Bazı antibiyotiklerin insan eritrositlerinden saflaştırılan 6-fosfoglukonat dehidrogenaz enzim aktivitesi üzerindeki etkilerinin belirlenmesi
Determination of the effect of some antibiotics on human eryhrocyte 6-phosphogluconate dehydric genase enzyme activity
Yazar: MEHMET AKYÜZ
Danışman: PROF.DR. NURİ BAKAN
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2004
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
VI ÖZET BAZI ANTİBİYOTİKLERİN İNSAN ERİTROSİTLERİNDEN SAFLAŞTIRILAN 6-FOSFOGLUKONAT DEHİDROGENAZ ENZİM AKTİVİTESİ ÜZERİNDEKİ ETKİLERİNİN BELİRLENMESİ Bu çalışmada insan eritrosit 6-fosfoglukonat dehidrogenaz enzimi üzerine bazı antibiyotiklerin in vitro ve in vivo etkileri araştırıldı. Bu amaçla insan eritrosit 6- fosfoglukonat dehidrogenaz enzimi amonyum sülfat çöktürmesi, 2',5' ADP-Sepharose 4B Afinite ve Jel filtrasyon kromotografik yöntemleriyle saflaştırıldı. Saflaştırma % 50 verimle 725 kat gerçekleştirildi. Enzim aktivitesi Beutler metoduna göre ölçüldü. Netilmisin sülfat, sefepim, amikasin, isepamisin, kloramfenikol, seftazidim, teikoplanin, ampisilin, ofloksasin, levofloksasin, sefotaksim, penisilin g, gentamisin sülfat, siprofloksasin gibi bazı ilaçlar in vitro şartlarda enzim aktivitesini inhibe ederken, seftriakson, streptomisin sülfat ve meropenem ilaçlarının enzim aktivitesi üzerine herhangi bir etkisi gözlenmedi. Bu ilaçlar içerisinden sadece sefazolin sodyum in vitro şartlarda enzimi aktive etti. İnhibisyon etkisi gösteren ilaçların I50 değerleri belirlendi. Düşük I50 değerlerine sahip olan ilaçlar için (%50 inhibisyon oluşturan ilaç konsantrasyonu, netilmisin sülfat ve sefepim) in vivo çalışmalar sıçanlarda yapıldı (Spraque-Dawley). Netilmisin sülfat 15-mg/kg'lık bir dozda uygulandıktan 1., 2. ve 3. saatlerden sonra enzim aktivitesini önemli derecede inhibe etti (p<0.01). Sefepim 200- mg/kg'lık bir dozda uygulandıktan 1. ve 2. saatten sonra enzim aktivitesini önemli derecede inhibe etti (p<0.01) Bu sonuçlardan netilmisin sülfat ve sefepim antibiyotikleri enzim aktivitesini hem in vitro hem de in vivo olarak inhibe etti.

Abstract:
vn SUMMARY DETERMINATION OF THE EFFECT OF SOME ANTIBIOTICS ON HUMAN ERYTHROCYTE 6-PHOSPHO GLUCONATE DEHYDROGENASE ENZYME ACTIVITY The in vitro and in vivo effects of some antibiotics on human erythrocytes 6- phospogluconate dehydrogenase were investigated in this study. Human erythrocyte 6- phosphogluconate dehydrogenase was purified with ammonium sulfate precipitation, 2',5' ADP-Sepharose 4B Affinity and Gel filtration chromatography. Purification of enzyme was obtained with a yield % 50 and 725 fold. The enzyme activity was determined by Beutler's method. Some antibiotics such as netilmicin sulfate, cefepime, amikacin, lsepamycin, kloramphenicol, ceftazidim, teicoplanin, ampicillin, ofloxacine, levofloxacine, cefotaxime, penicillin g, gentamicin sulphate, ciprofloxacine, inhibited the enzyme activity in in vitro conditions, decefin, streptomycin and meronem, have not any effects. Of these drugs, only cefozin activated the enzyme activity in in vitro conditions. The I50 values of the inhibiting antibiotics were determined. For the drags having low I50 values (drag concentrations which produce 50% inhibition, netilmicin sulfate and cefepime), in vivo studies were performed in rats (Spraque-Dawley). Netilmicin sulfate at 15-mg/kg inhibited the enzyme activity significantly (p<0.01) 1 h, 2 h, and 3 h after dosing. Cefepime at 200-mg/kg also inhibited the enzyme very significantly (pO.01) 1 h and 2 h after dosing. As a result, netilmicin sulfate and cefepime antibiotics inhibited rat erythrocyte 6-phospogluconate dehydrogenase both in vivo and in vitro.