Sıçanlarda okadaik asit ile oluşturulan nörodejenerasyona aca' nın etkisi
The effect of aca induced okadaic acid neurodegeneration in rats
Yazar: MURAT ÇAKIR
Danışman: DOÇ. DR. HALİL DÜZOVA
İnönü Üniversitesi / Sağlık Bilimleri Enstitüsü / Fizyoloji Ana Bilim Dalı
Derece: Doktora, 2016
Konu: Fizyoloji = Physiology
Dizin: Alzheimer hastalığı = Alzheimer disease ; Antranilik asit = Anthranilic acid ; Fosfolipazlar A = Phospholipases A ; Sinir dejenerasyonu = Nerve degeneration ; Sıçanlar = Rats

Özet:
Amaç: Son zamanlarda yapılan çalışmalarda Transient receptor potential melastatin 2 (TRPM2) ve Fosfolipaz A2 (PLA2) inhbitörlerinin nöronlar üzerinde koruyusu etkisi olduğu anlaşılmıştır. Bu çalışmada sıçanlarda Okadaik asit (OKA) ile oluşturulan nörodejenarasyon modelinde TRPM2 ve PLA2 inhibitörü N-(p-amylcinnamoyl) anthranilik asit (ACA)'nın koruyucu etkisini belirlemeyi amaçladık.
Materyal ve Metot: Bu çalışmada 50 adet erkek Sprague-Dawley sıçan randomize olarak 5 gruba bölündü (n=10). 1) Kontrol, 2) Sham: icv olarak yBOS ve ip olarak çözücü enjeksiyonu yapıldı. 3) ACA: 13 gün boyunca ip olarak 25 mg/kg/gün ACA enjeksiyonu yapıldı. 4) OKA: 10 µl yBOS' ta çözünen okadaik asit (200 ng) icv bilateral olarak enjekte edildi. 5) OKA+ACA: 10 µl yBOS' ta çözünen okadaik asit (200 ng) icv bilateral olarak enjekte edildi. 13 gün boyunca ip 25 mg/kg/gün ACA enjeksiyonu yapıldı. 13 günün sonunda sıçanlara  Morris su labirenti testi uygulandı. Korteks ve hipokampus dokusunda histopatolojik bulgular, SOD, GSH-PX enzim aktivitesi ve MDA, GSH, TNF-α, IL-1β seviyeleri ölçüldü.
Bulgular: OKA grubunda platformu bulma süresi ve mesafesi kontrol, sham, ACA ve OKA+ACA gruplarına göre uzadı (P< 0.05). OKA grubunda diğer gruplara göre MDA, TNF-α seviyesi artarken SOD, GSH-PX enzim aktivasyonu ve GSH seviyesi azaldı (P< 0.05). OKA+ACA grubunda OKA grubuna göre MDA, TNF-α seviyesi azalırken; SOD, GSH-PX enzim aktivasyonu ve GSH seviyesi arttı. OKA+ACA grubunda korteks ve hipokampus bölgelerinde dejenere nöron ve kaspaz-3 pozitif hücre sayısı OKA grubuna göre anlamlı olarak azaldı (P< 0.05).
Sonuç: Okadaik asit ile oluşturulan nörodejenerasyon modelinde, ACA uygulaması oksidatif stresi ve nöroinflamasyonu önleyici etki gösterdi. ACA uygulaması bilişsel fonksiyonlardaki azalmayı ve nörodejenerasyonu önledi.

Abstract:
Aim: Recent studies ıt has been shown that the TRPM2 and PLA2 inhibitors may have a protective effect on neurons. This study was aimed to investigate the protective effect of TRPM2 and PLA2 inhibitor N-(p-amylcinnamoyl)anthranilic acid (ACA)  in a neurodegenerative model induced by Okadaic acid (OKA).
Material and Method: Male Sprague-Dawley rats were randomly divided into five group (n=10); 1) control, 2) sham: rats were injected icv with aCSF and treated vehicle for 13 day, 3) ACA: rats were treated with ACA ip 25 mg/kg/day for 13 days, 4) OKA: OKA was dissolved in aCSF and injected icv (200 ng) in a volume of 10 μl bilaterally and 5) OKA+ACA: rats injected icv with OKA (200 ng) and treated with ACA ip 25 mg/kg/day for 13 days. After 13 days of surgical operations and injections, Morris water maze test was performed. The histopathological finding, SOD, GSH-PX enzyme activation and MDA and GSH, TNF-α, IL-1β levels in tissues the hippocampus and cerebral cortex were measured.
Results: The latency to platform and distance moved of OKA group rats were significantly increased in comparison to control, sham and ACA, OKA+ACA groups. In while the MDA, TNF-α levels of tissues were significantly increased in OKA group; SOD, GSH-PX enzyme activation and GSH levels were decreased compared to all of other groups (P< 0.05). OKA+ACA gruop comparison to OKA group, increased SOD and GSH-PX enzyme activation and GSH levels, and conversely decreased the levels of MDA, TNF-α. When OKA+ACA rats compared to OKA rats, ıt was found that numbers of degenerated neurons and caspase 3 positive cells of cortex and hippocampus regions were significantly reduced.
Conclusion: ACA administration prevented to oxidative stres and neuroinflammation of OKA induced neurodegeneration. ACA ameliorated to cognitive decline and neurodegeneration.