Doku transglutaminaz ve integrin BETA-1'in mesane kanserindeki rolünün araştırılması
Investigation of the roles of tissue transglutaminase and integrin BETA-1 in bladder cancer
Yazar: YAVUZ KARACA
Danışman: DOÇ. DR. OKTAY AKÇA
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Üroloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Patoloji = Pathology ; Üroloji = Urology
Dizin: Mesane hastalıkları = Urinary bladder diseases ; Mesane neoplazmları = Urinary bladder neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Transglutaminaz = Transglutaminase ; Üroloji = Urology ; İmmünohistokimya = Immunohistochemistry ; İntegrinler = Integrins

Özet:
Giriş: Doku transglutaminaz ve integrin beta 1; hücre adhezyonu, migrasyonu, sinyal iletiminde ortak görevleri olan proteinlerdir. Daha önce farklı insan tümörlerinde invazyon, metastaz gelişimi, kötü prognozla ilişkilendirilmişlerdir. Çalışmamızın amacı; doku transglutaminaz ve integrin beta 1 proteinlerinin mesane kanserindeki rolünün araştırılmasıdır.
Gereç ve Yöntem: Kas invazyonu olan ve olmayan toplam 91 mesane kanserli olgu; hastanemizde yapılmış olan vakalar retrospektif olarak taranarak değerlendirmeye alındı. Her iki grubun parafine gömdürülmüş mesane tümör dokuları doku transglutaminaz ve integrin beta 1 antikorları ile immunohistokimyasal olarak boyandı. Bu hastalardan 3 tanesinde ürotelyal karsinom nested varyant mevcuttu. Bu üç hasta, tümör dokuları antikorlarla boyanmadığından çalışma dışı bırakıldı. Çalışmaya 88 hasta dahil edildi. Dokular boyanma sonuçlarına göre 0-7 arasında skorlandı. Elde edilen boyanma skorlarıyla hastaların klinik ve histopatolojik özellikleri arasında anlamlı ilişki olup olmadığı araştırıldı. İstatistiksel analizde ki- kare, student-t, Mann-Whitney U, Kruskal-Wallis testleri kullanıldı.
Bulgular: Doku transglutaminaz skorunda; kas invazyonu olan grupta (median skor 6), kas invazyonu olmayan gruba (median skor 0) göre anlamlı farklılık saptandı (p<0,001). İntegrin beta 1 skorunda ise kas invazyonu olan (median skor 6) ve olmayan grup (median skor 5) arasında anlamlı fark saptanmadı (p=0,081).
Olgular doku transglutaminaz ve integrin beta 1 boyanma skorları median değerlerine göre yüksek ve düşük riskli gruplara ayrıldı. Bu iki grup arasında klinik ve histopatolojik veriler açısından anlamlı fark olup olmadığı incelendi.
TG2 boyanma skoru median değerine göre yüksek ve düşük riskli olarak 2'ye ayrılan gruplar arasında; tümörün T evresi (p<0,001), derecesi (p<0,001), lenf nodu evresi (p<0,001), uzak metastaz varlığı (p<0,01), karsinoma in situ varlığı (p<0,001), lenfovasküler invazyon varlığı (p<0,001), skuamöz diferensiasyon varlığı (p<0,001) ve glandüler diferensiasyon varlığı (p<0,01) açısından anlamlı farklılık saptandı. Sarkomatöz diferensiasyon açısından ise (p=0,596) anlamlı fark saptanamadı.
IGB1 boyanma skoru median değerine göre yüksek ve düşük riskli olarak 2'ye ayrılan gruplar arasında; tümörün T evresi (p=0,02), derecesi (p=0,01) ve lenf nodu evresi (p=0,04) açısından anlamlı fark saptandı. Uzak metastaz varlığı (p=0,197), karsinoma in situ varlığı (p=0,498), lenfovasküler invazyon varlığı (p=0,303), skuamöz diferensiasyon varlığı (p=0,179), sarkomatöz diferensiasyon varlığı (p=0,371), glandüler diferensiasyon varlığı (p=0,979) açısından anlamlı fark saptanamadı.
Sonuç: Doku transglutaminaz ve integrin beta 1, daha önce insan tümörlerinde invazyon gelişimi, metastatik hastalık, ilaç direnci gelişimi ve kötü prognozla ilişkilendirilmiştir. Bu çalışmada kötü prognozla seyreden kas inaziv mesane kanseri olgularında doku transglutaminaz ekspresyonu, iyi prognozla seyreden kas invaziv olmayan mesane kanseri olgularına göre anlamlı derecede yüksek saptandı. Doku transglutaminaz boyanma median skoruna göre yapılan yüksek ve düşük riskli gruplandırmanın istatistiksel analizinde ise; sarkomatöz diferensiasyon dışındaki tüm klinik ve histopatolojik bulgularda anlamlı fark saptandı. Daha önce yapılan çalışmalarda; kas invaziv mesane kanserinde doku transglutaminaz ekspresyonunun arttığı gösterilmiştir (36). Kas invazyonu olan ve olmayan mesane kanseri olguları arasında ise integrin beta 1 ekspresyonu açısından anlamlı farklılık saptanmadı. Yine integrin beta 1 boyanma median skoruna göre yapılan yüksek ve düşük riskli gruplandırmanın istatistiksel analizinde ise; tümörün T evresi, derecesi ve lenf nodu evresinde anlamlı fark saptanırken diğer bulgularda anlamlı fark saptanmadı. Literatürde; integrin beta 1'in daha malign fenotipli mesane kanseriyle ilişkili olduğu ancak düşük/yüksek dereceli ve non invaziv/invaziv mesane kanserinde anlamlı fark saptanmadığı gösterilmiştir (41).
