ferjorosa/bne-hemeroteca-ocr-xix huggingface dataset:
Gaceta médica catalana (1916-03-15 00:00:00), página 22

Si el enfermo de quien procede el excremento atraviesa una fase de atenuación o de seudocuración, podremos ver en las deposiciones las formas quísticas del parásito.

Para ello se comprime fuertemente entre porta y cubre una partícula de excremento, con el fin de obtener un frote finísimo. Al microscopio se verán pequeños quistes de siete, doce o catorce micras (Noc), de color agrisado y aspecto granuloso. En el interior de una envoltura espesa de doble contorno, hay uno o varios núcleos redondeados u ovales, generalmente en número de cuatro, así como grumos de una sustancia refringente muy siderófila (cromidia). Generalmente son escasos, pasando rara vez de uno o dos por campo.

En el Laboratorio de coprología que dirige el doctor Goiffon, en el servicio del doctor Mathieu (Hôpital Saint-Antoine, de París), tuvimos ocasión de ver una muestra de excrementos ricos en lamblia intestinalis y conservados desde hacia dos años sin que hubieran los parásitos sufrido la menor alteración.

Consíguese tal efecto añadiendo a las materias fecales un volumen igual de

    Formol comercial a 40 por 100
    5 gramos

    Suero fisiológico
    100

El procedimiento es perfectamente aplicable a las amebas, permitiendo el envío de muestras a distancia.

Para estudiar los detalles estructurales de estos protozoos, hemos recurrido al examen de preparaciones coloreadas, habiendo ensayado los métodos siguientes:

MÉTODO DEL ÁCIDO CRÓMICO. — En el borde del cubre de una de las preparaciones anteriores, se deja caer una gota de solución de ácido crómico al 1 por 100. El reactivo penetra por capilaridad entre el porta y el cubre fijando a las amebas, que se tiñen poco después deslizando otra gota de carmin aluminico.

MÉTODO BERTARELLI. — Se deseca sobre un porta la lámina de líquido que contiene los parásitos. Se hace actuar después durante cinco minutos alcohol absoluto ligeramente teñido o por la eosina; se lava con una mezcla de alcohol y de xilol a partes iguales; luego con xilol puro, y después se monta en bálsamo.

Ambos procedimientos tienen la ventaja de la rapidez, pero dan resultados muy poco satisfactorios.

Es preferible recurrir a los métodos especiales.

La fijación puede obtenerse por los vapores del ácido ósmico, o por el líquido de Flemming:

    Ácido crómico
    0'25 gramos

    ósmico
    0'10

    ácetico glacial
    0'10

    Agua destilada
    100 cm.³

haciéndole actuar durante una hora; o por el líquido de Schaudinn:

    Solución acuosa saturada de sublimado
    100 gramos

    Alcohol absoluto
    50

    Ácido acético
    V gotas
Gaceta médica catalana (1916-03-15 00:00:00), página 23

o por el de Müller:

Bicromático potásico ..................... 2 gramos
Sulfato sódico ............................ 1 "
Agua ........................................ 100 cm.³

o por el de Zenker, que con el anterior son los dos que preferimos:

Bicromato potásico ....................... 2 gramos
Sulfato sódico ............................ 1 "
Sublimado corrosivo ....................... 5 "
Ácido acético glacial ..................... 5 "
Agua ........................................ 100 "

Los cortes fijados se tratan con el alcohol iodurado o con el Lugol:

Iodo .......................................... 4 gramos
Ioduro potásico ............................ 6 "
Agua ........................................ 400 "

y en seguida se colorean con la hematoxilina de Delafield o de Heidenhaim (cuya técnica quedó anteriormente expuesta), o por alguno de los métodos que siguen.

a) Se disuelven 2 a 3 gramos de carmín y 4 de bórax en 100 de agua destilada caliente; se deja enfriar, y se añaden 100 cm.³ de alcohol de 70°, dejando madurar la mezcla en frasco abierto pero preservado del polvo, durante dos o tres semanas, al cabo de las cuales se filtra (carmín borárico de Grenacher). Las preparaciones se mantienen en el líquido durante varias horas. Diferenciación con alcohol clorhidrónico. Lavado en agua. Deshidratación. Xilol. Bálsamo.

