Bcr-Abl negatif kronik miyeloproliferatif neoplazilerde mast hücre triptaz aktivitesi ve CD34+ hücre ekspresyonunun araştırılması
Mast cell tryptase activity and CD34+ cell expression in bcr-abl negative chronic myeloproliferative neoplasm
Yazar: HAKAN KESKİ
Danışman: PROF. DR. ABDULLAH HACIHANEFİOĞLU
Kocaeli Üniversitesi / Tıp Fakültesi / İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı / Hematoloji Bilim Dalı
Derece: Tıpta Uzmanlık, 2013
Konu: Hematoloji = Hematology

Özet:
AMAÇ: Bu çalışmada amacımız, takip ve tedavi ettiğimiz Bcr-Abl negatif MPNhastalarının kemik iliği biyopsilerinde belirli düzeyde bulunabilen retikülin lifartışının mast hücre proliferasyonu ve CD34+ hücre ekspresyonu ile ilişkili olupolmadığının gösterilmesidir.YÖNTEM: Çalışmaya 47'si hasta grubu, 30'u kontrol grubu olmak üzere 77 kişialınmıştır. Hastalıkların tanısı 2008'de yeniden gözden geçirilen DSÖ tanıkriterlerine göre konuldu. Her hastadan kemik iliği biyopsisi alınmıştır. Biyopsipreparatları Patoloji A.B.D'da incelenmiştir. Her bir preparat retikülin boyasıylaboyanıp, retikülin lif derecelendirmesi yapıldı. Preparatlar daha sonra mast hücretriptaz ve CD34 boyalarıyla boyandı. Örnekler ışık mikroskobu ile 40 büyütmededeğerlendirilip ve 20 farklı alanda sayılan mast hücre ve CD34+ hücre sayılarınınortalaması alınmıştır. Kruskal Wallis testi ile olguların retikülin lif düzeylerine göremast hücre sayısı ortalamaları ve CD34+ hücre sayısı ortalamaları karşılaştırıldı. Pdeğeri <0,05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edilmiştir.BULGULAR: Hasta grubunun yaş ortalaması 54,71 yıl, kontrol grubunun yaşortalaması ise 52,63 yıldı. Bcr-Abl negatif kronik MPN'li hastalarda, retikülin lifdüzeylerine göre olguların mast hücre sayısı ortalamaları arasında istatistiksel olarakileri düzeyde anlamlı farklılık saptanmıştır (p<0,01). Oysaki retikülin lif düzeylerinegöre olguların CD34+ hücre sayısı ortalamaları arasında istatistiksel olarak anlamlıfarklılık saptanmazken (p>0,05); ağır düzeyde retikülin lif görülen olguların CD34+hücre sayısı ortalamasının retikülin lif görülmeyen olgulardan daha düşüksaptanmıştır. JAK2 pozitif olan olguların mast hücreleri ortalaması negatif olgularagöre anlamlı düzeyde yüksek bulundu (p<0,05). JAK 2 durumuna göre olgularınCD34+ hücre sayısı ortalamaları arasında istatistiksel olarak anlamlı farklılıksaptanmamıştır (p>0,05).SONUÇ: Mast hücrelerinde üretilen birçok madde ve sitokinin fibrogenezise katkıdabulunduğu gösterilmiştir. Bu çalışmamızda MPN'lerin alt tiplerinde çeşitliderecelerde bulunabilen retikülin lif artışıyla mast hücre artışının korele olduğunugösterdik. Ayrıca retikülin lif şiddeti arttıkça kemik iliğinde CD34+ boyanan hücresayısında azalma tespit ettik. Hafifçe fibrotik ve hiperselüler kemik iliği olanhastalarda ise kemik iliği CD34+ hücre sayısında artış gözlenmiştir. Bu sonuçlara 57göre MPN'lerde mast hücrelerini inhibe edebilen ilaçlarla belki fibrozis modifiyeedilebilir. Muhtemelen fibrotik kemik iliğinden dolaşıma salınan CD34+ hücrelerinartışı MPN'lerde hastalık progresyonuna yol gösterici olabilir.

Abstract:
Aim: The aim of this study is to determine the relationship between increasedreticulin staining (reticulin fibrosis) in bone marrow biyopsies of Bcr-Abl negativeMPN patients and mast cell proliferation and CD34 positive cell expression.Material and Method: A total of 77 patients were included in the study. 47 patientswith Bcr-Abl negative MPN and 30 controls were examined. The patients werediagnosed according to WHO diagnostic criteria revised in 2008. Bone marrowbiopsy were performed in all patients and specimens were evaluated in the divisionof pathology. Each specimen was stained with Gomory and graded for reticulinfibrosis. Then they were stained with mast cell tryptase and CD34 immunostain.Specimens were obseved under a light micrscobe at 40x magnification. The numberof mast cells and CD34+ cells seen in 20 different areas were averaged. The averageCD34+ cells and mast cells were correlated with the degree of the reticulin fibrosisby Kruskal Wallis test. P value <0,05 was statistically significant.Result: Mean age of patients was 54,71 years, whereas mean age of the controlgroup was 52,63 years. There was statistically advanced level of significancebetween reticulin fiber levels and mean mast cell count in patients with bcr-ablnegative chronic MPN (p<0,05). While there was no statistically significantdifference between means of CD34+ cell counts of cases according to reticulin fiberslevels (p<0,05) ; mean CD34+ cell coun in cases with intense reticulin fibers waslower than those cases without reticulin fibers. Means of mast cells in JAK2 positivecases were significantly higher than those cases with the negative cases(p<0,05).According to JAK2 status, there was no statistically significant difference betweenmeans of CD34+ cell count in cases (p＞0,01).Discussion and Conclusion: It has been demonstrated that many substances andcytokines produced in mast cells contribute in fibrogenesis. In this present study, weshowed that reticulin fiber increase, which was encountered at various rates in MPNsubtypes, was correlated with mast cell increase. Moreover, we detected the decreasein CD34+ stained cell number in the bone marrow as the intensity of reticulin fiberswas increased. CD34+ cell counts were increased in patients with mildly fibrotic,predominantly hypercellular bone marrows. According to these results, drugsinhibiting mast cellsin MPNs might modify  cells secreted from fibrotic bone marrow to the circulation can be guiding us for thedisease progression