N.C 146/12 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee 5.6.91 
II 
(Atti preparatori) 
COMMISSIONE 
Proposta di regolamento (CEE) del Consiglio che istituisce misure comunitarie di lotta contro la 
malattia di Newcastle 
(91/C 146/14) 
COM(91) 137 de/. 
(Presentata dalla Commissione il 16 maggio 1991) 
IL CONSIGLIO DELLE COMUNITÀ EUROPEE, 
visto il trattato che istituisce la Comunità economica 
europea, in particolare l'articolo 43, 
vista la proposta della Commissione, 
visto il parere del Parlamento europeo, 
visto il parere del Comitato economico e sociale, 
considerando che i volatili sono elencati nell'allegato II 
del trattato; che la loro commercializzazione costituisce 
un'importante fonte di reddito per la popolazione agri­
cola; 
considerando la necessità di istituire, a livello comuni­
tario, le misure di lotta da prendere in caso di insorgenza 
della malattia di Newcastle, allo scopo di garantire lo 
sviluppo del settore avicolo e contribuire alla protezione 
sanitaria degli animali nella Comunità; 
considerando che l'insorgere della malattia di Newcastle 
può rapidamente assumere un carattere di epizoozia pro­
vocando mortalità e perturbazioni tali da compromettere 
gravemente la redditività dell'allevamento del pollame in 
generale; 
considerando che è indispensabile agire non appena si 
sospetta la presenza di tale malattia, in modo da pren­
dere provvedimenti immediati ed efficaci di lotta in caso 
di successiva conferma; che le misure in questione de­vono essere adeguate dalle autorità competenti, all'even­
tuale vaccinazione profilattica eseguita da un paese su 
tutto il proprio territorio o su una parte dello stesso; 
considerando che occorre evitare la diffusione della ma­
lattia fin dalla sua prima comparsa, sottoponendo ad at­
tento controllo i trasporti degli animali e l'uso di pro­
dotti che possano essere contaminati e procedendo ad 
eventuale vaccinazione; 
considerando che la diagnosi della malattia deve essere 
effettuata sotto l'egida di laboratori responsabili, il cui 
operato deve essere coordinato da un laboratorio di rife­
rimento comunitario; 
considerando la necessità di predisporre che gli Stati 
membri redigano eventuali piani di vaccinazione e ne in­
formino la Commissione ed altri Stati membri; 
considerando l'opportunità di affidare alla Commissione 
il compito di prendere le necessarie misure di applica­
zione, 
HA ADOTTATO IL PRESENTE REGOLAMENTO: 
Articolo 1 
1. Il presente regolamento definisce le misure comuni­
tarie di lotta da applicare in caso di comparsa della ma­
lattia di Newcastle in volatili diversi dai piccioni da com­
petizione, fatte salve le disposizioni che disciplinano gli 
scambi intracomunitari. 
2. Il presente regolamento non si applica se la malattia 
viene individuata in altri volatili: tuttavia, in questo caso, 
gli Stati membri mettono al corrente la Commissione 
sulle misure eventualmente adottate. 
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Articolo 2 
1. Ai sensi del presente regolamento, si applicano, se 
del caso, le definizioni di cui all'articolo 2 della direttiva 
90/539/CEE del Consiglio 0). 
2. Inoltre si intende per: 
a) «pollame infetto» qualsiasi volatile: 
— in cui sia stata ufficialmente confermata la pre­
senza della malattia di Newcastle a seguito di un 
esame effettuato da un laboratorio riconosciuto, 
oppure 
— che presenti, nel caso del focolaio constatato o di 
focolai successivi, sintomi clinici o lesioni post 
mortem che possano essere attribuite alla malattia 
di Newcastle; 
b) «pollame sospetto di infezione»: qualsiasi volatile che 
presenti sintomi clinici o lesioni post mortem tali da 
indurre ragionevolmente a sospettare la presenza 
della malattia di Newcastle; 
e) «pollame sospetto di contaminazione»: qualsiasi vola­
tile che abbia potuto essere esposto, direttamente o 
indirettamente, al virus della malattia di Newcastle; 
d) «intruglio»: i rifiuti provenienti da cucine, ristoranti, 
o, eventualmente, da industrie che utilizzano carni; 
e) «autorità competente»: l'autorità veterinaria all'uopo 
designata dall'amministrazione nazionale del paese in 
questione, la quale risponde direttamente e riferisce a 
detta amministrazione nell'ambito del presente rego­
lamento; 
f) «veterinario ufficiale»: il veterinario designato dall'au­
torità competente dello Stato membro. 
Articolo 3 
Qualsiasi caso sospetto della malattia di Newcastle deve 
essere notificato immediatamente all'autorità competente. 
Articolo 4 
1. Qualora si sospetti che il pollame sia infetto o con­
taminato dalla malattia di Newcastle, il veterinario uffi­
ciale deve avviare immediatamente un'indagine allo 
scopo di confermare o escludere la presenza della malat­
tia e, in particolare, prelevare o far prelevare i campioni 
necessari per tutti gli esami di laboratorio. 
O GU n. L 303 del 31. 10. 1990, pag. 6. 2. Non appena è notificato un caso sospetto di infe­
zione, l'autorità competente pone l'azienda interessata 
sotto controllo e dispone in particolare che: 
a) venga compilato un registro di tutte le categorie di 
volatili presenti nell'azienda specificando, per cia­
scuna di esse, quanti volatili sono morti, quanti pre­
sentano sintomi clinici e quanti non presentano sin­
tomi. Il registro in questione deve essere tenuto ag­
giornato ed essere presentato su richiesta, potendo es­
sere controllato in occasione di ciascuna visita; 
b) tutti i volatili presenti nell'azienda restino sequestrati 
nei locali in cui sono allevati o in qualsiasi altro locale 
in cui possano essere isolati e senza contatti con altri 
volatili; 
e) nessun volatile possa entrare nell'azienda o uscirne; 
d) qualsiasi movimento: 
— di persone, altri animali e di veicoli in provenienza 
dall'azienda o a destinazione della stessa, 
— dall'azienda, di carni o carcasse di volatili, man­
gimi, attrezzi, rifiuti, lettiere o qualsiasi altro ma­
teriale che possa trasmettere la malattia di New­
castle, 
— venga proibito, salvo autorizzazione del veterina­
rio ufficiale; 
e) dall'azienda non siano fatte uscire uova, tranne le 
uova destinate al consumo che siano state previa­
mente disinfettate conformemente alle disposizioni 
del veterinario ufficiale; 
f) venga fatto ricorso a mezzi appropriati di disinfezione 
alle entrate e alle uscite dei fabbricati in cui sono alle­
vati i volatili, nonché dell'azienda stessa; 
g) venga effettuata una indagine epidemiologica confor­
memente all'articolo 7. 
3. Finché le misure ufficiali di cui al paragrafo 2 re­
stano in vigore, il proprietario o l'allevatore di una qual­
siasi categoria di volatili sospetta si adopera per garantire 
il rispetto del paragrafo 2, in particolare alle lettere b), 
e), d) ed e). 
