1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 1
Trattandosidiunsemplice strumentodidocumentazione,essononimpegnalaresponsabilitàdelleistituzioni
►B DECISIONEDELLACOMMISSIONE
del15luglio1994
che stabilisce le norme sanitarie e di certificazione veterinaria per l'importazione di sperma
bovinodapaesiterzi
(94/577/CE)
(GU L 221 del 26.8.1994, pag. 26)
Modificata da:
Gazzetta ufficiale
n. pag. data
►M1Decisione 1999/495/CE dellaCommissione del 1oluglio 1999 L 192 56 24.7.1999
►M2Decisione 2004/52/CE dellaCommissione del 9 genna io 2004 L 10 67 16.1.2004
▼B
DECISIONEDELLACOMMISSIONE
del15luglio1994
che stabilisce le norme sanitarie e di certificazione veterinaria per
l'importazione dispermabovinodapaesiterzi
(94/577/CE)
LA COMMISSIONE DELLE COMUNITÀ EUROPEE,
visto il trattato che istituisce la Comunità europea,
vistaladirettiva88/407/CEE del Consiglio, del 14 giugno 1988, che
stabilisce le esigenze di polizia sanitaria applicabili agli scambi intraco-
munitari ed alle importazioni di sperma di animali della specie
bovina(1), modificata da ultimo dalla direttiva 93/60/CEE (2), in parti-
colare gli articoli 10 e 11,
considerando che l'elenco dei paesi terzi da cui gli Stati membri auto-
rizzano l'importazione di sperma surgelato di animali della specie
bovina, in prosieguo denominato «l'elenco», è definito dalla decisione90/14/CEE dellaCommissione (
3), modificata dalla decisione 91/276/
CEE (4);
considerando che la situazione sanitaria in Israele ha condotto a vietare
le importazioni da quel paese con decisione 91/277/CEE dellaCommissione (
5);
considerando che le decisioni 91/479/CEE (6), 91/549/CEE (7), 92/123/
CEE (8), 92/124/CEE (9), 92/125/CEE (10), 92/126/CEE (11), 92/127/
CEE (12), 92/128/CEE (13), 92/386/CEE (14), 92/387/CEE (15)e 92/445/
CEE (16) della Commissione fissano le norme sanitarie e di certifica-
zione veterinaria per l'importazione di sperma bovino rispettivamentedagli Stati Uniti d'America, dal Canada, dalla Polonia, dalla Finlandia,
dalla Nuova Zelanda, dall'Austria, dalla Svizzera, dalla Svezia, dall'Un-
gheria, dalla Norvegia e dalla Cecoslovacchia;
considerando che la direttiva 93/60/CEE del Consiglio, che deve essere
attuata negli Stati membri prima del 1
oluglio 1994, modificaladirettiva
88/407/CEE e impone pertanto la necessità di modificare le predette
decisioni concernenti i paesi terzi; che per semplificare la legislazionecomunitaria in materia ed eliminare ambiguità è necessario unificare lepredette decisioni ed abrogare quelle relative ad ogni singolo paese;
considerando che, attese le disposizioni dell'accordo sullo Spazio
economico europeo, non è più necessario prevdere certificati di poliziasanitaria per le importazioni di sperma bovino in provenienza daAustria, Finlandia, Norvegia e Svezia;
considerando che, secondo il parere del comitato scientifico veterinario,
è richiesto un test supplementare per la malattia emorragica epizootica;
considerando che, limitatamente al Canada, vengono effettuati test di
routine preraccolta per questa malattia con periodicità semestrale; che
è pertanto necessario prevedere un periodo transitorio per l'applicazionedella presente decisione nei confronti del Canada, onde accordare alle1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 2
(1) GU n. L 194 del 22. 7. 1988, pag. 10.
(2) GU n. L 186 del 28. 7. 1993, pag. 28.
(3) GU n. L 8 dell'11. 1. 1990, pag. 71.
(4) GU n. L 135 del 30. 5. 1991, pag. 58.
(5) GU n. L 135 del 30. 5. 1991, pag. 60.
(6) GU n. L 258 del 16. 9. 1991, pag. 1.
