Çocuk yoğun bakımda oluşan klebsiella pneumoniae sepsislerinde IL-21, IL-23, 8-OHG, prokalsitonin, CRP ve 25-oh vitamin D düzeylerinin araştırılması
Investigation of IL-21, IL-23, 8-OHG, procalcitonin, CRP and 25-OH vitamin D levels in klebsiella pneumoniae sepsis in pediatric intensive care unit
Yazar: CUMA ASLAN
Danışman: DOÇ. DR. AHMET GÜZELÇİÇEK
Harran Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases
Dizin: 8-hidroksi deoksiguanozin = 8-hydroxy deoxyguanosine ; C reaktif protein = C reactive protein ; Kalsitonin = Calcitonin ; Klebsiella pneumoniae = Klebsiella pneumoniae ; Sepsis = Sepsis ; Vitamin D = Vitamin D ; Yoğun bakım üniteleri = Intensive care units ; Yoğun bakım üniteleri-pediyatrik = Intensive care units-pediatric ; İnterlökin 21 = Interleukin 21 ; İnterlökin 23 = Interleukin 23

Özet:
Giriş ve Amaç: Sepsis, septik şok ve çoklu organ yetmezliği dâhil olmak üzere klinik şiddet
spektrumunu kapsayıcı bir tanımdır. Bununla birlikte yoğun bakım ünitelerinde yüksek oranda
hastane enfeksiyonları nedenli sepsis görülmektedir. Klebsiella Pneumoniae (K.pneumoniae) de esas
olarak hastane enfeksiyonlarıyla ilişkili fırsatçı bir patojendir. K.pneumoniae'nin neden olduğu kan
dolaşımı enfeksiyonları, bu bakteri türünün neden olduğu diğer enfeksiyon türlerinden daha
ölümcüldür. Sepsis, erken tanı konulup erken tedavi uygulanmadığında ölüm oranı yüksek bir
hastalıktır. Laboratuvar değerleri sepsisi destekler niteliktedirler ama etkeni ve sepsisi belirlemeye
dair spesifik bir labaratuvar değeri henüz yoktur. Çalışmamızda çocuk yoğun bakımda yatmakta olup
Klebsiella Pneumoniae nedenli sepsis gelişen vakalarda IL-21, IL-23, 8-OHG, CRP, Prokalsitonin ve
25-OH Vitamin D düzeylerini araştırdık. Amacımız nazokomiyal fırsatçı bir patojen olan
K.pneumoniae sebepli gelişen sepsis vakalarında, erken tanıda ve tedavide yardımcı olabilecek veriler
elde ederek istenmeyen sonuçları ve mortaliteyi azaltmaya yönelik literatür katkısı vermektir.
Materyal ve Metod: Prospektif olarak yapılan bu çalışmamızda Harran Üniversitesi Tıp
Fakültesi Hastanesi Çocuk Yoğun Bakım Ünitesinde yatmakta olup, kan kültüründe K.pneumoniae
üremesi olan 30 hasta ve Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları polikliniklerine başvuran 30 sağlıklı çocuk
dahil edildi. Çalışmaya katılan tüm olgulardan 3 ml venöz kan örnekleri alındı, toplanan venöz kan
örnekleri 3500 rpm'de 10 dakika santrifüj edildikten sonra şekilli elemanlar tüp ile birlikte atıldı,
üstteki plazma örnekleri ise - 80 °C'de analizler için saklandı. Bu saklanan örnekler daha sonra 8-
Hydroxy-Desoxyguanosine (8-OHG), İnterlökin-21 (IL-21) ve İnterlökin-23 (IL-23) Bioassay
Technology Laboratory (BT Lab) markalı kitlerle ELISA prensibi ile çalışıldı. Bizim çalışmamızdaki
ELISA kiti, Sandwich-ELISA prensibine göre çalışmaktadır. CRP çalışması için 2 cc venöz kan
örneği sarı kapaklı jelli tüp kullanılarak alındı. Atellica CH Wide Range C-Reactive Protein (wrCRP)
testi, Atellica CH Analyzer kullanılarak insan serumu ve plazmadaki (lityum heparin) C-reaktif
protein konsantrasyonunun nicel tespitinde in vitro diagnostik kullanım için kullanıldı. D vitamini
için ise EDTA'lı mor kapaklı tüplere alınan 2 cc venöz kan örnekleri, sıvı kromatografi-kütle
spektrometrisi (LC–MS/MS) metodolojileri ile cihazda üç kez çalışılarak elde edildi. PCT için ise

EDTA'lı mor kapaklı tüplere alınan 2 cc venöz kan örnekleri, AQT90 FLEX analizörü kullanıldı.
