Disseny i síntesi de lligands i complexos de platí i estudi de la seva activitat antitumoral (2007)

En aquesta tesi es descriu la intesi d'una serie de lligands diaminats amb una estructura basica tipus 1,2-bis(aminometil)ciclohexa, amb diferents propietats estereoelectroniques, aixi com diferents substituents en l'anell de ciclohexa (hidroxil, metoxil, hexadecil ester, lligands bicicilics, etc.). Les diamines sintetitzades es poden dividir en tres grups: diamines sense substituents en l'anell de ciclohexa (s'estudiaren canvis estereoelectronics), diamines amb substituents oxigenats en la posicio C3 de l'anell de 6 baules (grups metoxil, hidroxil i hexadecil) i diamines amb lligands biciclics. Les diamines es coordinaren al plati per tal d'obtenir els corrresponents compelxos de palti(II) en cis analegs estructuralment al farmac anticancerigen cisplati, es van obtenir complexos diclorats o diiodats, depenent de la reactivitat del lligand que va provocar que no es poguessin obtenir els compostos diclorats en ttos els casos. Un cop sintetitzats ic aracteritzats els compelxos, es realitzaren assajos d'interaccio amb el DNA i assajos d'activitat biologica in vitro. Tots els compelxos es vana anlitzar per electroforesi, dicroisme circular i microscopia de forces atomiques per observar si els complexos de palti produien canvis en l'estructura secundaria i terciaria del DNA, observant que tots els compostos portaven a canvis en l'estructura del DNA i que, en alguns casos, aquests canvis es podien relacionar amb parametres estructurals dels lligands. Pel cas d'alguns dels compostos biciclics que ja havien mostrat previament una prometadora activitat biologica, es varen dur a terme estudis d'interaccio amb el DNA emprant noves metodologies biofisiques en una estada a l'Institut de Biofisica de Brno, a la Republica Txeca. Aquests estudis mostraren que els compelxos produeixen una interaccio amb el DNA semblant a la del farmac cisplati (Emprat com a patro) i, enc anvi, mostraren canvis interessants en la interaccio amb la molecula gluatio (responsable d'alguns dels mecanismes de resistencia en vers el cisplati per part de les cellules cancerigenes), en aquest cas s'observaren relacions entre l'activitat biologica in vitro i la interaccio amb el glutatio. Finalment es van realitzar estudis de citotoxicitat in vitro amb la linia cellular HL 60, obtenint que els compostos sintetitzats presentaven una activitat biologica molt condicionada per la polaritat del lligand (els complexos menys polars donaren lloc a millors activitats). Tanmateix, presentaren una inferior citotoxicitat pitjors que la que mostrava el farmac cisplati sota les mateixes condicions experimentals Tambe s'avalua l'activitat biologica per citometria de flux, el que ens va permetre establir si la mort cellular provocada pels nostres compelxos de plati es produia per necrosi o per apoptosi (mort cellular programada), els resultats derivats d'aquesta tecnica mostraren que la gran majoria de complexos produien la mort majoritariament per apoptosi, tot i que en alguns casos el percentatge de mort per necrosi resulta similar o superior.
 SUMMARY:
Synthesis of a series of a series of molecules having a 1,2-bis(aminometil)cyclohexane basic skeleton is described. These diamines have different substituents and stereolectronic properties in order to carry out SAR studies. The diamines were coordinated to platinum(II) yielding the corresponding diiodinated or dichlorinated platinum complexes having a cis structure similar to that of the anticancer drug cisplatin. The interaction of these complexes with DNA was analysed by means of different biochemical and biophysiscal assays such as: electrophoresis, circular dichroism or atomic force microscopy. Finally the potential cytotoxicity of the complexes was evaluated by assays of biological activity in vitro against HL 60 cell line, having results of IC50 values and also determining by flow cytometry the type of cellular death that produced our compounds, necrosis or apoptosis.