(7) GU n. L 298 del 29. 10. 1991, pag. 6.
(8) GU n. L 48 del 22. 2. 1992, pag. 1.
(9) GU n. L 48 del 22. 2. 1992, pag. 10.
(10) GU n. L 48 del 22. 2. 1992, pag. 19.
(11) GU n. L 48 del 22. 2. 1992, pag. 28.
(12) GU n. L 48 del 22. 2. 1992, pag. 37.
(13) GU n. L 48 del 22. 2. 1992, pag. 46.
(14) GU n. L 204 del 21. 7. 1992, pag. 13.
(15) GU n. L 204 del 21. 7. 1992, pag. 22.
(16) GU n. L 247 del 27. 8. 1992, pag. 1.
▼B
autorità canadesi un lasso di tempo sufficiente per introdurre il nuovo
test nel loro programma di routine;
considerando che inoltre, sulla scorta dei recenti progressi epidemiolo-
gici della febbre catarrale, può essere ora autorizzata l'importazione di
sperma bovino dall'Australia;
considerando che la situazione sanitaria degli animali nei paesi terzi
indicati nell'elenco risulta essere buona e controllata da servizi veteri-nari ben strutturati ed organizzati per quanto riguarda le malattietrasmissibili attraverso lo sperma;
considerando che le competenti autorità veterinarie dei paesi terzi di
cui all'elenco si sono impegnate a comunicare alla Commissione e
agli Stati membri, per telex o telefax entro le 24 ore successive, la
conferma della comparsa di una delle malattie indicate nell'elenco Adell'Ufficio internazionale delle epizoozie (UIE) ovvero qualsiasi modi-fica dei programmi di vaccinazione relativi alle suddette malattieoppure, in tempo opportuno, la comparsa di malattie elencate nell'e-
lenco B dall'UIE nonché le eventuali proposte di modifica delle
norme in materia di importazione di animali domestici o di loro spermao embrioni;
considerando che le competenti autorità veterinarie dei paesi terzi indi-
cati si sono impegnate a controllare ufficialmente il rilascio deicertificati previsti dalla presente decisione e a garantire che tutti i perti-nenti certificati, le deroghe ed i risultati di laboratorio sui quali è basata
la certificazione siano conservati su un registro ufficiale almeno per i
12 mesi successivi alla spedizione dello sperma cui si riferiscono;
considerando che le competenti autorità veterinarie dei paesi terzi indi-
cati nell'elenco si sono impegnate a riconoscere ufficialmente i centri diraccolta di sperma bovino destinato all'esportazione nella Comunità eu-ropea come previsto all'articolo 9 della direttiva 88/407/CEE;
considerando che le norme sanitarie e di certificazione veterinaria
devono essere adeguate alla situazione sanitaria degli animali nel paese
terzo in questione;
considerando che le misure previste dalla presente decisione sono
conformi al parere del comitato permanente veterinario,
HA ADOTTATO LA PRESENTE DECISIONE:
Articolo 1
Gli Stati membri autorizzano le importazioni di sperma bovino solo se
accompagnate da certificati conformi ai modelli di cui alla parte 1degli allegati A, B, C e D e solo se provenienti dai paesi terzi indicatirispettivamente nella parte 2 degli allegati A, B, C e D.
Tuttavia, essi autorizzano fino al 31 dicembre 1994 l'importazione in
provenienza dal Canada di sperma bovino raccolto e trattato conforme-
mente alla decisione 91/549/CEE.
Articolo 2
Le decisioni 91/479/CEE, 92/123/CEE, 92/124/CEE, 92/125/CEE, 92/
126/CEE, 92/127/CEE, 92/128/CEE, 92/386/CEE, 92/387/CEE e 92/445/CEE sono abrogate. La decisione 91/549/CEE è abrogata dal 1
o
gennaio 1995.
Articolo 3
Le disposizioni dell'articolo 1, primo comma riguardanti il Canada si
applicano a decorrere dal 1ogennaio 1995.
