„PRILOGA

SKUPNE TEHNIČNE SPECIFIKACIJE (STS) ZA IN VITRO DIAGNOSTIČNE MEDICINSKE PRIPOMOČKE

1. PODROČJE UPORABE

Skupne tehnične specifikacije iz te priloge se uporabljajo za namene iz seznama A v Prilogi II k Direktivi 98/79/ES.

2. OPREDELITVE IN IZRAZI

(Diagnostična) občutljivost

Verjetnost, da pripomoček prikaže pozitiven rezultat v prisotnosti ciljnega označevalca.

Resnično pozitiven

Vzorec, za katerega vemo, da je pozitiven na ciljni označevalec, kar pripomoček pravilno prikaže

Lažno negativen

Vzorec, za katerega vemo, da je pozitiven na ciljni označevalec, pripomoček pa tega ne prikaže.

(Diagnostična) specifičnost

Verjetnost, da pripomoček prikaže negativen rezultat v odsotnosti ciljnega označevalca.

Lažno pozitiven

Vzorec, za katerega vemo, da je negativen na ciljni označevalec, pripomoček pa tega ne prikaže.

Resnično negativen

Vzorec, za katerega vemo, da je negativen na ciljni označevalec, kar pripomoček pravilno prikaže.

Analitična občutljivost

Analitično občutljivost lahko izrazimo kot mejo odkrivanja, tj. najmanjšo količino ciljnega označevalca, ki jo lahko natančno zaznamo.

Analitična specifičnost

Analitična specifičnost je sposobnost metode, da odkrije le ciljni označevalec.

Tehnike pomnoževanja nukleinske kisline (NAT)

Izraz ‚NAT‘ se uporablja za teste za odkrivanje in/ali količinsko določitev nukleinskih kislin s pomnoževanjem ciljnega zaporedja, pomnoževanjem signala ali s hibridizacijo.

Hitri test

‚Hitri test‘ pomeni vse kakovostne ali delno količinske in vitro diagnostične medicinske pripomočke, ki se uporabljajo le posamično ali v majhnih nizih, uporabljajo neavtomatske postopke in so načrtovani tako, da dajejo hitre rezultate.

Stabilnost

Stabilnost analitičnega postopka je lastnost analitičnega postopka, da nanj ne vplivajo majhna, a namerna odstopanja pri parametrih metode, ter podaja oceno njegove zanesljivosti pri normalni uporabi.

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema

Stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema pomeni pogostost neustreznosti odzivanja, ko celoten proces poteka tako, kot predpisuje proizvajalec.

Potrditveni test

Potrditveni test je test, ki se uporablja za potrditev reakcij pri presejalnem testu.

Test za določanje tipa virusa

Test za določanje tipa virusa je test, ki se uporablja za določanje tipa že znanih pozitivnih vzorcev, ki se ne uporabljajo za primarno diagnosticiranje okužbe ali za presejanje.

Serokonverzijski vzorci HIV

Serokonverzijski vzorci HIV:

— so pozitivni na p24 antigen in/ali HIV RNK ter

— jih odkrijejo vsi presejalni testi za protitelesa ter

— rezultati njihovih potrditvenih testov so pozitivni ali nejasni.

Zgodnji serokonverzijski vzorci HIV

Zgodnji serokonverzijski vzorci HIV:

— so pozitivni na p24 antigen in/ali HIV RNK ter

— jih ne odkrijejo vsi presejalni testi za protitelesa ter

— rezultati njihovih potrditvenih testov so nejasni ali negativni.

3. SKUPNE TEHNIČNE SPECIFIKACIJE (STS) ZA PROIZVODE, OPREDELJENE V SEZNAMU A PRILOGE I K DIREKTIVI 98/79/ES

3.1 STS za vrednotenje delovanja reagentov in reagenčnih izdelkov za odkrivanje, potrjevanje in količinsko določitev označevalcev okužbe s HIV (HIV 1 in 2), HTLV I in II ter hepatitisa B, C in D v človeških vzorcih

Splošna načela

3.1.1 Pripomočki, ki odkrivajo virusne okužbe, dani na trg za uporabo kot presejalni ali diagnostični testi, morajo izpolnjevati zahteve v zvezi z občutljivostjo in specifičnostjo iz preglednice 1. Glej tudi načelo 3.1.11 za presejalne teste.

3.1.2 Pripomočki, ki jih je proizvajalec namenil testiranju telesnih tekočin razen seruma in plazme, npr. urina, sline itn., morajo izpolnjevati enake zahteve STS v zvezi z občutljivostjo in specifičnostjo kot testi za serum ali plazmo. Vrednotenje delovanja mora preskusiti vzorce istih posameznikov pri obeh testih v procesu odobritve in pri zadevnem testu seruma ali plazme.

