Adolesan kızlarda hashimoto tiroidit'inde miRNA ekspresyon seviyelerinin tanıda rolünün araştırılması
Investigation of the role of miRNAs expression levels in hashimoto thyroiditis in adolescent girls
Yazar: ENGİN AYDIN
Danışman: PROF. DR. SADRETTİN PENÇE
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı / Moleküler Tıp Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2019
Konu: Endokrinoloji ve Metabolizma Hastalıkları = Endocrinology and Metabolic Diseases ; Moleküler Tıp = Molecular Medicine ; Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases
Dizin: Ergenler = Adolescents ; Hashimoto hastalığı = Hashimoto disease ; Kız çocukları = Young girls ; Kızlar = Girls ; Mikro RNA = Micro RNA ; Tiroidit = Thyroiditis ; Ötiroid hasta sendromları = Euthyroid sick syndromes

Özet:
Çocuklarda otoimmünite araştırmaları çoğunlukla ya rastlantısal yada aile hikayesinde bir yakınında benzeri şikayetleri bulundurması ile başlar. Kadın nüfusun en sık görülen otoimmün hastalığı Hashimato tiroiditinde (HT), moleküler mekanizmalar ve bireyin genetik altyapıları suçlanmaktadır. Çalışmamızda 66 katılımcıya 32 HT 34 sağlıklı kız serum örnekleriyle ortalama yaş 16,13±2,16, hastalar 15,69±2,16 kontrol 16,54±1,34 olarak eş yaş grubu alındı. Hasta grubun ortalama TSH (µIU/ml) düzeyi 2,96±2,02, kontrol grubunda 1,41±0,58 düzeyinde bir fark (p<0.05) vardır ama tüm hastaları ötiroid düzeydedir. sT4 düzeyleri hasta 13,04±1,38 kontrol grubuysa 12,35±1,62 (pmol/L) ve istatiksel olarak fark yoktur(p=0,70). Buda bize ötiroid durumdaki sağlıklı bireylerle ötiroid durumda hasta grubuyla kıyaslayarak hiç tiroid ilacı almamış ve muhtemelen ilaca bağlı miRNA'ları aktive olmamış seçilmiş hasta ve kontrol grubunu kıyaslamaya imkan vermiştir.  Hastaların kan örnekleri TaqMan® microRNA RT-PCR Mix ile Mirvana® miRNA izolasyon kiti ile cell free olarak serumdan TaqMan® MicroRNA Assays primer ve probu kullanıldı.
Çalışmamız sonucunda havuz örneklemde 33 miRNa 15 up regüle halde 18 si downregüle olarak hasta ve kontrol grubu farklı bulundu. mir-15a,mir-26b, mir-33a*,mir-33a,mir-129(hsa-mir-129-1/5p), mir-133b,mir-136, mir-139, mir-190b, mir-198, mir-203, mir-485-5p, mir-545, mir-572, mir-586 upregüle, mir-1,mir-599, mir-574, mir-670-3p, mir-1200,mir-1825,mir-200c,mir-205,mir-214, mir-221, mir-223, mir-323,mir-328,mir-361,mir-36,mir-377,mir-424,mir-455 downregüle olarak bulunmuştur.  Bunumla beraber çalışmamızda tüm örneklerde; mir-26b hasta ΔCt ortalaması -8,63± 4,15 , kontrol grubu ΔCt ortlaması -8,92± 3,67 bulundu. p = 0,658(>0.05). hsa-mir-133b nin hasta grubunun ΔCt değeri -2,59±2,69, kontrol grubunda -2,43±2,27 bulunmuştur. p=,440(>0.05).miRNA'lar şu an bilinen haliyle moleküler translasyon sonrası gen ekspresyonları ve aktivasyon inaktivasyonunda hücre bölünmesinde e apoptozunda rol oynayan kısa 18-24 nano bazlık RNA fragmentleridir.  Bunları kandan serum ve plasma haliyle inceleyerek potansiyel hastalıkları patogenezini çözmede hücre fizyolojisi de sadece hayal edebildiğimiz ölçüde derinlere inmektedirler.

Anahtar Kelimeler : Adolesan, Kız, Çocuk, Hashimato Tiroiditi, Otoimmün Tiroidit,
miRNA, serum miRNA

Abstract:
In children, autoimmunity studies often begin with similar complaints in a random or family history.  The most common autoimmune disease of the female population is Hashimoto's thyroiditis (HT), the molecular mechanisms of and the genetic background of the individual is blamed.  In our study, mean age 16,13±2,16 were included in 66 participants with 32 HT 34 healthy girl. The mean TSH (µIU/ml) level of the patient group was 2,96 ± 2,02, the control group had a difference of 1,41±0,58 (p <0. 05).but all the patient are euthyrid. sT4 levels (pmol/L) 13,04±1,38 the control group was 12,35±1,62 and there was no statistical difference. (P=0.70) In this study, we compared the control group with the euthyroid healthy patients and the group of patients who did not use thyroid drugs in the euthyroid state and possibly compared the patient and control group whose drug-dependent miRNAs were not activated.  Blood samples of patients were isolated by using TaqMan® microRNA RT-PCR Mix by Mirvana® miRNA isolation kit. Cell free with TaqMan® MicroRNA Assays primer and probs.
As a result of our study found that pooling sample  33 of miRNa 15 upregulated, 18 of them downreguleted mir-15a,mir-26b, mir-33a*,mir-33a,mir-129(hsa-mir-129-1/5p), mir-133b,mir-136, mir-139, mir-190b, mir-198, mir-203, mir-485-5p, mir-545, mir-572, mir-586 upregulated, mir-1,mir-599, mir-574, mir-670-3p, mir-1200,mir-1825,mir-200c,mir-205,mir-214, mir-221, mir-223, mir-323,mir-328,mir-361,mir-36,mir-377,mir-424,mir-455 downregulated . In our study together with all this; the average ΔCt of our patients was -8.63±4.15, and the control group ΔCt was -8.92±3.67. p = 0.658 (> 0.05). The ΔCt value of hsa-mir-133b was -2.59 ± 2.69 and -2.43 ± 2.27 in the control group. p = 440 (> 0.05).miRNA's are short-term 18-24 nanobase rna fragments that are currently involved in cell division, apoptosis in molecular translation after gene expression and activation or inactivation.  By examining these in their serum and plasma form from the blood, they are only deep in the way we can imagine in cell physiology to solve the pathogenesis of potential diseases.


Keywords: Adolescent, Child, Girl, Hashimato Thyroiditis, Otoimmüne Thyroiditis,
miRNA, Circulating miRNA