Periferik sinir onarımında sarılmış otolog fasya grefti ve maresin 1 kullanımının ratlarda siyatik sinir onarımına etkisi
The effect of wrapped autologous fascia graft and maresin 1 in peripheral nerve repair on sciatic nerve in rats
Yazar: MURAT ENES SAĞLAM
Danışman: DR. ÖĞR. ÜYESİ BURAK YAŞAR
Sağlık Bilimleri Üniversitesi / Ankara Bilkent Şehir Hastanesi / Plastik Rekonstrüktif ve Estetik Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2023
Konu: Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi = Plastic and Reconstructive Surgery
Dizin: Maresin 1 = Maresin 1 ; Mikrocerrahi = Microsurgery

Özet:
Amaç: Bu çalışmada dikiş sayısı azaltılarak yapılan periferik sinir onarımlarında onarım hattı üzerine sarılmış otolog fasya greftinin ve inflamasyon gerilemesini sağlayan makrofaj mediatörü olan Maresin 1 adlı molekülün sistemik uygulamasının ratlarda periferik sinir iyileşmesi üzerine etkilerini araştırmak ve klinikte rutin olarak kullanılan yöntemle karşılaştırmak amaçlanmıştır.
Gereç ve Yöntem: Çalışmada 40 adet, dişi, erişkin, Wistar-Albino cinsi rat kullanıldı. 40 adet rat her grupta 8'er adet rat olacak şekilde 5 gruba ayrıldı. Grup 1'de siyatik sinir kesileri 4 adet epinöral dikişle onarıldı. Grup 2'de siyatik sinir kesileri, 2 adet epinöral dikişle onarıldı. Grup 3'te siyatik sinir kesileri, 2 adet epinöral dikişle onarıldı ve 1 hafta boyunca günde 1 sefer intraperitoneal yolla 100 ng (nanogram) Maresin 1 enjekte edildi. Grup 4'te siyatik sinir kesileri 2 adet epinöral dikişle onarıldı, sinir onarımı etrafına torakolomber fasyadan alınan 0.5x1 cm fasya grefti sarıldı ve 1 hafta boyunca günde bir sefer intraperitoneal yolla 100 ng (nanogram) Maresin 1 enjekte edildi. Grup 5'te siyatik sinir kesileri 2 adet epinöral dikişle onarıldı, sinir onarımı etrafına torakolomber fasyadan alınan 0.5x1 cm fasya grefti sarıldı. Onarım sonrası 21., 42. ve 63. günlerde yürüme testi yapılarak siyatik fonksiyonel indeks hesaplandı, toe-spread test, pin-prick test ile klinik değerlendirmeler yapıldı. Sakrifikasyon zamanı makroskopik değerlendirmede Petersen ve ark. sayısal derecelendirmesi kullanıldı. Rutin patolojik boyama yöntemleriyle inflamasyon ve fibrozis bakıldı. İmmunohistokimyasal olarak nörofilaman ve S-100 antikorları boyamalarıyla değerlendirmeler yapıldı.
Bulgular: SFİ'in 21. gün sonuçlarında Grup 4 ve Grup 5 diğer gruplara göre anlamlı olarak farklı bulunmuştur (p<0.05). 42. gün sonuçlarında Maresin 1'in etkileri ortaya çıkmaya başlamıştır. Grup 4 en iyi sonuçlara sahiptir. 63. gün sonuçlarındaysa Grup 4 diğer grupların hepsinden anlamlı olarak farklıdır (p<0.05). Motor muayene bulgularındaysa Grup 4 Grup 1 ve 2'den istatistiksel olarak anlamlı derecede farklıdır (p<0.05). Maresin 1 sinir yapışıklığını azaltıp ayrılabilirliğini kolaylaştırmasına rağmen tek başına kullanıldığında klinik muayenelerde istatistiksel olarak anlamlı farka sahip değildir. Fasya grefti ise sinir yapışıklığını arttırıp ayrılabilirliğini zorlaştırmıştır. Klinik muayenelerde istatistiksel olarak anlamlı farka sahip değildir. Patolojik sonuçlarda inflamasyon açısından Grup 2 diğer gruplara göre istatistiksel açıdan anlamlı derecede farklıdır (p<0.05). Masson trikrom boyasında Maresin 1 Grup 4'ü fibrozisten korumuştur. İmmunohistokimyasal boyalarda Grup 4 nörofilaman ve Schwann hücre sayısı ekspresyonu fazladır (p<0.05).