3.1.3 Pripomočki, ki jih je proizvajalec namenil za samotestiranje, tj. za domačo uporabo, morajo izpolnjevati iste zahteve STS v zvezi z občutljivostjo in specifičnostjo kot zadevni pripomočki za profesionalno uporabo. Ustrezne dele vrednotenja delovanja izvedejo (ali ponovijo) ustrezni nestrokovnjaki z namenom potrditve delovanja pripomočka in navodil za uporabo.

3.1.4 Vsa vrednotenja delovanja se izvedejo v neposredni primerjavi z že uveljavljenim najsodobnejšim pripomočkom. Pripomoček, ki se uporablja za primerjavo, se označi z oznako CE, če je ob času vrednotenja delovanja ta pripomoček na trgu.

3.1.5 Če se med seboj različni rezultati testov prepoznajo kot del ocene, se ti rezultati, kolikor je to mogoče, pojasnijo, na primer z:

— vrednotenjem vzorca, ki se razlikuje od drugih, v nadaljnjih sistemih testiranja,

— uporabo alternativne metode ali označevalca,

— ponovnim pregledom pacientovega kliničnega stanja in diagnoze ter

— testiranjem nadaljnjih vzorcev.

3.1.6 Vrednotenja delovanja se izvedejo na populaciji, enakovredni evropski populaciji.

3.1.7 Pozitivni vzorci, uporabljeni pri vrednotenju delovanja, se izberejo tako, da odražajo različne stadije ustreznih bolezni, različne vzorce protiteles, različne genotipe, različne podtipe, mutante itn.

3.1.8 Občutljivost za resnično pozitivne in serokonverzijske vzorce se vrednoti na naslednji način:

3.1.8.1 Diagnostična občutljivost testa med serokonverzijo mora ustrezati najnovejšemu tehničnemu razvoju. Ne glede na to, ali nadaljnje testiranje istih ali dodatnih serokonverzijskih vzorcev izvede priglašeni organ ali proizvajalec, morajo rezultati potrditi prvotne podatke o vrednotenju delovanja (glej preglednico 1). Serokonverzijski testi se morajo začeti z negativnimi pregledi krvi, intervali med pregledi pa morajo biti kratki.

3.1.8.2 Za pripomočke za presejalno testiranje krvi (razen testov za HbsAg in protitelesa proti HBc), se vsi resnično pozitivni vzorci prepoznajo kot pozitivni s pripomočkom, ki se ga označi z oznako CE (preglednica 1). Pri testih za HBsAg in protitelesa proti HBc mora biti splošno delovanje novega pripomočka vsaj enakovredno delovanju uveljavljenega pripomočka (glej 3.1.4).

3.1.8.3 Pri testih za HIV: — se vsi serokonverzijski vzorci HIV prepoznajo kot pozitivni ter — se testira vsaj 40 zgodnjih serokonverzijskih vzorcev HIV. Rezultati morajo ustrezati najnovejšemu tehničnemu razvoju.

3.1.9 Vrednotenje delovanja za presejalne teste vključuje 25 pozitivnih (če so na voljo pri redkih okužbah) vzorcev svežega seruma in/ali plazme, odvzetih na dan presejalnega testiranja (≤ 1 dan po vzorčenju).

3.1.10 Negativni vzorci, ki se uporabijo pri vrednotenju delovanja, se določijo tako, da predstavljajo ciljno populacijo, ki ji je test namenjen, na primer krvodajalce, hospitalizirane paciente, nosečnice itn.

3.1.11 Za vrednotenje delovanja za presejalne teste (preglednica 1) se krvodajalske populacije preiščejo v vsaj dveh krvodajalskih centrih in se izvedejo pri zaporednih darovanjih krvi, pri čimer izbira ne izključuje krvodajalcev, ki kri dajejo prvič.

3.1.12 Pripomočki morajo imeti pri darovani krvi vsaj 99,5 % specifičnost, če ni drugače navedeno v spremnih preglednicah. Specifičnost je potrebno izračunati s pomočjo pogostosti reakcij pri ponovljenem testiranju (tj. lažno pozitivnih rezultatov) pri krvodajalcih, negativnih na ciljni označevalec.

