크로넥스 사업보고서 (2023.12)
2. 주요 제품 및 서비스

가. 이종장기 부문 나. 미니피그 부문 다. CRO사업 부문

가. 이종장기 부문

당사는 생체재료 및 이종장기 원료동물로 순수 국내 토종품종인 제주재래돼지를 사용함으로서 생물자원을 활용하며 생기는 이익을 공유하기 위한 지침을 담은 국제협약인 나고야 의정서에 대비하고 있습니다. 이는 연구개발, 산업화 이후 사업의 영속성과 밀접하게 관련된 부분으로서 생물종 확보는 매우 중요한 사안이라 할수 있습니다. 당사는 사업화 이후에 발생할수 있는 문제점들에 대해 철저히 대비하여 사업을 진행하고 있습니다.

당사는 오랜시간 인간의 장기를 대체할 이종장기 개발에 초점을 맞추고, 다방면의 연구를 거듭하고 있습니다. 2020년 3월, 유전자 편집기술인 3세대 CRISPR/Cas9, 3.5세대 CRISPR/cpf1을 이용하여 면역거부를 유도하는 알파갈(α-Gal), CMAH, β4GALNT2 등을 제거(knock-out)하였고, 3가지 이상의 유전자를 동시 제거에 성공, 전세계적으로도 이례적인 성과를 거둬냈습니다. 또한 사람의 면역유전자 MCP, TPM 등을 삽입(knock-in)하여 6~7종의 유전자가 편집된 이종장기 생산용 multi_Transgenic Pig 생산을 진행하고 있으며, 매년 수차례에 걸쳐 출산되는 형질전환돼지의 개체수가 증가하고 있습니다.

면역거부반응 유전자가 결속된 돼지의 생산과정에서 체세포 핵이식 복제 기술은 가장 핵심적인 부분을 차지합니다. 1) 배양된 난자의 유전정보를 가지고 있는 핵을 제거→2) 생산하고자하는 편집된 유전자 세포를 난자에 주입→ 3) 복제란 생산 → 4) 생산된 복제란을 배란 단계가 막 지난 대리모에 외과적으로 이식 → 5) 유전자 편집된 형질전환 동물의 생산의 과정을 거칩니다. 이러한 형질전환 복제돼지의 사육은 철저하게 통제된 환경에서만 가능합니다. 당사는 청주 사업장 내에 SPF급 사육시설에서 국제기준에 부합하는 환경과 높은 청정도를 유지하며, IXA 및 미국 FDA에서 권고하는 수준의 청정도를 완벽히 준수할수 있는 DPF시설을 구축 중에 있습니다. 나아가 가축질병 청정지역인 제주도에서 이종장기 생산용 동물 사육을 계획하고 있으며, 앞서 기재한 IXA의 권고 72종의 바이러스, 미생물 등의 검출기술을 통해 주기적인 모니터링을 실시하고 있습니다.

Triple knockout Mini pig의 장기를 영장류에 이식하는 시험(2021.03.11)을 완료하였습니다. 지금껏 많은 연구팀들은 원숭이와 미니피그의 장기크기 차이로 인한 문제로 3~4주령의 어린 돼지의 장기를 사용하였고, 이식이후에 장기 사이즈의 변화로 인한 다양한 문제점에 직면하곤 했습니다. 당사는 이러한 문제점를 극복하고자 각고의 노력을 기해왔으며, 해당시험에 투입될 돼지는 5~6개월령으로 성돈에 가까우나, 체중은 약 15kg 수준을 유지하는 등 미성숙장기 이식으로 인해 발생될 문제점들을 미연에 차단하였습니다. 해당 시험을 통해 형질돼지 한마리 당 신장, 심장, 각막 및 피부를 동시에 추출하여 원숭이에게 이식하는 실험을 진행 예정이며, 본 시험결과를 통해 국내 이종장기 이식 연구의 새로운 패러다임을 이끌어 내고자합니다. 나. 미니피그 부문 1) 제주미니피그

당사는 동시사육 700두, 연간 생산 1,000두 이상의 생산규모의 제주 재래유전자원 미니피그 리서치센터(JMRC)를 준공진행 중에 있습니다. 이는 ASF, FMD 와 같은 국가적 재난 사태에 대비하고, 사육지역의 다변화를 위해 질병 청정지역인 제주에서 국내 최대규모의 SPF/DPF 미니돼지 생산/연구/사육 시설을 구축하고자 함에 그 목적이 있습니다. 가축질병청정지역인 제주도에서 우수한 원료동물 의 생산과 연구를 진행함으로써 발생할 수 있는 국가적 재난사태에 선제적으로 대응하여 사업을 도모하고 있습니다.

