ARCHIVES HISTORIQUES
DELACOMMISSION
COLLECTION RELIEEDES
DOCUMENTS "COM"
COM(67)224
Vol.1967/0038

Disclaimer
Conformément aurèglement (CEE, Euratom) n°354/83 duConseil du1erfévrier 1983
concernant l'ouverture aupublic desarchives historiques delaCommunauté économique
européenne etdelaCommunauté européenne del'énergie atomique (JOL43du15.2.1983,
p.1),telquemodifié par lerèglement (CE, Euratom) n°1700/2003 du22septembre 2003
(JOL243du27.9.2003, p.1),cedossier estouvert aupublic. Lecaséchéant, lesdocuments
classifiés présents dans cedossier ontétédéclassifiés conformément àl'article 5dudit
règlement.
Inaccordance with Council Regulation (EEC, Euratom) No354/83 of1February 1983
concerning theopening tothepublic ofthehistorical archives oftheEuropean Economic
Community andtheEuropean Atomic Energy Community (OJL43,15.2.1983, p.1),as
amended byRegulation (EC, Euratom) No1700/2003 of22September 2003 (OJL243,
27.9.2003, p.1),this fileisopen tothepublic. Where necessary, classified documents inthis
filehave been declassified inconformity with Article 5oftheaforementioned regulation.
InÜbereinstimmung mitderVerordnung (EWG, Euratom) Nr.354/83 desRates vom 1.
Februar 1983 über die Freigabe der historischen Archive der Europäischen
Wirtschaftsgemeinschaft undderEuropäischen Atomgemeinschaft (ABI. L43vom 15.2.1983,
S.1),geändert durch dieVerordnung (EG, Euratom) Nr.1700/2003 vom 22.September 2003
(ABI. L243vom 27.9.2003, S.1),istdiese Datei derÖffentlichkeit zugänglich. Soweit
erforderlich, wurden dieVerschlusssachen indieser Datei inÜbereinstimmung mitArtikel 5
dergenannten Verordnung freigegeben.

COMUN ITA'ECONOMICA EUROPEA
COMMISSIONE
COM(67)224 def.
Bruxelles ,17maggio 1?67
Proposta modificata didirettiva delConsiglio
relativa all'impiego ditaluni agenti conserva­
tivi periltrattamento insuperficie degli
agrumi ,nonché alle misure dicontrollo per la
ricerca el'identificazione degli agenti conser­
vativi negli esugli agrumi
(presentata dalla Commissione alConsiglio confor­
memente all'articolo 149 »paragrafo 2delTrattato CEE )
CCM(67)224 def.

Proposta modificata didirettiva del
Consiglio relativa all'impiego ditaluni
agenti conservativi per iltrattamento
insuperficie degli agrumi ,nonché alle
misure .dicontrollo per laricerca ela
identificazione degli agenti conservativi
negli e.sugli agrumi
(presentata dalla Commissione alConsiglio conformemente
all'articolo 149 »paragrafo 2delTrattato CEE )
A.Laproposta didirettiva èmodificata nelmodo seguente :
"Articolo 1
Ladirettiva delConsiglio del 5novembre 1963 relativa al
ravvicinamento delle legislazióni degli Stati membri concernenti
gliagenti conservativi chepossono essere impiegati nelle derra­
tedestinate all'alimentazione umana èmodificata nelmodo seguen­
te:
1. Iseguenti agenti conservativi sono aggiunti aquelli enu­
merati alla sezione Idell' allegato della direttiva :
••I/•••

