Tavşanlarda paklitaksel'in spermatolojik parametreler, testis histolojisi ile fertilite üzerine etkileri ve resveratrol'ün koruyucu özelliğinin belirlenmesi
Effects of paclitaxel on sperm parameters, testes histology, fertilility and protective impact of resveratrol in rabbits
Yazar: CANER ÖZTÜRK
Danışman: PROF. DR. MEHMET BOZKURT ATAMAN
Selçuk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı​
Derece: Doktora, 2015
Konu: Veteriner Hekimliği = Veterinary Medicine
Dizin: Kısırlık = Infertility ; Oksidatif stres = Oxidative stress ; Paklitaksel = Paclitaxel ; Resveratrol = Resveratrol ; Sperm = Spermatozoa ; Tavşanlar = Rabbits ; Testis = Testis

Özet:
Kemoterapötiklerin fertilite üzerine olumsuz etkileri bilinmektedir. Bu çalışmada antikanser
ilaçların infertilite üzerine oluşturduğu olumsuz etki ve bunun üzerine antioksidan maddenin koruyucu
etkinliği olup olmadığı spermatolojik parametreler, oksidatif stres değerleri ve histopatolojik
yöntemler ile değerlendirildi.
Sunulan çalışmada antikanser bir ajan olan paklitaksel ve antioksidan resveratrol'ün Yeni
Zelanda ırkı tavşan sperması üzerine etkileri araştırıldı. Deney, her grubu 8 Yeni Zelanda tavşanından
oluşan 4 grup olacak biçimde dizayn edildi. Kontrol grubuna 40 ml serum fizyolojik uygulaması
yapıldı. Paklitaksel grubuna 40 ml serum fizyolojik içerisinde 5mg/kg dozunda paklitaksel, resveratrol
grubuna 40 ml serum fizyolojik içerisinde 4 mg/kg dozunda resveratrol, paklitaksel+resveratrol
grubunda ise 40ml lik serum fizyolojik içerisinde 5 mg/kg paklitaksel + 4 mg/kg resveratrol
uygulaması yapıldı. Tüm uygulamalar 8 hafta boyunca haftada bir defa İ.V. yolla yapıldı. Ejakülatlar
11 hafta boyunca alındı. Sperma motilitesi faz-kontrast mikroskop ile değerlendirildi. Sperma
membran bütünlüğü, akrozom bütünlüğü ve mitokondriyel aktivite oranları sırasıyla SYBR 14/PI,
FITC-PNA ve JC-1/PI boyama ile değerlendirildi. Sperma ve testis dokusunda LPO, tGSH ve total
antioksidan kapasite seviyeleri sperktrofotometre ile belirlendi. Onbirinci haftada 32 dişi tavşan
kullanılarak fertilite denemesi yapıldı. Fertilite denemesi sonrasında erkek tavşanlara ötenazi
uygulandı ve tüm tavşanların testisleri alınıp tubul çapları ölçüldü.
Spermatolojik analizler sonucunda paklitaksel'in sperma üzerine olan hasarlarını
resveratrol'ün önlediği görülmüştür. Paklitaksel sperm motilitesini, yoğunluğunu, canlılığını, akrozom
bütünlüğünü ve mitokondriyel aktivitesini azaltmış (P<0.05), resveratrol ise bu hasarları engellemiştir.
Biyokimyasal olarak sperm ve testis dokusu LPO, tGSH ve AOP değerlerinin paklitaksel tarafından
olumsuz etkilendiği, resveratrol uygulamasının koruyucu özellik gösterdiği görülmüştür (P>0.05).
Histopatolojik değerlendirme sonucunda paklitaksel uygulamasının seminifer tubul çapı ölçülerini
daralttığı (P<0.05) ve resveratrol uygulamasının paklitaksel'in negatif etkilerine karşı koruyucu etki
gösterdiği belirlenmiştir. Fertilite denemesi sonucunda gruplar arasında istatistiksel farklılık
gözlenmemiştir (P>0.05).
Sonuç olarak paklitaksel'in bazı spermatolojik parametreler, biyokimyasal analizler ve
seminifer tubul çapı ölçümü üzerine olumsuz etkisi olduğu belirlendi. Ayrıca resveratrol'ün
paklitaksel'in negatif etkisine karşı koruyucu etkinliği olduğu tespit edildi.

Abstract:
It is known that chemotherapeutics have adverse effects on the fertility. In this study, the
negative effects of the anticancer drugs on infertility and whether antioxidant substances have
protective efficacy on this matter were evaluated by sperm parameters, oxidative stress levels and
histological methods.
In this study, the effects of anticancer drug paclitaxel and an antioxidant resveratrol on New
Zeland Rabbit semen were evaluated. The experimental design consisted of four treatment groups.
Each treatment group consisted of 8 New Zeland Rabbits. The control group was administered 40 ml
saline, the paclitaxel group was administered 5mg/kg paclitaxel in 40ml saline, the resveratrol group
was administered 4mg/kg resveratrol within 40ml saline and the paclitaxel+resveratrol group was
administered 5mg/kg paclitaxel+4mg/kg resveratrol within 40 ml saline. All administrations were i.v.
and continued once a week for 8 weeks. Ejaculates were collected for 11 weeks. Sperm motility was
estimated using phase-contrast microscopy. Sperm viability, sperm acrosome integrity, and sperm
mitochondrial activity were performed by staining with SYBR 14/PI, FITC-PNA, and JC-1/PI
respectively. LPO, tGSH and antioxidant capasity levels were determined by spectrophotometry in
semen and testes tissues. At the 11 th week, fertility trial was made by using 32 female rabbits. After
fertility trial, male rabbits were euthanasiad. Additionally, at the end of 11 weeks, all rabbit's testes
were removed and diameters of seminiferous tubules were measured.
At the result of spermatological analyses, it was observed that the damages on sperm
parameters induced by paclitaxel were normalised by resveratrol. While paclitaxel decreased sperm
motility, concentration, viability, acrosome integrity, and mitochondrial activity (P<0.05) treatment
with resverarol was removed these damages. As biochemically, although sperm and testis tissue LPO,
tGSH, and total antioxidant capasity levels increased by paclitaxel, resveratrol treatment showed
protective effect (P>0.05). Histopathologically it was observed that treatment of paclitaxel decreased
diameters of seminiferous tubules (P<0.05) and treatment of resveratrol prevented negative effects of
paclitaxel. In terms of fertility results, no significant difference was observed among the four groups
(P>0.05).
As a conclusion, the negative effects of paclitaxel was determined on some spermatological
parameters, biochemical assays and diameters of seminiferous tubules. It was also determined that
resveratrol prevented these negative effects of pacliaxel.