Hücre kültürü ortamında kalsiyum sinyali, apoptosis ve oksidatif stres değerleri üzerine mavi ışık (405 nm), amfenak ve melatoninin 
etkilerinin araştırılması
Investigation of effects of blue light-irradiation (405 nm), amfenac and melatonin on calcium signaling, apoptosis and oxidative stress parameters in cell culture medium
Yazar: MEHMET ARGUN
Danışman: YRD. DOÇ. DR. LEVENT TÖK
Süleyman Demirel Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2013
Konu: Göz Hastalıkları = Eye Diseases
Dizin: Amfenak = Amfenac ; Apoptozis = Apoptosis ; Hücre kültürü = Cell culture ; Kalsiyum = Calcium ; Makula dejenerasyonu = Macular degeneration ; Melatonin = Melatonin ; Oksidatif stres = Oxidative stress

Özet:
Hücre Kültürü Ortamında Kalsiyum Sinyali, Apoptosis ve Oksidatif Stres
Değerleri Üzerine Mavi Işık (405 nm), Amfenak ve Melatoninin Etkilerinin
Araştırılması
Yaşa bağlı maküla dejeneresansı (YBMD) gelişmiş ülkelerde yaşlılarda en
önemli körlük nedenidir. YBMD patogenezi tam olarak anlaşılamamış bir hastalık
olup günümüzde etkin bir tedavi ve önlemi yoktur. Yaşlılık sonucu YBMD
sebeplerinden birisi olan artan oksidatif stres sonucu maküladaki RPE ve progresif
dejenerasyon oluşmaktadır. Güneş ışığına maruziyet, yoğun ilüminasyon veya sigara
içimi gibi çevresel faktörler serbast radikal oluşumu aracılığı ile YBMD?den sorumlu
olduğu düşünülmüştür. Melatonin yapısında bulundurduğu pirol halkası nedeni ile
vücutta normal fizyoljik süreçte oluşan oksidan ajanlara karşı antioksidan özellik
göstermektedir. Amfenak siklooksijenaz yolağını inhibe eden ve inflamasyon,
maküla ödemi gibi önem arz eden durumlarda kullanılan bir antiinflamatuar ajandır.
Bu çalışmanın amacı ARPE-19 hücrelerinde kültür ortamında, mavi ışıkla
oluşturulan oksidatif stres modeline karşı Amfenak ve melatoninin LP, GSH, GSHPx,
hücre içi Ca+2 salınımı, ROT düzeyleri ve apoptozis düzeyleri üzerine muhtemel
koruyucu etkilerini araştırmaktır.
ARPE-19 hücreleri; Kontrol, Işık, Amfenak, Melatonin, Işık+Amfenak, Işık+
Melatonin, Işık+Amfenak+Melatonin olmak üzere yedi ana gruba ayrıldı.
LP düzeyleri; Kontrol, Amfenak, Melatonin, Işık+Amfenak, Işık+ Melatonin,
Işık+Amfenak+Melatonin gruplarında Işık grubuna göre anlamlı düzeyde düşük
saptandı (p<0.05).
GSH-Px aktivitesi değerlendirildiğinde gruplar arasında herhangi bir fark
tespit edilmedi.
GSH seviyeleri; Kontrol, Amfenak, Melatonin, Işık+Amfenak, Işık+
Melatonin, Işık+Amfenak+Melatonin gruplarında Işık grubuna göre anlamlı düzeyde
yüksek saptandı (p<0.05).
Hücre içi Ca+2 salınımı ve apoptozis düzeyleri; Kontrol, Amfenak, Melatonin,
Işık+Amfenak, Işık+ Melatonin, Işık+Amfenak+Melatonin gruplarında Işık grubuna
göre anlamlı düzeyde düşük saptandı (p<0.05).
ROT düzeyleri; Kontrol, Amfenak, Melatonin, Işık+Amfenak, Işık+
Melatonin, Işık+Amfenak+Melatonin gruplarında Işık grubuna göre anlamlı düzeyde
düşük saptandı (p<0.05).
Sonuç olarak bu çalışmada Amfenak ve melatoninin ARPE-19 hücrelerinde
oksidatif stres üzerine koruyucu etkilerinin olduğu gösterilmektedir.

Abstract:
Investigation of Effects of Blue Light-Irradiation (405 nm), Amfenac and
Melatonin on Calcium Signaling, Apoptosis and Oxidative Stress Parameters in
Cell Culture Medium
The most important cause of blindness in elderly people living in developed
countries is Age-Related Macular Degeneration (AMD). AMD, the pathogenesis is
not fully elucidated; today still an effective treatment and prophylaxis aren?t known
against it. Increased Oxidative stress status which is one of the most important actors
of AMD formation induces a progressive Retinal Pigment Epithelium (RPE)
degeneration in Macula. Environmental factors such as long-term daylight exposure,
intensive illumination and smoking are thought to be responsible from oxidative
stress mediated AMD development. Because of containing pirol chains in its
structure, melatonin has a very strong antioxidant effect against the oxidative
molecules occurring during the physiological process in human body. Amfenac is an
anti-inflammatory drug, which inhibits cyclooxygenase pathway, is used for
treatment of serious cases such as inflammation and macular edema.
The aim of this study is to investigate possible protective effects of Amfenac
and Melatonin on LP, GSH, GSH-Px, intracellular Ca2+ release, ROS and apoptosis
levels in cultured ARPE-19 cells in a blue light (405 nm) induced oxidative stress
model.
ARPE cells were divided into seven groups as defined; Control, Light,
Amfenac, Melatonin, Light + Melatonin, Light + Amfenac and Light + Amfenac +
Melatonin
Statistically, LP levels; in Control, Amfenac, Melatonin, Light + Amfenac,
Light + Melatonin and Light + Amfenac + Melatonin groups were significantly
lower than Light group (p<0.05).
In the terms of GSH-Px activity, there was no significant difference between
all groups.
GSH levels; in Control, Amfenac, Melatonin, Light + Amfenac, Light +
Melatonin and Light + Amfenac + Melatonin groups were significantly higher than
Light group (p<0.05).
Intracellular Ca2+ release and apoptosis levels; in Control, Amfenac,
Melatonin, Light + Amfenac, Light + Melatonin and Light + Amfenac + Melatonin
were significantly lower than Light group (p<0.05).
ROS levels; in Control, Amfenac, Melatonin, Light + Amfenac, Light +
Melatonin and Light + Amfenac + Melatonin groups were lower than Light group
(p<0.05).
As a result; in this study it is showed that Amfenac and Melatonin have a
protective effect against oxidative stress in ARPE-19 cells.