Aflatoksin B1'in TM3 leydig hücreleri üzerine etkileri
The effects of aflatoxin B1 on TM3 leydig cells
Yazar: MUSTAFA BATUHAN COŞKUN
Danışman: PROF. DR. MELİKE ERKAN
İstanbul Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı / Zooloji Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2014
Konu: Biyoloji = Biology

Özet:
Bu çalışmada toksik bir mikotoksin olan aflatoksin B1'in testis TM3 Leydig hücreleri 
üzerine etkilerinin; enzimatik antioksidanları (katalaz, süperoksit dismutaz), lipit 
peroksidasyonunu, hidrojen peroksit miktarını, apoptoz ve steroidogenik enzimleri (3β-
hidroksisteroid dehidrogenaz, 17β-hidroksisteroid dehidrogenaz) ölçülerek ortaya 
çıkarılması amaçlanmaktadır. 
 
Tahılların hasatı ya da depolanması sırasında, üreyen küf mantarları tarafından ikincil 
metabolit olarak sentezlenen mikotoksinlerden canlılar için en zararlı olanı aflatoksin 
B1'dir. Tüm dünyada kontamine tahılların tüketilmesi canlıların sağlığını tehdit eden bir 
sorundur. Aflatoksin B1 karaciğer aracılığıyla metabolize olur ve böbrekler tarafından 
da vücuttan uzaklaştırılır. Vücuttan atılamayan aflatoksin B1 ise doku ve organlarda 
birikerek hasar meydana getirebilmektedir. 
 
Kontamine olmuş besinlerin özellikle günlük olarak tüketilmesi halinde, aflatoksin 
B1'in kanda ve seminal sıvıda belli seviyede sürekli olarak bulunmasına yol açar. Bunun 
sonucunda da karaciğer ve böbrek üzerinde ciddi hasarlar meydana getirebildiği gibi, 
testiste dejenerasyona, Leydig hücrelerinde vakuolleşme ve steroidogenik aktivitenin 
bozulması gibi sonuçlar ortaya çıkardığı bilinmektedir. Hücre içinde de antioksidan 
enzim seviyelerini azaltıp, DNA üzerinde hasar oluşturan serbest radikalleri oluşturur. 
 
Aflatoksin B1'in besinlerle tüketilen miktarının in vitro koşullara uyarlanmış düşük (0,3 
nM) ve yüksek (1,2 nM) dozları 24 saat süreyle TM3 Leydig hücrelerine uygulanmıştır. 
Leydig hücrelerinin hücre canlılığı, antioksidan enzimleri ve steroidogenik enzimlerin 
miktarları, lipit peroksidasyonu, hidrojen peroksit miktarı ve apoptoz oranları 
ölçülmüştür. Bulgular steroidogenik ve antioksidan enzim miktarlarının azaldığını, 
hücre canlığı, lipit peroksidasyonu, hidrojen peroksit miktarı, ve apoptotik hücre 
sayısının arttığını göstermiştir. Elde edilen sonuçlar aflatoksin B1'in çok düşük 
dozlarının TM3 Leydig hücrelerinde oksidatif hasara yola açtığını, buna bağlı olarak 
apoptozu teşvik ettiğini ve steroidogenik enzimleri inhibe ederek testosteron 
biyosentezini inhibe edebileceğini göstermektedir.

Abstract:
The purpose of this study is to investigate the effects of aflatoxin B1 by measuring 
enzymatic antioxidants (catalase, superoxide dismutase), lipid peroxidation, hydrogen 
peroxide levels, apoptosis and steroidogenic enzyme (3β-hydroxysteroid 
dehydrogenase, 17β-hydroxysteroid dehydrogenase) levels. 
 
Aflatoxin B1 is one of the most poisonous mycotoxin that produced by fungi as 
secondary metabolites during harvesting or storage processes of cereals. Consumption 
of contaminated grains is a global problem that threats the living organisms. Aflatoxin 
B1 is metabolized by liver and eliminated from the body by kidneys. The remaining 
portion of aflatoxin B1 accumulates in the body and causes damage in tissues and 
organs. 
 
Daily intake of contaminated foods leads to constant amount of aflatoxin B1 circulating 
in blood and seminal fluids. Therefore, it is well known that this steady state can cause 
severe damage on liver and kidney, along with degeneration, vacuolization in Leydig 
cells and disrupted steroidogenic activity in testis. Also aflatoxin B1 exposure produces 
free radicals which can reduce the antioxidant enzyme levels and damage the DNA. 
 
In this study, low (0,3 nM) and high (1,2 nM) aflatoxin B1 concentrations, converted 
into in vitro conditions from predicted amounts of aflatoxin B1 that are consumed with 
food were administrated on TM3 Leydig cells for 24 hours. Cell viability, antioxidant 
and steroidogenic enzymes, lipid peroxidation, hydrogen peroxide levels and apoptotis rate were assayed on following administrations in Leydig cells. The results indicated 
that antioxidant and steroidogenic enzyme levels are decreased, while cell viability, 
lipid peroxidation, hydrogen peroxide levels, apoptosis rate are increased in tested 
groups. These findings suggests that very low doses of aflatoxin B1 can cause oxidative 
stress in TM3 Leydig cells which leads to apoptosis and may decrease the testosterone 
levels by inhibition of steroidogenic enzymes.