Sıçanlarda kısa süreli rosiglitazon tedavisinin aorta düz kas RAGE ekspresyonu ve enflamasyon belirteçleri üzerine etkileri
Effects of short-term rosiglitazone treatment on RAGE expression and inflammation markers in rat aortic smooth muscle
Yazar: NEVİN HAÇAT
Danışman: PROF.DR. NURAY ARI
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2007
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: İnflamasyon = Inflammation

Özet:
Diyabetik komplikasyonlar, diyabetik bireylerin yaşam kalitelerinin bozulmasına veerken ölümlere neden olmaktadır. Diyabette, ileri glikasyon son ürünleri (AGEs:advanced glycation end products)'nin düzeyleri ve reseptörlerinin (RAGE)ekspresyonları artmaktadır ve komplikasyonların gelişiminde bu artışların önemlirolü bulunmaktadır. Öte yandan, PPAR? (Peroxisome proliferator-activatedreceptor-?) agonistlerinin (antidiyabetik tiyazolidindionlar: pioglitazon verosiglitazon)) kültürlenmiş endotel hücrelerinde ve vasküler düz kasda RAGEekspresyonunu azalttıkları bildirilmiştir. Ancak bu etkilerin AGE-albuminuygulanımı ile in vivo koşullarda ortaya çıkıp çıkmadığı bilinmemektedir. Eğerrosiglitazon in vivo koşullarda da bu pleiotropik etkileri oluşturuyor ise enflamasyon,ateroskleroz ve benzeri önemli damar hastalıkların gelişiminde protektif etkisağlayabilir.Çalışmamızda sağlıklı Wistar sıçanlara steril şartlarda hazırlanan AGE-BSA çözeltisi(0,2 ml/gün, 10 gün, i.v.) ile birlikte 8 mg/kg/gün dozda 10 gün süreyle oralrosiglitazon tedavisi uygulanmıştır. Ek olarak, sadece rosiglitazon veya sadece BSAuygulanan kontrol ve hiçbir uygulama yapılmayan kontrol grupları oluşturulmuştur.Tedavi süresi sonunda tüm grupların aorta düz kasında RAGE ekspresyonları RTPCRile, aortada proenflamatuvar sitokinler TNF?, IL-6, IL-1ß ELISA yöntemi ileölçümlenmişlerdir. Ek olarak, kan/serumda bazı metabolik değerler de (glukoz,HbA1c, lipid profili) ölçümlenmiştir. Hayvanların kan basınçları da ?tail cuff ?yöntemiyle ölçülmüştür.Sadece AGE-BSA çözeltisi uygulanan sıçanların aortik düz kasında RAGEekspresyonu artmış, rosiglitazon tedavisi ile ise bu artış azalmıştır. Paralel olarakyine sadece AGE-BSA uygulanan grup aortalarda proenflamatuvar sitokinler TNF?,ve IL-1ß düzeyinde anlamlı artışlar görülmüş (p<0.05, p<0.001, n:7), rosiglitazontedavisi bu artışları da düşürmüştür (p<0.05, p<0.001, n:7). IL-6 düzeylerinde iseanlamlı değişimler gözlenmemiştir. (p>0.05, n:7). Kanda metabolik parametreler vekan basıncı değerlerinde de hiçbir grupta anlamlı değişimler saptanmamıştır.Bulgularımız AGE'lerin indüklediği vasküler bozukluklar üzerinde rosiglitazontedavisinin metabolik-bağımsız yararlı etkilerinin (pleiotropik etkiler) olduğunugöstermektedir. Eğer bu etkiler rosiglitazon ile uzun dönem tedavide de ortayaçıkıyorsa tiyazolidindionlar gelecekte enflamasyon, pre-diyabet, ateroskleroz veAGE-ilişkili öteki kronik dejeneratif hastalıklarda anti-enflamatuar, antiproliferatifve antiaterojenik amaçla kullanılabilme potansiyeline sahip olabilirler.Anahtar Sözcükler: AGE, enflamasyon , pleiotropik etki, RAGE, rosiglitazon

Abstract:
Diabetic patients have shorter life span and poorer quality of life mainly due todiabetic complications. The enhanced formation of AGEs ( advanced glycation endproducts) and expression of RAGE (receptor for advanced glycation end product)play an important role in the development of diabetic complications. PPAR? ligandssuch as thiazolidinedione antidiabetic agents (rosiglitazone and pioglitazone) havebeen shown to decrease vascular wall inflammation and also expression of RAGE incultured rat endothelial and vascular smooth muscle cells. However, it is not wellknown whether these beneficial pleiotropic effects of TZDs occur in in vivo AGEBSA-induced conditions. This study was therefore designed to evaluate whethershort-term rosiglitazone treatment independent of it?s metabolic effects, caninfluence AGEs/RAGE associated complications without diabetes.Sterile AGEs solution (AGE-BSA: bovine serum albumin solution) was given tohealthy male Wistar rats for 10 days (0.2 ml, once daily, i.v.) to induce AGE/RAGEassociated complications. Some of them were treated with rosiglitazone for 10 days(8 mg/kg, once daily, oral gavage) at the beginning of application of AGEs solution(preventif study). Some of them received only BSA, or rosiglitazone or BSA +rosiglitazone treatment. At the end of therapy, expression of RAGE (by RT-PCR)and proinflammatuar cytokine levels (TNF?, IL-6, IL-1ß) (by ELISA) weremeasured in aortae. Blood pressure (by non invasif tail cuff method) values and somemetabolic parameters (glucose, plasma triglyceride, cholesterole, HDL, LDL andHbA1c) in blood /plasma were also measured.AGE-BSA increased RAGE expression and proinflammatuar cytokin (TNF?, IL-1ß)levels significantly in aortae. Rosiglitazone treatment decreased these parameters.(p<0.05, p<0.001, n:7). Aortic TNF? levels, metabolic parameters in blood, andblood pressure values did not change among the groups.The antinflamatuar and antiatherogenic pleiotropic effects (independent of insulinsensitization) of TZDs may have clinical significance if sustained during long- termtherapy protecting vascular complications such as inflammation, atherosclerosis,vascular proliferation, pre-diabetes, diabetes or AGE associated chronic degeneratifdiseases. Our results can give a clue for their use as a potential anti-inflammatoryand antiatherogenic drugs in the future.Key Words:AGE, inflammation, pleiotropic effect, RAGE, rosiglitazone