4. L'autorità competente può estendere qualsiasi misura 
ai sensi del paragrafo 2 ad altre aziende, qualora, tenuto 
conto della disposizione o della configurazione dei fab­
bricati o di eventuali contatti con l'azienda nella quale si 
sospetta la presenza della malattia, vi siano fondati mo­
tivi per sospettare un'eventuale contaminazione. 
5. Le misure di cui ai paragrafi 2, 3 e 4 rimangono 
applicabili finché la sospetta presenza della malattia di 
Newcastle sia esclusa dal veterinario ufficiale. 
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Articolo 5 
1. Non appena viene confermata ufficialmente la pre­
senza della malattia di Newcastle in una azienda, l'auto­
rità competente dispone l'applicazione delle seguenti mi­
sure, oltre a quelle elencate nell'articolo 4, paragrafo 2: 
a) tutti i volatili presenti nell'azienda siano abbattuti in 
loco. I volatili morti o abbattuti e tutte le uova de­
vono essere distrutti. Le operazioni di cui sopra de­
vono essere eseguite in modo da ridurre al minimo il 
rischio di diffusione della malattia; 
b) tutti i materiali e i rifiuti, come il mangime o il le­
tame, che potrebbero essere contaminati, devono es­
sere distrutti o sottoposti a trattamento; quest'ultimo, 
eseguito conformemente alle istruzioni del veterinario 
ufficiale deve garantire la distruzione del virus della 
malattia di Newcastle eventualmente presente; 
e) qualora i volatili siano stati macellati durante il pe­
riodo presunto di incubazione della malattia, le carni 
da essi ottenute devono essere, nella misura del possi­
bile, individuate e distrutte; 
d) le uova deposte durante il presunto periodo di incu­
bazione e uscite dall'azienda devono essere, nella mi­
sura del possibile, individuate e distrutte; i pulcini già 
nati da queste uova devono essere posti sotto con­
trollo ufficiale; 
e) ultimate le operazioni di cui alla lettera a), i fabbricati 
adibiti all'allevamento e le loro vicinanze nonché i 
veicoli usati per il trasporto e tutte le attrezzature che 
possono essere contaminate devono essere puliti e di­
sinfettati conformemente alle disposizioni dell'arti­
colo 11 ; 
f) nell'azienda non devono essere reintrodotti i volatili 
per almeno 21 giorni a decorrere dall'ultimazione 
delle operazioni di cui alla lettera e); 
g) deve essere effettuata un'indagine epidemiologica 
conformemente all'articolo 7. 
2. L'autorità competente può estendere le misure di 
cui al paragrafo 1 ad altre aziende, qualora, tenuto 
conto della dislocazione e della configurazione dei fab­
bricati o degli eventuali contatti con l'azienda nella quale 
è stata confermata la presenza della malattia, esistano 
fondati motivi di sospettare un'eventuale contamina­
zione. 
Articolo 6 
1. Nel caso di allevamenti costituiti da due o più bran­
chi separati, l'autorità competente può derogare alle di­
sposizioni dell'articolo 5, paragrafo 1, lettera a), per 
quanto riguarda i branchi sani di un'azienda infetta, a 
condizione che il veterinario ufficiale confermi che, te­
nuto conto della struttura e delle dimensioni delle unità 
interessate nonché delle operazioni ivi effettuate, tali 
unità sono completamente separate, per quanto riguarda 
la stabulazione, il governo, l'alimentazione e l'eventuale 
immunità vaccinica per cui il virus non può propagarsi da 
un'unità all'altra. 2. La Commissione può, conformemente alla proce­
dura di cui all'articolo 24, definire i criteri da applicare 
per concedere una deroga a norma del paragrafo 1. 
Articolo 7 
1. L'indagine epidemiologica verte sui seguenti aspetti: 
— il periodo nel quale può essere stata presente nell'a­
zienda la malattia di Newcastle; 
— l'origine probabile della malattia di Newcastle e l'i­
dentificazione delle altre aziende il cui pollame può 
essere stato infettato o contaminato dalla stessa fonte 
del virus ; 
— i movimenti di persone, pollame o altri animali, vei­
coli, uova, carni e carcasse, nonché attrezzi o mate­
riali che abbiano potuto veicolare il virus della malat­
tia nell'azienda in questione o in provenienza da esse. 
2. Per coordinare pienamente tutte le misure necessa­
rie all'eradicazione della malattia di Newcastle con la 
massima tempestività e per condurre l'indagine epidemio­
logica, viene istituita un'unità di crisi. 
Si applicano le norme generali riguardanti le unità di 
crisi nazionali e l'unità di crisi comunitaria che sono con­
tenute nel regolamento (CEE) n. .../.. (1). 
Articolo 8 
1. Qualora il veterinario ufficiale abbia fondati motivi 
per sospettare che il pollame di un'azienda possa essere 
stato contaminato in conseguenza di movimenti di per­
sone, animali o veicoli o in qualsiasi altro modo, l'a­
zienda in questione è sottoposta a controllo ufficiale 
conformemente al paragrafo 2. 
2. Il controllo ufficiale ha lo scopo di individuare im­
mediatamente qualsiasi caso sospetto della malattia di 
Newcastle, di tenere un registro del pollame detenuto 
nell'azienda e di controllarne i movimenti nonché, ove 
occorra, di prendere le misure elencate al paragrafo 3. 
3. Quando un'azienda è sottoposta a controllo uffi­
ciale conformemente alle disposizioni del paragrafo 2, 
l'autorità competente vieta l'uscita di volatili dall'azienda 
tranne per il loro trasferimento diretto in un macello, 
sotto controllo ufficiale, ai fini della loro immediata ma­
cellazione. L'autorizzazione è concessa previa esecu­
zione, da parte del veterinario ufficiale, di esame clinico 
del pollame da cui risulti l'assenza della malattia di New­
castle nell'azienda. Le suddette restrizioni ai movimenti 
degli animali devono essere applicate per un periodo di 
almeno 21 giorni a decorrere dall'ultima data in cui può 
essersi verificata contaminazione. Se durante tale periodo 
di 21 giorni si verifica di nuovo una contaminazione, il 
periodo di restrizioni successivo non potrà essere infe­
riore a 7 giorni. 
(') GU n. L ... del , pag. 
5. 6. 91 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee N. C 146/15 
4. Qualora ritenga che le condizioni lo permettono, 
l'autorità competente può limitare le misure di cui al pre­
sente articolo a una parte dell'azienda e al pollame che si 
trova in tale parte, a condizione che il pollame in que­
stione sia stato completamente separato dal restante 
quanto al soggiorno, al governo e all'alimentazione e che 
le relative operazioni siano state eseguite da addetti di­
versi. 
