Aronia melanocarpa uygulamasının epiteliyal ovaryum kanseri hücre hattı skov-3 üzerine immünositokimyasal ve apoptotik etkilerinin incelenmesi
Investigation of immunocytochemical and apoptotic effects of aronia melanocarpa application on epithelial ovarian cancer cell line skov-3
Yazar: SİNEM KARA
Danışman: DOÇ. DR. SELEN BAHÇECİ
İzmir Katip Çelebi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2019
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Antineoplastik ajanlar = Antineoplastic agents ; Antosiyaninler = Anthocyanins ; Apoptozis = Apoptosis ; Aronia melanocarpa = Aronia melanocarpa ; Hücre dizisi = Cell line ; Hücre kültürü = Cell culture ; Over hastalıkları = Ovarian diseases ; Over neoplazmları = Ovarian neoplasms

Özet:
Ovaryum kanseri, ölümcül jinekolojik kanser türleri arasında ilk sırada yer
almaktadır. Mevcut kemoterapötik yöntemler hastaların çoğunda yetersiz
kaldığından yeni tedavi seçenekleri üzerine çalışmalar yapılmaktadır. Paklitaksel
ovaryum kanseri de dâhil olmak üzere birçok kanser türleri için kematerapik bir ilaç
olarak kullanılmaktadır. Paklitaksel'in kanser hücrelerini apoptozise yönlendirerek
kanseri yok etmede kullanıldığı bilinmektedir. Çoğu kanser türleri gibi ovaryum
kanseri de, başlangıçta bu kemoterapik ilaca yanıt verirken, uzun vadede, ilaç direnci
gelişir ve tedavide başarısız olunur. İlaç direncini baskılayabilmek için
kemoterapotik ilaçları ile birlikte antioksidanlar da tedavi için önerilmiştir. Aronia
Melanocarpa, antosiyanin içeriği yüksek olan bir bitki olup, çeşitli çalışmalarla antitümör
etkileri olduğu gösterilmiştir. Bu çalışmada, Aronia Melanocarpa'nın
epiteliyal ovaryum kanseri olan SKOV-3 hücre hattına etkilerinin in vitro
yöntemlerle incelenmesi amaçlanmıştır. Aronia Melanocarpa konsantrasyonları 400
μg/ml, 300 μg/ml, 200 μg/ml, 150 μg/ml, 100 μg/ml, 75 μg/ml, 50 μg/ml, 25 μg/ml,
10 μg/ml, 5 μg/ml, 1 μg/ml şeklinde ve 24 saat, 48 saat ve 72 saat aralıkla
uygulanmıştır. Aronia Melanocarpa'nın SKOV-3 ovaryum kanseri hücrelerine
sitotoksik etkilerini saptamak amacıyla MTT testi ile etkin olan 5 doz seçilerek
apoptozis üzerine etkileri TUNEL yöntemiyle araştırılmıştır. Bu etken maddenin
tümör hücrelerindeki PI3K, mTOR, p 38 MAPK sinyal yolağı üzerinden olan etkisi
immünositokimyasal (ICC) yöntemle belirlenmiştir. Aronia Melanocarpa'nın MTT,
ICC ve TUNEL testi ile 5 doz içerisinde en etkin olanı belirlenerek, paklitaksel ile
kombinasyon şeklinde uygulama yapıldıktan sonra TUNEL ve immünositokimyasal
testler uygulanmıştır. Bu çalışmada güçlü antioksidan ve antosiyanin içeriği olan
Aronia Melanocarpa ile paklitakselin kombinasyonunun etkisinin araştırılması
amaçlanmıştır. Sonuçlar ANOVA istatistik testleri ve Graphpad yazılım programı ile
değerlendirilmiştir.

Abstract:
Ovarian cancer is at the top of the list of deadly gynecological cancers. Since
chemotherapeutic methods are insufficient in the most of patients, new treatment
options are being studied. Paclitaxel is used as a chemotherapeutic drug for many
types of cancer, including ovarian cancer. Paclitaxel is known to be used to destroy
cancer by directing cancer cells to apoptosis. As with most cancer types, ovarian
cancer responds to this chemotherapeutic drug initially, while in the long term, drug
resistance develops and treatment fails. In order to suppress the drug resistance,
antioxidants and chemotherapeutic drugs have been proposed for treatment. Aronia
Melanocarpa is a plant with high anthocyanin content and has been shown to have
anti-tumor effects in various studies. The aim of this study is to investigate the
effects of Aronia Melanocarpa on epithelial ovarian cancer SKOV-3 cell line by in
vitro methods. Aronia Melanocarpa concentrations is selected as 400 μg / ml, 300
μg / ml, 200 μg / ml, 150 μg / ml, 100 μg / ml, 75 μg / ml, 50 μg / ml, 25 μg / ml, /
ml, 1 μg / ml and supplied by 24 hours, 48 hours and 72 hours. In order to determine
the cytotoxic effects of Aronia Melanocarpa on SKOV-3 ovarian cancer cells, 5
effective doses are selected by MTT test and effects on apoptosis are investigated by
TUNEL method. The effect of this active substance on PI3K, mTOR, p38 MAPK
signalling pathways in tumor cells is determined via immunocytochemical (ICC)
methods. With the results of MTT, ICC and TUNEL tests of Aronia Melanocarpa,
the most effective dose in 5 doses is determined and TUNEL and
immunocytochemical tests are applied after combination with paclitaxel. In this
study, it is aimed to investigate the effect of the combination of Aronia Melanocarpa
and paclitaxel, which are strong antioxidants and anthocyanins. The results are
interpreted with ANOVA statistical tests and Graphpad software program.