Enteroinvazif patojenlere karşı probiyotik mikroorganizmaların  hücre kültürü ortamında etkinlikleri
The efficacy of probiotic microorganisms against  enteroinvasive pathogenes in cell culture
Yazar: ESRA ÇÖREKLİ
Danışman: PROF. DR. SARHAN SAKARYA
Adnan Menderes Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Enfeksiyon Hastalıkları ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2017
Konu: Klinik Bakteriyoloji ve Enfeksiyon Hastalıkları = Clinical Microbiology and Infectious Diseases
Dizin: Hücre kültürü = Cell culture ; Lactobacillus = Lactobacillus ; Lactobacillus acidophilus = Lactobacillus acidophilus ; Mikrobiyoloji = Microbiology ; Probiyotikler = Probiotics ; Saccharomyces boulardii = Saccharomyces boulardii ; Salmonella typhi = Salmonella typhi ; Shigellalar = Shigella

Özet:
ENTEROİNVAZİF PATOJENLERE KARŞI PROBİYOTİK 
MİKROORGANİZMALARIN HÜCRE KÜLTÜRÜ ORTAMINDA 
ETKİNLİKLERİ
Giriş  ve  Amaç:  Probiyotikler  "yeterli  miktarda  alımı  sonucu  konağın  sağlıklı 
kalmasına yardımcı olan canlı mikroorganizmalar" olarak tanımlanmıĢtır.  Bu sebeple uzun 
yıllardır gerek terapötik gerekse profilaktik olarak çok çeĢitli alanlarda kullanımına yönelik 
araĢtırmalar  sürdürülmektedir.  Enteroinvazif  patojenlerle  oluĢan  gastroenteritlerin 
antibiyotiklerle  tedavi  edildiği  bilinmekte  ancak  antibiyoterapinin  flora  üzerinde 
oluĢturdukları  olumsuz  etki  ve  mikroorganizmalarda  antibiyotiklere  karĢı  geliĢen  direnç 
sorunu yeni tedavi arayıĢlarını gündeme getirmiĢtir.
Gereç ve Yöntem: Bu projede in vitro ortamda probiyotiklerin patojen bakterilere 
karĢı  inhibitör  rollerini  araĢtırmak  ve  probiyotikleri  kullanarak  patojen  bağırsak 
bakterilerine  karĢı  tedavi  stratejileri  geliĢtirmek  hedeflendi.  ÇalıĢmada,  bağırsak  epitel 
hasarına neden olan; Salmonella Typhi ve Shigella dysenteria‟ya karĢı probiyotiklerin etki 
mekanizmalarını  aydınlatmak  adına;  Lactobacillus  acidophilus  ve  Saccharomyces 
boulardii ile yapay kalın barsak epitel hücreleri kullanıldı.
Bulgular:  Probiyotik  mikroorganizmaların  ve  solubl  ürünlerinin  patojen 
mikroorganizmalar  üzerine  etkinliğini  anlamak  için  yapılan  çalıĢmanın  ilk  basamağında 
Müller  Hinton  plaklarında  patojen  mikroorganizmalara  karĢı,  probiyotiklerin  inhibisyon 
zonu  oluĢturmadığı  görüldü.  ÇalıĢmanın  ikinci  basamağı  olan  yara  iyileĢmesi  hücre 
proliferasyonu  bölümünde;  S.  Typhi  ve  S.  dysenteria‟nın  hücre  kültüründe  Caco-2 
hücresinin yara iyileĢme proliferasyon sürecini bozduğu,  L. acidophilus‟un tek baĢınayken 
bu  proliferasyon  üzerine  etkisi  olmadığı  fakat  S.  boulardii‟nin  tek  baĢınayken  kontrol 
grubuna kıyasla hasarlı hücrenin proliferasyonunu iyileĢme yönünde arttırdığı görülmüĢtür. 
