Dondurulup-çözdürülen tavşan spermi üzerine metionin, sisteamin, ellajik asit ve arjininin etkileri /
Yazar: METİN ER
Danışman: DOÇ. DR. AYŞE YILDIRIM ; YRD. DOÇ. DR. HARUN ALP
Mustafa Kemal Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2013
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Antioksidanlar = Antioxidants ; Arjinin = Arginine ; Dondurarak saklama = Cryopreservation ; Ellajik asit = Ellagic acid ; Meni = Semen ; Meni saklanması = Semen preservation ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Sisteamin = Cysteamine ; Sperm = Spermatozoa ; Tavşanlar = Rabbits

Özet:
Amaç: Bu çalışmada 5 mM dozundaki arjinin, ellajik asit, metionin ve sisteaminin dondurulup-çözdürülmüş tavşan semenleri üzerine etkilerinin incelenmesi amaçlandı.                          Yöntem: Beyaz Yeni Zellanda tavşanlarından alınan semenler birleştirildi. Birleştirilen semenler, 5 eşit kısma bölündü. Her bir kısım sırasıyla arjinin, ellajik asit, metionin ve sisteaminin 5 mM dozlarını içeren ve içermeyen (kontrol) Tris bazlı sulandırıcısıyla 37 santigrat derecede sulandırıldı. Dilüe numuneler, 5 santigrat derecede 1 saat ekilibrasyona bırakıldı. Ekilibrasyondan sonra numuneler, sıvı azot buharında donduruldu ve sonrasında saklamak amacıyla sıvı azota (-196 santigrat derece)atıldı. Numune,1 ay sıvı azotta bekletildikten sonra 37 santigrat derecelik su banyosunda 25-30 saniye bekletilerek çözdürüldü. Dondurup-çözdürme sonrası kontrol ve antioksidan gruplarının spermatozoanın motilitesi, canlılığı, akrozom bütünlüğü, mitokondriyal aktivitesi üzerine etkileriyle birlikte total redükte glutatyon düzeyi ve total antioksidan kapasite üzerine etkileri karşılaştırıldı.
Bulgular: Motil spermatozoa oranını kontrol grubuna (% 19.00)kıyasla; sisteamin grubunda (% 35.00) önemli ölçüde, diğer antioksidan gruplarında ise önemsiz düzeyde yüksek bulduk (p<0.05). Spermatozoa canlılık oranı, hasarsız akrozomlu spermatozoa oranı, yüksek mitokondriyal aktiviteli spermatozoa oranı ve malondialdehit oluşum düzeyi açısından; kontrol grubu ile diğer gruplar arasında önemli farklılık olmadığını tespit ettik (p>0.05).Yüksek mitokondriyal aktiviteli spermatozoa oranını, arjinin ve sisteamin gruplarında ellajik asite kıyasla önemli düzeyde yüksek tespit ettik (p<0.05). Total redükte glutatyon düzeyi, ellajik asit grubuna kıyasla diğer tüm gruplarda önemli ölçüde yüksek bulundu (p<0.05). Total antioksidan kapasitesini ellajik asit grubuna kıyasla; metionin grubunda önemli düzeyde, diğer antioksidan gruplarında ise önemsiz düzeyde yüksek olduğunu tespit ettik (p<0.05). 
Sonuç: Bu çalışmada dondurulup-çözdürülen tavşan semeninin spermatolojik ve oksidatif stres parametreleri üzerine grupların etkileri değerlendirildiğinde; genel itibarıyla sisteamin ile en iyi, ellajik asit ile en kötü sonuçları elde ettik. 

Anahtar Kelimeler: Tavşan semeni, semenin dondurulması, antioksidan, spermatolojik ve oksidatif stres parametreleri.

Abstract:
Aim: The aim of this study was to investigate the effects of arginine, ellagic acid, methionine and cysteamine at 5 mM doses on rabbit semen. 
Methods: Semens collected from New Zelland rabbits were pooled. Pooled semen divided into 5 equal aliquots. The aliquots were diluted in tris-base extender containing arginine, ellagic acid, methionine and cysteamine at doses of 5 mM, and no additive (control) at 37 santigrat degree. Diluted samples were equilibrated at 5 santigrat degree for 1 h. After qquilibration, the samples were frozen in liquid nitrogen vapour and then plunged into liquid nitrogen (-196 santigrat degree) for storage. After storage about one month, samples thawed via plunging into water bath at 37 santigrat degree for 25-30 second. Following freeze-thawing, effects of control and antioxidant groups on motility, acrosome integrity, viability, mitochondrial activity of spermatozoa and levels of total reduced glutathione and total antioxidant capacity were compared.  
Results: We found that cysteamine (% 35.00) led to higher significantly and other antioxidants except cysteamine led to higher non-significantly in the percentage of spermatozoa motility, compared to control (% 19.00) (p<0.05). We found that there were'nt significant difference in the percentage of spermatozoa viability, spermatozoa with non-damaged acrosome, spermatozoa with high mitochondrial activity and formation of malondialdehyde between control and other groups (p>0.05). We found that arginine and cysteamine led to higher percentage of spermatozoa with high mitochondrial activity, compared to ellagic acid (p<0.05). Compared to ellagic acid group, other groups led higher significantly levels of total reduced glutathione to be found (p<0.05). We found that the methionine led to higher significantly and other antioxidants except methionine led to higher non-significantly in the level of antioxidant capacity compared to ellagic acid (p<0.05).
Conclusion: When effects of groups spermatological and oxidative stress parameters of frozen-thawed rabbit semen were evaluated; in generally cysteamine led to the best results and ellagic acid led to the worst results to be found.

Key words: Rabbit semen, freezing of semen, antioxidant, spermatologic and oxidative stess paremeters.