RNA destrüksiyon miktarindaki düşüşün ölüm zamanı tayinindeki yeri
The place of RNA integrity decline in the estimation of postmortem interval
Yazar: MELİKE TOPÇUOĞLU
Danışman: DOÇ. DR. HANDAN AK ÇELİK ; PROF. DR. SÜHEYLA ERTÜRK
Ege Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Adli Tıp Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2011
Konu: Adli Tıp = Forensic Medicine
Dizin: Adli tıp = Forensic medicine ; Postmortem değişmeler = Postmortem changes ; RNA = RNA ; Ölüm = Death ; Ölüm nedeni = Cause of death

Özet:
Şüpheli bir ölüm olayında, aydınlatılması gereken önemli sorulardan biri de ölümün ne zaman gerçekleştiğidir. Postmortem interval (PMI) tayininde öncelikle adli tahkikat ve olay yeri incelemesi esas alınır, ayrıca ölü soğuması, ölü morlukları, ölü katılığı, dekompozisyon gibi faktörlerden de yararlanılır.Postmortem interval tayininde en önemli nokta yapılacak zaman aralığı tahminlerinin mümkün olduğu kadar daraltılması ve güvenilir olmasıdır. Bilimsel ilerlemelerle birlikte nükleik asitlerin zamana bağlı degredasyonlarının bu konuda kullanılabilirliği dikkati çekmektedir Bu çalışmanın amacı; kandaki postmortem RNA degredasyonunun PMI tayininde kullanılabilirliğinin araştırılmasıdır.Ölüm zamanı ile RNA integritesi arasındaki olası ilişkiyi araştırmaya yönelik olarak çalışmamızda ölüm zamanı bilinen 100 olgudan ölüm sonrası 2, 4 ve 6. saatlerde sağ subklavian venden kan örnekleri alındı. Bu sırada ortam sıcaklığı ve cesedin kaldırıldığı dolap sıcaklığı not edildi. Her alınan kanın pH'ı, indikatör kağıdı ile pH açısından değerlendirildi. Olguların ölüm sebepleri, hastalıkları, kardiyopulmoner resusitasyon süreleri, sigara kullanıp kullanmama durumları ile kullandıkları ilaçlar; olgulara ait Ege Üniversitesi Hastanesi epikrizleri incelenerek kaydedildi. Postmortem intervali tespit etmeye yönelik olarak kan örneklerinden RNA ekstrakte edildi. Ekstrakte edilen RNA'larda RNA integritesi; Agilent RNA Nanochip 6000 ile Agilent Bioanalizör 2100'de RNA integrite sayısının (RIN) hesaplanması ile araştırıldı.Analiz sonuçları RIN değerlerinde ölüm zamanına paralel olarak anlamlı düşüş olduğunu göstermektedir (p < 0,001). Postmortem 2. saat ile 4. saat (p = 0,011) ve postmortem 2. saat ile 6. saat (p < 0,001) RIN değerleri karşılaştırıldığında zamana bağlı anlamlı düşüş tespit edildi. Ölüm sebepleri dikkate alındığında; enfeksiyöz hastalık sebebiyle ölenlerin postmortem 6. saatteki RIN ortalama değeri en yüksek bulundu. Ayrıca ortalama RIN değerinin ölüm sebebi dışında kişinin ölümüne sebep olamayan; ancak kişide var olan hastalıklardan ve alınan bazı ilaçlardan da etkilendiği tespit edildi. Pnömoni, idrar yolu enfeksiyonu, viral veya bakteriyolojik bir üst solunum yolu enfeksiyonu gibi altta yatan enfeksiyon kaynaklı bir hastalığı olanlarda da (bu vakalarda ölüm enfeksiyöz bir hastalıktan kaynaklanmıyordu ancak vakaların enfeksiyöz bir hastalığı da bulunmaktaydı) postmortem 6. saat ortalama RIN değeri, olmayanlara göre anlamlı derecede yüksek bulundu (p=0,001). Antibiyotik kullananlarda postmortem 6. saat ortalama RIN değeri kullanmayanlara göre anlamlı derecede yüksek saptandı (p = 0,021). Benzer şekilde steroid alanlarda da postmortem 6. saat ortalama RIN değeri, steroid almayanlara göre istatistiksel olarak anlamlı derecede yüksek bulunmuştur (p < 0,001).Sonuç olarak, postmortem RNA degredasyonun zamana bağlı artışının göstergesi olan RIN'nin Adli Tıp açısından kullanılabilir bir RNA integritesi- PMI skalasının oluşturulabileceğini düşünmekteyiz. Bu konuda daha geniş vaka ve farklı koşulların araştırıldığı ileri çalışmalara ihtiyaç olduğu kanaatindeyiz.Anahtar Kelimeler: Ölüm Zamanı, PMI tayini, RNA degredasyonu, RIN

Abstract:
The time of the death is one of the important questions that should be answered about a suspicious death. In such a case the judicial and the crime scene investigations have the priority but besides these the factors as algor mortis, livor mortis, rigor mortis and decomposition are also being used.The most important point in determining the time of a death is the time interval, that would be estimated should be kept as narrow as possible and should be reliable. Along the progression of the scientific researches it is seen that the time related degradations of the nucleic acids are also can be used. The aim of this study is to see whether or not the postmortem RNA degradation can be used in the estimation of postmortem interval.In our research we collected the venous blood samples of 100 cases ,with which we know the exact time of the death, from the right subclavian vein on the 2nd, 4th and 6th hours postmortem in order to find out the relation between time of the death and the RNA integrity. The extraction of RNA is done from the blood samples to determine the postmortem interval and the RNA integrity is evaluated from the RIN number calculated by Agilent Bioanalyzer 2100 using RNA NanoChip® 6000. Meanwhile we recorded the ambient temperature together with the temperature of the refrigerator where the bodies were kept. The causes of death of the cases, their underlying illnesses, drugs, cigarette smoking, duration of cardiopulmonary resuscitation are all recorded from the files of Ege University Hospital where the deaths occured.The results of our analysis show that the RIN values are declining significantly parallel with the death time (p<0,001). When the RIN values of postmortem 2nd and 4th hours (p<0,001); 2nd and 6th hours (p=0,011) are compared it is seen that the RIN values are declining depending on the time. From the point of death causes, it is found that the 6th hour postmortem mean RIN value is significantly highest in cases died from infectious disease. In addition, it is found that the mean RIN values are affected by underlying diseases and some drugs. In terms of underlying diseases together with the causes of death postmortem 6th hour RIN values of cases having an infectious disease is significantly higher (p=0,001) and in terms of drugs postmortem 6th hour RIN value is significantly higher in cases that used antibiotics (p=0,021) and in cases that used steroids (p<0,001).As a result, we are thinking that the increment of the RNA degradation depending on the death time can be used in the field of forensic medicine and it may be possible to form an RNA integrity- PMI scale as the studies progressed and it is required to do further studies in this subject on larger population of cases with different environmental conditions.Keywords: Death time, PMI estimation, RNA degradation, RIN