»
INumeraziona j
déliaCEEjDenominazione Condizioni diimpiego
Е230 Mfenile–41
a)Soloporiltrattamento insuper­
ficiedegliagrumi; |
Ξ231 Ortofenilefenolo "b)almomentodellacommercializza -
I
i
ii zionedegliagrumi
E232 Ortofenilfenato diIi)iltassoresiduoperognichi-
Isodio logrammoliagrumi(fruttiin­
teri)nondevesuperares
perildifenile jOmg
V
per1'ortofenilfenolo
e1'ortofenilfenato di
sodio,separatamente o
insieme,espressiinorto- !'
fonilfenolo : 12mg
i
iii)iltrattamento deveessereindi-
catos
-nelcommercioall'ingrosso,j
sullefatture esuunlato i
esternodegliimballaggi con
I
I lamenzione "consorvato median-
te facendoseguire
ilnomedellaodellesostanze
utilizzate , |
-nelcommercio alminuto,con
unamenzionecheinformiilconj
sumatore inmodounivoco .
2.Ilcomma "bjdell'articolo 5delladirettiva èsoppresso .

Articolo 2
1* GliStati membri adottato tutte lamisure atte agarantire
ohe ilprelievo deicampioni eleanalisi per laricerca el'iden­
tificazione deldifenile ,dell' ortofenilf enolo edell 'ortof enilf ena-
todisodio negli esugli agrumi siano effettuati conformemente alle
disposizioni degli allegati I,IT,III eIVdella presente direttiva
2. Isummenzionati allegati possono essére modificati ecomple­
tati conformemente alla disposizioni generali concernenti laricer­
cael'identificazione degli agenti conservativi nelle esulle der­
rate alimentarli
Articolo 3
1
GliStati membri applicano lemisure necessarie perconfor­
marsi alla presente direttiva ont'ro ill8luglio 1567 ®-neinforma­
noimmediatamente la -Commissione .
Articolo 4
Lapresente direttiva èdestinata agli Stati membri .

Inseguito agli emendamenti apportati alla proposta di
direttiva ,ilsecondo eilterzo considerando ditale proposta
sono sostituiti dai due seguenti considerando :
"Considerando che l'impiego ditali sostanze periltrattamento
insuperficie degli agrumi nonrappresenta unpericolo per la
salute qualora ladoso rosidua perchilogrammo difrutti inte­
rinon superi i70mgdidifenile ei12mgdiortofenilfonolo
ediortofenilf enato disodio ,espressi inortofenilf enolo e
qualora ,atutti gli stadi della commercializzazione ,siafatta
menzione deltrattamento inmodo appropriato ;
Considerando che l'autorizzazione sulpiano comunitario delle
tresostanze considerate presuppone altresì 'lafissazione di
norme comuni per ilcontrollo K-Pficiale degli agrumi trattati ;
che lemodificazioni eicomplementi chedovranno essere even­
tualmente apportati atali norme comuni ,conformemente airisul­
tati delle ricerche scientifiche ,rappresentano misure diappli­
cazione dicarattere tecnico eche èquindi opportuno adottarli
secondo ledisposizioni generali concernenti laricerca ela
identificazione degli agenti conservativi negli esugli agrumi ".

ALLEGATO I
Modalità perilprelievodeicampionidiagrumiperil
controllo degliagenticonservativi
A.Prelievo deicampioni
I.Iprelievi sonoeffettuati secondoimetodiscientifici checonsentono
diottenere campioni rapprosentativi dellepartitedifruttadaoontrol-
lare•
II.Icampioni devonosoddisfare alleseguenti esigenze *
1.MeroeinImballaggi (casse,scatoleerecipienti analoghi )
. I_ I
Numerodirecipienti
iiunapartita! i
Ifinoa20ida21a
i |50Qda501
a1000piùdi1.000
Numerominimodi
recipienti daprelevare
11 2 3 4
Quantitativo inchilo­
grammidifruttidapre­
levareperrecipiente jI
i2
!
II
I
i
2 21
'2
2.Merceallarinfusa
Volumedéliapartitainkg11 1
finoa20da20 j
a500 j!
i
!piùdi500
Quantitativo daprelevare
inkgi ;12|4
; l
i8
III.Perpartitaintendesi unapartedifornitura aventelestessecaratteri­
stiche(varietà,gradodimaturazione ,calibro,tipodiimballaggio ecc.).
B.Condizionamento espedizione deicampioni
1.Icampioni sarannointrodotti inrecipienti ermeticamente chiusij
2.irecipienti sarannosigillati ;
3.icampioniintalmodocondizionati sarannoinviatiilpiùrapidamente
possibile ailaboratori dicontrollo .

