Rat tendon-kemik birleşkesi yırtık modelinde skafolda implante edilmiş wharton's jelly kaynaklı mezenkimal kök hücre ve condıtıoned medıum'un iyıleşme üzerındekı   etkinliğinin araştırılması
Investigation of the efficacy of wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells and conditioned medium implanted in scaffold on healing in a rat tendon-bone junction tear model
Yazar: AHMET RIFAT DOĞRAMACI
Danışman: DOÇ. DR. GÖKÇE YILDIRAN
Selçuk Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2024
Konu: Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery

Özet:
Amaç: Bu çalışmada; biyouyumlu, parçalanabilen, yüksek mekanik özelliğe sahip, mezenkimal kök hücrelerin adezyon ve çoğalmasına izin veren üç boyutlu hyalüronan bazlı skafolda Wharton jeli kaynaklı mezenkimal kök hücre implante ederek, fizyolojik katmanlara sahip entez ünitesinin oluşturulması amaçlanmıştır.
Materyal ve Metot: Bu çalışma Kobay Deney Hayvanları A.Ş. Yerel Etik Kurulu'ndan alınan onay 23.12.2022 toplantı tarihli ve 645 sayılı karar ile yürütülmüş olup araştırmanın hayvan deneyleri aşaması Kobay Deney Hayvanları A.Ş. Deneysel Tıp Uygulama ve Araştırma Merkezi'nde gerçekleştirilmiş prospektif bir çalışmadır. Toplamda 4 grup oluşturuldu. 1. Gruba sadece cerrahi uygulandı. 2. Gruba cerrahiye ek skafold ve MEM uygulandı. 3.gruba cerrahiye ek skafold ve CM uygulandı. 4. Gruba ise cerrahiye ek skafold ve WJ-MKH uygulandı. 30. Günün sonunda histolojik, immünhistokimyasal, biyomekanik ve morfometrik değerlendirmeler gerçekleştirildi.
Bulgular: Çalışmada toplamda 32 deney hayvanı kullanılmıştır. Her grupta eşit sayıda (n=8) olacak şekilde dört gruba (Sham kontrol, Kontrol, CM, WJ-MKH) ayrılmıştır. Uygulamaların vaskülarite üzerine etkisi incelendiğinde Sham kontrol grubu ile karşılaştırıldığında kontrol grubu (p<0,05), CM (p<0,01) ve KH (p<0,001) etkisinin anlamlı olduğu, hücresel aktivite üzerine etkisi incelendiğinde Sham kontrol grubu ile karşılaştırıldığında kontrol grubu (p<0,05), CM (p<0,01) ve WJ-MKH (p<0,001) etkisinin anlamlı olduğu, kollajen fibril sürekliliği, paralelliği ve yoğunluğu üzerine etkisi incelendiğinde şam grubu ile karşılaştırıldığında kontrol grubu (p<0,05), CM (p<0,01) ve KH (p<0,001) etkisinin anlamlı olduğu, FGF İHK üzerine etkisi incelendiğinde Sham kontrol grubu ile karşılaştırıldığında kontrol grubu (p<0,05), CM (p<0,01) ve WJ-MKH (p<0,001) etkisinin anlamlı olduğu, BMP2 İHK üzerine etkisi incelendiğinde Sham kontrol grubu ile karşılaştırıldığında kontrol grubu (p<0,05), CM (p<0,05) ve WJ-MKH (p<0,001) etkisinin anlamlı olduğu, Kopma kuvvetine göre gruplar içinde Kök hücre değişkeninin farklı grupta olduğu ve en yüksek değere sahip olduğu (p=0,001), kemik mineral dansitesi (KMD) 'ne göre gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı farklılığın olduğu (p=0,001), Trabekül kalınlığı (Tr.K) değerlerine göre gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı farklılığın olduğu (p=0,001) saptanmıştır.
Sonuçlar: Çalışmada elde edilen verilere göre, Wharton Jeli kaynaklı mezenkimal kök hücreler ve CM, rat tendon-kemik birleşmesi yırtık modelinde mekanik iyileşmeye ve doku yırtılma direncinin artışına katkı sağlamıştır.

Abstract:
Aim: This study aims to create a physiologically layered enthesis unit by implanting Wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells into a three-dimensional hyaluronic acid-based scaffold that is biocompatible, degradable, has high mechanical properties, and allows for the adhesion and proliferation of mesenchymal stem cells.
Materials and Methods: This study has been conducted with the approval obtained from the Local Ethics Committee of Kobay Experimental Animals Inc. with the decision numbered 645 dated 23.12.2022, and the animal experimentation phase of the research was carried out at the Experimental Medicine Application and Research Center of Kobay Experimental Animals Inc. It is a prospective study. 
Results: In total, 32 experimental animals were used in the study. They were divided into four groups (Sham control, Control, CM, WJ-MSC) with an equal number of animals (n=8) in each group. When examining the effect on vascularity, it was found that compared to the Sham control group, the effects of the Control group (p<0.05), CM (p<0.01), and MSC (p<0.001) were significant. When examining the effect on cellular activity, the Control group (p<0.05), CM (p<0.01), and WJ-MSC (p<0.001) had significant effects compared to the Sham control group. When examining the effect on the continuity, parallelism, and density of collagen fibrils, the Control group (p<0.05), CM (p<0.01), and MSC (p<0.001) had significant effects compared to the Sham group. When examining the effect on FGF immunohistochemistry, the Control group (p<0.05), CM (p<0.01), and WJ-MSC (p<0.001) had significant effects compared to the Sham control group. When examining the effect on BMP2 immunohistochemistry, the Control group (p<0.05), CM (p<0.05), and WJ-MSC (p<0.001) had significant effects compared to the Sham control group. It was found that the variable of stem cells had a different group with the highest value in terms of tensile strength (p=0.001), there was a statistically significant difference between the groups in terms of bone mineral density (BMD) (p=0.001), and there was a statistically significant difference between the groups in terms of trabecular thickness (Tr.Th) values (p=0.001).
Conclusions: According to the data obtained from the study, Wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells and CM have contributed to mechanical healing and increased tissue tear resistance in the rat tendon-bone junction tear model.