파일:Antibiotic sensitivity 감수성 검사의 예시. 항생제가 포함된 얇은 종이 디스크를 세균이 자란 한천배지에 올려놓는다. 세균이 감수성을 가지는 항생제라면 디스크 주변에서는 자랄 없게 된다. 세균이 자라지 못하는 구역은 'inhibition zone'(억제 구역)이라고 한다.|alt=See caption. '''항생제 감수성 sensitivity testing, antibiotic susceptibility testing)는 세균이 항생제에 얼마나 민감한지(=감수성을 가지는지) 측정하는 방법이다. 이런 검사가 필요한 이유는 세균이 어떤 항생제에는 내성을 가질 있기 때문이다. 의사는 처음에 감염 부위와 흔한 세균에 대한 정보를 바탕으로 경험적 치료를 시행한다. 감수성 검사는 병원체의 정확한 항생제 감수성 정보를 알아내 사용하던 항생제를 바꾸고, 정확한 치료를 있다. 감수성 검사는 보통 의학 연구실에서 시행하며, 세균을 배양해 항생제에 노출시키거나 세균이 내성 유전자를 가지는지 유전적 검사를 사용해 있다. 배양법에서는 세균을 균등하게 접종한 한천배지에 항생제가 포함된 종이 디스크를 놓는다. 세균이 성장하지 못한 구역의 지름을 측정해서 감수성을 알아낸다. 세균의 성장을 멈출 있는 가장 낮은 항생제 농도인 최소 저지 농도는 억제 구역의 크기를 통해 추정할 있다. 항생제 감수성 검사는 베타-락탐계열 항생제인 페니실린의 발견 이후 필요하게 되었다. 초기 방법들은 배양이나 희석을 통해 표현형을 알아내는 방식이었다. 항생제가 스며들게 띠(antibiotic impregnated strip)를 이용하는 E테스트는 1980년대 이후, 중합효소 연쇄 반응(PCR) 같은 유전적인 검사법은 2000년대 이후로 사용할 있게 되었다. 현대의 검사법을 빠르고 정확하게 개선하거나, 미세유체역학 등의 새로운 방법을 개발하기 위한 연구가 진행 중이다. == 용도 == 임상의학에서 항생제는 환자의 증상과 의학 가이드라인을 바탕으로 처방하는 경우가 가장 많다. 이런 식으로 처방할 항생제를 고르는 방법은 경험적 치료라고 한다. 경험적 치료는 어떤 세균이 감염을 일으키고, 세균이 어떤 항생제에 감수성이나 내성을 가지는지에 대한 지식을 기반으로 한다. 예를 들어 단순 요로감염증은 트리메토프림/설파메톡사졸로 치료할 있다. 이렇게 처방할 있는 이유는 coli'')이 가장 원인균일 가능성이 높고 해당 조합 항생제에 감수성을 가지기 때문이다. 그러나 세균은 여러 항생제 종류에 내성을 가질 수도 있다. 내성을 가지는 이유에는 세균이 일부 항생제에 대해 선천적으로 내성을 가지는 경우, 항생제에 과거에 이미 노출되어 내성이 생긴 경우, 플라스미드와 같은 다른 외부 요인으로 인해 내성을 획득한 경우 등이 있다. 항생제 감수성 검사는 어떤 항생제를 사용해야 감염을 치료할 가능성이 높은지 정보를 알려준다. 또한 일부 국가에서는 스크리닝의 형식으로 인구 수준에서 항생제 감수성 검사를 수행하기도 한다. 이런 검사를 하는 이유는 항생제에 대한 내성 비율(메티실린 내성 황색포도상구균 등)을 알아내고 가이드라인 설립과 공중보건에 이용할 있기 때문이다. == 방법 == 미생물 배양을 통해 세균을 동정한 이후에는 감수성 검사를 통해 항생제를 선택할 있다. 감수성 검사법은 세균을 항생제에 노출시켜 항생제로 인해 세균의 성장이 변하는 양상을 관찰하는 방식(표현형 검사, phenotypic testing)이나, 특정 유전적 표지자를 확인하는 방식(유전적 검사, genetic testing)에 기초한다. 