Mezenterik iskemi ?reperfüzyon hasarında rat barsak dokularında NO/cGMP yolağının ve reseptör aracılı kasılma yanıtlarının in vitro olarak araştırılması
In vitro research of NO/cGMP way and receptor related contraction response in rat gut in case of mesenteric ischemia and reperfusion damage
Yazar: AHMET ALPER İNAL
Danışman: PROF. DR. CENGİZ AYDIN
Cumhuriyet Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2009
Konu: Genel Cerrahi = General Surgery
Dizin: Mezenterik vasküler tıkanma = Mesenteric vascular occlusion ; Nitrik oksit = Nitric oxide

Özet:
Mezenter iskemi, barsakları besleyen damarlardaki tıkanmaya bağlı olarak barsak segmentlerindeki geri dönüşümlü ya da geri dönüşümsüz beslenme bozukluğudur. Klinik olarak çok sık karşılaştığımız bu durumun etkin tedavisi henüz bulunamamıştır. Fizyolojik düzeyde NO' in gastrointestinal sistemde , intestinal düz kaslarında gevşeme etkisi vardır. PDE enzim inhibitörleri ve guanilat siklaz emzim aktivatörleri dokuda cGMP ` yi arttırarak hedef dokuda kan akımının artışına neden olurlar.Süperior mezenterik arterin (SMA) klemplenip belirli bir süre sonra klempin kaldırılması, SMA `in beslediği alanlarda meydana gelen iskemi reperfüzyon (I/R) hasarını belirlemede kullanılan hayvan modelidir. İnsanlardaki SMA oklüzyonuna bağlı meydana gelen I/R hasarıyla benzerdir. Çalışmamızda 3 grupta 18 adet Wistar Albino erkek rat kullanıldı. Birinci gruptaki deneklere anestezi altında laparotomi yapıldı, ikinci grupdaki deneklere laparotomi yapılarak SMA izole edilip klemplenerek 30 dk iskemi sonrası 3 saatlik reperfüzyona maruz bırakıldı, üçüncü grupta ise reperfüzyon süresi 24 saat olarak uygulandı, bu işlemler sonunda her üç grupta da ileum ve kolon segmentleri rezeke edildi. Bu işlemleri takiben barsak dokusu izole edilerek Krebs-Henseleit solüsyonu içeren 10 ml'lik organ banyosuna 1 gram ön gerilim altında asıldı ve dokuların dengeye ulaşmaları için 60 dakika beklenildi. Dokuların dengeye ulaşmasından sonra nitrik oksit donörleri, fosfodiesteraz-5 inhibitörleri, guanilat siklaz aktivatörleri gibi NO/cGMP yolağını etkileyen diğer ilaçların spontan kontraksiyonlar üzerine in vitro etkileri incelendi .Çalışmamızda SNAP, SIN-1, Pentoksifilinin kasılma amplitüdlerinin ileum ve kolon dokularında 24 saatlik reperfüzyon döneminde 3 saatlik reperfüzyon dönemine göre azalan kasılmaları arttırdığı görüldü(p<0.05). SNAP ve SIN-1 konsantrasyonları arttıkça her iki dönemde de ileum ve kolonda kasılma frekanslarının azaldığı (p<0.05), Pentoksifilinin diğerlerinden farklı olarak konsantrasyonları arttırıldığında ileumda kasılma sayısında artışa neden olduğu görüldü.(p<0.05). Pentoksifilinin konsantrasyonları arttıkça kolonda meydana gelen kasılmaların frekanslarının azaldığı görüldü(p<0.05). Sonuçta reperfüzyon süresi uzadıkça SNAP, SIN-1 ,Pentoksifilinin gevşeme yanıtlarının daha iyi olduğu görüldü.

Abstract:
Mesenteric ischemia is a reversible or an irreversible blood supply disorder of the blood vessels of the bowel. This is a very often clinical status which still doesnt have a definitive treatment. In phsiologic ammounts NO has a relaxant effect on gastrointestinal system. PDE enzyme inhibitors increase both cGMP levels in tissues and increase blood suply of the target tissue.Clamping the superior mesenteric arteria (SMA) for a while and than remowing the clamp is an animal model used to determine the ischemia and reperfusion (I/R) damage on the sites supplied by SMA. In our study we used 18 male Wistar albino rats in 3 groups. In the first group laparotomy was performed under anasthesia, in the second group laparotomy was performed, SMA was isolated and clamped for 30 minutes and 3 hours of reperfusion was allowed, in the third group reperfusion time was 24 hours and ileum and colon segments were resected afterwords in all groups. After this procedure bowel tissue was isolated and hanged under tension with 1 gr weigth in 10 ml Krebs-Hanseleit solution for 60 minutes. After the tissue was equiblirated substances influencing NO/cGMP pathway like nitric oxide donors, phosphodiesterase 5 inhibitors, guanilat cyclase activators were tested for their effects on spontaneous contractions in vitroIn our study we found that SNAP, SIN-1, Pentoxyphiline after 24 hours of reperfusion increase contraction more than 3 hours of reperfusion (p<0.05). We found that when SNAP and SIN-1 concentrations increased contraction frequencies both in ileum and colon decreased (p<0.05), contraction frequencies of ileum increased with increasion of pentoxiphiline concentration (p<0.05) which was different than the others. Pentoxyphiline was found to increase the contractions more with increasing concentrations (p<0.05). As a result we found that relaxation responces to SNAP, SIN-1, pentoxyphiline were better when reperfusion times increased.