Arka kök ganglionu satellit hücrelerinin morfolojik özellikleri ve immünhistokimyasal işaretlenmeleri
The morfolological characteristics and immunohistochemical labelling of satellite cells of dorsal root ganglia
Yazar: ÇİĞDEM GÜNDÜZ
Danışman: DOÇ.DR. ENDER ERDOĞAN
Yüzüncü Yıl Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2006
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology

Özet:
Satellithücreleri ganglionik nöronları bir zarf veya kılıf gibi saran perinöronal glial hücrelerdir.Komşu olduğu nörona özel bağlantılarıyla bağlanmışlardır. Özellikle aksotomi sonrasıganglion sinir hücresindeki yapısal ve histolojik değişiklikler oldukça yoğunaraştırılmakla birlikte satellit hücrelerinin kökeni ve detaylı yapısı hakkındakiaraştırmalar kısıtlıdır. Bazı araştırmacılar bu hücreleri bir tip Schwann hücresi olarakkabul ederken; diğer bir kısmı ise astrositlere benzetmektedir. Bu çalışma arka kökganglonu glial satellit hücrelerinin detaylı yapısal fenotipik özelliklerini ortaya koymayıamaçlamıştır. Bu amaçla: L4 ve L5 spinal ganglionlar bilateral olarak çıkarılmıştır.Tespiti (%4 paraformaldehid) ve sükroz işlemi (%30) takiben 5-30 ?m kalınlığındafrozen kesitler alındı. Takiben Laminin, NeuN, NFH, Ne14, GFAP, SMA, S100, P75,Vimentin ve MBP primer antikorları ve flüoresan konjüge sekonder antikorları ileindirekt olarak ayrıca DAPI ile direkt olarak işaretlendi. Ayrıca bazı kesitler H&E vetoluidin mavisi ile de boyandı. Preparatlar konvansiyonel ışık, flüoresan ve konfokalmikroskoplarda incelendi. Konfokal mikroskobik incelemelerde: DAPI ve NeuN'unçekirdeklerde lamininin ise perinükleer kılıf ve basal membran tarafından ifade edildiğigözlendi. Kuvvetli anti-S100 yanısıra çeşitli düzeylerde vimentin ve GFAP immünreaktivitesi de gözlendi. NFH, MBP, P75, SMA ifadeleri oldukça zayıftı. Kuvvetli S100yanısıra GFAP boyanması satellit hücrelerinin fenotipik olarak köken olarak da yakınolduğu Schwann hücrelerine yakın olduğunu gösterdi. Işık mikroskobik veriler delitertürdekilerle uyumlu idi.Anahtar sözcükler: Glial satellit hücreleri, İmmunhistokimya, Periferik sinirsistemi, Arka kök ganglionu, Konfokal mikroskop

Abstract:
Glial satellite cells (GSCs) are perineuronalglial cells surrounding ganglionic neurons as an envelope or sheet. And they areconnected with adjacent neurons via specific junctions. The histological and structuralchanges of nerve cells in dorsal root ganglia (DRG) fallowing axotomy have beenstudied intensively. But, studies about the origins and morphological details of satellitecells are restricted. Some of the authors suggested that these cells are a type of Schwanncells (SCs) while others classify them as astrocytes. This study was aimed to determinethe detailed structural phenotypic features of GSCs of DRG. For this purpose, L4 andL5 spinal ganglions were taken bilaterally from mice. After fixation (paraformaldehyde4%) and sucrose (30%) processing, 5-30 ?m thickness sections were taken by frozensection and then labeled with DAPI, Laminin, Neun, NFH, GFAP, S100, P75,Vimentin, SMA and MBP primary and fluorescent conjugated secondary antibodies.Some sections were stained with H&E and toluidin blue dye. Tissue samples wereexamined with confocal and light microscopes. In the confocal microscopicexamination of sections: DAPI and NeuN were expressed by nuclei and Laminin wasexpressed by perineuronal sheets and basal membranes. In some satellite cells; S100and GFAP immunoreactivity were quite strong. On the other hand, NFH, MBP, P75,SMA and vimentin were expressed very weakly. Strong S100 and GFAP staining ofGSCs indicate close phenotypic relationship with SCs. The light microscopic data wereconsistent with the recent literature data.Key words: Glial satellite cells, Immunohistochemistry, Peripheral nervoussystem, Dorsal root ganglion, Confocal microscope