Diyabetik ratlarda topikal trombosit kökenli büyüme faktörü'nün yara dokusu oksidatif olayları üzerine etkisinin incelenmesi
Investigation of the effect topical platelet derived growht factor on oxidative events of wound tissue in diabetic rats
Yazar: SİBEL GÖKŞEN
Danışman: PROF. DR. ŞULE COŞKUN CEVHER
Gazi Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2014
Konu: Biyokimya = Biochemistry ; Biyoloji = Biology ; Fizyoloji = Physiology

Özet:
Diyabette yara iyileşmesindeki gecikmenin en önemli nedenleri arasında büyüme faktörü salınımının azalması, büyüme faktörü yıkımının ve oksidatif stresin artması bulunmaktadır. Trombosit kökenli büyüme faktörü (PDGF) yara iyileşmesinin tüm evrelerinde görev alan en önemli büyüme faktörlerinden biridir. Bu çalışmada, streptozosin ile diyabetik hale getirilmiş ratlarda oluşturulan dorsolateral kesi yaralarına topikal olarak uygulanan PDGF'nin, yara iyileşmesi sürecinde yara dokusundaki oksidatif olayların zamana bağımlı etkilerini incelemek amaçlanmıştır. Çalışma da 200-250 g ağırlığında 42 adet Wistar-Albino dişi rat kullanıldı. Ratlar, streptozotosin ile diyabetik hale getirildi. Diyabetik ratlar kontrol grubu (n=6), tedavisiz grup (n=12), kitosan uygulanan grup (n=12) ve kitosan+PDGF uygulanan grup (n=12) olmak üzere 4 gruba ayrıldı. Kontrol grubu hariç tüm ratlarda anestezi altındayken sırtta orta hattın iki yanında eksizyonel kesi yaraları oluşturuldu. PDGF uygulanan gruplardaki ratların yaralarına her gün birer kez topikal yolla kitosan jel içerisinde PDGF-BB (7 ng/ml) uygulandı. Kitosan grubunda ise aynı miktarda kitosan jel uygulandı. Uygulamalardan sonra iyileşmenin 3 ve 7. günlerinde ratlar feda edildi. Çıkarılan yara dokularının tiyobarbitürik asit reaktif türleri (TBARS), glutatyon (GSH), nitrik oksit (NOx), askorbik asit (AA) seviyeleri ve süperoksit dismutaz (SOD) aktivitesi spektrofotometrik yöntemle ölçüldü. Sonuçlar aritmetik ortalama ± standart sapma olarak ifade edildi ve Mann-Whitney U testi ile değerlendirildi (p<0,05). Topikal PDGF-BB uygulamasının yara iyileşmesinin erken evresinde yara dokusu TBARS seviyesini ve enzimatik olmayan antioksidan seviyelerini arttığı tespit edilmiştir. NOx seviyesinin ise erken evrede azaldığı, ileri evrede ise arttığı tespit edilmiştir. Bu bilgiler ışığında, diyabetli yaralara uygulanan PDGF-BB'nin iyileşmenin erken evresinde oksidatif denge üzerine etkili olduğu söylenebilir.

Abstract:
The reasons that cause delay in wound healing in diabetes are decrease in the level of growth factors secretion, increase of growth factors destruction and in oxidative stress. Platelet derived growth factor (PDGF) is one of the important growth factors that play a role in all phases of wound healing. In the study, we aimed to investigate time-dependent effects of topically PDGF administration on oxidative events during dorsolateral incision wounds healing in diabetic rats. In our study 42 female Wistar albino rats (weight: 200-250g) were used. Rats get diabetic with streptozotocin. Diabetic rats were divided into four groups: control group (n=6), untreated group (n=12), chitosan treated group (n=12), chitosan+PDGF treated group (n=12). Two full-thickness excisional skin wounds were made under anesthesia in all rats except for control group. In the PDGF groups, the wounds were treated topically with single daily dose PDGF-BB (7ng/ml) after wounding. In the chitosan treated groups, the wounds were treated topically with equal amount blank chitosan gel. After these administrations, on the 3rd and 7th days of wound healing, rats were sacrificed. Thiobarbituric acid reactive substances (TBARs), glutathione (GSH), nitric oxide (NOx), ascorbic acid (AA) levels and superoxide dismutase (SOD) activity were measured spectrophotometrically in wound tissues. Results were expressed as mean ± standard deviation. Mean differences were compared by Mann-Whitney U test (P<0.05). PDGF administration siğnificantly increased TBARS levels and non-enzymatic antioxidant levels in early phase of wound healing. PDGF significantly decreased NOx levels in 3rd and increased NOx levels in 7th of wound healing. In light of this information, PDGF-BB administration may have effects on oxidative balance in early phase of wound healing.