Boğalarda seminal plazma proteinleri ile sperm kalitesi arasındaki ilişkiler
Relationships between seminal plasma proteins and sperma quality in bulls
Yazar: ÖZKAN DURU
Danışman: PROF. DR. HİLAL KARAGÜL
Ankara Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Biyokimya Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2004
Konu: Biyokimya = Biochemistry

Özet:
ÖZET Boğalarda seminal plazma proteinleri ile sperma kalitesi arasındaki ilişkiler Bu araştırmada, SDS-PAGE tekniği ile seminal plazma proteinlerinin elektroforezi yapılarak protein bantları tespit edilmiş, bu bantların spermatozoa kalitesini belirleyen motilite, anormal spermatoza oranı, ölü spermatoza oram ve yoğunluk parametreleri arasında ki ilişkiye sperma hem dondurulmadan hemde dondurulduktan sonra bakılmıştır. Araştırmada, aynı bakım ve besleme şartlarında, yaşlan birbirine yakın siyah- ala ırkı boğalara ait 18 adet ejakulat, alınır alınmaz soğuk zincirde laboratuara ulaştırılmış, spermatolojik muayenelerin ardından, bir kısmı hemen sulandırılıp dondurulmuş, diğer kışımı ise 4000 rpm'de 20 dakika santrifüj edilerek seminal plazmaları elde edilmiştir. Motilite, ölü spermatozoa ve anormal spermatozoa oram parametreleri kendi aralarında gruplandınlarak seminal plazmaların SDS-PAGE elektroforezi yapılmış, jeller dansitometrik olarak değerlendirilmiştir. Aynı işlem dondurulmuş spermaya da uygulanarak elde edilen protein bantların yüzde dağılımları ile spermatolojik parametreler istatistik analizlerle değerlendirilmiştir. Bu araştırmada, dondurulup çözdürülmeye bağlı olarak, tüm protein bantların miktarlarında, önemli kayıplar olduğu, dondurulma sonrası motilitede 22 kDa'luk proteinde istatistik analizde p < 0,05 düzeyinde anlamlı artış, ölü spermatoza oranında 22 kDa'luk protein bandında p <0,05 düzeyinde anlamlı düşüş, anormal spermatoza oranında ise hem taze hem de dondurulmuş spermada 29 kDa'luk protein bandının istatistik analizinde p <0,05 düzeyinde anlamlı düşüş olduğu bulunmuştur. Elde edilen veriler ışığında SDS-PAGE'in sperm kalitesinin tesbitinde spermatolojik parametrelere ek olarak kullanılabileceği ve birlikte değerlendirebileceği söylenebilir.. Anahtar Sözcükler: Seminal plazma proteinleri, SDS-PAGE elektroforez, Sperma, Dondurulmuş sperma, Boğa, 55

Abstract:
SUMMARY Relationships Between Seminal Plasma Proteins and Sperma Quality in Bulls In this study, seminal plasma proteins were seperated by sodium doedosil sulphate- polyacilamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and the relationship between obtained protein bands and motility, abnormal number spermatozoa, abnormal number of dead spermatozoa and spermatozoa density indicating the quality of spermatozoa were examined before and after frozen samples of sperma. In this research, ejaculate samples from 18 holstein bulls with similar ages under the same control and feeding conditions were taken and transported to the laboratory in cold conditions. After the examinations of the sperma samples, some of the samples were diluted and frozen. Some other sperma samples were centrifuged at 4000 rpm for 20 minutes to obtain seminal plasma. Parameters were grouped according to the motility, dead spermatozoa and ratio of the abnormal spermatozoa before the analysis of obtained seminal plasma samples. Then, proteins of freshly prepared seminal plasma and frozen sperma samples were seperated by SDS-PAGE. Protein bands on the polyacrilamide gel from both seminal plasma and frozen sperma were evaluated as percentage distribution of proteins using densitometer. The percentage distribution of protein bands were compared statistically with the parameters of sperma. Results of this study showed that there was general decrease on the protein bands depending on the defrosting of the frozen seminal plasma samples. Obtained results showed also a statistically increased protein band with 22 kDa in relation to motility of frozen seminal plasma samples (p <0,05). Interestingly, the band with 22kDa was decreased significantly in the frozen seminal plasma samples according to the ratio of dead spermatozoas (p <0,05 ). Moreover, a 29kDa protein was also decrased significantly on both freshly prepared and frozen sperma samples (p < 0,05). These results may suggest that SDS-PAGE can be used itself and evaluated together with the spermatologic parameters on the determination of sperm quality. Key Words: Seminal plasma proteins, SDS-PAGE Electrophoresis, Sperma, Frozen sperma, bull 56