ALL3GAT0 II
lìinc-r ^ i-jgic -nididifanilo ,erte fenilf enolo e
.ortofenilfenato disodio nelle scorze diagrumi
1.Oggetto ecampo d'applicazione ,
Ilmetodo quiappresso descritto consente diverificare lapresenza diresi­
duididifenile ,ortofenilfenolo (OPP)oortofenilfenato disodio nelle scor
zediagrumi .Invalore assoluto ,ilsuolimite disensibilità èdell' ordine
di5ugperildifenile edì1jigperl'CPPol'ortofenilfenato disodio ,il
cheequivale ,rispettivamente ,a5mgdidifenile (5ppm )ea1mgdiOPP
(lppm)nelle scorze di1kgdiagrumi .
Iltrattamento degli agrumi coiprodotti summenzionati implica lapresenza di
residui ,localizzati per lopiù .nelle scorze dei frutti .Ildosaggio dique­
sti residui nei frutti interi ènecessario soltanto nei casi incui sia rive­
lata laloro presenza nelle scorze .
2.Principio
Lescorza sono estratte come diclorometano inambiente acido .L'estratto e
concentrato esottoposto acromatografia instrato sottile sulgel disilice .
Lapresenza didifenile ,ortofenilfenolo oortofenilfenato disodio èindica­
tadafluorescenza edareazioni dicolorazione .
3.Reattivi
Cicloesano p.a.
diclorometano p.a.
soluzione diacido cloridrico al25$ (p/v)'
.geldisilice -GP254 Mei*ck oequivalente •
soluzione acetonica di2,4,7-trinitrofluorenone (Pluka ,BDHoequivalente )
allo 0,5$ (TFF)

soluzione etanolica di2,6-di"bfomo -"bónzòchinone -4-clorimide allo 0,1$ (du­
rata massima diconservazione ;'ima settimana infrigorifero )
soluzione ocncentrata diammoniaca ,d':C,9
soluzione campione didifenile puro all'l$nelcicloesano
soluzione campione diortofenilfenolo puro all'l$nelcicloesano .
4.Apparecchiatura
Misoelatore
pallone da250 cc,concollo smerigliato erefrigerante ariflusso
evaporatore apressione ridotta
micropipette
apparecchiatura percromatografia instrato sottile oonpiastre di20x20 cm
lampada U.V. (254nn0*l'intensità deve essere tale darendere percettibile
unamacchia di5ugcLidifenile
polverizzatore perreattivi
stufa diessiccazione
v
5.Procedimento
a)Preparazione delcampione edAstrazione
Ifrutti cherappresentano l'intero campione prelevato per ilcontrollo
sono divisi indueparti .Lametà diciascun frutto èriservata aldosag­
giodeiresidui didifenile e(o)diortofenilfenolo .Sulle altre metà
siprelevano dei frammenti discorza per ottenere uncampione dicirca
80g.Tali frammenti sono tagliati inpiccoli pezzi ,frantumati nelmisce­
latore eintrodotti nelpallone da250 cc|siaggiungono poi 1ccdisolu­
zione diHCL e100ccdidiclorometanc .Siscalda lamiscela setto riflus _
soper 10minuti .Silascia raffreddare ,sirisciacqua ilrefrigerante
concirca 5cedidiclorometano esifiltra con filtro apieghe .Siversa
lasoluzione nell' evaporatore esiaggiungono alcune pietre porose .Si
concentra lasoluzione apressione ridotta ,aunatemperatura di60C°,
fino adottenere unvolume finale dicirca 10cc.Qualora siimpieghi un
evaporatore rotativo ,ilpallone deve essere mantenuto inposizione sta­
bile per evitare chesulla parete superiore delpallone siformi unostra
todiprodotto conconseguente perdita didifenile .

