Úradný vestník L 204 , 30/08/1995 S. 0013 - 0019



Rozhodnutie Komisie z 25. júla 1995, ktorým sa ustanovujú podmienky týkajúce sa zdravia zvierat a požiadavky týkajúce sa certifikácie pre dovoz z tretích krajín Crassostrea gigas pre znovunasadenie do vôd spoločenstva (Text s významom pre EHP) (95/352/ES) KOMISIA EURÓPSKYCH SPOLOČENSTIEV, so zreteľom na Zmluvu o založení Európskeho spoločenstva, so zreteľom na smernicu Rady 91/67/EHS z 28. januára 1991 o veterinárnych podmienkach zvierat pri uvádzaní zvierat a produktov akvakultúry na trh [1], naposledy zmenenú a doplnenú Aktom o pristúpení Rakúska, Švédska a Fínska, a najmä na jeho článok 19 ods. 4 a článok 20 a 21, keďže Crassostrea gigas predstavuje hlavný druh ustríc chovaný v spoločenstve, čím predstavuje dôležitý ekonomický faktor a dôležitý zdroj príjmov pre osoby pracujúce v sektore akvakultúry; keďže určité choroby, ktoré sa v spoločenstve považujú za exotické, avšak prevládajú v tretích krajinách, by mohli v prípade zavlečenia do spoločenstva mať devastujúce účinky na sektor chovu ustríc; keďže zavlečeniu takýchto chorôb sa musí zabrániť; keďže riziko zavlečenia chorôb je najvyššie vtedy, keď sa zavádzajú ustrice určené na znovu- nasadenie do vôd spoločenstva; keďže pokiaľ neexistujú vhodné dezinfekčné metódy pre odpadové vody z chovu a z čistiacich nádrží pre ustrice, rovnakénebezpečenstvo existuje pri zavádzaní ustríc, ktoré sú dočasne držané v takýchto zariadeniach pred ich spotrebou na území spoločenstva; keďže z tohto dôvodu podmienky týkajúce sa zdravia zvierat, veterinárne osvedčenia a tretie krajiny, z ktorých sa Crassostrea gigas môžu dovážať na účely nasadenia, musia byť predbežné až do zaslania informácií o epidemiologickej situácii a o organizácii inšpekčných služieb tretích krajín, ktoré ešte nie sú uvedené na zozname; keďže náhodný dovoz iných druhov lastúrnikov v zásielkach Crassostrea gigas predstavuje značné nebezpečenstvo choroby; keďže s cieľom zabrániť tomuto nebezpečenstvu musia byť zásielky pred odoslaním skontrolované; keďže toto rozhodnutie sa uplatňuje bez toho, aby tým boli dotknuté podmienky týkajúce sa zdravia ľudí stanovené smernicou 91/492/EHS, ktorou sa ustanovujú zdravotné podmienky pre produkciu a uvádzanie na trh živých lastúrnikov [2]; keďže opatrenia uvedené v tomto rozhodnutí sú v súlade so stanoviskom Stáleho veterinárneho výboru, PRIJALA TOTO ROZHODNUTIE: Článok 1 Členské štáty povolia dovozy lastúrnikov patriacich do druhu Crassostrea gigas určených na nasadenie do vôd spoločenstva alebo pre opätovné ponorenie v čistiacich strediskách tak, aby prišli do styku s vodami spoločenstva z krajín uvedených v prílohe I, za predpokladu, že: 1. sú splnené nasledovné dovozné podmienky: a) v deň nakládky sa museli podrobiť kontrole s cieľom overenia, či spĺňajú požiadavky uvedené v článku 3, bod 1 smernice 91/67/EHS; b) museli byť chované počas svojho celého životného cyklu a zberané v národných vodách krajiny pôvodu; c) musia pochádzať z územia, ktoré bolo vyhlásené príslušným