Articolo 9 
1. Non appena è ufficialmente confermata la presenza 
della malattia di Newcastle, l'autorità competente deli­
mita, attorno all'azienda infetta, una zona infetta che 
comprende una zona di protezione di almeno 3 km di 
raggio e una zona di sorveglianza di almeno 10 km di 
raggio. Nel delimitare queste zone si tiene conto dei 
confini naturali e dell'epidemiologia del focolaio. 
2. Le misure applicate nella zona di protezione com­
prendono: 
a) l'identificazione di tutte le aziende che detengono 
pollame situate nella zona; 
b) visite periodiche di tutte le aziende che detegono pol­
lame, l'esame clinico del pollame in questione, com­
presa, ove occorra, la raccolta di campioni da sotto­
porre ad esami di laboratorio; va tenuto inoltre un 
registro delle visite e dei risultati degli esami; 
e) il mantenimento in stato di isolamento di tutto il pol­
lame nei locali in cui è allevato o in qualsiasi altro 
locale idoneo; 
d) il ricorso a mezzi appropriati di disinfezione agli in­
gressi e alle uscite delle aziende; 
e) il controllo dei movimenti degli addetti alla manipola­
zione del pollame, delle carcasse di pollame e delle 
uova, nonché dei veicoli adibiti al traporto di pol­
lame, di carcasse e di uova in provenienza dalle 
aziende e a destinazione delle stesse; in linea di mas­
sima il transito del pollame è vietato, fatta eccezione 
per il transito sui grandi assi stradali o ferroviari; 
f) il divieto di uscita del pollame e di uova da cova dal­
l'azienda in cui si trovano, tranne qualora l'autorità 
competente abbia autorizzato il trasporto: 
i) di pollame destinato alla macellazione immediata 
in un macello situato, di preferenza, nella zona 
infetta, o, in casi di impossibilità, in un macello 
designato dall'autorità competente al di fuori 
della zona infetta. Le carni di tale pollame devono 
recare il marchio sanitario speciale previsto all'ar­
ticolo 6, paragrafo 1 del regolamento 
. . ./ . ./CEE del Consiglio [relativo alle norme di 
polizia sanitaria per gli scambi intracomunitari e 
le importazioni in provenienza dai paesi terzi, di 
carni fresche di volatili da cortile e di selvaggina 
da penna allevata]; ii) di pulcini di un giorno o di pollastre pronte per la 
deposizione in un'azienda situata nella zona in­
fetta, in cui non è presente altro pollame. L'a­
zienda destinataria deve essere sottoposta al con­
trollo ufficiale di cui all'articolo 8, paragrafo 2; 
iii) di uova da cova in un incubatoio situato nella 
zona infetta o in incubatoio esterno alla zona in­
fetta, designato dall'autorità competente; prima 
della spedizione, le uova e gli imballaggi che le 
contengono devono essere disinfettati. 
I trasporti autorizzati di cui ai punti i), ii) e iii) de­
vono essere effettuati direttamente e sotto controllo 
ufficiale. Essi sono autorizzati soltanto previa esecu­
zione, da pane del veterinario ufficiale, di un'ispe­
zione sanitaria dell'azienda. I mezzi di trasporto usati 
devono essere puliti e disinfettati prima e dopo l'uso; 
g) il divieto di spostare o spandere letame o lettiere di 
pollame senza autorizzazione; 
h) il divieto di fiere, mercati, esposizioni e altri raduni di 
pollame o di altri volatili. 
3. Le misure applicate nella zona di protezione re­
stano in vigore per almeno 21 giorni dopo l'esecuzione 
delle operazioni di pulizia e di disinfezione delle aziende 
infette, ai sensi dell'articolo 11. La zona di protezione 
entra allora a far parte della zona di sorveglianza. 
4. Le misure applicate nella zona di sorveglianza com­
prendono: 
a) l'identificazione di tutte le aziende che detengono 
pollame situate nella zona; 
b) la regolamentazione dei movimenti di pollame e di 
uova da cova nell'ambito della zona; 
e) il divieto di uscita di pollame dalla zona per i primi 15 
giorni, tranne per il trasporto diretto dei volatili ad un 
macello situato fuori della zona infetta, designato dal­
l'autorità competente. Le carni di tale pollame devono 
recare il marchio speciale previsto all'articolo 6 del 
regolamento . . ./ . ./CEE, [relativo alle norme di po­
lizia sanitaria per gli scambi intracomunitari e le im­
portazioni in provenienza dai paesi terzi di carni fre­
sche di volatili da cortile e di selvaggina da penna al­
levata] ; 
d) il divieto di uscita di uova da cova della zona infetta, 
tranne per il trasporto ad uno stabilimento designato 
dall'autorità competente. Prima della spedizione le 
uova e gli imballaggi che le contengono devono es­
sere disinfettati; 
e) il divieto di uscita, dalla zona, di concime e lettiera di 
pollame; 
N.C 146/16 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee 5.6.91 
f) il divieto di fiere, mercati, esposizioni o altri raduni di 
pollame o di altri volatili; 
g) fatte salve le disposizioni di cui alle lettere b) e e), il 
divieto di trasporto di pollame, escluso il transito sui 
grandi assi stradali o ferroviari. 
5. Le misure applicate nella zona di sorveglianza re­
stano in vigore per almeno 30 giorni dopo l'esecuzione 
delle operazioni preliminari di pulizia e di disinfezione 
dell'azienda infetta, conformemente all'articolo 11. 
Articolo 10 
1. L'autorità competente stabilisce le procedure che le 
consentono di seguire i movimenti di uova e di pollame. 
2. Il proprietario o il responsabile dell'allevamento del 
pollame è tenuto a fornire all'autorità competente, su ri­
chiesta di quest'ultima, le informazioni relative al pol­
lame e alle uova che entrano o escono dell'azienda. 
3. Le persone addette al trasporto o alla commercia­
lizzazione di pollame e di uova devono essere in grado 
di comunicare all'autorità competente le informazioni re­
lative agli spostamenti del pollame e delle uova da esse 
trasportato o commercializzato e a fornire qualsiasi altro 
dettaglio in materia. 
Articolo 11 
1. I disinfettanti da usare e le relative concentrazioni 
devono essere approvati dall'autorità competente. 
2. Le operazioni di pulizia e disinfezione vanno effet­
tuate sotto controllo ufficiale, conformemente alle istru­
zioni impartite dal veterinario ufficiale. 
Articolo 12 
La raccolta dei campioni e gli esami di laboratorio volti 
ad accertare la presenza del virus della malattia di New-
castle devono essere effettuati conformemente all'alle­
gato I. 
Articolo 13 
1. Ciascuno degli Stati membri provvede a designare: 
a) uno o più laboratori nazionali muniti delle attrezza­
ture e del personale specializzato necessari per poter 
procedere in qualsiasi momento all'individuazione 
delle caratteristiche antigeniche e biologiche del virus 
della malattia di Newcastle e per confermare i risul­
tati ottenuti dai laboratori regionali di diagnosi; e) uno o più istituti o laboratori nazionali incaricati di 
controllare l'efficacia, l'attività e la purezza dei vac­
cini da usare a scopo profilattico nel paese, o imma­
gazzinati per far fronte a situazioni di emergenza. 
