Düşük doz kolşisin kullanımının, non-steroid anti-enflamatuvar ilaç kullanımına bağlı gelişen akut böbrek hasarına etkilerinin   incelenmesi
Investigation of the use of low-dose colchicine on acute kidney damage due to non-steroidal anti-inflammatory drug use
Yazar: TUBA PERİ
Danışman: PROF. DR. HÜSNÜ ALPER BAĞRIYANIK
Dokuz Eylül Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2024
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology

Özet:
Amaç: Non-steroid anti-inflamatuvar ilaçlar (NSAİİ'ler), klinik tıpta 
analjezik, ateş düşürücü ve anti-inflamatuvar ajanlar olarak yaygın şekilde 
kullanılmakta olup sık görülen yan etkilerinden biri nefrotoksisitedir ve sıkça 
görülmektedir. 
Akut böbrek hasarı (ABH), dünya çapında milyonlarca hastayı etkileyen, 
böbrek fonksiyonlarında kısa sürede azalma ile karakterize bir sağlık sorunudur. 
Glomerüler filtrasyon hızında (GFR) düşüş, kan üre ve kreatininde artış ile 
karakterizedir. ABH için etkili bir tedavi yoktur ve yeni tedavilere ihtiyaç vardır. 
Eskiden beri kullanılan mevcut bir ilaç olan ve günümüzde çeşitli 
hastalıklar için kullanımı tartışılan kolşisinin NSAİİ kullanımına bağlı gelişen ABH'ye 
etkilerini NLRP3 inflamazom yolağı üzerinden incelemeyi hedefledik. 
Gereç ve yöntem: Bu amaçla çalışmada, Dokuz Eylül Üniversitesi Tıp 
Fakültesi Deney Hayvanları Laboratuvarından temin edilen 28 adet 8-10 haftalık (200
250 gr) dişi Wistar albino sıçan kullanıldı. Sıçanlar rastgele 4 gruba (Kontrol, 
Diklofenak sodyum, Kolşisin, Diklofenak sodyum+Kolşisin) n=7 olacak şekilde 
ayrıldı. 5 gün boyunca Kontrol grubuna (1. Grup) %0,9 NaCl (1 ml/gün per-oral) 
solüsyonu, NSAİİ ilaç grubuna (2. Grup) Diklofenak sodyum (50 mg/kg/gün, 
intramüsküler), Kolşisin grubuna (3. Grup) Kolşisin (0,2 mg/kg/gün, per-oral), NSAİİ 
+ kolşisin grubuna (4.grup) Diklofenak sodyum (50 mg/kg, intramüsküler) tedavisinin 
ardından 1 saat sonra (0,2 mg/kg/gün, per-oral) kolşisin uygulandı. Deneklerin vücut ağırlıkları deneyin başında ve sonunda tartıldı. 1. Gün ve 
6.gün biyokimyasal tahliller için kan örnekleri alındı. Elde edilen kan örneklerinden 
biyokimyasal (üre, kreatinin) tahliller yapıldı ve GFR (glomerüler filtrasyon hızı) 
hesaplandı. 6. gün inhaler eter anestezisi ile genel anestezi altında doku sıçanlar 
sakrifiye edilerek (böbrek) örnekleri toplandı. Böbrek dokuları %10 luk formalinle 
fikse edildi ve rutin doku takibi yapıldı. Ardından kesitleri alınan doku örneklerinden 
morfolojik değerlendirme için histokimyasal Hematoksilen-Eozin ve Periyodik asit
Schiff (PAS) boyamaları yapıldı. İmmunhistokimyasal olarak da NLRP3, kaspaz 1, İL
1 β işaretlemeleri yapıldı ve semikantitatif skorlandı. 
Elde edilen veriler GraphPad Prism 9 istatistik programı ile p (≤ 0.05) 
istatistiksel olarak anlamlı kabul edilecek şekilde değerlendirildi. 
