1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 1
Trattandosidiunsemplice strumentodidocumentazione,essononimpegnalaresponsabilitàdelleistituzioni
►B REGOLAMENTO(CEE)N.2676/90DELLACOMMISSIONE
del17settembre1990
chedetermina imetodid'analisicomunitaridautilizzare nelsettore delvino
(GU L 272 del 3.10.1990, pag. 1)
Modificato da:
Gazzetta ufficiale
n. pag. data
►M1Regolamento (CEE) n. 2645/92 della Commissione dell'11 settembre
1992L 266 10 12.9.1992
►M2Regolamento (CE) n. 60/95 della Commissione del 16 gennaio 1995 L 11 19 17.1.1995
►M3Regolamento (CE) n. 69/96 della Commissione del 18 gennaio 1996 L 14 13 19.1.1996
►M4Regolamento (CE) n. 822/97 della Commissione del 6 maggio 1997 L 117 10 7.5.1997
►M5Regolamento (CEE) n. 2348/91 della Commissione del 29 luglio 1991 L 214 39 2.8.1991
►M6modificato dal regolamento (CE) n. 1932/97 della Commissione del 3
ottobre 1997L 272 10 4.10.1997
►M7Regolamento (CE) n. 761/1999 della Commissione del 12 aprile 1999 L 99 4 14.4.1999
Rettificato da:
►C1Rettifica, GU L 311 del 28.10.1992, pag. 40 (2676/90)
▼B
REGOLAMENTO(CEE)N.2676/90DELLACOMMISSIONE
del17settembre1990
che determina i metodi d'analisi comunitari da utilizzare nel
settoredelvino
LA COMMISSIONE DELLE COMUNITÀ EUROPEE,
visto il trattato che istituisce la Comunità economica europea,
visto il regolamento (CEE) n. 822/87 del Consiglio, del 16 marzo 1987,
relativo all'organizzazione del mercato vitivinicolo (1), modificato dal
regolamento (CEE) n. 1325/90 (2), in particolare l'articolo 74,
considerando che l'articolo 74, paragrafo 1 del regolamento (CEE) n.
822/87 prescrive l'adozione dei metodi di analisi che consentono di
determinare la composizione dei prodotti di cui all'articolo 1 del rego-lamento in causa e definisce le norme che consentono di stabilire sequesti prodotti hanno subito dei trattamenti in violazione delle praticheenologiche autorizzate;
considerando che, non avendo la Comunità fissato ancora i limiti quan-
titativi della presenza degli elementi che caratterizzano il ricorso acerte pratiche enologiche e le tabelle che consentono il confronto deidati analitici, è opportuno autorizzare gli Stati membri a determinaretali limiti;
considerando che l'articolo 13, paragrafo 1 del regolamento (CEE) n.
822/87 prevede un esame analitico riguardante come minimo i valoridegli elementi caratteristici del v.q.p.r.d. in questione che figurano traquelli enumerati nell'allegato del regolamento stesso;
considerando che il controllo delle indicazioni figuranti nei documenti
relativi ai prodotti in oggetto rende necessaria l'adozione di metodid'analisi uniformi che permettano di ottenere dati precisi e comparabili;che tali metodi devono pertanto essere obbligatori per ogni transazionecommerciale ed ogni operazione di controllo; che, date le esigenze dicontrollo e le limitate possibilità del commercio, è tuttavia opportuno
ammettere un numero limitato di procedimenti usuali che consentano
una determinazione rapida e sufficientemente sicura degli elementiricercati;
considerando che è opportuno adottare, per quanto possibile, metodi
che sono unanimemente riconosciuti, ad esempio i metodi sviluppati
nell'ambito della Convenzione internazionale per l'unificazione dei
metodi d'analisi e di apprezzamento dei vini del 1954 pubblicatidall'Ufficio internazionale della vigna e del vino nella Raccolta dei
metodi internazionali d'analisi del vino;
considerando che il regolamento (CEE) n. 1108/82 (
3) fissaa lcuni
metodi d'analisi comunitari applicabili nel settore del vino; che, tenuto
conto del progresso scientifico, si è reso necessario sostituire conmetodi più appropriati taluni metodi, modificarne altri ed introdurnedi nuovi, in particolare quelli approvati successivamente dall'Ufficiointernazionale della vigna e del vino; che, a causa dell'elevato numero
e della complessità di tali adattamenti, è opportuno raggruppare tutti i
metodi di analisi in un nuovo regolamento ed abrogare il regolamento(CEE) n. 1108/82;
considerando che, per assicurare la comparabilità dei risultati ottenuti
applicando i metodi d'analisi di cui all'articolo 74 del regolamento
(CEE) n. 822/87, è opportuno fare riferimento, per quanto concerne la
ripetibilità e la riproducibilità di tali risultati, alle definizioni fissatedall'Ufficio internazionale della vigna e del vino;
considerando che, per tenere conto del progresso scientifico e della
dotazione dei laboratori ufficiali e per rendere il lavoro di tali labora-1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 2
(1) GU n. L 84 del 27. 3. 1987, pag. 1.
