Yüksek yağlı diyetle indüklenmiş obez sıçanlarda aposininin böbrek ve mesane üzerine etkilerinin histolojik ve biyokimyasal olarak incelenmesi
Histological and biochemical investigation of the effects of apocynin on kidney and bladder in high fat diet induced obese rats
Yazar: FATMA KANPALTA
Danışman: PROF. DR. FERİHA ERCAN
Marmara Üniversitesi / Tıp Fakültesi / Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2021
Konu: Histoloji ve Embriyoloji = Histology and Embryology

Özet:
Amaç: Bu çalışmanın amacı, yüksek yağlı diyete (YYD) bağlı obezitede, NADPH 
Oksidaz (NOX) inhibitörü olan aposininin (APS) böbrek ve mesane hasarı 
üzerindeki olası koruyucu etkilerini araştırmaktır. 
Gereç ve Yöntem: Wistar albino erkek sıçanlar dört eşit (n=8) gruba ayrıldı: 
Kontrol, YYD, YYD+dimetilsülfoksit (DMSO) ve YYD+APS. Deney grupları 16 
hafta boyunca standart (kontrol grubu; %6 yağ) veya YYD (YYD, YYD+DMSO, 
YYD+APS grupları; %45 yağ) ile beslendi. Deneyin son 4 haftasında, YYD+DMSO 
grubuna DMSO (%15) ve YYD+APS grubuna APS (25 mg/kg, %15 DMSO içinde 
çözülmüş) orogastrik uygulandı. Deney süresince her hafta ağırlıkları ölçülen 
sıçanlar deney sonunda hafif eter anestezisi altında dekapite edildi. Kan serumunda 
yüksek yoğunluklu lipoprotein (HDL), trigliserit, kolesterol ve leptin değerleri 
ölçüldü. Böbrek ve mesane örneklerinde malondialdehit (MDA), glutatyon (GSH), 
8-hidroksi-2'-deoksiguanozin (8-OHdG) ve miyeloperoksidaz (MPO) seviyeleri 
biyokimyasal olarak değerlendirildi. Işık mikroskobik incelemeler için böbrek ve 
mesane dokuları hazırlandı. NADPH Oksidaz (NOX)-2, Nükleer Faktör-kappa B 
(NFĸ-B), Transforming Growth Faktör (TGF)-β1 ve Proliferating Cell Nüklear 
Antigen (PCNA) pozitif hücreler immünohistokimya ve TUNEL yöntemi 
kullanılarak değerlendirildi. Tüm parametreler istatistiksel olarak değerlendirildi. P < 
0.05 anlamlı kabul edildi. 
Bulgular: YYD ve YYD+DMSO gruplarında vücut ağırlığı arttı. Serum leptin, 
kolesterol ve trigliserit seviyeleri yükseldi. Böbrek ve mesanede MDA, 8-OHdG ve 
MPO seviyeleri artarken, GSH seviyeleri azaldı. Renal cisimciklerde ve dejenere 
tübüllerde hasar, interstisyel bağ dokuda kolajen artışı, mesanede ise ürotelyumda 
yer yer dökülme, vasküler konjesyon, kas tabakasında kolajen artışı, mukoza ve kas 
tabakasında degranüle olmuş mast hücrelerinin artışı görüldü. Hem böbrek hem 
mesanede NOX-2, NFĸ-B immünpozitif veTUNEL pozitif hücrelerde artış; böbrekte 
ix
TGF-β1 immünpozitif hücrelerde artış gözlenirken, PCNA immünpozitif hücrelerde 
gruplar arasında anlamlı bir farklılık gözlenmedi. Tüm bu histolojik ve biyokimyasal 
hasar bulgularının APS uygulanmış YYD+APS grubunda azaldığı gözlendi. 
Sonuçlar: Yüksek yağlı diyet, oksidatif stres yoluyla NOX-2 aktivitesini ve 
inflamasyonu artırarak böbrek ve mesane hasarına neden olur. Aposinin, oksidatif 
stresi inhibe ederek böbrek ve mesane hasarını iyileştirebilir.

Abstract:
Aim: The aim of this study was to investigate the possible protective effects of 
apocynin (APC) on kidney and bladder damage in high-fat-diet (HFD) induced 
obesity. 
Materials and Methods: Wistar albino male rats were divided into four equal (n=8) 
groups: Control, HFD, HFD+dimethylsulfoxide (DMSO) and HFD+APC. 
Experimental groups were fed with standard (control group; 6% fat) or HFD (HFD, 
HFD+DMSO, HFD+APC groups; 45% fat) for 16 weeks. In the last 4 weeks of the 
experiment, DMSO (15%) to the HFD+DMSO group and APC (25 mg/kg, dissolved 
in DMSO) to the HFD+APC group were administered via orogastric gavage. Rat 
weights were measured every week during the experimental period. At the end of the 
experiment, rats were decapitated under light ether anesthesia. High-densitylipoprotein (HDL), triglyceride, cholesterol and leptin values were measured in blood 
serum. Kidney and bladder tissues were prepared for light microscopic examinations. 
NOX-2, NFĸ-B, TGF-β1 and PCNA positive cells and TUNEL positive cells were 
evaluated immunhistochemistry or cytochemistry method. Malondialdehyde (MDA), 
glutathione (GSH), 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG) and myeloperoxidase 
(MPO) levels were evaluated biochemically. All of the parameters were evaluated 
statistically. P < 0.05 was considered significant. 
Results: The body weight was increased in the HFD and HFD+DMSO groups. 
Leptin, cholesterol and triglyceride levels increased in these groups. Damage in the 
renal corpuscules and degenerated tubules, increased collagen in the interstitisyel 
connective tissue, localized shedding in the urothelium in the bladder, vascular 
congestion, increased collagen in the muscle layer, increase in degranulated mast 
cells in the mucosa and muscle layer were observed. Increase in NOX-2, NFĸ-B 
immunopositive and TUNEL positive cells in both kidney and bladder; while an 
increase was observed in TGF-β1 immunopositive cells in the kidney. No significant 
difference was observed between the groups in PCNA immunopositive cells. It was 
xi
observed that all these histological and biochemical damage findings decreased in the 
HFD+APC group who had APC. 
Conclusion: High-fat diet causes kidney and bladder damage by increasing NOX-2 
activity and inflammation through oxidative stress. Apocynin may ameliorate kidney 
and bladder damage by inhibiting oxidative stress.