Mesane kanserli hastalarda SRD5A2 polimorfizminin dutasterid yanıtına etkisinin değerlendirilmesi
Evaluation of the impact of SRD5A2 polymorphism on dutasteride response in patients with bladder cancer
Yazar: CANET İNCİR
Danışman: PROF. DR. YEŞİM TUNÇOK
Dokuz Eylül Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology ; Üroloji = Urology
Dizin: Advers olay = Adverse event ; Dutasterid = Dutasteride ; Enzim polimorfizmi = Enzyme polymorphism ; Farmakogenetik = Pharmacogenetics ; Mesane hastalıkları = Urinary bladder diseases ; Mesane neoplazmları = Urinary bladder neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Polimorfizm-genetik = Polymorphism-genetic ; İlaç yan etkileri ve istenmeyen reaksiyonlar = Drug-related side effects and adverse reactions

Özet:
Etkisini testosteronu dihidrotestosterona dönüştüren 5-alfa redüktaz enziminin hem tip-1 hem tip-2 izoenzimini inhibe ederek gösteren dutasterid, oral yoldan kullanılan bir ilaçtır. 5-alfa redüktaz enzimini kodlayan SRD5A2 geninde en sık görülen varyasyonlar olan V89L (rs523349) ve A49T (rs9282858) polimorfizmlerinin enzim aktivitesini etkilediği bilinmektedir. Çalışmanın amacı, bir faz 2 klinik araştırma kapsamında dutasterid tedavisi alan mesane kanserli hasta gönüllülerin SRD5A2 genindeki V89L ve A49T polimorfizmlerinin, dutasteridin etkililiği ve güvenliliği üzerindeki etkilerinin araştırılmasıdır. 
22 hasta gönüllüden alınan kan örneklerinden DNA'lar izole edilerek polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) kuruldu. TaqMan SNP Genotyping Assay sistemi kullanılarak DNA'lardaki tek nükleotid polimorfizmleri çoğaltılarak saptandı. Analizler, Applied Biosystems Instruments 7500 Fast Real-Time PCR Systems (Applied Biosystems™) PCR cihazı, TaqMan Genotype Software Version 1.6.0 (Applied Biosystems™) ve Microsoft Excel programları kullanılarak gerçekleştirildi. Çalışma süresince saptanan advers olayların dutasterid ile nedensellik ilişkisi ve şiddeti değerlendirildi. Tüm istatistiksel analizler, Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, Inc., Chicago IL), sürüm 22, Windows yazılımı ile yapıldı ve p<0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. 
Etkisini testosteronu dihidrotestosterona dönüştüren 5-alfa redüktaz enziminin hem tip-1 hem tip-2 izoenzimini inhibe ederek gösteren dutasterid, oral yoldan kullanılan bir ilaçtır. 5-alfa redüktaz enzimini kodlayan SRD5A2 geninde en sık görülen varyasyonlar olan V89L (rs523349) ve A49T (rs9282858) polimorfizmlerinin enzim aktivitesini etkilediği bilinmektedir. Çalışmanın amacı, bir faz 2 klinik araştırma kapsamında dutasterid tedavisi alan mesane kanserli hasta gönüllülerin SRD5A2 genindeki V89L ve A49T polimorfizmlerinin, dutasteridin etkililiği ve güvenliliği üzerindeki etkilerinin araştırılmasıdır. 
22 hasta gönüllüden alınan kan örneklerinden DNA'lar izole edilerek polimeraz zincir reaksiyonu (PCR) kuruldu. TaqMan SNP Genotyping Assay sistemi kullanılarak DNA'lardaki tek nükleotid polimorfizmleri çoğaltılarak saptandı. Analizler, Applied Biosystems Instruments 7500 Fast Real-Time PCR Systems (Applied Biosystems™) PCR cihazı, TaqMan Genotype Software Version 1.6.0 (Applied Biosystems™) ve Microsoft Excel programları kullanılarak gerçekleştirildi. Çalışma süresince saptanan advers olayların dutasterid ile nedensellik ilişkisi ve şiddeti değerlendirildi. Tüm istatistiksel analizler, Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, Inc., Chicago IL), sürüm 22, Windows yazılımı ile yapıldı ve p<0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. 
SRD5A2 genindeki V89L polimorfizmi açısından tüm hasta gönüllüler homozigot GG (%100); A49T (rs9282858) polimorfizmi açısından 22 hasta gönüllünün 11'i heterozigot TC (% 50), 9'u homozigot TT (% 40.9), 1'i homozigot CC (% 4.5) olarak saptandı. A49T polimorfizminin farklı genotipleri ile hastalık nüksü arasında istatistiksel olarak anlamlı bir farklılık saptanmadı (p=0.715). Hiçbir hasta gönüllüde dutasterid ile nedensellik ilişkisi kurulan advers reaksiyon gelişmedi. 
Çalışmamız, SRD5A2 genindeki V89L ve A49T polimorfizmlerinin mesane kanserli hastalardaki sıklığını ortaya koyan ve mesane kanseri nüksü ile ilişkisini araştıran literatürdeki ilk çalışmadır. İlgili polimorfizmlerin dutasteridin etkililiği ve güvenliliği üzerindeki etkisinin ortaya konması için daha büyük örneklem büyüklüğüne sahip ve kontrol grubunun da dahil edileceği çalışmaların planlanması gerekmektedir.

Abstract:
Dutasteride is an orally administered drug and shows its effect by inhibiting both the type-1 and type-2 isoenzymes of the 5-alpha reductase enzyme which converts testosterone to dihydrotestosterone. It is known that V89L (rs523349) and A49T (rs9282858) polymorphisms, which are the most common variations on the SRD5A2 gene encoding the 5-alpha reductase enzyme, affect the enzyme activity. The aim of the study was to investigate the impact of SRD5A2 gene polymorphisms on the efficacy and safety of dutasteride in patients with bladder cancer receiving dutasteride treatment in a phase 2 clinical trial.
DNAs were isolated from blood samples taken from 22 patients and polymerase chain reaction (PCR) was established. Using the TaqMan SNP Genotyping Assay system, single nucleotide polymorphisms on DNA were detected by amplification. Analyzes were performed using the Applied Biosystems Instruments 7500 Fast Real-Time PCR Systems (Applied Biosystems™) PCR instrument, TaqMan Genotype Software Version 1.6.0 (Applied Biosystems™) and Microsoft Excel programs. Causal relation between dutasteride use and the adverse events and severity of them was evaluated.  All statistical analyzes were performed with the Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, Inc., Chicago IL), version 22, Windows software, and p<0.05 was considered statistically significant.
All patients were homozygous GG (100%) for the V89L polymorphism in the SRD5A2 gene; In terms of A49T (rs9282858) polymorphism, 11 of 22 patients were heterozygous TC (50%), 9 homozygous TT (40.9%), and 1 homozygous CC (4.5%). There was no statistically significant difference between different genotypes of A49T polymorphism and disease recurrence (p=0.715). None of these events were causally related to dutasteride use.
To best of our knowledge, this study is the first to reveal the frequency of V89L and A49T polymorphisms on the SRD5A2 gene of patients with bladder cancer and to investigate its relationship with bladder cancer recurrence. In order to investigate the impact of SRD5A2 gene polymorphisms on the efficacy and safety of dutasteride, studies with much larger sample size and the control group are needed.