3.1.13 Pripomočki se med vrednotenjem delovanja ocenijo tudi glede na vpliv morebitnih motečih snovi. Morebitne moteče snovi, ki se ocenijo, so do neke mere odvisne tudi od sestave reagenta in zgradbe testa. Morebitne moteče snovi je potrebno identificirati v sklopu analize tveganja, predpisane z bistvenimi zahtevami za vsak nov pripomoček, vendar lahko vključujejo na primer:

— vzorce, ki predstavljajo ‚sorodne‘ okužbe,

— vzorce, ki izhajajo od multipare, tj. žensk, ki so bile večkrat noseče, ali pacientov, pozitivnih na revmatoidni faktor,

— za rekombinantne antigene, človeška protitelesa proti komponentam sistema za izražanje, na primer proti E. coli ali proti kvasovkam.

3.1.14 Za pripomočke, ki jih je proizvajalec namenil za uporabo s serumom ali plazmo, je pri vrednotenju delovanja treba dokazati enakovrednost seruma in plazme. To se dokaže za vsaj 50 darovanj krvi (25 pozitivnih in 25 negativnih).

3.1.15 Za pripomočke, namenjene uporabi s plazmo, vrednotenje delovanja preveri delovanje pripomočka z uporabo vseh antikoagulantov, ki jih proizvajalec navede za uporabo s pripomočkom. To se dokaže za vsaj 50 darovanj krvi (25 pozitivnih in 25 negativnih).

3.1.16 Kot del predpisane analize tveganja se stopnja neustreznosti odzivanja celotnega sistema, kar povzroča lažno negativne rezultate, določi s ponovljenimi testi na vzorcih z nizko pozitivno vsebnostjo.

3.1.17 Če skupne tehnične specifikacije ne vključujejo nekega novega in vitro diagnostičnega medicinskega pripomočka iz seznama A v Prilogi II, je treba upoštevati skupno tehnično specifikacijo za sorodni pripomoček. Sorodni pripomočki se lahko prepoznajo na različne načine, npr. glede na enako ali podobno predvideno uporabo ali podobna tveganja.

3.2 Dodatne zahteve za kombinirane teste za protitelesa proti HIV/antigen HIV

3.2.1 Kombinirani testi za protitelesa proti HIV/antigen HIV, ki so namenjeni odkrivanju protiteles proti HIV in antigena p24 ter lahko odkrijejo samo antigen p24, morajo biti skladni s preglednico 1 in preglednico 5, vključno z merili za analitično občutljivost za antigen p24.

3.2.2 Kombinirani testi za protitelesa proti HIV/antigen HIV, ki so namenjeni odkrivanju protiteles proti HIV in antigena p24 ter ne morejo odkriti samo antigena p24, morajo biti skladni s preglednico 1 in preglednico 5, razen z merili za analitično občutljivost za antigen p24.

3.3 Dodatne zahteve za tehnike pomnoževanja nukleinske kisline (NAT)

Merila za vrednotenje delovanja testov NAT so v preglednici 2.

3.3.1 Za teste s pomnoževanjem ciljnega zaporedja kontrola funkcionalnosti za vsak testni vzorec (notranja kontrola) ustreza najnovejšemu tehničnemu razvoju. Ta kontrola se, če je le mogoče, uporablja med celim procesom, tj. ekstrakcijo, pomnoževanjem/hibridizacijo, odkrivanjem.

3.3.2 Analitična občutljivost ali meja odkrivanja za teste NAT se izrazi s 95 % pozitivno mejno vrednostjo. To je koncentracija analita, pri kateri 95 % testnih serij da pozitivne rezultate po zaporednih razredčitvah mednarodnega referenčnega materiala, na primer standardnega materiala po WHO ali umerjenega referenčnega materiala.

3.3.3 Odkritje genotipa se prikaže s primerno potrditvijo sestave primerja ali sonde in se potrdi tudi s testiranjem opredeljenih genotipiziranih vzorcev.

3.3.4 Rezultati količinskih testov NAT se lahko izsledijo nazaj do mednarodnih standardov ali umerjenih referenčnih materialov, če so ti na voljo, ter se izrazijo v mednarodnih enotah, uporabljenih na določenem področju uporabe.

3.3.5 Testi NAT se lahko uporabijo za odkrivanje virusov v vzorcih, negativnih na protitelesa, tj. v predserokonverzijskih vzorcih. Virusi v imunskih kompleksih se lahko obnašajo drugače kot prosti virusi, na primer v fazi centrifugiranja. Zato je pomembno, da med študijami stabilnosti vključimo vzorce, negativne na protitelesa (predserokonverzijske).

3.3.6 Za raziskovanje morebitnega prenosa se med študijami stabilnosti izvede vsaj pet serij testov, izmenično z vzorci z visoko pozitivno vsebnostjo ter negativnimi vzorci. Vzorce z visoko pozitivno vsebnostjo predstavljajo vzorci z naravno visokimi virusnimi titri.

