Deneysel nekrotizan enterokolit modelinde amnion sıvısı 
ve sitokinlerin nekrotizan enterokolit ile ilişkisi
Deneysel nekrotizan enterokolit modelinde amnion sıvısı 
ve sitokinlerin nekrotizan enterokolit ile ilişkisi
Yazar: MUHAMMED ÜDÜRGÜCÜ
Danışman: DOÇ. DR. ŞEREF OLGAR
Kahramanmaraş Sütçü İmam Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2013
Konu: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases
Dizin: Amniotik sıvı = Amniotic fluid ; Endotelinler = Endothelins ; Enterokolit = Enterocolitis ; Granülosit koloni stimülan faktör = Granulocyte colony stimulating factor ; Granülosit makrofaj koloni stimülan faktör = Granulocyte macrophage colony stimulating factor ; Malondialdehit = Malondialdehyde ; Sitokinler = Cytokines ; Tümör nekroz faktörleri = Tumor necrosis factors ; Vasküler endotel büyüme faktörleri = Vascular endothelial growth factors ; İnterlökin 8 = Interleukin 8

Özet:
Nekrotizan enterokolit (NEK) prematür bebekleri ve yenidoğanları etkileyen,
gastrointestinal sistemin ciddi bir hastalığıdır. Son yıllarda in-vitro fertilizasyon
yöntemlerinin gelişmesiyle preterm doğumlarla birlikte bu hastalığın da sıklığı artmıştır.
Patogenezi yeterince bilinmemektedir, ancak enteral beslenme, bakteriyel kolonizasyon,
prematürite, düşük doğum ağırlığı ve hipoksik-iskemik durumlar şüphelenilen risk
faktörleridir. Fetal dönemde bu faktörlere maruz kalınsa da yutulan amnion sıvısının
önleyici rolü ile bebekler NEK?ten korunmakta, NEK bulguları görülmemektedir. Buna
göre, gastrointestinal sistem gelişiminde etkileri olan amnion sıvısının deneysel NEK
modelinde etkilerini incelemeyi planladık. Bu amaçla, sıçan yavruları hipoksi-hipotermi
geliştirilen modele göre 5 gruba ayrıldı. Grupların dördüne hipoksi-hipotermi uygulandı
ve anne sütü ile beslenen (G2), amnion sıvısı ile beslenen (G3), formula ile beslenen
(G4), amnion sıvısı ile hazırlanan formula ile beslenen (G5) gruplar kontrol grubu (G1)
ile kıyaslandı.
Deneyin 96. saatinde tüm hayvanlar ?sakrifiye? edildi ve çalışma sonlandırıldı.
Histopatolojik inceleme için bağırsak örnekleri alındı ve kalan bağırsak kısımlarından
doku homojenatı elde edildi. Homojenat örneklerinden sekonder enfeksiyonların
incelenmesi için CRP, oksidan-antioksidan stres için MDA, SOD, CAT ve GPx,
enflamasyon için GM-CSF, TNF-?, IL-8 ve vasküler hasarın tespiti için VEGF ve ET-1
düzeyleri değerlendirildi.
Hipoksi-hipotermi stresi uygulanan ve anne sütü ile beslenen yavrularda (G2)
NEK gelişimine ait bulgular ve perforasyon gözlemlenmedi. Bu durum anne sütünün
koruyucu etkisine bağlandı. Ancak, diğer gruplarda perforasyon ve NEK bulguları
gelişti. Amnion sıvısı ile beslenen yavruların (G3) formula mama ile beslenenlerden
daha kısa yaşadığı tespit edildi. Azalmış bu yaşam süresi amnion sıvısının düşük enerji
ve protein içermesine bağlandı, intestinal perforasyon ise G4 yarvularına göre daha
seyrek saptandı. Bununla birlikte G4 yavrularında perforasyon daha sıktı ve NEK
bulguları daha şiddetli idi. Bu değişiklikler amnion sıvısının bağırsak lümeninde
mukosiliyer bariyeri koruyucu rol oynaması, oksidatif stresi azaltması, antioksidan
görev yapması, enflamasyonu azaltması ve vaskulogenezisi etkileyerek remodelingi
artırması ile düşük solüt yüküne bağlandı.
ix
Sonuç olarak bu çalışmada, enerji ve protein içeriğinden fakir olan anmion
sıvısının formula mama ile birlikte yenidoğan sıçanlara verilmesiyle bağırsak
perforasyonu ve NEK gelişim sıklığının azaldığını gösterdik. Amnion sıvısının formula
mama ile verilebilmesi için steril olarak toplanması, mikrobiyal ajanlar ve verniks
kazeozadan arındırılması ve her yenidoğanın kendi amnion sıvısının muhafaza edilmesi
ve daha kapsamlı çalışmalara ihtiyaç vardır.

Abstract:
Necrotizing enterocolitis (NEC) is a serious disease that effects gastrointestinal
tract of premature infants and newborns. During the recent years, the development of invitro
fertilizastion methods caused preterm birth frequency and disease rate. The
pathogenesis of this disease is not known enough, however as risk factors for the
disease are enteral nutrition, bacterial colonization, prematurity, low birth weight, and
hypoxic-ischemic conditions are suspected risk factors. Despite exposure to these
factors in the fetal period the NEC signs are not seen because the swallowed amniotic
fluid has a preventive role and protects the baby from NEC. Beside this, it causes of
gastiontestinal tract development and we aimed to investigate the effects of amniotic
fluid on experimental NEC model. For this purpose, 5 groups of rat pups were
examined by hypothermia-hypoxia developed model. Four groups of newborn rats were
exposed to hypothermia-hypoxia and were fed with breast milk (G2), amniotic fluid
(G3), formula (G4), prepared with amniotic fluid formula (G5) and were compared with
control groups (G1).
At the 96th hour of the experiment model all animals were sacrified and the
study was terminated. A intestinal sample was taken for histopathologic examination
and the remaining segment of the intestine was homogenated. The homogenated
samples were examined for secondary infections by CRP, for oxidative-antioxidative
stress by MDA, SOD, CAT and GPx, for inflammation by GM-CSF, TNF-?, IL-8 and
for vascular damage evaluation by VEGF and ET-1 levels analyzes.
There weren?t NEC devolopment signs and perforation findings at hypoxichypothermic
stress induced and breast fed pups (G2). This conditon was connected to
protective effect of breastfeeding. However, perforation and necrotising enterocolitis
signs developed in the other groups. It was noticed that amniotic fluid fed pups (G3)
lived shorter than formula fed pups (G4). This short life span was connected to low
energy and protein content of amniotic fluid but the intestinal perforation rate was lower
than G4 pups?. In addition, the NEC signs of G3 were less and were not as severe as
G4?s. However, more perforation was observed in G4 pups and NEC findings were more
serious. When the pups were fed by the formula mixtured with amnion fluid (G5)the
intestinal perforation rate decreased and NEC findings weren?t severe as G4. These
xi
changes connected to amniotic fluid protecting role of mucociliary barrier at bowel
lumen, reduced oxidative stres, perform antioxidant tasks, reduce inflammation and
increase remodeling by affecting the vasculogenesis with low solute load.
As a result of this study, we showed that poor energy and protein content
amniotic fluid used combined with formula feeding newborn rats reduced bowel
perforation and NEC development rate. For using amniotic fluid combined with
formula, amniotic fluid should be sterile collected, seperated from microbial agents and
vernix caseosa and kept its own amniotic fluid of each newborns, and more extensive
studies are needed.