Gaceta médica catalana (1901-04-15 00:00:00), página 18

sóluto. Se puede entonces colorear con el violeta de genciana como si el examen recayese en un cultivo, pero aquí la decoloración por medio del lavado con agua es, por regla general, insuficiente, pues los elementos constitutivos del líquido, muy coloreados, estorban para la investigación de las bacterias; así es que se decolora ligeramente con el alcohol después de este primer examen con coloración simple, en el cual todas las bacterias están uniformemente teñidas; se ha de aplicar á la otra preparación el método de Gram, que destiende ciertas especies microbianas, permite un diagnóstico bacteriológico. Esta manipulación es indispensable cuando se estudia pus ó esputos líquidos, en los cuales la flora microbiana es á veces muy compleja. Para hacer esto, póngase directamente en contacto con la preparación, durante uno ó dos minutos, el líquido de Gram inmediatamente después de la coloración con el violeta sin lavado; la materia colorante se encuentra así fija sobre algunos microbios, y un lavado con alcohol aparta la materia colorante no fijada en los demás elementos; este lavado debe prolongarse hasta que el alcohol de lavado no aparezca coloreado. Se puede entonces montar con bálsamo la preparación seca. Pero como el líquido de Gram destiñe los elementos figurados del líquido examinado, si las bacterias son poco numerosas, es muy difícil poner en su punto la preparación, mientras que el examen se simplifica añadiendo á la manipulación la coloración rápida del fondo con algunas gotas de una solución acuosa de eosina.

A veces el alcohol, después del líquido de Gram, no decolora suficientemente, y se emplea entonces con ventaja el aceite de anilina que al mismo tiempo es deshidratante. El método de Gram Weigert-eosina comprende los tiempos siguientes:

1.º Violeta.
2.º Gram.
3.º Eosina.
4.º Alcohol.
5.º Aceite de anilina gota á gota hasta que no se note el color violeta.
6.º Montar con el bálsamo.

Este método tiene la ventaja de aplicarse al examen bacteriológico de todos los líquidos del organismo con exclusión, no obstante, de los que contienen el bacilo de Koch, en los que la coloración del microbio se hace con el rojo de Ziehl en caliente; la decoloración de los otros gérmenes y de los elementos figurados con el ácido nítrico al tercio, y la coloración con el azul de metileno. (Volveremos á tratar de este caso particular cuando estudiamos el bacilo de la tuberculosis).

Una vez consignados estos resultados, se procurará determinar y separar las variedades microbianas contenidas en el líquido que se examina, y para esto se sembrará este líquido en diferentes medios, teniendo cuidado de sembrar en estrías algunos tubos que contengan un medio sólido, sin recargar el hilo de platino como ya hemos indicado. El ó los últimos tubos sembrados contendrán así muy pocas colonias fáciles de diferenciar.

Cuando las diferentes especies han sido aisladas, se podrá medir su grado de virulencia mediante la inoculación á los animales. A veces, cuando el examen directo del líquido patológico revela como predominante una bacteria que es nociva para tal animal, se inocula directamente el líquido recogido tan asepticamente como sea posible, y el experimento, al mismo tiempo que confirma el diagnóstico bacteriológico, indica la virulencia del microbio; la inyección subcutánea de esputos de pulmonares al ratón, la inoculación intra-peritoneal de esputos de tuberculosos al conejito de Indias son ejemplos de ello. Este procedimiento de inoculación directa se aplica también á casos en que el líquido contiene las bastante pocas bacterias para que el examen microscópico ó la siembra den un resultado positivo; así es que el conejito de Indias es el único reactivo que puede demostrar la naturaleza tuberculosa de algunos derrames.

EXAMEN DE LOS MICROBIOS EN LOS TEJIDOS.—COLORACIÓN DE LOS COR- TES. Puede ser útil buscar los microbios en órganos infectados espontáneamente o experimentalmente. El corte debe ser muy fino, y por lo mismo se ha de escoger preferentemente la inclusión en la parafina. Los tejidos serán tratados según el modo ordinario empleado en Histología patológica; se les fijará de preferencia con el sublimado acético ó con el líquido de Flemming.