3.3.7 Neustreznosti odzivanja celotnega sistema, ki vodi k lažno negativnim rezultatom, se določi s testiranjem vzorcev z nizko pozitivno vsebnostjo. Vzorci z nizko pozitivno vsebnostjo vsebujejo koncentracijo virusa, enakovredno trikratni 95-odstotni pozitivni mejni vrednosti koncentracije virusa.

3.4 STS za proizvajalčevo testiranje ob sprostitvi reagentov in reagenčnih izdelkov za odkrivanje, potrditev in količinsko določitev markerjev okužbe s HIV (HIV 1 in 2), s HTLV I in II ter hepatitisom B, C, D v človeških vzorcih (samo imunološki testi)

3.4.1 Proizvajalčeva merila za testiranje ob sprostitvi zagotovijo, da vsaka serija dosledno opredeli ustrezne antigene, epitope in protitelesa.

3.4.2 Proizvajalčevo testiranje ob sprostitvi serij za presejalne teste zajema vsaj 100 vzorcev, negativnih na zadevni analit.

3.5 STS za ovrednotenje delovanja reagentov in reagenčnih proizvodov za določanje naslednjih antigenov krvnih skupin: ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B) sistema krvnih skupin ABO; RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) sistema krvnih skupin Rh; KEL1 (K) sistema krvnih skupin Kell

Merila za ovrednotenje delovanja reagentov in reagenčnih proizvodov za določanje antigenov krvnih skupin: ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B) sistema krvnih skupin ABO; RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) sistema krvnih skupin Rh; KEL1 (K) sistema krvnih skupin Kell so v preglednici 9.

3.5.1 Vsa vrednotenja delovanja se izvedejo v neposredni primerjavi z že uveljavljenim najsodobnejšim pripomočkom. Pripomoček, ki se uporablja za primerjavo, se označi z oznako CE, če je ob času vrednotenja delovanja ta pripomoček na trgu.

3.5.2 Če se med seboj različni rezultati testov prepoznajo kot del ocene, se ti rezultati, kolikor je to mogoče, pojasnijo, na primer z:

— vrednotenjem vzorca, ki se razlikuje od drugih, v nadaljnjih sistemih testiranja,

— uporabo alternativne metode.

3.5.3 Vrednotenja delovanja se izvedejo na populaciji, enakovredni evropski populaciji.

3.5.4 Pozitivni vzorci, uporabljeni pri vrednotenju delovanja, se izberejo tako, da odsevajo raznoliko in šibko izražanje antigenov.

3.5.5 Pripomočki se med vrednotenjem delovanja ocenijo tudi glede na vpliv morebitnih motečih snovi. Morebitne moteče snovi, ki se ocenijo, so do neke mere odvisne tudi od sestave reagenta in zgradbe testa. Morebitne moteče snovi se identificirajo v sklopu analize tveganja, predpisane z bistvenimi zahtevami za vsak nov pripomoček.

3.5.6 Za pripomočke, namenjene uporabi s plazmo, vrednotenje delovanja preveri delovanje pripomočka z uporabo vseh antikoagulantov, ki jih proizvajalec navede za uporabo s pripomočkom. To se dokaže za vsaj 50 darovanj krvi.

3.6 STS za proizvajalčevo testiranje ob sprostitvi reagentov in reagenčnih proizvodov za določanje antigenov krvnih skupin: ABO1 (A), ABO2 (B), ABO3 (A,B) sistema krvnih skupin ABO; RH1 (D), RH2 (C), RH3 (E), RH4 (c), RH5 (e) sistema krvnih skupin Rh; KEL1 (K) sistema krvnih skupin Kell

3.6.1 Proizvajalčeva merila za testiranje ob sprostitvi zagotovijo, da vsaka serija dosledno opredeli ustrezne antigene, epitope in protitelesa.

3.6.2 Zahteve za proizvajalčevo testiranje ob sprostitvi serij so navedene v preglednici 10.

Preglednica 1

‚Presejalni‘ testi: protitelesa proti HIV 1 in 2, proti HTLV I in II, proti HCV, HbsAg, proti HBc

