Clinical trial NCT04279613
Conditions: Type I Diabetes
Sponsor: National Institute of Diabetes and Digestive and Kidney Diseases (NIDDK)
Start date: 2020-11-23; Completion date: 2024-04-24
Enrollment: 47 participants; Allocation: RANDOMIZED; Intervention model: SEQUENTIAL

Brief summary:
The trial is a placebo-controlled, double-blinded within cohorts, randomized, multiple ascending dose trial with a sequential trial design. The primary outcome is to investigate the safety and tolerability of ascending subcutaneous weekly doses of NNC0361-0041 plasmid in patients with T1D.

Detailed description:
A total of 48 patients with T1D are planned to be studied in 4 cohorts of 12 patients (9 on active and 3 on placebo treatment). Within each cohort, sentinel enrollment will occur and safety assessment will occur before remaining participants are enrolled. The treatment period will be 12 weeks with once weekly dosing leading to 12 doses in total. Dose escalation will occur after data safety review (as described in section 4.9.2). An MMTT to assess insulin secretion will be done at baseline, 1, 3, 6, and 12 months. The follow-up (FU) period will be 1 week after the last dose, as well as 4, 6 and 12 months after the first dose.

Arms: arm 1: Dosage form: 9 mg/ml Solution for injection Route of administration: Subcutaneous Initial dose/Unit dose strength(s)/Dosage level(s) in cohort 1: 1mg Additional doses in cohorts 2, 3, and 4: 5mg, 12.5mg and 25mg Dosing instructions: Once weekly on site arm 2: Dosage form: Solution for injection Route of administration: Subcutaneous Dosing instructions: Once weekly on site
Interventions: intervention 1: NNC0361-0041 intervention 2: Placebo
Intervention descriptions: intervention 1: Recombinant supercoiled plasmid encoding four human proteins: (pre-proinsulin (PPI), transforming growth factor β1 (TGF-β1), interleukin-10 (IL-10), and interleukin-2 (IL-2) is administered s.c. via syringe and needle. intervention 2: Placebo

Protocol documents:
Prot_000.pdf: 
T O P P L E T 1 D  
A m ulti pl e a s c e n di n g d o s e tri al i n v e sti g ati n g s af et y, t ol er a bilit y a n d p h ar m a c o ki n eti c s 
of N N C 0 3 6 1 -0 0 4 1 a d mi ni st er e d s u b c ut a n e o u sl y t o p ati e nt s wit h t y p e 1 di a b et e s 
m ellit u s  
Pr ot o c ol V er si o n 3. 0  J a n u ar y 7, 2 0 2 2 
N C T 0 4 2 7 9 6 1 3  


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 of 4 4  
  
 
 
 
 
T O P P L E T 1 D  
A m ulti pl e a s c e n di n g d o s e tri al i n v e sti g ati n g s af et y, t ol er a bil it y a n d p h ar m a c o ki n eti c s of 
N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 a d mi ni st er e d s u b c ut a n e o u sl y t o p ati e nt s wit h t y p e 1 di a b et e s m ellit u s 
 
 
 
Tri al P h a s e: 1  
( Pr ot o c ol T N- 2 7) 
V E R SI O N 3. 0 
J a n u ar y 7, 2 0 2 2 
 
Pr e- a s si g n e d S u b mi s si o n Tr a c ki n g N u m b er ( S T N): I N D 2 4 2 5 2          
 
 
S p o n s or e d b y t h e N ati o n al I n stit ut e of Di a b et e s a n d Di g e sti v e a n d Ki d n e y Di s e a s e s ( NI D D K)  


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 of 4 4  
P R E F A C E 
 
T h e T y p e 1 Di a b et e s Tri al N et Pr ot o c ol T N- 2 7, N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 i n N e w O n s et T y p e 1 Di a b et e s, 
d e s cri b e s t h e b a c k gr o u n d, d e si g n, a n d or g a ni z ati o n of t h e st u d y .   
 
T h e pr ot o c ol will b e m ai nt ai n e d b y t h e Tri al N et C o or di n ati n g C e nt er o v er t h e c o ur s e of t h e st u d y 
t hr o u g h  n e w  r el e a s e s  of  t h e  pr ot o c ol,  or  i s s u a n c e  of  u p d at e s  eit h er  i n  t h e  f or m  of  r e vi si o n s  of 
c o m pl et e c h a pt er s or p a g e s t h er e of, or i n t h e f or m of s u p pl e m e n t al pr ot o c ol m e m or a n d a. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 of 4 4  
A b br e vi ati o n s 
A D A  
A m eri c a n Di a b et e s A s s o ci ati o n  
A E  
A d v er s e e v e nt 
A U C  
Ar e a U n d er C ur v e 
A P C  
A nti g e n- pr e s e nti n g c ell 
B MI  
B o d y M a s s I n d e x 
C B C  
C o m pl et e bl o o d c o u nt 
C D  
cl u st er of diff er e nti ati o n ( C D 2 5, C D 6 9, C D 7 4, C D 2 1 0) 
C F R  
C o d e of F e d er al R e g ul ati o n s 
c G M P  
C urr e nt G o o d M a n uf a ct uri n g Pr a cti c e 
C H O  
C ar b o h y dr at e s 
C M V  
C yt o m e g al o vir u s  
C O VI D- 1 9  
C or o n o a vir u s Di s e a s e 2 0 1 9 
C R F  
C a s e r e p ort f or m 
C R S  
C yt o ki n e R el e a s e S y n dr o m e 
DI A  
Dr u g-i n d u c e d a nti b o d y 
D P T- 1   
Di a b et e s Pr e v e nti o n Tri al of T y p e I Di a b et e s 
D S M B  
D at a a n d S af et y M o nit ori n g B o ar d 
E B V  
E p st ei n- B arr vir u s 
F D A  
U S F o o d a n d Dr u g A d mi ni str ati o n  
F W A  
F e d er al- wi d e A s s ur a n c e 
G A D  
Gl ut a m at e d e c ar b o x yl a s e 
G C P  
G o o d Cli ni c al Pr a cti c e 
H b A 1 c  
H e m o gl o bi n A 1 c 
H B s A g  
H e p atiti s B s urf a c e a nti g e n 
HI V  
H u m a n i m m u n o d efi ci e n c y vir u s 
I C A  
I sl et c yt o pl a s mi c a nti b o di e s 
I E C  
I n d e p e n d e nt Et hi c s C o m mitt e e 
I G R A  
I nt erf er o n- γ r el e a s e a s s a y s 
I N D  
I n v e sti g ati o n al N e w Dr u g 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 4 of 4 4  
I R B 
I n stit uti o n al R e vi e w B o ar d 
J C 
J o h n C u n ni n g h a m Vir u s 
J D R F 
J u v e nil e Di a b et e s R e s e ar c h F o u n d ati o n 
M A P 
M e c h a ni sti c A n al y si s Pl a n 
NI D D K 
N ati o n al I n stit ut e f or Di a b et e s a n d Di g e sti v e a n d Ki d n e y Di s e a s e 
NI H 
N ati o n al I n stit ut e of H e alt h 
N CI- C T C A E  
N ati o n al C a n c er I n stit ut e C o m m o n T er mi n ol o g y Crit eri a f or A d v er s e 
E v e nt s  
N O D 
N o n o b e s e di a b eti c 
O G T T 
Or al Gl u c o s e T ol er a n c e T e st 
O H R P 
Offi c e f or H u m a n R e s e ar c h Pr ot e cti o n s 
P B M C 
P eri p h er al Bl o o d M o n o n u cl e ar C ell 
P C R 
P ol y m er a s e c h ai n r e a cti o n 
P D 
P h ar m a c o d y n a mi c s  
PI 
Pri n ci p al I n v e sti g at or 
P K 
P h ar m a c o ki n eti c s  
P M L 
Pr o gr e s si v e 
M ultif o c al L e u k o e n c e p h al o p at h y
Q A 
Q u alit y A s s ur a n c e  
S A E 
S eri o u s a d v er s e e v e nt 
S A P 
St ati sti c al A n al y si s Pl a n 
S C 
S u b c ut a n e o u s F or m ul ati o n 
S O E 
S c h e d ul e of e v e nt s 
S O P   
St a n d ar d o p er ati n g pr o c e d ur e 
T 1 D 
T y p e 1 di a b et e s m ellit u s 
Z n T 8 
Zi n c Tr a n s p ort er 8 
 
 
 
 
 
 
 
 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 5 of 4 4  
 
T A B L E O F C O N T E N T S 
1  
I N T R O D U C TI O N .................................................................................................................... 7 
1. 1  
St u d y O v er vi e w ........................................................................................................... . 7 
2  
B A C K G R O U N D A N D SI G NI FI C A N C E ................................. ................................................. 8 
2. 1  
I ntr o d u cti o n .............................................. .................................................................... 8 
 2. 2         St u d y A g e nt: N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 ......................... ........................................................... 1 1 
3  
S T U D Y D E SI G N ............................................................................................................... ... 1 3 
3. 2  
E ntr y Crit eri a ............................................ .................................................................. 1 4 
3. 2. 1  
I n cl u si o n Crit eri a ..................................................................................................... 1 4 
3. 2. 2  
E x cl u si o n Crit eri a ...................................... ............................................................. 14 
3. 3  
St u d y A s s e s s m e nt s ......................................... .......................................................... 1 6 
3. 4  
Q u alit y A s s ur a n c e ...................................................................................................... 1 6 
3. 5  
P o st-tr e at m e nt F oll o w- u p ........................................................................................... 1 6 
4  
P A R TI CI P A N T M A N A G E M E N T ........................................................................................... 1 6 
4. 1  
S cr e e ni n g ................................................. .................................................................. 1 6 
4. 2  
R a n d o mi z ati o n a n d Tr e at m e nt Vi sit ........................................................................... 1 6 
4. 3  
I nt e n si v e Di a b et e s M a n a g e m e nt ............................................................................... 1 7 
4. 4  
O v er vi e w of Tr e at m e nt s A d mi ni st er e d ....................... ................................................ 1 7 
4. 4. 1  
R ati o n al e of D o si n g Pl a s mi d N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 ................ ........................................ 1 7 
4. 4. 2  
D o si n g a n d D o s e Wit h h ol di n g Crit eri a .................... ............................................... 1 8 
4. 5  
I nf e cti o u s Di s e a s e S cr e e ni n g .............................. ...................................................... 1 8 
4. 6  
M et a b oli c M o nit ori n g .................................................................................................. 1 9  
4. 7  
C o n c o mit a nt M e di c ati o n ............................................................................................ 1 9 
4. 8  
E nr oll m e nt S c h e d ul e O v er vi e w .............................. .................................................... 1 9 
4. 9  
O n g oi n g E nr oll m e nt D e ci si o n s ................................................................................... 2 0 
4. 9. 1  
Wit hi n C o h ort: E v al u ati o n of s e nti n el d o si n g ............ .............................................. 2 0 
4. 9. 2  
B et w e e n C o h ort s: E v al u ati o n of a c c u m ul at e d d at a ................................................ 2 0 
4. 9. 3  
P arti ci p a nt R e pl a c e m e nt ................................. ....................................................... 2 0 
4. 1 0  
I nt err u pti o n of E nr oll m e nt/ Tri al C e s s ati o n .................................................................. 2 1 
5  
S T U D Y A S S E S S M E N T S ........................................... .......................................................... 2 1 
5. 1  
G e n er al A s s e s s m e nt s ....................................... ......................................................... 2 1 
5. 2  
L a b or at or y A s s e s s m e nt s .................................... ....................................................... 2 1 
5. 3  
M e c h a ni sti c O ut c o m e A s s e s s m e nt s .......................................................................... 2 2 
5. 4  
M et a b oli c O ut c o m e A s s e s s m e nt s .............................................................................. 2 2 
5. 5  
Vi sit Wi n d o w s ............................................................................................................. 2 2 
5. 6  
Wit h dr a w al fr o m tr e at m e nt ................................. ........................................................ 2 3 
6  
P A R TI CI P A N T S A F E T Y .......................................... ............................................................ 2 3 
6. 1  
G e n er al St u d y A g e nt s c o n si d er ati o n s ........................................................................ 2 4 
6. 1. 1  
Pl a s mi d ................................................................................................................... 2 4 
6. 1. 2  
V e ct or C o n si d er ati o n s: .................................. ......................................................... 2 4 
6. 1. 3  
Dr u g C o n si d er ati o n s: .............................................................................................. 2 4 
6. 1. 4  
I m m u n o m o d ul at or y A g e nt s: ................................ ................................................... 2 4 
6. 2  
P ot e nti al Ri s k s ........................................... ................................................................ 2 5 
6. 2. 1  
A c c el er ati o n of B et a C ell D e str u cti o n ................... .................................................. 2 5 
6. 2. 2  
H y p er s e n siti vit y, All er gi c , a n d I nj e cti o n sit e r e a cti o n s ............................................ 2 5 
6. 3  
Pr ot e cti n g A g ai n st or Mi ni mi zi n g Ri s k s. ................... .................................................. 2 6 
6. 3. 1  
I nf e cti o u s Di s e a s e ...................................... ............................................................ 2 6 
6. 3. 2  
G e n er al pr e c a uti o n s ..................................... .......................................................... 2 8 
6. 4 
Pr e g n a n c y .................................................................................................................. 2 8 
6. 5  
H y p er s e n siti vit y or A n a p h yl a xi s ........................... ...................................................... 2 8 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 6 of 4 4  
7  
A D V E R S E E V E N T R E P O R TI N G A N D S A F E T Y M O NI T O RI N G ............... .......................... 2 9 
7. 1  
A d v er s e E v e nt D efi niti o n ............................................................................................ 2 9 
7. 1. 1  
A d v er s e E v e nt ........................................................................................................ 2 9 
7. 1. 2  
A d v er s e R e a cti o n ................................................................................................... 2 9 
7. 1. 3  
S eri o u s A d v er s e E v e nt/ R e a cti o n ............................................................... ............. 3 0 
7. 1. 4  
U n e x p e ct e d A d v er s e E v e nt .................................................................................... 3 1 
7. 1. 5  
Gr a di n g E v e nt S e v erit y a n d C a u s alit y .................................................................... 3 1 
7. 2  
A d v er s e E v e nt R e p orti n g a n d M o nit ori n g .................................................................. 3 1 
7. 2. 1  
A d v er s e E v e nt T a b ul ati o n s .................................................................................... 3 2 
8  
S T A TI S TI C A L C O N SI D E R A TI O N S A N D A N A L Y SI S P L A N). ............................................. 3 2 
8. 1  
Pri m ar y O ut c o m e a n d A n al y s e s .............................. .................................................. 3 3 
8. 2  
S e c o n d ar y O ut c o m e a n d A n al y s e s ............................................................................ 3 3 
8. 3  
A d diti o n al O ut c o m e s a n d A n al y s e s .......................... ................................................. 3 3 
8. 4  
T ar g et E n g a g e m e nt, M e c h a ni sti c O ut c o m e s a n d E x pl or at or y A n a l y si s .................... 3 3 
8. 5  
St ati sti c al C o n si d er ati o n s f or A s s e s s m e nt of W or s e ni n g of I n s uli n S e cr eti o n. .......... 3 4 
8. 6  
I nt eri m M o nit ori n g Pl a n .............................................................................................. 3 4 
9  
E T HI C A L C O N SI D E R A TI O N S A N D C O M P LI A N C E WI T H G O O D C LI NI C A L P R A C TI C E . 3 4 
9. 1  
St at e m e nt of C o m pli a n c e ........................................................................................... 3 4 
9. 2  
P arti ci p ati n g C e nt er s .................................................................................................. 3 5 
9. 3  
I nf or m e d C o n s e nt ...................................................................................................... 3 5  
9. 4  
St u d y S u bj e ct C o nfi d e nti alit y ............................. ........................................................ 3 6 
9. 5  
Ri s k s a n d B e n efit s ..................................................................................................... 3 6 
1 0  S T U D Y A D MI NI S T R A TI O N ....................................... .......................................................... 3 6 
1 0. 1  
Or g a ni z ati o n al Str u ct ur e ................................. ........................................................... 3 6 
1 0. 2  
R ol e of I n d u str y ......................................... ................................................................. 3 6 
1 0. 3  
Gr o u p s a n d C o m mitt e e s ............................................................................................ 3 6 
1 0. 3. 1  
T N 2 7 St u d y C h air C o m mitt e e ............................. ................................................... 3 6 
1 0. 3. 2  
Tri al N et C h air m a n’ s Offi c e a n d T N C C .................... ............................................... 3 6 
1 0. 3. 3  
Cli ni c al Sit e s ......................................... .................................................................. 3 7 
1 0. 3. 4  
M e di c al M o nit or ...................................................................................................... 3 7 
1 0. 3. 5  
Cli ni c al Sit e M o nit ori n g ............................... ............................................................ 3 7 
1 0. 3. 6  
D at a S af et y a n d M o nit ori n g B o ar d ( D S M B) ................ ........................................... 3 7 
1 0. 3. 7  
T h e N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o u p .................................................................... 3 7 
1 0. 4  
S a m pl e a n d D at a St or a g e .......................................................................................... 3 8 
1 0. 5  
Pr e s er v ati o n of t h e I nt e grit y of t h e St u d y ................................................................... 3 8 
1 0. 6  
P arti ci p a nt R ei m b ur s e m e nt a n d C o m p e n s ati o n ............... ......................................... 3 8 
S c h e d ul e of A s s e s s m e nt s ............................................................................................................ 3 9 
1 1  R E F E R E N C E S.................................................. ................................................................... 4 1 
 
 
 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 7 of 4 4  
1 
I N T R O D U C TI O N 
1. 1 St u d y O v er vi e w 
Titl e  
N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 i n N e w O n s et T y p e 1 Di a b et e s 
I N D S p o n s or  
 N ati o n al  I n stit ut e  of  Di a b et e s  a n d  Di g e sti v e  a n d  Ki d n e y  Di s e a s e s 
( NI D D K) 
C o n d u ct e d B y  
T y p e 1 Di a b et e s Tri al N et w or k ( Tri al N et) 
Pr ot o c ol C h air  
R o bi n S. G ol a n d, M D 
A c cr u al O bj e cti v e  
T o  a s s e s s  s af et y  a n d  t ol er a bilit y  a s  w ell  a s t ar g et  e n g a g e m e nt  a n d 
p h ar m a c o ki n eti c s ( P K) i n p ati e nt s wit hi n 4 y e ar s of di a g n o si s o f T 1 D 
St u d y D e si g n  
T h e  tri al  i s  a  pl a c e b o- c o ntr oll e d,  d o u bl e- bli n d e d 
wit hi n  c o h ort s, 
r a n d o mi z e d, m ulti pl e a s c e n di n g d o s e tri al wit h a st a g g er e d tri al d e si g n. 
A t ot al of 4 8 p ati e nt s wit h T 1 D ar e pl a n n e d t o b e st u di e d i n 4 c o h ort s of 
1 2 p ati e nt s ( 9 o n a cti v e a n d 3 o n pl a c e b o tr e at m e nt).  
Tr e at m e nt 
D e s cri pti o n 
R e c o m bi n a nt  s u p er c oil e d  pl a s mi d  e n c o di n g  f o ur  h u m a n  pr ot ei n s:  ( pr e-
pr oi n s uli n ( P PI), tr a n sf or mi n g gr o wt h f a ct or β 1 ( T G F- β 1), i nt er l e u ki n- 1 0 
(I L- 1 0),  a n d  i nt erl e u ki n- 2  (I L- 2)  i s  a d mi ni st er e d  s u b c ut a n e o u sly  vi a 
s yri n g e a n d n e e dl e, o n c e e v er y w e e k f or 1 2 w e e k s. 
St u d y D ur ati o n  
I n di vi d u al s u bj e ct s will b e f oll o w e d f or 1 2 m o nt h s fr o m i niti al d o si n g. 
O bj e cti v e 
T h e  pri m ar y  o bj e cti v e  of  t hi s  st u d y  i s  t o  i n v e sti g at e   t h e  s af et y  a n d 
t ol er a bilit y of a s c e n di n g s u b c ut a n e o u s w e e kl y d o s e s of N N C 0 3 6 1-0 0 4 1 
pl a s mi d i n p ati e nt s wit h T 1 D. 
Pri m ar y O ut c o m e  
T h e pri m ar y e n d p oi nt i s t h e n u m b er of a d v er s e e v e nt s r e c or d e d d uri n g 
t h e o n-tr e at m e nt p eri o d. 
S e c o n d ar y G o al s  
T o i n v e sti g at e eff e ct o n t ar g et e n g a g e m e nt, i m m u n e r e s p o n s e, a n d b et a 
c ell  f u n cti o n  f oll o wi n g  a s c e n di n g  s u b c ut a n e o u s  w e e kl y  d o s e s  of 
N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 pl a s mi d i n p ati e nt s wit h T 1 D 
M aj or I n cl u si o n 
Crit eri a 
Di a g n o s e d wit h T 1 D l e s s t h a n 4 8 m o nt h s pri or, m al e or f e m al e, a g e d 1 8-
4 5 y e ar s, p o siti v e r e s ult s f or ≥1 i sl et a ut o a nti b o d y, p e a k C- p e pti d e of ≥0. 2 
p m ol/ m L aft er mi x e d- m e al t ol er a n c e t e st ( M M T T)  
 
 
 
 


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Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 8 of 4 4  
2 
B A C K G R O U N D A N D SI G NI FI C A N C E 
 
2. 1 I ntr o d u cti o n 
T y p e 1 di a b et e s m ellit u s ( T 1 D) i s a n i m m u n e- m e di at e d di s e a s e i n w hi c h i n s uli n- pr o d u ci n g b et a 
c ell s  ar e  c o m pl et el y  or  al m o st  c o m pl et el y  d e str o y e d,  r e s ulti n g i n  lif e-l o n g  d e p e n d e n c e  o n 
e x o g e n o u s i n s uli n.  It i s a c hr o ni c a n d p ot e nti all y di s a bli n g d i s e a s e t h at r e pr e s e nt s a m aj or p u bli c 
h e alt h a n d cli ni c al c o n c er n.  T h e n u m b er of p ati e nt s b ei n g di a g n o s e d wit h T 1 D i s i n cr e a si n g e a c h 
y e ar ( 1). 
F or  i n di vi d u al s  li vi n g  wit h  T 1 D,  c o nti n u o u s  e x o g e n o u s  i n s uli n  t h er a p y  i s  n e e d e d  t o  pr e v e nt 
k et o a ci d o si s a n d ot h er c at a b oli c eff e ct s of i n s uli n d efi ci e n c y a n d t o pr o m ot e a n a b oli s m f or n or m al 
gr o wt h  a n d  d e v el o p m e nt.    D y n a mi c  i n s uli n  r e gi m e n s,  a c c o u nti n g  f or  c ar b o h y dr at e  i nt a k e  a n d 
e x er ci s e, m u st b e c o m bi n e d wit h fr e q u e nt bl o o d gl u c o s e m o nit ori n g i n or d er t o o pti mi z e gl y c e mi c 
c o ntr ol,  a n d  t o  pr e v e nt  h y p o-  a n d  h y p er gl y c e mi a.    I n  a d diti o n  t o  t h e  u nr el e nti n g  fi n a n ci al  a n d 
p s y c h ol o gi c al b ur d e n s o n p ati e nt s a n d t h eir f a mili e s fr o m d a y-t o- d a y m a n a g e m e nt of t hi s di s e a s e, 
i n di vi d u al s wit h T 1 D ar e at ri s k f or b ot h s h ort-t er m a n d l o n g-ter m c o m pli c ati o n s.   
 
S h ort-t er m c o m pli c ati o n s i n cl u d e s e v er e h y p er gl y c e mi a r e s ulti n g  i n di a b eti c k et o a ci d o si s ( D K A), 
a lif e-t hr e at e ni n g c o n diti o n.  A s r e p ort e d i n t h e S E A R C H st u d y, al m o st o n e-t hir d of i n di vi d u al s u p 
t o 1 9 y e ar s of a g e pr e s e nt wit h D K A at t h e ti m e of cli ni c al di ag n o si s; t h e ri s k w a s hi g h e st f or t h o s e 
a g e s 0 t o 4 ( ~ 3 9 %) a n d l o w e st i n t h e 1 5- 1 9- y e ar- ol d gr o u p ( ~ 2 3 % ) ( 2).  I n a d diti o n t o t h e c o st of 
h o s pit ali z ati o n,  a  r ar e  b ut  si g nifi c a nt  c o n c er n  a s s o ci at e d  wit h   D K A  i s  c er e br al  e d e m a,  w hi c h  i s 
a s s o ci at e d  wit h  a  hi g h  ri s k  f or  m or bi dit y  a n d  m ort alit y  ( 3).  R e c urr e nt  D K A  aft er  t h e  n e w  o n s et 
p eri o d r e m ai n s a si g nifi c a nt cli ni c al pr o bl e m, wit h 3 % of T 1 D E x c h a n g e p arti ci p a nt s e x p eri e n ci n g 
D K A  i n  t h e  pri or  3  m o nt h s.    A n ot h er  si g nifi c a nt a c ut e  ri s k  i s  h y p o gl y c e mi a,  w hi c h  c a n  r e s ult i n 
i m p air e d c o g niti o n a n d if s e v er e, c o m a a n d d e at h ( 4).  L o n g-t er m c o m pli c ati o n s f or t h o s e li vi n g 
wit h  T 1 D  i n cl u d e  vi s u al  i m p air m e nt  a n d  bli n d n e s s,  r e n al  f ail ur e ,  v a s c ul ar  di s e a s e  a n d  li m b 
a m p ut ati o n,  p eri p h er al  n e ur o p at h y,  a n d  str o k e.    T h e  r e s ult a nt  f i n a n ci al  b ur d e n  of  T 1 D  t o  t h e 
aff e ct e d i n di vi d u al, a n d t o s o ci et y, i s of tr e m e n d o u s i m p a ct b u t diffi c ult t o c al c ul at e ( 5); t h e o v er all 
D M  b ur d e n  w a s  r e c e ntl y  e sti m at e d  at  $ 3 2 7  billi o n  i n  t h e  U S,  a c c o u nti n g  f or  1  i n  4  h e alt h  c ar e 
d oll ar s,  wit h  a  2 6 %  i n cr e a s e  fr o m  2 0 1 2  t o  2 0 1 7.  Of  t h e s e,  $ 1 4  b illi o n  ar e  e sti m at e d  i n  T 1 D-
a s s o ci at e d a n n u al h e alt h c ar e c o st s i n t h e U S, c o n s u mi n g m or e t h a n 1 i n 7 h e alt h c ar e d oll ar s ( 6). 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 9 of 4 4  
T h e Di a b et e s C o ntr ol a n d C o m pli c ati o n s 
st u d y ( D C C T) s h o w e d t h at t h e l o n g-t er m 
c o m pli c ati o n s c o ul d b e r e d u c e d wit h n e ar 
n or m al c o ntr ol of gl u c o s e l e v el s, b ut at t h e 
c o st of a n i n cr e a s e d fr e q u e n c y of s e v er e 
h y p o gl y c e mi a ( 7). W hil e t h er e h a v e b e e n 
si g nifi c a nt  i m pr o v e m e nt s  i n  i n s uli n 
a n al o g s  a n d  i n s uli n  d eli v er y  s y st e m s, 
s u c h a s c o nti n u o u s s u b c ut a n e o u s i n s uli n 
i nf u si o n s  wit h  i n s uli n  p u m p s,  c o nti n u o u s 
gl u c o s e  m o nit ori n g,  a n d  h y bri d  cl o s e d 
l o o p  s y st e m s,  n or m al  gl u c o s e  c o ntr ol, 
p arti c ul arl y i n c hil dr e n, i s r ar el y a c hi e v e d 
( 4).  T hi s i s p arti c ul arl y tr u e i n t h e t e e n a g e 
y e ar s,  w h er e  t h e  m e a n  H b A 1 c  a s 
r e p ort e d  i n  2 0 1 5  i s  a s  hi g h  a s  9 %  a n d 
o nl y  1/ 8  ar e  m e eti n g  H b a 1 c  t ar g et s.  
( FI G U R E 1 [ 4]).  Gl y c e mi c c o ntr ol i s al s o 
p o or  a m o n g  a d ult s,  w h er e  l e s s  t h a n  1/ 3  m e et  t ar g et s  a n d  s e v er e h y p o gl y c e mi a  i s  a  c o m m o n 
o c c urr e n c e  i n  t h o s e  wit h  l o n g  st a n di n g  di s e a s e  ( 4).    Stri ki n gl y ,  d e s pit e  t h e  a v ail a bilit y  a n d 
i n cr e a si n g u s e of d e vi c e s t o o pti mi z e gl y c e mi c c o ntr ol, s u c h a s s e n s or s, p u m p s, a n d h y bri d cl o s e d-
l o o p  s y st e m s,  gl y c e mi c  c o ntr ol  h a s  w or s e n e d  o v er  ti m e  ( 4).    M or e o v er,  w hil e  t h e  fr e q u e n c y  of 
l o n g-t er m  c o m pli c ati o n s  i n cl u di n g  e n d  st a g e  r e n al  di s e a s e  i s  d ecr e a si n g  ( 8),  s o m e  d e gr e e  of 
ki d n e y di s e a s e i s s e e n i n virt u all y all t h o s e wit h l o n g- st a n di n g T 1 D ( 9), a n d i n di vi d u al s wit h T 1 D 
c o nti n u e t o h a v e r e d u c e d lif e e x p e ct a n c y ( 1 0, 1 1).   
T 1 D i s a p arti c ul ar b ur d e n t o c hil dr e n a n d t h eir f a mili e s, r e pr e s e nti n g o n e of t h e m o st c o m m o n 
c hr o ni c  c hil d h o o d  di s e a s e s  ( 1 2).    R e c e nt  r e p ort s  hi g hli g ht  c o g n iti v e  d y sf u n cti o n  a n d  str u ct ur al 
c e ntr al  n er v o u s  s y st e m  ( C N S)  c h a n g e s  ( 1 3).  W hil e  T 1 D  c a n  o c c ur  i nt o  a d ult h o o d,  t h er e  i s  a 
bi m o d al p e a k a g e of o n s et, b et w e e n a g e s 4- 7 a n d a g e s 1 4- 1 6 y e ar s ( 1).  T h e w orl d- wi d e i n ci d e n c e 
of T 1 D i s i n cr e a si n g, wit h t h e gr e at e st i n cr e a s e i n c hil dr e n u n d er t h e a g e of 5 y e ar s.   
2. 1. 1 N at ur al Hi st or y a n d St a g e s of T 1 D  
M u c h  i s  k n o w n  a b o ut  t h e  n at ur al  hi st or y  of  t h e  t y p e  1  di a b et e s di s e a s e  pr o c e s s.    B et a  c ell 
d e str u cti o n i s i niti at e d i n g e n eti c all y s u s c e pti bl e i n di vi d u al s  y e ar s b ef or e cli ni c al o n s et of di s e a s e 
( 1 4). T h e a ut oi m m u n e pr o c e s s t h at c a u s e s b et a c ell d e str u cti o n i s cli ni c all y sil e nt a n d c a n o nl y b e 
i d e ntifi e d b y t h e d et e cti o n of a ut o a nti b o di e s i n t h e bl o o d s u c h a s i sl et c ell a nti b o di e s (I C A), a n d 
a ut o a nti b o di e s t o gl ut a mi c a ci d d e c ar b o x yl a s e ( G A D 6 5), i sl et a n ti g e n 2 (I A- 2 A b/I C A 5 1 2), i n s uli n 
( mI A A), zi n c tr a n s p ort er 8 ( Z n T 8 A b) a n d ot h er s ( 1 5, 1 6, 1 7). C o nti n u e d i m m u n e- m e di at e d b et a 
c ell d e str u cti o n i n v ol vi n g b ot h B a n d T c ell s o c c ur s u ntil p h y s i ol o gi c i n s uli n d e m a n d c a n n ot b e m et 
b y t h e r e m ai ni n g b et a c ell s a n d h y p er gl y c e mi a e n s u e s ( 1 8).   
D at a  g at h er e d  fr o m  m ulti pl e  st u di e s  d uri n g  t h e  p a st  3 5  y e ar s  ar e  r e m ar k a bl y  c o n c or d a nt  wit h 
r e g ar d t o t h e pr o gr e s si o n fr o m d e v el o p m e nt of a ut o a nti b o di e s t o cli ni c all y o v ert di s e a s e.  T h e s e 
d at a,  w h et h er  fr o m  st u di e s  of  l o n git u di n al  c o h ort s  f oll o w e d  fr o m  birt h  ( 1 9)  or  cr o s s- s e cti o n all y 
i d e ntifi e d  p o p ul ati o n s  at  ri s k  ( 1 2,  2 0,  2 1,  2 2)  i n di c at e  t h at es s e nti all y all  g e n eti c all y  s u s c e pti bl e 