Articolo 4
Gli Stati membri sono destinatari della presente decisione.1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 3
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ALLEGATO A
PARTE 1
CERTIFICATODIPOLIZIASANITARIA
perl'importazione dispermabovino
1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 4
▼B
1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 5
▼B
►(1) (2)M11994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 6
▼M2
PARTE 2
Elenco dei paesi autorizzati ad utilizzare il modello di certificato di polizia
sanitariadicuiallaparteIdell'allegato A
Codice ISO Stato Nota
CH Svizzera
NZ NuovaZela nda
RO RomaniaCY Cipro (*)
CZ Repubblicaceca (*)
EE Estonia(*)
HU Ungheria(*)
LT Lituania (*)
LV Lettonia(*)
MT Malta (*)
PL Polonia(*)
SI Slovenia(*)
SK Slovacchia (*)
(*) Applicabile soltanto fino a quando questo Stato in via di adesione non diventerà Stato
membro dellaComunità.1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 7
▼B
ALLEGATO B
PARTE 1
CERTIFICATODIPOLIZIASANITARIA
perl'importazione dispermabovinoprovenientedagliStatiUnitid'America
1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 8
▼B
1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 9
▼B
►(1) (2)M11994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 10
▼B
PARTE 2
Elenco dipaesiautorizzati adusareilmodellodicertificato dipoliziasani-
tariadicuiall'allegato B,parte1
STATI UNITI D'AMERICA1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 11
▼B
ALLEGATO C
PARTE 1
CERTIFICATODIPOLIZIASANITARIA
perl'importazione dispermabovino
1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 12
▼B
1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 13
▼B
►(1) (2)M11994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 14
▼B
PARTE 2
Elenco dipaesiautorizzati adusareilmodellodicertificato dipoliziasani-
tariadicuiall'allegato C,parte1
CANADA: esclusa la regione Okanagan Valley della Columbia Britannica,
regione deliminatata da una linea tracciata da un punto sulla fron-tiera tra Canada e Stati Uniti longitudine 120º 15 ′latitudine 49º
verso nord ad un punto longitudine 119º 35 ′latitudine 50º 30 ′verso
nordest ad un punto longitudine 119º latitudine 50º 45 ′verso sud ad
un punto sulla frontiera tra Canada e Stati Uniti longitudine 118º
15′latitudine 49º.1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 15
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ALLEGATO D
PARTE 1
CERTIFICATODIPOLIZIASANITARIA
perl'importazione dispermabovino
1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 16
▼B
1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 17
▼B
►(1) (2)M11994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 18
▼B
PARTE 2
Elenco dipaesiautorizzati adusareilmodellodicertificato dipoliziasani-
tariadicuiall'allegato D,parte1
AUSTRALIA1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 19
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ALLEGATO E
Protocollo relativo a un saggio di immunoassorbimento enzimatico bloc-
cante o competitivo eseguito con un anticorpo monoclonale specifico del
gruppo per la ricerca degli anticorpi del virus della febbre catarrale
maligna
SAGGIO COMPETITIVO ELISA PER LA FEBBRE CATARRALE
MALIGNAMEDIANTEANTICORPOMONOCLONALE3-17-A3
Il saggio è atto a individuare anticorpi di tutti i sierotipi noti del virus della
febbre catarrale maligna (BTV).
Il principio su cui si basa detto saggio è l'interruzione della reazione tra l'anti-
gene BTV e un anticorpo monoclonale specifico del gruppo (3-17-A3) mediante
aggiunta di diluizioni del siero in esame. Gli anticorpi del BTV presenti nel
siero in esame bloccano la reattività dell'anticorpo monoclonale (Mab) e deter-
minano una riduzione dello sviluppo di colore previsto dietro aggiunta di un
substrato enzimatico.
MATERIALE E REATTIVI
1. Piastre per microtitolazioni a fondo piatto.
2. Antigene: preparato come descritto qui di seguito.
3. Tampone di arresto: latte essiccato in polvere «Marvel» al 5 % (p/v), Tween-
20 (fornito come sciroppo al poliossietilen-sorbitan-monolaurato) in solu-
zione salina tamponata al fosfato.