Proti HIV-1/2 Proti HTLV-I/II Proti HCV HBsAg Proti HBC Diagnostična občutljivost Pozitivni vzorci 400 HIV-1 100 HIV-2 Vključno s 40 podtipi razen B; vsi podtipi HIV 1, ki so na voljo, naj bodo zastopani vsaj s 3 vzorci za vsak podtip 300 HTLV-I 100 HTLV-II 400 (pozitivni vzorci) Vključno z vzorci z različnih stopenj okužbe, iz katerih so razvidni različni vzorci protiteles. Genotipi 1–4: > 20 vzorcev/genotip (vključno z genotipi 4 razen podtipa a); 5: > 5 vzorcev; 6: če so na voljo 400 Vključno s podtipi 400 Vključno z vrednotenjem drugih HBV-markerjev Serokonverzijski vzorci 20 vzorcev 10 nadaljnjih vzorcev (pri priglašenem organu ali proizvajalcu) Opredelijo se, ko so na voljo 20 vzorcev 10 nadaljnjih vzorcev (pri priglašenem organu ali proizvajalcu) 20 vzorcev 10 nadaljnjih vzorcev (pri priglašenem organu ali proizvajalcu) Opredelijo se, ko so na voljo Analitska občutljivost Standardi 0,130 IU/ml (Drugi mednarodni standard za HBsAg, podtip adw2, genotip A, oznaka NIBSC: 00/588) Specifičnost Neselekcionirani darovalci (vključno z novimi darovalci) 5 000 5 000 5 000 5 000 5 000 Hospitalizirani pacienti 200 200 200 200 200 Vzorci, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija (RF+, sorodni virusi, nosečnice itn.) 100 100 100 100 100





Preglednica 2

Testi NAT za HIV1, HCV, HBV, HTLV I/II (kakovostni in količinski; razen molekularne tipizacije)

HIV1 HCV HBV HTLV I/II Merila sprejemljivosti NAT Kakovostni Količinski Kakovostni Količinski Kakovostni Količinski Kakovostni Količinski Kot pri HIV količinski Kot pri HIV količinski Kot pri HIV količinski Občutljivost Meja odkrivanja Odkrivanje analitske občutljivosti (IU/ml; opredeljena z WHO-standardi ali umerjenimi referenčnimi materiali) V skladu z EP-smernico za potrditev (1): več serij razredčitev do mejne koncentracije; statistična analiza (npr. analiza Probit) na podlagi vsaj 24 dvojnikov; izračun 95-odstotne mejne vrednosti Meja odkrivanja: kot pri kakovostnih testih; meja količinske določitve: razredčitve (pol-log 10 ali manj) umerjenih referenčnih pripravkov, opredelitev nižje in višje meje količinske določitve, natančnost, točnost, ‚linearno‘, ‚meritveno območje‘, ‚dinamično območje‘; prikazati je treba ponovljivost pri različnih koncentracijah V skladu z EP-smernico za potrditev (1): več serij razredčitev do mejne koncentracije; statistična analiza (npr. analiza Probit) na podlagi vsaj 24 dvojnikov; izračun 95-odstotne mejne vrednosti V skladu z EP-smernico za potrditev (1): več serij razredčitev do mejne koncentracije; statistična analiza (npr. analiza Probit) na podlagi vsaj 24 dvojnikov; izračun 95-odstotne mejne vrednosti V skladu z EP-smernico za potrditev (1): več serij razredčitev do mejne koncentracije; statistična analiza (npr. analiza Probit) na podlagi vsaj 24 dvojnikov; izračun 95-odstotne mejne vrednosti Učinkovitost odkrivanja/količinske določitve pri genotipu/podtipu Vsaj 10 vzorcev na podtip (če so na voljo) Serije razredčitev vseh pomembnih genotipov/podtipov, zlasti referenčnih materialov, če so na voljo Vsaj 10 vzorcev na genotip (če so na voljo) Če so na voljo umerjeni referenčni materiali za genotip Če so na voljo umerjeni referenčni materiali za genotip Supernatanti celične kulture (lahko nadomestijo redke podtipe HIV 1) Uporabljajo se lahko transkripcije ali plazmidi, količinsko opredeljeni z ustreznimi metodami V skladu z EP-smernico za potrditev (1), če so na voljo umerjeni referenčni materiali; ena od možnosti so in vitro transkripcije V skladu z EP-smernico za potrditev (1), če so na voljo umerjeni referenčni materiali; ena od možnosti so in vitro transkripcije V skladu z EP-smernico za potrditev (1), če so na voljo umerjeni referenčni materiali; ena od možnosti so in vitro transkripcije V skladu z EP-smernico za potrditev (1), če so na voljo umerjeni referenčni materiali; ena od možnosti so in vitro transkripcije Diagnostična specifičnost Negativni vzorci 500 krvodajalcev 100 krvodajalcev 500 krvodajalcev 500 krvodajalcev 500 individualnih darovanj krvi Markerji, pri katerih je mogoča navzkrižna reakcija Z ustreznimi dokazi zasnove testa (npr. primerjavo zaporedij) in/ali testiranjem vsaj 10 človeških vzorcev, pozitivnih na retrovirus (npr. HTLV) Kot pri kakovostnih testih Z ustrezno zasnovo testa in/ali testiranjem vsaj 10 človeških vzorcev, pozitivnih na flavivirus (npr. HGV, YFV) Z ustrezno zasnovo testa in/ali testiranjem vsaj 10 drugih vzorcev, pozitivnih na DNA-virus Z ustrezno zasnovo testa in/ali testiranjem vsaj 10 človeških vzorcev, pozitivnih na retrovirus (npr. HIV) Stabilnost Kot pri kakovostnih testih Navzkrižno onesnaženje Vsaj 5 serij testov, pri katerih se izmenično uporabijo vzorci z visoko vsebnostjo (za katero je znano, da je naravna) in negativni vzorci Vsaj 5 serij testov, pri katerih se izmenično uporabijo vzorci z visoko vsebnostjo (za katero je znano, da je naravna) in negativni vzorci Vsaj 5 serij testov, pri katerih se izmenično uporabijo vzorci z visoko vsebnostjo (za katero je znano, da je naravna) in negativni vzorci Vsaj 5 serij testov, pri katerih se izmenično uporabijo vzorci z visoko vsebnostjo (za katero je znano, da je naravna) in negativni vzorci Inhibicija Notranja kontrola, najbolje med celotnim NAT-postopkom Notranja kontrola, najbolje med celotnim NAT-postopkom Notranja kontrola, najbolje med celotnim NAT-postopkom Notranja kontrola, najbolje med celotnim NAT-postopkom Stopnja neustreznega odzivanja celotnega sistema, ki vodi v lažno negativne rezultate Vsaj 100 vzorcev s 3-kratno koncentracijo virusa 95-odstotne pozitivne mejne koncentracije Vsaj 100 vzorcev s 3-kratno koncentracijo virusa 95-odstotne pozitivne mejne koncentracije Vsaj 100 vzorcev s 3-kratno koncentracijo virusa 95-odstotne pozitivne mejne koncentracije Vsaj 100 vzorcev s 3-kratno koncentracijo virusa 95-odstotne pozitivne mejne koncentracije 99/100 testov pozitivnih Opombe: Merilo sprejemljivosti za ‚neustreznost odzivanja celotnega sistema, ki povzroča lažno negativne rezultate‘, je 99/100 pozitivnih testov. Za količinske teste NAT se izvede študija s vsaj 100 pozitivnimi vzorci, pri kateri se upoštevajo rutinski pogoji, v katerih delajo uporabniki (npr. brez predizbora vzorcev). Hkrati je treba pridobiti primerjalne rezultate drugega sistema testa NAT. Za količinske teste NAT se diagnostična občutljivost izmeri z uporabo 10 serokonverzijskih vzorcev. Hkrati je treba pridobiti primerjalne rezultate drugega sistema testa NAT.





