Farklı düzeyde balık yağı ile beslenen erkek ratlarda L-karnitin in bazı kan ve doku parametrelerine etkileri
The effects of L-carnitine on blood and tissue parameters of male rats fed with different levels of fish oil
Yazar: HALİL YAVUZ
Danışman: PROF. DR. FİRUZE KURTOĞLU
Selçuk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2013
Konu: Biyokimya = Biochemistry ; Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine
Dizin: Antioksidanlar = Antioxidants ; Balık yağı = Fish oil ; Karnitin = Carnitine ; Lipidler = Lipids ; Sıçanlar = Rats ; Yağ asitleri = Fatty acids

Özet:
Bu çalışmada, farklı oranlarda balık yağı içeren rasyonla ad libitum beslenen erkek ratlarda 30 gün süreli L- karnitin (300 mg/kg/gün) uygulamasının (i.p.) plazma L- karnitin, lipit hidroperoksit (LPO), antioksidan enzimler (SOD, CAT) ile GSH, trigliserit, kolesterol seviyeleri, yağ asitleri profili ile karaciğer ve kas dokusu SOD, CAT, GSH düzeylerine ve canlı ağırlığına etkileri incelenmiş; elde edilen tüm veriler arınma dönemi olarak adlandırılan ikinci 30 günlük dönem değerleri ile karşılaştırılmıştır.

Araştırmada 5-6 aylık yaşta, canlı ağırlıkları birbirine yakın (ortalama 240g) 72 adet Sprague-Dawley cinsi erkek rat kullanılmıştır. Denemeye başlamadan önce bütün hayvanlar tartılarak canlı ağırlıkları tespit edilmiş ve canlı ağırlıkları birbirine yakın olacak şekilde gruplara dağıtılmıştır. Araştırma Selçuk Üniversitesi Veteriner Fakültesi Deney Hayvanları Ünitesi? nde yürütülmüştür ve 60 gün devam etmiştir. Ratlar her birinde 12 adet olacak şekilde 6 gruba ayrılarak standart rat besleme kafeslerinde barındırılmıştır. Yem ve su hayvanlara ad libitum olarak uygulanmıştır. Araştırmada 6 deneysel grup oluşturulmuştur ve bu gruplar şu şekilde düzenlenmiştir; 1. Kontrol, 2. Balık yağı (%1), 3. Balık yağı (%5), 4. L-karnitin (300 mg/kg/gün), 5. L-karnitin (300 mg/kg/gün) + balık yağı (%1) 6. L-karnitin (300 mg/kg/gün) + Balık yağı (%5). Araştırmada 10 gün adaptasyon dönemi olarak düzenlenmiş; bu süreyi takiben ilk 30 gün sonunda 36 adet rattan (her bir grup için 6 rat) kardiyak punksiyonla kanlar alınarak plazmalar kazanılmış; ötenazi ile ölen hayvanların karaciğer ve kas dokuları izole edilmiş, kazanılan plazmalarda L-karnitin, tirigliserit, kolesterol, LPO, GSH, CAT ve SOD değerleri ile karaciğer ve kas dokularında GSH, CAT, SOD aktiviteleri belirlenmiştir. Aynı işlemler kalan 36 adet rat için ikinci 30 günlük, sadece yem ve suyun ad libitum verildiği ve arınma periyodu olarak adlandırılan dönem sonunda tekrarlanmıştır.
Belirli gruplara (4., 5., ve 6. gruplar), günlük 300 mg/kg miktarında i.p. olarak karnitinin uygulandığı deneme dönemi sonunda (30. gün), en yüksek plazma karnitin konsantrasyonları bu gruplardan elde edilmiş benzer değişim karnitin uygulamasının kesildiği arınma dönemi sonunda (60. gün) da gözlenmiştir.  Tüm çalışma dönemleri  (başlangıç, deneme, arınma) arasındaki trigliserit ve kolesterol değerlerinde başlangıç dönemine göre özellikle 60. gün sonunda en belirgin düşüşler yine karnitin uygulanan gruplarda gerçekleşmiştir. 
Lipit hidroperoksit değerleri (LPO), hem dönemler arası hem de gruplar arası anlam taşıyan düşüşler göstermiştir. Sadece balık yağı verilen 2. ve 3. grup LPO değerleri ile kıyaslandığında karnitin desteğinin (5. ve 6. grup) belirli dönemlerde belirgin düşüş oluşturduğu tespit edilmiştir.  Glutasyon (GSH) değerlerinde hem deneme hem de arınma döneminde 4 grupta belirgin oranda artış göstermiş, balık yağı ile birlikte karnitin verilen 5. ve 6 gruplarda ise GSH değerlerinin kontrol gruplarına göre anlamlı oranda yüksek olduğu dikkati çekmiştir. Karnitin gruplarının antioksidan enzim değerlerinde (CAT ve SOD) gözlenen yükselmeler de anlamlı olup (P<0,001), özellikle karnitin ve karnitin+%1 balık yağı uygulanan 4 ve 5. gruplarda bu artışların belirgin olduğu gözlenmiştir. Karaciğer ve kas dokusu antioksidan enzim sonuçlarına göre tüm değerlerde 30 ve 60. gün gruplar arası enzim düzeylerinde aynı önem derecesinde (P<0,001) yükselmeler gözlenmiştir. 
Canlı ağırlık (CA) değerleri çalışma süresince gruplar arası farklılığa  (P<0.001) sadece 60. gün ölçümlerinde ulaşmış; karnitin uygulanan 4. grup ile karnitin + %1 balık yağı uygulanan 5. grupta ise başlangıçtan 60. güne kadar olan periyotta canlı ağırlıklarda belirgin (P<0.05) düşüş şekillendiği ortaya çıkmıştır.
Sonuç olarak, çalışmada ratlara 300 mg/kg/gün miktarında verilen karnitin, incelenen kan ve doku parametreleri ile canlı ağırlık ve plazma yağ asidi değerlerinde belirgin farklılıklar oluşturmuştur. İlave karnitinin kan ve doku antioksidan parametrelerini düzenlediği, lipit hidroperoksit düzeyini kontrol edici etki gösterebileceği, trigliserit düzeylerini azaltabileceği, canlı ağırlığına lipit kullanımını artırarak belirgin bir azalmaya neden olabileceği gözlenmiştir.

