Gıda alımı artırılan, azaltılan ve monosodyumglutamat uygulanan genç sıçanların mide dokusunda Apelin'in immünohistokimyasal olarak belirlenmesi
Determination of Apelin as immunohistochemically in gastric tissue of young rats applied monosodiumglutamate and increased, restricted food intake
Yazar: ZÜBEYDE ÇALIŞKAN
Danışman: PROF. DR. LEYLA CANPOLAT KOYUTÜRK
Fırat Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2010
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Apelin = Apelin ; Beslenme = Nutrition ; Gastrik mukoza = Gastric mucosa ; Mide = Stomach ; Sodyum glutamat = Sodium glutamate ; Sıçanlar = Rats ; İmmünohistokimya = Immunohistochemistry

Özet:
Apelin son zamanlarda keşfedilmiş, neredeyse tüm vücutta bulunan peptit yapılı bir hormon olup, mide, beyin, akciğer, laktasyondaki meme ve yağ dokusu gibi birçok dokuda üretilir. Apelinin sıvı ve gıda alımının yanı sıra, kardiyovasküler, gastrointestinal, endokrin ve immün sistemlerin düzenlenmesinde önemli fizyolojik rolü vardır. Diabetes mellitus, hipertansiyon ve kalp krizinin patogenezinde de etkili olduğu düşünülmektedir. Monosodium glutamat (MSG) uzun dönemde obezite ve metabolik sendrom tablosunun gelişmesine neden olan bir maddedir. Bu çalışmada, gıda kısıtlamasının, gıda alımının arttırılmasının ve MSG uygulanmasının mide dokusunda oluşturduğu yapısal değişiklikler ile apelin immünreaktivitesi üzerine olan etkilerinin belirlenmesi amaçlandı.Çalışmada 24 adet yenidoğan Wistar cinsi erkek sıçan kullanıldı. Sıçanlar dört eşit gruba ayrıldı. Grup I: Kontrol, Grup II: Gıda alımı arttırılan, Grup III: Gıda alımı azaltılan ve Grup IV: MSG uygulanan gruplar. Çalışmada kullanılan tüm sıçanlar deneyin 40. gününün sonunda ketamin ve xylazine anestezisi ile dekapite edilerek, mide dokuları çıkarıldı. Rutin ışık mikroskobu takibi yapılarak, dokular parafin bloklara gömüldü. Bloklardan alınan kesitlere histolojik boyamalar yapıldı ve apelin immunoreaktivitesi için avidin-biotin-peroxidaz yöntemi uygulandı.Kontrol grubuna ait mide dokusu kesitlerinin diğer gruplar ile karşılaştırılmasında, gıda alımı arttırılmış grup kontrole daha yakın olarak gözlenirken, gıda alımı azaltılan ve daha belirgin olarak MSG uygulanan gruba ait mide dokularının gastrik bezlerinde genişlemeler, apikal mukoza yüzeyinde hücresel dökülmeler ve yüzeyel epitel hücrelerinde kayıp gözlendi. Gıda alımı azaltılan grupta, mide mukozası lamina propriasındaki gastrik bezlerde daha belirgin olmak üzere, gıda alımı arttırılmış grupta da gastrik bezlerdeki hücreler arasında köpüksü görünüm izlendi. MSG uygulanan gruba ait mide mukozası lamina propriasında köpüksü görünüm izlenmedi ancak tüm gruplar arasında mide mukozasında en belirgin değişikliklerin MSG uygulanan grupta olduğu gözlendi. Ayrıca gıda alımı azaltılan grupta lamina propriada mononükleer hücre infiltrasyonları ve gastrik bezlerin bazal bölgelerinde apopitotik hücreler olduğu belirlendi.Kontrol ve deney gruplarına ait mide dokusundan alınan kesitlere uygulanan apelinin immunohistokimyasal boyanmasında sadece mukoza tabakasında pozitiflik gözlendi. Apelin immünpozitif hücreler özellikle bezlerin bazal kısımlarında daha yoğun ve belirgindi. Apelinin immünohistokimyasal boyanma derecesinin gruplar arasındaki karşılaştırılmasında sırasıyla, gıda alımı kısıtlanan grupta (+1), kontrol grubu (+2), gıda alımı arttırılan grupta (+3) ve MSG uygulanan grupta ise (+4) olduğu belirlendi.Sonuç olarak gıda alımının arttırılması, gıda kısıtlanması ve MSG uygulanmasının mide mukozasında sırasıyla gittikçe artan oranda histolojik değişikliklere neden olduğu ve mide dokusundaki apelinin gıda alımı kısıtlandığında azaldığı, gıda alımının arttırılması ve MSG uygulanması durumunda ise arttığı kanaatine varıldı.Anahtar Kelimeler: Apelin, immünohistokimya, mide, sıçan

Abstract:
Apelin, a recently discovered peptide hormone, has a widespread pattern of expression in thorough the body and it is produced in several tissues, including stomach, brain, lung, lactating breast and adipose tissues and body. Apelin has important physological roles in regulation of cardiovascular, gastrointestinal, endocrin and immune systems besides food and water intake. It has also effects on the pathogenesis of Diabetes Mellitus, hypertension and heart failure. Monosodium glutamate (MSG) is an agent that can cause obesity or metabolic sendrom in a long period. The aim of this study was to investigate the structural alterations and apelin immunoreactivity in rat stomach induced by food-restriction, increased food intake and MSG application.Twenty four neonate Wistar male rats were used in the study. The rats were divided to four equal groups. Group I: Control, Group II: Increased food intake, Group III: Restricted food intake, Group IV: MSG applied groups. All the rats used the study were decapitated under ketamine anestesia at the end of 40th day of the study and stomach tissues were removed. Following routine light microscopy procedure, tissues were embeded in paraffin blocks. The slides obtained from paraffin blocks were histologically stained and avidin- biotin-peroxidase method were applied to determine apelin immunoreactivity.Compared to the control group, examining of stomach tissue slides revealed that there was dilatation of lumens in the gastric glands, desquamation of the surface epithelium on the apical mucosa, loss of superficial epithelial cells in the restricted food intake group and especially the MSG applied group. However, increased food intake group was close to the controls. A foamy appearence was observed more intensively in gastric glands of stomach mucosa of the restricted food intake group and less intensively between gastric gland cells of the increased food intake group. There was no foamy appearence in lamina propria of gastric mucoza in the MSG applied group. However, the most distinct alterations in gastric mucosa were determined in the MSG applied group among all the groups. In addition, mononuclear cell infiltrations in lamina propria and apopitotic cells in basale of gastric glands of the restricted food intake group.In immunohistochemical staining for apelin appied to the slides of gastric tissues in all the groups, immunopositive reaction was determined in only mucosa layer. Immunopositive cells for apelin were more profound and apparent in base of the glands. The degree of immunohistochemical staining for apelin was determined as (+1) in restricted food intake group, (+2) in control group, (+3) in increased food intake group and (+4) in MSG applied groups.In conclusion, increased food intake, restricted food intake and MSG application cause progresively increased histological alterations in gastric mucosa and apelin immunoreactivity in gastric tissue is decreased in restriction of food intake while increased in MSG application and increment of food intake.Key words: Apelin, immunohistochemical, stomach, rat