Preglednica 3

Hitri testi: protitelesa proti HIV 1 in 2, HCV, HBc, HTLV I in II, ter za HBsAg

Proti HIV 1/2 Proti HCV HBsAg Proti HBC Proti HTLV I/II Merila sprejemljivosti Diagnostična občutljivost Pozitivni vzorci Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Serokonverzijski vzorci Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Enaka merila kot za presejalne teste Diagnostična specifičnost Negativni vzorci 1 000 darovanj krvi 1 000 darovanj krvi 1 000 darovanj krvi 1 000 darovanj krvi 1 000 darovanj krvi ≥ 99 % (proti HBc: > 96 %) 200 kliničnih vzorcev 200 kliničnih vzorcev 200 kliničnih vzorcev 200 kliničnih vzorcev 200 kliničnih vzorcev 200 vzorcev nosečnic 200 vzorcev nosečnic 200 vzorcev nosečnic 200 vzorcev nosečnic 100 potencialno motečih vzorcev 100 potencialno motečih vzorcev 100 potencialno motečih vzorcev 100 potencialno motečih vzorcev 100 potencialno motečih vzorcev





Preglednica 4

Potrditveni/dopolnilni testi za protitelesa proti HIV 1 in 2, proti HTLV I in II, proti HCV, ter za HbsAg

