Ailevi akdeniz ateşi (Famılıal Medıterranean Fever-FMF) hastalarında iNOS gen polimorfizmi ile nitrik oksit düzeyleri arasındaki ilişkinin araştırılması
Investigation of the relationship between iNOS gene polymorphism and nitric oxide levels in Familial Mediterranean Fever patients
Yazar: HAVVA KOÇAK
Danışman: DOÇ. DR. RECEP SÜTÇÜ
Süleyman Demirel Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2011
Konu: Biyokimya = Biochemistry
Dizin: Ailesel akdeniz ateşi = Familial mediterranean fever ; Diyet = Diet ; Egzersiz = Exercise ; Metabolik hastalıklar = Metabolic diseases ; Nitrik oksit = Nitric oxide ; Polimorfizm-genetik = Polymorphism-genetic ; Pozitif basınç solunumu = Positive pressure respiration

Özet:
Amaç: Ailevi Akdeniz ateşi (AAA) 12 ile 96 saat arası süren yangısal reaksiyonatakları, karın ve eklem ağrısı, halsizlik ve ateş yükselmesi belirtileriyle kendinigösteren bir rahatsızlıktır. Hastalığın etyolojisi ve kökeni, tam olarak bilinmemektedir.AAA hastalığının temel patogenezinde, 16. kromozomun kısa kolu üzerinde yer alanMEFV geninde mutasyon vardır. MEFV geni tarafından kodlanan bir proteinin, yangısalrekasiyonlara karşı etkili olduğu tespit edilmiştir. Nitrik oksit, vücutta meydana gelençok sayıda reaksiyonda yangısal medyatör olarak rol oynayan bir bileşendir. Buçalışmada, nitrik oksit sentezinde anahtar konuma sahip olan uyarılabilir nitrik oksitsentazın (iNOS), yangısal atak özelliğine sahip olan AAA hastalığında polimorfizmgeçirip geçirmediğini ve bunun plazma nitrik oksit seviyeleriyle olan bağlantısınıincelemeyi amaçladık.Gereç ve Yöntem: Toplam 60 hasta ve 30 sağlıklı kontrol, çalışmaya dahil edildi.AAA hastaları, MEFV gen mutasyon analizleri yapılarak üç gruba ayrıldı. Ayrıca, bütünvakalar iNOS gen polimorfizmlerine göre CC, CT ve TT genotipli olarak sınıflandırıldı.MEFV gen mutasyonlarını tespit etmek için, FMF gen dizileri multipleks polimerazzincir reaksiyonu yöntemiyle çoğaltıldı. Mutasyonlar, revers insitu hibridizasyonyöntemiyle çalışıldı. iNOS gen polimorfizmi, PCR-RFLP yöntemiyle belirlendi. Hastave kontrol grubuna dahil edilenlerden alınan kan örneklerinin plazmaları ayrıldı ve nitrikoksit seviyeleri ölçüldü. Elde edilen biyokimyasal ve genetik sonuçlar, istatistikanalizden geçirildi.Bulgular: Hastalardan 14'ü M694V homozigot (% 23,33), 10'u M694Vheterozigot (% 16,67), 12'si M694V bileşik heterozigot (% 20), 3'ü diğer bileşikheterozigot (% 5) ve 21'i de diğer heterozigot mutasyon (% 35) taşımaktaydı. GruplarıniNOS gen polimorfizmi sonuçlarının karşılaştırılmasında, kontrol ve AAA gruplarıarasında CC (p = 0,2917), CT (p = 0,5080) ve TT (p = 0,5130) açısından anlamlı birfarklılık bulunmadı. Grupları arasında nitrik oksit seviyeleri açısından da anlamlı birfark yoktu (p = 0,6434).Sonuç: AAA hastalığında nitrik oksit seviyelerinin normal bireylerdekine göreönemli bir değişiklik göstermediği ve gruplar arasında iNOS gen polimorfizmiyönünden farklılık olmadığı sonucuna varılabilir.

Abstract:
Objective: Familial Mediterranean Fever (FMF) is characterized by inflammationattacks, abdominal and articular pain, fatigue and fever manifestations lasting between12 and 96 hours. The ethiology and origin of FMF is unknown. In pathogenesis, there isa mutation in MEFV gene located at the short arm of the 16 th chromosome. It has beenfound that a protein encoded by MEFV gene is effective against inflammatory reactions.Nitric oxide is an inflammatory mediator which involves in many reaction processes. Inthis study, we aimed to investigate if inducible nitric oxide synthase (iNOS) hasundergone a polymorphism and whether there is a relation between a possiblepolymorphism and plasma nitric oxide levels.Materials and Methods: A total of 60 patients and 30 healthy individuals wereincluded in this study. FMF patients were seperated into three groups according toMEFV gene mutation analysis. Furthermore, all participants were classified as havingiNOS CC, CT or TT gene polymorphism types. In order to determine the MEFV genemutations, FMF gene sequences were proliferated via using multiplex polymerase chainreactin method. Mutations were analyzed by using reverse in situ hybridization method.iNOS gene polymorphism was determined by PCR-RFLP method. Blood samples werecollected from whole participants and plasma were seperated to measure nitric oxidelevels. Obtained biochemical and genetic data were statistically analyzed.Results: In FMF group, the MEFV gene mutation rates were as follows: M694Vhomozygote (n=14; 23,33 %), M694V heterozygote (n=10; 16,67 %), M694Vcompound heterozygote (n=12; 20 %), other compound heterozygote (n=3; % 5) andother heterozygote (n=21; 35 %). There was no significant difference between the FMFgroup and controls by means of iNOS CC (p = 0,2917), CT (p = 0,5080) and TT (p =0,5130) gene polymorphisms. Also, there was no statistically significant differencebetween the groups by means of plasma nitric oxide levels (p = 0,6434).Conclusion: As a result, it can be councluded that there is no prominent change inplasma nitric oxide levels in FMF patients when compared with normal individuals andalso there is no difference between the groups by means of iNOS gene polymorphism.