Rheum ribes L. tıbbi bitkisinden elde edilen ekstraktların 3T3-L1 hücre hattında obezite ve insülin direnci ile ilgili etkisinin transkripsiyonel düzeyde incelenmesi
Transcriptional investigation of the effect of extracts from Rheum ribes L. medicinal plant on obesity and insulin resistance in 3T3-L1 cell line
Yazar: HASRET KAYA
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ FİLİZ ALTAN
Muğla Sıtkı Koçman Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2021
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine
Dizin: Obezite = Obesity ; Rheum ribes L. = Rheum ribes L. ; İnflamasyon = Inflammation ; İnsülin direnci = Insulin resistance

Özet:
Obezite, gelişmiş ülkelerde kendini gösteren düşük dereceli inflamatuar bir hastalık olup, büyük sağlık sorunlarına sebebiyet vermektedir. Adipositlerin boyutunun veya sayısının artmasıyla oluşan aşırı yağ dokusu birikimi, Tip II diyabet, kanser, hipertansiyon, insülin direnci gibi bir dizi hastalıklarla ilişkilidir. Genetik (metabolik hız) ve çevresel faktörler (sağlıksız beslenme ve fiziksel hareketsizlik) obeziteyle pozitif korelasyon içerisinde seyretmektedir. Bitki kaynaklı bileşikler; antidiyabet, antikanser, antiobezite, antihipertansiyon, antioksidan ve antiinflamatuar gibi çeşitli biyolojik etkileri nedeniyle çok önemlidir. Rheum ribes, eski çağlardan beri Türkiye'de ve dünyada tıbbi ilaç kaynağı olarak kullanılmaktadır. Rheum ribes bitkisi geleneksel olarak diyabet, hipertansiyon, yüksek kolesterol, kabızlık, sedef hastalığı, ülser, ishal, yara ve kesik tedavisinde kullanılmaktadır. Bitkinin kan şekerini düşürücü aktivitesi yapılan çalışmalar sonucunda ortaya konulmuştur. Bu bitkinin obezite ve sindirim sorunlarına karşı tüketildiği literatüre dahil edilmiştir fakat çok fazla çalışma bulunmamaktadır. Bu çalışma ile Rheum ribes bitkisinin obezite ve insülin direnci ile ilişkili moleküler mekanizması aydınlatılmak istenmiştir. Farklılaştırılan 3T3-L1 adiposit hücrelerine bitki eksraktları verildikten sonra total RNA izolasyonu gerçekleştirilmiştir. RNA'dan cDNA analizlerine gidildikten sonra elde edilen cDNA örnekleriyle qPCR analizleri gerçekleştirilmiştir. Kontrol grupları ve bitki ektrakt uygulaması yapılan hücrelerin Real Time PCR yöntemi ile obezite (Dgat1, Lpl ve Fasn), inflamasyon (Mcp1 ve Il-6), insülin direnci (Irs-1) ve ekstrasellüler matriks (Col V) ile ilişkili olduğu bilinen ve NCBI üzerinden tasarlanılan primerler ile denemeler kurulmuştur. Housekeeping gen olarak 18S kullanılarak normalizasyon sağlanmıştır. Çalışma sonucunda Dgat1, Lpl, Fasn, Col V, Il-6 ve Mcp1 ekspresyonlarında azalma gözlemlenmiş ve bu değişimler istatistiki olarak anlamlı bulunmuştur.

Abstract:
Obesity is a low-grade inflammatory disease that manifests itself in developed countries and causes major health problems. Excessive accumulation of adipose tissue, which occurs by increasing the size or number of adipocytes, is associated with a number of diseases such as Type II diabetes, cancer, hypertension, insulin resistance. Genetic (metabolic rate) and environmental factors (unhealthy diet and physical inactivity) are positively correlated with obesity. Compounds of plant origin; It is very important because of its various biological effects such as antidiabetes, anticancer, antiobesity, antihypertension, antioxidant and anti-inflammatory. Rheum ribes has been used as a source of medicinal drugs in Turkey and the world since ancient times. Rheum ribes plant is traditionally used in the treatment of diabetes, hypertension, high cholesterol, constipation, psoriasis, ulcers, diarrhea, wounds and cuts. The blood sugar-lowering activity of the plant has been demonstrated as a result of studies. It has been included in the literature that this plant is consumed against obesity and digestive problems, but there are not many studies. In this study, it was aimed to elucidate the molecular mechanism of Rheum ribes plant associated with obesity and insulin resistance. After the plant extracts were given to the differentiated 3T3-L1 adipocyte cells, total RNA isolation was performed. After going to cDNA analysis from RNA, qPCR analyzes were performed with the cDNA samples obtained. It is known that control groups and plant extract treated cells are associated with obesity (Dgat1, Lpl and Fasn), inflammation (Mcp1 and Il-6), insulin resistance (Irs-1) and extracellular matrix (Col V) by Real Time PCR method. Trials were set up with primers designed via NCBI. Normalization was achieved by using 18S as the housekeeping gene. As a result of the study, a decrease in the expressions of Dgat1, Lpl, Fasn, Col V, Il-6 and Mcp1 was observed and these changes were found to be statistically significant.