2. I laboratori nazionali di cui all'allegato II sono re­
sponsabili per il coordinamento delle norme e dei metodi 
di diagnosi, per l'uso dei reagenti e per la prova dei vac­
cini. 
3. I laboratori nazionali che si occupano della malattia 
di Newcastle e dei quali si tratta al paragrafo 2 sono re­
sponsabili per il coordinamento delle norme e dei metodi 
diagnostici definiti in ciascuno dei laboratori specializzati 
nella malattia all'interno dello Stato membro. A questo 
scopo: 
a) essi possono fornire i reagenti diagnostici ai laboratori 
regionali; 
b) essi controllano la qualità di tutti i reagenti diagno­
stici usati in quello Stato membro; 
e) essi organizzano periodicamente prove comparative; 
d) essi detengono isolati del virus della malattia di New­
castle, prelevandoli da casi individuati in quello Stato 
membro; 
e) essi garantiscono la conferma di risultati positivi otte­
nuti nei laboratori diagnostici regionali. 
4. I laboratori nazionali elencati nell'allegato II si 
mantengono in contatto col laboratorio comunitario di 
riferimento di cui all'articolo 14. 
Articolo 14 
Il laboratorio comunitario di riferimento per la malattia 
di Newcastle è indicato nell'allegato III. Le mansioni e le 
attribuzioni di esso, nella misura in cui non siano disci­
plinate dall'articolo 28 della decisione del Consiglio 
90/424/CEE ('), vengono fissate secondo la procedura 
descritta all'articolo 24. 
Articolo 15 
1. La vaccinazione contro la malattia di Newcastle 
mediante vaccini autorizzati dall'autorità competente 
può essere praticata a scopo profilattico o per integrare 
le misure di lotta messe in applicazione in caso di com­
parsa della malattia. 
2. Sono autorizzati soltanto i vaccini che soddisfano 
le seguenti condizioni: 
a) il vaccino deve essere conforme ai requisiti della far­
macopea europea e deve essere stato prodotto e di­
stribuito sotto controllo ufficiale. 
b) uno o più laboratori nazionali per l'esecuzione delle 
prove sui reagenti da usare nei laboratori regionali; (') GU n. L 224 del 18. 8. 1990, pag. 29. 
5. 6. 91 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee N.C 146/17 
b) I vaccini importati da un paese terzo devono soddi­
sfare le condizioni di cui alla lettera a). 
3. Ulteriori criteri per l'uso di vaccini contro la malat­
tia di Newcastle possono essere stabiliti conformemente 
alla procedura prevista all'articolo 24. 
Articolo 16 
1. Gli Stati membri nei quali è praticata la vaccina­
zione preventiva facoltativa o obbligatoria contro la ma­
lattia di Newcastle ne informano la Commissione e gli 
altri Stati membri. 
2. La nota di informazione redatta in conformità del 
paragrafo 1 deve precisare: 
— le caratteristiche e la composizione di ciascuno dei 
vaccini usati; 
— le modalità di controllo della distribuzione, del ma­
gazzinaggio e dell'impiego dei vaccini; 
— le specie e le categorie di pollame che possono o de­
vono essere vaccinate; 
— le zone nelle quali la vaccinazione può o deve essere 
effettuata. 
Articolo 17 
1. In caso venga confermata la presenza della malattia 
di Newcastle, l'autorità competente può, a titolo di inte­
grazione delle altre misure di lotta previste dal presente 
regolamento, delimitare una zona territoriale e un pe­
riodo in cui dovrà essere effettuata immediatamente, 
sotto controllo ufficiale, la vaccinazione sistematica 
(vaccinazione di emergenza) delle specie di pollame da 
essa designate. Uno Stato membro che fa eseguire la vac­
cinazione d'emergenza informa la Commissione e gli al­
tri Stati membri, nell'ambito del comitato veterinario 
permanente istituito con decisone 68/361/CEE del Con­
siglio ('), in merito all'evolversi della malattia di New­
castle e al programma di vaccinazione di emergenza. 
2. Nel caso previsto al paragrafo 1, è vietato proce­
dere a vaccinazione o a rivaccinazione del pollame pre­
sente nelle aziende sottoposte alle restrizioni di cui al­
l'articolo 4. 
3. Nel caso previsto al paragrafo 1 : 
a) le specie di pollame da sottoporre a vaccinazione de­
vono essere vaccinate al più presto; 
b) tutti i volatili delle specie designate, nati o introdotti 
in un'azienda situata nella zona di vaccinazione, de­
vono essere o essere stati vaccinati; 
(') GU n. L255 del 18. 10. 1968, pag. 23. e) per tutta la durata della campagna di vaccinazione di 
cui al paragrafo 1, tutti i volatili delle specie designate 
detenuti in un'azienda situata nella zona di vaccina­
zione devono rimanere nell'azienda, con le seguenti 
eccezioni; 
— i pulcini di un giorno che sono trasferiti in un'a­
zienda situata nella zona di vaccinazione, nella 
quale dovranno essere sottoposti a vaccinazione; 
— i volatili trasportati direttamente in un macello si­
tuato nella zona di vaccinazione per esservi imme­
diatamente macellati. Qualora il macello sia si­
tuato fuori della zona di vaccinazione, lo sposta­
mento dei volatili è ammesso soltanto previa ese­
cuzione, da parte del veterinario ufficiale, di un'i­
spezione sanitaria dell'azienda; 
d) quando le operazioni di vaccinazione di cui alla let­
tera a) sono state ultimate, può essere autorizzata l'u­
scita dalla zona di vaccinazione: 
— di pulcini di un giorno destinati alla produzione di 
carne per essere trasferiti in un'azienda nella quale 
dovranno essere sottoposti a vaccinazione; l'a­
zienda in questione deve essere tenuta sotto con­
trollo fino a che i volatili che vi sono stati trasfe­
riti siano stati macellati; 
— dei volatili vaccinati da oltre 21 giorni e destinati 
all'immediata macellazione; 
— delle uova da cova deposte da pollame da produ­
zione vaccinato da almeno 21 giorni, le uova e gli 
imballaggi in cui sono contenute devono essere 
previamente disinfettati. 
4. Le misure di cui al paragrafo 3, lettere b) e d) ri­
mangono in applicazione per un periodo di 3 mesi dal­
l'ultimazione delle operazioni di vaccinazione di cui al 
paragrafo 1 ; esse possono essere prorogate per uno o più 
periodi ulteriori di 3 mesi. 
5. In deroga al paragrafo 3, lettere a) e b), l'autorità 
competente può escludere dalla vaccinazione sistematica 
determinati branchi di particolare valore scientifico, a 
condizione che siano state adottate tutte le misure neces­
sarie per garantirne la protezione sul piano sanitario e 
che siano sottoposti periodicamente a controllo sierolo­
gico. 