검사 결과에서 내성이 있는지 없는지를 따지는 정성적인 방법이 사용되기도 하며, 최소 저지 농도(MIC)를 이용하여 세균이 항생제 감수성을 가지는 항생제 농도를 정량적으로 알아낼 수도 있다. 항생제 감수성 검사 결과에는 기구 사용 실패, 온도, 습도, 항생제의 효능 많은 요인이 영향을 미친다. 정도관리(quality control, QC)를 통해 검사 결과의 정확성을 확실히 있다. ATCC(American Type Culture Collection)나 NCTC(National Collection of Type Cultures) 같은 조직은 정도관리에 사용할 있도록 내성 표현형이 알려진 균주 정보를 제공한다. === 표현형 검사 === clear test tubes containing solutions of successively increasing turbidity.|왼쪽부터 0.5, 1, 맥팔랜드 표준. 항생제를 세균에 노출시키는 검사법은 한천배지를 사용하거나, 한천배지나 액체배지에 희석시키는 방법을 사용한다. 항생제는 성장시킬 세균에 따라 선택한다. 결과를 정확하게 하기 위해 배지에 세균을 접종하는 농도에 표준이 세워져야 한다. 이때 맥팔랜드 표준(주어진 세균의 농도와 동등한 탁도를 가지는 용액)과 식염수나 액체배지에 있는 세균의 탁도를 비교한다. 눈으로 관찰하거나 광도를 측정하여 판단했을 적정 농도(대개 0.5 맥팔랜드 표준)에 도달하면 배지에 접종한다. ==== 수동식 ==== 디스크 확산 검사는 균주를 선택해 한천배지에 놓고, 항생제가 포함된 디스크 근처에서 세균이 성장하는지를 관찰하는 검사법이다. 검사법은 method)으로도 불리며 수정된 검사법이 사용되기도 한다. 간혹 소변 검사 표본이나 혈액 배양 양성 표본을 동정 과정을 생략하고 검사 배지에 바로 사용하기도 한다. 항생제가 미생물 성장을 억제한다면 디스크 주변에 투명한 고리 모양의 억제 구역이 보이게 된다. 최소 저지 농도와 관계를 가지는 억제 구역의 크기를 기준으로 세균은 항생제에 대한 감수성이 있는 경우, 중간 정도의 경우, 내성을 가진 경우로 나뉜다. 파일:E-test 묻힌 플라스틱 띠를 이용하는 E테스트. alt=Bacteria are growing on an agar plate upon which strip containing varying concentrations of antibiotics has been placed. An elliptical zone without growth is present around areas with higher concentrations of the antibiotic. 뮐러 힌튼 배지를 디스크 확산 검사에서 자주 사용한다. (CLSI)와 (EUCAST)는 한천배지의 종류와 깊이, 배양 온도, 결과 분석법 등에 대한 표준을 제공하고 있다. 디스크 확산은 감수성 검사에 사용되는 방법들 가장 싸고 간단하다고 생각되며 새롭게 사용할 있게 항생제나 제제를 시험하는 데에 쉽게 맞춰서 사용할 있다. 일부 배양이 까다롭거나 느리게 성장하는 미생물은 디스크 확산법으로 정확히 검사하기 힘들다. 반면 종들이나 헤모필루스 influenzae'') 등은 검사가 가능하지만 특별한 배지와 배양 조건이 필요하다. E테스트와 같이 차이(gradient)를 이용하는 방법은 한천배지와 플라스틱 끈을 이용한다. 여러 다른 농도의 항생제를 묻힌 플라스틱 끈을 배지에 위치시킨 배양 기간만큼 시간이 지나면 배지를 관찰한다. 