orgánom za územie bez výskytu chorôb Mikrocytos mackini a Oyster Velar Velum Disease, v súlade s postupmi odoberania vzoriek a s diagnostickými metódami uvedenými v prílohe II, a v ktorej sa nevyskytujú žiadne iné významné choroby dvojchlopňových mäkkýšov okrem marteiliózy (Marteilia refringens) a bonamiózy (Bonamia ostreae); d) museli byť pred nakládkou skontrolované na výskyt lastúrnikov akéhokoľvek iného druhu v súlade s postupmi uvedenými v prílohe III. 2. sú sprevádzané osvedčením o zdravotnom stave zvierat, ktorého vzor je uvedený v prílohe IV: Článok 2 Toto rozhodnutie sa bude uplatňovať od 1. októbra 1995. Článok 3 Toto rozhodnutie je adresované členským štátom. V Bruseli 25. júla 1995 Za Komisiu Franz Fischler člen Komisie [1] Ú. v. ES L 46, 19.2.1991, s. 1. [2] Ú. v. ES L 268, 24.9.1991, s. 1. -------------------------------------------------- PRÍLOHA I Predbežný zoznam tretích krajín, z ktorých sú povolené dovozy Crassostrea gigas určené na nasadenie v spoločenstve (AU) Austrália (CA) Kanada (NZ) Nový Zéland (US) Spojené štáty americké -------------------------------------------------- PRÍLOHA II Postupy odoberania vzoriek a diagnostické metódy na vyhlásenie územia za územie bez výskytu chorôb Mikrocytos mackini a velárna choroba ustríc (iridoviróza) A. METÓDY ODBERU VZORIEK 1. ODBER VZORIEK 1.1. Miesta odberu vzoriek Pre každé z uvedených území sa musí zvoliť určitý počet miest odberu vzoriek tak, aby bola možnosť zistenia patogénov maximálna. Musia sa vziať do úvahy parametre, ktoré majú vplyv na vývoj patogénnych pôvodcov, ako je hustota násad, vodné toky a vývojový cyklus lastúrnikov. Pre dané územie sa musia zvoliť najmenej tri miesta odberu vzoriek. Počet miest sa musí zvýšiť v prípade veľkých území obsahujúcich niekoľko oddelených oblastí pestovania vnímavých druhov. Vždy, ak je to možné, aspoň jedna vzorka sa musí odobrať z prírodných ložísk. Všetky lastúrniky vyznačujúce sa abnormalitami (abnormálny rast, roztvorené lastúry) sa musia vyselektovať. 1.2. Doba a početnosť odberu vzoriek Pri stanovení početnosti kontrol sa vychádza z inkubačnej doby nákazy a kontroly sa vykonajú až po uplynutí tejto doby. Pri stanovení doby kontroly sa musí brať do úvahy aj sťahovanie lastúrnikov, ktoré obvykle prebieha na jar a na jeseň. Odber vzoriek na Mikrocytos a na iridovirus sa musí z tohto dôvodu vykonávať dvakrát za rok (jar/jeseň). 1.3. Rozsah vzorkovania V priebehu počiatočného dvojročného obdobia, ktoré predchádza priznaniu schváleného štatútu, rozsah vzorkovania pre každé miesto odberu vzoriek činí 150 alebo dostatočný počet na zabezpečenie stanovenia patogénnych nosičov z 95 % intervalom spoľahlivosti pri prevalencii 2 %. 2. PREPRAVA VZORIEK Všetky vzorky mäkkýšov sa musia dodať do schváleného laboratória do 24 hodín po odbere vzorky. Musia byť zabalené v súlade s bežnými štandardmi s cieľom udržať ich v dobrom stave. Ku vzorke musí byť pripevnená etiketa, na ktorej bude jasne uvedené miesto odberu vzoriek a prípadne anamnéza. 