Yangı oluşturulmuş gökkuşağı alabalık (Oncorhynchusmykiss Walbaum, 1972)'larında karvakrolün biyoetkinliği
Effects of carvacrol on antioxidant some enzymes in infection of yersinia ruckeri
Yazar: İBRAHİM GÜLŞAFAK
Danışman: DOÇ. DR. AZİME KÜÇÜKGÜL
Tunceli Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Su Ürünleri Yetiştiriciliği Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2015
Konu: Su Ürünleri = Aquatic Products
Dizin: Gökkuşağı alabalığı = Rainbow trout ; Karvakrol = Carvacrol ; Oncorhynchus mykiss = Oncorhynchus mykiss

Özet:
Bu çalışmada, ön çalışmalarda dâhil olmak üzere toplam 400 gökkuşağı alabalığı
(ort. 16,57±7,48 cm uzunluk, 44.71±1,33 gr ağırlık) kullanıldı. Dört deneysel grup
oluşturulan araştırmada, ilk grup kontrol grubu olup deney süresince tüm optimal koşullar
sağlandı. İkinci gruptaki balıklar 25 µg/ml lipopolisakkarit (LPS) ile intraperitonel olarak
(i.p.) enfekte edildi ve infeksiyon grubu olarak değerlendirildi. Üçüncü grup balıklar
enfekte edilmedi ve yalnızca karvakrol destekli yem takviyesi (100µg/ml/1 kg yem) ile
beslendi. Son grubu oluşturan balıklar ise LPS ile enfeksiyon sonrası karvakrol destekli
yem ile beslendi. Deneme peryodu boyunca su sıcaklığı, pH, çözünmüş oksijen değerleri
sırasıyla 15,5 oC, 8.01, 9.57 mg/L olarak sabitlendi. Deneysel aşama 48 saat sonunda
tamamlandı. Deneme süresi sonunda karaciğer ve böbrek doku örnekleri alındı ve
proinflamatuar sitokinlerden interferon gama (IFN-γ) ve interlökin 1 beta (IL-1β) gen
ekspresyon seviyeleri araştırıldı. IFN-γ, IL-1β genlerine spesifik dizayn ettirilen
primerlerin en uygun yapışma (annealing) sıcaklıkları 55-60 oC arasında farklı ısı
dereceleri uygulanarak, gradient PCR yöntemiyle analiz edildi Karvakrolun
antiinflamatuvar etkinliği araştırıldı. LPS ile oluşturulan enfeksiyon sonunda balıklarda
göz cidarında, kuyruk bölgelerinde hemorajiler, pullarda dökülmeler gözlendi. Elde edilen
veriler göstermiştir ki, LPS ile enfekte edilen gruptan elde edilen karaciğer ve böbrek
dokusu IL-1β ekspresyon seviyeleri kontrol grubuna kıyasla sırasıyla % 53 ve % 12,9
oranında uyarılmıştır. Enfeksiyonu takiben karvakrol destekli yemleme yapılan grupta ise
bu artışların sırasıyla % 13 ve % 85 baskılandığı tespit edilmiştir. Enfeksiyon içeren grupta
akut faz proteinlerinden olan IFN-γ karaciğer ve böbrek ekspresyonu seviyeleri ise kontrol
grubuna göre 2, 87 ve 4, 87 misli değişimlerle uyarılmış, ancak karvakrolün bu artışları
sırasıyla 4,78 ve 8,11 misli değişimlerle baskıladığı gözlenmiştir.,

Anahtar Kelimeler: Gökkuşağı Alabalığı, Lipopolisakkarit, Karvakrol, İnterferon Gama,

Abstract:
In this study, including preliminary studies total 400 rainbow trout (mean
16.57±7.48 cm of length and 44.71±1.33 g of weight) was used. In this research created the
four experimental groups, the first group is the control group was provided optimal
conditions during all experiments. The fish in the second group were intraperitoneally (i.p.)
infected by 25 mg / ml of lipopolysaccharide (LPS) and was evaluated as infection group.
The fish in the third group was not infected and only the feed supported with carvacrol
(100µg/ml/1 kg of feed) was fed. The fish included the last group was fed by the feed
supported carvacrol after infection with LPS. Water temperature, pH, dissolved oxygen
values during the experimental period were fixed as 15.5 ° C, 8.01, 9.57 mg / L
respectively. The experimental stage was completed after 48 hours. The liver and kidneys
tissue samples were removed at the end of the trial period and interferon-gamma (IFN-γ)
and interleukin 1 beta (IL-1β) gene expression levels from pro-inflammatory cytokines
were investigated. Optimal adhesion (annealing) temperatures of the primers designed
specifically IFN-γ and IL-1β genes analyzed by gradient PCR with applying different
temperatures between 55-60 °C. Anti-inflammatory activity of carvacrol was investigated.
Hemorrhages in the eye wall and the tail region of the fish and loss of fish scales were
observed at the end of infection caused by LPS. The obtained data have shown that liver
and kidney tissues IL-1β expression levels obtained from the group infected by LPS were
compared to the control group and were stimulated 53 % and 12.9 %, respectively. These
increases in the group of feeding supplemented carvacrol following infection were
inhibited the rate of 13 % and 85 %, respectively. IFN-γ liver and kidney expression levels
to be acute phase proteins in the group-included infection were compared by the control
group and were stimulated 2.87 and 4.87 fold changes, respectively, however these
increases were inhibited by 4.78 and 8.11 fold changes.

Key Words: Rainbow Trout, LPS, Carvacrol, Interferon gamma, Interleukin 1 Beta