Malign melanomda tümör infiltre edici lenfositlerin (TIL) immunohistolojik karakterizasyonu ve regülatör T hücresi'nin tümör dokusu ve dolaşımda değerlendirilip prognoz ile ilişkisinin saptanması
Immunohistological characterisation of tumor infiltrating lymphocytes (TIL) in malignant melanoma and the evaluation of regulatory T cells in tumor tissue and circulation for the assessment of its relationship with prognosis
Yazar: SERPİL TANRIVERDİ-AKHİSAROĞLU
Danışman: PROF. DR. MÜNİR KINAY
Dokuz Eylül Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2009
Konu: Biyokimya = Biochemistry ; Patoloji = Pathology ; Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery

Özet:
Malign melanomun diğer solid tümörlerden farklı olarak spesifik bir immün cevap sayesinde spontan regresyonun görülmesi immünoterapistlerin ilgisini bu hastalığa çekmiştir. Günümüzde de immünoterapinin başarıya ulaşan hedeflerinden biri haline gelmiştir. İmmün sistemdeki görevleri incelenen regülatör T hücrelerinin (Treg) melanomdaki rolünün anlaşılması için ayrıntılı çalışmalara gereksinim vardır. Bu araştırmanın temel amacı, malign melanom hastalarında tümör infiltre edici lenfositlerin immünohistolojik karakterizasyonu ve dolaşımdaki Treg hücrelerinin serum S100B ile karşılaştırarak prognozu saptamadaki gücünün araştırılmasıdır. Bunun için hem melanom hastalarında (n=30) hem de sağlıklı kontrollerde (n=24), günümüzde en uygun Treg markeri olan FOXP3 transkripsyon faktörünü kullanarak, Treg'lerin miktar ve fenotip analizi yapıldı. Ayrıca immünhistokimyasal TIL tayini yapıldı.Çalışmamızda serum S100B ve dolaşımdaki CD4+CD25+, CD4+CD25+FOXP3+ ve CD8+CD25+FOXP3+ hücrelerinin hasta grubunda kontrol grubuna göre yüksek olduğu bulundu. Serum S100B ile hastaların periferik kanlarında ölçülen CD4+ hücreleri ve de tümörü infiltre eden B lenfositleri arasında ters yönde korelasyon bulundu. Tümörü infiltre eden T lenfositlerinin tümörün Breslow kalınlığı arttıkça azaldığı gösterildi. Clark seviyesi yükseldikçe de tümörü infiltre eden CD4+ T lenfositlerin azaldığı görüldü.Sonuçlarımıza göre tümör progresyonu, hastalığın klinik seyri ile serum S100B ve dolaşımdaki Treg hücre ölçümü paralellik göstermektedir. Ayrıca, hastalık prognozu ile TIL varlığı arasında ters yönde bir ilişki olduğunu ve tümörü süprese edecek olan lenfositlerin azlığının bu tümörün gelişmesine neden olduğunu söylemek mümkündür.Bu çalışma sonunda elde ettiğimiz veriler, Treg'lerin anti tümör immünitesinde olası bir rolü olduğunu göstermektedir. Gelecekte Treg'ler için spesifik marker ekspresyonunu araştıran, inhibisyon mekanizmalarının aydınlatılmasına yönelik ve antijen özgünlüğünü dikkate alan çalışmalar dizayn edilmesinin yararlı olacağı öngörülmektedir. Bununla beraber, CD4+ T hücrelerini artırma ve Treg hücrelerini kısıtlamaya yönelik yeni kanser aşı programları hem CD8+ T hücreleri hem de antijen spesifik immün cevabı düşünerek değerlendirilmelidir.

Abstract:
The immunotherapists have begun to focus on malignant melanoma, in which unlike most other solid tumors, spontaneous regression can be seen due to the specific immune response. Thus in nowadays, it has been listed among the successful goals of immunotherapeutic approaches. In order to clarify the role of regulatory T cells (Treg) in melanoma, further detailed studies should be performed. The main objective of this study is the immunohistological characterization of tumor infiltrating lymphocytes and to determine the prognostic efficacy of Treg cells in circulation by comparing serum S100B levels. Therefore, the analysis of phenotype and quantity of Treg?s are performed in both melanoma patients (n=30) and healthy controls (n=24) by using the most suitable Treg marker FOXP3 transcription factor. Additionally, TILs are immunohistochemically evaluated.In this study, higher serum levels of S100B and CD4+CD25+, CD4+CD25+FOXP3+, and CD8+CD25+FOXP3+ cells are obtained in the patient group comparing to control group. Negative correlation is found between serum S100B and CD4+ cells and tumor infiltrating B lymphocytes in peripheral blood circulation. It was shown that tumor infiltrating T lymphocyte numbers were decreased when the Breslow thickness was increased. It was also seen that tumor infiltrating CD4+ lymphocyte numbers were decreased when the Clark level was increased.According to our results, there was a correlation between the tumor progression and the clinical status of the patients and the measurement of serum S100B and Treg?s in blood circulation. Moreover, it is possible to say that, there is a negative correlation between the prognosis and presence of TIL?s. The lower quantity of lymphocytes which should suppress the tumor is responsible for tumor development.The final data of this study suggest a possible role of Treg?s in anti-tumor immunity. For future it can be said that it is useful to design studies to investigate Treg?s in terms of specific marker expression, inhibition mechanism, and antigen specificity. Thus, novel cancer vaccine formulations, aiming to favor the expansion of CD4+ T cells, and to limit Treg cell expansion, should be evaluated in conjunction with CD8+ T cells and at the level of antigen specific immune responses.