Gıda ve klinik örneklerinden izole edilen Escherıchıa colı suşlarının direnç genlerinin PCR ile karakterizasyonu
Using PCR for characterization of resistance genes of Escherichia coli strains isolated from food and clinical samples
Yazar: BİRGÜL YELİMLİBAĞ
Danışman: DOÇ. DR. MUHSİN AYDIN
Adıyaman Üniversitesi / Lisansüstü Eğitim Enstitüsü / Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Yüksek Lisans, 2023
Konu: Biyoloji = Biology ; Mikrobiyoloji = Microbiology
Dizin: Escherichia coli = Escherichia coli ; PCR =

Özet:
Bakterilerde savunma mekanizmalarından olan antimikrobiyal direnç gelişimi ile oluşan MDR insanoğlunu bu canlılarla mücadelede sürekli yeni antimikrobiyal ajan arayışına itmiştir. Kontamine olmuş gıda veya suların tüketilmesi ile insana açık sistem içinde ulaşan MDR'e sahip suşlardaki direncin tanımlanmasında hız ve hassasiyet oldukça önemlidir. Bu kapsamdaki çalışmada, gıda ve klinik kaynaklı E. coli izolatlarında ESBL gen varyantları (blaTEM, blaOXA, blaSHV ve blaCTX-M), integron genleri (int1, int2 ve int3) ve sülfonamid (sul1, sul2 ve sul3) direnç genlerinin PCR ile moleküler karakterizasyonu hedeflenmiştir. Fenotipik olarak tanımlaması yapılan E. coli izolatlarının filogenetik identifikasyonu (6 set primer), moleküler deteksiyonu (1 set primer), direnç ve integron gen karakterizasyonu (10 set primer) için toplamda 17 set primer kullanılmıştır. 
Gıda kaynaklı izolatların temini Adıyaman, Gaziantep, Kahramanmaraş ve Hatay illerinde tüketime sunulan 45 farklı kırmızı et örneğinden, klinik izolatların temini Şanlıurfa Mehmet Akif İnan Eğitim ve Araştırma Hastanesi'nden İYE şikayetli hasta idrar örneklerinden gerçekleştirilmiştir. Moleküler tanımlama ile E. coli olduğu tespit edilen 63 gıda ve 33 klinik izolatta 3 multipleks PCR uygulaması ile 3 gen grubunun taraması yapılmıştır. Gıda örneklerinde taranan 3 gen grubu açısından en yüksek oranlar; %44,44 ile blaSHV   geninde, %69,84 ile sul1 geninde ve %73,02 ile int2 geninde tespit edilirken, klinik örneklerde ise %15,15 oranıyla blaCTX-M geni, %81,82 ile sul2 geni ve %54,55 ile int1 geni şeklinde sıralanmaktadır. Taranan 3 gen grubu açısından gıda örneklerinden 31izolatta ve klinik örneklerden 2 izolatta her gen grubundan en az bir gene sahip olmak üzere 3 ve üzerinde genin varlığı tespit edilmiştir.

Abstract:
MDR, which is formed by the development of antimicrobial resistance, which is one of the defense mechanisms in bacteria, has pushed human beings to constantly seek new antimicrobial agents in the fight against these microorganisms. Speed and precision are very important in identifying resistance in strains with MDR that reach humans in an open system through the consumption of contaminated food or water. The main aim of this study was molecular characterization of ESBL gene variants (blaTEM, blaOXA, blaSHV, and blaCTX-M), integron genes (int1, int2, and int3), and sulfonamide (sul1, sul2, and sul3) resistance genes by PCR from E. coli isolates originated from food and clinical samples. A total of 17 sets of primers were used for phylogenetic identification (6 sets of primers), molecular detection (1 set of primer), and resistance and integron gene characterization (10 sets of primers) of phenotypically identified E. coli isolates.
The red meat samples (45) were collected from local markets, which are located on four (Adıyaman, Gaziantep, Kahramanmaraş, and Hatay) different provinces, clinical isolates were obtained from urine samples of patients with UTI from Şanlıurfa Mehmet Akif İnan Training and Research Hospital. Three gene groups were screened with 3 multiplex PCR applications in 63 food and 33 clinical isolates found to be E. coli by molecular identification. In terms of the 3 gene groups screened in food samples, the highest rates were found in the blaSHV gene with 44.44%, the sul1 gene with 69.84% and the int2 gene with 73.02%; in clinical samples, it is listed as blaCTX-M gene with 15.15%, sul2 gene with 81.82% and int1 gene with 54.55%. In terms of 3 gene groups scanned, the presence of 3 or more genes, including at least one gene from each gene group, was detected in 31 isolates from food samples and 2 isolates from clinical samples.