b) Después de teñidas las preparaciones con el carmín anterior, y antes de deshidratarlas, se sumergen durante uno a cinco minutos en

Anilina azul soluble en agua ............. 0'05 gramos
Solución acuosa saturada de ácido picrico 100 "

Lavado rápido en agua. Diferenciación por el alcohol de 70°; deshidratación, esclarecimiento y montaje.

c) Tionina o azul de toluidina con las técnicas usuales de la bacteriología.

d) Teñido durante quince a veinte minutos con solución acuosa saturada de tionina; diferenciación al microscopio con solución acuosa de ácido oxálico al 2 por 100, durante medio a un minuto (hasta color violeta de los núcleos). Lavado. Deshidratación. Montaje.

e) Romanowski, Giemsa, Leishmann y Laveran, con las mismas manipulaciones que detallamos al tratar del tejido de los leishmanias.

La precaución necesaria para obtener buenas preparaciones con cualquiera de estos métodos es mantenerlas siempre humedecidas con un líquido (agua, colorante, alcohol, xilol y bálsamo sucesivamente) durante los diversos períodos de la manipulación; la desecación altera y desfigura completamente las formas de estos protozoos.
Gaceta médica catalana (1916-03-15 00:00:00), página 24

La ameba aparece con los caracteres que señalaremos después. Deja ver un núcleo muy pequeño (5-6 micras), pobre en cromatina, casi siempre excéntrico, y muchas veces periférico. Contiene un cariosoma central. La membrana es muy delgada y suele quedar mal coloreada.

Para teñir los quistes de resistencia hemos obtenido los mejores resultados fijando con el Schaudinn y tiñendo con el método Heidenhain ya descrito. No hemos de insistir sobre la técnica expuesta.

En las preparaciones teñidas con cualquiera de los métodos anteriores, podría confundirse la entamaeba histolytica con la a. coli, pero ésta tiene un núcleo subcentral muy visible, es poco vacuolar, lleva el ecto unido al endoplasma y no engloba nunca hemáties, carácter, este último, definitivo para la diferenciación. Los quistes de la a. coli son mayores (16-20 micras), tienen ocho núcleos y carecen de bloques de cromidia.

Los del lamblia intestinal s son ovoides, de 12 por 8 micras, color gris, envoltura delgada, dos a cuatro núcleos, y unas líneas sinuosas bien visibles que siguen el eje mayor. Teñidas al Giemsa, quedan azules y en su extremidad anterior ostentan tres o cuatro masas nucleares de un color rojo violáceo.

Los del prowazekia son pequeños (5-7 micras), ovalados, refringentes, con un solo núcleo y una membrana de cubierta muy fina.

Los del blastocystis hominis son esféricos, incoloros, de 10 a 15 micras, con una masa central redondeada y homogénea y una capa protoplásmica bastante fina.

La cuestión del cultivo de las amebas es de las más delicadas de la parasitología. Los cultivos puros en el estricto sentido bacteriológico de la palabra, es decir, aquellos en los que únicamente se encuentra la especie amebiana, no se han logrado aún prácticamente. Dos causas se oponen a ello. Primero la gran cantidad de especies bacterianas que las amebas llevan consigo, y que naturalmente germinan a la par. Segundo que las amebas han de alimentarse de bacterias vivas, de modo que el cultivo no germina más que si el parásito va en simbiosis con otros gérmenes, y sobre todo con microbios intestinales.

Recientemente Williams (1) dice haber obtenido cultivos puros y lo mismo Couret y Walker (2), empleando agar neutro sobre el que extienden una capa de jugos de órganos autolizados, con acidez menor de 1'5 por 100 a la fenofthalalina, demostrando con ello que las amebas de los abscesos hepáticos se nutren de los productos de desagregación del hígado atacado.

