Üretra darliklarinda mikrorna'larin rolü
Role of micrornas in urethral stricture
Yazar: SALİH BÜTÜN
Danışman: PROF. DR. ALİ ERSİN ZÜMRÜTBAŞ
Pamukkale Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Üroloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2023
Konu: Üroloji = Urology
Dizin: Fibroz = Fibrosis ; Mikro RNA = Micro RNA ; RNA = RNA ; Üretra = Urethra ; Üretra darlıkları = Urethral stricture ; Üretra hastalıkları = Urethral diseases

Özet:
Üretra darlığı, hasta sağlığını ve yaşam kalitesini olumsuz etkileyen, üretranın yeterli
genişleyebilme özelliğini kaybetmesi olarak tanımlanabilir. Genellikle spongiyofibrozis ve
sonrasında gelişen epitel hasarı ile oluştuğu kabul görse de, bu süreçlerin detayları kesin olarak
bilinmemektedir. Bu çalışmamızda üretra darlığının patofizyolojisinin aydınlatılmasına katkıda
bulunmayı amaçladık. Patofizyoloji ortaya konulabilirse, yeni tedavi yöntemleri de
geliştirilebilir. Üretra darlığı tedavisi cerrahi yöntemlerle yapılmaktadır. Hasta özelliklerine
göre noninvaziv ve daha invaziv yöntemler tercih edilebilir. Bazı durumlarda noninvaziv tedavi
yöntemlerinde ısrar edilmesi faydadan çok zarar verebilmekte ve kesin tedavi olan üretroplasti
başarısını olumsuz etkileyebilmektedir. Hasta bazlı düşünüldüğünde erken nüks öngörülebilirse
ve etiyoloji aydınlatılabilirse noninvaviz yöntemlerle ısrar edilmeden, kesin tedavi olan
üretroplastinin erken uygulanması gündeme gelebilir. Özellikle yakın dönemde çeşitli
hastalıkların tanısında ve prognoz tayininde mikroRNA'lar (miRNA) ile ilgili literatürde çeşitli
çalışmaların yapıldığı görülmektedir. Bu amaçlar doğrultusunda miRNA'ların üretra
darlıklarındaki rollerini araştırmayı planladık.
Pamukkale Üniversitesi Üroloji Anabilim Dalı'nda Mart 2022 ve Kasım 2022 tarihleri arasında,
bukkal mukozal greft ile üretroplasti ve anastomotik üretroplasti yapılan toplam 45 hasta
çalışmaya dahil edildi. Hasta grubu olarak, travmatik nedene bağlı gelişmeyen üretra darlığı
bulunan, bukkal mukozal greft ile üretroplasti yapılan 30 hastanın, üretroplasti sırasında dar ve
spogiyofibrozisli üretra dokusundan örnek alındı. Kontrol grubu olarak, travmatik nedene bağlı
gelişen üretral stenozu bulunan, anastomotik üretroplasti yapılan 15 hastanın, üretroplasti
sırasında spatülize edilecek olan sağlıklı üretra dokusundan örnek alındı. Her iki grupta alınan
üretra dokuları cerrahi tedavi başarısını olumsuz etkilemeyecek düzeyde idi. Toplanan üretra
dokularından literatür taraması sonucu belirlenen miR-146a-5p, miR-155-5p, miR-142-3p,
miR-26b, miR-129-5p, miR-9-5p, miR-29a moleküllerinin total RNA izolasyonu yapılarak
katlı değişim değerleri gruplar arası değerlendirildi. Verilerin tanımlayıcı istatistiklerinde
ortalama, standart sapma, medyan en düşük en yüksek, frekans ve oran değerleri kullanıldı.
Değişkenlerin dağılımı Kolmogorov- Smirnov test ile ölçüldü. Nicel bağımsız verilerin
analizinde Kruskal-Wallis, Mann-Whitney U test kullanıldı. Analizlerde SPSS 28.0 programı
kullanıldı. Tüm analizlerde P<0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.
Travmatik nedene bağlı gelişmeyen üretra darlığı bulunan 30 hastalık grup ve 15 hastalık kontrol
grubu arasında miR-29a, miR-155-5p, miR-26b, miR-129-5p, miR-142-3p, miR-146-5p katlı
değişim değeri anlamlı farklılık göstermemiştir (P>0.05). Üretra darlığı olan grupta miR-9-5p
katlı değişim değeri kontrol grubundan istatiksel anlamlı olarak (P < 0.05) daha düşük bulundu.