Enfeksiyon  modelinde  destrüktif  etkisiyle  bilinen  S.  Typhi  ve  S.  dysenteria‟nın 
patojenitesinin  azalıp  azalmadığına  L.  acidophilus  ve  S.  boulardii  eĢliğinde  bakıldığında 
ise  L. acidophilus‟un  S.  Typhi ile  olan  kombinasyonunda  kontrole göre yara iyileĢmesini 
hızlandırdığı,  S.  dysenteria  ile  olan  kombinasyonunda  ise  yara  iyileĢmesi  üzerine  etkisi 
59
olmadığı  görülmüĢtür.  S.  boulardii  ise  mevcut  kullanılan  bakteriyolojik  miktarlar  ile  S.
Typhi ve S. dysenteria‟nın eĢit miktarının yarattığı destrüktif etkiyi engelleyememiĢtir. 
Sonuç:  Probiyotiklerin  akut  enfeksiyöz,  invazif  bakteriyel  diyaredeki  etkisi  net 
değildir.  Anlamlı  istatistikler  çıkmasına  rağmen  klinik  öneme  sahip  olup  olmadığını 
anlamak için daha çok randomize kontrollu çalıĢmaya ihtiyaç vardır.

Abstract:
THE EFFICACY OF PROBIOTIC MICROORGANISMS AGAINST 
ENTEROINVASIVE PATHOGENES IN CELL CULTURE
Introduction  and  Objective:  Probiotics  were  described  as  "living 
microorganisms which help to keep the host healthy when taken in sufficient amount." For 
this reason, research has been carried out for its use in a wide variety of fields including 
both  therapeutical  and  prophylactical  fields.  Although  it  is  known  that  gastroenteritis 
caused  by  enteroinvasive  pathogens  is  treated  with  antibiotics,  the  negative  effect  of 
antibiotics produced on the flora and the resistance problem developing against antibiotics 
in microorganisms brought the search of new treatment into question.
Materials and Methods:  The present project aimed to investigate the inhibitory 
roles of probiotics against pathogenic bacteria in  in vitro  environment and to improve the 
treatment  strategies  against  pathogenic  enteric  bacteria  using  probiotics.  In  the  present 
study,  Lactobacillus acidophilus,  Saccharomyces boulardii  and artificial colonic epithelial 
cells  were  used  in  order  to  elucidate  the  mechanisms  of  action  of  probiotics  against 
Salmonella Typhi and Shigella dysenteria which cause intestinal epithelial damage.
Results:  In  the  first  step  of  the  study  to  understand  the  efficacies  of  probiotic 
microorganisms and soluble products on pathogenic microorganisms, it was observed that 
probiotics  did  not  produce  an  inhibition  zone  against  pathogenic  microorganisms  in  the 
Müller  Hinton  plaques.  In  the  wound  healing  cell  proliferation  division,  which  is  the 
second  step  of  the  study,  it  was  observed  that  S.  Typhi  and  S.  dysenteria  impaired  the 
wound  healing  cell  proliferation  process  of  the  Caco-2  cells  in  the  cell  culture,  that  L. 
acidophilus alone had no effect on this proliferation, however, S. boulardii alone increased 
the proliferation of damaged cells compared to the control group. In the infection model, it 
was examined whether the pathogenicity of  S.  Typhi and  S. dysenteria  which are known 
for  their  destructive  effects  decreased  or  not.  When  examined  in  the  accompany  of  L. 
acidophilus  and  S.  boulardii,  they  were  observed  to  accelerate  the  wound  healing 
compared to the  combination of  L. acidophilus  with  S.  Typhi whereas it did not have any 
effect  on  wound  healing  in  case  of  its  combination  with  S.  dysenteria.  Whereas  S. 
61
boulardii  could not impede  the destructive effect created by the equal amount of  S.  Typhi 
and S. dysenteria and currently used bacterial amounts of it. 
Conclusion:  The  effect  of  probiotics  on  acute  infectious,  invasive  bacterial 
diarrhea is not clear. Despite the significant statistics concluded, there is a need for more 
randomized controlled trials in  order to understand whether they have clinical significance 
or not.