제주도에 건축되는 시설은 동물 조직 및 그 파생물을 사용하는 의료기기에 대한 국제표준인 ISO 22442 규격에 맞춰 진행하고 있으며, ISO22442, -13485, -14644 의 인증 획득 가능한 시설로 진행하고 있습니다. ISO 22442의 경우 당사가 가장 앞서 있어 국내에서도 관련 규정의 적용으로 인해 자사의 사업 영위에 있어 강점으로 작용할것으로 예상됩니다. 당사의 의료 및 실험용 미니피그인 제주 미니피그(Jeju Minipig)는 신약 개발 시 비설치류 비임상 연구와 인체 장기 대체용 인식 장기 연구, 그리고 생체 의료기술 개발 및의료 실습 대상으로 주로 사용되고 있습니다. 또한 이종조직 원료 공급원으로도 그 가치를 인정 받고 있습니다.

제주 미니피그는 FAO(UN 산하 농업식량기구)에 등록된 유전적으로 고정된 한국 고유 재래종으로서 사람의 인체와 유전적·해부적·생리학적으로 굉장히 유사합니다. 또한 나고야 의정서(생물다양성협약의 세가지 목표 중 '공정한 이익공유'를 달성하기위한 국제적 규범을 규정한 것으로 타국가의 유전자원을 이용하기 위해서는 자원보유국의 승인절차가 필요하며, 이를 이용하여 이익이 발생하였을 시 이익 공유에 관한내용이 담긴 협약)에 의한 분쟁의 소지가 전무합니다. 당사의 미니피그는 제주 재래돼지 독자 유전형질을 보유한 종으로 유전자 조작, 무균화, 약물처리 등을 통해 질환모델 및 장기이식용 돼지 개발이 가능한 장점이 있으며(외래 도입종의 경우 법적 분쟁 및 로열티 이슈 발생). 또한 외래종 대비 소형으로 실험 핸들링이 우수하고, 경쟁사 대비 가격경쟁력이 우수합니다.최근 유럽 FDA보고서에 의하면 원숭이나 개보다도 신약검증에 있어 우수한 결과를 보이며, 형질전환기술이 발달되어 있기 때문에 인간 질병모델이나 이종장기 생산용 유전자 편집 미니피그 생산이 가능합니다.

본사의 청주 사업장은 급수, 급식, 오물처리, 병성검증, 공조 등의 자동화 및 설비의 대형화를 통해 기존 미니피그 생산기업과 비교할 경우 품질, 생산성, 비용 등에서 월등한 장점이 있어 향후 가격경쟁력 및 품질 두 가지 측면에서 모두 상대우위를 유지할 것으로 기대됩니다. 당사는 2019년 7월 식품의약품안전처에서 우수실험동물생산시설로 지정되었고, 실험동물의 생산 및 관리는 엄격한 환경 기준과 위생 관리를 통해 안전하게 이루어 지고 있으며, SPF(Specific Pathogen Free) 수준의 청정도(Class 10,000) 유지하고 있습니다. 아래는 당사의 실험동물 생산관리 시설입니다..

2) 병성검증시스템(PCR법)당사는 미니피그의 품질관리를 위해 항원검사법(PCR)을 통한 표준시험검사법을 확립하였으며, 병성검증 체계를 온전히 구축하고 있습니다. 다음은 당사에서 구축한 항원 병성검증(PCR) 병원체 목록입니다.

당사는 실험동물의 SPF화 확립을 결과 해석을 위한 실험의 신뢰성 제고 및 재현성 확보 측면에서 매우 중요하게 여기고 있습니다. 생산된 형질전환 동물의 상업화 및 대량 생산 라인 조성을 위하여 Specific Pathogen Free (SPF) 병성 검증 시스템을 구축하였으며, 바이러스성/세균성 감염에 대한 진단방법을 개발하고 표준화를 진행하고 있습니다. SPF 병성검사 항목의 설정은 FELASA (Federation of European Laboratory Animal Sciecne Associations)와 National SPF Swine Accerditiing Agency의가이드라인을 따르고 있습니다.

다 . CRO사업 부문 1) CRO사업 현황

당사는 2012년 5월에 설립되어 신약 및 의료기기 시제품 개발에 필요한 비임상 유효성 평가(CRO) 사업을 영위하는 중소기업으로, 바이오의료 분야에서 실험 및 의료용으로 사용되는 미니피그의 생육,공급과 및 콜라겐 등 생체재료 원료까지 사업영역을 확대하고 있습니다.

국가 신성장 동력 산업인 바이오 산업의 근간을 이루는 생물자원을 육성, 개발하여 신약 및 의료기기의 개발에서 요구하는 유효성평가시험을 지원하고, 더 나아가 바이오 의료기기 제품생산에서 중요시되는 안전한 원료 소재 공급 체계를 구축하여 주요 바이오 인프라 기업으로서의Value Chain을 구축한 기업을 추구하고 있습니다.

