Hepatit B hastalarında HBV RNA'nın tanı ve tedavideki önemi
Importance of HBV RNA in diagnosis and treatment in hepatitis B patients
Yazar: HATİCE YILDIZ BEYTEKİN
Danışman: DOÇ. DR. SELAMİ GÜNAL
İnönü Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Temel Eczacılık Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2022
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Hepatit B = Hepatitis B ; Hepatit B virüsü = Hepatitis B virus ; Polimeraz zincirleme reaksiyonu = Polymerase chain reaction ; RNA = RNA ; Tedavi = Treatment

Özet:
Amaç: Hepatit B tüm dünyada olduğu gibi ülkemizde de önemli bir sağlık sorunudur. Ciddi sağlık sorunlarına, işgücü kayıplarına ve ekonomik yüke neden olduğundan, erken tanı ve tedavi önemlidir. Son zamanlarda yeni markerlar kullanılmaya başlanmıştır. Bunlardan biride serum HBV RNA'dır.Çalışmada hepatit hastalarının HBV RNA düzeyleri ölçülerek hastalığın seyri, antiviral tedavi etkinliğinin ölçülmesi ve reaktivasyonların erken tesbiti amaçlanmıştır. 
	Materyal ve Metod: Bu çalışma Sakarya Üniversitesi Tıp Fakültesi Hastanesi'ne başvuran 86 hepatit hastası ile yapılmıştır.   Hastalardan alınan kan örnekleri serumlarından ayrıştırılmış, çalışmanın yapılacağı zamana kadar -20°C'de saklanmıştır. Toplanan hasta örneklerinde ticari kit kullanılarak nükleik asit izolasyonu yapılmış, ardından iki aşamalı real-time PCR yöntemi ile HBV RNA araştırılmıştır.
Bulgular: İn house Real time PCR tekniği kullanarak dizayn ettiğimiz çalışmamızın sonucunda daha önce ticari kit kullanılarak HBsAg ve HBV DNA pozitif olan hastaların 22'si (% 25) pozitif, 10'u (% 12) negatif; HBsAg pozitif HBV DNA negatif olan hastaların 4'ü (% 5) pozitif, 28'i (% 33) negatif bulunmuştur. HBsAg ve HBV DNA negatif grupta 2 (% 2) hasta pozitif, 20 (% 23) negatif tespit edilmiştir. Pozitif sonuçlar tekrar edilmiştir. Sonuçların değerlendirilmesinde treshould değeri 0.02 olarak belirlenmiştir.
Sonuçlar: İki aşamalı olarak yapmış olduğumuz çalışmamızdastandart tanı testlerine yakın sonuçlar elde edilmesi, HBV DNA'sı negatif gruptan 6 hastayı pozitif olarak belirlemesi yöntemimizin Hepatit B'nin tanı ve tedavisinde kullanılmak üzere geliştirilmesi yönünde ümit verici olarak değerlendirilmiştir. Rutin kullanımlar için yöntemimizin tek basamaklı dizaynı için ileri çalışmalara ihtiyaç vardır.
	Anahtar Kelimeler: cccDNA, Hepatit B, HBV RNA, real time PCR

Abstract:
Aim: Hepatitis B is an important health problem in our country as well as all over the world. Early diagnosis and treatment is important because it causes serious health problems, workforce losses and economic burden. Recently, new markers have been used.One of them is HBV RNA. In this study, it was aimed to measure the course of the disease, to measure the effectiveness of antiviral treatment and to detect reactivations early by measuring the HBV RNA levels of hepatitis patients.
Materials and Methods: This study was conducted with 86 hepatitis patients who applied to Sakarya University Medical Faculty Hospital. The blood samples taken from the patients were separated from their serums and stored at -20°C until the time of the study. Nucleic acid isolation was performed in the collected patient samples using a commercial kit, and then HBV RNA was investigated by real-time PCR method.
Results: As a result of our study, which we designed using the in house Real time PCR technique, 22 (25%) of the patients who were positive for HBsAg and HBV DNA using a commercial kit, were positive and 10 (12%) were negative; Of the patients with HBsAg positive and HBV DNA negative, 4 (5%) were positive and 28 (33%) were negative. In the HBsAg and HBV DNA negative group, 2 (2%) patients were positive and 20 (23%) were negative. Positive results were repeated. Our results, using the Qiagen Rotor gene program, the treeshold value was determined as 0.02 on average and calculated according to this value.
Conclusion: Obtaining results close to the standard diagnostic tests in our study, which we conducted in two stages, and the positive determination of 6 patients from the HBV DNA negative group were evaluated as promising for the development of our method to be used in the diagnosis and treatment of Hepatitis B. Further studies are needed for a one-step design of our method for routine uses.
Keywords: cccDNA, Hepatitis B, HBV RNA, real time PCR