Vajen kaynaklı Lactobacillus spp.'nin ekzopolisakkarit (EPS) üretimlerinin antibiyotik dirençliliğine ve epitel hücre yüzeylerine yapışmadaki etkisi
Effect of exopolysaccharide (EPS) production by Lactobacillus spp. originated from vagina on antibiotic susceptibility and adhesion on cell surface
Yazar: ESİL HALİT
Danışman: PROF. DR. YAVUZ BEYATLI
Gazi Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Biyoloji = Biology ; Biyoteknoloji = Biotechnology ; Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Probiyotikler = Probiotics

Özet:
Bu çalışmada 57 adet vajen kaynaklı Lactobacillus spp. suşununekzopolisakkarit (EPS) üretimi ve hemaglutinasyon (HA) yetenekleriaraştırılmıştır. Bu suşların yüzeye tutunma kabiliyetleri in vitro olarak HA jelyöntemi ile ölçülmüştür. Suşların EPS (Ekzopolisakkarit) üretimleri 20-368mg/L arasında tespit edilmiştir. Ayrıca, suşların %77,2' sinin yüksek (+4,+3),%12' sinin HA göstermediği belirlenmiştir. Maksimum (368 mg/L) EPS üretimigösteren L. crispatus G10 suşunun, aynı zamanda yüksek HA yeteneğine sahipolduğu belirlenmiştir. EPS üretimi (30 mg/L) düşük olan L. acidophilus I4suşunun HA göstermediği tespit edilmiştir. Lactobacillus spp. suşlarının 12 adetantibiyotiğe duyarlılık testi disk difüzyon yöntemine göre yapılmış, sonuçlarNCCLS kriterlerine göre değerlendirilmiştir. Lactobacillus suşlarınıngentamisin (%100), ofloksasin (%98), siproflaksasin (%96) ve streptomisin'e(%88) karşı yüksek oranda dirençli oldukları gözlenirken, doksisiklin (%100),kloramfenikol (%98), tetrasiklin (%91) ve eritromisin'e (%89) duyarlı olduklarıtespit edilmiştir. Ayrıca, metronidazol antibiyotiğinin 1000-8000 ?g/ml veflukanazol antifungalının 64-1750 ?g/ml konsantrasyonları aralığında tümvLactobacillus spp. suşları üzerinde minimal inhibitör konsantrasyonu (MİK)belirlenmiştir. Her iki antibiyotiğe karşı L. crispatus G10, L. gasseri H14, ve L.oris A2 suşları en yüksek direnci göstermişlerdir. Bu suşların (L. crispatus G10,L. gasseri H14 L. oris A2) metronidazol ve flukanazol içeren, gliserol jelatin ovülpreparatlarında raf ömürleri belirlenmiştir. Ayrıca ovül preparatlarındayardımcı madde olarak askorbik asit kullanılmış ve bu maddenin suşlarıncanlılık sürelerini uzattığı belirlenmiştir. Tüm ovül formülasyonlarında enyüksek canlılığı L. gasseri H14 suşunun gösterdiği tespit edilmiştir.Anahtar Kelimeler : Vajinal laktobasiller, probiyotikler, bakteriyal vajinozis(BV), ekzopolisakkarit (EPS), antibiyotik duyarlılık,hemaglutinasyon (HA), ovül preparasyonu

Abstract:
In this study, exopolysaccharide (EPS) production and hemagglutination (HA)capability of 57 Lactobacillus spp. strains originated from human vagina wereinvestigated. The adhesion capabilities of these strains were measured by usinggel HA technology test in vitro. EPS productions of strains were determined as arange of 20?368 mg/L. In addition, 77.2% of the strains showed high HAcapability (+4, +3), %12 of the strains showed no hemagglutination.Lactobacillus crispatus G10 showed maximum EPS (368 mg/L) production andalso possessed high HA (+4) ability. Lactobacillus acidophilus I4 strain whichproduced lower EPS (30mg/L) did not show hemagglutination. Antibioticresistant Lactobacillus spp. against 12 antibiotics were determined by discdiffusion method and results were evaluated according to the NCCLS criteria.Lactobacillus strains were resistant to gentamicin (100%), ofloxacin (98%),ciproflaxacin (96%) and streptomycin (88%) and sensitive to doxycicline(100%), chloramphenicol (98%), tetracycline (91%) and eritromycin (89%).Minimum inhibition concentrations of Lactobacillus spp. were determined as arange of 1000-8000 ?g/ml concentrations of metronidazole and 64?1750 ?g/mlconcentrations of flucanazol. L. crispatus G10, L. gasseri H14, L. oris A2 wereshowed highest resistance to both metronidazole and flucanazol. Shelf life ofviithese strains (L. crispatus G10, L. gasseri H14 L. oris A2) was determined atglycerinated gelatin ovules containing metronidazole and flucanazol. Also,ascorbic acid was used as excipient at ovule preparates and it was determinedthat ascorbic acid significantly increased the survival of all these strains. Thehighest survival was observed for Lactobacillus gasseri H14 in all theformulations.Key Words : Vaginal lactobacilli, probiotics, exopolysaccharide(EPS), bacterial vaginosis (BV), antibiotic susceptibility,hemagglutination (HA), ovul preparation