Erişkin sıçan testisinde varikoselin polarite proteinleri ve ilişkili adezyon moleküllerinin ekspresyonları üzerine etkisinin incelenmesi
Examination of the effect of varicocele on the expressions of polarity proteins and related adhesion molecules in the adult rat testis
Yazar: SİMLA SU AKKAN
Danışman: PROF. DR. İSMAİL ÜSTÜNEL
Akdeniz Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2023
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Adezyon molekülleri = Adhession moleculs ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Proteinler = Proteins ; Sertoli hücreleri = Sertoli cells ; Sıçanlar = Rats ; Testis = Testis ; Varikosel = Varicocele

Özet:
Amaç: Varikoselin neden olduğu hipertermi/hipoksi durumlarında ROS ve NO
düzeylerinin artması sonucu adezyon moleküllerinde değişiklikler meydana geldiği
bilinmektedir. Bu durumun Sertoli hücresinin iskeletini ve spermatogenezi etkilediği
düşünülmektedir. Çalışmamızda ise; kan-testis bariyerinde ve spermiyasyonda önemli
görevleri olduğu bilinen polarite proteinlerinin (Vangl2, Par6, Scribble) ve ilişkili
adezyon moleküllerinin (F-aktin, N-kaderin, ZO-1) ekspresyonları üzerine varikoselin
etkisinin incelenmesi amaçlanmıştır.
Yöntem: Çalışma, 42 adet Wistar ırkı, erkek sıçan ile yürütüldü. Sıçanlar, rastgele üç
ayrı gruba [Kontrol (n:14); Sham(n:14) ve Varikosel(n:14)] ayrıldı. Deney modeli
oluşturulmasından 13 hafta sonra, testis dokuları alınarak rutin histolojik parametreler
için doku takibine alındı ve Hematoksilen-Eozin ile boyandı. Vangl2, Par6, Scribble, Faktin,
N-kaderin ve ZO-1 Western Blot ve İmmunfloresan ile değerlendirildi. Deneysel
modeli doğrulamak adına, western blot ile İNOS ve aktif Kaspaz-3'incelendi.
Bulgular: Yapmış olduğumuz analizler sonucunda, varikosel grubunda, seminifer tübül
dejenerasyonunun önemli ölçüde arttığı görüldü. Ayrıca, İNOS ve aktif Kaspaz 3'ün
ekspresyonunda anlamlı bir artış (p<0,05), Vangl2, Scribble, ZO-1 ve N-kaderinin ise
kontrol grubuna oranla belirgin miktarda azaldıkları saptandı (p<0,05). Par 6 ve Faktinde
ise anlamlı bir değişiklik gözlenmedi (p>0,05).
Sonuç: Sonuç olarak varikosel, testislerde ektoplazmik özelleşmelerin yapı ve
fonksiyonunun bozulmasına neden oldu. Bulgularımız, fizyolojik olarak kontrol
edilemeyecek kadar artan NO seviyelerinin, polarite proteinleri ile ilişkili adezyon
moleküllerinin iletişiminde hakimiyet kurarak hem kan-testis bariyerinde hem de
spermiyasyon mekanizmasında aksaklıklara neden olduğunu gösterdi. Bu açıdan tez
çalışmamız, varikoselin erkek infertilitesi üzerindeki patolojik mekanizmalarını anlamak
adına önemli kanıtlar sunmaktadır.

Abstract:
Objective: Changes in adhesion molecules are known to occur as a result of an increase
in ROS and NO levels in hyperthermia/hypoxia conditions caused by varicocele. This
change is thought to affect the structure of the Sertoli cell and spermatogenesis. In our
study; it was aimed to investigate the effect of varicocele on the expressions of polarity
proteins (Vangl2, Par6, Scribble) and related adhesion molecules (F-actin, N-cadherin,
ZO-1), which are known to have important roles in the blood testicular barrier and
spermiation.
Method: The study was carried out with 42 male Wistar rats obtained. The rats were
randomly divided into three groups as control, sham and varicocele. Thirteen weeks
after the experimental model was created, testicular tissues were taken and processed for
histological evaluation and stained with Hematoxylin-Eosin. Vangl2, Par6, Scribble, Factin,
N-cadherin and ZO-1 were examined by Western Blot and Immunofluorescence.
In addition to these proteins, Western blot analysis of iNOS and cleaved Caspase-3 was
used to corroborate the experimental model.
Results: According to the data, the degradation of the seminiferous tubule was
dramatically higher in the varicocele group. In addition, there was a significant increase
in the expression of iNOS and activeCaspase3(p<0.05), while Vangl2, Scribble, ZO-1
and N-cadherin were significantly decreased compared to the control group(p<0.05).
Par6 and F-actin showed no significant change(p>0,05).
Conclusion: As a result, varicocele caused damage on the structure and disfunction of
ectoplasmic specializations in the testes. Our findings showed that physiologically an
uncontrollable increase in NO levels dominate the communication between polarity
proteins and adhesion molecules associated with these proteins, causing disruptions in
both the BTB and the spermiation. In this context, our study provides important
evidence to understand the pathological mechanisms of varicocele on male infertility.