Ailevi akdeniz ateşi (AAA) hastalarında inflamatuvar hücre göçünün incelenmesi
Investigation of inflammatory cell migration in familial  mediterranean fever (FMF) patient
Yazar: EDİBE AVCI
Danışman: DOÇ. DR. BANU PEYNİRCİOĞLU
Hacettepe Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Ailesel akdeniz ateşi = Familial mediterranean fever ; Aktinler = Actins ; Hücre hareketleri = Cell movement ; Nötrofiller = Neutrophils ; Pirin = Pyrin ; İnflamasyon = Inflammation

Özet:
Ailevi Akdeniz ateşi (AAA), Pyrin proteinini kodlayan MEFV genindeki mutasyonlar sonucu oluşan otoinflamatuvar bir hastalıktır. AAA patogenezinden sorumlu Pyrin proteininin işlevi halen bilinmemekle beraber, ilişkide olduğu proteinler aracılığıyla inflamatuvar yolaklarda görev aldığı düşünülmektedir. Literatürde Pyrin'in proinflamatuvar bir düzenleyici olabileceği fikrini destekleyen çalışmalar mevcuttur. Tez çalışması kapsamında, klinik değerlendirmeler sonucu AAA tanısı almış ve genetik analizler ile her iki alleli de M694V mutasyonu için homozigot olduğu gösterilmiş 12 hasta ve 11 kontrol bireyden alınan kan örneklerinden izole edilen nötrofil hücrelerinde inflamatuvar hücre göçü araştırılmıştır.  Hücreler, inflamatuvar göçü tetiklemek amacıyla fMLP (N-formyl-Met-Leu-Phe) ile uyarılmıştır. Filtre deneyleri ile kemoatraktan gradiyenti boyunca göç eden sağlıklı ve hasta bireylerin hücreleri sayı bakımından karşılaştırılmıştır. fMLP uygulanmış ve fMLP uygulanmamış koşulda hasta nötrofillerinde kontrol nötrofillerine kıyasla hücre göçü oranında istatistiksel olarak anlamlı bir artış bulunmuştur (p<0.05). Floresan boyama yöntemi ile polarizasyon oranları çıkarılmıştır. Bu boyamaların sonucuna göre, uyarılan hasta nötrofillerinde %52 oranında, kontrol bireylerde ise %40 oranında polarizasyon gözlemlenmiştir (p<0.05). Ek olarak, hasta ve kontrol nötrofillerinde Pyrin proteininin aktin ile beraber polarize uçtaki eş yerleşimi gösterilmiştir. Elde edilen bu bulgular, Pyrin'in inflamatuvar süreçte pro-inflamatuvar bir molekül olarak işlev gördüğü ve AAA hastalarında artan hücre göçü nedeniyle ağır bir klinik fenotipe yol açabileceği hipotezini desteklemektedir. Sonuç olarak, bu çalışmanın Pyrin proteininin inflamatuvar hücre göçündeki olası rolünü aydınlatmaya yardımcı olacağı düşünülmektedir.

Abstract:
. Familial Mediterranean fever (FMF) is an autoinflammatory disease caused by mutations in MEFV gene encoding Pyrin protein. Although the function of Pyrin responsible for FMF pathogenesis is unknown, it is considered to regulate inflammatory pathway via interactions with its protein partners. There is a growing data supporting the view that Pyrin may be a proinflammatory regulator. In this study, inflammatory migration was investigated in primary neutrophils isolated from blood samples of 11 healthy individuals and 12 FMF patients that are homozygous for M694V mutation. fMLP (N-formyl-Met-Leu-Phe) was used to stimulate cells in order to trigger inflammatory migration. Neutrophil migration rate of FMF patients and healthy individuals were quantified by filter assays. Both non-fMLP and fMLP-mediated chemotaxis in patient cells were increased significantly compared to healthy individuals (p<0.05). The polarization rates between individuals were detected by fluorescence staining. The polarization rate of neutrophils, for fMLP-mediated condition was over 52% in FMF patients while it was 40% in healthy controls (p<0.05). In addition, Pyrin-actin co-localization was shown in neutrophils of FMF patients and healthy controls. These results suggest that Pyrin may play a crucial role as a pro-inflammatory regulator in inflammation and increase neutrophil migration in FMF patients. Consequently, this study may hopefully contribute to enhance our understanding of potential role of Pyrin in inflammatory cells during inflammation.