Ratlarda pseudomonas aeruginosa ile oluşturulan deneysel kronik otitis media modelinde rosmarinik asitin tedavi etkinliğinin araştırılması
Investigation of therapeutic effectiveness of rosmarinic acid in experimental chronic otitis media model in rats induced with pseudomonas aeruginosa
Yazar: SADIK VURAL KAYA
Danışman: DOÇ. DR. AYHAN KARS
Erzincan Binali Yıldırım Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kulak Burun Boğaz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2024
Konu: Kulak Burun ve Boğaz = Otorhinolaryngology (Ear-Nose-Throat)

Özet:
ETKİNLİĞİNİN ARAŞTIRILMASI ÖZET Amaç: Çalışmamızda antiinflamatuar, antibakteriyel ve antioksidan etkileri gösterilmiş olan rosmarinik asit (RA)'in, topikal damla formunda kullanımda kronik otitis media (KOM) üzerindeki tedavi edici etkinliğinin histopatolojik olarak araştırılması amaçlanmıştır.  Gereç ve Yöntem: Çalışmada 30 adet erişkin, dişi Wistar albino cinsi rat kullanıldı. Ratlar randomize olarak her birinde 6'şar rat bulunan 5 gruba ayrıldı. 1. grup sağlıklı kontrol grubu olarak ayrılmış ve iki kulaklarına da herhangi bir girişim uygulanmamıştır. Kalan 4 grupta Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) suşlarının transtimpanik inoküle edilmesi ile KOM modeli oluşturuldu. 2. grup KOM takip grubu olarak tedavisiz izleme alındı, 3. siprofloksasin damla ile tedaviye alındı, 4. grup siprofloksasin ve RA %2'lik solüsyon damlatılarak tedaviye alındı ve 5. grup RA %2'lik solüsyon damlatılarak tedaviye alındı. 14 günlük takibin ardından 30 rat (60 kulak) sakrifiye edilerek bilateral temporal kemikleri diseke edildi ve histopatolojik olarak nötrofil aktivitesi, kronisite, histiosit varlığı, keratin birikimi, subepitelyal ödem,  konjesyon, fibroblast proliferasyonu, neovaskülarizasyon ve timpanik membran (TM) kalınlığı açısından incelendi. Bulgular: Nötrofil aktivitesi yönünden gruplar arasında anlamlı farklılık izlendi (p: 0,002). 2. grupta nötrofil aktivitesi 1. - 4. ve 5. gruplara göre anlamlı şekilde yüksek bulundu (sırasıyla; p<0,001/ p: 0,01/ p: 0,02).  Kronisite açısından gruplar arasında anlamlı farklılık izlendi (p<0,001). 2. grupta kronisite oranı 1. gruba göre anlamlı şekilde artmış bulundu (p: 0,02).  Histiosit skorları karşılaştırıldığında gruplar arasında anlamlı farklılık izlendi (p<0,001). 2. grupta histiosit varlığı 1. - 3. - 4. ve 5. gruplara oranla anlamlı şekilde yüksek izlendi (sırasıyla; p<0,001/ p: 0,01/ p<0,001/ p:0,001).  Keratin birikimi açısından değerlendirildiğinde gruplar arasında anlamlı farklılık izlendi (p: 0,004). 2. grupta keratin debris birikimi 1. - 4. ve 5. gruplardan anlamlı olarak fazla bulundu (sırasıyla; p:0,01/ p:0,01/ p:0,01).  1 Subepitelyal ödem açısından incelendiğinde gruplar arasında anlamlı farklılık gözlendi (p: 0,004). 1. grupta subepitelyal ödem 3. - 4. ve 5. gruplara oranla anlamlı olarak daha az bulundu (sırasıyla; p: 0,03/ p: 0,009/ p: 0,003).  Konjesyon açısından bakıldığında gruplar arasında anlamlı farklılık görüldü (p<0,001). 1. grupta konjesyon 2. - 3. ve 4. gruplara oranla anlamlı olarak daha az izlendi (sırasıyla; p<0,001/ p: 0,031/ p:0,031). Fibroblast proliferasyonuna bakıldığında gruplar arasında anlamlı farklılık saptandı (p<0,001). 1.grupta 3. ve 4. gruplara kıyasla fibroblast proliferasyonu anlamlı oranda düşük izlendi (sırasıyla; p<0,001/ p: 0,012). 2. grupta fibroblast proliferasyonu 3. gruba göre daha düşük bulundu (p:0,005). Neovaskülarizasyon açısından bakıldığında gruplar arasında anlamlı farklılık görüldü (p<0,001). 1. grupta 2. ve 5. gruplara göre anlamlı olarak daha düşük neovaskülarizasyon izlendi (sırasıyla; p<0,001/ p: 0,001). TM kalınlığı açısından gruplar arasında anlamlı farklılık görüldü (p<0,001). 1. grupta TM kalınlığı 3. gruba göre anlamlı olarak düşük bulundu (p<0,001).  Sonuç: RA'in topikal kulak damlası formunda kullanımının KOM'da tedavi edici etkinliği olduğuna dair klinik ve histopatolojik bulgular elde edilmiştir. Anahtar Kelimeler: Kronik otitis media, rosmarinik asit, hayvan deneyi, deneysel otit modeli, otitis media.

