DMBA(7,12-dimetilbenz[a]antrasen) ile meme kanseri oluşturulan ratlarda medicago sativa özütünün kanserli meme dokusu üzerinde koruyucu etkinliğinin incelenmesi
Investigation of the protective efficacy of medicago sativa extract on cancerous breast tissue in rats with breast cancer caused by DMBA(7,12-dimethylbenz[a]anthracene)
Yazar: BARAN DEMİR
Danışman: DOÇ. DR. MEHMET TOLGA KAFADAR
Dicle Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2023
Konu: Genel Cerrahi = General Surgery

Özet:
Meme kanseri, kansere bağlı gelişen ölümlerin önde gelen nedenidir. Meme kanserinin etiyopatogenezi belirsizliğini korurken, çevre, üreme ve hormonal durum, yaş, meme yoğunluğu, alkol ve sigara kullanımı, genetik mutasyonlar ve genetik polimorfizmler, predispozan faktörler arasında yer almaktadır. Çoklu ilaç direncinin yaygınlığı ve ortaya çıkışı, anti-tümör ajanlarının spesifik olmayan sistemik dağılımı, tümör bölgesine ulaşan yetersiz ilaç konsantrasyonları, sitotoksisite ve terapötik yanıtları izleme yeteneğinin sınırlı olması ile kanser tedavisi giderek daha zorlayıcı ve tedavi edilemez bir hastalık haline gelmiştir (Sofi, 2018). Bu sorunun üstesinden gelmek için, kanser tedavisi veya yürütülen tedaviye yardımcı olabilecek yeni stratejiler üzerinde çalışılmaktadır. İnsan meme kanserine benzerliği dolayısıyla, sıçanlarda oluşturulan deneysel meme kanser modeli oldukça tercih edilen bir yöntemdir (Samy, 2006).
   7,12-Dimetilbenz[a]antrasen (DMBA) bir immunsüpresor (bağışıklık baskılayıcı) ve belirli bir organa özgü güçlü bir laboratuvar kanserojenidir (Miyata, 2001). Dişi sıçanlarda DMBA kaynaklı meme karsinomları, meme karsinogenezinin laboratuvar modellerinde standart hale gelmiştir (Russo, 1996). DMBA kullanımı sonucu sıçanlarda meydana gelen biyokimyasal, moleküler, genetik ve histopatolojik değişiklikler insan kanserlerinde gözlenenlere benzer olduğu için mutasyon ve kanser araştırmalarında prototip ajan olarak yaygın olarak kullanılan sentetik bir hidrokarbondur (Sung,2005). DMBA'nın meme kanserinde etkinliği araştırmak için kemirgenlerde sıklıkla kullanılmaktadır (Beyaz, 2022). DMBA hem karsinojenik hem de immunsüpresor ve yapılan çalışmalarda meme kanserini başarılı şekilde indüklediği gösterilmiştir (Zeweil, 2019).
   Tıbbi ve aromatik bitkiler öncelikle hastalıkları iyileştirmek, önlemek ve sağlığı sürdürmek için ilaç olarak kullanılan bitkilerdir (Anonim, 2005). İnsan sağlığına yararlı olan bitkilerin tedavi edici özellikleri olduğundan bitkisel ilaç yapımında faydanılmaktadır (Aydın, 2004). Antioksidan aktivite gösteren fenolik bileşiklerin vücutta oluşan serbest radikalleri temizleme, engelleme ve azaltıcı gibi özellikleri vardır. Fenolik bileşikler biyomoleküllerin serbest radikaller tarafından okside olmalarını engellemektedirler (Burda, 2001).
   Medicago sativa Fabaceae familyasına ait bir yem bitkisidir. Yaygın olarak Akdeniz ülkelerinde yetişen ve diğer bir yandan sert kış koşullarına uyum sağlayabilen çok yıllık otsu bitkilerdir (Farag, 2007). İnsanlar birçok hastalığa karşı immün sistemi koruması için bitkideki fitokimyasallardan yararlanmaktadır. Bu fitokimyasallar lignanlar, izoflavonlar, kümestan olarak tanımlanmıştır (Jacobs, 2009). Medicago türlerinde en fazla bulunan fitokimyasal izoflavondır ve bu fitokimyasal madde antimikrobiyal ve antifungal özellikleriyle tıpta çokça kullanılmaktadır (Javid, 2015).
