Ovariektomize ratlarda postmenopozal aterosklerozu önlemede raloksifen ve atorvastatin kullanımının immünohistokimyasal olarak değerlendirilmesi
Immunohistochemical assesment of Reloxifen and atorvastatin for prevention of postmenopozal atherosclerosis in ovariectomized rats
Yazar: BİLGE ÇETİNKAYA DEMİR
Danışman: Y.DOÇ. YILDIZ UYAR
Celal Bayar Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2007
Konu: Kadın Hastalıkları ve Doğum = Obstetrics and Gynecology

Özet:
ÖZETPostmenopozal dönemde sıklığı artarak karşımıza çıkan ateroskleroz ve nedenolduğu kardiovasküler hastalıklar, bilim adamlarını bu dönemde kullanılabilecek olanen etkili ilaçları bulmaya yöneltmektedir. Biz de çalışmamızda postmenopozalateroskleroz gelişim basamaklarında raloksifen ve atorvastatin kullanımının etkilerinideğerlendirmek istedik. Çalışmamız Celal Bayar üniversitesi Deney HayvanlarıLaboratuvarında her biri on adet rat içeren dört grup hayvan üzerindegerçekleştirildi. Ratlara ovariektomi uygulanıp menopoza girmeleri sağlandıktansonra gruplarına göre Evista (Raloksifen) 3 mg/kg, ator (atorvastatin) 30 mg/kg,raloksifen 3 mg/kg ve atorvasatin 30 mg/kg ilaç birlikte uygulandı. 5 haftalık ilaçuygulamasının ardından ratların dekapitasyon işlemi sonrasında aortaları dissekeedilip fikse edildi. Fikse edilmiş aortalar hemotoksilen ve eosin ile veimmünohistokimyasal metodlarla boyandı. Hazırlanan preparatlarda özellikle endotelhücrelerinde olmak üzere damar yatağında östrojen reseptör alfa (ERÎ±), östrojenreseptör beta (ERÎ²), iNOS, eNOS,TNF gibi aterosklerozunÎ±,ET-1,MCP-1gelişiminde ilk basamaklarda yer alan markerlar incelendi.Kontrol grubu endotel hücrelerinde ERÎ± tespit edilmezken ERÎ² yoğun şekilde izlendi.eNOS immunreaktivitesi iNOS aktivitesine göre daha yoğun olarak gözlendi. ET-1boyanması ise NOS boyanmasından daha yoğun olarak gözlendi. nflamatuarmarkerlardan TNF Î± ve monosit göçünü sağlayan MCP-1 aktivitesi de orta şiddetteboyanma gösterdi.Atorvastatin kullanımı ile endotel hücrelerinde ERÎ² immünreaktivitesi azalmış olarakbulunmuştur. TNF-Î±, ET-1, MCP-1 reaktivilerinde de azalma tespit edilmiştir.Paradoksal olarak eNOS ve iNOS aktivitesinde de azalma tespit edilmiştir.Raloksifen vermiş olduğumuz üçüncü grupta endotel incelemesinde ERÎ² minimalazalma göstermiştir. eNOS aktivitesi değişmez iken iNOS aktivitesi artış göstermiştir.TNFÎ±, MCP-1 ve ET-1 aktivitelerinde de atorvastatin grubu kadar belirgin olmamaklabirlikte azalma gözlenmiştir.Her iki ilacı birlikte kullanan rat grubunda ise TNFÎ±, ET-1 boyanmasında belirginolmak üzere tüm markerlarda azalma tespit edilmiştir. MCP-1 immünreaktivitesibelirgin değişiklik göstermemiştir.

Abstract:
SUMMARYThe postmenopausal state and the coexisting disorders especially atheroscleroticprocess and its end point cardiovascular diseases are one of the major problems onwhich the scientiests are seeking for better medications to be used. Fort his reasonwe desıgned a study ın which the effects of two drugs raloxifen and atorvastatin onthe process of atherosclerosis are looked for. Our study was performed at animalexperimantal laboratories of Celal Bayar University, on four seperate animal groups,each of them consisting of ten rats. After the rats get into menapausal state followingovariectomy, one group is treated with Evista (Raloksifen) 3mg/kg alone, the othergroup with Ator (Atorvastatin) 30mg/kg alone and the last group with Evista(Raloksifen) and Ator (Atorvastatin) together. After five weeks of treatment and thedecapitation of the rats are completed, the aortas of these animals are fixatedfollowing dissection. The fixated aortas are stained with hemotoxylen and eosine,and with immunohistochemical methods. On the prepared specimens we search forthe markers which play important roles at the atherosclerotic process, such aseostrogen receptor alfa (ERÎ±), eostrogen receptor beta (ERÎ²), iNOS, eNOS, TNFÎ±,ET-1, MCP-1 which are found on the endothelial cells of the vascular bed.The immunoreactivity of ERÎ² was highly detectable on endothelial cells of the controlgroup where as ERÎ± immunoreactivity was not detectable. And also eNOSimmunoreactivity was found to be more than the iNOS immunoreactivity. Theimmunostaining of ET-1 was denser corresponding to the staining of NOS. We foundintermediate staining activity of TNFÎ± and MCP-1 which sustain the migration of themonocytes.In the examination of the endothelium of the aortas of the group treated withAtorvastatin ERÎ² statining was weaker compared with the control group. Also theimmunostaining of the iNOS and eNOS activity was reduced compared to the controlgroup. TNFÎ±, ET-1, MCP-1 levels were also reduced with the administration ofAtorvastatin.The analysis of the endothelium of the group treated with raloxifen reveals minimaldecrease in the immunoreactivity of ERÎ², TNFÎ±, ET-1. MCP-1 and also eNOSactivity was found to have no difference but iNOS activity was increased despite theuse of raloxifen.At the group which was treated with both Atorvastatin and raloxifen we detected adecline in the immunoreactivity of all markers especially with TNFÎ± and ET-1staining. But MCP-1 immunoreactivity seems to reveal no difference.