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Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
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i n di vi d u al s  wit h  m ulti pl e  a ut o a nti b o di e s  will  e v e nt u all y  pr o gr es s  t o  cli ni c al  di s e a s e.    T h u s,  T 1 D 
st art s wit h t h e pr e s e n c e of 2 or m or e 
a ut o a nti b o di e s.    T hi s  o b s er v ati o n 
h a s  l e d  t o  t h e  
c o n c e pt  
of 
pr o gr e s si v e  st a g e s  of  T 1 D  ( 2 3).     
St a g e 1 i s d efi n e d a s t h e pr e s e n c e 
of  ≥  2  a ut o a nti b o di e s  wit h  n or m al 
gl u c o s e  t ol er a n c e.  St a g e  2  i s  t h e 
pr e s e n c e of ≥ 2 a ut o a nti b o di e s, wit h 
a b n or m al  gl u c o s e  t ol er a n c e.  A s 
r e c e ntl y  r e p ort e d,  al m o st  4 0 %  of 
pl a c e b o tr e at e d i n di vi d u al s at St a g e 
2  d e v el o p e d  cli ni c all y  o v ert  T 1 D 
( St a g e 3) wit hi n 1 y e ar ( 2 4). 
T h e  e v e nt u al  t ar g et  p o p ul ati o n  f or  N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1  ar e  t h o s e  at  e arl y  st a g e s  of  T 1 D.  A n y 
i nt er v e nti o n,  w hi c h  c a n  st o p  or  d el a y  t h e  pr o gr e s si o n  t o  cli ni cal  di s e a s e  or  c o m pl et e  l o s s  of 
f u n cti o n al  r e si d u al  β- c ell  m a s s,  i s  si g nifi c a nt  a s  it  m a y  r e d u ce  t h e  b ur d e n  of  li vi n g  wit h  cli ni c al 
di s e a s e a n d/ or pr o vi d e pr ot e cti o n a g ai n st h y p o gl y c e mi a a n d pr o vi d e i m pr o v e d m et a b oli c c o ntr ol 
r e s ulti n g i n a d el a y i n t h e mi cr o a n d m a cr o- v a s c ul ar c o m pli c atio n s of di a b et e s.   
 2. 1. 2 Di s e a s e M o dif yi n g T h er a p y i n T 1 D 
T h er e  ar e  at  l e a st  fi v e  i m m u n ot h er a p e uti c  a g e nt s  t h at  h a v e  b e e n  s h o w n  t o  pr e s er v e  b et a  c ell 
f u n cti o n i n tr e at e d a s c o m p ar e d t o c o ntr ol i n di vi d u al s wit h r e c e ntl y di a g n o s e d cli ni c al T 1 D.  T h e s e 
i n cl u d e  t h e  a nti- T  c ell  a g e nt s  a nti- C D 3  m A b  (t e pli z u m a b,  ot eli xi z u m a b)( 2 5,  2 6),  L F A 3  I g 
( Al ef a c e pt)  ( 2 7),  a nti-t h y m o c yt e  gl o b uli n  ( 2 8),    a nti- C D 2 0  m A b (rit u xi m a b)  ( 2 9)  a n d  C T L A 4  I g 
( A b at a c e pt)  ( 3 0).  M or e o v er,  a d mi ni str ati o n  of  t e pli z u m a b  t o  hi gh  ri s k,  a s y m pt o m ati c  i n di vi d u al s 
h a s r e c e ntl y b e e n s h o w n t o d el a y pr o gr e s si o n t o cli ni c al di s e a s e b y a m e di a n of 2 y e ar s ( 2 4). 
A s a n alt er n ati v e t o br o a d i m m u n o s u p pr e s si o n, t h e pr o mi s e of a n ti g e n t h er a p y i s t h e p o s si bilit y t o 
r e st or e t ol er a n c e or n o n-r e s p o n si v e n e s s t o s p e cifi c i m m u n e t ar g et s.  Pr e vi o u s p h a s e 2 tri al s u si n g 
a nti g e n t h er a p y b ot h pri or t o cli ni c al di a g n o si s t o d el a y di s e a s e pr o gr e s si o n a n d aft er di a g n o si s t o 
pr e s er v e b et a c ell f u n cti o n h a v e l ar g el y b e e n di s a p p oi nti n g ( 3 1).  I n t h e s e tri al s, pr ot ei n or p e pti d e 
a nti g e n s h a v e b e e n dir e ctl y a d mi ni st er e d wit h or wit h o ut a dj u v a nt t hr o u g h v ari o u s r o ut e s (I V, S C, 
or al, n a s al) ( 3 1- 3 3).     
A n ot h er a p pr o a c h i s t o d eli v er a nti g e n wit h o ut a dj u v a nt t hr o u g h  pl a s mi d t h er a p y.  S u c h t ol er o g e ni c 
pl a s mi d s  ar e  d e si g n e d  t o  r e d u c e  a n  a nti-i nfl a m m at or y  r e s p o n s e  t o  a  gi v e n  a nti g e n.  Pl a s mi d-
m e di at e d a nti g e n d eli v er y h a s b e e n pr o p o s e d a s a s uit a bl e pl atf or m f or a nti g e n- s p e cifi c t ol er a n c e 
t h er a p y ( 3 1- 3 3, 4 2). T hi s all o w s f or a d mi ni str ati o n of a nti g e n wit h o ut a dj u v a nt a n d t h u s off er t h e 
pr o mi s e of t ol er a n c e i n d u cti o n.  W hil e n o h u m a n pl a s mi d s h a v e b e e n a p pr o v e d f or t h er a p e uti c 
u s e,  d o z e n s  of  pl a s mi d- b a s e d  cli ni c al  tri al s  f or  a  wi d e  s p e ctr u m  of  pr o p h yl a cti c  or  t h er a p e uti c 
v a c ci n ati o n s  f or  i nf e cti o u s  di s e a s e  or  c a n c er  a p pli c ati o n s  ar e li st e d  a s  c o m pl et e d  or  o n g oi n g. 
Pl a s mi d s h a v e a n e x c ell e nt s af et y pr ofil e wit h n o r e p ort e d i s s u e s s u c h a s a ut oi m m u nit y or h o st 
                                                            
 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
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g e n o m e  i n s erti o n al  m ut a g e n e si s  fr o m  n u m er o u s  h u m a n  cli ni c al  tri al s  ( 3 4).  Pl a s mi d- e n c o d e d 
pr oi n s uli n t h er a p y h a s b e e n st u di e d i n T 1 D. T h er e w er e n o s af et y i s s u e s i d e ntifi e d i n t hi s d o s e 
e s c al ati o n tri al of 8 0 a d ult s wit h T 1 D ( 3 5).   
 
2. 2 St u d y A g e nt: N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 
2. 2. 1 D e s cri pti o n 
N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 i s a n o v el r e c o m bi n a nt s u p er c oil e d pl a s mi d ( 6 3 8 8) t h at e n c o d e s t h e f oll o wi n g f o ur 
h u m a n pr ot ei n s, i n a d diti o n t o a m o difi e d C D 7 4 (i n v ari a nt c h ai n ): pr e- pr oi n s uli n ( P PI), tr a n sf or mi n g 
gr o wt h f a ct or β 1 ( T G F- β 1), i nt erl e u ki n- 1 0 (I L- 1 0), a n d i nt erl e u ki n- 2 (I L- 2) ( Fi g ur e 1). T h e P PI i s 
f u s e d t o C D 7 4, l a c k s a s e cr eti o n si g n al, a n d i s d e gr a d e d 
f or pr e s e nt ati o n o n t h e c ell s urf a c e b y H u m a n L e u k o c yt e 
A nti g e n  ( H L A)  cl a s s  I  a n d  II  m ol e c ul e s.  T h e  t hr e e 
c yt o ki n e s  ar e  s e cr et e d  i n  t h e  l o c al  e n vir o n m e nt.  T h e 
pl a s mi d  h a s  b e e n  d e si g n e d  t o  b e  n o n-i nt e gr ati n g  a n d 
n o n-r e pli c ati n g  i n  h u m a n  c ell s.  T h e  pr ot ei n  s e q u e n c e s 
of t h e f o ur t ar g et g e n e pr o d u ct s s h ar e a hi g h d e gr e e of 
s e q u e n c e  si mil arit y  t o  t h e  c orr e s p o n di n g  h u m a n 
e n d o g e n o u s  pr ot ei n s.    F or  P PI,  T G F- β 1,  a n d  I L- 2,  b ut 
n ot  I L- 1 0,  c o d o n  u s a g e  h a s  b e e n  alt er e d  i n  or d er  t o 
eli mi n at e  
n u cl e oti d e  
s e q u e n c e  
h o m ol o g y  
t o 
e n d o g e n o u s  g e n e s  t o  mi ni mi s e  ri s k  of  h o m ol o g o u s 
r e c o m bi n ati o n.  O n  t h e  pr ot ei n  l e v el,  t h e  a mi n o  a ci d 
s e q u e n c e s  of  t h e  T G F- β 1  a n d  I L- 2  g e n e  pr o d u ct s  ar e 
e s s e nti all y  i d e nti c al  t o  t h e  e n d o g e n o u s  c o u nt er p art s. 
T h e  pl a s mi d- e n c o d e d  P PI  a n d  I L- 1 0  e a c h  c arr y  a  C-
t er mi n al t a g fr o m t h e vir al cl e a v a g e el e m e nt ( 2 4 a mi n o 
a ci d s f or t h e P PI “t a g” a n d 2 1 a mi n o a ci d s f or t h e I L- 1 0 “t a g”) . T h e s m all tr a n sl at e d C-t er mi n al t a g 
h a s b e e n c o nfir m e d n ot t o i nt erf er e wit h t h e f u n cti o n of I L- 1 0. S p e cifi c all y, e x pr e s si o n of t h e t a g g e d 
pr ot ei n w a s c o nfir m e d u si n g W e st er n bl otti n g a n d E LI S A, w hil e b i o a cti vit y w a s d e m o n str at e d i n a 
n ati v e r e c e pt or di m eri z ati o n bi ol u mi n e s c e n c e a s s a y. 
 
2. 2. 2  R ati o n al e f or u s e i n T 1 D 
N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1  tr e at m e nt  i s  a n  i m m u n ot h er a p y  i nt e n d e d  f or  c hr o ni c   a d mi ni str ati o n  t o  h alt  t h e 
a ut oi m m u n e  r e s p o n s e  a g ai n st  p a n cr e ati c  b et a  c ell s  a n d  t o  pr e s er v e  e n d o g e n o u s  i n s uli n 
pr o d u cti o n, t h er e b y pr e v e nti n g pr o gr e s si o n t o cli ni c al di s e a s e.   Pr e s er v ati o n of i n s uli n pr o d u cti o n 
aft er  cli ni c al  di a g n o si s  i s  a s s o ci at e d  wit h  b ett er  gl y c e mi c  c o n tr ol  a n d  l e s s  s h ort-  a n d  l o n g-t er m 
c o m pli c ati o n s  ( 3 6).  H alti n g  i m m u n e  d e str u cti o n  e arli er  i n  t h e  d i s e a s e  m a y  d el a y  or  pr e v e nt 
pr o gr e s si o n t o cli ni c al di s e a s e.  T h u s, t h e pri m ar y t ar g et p o p u l ati o n c o n si st s of s u bj e ct s at ri s k of 
d e v el o pi n g  T 1 D.  T h e  pl a s mi d  i n d u c e d  di a b et e s  pr e v e nti o n  i s  d e si g n e d  t o  b e  a c hi e v e d  wit h o ut 
s u p pr e s si o n of n or m al pr ot e cti v e i m m u n e r e s p o n s e s.  
 
T h e  m e di c al  h y p ot h e si s  f or  N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1  i s  t h at  a nti g e n  pr e s e nt i n g  c ell s  ( A P C s)  will  b e 
tr a n sf e ct e d wit h t h e pl a s mi d vi a s u b c ut a n e o u s i nj e cti o n, l e a di ng t o l o c ali s e d e x pr e s si o n of P PI a n d 
t h e i m m u n o- m o d ul at or y c yt o ki n e s, T G F- β 1, I L- 1 0, a n d I L- 2. P PI will n ot b e s e cr et e d b ut will b e 
pr e s e nt e d b y H L A cl a s s I a n d II o n t h e s urf a c e of t h e tr a n sf e ct e d c ell s t o cir c ul ati n g i m m u n e c ell s. 
T h e i m m u n o- m o d ul at or y c yt o ki n e s will b e l o c all y s e cr et e d ar o u n d  t h e tr a n sf e ct e d c ell s i n s m all 
a m o u nt s  t o  pr o m ot e  P PI- s p e cifi c  i m m u n e  t ol er a n c e  m e c h a ni s m s,  wi t h o ut  c a u si n g  s y st e mi c 
i m m u n o s u p pr e s si o n. P PI- s p e cifi c T c ell s, w hi c h e n c o u nt er A P C s pr e s e nti n g pl a s mi d- d eri v e d P PI, 
will r e c o g ni s e t h eir a nti g e n wit hi n t hi s t ol er o g e ni c mili e u. A s  a c o n s e q u e n c e, t h e T c ell s will n ot 
att a c k  t h e  a nti g e n  ( P PI)- p o siti v e  c ell s  i n  t h e  p a n cr e a s.  T h u s, a nti g e n  pr e s e nt ati o n  will  c a u s e  a 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 2 of 4 4  
t ol er o g e ni c r e- e d u c ati o n of t h e i m m u n e c ell s arr e sti n g t h e o n g oi n g a ut oi m m u n e att a c k a g ai n st t h e 
b et a c ell s. T hi s will r e s ult i n pr e s er v e d b et a c ell f u n cti o n, tr a n sl ati n g i nt o di s e a s e pr e v e nti o n. 
 
T h e pl a s mi d i s i nt e n d e d t o b e i nj e ct e d n a k e d, wit h o ut a dj u v a nt s  or e n h a n c er s a n d t h er ef or e will 
h a v e a l o w tr a n sf e cti o n c a p a cit y. T h e pl a s mi d i s e x p e ct e d t o o n l y tr a n sf e ct a n d e x pr e s s i n a li mit e d 
n u m b er of c ell s. T h e s y st e mi c e x p o s ur e t o pl a s mi d- d eri v e d pr ot ei n s will t h er ef or e b e mi ni m al a n d 
o c c urr e n c e of a c ut e s af et y si g n al s i s c o n s e q u e ntl y c o n si d er e d u nli k el y. 
 
2. 2. 3 Pr e- cli ni c al d at a 
 
N O D m o u s e d at a i n di c at e a 
s u st ai n e d eff e ct o n b et a c ell 
pr e s er v ati o n  
i n  
vi v o 
t hr o u g h o ut  t h e  tr e at m e nt 
p eri o d  wit h  t h e  pl a s mi d. 
T hr e e  ti m e s  w e e kl y  s. c. 
a d mi ni str ati o n of t h e m o u s e 
pl a s mi d  t o  N O D  mi c e  wit h 
t h e s u b- cli ni c al a ut oi m m u n e 
di s e a s e  (fr o m  9  w e e k s  of 
a g e),  
d e cr e a s e d  
t h e 
n u m b er  of  mi c e  d e v el o pi n g 
di a b et e s  
c o m p ar e d  
t o 
u ntr e at e d  or  e m pt y  v e ct or-
tr e at e d  
c o ntr ol s.  
W h e n 
d o si n g  w a s  di s c o nti n u e d  at 
3 0  
w e e k s,  
di a b et e s 
pr o gr e s si o n  
r e s u m e d, 
i n di c ati n g  
t h at  
c hr o ni c 
d o si n g  i s  r e q uir e d  f or 
s u st ai n e d  effi c a c y  ( Fi g ur e 
2). 
 
All  f o ur  pl a s mi d- e n c o d e d  pr ot ei n s  c o ntri b ut e  t o  t h e i n  vi v o effi c a c y  pr ofil e.  P PI  mi mi c s  a  k e y 
i m m u n e t ar g et f or b et a c ell d e str u cti o n d uri n g d e v el o p m e nt of T1 D ( 3 7, 3 8) a n d it s i n cl u si o n i nt o 
t h e  pl a s mi d  c o nf er s  t h e  a nti g e n- s p e cifi c  n at ur e  of  t h e  t h er a p y.  I L- 1 0  i s  a n  i m p ort a nt  r e g ul at or y 
c yt o ki n e i n v ol v e d i n s elf-t ol er a n c e a n d s u p pr e s s e s i nfl a m m ati o n  a n d a ut oi m m u nit y ( 3 9). T G F- β 1 
s y n er gi s e s wit h I L- 1 0 t o i n d u c e r e g ul at or y T c ell s ( T r e g) ( 4 0). Fi n all y, I L- 2 at l o w d o s e s c a n st a bili z e 
t h e Tr e g li n e a g e t o pr e v e nt l o s s of r e g ul at or y f u n cti o n i n i nfl a m m at or y e n vir o n m e nt s ( 4 1, 4 2). 
 
A s t h e N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 pl a s mi d i s d e si g n e d t o b e i n c a p a bl e of r e pl i c ati o n a n d i nt e gr ati o n wit hi n a 
e u k ar y oti c  h o st,  t h e  n u m b er  of  tr a n sf e ct e d  c ell s  a v ail a bl e  t o  p r o m ot e  i n s uli n- s p e cifi c  i m m u n e 
r e s p o n s e s t o w ar d t ol er a n c e i s s elf-li miti n g d u e t o n or m al c ell ul ar t ur n o v er. T hi s r e q uir e s c hr o ni c 
tr e at m e nt b ut mi ni mi s e s t h e ri s k s i n h er e nt i n p er m a n e nt g e n eti c m o difi c ati o n s. 
 
 
 
 
 
 
 
 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 3 of 4 4  
St u di e s i n Pri m at e s 
 
D o s e t o xi cit y st u di e s i n n o n- h u m a n pri m at e s t o s u p p ort t h e F H D tri al h a v e b e e n c o n d u ct e d f or 
w hi c h f ull i nf or m ati o n i s a v ail a bl e i n t h e i n v e sti g at or br o c h ur e.  
A  4- w e e k  d o s e  r a n g e  fi n di n g  st u d y  wit h  4  w e e k s  r e c o v er y  i n  c y n o m ol g u s  m o n k e y s  h a s  b e e n 
c o m pl et e d.  I n  a d diti o n  t o  st a n d ar d  t o xi cit y  e n d p oi nt s,  C- p e pti d e  l e v el s,  a s  w ell  a s  i m m u n e 
e n d p oi nt s i n cl u di n g c yt o ki n e p a n el s, i m m u n o p h e n ot y pi n g, a n d d s D N A a n d I L- 2 DI A a n al y si s w a s 
i n v e sti g at e d.  T h e st u d y al s o i n cl u d e d a n a s s e s s m e nt of bi o di stri b uti o n of t h e pl a s mi d.  
T h er e w er e n o a d v er s e tr e at m e nt r el at e d eff e ct s o n a n y of t h e m e a s ur e d t o xi cit y p ar a m et er s a n d 
n o  m e a ni n gf ul  c h a n g e s  i n  c o n c e ntr ati o n s  of  a n y  of  t h e  c yt o ki n e s  m e a s ur e d  d uri n g  t h e  st u d y 
c o m p ar e d t o pr e-tr e at m e nt v al u e s. Pl a s mi d w a s pri m aril y di stri b ut e d t o s ki n at i nj e cti o n sit e s a n d 
dr ai ni n g l y m p h n o d e s a n d l e v el s d e cli n e d i n t h e r e c o v er y p eri o d.  
A 1 3- w e e k t o xi cit y st u d y wit h r e c o v er y al s o i n c y n o m ol g u s m o n k e y s h a s b e e n c o m pl et e d. 
I n c o n cl u si o n, s u b c ut a n e o u s i nj e cti o n s of N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 at d o s e l e v el s u p t o 2 0 m g o n c e w e e kl y 
f or 1 3 w e e k s w a s w ell t ol er at e d i n c y n o m ol g u s m o n k e y s, wit h o nly n o n- a d v er s e fi n di n g s n ot e d. 
T h e s e c o m pri s e d hi g h n e utr o p hil c o u nt s a n d m o n o n u cl e ar c ell i nfiltr ati o n at i nj e cti o n sit e s f oll o wi n g 
d o si n g wit h 2 0 m g o n c e w e e kl y wit h f ull r e c o v er y at 8- a n d 1 3- w e e k s p o st- e n d of tr e at m e nt. T h e 
N O A E L w a s c o n si d er e d t o b e 2 0 m g/ o n c e w e e kl y ( hi g h e st a d mi ni st er e d d o s e). 
 
2. 2. 4 M a n uf a ct uri n g R ef er e n c e 
T h e  dr u g  m a st er  fil e  ( D M F)  s u b mi s si o n  tr a c ki n g  n u m b er s  f or  t h e dr u g  s u b st a n c e  i s  M F 
2 1 3 9 3 a n d f or t h e dr u g pr o d u ct/ pl a c e b o i s M F 2 1 3 9 4. 
 
3 
S T U D Y D E SI G N 
 
 3. 1 O v er vi e w 
 
T h e  pr o p o s e d  fir st  i n  h u m a n  d o si n g  ( F H D)  tri al  i s  a  pl a c e b o- c o ntr oll e d,  d o u bl e- bli n d e d  wit hi n 
c o h ort s, r a n d o mi s e d, m ulti pl e a s c e n di n g d o s e ( M D) tri al wit h a st a g g er e d tri al d e si g n. T h e tri al will 
i n v e sti g at e t h e s af et y, t ol er a bilit y a n d e x pl or e P K a s w ell a s t ar g et e n g a g e m e nt pr o p erti e s f oll o wi n g 
o n c e w e e kl y s u b c ut a n e o u s d o s e s of pl a s mi d N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 f or 1 2 w e e k s i n p ati e nt s wit hi n 4 8 
m o nt h s of di a g n o si s of T 1 D.  
 
A t ot al of 4 8 p ati e nt s wit h T 1 D ar e pl a n n e d t o b e st u di e d i n 4 c o h ort s of 1 2 p ati e nt s ( 9 o n a cti v e 
a n d  3  o n  pl a c e b o  tr e at m e nt).  Wit hi n  e a c h  c o h ort,  s e nti n el  e nr ol l m e nt  will  o c c ur  a n d  s af et y 
a s s e s s m e nt will o c c ur b ef or e r e m ai ni n g p arti ci p a nt s ar e e nr oll e d.  T h e tr e at m e nt p eri o d will b e 1 2 
w e e k s wit h o n c e w e e kl y d o si n g l e a di n g t o 1 2 d o s e s i n t ot al. D o s e e s c al ati o n will o c c ur aft er d at a 
s af et y r e vi e w ( a s d e s cri b e d i n s e cti o n 4. 9. 2).  A n M M T T t o a s s e s s i n s uli n s e cr eti o n will b e d o n e 
at s cr e e ni n g, 1, 3, 6, a n d 1 2 m o nt h s.  T h e f oll o w- u p ( F U) p eri o d will b e 1 w e e k aft er t h e l a st d o s e, 
a s w ell a s 4, 6 a n d 1 2 m o nt h s aft er t h e fir st d o s e. 
 
 
 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 4 of 4 4  
3. 2 
E ntr y Crit eri a 
3. 2. 1  I n cl u si o n Crit eri a 
P ot e nti al p arti ci p a nt s m u st m e et all  of t h e f oll o wi n g i n cl u si o n crit eri a: 
1.  Willi n g t o pr o vi d e I nf or m e d C o n s e nt  
2.  P arti ci p a nt s m u st li v e i n a l o c ati o n wit h r a pi d a c c e s s t o e m er g e n c y m e di c al s er vi c e s 
3.  A g e 1 8- 4 5 y e ar s ( b ot h i n cl u si v e) at t h e ti m e of si g ni n g i nf or m e d c o n s e nt  
4.  M u st h a v e a di a g n o si s of T 1 D f or l e s s t h a n 4 8 m o nt h s at r a n d o mi z ati o n 
5.  M u st h a v e at l e a st o n e di a b et e s –r el at e d a ut o a nti b o d y pr e s e nt  ( G A D 6 5 A; mI A A, if o bt ai n e d 
wit hi n 1 0 d a y s of t h e o n s et of i n s uli n t h er a p y; I A- 2 A; I C A; or Z n T 8 A) 
6.  M u st h a v e sti m ul at e d C- p e pti d e l e v el s 0. 2 p m ol/ ml m e a s ur e d d uri n g a n M M T T c o n d u ct e d 
at l e a st 2 1 d a y s fr o m di a g n o si s of di a b et e s a n d wit hi n o n e m o nt h ( 3 7 d a y s) of r a n d o mi z ati o n 
7.  B e willi n g t o c o m pl y wit h i nt e n si v e di a b et e s m a n a g e m e nt 
8.  H b A 1 c ≤8. 5 % at s cr e e ni n g 
9.  S u bj e ct s w h o ar e C M V a n d/ or E B V s er o n e g ati v e at s cr e e ni n g m u st b e C M V a n d/ or E B V 
P C R n e g ati v e wit hi n 3 7 d a y s of r a n d o mi z ati o n a n d m a y n ot h a v e h a d si g n s or s y m pt o m s of a 
C M V a n d/ or E B V c o m p ati bl e ill n e s s l a sti n g l o n g er t h a n 7 d a y s wi t hi n 3 7 d a y s of 
r a n d o mi z ati o n 
1 0. B e u p t o d at e o n r e c o m m e n d e d i m m u ni z ati o n s 
1 1. B e at l e a st 6 w e e k s fr o m l a st li v e i m m u ni z ati o n 
1 2. B e at l e a st 4 w e e k s fr o m kill e d v a c ci n e ot h er t h a n fl u v a c c i n e 
1 3. P arti ci p a nt s ar e r e q uir e d t o r e c ei v e kill e d i nfl u e n z a v a c ci n ati o n at l e a st 2 w e e k s pri or t o 
r a n d o mi z ati o n w h e n v a c ci n e f or t h e c urr e nt or u p c o mi n g fl u s e a so n i s a v ail a bl e 
1 4. B e willi n g a n d m e di c all y a c c e pt a bl e t o p o st p o n e li v e v a c ci n e s d uri n g t h e tr e at m e nt p eri o d 
a n d f or 3 m o nt h s f oll o wi n g l a st d o s e of st u d y dr u g  
1 5. If p arti ci p a nt i s f e m al e wit h r e pr o d u cti v e p ot e nti al, s h e m u st h a v e a n e g ati v e pr e g n a n c y t e st 
at s cr e e ni n g a n d b e willi n g t o a v oi d pr e g n a n c y u si n g a hi g hl y eff e cti v e c o ntr a c e pti v e m et h o d 
f or t h e 1 2 m o nt h s of t h e st u d y 
1 6. M al e s of r e pr o d u cti v e a g e m u st u s e a d e q u at e c o ntr a c e pti v e m et h o d d uri n g t h e tr e at m e nt 
p h a s e a n d f or 3 m o nt h s f oll o wi n g l a st d o s e of st u d y dr u g 
1 7. P arti ci p a nt s ar e r e q uir e d t o r e c ei v e a n a ut h ori z e d n o n-li v e C O VI D- 1 9 v a c ci n ati o n a n d b e f ull y 
v a c ci n at e d, i n cl u di n g eli gi bl e b o o st er s a s i n di c at e d, at l e a st t w o w e e k s pri or t o 
r a n d o mi z ati o n. 
3. 2. 2  E x cl u si o n Crit eri a 
P ot e nti al p arti ci p a nt s m u st n ot  m e et a n y of t h e f oll o wi n g e x cl u si o n crit eri a: 
 
1.  O n e or m or e s cr e e ni n g l a b or at or y v al u e s a s st at e d  
a.  L e u k o c yt e s < 3, 0 0 0/ μ L  
b.  N e utr o p hil s < 1, 5 0 0 / μ L 
c.  L y m p h o c yt e s < 8 0 0 / μ L 
d.  Pl at el et s < 1 0 0, 0 0 0 / μ L 
e.  H a e m o gl o bi n < 6. 2 m m ol/ L ( 1 0. 0 g/ d L) 
f.  P ot a s si u m > 5. 5 m m ol/ L or < 3. 0 m m ol/ L  


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 5 of 4 4  
g.  S o di u m > 1 5 0 m m ol/ L or < 1 3 0 m m ol/ L  
h.  A S T or A L T ≥2. 5 ti m e s t h e u p p er li mit s of n or m al  
i.  Bilir u bi n ≥ 1. 5 ti m e s u p p er li mit of n or m al 
j.  
Gl o m er ul ar Filtr ati o n R at e ( e G F R) v al u e of e G F R < 6 0 ml/ mi n/1. 7 3 m 2  a s d efi n e d 
b y K DI G O 2 0 1 2 ( 4 3) 
k.  A n y ot h er l a b or at or y a b n or m alit y t h at mi g ht, i n t h e j u d g m e nt  of t h e i n v e sti g at or, 
pl a c e t h e s u bj e ct at u n a c c e pt a bl e ri s k f or p arti ci p ati o n i n t hi s tri al 
 
2.  C urr e nt or o n g oi n g u s e of n o n-i n s uli n p h ar m a c e uti c al s t h at a ff e ct gl y c e mi c c o ntr ol wit hi n 
pri or 7 d a y s of s cr e e ni n g 
 
3.  U s e of ot h er i m m u n o s u p pr e s si v e a g e nt s i n cl u di n g c hr o ni c u s e of s y st e mi c st er oi d s. 
T o pi c al pr o d u ct s ar e a c c e pt a bl e ( n a s al, c o nj u n cti v al, s ki n) 
 
4.  H a v e a cti v e si g n s or s y m pt o m s of a c ut e i nf e cti o n at t h e ti m e  of r a n d o mi z ati o n 
 
5.  H a v e c urr e nt, c o nfir m e d C O VI D- 1 9 i nf e cti o n 
 
6.  C hr o ni c a cti v e i nf e cti o n ot h er t h a n l o c ali z e d s ki n i nf e cti o n s 
 
7.  H a v e e vi d e n c e of pri or or c urr e nt t u b er c ul o si s i nf e cti o n a s a s s e s s e d b y P P D, i nt erf er o n    
g a m m a r el e a s e a s s a y or b y hi st or y 
 
8.  H a v e e vi d e n c e of c urr e nt or p a st HI V, H e p atiti s B i nf e cti o n  
 
9.  H a v e e vi d e n c e of a cti v e H e p atiti s C i nf e cti o n 
 
1 0. V a c ci n ati o n wit h a li v e vir u s wit hi n t h e l a st 6 w e e k s a n d k ill e d v a c ci n e wit hi n 4 w e e k s 
( e x c e pt 2 w e e k s f or fl u v a c ci n e) 
 
1 1. B e c urr e ntl y pr e g n a nt or l a ct ati n g, or a nti ci p at e g etti n g p r e g n a nt wit hi n t h e o n e- y e ar 
st u d y p eri o d. 
 