   Son yirmi yılda araştırmalar daha çok, doğal olarak ortaya çıkan polifenolik bileşikler üzerine odaklanmıştır. Yapılan birçok çalışma bu bileşiklerin kanseri önlemede yararlı etkinliğinin olduğunu göstermiştir (Khan,2008). Flavonoidlerin biyolojik etkilerinin apoptozis indüksüyonuna bağlı gelişen tümör hücrelerine karşı etkili olduğu bilinmektedir (Limtrakul, 2005; Ramos, 2007). Medicago sativanın yüksek vitamin ve protein içeriği sayesinde pek çok hastalığın (bazı kanser türleri, koroner, osteoporoz, anemi, diabet, ülser) etkisini azalttığı bilinmektedir (Jian, 2009). Yaklaşık 1500 yıldır çeşitli hastalıkların tedavisinde yaygın olarak kullanılmaktadır. Bora ve Sharma çalışmalarında sayısız farmakolojik özelliklere sahip olduğunu bildirmişlerdir (Bora, 2011). Yonca yaprağı ekstraktlarının apoptozisle indüklenildiğinde antiproliferatif özelliklere sahip olduğu ve farklı tümör hücrelerini başarılı şekilde tedavi ettiği gösterilmiştir (Gatouillat, 2015). Medicago sativa yapraklarının özünde bulunan Medicarpin ve Millepurpan gibi flavonoidler özellikle çoklu ilaç tedavisine dirençli kanser türlerininin tedavisinde başarılı şekilde kullanıldığı bildirilmiştir (Gatouillat, 2014).
   Bu çalışmanın amacı dişi sıçanlarda DMBA ile oluşturulmuş meme kanserinde Medicago Sativa özütlerinin biyokimyasal, histopatolojik, immunohistokimyasal ve TUNEL boyama yöntemleri ile etkinliğini araştırmaktır.

Abstract:
Breast cancer is the leading cause of cancer-related deaths. While the etiopathogenesis of breast cancer remains unclear, environment, reproductive and hormonal status, age, breast density, alcohol and cigarette use, genetic mutations and genetic polymorphisms are among the predisposing factors. With the prevalence and emergence of multidrug resistance, nonspecific systemic distribution of anti-tumor agents, insufficient drug concentrations reaching the tumor site, cytotoxicity, and limited ability to monitor therapeutic responses, cancer treatment has become an increasingly challenging and incurable disease (Sofi, 2018). . To overcome this problem, new strategies are being studied that can assist in cancer treatment or treatment. Due to its similarity to human breast cancer, the experimental breast cancer model created in rats is a highly preferred method (Samy, 2006).
    7,12-Dimethylbenz[a]anthracene (DMBA) is an immunosuppressor and a potent laboratory carcinogen specific to a particular organ (Miyata, 2001). DMBA-induced mammary carcinomas in female rats have become standard in laboratory models of mammary carcinogenesis (Russo, 1996). DMBA is a synthetic hydrocarbon that is widely used as a prototype agent in mutation and cancer research because the biochemical, molecular, genetic and histopathological changes that occur in rats as a result of DMBA use are similar to those observed in human cancers (Sung, 2005). It is frequently used in rodents to investigate the effectiveness of DMBA in breast cancer (White, 2022). DMBA is both carcinogenic and immunosuppressive, and studies have shown that it successfully induces breast cancer (Zeweil, 2019).
    Medicinal and aromatic plants are plants used primarily as medicine to cure and prevent diseases and maintain health (Anonymous, 2005). Since plants that are beneficial to human health have therapeutic properties, they are used in the production of herbal medicine (Aydın, 2004). Phenolic compounds with antioxidant activity have properties such as cleaning, blocking and reducing free radicals formed in the body. Phenolic compounds prevent biomolecules from being oxidized by free radicals (Burda, 2001).
    Medicago sativa is a forage plant belonging to the Fabaceae family. They are perennial herbaceous plants that commonly grow in Mediterranean countries and can also adapt to harsh winter conditions (Farag, 2007). People benefit from the phytochemicals in the plant to protect the immune system against many diseases. These phytochemicals have been identified as lignans, isoflavones, coustanes (Jacobs, 2009). The most abundant phytochemical in Medicago species is isoflavone, and this phytochemical is widely used in medicine with its antimicrobial and antifungal properties (Javid, 2015).
    In the last two decades, research has focused mostly on naturally occurring polyphenolic compounds. Many studies have shown that these compounds have beneficial effects in preventing cancer (Khan, 2008). It is known that the biological effects of flavonoids are effective against tumor cells that develop due to induction of apoptosis (Limtrakul, 2005; Ramos, 2007). It is known that Medicago sativa reduces the effects of many diseases (some types of cancer, coronary, osteoporosis, anemia, diabetes, ulcer) thanks to its high vitamin and protein content (Jian, 2009). It has been widely used in the treatment of various diseases for approximately 1500 years. Bora and Sharma reported in their studies that it has numerous pharmacological properties (Bora, 2011). Clover leaf extracts have been shown to have antiproliferative properties when induced by apoptosis and successfully treat different tumor cells (Gatouillat, 2015). Flavonoids such as Medicarpin and Millepurpan, found in the essence of Medicago sativa leaves, have been reported to be used successfully in the treatment of cancer types that are resistant to multiple drug treatments (Gatouillat, 2014).
    The aim of this study is to investigate the effectiveness of Medicago Sativa extracts on DMBA-induced breast cancer in female rats using biochemical, histopathological, immunohistochemical and TUNEL staining methods.