Endometrial karsinomun karsinogenezinde epigenetik modifikasyonda rol alan 5-HMC ve HDAC6 genlerinin ekspresyonlarının değerlendirilmesi
Evaluation of the expression of 5-HMC and HDAC6 genes involved in epigenetic modification in the carcinogenesis of endometrial carcinoma
Yazar: KÜBRA ÖZTÜRK TÜRKER
Danışman: DOÇ. DR. İSMAİL SAYGIN
Karadeniz Teknik Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Tıbbi Patoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Patoloji = Pathology
Dizin: 5-hidroksi metil sitozin = 5-hydroxy methyl cytosine ; Endometrial hiperplazi = Endometrial hyperplasia ; Endometrial neoplazmlar = Endometrial neoplasms ; Endometriyum = Endometrium ; Epigenez-genetik = Epigenesis-genetic ; Gen ifadesi = Gene expression ; Genler = Genes ; Histon deasetilaz = Histone deacetylases ; Karsinogenez = Carcinogenesis ; Karsinoma = Carcinoma

Özet:
Amaç: Endometrial karsinomun karsinogenez aşamalarında epigenetik modifikasyonda rol alan 5-hmC ve HDAC6 genlerinin ekspresyonlarının değerlendirilmesi amaçlanmıştır. Literatürde 5-hmC ve HDAC6'nın endometrial kanser ve prekanseröz lezyonlardaki ekspresyonlarını araştıran çok az sayıda çalışma mevcuttur. Bu çalışmada elde edilen sonuçlar ışığında; daha sonra yapılacak moleküler çalışmalar ile birlikte, çalışmamızın endometrial karsinomun epigenetik modifikasyonuyla ilgili yeni biyobelirteçlerin keşfine katkıda bulunması amaçlanmıştır.
Materyal ve yöntem: Karadeniz Teknik Üniversitesi Tıp Fakültesi Tıbbi Patoloji Ana Bilim Dalında 2010-2019 yılları arasında tanı alan vakalar proliferatif endometrium, atipisiz endometrial hiperplazi, atipili hiperplazi ve endometrial adenokarsinom (derece 1-2-3) olmak üzere her bir grupta n=20 olacak şekilde sınıflandırılmıştır. Arşiv taraması sonuçlarına göre hastane sisteminden vakaların yaş, doğum sayısı, menopoz durumu, sigara kullanımı, CA125 düzeyi, endometrium kalınlığı ve beden kitle indeksi verileri kaydedilmiş; endometrial adenokarsinom grubundaki vakalara ait myometrial invazyon ve lenfovasküler invazyon durumu da değerlendirmeye alınmıştır. Olgulara ait Hematoksilen & Eozin boyalı preparatlar tekrar değerlendirilmiş ve immünohistokimyasal inceleme için uygun bloklar seçilmiştir.
Bulgular: 5-hmC ekspresyonu benign durumlarda yüksekken, endometrial karsinom grubunda ekspresyon kaybı görülmüştür. 5-hmC ekspresyonu açısından gruplar arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlıdır (p=0,001). Endometrial adenokarsinom ve atipili hiperplazi ile proliferatif endometrium arasında istatistiksel olarak anlamlı fark görülmüştür. HDAC6 ekspresyonunun endometrial adenokarsinom vakalarında diğer gruplara oranla belirgin olarak daha düşük olduğu görülmüştür. HDAC6 ekspresyonu açısından gruplar arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlıdır (p<0,001). Endometrial adenokarsinom ile atipili hiperplazi, atipisiz hiperplazi ve proliferatif endometrium grupları arasında HDAC6 ekspresyonu açısından istatistiksel olarak anlamlı fark görülmüştür. İyi, orta ve az diferansiye endometrial adenokarsinom grupları arasında 5-hmC ve HDAC6 ekspresyonu açısından istatistiksel olarak anlamlı fark saptanmamıştır. Menopoz durumuna göre karşılaştırma yapıldığında ise premenopozal dönemdekilerin HDAC6 ve 5-hmC ortalaması, postmenopozal dönemdekilerin ortalamasından anlamlı olarak yüksek saptanmıştır. CA125 değeri, vücut kitle indeksi, rahim içi araç ve oral kontraseptif kullanımı gibi klinik parametrelerle moleküllerin ekspresyonları arasında da anlamlı fark saptanmamıştır.
