Habituel abortusu olan hastalarda endometriyum lenfosit subtiplerinin etkisi
The effect of lymphocyte on habituel abortiin
Yazar: NAGİHAN YILMAZ
Danışman: DOÇ. DR. AYDIN ÇORAKÇI
Kocaeli Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2010
Konu: Kadın Hastalıkları ve Doğum = Obstetrics and Gynecology
Dizin: Abortus = Abortion ; Akım sitometrisi = Flow cytometry ; Endometriyum = Endometrium ; Lenfositler = Lymphocytes

Özet:
Gebelikte en sık karşılaşılan komplikasyon olduğu bilinmektedir. Gebelik kayıplarının büyük bir kısmı ilk trimester içinde olur ve bu oran bundan sonra hızla düşer. Günümüz şartlarında erken gebelik kaybına sebep olan nedenleri saptayabilmek her zaman mümkün olmamaktadır. Spontan gebelik kayıplarına neden olan maternal faktörler arasında ise uterin anomaliler, endokrin faktörler, enfeksiyonlar ve bağışıklıkla ilişkili faktörler sayılabilir. Tekrarlayan gebelik kayıplarının %20-50'sinin bağışıklıkla ilişkili nedenlere bağlı olduğu düşünülmektedir. Bu durum dikkatleri bağışıklık sistemi üzerine çekmiştir.Gebelik kayıplarının nedenlerini bulmak çoğu zaman zordur. Gebelik kaybında oluşan bağışıklık cevabı şimdiye kadar tam olarak açıklanamamıstır. Doğal öldürücü hücreleride dahil olmak üzere lenfosit subtiplerinin implantasyonda ve plasentasyonda önemli rol aldığı rapor edilmiştir. Üreme fizyolojisinde bu hücrelerin işevlerini anlamak hala ilgi çekmektedir. Bu hücrelerin implantasyonda ve gebeliğin devamındaki işlevi merak konusudur.Amaç: Tekrarlayan düşüğün nedenlerini araştırmak için lenfosit oranlarını ve subtiplerini midluteal endometriyumda akım sitometri kullanarak değerlendirdik.Gereç ve Yöntemler: Kocaeli Üniversitesi Tıp Fakültesi Kadın Hastalıkları ve Doğum kliniğine başvuran iki ya da daha fazla ardışık düşüğü olan, karyotip, endokrinolojik testler ve histerosalpingografi hastalar çalışmaya dahil edildi. Normal gebelik grubunda kadınların ortalama yaşı 27.53 (21- 37) spontan düşük grubunda 28.74 (18- 41)' dı. Desidual lenfositler FITC (fluorescin isothiocyanate)-konjuge anti-CD16 MoAb, PE- (phycoerythrin) konjuge anti-CD56 antikor ve PerCP-konjuge anti-CD3 antikor ile işaretlendi. Antikor işaretli hücreler FACS Caliber akım sitometri ile analiz edildi. Üç renkli akım sitometride 488nm de 15mW argon lazer kullanıldı. İstatiksel analizler ki-kare test ve Mann Whitney U test kullanılarak yapıldı. p<0.05 anlamlı fark olarak kabul edildi. Veriler SPSS13.0 Windows ile analiz edildi.Bulgular: Tekrarlayan düşük grubundaki 35 kadının ortalama yaşı 31.22 (18- 41) iken kontrol grubundaki 12 kadının ortalama yaşı 29.33 (21-37)'dir. En az iki normal doğumu olanlar kontrol grubuna dahil edili. Tekrarlayan düşük grubunda ortalama gebelik sayısı 3.65, doğum 0.34, düşük sayısı 3.2, yaşayan 0.28 iken kontrol grubunda gebelik 2.58, doğum 2.08, küretaj 1.05, yaşayan 1.08 idi. Hastaların gebelik haftasına göre abort etme haftaları 2-20 hafta arasında değişmekteydi. Düşük yapılan ortalama gebelik haftası 7.17 idi.CD 45, CD14, CD45 + 14, s CD 3, *CD4, *CD8, CD 8 + 3, CD sayısı, CD 16+56, CD 3+ 16 + 56, CD5, CD 10, CD 19, CD 103, CD 22, CD 20, CD 57, cCD68, CD 8 tekrarlayan düşük ve kontrol grubu arasında anlamlı bir fark izlenmedi. CD 4 +3, CD4 sayısı, CD4 / CD8 sayılarının oranları, CD 16 sayıları tekrarlayan düşük ve kontrol grubu arasında anlamlı olarak farklı idi. CD 4+3 kontrol grubunda tekrarlayan düşük grubundan daha yüksek olarak tespit edildi. CD 4 sayısı hasta grubunda kontrol grbuna göre daha düşük olarak tespit edildi. CD 4 / 8 oranı habituel abortus grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak düşük bulundu. CD 16 hücreleri tekrarlayan düşük grubunda kontrol grubuna göre anlamlı olarak yüksek bulundu. HLA G düzeyinde kontrol ve hasta grupları arasında anlamlı olarak farklı izlenmedi. FSH, LH, progesteron, prolaktin değerleri kontrol ve hasta grubu arasında istatistisel olarak farklı değildi. Estrodiol ise tekrarlayan düşük grubunda kontrol grubuna göre istatistiksel olarak anlamlı olarak bulundu.Sonuç: Bizim çalışmamızda CD 16 pozitif NK hücrelerinin arttığı, T helper ve T sitotoksik lenfositlerin birbirine olan oranının azaldığını gördük. Bu azalma T sitotokik hücrelerin etkinliğinin göreceli olarak fazla olması ile sonuçlanmaktadır. Tekrarlayan gebelik kayıplarının nedenleri arasında bağışıklık sisteminin rolünün açıklığa kavuşması ile immünmodülasyon umut verici bir tedavi yöntemi olacaktır.

