Sıçanlarda oluşturulan deneysel kolit modelinde Glukagon Like Peptid 2'nin bakteriyel translokasyon üzerine etkisi
Effects of GLP 2 on bacterial translocation in an experimental colitis model on rats
Yazar: BÜLENT HALAÇLAR
Danışman: DOÇ. DR. ALPER CELAL AKCAN
Erciyes Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Genel Cerrahi Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2010
Konu: Genel Cerrahi = General Surgery
Dizin: Bakteriyel translokasyon = Bacterial translocation ; Endotoksinler = Endotoxins ; Etanol = Ethanol ; Glukagon = Glucagon ; Kolit = Colitis ; Sıçanlar = Rats ; Trinitrobenzensulfonik asit = Trinitrobenzenesulfonic acid ; İnflamatuar bağırsak hastalıkları = Inflammatory bowel diseases

Özet:
Amaç: İnflamatuar barsak hastalıkların patogenezinde epitelyal fonksiyon bozuklukları ile birlikte proinflamatuar sitokinler, oksidan ajanlar ve kemokinlerin önemli rolü olduğu son zamanlarda yapılan çalışmalar ile göstermiştir. Bu çalışmada kolit sürecinin patofizyolojisinden yola çıkarak, GLP 2'nin inflamatuar barsak hastalıklarında antiinflamatuar etki ve intestinal permeabiliteyi azaltarak bakteriel translokasyon üzerine etkisi araştırılıp kolit tedavisinde yeni bir teropatik ajanın kullanılması amaçlanmaktadır.Materyal ve Metod: Çalışmada ağırlıkları 225?290 gram arasında değişen, 28?32 haftalık 21 adet erkek Wistar?Albino rat kullanıldı. Gruplar randomize olarak her biri 7'şer ratdan oluşan 3 gruba (kontrol, kolit ve tedavi grupları) ayrıldı. Kontrol grubundaki sıçanlara rektal yoldan serum fizyolojik (SF) verildi. Kolit grubuna trinitrobenzen sülfonik asit ve etanol karışımı (TNBS?E) rektal yoldan verilerek kolit oluşturuldu. Son olarak, tedavi grubuna ise TNBS?E ile kolit oluşturulduktan bir gün sonra başlanarak 7 gün boyunca günde bir defa subkutan olarak ringerli laktat solusyonu içinde çözünmüş 50 mikrogramg/kg GLP 2 verildi. Yedi gün sonra anestezi altında orta hat insizyonla laparotomi yapıldı. Öncelikle vena kava inferiordan ve vena portadan kan örnekleri alınıp santrifigasyona tabi tutuldu. Ayrıca kan kültürü için kültür şişelerine kan alındı. Eş zamanlı olarak sol kolektomi yapıldı. Kolondaki inflamasyon makroskopik ve mikroskopik olarak değerlendirildi ve derecelendirildi. Bakteriyel translokasyonu değerlendirmek için doku kültürü amacıyla karaciğer, dalak, mezenterik lenf nodlarından (MLN) doku örneklemeleri yapıldı. Doku düzeyinde myeloperoksidaz (MPO), serumda ise tümör nekroz faktör alfa (TNF? ? ), plazma endotoksin düzeylerine bakıldı.Bulgular: Kolit ve tedavi grupları karşılaştırıldığında gruplar arasında makroskopik ve mikroskopik açıdan belirgin farklılık mevcuttu (p<0.05). Tedavi grubunda doku düzeyinde ölçülen MPO düzeyleri kolit grubuna göre anlamlı düzeyde düşüktü (p<0.05). Serumda çalışılan TNF? ? ve plazma endotoksin düzeyleri tedavi grubunda kolit grubuna göre belirgin şekilde düşüktü (p<0.05). Kolit grubuyla karşılaştırılınca, tedavi grubunda karaciğer, dalak, MLN'ler, portal ve sistemik kanda bakteriyel translokasyon düşüktü (P<0.05). Transloke olan bakteri Escherichia coli, Enterococus faecalis, Staphylococcus aureus ve Enterobacter agglomerans olarak saptandı.Sonuç: Deneysel olarak TNBS?E ile oluşturulmuş kolit modelinde uygulanan GLP 2, histopatolojik, biyokimyasal, mikrobiyolojik parametrelere bakıldığında inflamasyonu ve bakteriyel translokasyonu belirgin düzeyde azaltmıştır.Anahtar Kelimeler: Glukagon like peptid 2, Deneysel kolit, Bakteriyel translokasyon.

Abstract:
Aim: Studies have shown that impairment in inflammatory bowel disease (IBD) along with proinflammatory cytokines and chemokines have important roles in pathogenesis of IBD. Based on the phatophysiology of colitis, this study aimed to invest a new therapeutic agent in treatment of colitis by studying an agent ?glukagon like peptide 2? having anti?inflammatory effects and decreasing bacterial tanslocation in inflammatory bowel disease.Materials and Methods: In this study, 28?32 weeks aged 21 Wistar albino male rats weighing 225?290 gr were used. Rats were randomly divided into 3 groups each including 7 rats (control, colitis and treatment groups). Normal saline (SF) was given to control group rectally. Trinitrobenzene sulfonic acid and ethanol mixture (TNBS?E) was instilled rectally for colitis formation in colitis group. Finally, for the treatment group, after instillation of TNBS?E, beginning from first day, 50 mcg/kg GLP 2 involved in lactated Ringer?s solution administered subcutaneous once a day during 7 days. A midline laparotomy was performed on the 7th day. Firstly blood samples were taken from vena cava inferior and vena porta and santrifugated. The blood sample for blood culture taken and the left colon was resected. Microscopic and macroscopic findings of colonic inflammation were evaluated and graded. Myeloperoksidase (MPO) levels in colonic tissue, tumor necrosis factor?? (TNF??) and endotoxin levels of blood samples were measured.Results: Macroscopic and microscopic grades, in colitis and treatment groups? were statistically different (p<0.05). In the treatment group, tissue MPO levels were significantly lower than colitis group (p<0.05). TNF?? and plasma endotoxin were decreased significantly in treatment group when compared to colitis group (p<0.05). In treatment group, in liver, spleen, mesenteric lenf nodes, portal and sistemic blood samples, bacterial translocation were lower when compared to colitis group (p<0.05). Escherichia coli, Enterococus faecalis, Staphylococcus aureus and Enterobacter agglomerans were identified as translocated bacteria.Conclusion: According to histopathological, biochemical and microbiological findings, administration of GLP 2 reduced the inflammation and bacterial translocation significantly on formated TNBS?E colitis rats.Key words: Glukagon like peptide 2, Experimental colitis, Bacterial translocation.