Sigara kullananlarda kan kadmiyum düzeyinin ve lenfosit DNA hasarının belirlenmesi
Determination of blood cadmium levels and lymphocyte DNA damage in smokers
Yazar: ESMA SÖYLEMEZ
Danışman: PROF. DR. HALİL GÜMÜŞ
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Disiplinlerarası Adli Bilimler Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2011
Konu: Adli Tıp = Forensic Medicine ; Genetik = Genetics
Dizin: Comet tekniği = Comet assay ; DNA hasarı = DNA damage ; DNA mutasyon analizi = DNA mutational analysis ; Kadmiyum = Cadmium ; Lenfositler = Lymphocytes ; Sigara içme = Smoking

Özet:
Çalışmamızın amacı, kan kadmiyum düzeyini belirlemek ve sigaranın lenfosit DNA hasarına etkisini araştırmak ve sigaranın potansiyel genotoksik etkisini comet assay ile analiz etmektir.Çalışma sonucunda, DNA hasar derecesi 9 comet parametresine göre değerlendirilmiştir. Sigara içen ve içmeyen gruplarda Cd düzeylerine ve CI, TL and OTM gibi comet parametrelerine göre istatistiksel olarak çok anlamlı bulunmuştur (p<0,01), bununla birlikte diğer comet parametreleri arasında istatistiksel olarak anlamlı bir ilişki bulunamamıştır. Sigara içen bireyleri cinsiyete göre ayırıp sonuçları değerlendirğimizde ise sigara içen kadınlarda içmeyenlere göre CL, CI, HL, HI, TL, TI comet parametreleri çok anlamlı (p<0,01), bunula birlikte Cd düzeyi ve TM parametresi ise istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur (p<0,05). Buna karşın, sigara içen erkekler ile içmeyenler karşılaştırıldığında, sadece Cd düzeyi, DT ve OTM comet parametrelerine göre istatistiksel olarak anlamlılık bulunmuştur (p<0,05). Korelasyon açısından değerlendirildiğinde, Cd düzeyi ile yaş ve comet parametreleri arasında anlamlılık bulunmazken (p>0,05), comet parametrelerinin kendi arasında istatistiksel olarak çok anlamlı sonuçlar bulunmuştur (p<0,01). Sigara indeksine göre değerlendirildiğinde, kadın bireylerde TM comet parametresine göre, erkek bireylerde ise CL, HL, HI, TI and OTM parametrelerine göre istatistiksel olarak anlamlılık bulunmuştur. Ayrıca, yaş, Cd düzeyi ve comet parametrelerinin korelasyonunda ise her hangi bir istatistiksel anlamlılık bulunamamıştır (p>0,05).Sigara içen içmeyen kadın ve erkek grupları dokuz comet parametresiyle değerlendirilmiştir ve dokuz parametrenin yedisinde sigara içen ve içmeyen kadın gruplarında istatistiksel olarak anlamlılık bulunmuş, erkek bireylerde sigara içen ve içmeyen gruplarda yalnızca iki parametrede istatistiksel olarak anlamlılık bulunmuştur. Ancak sigara içen kadınların erkeklere oranla DNA hasarının altı comet parametresiyle istatistiksel olarak anlamlı bulunmuştur.Çalışmamızında 120 kan örneğinin kadmiyum konsantrasyonları ölçülerek, comet parameteresi ile kadmiyum düzeyleri arasındaki ilişki araştırılmıştır. Sigara içen ve içmeyen gruplarda Cd derecesi CI, TI VE OTM parametrelerinde istatiksel olarak anlamlı bulundu (p<0,01), ancak diğer comet parametreleri arasında istatiksel bir anlamlılık bulunmadı. Sigara içen ve sigara içmeyen kadınlarda 9 comet parametresi ile kadmiyum derecesi arasında değerlendirme yapıldığında Cd düzeyi ile TM arasında istatiksel olarak bir anlamlılık bulundu (p<0,05). Ancak erkeklerde sigara içen ve içmeyen gruplar karşılaştırıldığında sadece Cd derecesi, DT ve OTM ile istatistiksel olarak anlamlı bulundu (p<0,05).

Abstract:
The aim of this study was to investigated determination of blood cadmium levels the relationship between the smoking and DNA damage in lymphocytes and a potential genotoxic effect of cigarette smoking was analyzed with the comet assay (single cell gel electrophoresis, SSGE).This study,The nine parameters, including comet length (CL), comet intensity (CI), head length (HL), head intensity (HI), tail length (TL), tail intensity (TI), DNA tail (DNAt), tail moment (TM) and olive tail moment (OTM) defined on comet assay were used for the first time in this study. 120 volunteers (60 non-smokers, 60 smokers) were monitored in the way of DNA damage in blood lymphocytes. The levels of DNA damage was measured by BAB Bs Comet Assay system.The highly significant associations were found between the non-smoker and smoker groups for CI, TL and OTM comet parameters (p<0,01). Smoker female group had higher CL, CI, HL, HI, TL, TI (p<0,01) and TM (p<0,05) with regards to DNA damages than non-smoker female group. In contrast, only DNAt and OTM comet parameters were statistically differences between the smoker male and non-smoker male groups (p<0,05). Smoking index (SI) of all the blood samples from females were compared based on all studied comet parameters and found statistically significant (p<0,05) except for TM. On the other hand, the blood samples taken from male were significant using CL, HL, HI, TI and OTM (p<0,05). Consequently, comet assay for the evaluation of DNA damages related with increased genotoxic effects could be used in smokers.The nine comet assay parameters were evaluated among the females and males in the non-smoker and smoker groups, and seven of nine comet parameters were found statistically significant between smokers and non-smokers women, only two of them parameters were statistically significant in male smokers and non-smokers. However, we have seen that more DNA damages in women smokers than men smokers for comparison with the six parameters of comet.After the determination Cd concentration of the 120 blood samples were measured and the evaluated between the comet assay parameters and Cd level were investigated. Cd levels and CI, TL and OTM parameters were found statistically significant between non-smoker and smoker groups(p<0,01), however another comet parameters were not found comet statistically significant. The nine comet assay parameters and cadmium levels were evaluated among the females in the non-smoker and smoker groups Cd levels and TM parameters were found statistically significant (p<0,05). However, cadmium levels were evaluated among males in the non-smoker and smoker groups were compared, just Cd level, DT ve OTM were found statistically significant (p<0,05).