Oleuropeinin voltaj kapılı sodyum kanalı aracılıkanser hücre hareketi üzerindeki etkisininhipoksik koşullarda araştırılması
Investigation of the effect on voltage gated sodium channelmediated cancer cell motility of oleuropein, at hypoxic conditions
Yazar: ŞİLAN GÖZENOĞLU ÜCAN
Danışman: DOÇ. DR. HATİCE AKTAŞ
Harran Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı / Biyoloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Biyoloji = Biology
Dizin: Hipoksi = Hypoxia ; Oleuropein = Oleuropein ; Prostat neoplazmları = Prostatic neoplasms ; Sodyum kanalları = Sodium channels

Özet:
Kanser, kalp hastalığından sonra dünya çapında ikinci önde gelen ölüm nedenidir. Kanserde başlıca
ölüm nedeni metastazdır. Voltaj kapılı sodyum kanalları, metastatik sürecin tüm adımlarında rol oynar.
Tümör dokusu büyüdükçe hipoksik bir ortama sahip olacaktır. Hipoksik koşullar hücre metabolizmasını
kanser hücresi lehine düzenler. Hipoksik koşullarda aktive olan hipoksi ile indüklenebilir faktör HIF,
fonksiyonel VGSC'nin ekspresyonunu arttırır, böylece metastatik süreci destekler. Antikanser ve
antimetastatik tedavilerin in vitro çalışmaları genellikle normal oksijen seviyelerinde gerçekleştirilir.
Bileşiklerin aktivitelerinin hipoksik koşullarda değerlendirilmesi daha gerçekçi sonuçlar sağlayacaktır.
Antioksidan, antiviral, antimikrobiyal ve antikanser aktivitelere sahip olduğu bildirilen oleuropeinin,
normoksik koşullar altında VGSC ekspresyonunu baskılayarak sıçan prostat kanseri hücrelerinin
hareketini engelleyebildiği de gösterilmiştir. Ancak literatürde hipoksik koşullarda oleuropeinin insan
prostat kanseri hücreleri üzerindeki etkisine ilişkin bir çalışmaya rastlanmamıştır. Bu çalışmada
oleuropein hem normoksik hem de hipoksik koşullarda 48 saat boyunca VGSC'yi eksprese eden ve
metastatik yeteneği VGSC'lerle ilişkili olan yüksek düzeyde metastatik bir insan prostat kanseri PC-3
hücre hattına uygulandı. Öncelikle hücre proliferasyonunu etkilemeyen ve hücreler üzerinde toksik
etkisi olmayan oleuropein konsantrasyonu her iki durumda da belirlendi. Daha sonra bu
konsantrasyondaki oleuropeinin hücre migrasyonu üzerindeki etkisi araştırıldı. Normoksik koşullarda
200 µM, hipoksik koşullarda 300 µM ve üzerindeki oleuropein konsantrasyonlarının doza bağlı olarak
PC-3 hücre proliferasyonunu inhibe ettiği, ancak 150 µM oleuropeinin hücre proliferasyonunu
etkilemediği ve hücreler için toksik olmadığı belirlenmiştir. Hücre proliferasyonu üzerindeki etkiyi
dışlamak için 150 µM oleuropeinin hücre migrasyonu üzerindeki etkisi incelenmiş ve bu
konsantrasyonda hücrelerin motilite indeksinde önemli bir değişiklik olmadığı tespit edilmiştir. Bu
sonuçlar bize oleuropeinin olası etkisinin farklı konsantrasyonlarda veya diğer bileşiklerle
kombinasyonlarda ve daha uzun uygulama sürelerinde tekrar test edilmesi gerektiğini göstermektedir.
Ayrıca oleuropeinin PC-3 hücre proliferasyonu üzerindeki inhibisyon aktivitesi değerlendirilmeli ve
etki mekanizması araştırılmalıdır.

Abstract:
Cancer is the second leading cause of death worldwide after heart disease. The main cause of death in
cancer is metastasis. Voltage-gated sodium channels play a role in all steps of the metastatic process.
As the tumor tissue grows, it will have a hypoxic environment. Hypoxic conditions regulate cell
metabolism in favor of the cancer cell. The hypoxia-inducible factor HIF, activated in hypoxic
conditions, increases the expression of functional VGSC, thus promoting the metastatic process. In vitro
studies of anticancer and antimetastatic therapies are generally performed at normal oxygen levels.
Evaluation of the activities of the compounds in hypoxic conditions will provide more realistic results.
It has also been shown that oleuropein, which has been reported to have antioxidant, antiviral,
antimicrobial, and anticancer activities, can inhibit the movement of rat prostate cancer cells by
suppressing the expression of VGSC under normoxic conditions. However, no study has been found in
the literature on the effect of oleuropein on human prostate cancer cells in hypoxic conditions. In this
study, oleuropein was applied to a highly metastatic human prostate cancer PC-3 cell line, which
expresses VGSC and whose metastatic ability is associated with VGSCs, for 48 hours in both normoxic
and hypoxic conditions. First, the concentration of oleuropein, which does not affect cell proliferation
and does not have a toxic effect on cells, was determined in both conditions. Then the effect of
oleuropein at this concentration on cell migration was investigated. It has been determined that
oleuropein concentrations of 200 µM in normoxic conditions and 300 µM and higher in hypoxic
conditions inhibit PC-3 cell proliferation depending on the dose, but 150 µM oleuropein does not affect
cell proliferation and is not toxic to cells. To exclude the effect on cell proliferation, the effect of 150
µM oleuropein on cell migration was examined, and it was found that there was no significant change
in the motility index of the cells at this concentration. These results show us that the possible effect of
oleuropein should be tested again with different concentrations or combinations with other compounds
and longer application times. In addition, the inhibition activity of oleuropein on PC-3 cell proliferation
should be evaluated, and its mechanism of action should be investigated.