Ratlarda akut spinal kord yaralanmasında nöroprotektif eritropoetinin hem oksijenaz-1 (HO-1) ve nitrik oksit sentaz (NOS) enzimleri üzerine olan etkilerinin araştırılması
Investigation of the effects of neuroprotective erythropoetine on heme oxygenase 1 and nitric oxide syntase enzymes in rats with acute spinal cord injury
Yazar: ÖZGEN ÖZMETE
Danışman: DOÇ. DR. NEVAL BOZTUĞ UZ
Akdeniz Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2012
Konu: Anestezi ve Reanimasyon = Anesthesiology and Reanimation
Dizin: Enzimler = Enzymes ; Eritropoietin = Erythropoietin ; Hem = Heme ; Nitrik oksit = Nitric oxide ; Spinal kord yaralanmaları = Spinal cord injuries ; Sıçanlar = Rats

Özet:
SKH?ında birincil yaralanma, travma anında gerçekleşmekte olup, doku
hasarı ve hücre ölümü sonucu meydana gelir. İkincil yaralanma ise endojen hücre
ölümü yollarının aktivasyonu ile sonuçlanan ölüm kaskatının bir sonucudur.
Deneysel çalışmalar ve klinik gözlemler spinal kord lezyonlarının daha çok
ikincil hasar mekanizmasıyla genişlediğini göstermektedir.
Günümüze kadar elde edilen bilgiler ışığında çalışmamızda sıçanlarda klip
kompresyon metoduyla gerçekleştirilen deneysel SKH modelinde intraperitoneal
(İP) uygulanan EPOnin, HO-1 ve NOS enzimlerine olan etkinliği ile nöronal
koruma sağladığını göstermeyi amaçladık.
Çalışmada 33 adet erişkin dişi Wistar albino cinsi ratlar dört gruba ayrıldı.
Etil karbamate 1.2-1.4 gr/kg ile anestetize edildi. Torakal 6-10 seviyesinden
laminektomi uygulandıktan sonra spinal kord iskemisi oluşturulan gruplarda 11
mm. ve 70 gr. kapanma basınçlı klip ile 3 dakika kompresyon uygulandı. Sham
grubuna sadece laminektomi uygulandı, iskemi grubuna ise laminektomi sonrası
farmakolojik ajan verilmedi. Reperfüzyon başlangıcında Eritropoetin grubuna
5000 Ü/kg İP EPO, Metilprednizolon grubuna ise 30 mg/kg İP MP verildi ve 2
saat sonra spinal kord örneklemesi yapıldı. Patolojik olarak ışık mikroskobisi ile
değerlendirildi, biyokimyasal olarak ise Hem Oksijenaz 1 ve Nitrit/Nitrat düzeyi
incelendi. Grup Ide Hem Oksijenaz-1 aktivitesi Grup Se göre anlamlı olarak
artış gösterirken, Grup M ve Grup Ede Hem Oksijenaz-1 aktivitesi Grup S?e göre
anlamlı farklılık göstermedi. Nitrit/Nitrat düzeyinde ise gruplar arasında
istatistiksel olarak anlamlı farklılık saptanmadı.
Sonuç olarak; EPOnin nöroprotektif etkinliğinin Nitrik Oksit Sentaz ve
Hem Oksijenaz 1 yolakları üzerinden olmadığı sonucuna vardık. Ancak ileri
çalısmalarla desteklenmesinin gerektiği, nöronal hücre düzeyinde oluşacak
etkilerin moleküler düzeyde çalışmalarla aydınlatılmasının uygun olacağı
kanaatindeyiz.

Abstract:
Primary injury in Spinal Cord Injury (SCI) occurs at the time of trauma that
arises from tissue trauma and cell death. Secondary injury is the result of death
cascade caused by the activation of endogenous cell death paths. Experimental
studies and clinical observations show that spinal cord lesions expand by means
of secondary injury mechanisms.
We aimed to show that intraperitoneal administration of EPO has neural
protection by its effects on HO-1 and NOS enzymes in experimental SCI models
using clip compression in light of the ongoing knowledge.
33 adult, female Wistar albino rats were divided into four groups in our
study. They were anaesthetised by etil carbamate using 1.2-1.4 gr/kg. After spinal
cord ischemia was performed following laminectomy at the levels of thoracal 6 ?
10, compression was administered for 3 minutes with a clip of 11 milimeters and
70 gr closing pressure. Sham group only received laminectomy, in ischemia
group no pharmalogical agents were administered after laminectomy. At the
beginning of reperfusion, 5000 U/kg IP EPO was given to group Erithropoetine
and 30 mg/kg IP MP was given to group Metile Prednisolone and spinal cord
sampling was performed after 2 hours. Samples were evaluated pathologically by
means of light microscopy, Heme Oxygenase 1 and levels were investigated
biochemically. Heme Oxygenase 1 activity was significantly high in Group I with
respect to Group S, whereas its activity was not significantly different between
Group S, Group M and Group E. For the levels of Nitrit/nitrate, no significant
differences were seen between the groups.
As a result, we concluded that neuroprotective effects of EPO does not rely
on Nitric Oxide Syntase and Heme Oxygenase 1 pathways. But we believe that
advanced studies should be performed and studies on molecular levels would be
appropriate to enlighten the effects occuring on the basis of neoronal cell.