BILAGA III

Provtagning och testning enligt artiklarna 4 och 7

1. Den provtagning och testning för officiella påvisandeinventeringar som avses i artikel 4.1 och 4.2 ska utföras enligt följande: Provtagningen ska omfatta ett jordprov, vilket som norm ska ha en omfattning på minst 1 500 ml jord/ha, insamlad från minst 100 borrstick/ha, helst i ett rutnät som täcker hela produktionsanläggningen och där avståndet mellan provtagningspunkterna är minst 5 m på bredden och högst 20 m på längden. Hela provet ska användas för ytterligare undersökningar, dvs. extraktion av cystor, identifiering av art och i tillämpliga fall bestämning av patotyp/virulensgrupp. Testningen ska utföras med tillämpning av följande metoder för extraktion av den angivna skadegöraren, vilka beskrivs i tillämpliga validerade och internationellt erkända diagnosprotokoll: a) För extraktion används metoder baserade på Fenwick-behållaren, Schuiling-centrifugen, Seinhorst-elutriatorn eller Kort-elutriatorn. b) För påvisande och identifiering används en av följande metoder: i) Isolering av cystor av Globodera från avfall baserat på cystornas morfologi, följt av identifiering av art baserad på enskilda cystors och juvenilers morfologi, i kombination med det konventionella PCR-testet baserat på Bulman & Marshall, 1997 (1) (om det råder tvivel om förekomsten av G. tabacum får även det konventionella PCR-testet baserat på Skantar et al., 2007 (2), utföras). ii) Isolering av cystor av Globodera från avfall baserat på cystornas morfologi, följt av identifiering av art baserad på enskilda cystors och juvenilers morfologi, i kombination med real-tids PCR baserat på Gamel et al., 2017 (3). iii) Isolering av nematodcystor från avfall, följt av påvisande av art med realtids-PCR baserat på Gamel et al., 2017 (3).

2. Provtagning för den officiella övervakningsinventering som avses i artikel 7 ska utföras enligt något av följande: a) Provtagning enligt punkt 1 med en provtagningsomfattning på minst 400 ml jord/ha. b) Riktad provtagning med prover på minst 400 ml jord efter visuell undersökning av rötter med synliga symptom. c) Provtagning med prover på minst 400 ml jord som vidhäftar potatisen efter skörd, under förutsättning att den produktionsanläggning där potatisen odlats går att spåra. Testning för den officiella övervakningsinventering som avses i artikel 7 ska utföras enligt punkt 1.

3. Genom undantag från punkt 1 får den normala provtagningsomfattningen minskas till minst 400 ml jord/ha i vart och ett av följande fall: a) Det finns skriftliga belägg för att varken potatis eller växter som förtecknas i punkt 1 i bilaga I har odlats eller förekommit vid produktionsanläggningen under sex år före den officiella påvisandeinventeringen. b) Inga exemplar av den angivna skadegöraren har påträffats vid de två senaste på varandra följande officiella påvisandeinventeringarna i prover på 1 500 ml jord/ha, och varken potatis eller växter som förtecknas i punkt 1 i bilaga I, med undantag av dem för vilka en officiell påvisandeinventering krävs enligt artikel 4.1, har odlats sedan den första officiella påvisandeinventeringen genomfördes. c) Inga exemplar av den angivna skadegöraren eller cystor av den angivna skadegöraren utan levande innehåll har påträffats vid den senaste officiella påvisandeinventeringen, där provstorleken ska ha varit minst 1 500 ml jord/ha, och varken potatis eller växter som förtecknas i punkt 1 i bilaga I, med undantag av dem för vilka en officiell påvisandeinventering krävs enligt artikel 4.1, har odlats vid produktionsanläggningen sedan den senaste officiella påvisandeinventeringen genomfördes.

4. Provtagningsomfattningen får minskas för fält som är större än 8 ha eller 4 ha i följande fall: a) Vid den normala omfattningen enligt punkt 1 ska provtagningen av de första åtta hektaren ske i den omfattning som anges i den punkten, men den får för varje ytterligare hektar minskas till minst 400 ml jord/ha. b) Vid den minskade omfattningen enligt punkt 3 ska provtagningen av de första fyra hektaren ske i den omfattning som anges i den punkten, men den får för varje ytterligare hektar minskas till minst 200 ml jord/ha.

5. Användningen av den minskade provstorlek som avses i punkterna 3 och 4 får fortsätta under den efterföljande officiella påvisandeinventering som avses i artikel 3.1 så länge de angivna skadegörarna inte påträffas vid den berörda produktionsanläggningen.

6. Den normala storleken på jordprovet får minskas till minst 200 ml jord/ha om produktionsanläggningen är belägen i ett område som har förklarats fritt från den angivna skadegöraren och utses, underhålls och inventeras i enlighet med tillämpliga internationella standarder för växtskyddsåtgärder (ISPM nr 4) (4).

7. Storleken på jordprovet ska i samtliga fall vara minst 200 ml jord per produktionsanläggning.

(1) Bulman, S.R. & Marshall, J.W. (1997), ”Differentiation of Australasian potato cyst nematode (PCN) populations using the Polymerase Chain Reaction (PCR)”, New Zealand Journal of Crop and Horticultural Science, 25, s. 123–129.

(2) Skantar, A.M., Handoo, Z.A., Carta, L.K., Chitwood, D.J. (2007), ”Morphological and molecular identification of Globodera pallida associated with Potato in Idaho”, Journal of Nematology, 39(2), s. 133–144.

(3) Gamel, S., Letort A., Fouville D., Folcher L., Grenier E. (2017), ”Development and validation of real-time PCR assays based on novel molecular markers for the simultaneous detection and identification of Globodera pallida, G. rostochiensis and Heterodera schachtii”, Nematology, 19(7), s. 789–804.

(4) ISPM 4 (1995), Requirements for the establishment of pest free areas, Rom, IPPC, FAO (https://www.ippc.int/en/publications/614/).