Elde edilen verileri SPSS 22.0 (SPSS® for Windows Chicago, IL, USA) paket programı kullanılarak
istatistiksel analizleri yapıldı. P değeri <0,05 olan sonuçlar istatiksel olarak anlamlı kabul edildi.
Bulgular: Hasta grubunda bulunan ortalama 8-OHG değeri, sağlıklı kontrol grubundan 4,19
ng/L daha fazla bulunmuştur. Hasta grubunda bulunan ortalama IL-21 değeri, sağlıklı kontrol
grubundan 1127,29 ng/L daha fazla bulunmuştur. Hasta grubunda bulunan ortalama CRP değeri,
sağlıklı kontrol grubundan 8,74 mg/dL daha fazla bulunmuştur. Hasta grubunda bulunan ortalama
PCT değeri, sağlıklı kontrol grubundan 4,49 ng/L daha fazla bulunmuştur. Hasta grubunda bulunan
ortalama 25-OH Vitamin D değeri, sağlıklı kontrol grubundan 20,04 ng/mL daha az bulunmuştur.
Hasta grubunun ve sağlıklı kontrol grubunun 8-OHdG, IL-21, CRP, PCT ve 25-OH Vitamin D
değerleri arasında yapılan karşılaştırmada hepsinde P değeri <0,05 idi ve sonuçlar istatiksel olarak
anlamlıydı. Hasta grubunda saptanan ortalama IL-23 değeri, sağlıklı kontrol grubundan 36,31g/L
daha az bulunmuştur. Hasta grubunun ve sağlıklı kontrol grubunun IL-23 değerleri arasında
istatistiksel verilere göre p değeri 0.005'ten büyüktür ve bu veriye göre anlamlı bir fark
bulunamamıştır (p = 0.079).
Sonuç: K.pneumoniae nedenli gelişen sepsiste erken tanı, mortalite ve morbidite açısından
son derece önemlidir. 8-OHG, IL-21, CRP ve PCT septik hastalarda yüksek değerlerde bulunmuştur.
K.pneumonaie etkenli sepsisi erken tanımada bu parametler belirteç olarak kullanılabilir ve çok
değerli parametrelerdir. Sepsis tanımında klinisyen bilgisi çok önemli bir yer tutmaktadır. Klinisyen
tarafından sepsis düşünüldüğünde bu parametler erken çalışılırsa kan kültürü sonuçları beklenmeden
erken tanı ve tedavi açısından da yol gösterici olacaklardır. Bu şekilde morbiditeyi ve mortaliteyi
azaltmada yardımcı olabileceklerdir. IL-23 ve 25-OH Vitamin D seviyelerinin ise hasta gurubunda
daha az olduğu saptanmıştır. 25-OH D Vitamini düşüklüğünü saptamak, K.pneumonaie etkenli septik
hastalarda yine erken tanı için bir belirteç olarak kullanılabilir. IL-23 ile ilgili ise septik hastalarda
daha düşük seyrettiğini belirten çalışmaları destekler nitelikte veriler elde ettik. Ama bir
K.pneumonaie etkenli sepsisin erken tanı belirteci olduğunu söyleyebilmek için daha çok çalışmalara
ihtiyaç vardır.
Anahtar Kelimeler: Sepsis, Klebsiella Pneumonaie, 8-OHG, CRP, IL-21, IL-23, 25-OH
Vitamin D, Prokalsitonin

Abstract:
Introduction and Objective: It is a definition that encompasses the spectrum of clinical
severity, including sepsis, septic shock, and multiple organ failure. However, high rates of sepsis due
to hospital infections are seen in intensive care units. Klebsiella pneumoniae (K. pneumoniae) is also
an opportunistic pathogen mainly associated with nosocomial infections. Bloodstream infections
caused by K. pneumoniae are more deadly than other types of infections caused by this bacterial
strain. Sepsis is a disease with a high mortality rate if not diagnosed and treated early. Laboratory
values are supportive of sepsis, but there is no specific laboratory value yet to determine the causative
agent and sepsis. In our study, we investigated IL-21, IL-23, 8-OHG, CRP, Procalcitonin and 25-OH
Vitamin D levels in children hospitalized in the intensive care unit who developed sepsis due to
Klebsiella Pneumoniae. Our aim is to contribute to the literature to reduce undesirable outcomes and
mortality by obtaining data that may help in the early diagnosis and treatment of sepsis cases caused
by K. pneumoniae, a nosocomial opportunistic pathogen.
