7,8-dihidroksiflavonun insan karbonik anhidraz I ve II izoenzimleri üzerine etkisinin in vitro araştırılması
In vitro investigation of the effect of 7,8-dihydroxyflavone on human carbonic anhydrase I and II isoenzymes
Yazar: SEÇKİN KAYA
Danışman: PROF. DR. AHMET ALVER
Karadeniz Teknik Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
Karbonik anhidraz (CA) karbondioksidin hidrasyonunu sağlayan bir metaloenzimdir. Memelilerde 16 izoenzimi keşfedilen CA'ların 15'i insanda da bulunur. İnsan karbonik anhidraz I (hCAI) ve II (hCAII) eritrosit izoenzimleri olarak bilinirler. Bu iki izoenzim kan pH'ını düzenlenmesinde, sıvı elektrolit dengesinin sağlanmasında, solunum ve sindirimde de rol alırlar. Asetazolamid (AZM) başta olmak üzere sülfonamid sınıfı ilaçlar CA inhibitörleridir ve glokom tedavisi için kullanılmaktadır. CA'lar için izoenzim seçici inhibitör ve aktivatör arayışı sürmektedir. 
Bitkilerde bulunan fenolik bileşikler çok zengin bir sınıfa sahiptir. Antioksidan, antidiyaretik, antialerjik, antimikrobiyal, antispazmotik, antiviral, antitromboz ve antihipertansif gibi etkiler gösterebilirler. 7,8-Dihidroksiflavon (7,8-DHF) fenolik bileşiklerin flavonoid alt sınıfının bir üyesidir. Bu bileşik Tropomiyosin reseptör kinaz B'nin agonistidir. CA üzerinde etkisi daha önce araştırılmamıştır. 
Bu tez çalışmasında, esteraz aktivitesi yöntemini kullanarak 7,8-DHF'nin hCAI ve hCAII izoenzimleri üzerine in vitro etkileri araştırıldı. Pozitif kontrol olarak AZM kullanıldı. Suda çözünürlüğü düşük olan 7,8-DHF'nin, %17'lik DMSO (Dimetil sülfoksit)'da 0-3 mM arasında farklı konsantrasyonlardaki çözeltileri hazırlandı. 7,8-DHF için belirtilen konsantrasyonlar arasında hCAI ve hCAII izoenzimleri %50 ve daha altında inhibisyon gözlenmedi. 7,8-dihidroksiflavonun hCAI ve hCAII için IC50 değerleri hesaplanmadı. 3 mM olan maksimum 7,8-DHF konsantrasyonunda hCAI ve hCAII izoenzimleri için sırasıyla %14.1 ve %14.7 oranında inhibisyon gözlendi. 
Sonuç olarak 7,8-DHF'nin hCAI ve hCAII izoenzimlerinin esteraz aktivitesi üzerine anlamlı bir inhibisyon etkisinin olmadığı görüldü.

Abstract:
Carbonic anhydrase (CA) is a metalloenzyme that provides hydration of carbon dioxide. Of the 16 isoenzymes discovered in mammals, 15 of the CAs are also found in humans. Human carbonic anhydrase I (hCAI) and II (hCAII) are known as erythrocyte isoenzymes. These two isoenzymes are also involved in the regulation of blood pH, fluid electrolyte balance, respiration and digestion. Sulfonamide class drugs, especially acetazolamide (AZM), are CA inhibitors and are used for the treatment of glaucoma. The search for isoenzyme-selective inhibitors and activators for CAs continues. 
Phenolic compounds found in plants have a very rich class. They can show effects such as antioxidant, antidiarrheal, antiallergic, antimicrobial, antispasmodic, antiviral, antithrombosis and antihypertensive. 7,8-Dihydroxyflavone (7,8-DHF) is a member of the flavonoid subclass of phenolic compounds. This compound is an agonist of Tropomyosin receptor kinase B. Its effect on CA has not been investigated previously. 
In this thesis, we investigated the in vitro effects of 7,8-DHF on hCAI and hCAII isoenzymes using the esterase activity method. AZM was used as a positive control. Solutions of 7,8-DHF, which has low water solubility, were prepared in 17% DMSO (Dimethyl sulfoxide) at different concentrations between 0-3 mM. Among the concentrations indicated for 7,8-DHF, no inhibition of hCAI and hCAII isoenzymes of 50% or less was observed. Therefore, IC50 values for hCAI and hCAII of 7,8-dihydroxyflavone were not calculated. It showed inhibition of 14.1% and 14.7% for hCAI and hCAII isoenzymes, respectively, at a maximum concentration of 7.8-DHF of 3 mM. 
As a result, 7,8-DHF had no significant inhibition effect on the esterase activity of hCAI and hCAII isoenzymes.