Tocilizumab'ın deneysel subaraknoid kanama sonrası serebral vazospazm üzerine etkileri
Experimental subearnoididation of tocilizumabeffects on cerebral vazospazm
Yazar: EMİR KAAN İZCİ
Danışman: DOÇ. DR. FATİH KESKİN
Necmettin Erbakan Üniversitesi / Meram Tıp Fakültesi / Nöroşirürji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2018
Konu: Nöroşirürji = Neurosurgery
Dizin: Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Hemorajiler = Hemorrhage ; Subaraknoid kanama = Subarachnoid hemorrhage ; Sıçanlar = Rats ; Tosilizumab = Tocilizumab ; Vazospazm-intrakraniyal = Vasospasm-intracranial ; İnterleukin 6 = Interleukin 6

Özet:
Amaç: IL-6 inhibitörü olan tocilizumab hem romatoid artrit hem de Behçet hastalığı gibi
otoimmün rahatsızlıklarda anti-inflamatuvar etkili bir ilaç olarak kullanılmıştır. Bunun yanında
patofizyolojisinde inflamasyonun da yer aldığı serebral iskemide de aynı şekilde
kullanılmıştır.Ancak SAK sonrası gelişen vazospazm da etkisi bilinmemektedir. Bu çalışmanın
amacı tocilizumabın SAK sonrası gelişen vazospazm üzerine etkilerini biyokimyasal,
histopatolojik ve fonksiyonel etkilerini olarak incelemektir.
Yöntem:Bu çalışmada 48 adet erişkin 300-350 gr ağırlığında erkek Wistar albino rat
kullanılmıştır. Ratlar 4 gruba ayrılmıştır: grup 1 (kontrol), grup 2(SAK), grup 3(SAK+salin), grup
4(SAK+tocilizumab). Tocilizumab tedavisi (8mg/kg/gün ip) olarak verilmiş ve tedaviye SAK
oluşturulduktan sonra başlanarak tedavi 72 saat sürdürülmüştür. Ratlar sakrifiye edildikten sonra
ratların beyin dokularında bcl-2(bax), caspase-3, STAT-3, IL-6, IL-1, TNF-  ve VEGF
düzeyleri ve beyin sapından elde edilen baziller arter kesitlerinde Hemotoksilen-Eozin ve Tunel
yöntemleri ile nöronal hasar, baziller arter çapı ve apopitozis skoru hesaplanacaktır Çalışma
sonrası elde edilen değerler SPSS 21.0 (Windows için SPSS, version 21.0; SPSS, Chicago,
ABD) programı ile değerlendirilmiştir.Verilerin gruplar arası karşılaştırılmasında Kruskal
Wallis varyans analizi kullanıldı. Gruplar arası veri farkları bulunduğunda gruplararası hangi
verilerin farklı olduğunu belirlemek için Mann Whitney U kullanıldı. İstatistiksel olarak p<0.05
anlamlı olarak kabul edildi. Sonuçlar tablo ve grafiklerle gösterildi.
Bulgular:Yaptığımız histolojik çalışmada apopitozis varlığını gösteren TUNEL pozitif
endotel hücre yüzde ortalamalarının SAK ve SAK+Salin grubunda kontrol grubuna göre
istatistiksel olarak anlamlı arttığı belirlendi. Toc'un ise TUNEL pozitif endotel hücre yüzde
ortalamasını istatistiksel olarak anlamlı düşürdüğü belirlendi.Çalışmamızda, SAK sonrasında
baziller arter duvar kalınlığında artış ve lümen alanı ortalama ölçüm değerlerinde ise azalma
meydana gelmiştir. İnflamatuar Sitokinler olan IL6, TNF- ve IL-1 seviyesinde SAK ve
SAK+salin grubuna göre anlamlı oranda azalma, propopitotik bax ve caspaz seviyesinde SAK ve
SAK+salin grubuna göre anlamlı azalma, anjiogenez molekulü olan VEGF'de SAK ve
SAK+Salin grubuna göre anlamlı zalma tespit ettik.
Sonuç: Tocilizumab tedavisininin etkilerini araştırdığımız deneysel çalışmamızda SAK
sonrası artan endotel apopitozisini ve arter duvar kalınlığını azalttığı, lümen alanında meydana
gelen daralmayı engellediği, nöroprotektif etkide artış sağladığı ve inflamasyonda azalma
sağladığı gösterilmiştir.

Anahtar Kelimeler: Subaraknoid Kanama, Vazospazm, Tocilizumab, Rat

Abstract:
AIM: . Tocilizumab, which is an IL-6 inhibitor, has been used as a medication with antiinflammatory
effects in autoimmune diseases like rheumatoid arthritis and Behcet's disease. In
addition, it has been used in the same way in cerebral ischemia whose pathology includes
inflammation. However, its effects are not known in vasospasm that develops after SAH.
METHODS:In this study, 48 adult male Wistar albino rats weighing 300-350 grams were
used.Rats were divided into 4 groups: group 1 (control), group 2 (SAH), group 3 (SAH + saline),
group 4 (SAH + tocilizumab).Tocilizumab treatment was given at a dose of 8mg / kg / day and
treatment was continued for 72 hours after the SAH was established.After the rats are sacrificed,
bcl-2(bax), caspase-3, STAT-3, IL-6, IL-1, TNF- and VEGF levels in the brain tissues of
ratsand neuronal damage, basilar artery diameter, and apoptosis score will be calculated by
Hemotoxylin-Eosin and Tunel methods in basilar artery sections obtained from brain stem.
Values obtained after the study were evaluated by SPSS 21.0 (SPSS for Windows, version 21.0;
SPSS, Chicago, USA) program.Kruskal Wallis analysis of variance was used for comparison of
data between groups. Mann Whitney U test were used to determine which data differ between
groups when data differences between groups were found.Statistically, p <0.05 was considered
significant. The results are shown in tables and graphs.
RESULTS: In our histological study, it was determined that the percentages of TUNEL
positive endothelial cells that reveal the existence of apoptosis increased statistically significantly
in the SAH and SAH + Saline group compared to the control group.Tocilizumab decreased the
mean percentage of TUNEL positive endothelial cells in a statistically significant manner.In our
study, basilar artery wall thickness was increased and mean luminal area was decreased after
SAH. In our study we found significant reduction in levels of inflammatory cytokines (IL6, TNF-
 and IL-1) compared to SAK and SAK + Saline group. Propitotic bax and caspase levels were
significantly lower than the SAK and SAK + saline groups and alsothere is a significant decrease
in the angiogenesis molecule VEGF compared to the SAK and SAK + Saline group.
CONCLUSION:In our experimental study investigating the effects of Tocilizumab
treatment, it has been shown that tocilizumab reduces the endothelial apoptosis and increased
arterial wall thickening after SAK, prevents narrowing in the lumen area, increases
neuroprotective effect and decreases inflammation.

Keywords: Subarachnoid Hemorrhage, Vasospasm, Tocilizumab, Rats