Gebelerden izole edilen streptococcus agalactiae kökenlerinde antimikrobiyal direnç profilleri ve virülans faktörleri
Antimicrobial resistance profiles and virulence factors in strains of streptococcus agalactiae isolated from pregnant women
Yazar: EMİNE HAMŞUOĞLU
Danışman: PROF. DR. NİZAMİ DURAN
Hatay Mustafa Kemal Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2022
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Gebelik = Pregnancy ; Mikrobiyal duyarlılık testleri = Microbial sensitivity tests ; Polimeraz zincirleme reaksiyonu = Polymerase chain reaction ; Streptococcus agalactiae = Streptococcus agalactiae ; Virülans faktörleri = Virulence factors ; İlaçlara direnç = Drug resistance ; İlaçlara direnç-mikrobiyal = Drug resistance-microbial

Özet:
Gebelerden İzole Edilen Streptococcus agalactiae Kökenlerinde 
Antimikrobiyal Direnç Profilleri ve Virülans Faktörleri
Streptococcus agalactiae alt gastrointestinal sistemi ve genitoüriner yolları kolonize 
eden mikroorganizmadır. S. agalactiae gebeler, yaşlılar, bağışıklığı baskılanmış bireyler ve 
yeni doğanlarda önemli bir enfeksiyon etkenidir. Yeni doğanlarda pnömoni, menenjit ve 
sepsis gibi hastalıkların en önemli sebebidir. Biz bu çalışmada gestasyonun 35-37.
haftasında olan gebelerden alınan vajinal sürüntü örneklerinde S. agalactiae varlığını 
kültür izolasyon yöntemiyle belirlemeyi, izolatlarda antimikrobiyal direnç profilleri ile 
lmb, hlyb, rib ve bac genleri arasındaki ilişkinin araştırılması amaçladık.
Çalışmada gebeliğinin 35.-37. haftalarında olan 120 gebeden vajinal sürüntü 
örnekleri toplandı. Alınan swab örnekleri Todd Hewitt seçici besiyeri inoküle edilerek 18 
saat süre ile 37 °C'de %5 CO2'li ortamda inkübe edildi. Daha sonra örnekler koyun kanlı 
agar plakalarına ekimleri yapılarak 37 C'de 48 saat %5 CO2'li ortamda inkübe edildi. 
İnkübasyondan sonra beta streptokoklarla uyumlu hemolitik koloniler Gram boyama, 
koloni morfolojisi, CAMP testi gibi konvansiyonel yöntemler kullanılarak verifiye edildi. 
Tüm izolatların tür tayinleri otomatize kültür yöntemi ile tür düzeyinde tiplendirilmesi 
yapıldı. Gebelerden izole edilen kökenlerde PCR yöntemiyle virülans genleri (lmb, hlyb, 
rib ve bac genleri)'nin varlığı araştırılmıştır
Çalışmada toplam 120 gebeden alınan vajinal sürüntü örneğinden %36,7
(44/120)'sında S. agalactiae kültür pozitifliği tespit edildi. S. agalactiae izolatlarının 
%43.2 (19/44)'inde Lmb geni, %38.6 (17/44)'sında hlyb geni, %18.2 (8/44)'inde bac geni, 
%18.2 (8/44)'inde rib geni varlığı tespit edildi. Çalışmada gebelerden izole edilen S.
agalactiae kökenlerinde tetrasiklin (%84.4) direnci çok yüksek olarak bulunurken, 
Eritromisin (%36.4) direncinin de yüksek olduğu bunun dışında iki gebeden izole edilen 
kökenlerde Sulfametaksazol (%4.5) direnci tespit edilirken, penisin, linezolid, gentamisin 
ve vankomisin direncine rastlanmamıştır.
Çalışma sonuçlarımızdan da anlaşılacağı gibi terme yakın dönemdeki gebelerde S.
agalactiae taşıyıcılığının oldukça önemli oranlarda olduğu tespit edilmiştir. Başta erken 
başlangıçlı S. agalactiae infeksiyonu olmak üzere hem yenidoğanın hem de annenin bu 
patojene karşı korunabilmesi için virülan taşıyıcıların belirlenmesi ve tedavi verilmesi son 
derece önemlidir. S. agalactiae kökenlerinde direnç oranlarının dünyanın birçok bölgesiyle 
kıyaslandığında daha düşük veya benzer seyretmesi tedavide akılcı antibiyotik 
kullanmanın önemini de göstermektedir. Taşıyıcı gebelerin doğru tanımlanması ve 
izolatlarda patojenite faktörlerinin belirlenmesi tedavi stratejisinin belirlenmesinde de yol 
gösterici olacaktır.
Anahtar kelimeler: S. agalactiae, gebe, antibiyotik direnci, virülans, PCR

Abstract:
Antimicrobial resistance profiles and virulence factors in strains of 
Streptococcus agalactiae isolated from pregnant women
Streptococcus agalactiae is a microorganism that colonizes the lower 
gastrointestinal tract and genitourinary tract. It is an important infectious agent in pregnant 
women, the elderly, immunocompromised individuals and newborns. It is the most 
important cause of diseases such as pneumonia, meningitis and sepsis in newborns. In this 
study, we determined the presence of S. agalactiae in vaginal swab samples taken from 
pregnant women at 35-37 weeks of gestation by culture isolation method. We aimed to 
investigate the relationship between antimicrobial resistance profiles and lmb, hlyb, rib and 
bac genes in isolates.
In the study, vaginal swab samples were collected from 120 pregnant women at 35-
37 weeks of pregnancy. The swab samples were inoculated with Todd Hewitt selective 
medium and incubated for 18 hours at 37 °C with 5% CO2. Then, the samples were 
inoculated on sheep blood agar plates and incubated at 37 ℃ for 48 hours. After 
incubation, hemolytic colonies compatible with beta streptococci were verified using 
conventional methods such as Gram stain, colony morphology and CAMP test. 
Identification of all isolates at the species level was performed, and they were typed at the 
species level by automated culture method. The presence of virulence genes (lmb, hlyb, rib
and bac genes) was investigated by PCR method in isolates isolated from pregnant women.
In the study, S. agalactiae culture positivity was detected in 36.7% (44/120) of the 
vaginal swab samples taken from a total of 120 pregnant women. Lmb gene in 43.2%
(19/44) of S. agalactiae isolates, hlyb gene in 38.6% (17/44), bac gene in 18.2% (8/44), rib
gene in 18.2% (8/44) gene was detected. Tetracycline resistance (84.4%) was found to be 
very high in S. agalactiae strains isolated from pregnant women in the study. While 
erythromycin (36.4%) resistance was high, Sulfamethoxazole (4.5%) resistance was 
detected in isolates isolated from two pregnant women, while penicine, linezolid, 
gentamicin and vancomycin resistance were not found.
As can be understood from our results, S. agalactiae carriage was detected at very 
high rates in pregnant women near term. It is extremely important to identify virulent 
carriers and take protective measures in order to protect both the newborn and the mother 
against this pathogen, especially early-onset S. agalactiae infection. The fact that the 
resistance rates in S. agalactiae isolates are lower or similar when compared to many 
regions of the world, also shows the importance of using rational antibiotics in treatment. 
Accurate identification of carrier pregnants and determination of pathogenicity factors in 
isolates will also guide in determining the treatment strategy.
Key words: S. agalactiae, pregnant, antibiotic resistance, virulence, PCR