Uveal malign melanomlu hastaların periferik dolaşımında miRNA'ların araştırılması
Investigation of mirnas in the peripheral circulation of patients with uveal malignant melanoma
Yazar: MASOUMEH HASSANI
Danışman: PROF. DR. HÜLYA YAZICI
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı / Kanser Genetiği Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2021
Konu: Onkoloji = Oncology
Dizin: Melanom = Melanoma ; Mikro RNA = Micro RNA ; RNA = RNA ; Üvea = Uvea ; Üvea hastalıkları = Uveal diseases ; Üveal neoplazmlar = Uveal neoplasms

Özet:
Uveal malign melanom yetişkinlerde göz içerisinde, görme yeteneğini, yaşam kalitesini ciddi anlamda etkileyen bir malignitedir. Kötü prognozlu olan bu tümör erken aşamalarda metastaz yapma eğilimi olması nedeniyle sağkalım süresini kısaltmaktadır. Bu nedenle bu hastalıkta özellikle periferik kanda gerek tedavi protokollerinin geliştirilmesi ve  tedavi takibinin yapılmasında gerekse erken tanıda kullanılabilecek belirteçlere gereksinim olduğu görülmektedir. Ayrıca Uveal malign melanoma ile ilişkili literatürde genetik ve epigenetik araştırmalar son derece kısıtlıdır. MikroRNA'lar yaklaşık 22 nükleotid içeren, protein kodlamayan RNA'ların bir üyesidir. miRNA'lar gen anlatımının baskılanması ve hedef mRNA'ların post-transkripsiyonel aktivitelerinin düzenlenmesinde rol oynamaktadırlar. Bu nedenle kanser gelişiminde önemlidirler. miRNA'lar proliferasyon, farklılaşma ve apoptoz yolakları üzerinden hücrelerin malign transformasyonuna katkıda bulunmaktadırlar.
 Sunulan çalışmada miR-181b, miR-155, miR-454 olmak üzere 3 farklı miRNA'nın ifade düzeyi 72 uveal malign melanom hastası ve 72 sağlıklı kişiye ait serum örneklerinde Real-Time PCR yöntemleri kullanılarak araştırıldı.
Çalışmanın sonucunda miRNA gen ifade düzeylerinin hasta gruplarında sağlıklı kontrollere göre 2 kattan fazla arttığı, istatistiksel açıdan anlamlı (p< 0,05) olduğu görüldü. Her bir miRNA için elde edilen p değerlerinin sırasıyla; miR-181b, p< 0,001; miR-155, p< 0,001 miR-454, p=0,005 olduğu belirlendi. Ayrıca miRNA ifade seviyeleri ile hastaların klinik verileri karşılaştırmalı olarak incelendiğinde; hastaların miR-155 düzeyi ile radyasyon tedavisi arasında bir ilişki olduğu ve bu ilişkinin anlamlı olduğu (p=0,040(p<0,05)), miR-454'ün artan ifade düzeyi ile sırasıyla sigara ve alkol kullanımı arasında bir ilişki olduğu (p=0,009 ve p=0,026 (p<0,05)) saptandı. Elde edilen bulgular, incelenen miRNA'ların kanserli hastalarda onkogenik özellik gösterdiğini ve uveal malign melanoma hastalığının oluşumunu primer ve metastatik evrelerde tetiklediğini düşündürmektedir. miR-181b, miR-155 ve miR-454 uveal melanoma hastalığının diyagnozunda ve prognozunda kullanılmasında potansiyel biyobelirteçler niteliği taşıdığı görülmüştür.
Anahtar Kelimeler:  Uveal malign melanoma, miR-181b, miR-155, miR-454, Biyobelirteç
Bu çalışma, İstanbul Üniversitesi Bilimsel Araştırma Projeleri Birimi tarafından desteklenmiştir. Proje No: TDK-2019-35336

Abstract:
Uveal malignant melanoma is a type of intraocular malignancy in adults, that seriously affects eyesight and quality of life. As a poor prognosis tumor in the early stages, shortens the survival time. Therefore, it seems that there is a need for new markers for both the development of treatment protocols and for early diagnosis. In addition, genetic and epigenetic researches related to uveal malignant melanoma are extremely limited. MicroRNAs are a member of non-protein-coding RNAs, containing approximately 22 nucleotides, regulate the suppression of gene expression and post-transcriptional activity of target mRNAs. Therefore, it plays an important role in cancer development. It contributes to malignant transformation of cells by affecting proliferation, differentiation and apoptosis. 
 In the presented study, expression of miR-181b, miR-155, miR-454 occurred in serum samples of 72 uveal melanoma patients cohort and 72 healthy controls. For gene expression analysis, RNA isolation from peripheral blood, cDNA synthesis specific to miRNAs followed by Real-Time PCR methods were performed. 
As a result of the study, it was seen that miRNA gene expression levels increased more than twice in the patient groups compared to healthy controls and it was statistically significant (p<0,05). The p values obtained for each miRNA; p miR-181b, p< 0,001; miR-155, p< 0,001 miR-454, p=0,005. In addition, when miRNA expression levels were compared with the clinical data of the patients; There was a significant relationship between miR-155 and radiation treatment option (P value= 0,040), and relationship between miR-454 and smoking (p value=0,009 ) and alchol intake (p value= 0,026) of patients. The findings suggest that the miRNAs examined have an oncogenic character in cancer patients and thus, trigger primer and metastatic uveal malignant melanoma. The miR-181b, miR-155 and miR-454 molecules are thought to be highly potential biomarkers for detecting uveal melanoma and demonstrating prognosis.

Key Words:  Uveal malignant melanoma, miR-181b, miR-155, miR-454, Biomarker.
The present work was supported by the Research Fund of Istanbul University. Project No. TDK-2019-35336.