Sıçanlarda beyin iskemi-reperfüzyonu sonrası 1 haftalık 3', 4'-dihydroxyflavonol takviyesinin aquaporin 4, apoptozis ve yangısal süreçlere etkisi
Effect of 1 week 3', 4'-dihydroxyflavonol supplementation on aquaporin 4, apoptosis and inflammation processes after brain ischemia-reperfusion in rats
Yazar: TUĞÇE ALADAĞ
Danışman: PROF. DR. RASİM MOĞULKOÇ
Selçuk Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Fizyoloji = Physiology
Dizin: Beyin iskemisi = Brain ischemia ; Dihydroxyflavonol = Dihydroxyflavonol

Özet:
Vücudun bir bölgesinin kanlanmasının çeşitli sebeplerle azalması veya ortadan kalkması iskemi olarak tanımlanır. Nöronlar, iskemik inme sonrasında oksijenden ve enerjiden yoksun kaldığından normal transmembran iyonik gradientini ve homeostazisini sürdüremezler ve bunun sonucunda da hücre ölümü görülür. DiOHF sentetik bir flavonoiddir ve farklı iskemi-reperfüzyon çalışmalarında koruyucu etkisi belirlenmiştir.
Bu çalışmanın amacı, 3',4'-dihidroksiflavonol'ün sıçanların deneysel beyin iskemi-reperfüzyonunda nörolojik parametreler ile apoptoz (Kaspaz-3), AQP4 ve IL-10 üzerindeki etkisini belirlemekti. Parametreler ile iskemi-reperfüzyon hasarı değerlendirildi
Bu çalışmada toplam 28 adet Wistar-albino erkek sıçan kullanıldı. Deney grupları 1-Kontrol, 2-Sham, 3-İskemi-reperfüzyon, 4-İskemi-reperfüzyon + DiOHF (3',4'-dihidroksiflavonol) (10 mg/kg) şeklinde oluşturuldu. Hayvanlara anestezi uygulandı; kaortid arterler 30 dakika bağlandı (iskemi) ve 30 dakika reperfüze edildi. Reperfüzyonla birlikte hayvanlara 1 hafta süreyle 10 mg/kg dozunda DiOHF periton içine verildi. Bir haftalık uygulama ile birlikte nörolojik skorlar ve yeni nesne tanıma testleri yapıldı. Daha sonra anestezi altında öldürülen hayvanlardan alınan hipokampüs dokusu örneklerinde kaspaz 3 ve AQP4 seviyeleri PCR yöntemi ile IL-10 ise ELISA yöntemi ile belirlendi. Sonuçlar ortalama ± standart sapma olarak tanımlandı. Gruplar arası karşılaştırmada Kruskal-Wallis varyans analizi kullanıldı ve p<0,05 düzeyi için Mann-Whitney U testi uygulandı. P<0.05 düzeyi istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.
Beyin iskemi reperfüzyonu hipokampüs dokusunda hem kaspaz 3 hem de AQP4 değerlerini önemli şekilde arttırırken, IL-10 seviyelerini azalttı (P<0.001). Ancak 1 hafta süreli DiOHF takviyesi artan kaspaz 3 ve AQP4 seviyeleri önemli şekilde baskılarken, IL-10 değerlerini artırdı. I/R aynı zamanda nörolojik skor değerlerini artırırken yeni nesne tanıma özelliğini baskıladı ve uygulanan tedavi oluşan olumsuz tabloyu düzeltti.
Araştırmanın bulguları sıçanlarda sıçanlarda iki taraflı karotid oklüzyonuyla oluşturulan beyin iskemisi ve takiben reperfüzyonunun doku hasarına yol açtığını ancak 1 hafta süreli DiOHF uygulamasının ise hem doku hem de nörolojik parametreleri iyileştirici yönde etki oluşturduğunu göstermektedir.

Anahtar Sözcükler: 3', 4'-Dihydroxyflavonol; apoptozis; AQP4, beyin iskemisi; IL-10.

Abstract:
Ischemia is defined as the decrease or disappearance of blood supply to a part of the body for various reasons. Since neurons are deprived of oxygen and energy after ischemic stroke, they cannot maintain the normal transmembrane ionic gradient and homeostasis, and as a result, cell death occurs. DiOHF is a synthetic flavonoid and its protective effect has been determined in different ischemia-reperfusion studies.
The aim of this study was to determine the effect of 3',4'-dihydroxyflavonol on neurological parameters and apoptosis (Caspase-3), AQP4 and IL-10 in experimental brain ischemia-reperfusion of rats. Ischemia-reperfusion damage was evaluated with parameters
A total of 28 Wistar-albino male rats were used in this study. Experimental groups were formed as 1-Control, 2-Sham, 3-Ischemia-reperfusion, 4-Ischemia-reperfusion + DiOHF (3',4'-dihydroxyflavonol) (10 mg/kg). The animals were anesthetized; The caortid arteries were ligated (ischemia) for 30 minutes and reperfused for 30 minutes. Following reperfusion, DiOHF was administered intraperitoneally to the animals at a dose of 10 mg/kg for 1 week. During the one-week practice, neurological scores and new object recognition tests were performed. Then, caspase 3 and AQP4 levels were determined by PCR method and IL-10 by ELISA method in hippocampus tissue samples taken from animals sacrificed under anesthesia. Results were described as mean ± standard deviation. Kruskal-Wallis analysis of variance was used for comparison between groups and Mann-Whitney U test was applied for p<0.05 level. P<0.05 level was considered statistically significant.
Brain ischemia reperfusion significantly increased both caspase 3 and AQP4 values in the hippocampus tissue, while decreasing IL-10 levels (P<0.001). However, 1-week DiOHF supplementation significantly suppressed increased caspase 3 and AQP4 levels and increased IL-10 values. While I/R also increased neurological score values, it suppressed the ability to recognize new objects, and the applied treatment corrected the negative situation.
The findings of the study show that brain ischemia caused by bilateral carotid occlusion in rats and subsequent reperfusion causes tissue damage, but 1-week DiOHF application has a healing effect on both tissue and neurological parameters.

Key Words: 3', 4'-Dihydroxyflavonol; apoptosis; AQP4; brain ischemia; IL-10.