Farklı gelişim evrelerindeki yağ hücrelerinde niban geninin antiapoptotik ve lipogenik etkilerinin 
araştırılması
Investigation of antiapoptotic and lipogenic effects of niban gene on different development stages of adipocytes
Yazar: MEHTAP ÇEVİK
Danışman: PROF. DR. BELGİN SÜSLEYİCİ DUMAN
Marmara Üniversitesi / Fen Bilimleri Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2016
Konu: Biyoloji = Biology

Özet:
Gerçek zamanlı hücre monitorizasyon sistemi kullanılarak olgun adipositlerin birtakım
stres koşullarını tetiklediği bilinen lineloik asit (LA), stearik asit (SA), etanol ve
hidrojen peroksitin farklı dozlarına cevap olarak proliferasyonları incelenmiştir. Bu
proliferasyon eğrilerinden faydalanılarak IC50 değerleri tespit edilmiştir. 50, 100, 250,
300, 400, 600, 800 ve 1000 μM hidrojen peroksitin (H2O2) olgun adipositler üzerine
olan etkisi 130 saat boyunca gözlemlendi. 1 mM ve 800 μM hidrojen peroksitin 3T3-L1
adipositleri üzerine letal etkili olduğu saptandı.
600, 400 ve 200 μM linoleik asit uygulamasının adiposit proliferasyonuna olan
etkisi yaklaşık 120 saat boyunca incelendi ve kontrol grubuna göre 600 μM linoleik
asitin adipositler üzerine letal etkili; diğer dozların ise antiproliferatif etkili olduğu
saptandı. 250, 150, 100 ve 50 mM etanolün olgun adipositlerin proliferasyonu üzerine
olan etkileri yaklaşık 190 saat boyunca incelendi. Uygulanan tüm dozların kontrole göre
antiproliferatif etkili olduğu tespit edildi. Bu çalışmalar sonrası proliferasyon verilerine
dayanarak her bir ajan için belirli saatlerdeki IC50 değerleri tespit edildi. Bu değerler
belirli süreler boyunca hücrelere uygulandıktan sonra hücrelerden Total RNA
izolasyonu yapılarak Niban genine ait gerçek zamanlı qPZR (Kantitatif Polimeraz
Zincir Raeksiyonu) çalışması yapıldı.
4 saat 300, 5 saat 600 ve 800, 24 saat 600 ve 800 μM hidrojen peroksit
uygulaması; 4 saat 50 mM stearik asit ve 24 saat 90 mM etanol uygulamalar sonucu
Niban gen anlatımı kontrole göre azaltmış bulunmuştur. 24 saat 480 μM linoleik asit
uygulaması ise Niban gen anlatımını kontrole göre arttırmıştır. Ayrıca adipositlerdeki
apoptozun inhibisyonun obezite ile ilişkili hastalıkların tedavisinde kullanımının yeni
bir terapötik strateji olabileceği hipotezinden yola çıkarak Niban geninin adipogenik ve
lipogenik süreçteki rolünün ortaya konulması amacıyla henüz yeni farklılaşmış ancak
yağ birikimi çok az olan pre-adipositler ile uzun süre kültüre edilmiş ve aşırı yağ
birikimi gözlemlenen olgun adipositlerde Niban gen anlatımı karşılaştırmalı olarak çalışılmıştır. Sonuç olarak olgun adipositlerdeki Niban gen anlatımı kontrole göre çok
yüksek; pre-adipositlerdeki ise kontrole göre düşük bulunmuştur.

Abstract:
By using real-time monitoring system, as a response to different doses of some
stress triggering substances such as linoleic acid (LA), stearic acid (SA),ethanol and
hydrogen peroxide, the proliferations of mature adipocytes were examined. IC50 values
were determined by utilizing the proliferation curves. 50, 100, 250, 300, 400, 600, 800
and 1000 μM of hydrogen peroxide concentrations were observed on mature adipocytes
for 130 hours. 1 mM ve 800 μM hydrogen peroxide was found to have lethal effect on
3T3-L1 adipocytes.
600, 400 and 200 μM linoleic acid application was examined for about 120 hours and
600 μM linoleic acid was found to have lethal effect compared to controls; whereas
other doses were found to have antiproliferative effect. 250, 150, 100 and 50 mM
ethanol effects were examined for about 180 hours for the proliferation of mature
adipocytes. All doses administered were found have antiproliferative effect compared to
controls. These IC50 values of each agent for certain times after operation data based on
their proliferation were observed. After applying these doses over the cells for certain
periods total RNA was isolated from cells, and qPCR was for NIBAN gene was
performed.
The NIBAN gene expression levels were found to be decreased compared to
controls in 4 hours, 300, 600 and 800 for 5 h, 24 h 600 and 800 mm the hydrogen
peroxide treatment; 4 hours 24 hours 90 mm 50 mm stearic acid and ethanol
administered cells. The 24-hour 480 μM linoleic acid administration was found to
increase Niban gene expression compared to control. Also starting from the hypothesis
that a new therapeutic strategy for use in the treatment of diseases associated with
obesity, inhibition of apoptosis in adipocytes Niban to reveal the role adipogenic and
the lipogenic process of gene order has not differentiated new but fat accumulation with
little pre-adipocytes has been a long time culture and excessive fat accumulation
observed narrative Niban genes in mature adipocytes were studied comparatively. As a result, Niban gene expression was found to be higher in mature adipoctes, and lower in
preadipocytes compared to control.