4. Anticorpo monoclonale: 3-17-A3 (fornito come supernatante di coltura tissu-
lare di ibridoma) conservato a − 20 ºC o surgelato, diluito a 1/50 con
tampone bloccante prima dell'uso, diretto contro il polipeptide p7 specifico
del gruppo.
5. Coniugato: globulina di coniglio anti-topo (absorbita ed eluita), coniugata
con perossidasi del rafano e tenuta al buio a 4 ºC.
6. Substrato e cromogeno: 0,2 g di ortofenilendiamina (OPD) sciolta in un
tampone costituito da 2,553 g di acido critico e 4,574 g di idrogenortofosfato
disodico (fosfato monoacido di sodio) portati a un volume di 500 ml con
acqua distillata, divisi in aliquote di 25 ml e tenuti al buio a − 20 ºC con
12µl/25 ml di acqua ossigenata (30 % p/v) aggiunta immediatamente prima
dell'uso.
TRATTARE L'OPD CON CAUTELA — INDOSSARE GUANTI DI
GOMMA — SOSPETTO MUTAGENO
7. Acido solforico 1 molare: 26,6 ml di acido aggiunti a 473,4 ml di acqua
distillata.
RICORDARSI DI AGGIUNGERE SEMPRE L'ACIDO ALL'ACQUA, MAI
L'ACQUA ALL'ACIDO
8. Agitatore orbitale.9. Lettore di piastra Elisa (la prova può essere letta visivamente).1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 20
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1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 21
▼B
PROTOCOLLO DI RIFERIMENTO
Controllo in bianco
La serie 1A - H è un termine di controllo in bianco consistente in antigene BTV
e coniugato. Essa può essere usata come bianco per il lettore Elisa.
Controllo MabLa serie 2A - H è un termine di controllo dell'anticorpo monoclonale ed è costi-
tuito da antigene BTV, anticorpo monoclonale e coniugato. Esso rappresenta un
termine di controllo negativo. La media delle letture di densità ottica da questa
serie di controllo rappresenta un valore di inibizione pari allo 0 %.
Controllo positivoLaserie 3A - H è un controllo positivo. Essaconsiste in a ntigene BTV, dilui-
zione di antisiero positivo BTV, Mab e coniugato. Essa sta ad indicare che la
prova funziona adeguatamente e che livelli analoghi di inibizione dovrebbero
essere ottenuti daprovaaprova .
Sieri di riferimentoNello schema sperimentale di cui sopra 18 sieri possono essere analizzati ad un
tasso di diluizione di 1/2, 1/4, 1/8 e 1/16. Ciò fornirà qualche indicazione sul
titolo dell'anticorpo nel siero di riferimento. La gamma di diluizione potrebbe
essere ulteriormente estesaper ottenere titoli fina li delladiluizione del siero.
Alternativamente, per esami sierologici su vasta scala i sieri potrebbero essere
analizzati a una singola diluizione (1/4) o a due diluizioni (1/2 e 1/4) come
unara pidaprovadi selezione.
PROCEDIMENTO
1. Diluire l'antigene BTV a una concentrazione pretitolata in PBS, sottoporre
brevemente agli ultrasuoni per disperdere il virus aggregato (se gli ultrasuoni
non sono disponibili, pipettare vigorosamente) e aggiungere 50 µl in tutti i
pozzetti della piastra Elisa. Picchiettare i bordi della piastra per disperdere
l'antigene.
2. Incubare a 37 ºC per 60 minuti su un agitatore orbitale. Lavare le piastre tre
volte, immergendole e vuotando i pozzetti con PBS non sterile e asciugare su
carta assorbente.
3. Aggiungere 50 µl di tampone bloccante per pozzetto. Aggiungere i sieri di
riferimento ed il siero positivo negli opportuni pozzetti e diluire attraverso
la piastra usando una pipetta a più canali. Non aggiungere i sieri al controllo
in bianco o al controllo del Mab.
4. Immediatamente dopo l'aggiunta dei sieri di riferimento, diluire il Mab in
tampone bloccante (alla diluizione pretitolata) ed aggiungere 50 µl atutti i
pozzetti della piastra, eccettuato il controllo in bianco.
