KML ve AML hücre kültürü hücreleri üzerine statin uygulanmasının hücre proliferasyonuna etkisi
The effect of appliance of statin on CML and AML cell culture cells to the cell proliferation
Yazar: TUNAHAN UNCU
Danışman: PROF. DR. MEHMET ŞENCAN
Cumhuriyet Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2015
Konu: Hematoloji = Hematology
Dizin: Antikolesteremik ajanlar = Anticholesteremic agents ; Atorvastatin = Atorvastatin ; Hücre kültürü = Cell culture ; Hücreler = Cells ; Lösemi-miyeloid-akut = Leukemia-myeloid-acute ; Lösemi-miyeloid-kronik-BCR-ABL pozitif = Leukemia-myelogenous-chronic-BCR-ABL positive ; Neoplazm kök hücreleri = Neoplastic stem cells

Özet:
KML ve AML Hücre Kültürü Hücreleri Üzerine Statin Uygulanmasının Hücre Proliferasyonuna Etkisi.Tunahan UNCU İç Hastalıkları A.B.D.,Sivas,2015
Kronik Miyeloid Lösemi (KML) miyeloid seri hücrelerinin aşırı ve kontrolsüz çoğalmasına yol açan bir hematopoetik pluripotent kök hücre hastalığıdır ve miyeloproliferatif bir neoplazi olarak tanımlanmaktadır. Erişkin lösemilerinin %15-20'sini oluşturan KML her yaşta görülebilmekle beraber ortalama görülme yaşı 55-60'tır. KML tedavisinde  tirozin kinaz inhibitörleri ve uygun hastalarda allogenik kök hücre nakli uygulanmasına rağmen küratif bir tedavi yaklaşımı henüz yoktur. 
Erişkin yaş grubunun en sık rastlanan lösemi tipi olan Akut Myeloid Lösemi(AML) ise farklılaşma özellikleri bozulmuş myeloid,eritroid, megakaryositik ve monositik öncü hücrelerin kontrolsüz çoğalması ile karakterize klonal,neoplastik bir hastalıktır. AML tedavisinde sitotoksik olan sitozin arabinozid (Ara-C) ve antrasiklinden(daunorubisin,idarubisin) oluşan "(3+7)"kemoterapi rejimi uygulanmaktadır. AML-M3'te ise ATRA(all-trans-retinoik-asit) kemoterapi rejimine eklenmektedir. Tam remisyon sağlanan hastalarda tedavi kemik iliği nakli veya konsolidasyon kemoterapisinden oluşmaktadır  Küratif tedavi yaklaşımının henüz olmadığı bu iki myeloid lösemide statinlerin(rosuvastatin,atorvastatin,fluvastatin ve pravastatin) antilipidemik etkisinin yanında pleiotropik etkilerinden olan antiproliferatif etkisini araştırmayı amaçladık.
Kasumi-1(AML-M2 hücre kültürü) ve K562(KML-Blastik Evre hücre kültürü) hücre kültürüne  statinler  uygulanarak  XTT (2,3-bis (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino) carbonyl]-2H-tetrazolium hydroxide) testi ile sitotoksik etkileri ve IC50 
(inhibitör konsantrasyon 50) değerleri değerlendirilmiştir. Uygulanan dört statin de  100, 50, 25, 12.5, 6.25 ve 3.12 µM konsantrasyonları ile hem Kasumi-1 hem de K562 hücreleri 
üzerine uygulandı ve meydana getirdikleri sitotoksik etki 24. ve 48. saatlerde  değerlendirildi.
Statinlerin sitotoksik etkilerinin istatistiksel olarak anlamlı şekilde farklı (p<0.05) olduğu gözlendi.AML hücrelerinde sitotoksik etki güçlerine göre sıralandığındarosuvastatin>fluvastatin>atorvastatin>pravastatinşeklinde olduğu gözlendi.
KML hücrelerinde sitotoksik etki güçlerine göre sıralandığında rosuvastatin>atorvastatin>fluvastatin>pravastatin şeklinde olduğu gözlendi.
Çalışmamızda uygulanan statinlerin anti-proliferatif etkinliği ortaya konulmuştur ve 
sitotoksik etki gücü en yüksek  rozuvastatin, sitotoksik etki gücü en düşük olan da pravastatin olarakgözlenmiştir. Statinlerin, KML ve AML' de standart tedavi protokollerine kombineolarak uygulanıp uygulanamayacağı bu konuda öncelikle yapılacak hayvan deneyleri ve sonrasında klinik  faz çalışmalarla ortaya konulabilir.