Çalışmamızda doku transglutaminaz ekspresyonunun kötü prognozla seyreden kas invaziv, ileri evre, yüksek dereceli; karsinoma in situ, skuamöz diferensiasyon, sarkomatöz diferensiasyon, lenfovasküler invazyon gibi kötü prognostik faktörleri içeren tümörlerde anlamlı olarak yüksek saptanmıştır.
İntegrin beta 1 ekspresyonu ise kas invaziv olan ve olmayan grupta anlamlı olarak farklı saptanamamıştır. Boyanma skorunun median değerine göre yüksek ve düşük riskli gruplara ayırdığımızda ise; tümörün T evresi, derecesi ve lenf nodu evresi açısından anlamlı farklılık saptanırken diğer parametrelerde anlamlı fark saptanmamıştır.
Çalışmada irdelenen bu proteinler, mesane kanseri tanı ve tedavisinde hedef ajan olarak göz önünde bulundurulabilir.

Abstract:
Aim: Tissue transglutaminase and integrin beta 1 have common functions on cell adhesion, migration, and signal transmission. They have previously been associated with invasion, metastasis and poor prognosis in different human tumors. In this study we aimed to determine the relationship between this proteins and bladder cancer.
Patients and Methods: A total 91 cases of muscle-invasive and non-invasive bladder cancer were evaluated retrospectively. Paraffin-embedded bladder tumor tissues of both groups were stained immunohistochemically with tissue transglutaminase and integrin beta 1 antibodies. Three of these patients had urothelial carcinoma with nested variant. These three patients were excluded because their tumor tissues were not stained with antibodies. 88 patients were included in the study. Tissues were scored between 0 and 7 according to the tissue transglutaminase and integrin beta 1 antibody staining results seperately. The relationship between the staining scores and the clinical and histopathological features of the patients were invastigated. Chi-square, student-t, and Mann-Whitney U tests were used for statistical analysis.
Results: Tissue transglutaminase score was found to be significantly higher in the muscle invasive group (median score 6) than in the non-muscle invasive group (median score 0) (p<0.001). No significant difference was found with the integrin beta 1 score (p=0.08).
The cases were divided into high and low risk groups according to the median values of tissue transglutaminase and integrin beta 1 staining scores. Statistical analysis was performed in order to detect if there was a significant difference between these two groups in terms of clinical and histopathological data. A significant difference was found between tissue transglutaminase high risk and low risk groups in terms of T stage of the tumor (p<0.001), tumour grade (p<0.001), lymph node stage (p<0.001), presence of distant metastases (p<0.01), presence of carcinoma in situ (p<0.001), presence of lymphovascular invasion (p<0.001), presence of squamous differentiation (p<0.001) and presence of glandular differentiation (p<0.01). There was no significant difference in terms of presence of sarcomatous differentiation (p=0.596).
A significant difference was found between integrin beta 1 high risk and low risk groups in terms of T stage of the tumor (p=0.02), tumour grade (p=0.01) and lymph node stage (p=0.04). There was no significant difference in terms of presence of distant metastases (p=0.197), presence of carcinoma in situ (p=0.498), presence of lymphovascular invasion (p=0.303), presence of squamous differentiation (p=0.179), presence of sarcomatous differentiation (p=0.371) and presence of glandular differentiation (p=0.979).
Conclusion: Tissue transglutaminase and integrin beta 1 have previously been associated invasion, metastatic disease, drug resistance and poor prognosis in different human tumors. In this study, tissue transglutaminase expression was found to be significantly higher in invasive bladder cancer cases which have worse prognosis than in non-invasive bladder cancer cases which have good prognosis. A significant difference was found between tissue transglutaminase high risk and low risk groups in terms of every clinic and histopathological finding except glandular differentiation. In previous studies it has been shown that tissue transglutaminase expression is increased in invasive bladder cancer (36). No significant difference was found in integrin beta 1 expression between non-invasive and invasive bladder cancer cases. A significant difference was found between integrin beta 1 high risk and low risk groups in terms of T stage of the tumor, tumour grade and lymph node stage. In the literature it has been shown that integrin beta 1 is associated with bladder cancer with a more malignant phenotype, but no significant difference was found in low/high grade and noninvasive/invasive bladder cancer (41).
In our study, tissue transglutaminase was found to be associated with muscle invasive, high grade bladder cancer with poor prognostic factor such as carcinoma in situ, squamous differentiation, sarcomatous differentiation, and lymphovascular invasion. Integrin beta 1 expression was not found to be significantly different in the muscle invasive and non-muscle invasive groups.
These proteins can be considered as target agents in the treatment of bladder cancer.