Abdominal aort anevrizması oluşturulmuş şıcanlara uygulanan melatoninin koruyucu ve tedavi edici etkilerinin araştırılması
The protective and therapeutic effects of melatonin on abdominal aortic aneurym formed rats
Yazar: GÖZDE TEKİN
Danışman: PROF. DR. CEMİL SELİM İSBİR ; PROF. DR. GÖKSEL ŞENER
Marmara Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kalp ve Damar Cerrahisi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2015
Konu: Göğüs Kalp ve Damar Cerrahisi = Thoracic and Cardiovascular Surgery
Dizin: Aort anevrizmaları = Aortic aneurysm ; Aort-abdominal = Aorta-abdominal ; Kalsiyum klorür = Calcium chloride ; Kaspazlar = Caspases ; Matriks metalloproteinaz 2 = Matrix metalloproteinase 2 ; Matriks metalloproteinaz 9 = Matrix metalloproteinase 9 ; Melatonin = Melatonin ; Nitrik oksit = Nitric oxide ; Sıçanlar = Rats ; Tümör nekroz faktörleri = Tumor necrosis factors

Özet:
Amaç: Abdominal aort anevrizması (AAA);  gerçek anevrizmalar içerisinde en sık görülen tip olmanın yanında yüksek rüptür insidansı nedeniyle hayatı tehdit eden bir hastalıktır. Monosit aktivasyonu, makrofaj infiltrasyonu, vasküler oksidatif stres ve matris proteoliz AAA oluşumuna katkıda bulunan önemli inflamatuar adımlardır. AAA'nın medikal tedavisinde antioksidan ajanlar yeni tedavilere ışık tutmaktadır. Bu nedenle abdominal aort anevrizması oluşturulmuş sıçanlara uygulanan melatoninin koruyucu ve tedavi edici etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. 
Yöntem: 28-32 haftalık erkek 40 adet Sprague-Dawley sıçan randomize olarak eşit sayıda (n=10) dört gruba ayrılmıştır. AAA oluşumu için CaCl2 modeli kullanılmıştır. Kontrol grubuna sadece SF uygulanmıştır. AA grubunda abdominal aort anevrizması oluşturulmuş ve sonrasında SF verilmiştir. AA+Mel Grubunda abdominal aort anevrizması oluşturulmuş ve sonrasında melatonin verilmiştir. Mel+AA+Mel Grubunda, abdominal aort anevrizması oluşumuyla eş zamanlı melatonin uygulanmış ve sonrasında da melatonin verilmiştir. Deneklerin anevrizma oluşumu öncesinde, sonrasında ve tedavi sonunda abdominal aortalarının anjiyografik görüntüleri alınmıştır. 6 haftanın sonunda denekler dekapite edilerek doku örneklerinde MMP2, MMP9, TNF-α, 8OHdG, Kaspaz-3, iNOS, total NOS,  myeloperoksidaz (MPO) ve glutatyon (GSH) bakılmıştır. Ayrıca doku örnekleri histolojik olarak incelenmiştir. 
Bulgular: Çalışmamızda melatoninin koruyucu etkilerini araştırmak için AA+Mel ve Mel+AA+Mel grubu karşılaştırılmıştır. Biyokimyasal tetkikler ile melatoninin koruyucu etkileri anlamlı bulunmuştur (p<0.01). Histolojik olarak ise anevrizma oluşumuyla birlikte melatoninin verilmesinin aort dokusundaki anevrizmatik değişiklikleri azalttığı gösterilmiştir. Anjiyografik yöntemler ile değerlendirilen çap ölçümlerinde anevrizma oluşumuyla eş zamanlı melatonin verilen grupta anevrizma çapının daha az olduğu saptanmıştır (p<0.01). Melatoninin tedavi edici etkilerini karşılaştırmak amacı ile AA grubu ile AA+Mel grubu karşılaştırılmıştır. Sonuç olarak melatoninin verilmesi ile inflamatuar, proteolitik, apoptoz ve immün yanıtın azaldığı biyokimyasal testler ile gösterilmiştir. Benzer sonuçlar histolojik olarak da gösterilmiş olup anjiyografik görüntülemelerde de anevrizma çapındaki azalmalar anlamlı bulunmuştur (p<0.01).    
Sonuç: Anevrizma oluşumunda melatoninin koruyucu etkisi ve anevrizma oluşturulan deneklerde tedavinin yeri biyokimyasal verilerle gösterilmiş olup, histolojik ve  anjiyografik verilerle de istatistiksel olarak anlamlandırılmıştır.

Abstract:
Objective: Abdominal aortic aneurysm (AAA); disesase frequently seen in all types of aneurysms, threats life because of its high rupture incidences. Monocyte activation, macrophage infiltration, vascular occidative stress and matrix proteolysis are the important inflammatuar steps during the formation of AAA.   Antioxidant agents show the way to the new treatments of AAA's medical treatment. That's why it is aimed to ascertain of melatonin's protective and therapeutic effects on AAA formed rats.
Methods: 28-32 weeks old 40 Sprague-Dawley rats divided into four equal groups randomly (n=10). CaCl2 model was used for AAA formation. To sham group just SF was injected. To AA group AAA was formed and than SF was injected. To AA+Mel group AAA was  formed and melatonin was injected. To Mel+AA+Mel group melatonin was injected during and after the formation of AAA. Rat's abdominal aortic anjiographic images were taken before, during and after the melatonin therapy. 6 weeks later rats were dekapitated and than MMP2, MMP9, TNF-α, 8OHdG, Caspase-3, iNOS, total NOS,  myeloperoxidase (MPO) and glutatyon (GSH) were searched on aortic tissue samples. 
Results: In our study AA+Mel and Mel+AA+Mel groups were compared to determine melatonines protective effects. By using biochemical datas melatonines protective effects were found significant (p<0.01). Moreover in histological view, the injection of melatonine during the aneurysm formation showed the decrease of aneurysmatic changes on aortic tissue. Also measuring diameter of aneurysm by using angiographic methods showed that aneurysm dilatation diameters were reduced in Mel+AA+Mel group when compared with other groups (p<0.001). In addition to determine melatonine's therapeutic effect , AA and AA+Mel groups were compared. Biochemical datas showed that inflammatory, proteolytic, apoptotic and immune responses decreased. The reduction of aneurysm diameter was found significant as a result of angiographic images and also similar results were shown  histologically (p<0.01).      
Conclusion: In our study the protective effects of melatonine in aneurysm formation and the therapeutic effects of melatonine in aneurysm formed rats were shown by biochemical datas. Also histologic and angiographic datas were explained statistically significant.