Sulfoksaflor insektisitinin kan lenfositleri üzerindeki genetik, oksidatif ve apoptotik hasar potansiyelinin incelenmesi
Investigation of genetic / oxidative and apoptotic damage potential of sulfoxaflor insecticide on blood lymphocytes
Yazar: CEBRAİL SINACI
Danışman: PROF. DR. AYLA ÇELİK
Mersin Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Biyoloji = Biology

Özet:
Bu çalışmada Neonikotinoid kimyasal grubunda yer alan Sulfoksaflor insektisitinin insan periferal kan lenfosit hücreleri üzerindeki genotoksik, oksidatif hasar ve apoptotik hasar potansiyeli incelenmiştir. Çalışmamızda; genotoksik hasarı belirlemek için tek hücre jel elektroforez (Komet) test ve Mikronükleus test yöntemleri kullanılmıştır. Oksidatif hasar potansiyelini belirlemek amacıyla antioksidan enzimlerden katalaz enzim aktivitesi düzeyi araştırılmıştır. Akım sitometri analiz yöntemi ile de apoptotik hasar ölçülmüştür. İnsan periferal kan lenfositleri, 10 μg/mL, 20 μg/mL ve 40 μg/mL olmak üzere üç farklı konsantrasyonda Sulfoksaflor insektisiti ile muamele edilmiştir. Bu çalışmada kullanılan kan örnekleri sigara, alkol içmeyen ve sağlıklı üç erkek bireyden temin edilmiştir. Komet test yönteminde pozitif kontrol grubuna 10 mM hidrojen peroksit (H2O2) uygulanmıştır. Mikronükleus test yönteminde ise pozitif kontrol gruplarına için mitomisin –C kullanılmıştır. Komet testi sonucunda elde edilen hasarlı hücre yüzdesi (HHY) ve genetik hasar indeksi (GHI) konsantrasyon artışına bağlı olarak anlamlı bir artış görülmüştür (p<0. 01). Katalaz enzim aktivitesi değerlerinde anlamlı bir değişim gözlemlenmiştir (p<0.05). Mikronükleus test sonuçları istatiksel açıdan konsantrasyon artışına bağlı olarak anlamlı bir artış görülmüştür(p<0.001). Akım sitometri analizinde ise 40 µg/ml'lik konsantrasyonda erken ve geç apoptotik, canlı hücre sayısında düşüş gözlenmiştir ve nekrotik hücre sayısında artış gözlenmiş ve bu artışın negatif kontrol ile istatistiksel olarak anlamlı olduğu gözlenmiştir (p<0.05).

Abstract:
In this study, the genotoxic, oxidative damage and apoptotic damage potential of Sulfoxaflor insecticide, which is in the Neonicotinoid chemical group, on human peripheral blood lymphocyte cells was investigated. In our work; Single cell gel electrophoresis (Komet) test and Micronucleus test methods were used to determine genotoxic damage. Catalase level, one of the antioxidant enzymes, was investigated to determine the potential for oxidative damage. Apoptotic damage was measured by flow cytometry analysis method. Human peripheral blood lymphocytes were treated with Sulfoxaflor insecticide at three different concentrations: 10 μg / mL, 20 μg / mL and 40 μg / mL. Blood samples used in this study were obtained from three non-alcoholic and healthy male individuals. In the Comet test method, 10 mM hydrogen peroxide (H2O2) was applied to the positive control group. In the micronucleus test method, mitomycin-C was used for positive control groups. A significant increase was observed in the percentage of damaged cells (HHY) and genetic damage index (GHI) obtained as a result of the comet test, depending on the dose increase(p <0.01). A significant change was observed in catalase enzyme values (p <0.05). Micronucleus test results showed a statistically significant increase depending on the dose increase (p <0.001). In flow cytometry analysis, an increase was observed in the number of early and late apoptotic, viable cell number decreased and necrotic cells at a concentration of 40 µg / ml and this increase was observed to be statistically significant with the negative control (p <0.05).