3. MAKROSKOPICKÉ VYŠETRENIE Lastúrniky musia byť otvorené opatrne tak, aby nedošlo k poškodeniu tkanív, a to najmä plášťa, žiabier, srdca a zažívacej žľazy. Musia byť zaznamenané anomálie a poškodenia tkanív, ako aj všetky deformácie lastúry, organizmy prevrtávajúce lastúry a podozriví obyvatelia plášťa. 4. VYŠETRENIE POPULÁCIE V PRÍPADE VÝSKYTU ABNORMÁLNEJ ÚMRTNOSTI Zakaždým, keď sa v populácii lastúrnikov vyskytne abnormálna úmrtnosť, tak sa musí vykonať naliehavé vyšetrenie s cieľom určiť pôvodcu. V prirodzených podmienkach je abnormálnou úmrtnosťou náhla značná úmrtnosť, ktorá sa vyskytne v krátkom čase medzi dvomi pozorovaniami počas nízkeho odlivového cyklu. V liahni sa úmrtnosť považuje za abnormálnu vtedy, ak chovateľ nedokáže získať larvy počas doby, ktorá zahŕňa následné potery z rôznych populácií mláďat z jedného výteru. V násadovom rybníku sa úmrtnosť považuje za abnormálnu vtedy, ak sa náhla úmrtnosť vyskytne v krátkom čase v mnohých nádržiach. Odobratá vzorka musí obsahovať 150 jednotlivých ustríc a musí sa ňou nakladať v súlade s postupom definovaným pre histologickú analýzu. Táto technika sa musí použiť na začiatku ešte pred akýmkoľvek druhom vyšetrenia. Vzorky sa musia fixovať najlepšie v Carsonovej fixačnej tekutine, čo umožní opätovné použitie vzorky pre elektrónovú mikroskopiu. B. DIAGNOSTICKÉ METÓDY a) Microcytos mackini 1. PRÍPRAVA A VYŠETRENIE VZORIEK NA MICROCYTÓZU 1.1. Cytologické vyšetrenie Vykonajte rez cez abscesy, vredy alebo zelené pustuly, odstráňte nadbytočnú vodu tak, že vzorku umiestnite na pijavý papier, potom preneste na podložné sklíčko vzorku zodpovedajúcu rezu prechádzajúcemu cez infikované tkanivo. Podložné sklíčka vysušte na vzduchu a potom fixujte metanolom (2 až 3 minúty). Podložné sklíčka vyfarbite pomocou ekvivalentného farbiva Wright-Giemsa (napr. Mercks Hemacolor Kit alebo Baxters Diff–Quick) v súlade s pokynmi výrobcu. Podložné sklíčka ponorte do prvého kúpeľa na 4 až 5 sekúnd, potom ich ponorte do druhého kúpeľa (3 sekundy). Opláchnite vodou z vodovodu, úplne vysušte studeným alebo teplým vzduchom a vložte do syntetickej živice (Eukitt). Parazit o priemere 1-3 μm sa objaví vo vnútri hemocytov alebo mimo hostiteľských buniek a má modrú cytoplazmu a malé červené jadro. Doba pozorovanie jedného podložného sklíčka v dĺžke 5 minút je dostatočná. 1.2. Histologické vyšetrenie S cieľom získať histologické rezy vykonajte rez telom ustrice vrátane pustúl, abscesov a vredov – pokiaľ sa vyskytujú. Vzorku potom vložte do fixačnej kvapaliny, ako je napr. Davidsonova, Bouinova alebo Carsonsova. Posledne menovaná kvapalina umožňuje v prípade potreby opakované použitie vzoriek pre elektrónovú mikroskopiu. Pomer objemu tkaniva k objemu fixačnej kvapaliny nesmie byť vyšší ako 1: 10. So vzorkami sa následne zaobchádza v súlade s klasickými histologickými metódami. Niekoľko nešpecifických vyfarbení umožní pozorovať Microcytos: haemalum-eosin, Massonsov trichróm. Tieto príklady nie sú vyčerpávajúce. Odporúča sa vyšetriť dva rezy na každej ustrici. Štádiá Mikrocytos, vnútrobunkový