分类：教育/科学-理工学科-生物学
问题：请教：RT
请教：RT-PR的方法与ELISE、放射免疫法相比有何优劣？ 
回答：RT-PR法:首先将细胞因子产生细胞的RNA提取出来，再经逆转录合成cDNA，以cDNA为模板，在细胞因子引物的引导下，进行PCR扩增。这种技术是迄今最敏感的细胞因子检测技术，而且可以直观的反应淋巴细胞产生细胞因子的能力。缺点是操作较为繁琐，测定结果只能代表细胞因子基因的表达，而不能代表活性细胞因子的水平，并且不容易对细胞因子表达水平进行定量。ELISA法：大多使用夹心法检测。要有抗同一细胞因子不同表位的两个抗体，一个抗体用于包被作捕捉抗体用;另一个抗体分子作检测用,其分子上标记生物素,使生物素分子与酶标记的亲和素分子结合,一般用单抗体包被抗体,用多抗或几个单抗混合起来作检测抗体,这样可以提高检测的灵敏度。ELISA法的优点是特异、方便、易标准化和批量化,很适合临床应用。其缺点是所提生供的是免疫活性信息而不是细胞因子生物活性信息，除此之外,血清与体液中的嗜异性抗体,抗类风湿因子等自身抗体也可干扰测定结果，而且不能反应细胞内的细胞因子水平。放射免疫法与夹心ELISA法基本相同，而且夹心ELISA法由于生物素和酶标亲和素的级联放大，其灵敏程度达到了放免的水平。