Deneysel olarak nekrotizan enterokolit oluşturulmuş yenidoğan sıçanlarda hiperbarik oksijen tedavisinin etkinliğinin değerlendirilmesi
Effect to hyperbaric oxygen therapy in an experimental newborn rat model of necrotizing enterocolitis
Yazar: DOĞAN ŞİMŞEK
Danışman: PROF.DR. İSMAİL GÖÇMEN
GATA / Haydarpaşa Eğitim Hastanesi  / Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2007
Konu: Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases

Özet:
Çalışmamızda deneysel olarak nekrotizan enterokolit oluşturulmuşyenidoğan sıçanlarda hiperbarik oksijen tedavisinin etkinliğinideğerlendirmeyi amaçlandık.Nekrotizan enterokolit oluşturabilmek için daha önceden kullanılmış birhipoksi-reoksijenizasyon (H/O) modeli kullanıldı. Grup 1'e üç gün arka arkayahipoksi reoksijenizasyon (H/O) işlemi yapıldı. Grup 2'ye üç gün arka arkayahipoksi reoksijenizasyon (H/O) işlemi yapıldı. Son hipoksi reoksijenizasyonişleminden iki saat sonra, 2,5 ATA basınçta 60 dakika %100 O2 ile bir seansHBO tedavisi uygulandı.Üçüncü günün sonunda terminal ileum ve çekumu içine alan barsakkısımları çıkarıldı. Dokuda TUNEL boyama yöntemi ile apoptozis ve proteinkarbonilasyon yöntemi ile oksidatif stres değerlendirildi.Kontrol grubu ve hiperbarik oksijen tedavisi verilen grup oksidatif stesve doku hasarı yönünden karşılaştırıldığında aşağıdaki sonuçlara ulaşılmıştır.1. Protein karbonilasyon yöntemi ile saptanan oksidatif stres, kontrol grubu ileHBO tedavisi verilen grup arasında belirgin farklıydı. İki grup arasındaki farkistatiksel olarak anlamlıydı.(p=0,01) Kontrol grubunda ortalama proteinkarbonil değeri 32,20 (±16,93) nmol/ mg proteinken, HBO tedavisi verilengrupta 233,25 (±181,06) nmol/mg protein olarak bulundu.2. Doku hasarını belirlemek amacıyla histopatolojik kesitlere yapılan TUNELboyaması ile apoptozis skorlandı. Apoptozis skorlamasına göre kontrol grubuile HBO tedavisi verilen grup arasındaki fark belirgindi. İstatiksel olarakanlamlıydı.(p=0,003) Kontrol grubunda ortalama apoptozis skoru 2,1 (±0,6),HBO tedavisi verilen grupta 1 (±0,7) olarak bulundu3. Bizim çalışmamızda HBO tedavisi verilen grupta protein karbonilasyonyöntemi ile oksidatif stresin belirgin arttığı gösterildi. Ancak HBO tedavisiverdiğimiz grupta doku hasarının kontrol grubuna göre daha az olduğunuTUNEL yöntemi ile yaptığımız apoptozis değerlendirmesinde saptadık. Bukarşıtlık bize oksidatif stresin belirli bir düzeye kadar doku üzerinde koruyucuetki yaptığını belirli bir düzeyin üzerinde ise doku hasarını artırdığınıdüşündürdü. Ancak bu konuda yeterli veri olmadığını, daha fazla çalışmayapılması gerektiğini düşünmekteyiz.Sonuç olarak deneysel olarak nekrotizan enterokolit oluşturduğumuzyenidoğan sıçanlarda yeni bir tedavi yöntemi olarak denediğimiz hiperbarikoksijenin intestinal hasarı azaltmada etkili bir yöntem olduğunudüşünmekteyiz ancak NEK tedavisinde hiperbarik oksijenin etkinliğinigösterecek daha kapsamlı çalışmalara ihtiyaç vardır.Danışman: Prof.Hv.Tbp.Alb. İsmail GöçmenÇalışmayı Destekleyen Kuruluş: GATA Haydarpaşa Eğitim HastanesiAnahtar kelimeler: Nekrotizan enterokolit; hiperbarik oksijen; apoptozis

Abstract:
This study was undertaken to investigate the effect to hyperbaricoxygen (HBO) therapy in an experimental newborn rat model of necrotizingenterocolitis.Twenty newborn rats were divided to two groups as control (group1)and HBO (group 2). An animal model was used for hypoxia-reoxygenation(H/O) which was described previously. Hypoxia was accomplished by placingthe pups in an airtight plexiglas (Rohm & Haas, Philadelphia, PA) chamber(Vacunit; Echmann, England), which was perfused with 100% CO2 for 15minutes. After hypoxia, the animals were reoxygenated for 15 min with 100%oxygen.After this procedure the animals were kept under standard conditions. H/Owas applied for three days to both groups. Single dose HBO therapy wasapplied to group 2 at 2,5 ATA 100% O2 with a duration of 60 minutes.At the end of the study all animals were sacrificed by cervicaldislocation. Terminal ileum and cecum were removed and fixed in 10%formaldehyde. The tissue injury was determined by performing an apoptosisscoring system with TUNEL staining. Oxidative stress was determined bymeasuring tissue protein carbonyl content.The results of our study regarding the tissue injury and oxidativestress when we compared between the two groups are:1. There was a statistically significant difference between control andHBO groups in oxidative stress determined by protein carbonilation(p=0,01). Mean protein carbonilation values were 32,2 nmol/mgprotein and 233,25 nmol/mg protein in control and HBO groupsrespectively.2. Apoptosis scoring was made after TUNEL staining to determine tissueinjury. There was a statistically significant difference between controland HBO groups in apoptosis scores (p=0,003) Mean apoptosisscores were 2,1 (±0,6) and 1 (±0,7) in control and HBO groupsrespectively.3. We showed a significant increase in oxidative stress by using proteincarbonilation in HBO group in our study. However the tissue injurydetermined by apoptosis scoring with TUNEL staining was significantlydecreased in HBO group.In conclusion these findings let us to think that HBO therapy reducesintestinal tissue injury in our experimental newborn rat model of necrotizingenterocolitis but more detailed studies should be made to show effect of HBOtherapy on necrotizing enterocolitis.Danışman: Prof.Hv.Tbp.Alb. İsmail GöçmenÇalışmayı Destekleyen Kuruluş: GATA Haydarpaşa Eğitim HastanesiKey words: Necrotizing enterocolitis; hyperbaric oxygen; apoptosis