Hodgkin lenfoma'da mikroçevre profilinin değerlendirilmesi
Evalution of microenvironment profile in hodgkin's lymphoma
Yazar: MERVE KAKCI
Danışman: PROF. SEMRA PAYDAŞ
Çukurova Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2018
Konu: Hematoloji = Hematology
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; B lenfositleri = B lymphocytes ; Granzim B = Granzyme B ; Hodgkin hastalığı = Hodgkin disease ; Lenfoma = Lymphoma ; Mikroçevre = Microenvironment ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Prognoz = Prognosis ; T lenfositleri = T lymphocytes

Özet:
Amaç:Hodgkin lenfoma, tam kür sağlanabilen, malign bir hastalıktır. Ancak,  hastaların %15-20 kadarında relaps veya nüks görülür. Klasik Hodgkin Lenfoma'da Reed-Stenberg hücreleri tümörü başlatır ve seyrek bulunur. Etrafında yoğun mikroçevre alanı bulunur. Mikroçevreyi oluşturan T ve B lenfositlerin rolü tam olarak patogenezde tanımlanamamıştır.T lenfosit fonksiyonlarını düzenleyen Programmed Death-1 (PD-1), Programmed Death Ligand-1 (PDL-1),  Forkhead Box-3 (FOXP-3)  ile B lenfosit fonksiyonunu gösteren granzim B'nin Hodgkin Lenfoma mikroçevresi ve prognozu ile ilişkili olduğuna dair önemli ipuçları saptanmıştır.
Hastalar ve Yöntem: Çalışmada ÇÜTF Onkoloji Bilim Dalında Hodgkin Lenfoma tanısı alan ve tedavi edilen hastalardan 62'si çalışma grubunu oluşturdu. Hastaların klinik ve demografik özellikleri ile klinik, demografik ve laboratuvar verileri gözden geçirildi. Mikroçevre biyolojisine yönelik PD-1, PDL-1, FOXP-3 ve Granzim B uygun antikorlarla immunhistokimyasal olarak çalışıldı; ekspresyon tümör hücresi ve mikroçevrede ayrı ayrı değerlendirilerek bilinen prognostik parametrelerle kıyaslandı. İstatistiksel analizler, SPSS 22.0 paket programları ile yapıldı. p değerinin <0.05 olması anlamlı kabul edildi.
Bulgular ve sonuç: Yaş (p=0,05), evre 4 hastalık (p=0,01), ilk tedavi yanıtı (p=0,03), hipoalbuminemi (p=0,01), lenfosit sayısının <1000/mm³ olması (p<0,001), nötrofil/lenfosit oranı (p=0,009), lökosit/lenfosit oranı (p=0,01), B semptomu (p=0,002) ve IPS-3,4 ve 7 skorları (p=0,03) sağ kalımla ilişkili bulundu. PD-1, RS hücre boyanmasında sadece bir hastada pozitifti. PD-1'in mikroçevre boyanması sağ kalımla ilişkili bulunmadı (p=0,3). PD-L1'in RS hücre boyanması ve mikroçevre boyanması sağ kalımla ilişkili bulunmadı (p=0,3 ve p=0,07). FOXP3 boyamasında non-spesifik boyanan vaka sayısı 36 idi, istatistiksel olarak anlamlı bulunmadı. Granzim B'nin RS hücrelerinde pozitif olması sağ kalımla ilişkili bulunmadı (p=0,1). Granzim B'nin mikroçevrede boyanması, sağ kalımla ilişkili bulunmadı (p=0,9 ). PD-L1'in hem RS hücrelerinde hem de mikroçevrede pozitif boyanmasıyla sağ kalım arasında ilişki bulunmadı (p=0,06). HL'da bilinen prognostik parametreler ve skorların yanısıra LLO ve IPS-4 de yararlı bulunmuştur. Çalışılan biyobelirteçlerden hiçbiri tek başına doğrudan sağ kalım üzerine etkili bulunmamıştır. Ancak daha geniş hasta gruplarıyla çalışmaları güçlendirmek gelecek tedavi yaklaşımlarına yol gösterecektir. 

Anahtar Sözcükler: Hodgkin lenfoma, mikroçevre, PD-1, PDL-1, FOXP-3, Granzim B

Abstract:
Purpose: Hodgkin's Lymphoma is a curable malignant disease. However, in 15-20% of patients, the disease recurs or becomes refractory. RS cells are rare in histopathological specimens and initiate the malignancy. There is dense microenvironment around it.  However, the role of T and B lymphocytes that constitute the microenvironment has not been exactly defined. Significant clues have been found between prognosis and expression of Programmed Death-1 (PD-1), Programmed Death Ligand (PD-L1), GRB and Forkhead Box3 (FOXP3) which are regulating  T and B lymphocyte functions.
Patients and Methods: Sixty-two patients diagnosed with Hodgkin's Lymphoma treated at the Department of Oncology in Çukurova University included in the study. Clinical, demographic and laboratory data of the patients were reviewed. PD-1, PDL-1, FOXP-3 and Granzim B were studied with appropriate antibodies immunohistochemically. Expression analysis performed on tumor cell and microenvironment separately  and compared with known prognostic parameters. Statistical analysis performed with SPSS 22.0 software programs. p value <0.05 was considered significant.
Results: Age (p=0,05), stage 4 disease (p=0,01), initial response to treatment (p=0,03), hypoalbuminemia (p=0,01), lymphocyte count <1000/mm³, neutrophil/lymphocyte  ratio ≤3,9 (p=0,009), leucocyte/lymphocyte ratio ≤3,9 (p=0,01), B symptom (p=0,02) and IPS-3 score (p=0,03) were found to be associated with event free survival. PD-1 at RS was found to be positive in only one patient. PD-1 staining in microinvironment was not found to be associated with event free survival. Staining for PD-L1 neither in RS-cell nor microenvironment were associated with survival. Non-specific staining for FOXP3 was detected in 36 cases. Intense staining of granzyme B at RS cells was found to be associated with event free survival. Intense staining for granzyme B was found in in only two cases statistical analyses was not performed. Granzim B staining at microenvironment was not associated with survival. There was no survival difference between simulaneous PD-L1 staining in RS cells and microenvironment, (p=0,06). In addition to the known prognostic parameters and scores in HL, LLO and IPS-4 score were found to be useful. None of the biomarkers determined in this study were found  associated with survival. However, more studies, with larger patient groups may provide more precise future treatment approaches.


Key Words: Hodgkin's Lymphoma, microenvironment, PD-1, PDL-1, FOXP-3, Granzyme B