2.

Za položku týkajúcu sa E 960ci) sa vkladajú tieto položky: „E 960cii) REBAUDIOZID M SA VYRÁBA ENZYMATICKOU KONVERZIOU VYSOKO PURIFIKOVANÝCH EXTRAKTOV REBAUDIOZIDU A Z LISTOV STÉVIE Synonymá Definícia Rebaudiozid M vyrobený enzymatickou konverziou vysoko purifikovaných extraktov rebaudiozidu A z listov stévie je glykozid steviolu zložený prevažne z rebaudiozidu M s malými množstvami iných glykozidov steviolu, ako sú rebaudiozid A a rebaudiozid D. Rebaudiozid M sa vyrába enzymatickou konverziou vysoko purifikovaných steviol-glykozidových extraktov (95 % glykozidov steviolu) rebaudiozidu A získaných z listov rastliny Stevia rebaudiana Bertoni použitím enzýmov UDP-glukozyltransferáza a sacharóza syntáza produkovaných geneticky modifikovanými kmeňmi E. coli (pPM294, pFAF170 a pSK401), ktoré uľahčujú prevod glukózy zo sacharózy a UDP-glukózy na glykozidy steviolu prostredníctvom tvorby glykozidických väzieb. Po eliminácii enzýmov separáciou tuhých látok a kvapalín a tepelným ošetrením spočíva purifikácia v koncentrácii rebaudiozidu M adsorpciou živice. Ďalším krokom je rekryštalizácia glykozidov steviolu, ktorej výsledkom je finálny produkt obsahujúci aspoň 95 % rebaudiozidu M. V prídavnej látke v potravinách sa nesmú zistiť životaschopné bunky E. coli (pPM294, pFAF170 a pSK401) a ich DNA. Chemický názov Rebaudiozid M: 2-O-β-D-glukopyranozyl-3-O-β-D-glukopyranozyl-β-D-glukopyranozylester kyseliny 13-[(2-O-β-D-glukopyranozyl-3-O-β-D-glukopyranozyl-β-D-glukopyranozyl)oxy]kaur-16-en-18-ovej Molekulový vzorec Triviálny názov Vzorec Konverzný faktor Rebaudiozid M C56H90O33 0,25 Molekulová hmotnosť a číslo CAS Triviálny názov Číslo CAS Molekulová hmotnosť (g/mol) Rebaudiozid M 1220616-44-3 1 291,29 Kvantitatívna analýza Nie menej ako 95 % rebaudiozidu M v sušine Opis Biely až svetložltý prášok, približne 150 až 350-krát sladší ako sacharóza (pri 5 % ekvivalencii sacharózy) Identifikácia Rozpustnosť Dobre rozpustný až málo rozpustný vo vode pH Medzi 4,5 a 7,0 (roztok 1:100) Čistota Celkový popol Nie viac ako 1 % Strata sušením Nie viac ako 6 % (105 °C, 2 hodiny) Reziduálne rozpúšťadlá Nie viac ako 5 000 mg/kg etanolu Arzén Nie viac ako 0,015 mg/kg Olovo Nie viac ako 0,2 mg/kg Kadmium Nie viac ako 0,015 mg/kg Ortuť Nie viac ako 0,07 mg/kg Rezíduá bielkovín Nie viac ako 5 mg/kg Veľkosť častíc Nie menej ako 74 μm (meranie preosievaním cez sito s maximálnou definovanou veľkosťou ôk 200 pre maximálnu veľkosť častíc 74 μm) E 960ciii) REBAUDIOZID D VYROBENÝ ENZYMATICKOU KONVERZIOU VYSOKO PURIFIKOVANÝCH EXTRAKTOV REBAUDIOZIDU A Z LISTOV STÉVIE Synonymá Definícia Rebaudiozid D vyrábaný enzymatickou konverziou vysoko purifikovaných extraktov rebaudiozidu A z listov stévie je glykozid steviolu zložený prevažne z rebaudiozidu D s malými množstvami iných glykozidov steviolu, ako sú rebaudiozid A a rebaudiozid M. Rebaudiozid D sa vyrába enzymatickou konverziou vysoko purifikovaných steviol-glykozidových extraktov (95 % glykozidov steviolu) rebaudiozidu A získaných z listov rastliny Stevia rebaudiana Bertoni použitím enzýmov UDP-glukozyltransferáza a sacharóza syntáza produkovaných geneticky modifikovanými kmeňmi E. coli (pPM294, pFAF170 a pSK401), ktoré uľahčujú prevod glukózy zo sacharózy a UDP-glukózy na glykozidy steviolu prostredníctvom tvorby glykozidických väzieb. Po eliminácii enzýmov separáciou tuhých látok a kvapalín a tepelným ošetrením spočíva purifikácia v koncentrácii rebaudiozidu D adsorpciou živice. Ďalším krokom je rekryštalizácia glykozidov steviolu, ktorej výsledkom je finálny produkt obsahujúci aspoň 95 % rebaudiozidu D a rebaudiozidu A. V prídavnej látke v potravinách sa nesmú zistiť životaschopné bunky E. coli (pPM294, pFAF170 a pSK401) a