Oligozoospermik erkeklerde sperm kromatin kondensasyonu ve sperm kreatin kinaz aktivitesinin sigara içimine bağlı olarak değerlendirilmesi
The evaluation of sperm chromatin condensation and totalcreatine kinase activity in oligozoospermic patients and the relationship with smoking
Yazar: DUYGU KÜTÜK
Danışman: PROF. DR. TÜLAY İREZ
Yeni Yüzyıl Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Kreatin kinaz = Creatine kinase ; Kreatin kinaz = Creatine kinase ; Kromatin = Chromatin ; Kısırlık = Infertility ; Kısırlık-erkek = Infertility-male ; Oligospermi = Oligospermia ; Sigara = Cigarette ; Sigara içme = Smoking ; Sperm = Spermatozoa ; Spermatogenez = Spermatogenesis

Özet:
Oligozo Kreatin fosfat tarafından üretilen kreatin kinaz, ATP'nin hızlı bir şekilde tamponlama ve yenilenmesi için enerji deposudur ve sperm hareketinde önemli bir rol oynamaktadır. Kromatin yoğunlaşması paternal kaynaklı genomun taşınmasında ve erken embriyo gelişiminde hayati önem taşımaktadır. Sperm kromatin yoğunlaşması ve kreatin kinaz aktivitesi bireysel sigara üzerindeki etkisinin yeterli çalışma bulunmamaktadır. Bu nedenle çalışmamızda, sigaranın insan sperm CK aktivitesi ve kromatin yoğunlaşması üzerine etkileri incelenmiştir.
Materyal – Metot: İnfertil çiftler (80) 2014-2015 arasında İstanbul Tüp Bebek Merkezi'ne başvuran IVF adayları arasından rastgele seçildi. Bu çalışmada, normozoospermik sigara içen (n=18) ve içmeyen erkekler (n=23) ile oligozoospermik sigara içen (n=18) ve içmeyen erkeklerden (n=21) meni örnekleri alındı. 80 hastadan alınan semen örnekleri sigara içimine göre karşılaştırıldığında, kromatin yoğunlaşması, geleneksel sperm parametreleri,özellikle sperm morfolojisinin, sperm sayısı ve progresif motilite ve sperm kreatin kinaz aktivitesi yönünden incelendi. Asidik anilin mavisi boyama DNA ile ilişkili olarak nükleoprotein içeriği ile ilgili spermin çekirdeklerinin kromatin kusurlarını tespit etmek için kullanıldı. Kreatin kinaz aktivitesi homojenize sperm örneklerinde spektrofotometrik yöntemle incelendi.
Bulgular: Sigara'nın, normozoospermik olgularda sperm konsantrasyonu ve morfolojisi üzerine olumsuz etkisi gözlenmiştir (p<0,05). Oligozoospermik olgularda ise semen volümü (p<0,001) ve kromatin kondansasyonunun (p<0,05) sigara içimi ile negatif etkilendiği görülmüştür.
Tüm olgular sigara içimine göre karşılaştırıldıklarında sperm konsantrasyonu ve kromatin kondansasyon oranının sigara içimi ile azaldığı gözlendi. Sigara'nın, sperm konsantrasyonu (p<0,05), motilitesi (p<0,05), morfoloji ve kromatin bütünlüğü üzerine olumsuz etkisi gözlenmiştir (p<0,05). Sperm kreatin kinaz aktivitesinin tüm olgularda sigara içimi ile negatif etkilendiği görülmüştür (p<0,05). Tüm olgular dikkate alındığında sperm kreatin kinaz aktivitesinin, sperm morfolojisi ve sperm motilitesi ile ilişkisi gözlenmemiştir.
Tartışma: Çalışmamızda analiz edilen normospermik ve oligospermik olgularda, sperm morfolojisi, motilitesi, kromatin bütünlüğü ve kreatin kinaz aktivitesinin sigara içimi ile etkilendiği gösterilmiştir. Sigaranın bırakılması infertilite tedavisinde başarıyı arttırabilir.
Anahtar Kelimeler: Kromatin Kondensasyonu, Erkek İnfertilitesi, Sperm Kreatin Kinaz, Sigara İçimi

Abstract:
Purpose: Creatine kinase, produced by creatine phosphate, is an energy reservoir for the rapid buffering and regeneration of ATP and can play an important role in sperm motility. Chromatin condensation is vital for the function of sperm which is the motile carrier of paternal genome and sperm genome quality has been emphasized for several years as playing a major role in early embryogenesis. There are no adequate studies of the effect on individual smoking on sperm chromatin condensation and creatin kinase activity. Therefore, this study investigates the effects of cigarette smoking on human sperm CK activity and chromatin condensation in males who smoke.
Materials and Method: Infertile couples (80) were randomly selected from IVF candidates referred to Istanbul IVF Center between 2014-2015 years. In this study, we obtained semen samples from oligozoospermic male smokers (n=18) and nonsmokers (n=21) with normozoospermic male smokers (n=18) and nonsmokers (n=23). Semen samples from 80 patients were examined for chromatin condensation, as well as conventional sperm parameters, notably sperm morphology, sperm count, and progressive motility and sperm creatine kinase activity, compared for cigarette smoking. Acidic aniline blue staining was used to detect chromatin defects of sperm nuclei related to their nucleoprotein content as associated with DNA. Sperm creatin kinase activity was examined with spectrophotometric method in homogenized samples.
Results: Negative effect of smoking on sperm concentration and morphology were observed in patients normozoospermic (p<0,05). In oligozoospermic cases it was observed that of semen volume (p<0,001) and chromatin condensation (p<0,05) were negatively affected by smoking. All patients were compared according to smoking , sperm concentration, percentage of chromatin condensation was diminished by cigarette smoking.In summary; Smoking, sperm concentration (p<0,05), motility (p<0,05), morphology and negative effects on chromatin integrity was observed (p<0,05).
In all cases, the sperm creatine kinase activity has been shown to negatively effected by smoking (p<0,05).
Discussion: In conclusion, the analyzed normozoospermic and oligozoospermic cases, sperm morphology, motility, chromatin integrity and creatin kinase activity has been shown to be affected by smoking. The cessation of smoking can increase the success of infertility treatment.
Key words: Sperm Chromatin Condensation, Male İnfertility, Sperm Creatine Kinase, Cigarette Smoking