Endosulfan, cypermethrin, 2,4-D ve trifluralinin androjenik ve anti-androjenik etkilerinin ratlarda hershberger metoduyla araştırılması
Investigation of androgenic and anti-androgenic effects of endosulfan, cypermethrin, 2,4-D and trifluralin by hershberger method in rats
Yazar: ÖZGÜR BULMUŞ
Danışman: PROF.DR. BAYRAM YILMAZ
Fırat Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Fizyoloji = Physiology
Dizin: Trifluralin = Trifluralin

Özet:
Endokrin bozucuların (EDC) insan saglıgı, hayvanlar ve çevre üzerindekipotansiyel zararlı etkileri, önemli bir halk saglıgı problemi olarak üzerindedurulan bir konu haline gelmistir. Bu çalısma; Türkiye'de yaygın olarakkullanılan ve dogada uzun süre kalma potansiyeline sahip organoklorlu(Endosulfan) ve pyrethroid (Cypermethrin) pestisitler ile herbisitlerin (2,4-D veTrifluralin) Hershberger metodu ile peri-pubertal erkek rat modelinde serum LHve FSH düzeyleri ile androjen duyarlı dokular (prostat, bulbouretral bezler,seminal veziküller, m. Levator ani) üzerine androjenik ve anti-androjeniketkilerini arastırmak amacıyla planlandı.Çalısmada toplam 56 adet peri-pubertal 42 günlük erkek Sprague Dawley ratkullanıldı. lk grup sham kastrasyon olarak ayrıldı. Geriye kalan toplam 49 adetrat xylazin+ketamin anestezisi altında total olarak (testisler + epididimis) kastreedildi. On günlük iyilesme süresinin sonunda ratların vücut agırlıkları belirlendive yedi gruba daha ayrıldı: Kastrasyon grubu; Testosteron propiyonat (TP) grubu(0.5 mg/kg/gün s.c. TP); TP+Flutamide grubu (25 mg/kg/gün, oral gavaj);TP+Endosulfan grubu (10 mg/kg/gün, oral gavaj); TP+2,4-D grubu (10mg/kg/gün, oral gavaj); TP+Cypermethrin grubu (20 mg/kg/gün, oral gavaj);TP+Trifluralin grubu (15 mg/kg/gün, oral gavaj). On günlük uygulamalarınsonunda tüm hayvanların vücut agırlıkları tekrar belirlendi. Son uygulamadan 24saat sonra ratlar dekapite edildi ve kan örnekleri toplandı. Tüm hayvanlarınprostat bezi, bulbouretral (cowper) bezleri, seminal veziküller ve musculus levatorani (mLA) ile karaciger ve böbrekleri hemen diseksiyon ile çıkartıldı ve tartıldı.Serum testosteron, LH ve FSH düzeyleri ELISA yöntemi ile belirlendi.Kastrasyon, tüm androjen-duyarlı doku agırlıklarında azalmaya nedenolurken (p<0.001); kastre edilen hayvanlara TP uygulanması bu dokularınagırlıklarının sham grubu degerlerine dönmesini sagladı (p<0.001). Endosulfan,Cypermethrin ve Trifluralin androjen-duyarlı dokulardan bulbouretral bezagırlıklarında TP grubuna göre anlamlı azalmaya yol açarken (p<0.01); 2,4-D iseseminal vezikül agırlıklarında TP grubuna göre anlamlı artıs olusturdu (p<0.01).Uygulanan test bilesiklerinden hiçbiri prostat ve m. Levator ani agırlıklarında TPgrubuna göre anlamlı bir fark olusturmadı (p>0.05). 2,4-D, Cypermethrin veTrifluralin serum FSH düzeylerinde anlamlı artısa yol açarken; serum LHdüzeylerindeki artıs sadece Trifluralin grubunda istatistiksel olarak anlamlı idi.Sonuç olarak; bu çalısmadan elde edilen bulgular, Hershberger metodundaEndosulfan, Cypermethrin ve Trifluralin'in bulbouretral bez üzerinde antiandrojenik;2,4-D'nin ise seminal vezikül üzerinde androjenik etkilere sahipolabilecegini göstermistir. Bu çevresel kirleticilerin erkek üreme fonksiyonlarınıolumsuz yönde etkileyebilecegi öngörülebilir.Anahtar Kelimeler: Endokrin bozucular (EDC), Endosulfan, Cypermethrin,2,4-D, Trifluralin, Hershberger assay.

Abstract:
The potential harmful effects of endocrine-disrupting chemicals (EDC) onhuman health, animals and environment constitutes a major concern as animportant public health problem. The present study was aimed to investigate theandrogenic and anti-androgenic effects of organochlorid (Endosulfan) andpyrethroid (Cypermethrin) pesticides and herbicides (2,4-D and Trifluralin),which have potential to accumulate in nature and widely used in Turkey, on serumLH and FSH levels and androgen-sensitive tissues (prostate, bulbourethral glands,vesicula seminalis, m.Levator ani) in peri-pubertal rat model with Hershbergerassay.A total of 56 peri-pubertal 42 days old Sprague Dawley rats were used in thestudy. The first group was separated as sham castration. The remaining 49 ratswere totally (testes and epididymis) castrated under xylazin+ketamineaneasthesia. After 10 days recovery period, rats were weighed and divided intofurther seven groups: Castration group; Testosterone Propionate (TP) group (0.5mg/kg/day s.c. TP); TP+Flutamide group (25 mg/kg/day, oral gavage);TP+Endosulfan group (10 mg/kg/day, oral gavage); TP+2,4-D group (10mg/kg/day, oral gavage); TP+Cypermethrin group (20 mg/kg/day, oral gavage);TP+Trifluralin group (15 mg/kg/gün, oral gavage). After 10 days application allanimals weighed again. 24 hours after the last application, rats were decapitatedand blood samples were obtained. Prostate, bulbourethral (Cowper) gland,vesicula seminalis and musculus levator ani (mLA) as well as liver and kidneyswere dissected immediately and weighed. Serum testosterone, LH and FSH levelswere determined with ELISA.Castration caused significant reduction in all androgen-sensitive tissueweights (p<0.001); whereas TP application to the castrated animals recovered thistissue weights to the levels of sham group (p<0.001). While Endosulfan,Cypermethrin and Trifluralin caused significant decrease in bulbourethral glandweights (p<0.01); 2,4-D significantly increased vesicula seminalis weightscompared to TP group (p<0.01). None of the applied test compounds causedsignificant differences in prostate and m. Levator ani weights compared to TPgroup (p>0.05). 2,4-D, Cypermethrin and Trifluralin significantly increased serumFSH levels; but the increase in serum LH levels was only significant in Trifluralingroup.In conclusion; data obtained from this study showed that 2,4-D hasandrogenic effects on vesicula seminalis whereas Endosulfan, Cypermethrin andTrifluralin have anti-androgenic effects on bulbourethral gland. It can besuggested that, these environmental pollutants could affect male reproductivefunctions negatively.Key Words: Endocrine disrupting chemicals (EDC), Endosulfan,Cypermethrin, 2,4-D, Trifluralin, Hershberger assay