Diyabet oluşturulmuş ratlarda ketojenik diyet  ve western diyet ile beslenmenin kornea ve retina üzerine etkilerinin karşılaştırılması
Comparison of the effects of ketogenic diet and western diet on cornea and retina in diabetes induced rats
Yazar: HALİL İBRAHİM SÖNMEZOĞLU
Danışman: DOÇ. DR. İSA YUVACI
Sakarya Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2021
Konu: Göz Hastalıkları = Eye Diseases
Dizin: Beslenme = Nutrition ; Diabetes mellitus = Diabetes mellitus ; Diabetik retinopati = Diabetic retinopathy ; Diyet-ketojenik = Diet-ketogenic ; Göz hastalıkları = Eye diseases ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Kornea = Cornea ; Retina = Retina ; Sıçanlar = Rats ; Vasküler endotel büyüme faktörleri = Vascular endothelial growth factors

Özet:
Giriş ve Amaç: Diyabet oluşturulmuş ratlarda farklı beslenme tarzlarının  kornea ve retina üzerindeki etkilerini karşılaştırmak
Gereç ve Yöntem: Çalışmada 28 adet,8-10 haftalık, LongEvans cinsi erkek ratlar rastgele seçilerek dört gruba ayrıldı.Çalışma için; sağlıklı ve normal beslenme uygulanmış (Grup 1); diyabet oluşturularak normal beslenme uygulanmış (Grup 2); diyabet oluşturularak ketojenik beslenme uygulanmış(Grup 3); diyabet oluşturularak western tipi beslenme uygulanmış (Grup 4) olmak üzere toplam 4 grup oluşturuldu. Ratlarda diyabet oluşturmak için 60 mg/kg tek doz streptozotosin phosphate buffered salin (PBS)'de çözdürülerek intraperitoneal uygulandı. Uygulamadan 72 saat sonra kuyruk veninden alınan kanda, glikoz düzeyi 200 mg/dl'nin üzerinde olanlar diyabetik kabul edildi. On hafta sonunda anestezi altında ekssanguinasyon sonrası gözler enüklee edildi. Parafin bloklara gömülü doku kesitlerinden vascular endotelyal growth factor (VEGF) ve Caspase-3 immünreaktiviteleri için immünohistokimyasal boyama yöntemi kullanıldı. Boyamalarda immünreaktivitenin kornea ve retinadaki yaygınlığı ve şiddeti esas alınarak histoskorlama yapıldı. Hematoksilen-eozin ile boyanan retina tabakalarının kalınlıkları karşılaştırıldı.
Bulgular: VEGF ile retina boyamasında grup 3'te az yoğun boyanma daha yüksek oranda bulundu (p: 0,018). Caspase-3 ile retina boyamasında gruplar arasında anlamlı fark görülmedi (p: 0,65). Retina tabakalarının kalınlıkları karşılaştırıldığında; iç nükleer, iç plexiform, dış nükleer ve ganglion tabakalarının grup 4'te diğer gruplardan anlamlı olarak kalın olduğu görüldü (Sırasıyla p değerleri <0,001, 0,013, 0,006, 0,017). Koroid kalınlıkları karşılaştırıldığında gruplar arasında anlamlı fark görülmedi(p: 0,118).VEGF ile kornea boyamasında grup 4'te çok yoğun, grup 3'te az yoğun boya tutulumu daha yüksek oranda bulundu(p<0,001). Caspase 3 ile kornea boyamasında gruplar arasında anlamlı fark saptanmadı (p: 0,121).
Sonuç: Western tipi diyetin apoptozisi, vaskülerpermeabiliteyi, inflamasyonu  ve dolayısıyla hücresel ödemi artırdığı, sonuç olarak doku kalınlaşmasına neden olduğu söylenebilir. Ketojenik diyetin western tipi diyete göre faydalı veya daha az zararlı olduğu söylenebilir. Ancak ketojenik diyetle ilgili kısa vadede olumlu sonuçlar bildirilmesine karşın uzun vadede etkisi bilinmeyen bir beslenme türüdür. Uzun vadedeki etkilerini saptamak için daha uzun süreli çalışmalara ihtiyaç vardır.

Abstract:
Purpose:To compare the effects of different diets on cornea and retina in diabetic rats
Materials and Methods:In the study,28 male 8-10 week old Long Evans rats were selected randomly and divided into four groups. For the study,a total of 4 groups were formed: healthy and normal nutrition (Group 1), diabetic normal nutrition (Group 2), diabetic ketogenic nutrition (Group 3),diabetic western-type nutrition (Group 4).To create diabetes in rats, a single dose of 60 mg/kg of streptozotocin was dissolved in phosphate buffered saline (PBS) and administered intraperitoneally, thosewith a glucose level above 200 mg/dl in the blood taken from the tail vein 72 hours after the administered was considered diabetic. At the end of ten weeks, eyes were enucleated after exsanguination under anesthesia. Immunobhistochemical staining method was used for vascular endothelial growth factor (VEGF) and Caspase-3 immunoreactivity from the tissue sections embedded in paraffin blocks.Histoscoring was performed based on the extent and intensity of immunoreactivity in the cornea and retina. The thicknesses of retinal layers stained with hematoxilen-eosin were compared.
Results: Less intense staining was higher in group 3 in retinal staining with VEGF(p: 0,018).There was no significant difference between the groups in retinal staining with caspase 3 (p: 0,65). When the retinal layers are compared; innernuclear, innerplexiform, outernuclear and ganglion layers were found to be significantly thicker in group 4 than other groups. When the choroidal thickness was compared, no significant difference was found between the groups (p: 0,118). In corneal staining with VEGF, very intense staining was found at a higher rate in group 4 and less intense in group 3 (p <0,001). There was no significant difference between the groups in corneal staining with caspase 3 (p: 0,121).
Conclusion: It can be said that western type diet increases apoptosis, vascular permeability, inflammation and thus cellular edema, and consequently causes tissue thickening. It can be said that the ketogenic diet is beneficial or less harmful than the western type diet. However, although positive results have been reported in the shortterm regarding the ketogenicdiet, it is a type of diet whose effect in the longterm is unknown. Longer studies are needed to determine its long-termeffects.