Abstract:
In this study, effects of  l-carnitine (300mg/kg/day) applicated intraperitoneally to male rats fed ration containing several proportions of fish oils for 30 days on plasma l-carnitine, lipid hydroperoxide (LPO), antioxidant enzymes (SOD, CAT), GSH, triglyceride, cholesterol levels, fatty acid profile and liver and muscle tissue SOD, CAT, GSH levels and body weight values were investigated; all the data obtained from the first 30 days period (trial period) compared with the second 30-day called wash-out period.
As animal material, 72 Sprague-Dawley male rats that have 5-6 months of age and body weight close to by each other (average 240 g) were used in the study. Before starting the experiment, all animals were weighed and distributed in groups according to homogenity for theirs body weight. The research lasted for 60 days and conducted at Selcuk University, Faculty of Veterinary Medicine Experimental Animal Research Unit.
Rats were divided into 6 groups in each be of 12 rats and were fed in standard rat cages ad libitum.  Six experimental groups were formed in the study and these groups organized as follows;
1-Control; 2-Fish oil (1%); 3-Fish oil (5%); 4-L-carnitine (300mg/kg/ day), 5-L-carnitine (300mg/kg/ day) plusfish oil (1%) 6-L-carnitine (300mg/kg/day) plus fish oil (5%). After the adaptation period of 10 days, at the end of the first 30 days the 36 rats (6 rats for each group) blood samples were taken by cardiac puncture, plasma were acquired; liver and muscle tissues isolated from animals killed by euthanasia, l-carnitine, trigliceride, cholesterol, LPO, GSH, CAT, SOD levels in the plasma and GSH, CAT, SOD activities of liver and muscle tissues were determined. The same procedure for the remaining 36 rats only given feed and water ad libitum at the end of second 30 days (wash-out) period were repeated. 
In the specific groups (4, 5, and 6. groups), which carnitine applied (daily 300 mg / kg body weight), the maximum plasma carnitine concentrations obtained from these groups (31,01, 24,96, 31,14 µM respectively) at the end of the trial period (30. day), similar changes for plasma carnitine levels of related groups at the end of wash-out period (60. day) was also observed. 
Lipid hydroperoxide levels (LPO) in the intertemporal as well as between groups showed meaningful declines. These values have been identified as posing significant decline in the group of carnitine supplemented groups (5 and 6) in certain periods compared to groups in 2 and 3 which fish oil supplemented. Glutathione (GSH) levels showed a significant increase in the group of 4 supplemented carnitine on trial and the wash-out periods and also, groups of 5 and 6 administered fish oils with carnitine have significantly higher GSH levels compared to control groups. Antioxidant enzyme (CAT and SOD) activities significantly (P<0.001) increased on carnitine supplemented groups especially the 4th and 5th groups which carnitine and carnitine+1%fish oil added respectively.. It was obtained that SOD activity in muscle and liver highly significant (P <0.001) have increase between groups on trial and wash-out periods, same course of liver SOD levels was found on the 30th day, while  muscle SOD activity on day 60 has emerged. 
Between the groups, live weight values reached on statistically (P <0.001) changed at only 60 day measurements; these values in carnitine applied (group 4) and carnitine+ 1% fish oil applied (group 5) decreased significantly (P<0.05).

In conclusion, it was found that carnitine applicated by 300 mg / kg /day to rats statistically affected the blood and tissue parameters, body weight of rats. It was also evaluated; extra-carnitine may decrease triglyceride levels and increase blood and tissue antioxidant, while lipid hydroperoxide levels can be display controlling effect by carnitine administration. A significant reduction in body weight may lead to increased use of lipid values were observed.