1 2. H a v e s e v er e o b e sit y: a d ult s B MI ≥ 4 0 
 
1 3. H a v e a hi st or y of m ali g n a n ci e s  
 
1 4. U ntr e at e d h y p ot h yr oi di s m or a cti v e Gr a v e s’ di s e a s e 
 
1 5. Hi st or y of s e v er e r e a cti o n t o pri or v a c ci n ati o n 
 
1 6. P arti ci p ati o n i n a n y cli ni c al tri al of a n a p pr o v e d or n o n- a p pr o v e d i n v e sti g ati o n al m e di ci n al 
pr o d u ct wit hi n 3 0 d a y s aft er l a st bl o o d dr a w ( or 5 h alf-li v e s o f i n v e sti g ati o n al dr u g, 
w hi c h e v er i s gr e at er) b ef or e s cr e e ni n g, or c urr e ntl y e nr oll e d i n a n y ot h er cli ni c al tri al 
 
1 7. S u bj e ct i s t h e i n v e sti g at or or a n y s u b-i n v e sti g at or, r e s e ar c h a s si st a nt, p h ar m a ci st, st u d y 
c o or di n at or, ot h er st aff or r el ati v e t h er e of dir e ctl y i n v ol v e d i n t h e c o n d u ct of t h e tri al 
 
1 8. S u pi n e bl o o d pr e s s ur e at s cr e e ni n g o ut si d e t h e r a n g e of 9 0- 1 3 9 m m H g f or s y st oli c or 5 0-
8 9 m m H g f or di a st oli c. T o e x cl u d e w hit e- c o at n er v o u s n e s s a si n gl e r e p e at m e a s ur e m e nt 
i s all o w e d 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 6 of 4 4  
 
1 9. H a v e a n y c o m pli c ati n g m e di c al i s s u e s or a b n or m al cli ni c al l a b or at or y r e s ult s t h at m a y 
i nt erf er e wit h st u d y c o n d u ct, or c a u s e i n cr e a s e d ri s k  
 
2 0. A n y c o n diti o n t h at i n t h e i n v e sti g at or' s o pi ni o n m a y a d v er s el y aff e ct st u d y p arti ci p ati o n or 
m a y c o m pr o mi s e t h e st u d y r e s ult s 
 
 
3. 3   St u d y A s s e s s m e nt s 
D uri n g t h e c o ur s e of t h e st u d y , p arti ci p a nt s will fr e q u e ntl y u nd er g o a s s e s s m e nt s of t h eir i n s uli n 
pr o d u cti o n, i m m u n ol o gi c st at u s, o v er all h e alt h a n d w ell- b ei n g a n d di a b et e s c ar e ( s e e s c h e d ul e of 
a s s e s s m e nt s i n A p p e n di x A). T h e p arti ci p a nt s’ i n s uli n pr o d u cti o n will b e m e a s ur e d b y a s eri e s of 
M M T T s c o n d u ct e d r e g ul arl y d uri n g t h e st u d y. T h e p arti ci p a nt s’ d i a b et e s c o ntr ol will b e e v al u at e d 
b y m e a s uri n g gl y c o s yl at e d h e m o gl o bi n ( H b A 1 c) a n d cli ni c al r e c or d s i n cl u di n g i n s uli n t y p e s, d o s e s, 
a n d ti mi n g a n d gl u c o s e r e c or d s. D uri n g t h e c o ur s e of t h e st u d y,  s a m pl e s will b e dr a w n f or st or a g e 
i n t h e N ati o n al I n stit ut e f or Di a b et e s a n d Di g e sti v e a n d Ki d n e y Di s e a s e ( NI D D K) R e p o sit or y a n d 
at Tri al N et R e p o sit ori e s f or f ut ur e a n al y si s.   
 
3. 4 
Q u alit y A s s ur a n c e 
 
D uri n g  t h e  st u d y,  d u pli c at e  c oll e cti o n s  of  bl o o d  s a m pl e s  f or  a s s a y s  will  b e  o bt ai n e d  i n  a  s m all 
s a m pl e  of  s u bj e ct s  f or  t h e  p ur p o s e  of  q u alit y  s ur v eill a n c e  of  t h e  p erf or m a n c e  of  t h e  c e ntr al 
l a b or at ori e s.  
 
 
3. 5   P o st-tr e at m e nt F oll o w- u p 
 
At t h e c o n cl u si o n of t h e st u d y or w h e n s u bj e ct s r e a c h 1 2 m o nt h s, s u bj e ct s m a y b e eli gi bl e t o 
p arti ci p at e i n f urt h er f oll o w- u p vi a p arti ci p ati o n i n t h e Tri al N et L o n g T er m I n v e sti g ati v e F oll o w- U p 
( LI F T).   
 
 
4 
P A R TI CI P A N T M A N A G E M E N T 
4. 1 
S cr e e ni n g 
Aft er  i nf or m e d  c o n s e nt,  s u bj e ct s  will  u n d er g o  a s s e s s m e nt s  t o  d e t er mi n e  if  t h e y  m e et 
eli gi bilit y crit eri a.  D o c u m e nt ati o n of t h e s u bj e ct s u n d er st a n d i n g of t h e ri s k s a n d b e n efit s of 
t h e st u d y will b e c oll e ct e d t hr o u g h t h e V ol u nt e er U n d er st a n di n g A s s e s s m e nt.   
 
4. 2 
R a n d o mi z ati o n a n d Tr e at m e nt Vi sit 
Eli gi bl e  st u d y  p arti ci p a nt s  will  b e  r a n d o mi z e d  b y  t h e  Tri al N et C o or di n ati n g  C e nt er  at  t h e 
b a s eli n e vi sit ( vi sit 0) o n c e eli gi bilit y h a s b e e n c o nfir m e d. S u bj e ct s will b e a s si g n e d a st u d y 
r a n d o mi z ati o n n u m b er c orr e s p o n di n g t o t h e tr e at m e nt gr o u p a s si gn m e nt. S u bj e ct s will b e 
r a n d o mi z e d t o eit h er t h e tr e at m e nt ar m or t h e pl a c e b o ar m of t he st u d y.   
 
S u bj e ct s w h o m e et e ntr y crit eri a will r e c ei v e a s u b c ut a n e o u s i nj e cti o n of a cti v e dr u g/ pl a c e b o 
at t h e r e s e ar c h u nit. S u bj e ct s will st a y i n t h e r e s e ar c h u nit f or a n o b s er v ati o n al p eri o d p o st 
i niti al d o s e t o e n s ur e c a pt uri n g a n y p ot e nti al a c ut e s af et y si gn al s. T hi s p eri o d will i n cl u d e 
a n i n p ati e nt st a y of 4 8 h o ur s p o st d o si n g. F or t h e s u b s e q u e nt v i sit s, s u bj e ct s will att e n d t h e 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 7 of 4 4  
sit e f or a m b ul at or y d o si n g vi sit s. 
 
4. 3 
I nt e n si v e Di a b et e s M a n a g e m e nt 
D uri n g  t h e  st u d y  p eri o d,  all  p arti ci p a nt s  will  r e c ei v e  “i nt e n si v e”  m a n a g e m e nt  of  t h eir 
di a b et e s.  T h e g o al of t h e tr e at m e nt will b e t o k e e p t h e H b A 1 c l e v el s wit hi n t h e c urr e ntl y 
r e c o m m e n d e d A m eri c a n Di a b et e s A s s o ci ati o n a g e- s p e cifi c t ar g et ra n g e i n t h e a b s e n c e of 
cli ni c all y  si g nifi c a nt  or  s e v er e  h y p o gl y c e mi a  or  di a b eti c  k et o a ci d o si s.  T h e  pri m ar y 
r e s p o n si bilit y  f or  di a b et e s  m a n a g e m e nt  will  b e  o n  t h e  tr e ati n g or  r ef erri n g  di a b et e s  c ar e 
pr o vi d er,  b ut  t h e  r e s e ar c h  st u d y  t e a m  will  pr o vi d e  a d diti o n al  s u p p ort  t hr o u g h  r e g ul ar 
i nt er a cti o n.  R e c or d s  of  c o m m u ni c ati o n  wit h  t h e  p arti ci p a nt  will  pr o vi d e  s o ur c e 
d o c u m e nt ati o n  of  t hi s  i nt er a cti o n.  S u bj e ct s  will  n ot  b e  p er mitt e d  t o  u s e  n o n-i n s uli n 
p h ar m a c e uti c al s f or gl y c e mi c c o ntr ol. 
 
T h e Cli ni c M o nit ori n g Gr o u p ( or d e si g n at e d Tri al N et C o m mitt e e) will b e e v al u ati n g 
i n di vi d u al H b A 1 c d at a o ut si d e t h e s e r a n g e s, a n d pr o vi d e a d diti on al g ui d a n c e t o t h e cli ni c al 
sit e a s n e e d e d t o bri n g gl y c e mi c c o ntr ol wit hi n g o al s. A n y e pi s o d e of s e v er e h y p o gl y c e mi a 
will b e pr o m ptl y r e vi e w e d b y t h e M e di c al M o nit or wit h r e c o m m e n d ati o n s f or c h a n g e s i n 
di a b et e s m a n a g e m e nt, if a n y, c o n v e y e d t o t h e cli ni c al sit e i n c o nj u n cti o n wit h t h e Cli ni c 
M o nit ori n g Gr o u p. 
4. 4 
O v er vi e w of Tr e at m e nt s A d mi ni st er e d 
T h e pl a s mi d N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 t o b e u s e d i n t hi s fir st i n h u m a n tri a l i s s u p pli e d i n a 9 m g/ ml 
st o c k  s ol uti o n  a n d  will  b e  pr e p ar e d  a s  a n  i nj e cti o n  f or  s u b c ut a n e o u s  a d mi ni str ati o n.  A s 
d e s cri b e d  i n  s e cti o n  4. 4. 2  b el o w,  t h e  i nj e cti o n s  will  b e  pr e p ar e d  a c c or di n g  t o  t h e  d o s e 
s p e cifi e d f or e a c h c o h ort, b e gi n ni n g wit h a 1- m g d o s e i n c o h ort 1 a n d e n di n g wit h a fi n al 
d o s e of 2 5 m g i n c o h ort 4 f or t hi s tri al. T h e pl a c e b o will b e a d mi ni st er e d i n t h e s a m e v ol u m e 
a s t h e tr e at m e nt. D o s e s will b e a d mi ni st er e d o n a w e e kl y b a si s f or 1 2 c o n s e c uti v e w e e k s. 
4. 4. 1  R ati o n al e of D o si n g Pl a s mi d N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 
T h e str at e g y f or s el e cti n g t h e st arti n g d o s e a n d t h e cli ni c al d o s e r a n g e i s b a s e d o n t h e 
F D A G ui d a n c e f or I n d u str y, e sti m ati n g t h e m a xi m u m s af e st arti n g  d o s e i n i niti al cli ni c al 
tri al s f or t h er a p e uti c s i n a d ult h e alt h y v ol u nt e er s a n d t h e E M A G ui d eli n e o n str at e gi e s 
t o  i d e ntif y  a n d  miti g at e  ri s k s  f or  fir st-i n- h u m a n  cli ni c al  tri al s  wit h  i n v e sti g ati o n al 
m e di ci n al  pr o d u ct s .  E x p o s ur e  pr ofil e s  of  t h e  pl a s mid- d eri v e d  pr ot ei n s  e x erti n g  t h e  
p h ar m a c ol o gi c al eff e ct c a n n ot b e o bt ai n e d i n a ni m al s or i n h u m a n s ( 4 4). F urt h er, n o 
i n  vitr o  st u di e s  a d e q u at el y  d e s cri b e  t h e i n  vi v o  P D  eff e ct s  o b s er v e d  i n  mi c e.  T hi s 
pr e v e nt s t h e u s e of P K/ P D m o d elli n g f or e st a bli s hi n g t h e mi ni m a l a nti ci p at e d bi ol o gi c al 
eff e ct  l e v el ( M A B E L)/ P A D.  T h er ef or e,  t h e  str at e g y  f or  s el e cti n g   t h e  st arti n g  d o s e i s 
b a s e d o n t h e e v al u ati o n of eff e cti v e d o s e s i n N O D mi c e a n d t h e n o- o b s er v e d- a d v er s e- 
eff e ct-l e v el  ( N O A E L)  i n  t h e  1 3- w e e k  G L P  t o xi cit y  st u d y  i n  m o n k e y s  ( 4 4).  U si n g 
all o m etri c s c ali n g a st arti n g d o s e of 1. 0 m g/ p ati e nt ( 0. 0 1 6 7 m g / k g) r e s ult s i n a m ar gi n 
of 3. 9 t o t h e l o w e st P A D i n t h e m o u s e di s e a s e m o d el. 
I n t h e cli ni c al tri al it i s i nt e n d e d t o c o v er t h e r el e v a nt P A D r a n g e i n h u m a n s. 
C o n s e q u e ntl y, t h e cli ni c al tri al s h o ul d i n cl u d e d o s e s e x c e e di n g t h e e q ui v al e nt of t h e 
hi g h e st t e st e d P A D i n mi c e i. e., 1 0 0 μ g/ m o u s e c orr e s p o n di n g t o 1 9. 2 m g/ s u bj e ct. 
T h er ef or e, a m a xi m u m d o s e of 2 5 m g/ p ati e nt i s pr o p o s e d f or t h e F H D tri al. T hi s 
all o w s f or p h ar m a c ol o gi c al v ari ati o n b et w e e n t h e effi c a c y m o d el  a n d t h e cli ni c al 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 8 of 4 4  
s etti n g. A 2 5 m g/ p ati e nt t o p d o s e r e s ult s i n a s af et y m ar gi n of  3. 9 i n t h e 1 3- w e e k 
G L P t o xi cit y st u d y i n m o n k e y s ( 4 4). A n u n m a s k e d p h y si ci a n or n ur s e i s r e q uir e d t o 
a d mi ni st er t h e st u d y a g e nt i n or d er t o k e e p t h e tr e at m e nt ar m a s si g n m e nt of e a c h 
r a n d o mi z e d p arti ci p a nt m a s k e d t o t h e r e s e ar c h p er s o n n el at e a c h sit e. 
4. 4. 2  D o si n g a n d D o s e Wit h h ol di n g Crit eri a 
D o si n g i s d e p e n d e nt o n t h e c urr e nt c o h ort o p e n t o p arti ci p a nt e nr oll m e nt. T a bl e 1 
b el o w d e m o n str at e s t h e d o s e t o b e a d mi ni st er i n e a c h c o h ort. N o r o uti n e pr e-
m e di c ati o n i s n e e d e d pri or t o e a c h s u b c ut a n e o u s i nj e cti o n of t h e st u d y dr u g.  
T a bl e 1: Pl a n n e d D o si n g L e v el s of Pl a s mi d N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 or Pl a c e b o 
C o h ort  
D o s e ( m g)  
E s c al ati o n 
f a ct or 
I P v ol u m e ( m L) 
( 9 m g/ m L st o c k s ol uti o n) 
I nj e cti o n( s) ( m L) 
1  
1 
- 
0. 1 1 
0. 1 1 
2  
5 
5 
0. 5 6 
0. 5 6 
3  
1 2. 5  
2. 5 
1. 4 
0. 7 + 0. 7 
4  
2 5 
2 
2. 8 
0. 9 4 + 0. 9 4 + 0. 9 4 
A d mi ni str ati o n of i nj e cti o n s will b e wit h h el d b a s e d o n t h e f oll o wi n g crit eri a:  
1.  I n di vi d u al s wit h f e v er: T e m p er at ur e gr e at er t h a n 3 8. 5 ° C ( 1 0 1. 3 ° F) wit hi n 4 8 h o ur s 
of e a c h d o s e  
2.  I n di vi d u al s wit h e vi d e n c e of a cti v e i nf e cti o n at ti m e of d o s i n g.   
 
4. 5 
I nf e cti o u s Di s e a s e S cr e e ni n g  
I n g e n er al, n o s p e cifi c i nf e cti o u s di s e a s e s pr o p h yl a xi s i s w arra nt e d i n t hi s st u d y. I n li e u of 
a cti v e  s er ol o gi c  or  vir ol o gi c  m o nit ori n g  str at e gi e s,  all  s u bj e c t s  will  b e  c o u n s el e d  o n  a n 
o n g oi n g b a si s o n t h e i m p ort a n c e of n otif yi n g t h eir r e s e ar c h c e n t er s a b o ut t h e pr e s e n c e of 
si g n s or s y m pt o m s s u g g e sti v e of i nf e cti o n. T h e y will al s o b e c o u n s el e d o n t h e i m p ort a n c e 
of n otif yi n g t h e r e s e ar c h c e nt er a b o ut p ot e nti al e x p o s ur e s t o v ari c ell a, i nfl u e n z a, C O VI D- 1 9 
or ot h er i nf e cti o u s ill n e s s e s.   
 
S u bj e ct s  will  b e  a s s e s s e d  f or  C O VI D- 1 9  s y m pt o m s  at  e a c h  st u d y  v i sit  s p e cifi e d  i n  t h e 
s c h e d ul e of a s s e s s m e nt s. S u bj e ct s ar e r e q uir e d t o b e fr e e of C O VI D- 1 9 s y m pt o m s f or 1 4 
d a y s pri or t o t h e s cr e e ni n g vi sit, a d mi ni str ati o n of st u d y dr u g  d o s e 1 a n d f oll o w- u p vi sit s 1 5 –
1 7.  F or  st u d y  dr u g  a d mi ni str ati o n  of  d o s e s  2 – 1 2  a n d  f oll o w- u p  v i sit  1 4,  p arti ci p a nt s  ar e 
r e q uir e d t o b e fr e e of C O VI D- 1 9 s y m pt o m s t h e 7 d a y s ( or p er c urr e nt l o c al g ui d a n c e/ C D C 
g ui d a n c e) pri or t o t h o s e vi sit s. 
 
S u bj e ct s will n ot b e e nr oll e d wit h a cti v e i nf e cti o n s, hi st or y o f c urr e nt or pri or HI V, H e p atiti s 
B, or T b i nf e cti o n. I n a d diti o n, all s u bj e ct s will h a v e C M V a n d  E B V s er ol o g y d et er mi n e d pri or 
t o st u d y e nr oll m e nt. S u bj e ct s w h o ar e C M V a n d/ or E B V s er o n e g ativ e at s cr e e ni n g m u st b e 
C M V  a n d/ or  E B V  P C R  n e g ati v e  wit hi n  3 0  d a y s  of  r a n d o mi z ati o n  a n d   m a y  n ot  h a v e  h a d 
si g n s  or  s y m pt o m s  of  a n  C M V  a n d/ or  E B V  c o m p ati bl e  ill n e s s  l a sti n g  l o n g er  t h a n  7  d a y s 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 1 9 of 4 4  
wit hi n 3 0 d a y s of r a n d o mi z ati o n. A d diti o n al C M V a n d E B V s er o n e g ati v e i n di vi d u al s will h a v e 
s a m pl e s c oll e ct e d t o b e st or e d a n d t e st e d f or vir al l o a d if cli ni c all y i n di c at e d. 
4. 6 
M et a b oli c M o nit ori n g 
I n di vi d u al s will u n d er g o a 2- h o ur M M T T f or C- p e pti d e m e a s ur e m e nt s t o d et er mi n e 
eli gi bilit y f or t h e st u d y at s cr e e ni n g.  T h e i n v e sti g ati o n al dr u g i s n ot a nti ci p at e d t o h a v e a n y 
m et a b oli c eff e ct i n s u bj e ct s wit h e st a bli s h e d T 1 D. H o w e v er, r e p e at M M T T pr o c e d ur e s will 
b e d o n e at m o nt h s 1, 3, 6, a n d 1 2 t o e v al u at e p ot e nti al a d v er s e eff e ct of t h er a p y o n i n s uli n 
s e cr eti o n. H b A 1 c, bl o o d gl u c o s e, a n d t ot al d ail y i n s uli n d o s e w ill al s o b e m o nit or e d 
a c c or di n g t o t h e s c h e d ul e of a s s e s s m e nt s. 
4. 7 
C o n c o mit a nt M e di c ati o n 
T h e u s e of c o n c o mit a nt m e di c ati o n s  will b e a s s e s s e d at e a c h st ud y vi sit a n d r e c or d e d o n 
a n a p pr o pri at e s o ur c e d o c u m e nt a n d C R F. P arti ci p a nt s ar e all o w e d t o u s e pr e p ar ati o n s of 
i n s uli n a s a d vi s e d b y t h e i n v e sti g at or or t h e r ef erri n g p h y si cia n 
P arti ci p a nt s will b e r e q u e st e d n ot t o u s e a n y of t h e f oll o wi n g m e di c ati o n s d uri n g t h e st u d y: 
  
A g e nt s t h at i nfl u e n c e i n s uli n s e n siti vit y or s e cr eti o n (i n cl u di n g pr a mli nti d e, s ulf o n yl ur e a s, 
m etf or mi n,  di p h e n yl h y d a nt oi n,  t hi a zi d e,  or  ot h er  p ot a s si u m- d e pl eti n g  di ur eti c s,  b et a-
a dr e n er gi c bl o c k er s, ni a ci n). 
  
V a c ci n ati o n wit h li v e v a c ci n e s fr o m 6 w e e k s b ef or e e nr oll m e nt t o 3 m o nt h s f oll o wi n g l a st 
d o s e of st u d y dr u g i s n ot p er mitt e d.  Kill e d v a c ci n e s ot h er t h a n i nfl u e n z a ar e di s c o ur a g e d 
d uri n g t hi s ti m e p eri o d. 
  
A n y m e di c ati o n t h at m a y r e s ult i n i m m u n o s u p pr e s si o n or i m m u n o m o d ul ati o n. 
  
S y st e mi c gl u c o c orti c oi d s 
 
If p arti ci p a nt s r e c ei v e, or if t h e i n v e sti g at or b eli e v e s t h at parti ci p a nt s m u st r e c ei v e, a n y of 
t h e a b o v e m e di c ati o n s, t h e c a s e m u st b e di s c u s s e d wit h t h e m e dic al m o nit or a n d/ or 
tr e ati n g p h y si ci a n t o d et er mi n e if alt er n ati v e s ar e a v ail a bl e. T h e u s e of t h e s e m e di c ati o n s 
m u st b e d o c u m e nt e d o n t h e s o ur c e d o c u m e nt a n d C R F. 
4. 8 
E nr oll m e nt S c h e d ul e O v er vi e w 
T hi s st u d y will e nr oll p arti ci p a nt s i n f o ur c o h ort s wit h 1 2 p ar ti ci p a nt s i n e a c h c o h ort.  E a c h 
s u b s e q u e nt c o h ort will r e c ei v e a hi g h er d o s e of st u d y dr u g.  Wi t hi n e a c h c o h ort, 9 i n di vi d u al s 
will r e c ei v e a cti v e tr e at m e nt a n d 3 will r e c ei v e pl a c e b o.   
S e nti n el  D o si n g:  F or  t h e  fir st  d o s e i n  e a c h c o h ort,  all  s u bj e ct s  will  b e d o s e d  i n  a s e nti n el 
m a n n er. T h e s e nti n el d o s e will b e a d mi ni st er e d i n t h e f oll o wi n g p att er n:  
  I niti all y t w o p arti ci p a nt s ( 1 wit h a cti v e tr e at m e nt a n d 1 wit h pl a c e b o) will b e d o s e d a n d 
m o nit or e d f or a n o b s er v ati o n al p eri o d c o v eri n g t wi c e t h e pr e di c t e d tm a x ( 4 8 h o ur s).   
  
T h e N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o u p a n d t h e Tri al N et M e di c al Mo nit or will r e vi e w d at a 
( a s d e s cri b e d s e cti o n 4. 9. 1) fr o m t h e s e t w o i n di vi d u al s.  If a ppr o v e d b y b ot h, e nr oll m e nt 
of  t h e  n e xt  t hr e e  p arti ci p a nt s  will  o c c ur  ( 2  wit h  a cti v e  tr e at m e nt  a n d  1  wit h  pl a c e b o). 
T h e s e t hr e e will t h e n b e d o s e d a n d m o nit or e d f or 4 8 h o ur s. 
  
T h e N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o u p a n d t h e Tri al N et M e di c al Mo nit or will r e vi e w d at a 
( a s d e s cri b e d s e cti o n 4. 9. 1) fr o m t h e s e 3 i n di vi d u al s a s w ell a s a n y n e w d at a fr o m t h e 
fir st  t w o  p arti ci p a nt s.  If  a p pr o v e d  b y  b ot h  gr o u p s,  e nr oll m e nt  of  t h e  r e m ai ni n g  s e v e n 
p arti ci p a nt s will o c c ur ( 6 wit h a cti v e tr e at m e nt a n d 1 wit h pl a c e b o). 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 0 of 4 4  
 
C o h ort E nr oll m e nt: E v al u ati o n of a c c u m ul at e d d at a ( a s d e s cri b e d  s e cti o n 4. 9. 2) will o c c ur 
i n d e p e n d e ntl y  b y  t h e  N o v o  N or di s k  Tri al  S af et y  Gr o u p  a n d  t h e  Tri al N et  D at a  S af et y 
M o nit ori n g B o ar d w h e n at l e a st 9 i n di vi d u al s wit hi n a c o h ort h a v e d at a a v ail a bl e fr o m vi sit 6.  
If a p pr o v e d b y b ot h, r a n d o mi z ati o n of t h e n e xt c o h ort will pr o ce e d. 
 
P arti ci p a nt s w h o ar e s cr e e n e d b ut ar e n ot i n cl u d e d i n t h e c urr e nt c o h ort m a y r e s cr e e n f or 
p arti ci p ati o n i n a l at er c o h ort. 
4. 9 
O n g oi n g E nr oll m e nt D e ci si o n s 
4. 9. 1  
Wit hi n C o h ort: E v al u ati o n of s e nti n el d o si n g 
T h e Tri al N et M e di c al M o nit or a n d N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o u p will r e vi e w d at a 
fr o m t h o s e r e c ei vi n g s e nti n el d o s e s ( s e cti o n 4. 8) m a s k e d t o tr e at m e nt gr o u p  wit hi n 
e a c h c o h ort.  T hi s d at a i n cl u d e s A E r e p ort s r e g ar dl e s s of r el ati o n s hi p t o st u d y dr u g 
vit al si g n s a n d C B C i nf or m ati o n.   
C o nti n u e d e nr oll m e nt aft er t h e s e nti n el d o si n g wit hi n e a c h c o h o rt will r e q uir e a n 
a b s e n c e of a n y of t h e r ul e s f or i nt err u pti o n of t h e tri al/ c e s s ati o n of st u d y ( s e cti o n 
4. 1 0)  a n d  c o n c urr e n c e  b y  b ot h  t h e  Tri al N et  M e di c al  M o nit or  a n d N o v o  N or di s k 
Tri al S af et y Gr o u p.   
4. 9. 2  B et w e e n C o h ort s: E v al u ati o n of a c c u m ul at e d d at a 
T h e  Tri al N et  M e di c al  M o nit or  a n d  N o v o  N or di s k  Tri al  S af et y  Gr o u p  will  r e vi e w 
a c c u m ul at e d d at a aft er 9 i n di vi d u al s wit hi n a c o h ort h a v e d at a a v ail a bl e fr o m vi sit 
6 m a s k e d t o tr e at m e nt a s si g n m e nt a n d h a v e r e c ei v e d t h e fir st 5 s c h e d ul e d d o s e s.  
T hi s  d at a  i n cl u d e s  i n s uli n  d o s e,  all  a v ail a bl e  M M T T  A U C  C- p e pti d e  v al u e s,  A E 
r e p ort s  r e g ar dl e s s  of  r el ati o n s hi p  t o  st u d y  dr u g,  vit al  si g n s, a s  w ell  a s  cli ni c al 
l a b or at or y d at a. Cli ni c al l a b or at or y d at a i n cl u di n g n or m al r a n g e s a n d C- p e pti d e will 
b e pr o vi d e d b y i n di vi d u al p arti ci p a nt a s w ell a s i n s u m m ar y f or m.   
T h e  D S M B  will  r e vi e w  t h e  s a m e  i nt eri m  d at a.    D at a  fr o m  pl a c e b o  p arti ci p a nt s 
r e g ar dl e s s of c o h ort will b e gr o u p e d t o g et h er.     
D o s e e s c al ati o n t o t h e n e xt c o h ort will r e q uir e a n a b s e n c e of a n y of t h e r ul e s f or 
i nt err u pti o n of t h e tri al/ c e s s ati o n of st u d y ( s e cti o n 4. 1 0) a n d c o n c urr e n c e b y b ot h 
t h e D S M B a n d N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o u p.  
4. 9. 3  P arti ci p a nt R e pl a c e m e nt 
T h e ai m i s t o h a v e a mi ni m u m of 9 of 1 2 p arti ci p a nt s i n e a c h c o h ort c o m pl et e at 
l e a st 1 0 d o s e s of st u d y dr u g/ pl a c e b o a n d h a v e vi sit 1 4 a s s e s s m ent s.  If n e e d e d, 
t h e st u d y c a n r e cr uit a n d r e pl a c e u p t o t w o a d diti o n al p arti ci p a nt s t o e a c h c o h ort. 
If a p arti ci p a nt i s t o b e r e pl a c e d i n a c o h ort d u e t o a p arti ci p a nt wit h dr a w al, t h e 
n e wl y e nr oll e d p arti ci p a nt i s t o b e all o c at e d t o t h e s a m e tr e at m e nt gr o u p a s t h e 
i n di vi d u al w h o e n d e d t h eir st u d y p arti ci p ati o n. P arti ci p a nt with dr a w s will b e cl o s el y 
m o nit or e d; i n t h e e v e nt m or e t h a n t w o p arti ci p a nt s wit h dr a w f or  a n y r e a s o n fr o m a 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 1 of 4 4  
c o h ort b ot h N o v o N or di s k a n d Tri al N et will c o n d u ct a n a s s e s s m e nt of t h e pr ot o c ol 
i n c o nj u n cti o n wit h t h e D S M B a n d N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o up. 
4. 1 0 I nt err u pti o n of E nr oll m e nt/ Tri al C e s s ati o n  
T hi s s e cti o n li st s cli ni c al a n d l a b or at or y a d v er s e e v e nt s t h at will n e c e s sit at e i n d e p e n d e nt 
r e vi e w  b y  t h e  D at a  S af et y  a n d  M o nit ori n g  B o ar d  ( D S M B)  a n d  N o v o N or di s k  Tri al  S af et y 
Gr o u p t o d et er mi n e w h et h er t h er e s h o ul d b e i nt err u pti o n of e nr o ll m e nt i nt o t h e st u d y a s a 
w h ol e.  A s p art of t h eir o n g oi n g s af et y r e vi e w,  t h e D S M B  a n d N o v o N or di s k Tri al S af et y 
Gr o u p will al s o m a k e i n d e p e n d e nt j u d g m e nt s r e g ar di n g ot h er a d v e r s e e v e nt s r e q uiri n g tri al 
i nt err u pti o n.  Eit h er gr o u p m a y i nt err u pt e nr oll m e nt or st u d y co nti n u ati o n, b ut b ot h gr o u p s 
m u st i n d e p e n d e ntl y a gr e e t o c o nti n u e t h e st u d y aft er t h e e v al u a ti o n of t h e e v e nt( s).  
  
A n y s u s p e ct e d u n e x p e ct e d s eri o u s a d v er s e r e a cti o n ( S U S A R) 
  
O n e or m or e s u bj e ct s wit h s e v er e A E s ( C T C A E gr a d e 3 or hi g h er) c o n si d er e d t o b e 
r el at e d t o t e st dr u g, r e g ar dl e s s of d o s e c o h ort ( s e e s e cti o n 7.1. 5 f or C T C A E gr a di n g 
d efi niti o n s) 
  
T w o or m or e s u bj e ct s wit h A E s C T C A E gr a d e 2 or hi g h er, c o n si d er e d t o b e r el at e d t o 
t e st dr u g, r e g ar dl e s s of d o s e c o h ort 
 
5 
S T U D Y A S S E S S M E N T S 
 
S e e A p p e n di x 1 f or d et ail e d S c h e d ul e of A s s e s s m e nt s 
 
5. 1 
G e n er al A s s e s s m e nt s 
St u d y vi sit s f or all gr o u p s will o c c ur a c c or di n g t o t h e S c h e d ul e of A s s e s s m e nt s. G e n er al 
a s s e s s m e nt s i n cl u d e: 
  
M e di c al Hi st or y (i n cl u di n g lif e st yl e a n d p arti ci p a nt e x p eri e n ce a s s e s s m e nt s*) 
  
C o m pl et e or dir e ct e d p h y si c al e x a m 
  
Vit al Si g n s ( s o m e vi sit s will r e q uir e m or e fr e q u e nt c oll e cti o n s of t h e s e a s s e s s m e nt s 
d uri n g t h e tr e at m e nt p h a s e of t h e st u d y)  
  
C o n c o mit a nt M e di c ati o n 
  
A d v er s e E v e nt s 
  
C O VI D- 1 9 A s s e s s m e nt F or m 
 
*T h e s e vi sit s m a y o c c ur i n- p er s o n or r e m ot el y. P s y c h o s o ci al a s s e s s m e nt s will a d dr e s s p arti ci p a nt 
e x p eri e n c e s  i n  t h e  tri al  a n d  t h e  i m p a ct  of  tri al  p arti ci p ati o n  a n d  di a b et e s  di a g n o si s  o n  t h e 
p arti ci p a nt  a n d  f a mil y.  T h e s e  a s s e s s m e nt s  m a y  b e  c o m pl et e d  i n- p er s o n  or  di stri b ut e d  a n d 
c o m pl et e d o ut si d e of a s c h e d ul e d st u d y vi sit.    
 