6. La Commissione segue l'evolversi dell'epizoozia e, 
all'occorrenza, può decidere in merito al controllo dei 
trasporti e alla vaccinazione ai sensi della procedura pre­
vista all'articolo 24. 
Articolo 18 
1. Qualora, in una determinata regione, una epizoozia 
della malattia di Newcastle si riveli eccezionalmente 
grave e presenti tendenza a diffondersi, lo Stato membro 
interessato : 
N. C 146/18 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee 5. 6. 91 
— dichiara «zona ad alto rischio sanitario» una sezione 
territorialmente delimitata, comprendente almeno 
tutte le zone di protezione e di sorveglianza che vi si 
trovano; 
— mette in applicazione nella «zona ad alto rischio sani­
tario» le misure previste all'articolo 9, paragrafo 3; 
— vieta l'uscita dalla «zona ad alto rischio» di tutto il 
pollame vivo e delle uova da cova. 
— informa la Commissione e altri Stati membri, nell'am­
bito del comitato veterinario permanente, in merito 
all'evolversi dell'epizoozia e alle misure di lotta appli­
cate. 
2. I confini della «zona ad alto rischio sanitario» pos­
sono essere riesaminati in funzione della progressiva eli­
minazione di zone di sorveglianza. Le misure di cui al 
paragrafo 1 sono abrogate quando è stata eliminata l'ul­
tima zona di sorveglianza. 
3. In caso di persistenza di una situazione di eccezio­
nale gravità, le misure che lo Stato membro interessato 
deve adottare, in particolare l'istituzione della «zona ad 
alto rischio sanitario» e il ricorso alle disposizioni dell'ar­
ticolo 17, possono essere oggetto di una decisione con­
formemente alla procedura di cui all'articolo 24. 
Articolo 19 
1. È vietato utilizzare per l'alimentazione del pollame 
intrugli provenienti dai mezzi di trasporto internazionali 
come navi, veicoli per il trasporto terrestre o aerei; gli 
intrugli in questione devono essere ammassati e distrutti 
sotto controllo ufficiale. 
2. L'utilizzazione per l'alimentazione del pollame di 
intrugli diversi da quelli di cui al paragrafo 1 o di rifiuti 
di pollame può essere autorizzata soltanto se questi sono 
stati sottoposti ad un trattamento termico che garantisca 
la distruzione del virus della malattia di Newcastle. 
3. Se necessario, la Commissione, in conformità con 
la procedura prevista all'articolo 24, definisce i criteri per 
l'applicazione del paragrafo 2. 
Articolo 20 
1. Ciascuno Stato membro redige un piano d'emer­
genza nel quale vengono specificate le misure nazionali 
da applicare in caso di comparsa della malattia di New­
castle. 
Il piano deve consentire l'accesso agli edifici, alle attrez­
zature, al personale e a tutti gli altri materiali opportuni 
necessari per una rapida ed efficace eradicazione della 
malattia. Esso deve precisare il fabbisogno di vaccino che ciascuno Stato membro ritiene necessario per l'eventua­
lità di una vaccinazione di emergenza. 
2. I criteri da seguire per la stesura del piano d'emer­
genza sono definiti dalla decisione della Commissione 
91/42/CEE(1) che si applica mutatis mutandis. 
Secondo la procedura di cui all'articolo 24, la Commis­
sione può modificare o completare tali criteri, tenendo 
conto della natura specifica della malattia di Newcastle. 
3. I piani redatti in conformità con i criteri di cui al 
paragrafo 2 vengono presentati alla Commissione non 
oltre 12 mesi dopo l'entrata in vigore del presente rego­
lamento. 
4. La Commissione esamina i piani allo scopo di de­
terminare se essi consentano di raggiungere l'obiettivo 
perseguito e suggeriscono allo Stato membro interessato 
eventuali emendamenti necessari in particolare a garan­
tirne la compatibilità con quelli degli altri Stati membri. 
La Commissione approva i piani, se necessario modifi­
cati, in conformità con la procedura di cui all'articolo 24. 
I piani possono successivamente essere modificati o inte­
grati, con la stessa procedura, in modo da tener conto 
dell'evolversi della situazione. 
Articolo 21 
Gli esperti veterinari della Commissione possono, in col­
laborazione con le autorità dello Stato membro interes­
sato e, se necessario, per garantire l'applicazione uni­
forme del presente regolamento, effettuare controlli in 
loco; la Commissione informa gli Stati membri sui risul­
tati dell'inchiesta. 
Lo Stato membro sul territorio del quale l'ispezione 
viene effettuata presta tutta l'assistenza necessaria affin­
ché gli espeni possano espletare le loro mansioni. 
Le disposizioni generali per l'attuazione del presente ar­
ticolo vengono determinate in conformità con la proce­
dura di cui all'articolo 24. 
Articolo 22 
Le modalità per la partecipazione finanziaria della Co­
munità alle azioni previste nel presente regolamento ven­
gono fissate nella decisione 90/424/CEE del Consiglio. 
Articolo 23 
Gli allegati al presente regolamento possono essere mo­
dificati dalla Commissione conformemente alla proce­
dura prevista all'articolo 24, soprattutto per tener conto 
dell'evoluzione dei metodi diagnostici. 
(») GU n. L33 del 29. 1. 1991, pag. 29. 
5.6.91 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee N.C 146/19 
Articolo 24 
1. La Commissione è assistita dal comitato veterinario 
permamente, in appresso denominato «il comitato». 
2. Ove si faccia ricorso alla procedura di cui al pre­
sente articolo, si applicano le seguenti disposizioni. 
Il rappresentante della Commissione sottopone al comi­
tato un progetto delle misure da adottare. Il comitato, 
entro un termine che il presidente può fissare in funzione 
dell'urgenza della questione in esame, formula il suo pa­
rere sul progetto, eventualmente procedendo a vota­
zione. Il parere è iscritto a verbale; inoltre, ciascuno Stato 
membro ha il diritto di chiedere che la sua posizione fi­
guri a verbale. 
La Commissione tiene in massima considerazione il pa­
rere formulato dal comitato. Essa lo informa del modo in 
cui ha tenuto conto del suo parere. 
Articolo 25 
Il presente regolamento entra in vigore il 1° luglio 1991. 
Il presente regolamento è obbligatorio un tutti i suoi 
elementi e direttamente applicabile in ciascuno Stato 
membro. 
ALLEGATO I 
METODI DIAGNOSTICI PER LA CONFERMA E LA DIAGNOSI DIFFERENZIALE DELLA MA­
LATTIA DI NEWCASTLE 
I metodi sotto descritti per isolare e individuare i virus di Newcastle devono essere considerati come orien­
tamenti e criteri minimi da applicare nella suddetta diagnosi. 