Anahtar kelimeler: AML, KML, Statin, Sitotoksisite, XTT

Abstract:
The effect of Appliance of Statin on CML and AML cell culture cells to the cellproliferation. Tunahan UNCU, Department of Internal Medicine, Sivas, 2015
ChronicMyeloidLeukemia(CML)is a stemcelldiseasewhichleadsmiyeloidstemcellstoincrease in an excessivelyanduncontrolledwayand it has beendefined as a myeloproliferative neoplazia. CMLwhichconstitutes 15-20% of adultleukemiamay be observed at anyagetheaverageage of theseen 55-60.Eventhoughtyrosinekinaseinhibitors in thetreatment of CML andtheimplementation of allogeneicstemcelltransplantationforappropriatepatients, there is no yet a curativetreatmentapproach.
AcuteMyeloidLeukemia (AML) themostcommontype of leukemia in adultagegroup is a clonalneoplasticdiseasecharacterizedbytheuncontrolledproliferation of differentiationfeaturesdistortedmyeloid, erythroid,megakaryocyticandmonocyticprecursorcells. Inthetreatment of AML, cytotoxicarabinozidcytosine (Ara-C) and anthracyclines (daunorubicin, idarubicin) "(3 + 7)" chemotherapyregime is applied. For AML-M3, ATRA (all-trans-retinoic-acid) is beingaddedtotheregime of chemotherapy.Treatment in patientswithcompleteremissionconsists of bone marrowtransplantorconsolidationchemotherapy. 
Weaimed at investigatingtheeffect of  antiproliferatif which is a pleiotropic effect , inadditiontothe effect of antilipidemic of  thesetwomyeloid leukemia of statins (atorvastatin, fluvastatinand rosuvastatin, pravastatin)thecurativetreatment is not yet found.WithXTT (2,3-bis (2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-[(phenylamino) carbonyl]- 2H-tetrazolium hydroxide)tests, cytotoxiceffectandwithIC50 (inhibitoryconcentration50) values has been evaluated by applying  statinstoKasumi-1 (AML cellculture) and K562 (CML cellculture) cellculture. Appliedfourstatinstogetherwith 100, 50, 25, 12.5, 6.25 ve 3.12 µMconcentrations wereappliedontoboth Kasumi-1 and  K562 cellsandcytotoxiceffectstheyproducedwerewereassessed at 24 and 48 hours.
Cytotoxiceffects of statinsstatisticallysignificantlydifferent (p <0.05) wasobserved.Whenrankedaccordingtotheircytotoxiceffectpowerin AML cellsrosuvastatin>fluvastatin>atorvastatin>pravastatinwasobserved. It has beenobserved in the form of rosuvastatin>atorvastatin>fluvastatin>pravastatinwhenrankedaccordingtotheircytotoxiceffectpower in CML cells. 
Ourstudieshavedemonstratedthatstatinsadministered anti-proliferativeactivityand it has beenobservedthatthehighestpotencycytotoxic is rosuvastatin, thelowcytotoxicpotency is pravastatin.Whetherstatins can be applied in combinationto CML and AML standart treatmentprotocolsornot ,inthisregardwill be madeprimarilyin animalexperimentsandafter it can be demonstratedbyclinicalphase studies.
Keywords: AML, CML, statins, Cytotoxicity ,XTT