 
5. 2      L a b or at or y A s s e s s m e nt s 
 
T h e f oll o wi n g g e n er al cli ni c al l a b or at or y a s s e s s m e nt s will b e p erf or m e d: 
  
C h e mi str y ( s o di u m, p ot a s si u m, c hl ori d e, C O 2, gl u c o s e, B U N, cr eati ni n e) 
  Li v er f u n cti o n t e st s ( A L T, A S T, al k ali n e p h o s p h at a s e, t ot al pr ot ei n, al b u mi n, t ot al a n d dir e ct 
bilir u bi n) 
  
H e m at ol o g y ( c o m pl et e bl o o d c o u nt wit h diff er e nti al a n d pl at el et s) 
  
Uri n e pr e g n a n c y t e st a s a p pr o pri at e 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 2 of 4 4  
  
A nti b o di e s t o HI V, h e p atiti s B ( a nti H B c A b, H B s A g), h e p atiti s C ( H C V), C yt o m e g al o vir u s 
( C M V I g G, I g M), a n d E p st ei n- B arr Vir u s ( E B V I g G, I g M, E B N A) 
  
C M V a n d E B V P C R 
  
T h yr oi d- sti m ul ati n g h or m o n e ( T S H) 
  
C o a g ul ati o n P a n el ( P T (I N R), a P T T, fi bri n o g e n a cti vit y) 
 
 
A d diti o n al a s s e s s m e nt s i n cl u d e: 
  
Di a b et e s r el at e d a ut o a nti b o di e s ( e. g., G A D 6 5 A, mI A A, I A- 2 A, I CA, Z n T 8 A) 
  I m m u n o g e ni cit y ( A nti- d o u bl e- str a n d e d D N A, a nti-I L 2, a nti-I L 1 0, a nti- T G F β 1) 
A nti- d s D N A, a nti- T G F- 1, a nti-I L 2, a n d a nti-I L- 1 0 a nti b o d y s a m pl e s will b e c oll e ct e d a c c or di n g 
t o t h e S c h e d ul e of A s s e s s m e nt s. All s a m pl e s m u st b e dr a w n pri or t o tri al pr o d u ct a d mi ni str ati o n 
if tri al pr o d u ct a d mi ni str ati o n i s pl a n n e d o n t h e s a m pli n g d a y. 
 
A s s e s s m e nt of a nti b o di e s a g ai n st T G F - 1, I L- 2, a n d I L- 1 0 i n s er u m will b e p erf or m e d at N o v o 
N or di s k A/ S or N o v o N or di s k A/ S a p p oi nt e d l a b or at or y. T h e a nti b o d y a n al y si s will b e p erf or m e d 
aft er l a st p ati e nt l a st vi sit ( L P L V), t h er ef or e t h e i n v e sti g at o r s m a y n ot b e a bl e t o r e vi e w t h e 
r e s ult s of a nti b o d y m e a s ur e m e nt s i n r el ati o n t o p ot e nti al A E s. 
 
 
5. 3      M e c h a ni sti c O ut c o m e A s s e s s m e nt s 
 
Tri al N et  a n d  N o v o  N or di s k  ( or  3r d  p art y  l a b or at ori e s  o p er ati n g o n  Tri al N et’ s  or  N o v o  N or di s k’ s 
b e h alf) will p erf or m i m m u n e a n d g e n eti c a s s a y s t o f urt h er u n d er st a n d m e c h a ni s m s t h at m a y b e 
u n d erl yi n g  t h e  T 1 D  di s e a s e  pr o c e s s  a n d  r e s p o n s e  t o  t h er a p y.  F or   t hi s  p ur p o s e,  s a m pl e s  f or 
P B M C s, D N A, R N A, pl a s m a, a n d s er u m will b e o bt ai n e d. M e c h a ni sti c a s s a y s will b e u s e d a s f or 
e x pl or at or y o ut c o m e s f or t hi s tri al. T h e s e i n cl u d e a s s e s s m e nt s r el at e d t o m e c h a ni s m of i m m u n e 
c h a n g e s  a n d  pl a s mi d  t ar g et  e n g a g e m e nt.  H L A  s cr e e ni n g  ( H L A  Cl a s s   I  a n d  II)  will  al s o  b e 
p erf or m e d. 
 
 
5. 4       M et a b oli c O ut c o m e A s s e s s m e nt s 
 
M et a b oli c a s s e s s m e nt s will c o n si st of: 
  
Gl u c o s e r e c or d s a n d r e p ort s of h y p o gl y c e mi a 
  I n s uli n d o s e 
  
H b A 1 c 
  
M M T T: 2- h o ur M M T T at s cr e e ni n g a n d at 1, 3, 6, a n d 1 2 m o nt h s aft er i niti al tr e at m e nt d o s e 
  
C G M d at a will b e c oll e ct e d fr o m p arti ci p a nt s w h o alr e a d y u s e th e s e d e vi c e s a s p art of t h eir 
cli ni c al c ar e 
 
 
5. 5 
  Vi sit Wi n d o w s 
 
E nr oll m e nt a n d i niti al tr e at m e nt vi sit ( vi sit 0) s h o ul d b e gi n w it hi n 1 m o nt h ( n o m or e t h a n 3 7 d a y s) 
fr o m t h e s cr e e ni n g vi sit ( vi sit - 1).  D o si n g vi sit s ( vi sit # 3- #1 3) s h o ul d b e wit hi n +/- 1 d a y fr o m t h e 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 3 of 4 4  
t ar g et d at e.  St u d y vi sit 1 4 s h o ul d b e wit hi n - 1/ + 1 d a y of t h e t ar g et d at e, vi sit 1 5 s h o ul d b e wit hi n 
- 3/ + 3 d a y s fr o m t h e t ar g et d at e. T h e wi n d o w f or t h e 6- a n d 1 2- m o nt h ti m e p oi nt s ( vi sit s 1 6 a n d 
1 7) i s +/- 1 4 d a y s. 
 
5. 6     Wit h dr a w al fr o m tr e at m e nt 
 
T h e ai m of t h e st u d y i s t o o bt ai n s af et y a n d m e c h a ni sti c d at a. T h e st u d y will b e c o n d u ct e d a s a 
m o difi e d  i nt e nt  t o  tr e at  pr ot o c ol  i n  w hi c h  all  s u bj e ct s  w h o  r e c ei v e  at  l e a st  o n e  d o s e  of  st u d y 
m e di c ati o n will b e u s e d f or s af et y a n al y si s. Wit h dr a w al fr o m tr e at m e nt d o e s n ot a ut o m ati c all y e nt ail 
wit h dr a w al  fr o m  t h e  st u d y.  Wit h dr a w al  fr o m  t h e  st u d y  will  o nl y o c c ur  if  t h e  p arti ci p a nt  di e s  or 
wit h dr a w s c o n s e nt.   
 
Wit h dr a w al fr o m tr e at m e nt c a n o c c ur f or a n u m b er of r e a s o n s, s o m e of w hi c h ar e o utli n e d b el o w:   
 
  I n di vi d u al s w h o mi s s t w o c o n s e c uti v e d o s e s or m or e t h a n t w o d os e s c oll e cti v el y w h et h er 
d u e t o mi s s e d vi sit or u n a bl e t o r e c ei v e st u d y dr u g d u e t o wit h h ol di n g r ul e s ( s e cti o n 4. 4) 
will n ot r e c ei v e f urt h er tr e at m e nt.  
  
A p arti ci p a nt m a y el e ct t o di s c o nti n u e st u d y m e di c ati o n s, m a y b e u n a bl e t o c o nti n u e t h e m, 
or  m a y  b e  wit h dr a w n  (t e m p or ar il y  or  p er m a n e ntl y)  at  t h e  di s cr eti o n  of  t h e  Pri n ci p al 
I n v e sti g at or if s/ h e d et er mi n e s t h at it i s u n s af e t o c o nti n u e or t h er e i s a si g nifi c a nt c h a n g e 
i n t h e ri s k/ b e n efit.  
  I n di vi d u al s w h o r e c ei v e a C O VI D- 1 9 v a c ci n ati o n aft er st art of st u d y dr u g, will n ot r e c ei v e 
f urt h er tr e at m e nt. 
  
S h o ul d a C O VI D- 1 9 b o o st er v a c ci n e b e c o m e r e c o m m e n d e d b y t h e C DC, i n di vi d u al s w h o 
r e c ei v e  a  C O VI D- 1 9  b o o st er  w hil e  i n  t h e  tr e at m e nt  p h a s e  of  t h e st u d y,  will  n ot  r e c ei v e 
f urt h er tr e at m e nt. 
 
I n di vi d u al s w h o ar e wit h dr a w n fr o m tr e at m e nt s h o ul d r e m ai n i n th e st u d y a n d u n d er g o s c h e d ul e d 
a s s e s s m e nt  vi sit s  a s  a p pr o pri at e  a n d  a n y  a d diti o n al  vi sit s  a s  n e e d e d  t o  a d dr e s s  o n g oi n g  A E s.  
M M T T t e st s will n ot o c c ur w hil e a n i n di vi d u al i s pr e g n a nt. 
 
6 
P A R TI CI P A N T S A F E T Y 
 
T h e ri s k s of t hi s st u d y ar e pr e s e nt e d i n t hi s pr ot o c ol a n d i n t h e i nf or m e d c o n s e nt f or m. A s a p h a s e 
1  st u d y,  s af et y  of  t h e  p arti ci p a nt s  i s  t h e  pri m ar y  ai m  of  t h e  t ri al  a n d  will  b e  c ar ef ull y  a s s e s s e d 
d uri n g t h e st u d y. K e y el e m e nt s of t hi s a s s e s s m e nt i n cl u d e: 
1.  D efi n e d  p ar a m et er s  f or  i nt err u pti o n  of  e nr ol m e nt  i n  t h e  tri a l  at  a n y  p oi nt  i n cl u di n g  a n y 
S U S A R, a si n gl e gr a d e 3 or t w o s u bj e ct s wit h gr a d e 2 a d v er s e e v e nt s c o n si d er e d t o b e 
r el at e d t o t e st dr u g ( s e cti o n 4. 1 0).  
2.  A  r e q uir e m e nt  t h at  e nr oll e d  i n di vi d u al s  li v e  i n  a  l o c ati o n  w it h  a c c e s s  t o  e m er g e n c y 
r e s p o n s e s er vi c e s. 
3.  A 4 8 h o ur o n- sit e o b s er v ati o n p eri o d aft er t h e fir st d o s e, a 4 h o ur o n- sit e o b s er v ati o n p eri o d 
f or  t h e  n e xt  4  d o s e s,  a n d  a  2  h o ur  o n- sit e  o b s er v ati o n  p eri o d  f or  t h e  r e m ai ni n g  d o s e s 
( s e cti o n 6. 5). 
4.  S e nti n el  d o si n g:  aft er  t h e  fir st  t w o  i n di vi d u al s  a n d  n e xt  t h r e e  i n di vi d u al s  f or  e a c h  d o s e 
c o h ort, a s af et y r e vi e w of all a c c u m ul at e d l a b or at or y, A E a n d i nj e cti o n sit e r e a cti o n d at a 
will b e p erf or m e d wit h a p pr o v al b y t h e Tri al N et M e di c al M o nit or  a n d N o v o N or di s k Tri al 
S af et y Gr o u p r e q uir e d b ef or e f urt h er e nr oll m e nt wit hi n a c o h ort  ( s e cti o n 4. 9). 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 4 of 4 4  
5.  R e vi e w  of  all  a c c u m ul at e d  s af et y  d at a  a n d  f or m al  a p pr o v al  b y   D at a  S af et y  M o nit ori n g 
B o ar d  a n d  N o v o  N or di s k  Tri al  S af et y  Gr o u p  b ef or e  pr o c e e di n g  t o s u b s e q u e nt  d o si n g 
c o h ort ( s e cti o n 4. 9). 
 
6. 1 
G e n er al St u d y A g e nt s c o n si d er ati o n s 
 
6. 1. 1  Pl a s mi d 
T h e  pl a s mi d  D N A  v e ct or  e n c o d e s  C D 7 4  a n c h or e d  t o  pr e- pr oi n s uli n ( P PI)  i n  a  m ulti- ci str o ni c 
e x pr e s si o n c o n str u ct. T h e a ut o a nti g e n P PI i s e x pr e s s e d f oll o w e d  b y a 2 A p e pti d e el e m e nt wit h 
T G F- 1, a n I R E S el e m e nt, I L- 1 0, a s u b s e q u e nt 2 A el e m e nt, a n d t er mi n a l I L- 2. T h e v e ct or will b e 
d eli v er e d vi a s u b c ut a n e o u s i nj e cti o n a s o utli n e d i n t h e tr e at m e nt s c h e d ul e.  
6. 1. 2  V e ct or C o n si d er ati o n s: 
Pl a s mi d  t h er a pi e s  h a v e  b e e n  pr o p o s e d  a n d  t e st e d  cli ni c all y  i n  a   n u m b er  of  i n di c ati o n s  ( P MI D: 
3 0 4 4 5 7 0 2). W hil e t h e pr e- cli ni c al a ni m al m o d el st u di e s s u g g e st t h e dr u g will b e s af e a n d r e s ult i n 
tr a n si e nt  v e ct or  r e s p o n s e s  ( s e e  I B  f or  a d diti o n al  i nf or m ati o n),  t h er e  r e m ai n s  a  p ot e nti al  t h at  a 
pl a s mi d- b a s e d d s D N A v e ct or m a y i n d u c e s o m e h o st i nfl a m m at or y r e s p o n s e a s a f u n cti o n of i n n at e 
s e n si n g m a c hi n er y ( e. g., a s a P A M P/ D A M P vi a T L R s). M or e o v er, t h er e i s a p o s si bilit y t h at t h e 
i n cl u si o n of 2 A el e m e nt s m a y alt er t h e str u ct ur e of tr a n s g e n e s. It i s c urr e ntl y u n k n o w n if t hi s c o ul d 
r e s ult i n a n i m m u n e r e s p o n s e t o t h e n ati v e pr ot ei n s a n d/ or m o difi e d e pit o p e s.  
6. 1. 3  Dr u g C o n si d er ati o n s:  
N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1  i s  i nt e n d e d  t o  b e  i nj e ct e d  wit h o ut  a dj u v a nt s  or  e n h a n c er s  a n d  t h er ef or e  i s 
e x p e ct e d  t o  o nl y  tr a n sf e ct  a n d  e x pr e s s  i n  a  li mit e d  n u m b er  of  c ell s.  T h e  s y st e mi c  e x p o s ur e  t o 
pl a s mi d- d eri v e d  pr ot ei n s  will  t h er ef or e  b e  mi ni m al  a n d  o c c urr e n c e  of  a c ut e  s af et y  si g n al s  i s 
c o n s e q u e ntl y c o n si d er e d u nli k el y. 
A ut o a nti g e n ( Pr e- pr oi n s uli n) 
R ati o n al e:  T h e  g o al  i s  u s e  h o st  m a c hi n er y  t o  e x pr e s s  e ct o pi c  tr a n s g e n e s  a n d  f a cilit at e  t h e 
pr e s e nt ati o n of P PI p e pti d e s i n t h e c o nt e xt of M H C cl a s s I a n d II m ol e c ul e s t o h o st T c ell s vi a 
e n d o g e n o u s a nti g e n pr o c e s si n g a n d pr e s e nt ati o n m a c hi n er y. T h e h y p ot h e si s i s t h at b ot h C D 4 + 
a n d C D 8 + T c ell r e s p o n s e s will b e i m p a ct e d, wit h t h e n et eff e ct  of s hifti n g t h e b al a n c e t o f a v or 
i m m u n e r e g ul ati o n. P ot e nti al si d e- eff e ct s m a y i n cl u d e a d el a y e d h y p er s e n siti vit y r e a cti o n at t h e 
i nj e cti o n  sit e  or  i n  a n y  sit e  t h e  dr u g  a n d  tr a n s g e n e  m a y  ulti m at el y  b e  e x pr e s s e d.  W hil e  t h e 
e x p e ct ati o n  i s  t h at  e n d o g e n o u s  T r e g s  will  b e  i n d u c e d  i n  r e s p o n s e  t o  t h e  dr u g,  m e c h a ni sti c  a n d 
cli ni c al  d at a  will  al s o  m o nit or  t h e  p ot e nti al  f or  t h e  tr a n s g e n e   t o  i n d u c e  t h e  e x p a n si o n  a n d/ or 
a cti v ati o n of eff e ct or c ell s t h at mi g ht a c c el er at e b et a c ell l o s s. 
6. 1. 4  I m m u n o m o d ul at or y A g e nt s: 
Tr a n sf or mi n g Gr o wt h F a ct or – B et a 1 ( T G F- 1) 
T G F- 1 i s a pl ei otr o pi c p ol y p e pti d e t h at i s k n o w n f or it s c a p a cit y t o f u n cti o n a s a n e g ati v e gr o wt h 
f a ct or t o li mit T c ell pr olif er ati o n. T G F-1 i s n at ur all y pr o c e s s e d b y pr ot e ol yti c a cti v ati o n i nt o it s 
a cti v e f or m t h at si g n al s t hr o u g h T G F- 1 r e c e pt or. O n-t ar g et i m pli c ati o n s of l o c ali z e d T G F- 1 ar e 
e x p e ct e d t o i n cl u d e t h e i n d u cti o n of b ot h C D 2 5 a n d F O X P 3 i n T c ell s f oll o wi n g T C R li g ati o n wit h 
r e d u c e d eff e ct or r e s p o n s e s a n d pr olif er ati o n. I n e x c e s s, T G F-1 c a n c a u s e ti s s u e r e m o d eli n g, wit h 
r e p ort s of r e n al fi br o si s f oll o wi n g s y st e mi c e x p o s ur e t o hi g h l e v el s of a cti v e T G F-1. Gi v e n t h e 
r e c e pt or s f or T G F-1 ar e wi d el y e x pr e s s e d t hr o u g h o ut t h e i n n at e a n d a d a pti v e i m m u n e s y st e m, 
T G F- 1 c a n l e a d t o br o a d i m m u n or e g ul ati o n, i n cl u di n g t h e d o w nr e g ul at i o n of M H C II e x pr e s si o n 
a n d c o sti m ul at or y m ol e c ul e s o n h o st A P C s. W hil e n o a g e nt s ar e e x p e ct e d t o i n d u c e m ut ati o n s or 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 5 of 4 4  
D N A d a m a g e, T G F- 1  si g n ali n g  h a s  pr e vi o u sl y  b e e n  a s s o ci at e d  wit h  tr a n sf or m ati o n  a n d 
e pit h eli al- m e s e n c h y m al tr a n siti o n ( E M T), a pr o c e s s t h at i s f a v o r e d i n t u m or c ell s a n d f a cilit at e s 
mi gr ati o n a n d i n v a si o n.  
 
I nt erl e u ki n- 1 0 (I L- 1 0) 
I nt erl e u ki n- 1 0 i s m o st oft e n r e g ar d e d a s a n a nti-i nfl a m m at or y cl a s s II c yt o ki n e c a p a bl e of i n d u ci n g 
a  t ol er o g e ni c  D e n driti c  C ell  ( D C)  p h e n ot y p e  a n d  s u b s e q u e nt  Tr 1- li k e  c ell  r e s p o n s e.  I L- 1 0  i s 
t h o u g ht t o a ut or e g ul at e it s o w n e x pr e s si o n t hr o u g h t h e I L- 1 0 R an d i n hi biti o n of p 3 8 si g n ali n g. A s 
wit h T G F- 1, I L- 1 0 e x ert s a br o a d arr a y of pl ei otr o pi c f u n cti o n s o n h o st a n d i m m u n e c ell s. Of n ot e, 
I L- 1 0 i s r e c o g ni z e d f or it s c a p a cit y t o s u p pr e s s h o st r e s p o n s e s t o T L R li g a n d s s u c h a s L P S i n 
m y el oi d li n e a g e c ell s. L o c all y, I L- 1 0 h a s b e e n r e p ort e d t o b e pr o d u c e d b y m a st c ell s, p ot e nti all y 
att e n u ati n g t h e i nfl a m m at or y b y pr o d u ct s of t h e s e c ell s t h at m a y  a ct l o c all y at t h e i nj e cti o n sit e.  I n 
g e n er al, I L- 1 0 s u p pr e s s e s i n n at e i nfl a m m ati o n, b ut c a n al s o i n d u c e i nfl a m m at or y s u b s et s at hi g h 
c o n c e ntr ati o n s.  I n  p e g yl at e d  f or m s,  I L- 1 0  i n d u c e s  m ar k er s  a s s o ci at e s  wit h  T  c ell  a cti v ati o n 
i n cl u di n g P D- 1, L a g 3, F a s L a n d d e cr e a s e d s er u m T Gb. T h u s, I L- 1 0 i s m o st oft e n r e g ar d e d a s a n 
i m m u n or e g ul at or y c yt o ki n e i n t h e c o nt e xt of m y el oi d e x p o s ur e t o P A M P s b ut m a y i n d u c e i m m u n e 
a cti v ati o n i n a tr a n s g e n e f or m.  
 
I nt erl e u ki n- 2 (I L- 2) 
I nt erl e u ki n- 2 i s c o m m o nl y r e g ar d e d a s a T c ell gr o wt h f a ct or a nd bi n d s t o t h e hi g h- affi nit y tri m eri c 
I L- 2 R c o m p o s e d of t h e c o m m o n g a m m a c h ai n  ( C D 1 3 2), I L 2 b et a c h ain ( C D 1 2 2),  a n d t h e hi g h 
affi nit y al p h a c h ai n ( C D 2 5). I m p ort a ntl y, t h e hi g h- affi nit y tri m eri c I L 2 R i s c o n stit uti v el y e x pr e s s e d 
o n T r e g s b ut c a n b e u pr e g ul at e d o n a cti v at e d c o n v e nti o n al T c ell s. I n Tr e g s, I L- 2 bi n di n g t h e I L 2 R 
i n d u c e s p S T A T 5 si g n ali n g a n d r ei nf or c e s F O X P 3 e x pr e s si o n a n d Tr e g fit n e s s. I n e x c e s s, I L- 2 c a n 
i n d u c e i nj e cti o n sit e r e a cti o n s, c h a n g e s i n v a s c ul ar p er m e a bilit y, l o c ali z e d i nfl a m m ati o n, a n d w h e n 
pr e s e nt i n hi g h c o n c e ntr ati o n s, bi n d t h e i nt er m e di at e affi nit y I L 2 R e x pr e s s e d o n i n n at e l y m p h oi d 
c ell s, N K c ell s, a n d c o n v e nti o n al a n d eff e ct or T c ell s u b s et s. T C R li g ati o n, T G F-
1 si g n ali n g, a n d 
c o- sti m ul ati o n  ar e  k n o w n  t o  u pr e g ul at e  C D 2 5  o n  T  c ell s  a n d  e arl y  I L- 2  si g n ali n g  i s  r e p ort e d  t o 
s u p pr e s s T h 1 7 c ell diff er e nti ati o n.  
 
6. 2 
P ot e nti al Ri s k s 
B a s e d  o n  lit er at ur e,  h y p ot h e si z e d  m e c h a ni s m  of  a cti o n  a n d  t h e  i n h er e nt  p ot e nti al  f or  r e a cti o n s 
w h e n  i ntr o d u ci n g  f or ei g n  m att er  i nt o  t h e  s u b c uti s,  t h e  f oll o wi n g  ri s k s  ar e  c urr e ntl y  c o n si d er e d 
p ot e nti al ri s k s f or h u m a n s u bj e ct s. 
6. 2. 1  A c c el er ati o n of B et a C ell D e str u cti o n 
W hil e t h e pl a s mi d v e ct or i s ai m e d t o pr o vi d e a nti g e n s p e cifi c t ol er o g e ni c t h er a p y, a n d n o e vi d e n c e 
of  i m m u n e  a cti v ati o n  w a s  s e e n  i n  pr e cli ni c al  st u di e s,  u ni nt e nti o n al  a c c el er ati o n  of  b et a  c ell 
d e str u cti o n d u e t o i m m u n e a cti v ati o n i s a p ot e nti al ri s k, w hi c h will b e m o nit or e d t hr o u g h s c h e d ul e d 
a s s e s s m e nt s of i n s uli n s e cr eti o n b y M M T T.    
6. 2. 2 
H y p er s e n siti vit y, All er gi c, a n d I nj e cti o n sit e r e a cti o n s 
Pl a s mi d  t h er a p y  i s  g e n er all y  w ell  t ol er at e d  a n d  t h e  D N A  c o m p o n e nt  i s  n ot  c o n si d er e d  t o  b e  
i m m u n o g e ni c. Pl a s mi d D N A v a c ci n e s h a v e b e e n e v al u at e d i n m a n y cli ni c al tri al s, a n d a n a p h yl a xi s 
h a s n ot b e e n r e p ort e d. T h e s af et y a n d t ol er a bilit y of D N A pl a s m i d v a c ci n e s h a s b e e n e v al u at e d i n 
s e v er al cli ni c al tri al s, b ot h f or a ut oi m m u n e di s e a s e s w h er e t h e  pl a s mi d s e x pr e s s e d a ut o a nti g e n s 
( 4 5) a n d f or a nti- vir al r e s p o n s e s ( 4 6), i n b ot h c a s e s wit h r e p e at e d d o s a g e s. A s s u m m ari z e d i n a 
r e vi e w arti cl e, m ulti pl e st u di e s h a v e r e p ort e d t h e D N A pl atf or m t o b e w ell t ol er at e d a n d t o h a v e a 
v er y g o o d s af et y r e c or d ( 4 7, 4 8). 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 6 of 4 4  
It  i s  n ot e w ort h y,  t h at  w hil e  a n a p h yl a cti c  r e a cti o n s  h a v e  b e e n  ob s er v e d  o n  o c c a si o n  wit h 
s u b c ut a n e o u s  or  i ntr a d er m al  a d mi ni str ati o n  of  p e pti d e s  i n  mi c e a s  w ell  a s  h u m a n s  ( 4 9),  s u c h 
a n a p h yl a cti c r e a cti o n s h a v e n ot b e e n o b s er v e d wit h D N A v a c ci n e s . T hi s i n cl u d e s pl a s mi d D N A 
a d mi ni str ati o n i n c o nj u n cti o n wit h c yt o ki n e r e s p o n s e m o difi er s a s w ell a s ot h er a dj u v a nt s f or w hi c h, 
u nli k e  p e pti d e  t h er a p y,  a n a p h yl a xi s  h a s  n ot  b e e n  o b s er v e d.  C yt o ki n e  m o d ul at or s  h a v e  b e e n 
a n al y z e d  i n  t h e  p a st,  a n d  s k e wi n g  of  i m m u n e  r e s p o n s e s  t o w ar d s  a ll er gi c  p at h w a y s  ( b ut  n ot 
a n a p h yl a xi s) c a n o c c ur b y u si n g I L- 4 a n d Il- 5 ( 5 0). T hi s i s i n c o ntr a st t o t h e c yt o ki n e s e x pr e s s e d 
b y o ur pl a s mi d, w hi c h w er e c ar ef ull y c h o s e n t o i n d u c e t ol er a n c e i n b ot h T H 1 ( m or e t h e a nti- vir al 
a n d a ut oi m m u n e eff e ct or r e s p o n s e s) a n d T H 2 ( m or e t h e all er gi c r e s p o n s e s) a n d t h u s n ot e n h a n c e 
a n y t y p e of all er gi c ( m or e T H 2-li k e) r e s p o n s e.   
F urt h er, a n i n n at e, i m m e di at e t y p e 1 r e a cti o n s h o ul d n ot b e i n c r e a s e d wit h t hi s pl a s mi d c o m p ar e d 
t o ot h er s, a n d r e p e at e d a d mi ni str ati o n s ar e n ot b eli e v e d t o b e a bl e t o pr o v o k e s u c h a r e s p o n s e.  
I n  pr e- cli ni c al  st u di e s  i n  mi c e  a n d  m o n k e y  wit h  r e p e at e d  d o si n g  of  t h e  pl a s mi d,  i m p ort a ntl y  n o 
a n a p h yl a cti c  or  ot h er  all er gi c  r e a cti o n s  h a v e  b e e n  d e m o n str at e d  ( s e e  I B  A p p e n di x  1  f or  a n 
o v er vi e w  of  all  n o n- cli ni c al  st u di e s  p erf or m e d).  T h e  l o n g e st  st u d y  c o n d u ct e d  i n  m o n k e y s  wit h 
N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 i s t h e 1 3 w e e k G L P t o xi cit y st u d y. M o n k e y s w er e d o s e d o n c e w e e kl y wit h eit h er 
v e hi cl e, 4 or 2 0 m g N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 pl a s mi d/ a ni m al ( a p pr o xi m at el y 1 a n d 5 m g pl a s mi d/ k g) f or 1 3 
w e e k s f oll o w e d b y eit h er 8 or 1 3 w e e k s r e c o v er y. A ni m al s w er e o b s er v e d aft er e a c h d o si n g f or 
cli ni c al  si g n s  a n d  n o  a d v er s e  r e a cti o n s  w er e  o b s er v e d.  I n  p arti c ul ar,  n o  a n a p h yl a cti c  r e a cti o n s 
w er e o b s er v e d. I n t h e st u d y, c yt o ki n e s (I L- 1 β, I L- 2, I L- 4, I L- 6 , I L 8, I L- 1 0, I L- 1 2 p 4 0, I L- 1 5, T G F β-
1, I F N- γ a n d T N F- α) w er e al s o m e a s ur e d ( pr e- st u d y, 2 h p o st d o s e aft er fir st a n d 4t h d o s e a n d at 
e n d of st u d y) a n d n o c h a n g e s w er e o b s er v e d. M o u s e s urr o g at e pl a s mi d h a s b e e n d o s e d t hri c e 
w e e kl y a n d u p t o o n c e d ail y i n mi c e wit h o ut a n y si g n s of a n a p h yl a xi s. 
E v al u ati o n  of  pl a s mi d  e x p o s ur e  i n  t h e  1 3  w e e k  t o xi cit y  st u d y  i n   n o n- h u m a n  pri m at e s  h a s 
d e m o n str at e d t h at pl a s mi d e x p o s ur e d e cli n e s t o l e v el s b el o w L L O Q wit hi n a w e e k aft er d o si n g.  
T h u s, wit h t h e pl a n n e d w e e kl y d o si n g, a c c u m ul ati o n i s n ot a nti ci p at e d i n t hi s st u d y, m e a ni n g t h at 
e x p o s ur e will n ot i n cr e a s e a s p arti ci p a nt s ar e d o s e d r e p e at e dl y f or t h e 1 2 w e e k s.  
T h u s,  w hil e  i n di vi d u al s  m a y  e x p eri e n c e  s y st e mi c  or  l o c al  a d v er s e  eff e ct s  s h ortl y  aft er  dr u g 
a d mi ni str ati o n i n cl u di n g h y p er s e n siti vit y, or all er gi c r e a cti o n s, t hi s i s n ot c o n si d er e d t o b e a li k el y 
eff e ct of t hi s t h er a p y.  I nj e cti o n sit e r e a cti o n s m a y al s o o c c ur.  All s u bj e ct s will b e cl o s el y m o nit or e d, 
a n d  i nj e cti o n  sit e s  will  b e  c ar ef ull y  a s s e s s e d  f or  l o c al  r e a cti o n  a n d  fi br o si s  at  e a c h  st u d y  vi sit. 
Pr oi nfl a m m at or y c yt o ki n e s will b e m o nit or e d i n r e s p o n s e t o pl a s mi d i nj e cti o n.   
 
