Renal tübüler epitel hücreleri (HK2) ve renal kanser hücrelerinde (CAKI-1) şok dalga tedavisinin apoptotik etkisinin ve hücre ölümünün değerlendirilmesi
Evaluation of the apoptotic effect and cell death in renal tubular epitel cells (HK2) and renal cancer cells (CAKI-1) of shock wave therapy
Yazar: HAKAN GÖRKEM KAZICI
Danışman: PROF. DR. İZZET KOÇAK
Aydın Adnan Menderes Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Üroloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2021
Konu: Üroloji = Urology
Dizin: Apoptozis = Apoptosis ; Böbrek = Kidney ; Böbrek hastalıkları = Kidney diseases ; Böbrek neoplazmları = Kidney neoplasms ; Böbrek taşları = Kidney calculi ; ESWL = ESWL ; Epitel hücreleri = Epithelial cells

Özet:
Amaç: Çalışmanın amacı şok dalga tedavisinin benign HK2 ve malign CAKI-1 hücreleri üzerindeki hücre canlılığı ve apoptozis üzerine olası etkilerini değerlendirmektir.
Gereç ve Yöntem: Aydın Adnan Menderes Üniversitesi Tıp Fakültesi Üroloji Anabilim Dalı ESWL ünitesinde oluşturulan deneysel model üzerinde, hücre kültüründe çoğaltılıp 1,5 ml eppendorf tüplere steril koşullarda alınan HK2 ve CAKI-1 hücrelerine 14 kV 500 atım, 14 kV 2000 atım, 24 kV 500 atım ve 24 kV 2000 atım şok dalga tedavisi uygulandı. Her iki gruba ait birer kontrol grubu benzer koşullarda bekletilip şok dalgası uygulanmadı. Uygulamanın ardından 24. saatte Muse Analyzer'da canlı hücre ve apoptotik ölüm oranları; MTT testinde ise absorbanslar incelendi. Sonuçlar uygun istatistiksel metod ile karşılaştırıldı.
Bulgular: HK2 ve CAKI-1 hücrelerinde canlılık oranı şok dalga tedavisi uygulamasıyla azalmıştır (sırasıyla p<0.001 ve p<0.001). Her iki hücre tipinde de en az canlı hücre kendilerine en yakın gruplara karşı 24 kV 2000 atım grubunda görülmüştür (p=0.004 ve p<0.001). Apoptotik ölüm oranı hem HK2 hem de CAKI-1 için kontrol gruplarında uygulama yapılanlara göre anlamlı düşük görülmüştür (p<0.001 ve p<0.001). Apoptozis her iki hücre tipinde de kendilerine en yakın gruplara karşı 24 kV 2000 atım grubunda en fazla görülmüştür(p=0.009 ve p<0.001). HK2 hücrelerinde 14 kV voltajda anlamlı apoptozis izlenmezken (p>0.05), CAKI-1 hücrelerinde 14 kV 2000 atım grubunda anlamlı apoptozis görülmüştür(p=0.001). MTT testinde mitokondriyal etkinlik hem HK2 hem de CAKI-1 hücrelerinde kontrol grubunda diğer gruplara göre anlamlı olarak daha yüksek görülmüştür (p<0.001 ve p<0.001).
Sonuç: Şok dalga tedavisi hem benign hem de malign renal proksimal tübül hücrelerinde apoptozise neden olmaktadır. Bu etki atım sayısı ve voltaj şiddetinin artışıyla artmaktadır. Malign hücrelerin apoptozis için eşik değeri benign hücrelere göre daha düşüktür.
Anahtar Kelimeler: Renal hücreli karsinom, RCC, şok dalga tedavisi, ESWL, apoptozis

Abstract:
Introduction and Objective: The aim of the study was to evaluate the possible effects of shock wave therapy on cell viability and apoptosis on benign HK2 and malignant CAKI-1 cells.
Materials and Methods: An experimental model was created in the ESWL unit of Aydın Adnan Menderes University Faculty of Medicine, Department of Urology. HK2 and CAKI-1 cells grown in cell culture were taken into 1.5 ml Eppendorf tubes under sterile conditions. Shock wave therapy was applied to HK2 and CAKI-1 cells with 14 kV 500 pulses, 14 kV 2000 pulses, 24 kV 500 pulses and 24 kV 2000 pulses. One control group of both groups was kept in similar conditions without shock wave therapy. After the application, at 24. hours, the rates of viable cells and apoptotic deaths in Muse Analyzer; In the MTT test, absorbances were examined. The results were compared with the appropriate statistical method.
Results: The viability of HK2 and CAKI-1 cells decreased with shock wave therapy (p<0.001 and p<0.001, respectively). In both cell types, the least viable cells were seen in the 24 kV 2000 pulses group againts the closest groups (p=0.004 and p<0.001). Apoptotic death count was lower in the control group than in the treatment groups for both HK2 and CAKI-1 cells (p<0.001 and p<0.001). Apoptosis was highest in the 24 kV 2000 pulses group in both cell types againts the closest groups (p=0.009 and p<0.001). While apoptosis was not observed in HK2 cells at 14 kV voltage (p>0.05), significant apoptosis was observed in CAKI-1 cells in the 14 kV 2000 pulse group (p=0.001). Mitochondrial activity in the MTT test was significantly higher in the control group in both HK2 and CAKI-1 tests (p<0.001 and p<0.001).
Conclusion: Shock wave therapy causes apoptosis in both benign and malignant renal proximal tubule cells. This effect increases with the number of pulses and the increase in voltage. The threshold value for apoptosis of malignant cells is lower than benign cells.
Key words: Renal cell carcinoma, RCC, shock wave treatment, ESWL, apoptosis