5. Incubare a 37 ºC per 60 minuti su un agitatore orbitale. Lavare tre volte con
PBS e asciugare.
6. Diluire il concentrato di coniglio anti-topo a 1/5 000in tampone bloccante ed
aggiungere 50 µl a tutti i pozzetti della piastra.
7. Incubare a 37 ºC per 60 minuti su agitatore orbitale. Lavare tre volte con
PBS e asciugare.
8. Sgelare l'OPD e immediatamente prima dell'uso aggiungere 12 µl di acqua
ossigenata al 30 % a ogni porzione di 25 ml di OPD. Aggiungere 50 µla
tutti i pozzetti della piastra. Lasciar sviluppare il colore per circa 10 minuti
e interrompere la reazione con acido solforico 1 M (50 µl per pozzetto). Il
colore dovrebbe svilupparsi nei pozzetti di controllo del Mab ed in quei
pozzetti che contengono siero nel quale NON vi sono anticorpi del BTV.
9. Esaminare e registrare le piastre visivamente oppure facendo uso di un lettore
spettrofotometrico.
ANALISI DEI RISULTATI
Calcolare la lettura media OD dai termini di riferimento Mab. Essa rappresenta
un valore di inibizione dello 0 %. Le letture di densità ottica (OD) dei sieri di
riferimento vengono espresse come valori di inibizione percentuali usando la
seguente formula:
Valore di inibizione percentuale ¼100/C0
OD in presenzadi siero di riferimento
OD in assenza di siero di riferimento/C2100
Valori di inibizione superiori al 40 % a una diluizione di siero di 1/4 vengono
considerati positivi. La lettura visiva è possibile, dato che una inibizione del
40 % è il valore più basso facilmente apprezzabile dall'occhio.1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 22
▼B
PREPARAZIONEDELL'ANTIGENEELISABTV
1. Lavare 10 unità di cellule confluenti BHK-21 tre volte con mezzo di Eagle
esente da siero ed infettare con sierotipo 1 del virus della febbre catarrale
maligna in mezzo di Eagle esente da siero.
2. Incubare a 37 ºC ed esaminare quotidianamente l'effetto citopatico (cpe).
3. Quando il cpe è evidente nell'80-90 % dello strato di cellule di ciascuna
unità, raccogliere il virus scuotendo dal recipiente eventuali cellule ancora
attaccate.
4. Centrifugare a 2 000-3 000 giri al minuto per agglomerare le cellule.5. Allontanare il supernatante e risospendere le cellule in circa 30 ml di PBS
contenente l'1 % di «Sarkosyl» e 2 ml di fenilmetilsolfonilfluoruro
(tampone di lisi). Ciò può far sì che le cellule formino un gel ed è possibile
aggiungere più tampone di lisi per ridurre questo effetto.
NOTA.Il fenilmetilsolfonilfluoruro è pericoloso: trattare con estrema
cautela.
6. Frantumare le cellule per 60 secondi usando una sonda ultrasonica ad una
ampiezza di 30 micron.
7. Centrifugare a 10 000 giri al minuto per 10 minuti.8. Conservare il supernatante a + 4 ºC e risospendere l'agglomerato di cellule
in 10-20 ml di tampone di lisi.
9. Sottoporre ad ultrasuoni e chiarificare, conservando il supernatante ogni
volta, per un totale di tre volte.
10. Raccogliere i supernatanti e centrifugare a 24 000 giri al minuto per 120
minuti a + 4 ºC sopra uno strato costituito da 5 ml di saccarosio al 40 %
(p/v in PBS) usando provette da centrifuga Beckmann da 30 ml ed un rotore
SW 28.
11. Eliminare il supernatante, asciugare accuratamente le provette e risospen-
dere l'agglomerato in PBS mediante ultrasuoni. Conservare l'antigene in
varie porzioni a − 70 ºC.
