Primer siliyer diskinezi (PCD) hastalarında dış dynein kolu (ODA) defektleri ile silyum ön yapım proteinlerinin ilişkisinin histolojik olarak araştırılması
Histological investigation of the relationship between external dynein arm (ODA) defects and cilium preforming proteins in primary ciliary dyskinesia (PCD) patients
Yazar: İLKER LEVENT ERDEM
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ ELİF BİLGİÇ
Hacettepe Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Genetik = Genetics ; Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology ; Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases
Dizin: Dinein = Dynein ; Diskineziler = Dyskinesias ; Histoloji = Histology ; Motor proteinler = Motor proteins ; Nadir hastalıklar = Rare diseases ; Silyum = Cilium

Özet:
Primer siliyer diskinezi (PCD) hastalarında dış dynein kolu (ODA) defektleri ile silyum ön yapım proteinlerinin ilişkisinin histolojik olarak araştırılması, Hacettepe Üniversitesi Tıp Fakültesi, Histoloji ve Embriyoloji Uzmanlık Tezi, Ankara, 2022. Primer siliyer diskinezi (PCD), nadir ve otozomal resesif geçişli, sinopulmoner enfeksiyonlar ile karakterize ve motil silyum/flagellumun defektine bağlı oluşan bir hastalıktır. Aksonem yapısında mikrotübül düzenlenmesine sahip olan silyumun içerdiği yapısal proteinlerin PCD'li bireylerin genetik heterojenitesine bağlı olarak defektleri gözlenmektedir. Zinc finger MYND domain-containing protein 10 (ZMYND10); dış dynein kolu (ODA) ve siliyer yapı elementlerinin ön yapımında görevli olan proteindir. GRP78 moleküler bir şaperon olarak çalışmaktır. Bu araştırmaya, Hacettepe Üniversitesi Tıp Fakültesi Çocuk Göğüs Hastalıkları Bölümü'nde klinik ve genetik olarak PCD ön tanısı (ODA defekti) almış yaşları 14-23 olan 8 adet hasta birey dahil edilmiştir. Hastaların nazal sürüntü örnekleri DNAH5-asetile beta tübülin, RSPH9-ZMYND10 ve RSPH9-GRP78 antikorları ile çift işaretleme yapılmıştır ve floresan mikroskopta değerlendirmeler yapılmıştır. İmmünofloresan işaretlemelerinde DNAH5 mutasyonlu hastaların %75'inde; DNAH5 ve ZMYND10 floresan işaretlenmesi gözlenmemiştir.  Kontrol ve hastaların DNAH5 ve ZMYND10 düzeltilmiş toplam hücre floresan (CTCF) ölçümlerinin ortalama değerleri arasında anlamlı fark bulunmuştur. Hastaların %63'ünde GRP78 floresan işaretlenmesi gözlenmemiştir ve kontrole göre anlamlı fark bulunmuştur. Bu bulgular sonucunda aynı DNAH5 geninde farklı mutasyona sahip ODA defekti olan hastaların; silyum ön yapımında görevli ZMYND10 ve şaperon proteini olan GRP78 proteinleri ile ilişkisinin olduğu kalitatif olarak gösterilmiştir.

Abstract:
Histological investigation of the relationship between external dynein arm (ODA) defects and cilium preforming proteins in primary ciliary dyskinesia (PCD) patients, Hacettepe University Faculty of Medicine, Histology and Embryology Specialization Thesis, Ankara, 2022. Primary ciliary dyskinesia (PCD) is rare and autosomal recessive, a transmissible disease characterized by sinopulmonary infections and caused by a defect in the motile cilium/flagellum. Defects of the structural proteins contained in the cilium, which has a microtubule arrangement in the axoneme structure, are observed due to the genetic heterogeneity of individuals with PCD. Zinc finger MYND domain-containing protein 10 (ZMYND10); It is the protein that is responsible for the pre-production of outer dynein arm (ODA) and ciliary structure elements. GRP78 function is to work as a molecular chaperone. Eight patients aged 14-23 who had clinically and genetically prediagnosed PCD (ODA defect) in Hacettepe University Faculty of Medicine, Department of Pediatric Chest Diseases were included in this study. Nasal swab samples of the patients were double-labeled with DNAH5-acetylated beta tubulin, RSPH9-ZMYND10 and RSPH9-GRP78 antibodies and evaluated under fluorescent microscope. In 75% of patients with DNAH5 mutations in immunofluorescence markings; No fluorescent labeling of DNAH5 and ZMYND10 was observed. There was a significant difference between the mean values of DNAH5 and ZMYND10 corrected total cell fluorescence (CTCF) measurements of control and patients. Fluorescent labeling of GRP78 was not observed in 63% of the patients, and a significant difference was found compared to the control. As a result of these findings, patients with ODA defect with different mutations in the same DNAH5 gene; it has been shown qualitatively that it has a relationship with ZMYND10, which is involved in cilium preconstruction, and GRP78, which is a chaperone protein.