Prematüre retinopatisi in vivo fare modelinde octreotid asetat `ın retinal endotelyal hücre proliferasyonuna ve retina morfolojisine etkisi
Effect  of octreotide acetate on endothelial cell proliferation and retinal morphology in an in vivo mouse model of retinopathy of prematurity
Yazar: FATMA SELİN KAYA
Danışman: PROF. DR. İMREN AKKOYUN
Başkent Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Göz Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2009
Konu: Göz Hastalıkları = Eye Diseases

Özet:
ÖZET
Bu çalışma in vivo prematüre retinopatisi (PR) fare modelinde C57BL/J6 tipi fare
kullanılarak, somatostatin analoğu olan Octreotid asetat' ın farklı dozlarda retinal
endotelyal hücre proliferasyonuna inhibitör etkisinin araştırılması ve retinal
morfolojik yapıya etkisini incelemek amacıyla yapılmıştır.
İn vivo analizler prematüre retinopatisi fare modeli kullanılarak gerçekleştirilmiştir.
Yirmialtı C57BL/J6 fare postnatal 7. günden 12. güne kadar %75 oksijene tabi
tutulmuştur. Fareler 4 gruba ayrılmıştır. Grup-1 negatif kontrol grubunu, grup-2
kontrol grubunu, grup-3 0.1μg IVO enjeksiyon grubunu ve grup-4 0.05μg IVO
enjeksiyon grubunu oluşturmuştur. Onikinci gün 12 farenin sağ gözüne (grup-3)
0.1μg intravitreal Octreotid asetat (İVO), 14 farenin sağ gözüne (grup-4) 0.05μg
İVO ve diğer gözlerine izotonik solüsyon enjeksiyonu (grup-2, n=26) uygulanmıştır.
Deneyin 17. günü fareler sakrifiye edilmiş ve gözler preretinal
neovaskülarizasyonun kantitatif analizi için ve morfolojik yapı incelmesi için
enüklee edilmiştir. Dört tane işlem görmemiş fare negatif kontrol grubunu (grup-1)
oluşturmuştur. Neovaskülarizasyon internal limitan membranın vitreusa bakan
yüzündeki vasküler hücre çekirdeklerinin sayımıyla kantifiye edilmiştir. Histolojik ve
ultrastrüktürel morfolojik değişiklikler ışık mikroskopi ve elektronmikroskopi ile
incelenmiştir.
Bir histolojik kesitte neovasküler endotelyal hücre sayısı kontrol grubunda (grup-2),
grup-3 (p<0.0001) ve grup-4 (p=0.01) ile karşılaştırıldığında anlamlı olarak daha
yüksek bulunmuştur. Grup-1 de (negatif kontrol grubu) neovasküler endotelyal
hücre proliferasyonu tespit edilmemiştir. Histolojik incelemede hiç bir grupta toksik
etki saptanmamıştır. Elektron mikroskopik incelemede kontrol grubunda
hiperoksiye bağlı mitokondriyal dismorfoloji saptanmıştır. Mitokondriyal dismorfoloji
İVO enjekte edilen gözlerde 0.1μg İVO enjeksiyon grubunda artış göstermektedir.
Kontrol grubu ve 0.05μg İVO enjeksiyonu yapılan grup kıyaslandığında
mitokondriyal dismorfolojinin benzer düzeyde olduğu gözlenmiştir.
Sonuç olarak İVO enjeksiyonu in vivo PR fare modelinde endotelyal hücre
proliferasyonunu inhibe ettiği görülmektedir. C57BL/J6 farenin retinasında
hiperoksiye bağlı morfolojik hasarın yanında Octreotid asetat ile ultrastrüktürel
hasar geliştiği saptanmıştır.

Abstract:
The aim of the study was to investigate the effects of Octreotide acetat, at different
concentrations, on retinal endothelial cell proliferation and retinal morphological
structure in an oxygen-induced retinopathy of preamturity (ROP) mouse model.
In vivo analysis were performed using ROP mouse model with C57BL7J6 newborn
mouse. There were four groups (group-1=negative control group), group-2=control
group, group-3=0.1μg IVO enjected group, group-4= 0.05μg IVO). Twentysix
C57BLJ6 mice were exposed to 75% oxygen from postnatal day 7(P7) to 12
(P12). On day 12 Octreotide acetat 0.1μg was administered intravitreally to one
eye of 12 mice (group 3), 0.05μg Octreotide acetat to one eye of 14 mice (group 4)
and contralateral eyes (group-2 n=26) received isotonic saline. Four mice of the
same age that had been kept in room air without any exposition to high oxygen
were used as negative kontrol.
On day 17, the mice were sacrificed and eyes enucleated for quantitative analysis
of preretinal neovascularisation. Neovascularizations were quantified by counting
the endothelial cell nuclei on the vitreal side of the inner limiting membrane of the
retina. Histological and ultrastructural changes were examined by using light and
electron microscopy.
The endothelial cell count, per histological section in the control group was
significanly higher compared with group 3 ( p<0.0001) and group 4 (p=0.01). In
grup-1 (negative kontrol group) there were no endothelial cell nuclei detected on
the vitreal side of the inner limitig membrane. Histologic evaluation of retinal layers
using light microscopy showed no retinal toxicity in any group. Electron
microscopy revealed similar mitochondrial dysmorphology in group-2 and grup-4,
but mitochondrial dysmorphology displayed increase in group- 3.
In conclusion we can say that intravitreal injection of octreotide acetat supresses
endothelial cell proliferation in a ROP mouse model. In addition to hyperoxia
induced vulnerability of C57BL/J6 retina, morphological findings implicate further
ultrastructural vulnerability due to octreatid acetate.