6. 3     Pr ot e cti n g A g ai n st or Mi ni mi zi n g Ri s k s.  
6. 3. 1  I nf e cti o u s Di s e a s e  
T h e  pl a s mi d  v e ct or  i s  ai m e d  t o  pr o vi d e  a nti g e n  s p e cifi c  l o c al  t ol er a n c e  a n d  n ot  br o a d 
i m m u n o s u p pr e s si o n.  T h u s, w hil e t h e p ot e nti al f or i nf e cti o n will b e c ar ef ull y m o nit or e d wit h cli ni c al 
a n d l a b or at or y a s s e s s m e nt s, a d v er s e e v e nt s a s s o ci at e d wit h i nf e cti o u s di s e a s e s ar e n ot e x p e ct e d. 
6. 3. 1. 1  C O VI D- 1 9  
Ri s k of C O VI D- 1 9 i nf e cti o n i n r el ati o n t o p arti ci p ati o n i n tri a l: 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 7 of 4 4  
K e y ri s k f a ct or s f or a d v er s e o ut c o m e s of C O VI D- 1 9 i nf e cti o n a p p e ar t o b e ol d a g e, 
p arti c ul arl y  i n  c o m bi n ati o n  wit h  c ar di o v a s c ul ar  c o- m or bi dit y,  o b e sit y,  c a n c er  or 
c o m pr o mi s e d i m m u n e s y st e m. 
T h e  pl a s mi d  v e ct or  i s  n ot  e x p e ct e d  t o  i n cr e a s e  t h e  ri s k  of C O VI D- 1 9,  b ut  p ati e nt s 
m a y b e e x p o s e d t o t h e ri s k of C O VI D- 1 9 tr a n s mi s si o n a n d i nf e cti o n i n r el ati o n t o sit e 
vi sit s if a n o ut br e a k i s o n g oi n g.  
T h e ri s k of C O VI D- 1 9 tr a n s mi s si o n i n r el ati o n t o sit e vi sit s i s  o v er all c o n si d er e d t o b e 
l o w, h o w e v er t hi s m a y v ar y b et w e e n g e o gr a p hi c al ar e a s. F or sit e vi sit s a n d tr a v el t o 
sit e s,  p arti ci p a nt s  s h o ul d  f oll o w  l o c al  g ui d a n c e  a n d  r e c o m m e n d a ti o n s  of  r e gi o n al 
h e alt h  a ut h oriti e s,  s u c h  a s  m a s ki n g  a n d  s o ci al  di st a n ci n g,  t o  mi ni mi z e  t h e  ri s k  of 
e x p o s ur e t o C O VI D- 1 9.  
 
6. 3. 1. 2  C O VI D- 1 9 V a c ci n ati o n 
T h e eff e ct of st u d y dr u g o n effi c a c y of a n y v a c ci n e i s u n k n o w n.  T h e ai m of t h e st u d y 
dr u g i s t o i n d u c e l o c al, a nti g e n s p e cifi c t ol er a n c e t o i m p a ct i sl et a ut oi m m u nit y a n d 
b et a  c ell  d e str u cti o n.  T h e  st u d y  dr u g  i s  a d mi ni st er e d  s u b c ut a n e o u sl y  i nt o  t h e 
a b d o m e n  wit h  eff e ct s  i n  dr ai ni n g  l y m p h  n o d e s.  T h er e  i s  n o  e vi d e n c e  of  s y st e mi c 
t ol er a n c e  fr o m  pr e- cli ni c al  m o d el s  of  st u d y  dr u g.  H o w e v er,  t h ere  i s  a  t h e or eti c al 
p o s si bilit y  t h at  si m ult a n e o u s  a d mi ni str ati o n  of  a  n e w  a nti g e n, s u c h  a s  C O VI D- 1 9 
v a c ci n ati o n  c o ul d,  t hr o u g h  cr o s s- pr e s e nt ati o n,  l e a d  t o  t ol eri z ati o n  t o  t h at  a nti g e n 
( s u c h a s t h e C O VI D- 1 9 s pi k e pr ot ei n). T o miti g at e t hi s ri s k, stu d y dr u g a d mi ni str ati o n 
will b e s e p ar at e d fr o m C O VI D- 1 9 v a c ci n ati o n b ot h i n s p a c e ( s u b c ut a n e o u s i nj e cti o n 
i n  a b d o m e n  f or  st u d y  dr u g  a n d  d elt oi d  f or  C O VI D- 1 9  v a c ci n e),  a n d  i n  ti m e  ( a s 
d e s cri b e d b el o w).   
Si mil arl y, t h e C O VI D- 1 9 v a c ci n e m a y i m p a ct t h e st u d y b y i ntr o d u ci n g A E’ s a s s o ci at e d 
wit h  C O VI D- 1 9  v a c ci n ati o n  r at h er  t h a n  st u d y  m e di c ati o n  a n d  b y  i m p a ct  o n  t h e 
i m m u n e m e a s ur e s t e st e d i n t h e st u d y. 
P arti ci p a nt s will b e i n str u cti o n t o i nf or m t h e st u d y t e a m of pl a n s t o r e c ei v e C O VI D- 1 9 
v a c ci n ati o n. T o a d dr e s s b ot h t h e p ot e nti al ri s k of st u d y dr u g o n t h e C O VI D- 1 9 v a c ci n e 
a n d t h e i m p a ct of t h e C O VI D- 1 9 v a c ci n e o n st u d y dr u g:  
1.  D u e  t o  t h e  p ot e nti al  s e v erit y  of  C O VI D- 1 9  i nf e cti o n,  C O VI D- 1 9  v a c ci n ati o n 
will  b e  r e q uir e d  f or  all  p arti ci p a nt s  i n cl u di n g  b o o st er  v a c ci n a ti o n  if  eli gi bl e.  
S h o ul d  f urt h er  f ut ur e  b o o st er  v a c ci n ati o n  b e c o m e  a v ail a bl e  it  w ill  b e 
r e c o m m e n d e d t o all. 
2.  D o c u m e nt ati o n of C O VI D- 1 9 v a c ci n ati o n will b e r e q u e st e d fr o m  p arti ci p a nt s. 
3.  P arti ci p a nt s  ar e  t o  c o m pl et e  t h e  C O VI D- 1 9  v a c ci n e  s eri e s  or si n gl e  d o s e 
v a c ci n e  a n d  eli gi bl e  b o o st er s  at  l e a st  t w o  w e e k s  pri or  t o  r a n d o mi z ati o n.  If 
p arti ci p a nt s  h a v e  a c c e s s  t o  b ot h  a  m R N A  b a s e d  v a c ci n e  or  vir al v e ct or 
v a c ci n e, it i s r e c o m m e n d e d t h e p arti ci p a nt b e a d mi ni st er e d m R N A  C O VI D- 1 9 
v a c ci n e s.  
4.  P arti ci p a nt s w h o s cr e e n e d f or t h e tri al pri or t o t h e r e q uir e m e nt of C O VI D- 1 9 
v a c ci n ati o n ( Pr ot o c ol V 2. 0 0 5 J a n 2 0 2 1 ) ar e a bl e t o r e c ei v e t h e v a c ci n e d uri n g 
t h e 1 2- w e e k p eri o d of st u d y dr u g a d mi ni str ati o n b ut m u st w ait 3 d a y s fr o m 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 8 of 4 4  
l a st st u d y dr u g d o s e b ef or e g etti n g C O VI D- 1 9 v a c ci n ati o n. T h e y will r e c ei v e 
n o  f urt h er  st u d y  m e di c ati o n,  b ut  will  c o nti n u e  o n  st u d y  f or  s af et y  a n d 
m e c h a ni sti c f oll o w- u p. P arti ci p a nt s w h o h a v e c o m pl et e d t h e 1 2- w e e k c o ur s e 
of st u d y dr u g m a y r e c ei v e v a c ci n e 3 d a y s aft er l a st d o s e of st u d y dr u g. T h e y 
will c o nti n u e o n st u d y s c h e d ul e. 
5.  If  f ut ur e  r e c o m m e n d ati o n s  ar e  i s s u e d  b y  t h e  C D C  r e g ar di n g  b o o st er 
v a c ci n ati o n s, p arti ci p a nt s ar e a bl e t o r e c ei v e t h e b o o st er v a c c i n ati o n at l e a st 
3  d a y s  aft er  t h eir  1 2- w e e k  c o ur s e  of  st u d y  dr u g.  P arti ci p a nt s  w h o  wi s h  t o 
o bt ai n a f ut ur e C O VI D- 1 9 b o o st er v a c ci n ati o n d uri n g t h e tr e at m e nt p h a s e will 
w ait  3  d a y s  fr o m  l a st  d o s e  of  st u d y  dr u g,  will  r e c ei v e  n o  f urt h er  st u d y 
m e di c ati o n b ut will c o nti n u e o n st u d y f or s af et y a n d m e c h a ni sti c f oll o w- u p. 
6. 3. 2  G e n er al pr e c a uti o n s 
S u bj e ct s  will  n ot  b e  e nr oll e d  w h o  h a v e  ot h er  s eri o u s  a cti v e  m e d i c al  pr o bl e m s  a si d e  fr o m  t y p e 
1 di a b et e s.  Fr e q u e nt  m o nit ori n g  of  s u bj e ct s’  m e di c al  hi st or y,  p h y si c al  e x a mi n ati o n s,  a n d 
l a b or at or y  st u di e s  will  all o w  f or  e arl y  i d e ntifi c ati o n  of  a d v ers e  e v e nt s.  All  p arti ci p a nt s  will  b e 
r e q uir e d t o h a v e a d e q u at e h e m o gl o bi n t o all o w s af e fr e q u e nt v e ni p u n ct ur e. E v er y att e m pt will b e 
m a d e t o mi ni mi z e t h e n u m b er of v e ni p u n ct ur e s. 
S u bj e ct s will b e c o u n s el e d a b o ut t h e n e e d t o r e p ort a n y c h a n g e i n h e alt h st at u s b et w e e n or at t h e 
ti m e of vi sit s. Dir e ct e d q u e sti o ni n g a b o ut c o n c urr e nt ill n e s s will o c c ur b ef or e e a c h i nj e cti o n. N o 
i nj e cti o n will o c c ur i n t h o s e wit h si g n s or s y m pt o m s i n di c ati v e of a cti v e i nf e cti o n.   
All i niti al st u d y dr u g i nj e cti o n s will t a k e pl a c e i n a f a cilit y  t h at h a s r e s u s cit ati o n c a p a biliti e s a n d 
s u bj e ct s will b e cl o s el y m o nit or e d d uri n g a n d aft er t h e i nj e cti o n.  
 
6. 4 
Pr e g n a n c y 
 
M al e s u bj e ct s w h o ar e s e x u all y a cti v e will b e i n str u ct e d t o u s e  c o n d o m s fr o m r a n d o mi z ati o n u ntil 
3 m o nt h s p o st l a st a d mi ni str ati o n of st u d y dr u g t o a s s ur e s af et y. F e m al e s u bj e ct s wit h r e pr o d u cti v e 
p ot e nti al will b e i n str u ct e d t o u s e hi g hl y eff e cti v e m e a n s of b irt h c o ntr ol ( w hi c h i n cl u d e s a b sti n e n c e) 
fr o m r a n d o mi z ati o n u ntil 3 m o nt h s p o st l a st a d mi ni str ati o n of st u d y dr u g t o a s s ur e s af et y.  F e m al e 
s u bj e ct s will al s o b e a s k e d t o a v oi d pr e g n a n c y u ntil l a st s c h e d ul e d st u d y vi sit at 1 2 m o nt h s p o st 
r a n d o mi z ati o n.  T hi s  i s  t o  a s s ur e  a c c ur at e  e n d p oi nt  m e a s ur e m e nt s.  T h e y  will  u n d er g o  uri n e 
pr e g n a n c y t e sti n g at t h e st art of e v er y st u d y vi sit. All pr e g n a n ci e s t h at ar e i d e ntifi e d d uri n g t h e 
st u d y m u st b e f oll o w e d t o c o n cl u si o n a n d t h e o ut c o m e of e a c h m u st b e r e p ort e d.  T h e i n v e sti g at or 
s h o ul d b e i nf or m e d i m m e di at el y of a n y pr e g n a n c y o c c urri n g i n a f e m al e p arti ci p a nt.  Pr e g n a n c y 
will b e r e p ort e d b y sit e s t o t h e Tri al N et C o or di n ati n g C e nt er, w h o will pr o vi d e t hi s i nf or m ati o n t o 
t h e  Tri al N et  M e di c al  M o nit or,  D S M B,  a n d  N o v o  N or di s k  Tri al  S af et y  Gr o u p.  M o nit ori n g  of  t h e 
p arti ci p a nt s h o ul d c o nti n u e u ntil t h e c o n cl u si o n of t h e pr e g n a n c y. S u bj e ct s w h o ar e f o u n d t o b e 
pr e g n a nt w hil e o n t hi s st u d y s h all h a v e tr e at m e nt wit h dr a w n, b u t will still b e f oll o w e d f or s af et y a n d 
ot h er  st u d y  m e a s ur e s  a s  a p pr o pri at e.  Tr e at m e nt  will  n ot  b e  r e s u m e d.  If  a  p arti ci p a nt  w h o  w a s 
pr e vi o u sl y s e x u all y i n a cti v e b e c o m e s s e x u all y a cti v e, t h e p arti ci p a nt will b e c o u n s el e d a b o ut t h e 
n e e d t o u s e a r eli a bl e f or m of birt h c o ntr ol. 
 
6. 5  H y p er s e n siti vit y or A n a p h yl a xi s 
 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 2 9 of 4 4  
I n di vi d u al s wit h a hi st or y of s e v er e r e a cti o n s t o pr e vi o u s v a c ci n ati o n s will b e e x cl u d e d fr o m t h e 
st u d y.  All vi sit s will o c c ur o n a cli ni c al r e s e ar c h c e nt er or e q ui v al e nt f a cilit y wit h e q ui p m e nt a n d 
st aff  tr ai n e d  t o  r e c o g ni z e  a n d  tr e at  si g n s  a n d  s y m pt o m s  of  h y p e r s e n siti vit y  or  a n a p h yl a xi s 
r e a cti o n s.  All i n di vi d u al s will b e m o nit or e d f or r e a cti o n s f or 4 8 h o ur s o n- sit e aft er t h e fir st d o s e.  
T h e l e n gt h of t h e o b s er v ati o n ti m e ( 4 8 h o ur s) h a s b e e n c h o s e n b a s e d o n t h e pr e di ct e d T m a x  of l e s s 
t h a n 2 4 h o ur s f or t h e pl a s mi d e n c o d e d pr ot ei n s a n d it i s a nti ci p at e d t h at 4 8 h o ur s i s s uffi ci e ntl y 
l o n g ti m e t o o b s er v e a n y a c ut e a d v er s e e v e nt s p o s si bl y r el at e d t o Tm a x .  F or t h e s u b s e q u e nt 4 
d o s e s, i n di vi d u al s will b e m o nit or e d f or 4 h o ur s o n- sit e, a n d f or t h e r e m ai ni n g d o s e s, f or 2 h o ur s 
o n- sit e.  A d diti o n all y, a n y i n di vi d u al wit h si g n s a n d s y m pt o m s of h y p er s e n siti vit y or a n a p h yl a xi s 
r e a cti o n will b e m o nit or e d f or 8 h o ur s a n d di s c h ar g e d o nl y if st a bl e wit h n o f urt h er e vi d e n c e of 
r e a cti o n s. I n di vi d u al s t h at ar e n ot st a bl e aft er 8 h o ur s will be a d mitt e d f or a p pr o pri at e m e di c al c ar e 
a n d f urt h er o b s er v ati o n. 
 
7 
A D V E R S E E V E N T R E P O R TI N G A N D S A F E T Y M O NI T O RI N G 
 
7. 1   A d v er s e E v e nt D efi niti o n 
 
7. 1. 1  A d v er s e E v e nt 
 
I n  t hi s  cli ni c al  tri al,  a n  a d v er s e  e v e nt  i s  a n y  o c c urr e n c e  or  wor s e ni n g  of  a n  u n d e sir a bl e  or 
u ni nt e n d e d  si g n,  s y m pt o m  or  di s e a s e  w h et h er  or  n ot  a s s o ci at e d  w it h  t h e  tr e at m e nt  a n d  st u d y 
pr o c e d ur e s.   
Fr o m st u d y st art t hr o u g h vi sit 1 5, t h e i n v e sti g at or m u st r e c or d  all a d v er s e e v e nt s w hi c h ar e Gr a d e 
1 or gr e at er p er t h e N CI C T C A E ( s e e S e cti o n 7. 1. 5. Gr a di n g E v e n t S e v erit y b el o w), e x c e pt f or 
e v e nt s  r el at e d  t o  h y p o gl y c e mi a or  h y p er gl y c e mi a.  H y p o gl y c e mi a  a n d  h y p er gl y c e mi a  s h o ul d  b e 
r e c or d e d a s a d v er s e e v e nt s o nl y i n t h e c a s e of r e q uiri n g t h e a ssi st a n c e of ot h er s d u e t o l o s s of 
c o n s ci o u s n e s s or D K A. Aft er vi sit 1 5 o nl y gr a d e t w o or hi g h er A E s ar e t o b e r e c or d e d ( vi sit s 1 6 & 
1 7).  
All  S A E s  m u st  b e  r e c or d e d  t hr o u g h o ut  t h e  st u d y  (fr o m  si g ni n g  of  i nf or m e d  c o n s e nt  t hr o u g h 
vi sit 1 7). 
T h e i n v e sti g at or s h o ul d tr e at p arti ci p a nt s wit h a d v er s e e v e nt s a p pr o pri at el y a n d o b s er v e t h e m at 
s uit a bl e i nt er v al s u ntil t h e e v e nt s r e s ol v e or st a bili z e. 
A d v er s e e v e nt s m a y b e di s c o v er e d t hr o u g h: 
  o b s er v ati o n of t h e p arti ci p a nt; 
  q u e sti o ni n g t h e p arti ci p a nt; 
  u n s oli cit e d c o m pl ai nt b y t h e p arti ci p a nt. 
Q u e sti o ni n g of t h e p arti ci p a nt s h o ul d b e c o n d u ct e d i n a n o bj e ct i v e m a n n er. 
7. 1. 2  A d v er s e R e a cti o n 
 
A d v er s e  r e a cti o n s  ar e  a  s u b s et  of  all  s u s p e ct e d  a d v er s e  e v e nt s f or  w hi c h  t h er e  i s  r e a s o n  t o 
c o n cl u d e t h at t h e dr u g c a u s e d t h e e v e nt.  S u s p e ct e d a d v er s e r e a cti o n m e a n s a n y a d v er s e e v e nt 
f or  w hi c h  t h er e  i s  a  r e a s o n a bl e  p o s si bilit y  t h at  t h e  dr u g  c a u s e d  t h e  a d v er s e  e v e nt.    F or  t h e 
p ur p o s e s of s af et y r e p orti n g, “r e a s o n a bl e p o s si bilit y” m e a n s t h er e i s e vi d e n c e t o s u g g e st a c a u s al 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 0 of 4 4  
r el ati o n s hi p  b et w e e n  t h e  dr u g  a n d  t h e  a d v er s e  e v e nt.  A  s u s p e ct ed  a d v er s e  r e a cti o n  i m pli e s  a 
l e s s er  d e gr e e  of  c ert ai nt y  a b o ut  c a u s alit y  t h a n  a n  a d v er s e  r e a cti o n, w hi c h  m e a n s  a n y  a d v er s e 
e v e nt c a u s e d b y a dr u g.  E x a m pl e s of e vi d e n c e t h at s u g g e st a c a u s al r el ati o n s hi p (r e a s o n a bl e 
p o s si bilit y) b et w e e n t h e dr u g a n d t h e a d v er s e e v e nt i n cl u d e: 
  
A si n gl e o c c urr e n c e of a n e v e nt t h at i s u n c o m m o n a n d k n o w n t o b e str o n gl y a s s o ci at e d 
wit h dr u g e x p o s ur e 
  
O n e or m or e o c c urr e n c e s of a n e v e nt t h at i s n ot c o m m o nl y a s s o ci at e d wit h dr u g e x p o s ur e, 
b ut i s ot h er wi s e u n c o m m o n i n t h e p o p ul ati o n s e x p o s e d t o t h e dr u g 
  
A n  a g gr e g at e  a n al y si s  of  s p e cifi c  e v e nt s  o b s er v e d  i n  a  cli ni c al  tri al  ( s u c h  a s  k n o w n 
c o n s e q u e n c e s of t h e u n d erl yi n g di s e a s e or c o n diti o n u n d er i n v e sti g ati o n or ot h er e v e nt s 
t h at c o m m o nl y o c c ur i n t h e st u d y p o p ul ati o n i n d e p e n d e nt of dr u g t h er a p y) t h at i n di c at e s 
t h o s e e v e nt s o c c ur m or e fr e q u e ntl y i n t h e dr u g tr e at m e nt gr o u p t h a n i n a c o n c urr e nt or 
hi st ori c al c o ntr ol gr o u p. 
7. 1. 3   S eri o u s A d v er s e E v e nt/ R e a cti o n 
 
A s eri o u s a d v er s e e v e nt ( S A E) or r e a cti o n i s d efi n e d a s “ a n y a dv er s e e v e nt o c c urri n g at a n y d o s e 
t h at s u g g e st s a si g nifi c a nt h a z ar d, c o ntr ai n di c ati o n, si d e eff ect, or pr e c a uti o n.”  A n a d v er s e e v e nt 
or s u s p e ct e d a d v er s e r e a cti o n i s c o n si d er e d “ s eri o u s” if, i n t h e vi e w of eit h er t h e i n v e sti g at or or 
s p o n s or, it r e s ult s i n a n y of t h e f oll o wi n g o ut c o m e s: 
1.  D e at h.    A  d e at h  t h at  o c c ur s  d uri n g  t h e  st u d y  or  t h at  c o m e s  t o  t h e  att e nti o n  of  t h e 
i n v e sti g at or d uri n g t h e pr ot o c ol- d efi n e d f oll o w- u p aft er t h e c om pl eti o n of t h er a p y m u st 
b e r e p ort e d w h et h er it i s c o n si d er e d t o b e tr e at m e nt r el at e d or n ot. 
2.  A  lif e-t hr e at e ni n g  a d v er s e  e v e nt.    A  lif e-t hr e at e ni n g  e v e nt i s  a n y  a d v er s e  t h er a p y 
e x p eri e n c e t h at, i n t h e vi e w of t h e i n v e sti g at or, pl a c e s t h e p a rti ci p a nt at i m m e di at e 
ri s k of d e at h fr o m t h e r e a cti o n a s it o c c urr e d. 
3.  H o s pit ali z ati o n  or  pr ol o n g ati o n  of  e xi sti n g  h o s pit ali z ati o n wit h  t h e  e x c e pti o n  of 
h o s pit ali z ati o n r el ati n g t o i niti al di a g n o si s of t y p e 1 di a b et e s. 
a)  N ot e: I n g e n er al, h o s pit ali z ati o n si g nifi e s t h at t h e p arti ci p a nt h a s b e e n d et ai n e d 
( u s u all y i n v ol vi n g at l e a st a n o v er ni g ht st a y) at t h e h o s pit al or e m er g e n c y w ar d 
f or o b s er v ati o n a n d/ or tr e at m e nt t h at w o ul d n ot h a v e b e e n a p pr opri at e i n t h e 
p h y si ci a n’ s  offi c e  or  o ut- p ati e nt  s etti n g.  C o m pli c ati o n s  t h at  o c c ur  d uri n g 
h o s pit ali z ati o n ar e A E s. If a c o m p li c ati o n pr ol o n g s h o s pit ali z ati o n or f ulfil s a n y 
ot h er  s eri o u s  crit eri a,  t h e  A E  i s  s eri o u s.  W h e n  i n  d o u bt  a s  t o w h et h er 
‘ h o s pit ali z ati o n’  o c c urr e d  or  w a s  n e c e s s ar y,  t h e  A E  s h o ul d  b e  co n si d er e d 
s eri o u s. 
4.  P er si st e nt or si g nifi c a nt i n c a p a cit y or s u b st a nti al di sr u pti o n of t h e a bilit y t o c o n d u ct 
n or m al lif e f u n cti o n s 
5.  C o n g e nit al a n o m al y or birt h d ef e ct. 
6.  I m p ort a nt m e di c al e v e nt s t h at m a y n ot r e s ult i n d e at h, b e li f e-t hr e at e ni n g, or r e q uir e 
h o s pit ali z ati o n  m a y  b e  c o n si d er e d  s eri o u s  w h e n,  b a s e d  u p o n  a p pr o pri at e  m e di c al 
j u d g m e nt,  t h e y  m a y  j e o p ar di z e  t h e  p ati e nt  or  s u bj e ct  a n d  m a y  r eq uir e  m e di c al  or 
s ur gi c al i nt er v e nti o n t o pr e v e nt o n e of t h e o ut c o m e s li st e d a b o v e.  
A n a d v er s e e v e nt or s u s p e ct e d a d v er s e r e a cti o n i s c o n si d er e d “l if e-t hr e at e ni n g” if, i n t h e vi e w of 
eit h er t h e i n v e sti g at or or s p o n s or, it s o c c urr e n c e pl a c e s t h e p ati e nt or s u bj e ct at i m m e di at e ri s k of 
d e at h. It d o e s n ot i n cl u d e a n a d v er s e e v e nt or s u s p e ct e d a d v er s e r e a cti o n t h at, h a d it o c c urr e d i n 
a m or e s e v er e f or m, mi g ht h a v e c a u s e d d e at h. 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 1 of 4 4  
R e g ar dl e s s of t h e r el ati o n s hi p of t h e a d v er s e e v e nt t o st u d y dr u g, t h e e v e nt m u st b e r e p ort e d a s 
a s eri o u s a d v er s e e v e nt if it m e et s a n y of t h e a b o v e d efi niti o n s. 
7. 1. 4  U n e x p e ct e d A d v er s e E v e nt  
 
A n a d v er s e e v e nt/r e a cti o n i s c o n si d er e d u n e x p e ct e d w h e n t h e n at ur e ( s p e cifi cit y) or s e v erit y of 
t h e e v e nt i s n ot c o n si st e nt wit h t h e ri s k s d e s cri b e d i n t h e I n ve sti g at or’ s Br o c h ur e.  T hi s i n cl u d e s 
e v e nt s t h at o c c ur m or e fr e q u e ntl y t h a n e x p e ct e d. 
7. 1. 5  Gr a di n g E v e nt S e v erit y a n d C a u s alit y 
 
Tri al N et h a s a d o pt e d u s a g e of t h e N ati o n al C a n c er I n stit ut e ( N C I) C o m m o n T e c h n ol o g y Crit eri a 
f or A d v er s e E v e nt s ( C T C A E) a n d/ or st u d y- s p e cifi c crit eri a f or cl a s sifi c ati o n t o d e s cri b e t h e s e v erit y 
of a d v er s e e v e nt s. Tri al N et I n v e sti g at or s will al s o pr o vi d e a n a s s e s s m e nt of r el ati o n s hi p of A E t o 
st u d y dr u g a s n ot, u nli k el y, p o s si bl y, pr o b a bl y, or d efi nit el y r el at e d.  
T h e C T C A E v 5. 0 di s pl a y s Gr a d e s 1 t hr o u g h 5 wit h u ni q u e cli ni c al d e s cri pti o n s of s e v erit y of e a c h 
A E b a s e d o n t hi s g e n er al g ui d eli n e: 
  
Gr a d e 1: Mil d; a s y m pt o m ati c or mil d s y m pt o m s; cli ni c al or di a gn o sti c o b s er v ati o n s o nl y; 
i nt er v e nti o n n ot i n di c at e d. 
  
Gr a d e 2: M o d er at e; mi ni m al, l o cal or n o ni n v a si v e i nt er v e nti o n i n di c at e d; li miti n g a g e 
a p pr o pri at e i n str u m e nt al a cti vit i e s of d ail y li vi n g ( A D L) 
  
Gr a d e 3: S e v er e or m e di c all y si g nifi c a nt b ut n ot i m m e di at el y lif e-t hr e at e ni n g; 
h o s pit ali z ati o n or pr ol o n g ati o n of h o s pit ali z ati o n i n di c at e d; d i s a bli n g; li miti n g A D L 
  
Gr a d e 4: Lif e-t hr e at e ni n g c o n s e q u e n c e s; ur g e nt i nt er v e nti o n i ndi c at e d 
  
Gr a d e 5: D e at h r el at e d t o A E 
A s e mi c ol o n i n di c at e s “ or” wit hi n t h e d e s cri pti o n of t h e gr a d e 
 
7. 2   A d v er s e E v e nt R e p orti n g a n d M o nit ori n g 
 
A d v er s e e v e nt s will b e r e p ort e d t o t h e Tri al N et C o or di n ati n g C e nt er.  T h e i n v e sti g at or will gr a d e 
t h eir  s e v erit y  a c c or di n g  t o  c o m m o n  t o xi cit y  crit eri a  or  st u d y- sp e cifi c  crit eri a  a n d  will  m a k e  a 
d et er mi n ati o n of t h eir r el ati o n t o t h er a p y.  E v e nt s will b e a s s e s s e d a n d r e p ort e d c o n si st e nt wit h 
t h e I C H G ui d eli n e f or G o o d Cli ni c al Pr a cti c e, 2 1 C F R 3 1 2. 3 2 f or e x p e dit e d s af et y r e p orti n g, a n d 
p er t h e g ui d a n c e of t h e D H H S Offi c e f or H u m a n R e s e ar c h Pr ot e cti o n s ( O H R P).   
T h e  a d v er s e  e v e nt  c a s e  r e p ort  f or m  f or  t h e  pr ot o c ol  m u st  b e  c o m pl et e d  f or  all  a d v er s e  e v e nt s 
( A E). F or all t y p e s of i nj e cti o n sit e r e a cti o n s a d diti o n al i nf or m ati o n a b o ut t h e o bj e cti v e fi n di n g s a n d 
l o c al s y m pt o m s m u st al s o b e r e p ort e d i n t h e i nj e cti o n sit e r e a cti o n s e cti o n of t h e c a s e r e p ort f or m.   
F or r e p orti n g s eri o u s a d v er s e e v e nt s ( S A E), t h e M e d W at c h F or m s h o ul d al s o b e c o m pl et e d a n d 
f a x e d t o t h e T N C C wit hi n 2 4 h o ur s of w h e n t h e sit e w a s n otifi e d of t h e e v e nt.  T hi s will b e r e vi e w e d 
b y t h e Tri al N et M e di c al M o nit or, N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o u p, a n d t h e D S M B a s a p pr o pri at e.  
D e at h s m u st b e r e p ort e d i m m e di at el y.  E v e nt o ut c o m e a n d ot h er f oll o w- u p i nf or m ati o n r e g ar di n g 
t h e tr e at m e nt a n d r e s ol uti o n of t h e e v e nt will b e o bt ai n e d a n d r e p ort e d w h e n a v ail a bl e, if n ot k n o w n 
at t h e ti m e t h e e v e nt i s i niti all y r e p ort e d.  T h e f oll o w- u p i nf or m ati o n s h o ul d c o nt ai n s uffi ci e nt d et ail 
t o  all o w  f or  a  c o m pl et e  m e di c al  a s s e s s m e nt  of  t h e  c a s e  a n d  a n  i n d e p e n d e nt  d et er mi n ati o n  of 
p o s si bl e c a u s alit y.  
A d v er s e e v e nt s will b e a s s e s s e d b y t h e Tri al N et M e di c al M o nit or .   F or m al s af et y e v al u ati o n s will 
o c c ur b y Tri al N et M e di c al M o nit or, N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o u p, a n d t h e D S M B a s i n di c at e d 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 2 of 4 4  
b y  e nr ol m e nt  a n d  tri al  pr o gr e s s.    A d diti o n al  r e vi e w  will  o c c ur d uri n g  r e g ul arl y  s c h e d ul e  D S M B 
m e eti n g s w hi c h o c c ur a p pr o x i m at el y e v er y si x m o nt h s.    
F or  S A E s  t h at  ar e  u n e x p e ct e d  a n d  c o n si d er e d  p o s si bl y  or  pr o b a bl y  dr u g  r el at e d,  t h e  M e di c al 
M o nit or  will  pr o vi d e  i nf or m ati o n  o n  fr e q u e n c y  of  si mil ar  e v e nt s ,  a n d  g e n er at e  F D A  f or m  3 5 0 0 A 
r e p ort s ( M e d W at c h f or m) f or di stri b uti o n t o F D A, NI D D K, D S M B a nd sit e i n v e sti g at or s.  E x p e dit e d 
s af et y r e p ort s will b e s u b mitt e d t o t h e I N D b y t h e NI D D K.  T h e T N C C will al s o b e r e s p o n si bl e f or 
s e n di n g r e q uir e d s af et y i nf or m ati o n t o N o v o N or di s k S af et y. 
 