Nosotros no tenemos experiencia personal sobre estos métodos.

Pueden emplearse las infusiones de heno, de paja o de tierra, pero es preferible utilizar el agar poco nutritivo, dispuesto en cajas de Petri y sembrado de bacterias del grupo fluorescens o mejor de bacterium coli (Wüller) (3).

(1) « Pure culture of amoebae pa asitic in mammals » (Journal méd. res., volumen XXV, página 263, 1912).
(2) « The cultivation of amoebae in pure-culture upon autolyzed tissues » (Journal of exp. Med., volumen XII, página 252, 1913).
(3) « Die Technik der Amöbenzüchtung » (Zentralblatt. für Backt. I ref., volumen I, página 577, 1911).
Gaceta médica catalana (1916-03-15 00:00:00), página 25

Lesage utiliza el agar muy poco nutritivo, preparado con agar lavado, adicionado de un poco de extracto de carne y alcalinizado. Junto a los puntos de siempre de la ameba, se hacen picaduras con bacilos paracólicos, obteniéndose así, después de varios pases, un cultivo mixto puro, que Lesage ha conservado vivo durante dos años, resembrándolo sesenta y seis veces sucesivas.

Frösch y Nägler preparan una fórmula que nos ha dado excelentes resultados:

    0'5 gramos

    Agar

    Caldo de carne de vaca alcalinizado
    10 cm³

    Agua
    90 "

Otros autores substituyen el caldo por somatosa o por peptona, y otros utilizan cultivos muertos de bacterias vulgares, evitando así la siembra en simbiosis.

Musgrave y Clegg utilizan una caja de Petri donde siembran, en círculos concéntricos, bacterias paracólicas. En el centro depositan el producto amebiano.

En todos nuestros casos de amebiosis hemos practicado la prueba de la inoculación.

Escogemos para ello un gato muy joven, menor de tres meses, y lo sujetamos en la bandeja de contención de animales.

Recogemos con una jeringa adecuada 1 cm³ de heces disentéricas recién expulsadas, procurando tomar grumos de moco que son los más ricos en amebas, y los introducimos en el recto del animal, al que alimentamos desde ese momento con leche y alimentos sencillos.

A los tres, cuatro o cinco días, el animal enferma. Principia con una diarrea serosa, que luego pasa a mucosa y después a sanguinolenta. Al mismo tiempo principia el abatimiento, la tristeza y la inapetencia. Luego el pelo se eriza y el panículo adiposo desaparece, y, por último, tras una verdadera caquexia, sobreviene la muerte, encontrándose en el intestino las lesiones típicas de la disentería tropical, y abundando en él las amebas inoculadas, que pueden ser nuevamente, y por serie indefinida, transmitidas a gatos jóvenes.

Nunca les hemos practicado inoculación per os haciéndoles ingerir deposiciones amebianas, ni hemos visto aparecer los abscesos del hígado, tan frecuentes en el hombre.

XII. — En el grupo plasmodromata de la clasificación general de los protozoos, y dentro del subgrupo sarcodina (de Butchilli), se encuentra la clase rhizopoda de von Siebold.

Los rizopodos son protozoos de membrana tan escasamente diferenciada, que generalmente se les considera como desprovistos de ella. Poseen la propiedad de extender y contraer prolongaciones protoplásmicas que les sirven para la locomoción y para la prehensión de los alimentos, y que, con el nombre genérico de seudopodos, se distinguen en lobopodios, cuando son gruesos, anchos y no anastomosables (amoebidos); filopodios, si son delgados y no anastomosables (foraminíferos); rizopodios, si filiformes ramificados y anasto-
Gaceta médica catalana (1916-03-15 00:00:00), página 26

mosables (algunos foraminíferos y radiolarios); y exopodios, si el seudopodo presenta un eje central más consistente que el protoplasma (heliozoarios).