-3-
b)Cromatografia
Siintroducono munmiscelatore 30g-digeldisilicee60ccdiacqua.
Simescolaperunminuto,sipercolasuccessivamente lamiscelasu5pia­
strecromatografiche elasistendeperformareunostratodicirca0,250
mmdispessore .Lepiastrecosi'ricoperte sonosottoposte per15miniti
adunacorrente d'ariacaldaesuccessivamente introdotte inunastufadi
essiccazione dovesonomantenute per30minutiadunatemperatura di110°C.
Silasciaraffreddare ,quindiognipiastra èdivisainstriscelarghe2
cmcontrattiparalleli chepenetrano nelricoprimento finoallasuperfi­
ciedellapiastra.Suciascunastrisciasidispongono ,acirca1,5cmdal
"bordoeagccceposteunaaccantoall'altra,50jildell'estratto daanaliz
zare.Unastriscia almenoèriservata aicampionicostituiti daundeposi­
todil^ul(ossia10ug)dellesoluzioni campionedidifenileediortofe-
nilfenolo .
Lepiastrecromatografiche sonosviluppate conunamisceladicicloesano
edidiclorometano (25'95)nellevaschette preventivamente ricoperte al­
l'interno conunacartadafiltro.
c)Ricercaeidentificazione
Lapresenza didifenile ediortofenilf enoloèrivelatadall'apparire di
macchieallaluceU.Y.(254nm).Poiché1'ortofenilfenato disodioèsta^-
totrasformato inortofenilfenolo all'attodell'estrazione inambiente a­
cido,lasuapresenzasiidentifica conquelladell'ortofenilfenolo .1L'i­
dentificazione deiprodottisieffettua nelmodoseguente ?
i)ildifenile dàallalucedelgiorno,unamacchiagiallasevienepol­
verizzato conlasoluzione diT1TP|
ii)1'ortofenilfenolo dàunamacchiablusevienepolverizzato conlaso­
luzionedi2,6-dibromo-benzochinone -4-clorimide, fattopassarera­
pidamente inunacorrente d'ariacaldaedespoetosuccessivamente in
atmosfera saturad'ammoniaca .

ALLEGA^O III
Dosaggio dsiresiduididifenile negliagrumi
1.Oggettoecampod'applicazione T
Ilmetodoquiappresso descritto consente didosareiresiduididifenile ne­
gliagrumi (.fruttiinteri).L'approssimazione deirisultati èdi+10$perun
tenoreindifenilesuperiore a10mgperognichilogrammo difrutta(10ppm).
2.Principio -
Dopoladistillazione incorrente divaporeacqueoeinambiente acidoela
successiva estrazione conciifiloesano ,l'estratto vienesottoposto acromato­
grafiainstratosottilesulgeldisilice.Ottenutoilcromatogramma ,ildi-
fenilevieneeluitoedeterminato spettrofotometricamente à248nm.
3.Reattivi
Acidosolforico concentrato
emulsione antiscliiuma abasedisilicone
cicloesano p.a.
esanop.a.
alcoleetilicop.a.
solfatodisodioanidro
geldisilice GF254Merckoequivalente
soluziono campionedidifenile puroall'l$nelcicloesano :diluireconci­
cloesanoperottenere !(a).0,6ug/ul|(b)1jxg/plì(c)1,4,ug/ul.
4fc''Apparecchiatura
Mis©3latore da1litro
pallonedadistillazione da2litriconseparatore deltipoClevènger módi-
.Ificatoerefrigerante ariflusso (cfr.schema)
matraccio taratoda10cc
micropipette da$0jj.1
apparecchiatura percromatografia instratosottileconpiastredi20x20cm
stufadiessiccazione
centrifuga oontubiconicidi15oc 1
spettrofetometro U.V.

