Silymarinin primer karışık glia hücrelerinin çoğalmasına etkisi
The effect of silymarin on primer mixed glial cells proliferation
Yazar: DUYGU GEZGİN
Danışman: PROF.DR. RUHİ UYAR
Eskişehir Osmangazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Fizyoloji = Physiology

Özet:
Silymarin bir çeşit flavonoiddir ve % 70-80 flavonolignanlar ile % 20-30 oranındatanımlanmamış bileşenlerden oluşur. Eczanelerde satılan bu madde karaciğerde çoklukoruyucu etkileri nedeniyle hastalar tarafından kullanılmaktadır. Hücre koruyucu özelliğindendolayı ultraviole ve kimyasallarla oluşturulmuş prostat, akciğer, böbrek, pankreas, meme vederi kanserlerine karşı anti-mitotik etkisi kanıtlanmıştır. In vitro ve in vivo araştırmalardakaraciğerin hasarlı bölgelerinde hücrelerin DNA sentezini, ribozom oluşumunu ve proteinyapımını önemli ölçüde yükselterek iyileşme sağladığı görülmüştür. Silymarinin vepolifenolik bileşenlerinin güçlü antioksidan özelliği, yaşlanmayla ilişkili beyinfonksiyonlarının bozulmasını ve çeşitli hastalıkların oluşumuna neden olduğu bilinen serbestoksijen türevlerini ortadan kaldırmaktadır.Çalışmamızda, sıçan glioma (C6) hücreleri ve 1-3 günlük sıçan yavrularınınbeyinlerinden elde edilen glia hücrelerine silymarinin 1, 10, 50, 75 ve 100 ng/ml dozlarını 24veya 48 saat uygulayarak silymarinin hücre çoğalması üzerine etkisini araştırdık. Bu etkiyigözlemleyebilmek için canlı hücre yoğunluğunu saptayan 3-(4,5- D-methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, thyazolyl blue (MTT) yöntemi kullanıldı. Glia ve C6hücrelerine 24 veya 48 saat süreyle uygulanan bu farklı silymarin dozları hücre sayısını %73'e kadar azaltmıştır.Hidrojen peroksit (H2O2) primer glia ve C6 hücrelerinde doza bağlı olarak toksik bir etkiyapmaktadır. Silymarinin H2O2 toksisitesi üzerinde koruyucu bir etkisinin olup olmadığınıbelirlemek için hücrelerin yaklaşık % 75'ini öldüren doz olan 100 ?M H2O2 uygulandı. Budozdaki H2O2 ile birlikte silymarin 1 ile 100 ?M arası dozlarda 3 saat uygulandı. 24 saat sonraMTT yöntemini kullanılarak hücre canlılığı araştırıldı. Silymarin 100 ?M H2O2oluşturduğumuz oksidatif strese karşı glia ve C6 hücrelerinde herhangi bir koruyuculukgöstermemiştir.Anahtar kelimeler: Silymarin, Glia, Çoğalma, Hidrojen peroksit, Oksidatif Stres.

Abstract:
Silymarin is a kind of flavonoid that contains approximately 70-80 % flavonolignansand 20-30 % non-identified polyphenolic compounds. Sold in drugstores this substance hasbeen used by patients, because it has multiple protective effects in liver. Since it has cellprotective activity, it has anti-mitotic effects against lung, breast, kidney, skin, pancrease,prostate cancer models that caused by ultraviolate and chemicals. In vitro and in vivo studieshave shown that silymarin provides significant level of recovery by elevating DNA synthesis,ribosome formation and protein synthesis in defected areas of liver. The strong antioxidantactivity of silymarin and polyphenolitic compounds eliminates reactive oxygen radicals in ageand reactive oxygen species related brain damages.We have investigated the effects of 1, 10, 50, 75 and 100 ng/ml silymarin doses onproliferation of glial cells that were obtained from 1-3 day old rat whole brain and C6 cells for24 or 48 hours. 3-(4,5- D- methylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide, thyazolylblue (MTT) method was used for determination of percentage of the cell survival. Thetreatment of glial and C6 cells with different silymarin doses for 24 or 48 hours reduced thecell number down to 73 %.Hydrogen peroxide (H2O2) exerts a dose dependent toxic effect on cultured glia and C6cells. For determining whether silymarin is a protective or anti-protective substance, the cellswere treated with 100 ?M H2O2 that kills 75 % of the cells. Combined with 100 ?M H2O2,silymarin at 1-100 ?M were applied to the cells for three hours. After 24 hours, wedetermined the number of surviving cells by using MTT method. Silymarin did not show anyprotective effect against toxicity of H2O2 on glia and C6 cells.Key Words: Silymarin, Glia, Proliferation, Hydrogen peroxide, Oxidative stress.