(2) GU n. L 132 del 23. 5. 1990, pag. 19.
(3) GU n. L 133 del 14. 5. 1982, pag. 1.
▼B
tori più efficace e produttivo, è opportuno consentire l'applicazione dei
metodi di analisi automatizzati a talune condizioni; che è opportunoprecisare che, in caso di controversie, i metodi automatizzati non
possono sostituire i metodi di riferimento ed i metodi usuali;
considerando che i risultati di una misurazione di densità con il metodo
automatizzato basato sul principio del risonatore di flessione sono, in
quanto ad accuratezza, ripetibilità e riproducibilità, almeno pari airisultati ottenuti con i metodi descritti al punto 1 dell'allegato delpresente regolamento per la misurazione della massa volumica o delladensità relativa; che è quindi opportuno, ai sensi dell'articolo 74, para-grafo 3 del regolamento (CEE) n. 822/87, considerare detto metodo
automatizzato equivalente ai metodi di cui all'allegato del presente
regolamento;
considerando che il modo di operare descritto al capitolo 25, punto
2.2.3.3.2 dell'allegato al presente regolamento per l'analisi del tenoredi biossido di zolfo totale dei vini e dei mosti aventi un tenore presuntoinferiore a 50 mg/l permette una migliore estrazione di questa sostanzain rapporto al modo di operare descritto nel capitolo 13, punto 13.4dell'allegato al regolamento (CEE) n. 1108/82; che in tal modo si otten-
gono tenori più elevati in biossido di zolfo totale che possono superare,
specialmente nel caso di alcuni succhi di uva il limite massimoprescritto; che, allo scopo di evitare difficoltà per lo smaltimento disucchi di uva, già elaborati al momento dell'entrata in vigore delpresente regolamento ed in attesa che i processi di elaborazione siano
adattati per ottenere una desolfitazione più completa dei mosti muti di
uva, è necessario permettere durante un periodo transitorio che il mododi operare descritto nel regolamento precitato sia ancora utilizzato;
considerando che le misure previste dal presente regolamento sono
conformi al parere del comitato di gestione per i vini,
HA ADOTTATO IL PRESENTE REGOLAMENTO:
Articolo 1
1. I metodi d'analisi comunitari applicabili nel settore del vino che
consentono, nelle transazioni commerciali e nelle operazioni dicontrollo:
— di stabilire la composizione dei prodotti di cui all'articolo 1 del
regolamento (CEE) n. 822/87,
— di accertare se i prodotti di cui trattasi hanno subito trattamenti che
contravvengono alle pratiche enologiche autorizzate,
sono quelli riportati nell'allegato del presente regolamento.2. Per le sostanze per le quali sono stati fissati metodi di riferimento
e metodi usuali, prevalgono i risultati ottenuti applicando i metodi diriferimento.
