Bovine Herpes I virusu ile enfekte madin-darby bovine kidney hücre kültüründe oksidatif stres üzerine kuersetinin etkisi
The effect of quercetin on oxidative stress in madin-darby bovine kidney cell culture infected with bovine Herpes i Virus
Yazar: GÖKHAN KOÇAK
Danışman: PROF. DR. SENA ÇENESİZ
Ondokuz Mayıs Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2019
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Enzime bağlı immünosorbent testi = Enzyme-linked immunosorbent assay ; Glütatyon peroksidaz = Glutathione peroxidase ; Herpesvirüs 1-sığır = Herpesvirus -bovine ; Hücre kültürü = Cell culture ; Kuersetin = Quercetin ; Malondialdehit = Malondialdehyde ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Seruloplazmin = Ceruloplasmin ; Süperoksit dismutaz = Superoxide dismutase

Özet:
Amaç: Bu çalışma ile Madin Darby Bovine Kidney (MDBK) hücre kültüründe üretilen Bovine Herpes I Virusunun(BHV-1) oluşturduğu oksidatif stres üzerine kuersetinin etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. 
Materyal ve Metot: Çalışmamızda in vitro ortam MDBK hücre kültürü ile oluşturuldu. Sonra kontrol, kuersetin, BHV-1 ve kuersetin+ BHV-1 olarak 4 deney grubu oluşturuldu. MDA ve Cp düzeyleri spektrofotometrik yöntemle; GSH-Px ve SOD aktivitesi ELISA yöntemiyle ölçüldü. Apoptozis TUNEL yöntemi kullanılarak floarasan mikroskobunda incelendi. 
Bulgular: MDA düzeyinde istatistikî olarak anlamlı bir değişim bulunamadı GSH-Px aktivitesinde tüm gruplar arasında anlamlı bir artış görülürken virus bulunan gruplarda bu artışın daha fazla tespit edildi (p<0.01). SOD aktivitesi 0. ve 24. saatlerde virüs verilen gruplarda anlamlı bir azalma gösterirken (p<0.05); 48. ve 72 saatlerde kuersetin verilen gruplarda anlamlı bir artış olduğu görüldü (p<0.05). Cp düzeyinde virus verilen gruplarda anlamlı bir artış gösterdi (p<0.05). Apoptozis tüm gruplarda yüzde (%) olarak artış gösterirken BHV-1 ve kuersetin verilen gruplarda sinerjik bir etkiyle daha fazla bir artış olduğu belirlendi.
Sonuç: Enfeksiyona bağlı olarak GSH-Px aktivitesinde artış, SOD aktivitesinde ise ilk saatlerde bir azalma daha sonra kuersetin etkisiyle ilerleyen saatlerde artış tespit edildi. Seruloplazminde virüsün etkisiyle artış görülürken, kuersetinin koruyucu etkisiyle en fazla grup 4'de artış tespit edildi. MDA düzeylerinde anlamlı fark bulunamadı. BHV-1 ile enfekte edilen deney gruplarında apoptotik etki gözlendi. Sonuç olarak kuersetinin BHV-1 virüs enfeksiyonuna karşı antioksidan olarak etkili bir rol oynadığı görüldü.
Anahtar Kelimeler: Apoptozis; Cp; GSH-Px; Kuersetin; MDA; SOD

Abstract:
Aim: This study aimed at investigating the effects of quercetin on levels of Malondialdehyde (MDA), ceruloplasmin (CP), activity of glutathione peroxidase  (GSH-Px), superoxide dismutase (SOD) and apotozis in Bovine Herpes I Virus (BHV-1) produced in Madin Darby Bovine Kidney (MDBK) cellculture.
Material and Method: In our study, in vitro medium was created by MDBK cell culture. Four experimental groups were then formed as control, quercetin, BHV-1 and quercetin + BHV-1. MDA and Cp levels were determined by spectrophotometric method; GSH-Px and SOD activity was measured by ELISA. Apoptosis was examined under floarasan microscope using TUNEL method.
Results: There was no statistically significant change in MDA level. GSH-Px activity was significantly increased in all groups, whereas it was found to be higher in groups with virus (p <0.01). SOD activity showed a significant decrease in virus-treated groups at 0 and 24 hours (p <0.05); There was a significant increase in quercetin at the 48th and 72th hours (p <0.05). Cp levels showed a significant increase in virus treated groups (p <0.05). Apoptosis increased in percent (%) in all groups, whereas it was determined that in groups treated with BHV-1 and quercetin, there was a higher increase with a synergistic effect.
Conclusion: GSH-Px activity was increased due to infection and SOD activity was decreased in the first hour and then increased in the following hours with the effect of quercetin. While ceruloplasm increased with the effect of virus, quercetin was found to increase in group 4 with the protective effect. There was no significant difference in MDA levels. Apoptotic effect was observed in BHV-1 infected experimental groups. As a result, quercetin has been shown to play an effective role as an antioxidant against BHV-1 virus infection.
Key Words: Apoptosis; Cp; GSH-Px; MDA; SOD; Quercetin