Ratlarda Abobotulinumtoxin A enjeksiyonlarının deri üzerindeki uzun süreli etkilerinin araştırılması
The long-term effects of Abobotulinumtoxin A on skin in a rat model
Yazar: ALİ SADİOĞLU
Danışman: PROF. DR. OSMAN LATİFOĞLU
Gazi Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Plastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2020
Konu: Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery
Dizin: Botulinum toksinleri = Botulinum toxins ; Deri = Skin ; Deri belirtileri = Skin manifestations ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Nörotoksinler = Neurotoxins ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Botulinum nörotoksini, Clostridium botulinum tarafından üretilen, nöromusküler kavşakta asetilkolin salınımını bloke eden güçlü bir toksindir. Yedi farklı serotipi bulunan botulinum nörotoksininin, A ve B serotipleri 1970'li yıllardan itibaren çeşitli hastalıkların tedavisinde kullanılmaya başlanmış ve günümüzde en sık uygulanan estetik işlem haline gelmiştir. Literatürde çok sayıda çalışma botulinum toksinini konu almış olsa da deri üzerindeki uzun süreli etkileri üzerine araştırmalar kısıtlı sayıdadır. Çalışmamızın amacı uzun süreli botulinum nörotoksin uygulamasının deri yapısındaki etkilerinin deneysel olarak ortaya koyulması ve bu bilgiler ışığında klinik pratiğin değerlendirilmesine katkı sağlamaktır.
Çalışmada 24 adet Wistar abino türü erkek rat 4 gruba ayrıldı. Sırtta iliak krestin 1cm kraniyalinde belirlenen 2x3cm'lik alan da 6 noktada olacak şekilde enjeksiyonlar yapıldı. Grup-1'de ( Deney Grubu-1) bir defa 100U/kg dozunda Abobotulinumtoxin A (AboBT), Grup-2'de (Kontrol Grubu-1) bir defa serum fizyolojik (SF) enjeksiyonu yapıldı. Grup-3 (Deney Grubu-2) ve Grup-4 (Kontrol Grubu-2) için sırasıyla aynı işlemler, 3 ay arayla 2 kez gerçekleştirildi. Son enjeksiyondan 3 ay sonra denekler sakrifiye edilerek makroskopik değerlendirme kıl uzunlukları ve deri örnekleri alınarak yapılan histolojik değerlendirmede epidermis, dermis, hipodermis, panniculus carnosus kalınlıkları, birim alanda kıl folikülü sayısı, sebase bez alanlarının dermis alanına oranı, kollajen-1 ve 3 yüzdeleri ve birbirlerine oranları ele alındı.
AboBT enjeksiyonu yapılan gruplarda, kontrol gruplarına göre deri altındaki kas dokusu olan Panniculus Carnosus kalınlığı azalmış bulundu (p<0,05). Birim alandaki kıl folikülü sayısında 2 kez enjeksiyon yapılan gruplarda 1 kez enjeksiyon yapılan gruplara göre azalma olduğu görüldü (p<0,05). SF enjeksiyonu yapılan gruplarda sebase bez alanının dermis alanına oranı 2 kez enjeksiyonla azalmış, 2 kez AboBT enjeksiyonunun bu etkiyi azalttığı görülmüştür (p<0,05). Diğer parametrelerde AboBT'nin etkisi anlamlı değildir.
Abobotulinumtoxin A enjeksiyonlarının uzun süreli uygulanmasında kas kalınlığını azaltıcı etkisi olduğu görülmüştür. Botulinum toksin uygulamalarının deri yapısındaki etkileri değerlendiren, uzun süreli çalışmalarla bu konunun araştırılması klinik uygulamalara yol gösterici olması açısından önemlidir.

Abstract:
Botulinum neurotoxin (BT) is a potent toxin, produced by Clostridium botulinum, that blocks release of acetylcholine in neuromuscular junction. Serotype A and B have been used in various medical treatments since 1970s. BT injections have become the most popular aesthetic procedure. Although there is lots of researches about BT, the number of publications investigating the effect on skin structure of it is limited. The aim of our study is elucidating the long-term effect of BT on skin experimentally and making contribution to the reassessment of clinical practice. 
The study designed with a total of 24 male, Wistar rats divided in 4 groups. Injections were made at 6 point in 2x3 cm area localized 1 cm cranial to the iliac crest. In Group-1 (Experimental Group-1), single dose of (100U/kg)  Abobotulinumtoxin A (AboBT), in Group-2 (Control Group-1), saline (SF) injection was performed. In Group-3 (Experimental Group-2) and Group-4 (Control Group-2), AboBT and SF injected 2 times with an interval of 3 months, respectively. 3 months after the last injection, the subjects were sacrificed and the hair lengths at the injection site were measured. Skin samples were taken and histological evaluation of epidermis, dermis, hypodermis, panniculus carnosus thickness, number of hair follicles per unit area, ratio of sebaceous gland areas to dermis area, collagen-1 and 3 percentages and their ratios to each other were evaluated.
Panniculus Carnosus, the subcutaneous muscle tissue, thickness was found to be decreased in the groups with the injection of AboBT compared to the control groups  (p <0.05). There was a decrease in the number of hair follicles per unit area in groups that were injected 2 times compared to the single injection groups (p <0.05). In the saline injected groups, the ratio of sebaceous gland area to the dermis area decreased with 2 injections, besides 2 times of AboBT injection reduced this effect (p <0.05). For other parameters, the effect of AboBT is not significant.
It has been observed that the long-term administration of Abobotulinumtoxin A injections have a decreasing effect on muscle thickness. Investigating this issue with long-term studies evaluating the effects of botulinum toxin applications on skin structure is important in terms of reevaluation of clinical practice.