Macrovipera lebetina  zehrinin antitümöral etkilerinin biyokimyasal olarak hücre kültüründe incelenmesi
Biochemical investigation of the antitumoral effects of macrovipera lebetina venom in cell culture
Yazar: İLHAN ÖNGANER
Danışman: PROF. DR. ERGÜL BELGE KURUTAŞ
Kahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya (Tıp) Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine
Dizin: Antineoplastik ajanlar = Antineoplastic agents ; Antioksidanlar = Antioxidants ; Apoptozis = Apoptosis ; Glioblastoma = Glioblastoma ; Hücre kültür teknikleri = Cell culture techniques ; Kondrosarkom = Chondrosarcoma ; Macrovipera lebetina = Macrovipera lebetina ; Mezotelyoma = Mesothelioma ; Yılan = Snake ; Yılan zehirleri = Snake venoms

Özet:
Kanser, çok hücreli organizmalarda, bazı hücrelerin bölünme-ölüm arasındaki dengesini yitirerek, kontrolsüzce bölünmesi davranışı ile karakterize edilen bir genetik hastalıklar grubudur. Varolan tüm kanser tiplerine karşı etkin tedavi yöntemleri bulunmadığından, bu konu üzerinde çalışmalar devam etmekte ve alternatif yaklaşımlar da bu bağlamda değerlendirilmektedir. Yılan zehrinin kanser hücrelerine karşı bir tedavi olarak kullanılabileceğine ilişkin yayınlar bulunmaktadır. Ancak, ülkemiz coğrafyasına özgü Makrovipera lebetina türü engerek yılanından elde edilen ve liyofilize edilmiş zehrin glioblastoma (YKG-1), mezoteliyoma (H2452) ve kondrosarkoma (OUMS) hücre hatları üzerindeki etkisini 24 saatlik bir zaman diliminde inceleyen bir çalışma bulunmamaktadır. Bu nedenle, bu çalışmada Vetal Serum ve Biyolojik Ürünler Üretimi San. ve Tic. A.Ş'den (Adıyaman-Türkiye) liyofilize halde edinilmiş yılan zehiri yukarıda ismi verilen üç kanser hattı üzerinde denenmiş; bunların yanında, zehrin anti-kanser potansiyelinin doğru değerlendirilebilmesi için HUVEC hücreleri ile de sitotoksik denemeler yapılmıştır. Gerçekleştirilen MTS deney sonuçlarına göre, çalışılan zehrin YKG-1 hücreleri için 24 saatlik IC50 değeri 0.73 µg/µL olarak hesaplanırken, OUMS için bu değer 0.67 µg/µL, H2452 için 0.60 µg/µL ve HUVEC için 2.43 µg/µL olarak bulunmuştur. Bulunan değerlerin iki yönlü ANOVA ile istatistiksel analizi, kanserler arasında IC50 değerleri bakımından bir fark bulunmadığını, ancak HUVEC sağlıklı hücrelerinin yılan zehrine karşı çalışılan tüm kanser hücrelerinden daha dayanıklı olduğunu ortaya koymuştur (p<0.05). Sonrasında, IC50 değerinde zehir ile muamele edilmiş hücreler ile yapılan Western Blotlama deneyleri, zehir muamelesinin, pro-apoptotik bir protein olan kaspaz-3, anti-apoptotik protein olan Bcl-2 ve antioksidan bir enzim olan süperoksit dismutaz (SOD) seviyelerindeki değişimlerin hücre tipine bağlı bir şekilde artış/azalış/aynı kalış şeklinde farklı sonuçlar verdiğini ortaya koymuştur.  Bu sonuçlar birlikte değerlendirildiğinde, Makrovipera lebetina türü engerek yılanından elde edilen zehrin anti-kanser bir potansiyeli olduğunu, ancak zehrin kanser tipine göre etki mekanizmasının farklı olabileceğini düşündürmüştür.

Abstract:
Daha sonra dCancer is a group of genetic diseases characterized by the behavior of uncontrolled division of some cells by losing the balance between division and death in multicellular organisms. Since there are no effective treatment methods against all existing cancer types, studies on this subject continue and alternative approaches are evaluated in this context. There are publications on the use of snake venom as a treatment against cancer cells. However, there is no study examining the effect of lyophilized venom obtained from the Macrovipera lebetina viper snake specific to our country's geography on glioblastoma (YKG-1), mesothelioma (H2452) and chondrosarcoma (OUMS) cell lines in 24 hours. Therefore, in this study, Vetal Serum and Biological Products Production Coop. (Adıyaman-Turkey) lyophilized snake venom was tested on three cancer lines named above. In addition to these, cytotoxic experiments were also carried out with HUVEC cells in order to accurately evaluate the anti-cancer potential of the venom. According to the MTS test results, the IC50 value for YKG-1 cells at 24 hour was calculated as 0.73 µg/µL, while this value was determined as 0.67 µg/µL for OUMS, 0.60 µg/µL for H2452 and 2.43 µg/µL for HUVEC. Statistical analysis of the values  by two-way ANOVA revealed that there was no difference in IC50 values between the cancer types studied, yet HUVEC healthy cells were more resistant to snake venom than all examined cancer cells (p<0.05). Subsequently, Western blotting experiments with venom-treated cells at IC50 showed that the exposure to venom changed the levels of caspase-3, a pro-apoptotic protein, Bcl-2, an anti-apoptotic protein, and superoxide dismutase (SOD), an antioxidant enzyme in a cell type-dependent manner. When these results were evaluated together, it was suggested that the venom obtained from the Macrovipera lebetina viper snake has an anti-cancer potential, but the mechanism of action of the venom may be different depending on the cancer type.oldurulacaktır.