TITOLAZIONEDELL'ANTIGENEELISABTV
L'antigene Elisa per la febbre catarrale maligna viene titolato mediante Elisa
indiretto. Diluizioni doppie di antigene vengono titolate rispetto a una diluizione
costante (1/50) di anticorpo monoclonale 3-17-A3. Il protocollo è il seguente:
PROCEDIMENTO
1. Diluire l'antigene BTV in PBS attraverso una piastra di microtitolazione in
unaserie di diluizioni doppie (50 µl/pozzetto) usando una pipetta a molti
canali.
2. Incubare per un'ora a 37 ºC su un agitatore orbitale.3. Lavare le piastre tre volte con PBS.4. Aggiungere 50 µl di anticorpo monoclonale 3-17-A3 (diluito a 1/50) in
ciascun pozzetto della piastra di microtitolazione.
5. Incubare per un'ora a 37 ºC su agitatore orbitale.6. Lavare tre volte le piastre con PBS.
7. Aggiungere 50 µl di globulina di coniglio anti-topo coniugata con perossidasi
di rafano, diluita a una concentrazione ottimale pretitolata, in ciascun
pozzetto della piastra di microtitolazione.
8. Incubare per un'ora a 37 ºC su agitatore orbitale.9. Aggiungere substrato e cromogeno come descritto in precedenza. Arrestare la
reazione dopo 10 minuti aggiungendo acido solforico 1 Molare (50 µl/
pozzetto).
Nella prova competitiva l'anticorpo monoclonale deve essere in eccesso, per cui
viene scelta una diluizione di antigene tale da ricadere sulla curva di titolazione
(non sulla zona piatta) e da dare approssimativamente un valore di 0,8 OD dopo
10 minuti.1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 23
▼B
Protocollo per una reazione di immunodiffusione su gel di agar per la
ricerca deglianticorpidellamalattiaemorragica epizootica
La reazione di immunodiffusione su gel di agar viene effettuata secondo il
seguente protocollo:
MATERIALI E REATTIVI
1. Antigene
L'antigene precipitante viene preparato in qualsiasi sistema di coltura cellu-
lare che favorisce la rapida moltiplicazione del (dei) sierotipo(i)
opportuno(i) del virus della malattia emorragica epizootica. Si raccomandano
le cellule BHK oppure Vero. L'antigene è presente nel liquido supernatante
alla fine della crescita virale, ma richiede una concentrazione da 50 a 100
volte per poter agire. Ciò può essere ottenuto mediante qualsiasi procedura
standard di concentrazione delle proteine; il virus dell'antigene può essere
inattivato mediante aggiunta di beta-propiolattone allo 0,3 % (v/v).
2. Siero di controllo positivo noto
Facendo uso del siero di riferimento internazionale e dell'antigene viene pro-
dotto un nuovo siero di riferimento nazionale. Questo viene standardizzato
per trovare la proporzione ottimale rispetto al siero di riferimento internazio-
nale, viene liofilizzato e usato in ciascuna prova come siero di riferimento
noto.
3. Siero in esame.
PROCEDIMENTO
1. Versare agarosio all'1 %, preparato in tampone borato o sodio barbital, pH
8,5-9,0, in unasca toladi Petri aunaprofondità minimadi 3 mm.
2. Ricavare nell'agar 7 pozzetti esenti da umidità, ciascuno avente 5,0 mm di
diametro. Di questi pozzetti uno deve trovarsi in centro e sei altri devono
essere sistemati attorno ad esso in un cerchio avente un raggio di 3 mm.
3. Riempire il pozzetto centrale di antigene standard. Riempire i pozzetti perife-
rici 2, 4 e 6 con siero positivo noto ed i pozzetti 1, 3 e 5 col siero in esame.
4. Incubare il sistema fino a 72 ore a temperatura ambiente in atmosfera confi-
nata ed umida.
INTERPRETAZIONE
Il siero in esame è positivo se forma una linea specifica di precipitine con l'anti-
gene e unalineacompletadi identità col siero di riferimento. Un siero in esa me
è negativo se non forma una linea specifica con l'antigene e se non provoca
l'incurva mento dellalineadel siero di riferimento. Le sca tole di Petri devono
essere esaminate su sfondo scuro e usando illuminazione indiretta.1994D0577 — IT — 19.01.2004 — 002.001 — 24