Glioblastoma, kondrosarkoma ve mezotelyoma hücrelerinde zingeron etkisinin in vitro incelenmesi
In vitro investigation of the effect of zingeron on cells ofmesothelioma, glioblastoma and condrosarcoma
Yazar: MEHMET DELİBAŞ
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ SABAHATTİN CÖMERTPAY
Kahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2020
Konu: Moleküler Tıp = Molecular Medicine

Özet:
Kanser, hücrenin düzensizce bölünerek işlevsizleşmesine neden olan, çeşitli genetik değişikliklerden kaynaklanan bir hastalık adıdır. Glioblastoma multiforme (GBM) en sık görülen birincil insan beyin tümörü formlarındandır ve oldukça invaziftir. Kondrosarkom, kıkırdak dokusu oluşturan kondrositlerden köken almaktadır ve kemik kanserleri arasında en sık görülen ikinci malign tümör tipini oluşturur. Mezotelyoma; akciğer, kalp ve karın zarında gelişen, nadir görülen ancak oldukça öldürücü bir kanser türüdür. Geleneksel kanser tedavilerine karşı yanıtı oldukça düşük olan glioblastoma, kondrosarkoma ve mezotelyoma için bilinen etkili bir tedavi yöntemi henüz bulunmamaktadır. Zingeron, zencefil (Zingiber officinale) bitkisinde bulunan bir biyoaktif fenolik bileşiktir. Zingeronun başka kanser hücreleri üzerinde etkilerini inceleyen çalışmalar olmasına karşın, glioblastoma (YKG-1), kondrosarkoma (OUMS) ve mezotelyoma (H2452) hücre hatları üzerine etkileri yeterince araştırılmamıştır. Bu tezin amacı; in vitro koşullar altında zingeronun YKG-1, OUMS ve H2452 hücre hatları üzerindeki sitotoksisitesini MTS ile tespit etmek, DNA fragmantasyon deneyi aracılığıyla gözlenen ölümlerin apoptotik ölüm olup olmadığını değerlendirmek, yara iyileştirme ve koloni oluşturma deneyleriyle hücrelerin invazyon ve metastaz yeteneklerindeki değişim hakkında fikir sahibi olmak ve hücrelerin toplam antioksidan protein miktarındaki değişimi DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) süpürme deneyi ile ortaya koymaktır. Sonuç olarak; YKG-1, OUMS ve H2452 için zingeronIC50 değerleri sırasıyla 17,825 mM, 15,875 mM ve 12,96 mM olarak belirlenmiş ve her hücre tipi için hesaplanan değerler arasında istatistiksel bir fark bulunmamıştır (p>0.05). Her üç hücre için de 24, 48, 72 ve 96 saatlik zingeron muamelesinin DNA fragmantasyonuna neden olmadığı gözlenmiş, ancak zingeron ile muamele edilmiş hücrelerin yara iyileştirme hızının etanol ve kontrole göre önemli bir biçimde azaldığı sonucuna ulaşılmıştır (p <0.05).  Ayrıca, IC50/5 derişiminde zingeron uygulanan tüm hücrelerin için koloni oluşturma yeteneklerinin tamamen ortadan kaldırıldığı tespit edilmiştir. Son olarak, zingeron uygulanan YKG-1 hücrelerinden elde edilen proteinlerin antioksidan potansiyellerinin yükseldiği gözlenmiştir.

Abstract:
Cancer is a disease caused by various genetic changes that cause the cell to disintegrate irregularly. Glioblastoma multiforme (GBM) is one of the most common forms of primary human brain tumor and is highly invasive. Chondrosarcoma originates from chondrocytes forming cartilage tissue and is the second most common malignant tumor type among bone cancers. Mesothelioma; It is a rare but highly lethal cancer that develops in the lung, heart and abdominal membranes. There is no known effective treatment for glioblastoma, chondrosarcoma and mesothelioma, which have relatively low responses to conventional cancer treatments. Zingeron is a bioactive phenolic compound found in the ginger (Zingiber officinale) plant. Although there are studies investigating the effects of zingeron on other cancer cells, its effects on glioblastoma (YKG-1), chondrosarcoma (OUMS) and mesothelioma (H2452) cell lines have not been investigated sufficiently. The aim of this thesis is; To determine the cytotoxicity of zingeron on YKG-1, OUMS and H2452 cell lines under in vitro conditions by MTS, to evaluate whether the deaths observed through are apoptotic DNA fragmantation test, to have an idea about the change in invasion and metastasis ability of the cells by wound healing and colony forming experiments, and to evaluate the change in total antioxidant protein content of the cells by DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl) sweep assay. As a result; Zingerone IC50 values for YKG-1, OUMS and H2452 were determined as 17.825 mM, 15.875 mM and 12.96 mM, respectively, and there was no statistical difference between the calculated values for each cell type (p> 0.05). It was observed that 24, 48, 72 and 96 hours of zingeron treatment did not cause DNA fragmantation for all three cells, but the wound healing rate of the zingeron treated cells decreased significantly compared to ethanol and control (p <0.05). In addition, it was found that the ability of colony formation to be completely abolished for all cells treated with zingerone at IC50/ 5 concentration. Lastly, antioxidant potentials of proteins obtained from YKG-1 cells treated with zingeron were increased.