Tekrarlayan idrar yolu enfeksiyonlarında genetik yatkınlığın rolünün araştırılması
The investigation of genetic susceptibility to recurrent urinary tract infections
Yazar: MELTEM AKSU
Danışman: PROF. DR. SEVCAN A. BAKKALOĞLU EZGÜ
Gazi Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2012
Konu: Nefroloji = Nephrology ; Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları = Child Health and Diseases
Dizin: Mesane hastalıkları = Urinary bladder diseases ; Reseptörler-toll like = Receptors-toll like ; Üriner sistem enfeksiyonları = Urinary tract infections ; İnterlökin 8 = Interleukin 8

Özet:
İdrar yolu enfeksiyonları çocukluk çağındaki en sık enfeksiyon hastalıklarındandır. İdrar yolu enfeksiyonu geçiren bireylerin ailelerinde İYE öyküsünün sık olduğunun tespit edilmesi kalıtımsal faktörlere dikkat çekmiştir. Doğumsal immunitenin patogenezdeki öneminin anlaşılması ile genetik faktörler üzerinde daha çok durulmaya başlanmıştır.Toll like reseptörler epitelyal yüzeylerde bulunur, patojenlerin ve hücre hasarı sonucu oluşan moleküllerin tanınmasını sağlar. Üriner sistemde de yaygın olarak bulunduğu çalışmalarda gösterilmiş olan TLR4, gram negatif bakteri ana bileşeni olan lipopolisakkaridi tanır. Patojenin saptanması sonrası hücre içi aracı moleküllerin aktivasyonu ile hücreden sitokin, özellikle de IL-6 ve IL-8 salınımı tetiklenir. Bu sitokinler aracılığıyla nötrofil aktivasyonu ve enfeksiyon bölgesine göçü ve bakterinin ortadan kaldırılması gerçekleşir. Doğumsal immun yanıt mekanizmalarında önemli rol oynayan TLR4 geni A896G polimorfizminin, gram negatif enfeksiyonlar ve sepsis ile, IL-8 geni A2767G polimorfizminin üst üriner sistem enfeksiyonları ile ilişkili olduğu bildirilmiştir.Çalışmamızda tekrarlayan İYE geçiren, risk faktörü olarak mesane disfonksiyonu saptanmış 33, herhangi bir risk faktörü saptanmamış 43 hastadan ve daha önceden geçirilmiş İYE veya mevcut böbrek hastalığı öyküsü olmayan 110 sağlıklı gönüllüden (kontrol grubu) alınan kan örneklerinde DNA izolasyonları yapılmıştır. DNA eldesi sonrası gerçek zamanlı PZR ve Restriksiyon Enzimi Uzunluk Polimorfizmi (RFLP) yöntemi kullanılarak TLR4 geni A896G ve IL-8 geni A2767G polimorfizmleri araştırılmıştır. Ateşli enfeksiyon geçirmiş olma öyküsü piyelonefrit lehine değerlendirilmiştir.Tekrarlayan idrar yolu enfeksiyonu olan 76 olgunun tamamı kız (%100) olup yaş ortalaması 9,2±3,5 (2-17) yıl olarak saptandı. Tekrarlayan İYE olan hasta grubunda TLR4-896AG ve GG genotipi (p=0,023 ve p<0,001), TLR4 geni G allelinin (p<0,001) ve IL-8-2767AG genotipinin (p=0,019) kontrol grubuna göre daha sık olduğu saptandı. TLR4 geni G allelinin tekrarlayan İYE ve mesane disfonksiyonu ile ilişkili olduğu düşünüldü. Risk faktörü saptanmayan hasta grubunda mesane disfonksiyonu olan gruptan farklı olarak TLR4-896AG genotipinin kontrol grubuna göre daha sık olduğu gözlendi (p=0,013). Mesane disfonksiyonu olan grupta ise IL-8-2767AG genotipinin ve A alelinin kontrol grubuna göre daha sık olduğu gözlendi (p<0,001 ve p=0,015), hastalıkla ilişkili olabileceği düşünüldü. Mesane disfonksiyonu olan grup ve risk faktörü saptanmayan grup karşılaştırıldığında ise TLR4-896GG genotipi ve G allelinin (p=0,04 ve p<0,001), ve IL-8-2767AG genotipinin daha sık olduğu gözlendi (p=0,022). Ateş atağı öyküsü olan hastalarda TLR4-896AG ve IL-8-2767AG genotiplerinin kontrol grubuna kıyasla daha sık olduğu saptandı (p=0,004 ve p=0,031) ve üst üriner sistem enfeksiyonları ile ilişkilendirildi.TLR4 A896G ve IL-8 A2767G polimorfizmlerinin tekrarlayan İYE, üst üriner sistem enfeksiyonları ve mesane disfonksiyonu ile ilişkili olabileceği düşünülmektedir. Söz konusu bulgular çerçevesinde, bu hastalıklar ile ilgili yeni tedavi yaklaşımları getirilebilir. Bu konunun ileri çalışmalarla irdelenmesi gerektiği düşünülmektedir.