Poseen frecuentemente formaciones esqueléticas, ya en forma de conchas seudoquintinas o keratinicas (foraminíferos), ya en armazones, púas, placas o fibras (heliozoarios), ya a modo de cápsula central perforada, rodeada por el ectoplasma y que contiene el endoplasma y los núcleos (radiolarios).

La nutrición es siempre holozoica, penetrando la partícula alimenticia por cualquier punto, previa la formación del seudopodo que ha de englobarla.

La reproducción es variable: bien asexual por división sencilla o múltiple; bien plasmotónica, es decir, segmentación del protoplasma en tantos trozos como núcleos contiene; bien por formación de flagelos iguales entre sí y capaces de funcionar como isogametos, o diferenciados en micro y macrogametos, o bien, finalmente, por copulación isogámica, autogamia y hasta plasmodgamia (Rodríguez López Neyra).

Es clásica la colocación de los rizopodos al comienzo de la serie animal, fundándose en la simplicidad orgánica que manifiestan, sobre todo si se considera que los protozoos más sencillos son aquellos en que no habiendo membrana de cubierta, ha de ser el mismo protoplasma el que verifique las funciones de locomoción y de prehensión de los alimentos. Pero si fijamos nuestra atención en la filogenia de la clase, deduciremos inmediatamente que no es aquel lugar el más adecuado para un grupo relacionado por intermedio de los micetozoos o mixomicetos con los hongos, vegetales alejados, por muchas razones, del primer lugar en las clasificaciones botánicas.

En cambio, todos los botánicos concuerdan en considerar a las bacteriáceas como los vegetales más sencillos, y bien evidentes son las relaciones que, determinados flagelados, presentan con este grupo de talofitas. Estas razones han instigado al ilustre protistólogo alemán Doflein a comenzar el estudio de los protozoarios por los flagelados y continúa con los rizopodos, igualmente relacionados con el reino vegetal. Tal modo de ver sustenta recientemente Poche (1).

Los rizopodos se han dividido con arreglo al siguiente plan:

a) Sin cápsula central, seudopodos desprovistos de filamento axil, cuerpo de forma muy variable, sin concha protectora, seudopodos lobados no anastomosables amebidos.

b) Sin cápsula central, seudopodos desprovistos de filamento axil, cuerpo de forma muy variable, con concha protectora, seudopodos largos, anastomosables en la mayoría de los casos (rizopodos) o sólo filiformes (filopodios), foraminíferos.

c) Sin cápsula central, seudopodos provistos de filamento axil, cuerpo con forma redondeada, heliozoarios.

d) Con cápsula central, cuerpo de forma redondeada, casi semiesférica, radiolarios.

El orden de los amebidos, único que por ahora nos interesa, comprende protozoos con seudopodos cortos no anastomosables, des-

(1) «Das System der Protozoa» (Arch. f. Protistenkd, volumen XXX, número 3, página 125, 1913).
Gaceta médica catalana (1916-03-15 00:00:00), página 27

provistos de filamento axil, sin cápsula central, y desprovistos de formaciones esqueléticas.

Su forma es primitivamente redondeada, pero se modifica constantemente por la continua emisión de seudopodos, que se forman a la menor excitación y desaparecen rápidamente para volver a proyectarse en otra dirección.

El protoplasma suele presentar dos zonas diferentes: una externa hialina y otra interna granulosa, con un núcleo (amoeba), dos (pelomixa binucleata) o muchos (pelomixa palustris).

La reproducción es asexual, por división binaria o múltiple y sexuada por autogamia, previa formación de quistes.

Inclúyense en este orden una porción de géneros y de especies mal clasificados y diferenciados: amoeba proteus (Pallás), amoeba terricola (Grefft), entamaeba coli (Lösch), entamaeba minuta (Elmas-sian), entamaeba tetragena (Viereck), entamaeba niponensis (Koidzumi), entamaeba histolytica (Schaudinn), amoeba pulmonaris (Artault), amoeba miturai (Ijima), amoeba kartulisi (Doflein), amoeba urogenitalis (Baelz), entameaba buccalis, (Steim y Prow), entameaba bovis (Liebetanz), entamaeba meleagris (Smith), amoeba parasitica (Lendenfeld), etc., etc.

