Çay olarak kullanılan bazı bitkilerde yüksek performanslı sıvı kromatografisi -dad yöntemi ile flavonoid miktar tayini çalışmaları
HiGH-performance liquid chromatography-DAD method fordetermination of flavonoids in some plants used as TEA
Yazar: ELAF ZEYAD AFTAN AFTAN
Danışman: PROF. DR. NİLGÜN ÖZTÜRK
Anadolu Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Farmakognozi Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Eczacılık ve Farmakoloji = Pharmacy and Pharmacology
Dizin: Antioksidan aktivite = Antioxidant activity ; Bitkisel çaylar = Herbal teas ; Fenolik asit = Phenolic acid ; Flavonoidler = Flavonoids ; Validasyon = Validation ; Yüksek basınç sıvı kromatografisi =

Özet:
Bu çalışmanın amacı, geleneksel tedavide yaygın olarak kullanılan bazı bitkisel
materyallerden hazırlanan infüzyonların flavonoid içeriklerinin değerlendirilmesinde
etkili bir ters faz-YBSK-DAD yöntemi geliştirmektir. Bu amaçla seçilmiş mirisetin,
kersetin, rutin, luteolin ve apigenin gibi flavonoidlerin ters faz C18 kolon (4.6 mm, 100
mm, 3 µm), 1,0 mL/dk akış hızı ve 360 nm'de DAD dedektör ile gradient elüsyon
sisteminde ayırımı gerçekleştirilmiştir. Yöntemin kesinliği, doğruluğu ve
tekrarlanabilirliği validasyon çalışmaları ile gösterilmiştir.
Bunun yanında infüzyonların içerdiği fenolik asit miktarları ise farklı bir ters fazYBSK-DAD ve gardient elüsyon yöntemi ile tayin edilirken, toplam fenolik madde
miktarları Folin-Ciocalteu yöntemi ile spektrofotometrik olarak belirlenmiştir. Ayrıca,
infüzyonların antioksidan aktiviteleri DPPH•
ve ABTS•+ radikalleri üzerinden tayin
edilmiştir. ABTS•+ radikal renksizleştirme testine göre en yüksek antioksidan aktivite en
fazla klorojenik asit içeren Hypericum perforatum ve H. thymopsis ile, en fazla o-kumarik
asit içeren Achillea milleifolium infüzyonlarında gözlenirken, en düşük aktivite Lycium
depressum meyva infüzyonlarında görülmüştür. DPPH• radikal süpürücü aktivite
tayininde ise en yüksek aktivite Hypericum perforatum (% inh.44.99), H. thymopsis (%
inh.31.89) ve Malabaila secacul meyva ve herba (MSM ve MSH, % inh 35.32-38.81,
sırasıyla) infüzyonlarında tespit edilmiştir.

Abstract:
The aim of this study is to develop an effective reverse phase-solid phase extraction (RPSPE)-diode array detection (DAD) method for the evaluation of flavonoid contents in
infusions prepared from some herbal materials commonly used in traditional treatments.
For this purpose, selected flavonoids such as myricetin, quercetin, rutin, luteolin, and
apigenin were separated using a reverse phase C18 column (4.6 mm, 100 mm, 3 µm), a
flow rate of 1.0 mL/min, and a DAD detector at 360 nm in a gradient elution system. The
accuracy, precision, and repeatability of the method were demonstrated through
validation studies.
Furthermore, the amounts of phenolic acids present in the infusions were determined
using a different reverse phase-SPE-DAD and gradient elution method, while the total
phenolic content was determined spectrophotometrically using the Folin-Ciocalteu
method. Additionally, the antioxidant activities of the infusions were determined through
DPPH• and ABTS•+ radical assays. According to the ABTS•+ radical decolorization test,
the highest antioxidant activity was observed in Hypericum perforatum and H. thymopsis
infusions, which contained the highest amounts of chlorogenic acid, while Achillea
millefolium infusions containing the highest amount of o-coumaric acid exhibited the
highest activity. The lowest activity was observed in Lycium depressum fruit infusions.
In the DPPH• radical superscript activity assay, the highest activity was detected in
Hypericum perforatum (44.99 % inh.), H. thymopsis (31.89 % inh.), and Malabaila
secacul fruit and herb (MSM and MSH, 35.32-38.81% inh, respectively) infusions.