İleri periodontal yıkım olan bireylerde interlökin-1 beta ve tümör nekrozis faktör alfa gen polimorfizmlerinin ve dişeti oluğu sıvısı düzeylerinin incelenmesi
Determination of interleukin-1beta and tumor necrosis factor- alpha gene polymorphisms and gingival crevicular fluid levels in patients with severe periodontal destruction
Yazar: ÖZLEM ÖZER YÜCEL
Danışman: PROF.DR. EZEL BERKER
Hacettepe Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Periodontoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2007
Konu: Allerji ve İmmünoloji = Allergy and Immunology ; Diş Hekimliği = Dentistry ; Genetik = Genetics
Dizin: Periodontal hastalıklar = Periodontal diseases ; Polimorfizm-genetik = Polymorphism-genetic ; Tümör nekroz faktörleri = Tumor necrosis factors ; İnterlökin 1 = Interleukin 1

Özet:
Periodontitis, dişi destekleyen dokuların yıkımına neden olarak diş kaybı ilesonuçlanabilen kronik iltihabi bir hastalıktır. IL-1ß ve TNF-? periodontalhastalıkta ekstraselüler matriks katabolizması ve kemik yıkımını yönlendirenmedyatörlerdir. IL-1ß ve TNF-?'nın genetik ekspresyonunu, üretimini, vebiyolojik aktivitelerini kontrol eden immünolojik mekanizmalar ve genetikvaryasyonların, periodontal hastalık patogenezinde önemli rol oynadığıdüşünülmektedir. Bu çalışmanın amacı sitokinlerin üretimini etkileyen IL-1B(+3954) ve TNF-? (-308) gen polimorfizmlerinin agresif periodontitis (AP),kronik periodontitis (KP) ve sağlıklı bireyler (K) arasında dağılımınınincelenmesi, aynı zamanda bu polimorfizmlerin dişeti oluğu sıvısı (DOS) IL-1ß ve TNF-? düzeyleri ile ilişkili olup olmadığını belirlemektir. Çalışmaya 56AP, 44 KP, ve 47 K olmak üzere toplam 147 birey dahil edilmiştir. Cepderinliği (CD), ataçman kaybı (AK), gingival indeks (Gİ), plak indeksi (Pİ) vekanama indeksi (Kİ) değerleri belirlenmiştir. IL-1B (+3954) ve TNF-? (-308)pozisyonlarındaki tek nükleotid polimorfizmleri polimeraz zincir reaksiyonu(PCR)-restriction fragment length polymorphism (RFLP) yöntemiyle analizedilmiştir. DOS örneklerinde IL-1ß ve TNF-? düzeyleri ?enzyme-linkedimmunosorbent assay? (ELISA) yöntemi kullanılarak belirlenmiştir. Tüm klinikparametreler hasta (AP+KP) ve kontrol grupları arasında önemli derecedeyüksek bulunurken, AP ve KP grupları arasında anlamlı farklılıkbulunmamıştır. Gruplar arasında IL-1B (+3954) and TNF-? (-308)polimorfizmleri için genotip dağılımı ve allel frekansı açısından önemli farklılıktespit edilmemiştir. Periodontal hastalık şiddeti ve polimorfizmler arasındakiolası ilişkinin araştırılması için hasta grupları (AP, KP, AP+KP), klinikataçman düzeylerine göre (AK<4mm, AK>4mm) iki gruba ayrılarakdeğerlendirilmiştir. AK>4mm olan AP hastalarında TNF-? (-308) allel 2frekansı, AK>4mm olan KP hastalarına göre istatistiksel olarak yüksekbulunmuştur. İncelenen genotipler ve DOS sitokin düzeyleri arasında anlamlıilişki bulunmamıştır. KP grubunda kanayan bölgelerin oranı (Kİ %), TNF-?(-308) allel 2 bulunan bireylerde, olmayanlara göre anlamlı derecede yüksekbulunmuştur. Bu çalışmanın sonuçları, incelenen hasta populasyonunda IL-1B (+3954) ve TNF-? (-308) gen polimorfizmlerinin periodontal hastalığayatkınlık ya da hastalık şiddetini belirleyen faktörler olduğunudesteklememektedir. Daha çok sayıda ve farklı seyir gösteren olguda, antiinflamatuarsitokin gen polimorfizmlerinin de incelendiği çalışmalaragereksinim vardır.Anahtar Kelimeler: IL-1ß ,TNF-?, gen polimorfizmi, periodontitis, DOS

Abstract:
Periodontitis is a chronic inflammatory disease that leads todestruction of tooth supporting tissues and eventually tooth loss. IL-1ß andTNF-? are major modulators of extracellular matrix catabolism and boneresorbtion in periodontitis. The immune mechanisms and genetic variationsthat regulate genetic expression, production and biological activities of IL-1ßand TNF-?, are thought to play important role in the pathogenesis ofperiodontal disease.The purpose of this study was to determine thedifferences in the distribution of IL-1B (+3954) and TNF-? (-308) genepolimorphisms among agressive periodontitis (AP), chronic periodontitis (CP)and periodontally healty individuals (C) and also to investigate wheter thesepolymorphisms are associated with gingival crevicular fluid (GCF) IL-1ß andTNF-? levels. A total of 147 individuals were enrolled in the study including56 AP, 44 CP patients and 47 healty controls. Probing depth (PD), clinicalattachment level (CAL), plaque index (PI) gingival index (GI) and bleeding onprobing (BOP %) were recorded. Single nucleotide polymorphisms at IL-1B(+3954) and TNF-? (-308) were analysed by polymerase chain reaction(PCR)-restriction fragment length polymorphism RFLP assay. GCF sampleswere analyzed for IL-1ß, and TNF-? using commercially available enzymelinkedimmunosorbent assays (ELISA). All of the clinical parameters weresignificantly higher in the patient (AP and CP) groups than the control group,while no significant differences were found between AP and CP. Nosignificant differences were detected in genotype distribution and allelfrequencies among the groups for both IL-1B (+3954) and TNF-? (-308).Patient groups (AP, KP, AP+KP) were further divided into two groupsaccording to clinical attachment level (CAL<4mm and CAL>4mm) in order toinvestigate the possible link between the polymorphisms and periodontaldisease severity. TNF (-308) allel 2 frequency was significantly higher in APpatients with CAL>4mm, compared to CP patients with CAL>4mm. Nosignificant associations were detected between the assesed genotypes andGCF cytokine levels. In the CP group, BOP % was significantly higher inpatients with the TNF (-308) allel 2 compared to patients without the allel 2.The results of this study do not support that genetic polymorphisms in the IL-1B (+3954) and TNF-? (-308), could be identified as susceptibility or severityfactors in periodontitis, in the present population. Future studies designed toasses anti-inflammatory cytokine polymorphisms in a broad population anddifferent disease activities are needed.Key words: IL-1ß, TNF-?, genetic polymorphism, periodontitis, GCF