İnflamatuar barsak hastalıklarında MEFV geni mutasyon sıklığı ve klinik gidişe etkisinin değerlendirmesi
Frequency of MEFV gene mutation in inflammatory intestinal diseases and its relationship to the clinic
Yazar: SEZEN ŞAHİN
Danışman: DR. RASİME DERYA GÜLEÇ
Sağlık Bakanlığı / İzmir Bozyaka Eğt. ve Arş. Hast. / Biyokimya ve Klinik Biyokimya Ana Bilim Dalı / Biyokimya Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2014
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
Amaç: İBH (Crohn ve Ülseratif Kolit) genetik olarak yatkın kişilerde bağırsak
bakteriyel antijenlerine karşı bozulmuş immün cevaptan kaynaklandığı düşünülen
multifaktöriyel ve tekrarlayıcı inflamatuvar hastalıklardır. FMF (Familial
Mediterranean Fever) periyodik inflamatuvar klinik sendromların prototipidir.
Periyodik ateş ve serozaların iltihabı ile karakterizedir. FMF ve İBH ortak klinik ve
biyolojik özelliklere sahiptirler. Her ikisi de yangı alanında nötrofil infiltrasyonu ve
anormal apopitoz regülasyonunun olduğu, kliniklerinde relaps ve remisyonların
görüldüğü kronik, periyodik inflamatuvar hastalılardır.
FMF'den sorumlu MEFV geni 781 aa'lik pyrin adı verilen bir proteini
kodlamaktadır. İBH'a yatkınlık geni olduğu düşünülen NOD2/CARD15 ve MEFV
geni 16. kromozomda yer almakta, aynı protein ailesine ait, benzer yapılar içeren
proteinleri (pyrin ve NOD2/CARD15) sentezlemektedirler.
Pyrinin inflamasyonun kontrolünde kilit bir rolü vardır. İBH ve sistemik
otoiflamatuvar hastalıkların prototipi olan FMF birlikteliği ile ilgili yapılan
çalışmalar, FMF mutasyonlarının genetik olarak İBH'a yatkınlık oluşturabileceğini
ve İBH kliniği üzerine modifiye edici bir faktör olabileceğini düşündürüyor.
İBH'dan muzdarip hastaların klinik seyirleri hastadan hastaya farklılık
göstermektedir. Kimi hasta remisyon için cerrahiye ihtiyaç duyarken, kimi hasta
medikal tedaviyle remisyona ulaşmaktadır. Biz bu çalışmamızda MEFV
mutasyonlarının İBH'da sıklığını ve klinikle ilişkisini incelemeyi amaçladık.
Materyal Metod: 55 Ülseratif kolit, 45 Crohn hastası ve 20 sağlıklı kontrol
grubunun MEFV geninin ilgili bölgeleri polimeraz zincir reaksiyonu ile amplifiye

92
edildi. Sanger yöntemiyle amplifikasyon ürünü dizilendi ve ABI PRISM™ 310
Genetic Analizöründe (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA) analiz edildi.
Bulgular: Ülseratif kolit hastalarının % 14,5, Crohn Hastalarının % 26,6'sında FMF
ilişkili mutasyon saptandı. Hastalardaki mutasyon sıklığı kontrol grubundan anlamlı
ölçüde farklı değildi. FMF kliniği ile ilgili herhangi bir mutasyon varlığınının tüm
İBH hastalarının kliniğine etkisi değerlendirildi. Steroid gerekliliği, immun
modülatör gerekliliği, biyolojik ajan gerekliliği mutasyon taşıyan ve taşımayan
hastalar arasında farklı görülmezken, cerrahi gereksinim mutasyon taşıyan grupta
anlamlı ölçüde fazlaydı. Hastalarda cerrahi gereksinimi açıklamada E148Q
(p=0.036) ve M694V (p=0.036) varlığı bir arada anlamlı bulundu. E148Q ve
M694V mutasyonlarının varlığı cerrahi gereksinimi 6.25 (%95 güven aralığı: 1.13-
34.64) kat arttırmaktaydı. Ülseratif kolit hastaları incelendiğinde ise E148Q
mutasyonun varlığı cerrahi gereksinimi arttırmaktaydı (p=0.037). Crohn hastalarında
mutasyon taşıyan ve taşımayanlar arasında cerrahi gereksinim bakımından fark
bulunmadı.
Sonuç: MEFV mutasyonlarının İBH'na yatkınlık oluşturmada risk olduğu ya da sık
görüldüğü hipotezinin doğruluğu yönünde bir bulguya ulaşamadık. Ancak MEFV
geninde FMF ile ilişkili mutasyon taşıyan hastaların cerrahi gereksinimin fazla
olduğunu saptadık. Yoğunlaşılması gereken konunun bu mutasyonların varlığında
İBH'nın klinik şiddetinin artıp artmadığı olduğunu düşünüyoruz. Cerrahi ihtiyacı
doğmuş hastaların sık atak geçirdiği ve ataklarının şiddetli seyrettiği ya da yaygın
tutulumlu hastalar olduğu düşünelecek olursa, inflamasyonun regülasyon ayağında
önemli fonksiyonu olan pyrin proteinini kodlayan MEFV genindeki mutasyonlar
İBH hastalarında da araştırılmadır. FMF hastalarında remisyon sağlayabilen kolşinini
de içeren bir tedavi rejimi bu konuda yapılacak daha kapsamlı çalışmalarla İBH
hastalarında da önerilebilir.

