Klinefelter hastalarında PAI-1 geni varyantlarının trombofili gelişimi üzerindeki etkisinin incelenmesi
The observation of PAI-1 gene variants on development of thrombophilia in klinefelter patients
Yazar: BURÇİN ERKAL
Danışman: PROF. DR. MEHMET SEVEN
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Genetik Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2017
Konu: Genetik = Genetics
Dizin: Genetik hastalıklar-doğuştan = Genetic diseases-inborn ; Genler = Genes ; Klinefelter sendromu = Klinefelter syndrome ; Kromozomlar = Chromosomes ; Polimorfizm-genetik = Polymorphism-genetic ; Trombofili = Thrombophilia ; Tromboz = Thrombosis

Özet:
Klinefelter sendromu (KS) erkeklerde sık görülen ve seks kromozomlarında oluşan fazlalıktan dolayı meydana gelen genetik bir hastalıktır. Karyotip analizlerine göre bu hastalarda bir ya da daha fazla X oluşumu gözlenmektedir. Tüm etnik gruplarda yaklaşık 500-1000 canlı doğumda 1 görülmektedir. Spermatogenez ve testesteron oluşumu negatif etkilendiğinden KS'li hastalarda toplam testesteron seviyesi düşük bulunmaktadır. Uzun boy, jinekomasti, küçük testisler ve yüksek FSH düzeyi klinik tablosunu oluşturmaktadır.  Yapılan araştırmalar KS'nin trombofili oluşumunu arttırdığını göstermiştir. Androjen eksikliği ya da trombofiliye neden olabilen varyantların bu oluşuma katkı sağladığı düşünülmektedir. 
Plasminojen aktivatör inhibitör (PAI-1) insanda Serpin E1 proteinini kodlayan Serpin1 geninden sentezlenmektedir. Artmış PAI-1 seviyesi tromboz oluşumunda bir risk faktörü olarak görülmektedir. PAI-1 geninin promoter bölgesinde bulunan 4G/4G, 4G/5G, 5G/5G polimorfizmlerin venöz tromboz gelişiminde etkili olması nedeniyle, KS'li hastalarda PAI-1 geninin tromboz oluşumunda da etkili olabileceği düşünülmektedir. 
Bu çalışmada; KS'li hastalarda PAI-1 gen varyantlarının pıhtılaşma üzerindeki etkisi incelendi. Bu amaçla, çalışmaya KS'li 41 hasta ve 50 normal birey dahil edildi. Hasta ve kontrollerden alınan periferik venöz kan örneklerinden DNA izolasyonu yapıldı. Elde edilen DNA'lardan  Real-time PCR yöntemiyle tek nükleotid polimorfizm (SNP) analizi gerçekleştirildi. Ayrıca  ELİSA yöntemiyle PAI-1 plazma seviyesi belirlendi. 
Klinefelter sendromlu hastaların PAI-1 gen varyantları ile kontrol grubu polimorfizm dağılımı karşılaştırıldığında istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmadı (p> 0,05). Ancak KS'li hastalarla kontrol grubu arasında PAI-1 plazma düzeyleri kıyaslandığında ise hasta grubundakilerin plazma düzeyinin kontrol grubundakilere göre yüksek olduğu belirlendi ve bu fark istatiksel olarak  anlamlıydı (p=0,020). Ayrıca KS'li hastalarda kontrol grubuna oranla tromboembolizm oluşumuyla ilişkili klinik bulgulara daha fazla rastlandığı belirlendi (p= 0,040). PAI-1 plazma düzeyinin anlamlı bulunması PAI-1 gen değişimlerinin başka mekanizmalar tarafından etkilenebileceğini göstermektedir.

Abstract:
Klinefelter syndrome (KS) is common among  men population which  is related with sex chromosome abnormality. Approximately, KS can be  seen in every 1/500-1000 birth in all ethnic groups. KS affects formation of spermatogenesis and testosterone production negatively. Klinefelter syndrome's clinic symptoms are long height, gynecomastia, small testicular formation and increasing FSH levels. According to karyotype analysis, these patients have extra one or more X chromosomes. It was observed  Klinefelter syndrome increases the formation of trombosis but the real  reasons are not known. According to the research, hypoandrogenism and gene variants which are related with thrombophilia may affect. 
Plasminogen activator inhibitor-1 (PAI-1) also known serpine1  is a protein in humans that is encoded by the SERPIN1 gene. Elevated PAI-1 is a risk factor for formation of thrombosis. PAI-1 gene polymorfism in promoter region 4G/4G, 4G/5G, 5G/5G are effective in deep venn trombosis patients. Therefore, we are thinking about the KS patients may be affected by PAI-1 gene variants. In  this study; PAI-1 gene variants and  its effects on KS patients that are related with thrombophilia were observed. Therefore, 41 KS patients and 50 control groups (volunteers) were included.
In our study, DNA isolation from periphery blood and fluorescent method with Real Time PCR device were applied and formerly established SNP (Single Nucleotide Polymorphism)'s analysis  was achieved. In addition, PAI-1 plasma level was determined by using ELİSA method. According to the results; there are no any relationship between PAI-1 gene polymorphism and KS (p>0,05). However,  significant relation was found about PAI-1 plasma  level (high PAI-1 plasma level) between KS patients and control group (p = 0,020). Moreover, clinic symptoms that are related with thromboembolism were observed much more on KS patients compared to control groups (p= 0,040). We think that PAI-1 gene variants can be affected by other mechanism after we found statistically difference PAI-1 plasma level.