Albino sıçanlarda ultraviyole B ile indüklenmiş deri hasarı modelinde arı sütünün antiapoptotik, antigenotoksik ve antioksidan etkisinin moleküler, biyokimyasal ve stereolojik yöntemlerle araştırılması
Investigation on the antiapoptotic, antigenotoxic and antioxidant effects of royal jelly BY molecular, biochemical and stereological methods in ultraviolet B-induced skin damage model of albino rats
Yazar: BURCU ZORER
Danışman: DOÇ. DR. HALİL ÖZKOL ; DOÇ. DR. YASİN TÜLÜCE
Yüzüncü Yıl Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Antioksidanlar = Antioxidants ; Apoptozis = Apoptosis ; Arı sütü = Royal jelly ; Genotoksisite = Genotoxicity ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Stereoloji = Stereology ; Sıçanlar = Rats ; Ultraviyole ışınlar = Ultraviolet rays

Özet:
Yapılan önceki bazı çalışmalarda ultraviyole B (UVB) radyasyonunun oksidatif stres ve DNA hasarına neden olduğu, arı sütünün (AS) ise antioksidan özellik gösterdiği bildirilmektedir. Bu çalışmada, deneysel olarak oluşturulan UVB hasarına karşı AS'nin farklı dozlardaki tedavi etkinliğini literatüre göre ilk kez araştırıldı. Bu amaçla, oksidatif stres, genotoksisite ve apoptozda meydana gelen değişiklikler stereolojik inceleme ile birlikte değerlendirildi. Herbiri 6 Wistar türü albino erkek sıçandan oluşan 5 grup oluşturuldu. Bu gruplar kontrol (K), UVB, AS 150 mg/kg (AS150), UVB+AS 100 mg/kg (UVB + AS100) ve UVB+AS 200 mg/kg (UVB+AS200) olarak isimlendirildi. UVB, UVB+AS100 ve UVB+AS200 grubundaki hayvanlar 30 gün boyunca günde 2 saat süreyle UVB ışınına maruz bırakıldı. AS150, UVB+AS100 ve UVB + AS200 grubundaki hayvanlara ise 30 gün boyunca gün aşırı olarak sırasıyla 150, 100 ve 200 mg/kg arı sütü verildi. Bütün hayvanlar otuzuncu günde sakrifiye edildi. Analizler için kan ve deri dokuları alındı. UVB grubuna ait TOS değeri diğer bütün gruplara göre anlamlı derecede (p<0.01) yükseldi. AS verilen gruplarda ise UVB grubuna göre TOS değerinde anlamlı derecede (p<0.01) düşüşler saptandı. K grubu ile mukayese edildiğinde UVB grubunda TAS istatistiksel olarak anlamlı derecede (p<0.01) düşerken, AS150 grubunda tekrardan anlamlı (p<0.01) olarak artmıştır. OSI değerine gelince, UVB grubunda K'ya göre anlamlı (p<0.001) bir artış, AS150 ve UVB+AS200 gruplarında ise UVB grubuna göre anlamlı düşüşler (p<0.001) görülmüştür. Çalışmamızın apoptoz görüntüsü analiz edildiğinde K ve AS150 gruplarında DNA kırığının az olduğu, UVB hasarı oluşturulan gruplarda ise DNA kırıklarının arttığı görülmüştür. UVB+ AS100 ve UVB+AS200 gruplarında ise kırıkların olduğu ancak UVB grubuna göre kırıkların azaldığı tesbit edilmiştir. UVB grubuna ait comet assay analiz sonucu diğer bütün gruplara göre anlamlı derecede (p<0.001) yüksekti. Bu analizin sonucu AS'nin uygulandığı bütün gruplarda çarpıcı şekilde (p<0.001) düşmüştür. Stereoloji değerleri (hacim fraksiyonu) bakımından gruplar karşılaştırıldığında UVB grubunda K'ya göre artış, AS150, UVB+AS100 ve UVB+AS200 gruplarına göre ise azalış görülmektedir. Bu çalışma, arı sütünün UVB hasarının tedavisinde faydalı olabildiğini ortaya çıkarmıştır. Burada elde edilen bulguların desteklenmesi için daha ileri çalışmalara ihtiyaç vardır. 

Anahtar sözcükler: Sıçan, Apoptoz, Genotoksisite, Oksidatif stres, UVB, Arı sütü, Stereoloji

Abstract:
Ultraviolet B (UVB) was reported to cause oxidative stress, DNA damage and royal jelly (RJ) was informed to exhibit antioxidant feature in some previous studies. In this study, for the first in the literature, treatment effectiveness of different doses of RJ was investigated against experimentally formed UVB damage. For this purpose, changes which occurred in oxidative stress, genotoxicity and apoptosis were evaluated together with stereological examination. Five equal groups were constituted each including 6 Wistar albino rats. These groups were named as control (C), UVB, RJ 150 mg/kg (RJ150), UVB+RJ 100 mg/kg (UVB+RJ100) and UVB+RJ 200 mg/kg (UVB+RJ200). The animals of UVB, UVB+RJ100 and UVB+RJ200 groups were exposed to UVB radiation for 2 hours once a day during 30 days. RJ was given to rats of RJ150, UVB+RJ100 and UVB+RJ200 groups at 150, 100 and 200 mg/kg doses respectively. All animals were sacrificed on the 30th day. Blood and skin samples were taken for analysis. TOS level of group UVB was significantly (p<0.01) higher compared to all other groups. Marked (p<0.01) decreases of TOS were determined in RJ treated groups comparing to UVB group. When compared with C group, TAS level decreased dramatically (p<0.01) in UVB group whereas significantly (p<0.01) increased again in RJ150 group. With regard to OSI value, its significant (p<0.001) increase was seen in UVB group compared to C and its marked (p<0.001) decrease was seen in RJ150 and UVB+RJ200 groups compared to UVB group. When apoptotic image of our study is analyzed, less DNA fracture was seen in C and RJ150 groups whereas increased DNA fracture was seen in groups where UVB damage was formed. Decrement of DNA fracture was determined in UVB+RJ100 and UVB+RJ200 groups compared to UVB. Comet assay analyze result of UVB group was significantly (p<0.001) higher than those of all other groups. This result was markedly (p<0.001) lower in all RJ treated groups compared to UVB group. When stereological values (volume fraction) were evaluated, a dramatical (p<0.001) increment was seen in UVA group compared to C. This study revealed that RJ could be beneficial in the treatment of UVB damage. Further studies are needed to verify results of this study.

Key words: Rat, Apoptosis, Genotoxicity, Oxidative stress, UVB, Royal jelly, Stereology