Obez IVF hasta gruplarında oosit toplama işlemi (OPU) sonrası folikül sıvısı ve granüloza hücrelerinin immünositokimyasal ve moleküler yöntemlerle incelenmesi
The examination of follicular fluid and granulosa cells in obese IVF patient groups after oocyte pick up (OPU) with immunocytochemical and molecular techniques
Yazar: ELİF GELENLİ DOLANBAY
Danışman: PROF. DR. MELDA YARDIMOĞLU YILMAZ
Kocaeli Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı / Histoloji ve Embriyoloji Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2016
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Adiponektin = Adiponectin ; Fertilizasyon-in vitro = Fertilization-in vitro ; Foliküler sıvı = Follicular fluid ; Ghrelin = Ghrelin ; Granüloza hücreleri = Granulosa cells ; Leptin = Leptin ; Obezite = Obesity ; Tümör nekroz faktörleri = Tumor necrosis factors ; Östradiol = Estradiol ; İnsülin = Insulin

Özet:
Obez IVF Hasta Gruplarında Oosit Toplama İşlemi (OPU) Sonrası Folikül Sıvısı ve Granüloza Hücrelerinin İmmünositokimyasal ve Moleküler Yöntemlerle İncelenmesi
Amaç: Bu çalışmanın amacı VKİ'lerine göre hasta grupları arasında folikül sıvısında leptin, ghrelin, adiponektin, TNF-α, E2, insülin değerleri ve granüloza hücrelerinde leptin, ghrelin, adiponektin, TNF-α immunfloresan ekspresyonlarının, serum hormon parametreleri ile oosit ile embriyo sayısı ve kalitesi, gebelik durumu, eve bebek götürme ile ilişkisinin incelenmesidir.
 Yöntem: Çalışmamıza katılan 86 kadın hasta; VKİ'lerine göre N, FK, OB olarak sınıflandırıldı. Menstrüel siklus 3.gün hormonları, AMH, Homa-IR değerleri, hCG günü endometriyum kalınlığı, oosit ile embriyo sayı ve kaliteleri, fertilizasyon ve implantasyon oranları, gebelik durumu ve süreçleri ile eve bebek götürme oranları, hastaların eşlerinin VKİ'leri ve sperm parametreleri kaydedildi. OPU sonrası alınan folikül sıvılarında ve  granüloza hücrelerinde leptin, ghrelin, adiponektin ve TNF-α; folikül sıvı E2 ve insülin parametreleri incelendi. ICSI işlemi sonrası günlük olarak embriyo gelişimleri takip edildi. 
Bulgular: Çalışmamıza katılan kadın hastaların VKİ'leri arttıkça, gebelik oranlarında azalma görüldü (N:%43,33, FK:%36,67,OB%20). Kadın VKİ arttıkça, eve bebek götürme oranının ciddi oranda azaldığı görüldü (N:%81,82, FK:%9,09, OB: :%9,09). Leptin seviyeleri, LH oranları, folikül sıvısında E2 ve insülin değerleri ile kadın VKİ arasında anlamlı bir farklılık olduğu bulundu (p<0,01). İmmünfloresan boyamada leptin (+) granüloza hücreleri ile kadın VKİ arasında anlamlı farklılık görüldü (p<0,01). Oosit sayıları, MI ve MII oosit sayıları ile kadın VKİ arasında anlamlı farklılık görüldü (p<0,05). Transfer edilen embriyo kalitesinin obeziteyle azaldığı bulundu. Transfer edilen 1. kalite embriyo oranları N: %60, FK: %30, OB: %10 olarak; transfer edilen 2. kalite embriyo oranları N: %38,9 FK: %38,9, OB: %22.2 olarak; transfer edilen 3. kalite embriyo oranları N: %0, FK: %50, OB: %50 olarak bulundu.
Sonuç: Obezitenin hormonlar ve sitokinler üzerinden oosit ve embriyo kalitesi, gebelik oranları, eve bebek götürme durumu üzerine olumsuz etkileri olduğu anlaşılmaktadır. Erkek VKİ dikkate alınıp, PKOS dışlanarak sadece obezitenin etkilerini gösteren çalışmamızda elde edilen kapsamlı bulguların literatüre özgün ve değerli katkılar sağlayacağını umuyoruz.


Anahtar Kelimeler: Obezite, IVF, Folikül sıvısı, Granüloza hücreleri, Leptin, Ghrelin, Adiponektin, TNF-α, E2, İnsülin.

Abstract:
The Examination of Follicular Fluid and Granulosa Cells in Obese IVF Patient Groups After Oocyte Pick Up (OPU) with Immunocytochemical and Molecular Techniques
Objective: The aim of this study is to examine the relationship with the patient groups according to the BMI, leptin, ghrelin, adiponectin, TNF-α, E2, and insulin levels of follicular fluid and leptin, ghrelin, adiponectin, TNF-α immunofluorescence expression of the granulosa cells between the number of embryos and oocytes with serum hormone parameters and pregnancy status and take home baby.
Methods: 86 female patients which are N, OW and OB, participated in our study according to BMI. Menstrual cycle day 3 hormones AMH, Homa-IR values, hCG day endometrial thickness, oocyte and embryo number and quality, fertilization and implantation rates, pregnancy status and process of take baby home ratio, BMI and sperm parameters of the husband of the patients were recorded. After the OPU, follicular fluid and granulosa cells of leptin, ghrelin, adiponectin and TNF-α; E2 and insulin parameters of follicular fluid were examined. After ICSI embryo development was monitored daily.
Results: Female patients who participated in our study, showed decreased as BMI increased pregnancy rates (N: 43.33%, OW: 36.67%, OB: 20%). Increased BMI; take home baby rate of women has decreased significantly (NW: 81,82%, OW: 9.09%, OB: 9.09%). A significant difference was found between the women's BMI with leptin levels, LH ratio, E2 in folicular fluid and insulin levels (p<0,01). A significant difference was seen between the women's BMI with leptin (+) granulosa cells in immunofluorescence staining (p <0.01). Oocyte numbers, oocytes numbers of MI and MII showed significant difference between women's BMI (p <0.05). It was found that obesity decreased quality of transferred embryos. The rates of embryos transferred 1st quality N: 60%, OW: 30%, OB: 10%; the rates of embryos transferred 2nd quality N: 38.9%,  OW: 38.9%, OB: 22.2%;  the rates of embryos transferred 3rd quality N: 0%, OW: 50%, OB: 50% were found. 
Conclusion: It is understood that obesity has a negative impact on oocyte and embryo quality, pregnancy rates and on baby take home status through hormones and cytokines. Male BMI taken into account and PCOS excluded; hope that the exclusion original and valuable contribution to the literatüre of the findings of a comprehensive study showing the effects of obesity.

Key Words: Obesity, IVF, Follicular Fluid, Granulosa cells, Leptin, Ghrelin, Adiponectin, TNF-α, E2, İnsulin.