최소 저지 농도는 물방울 모양의 성장이 억제된 구역이 끈과 교차하는 지점의 위치를 통해 확인할 있다. 이런 방식의 검사도 확산 검사로 간주된다. 한천배지와 액체배지 희석법에서는 세균을 항생제 농도가 각기 다른 여러 개의 작은 관에 넣는다. 세균이 항생제에 감수성을 가지는지 여부는 배양 기간이 지난 눈으로 관찰하거나 자동화된 광학적 방법으로 판단한다. 액체배지 희석법은 표현형 검사법에서 표준으로 여겨진다. 세균의 성장을 억제하는 가장 낮은 농도가 최소 저지 농도로 간주된다. ==== 자동식 ==== 자동화 시스템은 수동식 검사 과정을 모방하여 만들어졌다. 예를 들어 이미징과 소프트웨어 분석을 통해 확산 검사의 억제 구역을 기록한다. VITEK-2, BD Phoenix, Microscan systems 등의 자동화 기기들이 항생제 감수성 검사에 가장 흔하게 사용된다. 각각의 기구들의 사양은 다르지만 기본적인 원리는 세균 현탁액을 미리 만들어진 항생제 패널에 넣는 것이다. 패널에서 세균이 배양되며 항생제에 의해 세균 성장이 억제되면 비탁법, 분광광도법, 형광 탐지법 등을 통해 억제 정도를 자동적으로 측정한다. 전문가 시스템이 최소 저지 농도를 감수성 검사 결과와 연관짓고, 결과는 확인과 기록을 위해 실험실 정보 관리 시스템으로 자동으로 전송된다. 이런 자동화 검사법은 수동식 검사법보다 노동집약적이며 표준화되어 있지만, 특정 생명체와 항생제에 대해서는 정확성이 비교적 부족할 있다. 따라서 디스크 확산 검사는 예비 검사법으로서 여전히 유용하다. === 유전적 방법 === 중합효소 연쇄 반응(PCR), DNA 마이크로어레이, DNA 칩, LAMP법 등의 유전적 검사법을 통해 세균에 유전자 내성을 부여하는 유전자를 검출할 있다. 하나의 예시는 황색포도상구균에서 베타락탐 내성 유전자인 ''mecA''를 검출하기 위해 PCR을 사용하는 것이다. 다른 예시에는 엔테로코커스 종들의 반코마이신 내성 유전자인 ''vanA''와 ''vanB'', 또는 녹농균, 폐렴간균, 대장균의 항생제 내성 유전자를 검사하기 위한 어레이 등이 있다. 이런 검사법들은 위의 사람이 관찰하는 방법들보다 빠르고 직접적이라는 이점이 있으며 유전자가 존재한다면 검출해 가능성도 높다. 그러나 유전적 검사에서 내성 유전자가 검출되었는지 여부가 언제나 표현형 검사 결과에서 나온 내성 유무와 일치하지는 않는다. 또한 유전적 검사는 비용이 비싸며 특별히 훈련된 인원이 필요하다. PCR은 항생제 감수성과 관련된 유전자를 확인할 있는 방법이다. PCR이 일어나는 과정에서 세균의 DNA는 변성되며 이중 나선 가닥이 서로 분리된다. 다음으로는 분리된 DNA가 포함된 용액에 DNA의 특정 부위에 특이적으로 결합하는 프라이머를 추가하고, DNA 중합효소와 함께 DNA 합성에 필요한 분자들(뉴클레오타이드, 이온 등)이 들어간 혼합물도 집어 넣는다. 만약 관련 유전자가 존재한다면 과정이 반복될 때마다 표적 유전자의 양이 배씩 늘어난다. PCR 과정 이후 유전자가 존재하는지 여부는 전기영동, 서던 블로팅, 기타 다른 DNA 시퀀싱 분석법 여러 가지 방법들을 이용해 확인한다. DNA 마이크로어레이와 DNA 칩은 표적 유전자나 핵산 서열에 상보적 DNA(cDNA)가 결합하는 것을 이용한다. 이런 방법은 여러 가지 유전자들을 동시에 확인 가능하다는 장점이 있다. == 참고 문헌 == == 각주 == 분류:항생물질 분류:미생물학 기술 분류:감염병