11 virus responsabile della malattia di Newcastle è il virus prototipo appartenente alla famiglia delle Para-
myxoviridae. Attualmente vi sono nove gruppi sierologicamente distinguibili di Paramixovirus aviare, che 
sono stati designati con le sigle PMV-1 fino a PMV-9. Tutti i virus della malattia di Newcastle sono stati 
assegnati al gruppo PMV-1. Ai fini delle procedure diagnostiche per la conferma e la diagnosi differenziale 
della malattia di Newcastle si applica la seguente definizione: 
Per malattia di Newcastle si intende un'infezione dei volatili causata da un ceppo aviare del Paramixovirus 
1 con un indice di patogenicità intracerebrale (ICPI) superiore a 0,7 nei pulcini di un giorno. 
CAPITOLO 1 
Campionatura e trattamento dei campioni 
1. Campioni 
Frammenti prelevati mediante tampone nell'intestino (o feci) e nella trachea di volatili malati; feci o 
contenuti dell'intestino, tessuti cerebrali, trachea, polmoni, fegato, milza e altri organi dell'animale ma­
lato, prelevati da volatili morti di recente. 
2. Trattamento dei campioni 
Gli organi e i frammenti di tessuto sopra elencati possono essere trattati insieme, salvo per quanto 
riguarda le feci, per le quali è essenziale un trattamento separato. I materiali prelevati devono essere 
immersi completamente in un quantitativo sufficiente di antibiotico. I campioni di feci e gli organi de­
vono essere omogeneizzati (in un miscelatore chiuso o in un mortaio con pestello e sabbia sterile) in un 
mezzo antibiotico e portati in sospensione in tale mezzo al 10-20 % p/v. Le sospensioni devono essere 
lasciate riposare per circa due ore a temperatura ambiente (o per un intervallo superiore a 4 °C) e 
successivamente chiarificati mediante centrifugazione (ad esempio da 800 a 1 000 x g per 10 minuti). 
N.C 146/20 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee 5. 6. 91 
3. Mezzo antibiotico 
Numerosi laboratori hanno utilizzato con successo mezzi antibiotici di varia composizione e i laboratori 
di cui all'allegato II potranno essere consultati in proposito nei rispettivi paesi. Per i campioni di feci 
occorre una elevata concentrazione di antibiotici; una miscela tipica è la seguente: 10 000 unità/mi di 
penicillina, 10 mg/mi di streptomicina, 0,25 mg/mi di gentamicina e 5 000 unità/mi di micostatina in 
una soluzione salina tampone di fosfato. Queste dosi possono essere ridotte fino a 5 volte per i tessuti e 
per i prelievi di trachea. Per l'accertamento della Clamidia, si possono aggiungere 50 mg/mi di ossitetra-
ciclina. Nella preparazione del mezzo antibiotico, occorre assolutamente controllare il pH dopo l'ag­
giunta degli antibiotici e portarlo al valore 7,0-7,4. 
CAPITOLO 2 
Isolamento del virus 
Isolamento del virus nelle uova embrionale di galline 
Inoculare 0,1-0,2 mi del liquido sopranatante chiarificato nella cavità allantoica di almeno 4 uova embrio­
nale di gallina previamente sottoposte a incubazione per 8-10 giorni. Idealmente si dovrebbero utilizzare 
uova provenienti da un branco indenne da organismi patogeni specifici, ma, in caso di impossibilità, si 
possono utilizzare uova provenienti da un branco nel quale sia comprovata l'assenza di anticorpi del virus 
di Newcastle. Le uova inoculate sono mantenute alla temperatura di 37° C ed esaminate ogni giorno in 
controluce. Le uova nelle quali si constata che l'embrione è morto o è morente, nonché tutte le uova 
restanti 6 giorni dopo l'inoculazione, vengono refrigerate a 4° C e il liquido allantoico-amniotico sottopo­
sto alla prova dell'attività emoagglutinante. Qualora non si constati emoagglutinazione, il procedimento 
sopra descritto deve essere ripetuto inoculando nelle uova liquido allantoico-amniotico non diluito. 
Quando viene constatata emoagglutinazione, la presenza di batteri deve essere esclusa mediante coltura. In 
caso di presenza di batteri, far passare i liquidi attraverso un filtro a membrana di 450 mn, quindi aggiun­
gere altri antibiotici e procedere nuovamente, come indicato sopra, alla inoculazione in uova embrionate. 
CAPITOLO 3 
Diagnosi differenziale 
1. Differenziazione preliminare 
Tutti i virus che provocano emoagglutinazione devono essere trasmessi al laboratorio nazionale per 
esservi sottoposti ad una gamma completa di prove di identificazione, caratterizzazione e patogenicità. 
Tuttavia, è importante ricorrere al più presto a misure provvisorie di contenimento della malattia di 
Newcastle, allo scopo di limitare la diffusione del virus, e occorre che i laboratori regionali ne identifi­
chino la presenza. Occore pertanto utilizzare i liquidi emoagglutinati eseguendo una prova di inibizione 
deiPemoagglutinazione come descritto ai capitoli 5 e 6. Una inibizione positiva, cioè pari a2'o più, con 
l'antisiero policlonale specifico del virus di Newcastle avente un titolo noto, pari almeno a 2', potrà 
servire per una identificazione preliminare sulla cui base istituire misure provvisorie di contenimento. 
2. Identificazione di conferma 
Il laboratorio nazionale procede ad una diagnosi differenziale completa di tutti gli agenù emoaggluti-
nanti. La conferma della presenza del virus di Newcastle è nuovamente fornita mediante prove di inibi­
zione dell'emoagglutinazione con antisieri monospecifici del poili. Vanno inoltre eseguite le prove de­
scritte al capitolo 7 sull'indice di patogenicità intracerebrale in tutti i casi positivi isolati. Indici di pato­
genicità superiori a 0,7 indicano la presenza del virus, con la conseguente applicazione integrale delle 
misure di contenimento. 
Recenti progressi nell'individuazione dei tipi di virus di Newcastle, soprattutto nelle tecniche concer­
nenti anticorpi monoclonali, hanno permesso il raggruppamento di ceppi e di isolati. In particolare, sono 
ora disponibili anticorpi monoclonali specifici per i ceppi vaccinici utilizzati nella Comunità europea, 
che possono essere utilizzati in prove di inibizione dell'emoagglutinazione di tipo semplice. 
Dal momento che ceppi di vaccino vivo possono essere isolati in campioni di pollame, è evidente il 
vantaggio di poter provvedere ad una loro rapida identificazione presso il laboratorio nazionale di cui 
all'allegato II. Questi anticorpi monoclonali potrebbero essere ricavati dal laboratorio di riferimento 
Gazzetta ufficiale delle Comunità europee N. C 146/21 
comunitario di cui all'articolo 14 e distribuito ai laboratori nazionali per la conferma dell'isolamento di 
virus vaccinici. 
I laboratori nazionali dovrebbero trasmettere al laboratorio comunitario di riferimento tutti gli agenti 
emoagglutinati. 
