Pankreas kanseri kemoterapötik direncinde 5-florourasil, leptin ve leptin inhibitörü kombinasyonunun rolü
The role of combination of 5-fluorouracil, leptin and leptin inhibitor in chemotherapeutic resistance of pancreatic cancer
Yazar: FİLİZ TAŞPINAR
Danışman: PROF. DR. DURSUNALİ ÇINAR
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2019
Konu: Fizyoloji = Physiology ; Onkoloji = Oncology
Dizin: Antagonistler = Antagonists ; Flüorourasil = Fluorouracil ; Kemoterapi =   ; Leptin = Leptin ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Pankreas = Pancreas ; Pankreas hastalıkları = Pancreatic diseases ; Pankreas neoplazmları = Pancreatic neoplasms ; İlaç tedavisi = Drug therapy ; İlaçlara direnç = Drug resistance

Özet:
Pankreas Kanseri Kemoterapötik Direncinde 5-Florourasil, Leptin ve Leptin
Ġnhibitörü Kombinasyonunun Rolü
Amaç: PK hedefe odaklı tedavisi bulunmayan en agresif tümörlerden biridir. PK
tedavisinde kullanılan kemoterapi ajanlarından biri de 5-FU'dur. 5-FU kemoterapi
sürecinde kemoterapötik direnç sıkça geliĢmektedir. Bu çalıĢmada, PK'de, 5-FU
kemoterapi direncinin üstesinden gelebilmek için 5-FU tedavisinde leptin ve leptin
inhibisyonu için antagonist SHLA'nın olası rolünün araĢtırılması amaçlanmıĢtır.
Materyal ve Metot: ÇalıĢmada AsPC-1, MIA PaCa-2 ve Panc-I PK hücre
serilerinde 5-FU, leptin ve SHLA'nın sitotoksisitesi MTT yöntemiyle saptanmıĢtır. PK
hücre serilerinde 5-FU, leptin ve SHLA moleküllerinin kombinasyonlarının 5-FU
kemoterapi direncinde rol alan genler ile apoptotik kaspaz 3, 8 ve 9 genlerinin
ekspresyonları üzerindeki etkileri RT-PZR ile belirlenmiĢtir. Moleküllerin genomik
DNA hasarı ve hücre döngüsü üzerindeki etkileri sırayla COMET ve akım sitometri
testleri ile tespit edilmiĢtir.
Bulgular: AsPC-1, MIA PaCa-2 ve Panc-I PK hücre serilerinin 5-FU duyarlılığı
birbirinden farklı bulunmuĢtur. Leptin ve SHLA tek baĢlarına kullanıldıklarında
herhangi bir sitotoksik etkisi saptanmamıĢtır. 5-FU (her bir hücre serisi için IC50
değeri), leptin (0.1µM) ve SHLA (1000 ng)'nın 5-FU direnç genleri DPD, hENT1, TP,
TS, MDR1 ve MRP5'in ekspresyonlarını değiĢtirdiği, bu moleküllerin PK hücrelerinde
tek veya kombine kullanımının apoptozu tetikleyebildiği saptanmıĢtır. Ayrıca, 5-FU,
leptin ve SHLA'nın tek ve kombine uygulanmasında PK hücre serilerinde DNA hasarı
ve hücre döngüsü açısından gruplar arasında anlamlı bir farklılık saptanmıĢtır
(p≤0.001).
Sonuç: PK'da hücrelerin 5-FU duyarlılığı hücre tipine göre farklılık
göstermektedir. Bu çalıĢmada, PK tedavisinde, 5-FU kemoterapötik direncinin
üstesinden gelebilmek için leptin ve/veya SHLA'nın 5-FU ile kombine edilerek
kullanımının yeni bir tedavi yaklaĢımı olabileceği sonucuna varılmıĢtır. Leptin ve
SHLA'nın 5-FU direnç yolağında yer alan genlerin ekspresyonları üzerindeki etkisi ile
PK tedavisindeki terapötik etkileri ilk kez bu çalıĢmayla gösterilmiĢtir.

Abstract:
The Role of Combination of 5-Fluorouracil, Leptin and Leptin Inhibitor in
Chemotherapeutic Resistance of Pancreatic Cancer
Aim: Pancreatic cancer is one of the most aggressive tumors without targeted
therapy. One of the chemotherapy agents used in PC treatment is 5-FU
chemotherapeutic resistance develops frequently in 5-FU chemotherapy process. The
aim of this study was to investigate the possible role of leptin and its antagonist SHLA
for leptin inhibition to overcome chemotherapy resistance in 5-FU treatment treatment
for PC.
Materials and Methods: In this study, the cytotoxicity of 5-FU, leptin and,
SHLA was determined by MTT method in PC cell lines, AsPC-1, MIA PaCa-2 and
Panc-I. The effects of combinations of 5-FU, leptin and SHLA in PC cell lines on
expressions of genes involved in 5-FU chemotherapy resistance and apoptotic caspase
3, 8 and 9 genes were determined by RT-PCR. The impacts of molecules on genomic
DNA damage and cell cycle were detected by COMET and flow cytometry,
respectively.
Results: The sensitivity of 5-FU of PC cell lines, AsPC-1, MIA PaCa-2 and
Panc-I were different from each other. No cytotoxic effects were detected when leptin
and SHLA were used alone.
It has been found that 5-FU (at IC50 values for each cell lines), leptin (0.1µM)
and SHLA (1000 ng) change the expressions of 5-FU resistance genes DPD, hENT1,
TP, TS, MDR1 and MRP5, and that single or combinational usage of these molecules
can trigger the apoptosis in PC cells. In addition, there was a significant difference
between the groups in PC cell lines in terms of DNA damage and cell cycles in single
and combined administration of 5-FU, leptin and SHLA (p≤0.001).
Conclusion: 5-FU sensitivity of the cells in the PC varies according to the cell
type. In this study, it was concluded that the use of leptin and/or SHLA in combination
with 5-FU may be a new therapeutic approach to overcome chemotherapeutic resistance
in the treatment of PC. The effects of leptin and SHLA on the expression of genes in the
5-FU resistance pathway and their therapeutic effects in treatment of PC have been
demonstrated for the first time in this study.