Abstract:
Early and sporadic pregnancy loss are common gynecological problems. This is known that, it is the most common compication of pregnancy. Most of pregnancy loss occurs in the first trimester and this proportion fall rapidly thereafter. In today's terms, the cause of early pregnancy loss is not always possible to detect. Maternal factors that may cause spontaneous pregnancy loss are the uterine abnormalities, endocrine factors, immunological factors and infections. 20-50% of recurrent pregnancy loss is thought to be due to immunological causes. This situation has attracted attention on the immune system.Causes of pregnancy loss is often difficult to find. Immune response that occurs in pregnancy losses so far not been fully explained. Natural killer cells and lymphocyte subtypes have a role in implantation and placentation have been reported. In reproductive physiology, to understand the function of these cells is still interesting. The function of these cells is still wondering about implantation and pregnancy continuation.Objective: To investigate the causes of recurrent miscarriages, lymphocyte ratio and subtypes in midluteal endometrium were evaluated using flow cytometry.Materials and Methods: patients who were admitted to Kocaeli University Medical Faculty Hospital Obstetrics and Gynecology Department for 2 or more abortus clinically were included in the study. The average age of women in normal pregnancy group was 27.53 (21- 37) and spontaneous abortion group was 28.74 (18- 41). Antibodies marking: Decidual lymphocytes, FITC (fluorescin isothiocyanate)-conjugated anti-CD16 Moab, PE-(phycoerythrin) conjugated anti-CD56 antibody and PerCP-conjugated anti-CD3 antibody has been marked with. Flow cytometry: Antibody labeled cells were analyzed by FACS Caliber flow cytometer. Three-color flow cytometry at 488nm 15mW argon laser was used. Statistical analysis using the Student t test and Mann Whitney U tests were performed. p <0.05 was considered significant difference. The data were analyzed with SPSS13.0 Windows.Results: The average age of the 35 women with recurrent abortion group was 31.22 (18-41) and the average age of 12 women in the control group was 29.33 (21-37). In the group with recurrent miscarriages; average number of pregnancies was 3.65, birth 0.34, abortus 3.2 and live 0.28. In the control group; average number of pregnancies was 2.58, birth 2.08, curettage 1.05 and live 1.08. Gestational abortion of patients were ranged from 2-20 weeks. The mean gestational abortion was 7.17. p <0.05 was considered significant difference. In habitual abortus and control group CD 45, CD14, CD45 + 14, s CD 3, * CD4 * CD8 +, CD 8 + 3, the number of CDs, CD 16 +56, 3 + 16 + 56 CD, CD5, CD 10, CD 19, CD 103, CD 22, CD 20, CD 57, cCD68, and CD 8 counts were similar. CD 4 +3, CD4 count, CD4 / CD8 ratio and CD 16 count were significantly different between habitual abortion and control group. CD4+3 was found high in control group compared to habitual abortus group. Number of CD4 in the patient group was found to be lower than in the control group. CD 4 / 8 ratio in the habitual abortion group were significantly lower than the control group. CD 16 cells in the habitual abortion group were significantly higher than the control group. HLA-G levels in the habitual abortion group and control group had no difference. FSH, LH, progesterone, and prolactin values between control and patient groups was not statistically different. Estrodiol in the group with recurrent miscarriages, was found to be higher than the control group. This was found to be statistically significant.Conclusion: In our study, we found CD 16 positive NK cells increased, the T helper and cytotoxic T lymphocyte ratio decreased with each other. RSA with unexplained infertility, multiple implantation failures are associated with TH1. NK cell immune response,number and activity may change with hormonal effects, exercise, menstrual days. Of the studies so far; NK cells in implantation and early pregnancy decidua are the main cell type, uterine NK cells is different from peripheral NK cells. In patients with RSA or infertility problems, increase number NK cells create a clinical problem. NK cell subtypes, new cell markers, patient selection criteria should be for future analysis techniques. Changes in the number and activity of NK cells were not known to causes or consequences. Immunomodulation for RSA and infertility, is a promising treatment modality. Randomized controlled studies on this subject are needed to be done.