Bleomisin ile oluşturulmuş deneysel skleroderma modelinde proteazom inhibisyonunun tedavi edici rolü
The therapeutic role of proteasome inhibition in bleomycin induced experimental scleroderma
Yazar: SÜLEYMAN SERDAR KOCA
Danışman: PROF. DR. AHMET IŞIK
Fırat Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı / Romatoloji Bilim Dalı
Derece: Tıpta Yan Dal Uzmanlık, 2010
Konu: Romatoloji = Rheumatology
Dizin: Bleomisin = Bleomycin ; Proteozom = Proteasome ; Skleroderma-sistemik = Scleroderma-systemic

Özet:
Skleroderma, yaygın fibrozla karakterize kronik inflamatuar bir hastalıktır. Bir proteozom inhibitörü olan bortezomib kollajen üretimini azaltarak, yıkımını artırarak anti-fibrotik etkilere sahiptir. Deneysel çalışmalarda böbrek ve kalpte fibroz gelişimini önlediği gösterilmiştir. Bu çalışmanın amacı, bleomisin (BLM) ile uyarılan deneysel skleroderma modelinin erken ve geç evrelerinde, bortezomib tedavisinin dermal fibrozun önlenmesi ve tedavisindeki etkinliğinin araştırılmasıdır.Bu çalışmaya 6 grup (her grupta n=10) Balb/c fare alındı. A ve D grubu farelere, subkutan 100 ?l fosfat ile tamponlanmış salin (FTS); B, C, E ve F grubu farelere subkutan 100 ?g/gün BLM (100 ?l FTS içinde çözündürülmüş) uygulandı. BLM uygulamalarına ek olarak, C grubu farelere ilk 3 hafta, F grubu farelere son 3 hafta, intraperitoneal 1.6 mg/kg dozunda bortezomib haftada iki kez uygulandı.A, B ve C grubu fareler 3. hafta; D, E ve F grubu fareler 6. hafta sonunda sakrifiye edildi ve yapılacak analizler için kan ve doku örnekleri alındı. IL-4 ve TGF-ß1 serum düzeyleri, deri dokusu tip I kollajen, nükleer faktor-?B (Nf-?B), Nf-?B inhibitör (I-?B) ve c-Jun N-terminal kinaz (JNK)1 protein düzeyleri, dermal kalınlık, dermal alandaki inflamatuar hücre sayıları ve ?-düz kas aktin pozitif (?-SMA+) hücre sayıları belirlendi.Fibrozun erken evresinde ciltte inflamatuar hücre infiltrasyonu varken, yerleşmiş fibroz evresinde ise inflamatuar hücre infiltrasyonu yoktu ancak, heriki dönemde de Nf-?B ve JNK1 ekspresyonları yüksekti. Nf-?B ve JNK1 ekspresyonlarını baskılayan bortezomib erken evrede dermal kalınlık, dermal inflamatuar hücre sayısı ve ?-SMA+ hücre sayısını azaltırken, yerleşmiş fibroz evresinde bu parametreleri etkilemedi.Sonuç olarak, BLM ile uyarılan skleroderma modelinde bortezomib, erken evrede anti-inflamatuar etkileri ile fibroz gelişimini önlemekte, yerleşmiş fibroz tedavisinde ise etkili olmamaktadır.

Abstract:
Scleroderma is a chronic inflammatory disease characterized by widespread fibrosis. Bortezomib, a proteasome inhibitor, has anti-fibrotic properties by reducing collagen production and favoring collagen degradation, and attenuates experimentally induced renal and cardiac fibrosis. The aim of this study was to evaluate the preventive effects of bortezomib on early and later stages of bleomycin (BLM)-induced experimental scleroderma model.This study involved six groups Balb/c mice (n=10 in each group). Group A and D were only received subcutaneously 100 ?l phosphate-buffered saline (PBS), whereas group B, C, E and F mice were subcutaneously administered 100 ?g/day BLM (dissolved in 100 ?l PBS). In addition to BLM, group C mice were intraperitoneally administered 1.6 mg/kg bortezomib twice a week for the first three weeks, while group F mice were received same dose of bortezomib for the second three weeks.Groups A, B and C mice, at the end of the third week, and group D, E and F mice, at the end of sixth week, were sacrificed and blood and tissue samples were then obtained for further analysis. IL-4, and TGF-ß1 serum levels, type I collagen, nuclear factor-?B (Nf-?B), inhibitor of Nf-?B (I-?B) and c-Jun N-terminal kinase (JNK)1 protein levels of skin tissues, dermal thicknesses, the numbers of inflammatory cells on dermal layer and ?-smooth muscle actin-positive (?-SMA+) cells were determined.In early stage of fibrosis, inflammatory cell infiltrations of the skin are prominent, while this inflammatory status is decreased in the later stage of fibrosis. However, the expressions of Nf-?B and JNK1 were higher in the both stages. Bortezomib which downregulated the expressions of Nf-?B and JNK1 decreased dermal thickness, dermal inflammatory cell counts and ?-SMA+ cell counts in early stage, although it had no effects on the late stage of fibrosis.In conclusion, in BLM-induced dermal fibrosis, bortezomib has anti-fibrotic effect in early stage of fibrosis which may be related with its anti-inflammatory effects, although it is not effective on the established fibrosis.