3. Altre prove di individuazione del tipo e delle caratteristiche degli isolati 
I laboratori nazionali dovrebbero trasmettere al laboratorio comunitario di riferimento tutti i virus 
emoagglutinati, da sottoporre ad ulteriori esami antigenici e genitici, ai fini di una maggiore compren­
sione dell'epidemiologia della malattia/delle malattie nella Comunità europea, conformemente ai com­
piti assegnati al laboratorio di riferimento. 
CAPITOLO 4 
Prove rapide per individuare i virus e gli anticorpi della malattia di Nescastle 
Prove rapide per individuare il virus della malattia di Newcastle in volatili vaccinati e anticorpi in volatili 
non vaccinati vengono descritte qui di seguito. 
1. Individuazione del virus della malattia di Newcastle 
Nella diagnosi di infezioni nei volatili non vaccinati sono state impiegate parecchie prove rapide che 
individuano direttamente gli antigeni della malattia di Newcastle. Quelli attualmente più usati sono le 
prove di fluorescenza degli anticorpi su sezioni longitudinali della trachea e le prove degli anticorpi 
della perossidasi nel cervello. Sembra indubbio che altre prove per Piridividuazione diretta degli antigeni 
possano essere applicate alle infezioni da virus di Newcastle. L'aspetto negativo di queste prove risiede 
nell'impossibilità pratica di esaminare tutti i punti potenziali di replicazione del virus di Newcastle nei 
volatili vaccinati. Ad esempio, il fatto che non si riscontri il virus nella trachea non ne esclude la replica­
zione nell'intestino. Non vi sono metodi diretti di individuazione «di routine» che possono essere racco­
mandati nella diagnosi della malattia di Newcastle; in circostanze specifiche, queste prove possono tut­
tavia essere utili. 
2. Individuazione di anticorpi in volatili non vaccinati 
La maggior parte dei laboratori che si occupano della diagnosi della malattia di Newcasde conosce 
perfettamente la prova di inibizione dell'emoagglutinazione; le raccomandazioni riportate in appresso 
riguardano appunto tale prova per la misurazione degli anticorpi del virus. Tuttavia per l'individuazione 
degli anticorpi del virus, si può ricorrere, con molte probabilità di riuscita, alla prova di immunoassorbi-
mento enzimatico (ELISA). Qualora si intenda usare questa tecnica a livello di laboratori regionali, si 
suggerisce che la prova in questione sia controllata dal laboratorio nazionale di cui all'allegato IL 
a) Campioni 
Prelevare campioni di sangue da tutti i volatili, se il branco è costituito da meno di 20 capi, e da 20 
esemplari in caso di branchi più numerosi (si ha, in tal modo, una probabilità superiore al 99 °/o di 
individuare almeno un caso sieropositivo se almeno il 25 % degli individui del branco è positivo, 
indipendentemente dalle dimensioni del branco stesso). Lasciar coagulare il sangue e asportare il 
siero da sottoporre alla prova. 
b) Ricerca degli anticorpi 
Verificare la capacità di singoli campioni di siero di inibire l'antigene emoagglutinante del virus 
di Newcastle mediante prove standard di inibizione dell'emoagglutinazione come obiettivo nel capi­
tolo 6. 
Un aspetto discusso è se nella prova di inibizione dell'emoagglutinante occorre usare 4 o 8 unità di 
emoagglutinina. Entrambe le ipotesi sembrano valide; la scelta deve essere quindi lasciata a discre­
zione dei laboratori nazionali. 
Tuttavia l'antigene usato incide sul livello al quale un siero è considerato positivo: usando 4 unità di 
emoagglutinina, un siero è considerato positivo se rivela un titolo uguale o superiore a 24; usando 8 
unità di emoagglutinina, un siero è considerato positivo se rivela un titolo uguale o superiore a 2\ 
N.C 146/22 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee 5.6.91 
CAPITOLO 5 
Prova di emoagglutinazione (HA) 
1. Reagenti 
a) Soluzione salina isotonica tamponata con fosfato (0,05 M) al pH 7,0-7,4. 
b) Prelevare globuli rossi da almeno 3 volatili esenti da organismi patogeni specifici (in caso di impossi­
bilità, il sangue può essere prelevato da volatili regolarmente sottoposti a controllo e che non presen­
tano anticorpi del virus di Newcastle), raggrupparli e aggiungerli ad un volume uguale di soluzione 
di Alsever. Prima dell'uso, i globuli rossi devono essere lavati 3 volte in soluzione salina tamponata 
con fosfato. Per l'esecuzione della prova si raccomanda una sospensione all'I % (globuli confezio­
nati v/v) in soluzione salina tamponata. 
e) Si raccomanda di usare, come antigene standard, il ceppo di virus di Newcastle Ulster 2C. 
2. Procedimento 
a) Porre 0,025 mi di soluzione in ciascuno dei pozzetti di una piastra di microtitolazione in materiale 
plastico (usare pozzetti a V). 
b) Versare 0,025 mi di sospensione del virus (ad esempio liquido allantoico) nel primo pozzetto. 
e) Usare un diluente da microtitolazione per raddoppiare la diluizione (da 1:2 a 1:40%) di virus nella 
piastra. 
d) Aggiungere altri 0,025 mi di soluzione salina in ogni pozzetto. 
e) Aggiungere 0,025 mi di globuli rossi all'I % in ogni pozzetto. 
f) Mescolare agitando leggermente e porre a riposo alla temperatura di 4 °C. 
g) La lettura viene effetuata 30-40 minuti dopo, una volta stabilizzati i controlli. La lettura si effettua 
inclinando la piastra ed osservando la presenza o l'assenza di globuli rossi raggruppati a forma di 
goccia. Il flusso nei pozzetti che non presentano emoagglutinazione deve essere identico a quello 
constatato presso i globuli rossi di controllo esenti dal virus. 
h) Il testo di emoagglutinazione è costituito dalla diluizione più elevata che provoca agglutinazione dei 
globuli rossi. Tale diluizione può essere considerata come contenente una unità emoagglutinante 
(HAU). Un metodo più accurato per la determinazione del titolo di emoagglutinazione consiste 
nell'effettuare prove di agglutinazione sul virus in una serie di diluizioni iniziali progressive, ad esem­
pio 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, ecc. Si raccomanda questa procedura per una preparazione accurata dell'anti­
gene per le prove di inibizione dell'emoagglutinazione (capitolo 6). 
CAPITOLO 6 
Prova dì inibizione dell'emoagglutinazione 
1. Reagenti (vedi capitolo 5) 
a) Soluzione salina tamponata con fosfato. 
b) Liquido allantoico contenente il virus, diluito nella soluzione salina in modo da avere un contenuto 
di 4 o 8 unità di emoagglutinazione per 0,025 mi. 
e) Globuli rossi di pollame: 1 % 
d) Siero di pollame negativo, di controllo 
e) Siero positivo di controllo. 