 Sonuç: Çalışmamızda epigenetik modifikasyonda yer alan 5-hmC ve HDAC6 genlerinin endometrium kanserini prekanseröz lezyonlardan ayırt etmede yararlı olabileceği görülmüştür. Ancak bu kapsamda daha yüksek sayılı hasta gruplarında daha detaylı klinik ve patolojik veriler içeren çalışmalar yapılması gerekmektedir. 5-hmC ortalamaları yüksek dereceli endometrioid kanserlerde düşük saptandığı için prognostik önemi olabileceği düşünülmüştür. Literatür incelemesinde çeşitli kanserlerde HDAC6 ekspresyonu artmış olmasına rağmen çalışmamızda endometrial kanser dokusunda ekspresyonun azalmış olduğu görülmüştür. Bu bulgu, literatürle uyumlu değildir.

Abstract:
Objective: The aim of this study was to evaluate the expression of 5-hmC and HDAC6 genes involved in epigenetic modification in the carcinogenesis stages of endometrial carcinoma. There are very few studies in the literature investigating the expression of 5-hmC and HDAC6 in endometrial cancer and precancerous lesions. In the light of the results obtained in this study; with future molecular studies, it is aimed that our study will contribute to the discovery of new biomarkers related to the epigenetic modification of endometrial carcinoma.
Material and Methods: Cases diagnosed between 2010-2019 in Karadeniz Technical University Faculty of Medicine, Department of Medical Pathology were classified as n=20 in each group as proliferative endometrium, endometrial hyperplasia without atypia, hyperplasia with atypia, and endometrial adenocarcinoma (grade 1-2-3). According to the results of the archive scanning, the age, gravida, menopausal status, smoking, CA125 level, endometrial thickness and body mass index data of the cases were recorded from the hospital system; myometrial invasion and lymphovascular invasion status of the cases in the endometrial adenocarcinoma group were also evaluated. Hematoxylin & Eosin stained preparations of the cases were reevaluated and appropriate blocks were selected for immunohistochemical examination.
 Results: While expression of 5-hmC is high in benign conditions, loss of expression was observed in the endometrial carcinoma group. The difference between the groups in terms of 5-hmC expression was statistically significant (p=0.001). A statistically significant difference was observed between endometrial adenocarcinoma and hyperplasia with atypia and proliferative endometrium. HDAC6 expression was found to be significantly lower in endometrial adenocarcinoma cases compared to other groups. The difference between groups in terms of HDAC6 expression was statistically significant (p=0.000). There was a statistically significant difference in HDAC6 expression between endometrial adenocarcinoma and hyperplasia with atypia, hyperplasia without atypia and proliferative endometrium groups. No statistically significant difference was found between the well, moderately and poorly differentiated endometrial adenocarcinoma groups in terms of 5-hmC and HDAC6 expression. When compared according to the menopausal status, the HDAC6 and 5-hmC averages of those in the premenopausal period were found to be significantly higher than the average of those in the postmenopausal period. There was no significant difference between the expressions of molecules and clinical parameters such as CA125 value, body mass index, intrauterine device and oral contraceptive use.
Conclusion: In our study, it was seen that 5-hmC and HDAC6 genes, which are involved in epigenetic modification, may be useful in differentiating endometrial cancer from precancerous lesions. However, in this context, studies with more detailed clinical and pathological data in higher numbered patient groups are required. Since 5-hmC averages were found to be low in high-grade endometrioid cancers, it was thought to have prognostic significance. Although HDAC6 expression was increased in various cancers in the literature review, it was observed that the expression was decreased in endometrial cancer tissue in our study. This finding is inconsistent with the literature.