Articolo 2
Ai fini dell'applicazione del presente regolamento:
a) la ripetibilità rappresenta il valore al di sotto del quale è situato, con
una probabilità specificata, il valore assoluto della differenza tra duesingoli risultati ottenuti mediante misure effettuate nelle stesse
condizioni (stesso operatore, stesso apparecchio, stesso laboratorio
e breve intervallo di tempo;
b) la riproducibilità rappresenta il valore al di sotto del quale è situato,
con una probabilità specificata, il valore assoluto della differenza tradue singoli risultati ottenuti in condizioni diverse (operatori diversi,apparecchiature diverse e/o laboratori diversi e/o tempi diversi).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 3
Nota:Le tabelle, i diagrammi e una parte delle figure riportati nell'allegato sono
stati messi a disposizione della Commissione delle Comunità europee
dall'Ufficio internazionale della vigna e del vino di Parigi.
▼B
Per «singolo risultato» si intende il valore ottenuto applicando una
volta e completamente il metodo di analisi normalizzato su un solocampione.
In assenza di indicazioni la probabilità è del 95 %.
Articolo 3
1. Sotto la responsabilità del direttore del laboratorio, i metodi di
analisi automatizzati sono ammessi a condizione che la ripetibilità e la
riproducibilità dei risultati siano almeno equivalenti a quelle dei risul-tati ottenuti con i metodi di analisi di cui all'allegato.
In caso di controversie, i metodi automatizzati non possono prevalere
su quelli riportati in allegato.
2. Il metodo automatizzato per la misura della densità, basato sul
principio della variazione della frequenza di oscillazione, è consideratoequivalente ai metodi di cui al punto 1 dell'allegato del presente rego-
lamento.
Articolo 4
Quando si fa riferimento all'acqua per le soluzioni, le diluizioni o i
lavaggi, si intende sempre acqua distillata o acqua demineralizzata dipurezza almeno equivalente. Tutti i prodotti chimici devono essere dipurezza analitica, salvo specificazioni diverse.
Articolo 5
Il regolamento (CEE) n. 1108/82 è abrogato.Tuttavia l'articolo 1, paragrafo 4 del regolamento precitato resta appli-
cabile fino al 31 dicembre 1990.
Articolo 6
Il presente regolamento entra in vigore il giorno della pubblicazione
nellaGazzetta ufficiale delle Comunità europee .
Esso è applicabile a decorrere dal 1
oottobre 1990.
Il presente regolamento è obbligatorio in tutti i suoi elementi e diretta-
mente applicabile in ciascuno degli Stati membri.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 4
▼B
ALLEGATO
1.MASSAVOLUMICAA20ºCEDENSITÀRELATIVAA20ºC
1. DEFINIZIONI
La massa volumica è il rapporto fra la massa di un certo volume di
vino o di mosto a20 ºC e il volume stesso. Si esprime in gra mmi
per millilitro ed il suo simbolo è ρ2 0ºC.
La densità relativa a 20 ºC o densità 20 ºC/20 ºC è il rapporto,
espresso in numeri decimali, fra la massa di un certo volume di
vino o di mosto a 20 ºC e la massa dello stesso volume di acqua
alla stessa temperatura.
Il suo simbolo è d20 ºC20 ºC
2. PRINCIPIO DEI METODI
La massa volumica e la densità relativa a 20 ºC vengono determinati
sul campione di analisi:
— mediante picnometria: metodo di riferimento;
— mediante areometria o densimetria per mezzo della bilancia idro-
statica: metodi usuali.
Osservazione:
Per determinazioni molto precise, la massa volumica deve essere
correttadell'a zione del biossido di zolfo:
ρ2 0ºC = ρ′20 ºC &minus 0,0006 · S
ρ2 0ºC = massa volumica corretta
ρ′20 ºC = massa volumica osservata
S = biossido di zolfo totale in g/l
3. TRATTAMENTO PRELIMINARE DEL CAMPIONE
Se il vino o il mosto contengono quantità notevoli di biossido di
carbonio, eliminarne la maggior parte agitando 250 ml di campione
in un pallone da 1 000 ml o filtrando sotto vuoto su 2 g di cotone
collocato in un'allunga.
4. METODO DI RIFERIMENTO4.1.Apparecchiatura
Materiale d'uso comune in laboratorio, in particolare:
4.1.1. Picnometro (
1), in vetro pyrex dacirca100 ml provvisto di un termo-
metro mobile con raccordo smerigliato, graduato in decimi di grado
da 10 ºC a 30 ºC. Tale termometro deve essere controllato (fig. 1).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 5
(1) Si può usare qualsiasi picnometro avente caratteristiche equivalenti.