5. 6. 91 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee N.C 146/23 
2. Procedimento 
a) Versare 0,025 mi di soluzione salina tamponata con fosfato in tutti i pozzetti di una piastra di micro­
titolazione in materiale plastico (i pozzetti devono avere una forma a V). 
b) Versare 0,025 mi di siero nel primo pozzo della piastra. 
e) Usare un diluente da microtitolazione per ottenere una diluizione di 1:2 di siero sulla piastra. 
d) Aggiungere 0,025 mi di liquido allantoico diluito contenente 4 o 8 unità di emoagglutinazione. 
e) Mescolare picchiettando e conservare alla temperatura di 4 ° C per almeno 60 minuti o a temperatura 
ambiente per almeno 30 minuti. 
f) Aggiungere 0,025 mi di globuli rossi all'I % in tutti i pozzetti. 
g) Mescolare picchiettando leggermente e porre a riposo alla temperatura di 4 °C. 
h) La lettura delle piastre è effettuata dopo 30-40 minuti, dopo che i globuli rossi di controllo si sono 
stabilizzati. La lettura viene effettuata inclinando la piastra e osservando se nel flusso del liquido vi è 
o meno formazione di gocce in misura uguale a quelle dei pozzetti di controllo che contengono 
unicamente globulli rossi (0,025 mi) e soluzione salina (0,05 mi). 
i) Il titolo di inibizione dell'emoagglutinazione è costituito dalla diluizione massima di antisiero che 
comporta una inibizione totale di 4 o 8 unità di virus (ciascuna prova dovrebbe comprendere una 
titolazione di emoagglutinazione a scopo di conferma della presenza delle unità di agglutinazione 
richieste). 
j) I risultati sono validi se si ottiene un titolo inferiore a 2J per 4 unità di agglutinazione o 22 per 8 
unità di agglutinazione con il siero negativo di controllo ed un titolo inferiore o uguale a 1 con una 
diluizione del siero di controllo positivo del titolo noto. 
CAPITOLO 7 
Prova dell'indice di patogenicità intracerebrale 
1. Diluire in proporzione di 1:10, in una soluzione isotonica salina sterile, una aliquota di liquido allan­
toico infetto appena prelevato (il titolo di emoagglutinazione deve essere superiore a 2* (non usare anti­
biotici). 
2. Iniettare nel cervello di 10 pulcini di un giorno (cioè aventi un'età compresa fra 24 e 40 ore alla schiusa) 
0,05 mi di virus diluito. I pulcini devono essere ottenuti da uova provenienti da un branco esente da 
organismi patogeni specifici. 
3. Esaminare i pulcini per 8 giorni, ad intervalli di 24 ore. 
4. Classificare ognuno dei pulcini ad ogni osservazione nel modo seguente: 0 =* normale; 1 = malato; 
2 = morto. 
5. L'indice è calcolato come nell'esempio che segue: 
Sintomi clinici 
Normale 
Malato 
Morto Giorni successivi all'inoculazione 
(Numero di pulcini) 
1 
10 
0 
0 2 
4 
6 
0 3 
0 
10 
0 4 
0 
4 
6 5 
0 
0 
10 6 
0 
0 
10 7 
0 
0 
10 8 
0 
0 
10 locale 
14 @ 0 
20 @ 1 
46 @ 2 
TOTALE Punteggio 
= 0 
= 20 
« 92 
= 112 
L'indice è costituito dal punteggio medio per pulcino per ogni osservazione, ossia 112/80 = 1,4. 
N. C 146/24 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee 5.6.91 
CAPITOLO 8 
Valutazione della capacità di formazione di placca 
1. Il procedimento migliore consiste nell'utilizzare tutta una gamma di diluizoni di virus per essere certi di 
disporre sulla piastra dei numeri ottimali di placche. Dieci diluizioni fino a IO-7 in soluzione salina 
fosfatata dovrebbero essere sufficienti. 
2. Monostrati confluenti di cellule di embrione di volatile o una linea cellulare adeguate (ad esempio rene 
bovino Madin-Darby) sono preparati e disposti in scatole di Petri aventi 5 cm di diametro. 
3. Aggiungere in due scatole di Petri 0,2 mi di ciascuna delle diluizioni di virus e lasciar assorbire il virus 
per 30 minuti. 
4. Lavare 3 volte con la soluzione salina le cellule infette, indi ricoprirle di mezzo pertinente, contenente 
l'I % p/v di agar e 0,01 mg/mi di tripsina, oppure non contenente tripsina; è importante non aggiun­
gere siero al mezzo di copertura. 
5. Dopo una incubazione a 37 °C per 72 ore, le placche dovrebbero avere una dimensione sufficiente. Per 
una migliore osservazione delle placche, asportare lo strato di agar di copertura e colorare il monostrato 
cellulare con cristalvioletto (0,5 % p/v) in metanolo al 25 % v/v. 
6. Tutti i virus dovrebbero fornire placche evidenti, se incubati alla presenza di tripsina nello stato di 
copertura. Se nel mezzo di copertura non vi è tripsina, soltanto i virus virulenti per i volatili producono 
placche. 
ALLEGATO II 
ELENCO DEI LABORATORI NAZIONALI DESIGNATI PER LA MALATTIA DI NEWCASTLE 
BELGIO Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, 
B-1180 Bruxelles 
DANIMARCA National Veterinary Laboratory, Poultry Disease Division, 
Hangevej 2, DK-8200 Àrhus N 
GERMANIA Institut fiir Kleintierzucht der Bundesforschungsanstalt fiir 
Landwirtschaft, Braunschweig-Vòlkenrode, Postfach 2 80, 
D-W-3100 Celle 
FRANCIA Centre national d'études vétérinaires et alimentation — Labora-
toire centrai de recherches agricoles et porcine, boìte postale 53, 
F-22440 Ploufragan 
GRECIA Institut de maladies infectieuses et parasitaires d'Athènes, 25 rue 
Napoleos, 153 10, Agia Paraskevi, Attiki 
IRLANDA Veterinary Research Laboratory, Abbotstown, Castleknock, 
IRL-Dublin 15 
ITALIA Istituto zooprofilattico sperimentale di Padova, via G. Orus n. 2, 
1-35100 Padova 
LUSSEMBURGO Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, 
B-1180 Bruxelles 
PAESI BASSI Centraal Diergeneeskundig Instituut, Vestiging Virologie, 
Hourtibweg 39, NL-8221 RA Lelystad 
5.6.91 Gazzetta ufficiale delle Comunità europee N. C 146/25 
PORTOGALLO Laboratòrio Nacional de Investigalo Veterinària (LNIV), 
Estrada de Benfica, 701, P-1500 Lisboa 
SPAGNA Laboratorio de Sanidad y Producción Animai, Zona Franca, 
Circunvalación — Tramo 6, Esquina Calle 3, E-08004 Barce­
lona 
REGNO UNITO Central Veterinary Laboratory, New Haw, Weybridge, UK-
Surrey KT 15 3 NB 
ALLEGATO III 
LABORATORIO COMUNITARIO DI RIFERIMENTO PER LA MALATTIA DI NEWCASTLE 
Central Veterinary Laboratory 
New Haw 
Weybridge 
UK-Surrey KT15 3 NB