당사의 주요 사업을 도해화하면 다음과 같습니다.

당사의 주력 사업인 CRO 시장의 성장에 있어 핵심요소는 1) 치료혁신, 2) 제조비용 절감, 3) 연구장비 개발, 그리고 4) Late-Stage가 있습니다.

성 장 요 인	1~2년	2~4년	5년 이상

혁신적인 치료 방법의 증가	높음	높음	높음

제약회사와 바이오기술회사의 비용절감정책	높음	높음	높음

연구장비 및 기술의 지속적인 개발	높음	높음	보통

임상시험의 Late-Stage에 대한 서비스	보통	높음	높음

(출처: Global CRO Market, Frost Sullivan, 2015.2)

아웃소싱에서 혁신적인 치료 방법과 약 효능 및 안전성의 중요성이 부각되고 있습니다. 예를 들어 종양, 자가 면역질환, 심혈관 질환, 전염병, 신진대사질환 등의 질병발병률의 증가는 향상된 치료에 대한 수요가 발생하고 약물의 기능뿐만 아니라 다른 인종 간의 효능과 안전성을 확인해야 하는 바, CRO에 대한 중요성은 높아질 수 밖에 없습니다.

제약회사와 바이오기술회사의 비용절감은 CRO 시장 성장을 견인할 것으로 예상됩니다. 최근 각 제약회사들은 약가 압력, 특허 만료, 제네릭 의약품, 블록버스터 의약품 등의 문제와 바이오기술회사의 제조비용에 대한 비용 절감을 위해 CRO 회사와의계약이 증가하고 있는 추세입니다.

CRO 기업들에게 아웃소싱을 촉진하는 주 원인으로 제약기업들의 연구장비 및 기술의 지속적인 개발이 있습니다. 중소 제약회사와 바이오의약품회사는 연구장비와 기술개발의 큰 비용 때문에 CRO 기업들에게 아웃소싱이 증가할 것으로 예상됩니다.

Late-Stage 서비스는 최근 신약개발후보물질이 감소하고 있어 임상시험의 Late-Stage에서 성공률을 높이는 것이 중요하기 때문에 CRO 시장의 성장을 이끌 요인으로 주목됩니다.

한편, CRO 시장의 성장에 있어 저해 요인은 1) 숙련된 인력부족, 2) 대형회사의 내부R 및 임상시험, 3) CRO 기업의 질 낮은 서비스 제공, 4) 임상시험의 표준화 등이 있습니다.

세계 CRO 시장은 제약 및 생명공학 기업의 비임상, 임상 시험을 수행하는 단계별로 구성되어 있습니다. 시장은 당사가 영위하는 비임상뿐만 아니라, 임상 1상 ~ 3상, 기타(후보물질, 임상4상 등)로 구분되며, 임상 3상의 시장이 전체의 24.6%로 가장 큰 비중을 차지하고 있습니다.

출처: Global CRO Market : Quantitative Assessment, Frost Sullivan(2011.6)

2) 시험분야별 기술보유 현황1. 치과

구분	동물종	실험종류

치과	rabbit, dog, pig	Implant 식립 평가 시험	골이식재 효능 평가 시험

(1) Implant 식립 평가 시험 시험동물의 치아 발치 후 implant 식립 후 4, 8, 12주 implant의 식립평가

(조직분석, micro-ct, remove torque, RT)

(2) 골이식재 효능 평가 시험시험동물의 하악 Calvaria, TIBIA에 임의의 골결손부를 만든 후 골이식재를 식립하여 기간별 신생골량을 평가하여 골이식재의 효능을 평가(조직분석, micro-ct)

2. 약물실험(1) 시험방법시험동물에게 약물을 투약(PO, IM, IV, SC) 후 시간경과별 혈액샘플을 채취하여 약물의 시간별 채내 흡수량을 측정하여 약물의 효능을 평가(2) 시험동물 : dog, pig 3. 고주파의료기기 평가시험(1) 시험방법돼지의 피부는 사람과 매우 유사하여 고주파의료기기의 효능 및 안전성 평가시험을 진행, 고주파의료기기의 효능은 주름개선효능과 지방분해 효능으로 혈액검사를 통하여 안전성평가를 진행(혈액검사, 조직분석, 육안관찰을 병행)(2) 시험동물 : pig 4. Wound healing 평가시험(1) 시험방법돼지의 피부에 임의의 defect를 만든 후 30일간 상처의 회복능을 관찰하여 제품의 효능을 평가(면적측정, HT100, 조직분석)(2) 시험동물 : pig 5. 정형외과(1) 시험방법

중동물을 이용하여 사람과 동일한 크기의 의료기기 및 의료장비의 효능 및 안전성을 평가(인체 대체물 이식시험, 의료장비 평가)

(2) 시험동물 : dog, pig