Bulgular: Deney sonunda diklofenak sodyum grubu ve diklofenak 
sodyum+kolşisin grubundaki sıçanların kilo kaybettiği, bu kilo farkının yüzde 
değişiminin kontrol ve kolşisin gruplarına göre anlamlı olduğu görüldü. Toplam 
böbrek ağırlık ve böbrek indeksinde gruplar arasında fark görülmedi. Kontrol ve 
kolşisin grubunda biyokimyasal, histokimyasal ve immünohistokimyasal olarak 
normal sonuçlar elde edildi. Diklofenak sodyum grubunda serum üre ve kreatinin 
değerlerinde artış ile eGFR değerinde azalma saptandı. Diklofenak sodyum grubu HE 
ve PAS boyamaları incelendiğinde glomerüler atrofi, fırçamsı kenarda azalma, tübüler 
hücrelerde vakuolizasyon, tübüler epitel hücre hasarı, tübül lümen dilatasyonu, hiyalin 
kast oluşumları ile mononükleer hücre infiltrasyonları, yer yer kanama odakları 
saptandı. Diklofenak sodyum grubunda NLRP3, kaspaz 1 ve İL-1 β 
immünohistokimyasal boyamasında reaktivite şiddetinin anlamlı olarak artmış olduğu 
görüldü.  Diklofenak sodyum+kolşisin grubunda ise diklofenak sodyum grubuna göre 
hasarı işaret eden bu değişikliklerin oldukça azalmış olduğu saptandı. 
Sonuç: Diklofenak sodyum ile kolşisin tedavisi verildiğinde, diklofenak 
sodyum ile indüklenen akut böbrek hasarında istatistiksel olarak anlamlı şekilde 
azalma olduğu gözlemlendi.

Abstract:
Aim: Non-steroidal anti-inflammatory drugs (NSAID) are widely used as 
analgesic, antipyretic and anti-inflammatory agents in clinical medicine, and one of 
the common side effects is nephrotoxicity and is often seen. 
Acute kidney injury (AKI) is a health problem that affects millions of patients 
around the world and is characterized by a short decrease in renal functions. AKI is 
characterized by decrease in glomerular filtration rate (GFR) and an increase in blood 
urea and creatine. There is no effective treatment for AKI and new treatments are 
needed. 
We aimed to examine the effects of Colchicine, which is an existing drug 
that has been used for various diseases and discussed for various diseases, on the 
developing AKI, which is due to the use of NSAID, on the NLRP3 inflammoma 
pathway. 
Materials and Methods: For this purpose, 28 8-10 weeks (200-250 g) 
female Wistar Albino rats were used in the study of Dokuz Eylül University Faculty 
of Medicine Faculty. Rats were randomly separated to 4 groups (control, diclofenac 
sodium, colchicine, diclofenac sodium+colchicine) and n = 7. We were applied 0.9 
%Nacl (1 ml/day per-oral) to the control group (Group 1), Diclofenac Sodium (50 
mg/kg/day, intramuscular) NSAID Group (Group 2), Colchicine (0.2 mg/kg/day, per
oral) Colchicine group (Group 3), treatment of colchicine (0.2 mg/kg/day, per-oral) 1 
hour after diclofenac sodium (50 mg/kg/day, intramuscular) treatment to the NSAID 
+ Colchicine group (Group 4) for consecutive 5 days. 
Results: At the end of the experiment, the diclofenac sodium group and 
diclofenac sodium+colchicine groups lost weight, and the weight difference was significant compared to control and colchicine groups. There was no difference 
between the groups in the total kidney weight and kidney index. In the control and 
colchicine group, normal results were obtained from biochemical, histochemical and 
immunohistochemical. In the diclofenac sodium group, there was an increase in serum 
urea and creatinine values and a decrease in eGFR value. When Diclofenac Sodium 
Group H&E and PAS paintings were examined, glomerular atrophy, brushed edge 
loss, vacuolization in tubular cells, tubular epithelial cell damage, tubule dilatation, 
hyaline caste formations, and mononuclear cell infiltrations and bleeding in some areas 
were detected. NLRP3, Caspase 1 and IL-1 β immunohistochemical painting in 
Diclofenac Sodium group showed significantly increased. In the diclofenac 
sodium+colchicine group, these changes, which indicate damage compared to 
Diclofenac sodium group, were found to be highly reduced. 
Conclusion: When the treatment of colchicine with diclofenac sodium 
was given, it was observed that there was a statistically significant decrease in acute 
renal damage induced by diclofenac sodium.