Sıçanlarda DOCA-tuz modeli ile oluşturulan hipertansiyona bağlı damar endotel disfonksiyonu parametreleri ve ROCK ekspresyonu ve aktivasyonunun karşılaştırılması
The comparison of the hypertension dependent endothelial dysfunction parameters and, ROCK expression and activation in the DOCA-salt hypertensive rats
Yazar: SEVTAP HAN
Danışman: YRD. DOÇ. DR. MECİT ORHAN ULUDAĞ
Gazi Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2010
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Enzimler = Enzymes ; Hipertansiyon = Hypertension ; Kan basıncı = Blood pressure ; Rhokinaz = Rhokinase ; Sıçanlar = Rats ; Tuz = Salt

Özet:
Bu çalışmanın amacı; DOCA-Tuz hipertansiyon modeli uygulanan sıçanlarda hipertansiyona bağlı damar endotel disfonksiyon parametreleri ile ROCK ekspresyonu ve aktivasyonunun incelenmesidir.Çalışmada dört farklı deney grubu kullanılmıştır: 4 hafta kontrol, 4 hafta DOCA-tuz, 12 hafta kontrol ve 12 hafta DOCA-tuz. DOCA gruplarına haftada iki kez 15 mg/kg DOCA enjeksiyonu ek olarak %1 NaCl ve %0.2 KCl içeren içme suyu uygulanmıştır. Tüm grupların kan basıncı değerleri haftalık olarak ölçülmüştür. 4 ve 12 hafta sonunda izole edilen torasik aort halkaları izole organ deneylerinde kullanılmıştır. Fenilefrinle kastırılmış dokularda 10-5-10-8M asetilkolin konsantrasyon-cevap eğrileri çıkarılmıştır. Ayrıca bu aortların bir kısmında western blot yöntemi ile ROCK I, ROCK II ve pMYPT ekspresyonları incelenmiştir.Deneylerin sonucunda DOCA uygulanan gruplardaki kan basıncı değerlerinin 1. haftadan başlayarak anlamlı olarak arttığı bulunmuştur. Asetilkolin gevşeme yanıtlarından elde edilen EC50 değerleri, 4 ve 12 hafta DOCA-tuz gruplarında kontrole göre anlamlı olarak değişmezken, Emaks değerlerinin anlamlı olarak azaldığı tespit edilmiştir. ROCK I, ROCK II ve pMYPT ekspresyonları hipertansiyona bağlı olarak değişmemiştir. ROCK I ekspresyonu hem kontrol hem de DOCA gruplarında yaşa bağlı olarak anlamlı olarak artmıştır. ROCK II ekspresyonu ise 12 hafta kontrol grubunda, 4 hafta kontrol grubuna göre anlamlı olarak azalmıştır. pMYPT ekspresyonunda, 4 hafta ve 12 hafta DOCA-tuz uygulanmış gruplar arasındaki fark istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur.Bu sonuçlar, DOCA-tuz uygulamasıyla indüklenen hipertansiyona bağlı olarak endotel disfonksiyonu geliştiğini, fakat disfonksiyonun derecesinin hipertansiyonun süresine göre değişmediğini ve ROCK ekspresyonu ve aktivasyonunun DOCA-tuz hipertansiyon modeline aracılık etmediğini düşündürmekle birlikte, kas kasılmasında rol oynayan ROCK proteinlerinin ekspresyon ve aktivasyonunun yaşa bağlı olarak değişiklik gösterdiğine işaret etmektedir.

Abstract:
The aim of the present study was to investigate hypertension dependent endothelial dysfunction parameters and, ROCK expression and activation in the DOCA-salt hypertensive rats.Male Wistar rats (8 weeks old) were used, and rats were divided into four grups: 4 weeks control, 4 weeks DOCA-salt, 12 weeks control and 12 weeks DOCA-salt. Nephrectomised rats were given DOCA injections (15 mg/kg, sc) twice weekly, and 1% NaCl and 0.2% KCl were added to their drinking water. Systolic blood presures were measured once a week by tail-cuff method. Thoracic aortas were dissected and mounted in the isolated tissue bath. Cumulative concentration-response curves were performed for acetylcholine (10-5-10-8 M) in the presence of a submaximal contraction to phenylephrine. Also ROCK I, ROCK II and pMYPT expressions were determined by using western blot technique.DOCA-salt rats showed an increase in systolic blood pressure compared to animals of the control group and this increment was significant (p<0.05) from the first week. In DOCA-salt hipertensive rats, lower maximal response to Ach was observed compared to control rats, whereas EC50 values for both of 4 and 12 weeks groups were unchanged. Protein levels of ROCK I, ROCK II and pMYPT were not altered in DOCA-salt hypertension. ROCK I expression was significantly increased in control and DOCA groups with aging. Expression of ROCK II significantly decreased in 12 weeks control group compare to 4 weeks control group. Also, The difference between pMYPT expressions of 4 weeks and 12 weeks DOCA-salt groups was significant statistically.These results suggest that while endothelial dysfunction developed in DOCA-salt hypertension, the level of dysfunction did not change during hypertension period and, ROCK expression and activation may not contribute to the mechanism of DOCA-salt hypertension.