The effect of neomycin on survival and development of Pimpla turionellae L. (Hymenoptera: Ichneumonidae) reared on natural
Doğal konak üzerinde yetiştirilen Pimpla turionellae L. (Hymenoptera: Ichneumonidae)'nin yaşama ve gelişimine neomisinin etkisi
Yazar: CUMHUR HARMANCI
Danışman: DOÇ. DR. ENDER BÜYÜKGÜZEL
Bülent Ecevit Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2015
Konu: Biyoloji = Biology
Dizin: Galleria mellonella = Galleria mellonella ; Gelişme = Development ; Pimpla turionellae = Pimpla turionellae ; Yaşama oranı = Survival rate

Özet:
Aminoglikozit bir antibiyotik olan neomisin doğal olarak Streptomyces fradies bakterisi tarafından üretilmektedir. Bakteriyel ribozomların 30 S alt birimine bazı durumlarda da 50 S alt birimine bağlanması sonucu protein sentezini başlangıç ve uzama aşamasında inhibe ederek etkilerini göstermektedir. Bu çalışmada Büyük bal mumu güvesi Galleria mellonella L. yapay besin ortamında neomisin ile beslenerek elde edilen puplar deneysel gruplarda Pimpla turionellae için doğal konak olarak kullanıldı. Deney grubunda G. mellonella birinci evre larvaları antibiyotiğin 0,005, 0,01 ve 0,5 g'larını içeren yapay besinler (g/100 gr besin) ile beslendi ve konak olarak kullanıldı. Kontrol grubunda ise neomisin içermeyen yapay besinle beslenen larvalardan elde edilen puplar konak olarak kullanıldı. Bu çalışmada, neomisin ile muamele edilen yalancı konak G. mellonella pupları ile beslenerek, uzun dönem fizyolojik stres biyoindikatörleri olarak P. turionellae larvalarının 5. evreye ulaşma oranı, pup evresine ulaşma oranı ve ergin olma oranı ile bu evrelere ulaşma süreleri belirlendi.

Neomisinin farklı konsantrasyonları ile beslenen G. mellonella pupları ile yetiştirilen P.turionellae bireylerinin 5. evreye ulaşan larva oranı, pup ve ergin olma oranı kontrol besine göre önemli derecede düşmüştür. Kontrol grubu konak puplar ile yetiştirilen P. turionellae larvalarının % 86,6'sı 5.evreye ulaşırken neomisinin % 0,005 ve 0,01'i ile beslenen konak puplarda yetiştirilen larvaların sırasıyla % 31,6 ve % 28,2'si 5. larval evreye ulaşmıştır. Neomisin içermeyen besinler ile beslenen konak puplarda yetiştirilen P. turionellae larvalarının % 79,9'u pup evresine ulaşırken neomisinin diğer konsantrasyonları bu parasitoidin pup olma oranını yaklaşık % 50 oranında düşürmüştür. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında neomisinin % 0,01'i de P. turionellae'nın pup olma oranını önemli derecede düşürmüş olup % 23'e indirmiştir. Neomisin içermeyen besinler ile beslenen G. mellonella konak puplarında yetiştirilen P. turionellae larvalarının % 78,3'ü ergin evreye ulaştığı halde neomisinin diğer konsantrasyonları ile yetiştirilen Pimpla larvalarının ergin evreye ulaşma oranlarını yaklaşık olarak 1/3 oranında azalmıştır. 

Neomisin 5. evreye ulaşma süresini önemli derecede kısaltmasına karşın larva sonrası evrelerde gelişme süresi üzerine önemli dercede etkili olmamıştır. Neomisinin en yüksek konsantrasyonu (% 0,5) P. turionellae birinci evre larvalarının 5. evreye ulaşma süresini ortalama 2 gün kısaltmıştır. Kontrol grubu konak puplar ile yetiştirlen P. turionellae larvaları ortalama 9,6 günde 5. evreye ulaştığı halde en yüksek antibiyotik konsantrasyonunda larvalar ortalama 7,4 günde 5. evreye ulaşmışlardır. Bu sonuçlar P. turionella'nın konağı aracılığıyla neomisine maruz kaldığı ve bu antibiyotiğin daha çok parazitoidin larval evresinde etkili olduğunu göstermiştir.

Abstract:
An aminoglycoside antibiotic neomycin is naturally produced from Streptomyces fradiae bacterium.This antibiotic inhibits protein synthesis at initiation and elongation stages by binding 30 S subunits, sometimes 50S subunits, of ribosomes. In this study, Galleria mellonella pupae reared on artificial diet containing neomycin will be used as natural host for Pimpla turionellae in experimental groups. In these groups, first instar larvae of G. mellonella will be reared on artificial diets containing 0.005, 0.01 or 0,5 g (g/100 gr of diet) until 7th instar larvae, the pupae from these larvae will be used as host for rearing P. turionellae. In control group, the pupae from larvae reared on artificial diets without neomycin will be used as host. As bioindicators of long-term physiological stress responses, survivorship of 7th-instar larvae, pupation and adult emergence rate and developmental time to these stages of endoparasitoid P. turionellae were determined by rearing the parasitoid on a factitious host, G. mellonella pupae treated with neomycin. 

Survivorship in 5th-instar, pupal and adult stages of P. turionellae reared on G. mellonella pupae as host fed with different concentrations of neomycin were significantly decreased in comparison to control group.  While 86.6 % of P. turionellae larvae reared on host pupae ascontrol group reached 5th-instar stage, the larvae reared on host pupae exposed with 0.005 and 
0.01 % of neomisin reached 5th-instar stage by 31.6 and 28.2% respectively. A 79.9 % of P. turionellae pupae were produced from host pupae exposed to diets without neomycin while other neomycin concentrations significantly decreased pupation rate of this parasitoid by 50%. In comparison to control group, neomycin at 0.01 % significantly decreased pupation rate of  P. turionellae to 23%. The host pupae reared on diets without neomycin produced 78.3 % of P. turionellae adults. However, adult emergence rate from hosts exposed to other neomycin concentrations was significantly decreased by a rate of 1/3 or above.

Neomycin significantly shortened developmental time to reach 5th-instar of P. turionellae while this antibiotic had no significant effects on post larval developmental stages. The highest concentrations of neomycin (0.5 %) significantly shortened developmental time to 5th instar by approximately 2 days. P. turionellae larvae reared on control host pupae reached 5th instar by about 9.6 days, while the larvae reared from host pupae exposed to highest antibiotic concentration completed their development to 5th instar by about 7.4 days. These results showed that neomycin, and possibly its metabolites, contaminated P. turionella larvae from host and affected mostly larval stages of the parasitoid.