Abstract:
Urinary tract infections (UTI) are among the most common infections in childhood. As urinary tract infections show familial predisposition, hereditary factors those may play a role have attracted attantion. This fact especially gained importance after the role of innate immunity on the pathogenesis was evident.Toll like receptors reside on the epithelial surfaces and help in recognition of the pathogens and the molecules those are formed as a result of cell damage. TLR4, which was shown to be present in the urinary system broadly, recognizes lipopolisaccaride which is the main structure of gram negative bacteria. After determination of the pathogen, the secretion of cytokines, especially IL-6, IL-8 triggered by the activation of the mediators in the cell. By the help of these cytokines neutrophile activation, migration to the area of infection and bacterial death occurs. It was shown that A896G polymorphism in TLR4 gene which plays an important role in innate immun response has been associated with gram negative infections and A2767G polymorphism in IL-8 gene has been associated with upper urinary tract infections.In this study DNA extractions were made from 33 patients with recurrent urinary tract infections in whom bladder dysfunction was determined as a risk factor, from 43 patients without any risk factors and from 110 healthy controls (control group) without a history of urinary tract infection or kidney disease. The A896G polymorphism in TLR4 gene and the A2767G polymorphism in the IL-8 gene were investigated by using realtime PCR and restriction fragment length polymorphism (RFLP). The history of infection with fever was accepted as pyelonephritis.All the 76 patients with recurrent urinary tract infections was females (%100) and the mean age was 9,2±3,5 (2-17) years. TLR4-896AG and GG genotypes (p=0,023 and p<0,001), TLR4 gene G allel (p<0,001) and IL-8-2767AG genotype (p=0,019) were more frequent in the patients with recurrent infections compared to the control group. It is considered that TLR4 gene G allele is associated with recurrent urinary tract infection and bladder dysfunction. In the patients without any risk factor, TLR4-896AG genotype was more frequent compared to the control group which was different than the patients with bladder dysfunction (p=0,013). IL-8-2767AG genotype in the patients with bladder dysfunction was more frequent compared to the control group (p<0,001 and p=0,015), which is thought to be associated with the disease. TLR4-896GG genotype and G allele (p=0,04 and p<0,001), IL-8-2767AG genotype (p=0,022) also occurred more frequently in patients with bladder dysfunction than in patients with any risk factors. In the patients with a history of recurrent fever TLR4-896AG and IL-8-2767AG genotypes were more frequent compared to the control group (p=0,004 and p=0,031) and this was thought to be related to the upper urinary tract infections.As a result, these data suggest that TLR4 A896G and IL-8 A2767G polymorphisms are involved in susceptibility to recurrent urinary tract infections, upper urinary tract infections and bladder dysfunction. Clinical studies are needed to demonstrate if those who carry these genetic variants should need a different approach of treatment.