Gaceta médica catalana (1913-06-30 00:00:00), página 20

terreno llamado de Novy-Neal, modificado por Nicolle (N. N. N.), cuya composición formularé en seguida.

También se han obtenido siembras positivas en el medio ideado por Rogers para el Leishmania donovani (sangre esplénica citratada), en el cual Lengó (de Catania) ha sido el primero en conseguirlo, destruyendo así uno de los principales argumentos esgrimidos por la escuela dualista en contra de la identidad del leishmania de Donavan y el infantum, como ya en mi primer artículo decía.

Análogos resultados obtuvieron Di Cristina y Cannata en cultivo anaerobio, sembrando en sangre de conejo, con adición de citrato de sosa

La fórmula del agar de Nicolle es la siguiente: agua, 900 centímetros cúbicos; agar, 14 gramos, y cloruro de sodio, 6. Una vez preparado, mediante las manipulaciones de rigor (fusión, distribución y esterilización), se le añade sangre fresca de conejo en la proporción de una parte de sangre por dos de agar.

Yo, siguiendo casi en todo la técnica empleada en el laboratorio de la Clínica Pediátrica de Palermo, mezclo estos dos elementos a partes iguales sin desfibrinar la sangre, que aspiro directamente del corazón del animal. Después de haber hecho esto, deben agitarse los tubos hasta obtener una mezcla lo más homogénea posible, inclinándolos inmediatamente para que el terreno se solidifique en pico de flauta. Sólo dos cosas quedan entonces por hacer: la primera es comprobar la perfecta esterilización de los tubos, dejándolos durante cuarenta y ocho horas en la estufa a 37°; la segunda es procurar un cierre cuidadoso de los mismos, con el fin de lograr la mayor cantidad posible de agua de condensación.

Una vez hecha la siembra (pulpa esplénica, material de cultivos anteriores, etc.) se colocan los tubos a 22°, que es la temperatura más favorable para la vida del parásito, aunque no la única en que puede desarrollarse, puesto que diferencias de pocos grados, tanto en más cuanto en menos, no influyen notoriamente sobre su vitalidad. Solamente de 40° para arriba los parásitos mueren, pudiendo todavía sobrevivir algunas formas de cultivos viejos desprovistos de flagelo (Franchin).

Generalmente a los ocho o diez días de estufa a 22° se puede ya obtener el desarrollo del germen; en los pases sucesivos este periodo es mucho más corto (tres o cuatro días).

Las colonias se obtienen, según unos, en el agua de condensación principalmente; según otros, en la superficie del agar. En mis cultivos siempre ha sido aquélla la más rica en parásitos, y me parece que la vitalidad de éstos queda muy comprometida cuando el terreno se deseca.

Macroscópicamente, las colonias, pequeñísimas al principio, con ligero relieve sobre la superficie y de contornos redondeados, van lentamente agrandándose hasta alcanzar algunas de ellas el tamaño de una cabeza de alfiler, rara vez mayor. Hay tubos, sin embargo, en los que no es posible ver traza alguna de colonias, sin que ello quiera decir que deben considerarse como estériles.

Es bastante frecuente, en efecto, al menos en el material que yo manejo, encontrar que es el agua de condensación la única parte parasitífera del cultivo.

Como dejo dicho, pasados algunos días de realizada la siembra, puede demostrarse ya la presencia de leishmanias, cuya morfología difiere esencialmente de la que éstos ofrecen en el organismo. Son corpúsculos de configuración variable (redondeados, ovalados piriformes o fusiformes), dotados de vivísima movilidad, desprovistos de membrana y constituidos por una masa protoplásmica, un núcleo, un blefaroplasto y un flagelo.

El citoplasma es granuloso, contiene a veces vacuolas y casi siempre se ven en él numerosos acúmulos cromáticos irregularmente distribuidos.

El núcleo, grande y redondeado, aparece generalmente en el centro del parásito. Entre el núcleo y el flagelo se coloca constantemente,