Tromboz ve tromboz riski taşıyan olguların protein C düzeyleri ve F VIII polimorfizminin incelenmesi
Study of protein C levels and factor VIII polymorphism in cases with thrombosis and thrombosis risk
Yazar: NEZAKET EREN
Danışman: PROF. DR. NESRİN EMEKLİ
Marmara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2002
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
IV ÖZET Bu çalışmada koroner anjiyografi ile, koroner kalp hastalığı tanısı konmuş 58 hasta ve yine koroner anjiyografi sonucunda hiçbir damar patolojisi olmadığı tespit edilmiş 20 kontrol grubunda, bu hastalığın risk faktörleri arasında bulunan hemostaz parametrelerinden protein C antigen ve aktivitesi, aktive protein C rezistansı, F VIII: C, F VIII: Ag ile F VIII gen polimorfizmi ilişkisi ile diğer risk faktörlerinin, ilişkisinin belirlenmesi amaçlanmıştır. F VIII:C, F VIII eksik plazma kullanılarak koagulometrik yöntemle, F VIILAg, Protein C:Ag ELISA yöntemi ile protein C aktivitesi koagulometrik yöntemle, APC-R ise protein C antikoagülan kapasitesinin koagulometrik yöntemle tespiti ile tayin edildi. çalışıldı. Polimorfizm analizi PCR/RFLP ve agaroz jel elektrforezi teknikleri kullanılarak yapıldı. aPTT, protrombin zamanı, fibrinojen, APC, APC rezistansı koagulometrik yöntemle, serum lipid düzeyleri ise enzimatik yöntemle tayin edildi. Literatüre uygun olarak F VIII: C ve F VIII: Ag değerleri birbiri ile korele idi (r=0.774, p=0). F VIILC, F VIII: Ag, fibrinojen ve HDL-kolesterol değerlerini hasta grubunda, kontrollere göre anlamlı derecede yüksek bulduk (sırasıyla; p<0.001, p<0.07, p<0.002, p<0.07) (Tablo 1). Hasta grubumuzun alel sayısı 76, kontrol grubumuzda ise 29 idi. Bcl-1/intron 18 RFLP (+)Tığı hasta grubunda (%71) daha yüksekti. Hind III/intron 19 RFLP (+) 'lığı için bu (%19)idi. Hasta grubumuzda, en yüksek heteroziyotluk oranı St 14 VNTR polimorfizminde görüldü bu oran Hind III/İntron 19 RFLP polimorfizmi için %6.57, Bcl-1/intron 18 polimorfizmi için ise %1 1.8 idi. Stl4 VNTR için PCR neticesinde, kontrol grubumuzu oluşturan 20 kişide (29 kromozom) 13 farklı alel, hasta grubumuzu oluşturan 58 kişide (76 kromozom) 17 farklı alel bulunmuştur. Kontrol grubumuzda en sık rastlanan aleller 700 bp (%13.8), 1300 bp (%20.7), aleller, hasta grubunda en sık rastlanan aleller ise 700 bp (%19.4), 1480 bp(%13.2)idi. Bcl-1/intron 18 polimorfizmi ile fibrinojen (r-0.306 p<0.01) ve St 14 VNTR (r=- 0.245 p<0.05) arasında zayıf bir korelasyon; Hind III/intron 19 RFLP polimorfizmi arasında orta derecede negatif bir korelasyon (r=-0.599, p<0.0) vardı. Hind III/İntron 19 RFLP polimorfizmi ile protein C aktivitesi, (r=0.296, p<0.05), protein C:Ag (r=-0.316 p<0.05) zayıf korelasyon vardı. F VIILC ve F VIILAg ile polimorfizmler arasında bir ilişki bulunmadı. Sonuç olarak Bcl-1/intron 18 RFLP (+)Tiğinin hasta grubunda fazla (%71) görülmesi, fibrinojenle aralarındaki korelasyon, buna karşılık Hind III/İntron 19 RFLP (+)'lığının hasta grubunda düşük (%19) olması, protein C: Ag ve aktivitesi ile pozitif ailesinde MI öyküsü olanlarla negatif bir korelasyon göstermesi anlam taşımaktadır. Sonuç olarak; Bel 1/Intron 18, Hind ııı/Intron 19 için heterozigotluğun hasta grubunda daha yüksek olması, St 14 VNTR-RFLP için hasta ve kontrollerde en sık rastlanan alellerin farklı olması KKHTığı ise bu polimorfizmlerin ilişkisini düşündürebilir.

Abstract:
11- SUMMARY In this study we aimed to identify the association of coronary heart disease factors F VIII: C, F VIII: Ag with F VIII gene polymorphisms as well as the association of other coronary risk factors with F VIILC, F VIILAg and F VIII gene polymorphisms. A study group of 58 patients with coronary heart disease and a control group of 20 patients without any coronary disease (both diagnosed with coronary angiogram) have been studied. Polymorphisms Analysis has been made by using Polymerase Chain Reaction (RCR), Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) and Agoroze Gel Electrophoresis Methods. ELISA method for protein C:Ag and F VIILAg, Coagulometric Method with defecient plasma for F VIILC and F VIII, Coagulometric Method for protrombin time, for aPTT, for fibrinogen, for APC and for APC-R, Enzymatic Method for serum lipid levels have been used. In line with findings of other studies we found that F VIILC and F VIILAg values were corelated (r=0.774, p=0) we also found that F VIILC, F VIILAg, Fibrinogen and HDL Cholesterol levels were significantly higher in the study group compared to the control group (respectively, p<0.001, p<0.07, p<0.002, p<0.07). The Study Group had 79 alleles where as the control group had 29 alleles. Positivity of Bcl-1/Intron 18 RFLP was higher in the study Group (%71). The rate for Hind III/Intron 19 RFLP positivity was lower (%19). The highest rate of heterozygosity in the study group was seen in St 14 VNTR polymorphism; This rate was %6.57 for Hind III/Intron 19 RFLP polymorphism and %11.8 for Bcl-1/Intron 18 polymorphism. Bcl-1/Intron 18 polymorphism had a weak corelation with fibrinogene (r=0.306 p<0.01) and St 14 VNTR (r=-0.245 p<0.05) and a mild negative corelation with Hind III/Intron 19 Polymorphism (r=-0.599, p<0.00). Hind III/Intron 19 RFLP polymorphism had a weak corelation with protein C activity (r=0.296, p<0.05) protein C:Ag (r=0.284, p<0.05) and patients having MI history in their family (r=-0.316, p<0.05). Studied polymorphisms did not reveal any association with F VIILC nor with F VIILAg. However in conclusion higher heterozigoty levels of Bcl-1/Intron 18 and Hind III/Intron 19 in the Study Group and different frequency of alleles for ST 14 VNTR-RFLP in the Study and Control Group suggest an association between CHD and these polymorphises. Considering the size of F VIII gene in order to clarify the genetic factors causing high levels of F VIILC and F VIILAg, there is a need to make further research in larger populations.