Kolera, slemhinneimmunitet och utveckling av vacciner och immunterapier CHOLERA, MUCOSAL VACCINES AND IMMUNOMODULATION Important aspects of cholera, mucosal immunology and mucosal vaccines and immunotherapies are studied. 1. Molecular epidemiology of V. cholerae: Genome-wide SNP-mapping of isolates over 30 years and impact of vaccine-induced pressure on pathogen evolution. 2. Genome-wide analysis of human susceptibility genes for cholera: Compare gene polymorphism between cholera and no-cholera vacinees and controls in field trial of oral cholera vaccine (OCV) and between strong and weak vaccine responders. 3. Development of new or improved vaccines against cholera and ETEC. We aim at a single strain, thermostable OCV with inbuilt CTB and adjuvant systems. We also (with A-M Svennerholm) develop a multivalent oral ETEC vaccine, optionally given with dmLT adjuvant and now entering clinical studies. 4. Evaluate mucosal immunization routes including sublingual vaccination in humans (cholera and influenza vaccines). 5. Studies of immune regulation and mucosal adjuvants for immunization or tolerance induction. We focus on a) the role of subsets of mucosally induced APCs, and effects and mechanisms of mucosal adjuvants; b) Fc&#436;RIIB. 6. Immune therapy against autoimmune diseases based on mucosal tolerance induction and/or tolerizing B-cell therapy. (1) Further develop the Ag/CTB-treated B-cell therapy and sublingual Ag/CTB tolerization concepts, alone and when combined in EAE and atherosclerosis; (2) extend the in vitro Ag/CTB-vaccinated B cell therapy concept to human B cells. Kolera, slemhinneimmunitet och utveckling av vacciner och immunterapier Projektets målsättning är att fortsatt ha en internationellt ledande roll inom forskningen om kolera, slemhinneimmunitet och utveckling av mukosala vacciner och immunterapimetoder. Största delen av projektet är av stor betydelse för området global hälsa. A. Molekylär-genomisk forskning om förändringar hos kolerabakterien som kan påverka smittspridning och sjukdomsegenskaper. En ny typ av kolerabakterier har sedan några år ersatt den gamla El Tor-typen i Asien och nu också spridit sig till Afrika. Den nya typen är en hybrid mellan El Tor- och ?klassiska? kolerabakterier och bildar toxin (CT) av klassisk biotyp, och verkar också vara mer aggressiv än tidigare. Vi undersöker i internationellt samarbete sådana hybridstammars genetiska förändringar, förändringar i virulens, och ev. skillnader för vaccinskydd. B. Molekylär-genomisk forskning för att identifiera gener hos människa som påverkar mottaglighet för och vaccinsvar mot kolera. Vi har i samarbete med indiska forskare inom ramen för en stor vaccinfältprövning i Kolkata möjlighet att analysera genvariation mellan koleravaccinerade och placebovaccinerade individer som utvecklar resp. inte utvecklar kolera under 3 års uppföljning. C. Fortsatt utveckling av drickbara vacciner mot gastrointestinala infektioner. Vi har utvecklat ett drickbart vaccin mot kolera (Dukoral®). Fortsatt vaccinutvecklingsarbete är inriktat på: (1) Ett förenklat (en stam och en formulering) oralt koleravaccin med ökad effektivitet; (2) Att i samarbete med A-M Svennerholm utveckla specifikt vaccin mot ETEC-diarré, som är den vanligaste orsaken till diarrésjukdom hos barn i utvecklingsländerna och hos resenärer. D. Sublingual vaccination. Vi har i samarbete med C Czerkinsky (IVI, Korea) visat att på försöksdjur ?vaccination under tungan? är ett mycket lovande nytt mukosalt vaccinations-sätt som ger upphov till stark och brett disseminerad cellulär och humoral immunitet och immunskydd mot många olika infektioner. Vi ska nu i fas 1-studier med kolera- och influensavaccin undersöka om dessa goda effekter också gäller för människa. E. Forskning för att kunna förstärka och styra immunsvaret efter slemhinnevaccination: Målet är definiera regleringsmekanismer i slemhinnor, som bestämmer om lokal exposition för antigen leder till immunitet eller tolerans, för att bättre kunna styra det immunologiska svaret i den önskade riktningen. Specifikt studeras styreffekten hos olika antigenpresenterande celler som ?vaccineras? och effekten på dessa av mukosala adjuvans, bl.a. ett av oss nyligen framtaget lovande adjuvans (CTB-CpG-konjugat). F. Forskning för att utveckla terapeutiska vacciner mot autoimmuna sjukdomar baserade på oral tolerans och/eller B-cellsterapi. Vi har utvecklat ett nytt koncept för slemhinneinducerad toleransutveckling baserat på användning av CT:s oskadliga B-subenhet (CTB), som kopplats till ett relevant antigen/tolerogen. Detta har givit mycket lovande resultat i djurmodeller för autoimmuna sjukdomar (MS-liknande encephalomyelit, reumatoid artrit-liknande ledinflammation, diabetes och uveit), och även vid allergier och infektionsorsakade immunpatologiska tillstånd (schistosomiasis och leishmaniasis). Metoden har också visat lovande resultat vid klinisk testning på patienter med Behcet?s sjukdom (uveit med risk för blindhet). Nyligen har vi visat att B-celler är de viktigaste antigen-presenterande cellerna för toleransinduktion, och att kort provrörs-behandling av B-celler med antigen kopplat till CTB följt av injektion av cellerna till djur med tidig autoimmun sjukdom effektivt kan förhindra fortsatt sjukdomsutveckling. Baserat på detta ska vi i samarbete med kliniska forskare (1) Ta fram CTB-baserade fusionsproteiner för mukosal (främst sublingual) immunbehandling vid f.a. MS-liknande encephalit (EAE) och arterioscleros; samt (2) Utveckla B-cellsterapikonceptet ensamt och i förening med mukosal immunterapi med sådana fusionsprote