Material and Method: In this prospective study, 30 patients who were hospitalized in the
Pediatric Intensive Care Unit of the Harran University Medical Faculty Hospital and had
K.pneumoniae growth in their blood culture and 30 healthy children who applied to the Pediatric
Health and Diseases polyclinics were included. 3 ml venous blood samples were taken from all
subjects participating in the study, the collected venous blood samples were centrifuged at 3500 rpm
for 10 minutes, and the shaped elements were discarded together with the tube, while the upper plasma
samples were stored for analysis at -80 °C. These stored samples were then studied with the ELISA
principle with kits branded 8-Hydroxy-Desoxyguanosine (8-OHG), Interleukin-21 (IL-21) and
Interleukin-23 (IL-23) Bioassay Technology Laboratory (BT Lab). The ELISA kit in our study works
according to the Sandwich-ELISA principle. For the CRP study, 2 cc venous blood samples were
taken using a yellow capped gel tube. The Atellica CH Wide Range C-Reactive Protein (wrCRP)
assay was used for in vitro diagnostic use in the quantitative determination of C-reactive protein
concentration in human serum and plasma (lithium heparin) using the Atellica CH Analyzer. For

vitamin D, 2 cc venous blood samples taken into purple capped tubes with EDTA were obtained by
working three times in the device with liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS/MS)
methodologies. For PCT, 2 cc venous blood samples taken into purple capped tubes with EDTA and
AQT90 FLEX analyzer were used. Statistical analysis of the obtained data was performed using SPSS
22.0 (SPSS® for Windows Chicago, IL, USA) package program. Results with a P value of <0.05
were considered statistically significant.
Results: The mean 8-OHG value in the patient group was 4.19 ng/L higher than the healthy
control group. The mean IL-21 value in the patient group was 1127.29 ng/L higher than the healthy
control group. The mean CRP value in the patient group was 8.74 mg/dL higher than the healthy
control group. The mean PCT value in the patient group was 4.49 ng/L higher than the healthy control
group. The mean 25-OH Vitamin D value in the patient group was 20.04 ng/mL less than the healthy
control group. In the comparison between the 8-OHG, IL-21, CRP, PCT and 25-OH Vitamin D values
of the patient group and the healthy control group, the P value was <0.05 in all of them and the results
were statistically significant. The mean IL-23 value in the patient group was 36.31 g/L less than the
healthy control group. According to statistical data, the p value was greater than 0.005 between the
IL-23 values of the patient group and the healthy control group, and no significant difference was
found according to this data (p = 0.079).
Conclusion: Early diagnosis of sepsis caused by K. pneumoniae is extremely important in
terms of mortality and morbidity. 8-OHG, IL-21, CRP and PCT were found to be high in septic
patients. These parameters can be used as markers in the early recognition of sepsis caused by K.
pneumoniae and are very valuable parameters. Clinician knowledge has a very important place in the
definition of sepsis. If these parameters are studied early when sepsis is considered by the clinician,
they will also guide in terms of early diagnosis and treatment without waiting for blood culture results.
In this way, they will be able to help reduce morbidity and mortality. IL-23 and 25-OH Vitamin D
levels were found to be lower in the patient group. Detection of low 25-OH Vitamin D can be used
as a marker for early diagnosis in septic patients with K. pneumoniae. Regarding IL-23, we obtained
data supporting the studies stating that it has a lower course in septic patients. But more studies are
needed to say that it is an early diagnosis marker of sepsis caused by a K. pneumoniae.
Keywords: Sepsis, Klebsiella Pneumonaie, 8-OHG, CRP, IL-21, IL-23, 25-OH Vitamin D,
Prokalsitonin