Yeni sentezlenmiş metiltiyazol türevi bileşiğin lipopolisakkarit (LPS) ile indüklenmiş nöroinflamasyon üzerindeki etkinliğinin in vivo araştırılması
In vivo investigation of the efficacy of newly synthesized methylthiazole derivative compound on lipopolysaccharide (LPS)-induced neuroinflammation
Yazar: EZGİ KAR
Danışman: PROF. DR. İBRAHİM ÖZKAN ALATAŞ
Eskişehir Osmangazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2023
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Nöroinflamatuar hastalıklar = Neuroinflammatory diseases

Özet:
Amaç: Tez çalışmasının amacı, in vitro olarak anti-inflamatuar aktivitesi kanıtlanmış
olan metiltiyazol türevi bileşiğin (MET) sıçanlarda LPS ile indüklenen
nöroinflamasyon üzerinde araştırılmasını gerçekleştirmektir.
Yöntem: 40 erkek Sprague Dawley sıçan her grupta sekiz adet olmak üzere kontrol,
LPS, MET, MET + LPS ve İNDO + LPS olmak üzere beş gruba ayrıldı. Kontrol
grubuna sakrifiye edilmeden 24 saat önce serum fizyolojik enjekte edildi, LPS
grubuna ise 1 mg/kg dozunda i.p. LPS uygulandı. MET grubuna altı gün boyunca 10
mg/kg MET oral olarak verildi ve yedinci günde i.p. serum fizyolojik
uygulamasından 24 saat sonra sakrifiye edildi. Tedavi gruplarında MET ve
indometazin (İNDO) sırasıyla altı gün boyunca oral yoldan verildi ve hayvanlar
yedinci günde 1 mg/kg dozunda LPS i.p. uygulanarak 24 saat sonra sakrifiye edildi.
Sıçanlardan alınan beyin dokularında COX 1-2, NF-κB, BDNF, iNOS, TNF-α, IL-6
ve IL-10 mRNA ekspresyonları qRT-PCR ile COX enzimleri ayrıca Western Blot
yöntemiyle, PGE2 düzeyleri ise ELISA yöntemiyle ölçüldü. Beyin dokuları aynı
zamanda histolojik ve immunohistokimyasal olarak değerlendirildi. Tüm veriler
SPSS ve GraphPad 7 Prism istatistiksel analiz programları ile değerlendirildi.
Bulgular: Biyokimyasal, moleküler ve histopatolojik analizler sonucunda, LPS'nin
sıçan beyinlerinde ciddi düzeyde nöroinflamasyon meydana getirdiği görüldü. MET
bileşiğinin farklı yolaklar üzerinden nöroinflamasyonu baskılayıcı yönde etki ettiği
gözlendi. Özellikle TNF-α, IL-6 ve IL-10 sonuçları İNDO ile karşılaştırıldığında
anti-inflamatuar etkinliğinin yüksek olduğu tespit edildi.
Sonuç: Çalışmamızda, metiltiyazol türevi bileşiğin nöroinflamasyon üzerinde, hem
COX enzim inhibisyonu hem de pro-inflamatuar sitokinleri baskılayarak antiinflamatuar etkinlik gösterdiği tespit edilmiştir.

Abstract:
Aim: The aim of the thesis study was to carry out the investigation of methylthiazole
derivative compound (MET), which has proven anti-inflammatory activity in vitro,
on LPS-induced neuroinflammation in rats.
Methods: 40 male Sprague Dawley rats were divided into five groups as control,
LPS, MET, MET + LPS and INDO + LPS, with eight rats in each group. The control
group was injected with saline 24 hours before sacrifice and the LPS group was
injected with LPS at a dose of 1 mg/kg i.p. LPS was administered. MET group was
given 10 mg/kg MET orally for six days and sacrificed 24 hours after i.p. saline
administration on the seventh day. In the treatment groups, MET and indomethacin
(INDO) were administered orally for six days, respectively, and animals were
sacrificed 24 hours after LPS i.p. administration at a dose of 1 mg/kg on the seventh
day. In brain tissues obtained from rats, COX 1-2, NF-κB, BDNF, iNOS, TNF-α, IL6 and IL-10 mRNA expressions were measured by qRT-PCR, COX enzymes were
analysed by Western blotting and PGE2 levels were measured by ELISA. Brain
tissues were also evaluated histologically and immunohistochemically. All data were
evaluated with SPSS and GraphPad 7 Prism statistical analysis programmes.
Results: Biochemical, molecular and histopathological analyses revealed that LPS
induced severe neuroinflammation in rat brains. MET compound was observed to
suppress neuroinflammation through different pathways. It was found to have high
anti-inflammatory activity compared to INDO.
Conclusion: In our study, methylthiazole derivative compound showed antiinflammatory activity on neuroinflammation by suppressing pro-inflammatory
cytokines and COX enzyme inhibition.