SH-SY5Y nöroblastoma hücrelerinde yüksek glukozla oluşturulan hasara karşı neoeriositrinin koruyucu etkisinin araştırılması
Investigation of the protective effect of neoeriocitrin against high glucose-induced damage in SH-SY5Y neuroblastoma cells
Yazar: DENİZ TULUMCUOĞLU
Danışman: PROF. DR. GÜLDENİZ SELMANOĞLU
Hacettepe Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı / Biyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Biyoloji = Biology

Özet:
Diabetes mellitus günümüzde yaygın olarak görülen bir metabolik hastalıktır ve her geçen 
gün insidansı önemli ölçüde artmaktadır. Diabetes mellitus'un artışıyla birlikte bu 
hastalığa bağlı gelişen komplikasyonlarda da önemli bir artış olmaktadır. Diyabetik 
nöropati bu komplikasyonlar arasında en sık görülendir. Bu nedenle, diyabetik nöropatiyi 
hafifletmek, diyabetik nöropatiden korunma yolları bulmak, korumak veya iyileştirmek 
için çeşitli ilaçlar ve doğal aday ajanlar bulunmaya çalışılmaktadır. Flavonoidler, 
bitkilerde bol miktarda bulunan ve antioksidan ve antidiyabetik etkiye sahip fenolik 
bileşiklerdir. Neoeriositrin yeni keşfedilen bir flavonoid olup hakkında fazla bilgi yoktur. 
Bu nedenle flavonoidlerin antioksidan etkileri dikkate alınarak neoeriositrin'in aday bir 
ajan olabileceği düşünülerek bu çalışma planlanmıştır. Çalışmada SH-SY5Y 
nöroblastoma hücrelerinde yüksek glukoz konsantrasyonu (350 mM) ile hasar 
oluşturularak neoeriositrinin (5 µM, 10 µM ve 20 µM konsantrasyonlarında) koruyucu ii
etkisi araştırılmıştır. Hücre canlılığının belirlenmesi için kristal viyole ve tripan mavisi 
boyamalar yapılmıştır. Antioksidan özelliğini tespit etmek için oksidatif strese bağlı 
ortaya çıkan hücre içi ROS miktarı ve lipit peroksidasyon belirteci olan MDA miktarı 
ölçümleri yapılmıştır. Ayrıca hücrenin metabolik aktivitesini belirlemek için ATP 
seviyeleri ölçülmüş ve apoptotik hücre ölümü TUNEL testi ile belirlenmiştir. Elde edilen 
sonuçlara göre neoeriositrinin, konsantrasyona bağlı olarak ROS miktarını düşürdüğü ve 
20 µM konsantrasyonda lipid peroksidasyonu azalttığı bulunmuştur. Diğer yandan 
neoeriositrinin artan konsantrasyonlarında SH-SY5Y hücrelerinde ATP miktarında artışa 
ve apoptotik hücre sayısında azalmaya neden olduğu tespit edilmiştir. Çalışmadan elde 
edilen sonuçlarla yüksek glukoz konsantrasyonuyla diyabetik nöropati modellemesi 
yapılan SH-SY5Y hücrelerinde oluşan hasara karşı neoeriositrinin koruyucu etkisinin 
olduğu ortaya çıkarılmıştır

Abstract:
Diabetes mellitus is a common metabolic disease and its incidence increases dramatically. 
With the spread of diabetes mellitus, there is a significant increase in the complications 
of disease. Diabetic neuropathy is the most common disease among these complications. 
Therefore, candidate natural agents have been searching for various medicines for 
relieving, protecting or remediation against diabetic neuropathy. Flavonoids, which are 
phenolic compounds found in plants, have antidiabetic and antioxidant effects. 
Neoeriocitrin is a newly discovered flavonoid and there is not much information about its 
effect. Therefore, this study has been planned by considering antioxidant effects of 
flavonoids, neoeriocitrin may be a candidate agent. In this study, the protective effect of 
neoeriocrine was investigated by causing damage to SH-SY5Y neuroblastoma cells with 
high glucose concentration. In the study, crystal violet and trypan blue staining were 
performed to determine cell viability. In order to determine its antioxidant properties, the 
amount of intracellular ROS resulting from oxidative stress and the amount of MDA, iv
which is a lipid peroxidation marker, were measured. According to the results obtained, 
it was found that neoeriocitrin decreased the amount of ROS at increasing concentrations 
and had an effect on the reduction of lipid peroxidation at a concentration of 20 µM. On 
the other hand, ATP levels were measured to determine the metabolic activity of the cell 
and apoptotic cell death determined by the TUNEL test. According to the results, it was 
found that the amount of ATP increased and the number of apoptotic cells decreased in 
SH-SY5Y neuroblastoma cells at increasing concentrations of neoeriocitrin. Considering 
all the results obtained from the study, it was revealed that neoeriocitrin had a protective 
effect against the damage in SH-SY5Y cells that were modeled for diabetic neuropathy 
with high glucose concentration