Okratoksin A içeren yemle beslenmiş wistar çeşidi erkek sıçanların [Rattus norvegicus] karaciğer ve böbrek dokularında okratoksin birikimi ve testosteron hormon düzeyi ile ilişkisinin araştırılması
Determination of Ochratoxin A accumulation in kidney and liver of wistar male rats [Rattus norvegicus] fed with ota containing diet and relation with testosterone hormone levels
Yazar: KEMAL URAN
Danışman: YRD. DOÇ. DR. MEHMET AKİF KILIÇ
Akdeniz Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2012
Konu: Biyoloji = Biology
Dizin: Okratoksinler = Ochratoxins

Özet:
Bu çalışmada; Okratoksin A (OTA) içeren yem ile beslenmiş erkek, kastre edilmiş erkek ve dişi sıçanların böbrek, karaciğer ve plazma OTA miktarları belirlenmiş ve OTA düzeylerinin organ, zaman, cinsiyet ve kastrasyon işlemine bağlı olarak değişimi araştırılmıştır. Bu amaç doğrultusunda; 6 ve 12 hafta süresince OTA içeren yem ile beslenmiş erkek sıçanlar, 24 hafta süresince OTA içeren yem ile beslenmiş erkek, kastre edilmiş erkek ve dişi sıçanlar ile kontrol grubunu oluşturan OTA içermeyen yem ile beslenen sıçanlar olmak üzere 7 deney grubu oluşturulmuştur. Deney periyodu boyunca OTA içeren yem ile beslenen erkek ve dişi sıçanların böbrek, karaciğer ve plazma dokularındaki OTA analizleri HPLC cihazı ile gerçekleştirilmiştir. Tespit edilen OTA seviyeleri organlara, zamana, cinsiyet ve kastrasyon işlemine bağlı olarak değerlendirilmiştir. Testosteron hormonu miktarı ise ELISA test tekniği ile ortaya konmuştur.Sıçanların OTA seviyelerinin organlara bağlı değişimi incelenmiş ve yalnızca 12 ve 24 hafta OTA uygulaması yapılan erkek sıçanların böbrek ile karaciğerleri arasında anlamlı bir farklılığın olmadığı tespit edilmiştir (P>0.05). Bunun yanında diğer grupların (dişi, kastre erkek ve normal erkek 6. hafta) böbrek ve karaciğer OTA seviyeleri arasında istatistiksel olarak anlamlı bir farklılığın olduğu görülmüştür (P<0.05).Erkek sıçanlarda OTA seviyesinin zamana bağlı değişimi incelenmiş, böbrek, karaciğer ve plazmalarda tespit edilen OTA değerlerinin 12. haftada 6. haftaya göre yükseldiği, ancak 24. haftada düştüğü görülmüştür. Böbrek OTA düzeylerinin bu üç farklı zaman diliminde istatistiksel olarak farklılık gösterdiği belirlenmiştir (P<0.01). Karaciğer OTA değerleri zamana bağlı incelendiğinde; 6. haftada elde edilen OTA değeri ile diğer iki grup arasında herhangi bir farklılık tespit edilmezken (P>0.05), 12. ve 24. haftada elde edilen karaciğer OTA değerleri arasında anlamlı bir farklılık görülmüştür (P<0.01). Sıçanların plazma OTA seviyeleri zamana bağlı değerlendirildiğinde, 6 ve 12 hafta süresince OTA uygulanmış erkek sıçanların plazma OTA düzeyleri arasında istatistiksel açıdan anlamlı bir fark olmayıp (P>0.05), 24 hafta süresince OTA ile beslenmiş erkek sıçanların plazma OTA seviyesinin diğer iki gruba oranla anlamlı düzeyde azaldığı belirlenmiştir (P<0.01).Sıçanların OTA seviyelerinin cinsiyete bağlı değişip değişmediğini ortaya koymak amacıyla, 24 hafta süresince OTA uygulanan erkek ve dişi sıçanların böbrek, karaciğer ve plazma OTA seviyeleri tespit edilmiştir. Elde edilen bu veriler karşılaştırıldığında, dişi sıçanların her üç dokudaki OTA seviyelerinin erkeklere göre daha yüksek değerlerde olduğu bulunmuştur (P<0.01). Bu sonuç, cinsiyetin sıçanlardaki OTA seviyesi üzerine belirgin etkisinin olduğunu göstermektedir.Sıçanlarda organ ve plazma OTA seviyelerinin testosteron hormonu ile ilişkili olup olmadığını ortaya koymaya yönelik olarak, bir grup erkeğin testisleri OTA alımlarının 6. haftasında uzaklaştırılmış (kastre edilmiş) ve 24 hafta OTA alımı sonrasında, organları ve plazmaları toplanmıştır. Normal erkek, OTA almış erkek ve kastre edilmiş erkeklerin kastrasyon öncesinde plazma testosteron hormon düzeylerinin benzer olduğu (3.61- 4.86 ng/ml) ve kastrasyonun testosteron hormon düzeyini belirgin bir şekilde azatlığı (0.19 ng/ml) görülmüştür. Kastrasyon işlemi, erkeklerin karaciğer ve plazma OTA düzeyinde istatistiksel olarak anlamlı bir farklılık yaratmazken (P>0.05), böbrek OTA düzeylerinde farklılık yarattığı görülmektedir (P<0.05).Bu çalışmadan elde edilen bulgular özetlendiğinde; 1- Sıçanların plazma ve organ OTA düzeyleri cinsiyete bağlı değişmiş ve dişilerde daha yüksek seviyede bulunmuştur, 2- Erkek sıçanlarda organ ve plazma OTA düzeyi 12. haftaya kadar artış göstermekte ve daha sonra azalmaktadır 3- Erkek sıçanların karaciğer ve böbrek OTA düzeylerinde organlara bağlı belirgin bir farklılık gözlenmemektedir ve 4- Erkek sıçanların plazma ve organ OTA düzeyleri testosteron hormon düzeyinden bağımsız gözükmektedir.