5.Procedimento
a)Preparazione delcampione edestrazione ■-
Ifrutti checostituiscono l'intero campione prelevato perilcontrollo S£
nodivisi indueparti .Lametà diciascun frutto èriservata alla ricerca
Mei residui didifenile ,diOPP odiSOPP .Lerimanenti metà sono raccolte
triturate inunmulino ofrantumate fino adottenere unmiscuglio omogeneo .
Successivamente siprelevane almeno 2S.ottocampioni da200 g,suiquali
viene effettuata l'analisi secondo ilprocedimento seguente .Ciascun sottè
campione viene introdotto inunmiscelatore con 100 ccdiacqua efrantu -..
mato avelocità ridotta peralcuni secondi .Siaggiunge una quantità d'ac-
quansufficiente affinché ilvolume delmiscuglio raggiunga i3/4delconte­
nuto delmiscelatore .Sicontinua poi lafrantumazione agrande velocità
per cinque minuti .lapoltiglia intalmodo ottenuta viene travasata inun
pallone dadistillazione da2litri .Sirisciacqùa ilmiscelatore conacqua
esiaggiungono iliquidi dilavaggio alcontenuto delpallone ,(ilquanti­
tativo totale diacqua dautilizzare per lafrantumazione elarisciacqua­
tura èdi1litro ).Siaggiungono almiscuglio 2ccdiacido solforico ,1
ccdiemulsione antischiuma ealcune pietre porose .Siapplicano alpallone
ilseparatore eilrefrigerante .Siintroduce nelseparatore dell' acqua di­
stillata ,finché illivello dell' acqua superi abbondantemente ilraccordo
inferiore del tubo laterale diritorno ,esiintroducono poi 7cediciclo­
esano .Sidistilla percirca 2ore .Sucoessivamente siraccoglie ilconte­
nuto delseparatore nelmatraccio tarato di10cc,sirisciacqua ilsepa­
ratore con1,5ccdicicloesano ,siaggiunge illiquido dilavaggio alcon­
tenuto delpallone esicompleta ilvolume concicloesano .Alla fine siin­
^troduce unpo' disolfato disodio anidro esiagita .
b)Cromatografia
Siintroducono inunmiscelatore 30gdigeldisilice e60codiacqua .Si
mescola perunminuto ,siperoola successivamente lamisoela' su5piastre
cromatografiche elasistende performare unostrato dicirca 0,250mmdi
spessore .Lepiastre cosi' ricoperte sono sottoposte per15jninuti aduna
corrente d'aria calda esuccessivamente introdotte inuna stufa diessicca­
zione ,dove sono mantenute per30minuti alla temperatura di110C°.Sila­
scia raffreddare ,quindi ogni piastra èdivisa inquattro strisce larghe
4,5cmcontratti paralleli chepenetrano nelricoprimento fino alla super­

-3-
ficie della piastra .Suunadelle striscia sidispongono ,acirca 1,5cm
dalbordo eagocce poste unaaccanto all'altra ,50jul "dell'estratto da
analizzare e,suciàsouna delle altre trestriscio ,5C^ul delle soluzioni
campióne (à),(b),e(c),corrispondenti rispettivamente adosi didifeni -
ledi -30,50a70ug. ' '
Sesiprocede adanalisi inserie ,sipuòomettere didisporre suciascuna
piastra lesoluzioni campione efarriferimento ,perla .curva dicampiona­
tura ,alla media deivalori ottenuti sulla "base dialmeno 5piastre ,con
lestesse dosi campione .
9
c)Sviluppo deicromatogrammi edeluizione
Icromatogrammi sono sviluppati suun'altezza dj17cmcon l'esano nelle
vaschette preliminari rivestite all'interno dicarta filtro :Lepiastre
sono essiccate all'aria .Lezone nelle quali èlocalizzato ildifenile sa­
nopercepibili alla luce U.V. a254nmedelimitate inrettangoli disuper ^
ficie identica .
lesuperficie intalmodo delimitate sono immediatamente raschiate median­
teuna spatola sututto lospessore dello strato disostegno .Ildifenile
viene estratto mediante 10c^5dialcole etilico ,per10minuti ,agitando
piùvolte .Siprocede altravaso intubi percentrifugazione esicentri­
fuga ,per 5minuti ,a2500 giri alminuto .
Hello stesso modo sipreleva una zona dicontrollo della stessa dimensio­
ne.Qualora siproceda adanalisi inserie ,sipreleva tale zona inuna
striscia vergine della piastra$ incaso dianalisi individuali ,sipreleva
tale zona suuna striscia occupata dauncampione ,aldisotto della zona
contenente ildifenile .
d)Determinazione spettrofotometrica
Siprocede alla decantazione delliquido chegalleggia nelle celle dello
spettrofotometro esidetermina l"estinzione a248nmperconfronto conun
estratto campione diuna zona cromatografica esente dadifenile .