Potrditveni test za protitelesa proti HIV Potrditveni test za protitelesa proti HTLV Dopolnilni test za HCV Potrditveni test za HBsAg Merila sprejemljivosti Diagnostična občutljivost Pozitivni vzorci 200 HIV 1 in 100 HIV 2 200 HTLV I in 100 HTLV II 300 HCV (pozitivni vzorci) 300 HBsAg Pravilna identifikacija kot pozitivna (ali nedoločena), ne negativna Vključno z vzorci z različnih stopenj okužbe, iz katerih so razvidni različni vzorci protiteles Vključno z vzorci z različnih stopenj okužbe, iz katerih so razvidni različni vzorci protiteles. Genotipi 1–4: > 20 vzorcev/genotip (vključno z genotipi 4 razen podtipa a); 5: > 5 vzorcev; 6: če so na voljo Vključno z vzorci z različnih stopenj okužbe 20 vzorcev z ‚visoko pozitivno‘ vsebnostjo (> 26 IU/ml); 20 vzorcev v mejnem območju Serokonverzijski vzorci 15 serokonverzijskih vzorcev/vzorcev z nizkimi titri 15 serokonverzijskih vzorcev/vzorcev z nizkimi titri 15 serokonverzijskih vzorcev/vzorcev z nizkimi titri Analitska občutljivost Standardi Drugi mednarodni standard za HBsAg, podtip adw2, genotip A, oznaka NIBSC: 00/588 Diagnostična specifičnost Negativni vzorci 200 darovanj krvi 200 darovanj krvi 200 darovanj krvi 10 lažno pozitivnih vzorcev pri ustreznem presejalnem testu (2) Brez lažno pozitivnih rezultatov/ (2) brez nevtralizacije 200 kliničnih vzorcev, vključno z vzorci nosečnic 200 kliničnih vzorcev, vključno z vzorci nosečnic 200 kliničnih vzorcev, vključno z vzorci nosečnic 50 potencialno motečih vzorcev, vključno z vzorci z nedoločenimi rezultati pri drugih potrditvenih testih 50 potencialno motečih vzorcev, vključno z vzorci z nedoločenimi rezultati pri drugih potrditvenih testih 50 potencialno motečih vzorcev, vključno z vzorci z nedoločenimi rezultati pri drugih potrditvenih testih 50 potencialno motečih vzorcev





Preglednica 5

HIV 1 antigen

Test za HIV 1 antigen Merila sprejemljivosti Diagnostična občutljivost Pozitivni vzorci 50 HIV 1 vzorcev, pozitivnih na Ag 50 supernatantov celičnih kultur, vključno z različnimi podtipi HIV 1 in HIV 2 Pravilna identifikacija (po nevtralizaciji) Serokonverzijski vzorci 20 serokonverzijskih vzorcev/vzorcev z nizkimi titri Analitska občutljivost Standardi HIV 1 antigen p24, prvi mednarodni referenčni reagent, oznaka NIBSC: 90/636 ≤ 2 IU/ml Diagnostična specifičnost 200 darovanj krvi 200 kliničnih vzorcev 50 potencialno motečih vzorcev ≥ 99,5 % po nevtralizaciji





Preglednica 6

Serotipizacijski in genotipizacijski testi: HCV

Serotipizacijski in genotipizacijski testi za HCV Merila sprejemljivosti Diagnostična občutljivost Pozitivni vzorci 200 (pozitivni vzorci) Vključno z vzorci z različnih stopenj okužbe, iz katerih so razvidni različni vzorci protiteles. Genotipi 1–4: > 20 vzorcev/genotip (vključno z genotipi 4 razen podtipa a); 5: > 5 vzorcev; 6: če so na voljo ≥ 95 % skladnost serotipizacije in genotipizacije > 95 % skladnost serotipizacije in genotipizacije Diagnostična specifičnost Negativni vzorci 100





Preglednica 7

HBV-markerji: protitelesa proti HBs, proti HBc IgM, proti Hbe ter za HBeAg

Proti HBs IgM proti HBC Proti HBe HBeAg Merila sprejemljivosti Diagnostična občutljivost Pozitivni vzorci 100 cepljenih 200 200 200 ≥ 98 % 100 po naravni poti okuženih oseb Vključno z vzorci z različnih stopenj okužbe (akutna/kronična itn.) Merila sprejemljivosti se morajo uporabljati le za vzorce z akutne stopnje okužbe Vključno z vzorci z različnih stopenj okužbe (akutna/kronična itn.) Vključno z vzorci z različnih stopenj okužbe (akutna/kronična itn.) Serokonverzijski vzorci 10 nadaljnjih ali proti HBs serokonverzij Kadar so na voljo Analitska občutljivost Standardi Prvi mednarodni referenčni pripravek SZO 1977; NIBSC, Združeno kraljestvo HBe – referenčni antigen 82; PEI Nemčija Proti HBs: < 10 mIU/ml Diagnostična specifičnost Negativni vzorci 500 darovanj krvi 200 darovanj krvi 200 darovanj krvi 200 darovanj krvi ≥ 98 % Vključno s kliničnimi vzorci 50 potencialno motečih 200 kliničnih vzorcev 50 potencialno motečih vzorcev 200 kliničnih vzorcev 50 potencialno motečih vzorcev 200 kliničnih vzorcev 50 potencialno motečih vzorcev