Abstract:
Objective: IBD (Crohn and Ulcerative Colitis) are multifactorial and repetitive
inflammatory diseases, thought to originate from degenerative immune responses to
bacterial antigens in intestines in genetically predisposed individuals. FMF (Familial
Mediterranean Fever) is the prototype of periodical inflammatory clinical syndromes.
It is characterized by periodical fever and serosa inflammation. FMF and IBD share
common clinical and biological characteristics. Both are chronic and inflammatory
diseases in which neutrophil infiltration, and abnormal apoptosis regulation occur in
the inflamed area, and relapse and remissions are observed in the clinical.
The MEFV gene responsible for FMF encodes with 781 amino acid protein called
pyrin. NOD2/CARD15, which is thought to be the predisposition gene for IBD, and
the MEVF gene are located on the 16th chromosome, and synthesize proteins from
the same protein family with similar structures (pyrin and NOD2/CARD15).
Pyrin has a key role in controlling the inflammation. Studies concerning the
concurrence of IBD and FMF, the prototype of systemic auto inflammatory diseases,
suggest that FMF mutations might result in genetic predisposition to IBD, and that it
may be a modifying factor on IBD clinical. The clinical progress of IBD differs from
patient to patient. While some patients need surgery for remission, others achieve
remission by medical treatment. In this study, we aimed to analyze the frequency of
MEVF mutations in IBD and its relationship to the clinical.
Material Method: Relevant regions of the MEFV gene were amplified through
polymerase chain reaction in 55 ulcerative colitis patients, 45 Crohn patients, and 20
healthy individuals in the control group. Results of the amplification were arranged

94
with Sanger method, and analyzed in ABI PRISM™ 310 Genetic Analyser (Applied
Biosystems, Foster City, CA, USA).

Results: The relevant mutation was detected in 14,5 % of the ulcerative colitis
patients, and 26,6 % of the Crohn patients. Mutation frequency in patients was not
significantly different than the control group. The influence of the presence of any
mutation related to the FMF clinical on all of the IBD patients was evaluated. While
no difference was observed between patients who had mutations and patients who
did not have mutations regarding the need for steroids, immune modulators, or
biological agents, the need for surgery in patients with mutations was significantly
higher. In explaining the need for surgery in patients, the Concurrent presence of
E148Q (p=0.036) and M694V (p=0.036) was found substantive. The presence of
E148Q and M694V mutations increased the need for surgical requirement 6.25 times
(confidence interval 95 %: 1.13-34.64). When ulcerative colitis patients were
analyzed, the presence of the E148Q mutation increased the need for surgery
(p=o.o37). No difference was found concerning the surgical requirement between the
Crohn patients who carried the mutations and those who did not.

Conclusion: We did not attain any indication to suggest the accuracy of the
hypotheses that MEVF mutations pose a risk in producing predisposition to IBD, or
that these mutations are frequently observed. However, we have determined that the
surgical need of the patients with mutation related to FMF in the MEVF gene was
high. We think that what should be concentrated on is the possible increase of the
clinical severity/intensity of IBD in light of these mutations. Given that patients who
require surgery have frequent attacks, and that the attacks are severe or that the
patients have prevalent involvement, the mutations in the MEVF gene that encodes
pyrin, which has an important function in inflammation regulation, should be studied
in IBD patients. A treatment regimen, which includes colchicine that ensures
remission in FMF patients, can also be recommended to IBD patients through more
comprehensive studies on this subject.