-4-
6.Calcolo doirisultati
Sitracciaunacurvadicampionatura ,prendendo rispettivamente cornocoor­
dinateledosididifenile di30,50©70ugelocorrispondenti estin­
zioni,detcrminate allospettrofotometro .Lacurvaintalmodoottenuta
èunarottachopassaporl'origine.Ilgraficoconsentelaletturadi­
rettainppmdeltenoredidifenile doicampioni ,partendo daivalori
diestinzione doiloroestratti .

ALLEGATO TV
Dosàggio dairesiduidiortòfenilfenolo e
diortofenilfenato disodionegliagrumi
1.Oggctto gcampoaiapplicaziono
Ilmetodoquiappressodescritto consente didosareiresiduidiorto-
fenilfenolo (OPP)ediortofonilf enatodisodio(SOPP)negliagrumi
(fruttiinteri).Irisultati hannoun'approssimazione pordifettoil
cuivaloremediooscillaintornoal10-20$poruntenorediOPPodi
SOPPdell'ordinedi12ppm.
2.Principio
Dopoladistillazione inambiente acidoesuccessiva estrazione conetere
diisopentilioo ,11'estratto vienepurificato etrattato conunasoluzione
di1-fonil-2,3-diafetil-4-aminopirazolone (5)(=4-aminoantipirina ).Si
sviluppa unacolorazione rossalacuiintensità èmisurataallo'spettrofo­
tometroa510
3«Reattivi
Acidofosforicoal70$
emulsione antischiuma abasedisilicone
eterediisopentilico p.a.
cicloesanopuraficatoi agitaretrevolteconunasoluzione disodacau­
sticaal4$»lavaretrevolteconacqua !distillata
soluzione disodacausticaal4$-'
soluzione tamponea:pH10,4*introdurre inunmatraccio taratoda2litri
6,64gdiacidoborico,8gdiclorurodipotassio e93»1cedisoluzio­
nedisodacaustrica 1Njmescolare eriempire conacquadistillata fino
allatacca
reattivoI:sciogliere 1gdi1-fenil-2,3-dimetil-4-aminopirazolon© (5)
(04-amincantipirina )in-100ccdieoquadistillata
reattivoII:sciogliere 2gdiferrocianuro dipotassio in100cdi
acquadistillata .IreattiviIeIIdevonoessereconservati inflaconi
divetroscuro"erestanostabilisoltanto per14giornicirca.
geldisilice

