İnsan mesane kanserlerinde transient reseptör potansiyel melastatin (TRPM)iyon kanalı genlerinin ekspresyonlarının araştırılması
Investigation of transient receptor potential melastatin (TRPM)ion channels genes expressions in human bladder carcinomas
Yazar: GÜLAY GÜLEÇ CEYLAN
Danışman: DOÇ. DR. EBRU ÖNALAN
Fırat Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2015
Konu: Genetik = Genetics ; Üroloji = Urology
Dizin: Gen ifadesi = Gene expression ; Genler = Genes ; Mesane neoplazmları = Urinary bladder neoplasms ; Neoplazmlar = Neoplasms ; Polimeraz zincirleme reaksiyonu = Polymerase chain reaction ; İmmünohistokimya = Immunohistochemistry

Özet:
Tüm dünyada mesane kanserleri erkeklerde 7, kadınlarda ise 17. sıklıkta 
görülen kanser türüdür. Türkiye'de görülme sıklığı akciğer kanserinden sonra 2. 
sırada, urogenital kanserler arasında ise erkeklerde ilk sıradadır. Genellikle 6. ve 
7. dekatta ortaya cıkar. Erkek kadın oranı 3:1 olmasına rağmen mesane kanseri 
nedeniyle ölenlerin %31'i kadındır. Artmış proliferasyon sonucu malign 
hücrelerin transformasyonu, bozuk farklılaşma, ölüm yeteneğinin bozulması 
anormal doku gelişiminin temel sebebidir. Bunun sonucunda kontrolsüz yayılım 
ve invazyon ortaya çıkabilmektedir. Transformasyon sıklıkla iyon kanal 
ekspresyonundaki değişimlerle gerçekleşebilmektedir. Plazma membranında yer 
alan iyon kanalları hücresel elektrogenez ve elektrik iletiminden sorumludur. Bu 
kanallar apoptoz, proliferasyon ve farklılaşma gibi doku homeostazının korunması 
için gerekli olan tüm temel hücre davranışlarının yerine getirilmesinde görev 
almaktadırlar. İyon kanallarının bu kritik süreçlere katkısında birkaç ana 
mekanizma vardır. Bunlar membran potansiyelinin korunması, hücre volümünün 
düzenlenmesi ve temel sinyal iletimini sağlayan iyonların girişidir. Sonuç, 
hücresel cevapların anormal progresyonudur. Kanserin ortaya çıkmasını ve 
ilerlemesini düzenleyen farklı ekspresyon ve iyon kanalı aktiviteleri önerilmesine 
rağmen, mesane kanseri hücrelerinde, iyon kanalı bağımlı mekanizmaları 
incelemek oldukça kıymetli olacaktır. Çalışmamıza transisyonel hücreli mesane 
kanseri tanısı almış 40 hasta ve 7 kontrol dokusu alınmıştır. Bu dokuların 
immunohistokimyasal olarak ekspresyonları ve gerçek zamanlı Polimeraz Zincir 
Reaksiyonu ile TRPM2, TRPM4, TRPM5, TRPM7 ve TRPM8'in mRNA 
10
ekspresyonları çalışılmıştır. İmmunohistokimyasal olarak sadece TRPM2 tüm 
dokularda (epitelyum hücreleri, tümör hücreleri, kas dokusu) eksprese olurken, 
TRPM5 ekspresyonu hiçbir dokuda gözlenmemiştir. TRPM4, TRPM7 ve TRPM8 
ekspresyonlerı ise sadece epitelyum hücrelerinde gözlenmiştir. TRPM7 mRNA 
ekspresyonu kontrol grubuna göre çalışma grubunda belirli derecede yükselmiş 
olarak tespit edilirken, TRPM5 ve TRPM8 mRNA ekspresyonları yine çalışma 
grubunda anlamlı derecede düşük, TRPM2 ve TRPM4 mRNA ekspresyonlarında 
ise istatistiksel olarak anlamlı bir değişiklik gözlenmemiştir. Çalışmamızda, 
mesane kanser oluşumunda TRP iyon kanallarının etkilerinin incelenmiş, özellikle 
TRPM2, TRPM4, TRPM5, TRPM7 ve TRPM8'in terapotik bir hedef olup 
olamayacağının belirlenmesi yönünde yol gösterici bir özelliği olduğu gibi, 
sonuçlarımız da bu iyon kanallarının mesane kanseri tedavisinde yeni hedef genler 
olabileceğini ve böylece daha sonraki bir aşamada invivo koşullarda bu proteinler 
hedeflenerek deneysel anlamda mesane kanseri tedavi yöntemlerinin 
denenebilmesine olanak sağlayacağını düşünüyoruz.

Abstract:
Bladder cancers are among the most seen cancers all over the world. It is 
the 7th most seen cancer in males and 17th in females. It is the second most seen 
cancer after lung cancer and the most seen cancer among the urogenitalial cancers 
in males. It usually occurs in the 6th and 7th decades. Although the frequency rate 
of males to females is 3:1, it causes usually to death in females (31%). Ion 
channels located in the plasma membrane are responsible from cellular 
electrogenesis and electricity transmission. These channels are involved in 
erforming the basic cellular functions like apopitosis, proliferation and 
differentiation to protect the tissue homeostasis. There are several main 
echanisms in contributing to this critical process. These are the protection of 
membrane potential, to regulate the cell volume and the entrance of ions which 
provides the basic signal transduction. The basic reason of abnormal tissue 
development is transformation of malign cells, impaired differentiation and 
disrupted death ability. This results in uncontrolled spread and invasion. 
Transformation usually occurs by the changes in ion channel expressions. The 
esult is the abnormal progression of cellular responses. Although some different 
expression and ion channel activities that regulate the formation and progression 
of cancer are suggested, to investigate the ion-channel related mechanisms in 
bladder cancer cells will be precious. 40 tissues of patients with transitional cell 
bladder cancer and 7 normal tissues of the same group are included to the study. 
Immunohistochemical expressions and mRNA expressions of TRPM2, TRPM4, 
12
TRPM5, TRPM7 and TRPM8 by real-time Polymerase Chain Reaction were 
studied. Immunohistochemically, only TRPM2 was expressed in all of the tissues 
(epithelium cells, tumor cells, muscle cells), no TRPM5 expression was detected. 
TRPM4, TRPM7 and TRPM8 expressions were detected only in epithelium cells.  
mRNA ekspression of TRPM7 was significantly higher in study group according 
to control group. mRNA expressions of TRPM5 and TRPM8 were lower in study 
group according to control group. There was no statistically significant difference 
for mRNA expressions of TRPM2 and TRPM4. The effects of TRP ion channels 
in the development of bladder cancer will be searched. TRPM2, TRPM4, TRPM5, 
TRPM7 and TRPM8 can be important therapeutic targets for bladder cancer. We 
think that our results will provide new target genes for these ion channels at 
bladder cancer. So, in a later stage, these proteins can be targeted under invivo 
conditions and new bladder cancer therapy methods can be tried.