7. 2. 1  A d v er s e E v e nt T a b ul ati o n s 
 
All r e p ort e d a d v er s e e v e nt s will b e t a b ul at e d b y s y st e m or g a n c l a s s ( S O C) ( e. g., c ar di a c di s or d er s, 
e n d o cri n e  di s or d er s,  i nf e cti o n s  a n d  i nf e st ati o n s,  et c.),  s u pr a- or di n at e  t er m  ( e. g.,  p al pit ati o n s, 
h y p ert h yr oi di s m, a p p e n di citi s, et c.), s e v erit y, e x p e ct e d n e s s ( p er t h e i n v e sti g ati o n al br o c h ur e a n d 
c a u s alit y i n r el ati o n t o t h e st u d y a g e nt. A d v er s e e v e nt s ar e r e p ort e d s e p ar at el y f or t h e n u m b er of 
st u d y p arti ci p a nt s a n d t h e n u m b er o f e v e nt s s h o ul d st u d y p arti ci p a nt s e x p eri e n c e t h e s a m e t y p e 
of e v e nt m ulti pl e ti m e s.  
 
8 
S T A TI S TI C A L C O N SI D E R A TI O N S A N D A N A L Y SI S P L A N).   
 
T h e  pri m ar y  o bj e cti v e  of  t hi s  st u d y  i s  t o  i n v e sti g at e  t h e  s af et y  a n d  t ol er a bilit y  of  a s c e n di n g 
s u b c ut a n e o u s  w e e kl y  d o s e s  of  N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1  pl a s mi d  i n  p ati e nt s  w it h  T 1 D.  S e c o n d ar y 
o bj e cti v e s ar e t o i n v e sti g at e eff e ct o n t ar g et e n g a g e m e nt, i m m u n e r e s p o n s e, a n d b et a c ell f u n cti o n 
f oll o wi n g a s c e n di n g s u b c ut a n e o u s w e e kl y d o s e s of N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 pl a s mi d i n p ati e nt s wit h T 1 D. 
 
U p t o 1 2 p ati e nt s will b e r a n d o mi z e d t o tr e at m e nt v s. pl a c e b o wit hi n e a c h of t h e 4 c o h ort s. T h e 
g o al  i s  t o  h a v e  a  mi ni m u m  of  9  p ati e nt s  wit hi n  e a c h c o h ort  t o  h a v e r e c ei v e d  at l e a st  1 0  of  t h e 
pl a n n e d 1 2 tr e at m e nt d o s e s. 
 
 
T h e f oll o wi n g gr o u p s a n d p eri o d s ar e d efi n e d f or a n al yti c p ur p o s e s: 
 
 
 
R a n d o mi z e d:  M et eli gi bilit y crit eri a a n d r a n d o ml y a s si g n e d t o a  
tr e at m e nt ar m wit h o ut c o n si d er ati o n of a ct u all y r e c ei vi n g 
tr e at m e nt. 
R a n d o mi z e d a n d p arti all y tr e at e d:  M et eli gi bilit y crit eri a, r a n d o ml y a s si g n e d t o a tr e at m e nt 
ar m a n d r e c ei v e d at l e a st 1 – 9 d o s e s. 
R a n d o mi z e d a n d tr e at e d:  M et eli gi bilit y crit eri a, r a n d o ml y a s si g n e d t o a tr e at m e nt 
ar m a n d r e c ei v e d at l e a st 1 0 d o s e s.
Pr etr e at m e nt p eri o d  Fr o m si g ni n g of i nf or m e d c o n s e nt u ntil 1 st tr e at m e nt
O n-tr e at m e nt p eri o d  Fr o m 1 st tr e at m e nt t hr o u g h vi sit 1 5 ( or 5 w e e k s aft er l a st 
tr e at m e nt f or s u bj e ct s n ot r e c ei vi n g all i nj e cti o n s)
F oll o w- u p p eri o d  Fr o m vi sit 1 5 ( or 5 w e e k s aft er l a st tr e at m e nt) t hr o u g h 
vi sit 1 7
 
 
U p t o 2 a d diti o n al i n di vi d u al s wit hi n e a c h c o h ort m a y b e e nr oll e d t o c o m pl et e t h e t ar g et 9 p ati e nt s 
r a n d o mi z e d  a n d  tr e at e d  t o  a c c o u nt  f or  t h o s e  w h o  ar e  r a n d o mi z e d  a n d  p arti all y  tr e at e d  f or  a n y 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 3 of 4 4  
r e a s o n, i n cl u di n g C O VI D- 1 9 v a c ci n ati o n. A d diti o n al i n di vi d u al s m a y b e e nr oll e d u p o n a gr e e m e nt 
b et w e e n Tri al N et a n d N o v o N or di s k. 
 
All r a n d o mi z e d s u bj e ct s will b e u s e d f or a n al y s e s of P K e n d p oi n t s a n d all s u bj e ct s r e c ei vi n g at 
l e a st o n e d o s e of r a n d o mi z e d tr e at m e nt ( p arti all y tr e at e d a n d tr e at e d c o m bi n e d) will b e u s e d f or 
a n al y s e s  of  t h e  pri m ar y  e n d p oi nt.  S u bj e ct s  r e c ei vi n g  pl a c e b o  tr e at m e nt  will  b e  p o ol e d  a cr o s s 
c o h ort s.  
8. 1   Pri m ar y O ut c o m e a n d A n al y s e s 
T h e pri m ar y e n d p oi nt i s t h e n u m b er of a d v er s e e v e nt s r e c or d e d d uri n g t h e o n-tr e at m e nt p eri o d. 
T h e pri m ar y e n d p oi nt will b e pr e s e nt e d i n a s u m m ar y t a bl e i n cl u di n g n u m b er of A E s, n u m b er of 
s u bj e ct s wit h at l e a st 1 A E a n d p er c e nt a g e of e x p o s e d s u bj e ct s wit h at l e a st 1 A E. A s u m m ar y 
t a bl e will al s o b e m a d e b y s y st e m or g a n cl a s s a n d tri al pr o d u ct. 
 
S eri o u s a d v er s e e v e nt s will b e s u m m ari z e d o v er t h e e ntir e tri al (i. e., o n-tr e at m e nt a n d f oll o w- u p 
p eri o d).  
A st ati sti c al a n al y si s pl a n will b e writt e n i n a d diti o n t o t h e pr ot o c ol i n cl u di n g a m or e d et ail e d a n d 
t e c h ni c al el a b or ati o n of t h e st ati sti c al a n al y s e s. T h e st ati stic al a n al y si s pl a n will b e fi n ali z e d b ef or e 
u n bli n di n g ( d at a b a s e l o c k). 
8. 2   S e c o n d ar y O ut c o m e a n d A n al y s e s 
Δ A U C 0- 2 h ,C- p e pti d e, M M T T ; R el ati v e c h a n g e i n t h e ar e a u n d er t h e pl a s m a C- p e pti d e c o n c e ntr ati o n-ti m e 
c ur v e fr o m ti m e 0 t o 2 h o ur s d uri n g M M T T fr o m b a s eli n e t o 3 m o n t h s ( vi sit 1 4) b et w e e n gr o u p s.   
8. 3   A d diti o n al O ut c o m e s a n d A n al y s e s 
It i s t h e ai m t o p erf or m a d diti o n al a n al y si s t o g et i nf or m ati o n of t h e a p p e ar a n c e a n d di s a p p e ar a n c e 
of Pl a s mi d D N A a n d R N A at v ari o u s ti m e p oi nt s d uri n g t h e tri al s  c o n d u ct p eri o d: 
  
Pl a s mi d D N A a n d R N A c o n c e ntr ati o n s at s el e ct e d ti m e p oi nt s b efor e a n d fr o m 1 h o ur t o 
u p t o 4 8 h o ur s aft er t h e fir st d o s e ( Vi sit s 0- 2, d a y s 0- 2) 
  
Pl a s mi d D N A a n d R N A c o n c e ntr ati o n s b ef or e s e c o n d d o s e ( Vi sit 3, d a y 7 +/- 1 d a y) 
  
Pl a s mi d D N A a n d R N A c o n c e ntr ati o n s b ef or e d o s e 5 ( Vi sit 6, d a y 2 8 +/- 1 d a y) 
  
Pl a s mi d D N A a n d R N A c o n c e ntr ati o n s b ef or e d o s e 8 ( Vi sit 9, d a y 4 9 +/- 1 d a y) 
  
Pl a s mi d D N A a n d R N A c o n c e ntr ati o n s at s el e ct e d ti m e p oi nt s after l a st d o s e ( Vi sit 1 4, d a y 
8 4 +/- 3 d a y s; Vi sit 1 5, d a y 1 2 0 +/- 1 4 d a y s; Vi sit 1 6, d a y 1 8 0  +/- 1 4 d a y s; a n d Vi sit 1 7, 
d a y 3 6 5 +/- 1 4 d a y s) 
A d diti o n al  a n al y si s  of  t h e  i m p a ct  of  st u d y  dr u g  o n  m et a b oli c  o u t c o m e s  ( S e cti o n  5. 4)  will  b e 
d et er mi n e d at 1, 3, 6, a n d 1 2 m o nt h s f oll o wi n g tr e at m e nt i n cl u d i n g a n al y si s of c h a n g e s of t h e s e 
p ar a m et er s fr o m b a s eli n e. 
T h e  i m p a ct  of  C O VI D- 1 9  v a c ci n ati o n  a n d  r e s p o n s e  t o  v a c ci n ati o n o n  cli ni c al  a n d  i m m u n e 
r e s p o n s e s t o st u d y dr u g m a y b e e v al u at e d, a s n e e d e d.  
8. 4  T ar g et E n g a g e m e nt, M e c h a ni sti c O ut c o m e s a n d E x pl or at or y A n al y si s 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 4 of 4 4  
T h e pri m ar y ti m e p eri o d f or e v al u ati o n of t ar g et e n g a g e m e nt a n d  m e c h a ni sti c o ut c o m e s will b e 
a c c u m ul at e d d at a t hr o u g h vi sit # 1 4.  
T h e m e c h a ni sti c h y p ot h e si s u n d erl yi n g t hi s t h er a p y i s t h at N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1 i s a t ol eri zi n g a g e nt 
( s e e s e cti o n 2. 2. 2).  D u e t o t h e l o w n u m b er of tr a n sf e ct e d c ells it m a y n ot b e p o s si bl e t o d et e ct 
a n y  s y st e mi c  eff e ct.  H o w e v er,  e vi d e n c e  s u p p orti n g  t hi s  h y p ot h e s i s  w o ul d  b e  t h e  d et e cti o n  of 
pl a s mi d d eri v e d m R N A i n t h e cir c ul ati o n or i n cr e a s e i n c ert ai n c yt o ki n e s. F urt h er s u p p orti n g t hi s 
h y p ot h e si s will b e t h e d e m o n str ati o n of a r e d u cti o n i n n u m b er ( fr e q u e n c y), or c h a n g e of p h e n ot y p e, 
or f u n cti o n of a nti g e n s p e cifi c a ut or e a cti v e T c ell s t o w ar d s r e g ul ati o n.  T h e s e st u di e s will i n cl u d e, 
b ut n ot b e li mit e d t o fl o w c yt o m etr y, m e a s ur e s of g e n e f u n cti o n, a n d e v al u ati o n of c yt o ki n e l e v el s. 
T h e  r el ati o n s hi p s  of  s u c h  m e a s ur e s  will  b e  e v al u at e d  wit h  r e s p e ct  t o  C- p e pti d e,  i n s uli n  d o s e, 
gl y c e mi c c o ntr ol, P K a n d P D m ar k er s of t h er a p y, a n d g e n ot y p e (i n cl u di n g, b ut n ot li mit e d t o c o di n g 
a n d  n o n- c o di n g  g e n e s  H L A,  i n s uli n- V N T R,  C D 2 5,  P T P N 2,  a n d  I L 1 0).     A d diti o n al  e x pl or at or y 
a n al y si s f or t ar g et e n g a g e m e nt a n d m e c h a ni sti c o ut c o m e s t o a s s e s s t h e d ur ati o n of s u c h eff e ct s 
will b e d o n e u si n g d at a t hr o u g h m o nt h 1 2 p o st d o si n g. 
8. 5  St ati sti c al C o n si d er ati o n s f or A s s e s s m e nt of W or s e ni n g of I n s uli n S e cr eti o n. 
A c c el er ati o n  of  b et a  c ell  d e str u cti o n  d u e  t o  i m m u n e  a cti v ati o n i s  a  p ot e nti al  ri s k,  w hi c h  will  b e 
m o nit or e d  t hr o u g h  A U C
0- 2 h ,C- p e pti d e, M M T T .  T h e  l o g-tr a n sf or m e d  ar e a  u n d er  t h e  pl a s m a  C- p e pti d e 
c o n c e ntr ati o n-ti m e c ur v e fr o m ti m e 0 t o 2 h o ur s d uri n g M M T T o bt ai n e d at t h e e n d- of d o si n g d a y 
8 4 f or t h e tr e at m e nt a n d pl a c e b o ar m s will b e c o m p ar e d f or e a c h c o h ort ( N = 3 pl a c e b o, a n d N = 9 
tr e at e d)  a n d  at  t h e  e n d of  t h e st u d y  b y  c o h ort  (i. e.,  p o oli n g th e  pl a c e b o  tr e at e d  p ati e nt s,  N = 1 2 
pl a c e b o, N = 9 tr e at e d i n e a c h c o h ort). T h e st u d y h a s a 7 2 %- 8 7 % p o w er t o d et e ct a 5 0 % or l e s s 
tr e at m e nt r ati o w h e n t h e c o effi ci e nt of v ari ati o n ( C o V) r a n g e s fr o m 0. 3 8 t o 0. 3 1. T hi s i s b a s e d u p o n 
hi st ori c al d at a d eri v e d fr o m r e c e nt o n s et p ati e nt s ( 5 1). S h o ul d  t h e o b s er v e d C o V b e l ar g er, t h er e 
w o ul d b e a c orr e s p o n di n g r e d u cti o n i n p o w er t o d et e ct a 5 0 % tr e at m e nt r ati o or a c orr e s p o n di n g 
d e cr e a s e i n t h e d et e ct a bl e tr e at m e nt r ati o t o r et ai n 8 0 % or gr e at er p o w er. T h e p o w er t o d et e ct a 
5 0 % or l e s s tr e at m e nt r ati o at t h e e n d of t h e st u d y ( u si n g t h e p o ol e d pl a c e b o p ati e nt s) i s u nif or ml y 
> 9 0 %. 
8. 6 
I nt eri m M o nit ori n g Pl a n 
T h e st u d y pl a n i s t o a c cr u e 4 c o h ort s of 1 2 p ati e nt s e a c h, i n cr e a si n g t h e d o s e l e v el wit h e a c h 
c o h ort. Wit hi n c o h ort m o nit ori n g will f oll o w s e cti o n 4. 9. 1 a n d b et w e e n c o h ort m o nit ori n g will 
f oll o w s e cti o n 4. 9. 2 
9 
E T HI C A L C O N SI D E R A TI O N S A N D C O M P LI A N C E WI T H G O O D C LI NI C A L P R A C TI C E 
 
9. 1    St at e m e nt of C o m pli a n c e 
 
T hi s  st u d y  will  b e  c o n d u ct e d  i n  c o m pli a n c e  wit h  t h e  pr ot o c ol  a n d  c o n si st e nt  wit h  c urr e nt  G o o d 
Cli ni c al Pr a cti c e s ( G C P), a d o pti n g t h e pri n ci pl e s of t h e D e cl ar ati o n of H el si n ki, a n d all a p pli c a bl e 
r e g ul at or y r e q uir e m e nt s (I C H E 6, 4 5 C F R 4 6, a n d F D A 2 1 C F R s e cti o n s 1 1, 5 0, 5 6, 3 1 2). 
Pri or t o st u d y i niti ati o n, t h e pr ot o c ol a n d t h e i nf or m e d c o n s e n t d o c u m e nt s will b e r e vi e w e d a n d 
a p pr o v e d b y a n a p pr o pri at e I n d e p e n d e nt Et hi c s C o m mitt e e/ R e s e ar c h Et hi c s B o ar d (I E C/ R E B) or 
I n stit uti o n al R e vi e w B o ar d (I R B).  A n y a m e n d m e nt s t o t h e pr ot o col or c o n s e nt m at eri al s m u st al s o 
b e a p pr o v e d b ef or e t h e y ar e i m pl e m e nt e d. 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 5 of 4 4  
 
9. 2    P arti ci p ati n g C e nt er s 
P arti ci p ati n g Tri al N et cli ni c al sit e s m u st h a v e a n a p pr o pri at e a s s ur a n c e, s u c h a s a F e d er al- wi d e 
A s s ur a n c e  ( F W A)  or  a n  U n affili at e d  I n v e sti g at or s  A gr e e m e nt  ( UI A),  wit h  t h e  Offi c e  f or  H u m a n 
R e s e ar c h Pr ot e cti o n s ( O H R P), si n c e t h e y ar e a cti v el y e n g a g e d i n  r e s e ar c h a n d pr o vi d e i nf or m e d 
c o n s e nt.  T h e pr ot o c ol a n d c o n s e nt f or m s will b e a p pr o v e d b y I n stit uti o n al R e vi e w B o ar d s or Et hi c s 
C o m mitt e e s/ R e s e ar c h  Et hi c s  B o ar d s  at  e a c h  of  t h e  p arti ci p ati n g  cli ni c al  sit e s.  T h e  H e alt h 
I n s ur a n c e  P ort a bilit y  a n d  A c c o u nt a bilit y  A ct  ( HI P A A)  a n d  a p pli ca bl e  l o c al  r e g ul ati o n s  will  b e 
f oll o w e d b y e a c h p arti ci p ati n g i n stit uti o n i n a c c or d a n c e wit h ea c h i n stit uti o n’ s r e q uir e m e nt s.  T h e 
p arti ci p ati n g  i nt er n ati o n al  sit e s  will  o bt ai n  a p pr o v al  fr o m  t h e ir  c orr e s p o n di n g  r e vi e w  b o ar d s  i n 
a c c or d a n c e wit h t h eir l o c al pr o c e d ur e s a n d i n stit uti o n al r e q uir e m e nt s. 
T h e i n v e sti g at or i s r e q uir e d t o k e e p a c c ur at e r e c or d s t o e n s ur e  t h e c o n d u ct of t h e st u d y i s f ull y 
d o c u m e nt e d.  T h e i n v e sti g at or i s r e q uir e d t o e n s ur e t h at all c a s e r e p ort f or m s ar e l e gi bl y c o m pl et e d 
f or e v er y p arti ci p a nt e nt er e d i n t h e tri al. 
T h e i n v e sti g ati o n al sit e s p arti ci p ati n g i n t hi s st u d y will m ai n t ai n t h e hi g h e st d e gr e e of c o nfi d e nti alit y 
p er mitt e d f or t h e cli ni c al a n d r e s e ar c h i nf or m ati o n o bt ai n e d fr o m p arti ci p a nt s p arti ci p ati n g i n t hi s 
st u d y.  W h e n a s u bj e ct p arti ci p at e s i n t hi s st u d y at m or e t h a n o n e Tri al N et sit e, s h ari n g of t hi s 
i nf or m ati o n i s r e q uir e d.  S h ari n g of i nf or m ati o n o bt ai n e d d uri n g t hi s st u d y b et w e e n Tri al N et cli ni c al 
c e nt er s  a n d  affili at e s  will  b e  d o n e  t o  a s s ur e  s u bj e ct  u n d er st a n di n g  a n d  c o n s e nt,  s af et y,  a n d 
a d h er e n c e t o pr ot o c ol.  M e di c al a n d r e s e ar c h r e c or d s will b e m ai nt ai n e d at e a c h sit e i n t h e stri ct e st 
c o nfi d e n c e.    H o w e v er,  a s  a  p art  of  t h e  q u alit y  a s s ur a n c e  a n d  l e g al  r e s p o n si biliti e s  of  a n 
i n v e sti g ati o n, t h e i n v e sti g ati o n al sit e m u st p er mit a ut h ori z e d r e pr e s e nt ati v e s of t h e s p o n s or( s) a n d 
r e g ul at or y a g e n ci e s t o e x a mi n e ( a n d w h e n r e q uir e d b y a p pli c a bl e l a w, t o c o p y) r e c or d s f or t h e 
p ur p o s e s of q u alit y a s s ur a n c e r e vi e w s, a u dit s a n d e v al u ati o n of  t h e st u d y s af et y a n d pr o gr e s s.  
U nl e s s r e q uir e d b y t h e l a w s p er mitti n g c o p yi n g of r e c or d s, o nl y  t h e c o d e d i d e ntit y a s s o ci at e d wit h 
d o c u m e nt s  or  ot h er  p arti ci p a nt  d at a  m a y  b e  c o pi e d  ( o b s c uri n g  a n y  p er s o n all y  i d e ntif yi n g 
i nf or m ati o n).    A ut h ori z e d  r e pr e s e nt ati v e s,  a s  n ot e d  a b o v e,  ar e b o u n d  t o  m ai nt ai n  t h e  stri ct 
c o nfi d e nti alit y of m e di c al a n d r e s e ar c h i nf or m ati o n t h at m a y b e li n k e d t o i d e ntif y i n di vi d u al s.  T h e 
i n v e sti g ati o n al sit e will n or m all y b e n otifi e d i n a d v a n c e of a u diti n g vi sit s. 
 
9. 3    I nf or m e d C o n s e nt 
T h e pr o c e s s of a s s uri n g t h at i n di vi d u al s ar e m a ki n g a n i nf or m e d d e ci si o n a b o ut p arti ci p ati n g i n 
t hi s st u d y i n cl u d e s b ot h v er b al a n d writt e n c o m m u ni c ati o n. Writt e n m at eri al s i n cl u d e a V ol u nt e er 
H a n d b o o k, V ol u nt e er U n d er st a n di n g A s s e s s m e nt, a n d writt e n c o n s e nt f or m s. T h e c o n s e nt f or m s 
will b e r e vi e w e d wit h p arti ci p a nt s a n d t h e p arti ci p a nt will b e gi v e n ti m e t o r e vi e w t h e writt e n c o n s e nt 
f or m a n d a s k q u e sti o n s.   
A s p art of t h e i nf or m e d c o n s e nt pr o c e s s, t h e p arti ci p a nt will al s o b e r e q uir e d t o c o m pl et e a s h ort, 
writt e n  V ol u nt e er  U n d er st a n di n g  A s s e s s m e nt  t h at  i s  d e si g n e d  t o 
e n s ur e  t h at  t h e  s u bj e ct 
u n d er st a n d s t h e st u d y, a s w ell a s w h at i s b ei n g a s k e d of hi m/ h e r. T h e p arti ci p a nt will b e gi v e n a 
c o p y of t h eir c o n s e nt f or m s.   
T h e c o n s e nt pr o c e s s will b e c o n d u ct e d b y q u alifi e d st u d y p er s o n n el (t h e Tri al I n v e sti g at or or St u d y 
C o or di n at or a n d/ or a n ot h er d e si g n e e).  All p arti ci p a nt s ( or t h eir l e g all y a c c e pt a bl e r e pr e s e nt ati v e) 
m u st r e a d, si g n a n d d at e a c o n s e nt f or m pri or t o p arti ci p ati o n i n t h e st u d y, a n d/ or u n d er g oi n g a n y 
st u d y- s p e cifi c pr o c e d ur e s. 
T h e i nf or m e d c o n s e nt f or m m u st b e u p d at e d or r e vi s e d w h e n e v er t h er e i s n e w, cli ni c all y si g nifi c a nt 
i nf or m ati o n a p pli c a bl e t o t h e s af et y of t h e p arti ci p a nt s, w h e n i n di c at e d f or a pr ot o c ol a m e n d m e nt, 
a n d/ or w h e n e v er a n y n e w i nf or m ati o n b e c o m e s a v ail a bl e t h at m a y aff e ct a s u bj e ct’ s p arti ci p ati o n 
i n t h e st u d y.   


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 6 of 4 4  
 
9. 4    St u d y S u bj e ct C o nfi d e nti alit y 
St u d y  s u bj e ct  d at a,  w hi c h  i s  f or  r e p orti n g  p ur p o s e s,  will  b e  st or e d  at  t h e  Tri al N et  C o or di n ati n g 
C e nt er.    D at a  s e nt  t o  t h e  C o or di n ati n g  C e nt er  will  i d e ntif y  p ar ti ci p a nt s  b y  t h e  u ni q u e  Tri al N et 
I d e ntifi c ati o n N u m b er. T h e d at a e ntr y s y st e m at t h e C o or di n ati ng C e nt er i s a s e c ur e d, p a s s w or d 
pr ot e ct e d c o m p ut er s y st e m. At t h e e n d of t h e st u d y, all st u d y d at a b a s e s will b e ar c hi v e d at t h e 
C o or di n ati n g C e nt er f or l o n g-t er m st or a g e.   
St or e d s a m pl e s i n cl u di n g g e n eti c s a m pl e s c o ul d b e utili z e d t o l e ar n m or e a b o ut c a u s e s of t y p e 1 
di a b et e s, it s c o m pli c ati o n s ( s u c h a s e y e, n er v e, a n d ki d n e y d a m a g e) a n d ot h er c o n diti o n s f or w hi c h 
i n di vi d u al s wit h di a b et e s ar e at i n cr e a s e d ri s k, a n d h o w t o i m pr o v e tr e at m e nt. T h e r e s ult s of t h e s e 
f ut ur e a n al y s e s, a n d a n y m e c h a ni sti c st u di e s will n ot b e m a d e k n o w n t o t h e p arti ci p a nt. 
 
9. 5    Ri s k s a n d B e n efit s 
T h e ri s k s of t hi s st u d y ar e pr e s e nt e d i n t hi s pr ot o c ol, a n d i nf or m e d c o n s e nt f or m. A s a p h a s e 1 
st u d y, n o b e n efit i s li k el y f or st u d y p arti ci p a nt s b ut t h er e i s  b e n efit f or s o ci et y if t h e st u d y l e a d s t o 
t h er a p y t o h alt t y p e 1 di a b et e s di s e a s e pr o gr e s si o n. 
 
1 0 S T U D Y A D MI NI S T R A TI O N 
 
1 0. 1  Or g a ni z ati o n al Str u ct ur e 
 
T hi s st u d y i s p art of T y p e 1 Di a b et e s Tri al N et, w hi c h i s f u n d e d b y t h e N ati o n al I n stit ut e s of H e alt h. 
 
1 0. 2  R ol e of I n d u str y 
T hi s i s a Tri al N et pr ot o c ol. Tri al N et i s f u n d e d b y NI D D K.  F or t hi s pr ot o c ol, N o v o N or di s k pr o vi d e s 
i n v e sti g ati o n al pr o d u ct, s u p p ort s cli ni c al a cti viti e s a s s o ci at ed wit h t h e st u d y, a n d p arti ci p at e s i n 
t h e  s af et y  m o nit ori n g  of  t h e  st u d y.  T h e  pr ot o c ol  a n d  i m m u n e  bi om ar k er  pl a n,  e x e c uti o n,  a n d 
a n al y s e s  h a s  b e e n  d e v el o p e d  i n  c oll a b or ati o n  b et w e e n  t h e  Tri al N et  I n v e sti g at or s  a n d  N o v o 
N or di s k.  N o v o  N or di s k  i n v e sti g at or s  will  b e  i n v ol v e d  i n  di s c u s s i o n s  a b o ut  a d diti o n al  u s e  of 
s a m pl e s. 
 
1 0. 3  Gr o u p s a n d C o m mitt e e s 
1 0. 3. 1  T N 2 7 St u d y C h air C o m mitt e e 
 
T h e St u d y C h air C o m mitt e e will r e c ei v e p eri o di c r e p ort s fr o m t h e T N C C o n t h e pr o gr e s s of t h e 
st u d y.  T h e s e will i n cl u d e a c cr u al st at u s f or e a c h c o h ort a n d t h e o v er all st u d y.  A s a p pr o pri at e, 
a b str a ct s a n d m a n u s cri pt s d e ali n g wit h t h e pr o gr e s s of t h e tri a l s h all b e dir e ct e d b y t h e T N 2 7 St u d y 
C h air C o m mitt e e.  
1 0. 3. 2  Tri al N et C h air m a n’ s Offi c e a n d T N C C 
 
T h e Tri al N et C h air m a n’ s Offi c e a n d T N C C will w or k t o g et h er i n p r o vi di n g l e a d er s hi p t o t h e Tri al N et 
st u d y gr o u p t o i n cl u d e pr ot o c ol a n d m a n u al pr e p ar ati o n, tr ai ni n g f or cli ni c al sit e s, d e v el o p m e nt of 
st ati sti c al  d e si g n  f or  e a c h  st u d y,  a n d  a n al y si s of  st u d y  r e s ult s.    T h e  T N C C  will  al s o  c o or di n at e 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 7 of 4 4  
i nt er a cti o n s a m o n g t h e p arti ci p ati n g Tri al N et Cli ni c al C e nt er s, t e st l a b or at ori e s i n cl u di n g Tri al N et 
C or e L a b or at ori e s a n d ot h er s u b c o ntr a ct l a b or at ori e s, NI D D K, a n d ot h er s p o n s ori n g a g e n ci e s. 
1 0. 3. 3  Cli ni c al Sit e s 
 
Pri n ci p al I n v e sti g at or s at e a c h p arti ci p ati n g Tri al N et cli ni c al  sit e will o v er s e e all o p er ati o n s at t h at 
sit e.  T h e cli ni c al sit e s will f or w ar d all l a b or at or y a n d d at a c oll e cti o n f or m i nf or m ati o n t o t h e T N C C 
f or a n al y si s.  Dir e ct c o m m u ni c ati o n a n d sit e vi sit s, a s n e e d e d, will f a cilit at e e v al u ati o n of t h e tri al 
m a n a g e m e nt.   
1 0. 3. 4  M e di c al M o nit or 
 
Tri al N et h a s e st a bli s h e d p oli ci e s a n d pr o c e d ur e s f or a s s ur a n c e of s af et y m o nit ori n g of Tri al N et 
pr ot o c ol s a n d of Tri al N et s u bj e ct s.  
All a d v er s e e v e nt s will b e r e c or d e d o n t h e a d v er s e e v e nt f or m s,  w hi c h will b e s e nt t o t h e l o c al 
I R B s/ R E B s, p er t h eir r e p orti n g r e q uir e m e nt s, a n d t o t h e C o or di nati n g C e nt er.  
A n i n d e p e n d e nt p h y si ci a n will s er v e a s t h e m e di c al m o nit or f or t hi s st u d y w h o will m ai nt ai n r e g ul ar 
c o nt a ct wit h t h e st u d y a n d t h e St u d y C h air.  T h e M e di c al M o nit o r will r e vi e w all A E s, m a s k e d t o 
tr e at m e nt, a n d i n v ol v e ot h er Tri al N et m e m b er s a s a p pr o pri at e.  
1 0. 3. 5  Cli ni c al Sit e M o nit ori n g 
 
I n  or d er  t o c o n d u ct  t hi s  st u d y  wit h e st a bli s h e d r e s e ar c h  pri n cipl e s,  sit e  vi sit s  will  b e  c o n d u ct e d 
d uri n g t h e st u d y t o e v al u at e st u d y c o n d u ct a n d e n s ur e s u bj e ct s af et y.  All sit e s will b e m o nit or e d 
b y t h e T N C C a n d a p pr o pri at e Tri al N et c o m mitt e e s f or p ati e nt e nr oll m e nt, c o m pli a n c e wit h pr ot o c ol 
pr o c e d ur e s, c o m pl et e n e s s a n d a c c ur a c y of d at a e ntr y, t h e o c c urr e n c e a n d r e p orti n g of a d v er s e 
e v e nt s ( A E s) a n d s eri o u s a d v er s e e v e nt s ( S A E s), sit e p h ar m a c y a c c o u nt a bilit y/ o p er ati o n s a n d t o 
c o nfir m t h e pr e s e n c e of a p pr o pri at e I R B/ R E B r e g ul at or y a p pr o v al s/ d o c u m e nt s.   
A bli n d e d m o nit or a n d u n bli n d e d m o nit or will b e utili z e d i n t h e  e v al u ati o n of t h e af or e m e nti o n e d 
r e g ul at or y r e q uir e m e nt s a n d pr ot o c ol pr o c e d ur e s. A n u n bli n d e d mo nit or will vi sit t h e sit e s t o e n s ur e 
pr o d u ct h a n dli n g pr o c e d ur e s ar e a d h er e d t o a n d v erif y st u d y a g e nt a c c o u nt a bilit y.  
1 0. 3. 6  D at a S af et y a n d M o nit ori n g B o ar d ( D S M B) 
 
