İnsan yumurtalık kanseri hücre hatlarında (MDAH 2774 VE OVCAR 3) leptinin apoptoza olan etkileri
The effect of leptin on apoptozes i̇n human ovarian canser cell lines (MDAH 2774 AND OVCAR 3)
Yazar: AYTAN NAJAFALIYEVA
Danışman: PROF. DR. MUSTAFA COŞAN TEREK
Ege Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2018
Konu: Kadın Hastalıkları ve Doğum = Obstetrics and Gynecology

Özet:
Obezite  çeşitli  kanser  tiplerinin  gelişimiyle  sıkı  bağlantılı  bir  hastalıktır. Obezitenin,  kanser  riskini  hangi  biyolojik  mekanizmalarla  ve  nasıl  etkilediğine  dair yapılan  çalışmalar;  farklı  kanser  türleri  için  farklı  mekanizmaların  söz  konusu olabileceğini göstermektedir.Leptin seviyesi obezhastalardanormal populasyona göre daha  yüksek  olduğu  bilinmektedir.  Bu  çalışmada  leptinin  over  kanseri  hücrelerinde (MDAH-2774ve OVCAR-3) apoptoza olan etkileriniortaya koymak amaçlanmıştır.24 ve 48saat serum açlığına bırakılan MDAH-2774 ve OVCAR-3 hücre hatlarında artan konsantrasyonlarda leptin uygulamasının (0.5-400 ng/ml) 24, 48 ve 72 saat sonunda hücre  çoğalması  üzerindeki  etkilerini  belirlemek  amacıyla XTTtesti,  proapoptoz  ve antiapoptoz  protein miktarlarındaki  değişimleri  belirlemek  amacıyla  apoptoz  array (Human  ApoptozArray C5, RayBiotech) yöntemi kullanılmıştır. Elde edilen bulgular ANOVA ve ardından Dunnett's istatistiksel analizleriyle değerlendirilmiştir.Çalışmamızda24  ve  48 saat  serum  açlığına  bırakılan  hücre  hatlarında  leptin uygulamasının hücre çoğalmasını artırdığı gözlenmiştir. 24.saat serum açlığına bırakılan MDAH-2774 hücrehattında25 ng/ml leptin uygulaması ile 72. saatte hücrelerinkontrol hücrelerine göre %127.1oranında çoğalması ile maksimum etki gözlenmiştir. 48.saat serum açlığına bırakılan OVCAR-3 hücre hattındaise50 ng/ml leptin uygulaması ile 24. saatte hücrelerin kontrol hücrelerine göre %187.4 oranında çoğalması ile maksimum etki görülmüştür. Leptin uygulaması sonucu her iki hücre hattında da antiapoptotik proteinolankatalaz seviyelerinde  artış  izlenmiştir.MDAH-2774 hücre  hattında  proapoptotik proteinler olanTRAİL R1/DR4,TRAİL R2/DR5,FADD, HTRA 2/Omi,PHOSPHO-53(S15),  Fas  TNFRSF6/CD  95seviyelerinde  azalma görülmüştür.  OVCAR-3  hücre hattında leptin   uygulaması   ile   antiapoptotik     etkiye     sahipBcl-2,PON2,p21/cip1/CDNK1a,phospho-Rad17(s635),HO-1/HMOX1/HSP32,katalazseviyesindeartış belirlenmiştir. Epidemiyolojik  araştırmalar,  obeziteninover  kanseri  insidansını  arttırdığını, yaşam süresini ve nüks riskini arttırdığını göstermektedir. Bu çalışmaklinik gözlemlerin altında  yatan ve  henüz  tam  olarak  aydınlatılmamış  olan moleküler  mekanizmalar açısından bir kaynak oluşturmaktadır.Anahtar kelimeler: Leptin, over kanseri, obezite,apoptoz, serum açlığı

Abstract:
Obesity is closely linked to the development of various cancer types. Studies on which biological mechanisms and how obesity affects the cancer risk showed that there may be different mechanisms for different types of cancer. It is known that leptin levels in obese patients are higher than in normal population. The objective of the present study is  to  reveal  the  effects  of  leptin  oncell  proliferation  and  proapoptotik,  antiapoptotik proteinlevels in human ovarian cancer cell lines MDAH-2774 and OVCAR-3.XTT  test  was  used  to  evaluate  the  effect  of  increasing  concentrations  of  leptin treatment (0.5 –400 ng/ml) on cell proliferation in OVCAR-3 and MDAH-2774 cell lines at 24, 48 and 72 hours after 24h and 48h serum starvation, respectively. Human Apoptosis Array was used to determine the changes in proapoptotik and antiapoptotik proteinlevels. The findings were evaluated by ANOVA followed by Dunnett's statistical analyzes.In our study it was observed that leptin treatment increased the cell proliferation after 24h and 48h serum starvation. The  maximum  effect  was  observed  with  a  proliferation  of  127.1%  compared  to control  cells  in  MDAH-2774  cell  line  with  25  ng/ml  leptin  treatment  at  72h  after  24h serum  starvation The  maximum  effect  was  observed  with  a  proliferation  of  187.4% compared  to  control  cells  in  OVCAR-3  cell  line  with  50  ng/ml  leptin  treatment  at  24h after 48h serum starvationAs aresult of leptin treatment, there is an increase inproapoptotik protein catalasein  both  of  cell  lines.  There  is  anincreasein  antiapototic  proteins  Bcl-2,PON2,p21/cip1/CDNK1a,phospho-Rad17(s635),HO-1/HMOX1/HSP32levels in-OVCAR-3 cell  lineby  leptin  administration.There  is a  decrease in proapoptotic  proteins TRAİL R1/DR4,TRAİL R2/DR5, FADD,HTRA 2/Omi,PHOSPHO-53(S15), Fas TNFRSF6/ CD 95 levelsin MDAH-2774 cell lineby leptin administration.Epidemiological  studies  have  shown  that  obesity  increased  the  ovarian  cancer incidince,  life  span  and  risk  of  relapse.  This  study  is  a  reference  for  the  molecular mechanisms, which are not fully identified, underlying clinical observations.Key words: Leptin, ovarian cancer, obesity, apoptosis, serum starvation