Adli tıpta vücut sıvılarının tanımlanmasında biyolojik marker olarak mikroRNA'nın kullanımı
The usage of microrna as a biomarker for identification of body fluids in forensic sciences
Yazar: BETÜL ACAR
Danışman: PROF. DR. HAKAN KAR
Mersin Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Adli Tıp Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2019
Konu: Adli Tıp = Forensic Medicine
Dizin: Adli tıp = Forensic medicine ; Biyobelirteçler = Biomarkers ; Mikro RNA = Micro RNA ; RNA = RNA ; Vücut sıvıları = Body fluids

Özet:
Adli uygulamalarda vücut sıvılarının tanımlanması olayın aydınlanmasına
katkıda bulunması bakımından önemlidir. Son zamanlarda vücut sıvılarının
tayininde RNA analizine dayalı metotlar üzerine çalışmalar yapılmaktadır.
Yapılan bu çalışmalarda mikroRNA ekspresyon analizinin vücut sıvılarının
tanımlanmasında hassas ve spesifik bir yöntem olduğu öne sürülmektedir. Bu
çalışmada belirlenen 11 hedef biyomarker adayı mikroRNA'nın periferik kansemen-tükürük-menstruel kanda ekspresyon analizi yapılarak miRNA'ların
vücut sıvılarının tayininde kullanılabilirliği ve biyolojik sıvılar için bir marker
değerlerinin olup olmadığının araştırılması amaçlanmıştır.
Çalışmamıza Mersin Üniversitesi Tıp Fakültesi Adli Tıp Anabilim Dalı'nda
yazılı ve sözlü onamı alınan 10 kadın ve 10 erkek birey olmak üzere toplam
sağlıklı 20 bireyden alınan periferik kan, tükürük, semen ve menstruel kan
örnekleri dahil edildi. Alınan örneklerde hsa-miR-451, hsa-miR-144, hsa-miR106a, hsa-miR-10b, hsa-miR-891a, hsa-miR135a, hsa-miR-96, hsa-miR-203,
hsa-miR-205, hsa-miR-412 ve hsa-miR-214 ekspresyon düzeyleri analiz edildi.
Analiz edilen 11 miRNA'nın ekpresyon seviyeleri farklı vücut sıvıları arasında
istatiksel olarak anlamlı farklılık gösterdi(p<0,05). Periferik kanın tanımlanması
için hsa-miR-451a'nın artmış ekpresyon düzeylerinin, tükürük sıvısının
tanımlanması için hsa-miR-203a-3p ve hsa-miR-205-5p'nin artmış ekspresyon
düzeylerinin, semen sıvısının tanımlanması için hsa-miR-10b-5p, hsa-miR891a-5p ve hsa-miR-135a-5p'nin artmış ekspresyon düzeylerinin, menstruel
kan tanımlanması için hsa-miR-412-3pve hsa-miR-214-3p'nin azalmış
ekpresyon düzeylerinin istatiksel olarak anlamlı olduğu görüldü(p<0,001).
Ayrıca vücut sıvılarının tanımlanması için aday olarak seçilen miRNA'lardan
hsa-miR-451a'nın periferik kan için, hsa-miR-203a-3p'nın tükürük için, hsa-miR891a'nın semen için diğer aday miRNA'lara kıyasla oldukça yüksek ayırt edici
özelliğe sahip olduğu ve bu üç miRNA'nın adli uygulamalarda kullanılabilecek
en güçlü biyomarkerlar olduğu belirlendi.
Çalışmamızın sonuçları; olay yerlerinde sıklıkla karşılaşılabilecek
periferik kan, semen, tükürük ve menstruel kan gibi vücut sıvılarında seçilen
aday miRNA biyobelirteçlerinin istatiksel olarak anlamlı düzeyde farklı
ekpresyon seviyesi gösterdiğini, bu nedenle de vücut sıvılarının 
6
tanımlanmasında miRNA'ların, adli laboratuarların rutin uygulamalarında yeni
bir yöntem olarak kullanımını desteklemektedir.

Abstract:
Identifying body fluids in forensic applications is important for contributing
revelation of cases. In recent years, there have been studies on method based
on RNA analysis for identification of body fluids. It has been proposed that
microRNA expression analysis is a sensitive and specific method for
identification of body fluids in these conducted studies. In this study, evaluating
whether chosen 11 target biomarker candidate microRNAs have availability and
marker value for identification of body fluids and for biologic fluids by performing
expression analysis on peripheral blood-semen-saliva-menstural blood; was
aimed.
Peripheral blood, saliva, semen and menstural blood samples of a total
of 20 healthy subjects (consisted of 10 male and 10 female individuals) who had
given written and verbal consent in Mersin University Faculty of Medicine,
Department of Forensic Science were included in this study. Expression levels
of hsa-miR-451, hsa-miR-144, hsa-miR-106a, hsa-miR-10b, hsa-miR-891a,
hsa-miR135a, hsa-miR-96, hsa-miR-203, hsa-miR-205, hsa-miR-412 and hsamiR-214 in collected samples were analysed. There was statistically significant
difference between measured 11 miRNA expression levels in different body
fluids (p<0,05). Increased levels of hsa-miR-451a, hsa-miR-203a-3p and hsamiR-205-5p, hsa-miR-10b-5p and hsa-miR-891a-5p and hsa-miR-135a-5p were
found to be statistically significant for identification of peripheral blood, saliva,
semen; respectively; whereas decreased expression levels of hsa-miR-412-3p
and hsa-miR-214-3p were found to be statistically significant for identification of
menstural blood (p<0,001). In addition, hsa-miR-451a, hsa-miR-203a-3p and
hsa-miR-891a among all other chosen miRNAs for identification of body fluids
were found to have quite higher differentiating quality than other candidate
miRNAs for identification of peripheral blood, saliva and semen; respectively;
and these three miRNAs were identified as most potent biomarkers which can
be used in forensic applications.
Results of our study supports the utility of miRNAs as a new method in
routine applications of forensic laboratories in identification of body fluids due to 
8
statistically significantly different expression levels of chosen miRNA biomarkers
in peripheral blood, semen, saliva and menstural blood which can be frequently
seen during crime scene investigations.