Parvovirus B19 enfeksiyonu olan hastalarda SLE ile ilişkili miRNA'ların araştırılması
Investigation of SLE-associated miRNAs in parvovirus B19 infection
Yazar: AYŞE RÜVEYDA UĞUR
Danışman: PROF. DR. MEHMET ÖZDEMİR
Necmettin Erbakan Üniversitesi / Meram Tıp Fakültesi / Tıbbi Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı / Tıbbi Viroloji Bilim Dalı
Derece: Tıpta Yan Dal Uzmanlık, 2018
Konu: Mikrobiyoloji = Microbiology ; Moleküler Tıp = Molecular Medicine

Özet:
Parvovirus B19, immünkompetan çocuklarda hafif seyirli eritema enfeksiyozum, primer enfeksiyon
geçiren gebelerde fetal kayıp, immünkompetan erişkinlerde artrit, immünkompromize erişkinlerde
aplastik anemi ve ağır sitopeni gibi geniş bir hastalık spektrumuna neden olan bir virüstür. Israrcı veya akut viral enfeksiyon, otoimmün bağışık yanıta neden olabilmektedir. Parvovirus B19 enfeksyonunda
görülen klinik belirtiler otoimmün hastalıkları taklit edebilmektedir. Bu nedenle parvovirus B19
enfeksiyonunun sistemik lupus eritematosus (SLE) ve romatoid artrit gibi bazı otoimmün hastalıklara
neden olduğu veya bu hastalıkları alevlendirdiği düşünülmektedir. Parvovirus B19'un SLE'yi
tetikleyip tetiklemediği de dikkatleri oldukça üzerine çeken bir konudur.
Konak hücre ve viral proteinler arasındaki moleküler benzerlik, otoimmüniteye neden olan ana
mekanizma gibi görünmektedir. miRNA'lar gen ekspresyonununda post-transkripsiyonel
düzenleyiciler olarak görevli, doğal ve edinilmiş bağışıklıkta anahtar rolleri olan yaklaşık 22 nükleotid
uzunluğunda tek zincirli RNA'lardır. SLE gibi bir çok otoimmün hastalıkta miRNA ekspresyonlarının
değiştiği bilinmektedir. Diğer taraftan parvovirus B19 enfeksiyonu sırasında SLE patogenezinde yer
aldığı düşünülen miRNA'ların serum seviyelerinin nasıl değiştiği bildiğimiz kadarıyla daha önce hiç
araştırılmamıştır. Bu tez projesinin amacı, parvovirus B19 enfeksiyonu geçiren hastalarda SLE
patogenezi ile ilişkili olduğu bildirilmiş 19 miRNA'nın (let-7e-5p, miR-155, miR-181b, miR-146a,
miR-21, miR-142-3p, miR-142-5p, miR-148a-3p, miR-126, miR-181a, miR-223-3p, miR-223-5p,
miR-125a-3p, miR-451, miR-31, miR-144-5p, miR-196a, miR-524-5p, miR-203) serum seviyelerinin
belirlenmesidir.
Parvovirus B19 enfeksiyonu ön tanısı ile gönderilen ve VP2 immün capture ELISA yöntemi ile
(Vircell, Granada, İspanya ve Euroimmun, Luebeck, Almanya) parvovirus B19 IgM antikoru pozitif
saptanmış 35 hastanın serum örneği Ocak 2017-Mayıs 2018 arasında çalışmaya alındı. miRNA
ekstraksiyonu (RTA miRNA Kit, Kocaeli, Türkiye) yapıldıktan sonra, miRNA ekspresyon seviyeleri
real time PCR kitiyle (Applied Biological Materials Inc., Richmond, Kanada) gerçekleştirildi. miRNA
serum ekspresyon seviyeleri 2

(–ΔΔCT) yöntemi ile analiz edildi. miR-146-5p, miR-126, miR-142-5p,
miR-125a-3p ve miR-21 serum ekspresyon sevileri kontrol grubuna göre parvovirüs B19 hastalarında

daha yüksek bulundu. SLE hastalarının periferik kan mononükleer hücrelerinde miR-146-5p ve miR-
126 ekspresyon seviyelerinin azaldığının bildirilmesine rağmen bizim çalışmamızda tam tersine serum

ekspresyon sevilerinde artış bulunmasının sebebinin parvovirüs B19 enfeksiyonuna verilen konak
immün yanıtı olduğu düşünüldü. Sonuç olarak, parvovirüs enfeksiyonunun SLE gelişmesinde rolünü
belirlemek için daha ayrıntılı prospektif çalışmalar yapılmalıdır.

Abstract:
Parvovirus B19 is the causative agent of a wide range of infections ranging from mild erythema
infectiosum in immunocompetent children to fetal loss in primary infected pregnant women and
arthritis in immunocompetent adults and aplastic anemia or cytopenias in adult immunocompromised
patients. Persistent or acute course of viral infection may be responsible for an autoimmune response.
Clinical symptoms of parvovirus B19 can mimic autoimmune diseases. Indeed the virus has been
implicated as the causative or the precipitating agent of several autoimmune disorders, including
systemic lupus erythematosus (SLE) and rheumatoid arthritis. Therefore, parvovirus B19 is the center
of attraction whether it is able to trigger SLE.
Molecular mimicry between host and viral proteins seems to be the main mechanism involved in the
induction of autoimmunity. miRNAs, approximately 22 nucleotides in length, are small single stranded
RNAs playing key roles in the post-transcriptional regulation of most gene regulatory pathways and
regulate both the innate and adaptive immune responses. Altered miRNA expression has been reported
in autoimmune diseases, including SLE. On the other hand, during parvovirus B19 infection, the serum
expression levels of miRNAs implemented in SLE pathogenesis were not yet to be studied. The aim of

this study is to investigate the serum expression levels of selected miRNAs (let-7e-5p, miR-155, miR-
181b, miR-146a, miR-21, miR-142-3p, miR-142-5p, miR-148a-3p, miR-126, miR-181a, miR-223-3p,

miR-223-5p, miR-125a-3p, miR-451, miR-31, miR-144-5p, miR-196a, miR-524-5p, miR-203)
implemented in SLE pathogenesis in patients with parvovirus B19 infection.
Thirty-five serum specimens of patients, in whom parvovirus B19 IgM was determined by two
immune capture assay directed to VP2 viral protein (Vircell, Granada, Spain, and Euroimmun,
Luebeck, Germany), were included to the study between January 2017 and May 2018. After miRNA
extraction assay (RTA miRNA Kit, Kocaeli, Turkey), expression levels of selected miRNAs were
determined by real time PCR assay (Applied Biological Materials Inc., Richmond, Kanada). The
results will be evaluated statistically to assess the relation between parvovirus B19 infection and
selected miRNA expression levels. Serum expression levels of miRNAs were analyzed by 2
(–ΔΔCT)
method. Serum miR-146-5p, miR-126, miR-142-5p, miR-125a-3p, and miR-21 levels were found to
be higher in the patients with parvovirus B19 infection than the control subjects despite that expression
levels of these miRNAs in peripheral blood mononuclear cells of patients with SLE are downregulated.
The cause of raised serum levels of miR-146-5p and miR-126 is suggested to be the host immune
response to parvovirus B19 infection. In conclusion, detailed and prospective studies are needed to
elucidate the role of parvovirus B19 in the development of SLE.