Kateter ilişkili hastane enfeksiyonlarında sık karşılaşılan biyofilm oluşturan bakterilerde, biyofilm ilişkili antibiyotik direncinin araştırılması
Investigation  of  biofilm  related  antibiotic  susceptibilities  of bacteria  frequently  isolated  from  catheter  related  hospitalinfections
Yazar: FULYA BAYINDIR BİLMAN
Danışman: PROF. DR. FÜSUN CAN
Başkent Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2010
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology

Özet:
Hastaneye yatıs sürecinde tanı ve tedavi amaçlı kullanılan yabancı cisimlerden kateterlerin,
en önemli komplikasyonları arasında lokal ve sistemik enfeksiyon riski yer almaktadır. Bu
çalısma kateter yüzeylerinde mikroorganizmalar tarafından olusturulan biyofilm yapısının
tedaviye direnci artıran ve tedavi sürecini zorlastıran önemli bir etken olduğuna dayanılarak
yapılmıstır.
Çalısmada Baskent Üniversitesi Tıp Fakültesi Ankara Hastanesi'nde 2006-2009 yılları
arasında çesitli servislerde ve yoğun bakımlarda yatarak tedavi gören hastaların kateterlerinde
üremis metisilin dirençli S.aureus (MRSA), metisilin dirençli koagülaz negatif stafilokok
(MRKNS) ve P.aeruginosa izolatlarının planktonik hücre asamasında ve in vitro kosullarda
biyofilm yaptırıldıktan sonra sesil hücrelerinin çesitli antibiyotiklere duyarlılıkları
arastırılmıstır. Antibiyotiklerin seçiminde MRSA ve MRKNS susları için vankomisin,
siprofloksasin, rifampisin, gentamisin, meropenem, tigesiklin, linezolid, seftazidim ve
sefazolin tercih edilirken, P.aeruginosa susları için de siprofloksasin, gentamisin,
meropenem, tigesiklin, piperasilin, seftazidim ve amikasin çalısmaya alınmıstır.
Seçilen bu antibiyotikler ile önce planktonik hücrelerde duyarlılık arastırılmıs, böylece
minimal inhibitör konsantrasyonları (MĐK) ve minimal bakterisidal konsantrasyonları (MBK)
belirlenmistir. Daha sonra her bir sus ile biyofilm olusturulup sesil hücrelerde aynı
antibiyotikler ile yine MĐK ve MBK değerleri belirlenmistir. Ardından ikili ve üçlü
antibiyotik kombinasyonları olusturulup, çoklu kombine bakterisidal test (ÇKBT) yöntemi ile
hem planktonik hem de biyofilmde etkinlikleri belirlenmistir. Her bir antibiyotik ile
planktonik ve biyofilm hücrelerinde elde edilen veri seti istatistiksel olarak iki oran z testi ile
analiz edilmistir.
Sonuç olarak; sesil hücrelerde planktonik forma göre genel olarak duyarlılıklarda anlamlı
azalmalar tespit edilmistir. Hem ikili hem de üçlü kombinasyonlar ile yapılan çalısmaların
sonucunda da sesil hücrelerin kombinasyonların çoğuna duyarlılıklarında anlamlı azalma
olduğu görülmüstür. Planktonik ve sesil hücrelere kombinasyonların etkinliğinin
karsılastırılmasında, susların % 90'ından fazlasını inhibe etme açısından, ikili kombinasyonlar
ile üçlüler arasında anlamlı bir fark tespit edilmemistir.

Abstract:
Local and systemic infection risks are one of the most important complications of catheters used for diagnosis and treatment in hospitalization process. This study is undertaken on the basis of the biofilm formation by microorganisms oncatheter surface is one of the important factors which increase the resistance and complicate the treatment process. 
In this  study,  the  sensitivity  of  methicillin  resistant  S.aureus  (MRSA),  methicillin  resistant coagulase negative staphylococcus (MR-CNS) and  P.aeruginosaisolates from the catheters of  inpatients  hospitilized  in  different  clinics  and intensive  care  units  in  Başkent  University Medicine Faculty Hospital between 2006-2009 was investigated in vitro in planctonic phase and  on  sessile  cells  after  biofilm  was  formed.  Vancomycin,  ciprofloxacin,  rifampicin, gentamicin,  meropenem,  tigecycline,  linezolid,  cephtazidime  and  cephazolin  were  preferred for  MRSA  and  MR-CNS  isolates  and  ciprofloxacin,  gentamicin,  meropenem,  tigecycline, piperacillin, ceftazidime and amikacin were selected for P.aeruginosa. 
First of all, the sensitivity of planktonic cells to antibiotics was examined so minimal inhibitor concentrations (MIC) and minimal bactericidal concentrations (MBC) were determined. Next, each strain was transformed to sessile cell in biofilm environment, and MIC and MBC values were determined for sessile cells. Double and triple antibiotics combinations were arranged, the  effectiveness  of  combinations  were  studied  on  both  planktonic  and  biofilm  cells  with multiple-combination  bactericidal   testing  (MCBT)  method.  The  data  set  obtained  from planktonic and biofilm cells with each antibiotic analyzed with two proportion z test. 
In conclusion,  a significant  decreases  were  found  in  the  sensitivities  of  sessile  cells  when compared  to  planktonic  cells.  Experiments with both double and triple antibiotic combinations showed  a  significant  decrease  in  the  sensitivities  of  sessile  cells  to  all combinations tested.  In the comparison of effectiveness  of  double  and  triple  combinations against planktonic and sessile cells in terms of the inhibition of more than %90 of the strains, no difference was determined.