Hepatoselüler karsinom (HEPG2 hücre hattı) üzerinde borik asit uygulamasının glutatyon peroksidaz enzim aktivitesi üzerine etkisi
The effect of boric acid administration on glutathione peroxidase enzyme  activity in hepatocellular carcinoma (HEPG2 cell line)
Yazar: BETÜL ÇALIŞKAN
Danışman: PROF. DR. ÖZEN ÖZENSOY GÜLER
Ankara Yıldırım Beyazıt Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı / Kanser Biyolojisi Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Borik asit = Boric acid ; Enzim aktivasyonu = Enzyme activation ; Glütatyon peroksidaz = Glutathione peroxidase ; Hücre dizisi = Cell line ; Karsinoma = Carcinoma ; Karsinoma-hepatoselüler = Carcinoma-hepatocellular ; Neoplazmlar = Neoplasms

Özet:
Hepatoselüler Karsinom (HepG2 Hücre Hattı) Üzerinde Borik Asit 
Uygulamasının Glutatyon Peroksidaz Enzim Aktivitesi Üzerine Etkisi
Hepatoselüler Karsinom, çoğunlukla karaciğer hastalığı olan ve siroz gelişen
hastalarda ortaya çıkan en yaygın primer karaciğer malignitesidir. Sitokrom P-450 
(CYP450); ilaç, ksenobiyotikler, kolesterol ve safra asidi sentezinde, streoid sentezi 
ve katabolizmasında rol oynayan enzim sistemidir. CYP450 enziminin, artan 
aktivitesinin lipit peroksidasyonuna ve ROS üretimine yol açtığı bilinmektedir.
Glutatyon Peroksidaz enzimi (GPx) hücrelerin sitoplazmasında bulunup H2O2'den 
kaynaklanan oksidatif hasara karşı hücreleri koruyan antioksidan enzimdir. GPx 
enziminin, anjiyogenez ve tümör hücrelerinin proliferasyonunu inhibe ettiği 
bildirilmiştir. Ayrıca GPx enziminin, immün aracılı mekanizmalarla hepatoselüler 
karsinom oluşumunu önlediği ve ilerlemesini baskıladığı da bilinmektedir. GPx 
enziminin inhibisyonunun hücrede programlanmış ölüme neden olduğu bildirilmiştir.
Bor elementi vücuda su ve bitki kaynaklı besinlerden alınır, gastrointestinal sistemde 
neredeyse tamamen emilir ve kanda borik asit olarak dolaşır. Çalışmalarda borik 
asitin, uygulanan doz ile bağlantılı olarak bazı kanser türlerinde, proliferasyonu 
inhibe ederek apoptozu indüklediğini göstermiştir. 
Bu çalışmada, HepG2 hücre hattında borik asitin GPx aktivitesi üzerindeki 
etkisi in vitro olarak araştırılmıştır. GPx aktivitesi spektrofotometrik olarak 
ölçülmüştür. Borik asitin GPx enzimi üzerine inhibisyon etkisi gözlendiği tespit 
edilmiştir.
Borik asitin GPx enzimi üzerine sitotoksitesini belirlemek için hücre canlılık 
testi uygulanarak inhibisyon seviyeleri ölçülmüştür. Bu çalışmada, GraphPad Prism 9 
programı kullanılarak, HepG2 hücreleri üzerine uygulanacak borik asit dozu 236,7 
mM olarak belirlenmiştir ayrıca borik asit uygulanan ve uygulanmayan HepG2 
hücrelerinde GPx konsantrasyonlarının anlamlılık düzeyleri gösterilmiştir. Sonuç 
olarak, borik asit hepatoselüler karsinom hücreleri üzerinde glutatyon peroksidaz 
enzim aktivite düzeyinde anlamlı inhibisyon etkisi göstermiştir.
Anahtar Kelimeler: Borik Asit, Glutatyon Peroksidaz, Hepatoselüler Karsinom

Abstract:
The effect of boric acid administration on glutathione peroxidase enzyme 
activity in hepatocellular carcinoma (HepG2 cell line)
Hepatocellular carcinoma is the most common form of primary liver 
malignancy and usually occurs in patients with chronic liver disease and cirrhosis. 
Cytochrome P450 (CYP450); is an enzyme system involved in the synthesis of 
drugs, xenobiotics, cholesterol, bile acid, and steroids and their degradation. It is 
known that the increased activity of CYP450 enzyme leads to lipid peroxidation and 
the formation of ROS. The enzyme glutathione peroxidase (GPx) is an antioxidant 
enzyme located in the cytoplasm of cells that protects cells from oxidative damage 
by H2O2. GPx enzyme has been shown to inhibit angiogenesis and proliferation of 
tumor cells and prevent the development of hepatocellular carcinoma and suppress 
its progression through immune-mediated mechanisms. Inhibition of the GPx 
enzyme leads to programmed death of the cell. The element boron is absorbed into 
the body with drinking water and plant foods, it is almost completely absorbed in the 
liver. It circulates in the blood as boric acid and it induces apoptosis in some types of 
cancer.
In this study, the effect of boric acid on glutathione peroxidase enzyme 
activity was investigated in the HepG2 cell line. The GPx enzyme cells were 
measured spectrophotometrically. Boric acid was found to have an inhibitory effect 
on the GPx enzyme.
According to these results, the inhibition levels were measured by applying 
the cell viability assay to determine the cytotoxicity of boric acid on the GPx 
enzyme. In this study, the boric acid dose to be applied to HepG2 cells was set at 
236.7 mM using the GraphPad Prism 9 program. In addition, the significance levels 
of GPx concentrations in HepG2 cells with and without boric acid application were 
again determined using the GraphPad Prism 9 program. As a result, boric acid 
showed a significant inhibitory effect on HepG2 cells at the level of glutathione 
peroxidase enzyme activity.
Keywords: Boric Acid, Glutathione Peroxidase, Hepatocellular Carcinoma