Preglednica 8

HDV-markerji: proti HDV, IgM proti HDV, Delta antigen

Proti HDV IgM proti HDV Delta antigen Merila sprejemljivosti Diagnostična občutljivost Pozitivni vzorci 100 50 10 ≥ 98 % določevalnih HBV-markerjev določevalnih HBV-markerjev določevalnih HBV-markerjev Diagnostična specifičnost Negativni vzorci 200 200 200 ≥ 98 % Vključno s kliničnimi vzorci Vključno s kliničnimi vzorci Vključno s kliničnimi vzorci 50 potencialno motečih vzorcev 50 potencialno motečih vzorcev 50 potencialno motečih vzorcev





Preglednica 9

Antigeni za sisteme krvnih skupin ABO, Rh in Kell

1 2 3 Specifičnost Število testov na priporočeno metodo Skupno število vzorcev, ki se testirajo, preden je proizvod dan na trg Skupno število vzorcev, ki se testirajo za nov preparat ali uporabo jasno opredeljenih reagentov Proti ABO1 (proti A), proti ABO2 (proti B), proti ABO3 (proti A,B) 500 3 000 1 000 Proti RH1 (proti D) 500 3 000 1 000 Proti RH2 (proti C), proti RH4 (proti c), proti RH3 (proti E) 100 1 000 200 Proti RH5 (proti e) 100 500 200 Proti KEL1 (proti K) 100 500 200

Merila sprejemljivosti

Pri vseh zgoraj navedenih reagentih so testni rezultati primerljivi z že uveljavljenimi reagenti s sprejemljivim delovanjem glede na navedeno reaktivnost pripomočka. Za že uveljavljene reagente, katerih področje ali način uporabe je spremenjeno ali dopolnjeno, se izvedejo nadaljnji testi v skladu z zahtevami iz stolpca 1 (zgoraj).

Vrednotenje delovanja proti D reagentov vključuje teste za različne šibke Rh1 (D) in delne Rh1 (D) vzorce, glede na predvideno uporabo proizvoda.

Omejitve:

Klinični vzorci: : 10 % testne populacije Vzorci novorojenčkov : > 2 % testne populacije Vzorci ABO: : > 40 % A, B pozitivnih ‚šibek D‘ : > 2 % RH1 (D) pozitivnih

Preglednica 10

Merila za sprostitev serij za določanje antigenov sistemov krvnih skupin ABO, Rh in Kell

Testne zahteve za specifičnost vsakega reagenta

1. Testni reagenti

Reagenti za določanje krvnih skupin Najmanjše število testiranih kontrolnih celic Pozitivne reakcije Negativne reakcije A1 A2B Ax B 0 Proti ABO1 (proti A) 2 2 2 (3) 2 2 B A1B A1 0 Proti ABO2 (proti B) 2 2 2 2 A1 A2 Ax B 0 Proti ABO3 (proti A,B) 2 2 2 2 4 R1r R2r šibek D r’r r’r rr Proti RH1 (proti D 2 2 2 (3) 1 1 1 R1R2 R1r r’r R2R2 r’r rr Proti RH2 (proti C) 2 1 1 1 1 1 R1R2 R1r r’r R1R1 Proti RH4 (proti c) 1 2 1 3 R1R2 R2r r’r R1R1 r’r rr Proti RH3 (proti E) 2 1 1 1 1 1 R1R2 R2r r’r R2R2 Proti RH5 (proti e) 2 1 1 3 Kk kk Proti KEL1 (proti K) 4 3 Opomba: Poliklonalni reagenti se morajo testirati na številnih celicah, da se potrdi specifičnost ter izključi prisotnost nezaželenih protiteles, ki onesnažujejo vzorec.

Merila sprejemljivosti

Vsaka serija reagenta mora izkazati nedvoumne pozitivne ali negativne rezultate z vsemi priporočenimi tehnikami v skladu z rezultati, pridobljenimi iz podatkov o vrednotenju delovanja.

2. Kontrolni materiali (rdeče krvničke)

Fenotip rdečih krvničk, uporabljenih za kontrolo zgoraj navedenih reagentov za določanje krvnih skupin, se potrdi z uporabo uveljavljenega pripomočka.“