Muchos de estos protozoos viven libres en las aguas estancadas, en el barro húmedo, en las infusiones vegetales, sobre las hojas de las hierbas acuáticas, etc., reservándoseles el nombre genérico de amebas; otros son parásitos de animales vertebrados y se conocen con el nombre de löschia y, frecuente aunque impropriamente, con el de entamaeba; y otros lo son de los invertebrados y llevan en propiedad la denominación de entamaeba.

La entamaeba o löschia histolytica, de Schaudinn, productora de la llamada disentería tropical, y hallada por nosotros en España, tiene un diámetro de 28 a 30 micras, aspecto vitreo y coloración clara.

El ectoplasma es hialino, claro, muy refringente, apreciable con toda evidencia aun en estado de reposo, con zona ectoplasmática evidente y dos a tres seudopodos cortos y anchos.

El protoplasma es granuloso y alveolar, suele contener vacuolas, y encierra casi siempre, a la par que materiales bacterícos y detritus, uno dos o más hematies, ya integros, ya en diferentes periodos de desintegración; carácter importantísimo que puede servir para diferenciarla de la a. coli.

El núcleo es pequeño (5 a 6 micras), casi invisible en el ser vivo, pobre en cromatina, casi siempre excéntrico y muchas veces periférico. Contiene un cariosoma central y carece de membrana, siendo difícilmente teñible.

La reproducción es asexuada, por división sencilla o múltiple, o sexuada por producción de yemas que se envuelven en quistes duros de color amarillento u obscuro.

En el momento de la curación de la disentería, cuando las materias empiezan a endurecerse, se ve desarrollarse en la superficie de la ameba una especie de brote más o menos esférico, de tres a ocho micras, incoloro o moreno, rodeado en seguida por una membrana.
Gaceta médica catalana (1916-03-15 00:00:00), página 3

tuberculosis, etc.). Es preciso hacer constar, de conformidad con todos los autores que se han ocupado en este asunto, que el tratamiento con el suero tiene un valor curativo pasajero, si no se insiste en la repetición del tratamiento. — En términos generales puede aconsejarse el siguiente plan de tratamiento : Si fuera necesario obrar rápidamente, inyéctese 20 ó 40 cm.³ de suero por el momento y luego seguir inyectando 10 cm.³ cada ocho días. Para evitar los accidentes anafilácticos puede recurrirse al procedimiento de Bes-redka : se mezcla 9 cm.³ de solución salina fisiológica y 1 cm.³ de suero ; se inyecta primero 0'5 cm.³ de esta mezcla, a los diez minutos se inyecta 1 cm.³ y a los diez siguientes 2 cm.³ ; a las cinco horas puede inyectarse todo el suero que se crea conveniente. Si se quiere obrar más rápidamente se inyectará por vía intravenosa, de la anterior preparación, 1 cm.³ y, transcurrida una hora, puede administrarse el suero.

Tratamiento opoterápico. — Son dignos de mención en la terapéutica de esta enfermedad, la opoterapia hipofisaria y la hepática.

M. Anosoff, ligando el colédoco e inyectando cloroformo, comprobó el efecto de la gelatina, del cloruro de calcio y del extracto hipofisario : notando que la primera provocaba sólo lentos efectos sobre la coagulación ; que el segundo, aunque disminuía el efecto anticoagulante, era pasajero, y en cambio, con el tercero se aceleraba la coagulación, manteniéndose este efecto doce horas por lo menos : y en los ictericos esta aceleración se producía una hora después de la inyección, sosteniéndose veinticuatro horas. Según E Weil, el lóbulo posterior de la hipófisis determina aumento de la coagulación sanguínea y, por último, en una observación propia en una hemofílica con hemorragia nasal, dos inyecciones de 0'50 cm.³ fueron suficientes para detener la hemorragia. Este preparado, pues, administrado varias veces por semana, ayudará al efecto curativo propuesto.

