Myasthenia gravis (MG) gelişiminde patolojik etkili yardımcı T hücrelerinin ve gelişen otoantikor yanıtının sitokinlerle modülasyonu
Modulation of pathogenic effectors T cells and developing autoantibody response with cytokines in the development of myasthenia gravis (MG)
Yazar: MERVE ÇEBİ
Danışman: PROF. DR. GÜHER SARUHAN DİRESKENELİ
İstanbul Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / İmmünoloji Ana Bilim Dalı / İmmünoloji Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2023
Konu: Nöroloji = Neurology

Özet:
Myasthenia gravis (MG) patogenezinde otoantikorların rol oynadığı otoimmün bir hastalıktır. Otoantikor üretiminde etkin olan yardımcı foliküler T (Tfh) ve yardımcı periferik T (Tph) hücre popülasyonları MG hastalarında yüksek bulunmuştur ve immünosüpresif tedavi, bu hücre popülasyonlarını düşürmede yetersiz kalmaktadır. Çalışma, in vitro düşük doz IL-2 uyarısının MG hastalarındaki Tfh, Tph ve düzenleyici T (Treg) hücre popülasyonları üzerindeki etkisini araştırmayı, ve Tfh ve Tph hücre popülasyonlarının B hücre yanıtındaki etkisini fonksiyonel olarak değerlendirmeyi amaçlamaktadır.
İn vitro IL-2 etkisinin değerlendirilmesinde, çalışmaya asetilkolin reseptörüne karşı antikor ile gelişen MG (AChR-MG, n = 31), kasa özgü kinaza karşı antikor ile gelişen MG (MuSK-MG, n = 12) hastaları ve sağlıklı kontrol (SK, n = 28) grubu dahil edilmiştir. Donörlerin periferik kan mononükleer hücreleri, IL-2 ile uyarılarak veya uyarısız kültür sonrası, Tfh, Tph ve Treg hücre popülasyonları açısından değerlendirilmiştir. Tfh ve Tph hücrelerinin fonksiyonel değerlendirilmesinde, çalışmaya 10 SK dahil edilmiştir. Donörlerin yardımcı T hücreleri, CXCR5, ICOS ve PD-1 ekspresyonlarına göre ayrılıp CD3/CD28 ile uyarılarak CD19+ B hücreleriyle kültürde yaşatılmıştır. Kokültür sonrası, plazmablast hücreleri ve üst sıvıda IgG konsantrasyonları incelenmiştir.
IL-2 uyarısız kültürlerde, MG hastalarının Treg hücreleri sağlıklılara göre düşükken, Tfh ve Tph popülasyonlarının yüksek olduğu görülmüştür. Düşük doz IL-2 uyarısı, Treg popülasyonunu arttırırken, Tfh ve Tph popülasyonlarını düşürmektedir. Ayrıca, Tfh hücreleri, Tph hücrelerine göre plazmablast oluşumunu ve antikor üretimini daha fazla indüklemektedir.  
Düşük doz IL-2 tedavisi, Tfh ve Tph hücrelerini düşürerek ve Treg hücrelerini arttırarak patolojik hücrelerin modülasyonunu sağlamaktadır. IL-2, MG için ümit verici bir tedavi seçeneği olabilir.

Abstract:
Myasthenia gravis (MG) is an autoimmune disease mediated by autoantibodies. In MG patients, T follicular helper (Tfh) and T peripheral helper (Tph) cells are elevated and immunosuppressive treatments do not effectively reduce these cells. This study aims to evaluate the effect of low-dose IL-2 stimulation on Tfh, Tph, and regulatory T (Treg) cell populations in MG patients and the effects of Tfh and Tph cells on B cell response in vitro.
To assess in vitro effect of IL-2, acetycholine receptor antibody positive MG (AChR-MG, n = 31) and muscle spesific kinase antibody positive MG (MuSK-MG, n = 12) patients and healthy controls (HC, n = 28) were included. Peripheral blood mononuclear cells from donors were cultured with or without IL-2 stimulation. Subsequently, Tfh, Tph, and Treg cell populations were analyzed. To functionally assess Tfh and Tph cells, 10 HC were included. Helper T cells were separated into various combinations based on CXCR5, ICOS, and PD-1 and cocultured with CD19+ B cells with CD3/CD28 stimulation. After coculture, plasmablasts and IgG concentrations in the supernatant were measured. 
MG patients showed lower Treg populations compared to HC in unstimulated cultures, while Tfh and Tph populations were higher. Low-dose IL-2 stimulation increased the Treg population, while decreasing Tfh and Tph populations. 
Tfh cells were more effective in promoting the formation of plasmablasts and inducing antibody production compared to Tph cells.
Low-dose IL-2 therapy may provide a treatment for MG by regulating pathological cells such as decreasing Tfh and Tph cells and increasing Treg cells.

Key Words: Myasthenia Gravis, Interleukin-2, T follicular helper cells, Regulatory T Cell