Yumurtalık kanseri tedavisinde IL-6R
STAT 3 / PD-L1 hedefli lobarik asit ve lobarik asit -tosilizumab kombinasyonunun terapötik etkinliğinin belirlenmesi / Determination of therapeutic effect of lobaric acid and lobaric acid – tosilizumab combination targeted at IL-6R / STAT 3 / PD-L1 in ovarian cancer treatment
Yazar: IBRAHIM GADAŞLİ
Danışman: PROF. DR. DEMET CANSARAN DUMAN
Ankara Üniversitesi / Biyoteknoloji Enstitüsü / Temel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2024
Konu: Biyoloji = Biology ; Biyoteknoloji = Biotechnology ; Genetik = Genetics

Özet:
Yumurtalık kanseri, kadın jinekolojik kanserleri arasında en yüksek mortalite oranına sahip
olup günümüzde önemli bir sağlık sorunu teşkil etmektedir. İlerleyen teknoloji ve
çalışmalarına rağmen, erken tanının zorluğu, tedavi direnci, yüksek toksisite, maliyet ve
düşük tedavi yanıtı gibi faktörler, yumurtalık kanseri tedavisinde yeni yaklaşımlara duyulan
ihtiyacı artırmaktadır. Bu bağlamda, immünoterapi, bağışıklık sisteminin kanser üzerindeki
etkilerine odaklanarak, hedefe yönelik tedavi ve yan etkileri en aza indirmeye yönelik bir
tedavi modeli olarak öne çıkmaktadır. Tez çalışması konusu, immün kontrol noktasında rol
oynayan IL-6R/STAT3/PD-L1 yolakları üzerinde doğal bir küçük molekül olan liken ikincil
metaboliti lobarik asitin (LA) ve LA-Atezolizumab (ATE) ve LA-Tosilizumab (TCZ)
monoklonal antikor kombinasyonunun yumurtalık kanseri üzerinde sinerjistik etki
potansiyelinin belirlenmesidir. Bu amaçla, LA, TCZ ve ATE`nin yüksek dereceli seröz
yumurtalık kanseri hücre hattı OVCAR-3 üzerindeki anti-proliferatif etki potansiyeli, hücre
göçü ve hücre morfolojisi üzerindeki etkileri değerlendirilmiştir. Hedef moleküllerin
immünoterapötik etkinliğini belirlemek için PD-1/PD-L1 protein bağlanması üzerindeki
etkileri incelenmiştir. LA, TCZ ve ATE`nin hedef yolak üzerindeki transkriptom
düzeyindeki etkileri qRT-PCR, protein düzeyindeki etkileri ise western blot analizi ile
belirlenmiştir. LA, LA-ATE ve LA-TCZ`nin etki mekanizmasını anlamak ve hücre içi
sinyallenme üzerindeki etkilerini incelemek amacıyla siRNA transfeksiyonu
gerçekleştirilmiş olup immünoterapideki rolleri valide edilmiştir. Elde edilen sonuçlara göre,
LA ve LA-TCZ kombinasyonunun yumurtalık kanseri üzerinde immünoterapötik etkinlik
gösterdiği anlaşılmıştır. Tez çalışması sonucunda elde edilen veriler, LA`nın tekli ve TCZ
ile birlikte yumurtalık kanseri tedavisinde yenilikçi bir ilaç adayı olarak kullanılma
potansiyelini ortaya çıkarmıştır. Ancak dha fazla in-vitro analizler ve in-vivo çalışmalar ile
desteklenmesi gerekmektedir.

Anahtar kelimeler: Yumurtalık kanseri, immünoterapi, lobarik asit, Tosilizumab

Abstract:
Ovarian cancer has the highest mortality rate among female gynaecological cancers and
represents a significant public health concern in the present era. Despite the advent of
sophisticated technology and a plethora of studies, factors such as the difficulty in early
diagnosis, treatment resistance, high toxicity, cost and low treatment response underscore
the necessity for novel approaches in ovarian cancer treatment. In this context,
immunotherapy represents a promising treatment model that focuses on harnessing the
immune system's effects on cancer, targeted treatment, and minimising side effects. The aim
of this thesis is to ascertain the potential synergistic effect of the lichen secondary metabolite
lobaric acid (LA), a natural small molecule, on IL-6R/STAT3/PD-L1 pathways that play a
role in immune control, and the monoclonal antibody combination of LA-Atezolizumab
(ATE) and LA-Tosilizumab (TCZ) on ovarian cancer. The objective was to evaluate the antiproliferative potential, cell migration and cell morphology effects of LA, TCZ and ATE on
the high-grade serous ovarian cancer cell line OVCAR-3. In order to ascertain the
immunotherapeutic efficacy of the target molecules, their effects on PD-1/PD-L1 protein
binding were examined. The effects of LA, TCZ and ATE on the target pathway at the
transcriptome level were determined by quantitative reverse transcription polymerase chain
reaction (qRT-PCR), while their effects at the protein level were determined by western blot
analysis. In order to gain insight into the mechanism of action of LA, LA-ATE and LA-TCZ
and to examine their effects on intracellular signalling, siRNA transfection was performed,
and their role in immunotherapy was validated. The results demonstrated that the
combination of LA and LA-TCZ exhibited immunotherapeutic efficacy in the treatment of
ovarian cancer. The thesis study yielded data indicating the potential of LA as a standalone
agent and in combination with TCZ as a novel drug candidate for the management of ovarian
cancer. However, further in vitro analyses and in vivo studies are necessary to substantiate
these findings.

Keywords: Ovarian cancer, immunotherapy, lobaric acid, Tocilizumab