-2-
%
soluzione campione :sciogliere 10ragdiOPPin0,5 osdiNaOH 0,01 N;
portare a100ccconlinasoluzione diborato disodio 0,2m(1cee
100ug^.Perlacurva dicampionatura diluire 1:10 conlasoluzione
tampone .
4*Apparocchiatura
Mulino ofrantumatore
miscelatore
pallone dadistillazione da11conseparatore del tipo Clevenger modi­
ficato erefrigerante ariflusso (schema :cfr ."Dosaggio deiresidui di
difenile negli agrumi ")
bagno all'infrarosso
"bulbo perdecantazione da200 cc
cilindri graduati da25a100cc
matracci tarati da25a100 cc
pipette da 1a10cc
pipette tarate da0,5 ce
spettrofotometro convaschette di5°m.
5.Procedimento
Ifrutti checostituiscono l'intero campione prelevato per ilcontrollo
sono divisi indueparti .Lametà diciascun frutto èriservata alla ri­
cerca deiresidui didifenile ,diOPP odiSOPP .Lerimanenti metà sono
riunite ,triturate inunmulino ofrantumate fino adottenere unmiscu­
glio omogeneo .Siprelevano almeno duo sottocampioni di250gsuiquali
viene effettuata l'analisi secondo ilprocedimento quiappresso indica­
to.
\ •
Ciascun sottocampione viene introdotto inunmiscelatore con 500 cedi
acqua etriturato fino adottenere unapoltiglia omogenea impalpabile in
cuisiano percettibili lecellule oleose .Siprelevano poi ,secondo il
tenore presunto inOPP ,150<-300 gdiquesta poltiglia omogenea cheven­
gono introdotti nelpallone dadistillazione da 11oonunaquantità di
acqua tale dàportare ilmiscuglio delpallone a500g»Dopo aver aggiun­
to10ccdiacido fosforico al70$ ,alcune pietre poroso e0,5cedi
emulsione antischiuma ,siapplicano ilseparatore eilrefrigerante sul
pallone .Simettono nel separatore 10ccdietere diisopentilico esi
•••/ •••

riscalda lentamente ilpallonenoibagnoall'infrarosso ,ovitandolacot­
turadellapoltiglia olaformazione dischiuma.Sidistilla por6oro
circa.Terminata ladistillazione ,siversailcontenuto delseparatore
noibulbopordecantazione da200cc,sirisciacquano ilseparatore o
ilrefrigerante con60oodicicloosano esuccessivamente con60ccdi
acqua.Iliquididilavaggiosiaggiungono alcontenuto delbulbodi
decantazione .Siagitaenergicamente ,e,nonappenasonoseparatelefa­
si,silasciadecantare lafaseacquosa.
Perestrarrel'OPP,siagitapoivigorosamente lafaseorganica 5volte,
ognivoltaper5minuticon10ccdisodacausticaal4$.Lesoluzioni
alcaline vengonoraccolte insieme,neutralizzate apH9-10conacido
fosforico inpresenza dicartaallafenolftaleina eportatea100cc
conacquadistillata .Perchiarificare lasoluzione cheapparolegger­
mentetorbidasiaggiunge unpizzicodigeldisilice,siagitaesi
filtraattraverso unfiltroasciutto agranafino.Poichéilmassimo
disensibilità ediesattezza nellosviluppodellacolorazione siot­
tieneconquantità OPPcompresofra10e70ug,siproleva conunapi­
pettaunaquotapartedi0,5-10codisoluzione ,secondolequantità
diOPPchesiprevedono ,esiintroduce inunmatraccio taratodi25ccj
siaggiungono 0,5cedelreattivoI,10ccdellasoluzione tamponoe
successivamente 0,5ocdelreattivoII.Siaggiungolasoluzione tampono
finoallataccaesiagitaenergicamente .
Dopo5minutisimisuraallospettrofotometro l'estinzione dellacolora­
zionerossaa510nmporconfronto conuncampione privodiestratto.L'in­
tensitàdellacolorazione nonmutaperladuratadi30minuti.Lavalutazio­
nesieffettuainfunzione deivaloridellacurvadioampionatura stabilita
nellestessecondizioni conlasoluzione campione diOPP.
6.Osservazioni
Perciascuna analisisiraccomanda dieffottuare almenoduevolteilcom­
plessodoliooperazioni ediprocedere adunadoppiadeterminazione spet­
trofotometrica convolumidiversidegliestrattialcalinineutralizzati .
Conquestometodogliagruminontrattati dannounvaloreinbiancoche
può1raggiungere 0,5ppmperlearancee0,8ppmperilimoni.