NI D D K h a s a p p oi nt e d i n di vi d u al s o ut si d e of Tri al N et t o s er v e a s t h e D S M B f or t hi s  st u d y. T hi s 
D S M B will pr o vi d e m o nit ori n g f or t hi s st u d y a s d e s cri b e d. 
1 0. 3. 7  T h e N o v o N or di s k Tri al S af et y Gr o u p  
 
T h e p ur p o s e of t h e N o v o N or di s k tri al s af et y gr o u p i s t o r e vi e w  a n d e v al u at e t h e s af et y d at a pri or 
t o  e a c h  d o s e  e s c al ati o n.  T h e  N o v o  N or di s k  tri al  s af et y  gr o u p  h as  t h e  m a n d at e  t o  a c c e pt  t h e 
pr o gr e s si o n t o n e xt d o s e l e v el, a c c e pt r e d u cti o n t o l o w er d o s e l e v el or st o p d o si n g a c c or di n g t o 
t h e  st o p pi n g  r ul e s.  If  s af et y  si g n al s  a n d/ or  i s s u e s  ar e  i d e ntifi e d  i n di c ati n g  a  n e e d  f or 
i m pl e m e nt ati o n of a cti o n s n ot c o v er e d b y t h e tri al pr ot o c ol, t hi s m u st b e e s c al at e d t o t h e N o v o 
N or di s k s af et y C o m mitt e e f or a n a gr e e m e nt o n a cti o n s n e e d e d. M e m b er s of t h e tri al s af et y gr o u p 
i n cl u d e:  
  
C V P of Cli ni c al P h ar m a c ol o g y a n d Tr a n sl ati o n al M e di ci n e ( C h air) 
  
M e di c al s p e ci ali st  


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 8 of 4 4  
  
Cli ni c al P h ar m a c ol o g y S ci e nti st  
  
C h air p er s o n fr o m s af et y C o m mitt e e or d el e g at e 
  
A d H o c p er s o n 
 
1 0. 4  S a m pl e a n d D at a St or a g e 
S a m pl e s  t o  b e  st or e d  f or  r e s e ar c h  p ur p o s e s  will  b e  l o c at e d  at  t h e  NI D D K  R e p o sit or y  a n d  at 
Tri al N et  L a b or at or y  Sit e s.  W hil e  Tri al N et  i s  a cti v e,  t h e  u s e  of   t h e  s a m pl e s  will  b e  r e stri ct e d  t o 
Tri al N et r e s e ar c h er s u nl e s s r e s e ar c h er s fr o m o ut si d e of Tri al N e t o bt ai n a p pr o v al fr o m t h e Tri al N et 
St e eri n g C o m mitt e e a n d  t h e NI D D K t o utili z e t h e s a m pl e s.  All sa m pl e s will b e c o d e d wit h u ni q u e 
st u d y n u m b er s, b ut Tri al N et r e s e ar c h er s will b e a bl e t o i d e ntif y s a m pl e s if it i s n e c e s s ar y t o c o nt a ct 
p arti ci p a nt s f or r e a s o n s of h e alt h or f or n otifi c ati o n t o t h e m a b o ut f ut ur e st u di e s. A p pr o v al fr o m t h e 
Tri al N et St e eri n g C o m mitt e e a n d t h e NI D D K w o ul d b e r e q uir e d b ef or e s u c h li n k a g e c o ul d o c c ur.  
R e s e ar c h er s fr o m o ut si d e of Tri al N et will n ot b e p er mitt e d t o i d e ntif y s a m pl e s.  
D at a c oll e ct e d f or t hi s st u d y will b e s e nt t o t h e T N C C. D e-i d e n tifi e d d at a will b e st or e d at t h e NI D D K 
R e p o sit or y,  u n d er  t h e  s u p er vi si o n  of  t h e  NI D D K/ NI H,  f or  u s e  b y r e s e ar c h er s  i n cl u di n g  t h o s e 
o ut si d e of Tri al N et. 
Wit h p er mi s si o n of t h e s u bj e ct, w h e n Tri al N et i s c o m pl et e d, s a m pl e s will c o nti n u e t o b e st or e d at 
t h e NI D D K R e p o sit or y.  Si n c e t h e st or e d d at a will b e f ull y d e-id e ntifi e d, it will n o l o n g er b e p o s si bl e 
t o i d e ntif y s a m pl e s.  T h u s, w h er e a s a s a m pl e c a n b e d e str o y e d up o n a p arti ci p a nt’ s r e q u e st d uri n g 
t h e e xi st e n c e of Tri al N et, it c a n n o l o n g er b e d e str o y e d o n c e Tri al N et i s c o m pl et e d.  H o w e v er, 
t h er e will still b e t h e p ot e nti al t o li n k d at a d eri v e d fr o m t h e s a m pl e s wit h d at a t h at h a d b e e n d eri v e d 
fr o m Tri al N et st u di e s.  O n c e Tri al N et i s c o m pl et e d, r e s e ar c h er s will o nl y o bt ai n a c c e s s t o s a m pl e s 
t hr o u g h gr a nt pr o p o s al s a p pr o v e d b y t h e NI D D K. T h e NI D D K will c o n v e n e a n e xt er n al p a n el of 
e x p ert s t o r e vi e w r e q u e st s f or a c c e s s t o s a m pl e s. 
 
1 0. 5  Pr e s er v ati o n of t h e I nt e grit y of t h e St u d y 
T h e s ci e ntifi c i nt e grit y of t h e tri al di ct at e s t h at r e s ult s b e r e p ort e d o n a st u d y- wi d e b a si s; t h u s, a n 
i n di vi d u al  C e nt er  will  n ot  r e p ort  t h e  d at a  c oll e ct e d  fr o m  it s  sit e  al o n e.    All  pr e s e nt ati o n s  a n d 
p u bli c ati o n s u si n g Tri al N et tri al d at a m u st pr ot e ct t h e m ai n o bj e cti v e s of t h e st u d y.  D at a t h at c o ul d 
b e p er c ei v e d a s t hr e at e ni n g t h e st u d y o ut c o m e will n ot b e pr e s e nt e d pri or t o r el e a s e of t h e pri m ar y 
st u d y o ut c o m e s.  A p pr o v al a s t o t h e ti mi n g of pr e s e nt ati o n s of d at a a n d t h e m e eti n g s at w hi c h t h e y 
mi g ht b e pr e s e nt e d will b e gr a nt e d b y t h e Tri al N et St e eri n g C o m mitt e e.  St u d y r e s ult s s h o ul d b e 
di s c u s s e d  wit h  t h e  n e w s  m e di a  o nl y  u p o n  a ut h ori z ati o n  of  t h e  St e eri n g  C o m mitt e e,  a n d  n e v er 
b ef or e t h e r e s ult s ar e pr e s e nt e d.  A n y writt e n st at e m e nt s a b o ut  t hi s st u d y t h at ar e s h ar e d wit h 
n ati o n al m e di a m u st b e a p pr o v e d b y Tri al N et b ef or e r el e a s e. 
 
1 0. 6  P arti ci p a nt R ei m b ur s e m e nt a n d C o m p e n s ati o n 
P arti ci p a nt s will b e c o m p e n s at e d f or st u d y p arti ci p ati o n. I n c o m pli a n c e wit h I C H G ui d a n c e E 6, t h e 
a m o u nt  a n d  m et h o d  of  p a y m e nt s  t o  s u bj e ct s  s h all  b e  d e si g n e d  t o a v oi d  c o er ci o n  or  u n d u e 
i nfl u e n c e o n t h e st u d y s u bj e ct s. P a y m e nt s t o s u bj e ct s will b e pr or at e d a n d n ot w h oll y c o nti n g e nt 
o n c o m pl eti o n of t h e tri al b y t h e s u bj e ct.


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 3 9 of 4 4  
S c h e d ul e of A s s e s s m e nt s 
 
  
S cr e e ni n g 
Tr e at m e nt
F oll o w- u p
V i sit n u m b er 
- 1 
0 
1
2
3
4
5
6
7
8 
9 
1 0
1 1
1 2
1 3
1 4
1 5
1 6
1 7 
V i sit D a y  
(- 3 7) 
0 
1
2
7
1 4
2 1
2 8
3 5
4 2 
4 9
5 6
6 3
7 0
7 7
8 4
1 2 0
1 8 0
3 6 5 
V i sit ( a p pr o xi m at e m o nt h s) 
  
  
 
  
  
3
4
6
1 2 
V i sit ( w e e k s) 
  
0 
 
1
2
3
4
5
6 
7 
8
9
1 0
1 1
1 2
1 6
2 4
5 2 
V i sit Wi n d o w ( d a y s) 
   
  
+ /- 1  
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1 
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1  
+/- 1 
+/- 3 
+/- 1 4  
+/- 1 4 
V i sit T y p e 
o ut p ati e nt  
i n p ati e nt 
o ut p ati e nt
Pr o c e d ur e 
S cr e e ni n g 1  
D o s e 
1  
O b s er v e A 
D o s e 
2 B 
D o s e 
3 B
D o s e 
4 B
D o s e 
5 B
D o s e 
6 C
D o s e 
7 C  
D o s e 
8 C
D o s e 
9 C
D o s e 
1 0 C
D o s e 
1 1 C
D o s e 
1 2 C
F oll o w
- u p
F oll o w-
u p
F oll o w-
u p
F oll o w-
u p 
I nf or m e d c o n s e nt 
X  
   
 
   
  
  
I n cl u si o n/ e x cl u si o n r e vi e w 
X  
X  
 
   
  
  
M e di c al hi st or y 
X  
 X  
 
   
  
X 
X 
X 
X 
P h y si c al e x a m 2  
X 
 
X 
 
 
X
X
X
X
 
X
 
X
X 
X
X
 
X
 
X
 
X
 
X
 
X
 
X
 
X 
Vit al si g n s 
X  
X  
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X  
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
A d v er s e E v e nt A s s e s s m e nt 3  
 
  
 
X 
X
X
X
X
X
 
X
 
X
X 
X
X
 
X
 
X
 
X
 
X
 
X
 
X
 
X 
C o n c o mit a nt M e di c ati o n s 
X  
X  
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X  
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
C o vi d- 1 9 A s s e s s m e nt 4 
X  
X  
 
  
 
X 
X 
X 
St u d y A g e nt/ Pl a c e b o A d mi ni str ati o n   
R a n d o mi z ati o n 
  
X  
 
  
 
 
St u d y A g e nt/ Pl a c e b o A d mi ni str ati o n  
  
X  
 
X 
X 
X 
X 
X 
X  
X 
X 
X 
X 
X
 
St u d y A g e nt/ Pl a c e b o A c c o u nt a bilit y   
  
X  
 
X 
X 
X 
X 
X 
X  
X 
X 
X 
X 
X
 
L a b or at or y T e st s  
C B C wit h diff er e nti al a n d pl at el et s  
X  
X  
X
X 
X
X
X  
 X
X
X 
X 
X 
X 
C h e mi str y a n d Li v er f u n cti o n t e st s  
X  
X  
X
X 
X
X
X  
  
X
X 
X
X 
HI V/ H e p atiti s B a n d C 
X  
   
 
   
  
X 
T 1 D a ut o a nti b o di e s 
X  
X  
 
   
X
X
X 
X 
T S H 
X 
 
 
  
  
X
X  
C o a g ul ati o n p a n el 
X  
X  
X
X 
X
X
X  
  
X
X 
X
X 
Uri n al y si s/ di p 
X  
X  
 
   
  
X
  
Uri n e pr e g n a n c y t e st 
X  
X  
 
X 
X 
X 
X 
X 
X  
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
X 
I G R A/ P P D 
X  
   
 
   
  
  
M et a b oli c A s s e s s m e nt s  
H b A 1 c 
X  
X  
 
   
  
X
X 
X 
M M T T 
X  
   
 
X
   
  
X
X 
X 
I n s uli n u s e5  
X 
 
X 
 
 
X
X
X
X
X
X 
X
X
X
X
X
 
X
 
X
 
X
 
X 
S af et y St u di e s 
E K G 
X  
X  
X 
X
   
  
X
  
E B V/ C M V vir al l o a d 6  
X 
X  
 
X
X
X
X  
X
X
 
X
X
 
E B V/ C M V s er ol o g y 
X  
   
 
   
  
X
  
A nti- d s D N A 7  
  
X  
 
 
X
  
  
X
X
X
 X  
Dr u g-i n d u c e d a nti b o di e s ( DI A) 7  
  
X  
 
X
  
 
X
X
X 
 X 
Cir c ul ati n g Pl a s mi d ( D N A/ R N A) 8  
 
X  
X 
X 
X 
X
 
X
 
X
X
X
X 
C yt o ki n e s 9  
 
X  
X
X
X
X
 
X
 
X
X  
M e c h a ni sti c St u di e s
1 0  
 
X 
X
 
X
X
 
 
X
X
X
X
X 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 4 0 of 4 4  
 
 
 
A = I n di vi d u al s will b e m o nit or e d o n- sit e f or 4 8 h o ur s aft er d o si n g wit h di s c h ar g e at t h at ti m e o nl y if st a bl e. 
B = I n di vi d u al s will b e m o nit or e d o n- sit e f or 4 h o ur s aft er d o si n g wit h di s c h ar g e at t h at ti m e o nl y if st a bl e.  I n di vi d u al s wit h a n y si g n s or 
s y m pt o m s of h y p er s e n siti vit y or a n a p h yl a xi s will b e m o nit or e d a  mi ni m u m of 8 h o ur s wit h di s c h ar g e at t h at ti m e o nl y if st a bl e  
C = I n di vi d u al s will b e m o nit or e d o n- sit e f or 2 h o ur s aft er d o si n g wit h di s c h ar g e at t h at ti m e o nl y if st a bl e. I n di vi d u al s wit h  a n y si g n s or 
s y m pt o m s of h y p er s e n siti vit y or a n a p h yl a xi s will b e m o nit or e d a  mi ni m u m of 8 h o ur s wit h di s c h ar g e at t h at ti m e o nl y if st a bl e 
 
 
1 = S cr e e ni n g: M a y o c c ur o v er m ulti pl e d a y s a s n e e d e d 
2 = P h y si c al E x a m: F ull e x a m at s cr e e ni n g, a n d 3 m o nt h s ( vi sit 1 4).  Dir e ct e d e x a m a s i n di c at e d b y m e di c al hi st or y or s y m pt o m s  at 
ot h er vi sit s a s i n di ct e d.  
3 = F or vi sit s 1 6 & 1 7: O nl y r e q uir e d t o c oll e ct S A E s a n d a n y g r a d e t w o or hi g h er A E s; All ot h er vi sit s will r e p ort all A E s gra d e 1 or 
hi g h er. 
4 = C o vi d- 1 9 A s s e s s m e nt s will b e c o m pl et e d P R N d uri n g vi sit s 3- 1 3 b a s e d o n e x p o s ur e a n d s y m pt o m s. 
5 = C G M d at a fr o m p arti ci p a nt s w h o c urr e ntl y u s e t h e s e d e vi c e s a s a p art of t h eir st a n d ar d cli ni c c ar e will b e a s k e d t o pr o vi d e t hi s 
d at a t o a s s e s s t h eir di a b et e s m a n a g e m e nt a n d i n s uli n u s e. 
6 = Vir al P C R: All s u bj e ct s will h a v e s er ol o g y a n d P C R f or E B V/ C M V at s cr e e ni n g a n d vi sit 1 5. S a m pl e s f or vir al l o a d will b e o bt ai n e d 
at ot h er ti m e p oi nt s t o b e t e st e d i n s y m pt o m ati c i n di vi d u al s. 
7 = T h e f oll o wi n g dr u g-i n d u c e d a nti b o di e s ( DI A) will b e m e a s ur e d: a nti- d s D N A, a nti-I L 2, a nti-I L 1 0, a nti- T G F β. A nti- d s D N A will b e 
m e a s ur e d r e al-ti m e a n d c oll e ct e d s e p ar at el y fr o m t h e ot h er DI A s , w hi c h will b e t e st e d i n b at c h. Sa m pl e s c oll e ct e d at d o si n g vi sit s will 
b e c oll e ct e d pr e- d o s e.  
8 = Pl a s mi d D N A/ R N A s a m pl e s will b e c oll e ct e d at vi sit s 0, 1, 2, 3 , 6, 9, 1 4, 1 5, 1 6, 1 7. At vi sit s 0- 2, s a m pl e s will b e c oll e ct e d at th e 
f oll o wi n g ti m e p oi nt s r el at e d t o D o s e 1: Pr e- d o s e a n d t h e n p o st- d o s e at 1 h, 8 h +/- 1 h, 1 2 h +/- 1 h, 2 4 h +/- 4 h, 4 8 h +/- 6 h. S a m pl e s at V 3 
a n d l at er d o si n g vi sit s will b e c oll e ct e d pr e- d o s e. 
9 = C yt o ki n e s a m pl e s t o a s s e s s s a f et y a n d m e c h a ni s m of a cti o n will b e c oll e ct e d at Vi sit s 0, 1, 2, 3, 6, 9, 1 4, 1 7. At Vi sit s 0- 2, s am pl e s 
will b e c oll e ct e d at t h e f oll o wi n g ti m e p oi nt s r el at e d t o D o s e 1: Pr e- d o s e a n d t h e n p o st- d o s e at 8 h +/- 1 h, 2 4 h +/- 4 h, 4 8 h +/- 6 h. 
S a m pl e s at V 3 a n d l at er d oi n g vi sit s will b e c oll e ct e d pr e- d o s e . 
1 0 = M e c h a ni sti c st u di e s: Will i n cl u d e s a m pl e s f or R N A, pl a s m a, s er u m, D N A, m e a s ur e s of T a n d B c ell n u m b er a n d f u n cti o n.  T h e 
s c h e d ul e f or t h e s e a s s e s s m e nt s m a y v ar y a s a p pr o pri at e.  At n o ti m e will t h e bl o o d dr a w v ol u m e e x c e e d w h at i s all o w a bl e a c c or di n g 
t o t h e p arti ci p a nt’ s a g e a n d b o d y w ei g ht. At d o si n g vi sit s, m e c h a ni sti c s a m pl e s will b e c oll e ct e d pr e- d o s e. Vi sit 1 s a m pl e s wi ll b e 
c oll e ct e d 2 4 h +/- 4 h aft er fir st d o s e. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 4 1 of 4 4  
 
 
1 1  R E F E R E N C E S  
1.  H arri s MI, C o wi e C, St er n M P, B o y k o E J, R ei b er G E, B e n n ett P H. Di a b et e s i n A m eri c a , 
N ati o n al Di a b et e s I nf or m ati o n Cl e ari n g h o u s e. 2 0 0 7. 
2.  D u c a, L. M., W a n g, B., R e w er s, M., & R e w er s, A. ( 2 0 1 7). Di a b eti c k et o a ci d o si s at 
di a g n o si s of t y p e 1 di a b et e s pr e di ct s p o or l o n g-t er m gl y c e mi c c o ntr ol. Di a b et e s c ar e, 
4 0 ( 9), 1 2 4 9- 1 2 5 5. 
3.  E d g e, J., H a w ki n s, M., Wi nt er, D., & D u n g er, D. ( 2 0 0 1). T h e ri s k a n d o ut c o m e of c er e br al 
o e d e m a d e v el o pi n g d uri n g di a b eti c k et o a ci d o si s. Ar c hi v e s of di s e a s e i n c hil d h o o d, 8 5 ( 1), 
1 6- 2 2. 
4.  Mill er, K. M., F o st er, N. C., B e c k, R. W., B er g e n st al, R. M., D u B o s e, S. N., Di M e gli o, L. 
A., M a a h s, D. M., & T a m b orl a n e, W. V. ( 2 0 1 5). C urr e nt st at e of t y p e 1 di a b et e s tr e at m e nt 
i n t h e U S: u p d at e d d at a fr o m t h e T 1 D E x c h a n g e cli ni c r e gi str y. Di a b et e s C ar e, 3 8 ( 6), 
9 7 1- 9 7 8. 
5.  T a o, B. T., & T a yl or, D. G. ( 2 0 1 0). E c o n o mi c s of t y p e 1 di a b et e s. E n d o cri n ol o g y a n d 
m et a b oli s m cli ni c s of N ort h A m eri c a, 3 9 ( 3), 4 9 9- 5 1 2. 
6.  Y a n g, W., D all, T. M., B er o nij a, K., Li n, J., S e mill a, A. P. , C h a kr a b arti, R., & H o g a n, P. F. 
( 2 0 1 8). E c o n o mi c C o st s of Di a b et e s i n t h e U. S. i n 2 0 1 7. Di a b et e s C ar e, 4 1 ( 5), 9 1 7- 9 2 8. 
7.  Di a b et e s C o ntr ol a n d C o m pli c ati o n s Tri al R e s e ar c h Gr o u p. ( 1 9 9 3). T h e eff e ct of i nt e n si v e 
tr e at m e nt of di a b et e s o n t h e d e v el o p m e nt a n d pr o gr e s si o n of l o ng-t er m c o m pli c ati o n s i n 
i n s uli n- d e p e n d e nt di a b et e s m ellit u s. N e w E n gl a n d j o ur n al of m e di ci n e, 3 2 9 ( 1 4), 9 7 7- 9 8 6. 
8.  G a g n u m, V., S a e e d, M., St e n e, L. C., L ei v e st a d, T., J o n er, G., & S kri v ar h a u g, T. ( 2 0 1 8). 
L o w i n ci d e n c e of e n d- st a g e r e n al di s e a s e i n c hil d h o o d- o n s et t y p e 1 di a b et e s f oll o w e d f or 
u p t o 4 2 y e ar s. Di a b et e s C ar e, 4 1 ( 3), 4 2 0- 4 2 5. 
9.  C o st a c o u, T., & Or c h ar d, T. J. ( 2 0 1 8). C u m ul ati v e ki d n e y c o m pli c ati o n ri s k b y 5 0 y e ar s of 
t y p e 1 di a b et e s: t h e eff e ct s of s e x, a g e, a n d c al e n d ar y e ar at o n s et. Di a b et e s C ar e, 
4 1 ( 3), 4 2 6- 4 3 3. 
1 0. Li n d, M., S v e n s s o n, A.- M., K o si b or o d, M., G u d bj ör n s d ottir, S., Pi v o di c, A., W e d el, H., 
D a hl q vi st, S., Cl e m e nt s, M., & R o s e n gr e n, A. ( 2 0 1 4). Gl y c e mi c c o ntr ol a n d e x c e s s 
m ort alit y i n t y p e 1 di a b et e s. N e w E n gl a n d J o ur n al of M e di ci n e, 3 7 1 ( 2 1), 1 9 7 2- 1 9 8 2. 1 3.  
1 1. Ali, M. K., B ull ar d, K. M., S a a d di n e, J. B., C o wi e, C. C., I m p er at or e, G., & Gr e g g, E. W. 
( 2 0 1 3). A c hi e v e m e nt of g o al s i n U S di a b et e s c ar e, 1 9 9 9 – 2 0 1 0. N e w E n gl a n d J o ur n al of 
M e di ci n e, 3 6 8 ( 1 7), 1 6 1 3- 1 6 2 4. 
1 2. W h err ett, D. K., C hi a n g, J. L., D el a m at er, A. M., Di M e gli o, L. A., Git el m a n, S. E., G ottli e b, 
P. A., H er ol d, K. C., L o v ell, D. J ., Or c h ar d, T. J., & R y a n, C. M. ( 2 0 1 5). D efi ni n g p at h w a y s 
f or d e v el o p m e nt of di s e a s e- m o dif yi n g t h er a pi e s i n c hil dr e n wit h t y p e 1 di a b et e s: a 
c o n s e n s u s r e p ort. Di a b et e s C ar e, 3 8 ( 1 0), 1 9 7 5- 1 9 8 5. 
1 3. M ar z elli, M. J., M a z ai k a, P. K., B ar n e a- G or al y, N., H er s h e y , T., T s ali ki a n, E., 
T a m b orl a n e, W., ... & R u e d y, K. J. ( 2 0 1 4). N e ur o a n at o mi c al c orr el at e s of d y s gl y c e mi a i n 
y o u n g c hil dr e n wit h t y p e 1 di a b et e s. Di a b et e s, 6 3 ( 1), 3 4 3- 3 5 3. 
1 4. Ei s e n b art h, G. S. ( 1 9 8 6). T y p e I di a b et e s m ellit u s. N e w E n gl a n d J o ur n al of M e di ci n e, 
3 1 4 ( 2 1), 1 3 6 0- 1 3 6 8. 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 4 2 of 4 4  
 
1 5. P al m er, J. P., A s pli n, C. M., Cl e m o n s, P., L y e n, K., T at p at i, O., R a g h u, P. K., & P a q u ett e, 
T. L. ( 1 9 8 3). I n s uli n a nti b o di e s i n i n s uli n- d e p e n d e nt di a b eti c s  b ef or e i n s uli n tr e at m e nt. 
S ci e n c e, 2 2 2 ( 4 6 3 0), 1 3 3 7- 1 3 3 9. 1 9.  
1 6. B a e k k e s k o v, S., A a n st o ot, H. J., C hri st g ai, S., R e et z, A., S oli m e n a, M., C a s c al h o, M., ... 
& C a milli, P. D. ( 1 9 9 0). I d e ntifi c ati o n of t h e 6 4 K a ut o a nti g e n i n i n s uli n- d e p e n d e nt 
di a b et e s a s t h e G A B A- s y nt h e si zi n g e n z y m e gl ut a mi c a ci d d e c ar b o x yl a s e. N at ur e, 
3 4 7 ( 6 2 8 9), 1 5 1. 2 0.  
1 7. B o nif a ci o, E., L a m p a s o n a, V., G e n o v e s e, S., F err ari, M., & B o si, E. ( 1 9 9 5). I d e ntifi c ati o n 
of pr ot ei n t yr o si n e p h o s p h at a s e-li k e I A 2 (i sl et c ell a nti g e n 5 1 2) a s t h e i n s uli n- d e p e n d e nt 
di a b et e s-r el at e d 3 7/ 4 0 K a ut o a nti g e n a n d a t ar g et of i sl et- c ell a nti b o di e s. T h e J o ur n al of 
I m m u n ol o g y, 1 5 5( 1 1), 5 4 1 9- 5 4 2 6. 
1 8. S o s e n k o, J. M., P al m er, J. P., Gr e e n b a u m, C. J., M a h o n, J.,  C o wi e, C., Kri s c h er, J. P., 
C h a s e, H. P., W hit e, N. H., B u c ki n g h a m, B., H er ol d, K. C., C ut h b ert s o n, D., & S k yl er J. S. 
( 2 0 0 6). P att er n s of m et a b oli c pr o gr e s si o n t o t y p e 1 di a b et e s i n t h e Di a b et e s Pr e v e nti o n 
Tri al – T y p e 1. Di a b et e s C ar e, 2 9 ( 3), 6 4 3- 6 4 9. 
1 9. Zi e gl er, A. G., R e w er s, M., Si m ell, O., Si m ell, T., L e m p ai n e n, J., St e c k, A., Wi n kl er, C., 
Il o n e n, J., V eij ol a, R., K ni p, M. a n d B o nif a ci o, E. ( 2 0 1 3). S er o c o n v er si o n t o m ulti pl e i sl et 
a ut o a nti b o di e s a n d ri s k of pr o gr e s si o n t o di a b et e s i n c hil dr e n.  J a m a, 3 0 9 ( 2 3), 2 4 7 3- 2 4 7 9. 
2 3.  
2 0. S k yl er, J. S., Kri s c h er, J. P., W olf s d orf, J., C o wi e, C., P al m er, J. P., Gr e e n b a u m, C., & 
L e s c h e k, E. ( 2 0 0 5). Eff e ct s of or al i n s uli n i n r el ati v e s of p ati e nt s wit h t y p e 1 di a b et e s: T h e 
Di a b et e s Pr e v e nti o n Tri al-- T y p e 1. Di a b et e s C ar e, 2 8 ( 5), 1 0 6 8- 1 0 7 6.  
2 1. Di a b et e s Pr e v e nti o n Tri al – T y p e 1 Di a b et e s St u d y Gr o u p. ( 2 0 0 2). Eff e ct s of i n s uli n i n 
r el ati v e s of p ati e nt s wit h t y p e 1 di a b et e s m ellit u s. N e w E n gl a n d J o ur n al of M e di ci n e, 
3 4 6 ( 2 2), 1 6 8 5- 1 6 9 1. 
2 2. St eff e s, M. W., Si bl e y, S., J a c k s o n, M., & T h o m a s, W. ( 2 0 0 3). β- C ell f u n cti o n a n d t h e 
d e v el o p m e nt of di a b et e s-r el at e d c o m pli c ati o n s i n t h e di a b et e s c o ntr ol a n d c o m pli c ati o n s 
tri al. Di a b et e s C ar e, 2 6 ( 3), 8 3 2- 8 3 6. 
2 3. I n s el, R. A., D u n n e, J. L., At ki n s o n, M. A., C hi a n g, J. L., D a b el e a, D., G ottli e b, P. A., 
Gr e e n b a u m, C. J., H er ol d, K. C., Kri s c h er, J. P., L er n m ar k, Å. & R at n er, R. E. ( 2 0 1 5). 
St a gi n g pr e s y m pt o m ati c t y p e 1 di a b et e s: a s ci e ntifi c st at e m e nt of J D R F, t h e E n d o cri n e 
S o ci et y, a n d t h e A m eri c a n Di a b et e s A s s o ci ati o n. Di a b et e s C ar e, 3 8 ( 1 0), 1 9 6 4- 1 9 7 4. 
2 4. H er ol d, K. C., B u n d y, B. N., L o n g, S. A., Bl u e st o n e, J. A., Di M e gli o, L. A., D uf ort, M. J, … & 
Gr e e n b a u m, C. J. ( 2 0 1 9). A n a nti- C D 3 a nti b o d y, t e pli z u m a b, i n r e l ati v e s at ri s k f or t y p e 1 
di a b et e s. T h e N e w E n gl a n d J o ur n al of M e di ci n e, 3 8 1 , 6 0 3- 6 1 3. 
2 5. H er ol d, K. C., P e s c o vit z, M. D., M c G e e, P., Kr a u s e- St ei nr a uf, H., S p ai n, L. M., B o ur ci er, 
K., ... & T y p e 1 Di a b et e s Tri al N et A nti- C D 2 0 St u d y Gr o u p. ( 2 0 1 1 ). I n cr e a s e d T c ell 
pr olif er ati v e r e s p o n s e s t o i sl et a nti g e n s i d e ntif y cli ni c al r e s p o n d er s t o a nti- C D 2 0 
m o n o cl o n al a nti b o d y (rit u xi m a b) t h er a p y i n t y p e 1 di a b et e s. T h e J o ur n al of I m m u n ol o g y, 
1 8 7 ( 4), 1 9 9 8- 2 0 0 5.  
2 6. K e y m e ul e n, B., V a n d e m e ul e br o u c k e, E., Zi e gl er, A. G., M at hi e u, C., K a uf m a n, L., H al e, 
G., ... & S c h a n d e n e, L. ( 2 0 0 5). I n s uli n n e e d s aft er C D 3- a nti b o d y t h er a p y i n n e w- o n s et 
t y p e 1 di a b et e s. N e w E n gl a n d J o ur n al of M e di ci n e, 3 5 2 ( 2 5), 2 5 9 8- 2 6 0 8. 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 4 3 of 4 4  
 