Sonuç: Periferik sinir onarımında ratlarda dikiş sayısının azaltılarak onarım yapılması rutin onarımla karşılaştırıldığında sonuçları değiştirmemektedir. Yanına tek başına eklenen Maresin 1 ile inflamasyonun azaltılması yada tek başına fasya greftinin sarılması sonuçları anlamlı derecede değiştirmemiştir. Ancak dikiş sayısı azaltılıp fasya grefti sarıldığı ve Maresin 1 enjeksiyonu yapılan deneklerde onarımın sonuçları diğer gruplara göre istatistiksel olarak farklı sonuçlanmıştır. Maliyeti düşük olan bu kombine tedavi yöntemi sinir onarımlarında kullanılması açısından kullanılabilir bir yöntemdir.

Abstract:
Aim: This study aimed to investigate the effects of autologous fascia graft wrapped over the repair line and systemic administration of Maresin 1, a macrophage mediator that provides inflammation regression, on peripheral nerve healing in rats and to compare it with the method routinely used in the clinic.
Materials and Methods: In the study, 40 female Wistar-Albino rats were used. 40 rats were divided into five groups, with eight in each group. In group 1, sciatic nerve injuries were repaired with four epineural sutures. In group 2, sciatic nerve injuries were repaired with two epineural sutures. In group 3, sciatic nerve injuries were repaired with two epineural sutures, and 100 ng (nanogram) Maresin 1 was injected intraperitoneally once a day for one week. In group 4, sciatic nerve injuries were repaired with two epineural sutures, a 0.5x1 cm fascia graft taken from thoracolumbar fascia was wrapped around the nerve repair, and 100 ng (nanogram) Maresin 1 was injected intraperitoneally once a day for one week. In group 5, sciatic nerve injuries were repaired with two epineural sutures, and a 0.5x1 cm fascia graft taken from the thoracolumbar fascia was wrapped around the nerve repair. The sciatic functional index was calculated by performing a walking test on the 21st, 42nd, and 63rd days after repair, and clinical evaluations were performed with a toe-spread test and pin-prick test. At the time of sacrification, Petersen et al. numerical grading was used for macroscopic evaluation. Routine pathological staining methods examined inflammation and fibrosis. Immunohistochemical evaluations were performed with neurofilament and S-100 antibody staining.
Results: Group 4 and Group 5 were found to be significantly different from the other groups in the 21st-day results of SFI (p<0.05). On the 42nd day, the effects of Maresin 1 started to emerge. Group 4 has the best results. At 63 days, Group 4 significantly differs from all other groups (p<0.05). In motor examination findings, Group 4 is significantly different from Groups 1 and 2 (p<0.05). Although Maresin 1 reduces nerve adhesion and facilitates separability, it does not have a statistically significant difference in clinical examinations when used alone. Fascia graft increased nerve adhesion and made separability difficult. It did not have a statistically significant difference in clinical examinations. Group 2 is statistically significantly different from the other groups regarding inflammation in pathological results (p<0.05). In Masson trichrome staining, Maresin 1 protected Group 4 from fibrosis. In immunohistochemical stains, Group 4 had higher expression of neurofilament and Schwann cell number (p<0.05).
Conclusion: Reducing the number of sutures in peripheral nerve repair in rats does not change the results compared to routine repair. Reduction of inflammation with Maresin 1 added alone or wrapping the fascia graft alone did not significantly change the results. However, the repair results in the subjects whose number of sutures was reduced, the fascia graft was wrapped, and Maresin 1 injection was given were statistically different from the other groups. It has been concluded that this low-cost combined treatment method can be used in nerve repairs.