Sprague-dawley sıçanlarda oluşturulan yanık yara modelinde origanum majorana (beyaz kekik/alanya kekiği) bitkisinden elde edilen esansiyel yağın mrsa ile enfekte yaralar üzerindeki tedavi edici etkilerinin in-vivo ve in-vitro yöntemler kullanılarak araştırılması
Investigation of the therapeutic effects of essential oil from origanum majorana (white oregano / Alanya oregano) on burn-injured wounds in sprague-dawley rats using in-vivo and in-vitro methods
Yazar: SELMA SEZEN
Danışman: PROF. DR. MEDİNE GÜLLÜCE
Atatürk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2021
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Antienfektif ajanlar = Anti infective agents ; Kekik = Thyme ; Kekik yağı = Thyme oil ; Origanum majorana L. = Origanum majorana L. ; Sıçanlar = Rats ; Yanıklar = Burns ; Yara iyileşmesi = Wound healing ; Yara iyileşmesi = Wound healing ; Yaralar ve yaralanmalar = Wounds and injuries ; İn vitro = In vitro

Özet:
Amaç: Bu çalışmada Alanya ve çevresinde yanık yaralarının iyileştirilmesi için
kullanılan Origanum majorana L. esansiyel yağının sıçanlarda oluşturulan temiz ve MRSA
ile kontamine edilmiş yanık yaralarındaki antimikrobiyal ve yara iyileştirici özelliğinin invitro ve in-vivo yöntemler kullanılarak araştırılması amaçlanmıştır.
Materyal ve Metot: Bu çalışma kapsamında Origanum majorana L. bitkisi 2 farklı
zamanda toplanarak esansiyel yağ analizi gerçekleştirilmiştir. Esansiyel yağların içerik analizi
yapıldıktan sonra in-vitro antimikrobiyal aktiviteleri değerlendirilmiştir. İn-vitro deneyler
kapsamında hücre kültürü doz çalışmaları ve hücre kültürü yara modeli gerçekleştirilmiştir.
60 sprague-dawley sıçan 10 gruba ayrılarak yanık yara modeli oluşturulmuştur. Temiz yanık
yarası olan gruplar ve MRSA ile kontamine yanık yarası olan grupların iyileşme düzeyi 28
gün boyunca takip edilmiştir. 28 günün sonunda kan, doku ve yara sürüntüsü alınmıştır.
Mikrobiyolojik, biyokimyasal, histopatolojik ve immünohistokimyasal yöntemler
kullanılarak örneklerde yara iyileşme düzeyi ve inflamasyon parametreleri araştırılmıştır.
Bulgular: Esansiyel yağlar in vitro deneylerde kullanılan tüm patojen bakterilere karşı
antimikrobiyal etki göstermiştir. Hücre kültürü yara modelinde yaranın daha hızlı ve yoğun
şekilde kapanmasını sağlamıştır. Sıçanlarda oluşturulan yara modellerinde düşük doz (500
µl/ml) ve yüksek doz (1000 µl/ml) esansiyel yağ grupları hem temiz hem MRSA ile
kontamine yara gruplarında pozitif kontrol ve sham grubundan daha hızlı yara kapanması
sağlamıştır. Yüksek doz esansiyel yağ grupları ise yanık kremi gümüş sülfadiazin
karşılaştırıldığında daha hızlı yara kapanması sağlayarak, histopatolojik ve
immünohistokimyasal analizlerde daha güçlü tedavi yanıtı oluşturmuştur. Yine yüksek doz
esansiyel yağ grubunun bakteriyel yara kültüründe MRSA yoğunluğunun gümüş
sülfadiazinden daha düşük olduğu belirlenmiştir.
Sonuç: Origanum majorana L. esansiye yağının in-vitro ve in-vivo antimikrobiyal etki
sergilediği, sıçanlada oluşturulan temiz ve kontamine yanık yaralarda iyileştirici etkiye sahip
olduğu belirlenmiştir. Bu tez çalışmasında elde ettiğimiz veriler ışığında biyoteknolojik
yöntemler kullanılarak, yara iyileşmesini hızlandıracak esansiyel yağ kaynaklı yerli ve milli
bir topikal ürünün geliştirilmesi hedeflenmektedir.

Abstract:
Aim: In this study, it was aimed to investigate the antimicrobial and wound
healing properties of Origanum majorana L. essential oil, which is used for in the
treatment of burn wounds in Alanya and its surroundings, in clean- and MRSAcontaminated burn wounds in rats using in-vitro and in-vivo methods.
Material and method: Within the scope of this study, Origanum majorana L.
plant was collected at two different times and its essential oil analysis was carried out.
After content analysis of this essential oils, their in-vitro antimicrobial activities were
evaluated. In the in-vitro experiments, the doses were determined and the wound models
were created for the cell culture studies. A burn wound model was created by dividing 60
sprague-dawley rats into 10 groups. The healing level of the groups with clean burn
wounds and the groups with MRSA-contaminated burn wounds were followed for 28
days. At the end of 28 days, blood, tissue and wound swab samples were taken. The level
of wound healing and inflammation parameters of these samples were investigated using
microbiological, biochemical, histopathological and immunohistochemical methods
Results: The essential oils obtained from Origanum majorana L. harvested at
different times showed antimicrobial activity against all pathogenic bacteria used in the
in vitro studies. In the cell culture wound model, faster and more intense closure of the
wound was achieved. In the wound models created in rats, low-dosage (500 µl/ml) and
high-dosage (1000 µl/ml) essential oil groups provided faster wound closure in both
clean- and MRSA-contaminated wound groups than the positive and sham control groups.
High-dosage essential oil groups, on the other hand, provided faster wound closure
compared to burn cream, silver sulfadiazine, and produced a stronger treatment response
in the histopathological and immunohistochemical analyzes. Likewise, it was determined
that the MRSA density in bacterial wound culture of the high-dosage essential oil group
was lower than that of silver sulfadiazine.
Conclusion: In this thesis study, it was determined that one of Origanum
majorana L. essential oil exhibited antimicrobial effects in-vitro and in-vivo, and also had
a healing effect on clean and contaminated burn wounds in rats. In the light of the new
findings reported in this study, it is aimed to develop a local and national topical product
from Origanum majorana L. essential oil, which will accelerate wound healing, using
biotechnological methods.