İki farklı juniperus türü (juniperus communis L. var. saxatilis pall. ve juniperus excelsa M. BİEB. subsp. excelsa)'ne ait yaprak ve meyve özütlerinin DU145 ve PCD-3 prostat kanseri hücre hatlarında sitotoksik ve antitümöral etkilerinin araştırılması
Investigation of antitumoral and cytotoxic effects of leaf and berry extracts from two different juniperus species (juniperus communis L. var. saxatilis pall. and juniperus excelsa M. BİEB. subsp. excelsa) on DU145 and PC-3 prostate cancer cell lines
Yazar: IŞIL EZGİ ERYILMAZ
Danışman: PROF. DR. ÜNAL EGELİ
Uludağ Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Tıbbi Biyoloji = Medical Biology
Dizin: Antineoplastik ajanlar = Antineoplastic agents ; Bitki özütü = Plant extract ; Juniperus communis L. = Juniperus communis L. ; Juniperus excelsa = Juniperus excelsa ; Neoplazm kök hücreleri = Neoplastic stem cells ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Prostat neoplazmları = Prostatic neoplasms ; Sitotoksisite = Cytotoxicity

Özet:
Günümüzde kastrasyon dirençli prostat kanseri (KDPK) mevcut taksan türevi ilaçlar
ile etkin tedavi edilememektedir. KDPK tedavisi için yeni yaklaşımların geliştirilmesi
gerekmekte ve bu anlamda biyoaktif moleküllerin zengin kaynakları olarak bitkiler yoğun
ilgi çekmektedir. Son yıllarda sahip olduğu antitümöral özellikteki bileşikler nedeni ile
Juniperus L. türlerinin kanser tedavisinde faydalanılabilecek bitkiler arasında yer
alabileceği düşünülmektedir.
Gerçekleştirilen çalışmada Türkiye florasında yetişen iki farklı Juniperus L. türüne ait
yaprak ve meyve sulu özütlerinin iki farklı KDPK hücre hattı ve bir normal hücre hattında
sitotoksik etkileri değerlendirilmiştir. Sitotoksisite analizine göre Juniperus L. özütlerinin
KDPK hücreleri üzerindeki seçici sitotoksik etkisinin doz-zaman bağımlı arttığı
bulunmuştur. Hücre ölümünün morfolojik ve immünohistokimyasal analizlerine göre 48
saatlik özüt uygulamasında erken apoptozda artış saptanırken, 72 saatlik özüt
uygulamasında yüksek oranda geç apoptotik ve daha az oranda nekrotik hücre ölümü
belirlenmiştir. Türler arasında J. excelsa' nın, tür içinde ise yaprak özütlerinin daha etkili
olduğu bulunmuştur. HPLC-DAD analizi ile özütlerin farklı sayıda ve miktarda fenolik
bileşik içerdiği saptanmış ve saptanan fenolik bileşiklerin yaprak özütlerinde daha çok
olmak üzere klorojenik asit, ferulik asit, gallik asit, kaempferol-3-glikozit, rutin ve tcinnamik
asit olduğu belirlenmiştir. RT-qPCR analizine göre Juniperus L. özütlerinin
KDPK hücre hatlarında MMP-2 ve MMP-9 gen ekspresyonlarında (sırasıyla p<0.01 ve
p<0.05) anlamlı azalışa yol açtığı saptanmıştır.
Mevcut tez çalışması ile Juniperus L. özütlerinin KDPK hücre hatlarındaki
antitümöral etkileri literatürde ilk kez araştırılmıştır. Bulgularımız doğrultusunda
Juniperus L. türlerinin, kanser tedavisinde yeni terapötik aday araştırmaları için önemli
bitki türleri arasında yer alabileceğini ve ileri ilaç araştırmalarında Juniperus L. türlerinde
bulunan küçük moleküllerin umut vaat eden bileşikler olabileceğini düşünmekteyiz.

Abstract:
Nowadays, castration resistant prostate cancer (CRPC) can not be effectively treated
with available taxane derivatives. It is needed to develop new aprroaches for the treatment
of CRPC. In this sense, plants, the richest source of bioactive molecules, have attracted
interest. In recent years, cause of having compounds with antitumor properties, Juniperus
L. species is thought to be among the plants that can be utilized in cancer therapy.
In the present study, cytotoxic effects of leaf and berries aqueous extracts of two
different Juniperus L. from Turkey on CRPC and a normal cell lines were evaluated. It
was determined that selective cytotoxic effects of the extracts on CRPC cell lines was
increased dose and time dependent manner. According to the morphological and
immunohistochemical analysis of cell death, while an increase was detected in early
apoptosis after 48 h, for 72 h application higher rate of late apoptotic and lower rate of
necrotic cell death were detected. More cytotoxic effect was revealed in J. excelsa extracts
between two species and in leaf extracts in the same species. The extracts were determined
by HPLC-DAD analysis to contain phenolic compounds including chlorogenic acid, ferulic
acid, gallic acid, kaempferol-3-glycoside, rutin and t-cinnamic acid with different number
and amount. It was also revealed that phenolic compounds were more abundant in leaf
extracts. According to RT-qPCR analysis, Juniperus L. extracts significantly
downregulated MMP-2 (p<0.01) and MMP-9 (p<0.05) gene expression levels in CRPC cell
lines.
This is the first study to investigate antitumor effects of Juniperus L. extracts on
CRPC cell lines. In accordance with our findings, we suggest that Juniperus L. may be
important plant species as a new therapeutic candidate and small molecules found in
Juniperus L. species are possibly promising compounds in advanced drug research for
cancer therapy.