2 7. Ri g b y, M. R., Di M e gli o, L . A., R e n d ell, M. S., F el n er, E. I., D o st o u, J. M., Git el m a n, S. E., 
& Gr e e n b a u m, C. J. ( 2 0 1 3). T ar g eti n g of m e m or y T c ell s wit h al e f a c e pt i n n e w- o n s et t y p e 
1 di a b et e s ( T 1 D A L st u d y): 1 2 m o nt h r e s ult s of a r a n d o mi s e d, d o u bl e- bli n d, 
pl a c e b o c o ntr oll e d p h a s e 2 tri al. T h e L a n c et Di a b et e s E n d o cri n ol o g y, 1 ( 4), 2 8 4- 2 9 4.  
2 8. H all er, M. J., S c h at z, D. A., S k yl er, J. S., Kri s c h er, J. P ., B u n d y, B. N., Mill er, J. L., ... & 
Git el m a n, S. E. ( 2 0 1 8). L o w- d o s e a nti-t h y m o c yt e gl o b uli n ( A T G) pr e s er v e s β- c ell f u n cti o n 
a n d i m pr o v e s H b A 1 c i n n e w- o n s et t y p e 1 di a b et e s. Di a b et e s c ar e, 4 1 ( 9), 1 9 1 7- 1 9 2 5.  
2 9. P e s c o vit z, M. D., Gr e e n b a u m, C. J., Kr a u s e- St ei nr a uf, H., B e c k er, D. J., Git el m a n, S. E., 
G ol a n d, R., G ottli e b, P. A., M ar k s, J. B., M c G e e, P. F., M or a n, A. M. & R a s ki n, P., ( 2 0 0 9). 
Rit u xi m a b, B-l y m p h o c yt e d e pl eti o n, a n d pr e s er v ati o n of b et a- c el l f u n cti o n. N e w E n gl a n d 
J o ur n al of M e di ci n e, 3 6 1 ( 2 2), 2 1 4 3- 2 1 5 2.  
3 0. Or b a n, T., B u n d y, B., B e c k er, D. J., Di M e gli o, L. A., Git el m a n, S. E., G ol a n d, R., G ottli e b, 
P. A., Gr e e n b a u m, C. J., M ar k s, J. B., M o n z a vi, R. M or a n, A. M., R a s ki n, P., R o dri g u e z, H., 
R u s s ell, W. E., S c h at z, D., W h err ett, D., Wil s o n, D. M., Kri s c h er , J. P., S k yl er, J. S., & t h e 
T y p e 1 Di a b et e s Tri al N et A b at a c e pt St u d y Gr o u p ( 2 0 1 1). C o Sti m ul ati o n M o d ul ati o n wit h 
A b at a c e pt i n P ati e nt s wit h R e c e nt O n s et T y p e 1 Di a b et e s.  L a n c et, 3 7 8, 4 1 2- 4 1 9. 
3 1. Di a b et e s Pr e v e nti o n Tri al – T y p e 1 Di a b et e s St u d y Gr o u p. ( 2 0 0 2). Eff e ct s of i n s uli n i n 
r el ati v e s of p ati e nt s wit h t y p e 1 di a b et e s m ellit u s. N e w E n gl a n d J o ur n al of M e di ci n e , 
3 4 6 ( 2 2), 1 6 8 5- 1 6 9 1. 
3 2. H all er, M. J. & S c h at z, D. A. ( 2 0 1 6). T h e DI P P pr oj e ct: 2 0 y e ar s of di s c o v er y i n t y p e 1 
di a b et e s. P e di atri c Di a b et e s , 1 7 ( 2 2), 5- 7. 
3 3. W h err ett, D. K., B u n d y, B., B e c k er, D. J., Di M e gli o, L. A., Gi t el m a n, S. E., G ol a n d, R … & 
T y p e 1 Di a b et e s Tri al N et G A D St u d y Gr o u p. ( 2 0 1 1). A nti g e n- b a s e d t h er a p y wit h gl ut a mi c 
a ci d d e c ar b o x yl a s e ( G A D) v a c ci n e i n p ati e nt s wit h r e c e nt- o n s et t y p e 1 di a b et e s: A 
r a n d o mi s e d d o u bl e- bli n d tri al. L a n c et , 3 7 8 ( 9 7 8 8), 3 1 9- 3 2 7. 
3 4. F err ar o, B., M orr o w, M. P., H ut ni c k, N. A., S hi n, T. H., L u c k e , C. E., & W ei n er, D. B. ( 2 0 1 1). 
Cli ni c al a p pli c ati o n s of D N A v a c ci n e s: C urr e nt pr o gr e s s. Cli ni c al I nf e cti o u s Di s e a s e s, 
5 3 ( 3), 2 9 6 – 3 0 2. 
3 5. R o e p, B. O., S ol v a s o n, N., G ottli e b P. A., A br e u, J. R. F., H ar ri s o n, L. C., Ei s e n b art h, G. S … 
& St ei n m a n, L. ( 2 0 1 3). Pl a s mi d- e n c o d e d pr oi n s uli n pr e s er v e s C- p e pti d e w hil e s p e cifi c all y 
r e d u ci n g pr oi n s uli n- s p e cifi c C D 8⁺ T c ell s i n t y p e 1 di a b et e s. S ci e n c e Tr a n sl ati o n al 
M e di ci n e, 5 ( 1 9 1), 1 9 1r a 8 2. 
3 6. L a c hi n, J. M., M c G e e, P., P al m er, J. P., & D C C T/ E DI C R e s e ar c h  Gr o u p. ( 2 0 1 4). I m p a ct 
of C- p e pti d e pr e s er v ati o n o n m et a b oli c a n d cli ni c al o ut c o m e s i n t h e Di a b et e s C o ntr ol a n d 
C o m pli c ati o n s Tri al. Di a b et e s, 6 3 ( 2), 7 3 9- 7 4 8. 
3 7. Mi c h el s, A. W., L a n dr y, L. G., M c D a ni el, K. A., Y u, L., C a m p b ell- T h o m p s o n, M., K w o k, 
W. W … & N a k a y a m a, M. ( 2 0 1 7). I sl et- d eri v e d C D 4 T c ell s t ar g eti n g  pr oi n s uli n i n h u m a n 
a ut oi m m u n e di a b et e s. Di a b et e s, 6 6 ( 3), 7 2 2- 7 3 4. 
3 8. G e gi n at, J., L ar g hi, P., P ar o ni, M., Ni z z oli, G., P e n atti, A., P a g a ni, M … & Fl a v ell, R. A. 
( 2 0 1 6). T h e li g ht a n d t h e d ar k si d e s of I nt erl e u ki n- 1 0 i n i m m u ne- m e di at e d di s e a s e s a n d 
c a n c er. C yt o ki n e Gr o wt h F a ct or R e vi e w s, 3 0 , 8 7- 9 3. 
3 9. R o n c ar ol o, M. G., Gr e g ori, S., B a c c h ett a, R., B att a gli a, M., & G a gli a ni, N. ( 2 0 1 8). T h e 
bi ol o g y of T r e g ul at or y t y p e 1 c ell s a n d t h eir t h er a p e uti c a p pl i c ati o n i n i m m u n e- m e di at e d 
di s e a s e s. I m m u nit y, 4 9( 6), 1 0 0 4- 1 0 1 9. 


Tri al N et Pr ot o c ol T N 2 7 
Pr ot o c ol V er si o n: J a n 7, 2 0 2 2 
P a g e 4 4 of 4 4  
 
4 0. C hi n e n, T., K a n n a n, A. K., L e vi n e, A. G., F a n, X., Kl ei n, U.,  Z h e n g, Y … & R u d e n s k y, A. Y. 
( 2 0 1 6). A n e s s e nti al r ol e f or t h e I L- 2 r e c e pt or i n Tr e g c ell f u n cti o n. N at ur e I m m u n ol o g y, 
1 7 ( 1 1), 1 3 2 2- 1 3 3 3. 
4 1. K a n a m ori, M., N a k at s u k a s a, H ., O k a d a, M., L u, Q., & Y o s hi m ur a, A. ( 2 0 1 6). I n d u c e d 
r e g ul at or y T c ell s: T h eir d e v el o p m e nt, st a bilit y, a n d a p pli c atio n s. Tr e n d s i n I m m u n ol o g y, 
3 7 ( 1 1), 8 0 3- 8 1 1. 
4 2. F el d m a n n M, St ei n m a n L. D e si g n of eff e cti v e i m m u n ot h er a p y f or h u m a n a ut oi m m u nit y. 
N at ur e. 2 0 0 5; 4 3 5( 7 0 4 2): 6 1 2- 6 1 9. d oi: 1 0. 1 0 3 8/ n at ur e 0 3 7 2 7 
4 3. Ki d n e y Di s e a s e: I m pr o vi n g Gl o b al O ut c o m e s ( K DI G O) C K D W or k Gr o u p. K DI G O 2 0 1 2 
Cli ni c al Pr a cti c e G ui d eli n e f or t h e E v al u ati o n a n d M a n a g e m e nt o f C hr o ni c Ki d n e y 
Di s e a s e. Ki d n e y I nt S u p pl. 2 0 1 3; 3( 1): 1- 1 5 0 
4 4. N o v o N or di s k A/ S. ( J ul y 2 0 2 0). I n v e sti g at or’ s Br o c h ur e, N N C 0 3 6 1- 0 0 4 1, ( E diti o n 1. 0). 
4 5. B art O. R o e p et al. Pl a s mi d- E n c o d e d Pr oi n s uli n Pr e s er v e s C- P e pti d e W hil e S p e cifi c all y 
R e d u ci n g Pr oi n s uli n- S p e cifi c C D 8 + T C ell s i n T y p e 1 Di a b et e s. S ci Tr a n sl M e d 2 0 1 3: 5, 
1 9 1r a 8 2 
4 6. M ar g ar et A Li u. D N A v a c ci n e s: a n hi st ori c al p er s p e cti v e a n d  vi e w t o t h e f ut ur e. I m m u n ol 
R e v. 2 0 1 1 J a n; 2 3 9( 1): 6 2- 8 4. P MI D: 2 1 1 9 8 6 6 5 
4 7. B er n a d ett e F err ar o, M att h e w P. M orr o w, N at ali e A. H ut ni c k, T h o m a s H. S hi n, C oll e e n E. 
L u c k e, a n d D a vi d B. W ei n er. Cli ni c al A p pli c ati o n s of D N A V a c ci n e s: C urr e nt Pr o gr e s s. 
Cli ni c al I nf e cti o u s Di s e a s e s 2 0 1 1; 5 3( 3): 2 9 6 – 3 0 2 
4 8. H o b er ni k D a n d Br o s M. D N A v a c ci n e s – H o w f ar fr o m cli ni c al  u s e ? I nt er n ati o n al J o ur n al 
of M ol e c ul ar S ci e n c e. 2 0 1 8). 
4 9. E d wi n Li u, Hir o a ki M ori y a m a, N ori o A bir u, J o h a n n a P ar o n e n, D e v a s e n a n D e v e n dr a, Fr e d 
D Fi n k el m a n, G e or g e S Ei s e n b art h. Pr e v e nti n g p e pti d e-i n d u c e d a n a p h yl a xi s: a d diti o n of 
C-t er mi n al a mi n o a ci d s t o pr o d u c e a n e utr al i s o el e ctri c p oi nt. J All er g y Cli n I m m u n ol. 
2 0 0 4 S e p; 1 1 4( 3): 6 0 7- 1 3. P MI D: 1 5 3 5 6 5 6 5 
5 0. Y e c hi el B e c k er. T h e c h a n g e s i n t h e T h el p er 1 ( T h 1) a n d T h el p er 2 ( T h 2) c yt o ki n e 
b al a n c e d uri n g HI V- 1 i nf e cti o n ar e i n di c ati v e of a n all er gi c r e s p o n s e t o vir al pr ot ei n s t h at 
m a y b e r e v er s e d b y T h 2 c yt o ki n e i n hi bit or s a n d i m m u n e r e s p o n s e m o difi er s-- a r e vi e w 
a n d h y p ot h e si s. Vir u s G e n e s. 2 0 0 4 J a n; 2 8( 1): 5- 1 8. P MI D: 1 4 7 3 9 6 4 8 
5 1. H er ol d K C, P e s c o vit z M D, M c G e e P, Kr a u s e- St ei nr a uf H, S p ai n L M, B o ur ci er K, A s ar e 
A, Li u Z, L a c hi n J M, D o s c h H M; T y p e 1 Di a b et e s Tri al N et A nti- C D 2 0 St u d y Gr o u p. 
I n cr e a s e d T c ell pr olif er ati v e r e s p o n s e s t o i sl et a nti g e n s i d e ntif y cli ni c al r e s p o n d er s t o 
a nti- C D 2 0 m o n o cl o n al a nti b o d y (rit u xi m a b) t h er a p y i n t y p e 1 di a b et e s. J I m m u n ol.  2 0 1 1 
A u g 1 5; 1 8 7( 4): 1 9 9 8- 2 0 0 5. d oi: 1 0. 4 0 4 9/ji m m u n ol. 1 1 0 0 5 3 9. E p u b 2 0 1 1 J ul 2 0. P MI D: 
2 1 7 7 5 6 8 1 

SAP_001.pdf: 
TOPPLE T1D 
A multiple ascending dose trial investigating safety, tolerability and 
pharmacokinetics of NNC0361-0041 administered subcutaneously to patients with 
type 1 diabetes mellitus 
SAP Version June 23, 2023
Protocol Version 3.0 January 7, 2022 
NCT04279613 


1 
 
Protocol TN27 
 
Protocol title: 
A multiple ascending dose trial investigating safety, tolerability 
and pharmacokinetics of NNC0361-0041 administered 
subcutaneously to patients with type 1 diabetes mellitus 
 
 
Trial Phase: 1 
 
Statistical Analysis Plan (SAP) 
Version: 1.2 
Author: Jeffrey Krischer 
Date: June 23, 2023 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
TrialNet Approver 
 
 
 
 
Novo Nordisk Approver  
Brian Bundy, PhD 
 
 
 
 
Lars Holm Damgaard 
University of South Florida 
 
 
 
Novo Nordisk Senior Statistical Director 
 
 
 
 
Signature 
 
 
 
 
 
Signature 
 
 
 
 
 
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agreed to in writing, by accepting or reviewing these materials, you agree to hold such information in 
confidence and not to disclose it to others (except where required by applicable law), nor to use it for 
unauthorized purposes. In the event of actual or suspected breach of this obligation, TrialNet should be 
promptly notified. 
 


2 
 
Contents 
1 AMENDMENTS FROM PREVIOUS VERSION(S) ........................................................................................... 3 
2 INTRODUCTION .......................................................................................................................................... 3 
2.1 STUDY DESIGN ..................................................................................................................................... 3 
2.2 STUDY OBJECTIVES .............................................................................................................................. 3 
3. Population Definitions .............................................................................................................................. 3 
4. SAFETY and INSULIN SECRETION ANALYSES ............................................................................................. 4 
4.1 SAFETY ................................................................................................................................................. 4 
4.2 INSULIN SECRETION ANALYSIS ............................................................................................................ 4 
5 ANALYSIS SETS ............................................................................................................................................ 4 
5.1 FULL ANALYSIS POPULATION .............................................................................................................. 4 
5.2 SAFETY ANALYSIS POPULATION .......................................................................................................... 4 
5.3 EVALUABLE POPULATION FOR PHARMACOKINETICS ......................................................................... 4 
5.4  ANALYSIS SUBGROUPS ....................................................................................................................... 4 
5.5 TREATMENT MISALLOCATIONS .......................................................................................................... 5 
5.6 PROTOCOL DEVIATIONS ...................................................................................................................... 5 
6 ENDPOINTS AND COVARIATES ................................................................................................................... 5 
6.1 SAFETY ENDPOINTS ............................................................................................................................. 5 
6.2 SECONDARY ENDPOINTS ..................................................................................................................... 5 
6.3 COVARIATES AND STRATIFICATION FACTORS .................................................................................... 6 
7 HANDLING OF MISSING VALUES ................................................................................................................ 6 
7.1 MISSING DATES ................................................................................................................................... 6 
7.2 MISSING VALUES for AUC ................................................................................................................... 6 
7.3 MISSING PK/PD VALUES ...................................................................................................................... 7 
8 STATISTICAL METHODOLOGY AND STATISTICAL ANALYSES ...................................................................... 7 
8.1 STATISTICAL METHODS ....................................................................................................................... 7 
8.1.1 Analyses of Continuous Data ....................................................................................................... 7 
8.1.2 Analyses of Categorical Data ........................................................................................................ 7 
8.2 STATISTICAL ANALYSES ....................................................................................................................... 7 
8.2.1 Standard Analyses ........................................................................................................................ 7 
8.2.2 SAFETY ANALYSES ........................................................................................................................ 8 
8.2.3 MMTT ANALYSES ......................................................................................................................... 8 
9.0 REFERENCES ............................................................................................................................................ 9 
 
 


3 
 
1 AMENDMENTS FROM PREVIOUS VERSION(S) 
This version (dated June 23, 2023) is an update to the initial SAP for the TN27 protocol. 
Previous SAP version and date: V1.1 February 28, 2021 
 
2 INTRODUCTION 
This document describes the planned statistical analyses for protocol TN27, current version dated 
January 7, 2022.  This analysis plan is meant to supplement the study protocol. Any deviations from 
this analysis plan will be described in the Clinical Study Report. 
 
2.1 STUDY DESIGN 
This is a placebo-controlled, double-blinded within cohorts, randomized, multiple ascending dose 
trial with a staggered trial design. A total of 48 patients with T1D are planned to be studied in 4 
cohorts of 12 patients (9 on active and 3 on placebo treatment). Patients will be randomized in a 3:1 
fashion within each cohort to receive recombinant supercoiled plasmid NNC0361-0041 or placebo. 
The randomization is not stratified. A centralized random permuted block design will be used to 
balance treatment assignments within cohorts. 
 
Each treatment is defined as 12 weekly doses. Should it not be possible to administer all 12 doses, 
patients will be followed, nonetheless, for 12 months according to the protocol Schedule of 
Assessments. 
 
2.2 STUDY OBJECTIVES 
Primary Objective: 
To investigate the safety and tolerability of ascending subcutaneous weekly doses of NNC0361-0041 
plasmid in patients with T1D.  
 
Secondary Objectives: 
To investigate effect on target engagement, immune response, and beta cell function following 
ascending subcutaneous weekly doses of NNC0361-0041 plasmid in patients with T1D. 
 
3. Population Definitions 
Up to 12 patients will be randomized to treatment vs. placebo within each of 4 cohorts. The goal is to 
have a minimum of 9 patients within each cohort to have received at least 10 of the planned 12 
treatment doses. 
 
Randomized: 
Met eligibility criteria and randomly assigned to a 
treatment arm without consideration of actually receiving 
treatment.  
Randomized and partially 
treated: 
Met eligibility criteria, randomly assigned to a treatment 
arm and received at least 1 – 9 doses. 
Randomized and treated: 
Met eligibility criteria, randomly assigned to a treatment 
arm and received at least 10 doses. 
Pretreatment period 
From signing of informed consent until 1st treatment 


4 
 
On-treatment period 
From 1st treatment through visit 15 (or 5 weeks after last 
treatment for subjects not receiving all injections) 
Follow-up period 
From visit 15 (or 5 weeks after last treatment) through 
visit 17 
 
 
Up to 2 additional individuals within each cohort may be enrolled to complete the target 9 patients 
randomized and treated to account for those who are randomized and partially treated.  
 
 
4. SAFETY and INSULIN SECRETION ANALYSES 
4.1 SAFETY 
Clinical data (vital signs, AEs) from the first 48 hours for the first two patients enrolled within a cohort 
(sentinel cases) will be evaluated by the TrialNet Medical Monitor and the Novo Nordisk Safety group 
to assess whether accrual within the cohort can continue. A safety analysis to support the decision to 
proceed to the next dose level will be conducted when at least 9 patients have received the first four 
injections and have had 4-week assessments (visit 6.) This analysis is conducted by TrialNet DMC and 
the NovoNordisk Safety group and will include cumulative data from previous cohorts when available. 
 
4.2 INSULIN SECRETION ANALYSIS 
The insulin secretion analysis is conducted when all subjects have completed their final visits through 
visit 17 (1 year after first treatment).  
 
5 ANALYSIS SETS 
5.1 FULL ANALYSIS POPULATION 
The full analysis (FA) population will include all patients who are randomized with study drug 
assignment designated according to the initial randomization.  In exceptional cases subjects from the 
FA may be excluded. In such cases the exclusion will be justified and documented. The subjects in the 
FA will contribute to the analyses ‘as treated’. 
 
5.2 SAFETY ANALYSIS POPULATION 
The safety analysis (SA) population will include all randomized patients who receive at least one dose 
of study medication, with treatment assignments designated according to actual study medication 
received. The SA population will be the primary population for safety and treatment evaluations. 
 
5.3 EVALUABLE POPULATION FOR PHARMACOKINETICS 
The PK concentration population is defined as all patients in the SA population who have at 
least one dose. 
 
5.4  ANALYSIS SUBGROUPS 
Of particular interest for safety outcomes and potential worsening of insulin secretion is the subset 
of the safety analysis population who receive at least 10 doses of their assigned treatment (FA10). 
Those not included in FA10 will also be analyzed as a separate subgroup. AEs reported through 4 
weeks (visit 6) will also be a defined subgroup for safety assessments. 


5 
 
 
5.5 TREATMENT MISALLOCATIONS 
Patients who were randomized but not treated with study medication will be reported under their 
randomized treatment group (FA). However, they are by definition excluded from the safety 
analyses. 
 
Patients who were randomized but received incorrect treatment, will be reported under their 
randomized treatment group (FA) but will be reported under the treatment they actually received 
(SA) for all safety analyses and treatment evaluations. 
 
5.6 PROTOCOL DEVIATIONS 
All deviations will be described when they appear and relate to the statistical analyses or analyses 
sets. No patients will be excluded from primary analyses based on eligibility evaluations. 
 
6 ENDPOINTS AND COVARIATES 
6.1 SAFETY ENDPOINTS 
The primary endpoint is the number of adverse events recorded during the on-treatment period 
through visit 15. No formal statistical analysis will be made for the primary outcome. The primary 
endpoint will be presented by treatment groups in a summary table including number of AEs, number 
of subjects with at least 1 AE and percentage of exposed subjects with at least 1 AE. Placebo will be 
pooled across cohorts for comparison. AEs will also be summarized by system organ class, preferred 
term, seriousness, severity, outcome, and relationship to IMP using descriptive statistics.  
 
Adverse events will be summarized over the entire trial (i.e., on-treatment and follow-up period). 
(i.e., visit 0 through visit 17 at 12 months). They will be further summarized by whether they occurred 
up to and including visit 6 (4 weeks) or later. Follow-up visits 16 and 17 will be conducted to obtain 
6- and 12-month data on participants’ metabolic status and reportable adverse event assessments.  
 
All AEs will be coded using the CTCAE and mapped to latest version of Medical Dictionary for 
Regulatory Activities (MedDRA). AEs will be summarized by system organ class, preferred term, 
seriousness, severity, outcome, and relationship to IMP using descriptive statistics. 
 
6.2 SECONDARY ENDPOINTS 
ΔAUC0-2h,C-peptide,MMTT; Relative change in the area under the plasma C-peptide concentration-time 
curve from time 0 to 2 hours during MMTT from baseline to 3 months (visit 14) between groups. The 
comparison will be blinded until the last patient has been followed for 12 months. 
  
Additional Outcomes and Analyses 
It is the aim to perform additional analysis to get information of the appearance and disappearance 
of Plasmid DNA and RNA at various time points during the trials conduct period: 
• 
Plasmid DNA and RNA concentrations at selected time points before and from 1 hour to up to 48 
hours after the first dose (Visits 0-2, days 0-2) 
• 
Plasmid DNA and RNA concentrations before second dose (Visit 3, day 7 +/- 1 day) 
• 
Plasmid DNA and RNA concentrations before dose 5 (Visit 6, day 28 +/- 1 day) 
• 
Plasmid DNA and RNA concentrations before dose 8 (Visit 9, day 49 +/- 1 day) 


6 
 
• 
Plasmid DNA and RNA concentrations at selected time points after last dose (Visit 14, day 84 +/- 3 
days; Visit 15, day 120 +/- 14 days; Visit 16, day 180 +/- 14 days; and Visit 17, day 365 +/- 14 days) 
Additional analysis of the impact of study drug on metabolic outcomes (Section 5.4) will be 
determined at 1-, 3-, 6-, and 12-months following treatment including analysis of changes of these 
parameters from baseline. 
 
Target Engagement, Mechanistic Outcomes and Exploratory Analysis 
The primary time period for evaluation of target engagement and mechanistic outcomes will be 
accumulated data through visit #14.  
 
The mechanistic hypothesis underlying this therapy is that NNC0361-0041 is a tolerizing agent (cross 
reference to protocol section 2.2.2).  Due to the low number of transfected cells, it may not be 
possible to detect any systemic effect. However, evidence supporting this hypothesis would be the 
detection of plasmid-derived mRNA in the circulation or increase in certain cytokines. Further 
supporting this hypothesis, will be the demonstration of a change in number (frequency), or change 
of phenotype in circulating immune cells from baseline. These studies will include, but are not limited 
to, flow cytometry, measures of gene expression, and cytokine detection.  The relationships of such 
measures will be evaluated with respect to C-peptide, insulin dose, glycemic control, PK and PD 
markers of therapy, and genotype (including, but not limited to coding and non-coding genes HLA, 
insulin-VNTR, CD25, PTPN2, and IL10).  Additional exploratory analysis for target engagement and 
mechanistic outcomes to assess the duration of such effects will be done using data through month 
12 post-dosing. 
 
6.3 COVARIATES AND STRATIFICATION FACTORS 
The potential influences of baseline patient characteristics such as age, gender, C-peptide level 
following a MMTT at study entry on the primary and secondary endpoints will be evaluated in a 
multivariate model to see whether they have an effect on the treatment vs. placebo comparison. 
 
7 HANDLING OF MISSING VALUES 
7.1 MISSING DATES 
In compliance with TrialNet standards, if the day of the month is missing for any date used in a 
calculation, the 15 of the month will be used to replace the missing date unless the calculation results 
in a negative time duration (e.g., date of resolution cannot be prior to date of onset; if replacing 
resolution date with the 15 of the month results in a negative duration, the resolution date will be 
set to the onset date). In this case, the date resulting in 0 time duration will be used. If the start date 
is missing for an AE, the AE is considered to be treatment emergent unless the collection date is prior 
to the treatment start date. 
 
7.2 MISSING VALUES for AUC 
For the calculation of AUC following a MMTT, no values will be imputed for missing data; however if 
a single timed value is unavailable the calculation will proceed with the remaining known timed 
values. AUC is calcuted using the trapezoidal technique based on observed values and actual 
measurement times. If more than one timed value is missing the AUC will be considered missing.  


7 
 
 
7.3 MISSING PK/PD VALUES 
Concentrations below the limit of quantification 
In all data presentations (except listings), concentrations below the limit of quantification (BLQ) will 
be set to zero. In listings, BLQ values will be reported as “<LLQ”, where LLQ will be replaced with 
the value for the lower limit of quantification. 
 
Deviations, missing concentrations, and anomalous values 
In summary tables, statistics will be calculated having set concentrations to missing if 1 of the 
following cases is true: 
1. A concentration has been noted as ND (i.e., not done) or NS (i.e., no sample); 
2. A deviation in sampling time is of sufficient concern or a concentration has been flagged 
anomalous by the pharmacokineticist. 
 
8 STATISTICAL METHODOLOGY AND STATISTICAL ANALYSES 
 
8.1 STATISTICAL METHODS 
8.1.1 Analyses of Continuous Data 
Descriptive statistics, including the mean, standard deviation, median, minimum, and maximum 
values will be provided. 
 
8.1.2 Analyses of Categorical Data 
The number and percentage of patients in each category will be provided for categorical variable. 
 
8.2 STATISTICAL ANALYSES 
8.2.1 Standard Analyses 
Descriptive statistics will be used to summarize study conduct, patient disposition, baseline 
characteristics, and treatment administration/compliance. 
 
Study Conduct and Patient Disposition - an accounting of the study patients will be tabulated for 
the FA population. Patients not meeting eligibility criteria will be identified. Patients not completing 
the study will be listed along with the reason for their premature discontinuation. Reasons for 
premature discontinuation will be summarized. 
 
Baseline Characteristics - patient characteristics such as age, gender, race, ethnicity, duration of 
disease will be provided in frequency tables and descriptive statistics for quantitative variables. 
 
Treatment Administration/Compliance – Administration of study medication will be presented for 
the SA population, by medication administered within each treatment group and will be described 
in terms of the total number of doses administered, the median (range) of doses administered, dose 
modifications, dose interruptions, dose delays due to adverse event and other reasons for dose 
modifications, interruptions or delays. 
 


8 
 
8.2.2 SAFETY ANALYSES 
Safety data will be analyzed in the SA population. Adverse events and select laboratory values (e.g., 
hematology, blood chemistry and others) may also be summarized by the treatment arms. Only 
grade 2 or higher AEs are to be reported for visits 16 and 17, as per protocol. 
 
On-Treatment Adverse Events 
An overall summary of AEs as described above will be provided. AEs will be summarized for all doses 
and also by dose. The most commonly reported AEs (5% or more of patients) will also be 
summarized by preferred term. A summary of AEs by preferred term and maximum CTCAE grade, 
as well the grouped maximum CTCAE grade group (Grade 1-2 vs. Grade 3-4 vs. Grade 5) will be 
presented. Only patients who experience AEs during the AE reporting period will be listed. 
 
Treatment Related Adverse Events 
Treatment-related AEs are those judged by the Investigator to be at least possibly related to the 
study drugs [with a cause related to study drug as indicated on the case report form (CRF)] or for 
which relatedness is recorded as “unknown” by the Investigator. Similar summaries as noted for 
AEs will be provided for treatment related AEs.  
 
Serious Adverse Events and Death 
On-treatment SAEs and treatment-related SAEs will be summarized by MedDRA SOC and preferred 
term. Patients who experienced a SAE during the SAE reporting period will be listed for all 
randomized patients. The number and percentage of patients who experienced any serious 
treatment – emergent SAE will be summarized for all doses. A summary of SAEs by preferred term, 
maximum CTCAE grade and grade group will be presented. 
 
Deaths will be summarized by time period (on-treatment vs. during follow-up) and cause of death. 
Deaths that occurred on or after first dose of study medication and within 28 days after the last 
dose of study medication are defined as on-treatment deaths. A listing of death data will also be 
provided and it will include all deaths that occurred during the reporting period for deaths which 
starts from the signing of the informed consent to the end of the follow up period for death. 
 
Concomitant medications/Follow-up systemic therapy - All medications received during the 
treatment period will be considered as concomitant medications and will be coded by WHO medical 
dictionary. Patients who received concomitant medications will be listed. Follow-up systemic 
therapy for primary diagnosis will be summarized by categories of follow-therapy and will be listed 
for each patient. 
 
8.2.3 MMTT ANALYSES 
Acceleration of beta cell destruction due to immune activation is a potential risk, which will be 
monitored through AUC0-2h,C-peptide,MMTT. The plasma C-peptide concentration-time curve from time 
0 to 2 hours during MMTT obtained at the end-of dosing day 85 for the treatment and placebo arms 
will be compared for each cohort (N=3 placebo, and N=9 treated) and at the end of the study by 
cohort (i.e., pooling the placebo treated patients, N=12 placebo, N=9 treated in each cohort).  
 
The MMTT analysis will be conducted on a transformed scale using the function log (1+ AUC0-2h,C-
peptide,MMTT ).  This provides better normal distributional behavior by the test statistic. The comparison 
between the two treatment arms will be based on a test of the difference between the means. 


9 
 
When an adjustment for covariates is desired, the comparison will be made using a Wald test of 
treatment effect in an ANCOVA model adjusting for gender, baseline age, and baseline.   
 
The study has a 72%-87% power to detect a 50% or less treatment ratio when the coefficient of 
variation (CoV) ranges from 0.38 to 0.31. This is based upon historical data derived from recent 
onset patients (REF). Should the observed CoV be larger, there would be a corresponding reduction 
in power to detect a 50% treatment ratio or a corresponding decrease in the detectable treatment 
ratio to retain 80% or greater power. The power to detect a 50% or less treatment ratio at the end 
of the study (using the pooled placebo patients) is uniformly >90%. 
 
Additionally, using a published methodology, the observed transformed AUC C-peptide can be 
compared visually with the expected AUC C-peptide calculated from TrialNet historical data from 
untreated recent onset patients. 
 
9.0 REFERENCES 
 
Herold KC, Pescovitz MD, McGee P, Krause-Steinrauf H, Spain LM, Bourcier K, As are A, Liu Z, Lachin JM, 
Dosch HM; Type 1 Diabetes TrialNet Anti-CD20 Study Group. Increased T cell proliferative responses to 
islet antigens identify clinical responders to anti-CD20 monoclonal antibody (rituximab) therapy in type 
1 diabetes. J Immunol. 2011 Aug 15;187(4):1998-2005. doi: 10.4049/jimmunol.1100539. Epub 2011 Jul 
20. PMID: 21775681 
 
Bundy BN, Krischer JP; Type 1 Diabetes TrialNet Study Group. A quantitative measure of 
treatment response in recent-onset type 1 diabetes. Endocrinol Diabetes Metab. 2020 May 
14;3(3):e00143. doi: 10.1002/edm2.143. PMID: 32704564; PMCID: PMC7375065.