Abstract:
In this study, plasma and organ (kidney and liver) OTA levels of OTA-treated normal male and female rats and castrated rats were determined and their OTA levels were evaluated according to sample types, time, sex and castration. For this purpose, rats were put in seven groups. For the determination of time-dependent OTA changes in organs and plasma, normal males were treated with OTA for 6, 12 and 24 weeks. Female rats were also treated with OTA for 24 weeks for the determination of sex-dependent OTA levels of organs and plasma. To find out the role of testosterone in organ and plasma OTA levels, a group of rats were castrated after 6 weeks of OTA treatment and then continued to be fed with OTA containing food for a further 18 weeks. OTA analysis of organs and plasma samples were carried out using HPLC with a fluorescence detector and testosterone levels of normal and castrated males? plasma samples were determined with an ELISA based technique.The OTA levels of organs and plasma samples were evaluated according to organ type, OTA-treatment period, sex and castration. When OTA levels of kidney and liver of the rats were compared, there were statistically significant differences between the organs (P<0.05), except in the organs of 12 and 24 week OTA-treated normal male rats (P>0.05).When organ and plasma OTA levels of the male rats were compared according to the OTA-treatment period, it was found that there was an increase in week 12 (compared to week 6) and then a decrease in week 24. The kidney OTA levels in three different time periods showed statistically significant differences (P<0.001). When liver OTA levels were compared, there were no statistical differences between week 6 and other weeks (P>0.05) but there were statistically significant differences between weeks 12 and 24 (P<0.001). When the plasma OTA levels of the male rats were compared according to their OTA-treatment period, there were no differences between weeks 6 and 12 (P>0.05) but in week 24, OTA levels of the plasma were significantly lower than the other two weeks (P<0.001).In order to find out whether males and females? organ and plasma OTA levels differ, 24 weeks OTA treated males and females? organ and plasma OTA levels were compared and it was found that the organ and plasma OTA levels of females were significantly higher than males (P<0.001). The result showed that organ and tissue OTA levels in rats are sex dependent.In order to find out whether males? organ and plasma levels are testosterone dependent, the testes of a group of males were removed (castrated) after receiving 6 weeks OTA treatment and then their organs and plasma samples were collected at the end of their 24 week OTA treatment. It was found that the testosterone levels of normal males, OTA-treated normal males and OTA-treated castrated males were similar to each other (3.61- 4.86 ng/ml) and the castration dramatically reduced the plasma testosterone level in castrated males (0.19 ng/ml). When OTA levels of normal and castrated males were compared, there were no significant differences in the liver and plasma OTA levels of the rats (P>0.05) but kidney OTA levels of the rats were statistically different (P<0.05).In summary; 1- The plasma and organ OTA levels of rats changes according to sex, being higher in females, 2- Males? organ and plasma OTA levels increase up to week 12 and then they decrease, 3- There are no significant differences between the organ and plasma OTA levels of males and 4- It seems that organ and plasma OTA levels of male Wistar Rats are independent from their plasma testosterone levels.