Pseudomonas aeruginosa suşlarında antibiyotik varlığında biofilm ve alginat üretiminin araştırılması
Investigation of biofilm and anginate production from pseudomonas aeruginosa isolats at the existince of antibiotics
Yazar: UMUT YILDIRIM
Danışman: Y.DOÇ.DR. MELEK DEMİR
Pamukkale Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Mikrobiyoloji ve Klinik Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2006
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology

Özet:
Bu çalışmada, çeşitli vücut örneklerinden soyutlanan P. aeruginosasuşlarının, farklı sürelerde ve farklı yöntemlerle, biofilm oluşturma ve alginatüretme yetenekleri, bu yeteneklerin antibakteriyel madde varlığındaki değişimlerive aynı zamanda biofilm oluşturma ve alginat üretiminin antibakteriyel maddedirencine katkısı araştırıldı.P.aeruginosa suşlarının 57 tanesi endotrakeal aspirat örneklerinden (%38,5),31 tanesi idrar örneklerinden (%20,9), 29 tanesi yara örneklerinden (%19,6), 11tanesi balgam örneklerinden (%7,4), 17 tanesi (%11,4) çeşitli örneklerden (kan,sürüntü, göz vb.) soyutlanmıştır. 24 saatlik ölçümler sonrasında, kristal violekullanarak suşların %45'inin, safranin kullanarak ise %58,4'ünün P.aeruginosaATCC 27853'den daha fazla biofilm oluşturduğu saptanmıştır. 48 saatlik ölçümlersonrasında, kristal viole kullanarak suşların %33,6'sı, safranin kullanarak %37,8'iATCC 27853'den daha fazla biofilm oluşturmuştur. 24 saatlik değerler ile 48saatlik değerler arasındaki fark, her iki boyar madde kullanımında da anlamlıbulunmuştur (p=0,00). Kinolon grubu antibiyotiklerin biofilm üretimine etkisinebakıldığı zaman, bütün antibiyotiklerin sub M K konsantrasyonlarda 24 saatsonunda biofilm üretimini doz bağımlı olarak azalttığı saptanmıştır. Sub M Kkonsantrasyonda biofilm oluşumuna etki açsından bakıldığında, ciprofloksasin velevofloksasin, moksifloksasine göre daha etkili bulunmuştur. Sub M Kkonsantrasyonlarda 48 saat sonunda biofilm oluşumuna etki açısındanbakıldığında, antibiyotikler arasında bir fark bulunmamıştır. Biofilm oluşturmuşbakteriler üzerine kinolon grubu antibiyotiklerin etkisine bakıldığında, her 3antibiyotik için de B K değerlerinin M K değerlerine göre oldukça yükseldiğibulunmuş ve moksifloksasinin, biofilm üzerine ciprofloksasin ve levofloksasindendaha az etkili olduğu saptanmıştır. P.aeruginosa suşlarının standartlar kullanılarakoluşturulan kalibrasyon eğrisine göre 24 saat sonunda ürettiği alginat miktarı 0,4-6.9 Âµg/ml aralığında bulunmuştur. Her iki boyar maddeyle yapılan 24 saatlikbiofilm ölçümleriyle, alginat üretimleri karşılaştırıldığında, aradaki ilişki anlamlıbulunmuştur (p=0,007; p=0,016). Kullanılan her 3 antibiyotiğin de sub M Kkonsantrasyonlarda alginat üretimini doz bağımlı olarak arttırdığı bulunmuştur.Sonuç olarak biofilm oluşumu ve alginat üretimi, P.aeruginosa suşlarının tedaviyanıtını etkileyen önemli virulans faktörlerindendir.

Abstract:
In this study we reseached the capability of forming biofilm and alginateof P.aeruginosa strains isolated from various body samples with various periodsand methods. We also searched the changes in these ağabeylities in presence ofantibacterial substance and the contribution of biofilm formation and alginateproduction to the antibacterial resistance.We isolated 57 P.aeruginosa strains from the endotracheal aspiratesamples, 31 urine, 29 from wound, 11 from sputum and 17 from other samples(blod, eye, etc.). After 24 hours of measurament, by using kristal viole 45% of thestrains and by using safranin-0 58,4% of the strains produced biofilm more thanATCC 27853. After 48 hours of measurement by using kristal viole 33,6% of thestrains and by using safranin 37,8% of the strains produced biofilm more thanATCC 27853.By using both dyestuffs the difference between the values of 24th and 48th hour were found statistically significant (p<0,001). The difference between thevalues of the 24th and the 48th hour were found significant by using bothdyestuffs (p<0,001). If in the effect of quinolone antibiotics to the formation ofbiofilms, dose dependend reduction of the biofilm production at the sub micconcentration of this antibiotics at the end of 24 hours were expected. In the effectof sub mic groups concentrations to the biofilm formations , ciprofloxacin andlevofloxacin are more effective from moxifloxacine?s. In the quinolones effects atbiofilm formation, all three antibiotic?s BIC values got higher than the MICvalues and the moxifloxacine has less affect on biofilm formation rather thanlevofloxacine and ciprofloxacine. According to the calibration curve formed bythe standartsi, the amount of alginate that P.aeruginosa produced is found 0,4-6,9Âµg/ml at the end of 24 hour?s. We have found significant relationship betweenbiofilms and alginate production at the and of 24 hour?s (p<0,05). All threeantibiotics have been increased the alginate production by dose depended. As aresult the biofilm formation and alginate production are important virulancefactors may affect the treatment of P.aeruginosa infections.