İnflamatuvar bağırsak hastalığı modelinde nanopartiküler sistemlerin in vitro/in vivo değerlendirilmesi
In vitro/in vivo evaluation of nanoparticular systems in inflammatory bowel disease model
Yazar: SERKAN YENER
Danışman: PROF. DR. FÜSUN ACARTÜRK
Gazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2013
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Antioksidanlar = Antioxidants ; Crohn hastalığı = Crohn disease ; Kolit-ülseratif = Colitis-ulcerative ; Melatonin = Melatonin ; Nanopartiküller = Nanoparticles ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Pektin = Pectin ; Sitokinler = Cytokines ; Yapay sinir ağları = Artificial neural networks ; İnflamatuar bağırsak hastalıkları = Inflammatory bowel diseases

Özet:
Bu çalışmada, melatonin kullanılarak kolona hedeflendirilmiş, nanopartiküler ilaç taşıyıcı sistemlerin oluşturulması, bunların karakterize edilmesi, hazırlanan formülasyonların in vitro salım çalışmalarının yapılması ve yapay sinir ağı modellemesi sonucunda elde edilen veriler doğrultusunda uygun olduğuna karar verilen formülasyonun, TNBS ile kolit indüklenmiş sıçanlarda kolit üzerindeki etkisinin değerlendirilmesi amaçlanmıştır.Modifiye edilen iyonotopik jelasyon yöntemiyle melatonin yüklü, kalsiyum pektinat nanopartikül formülasyonları hazırlanmıştır. Hazırlanan nanopartikül formülasyonları partikül büyüklüğü, zeta potansiyel, PDI değerleri kullanılarak karakterize edilmiştir, in vitro salım çalışmaları gerçekleştirilmiş ve mukoadezyon özellikleri incelenmiştir.AFM ve TEM teknikleri kullanılarak nanopartiküllerin görüntüsü elde edilmiştir.Yapay sinir ağı modellemesi sonucunda elde edilen veriler doğrultusunda uygun olduğuna karar verilen formülasyon seçilerek in vivo çalışmalarda kullanılmıştır.İn vivo çalışmalarda Wistar erkek sıçanlar kullanılmıştır. TNBS ile kolit oluşturulan sıçanlara, oral ve intrakolonik yoldan 10 mg/kg dozunda MEL yüklü nanopartikül formülasyonu, dört gün süreyle verilmiş ve elde edilen sonuçlar oral ve intrakolonik yoldan boş nanopartikül formülasyonu verilen sıçanlarınki ile karşılaştırılmıştır.Tedavinin sonunda kolon dokusundaki oksidatif parametreler (NOx, MDA ve GSH) ve sitokin düzeyleri (TNF-?, IL-10 ve IL-17) ölçülmüştür. Oral ve intrakolonik yoldan melatonin tedavisi uygulanan gruplarda kolonik NOx ve MDA düzeyleri boş nanopartikül formülasyonu verilen gruplara kıyasla anlamlı olarak azalmış, GSH düzeyleri ise anlamlı olarak artmıştır. Ayrıca proinflamatuvar TNF-?, IL-17 ve antiinflamatuvar IL-10 sitokin düzeyleri ise anlamlı olarak azalmıştır.Histolojik bulgalara göre, oral ve intrakolonik yoldan melatonin yüklü nanopartikül tedavisi uygulanan gruplarda doku iyileşmesinin boş nanopartikül formülasyonu verilen gruplara kıyasla daha iyi olduğu görülmüştür.Elde edilen sonuçlar, hazırlanan melatonin yüklü nanopartikül formülasyonunun, İBH'da oksidatif strese bağlı olarak gelişen kolonik doku hasarında etkili olabileceğini göstermektedir.

Abstract:
The aim of this study was to formulate colon targetted nanoparticular drug carrier systems of melatonin, characterization of them, conducting in vitro release studies of the prepared formulations and to determine the effect of the formulation which was found to be suitable as a result of artifical neural network modelling, on TNBS induced colitis in rats.Melatonin loaded calcium pectinate nanoparticle formulations prepared with modified ionotropic gelation method. Prepared nanoparticle formulations characterized by particle size, zeta potential and polydispersity index, the in vitro release studies were performed and mucoadhesion were investigated.AFM and TEM techniques are used to obtain nanoparticle images.The formulation which was found to be suitable as a result of artifical neural network modelling was used in in vivo studies.Wistar male rats were used in in vivo studies. 10 mg/kg melatonin loaded nanoparticle formulation was given oral and intracolonic route to TNBS induced colitis rats for four days. The obtained results are compared with the results of the rats which was given blank nanoparticle formulation.At the end of the treatment, oxidative parameters (NOx, MDA ve GSH) of the colonic tissue and cytokine levels was evaluated. Colonic tissue NOx and MDA levels in the group treated with melatonin by oral and intracolonic route were found to be lower compared to the groups which treated with blank nanoparticle formulation. Colonic tissue GSH levels in the group treated with melatonin by oral and intracolonic route were found to be higher compared to the groups which treated with blank nanoparticle formulation. Also proinflammatory TNF-?, IL-17 levels and antiinflammatory IL-10 levels in the group treated with melatonin by oral and intracolonic route were found to be lower compared to the groups which treated with blank nanoparticle formulation.According to histological findings, the tissue healing in the group treated with melatonin loaded nanoparticle formulation by oral and intracolonic route was found better than the group treated with blank nanoparticle formulation.The results of the experiments showed that, melatonin loaded nanoparticle formulation can be effective in colonic tissue damage which develops due to oxidative stress in IBD.