6.

Kvalitatívne pomôcky NAT na HIV iné ako pomôcky na typizáciu vírusu musia byť navrhnuté tak, aby bolo prípadné zlyhanie cieľovej oblasti NAT pre HIV-1 kompenzované použitím dvoch nezávislých cieľových oblastí. Parameter výkonu Vzorka Počet, vlastnosti a použitie vzoriek Kritériá prijateľnosti Analytická citlivosť Medzinárodná norma WHO pre RNA HIV-1; Medzinárodná norma WHO pre RNA HIV-2; alebo kalibrované referenčné materiály Citlivosť NAT a detekčný limit (LOD) NAT sa validujú sériovým riedením referenčných materiálov, testovaním replikátov (minimálne 24) pri rôznych koncentráciách analytu vrátane koncentrácií s prechodom od pozitívnych k negatívnym výsledkom s príslušnou pomôckou NAT. Detekčný limit (LOD) sa vyjadruje ako 95 % pozitívna hraničná hodnota (v IU/ml) po štatistickej analýze (napr. Probit) (2). kvantitatívne NAT: určenie dolnej, hornej hranice kvantifikácie, presnosti, správnosti, „lineárneho“ rozsahu merania, „dynamického rozsahu“. Reprodukovateľnosť pri rôznych úrovniach koncentrácie. V súlade s najnovším stavom vedeckých poznatkov. Citlivosť na genotypy/podtypy HIV Všetky príslušné genotypy/podtypy, prednostne z medzinárodných referenčných materiálov. Potenciálne náhrady za zriedkavé podtypy HIV (ktoré sa majú kvantifikovať primeranými metódami): supernatanty bunkovej kultúry, transkripty in vitro, plazmidy. Kvalitatívne NAT: aspoň 10 vzoriek na genotyp alebo podtyp. Kvantitatívne NAT: sériové riedenie na preukázanie účinnosti kvantifikácie. V súlade s najnovším stavom vedeckých poznatkov. Diagnostická citlivosť Pozitívne vzorky odrážajúce bežné podmienky používateľov (napr. bez predbežného výberu vzoriek). Kvantitatívne NAT: ≥ 100 Súbežne sa stanovujú výsledky porovnateľné s iným systémom NAT. V súlade s najnovším stavom vedeckých poznatkov. Sérokonverzné panely Kvalitatívne NAT: ≥ 10 panelov Súbežne sa stanovujú výsledky porovnateľné s iným systémom NAT. V súlade s najnovším stavom vedeckých poznatkov. Diagnostická špecifickosť Vzorky darcov krvi Kvalitatívne NAT: ≥ 500 Kvantitatívne NAT: ≥ 100 V súlade s najnovším stavom vedeckých poznatkov. Skrížená reaktivita Vzorky s potenciálnou skríženou reaktivitou ≥ 10 vzoriek pozitívnych na ľudský retrovírus (napr. HTLV) V súlade s najnovším stavom vedeckých poznatkov. Prenos Vysokopozitívna na RNA HIV; negatívna na RNA HIV. Počas štúdií robustnosti sa vykoná najmenej päť sérií testov so striedaním vysokopozitívnych a negatívnych vzoriek. Titre vírusu vo vysokopozitívnych vzorkách musia byť reprezentatívne pre prirodzene sa vyskytujúce vysoké titre vírusu. V súlade s najnovším stavom vedeckých poznatkov. Zisťovanie stavu protilátok Pozitívna na RNA HIV: negatívna na anti-HIV, pozitívna na anti-HIV. Vzorky pred sérokonverziou (negatívne na anti-HIV) a po sérokonverzii (pozitívne na anti-HIV) V súlade s najnovším stavom vedeckých poznatkov. Miera zlyhania celého systému Nízkopozitívna na RNA HIV Testuje sa ≥ 100 vzoriek nízkopozitívnych na RNA HIV. Tieto vzorky obsahujú koncentráciu vírusu rovnajúcu sa trojnásobku 95 % pozitívnej hraničnej hodnoty koncentrácie vírusu. ≥ 99 % pozitivita Tabuľka 6. Ďalšie požiadavky na samotesty na HIV-1/2 Parameter výkonu Vzorky (3) Počet laických osôb Interpretácia výsledkov (4) Interpretácia výsledkov (5) laickými osobami odrážajúca tento rozsah úrovní reaktivity: — nereaktívne, — reaktívne, — slabo reaktívne (6), — neplatné. ≥ 100 Diagnostická citlivosť Laické osoby, o ktorých je známe, že sú pozitívne. ≥ 200 Diagnostická špecifickosť Laické osoby, ktoré nepoznajú svoj stav. ≥ 400 Laické osoby, u ktorých existuje vysoké riziko nákazy danou infekciou. ≥ 200