parazit o priemere 2/3 μm sa dá pozorovať v bunkách vezikulárneho spojovacieho tkaniva na periférii lézií, v svalových bunkách a v hemocytoch nachádzajúcich sa vo vnútri lézií. b) Velárna choroba ustríc 1. PRÍPRAVA A VYŠETRENIE VZORIEK NA IRIDOVÍRUS 1.1. Cytologické vyšetrenie Rozrežte zažívaciu žľazu a žiabre pozdĺž sagitálnej roviny, odsajte prebytočnú vodu pomocou pijavého papiera, potom zatlačte tú časť rozrezanej vzorky, ktorá prechádza cez postihnuté orgány proti podložnému sklíčku. Podložné sklíčka vysušte na vzduchu a potom fixujte metanolom (2 až 3 minúty). Podložné sklíčka sa vyfarbia s použitím s Mercks Hemacolor Kit (reagenčným roztokom 2 (ref. 11956) kvôli vyfarbeniu dočervena a reagenčným roztokom 3 (ref. 11957) kvôli vyfarbeniu domodra). Podložné sklíčka ponorte do prvého kúpeľa na 4 až 5 sekúnd, potom ich ponorte do druhého kúpeľa (3 sekundy). Opláchnite vodou z vodovodu, úplne vysušte studeným alebo teplým vzduchom a vložte do syntetickej živice (Eukitt). 5 minút je dostatočná doba na vyšetrenie každého podložného sklíčka. Cytoplazma infikovaných buniek sa vyfarbuje domodra a obsahuje slabo dočervena sfarbené jadro a inklúzne teliesko premenlivej veľkosti sfarbené do jasne červena. 1.2. Histologické vyšetrenie Prestrihnite malými nožnicami viscerálnu hmotu a žiabre pozdĺž sagitálnej roviny a vzorku vložte do fixačnej kvapaliny (Davidsonova, Bouinova, Carsonova kvapalina); posledne menová je vhodná pre vzorky, ktoré treba neskôr vyšetriť v prípade potreby elektrónovou mikroskopiou. Na každú objemovú časť vzorky musí pripadať aspoň 10 objemových častí kvapaliny. Vzorky sa potom vyšetria bežnými histologickými postupmi. Mnoho nešpecifikovaných vyfarbení poukazuje na iridovírusové inklúzne telieska: haemalum-eosin, Massonsov trichróm a iné. U každej ustrice sa musia vyšetriť dva rezy. Obrvený velárny epitel s intracytoplazmatickými inklúznymi telieskami (priemer 1,2 až 2,4 μm), ktoré sú guľovité, husté a bazofilné v rannom štádiu infekcie sa však stávajú nepravidelnými a menej bazofilnými vo virionovej forme. Inklúzne telieska sa príležitostne vyskytujú vo velárnych podporných ezofagových a orálnych epiteloch a zriedkavo v epiteli plášťa. 1.3. Elektrónová mikroskopia Velárne epitelové bunky s viroplazmou (pozorované v histológii ako inklúzne telieska), ktoré tvoria virálne čiastočky. Virálne čiastočky s dvadsaťstenovou symetriou (priemer 228 ± 7 nm) a s kapsidou pozostávajúcou z dvoch dvojvrstvových membrán. Kompletné virálne častice majú husté vnútorné jadro oddelené od kapsidy priemerne hustou zónou. -------------------------------------------------- PRÍLOHA III 1. Príslušný úrad vykoná u každej zásielky vizuálnu kontrolu najmenej 1000 ustríc náhodne vybraných pre každé miesto pôvodu. 2. Dávka vyhovie skúške vtedy, ak kontrola uvedená v bode 1 neodhalí prítomnosť iných mäkkýšov ako Grassostreas gigas. -------------------------------------------------- PRÍLOHA IV +++++ TIFF +++++ +++++ TIFF +++++ --------------------------------------------------