ich DNA. Chemický názov Rebaudiozid D: 2-O-β-D-glukopyranozyl-β-D-glukopyranozylester kyseliny 13-[(2-O-β-D-glukopyranozyl-3-O-β-D-glukopyranozyl-β-D-glukopyranozyl)oxy]kaur-16-en-18-octovej Rebaudiozid A: β-D-glukopyranozylester kyseliny 13-[(2-O-β-D-glukopyranozyl-3-O-β-D-glukopyranozyl-β-D-glukopyranozyl)oxy]kaur-16-en-18-oik octovej Molekulový vzorec Triviálny názov Vzorec Konverzný faktor Rebaudiozid D C50H80O28 0,29 Rebaudiozid A C44H70O23 0,33 Molekulová hmotnosť a číslo CAS Triviálny názov Číslo CAS Molekulová hmotnosť (g/mol) Rebaudiozid D 63279-13-0 1 291,15 Rebaudiozid A 58543-16-1 967,01 Kvantitatívna analýza Nie menej ako 95 % rebaudiozidov D a A v sušine Opis Biely až svetložltý prášok, približne 150 až 350-krát sladší ako sacharóza (pri 5 % ekvivalencii sacharózy) Identifikácia Rozpustnosť Dobre rozpustný až málo rozpustný vo vode pH Medzi 4,5 a 7,0 (roztok 1:100) Čistota Celkový popol Nie viac ako 1 % Strata sušením Nie viac ako 6 % (105 °C, 2 hodiny) Reziduálne rozpúšťadlá Nie viac ako 5 000 mg/kg etanolu Arzén Nie viac ako 0,015 mg/kg Olovo Nie viac ako 0,2 mg/kg Kadmium Nie viac ako 0,015 mg/kg Ortuť Nie viac ako 0,07 mg/kg Rezíduá bielkovín Nie viac ako 5 mg/kg Veľkosť častíc Nie menej ako 74 μm (meranie preosievaním cez sito s maximálnou definovanou veľkosťou ôk 200 pre maximálnu veľkosť častíc 74 μm) E 960civ) REBAUDIOZID AM SA VYRÁBA ENZYMATICKOU KONVERZIOU VYSOKO PURIFIKOVANÝCH EXTRAKTOV STEVIOZIDU Z LISTOV STÉVIE Synonymá Definícia Rebaudiozid AM vyrábaný enzymatickou konverziou vysoko purifikovaných extraktov steviozidu z listov stévie je glykozid steviolu zložený prevažne z rebaudiozidu AM s malými množstvami iných glykozidov steviolu, ako sú steviozid a rebaudiozid E. Rebaudiozid AM sa vyrába enzymatickou konverziou vysoko purifikovaných steviol-glykozidových extraktov (95 % glykozidov steviolu) steviozidu získaných z listov rastliny Stevia rebaudiana Bertoni použitím enzýmov UDP-glukozyltransferáza a sacharóza syntáza produkovaných geneticky modifikovanými kmeňmi E. coli (pPM294, pFAF170 a pSK401), ktoré uľahčujú prevod glukózy zo sacharózy a UDP-glukózy na glykozidy steviolu prostredníctvom tvorby glykozidických väzieb. Po eliminácii enzýmov separáciou tuhých látok a kvapalín a tepelným ošetrením spočíva purifikácia v koncentrácii rebaudiozidu AM adsorpciou živice. Ďalším krokom je rekryštalizácia glykozidov steviolu, ktorej výsledkom je finálny produkt obsahujúci aspoň 95 % rebaudiozidu AM. V prídavnej látke v potravinách sa nesmú zistiť životaschopné bunky E. coli (pPM294, pFAF170 a pSK401) a ich DNA. Chemický názov Rebaudiozid AM: 2- O-β-D-glucopyranozyl-3-O-β-D-glucopyranozyl-β-D-glucopyranozyl ester kyseliny 13-[(2-O-β-D-glucopyranozyl-β-D-glucopyranozyl)oxy]kaur-16-en-18-ovej Molekulový vzorec Triviálny názov Vzorec Konverzný faktor Rebaudiozid AM C50 H80 O28 0,29 Molekulová hmotnosť a číslo CAS Triviálny názov Číslo CAS Molekulová hmotnosť (g/mol) Rebaudiozid AM 2222580-26-7 1 291,15 Kvantitatívna analýza Nie menej ako 95 % rebaudiozidu AM v sušine Opis Biely až svetložltý prášok, približne 150 až 350-krát sladší ako sacharóza (pri 5 % ekvivalencii sacharózy) Identifikácia Rozpustnosť Dobre rozpustný až málo rozpustný vo vode pH Medzi 4,5 a 7,0 (roztok 1:100) Čistota Celkový popol Nie viac ako 1 % Strata sušením Nie viac ako 6 % (105 °C, 2 hodiny) Reziduálne rozpúšťadlá Nie viac ako 5 000 mg/kg etanolu Arzén Nie viac ako 0,015 mg/kg Olovo Nie viac ako 0,2 mg/kg Kadmium Nie viac ako 0,015 mg/kg Ortuť Nie viac ako 0,07 mg/kg Rezíduá bielkovín Nie viac ako 5 mg/kg Veľkosť častíc Nie menej ako 74 μm (meranie preosievaním cez sito s maximálnou definovanou veľkosťou ôk 200 pre maximálnu veľkosť častíc 74 μm) “