Fluoreszenzserologische Untersuchungen über das Auftreten von Borna‐ Virusantigen in Zellkulturen aus Gehirnexplantaten infizierter Kaninchen (1973)

Zusammenfassung Die intrazelluläre Bildung und Verteilung von Borna‐Virusantigen wurde mit der Immunofluoreszenztechnik in Explantat‐Kulturen aus Borna‐infizierten Kaninchengehirnen untersucht. Borna‐Antigen trat bevorzugt im Zellkern auf. In älteren Kulturen ließ sich in einem Teil der positiven Zellen auch eine schwache, diffuse Fluoreszenz des Cytoplasmas nachweisen. Sie war stets mit einer Kernfluoreszenz vergesellschaftet. Im Kern erschien die Borna‐Fluoreszenz entweder diffus‐granulär über das ganze Nukleoplasma verteilt oder äußerte sich in Form multipler, stark fluoreszierender, gut von der Umgebung abgesetzter Bezirke. Diese Zonen waren entweder sehr klein und punktförmig oder imponierten als große, runde oder schollige Bezirke. Letztere entsprachen den Joest‐Degenschen Kerneinschlußkörperchen. Ihre Bildung erfolgte bevorzugt in astrozytenähn‐lichen Kulturzellen. Kleine, kubische oder spindelförmige Zellen enthielten trotz oftmals brillanter granulärer Fluoreszenz selten typische Kerneinschlüsse. Beim Fehlen von Kerneinschlußkörperchen kann eine Zelle trotzdem Borna‐Virusantigen vermehren. Der Nachweis von Joest‐Degenschen Einschlüssen ist diagnostisch nur im positiven Falle verwertbar. Summary Serum fluorescence studies on the appearance of Borna virus antigen in cell cultures from brain explants of infected rabbits Intracellular formation and distribution of Borna virus antigen was studied by the immuno‐fluorescence technique in explant cultures of Borna infected rabbit brain. The antigen occurred predominantly in the cell nuclei. In older cultures a proportion of positive cells also showed a weak diffuse fluorescence of their cytoplasm which was always accompanied by bluorescence in the nuclei. In the nucleus the fluorescence took the form of either diffuse granular changes throughout the whole nucleoplasm or of multiple markedly fluorescent areas well demarcated from their surroundings. These zones were either small and point‐like or in the form of large rounded or plaque‐like areas. The latter represented Joest‐Degen nuclear inclusion bodies. They are formed predominantly of polygonal culture cells (probably astrocytes). Small cubical or spindle‐shaped cells, despite often showing brilliant granular fluorescence, rarely showed typical inclusion bodies. Despite the absence of nuclear inclusion bodies the cells form Borna virus antigen. The demonstration of Joest‐Degen inclusions is of diagnostic value only in positive cases. Résumé Recherches sérologiques avec la fluorescence sur l'apparition de l'antigène du virus de la maladie de Borna dans des cultures cellulaires à partir d'explantats de cerveau de lapins infectés On a examiné la formation intracellulaire et la répartition de l'antigène viral de la maladie de Borna avec la technique de l'immunofluorescence dans des cultures de cellules à partir d'explantats de cerveau de lapins infectés. L'antigène apparaît avant tout dans le noyau cellulaire. Il est possible avec de vieilles cultures de démontrer une fluorescence faible et diffuse du cytoplasme dans une partie des cellules positives. Elle était toujours associée à une fluorescence du noyau. La fluorescence de l'antigène viral apparaissait soit répartie sous une forme granuleuse et diffuse sur tout le nucléoplasma, soit sous la forme de nombreuses sphères fortement fluorescentes et contrastant bien avec le milieu. Ces zones étaient soit très petites et punctiformes, soit apparaissaient comme de grosses sphères rondes ou en mottes. Ces dernières correspondaient aux inclusions intranucléaire de Joest‐Degen. Leur formation se situait de préférence dans de cellules de culture représentant vraisemblablement des astrocytes. Les cellules petites, cubiques ou en forme de fuseau contenaient rarement des inclusions intranucléaires typiques malgré une fluorescence granulaire brillante. Une cellule peut multiplier l'antigène viral de la maladie de Borna malgré l'absence d'inclusions intranucléaires. La mise en évidence des inclusions de Joest‐Degen n'est utilisable pour le diagnostic que dans des cas positifs. Resumen Estudios fluorescenteserológicos sobre la aparición de antígeno virósico Borna en cultivos celulares de explantaciones cerebrales de conejos infectados Se examinó la formación intracelular y la distribución de antígeno virósico con la técnica de inmunofluorescencia en cultivos de explantaciones de cerebros de conejos infectados con Borna. El antígeno Borna aparecía de forma preferente en el núcleo celular. En los cultivos viejos también se pudo identificar en una parte de las células positivas una fluorescencia difusa débil del citoplasma. Estaba siempre asociada a una fluorescencia nuclear. En el núcleo aparecía la fluorescencia Borna bien difusa‐granular difundida por todo el nucleoplasma o bien se expresaba en forma de áreas múltiples, fuertemente fluorescentes, bien delimitadas de las inmediaciones. Estas zonas eran o muy pequeñas y puntiformes o imponían como áreas grandes, redondas o tempanosas. Estas últimas equivalían a los corpúsculos de inclusión nuclear de Joest‐Degen. Su formación acontecía de forma preferente en células culturales que representaran probablemente astrocitos. Las células pequeñas, cúbicas o fusiformes apenas contenían inclusiones nucleares típicas, a pesar de la frecuente fluorescencia granular brillante. Aun con la ausencia de los corpúsculos de inclusión nuclear, una célula puede multiplicar antígeno virósico Borna. Desde el punto de vista diagnóstico, la identificación de las inclusiones de Joest‐Degen solo es válida en el caso positivo.