Rat modellerinde uterus ve over dokusuna uygulanacak olan platalet rich plazma'nın over ve uterus üzerine ve fertilite üzerine etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of platelet rich plasma applied to uterus and ovarian tissue in rat models on ovary and uterus and fertility
Yazar: ÖZKAN DURMAZ
Danışman: PROF. DR. NERMİN AKDEMİR
Sakarya Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2022
Konu: Kadın Hastalıkları ve Doğum = Obstetrics and Gynecology
Dizin: Antimüllerian hormon = Antimullerian hormone ; Hayvan deneyleri = Animal experimentation ; Kısırlık = Infertility ; Kısırlık-kadın = Infertility-female ; Over = Ovary ; Sıçanlar = Rats ; Trombositten zengin plazma = Platelet rich plasma ; Uterus = Uterus ; Uterus hastalıkları = Uterine diseases

Özet:
GİRİŞ VE AMAÇ: Platelet Rich Plazma uygulamaları endometriyumu uygun kalınlığa getirmek, azalmış over rezervini iyileştirmek, over kalitesini arttırmak için kullanılabilmektedir. Over rezervi ve endometriyal reseptivite üzerine PRP uygulamasının etkin olup olmadığını, immünohistokimyasal ve biyokimyasal olarak gösterebilmek amacıyla bu çalışmayı planladık.
YÖNTEM: Aralık 2021/Mart 2022 tarihleri arasında 28 dişi Sprague-Dawley albino rat kullanıldı. Ratlar 4 gruba ayrılıp, işlem öncesi sedasyon sağlandı. Ratlardan AMH ve FSH ölçümü için 0,2 ml kan alındı. PRP uygulanacak ratlardan PRP hazırlığı için 0,8 ml kan alındı. 1. grubun batını diseksiyon makasıyla açılıp kapatıldı. 2. grubun overleri ve uterus hornlarına enjektör ile girip çıkılıp inflamasyon uyarıldı. 3. grubun overleri ve uterus hornlarına 0,2 ml serum fizyolojik uygulandı. 4. grubun overleri ve uterus hornlarına 0,2 ml PRP uygulandı. Gruplar 3 östrus izlendi. Gruplardan AMH ve FSH ölçümü için anestezi altında tekrar kan alındı. Ratların batını diseksiyon makasıyla açılıp uterus ve overleri alınıp formalin içinde sabitlendi. Hematoksilen-Eozinle over ve endometriyum boyandı. Epitelyal, stromal ve vasküler hücrelerin büyümesi değerlendirildi. VEGF ve Ki-67 antikorları kullanılarak, PRP nin damarlaşma ve hücre proliferasyonu üzerine etkileri incelendi. Grupların işlem öncesi ve sonrası AMH-FSH değerleri ile histopatolojik bulguları karşılaştırıldı. Veriler SPSS 20,0 paket programı kullanılarak değerlendirildi.
BULGULAR: PRP uygulanan grupta AMH değerleri diğer 3 grupla karşılaştırıldığında; AMH seviyesindeki artış anlamlı olarak saptandı (p<0,05). Endometriyum ve overler Ki-67 ve VEGF varlığı açısından incelendiğinde grup 4 de artış gözlenmiştir (p<0,05). PRP uygulaması uterusta fibrozisi ve inflamasyonu azaltırken, damarsal gelişimi artırmıştır. 4. grupta histolojik bulguların olumlu yönde geliştiğini gözlemledik (p<0,05).
SONUÇ: PRP uygulamasının, over ve uterus üzerine olumlu etkileri olduğunu gözlemledik. PRP' nin fonksiyonel mekanizmasını belirlemek ve klinik kullanımlar için onaylanmış bir PRP uygulama dozu, sayısı ve zamanı bulmak; PRP tedavisini standart ve önerilen bir tedavi stratejisi haline getirmek için iyi kurgulanmış ve randomize kontrollü çalışmalara ihtiyaç vardır.

Abstract:
AIM: Platelet Rich Plasma applications can be used to bring the endometrium to the appropriate thickness, to improve the decreased ovarian reserve, and to increase the quality of the ovary. We planned this study in order to demonstrate immunohistochemically and biochemically, whether PRP application is effective on ovarian reserve and endometrial receptivity.
MATERIALS AND METHODS: Between December 2021 and March 2022, 28 female Sprague-Dawley albino rats were used. Rats were divided into 4 groups and sedation was provided before the procedure.  0.2 ml of blood was taken from the rats for AMH and FSH measurement. For PRP preparation, 0.8 ml of blood was taken from the rats to which PRP was applied. The abdomen of the first group was opened and closed with dissecting scissors. Inflammation was stimulated by entering and exiting the ovaries and uterus horns of the 2nd group with an injector. 0.2 ml of saline was applied to the ovaries and uterine horns of the 3rd group. 0.2 ml of PRP was applied to the ovaries and uterine horns of the 4th group. Groups 3 estrus were observed. Blood was taken again under anesthesia for the measurement of AMH and FSH from the groups. The abdomen of the rats was opened with dissecting scissors, the uterus and ovaries were removed and fixed in formalin. Ovary and endometrium were stained with hematoxylin-eosin. The growth of epithelial, stromal and vascular cells was evaluated. The effects of PRP on vascularization and cell proliferation were investigated using VEGF and Ki-67 antibodies. AMH-FSH values and histopathological findings of the groups were compared before and after the procedure. The data were evaluated using the SPSS 20.0 package program.
RESULTS: When the AMH values in the PRP group were compared with the other 3 groups; The increase in AMH level was found to be significant (p<0.05). When the endometrium and ovaries were examined for the presence of Ki-67 and VEGF, an increase was observed in group 4 (p<0.05). While PRP application reduced fibrosis and inflammation in the uterus, it increased vascular development. We observed that histological findings improved positively in group 4 (p<0.05).
CONCLUSION: We observed that PRP application has positive effects on ovary and uterus. To determine the functional mechanism of PRP and to find an approved PRP application dose, number and time for clinical uses; Well-designed and randomized controlled studies are needed to make PRP treatment a standard and recommended treatment strategy.