Gaceta médica catalana (1915-05-15 00:00:00), página 34

en los medios de cultivo fenicados. Pero después que por las experiencias de Rothberger y Scheffler, se vino a considerar casi como reacción específica del bacilo del colon, la modificación que imprime a los medios de cultivo teñidos con el «rojo-neutro» (viraje de color desde el rojo-rubi al amarillo-cantaro, con reflejos fluorescentes) cuando en ellos se desarrolla, lo adoptamos en nuestra técnica, substituyéndolo a los medios fenicados. Como medio de cultivo, dimos la preferencia al «caldo de Savage» sobre la gelosa ordinaria de Rothberger y la gelosa glicerinada de Scheffler. Hago gracia a mis lectores de la composición del «caldo de Savage» como de la de todos los otros medios de cultivo que se irán citando, ya que los puede encontrar en cualquier obra clásica de bacteriología o en los Anales y Boletines del Instituto Pasteur de París.

En este caldo, repartido en tubos de ensayo y en cantidad de 6 cm.³ en cada uno, practicábamos dos siembras del agua analizada, empleando cantidades diversas de la misma, según el origen de procedencia del agua. Tratándose de aguas provenientes de la capa freática, sembrábamos un tubo con 1 cm.³ de agua y otro con 5 cm.³; en cambio, añadíamos a los tubos de Savage 5 y 1 cm.³ si el agua era profunda o de las fuentes públicas. Se llevaban los tubos a la estufa a 37º y se observaba la reacción después de transcurridas veinticuatro horas.

Después que por los trabajos de Vincent y Giraud en Francia, y de Petruschky y Pusch en Alemania, se ha reconocido la mayor importancia que para la higiene pública tiene la determinación cuantitativa de los colibacilos que contengan las aguas, se han aconsejado infinidad de procedimientos para conseguirla con la mayor exactitud posible. Todos ellos están basados en alguna de las especiales propiedades biológicas del bacilo de Escherich. Mencionamos tan sólo para recordarlos, los de Mr. Vincent, Peré, Lignières y Joudan, en Francia, y los de Freudenberg, Abba, Petruschky y Pusch, en Alemania. En esta nación se sigue preferentemente el método propuesto por los dos últimos.

Nosotros hemos utilizado en nuestros análisis primariamente el procedimiento que Calmette emplea en el Instituto Pasteur de Lille y que posteriormente hemos substituido por el que adopta Miquel en el servicio micrográfico del Observatorio de Monsoulis de París.

Para obtener la reacción de Calmette, repartíamos caldo Vincent en matraces esterilizados, a razón de 10, 25 ó 50 cm.³ según era la procedencia del agua que analizábamos; sembrábamos en dichos matraces y con la asepsia que estos análisis requieren igual cantidad de agua que de caldo, y suspendíamos en el interior del matraz y sujeto por el propio tapón, una tirilla de papel chupon impregnada de una solución saturada de ácido oxálico; quedaban los matraces en la estufa a 37º, y los retirábamos a las cuarenta y ocho horas. En los matraces en que había cultivado el colibacilo se había producido indol, que tiene la propiedad de hacer virar al rojo el color blanco del ácido oxálico. Con ver el número de tirillas rojas y leer las soluciones anotadas en los matraces, no había dificultad en averiguar el tanto por mil de colibacilos contenidos en la muestra.

Pero por parecernos más sensible y fiel, hemos adoptado definitivamente el procedimiento de Miquel. Para practicar éste, mezclamos, a partes iguales y en tubos de ensayo, 5 cm.³ de caldo peptonado y solución fenicada al 210 por 1,000. En 10 tubos de este caldo sembramos otros 10 cm.³ de agua en cada uno, ya que, como anteriormente decimos, hemos adoptado con Savage la cantidad de 100 colibacilos por litro como límite mínimo para considerar un agua como peligrosa y mala. Llevamos los tubos a la estufa a 40º y al cabo de cuarenta y ocho horas buscamos en ellos la reacción que ha de caracterizar a cada tubo 1 cm.³ de cada uno de los dos reactivos siguientes: 1.º, una solución saturada de persulfato de sosa, y 2.º, una solución de 4 gramos de paradimetilamidobenzaldehído en 380 de alcohol absoluto y 80 gramos de ácido clorhídrico puro. Si en los tubos sembrados ha proliferado el coli, en la superficie de contacto de los dos reactivos con el caldo de cultivo se produce un anillo de color rojo, tanto más subido cuanto más intensa es la reacción.

Siguiendo la marcha analítica, procedemos luego a la identificación de las bacterias que han dado positiva la reacción de Miquel, comprobando si poseen las propiedades morfológicas y biológicas de los coli. Para ello se practican con el contenido de los tubos que acusan la reacción colorante las operaciones siguientes:

a) Doble preparación microscópica, teñidas por el violeta de genciana fenicado y una de ellas tratada por el Gram.