Deneysel diabet sıçan modelinin, deri dokusu üzerine olan etkilerinin histolojik olarak araştırılması
The histological investigation of the effects of the experimental diabetic rat model on skin tissue
Yazar: SAADET ÖZEN AKARCA
Danışman: DOÇ. DR. HÜSEYİN AKTUĞ
Ege Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2011
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology
Dizin: Deri = Skin ; Diabetes mellitus = Diabetes mellitus ; Histoloji = Histology ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Bu çalışma 190-250 gr arasında ağırlıkları değişen erkek sıçanlar (Rattus Albinus) Ege Üniversitesi Hayvan Etik Kurulu'nun onayıyla ve ilişkili yönergelerle uyumlu olarak gerçekleştirilmiştir. Deney gruplarını Grup 1 olarak kontroller (n=10) ve Grup 2 olarak Diabet (n=10) grupları oluşturmaktadır. Deneysel diabet modeli, Grup 2'de intraperitonal olarak 55mg/kg Streptozotosin (STZ) enjeksiyonuyla oluşturulmuştur. İki ayın sonunda hayvanlar sakrifiye edilmiş, sırt deri bölgesi çıkarılıp %4'lük paraformaldehitte fiksasyonu takiben parafin bloklama için rutin doku takip işlemleri uygulanmıştır. Kesitler; Hematoksilen-Eozin (HE), Masson Trikrom ve Periodik Asit Schiff (PAS) ve immünohistokimyasal olarak Connexin 43 ve Tip 4 Kollagen ile boyanmıştır. HE ile boyamada; Grup 2'de epitel kalınlığında azalma ve derinin çok katlı epitel görünümünde bozulma ile birlikte epidermal bütünlük kaybı gözlemlenmiş, dermisde kollajen lif yoğunluğunda azalma saptanmıştır. Grup 2'de stratum spinozum tabakasında morfolojik bozukluklar gözlenmiştir. PAS boyamasında; Grup 2'de epitelyum kalınlığı ve bazal membran bütünlüğünde azalma, epitelde skar oluşumu, polihedral hücre yerleşiminin yokluğu, epidermisde bozulma ve vasküler yapılardaki PAS tutulum azlığı belirlenirken, retiküler dermisde ve kıl kökü morfolojilerinde iki grup arasında belirgin farklılık bulunmamıştır. Masson Trikrom ile , Grup 2'de kollajen lif yoğunluğunun dermisde belirgin azaldığı saptanmıştır. Konneksin 43 ve Tip4 Kollajen immün boyamalarında belirgin olarak azaldığı diabet grubunda kontrol grubuna kıyasla gösterilmiştir. Sonuçta; bu çalışma açıkça gösterdi ki; diabet en bilinen hücre bağlantı komplekslerinden oluklu bağlantıların kaybı aracılığıyla epidermis bütünlüğünde ve epidermisi oluşturan hücrelerde morfoloji bozukluğuna yol açtığı gibi, dermisin kollajen içeriğine ve bazal membran bütünlüğüne de dramatik olarak olumsuz etkiler göstermektedir.Anahtar Kelimeler: Diabet, Deri, Bazal Membran, Tip 4 Kollagen, Konneksin 43.

Abstract:
This study has been carried out with male rats (Rattus Albinus) weights ranging between 190-250gr in accordance with the guidelines and was approved by the Local Animal Ethics Committee. Experimental groups consisted of controls (n = 10) as Group 1 and Diabetes groups (n = 10) as Group 2. Experimental diabetes model was generated by intraperitoneal injection of 55mg/kg streptozotocin (STZ) in Group 2. The animals were sacrificed and dorsal skin area were removed. Routine tissue procedures were applied for paraffin embedding after fixation in 4% Paraformaldehyde and then sectioning was acquired. Hematoxylin and Eosin (HE), Masson's Trichrom and Periodic Acid Schiff (PAS) were applied as well as the immunohistochemical Connexin 43 and type IV collagen stainings. HE staining, Group 2 revealed decrease in epidermal thickness and loss of epidermal integrity with disintegration of the stratified epithelium and decrease in the density of dermal collagen fibers were also observed. Morphological abnormalities were recorded in cells that form the stratum spinosum for the diabetes group. PAS staining for Group 2 revealed decrease of both thickness of the epithelium and consistent lining of the basement membrane were also disrupted. Epithelial scar formation, deterioration of transformation in the polyhedral cells, degradation of epidermis and decrease in PAS stainings for vascular structures were distinguished, whereas the reticular dermis and hair follicles revealed normal morphology. Collagen fiber density in group 2 were found to be prominently decreased in dermis with Masson's Trichrom staining. Evident decrease in immunostaining of Connexin 43 and type IV Collagen were also shown in diabetic group in comparison to the controls. In conclusion, diabetes not only induced impairment of the epidermal integrity and deterioration in the epidermis via loss of gap junctions which is the most prominent cellular junctional complex, but also caused dramatically negative impact on the dermal collagen content, and integrity of the basement membrane.Key words: Diabetes, Skin, Basement Membrane, Type IV Collagen, Connexin 43