Yaptığımız literatür taramasına göre, bu çalışma travmatik nedene bağlı olmayan üretra darlığı
bulunan üretra dokusu ve kontrol grubu üretra dokusu arasında miRNA katlı değişim
değerlerini karşılaştırılan ilk çalışmadır. Sonuç olarak, çalışmamızda miR-9-5p'nin üretra
darlığının patofizyolojisine ışık tutabileceğini saptadık. miR-9-5p'nin koruyucu etkileri
olabileceğini ancak hastaların klinik bulgularının, üretral fibrozisteki patofizyolojik sürecin
tamamlanmasından daha önce ortaya çıktığını gösterdik.
Anahtar kelimeler: üretra darlığı, miRNA, fibrozis, spongiyofibrozis, üretroplasti

Abstract:
Urethral stricture can be defined as the loos of adequate expandability of the urethra, which
adversely affects patient health and quality of life. Although it is generally accepted that it
occurs with spongiofibrosis and fallowing epithelial damage, the details of these processes are
not known precisely. In this study, we aimed to contribute to the explanation of the
pathophysiology of urethral stricture. If the pathophysiology can be revealed, new treatment
methods can be developed. The treatment of urethral stricture is performed by surgical methods.
Non-ivasive and invasive methods can be preferred according to patient characteristics. In some
situations, insisting on non-invasive treatment methods may do more harm than good and may
negatively affect the success of urethroplasty, which is the definitive treatment. Considering on
a patient basis, if early recurrence can be predicted and the etiology can be clarified, early
administration of urethroplasty, which is a definitive treatment, may come to the fore without
insisting on non-invasive methods. Especially recently, it is seen that various studies have been
carried out in the literature on microRNAs (miRNA) in the diagnosis and prognosis of various
diseases. For these purposes, we projected to research the role of miRNAs in urethral strictures.
Pamukkale University Department of Urology in March 2022 between November 2022, a total
of 45 patients who underwent urethroplasty with buccal mucosal graft and anastomotic
urethroplasty were included in the study. As the patient group, specimens were taken from the
narrow and spogiofibrosis urethral tissue of 30 patients who had urethral stricture that did not
develop due to traumatic causes and who underwent urethroplasty with buccal mucosal grafts.
As a control group, specimens were taken from healthy urethral tissue spatulized during
urethroplasty from 15 patients who had urethral stenosis due to traumatic causes and underwent
anastomotic urethroplasty. The urethral tissues taken in both groups were at a level that did not
negatively affect the success of surgical treatment. The miRNAs to be investigated from the
collected urethral tissues were determined by literature review. miRNAs to be researched were
determined as miR-146a-5p, miR-155-5p, miR-142-3p, miR-26b, miR-129-5p, miR-9-5p,
miR-29a. Total RNA was isolated from the urethra tissues collected from the individuals
participating in the study by means of a commercial kit. The expression levels of the determined
miRNA molecules in the obtained RNA samples were investigated by real-time PCR method.
2ΔCt method was used to evaluate miRNA expressions. The fold change values of the miRNAs
found by the analyzes were compared statistically between the groups. Mean, standard
deviation, median lowest, highest, frequency and ratio values were used in the descriptive
statistics of the data. The distribution of variables was measured with the Kolmogorov-Smirnov
test. Kruskal-Wallis, Mann-Whitney U test was used in the analysis of quantitative independent
data. SPSS 28.0 program was used in the analysis. P<0.05 was considered statistically
significant in all analyses.
The fold change values of miRNAs were compared between the group of 30 patients with nontraumatic
urethral stricture and the control group of 15 patients. In the results, fold change
values of miR-29a, miR-155-5p, miR-26b, miR-129-5p, miR-142-3p, miR-146-5p did not
differ significantly (P > 0.05). The fold change value of miR-9-5p in the group with urethral
stricture was found to be statistically significantly (P < 0.05) lower than the control group.
According to our literature review, this is the first study to compare miRNA fold change values
between urethral tissue with non-traumatic urethral stricture and control group urethral tissue.
In conclusion, we found in our study that miR-9-5p may explain the pathophysiology of urethral
stricture. We have demonstrated that miR-9-5p may have protective effects, but the clinical
findings of patients appear before the completion of the pathophysiological process in urethral
fibrosis.
Keywords: Urethral stricture, miRNA, fibrosis, spongiofibrosis, urethroplasty