Abstract:
In our study, we aimed to investigate the histopathological therapeutic efficacy of rosmarinic acid (RA), which has been shown to have anti-inflammatory, antibacterial and antioxidant effects, on chronic otitis media (COM) when used in topical drop form.  Materials and Methods: Thirty Wistar rats were used in the study. The rats were randomly divided into 5 groups for 6 rats. Group 1 was separated as a healthy control group. COM was induced with Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) in 4 groups. Group 2 COM follow-up group, group 3 treated with ciprofloxacin drops, group 4 treated with ciprofloxacin+RA drops, and group 5 treated with RA drops. After 14 days of follow-up, 30 rats (60 ears) were sacrificed and their temporal bones examined histopathologically for neutrophil activity, chronicity, presence of histiocytes, keratin accumulation, subepithelial edema, congestion, fibroblast proliferation, neovascularization and tympanic membrane (TM) thickness.  Results: There was a significant difference between the groups in terms of neutrophil activity (p: 0.002). Neutrophil activity in group 2 was found to be significantly higher than in groups 1, 4 and 5 (respectively; p<0.001/ p: 0.01/ p: 0.02). There was a significant difference between the groups in terms of chronicity (p<0.001). The chronicity rate in group 2 was found to be significantly increased compared to group 1 (p: 0.02). There was a significant difference between the groups in terms of histocyte scores (p<0.001). The presence of histiocytes in group 2 was observed to be significantly higher than in groups 1, 3, 4 and 5 (respectively; p<0.001/ p: 0.01/ p<0.001/ p:0.001). There was a significant difference between the groups in terms of keratin accumulation (p: 0.004). Keratin debris accumulation was found to be significantly higher in group 2 than in groups 1, 4 and 5 (respectively; p:0.01/ p:0.01/ p:0.01). A significant difference was observed between the groups in terms of subepithelial edema (p: 0.004). Subepithelial edema was found to be significantly less in group 1 than in groups 3, 4 and 5 (respectively; p: 0.03/ p: 0.009/ p: 0.003). 3 A significant difference was observed between the groups in terms of congestion (p<0.001). Congestion was observed to be significantly less in group 1 than in groups 2, 3 and 4 (respectively; p<0.001/ p: 0.031/ p:0.031). A significant difference was observed between the groups in terms of fibroblast proliferation (p<0.001). Fibroblast proliferation was significantly lower in group 1 compared to groups 3 and 4 (p<0.001/ p: 0.012, respectively). Fibroblast proliferation was lower in group 2 compared to group 3 (p:0.005). A significant difference was observed between the groups in terms of neovascularization (p<0.001). Neovascularization was significantly lower in group 1 compared to groups 2 and 5 (p<0.001/ p: 0.001, respectively). A significant difference was observed between the groups in terms of TM thickness (p<0.001). TM thickness was significantly lower in group 1 compared to group 3 (p<0.001). Conclusion: Clinical and histopathological findings were obtained indicating that the use of RA healing in COM. Key Words: Chronic otitis media, rosmarinic acid, animal experiment, experimental otitis model, otitis media.