A mediados del siglo pasado, Monneret formuló una ley general : la existencia de hemorragias en el curso de afecciones hepáticas.

« Las hemorragias, decía, se cuentan entre los síntomas más graves en las enfermedades del hígado y dan medida de la importancia del mal. » — Quinquaud, Maragliano y Hayem han atribuido las predisposiciones hemorrágicas, en las insuficiencias hepáticas, a alteraciones en los glóbulos rojos y de la hemoglobina, sumando a ésto el estado hidrohémico.

Gauthier, J. Teissier y Guinard llegan a la conclusión de que es preciso aceptar que las sustancias tóxicas resultantes de la insuficiencia hepática producen lesiones vasculares, degeneraciones grasosas y, por consecuencia, gran fragilidad vascular. Gilbert, Quenu y Lereboullet sostienen, como debida a una colemia familiar de forma hemorrágica, la hemofilia.

Para terminar, F. Widal, P. Abrani y Brissaud han observado que al producir involuntariamente, por la administración repetida de suero, la anafilaxia, desapareció la predisposición hemorrágica.

Plencia (Vizcaya).
Gaceta médica catalana (1916-03-15 00:00:00), página 4

LOS NUEVOS PROTOZOOS PARÁSITOS DE EL MEDIODÍA DE ESPAÑA (1)

POR EL
DOCTOR FIDEL FERNÁNDEZ MARTÍNEZ, de Granada

Dos especies de este género nos van a ocupar; es decir, las dos cuya existencia en el Mediodía de España ha sido por nosotros respectivamente descubierta y comprobada. Son la leishmania infantum (Nicolle), identificable actualmente con la leishmania donovani (Leishmann, Donovan), y la leishmania tropicalis o leishmania forunculosa (Wright), cuyo estudio haremos más adelante.

El leishmania infantum aparece con caracteres totalmente distintos cuando se le examina en la sangre o en los órganos del hombre y de los animales donde ordinariamente vive, y cuando se le observa en los cultivos antes descritos.

Vamos a ocuparnos sucesivamente de cada uno de esos dos aspectos.

En las preparaciones que, coloradas por los procedimientos que indicamos tenemos el honor de presentar, se ven numerosos parásitos en su mayoría endocelulares, incluidos en las grandes células endoteliales, en las lagunas sanguíneas, en los macrófagos, en los grandes mononucleares y en las células propias del tejido esplénico.

El leishmania infantum aparece como un pequeño corpúsculo discoidal, piriforme, u ovalado, de dos a tres y media micras de largo por dos de ancho, y en el que se pueden reconocer tres elementos: el protoplasma, el núcleo y el blefaroplato o kinetonúcleo.

El protoplasma, finamente granulado, está encerrado en una membrana, que acaso no sea más que el producto de su condensación periférica (Jemma); es generalmente vacuolado, sobre todo en las proximidades del macronúcleo, que es redondeado, de dimensiones variables, según el tamaño del parásito, tenible con las anilinas básicas, central en las formas esféricas y polar en las ovaladas, colocándose por lo general en la extremidad más gruesa.

El blefaroplato o kinetonúcleo es un recio bastoncito de cromatina extranuclear, más o menos alejado del núcleo y dispuesto en un punto cualquiera del escaso citoplasma del protozoo. Su dirección puede ser perpendicular, oblicua o paralela al eje del parásito y su forma es, en general, alargada, aun cuando puede ser puntiforme.

Las dimensiones varían mucho, aunque siempre es menor que el núcleo; puede faltar, y cuando existe puede ser único o doble. Reacciona bien a los colores selectivos de la cromatina, y, como puede verse en las preparaciones adjuntas, el método de Leishmann pone de relieve las diferencias entre el núcleo (rosado o rojo carmín) y el bastoncito o corpúsculo cromático extranuclear, que es de color púrpura muy obscuro o morado. Las dimensiones oscilan alrededor de una a una y media micras de longitud por media de anchura.

(1) Conclusión.—Véase el número anterior.