum vücutta
iskemiye en duyarlı organlar arasındadır. Jejunal flep ile özofagus
rekonstrüksiyonunun en sık görülen komplikasyonlardan olan fistül oluşumu ve
stenozun etiyolojisinde flebin maruz kaldığı iskemi-reperfüzyon (I/R) hasarı
gösterilmektedir. Bu çalışmada amaç bir prostasiklin analoğu olan iloprost ile iskemik
ön-koşullandırma modalitelerinin I/R hasarı üzerine etkilerini araştırmak ve bu iki
modaliteyi karşılaştırmaktı.
Yöntem: 34 adet Sprague-Dawley sıçan randomize olarak 5 gruba ayrıldı. Orta hat
laparotomisi yapıldı, Treitz ligametinin yaklaşık 15 cm distalinde 5-7 cm uzunluğunda
jejunal bir segment besleyen damarlar ile jejunal flep şeklinde hazırlandı. Sham
grubunda flep hazırlandıktan sonra biyopsiler alındı.0p Kontrol ve iskemik önkoşullandırma
(ÖK) grubuna SF, iloprost (ILO) ve iloprost+iskemik ön-koşullandırma
(ILO+ÖK) grubunda 1 mcg/kg iloprost iv bolus enjekte edildi. Jejunal flep pedikülü
atravmatik mikrovasküler klemp ile klemplendi ve 60 dakika iskemi, 2 saat
reperfüzyon uygulandı. Flep perfüzyonu lazer Doppler flowmetri ile değerlendirildi.
Bağırsak biyopsisi hemotoksilen ve eozin ile boyandı ve Chiu skorlama sistemi ile
değerlendirildi. Diğer biyopsiler homojenize edildi ve spektrofotometrik yöntemle
süperoksit dismutaz (SOD) ve miyeloperoksidaz (MPO) enzimlerinin seviyesi tayin
edildi.
Bulgular: ILO, ÖK, ILO+ÖK gruplarında mukozal hasarın kontrol grubuna göre daha
az olduğu ve mukozal perfüzyonunun post-iskemik dönemde kontrole göre daha
yüksek değerlere ulaştığı görüldü. (p<0.05) ILO grubunun histolojik skoru ÖK
grubundan daha iyidi. ILO, ÖK, ILO+ÖK gruplarında antioksidan enzim SOD
miktarının arttığı, inflamasyon parametresi olan MPO'nun azaldığı tespit edildi.
Sonuç: İloprost ve iskemik ön-koşullandırma jejunal flepte iskemi-reperfüzyon
sonrası flep perfüzyonu arttırmış ve mukozal hasarı azaltmıştır. Bu çalışmadan elde
edilen olumlu sonuçlar ileride iloprost ya da iskemik ön-koşullandırma yöntemlerinin
jejunal flebi iskemiye hazırlamada kullanımına zemin hazırlamaktadır.

Abstract:
ABSTRACT
Objective: Free jejunal flap is one of the most common used flaps for
esophageal reconstruction. However, ischemia-reperfusion (I/R) injury due to
warm ischemia seen during the transfer limits its use. Because jejunum is one
of the organs that are least tolerant to ischemia. I/R injury was pointed out in
the etiology of fistula formation and stenosis, which are among the most
commonly observed complications of esophageal reconstruction with free
jejunal flap. The goal of this study was to evaluate the effects of iloprost (a
synthetic prostacyclin analogue) and ischemic pre-conditioning on intestinal
I/R injury and to compare the effectiveness of these two modalities.
Method: 34 Sprague-Dawley rats were randomized into 5 groups. A midline
laparotomy performed and a 5-7 cm long jejunal segment 15 cm distal to the
Treitz ligament was isolated with its supplying vessels. Biopsies were taken in
the sham group after the jejunal flap was prepared. In the other groups, EJV
was cannulated through the neck incision. Before ischemia, 1 mcg/kg normal
saline or iloprost was injected as iv bolus in control, ischemic pre-conditioning
(PC) or iloprost (ILO), iloprost+ischemic pre-conditioning (ILO+PC) groups,
respectively. The vascular pedicle of jejunal flap was clamped for 60 min by an
atraumatic microvascular clamp. Following ischemia, the clamp was removed
and the flap was perfused for 2 hours. Flap perfusion was asseses by laser
doppler flowmetry. Intestinal tissue segments were stained with hematoxylin
and eosin and evaluated using Chiu scoring system. Other flap segments were
homogenized and assesses for superoxide dismutase (SOD) and
myeloperoxidase (MPO) levels via spectrophotometry.
Results: Animals in groups ILO, PC and ILO+PC following I/R injury had
significantly better post-ischemic recovery of mesenteric perfusion and
significantly less mucosal injury compared to the control group. The histologic
score of ILO group was better than PC. In treatment groups (ILO, PC, ILO+PC)
the levels of the antioxidant enzyme, SOD, were increased and that of MPO,
one of inflammatory markers, were reduced.
Conclusion: According to the results of this study, iloprost and ischemic preconditioning
increased the mucosal perfusion and reduced the mucosal injury
of jejunal flap following ischemia and reperfusion. Iloprost or ischemic preconditioning
might be considered as a treatment strategy in the future to reduce
I/R injury of jejunal flaps.