▼B
Fig. 1
Picnometro erelativopallonetara
Detto picnometro porta un tubo laterale di 25 mm di lunghezza e di
1 mm al massimo di diametro interno, terminante con una parte
conica smerigliata. Questo tubo laterale può essere chiuso da un
«tappo ricevitore» costituito da un tubo conico smerigliato termi-
nante con una parte affilata. Questo tappo serve da camera di
dilatazione.
Le due smerigliature dell'apparecchiatura devono essere realizzate
con la massima cura.
4.1.2. Pallone tara avente lo stesso volume esterno del picnometro (a meno
di circa 1 ml) e di massa uguale alla massa del picnometro pieno di
un liquido di densità 1,01 (soluzione al 2 % m/v di cloruro di sodio).
Involucro coibentato che si adatta perfettamente al corpo del picno-
metro.
4.1.3. Bilancia a due piatti con portata di almeno 300 g e sensibilità di 0,1
mg, oppure bilancia monopiatto con portata di almeno 200 g e sensi-
bilità di 0,1 mg.
4.2.Taraturadelpicnometro
La taratura del picnometro comporta la determinazione delle
seguenti caratteristiche:
— tara a vuoto,
— volume a20 ºC,— massa dell'acqua a 20 ºC.
4.2.1.Utilizzazione diunabilanciaaduepiatti
Una volta collocato il pallone tara sul piatto sinistro della bilancia ed
il picnometro pulito ed asciutto munito del relativo «tappo ricevi-
tore» sul piatto destro, raggiungere l'equilibrio ponendo accanto al
picnometro i pesi necessari: p grammi.
Riempire con cura il picnometro con acqua distillata a temperatura
ambiente ed immergere il termometro; asciugare con cura il picno-
metro e collocarlo nell'involucro coibentato; agitare capovolgendo
finché la temperatura letta al termometro sia costante. Portare il
livello esattamente al bordo superiore del tubo laterale. Asciugare
questo tubo ed applicare il «tappo ricevitore»; leggere la temperatura
t ºC con accuratezza ed effettuare l'eventuale correzione della scala
del termometro. Pesare il picnometro pieno d'acqua: sia p ′lama ssa
in grammi che realizza l'equilibrio.
Calcoli(
1)
Tara del picnometro vuoto:1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 6
(1) Al punto 6 del presente capitolo si riporta un esempio numerico.
▼B
Tara a vuoto = p + m
m = massa d'aria contenuta nel picnometro
m = 0,0012 (p − p ′)
Volume a20 ºC:V
20 ºC=( p+m−p ′)·Ft
Ft= fattore ricavato dalla tabella I per la temperatura t ºC
V20 ºCdeve essere noto con l'approssimazione di ± 0,001 ml
Massa in acqua a 20 ºC:M
20 ºC=V20 ºC· 0,998203
0,998203 = massa volumica dell'acqua a 20 ºC.
4.2.2. Utilizzazione di una bilancia monopiatto
Determinare:
— la massa del picnometro pulito ed asciutto: P;
— la massa del picnometro pieno d'acqua, a t ºC: P1seguendo le
indicazioni di cui al punto 4.2.1;
— la massa del pallone tara To.
Calcoli (1):
Tara del picnometro vuoto:Tara a vuoto: P − mm = massa d'aria contenuta nel picnometro
m = 0,0012 (P
1−P )
Volume a20 ºCV
20 ºC=[ P1− (P − m)] · Ft
Ft= fattore ricavato nella tabella I in corrispondenza alla tempera-
turat ºC
Il volume a 20 ºC deve essere noto con l'approssimazione di ± 0,001
ml.
Massa dell'acqua a 20 ºC.M
20 ºC=V20 ºC· 0,998203
0,998203 = massa volumica dell'acqua a 20 ºC.
4.3.Mododioperare (1)
4.3.1. Utilizzazione di una bilancia a due piatti
Pesare il picnometro riempito con il campione preparato per l'analisi
(3) secondo le indicazioni descritte al punto 4.2.1. Sia p ″lama ssain
grammi che realizza l'equilibrio a t ºC.
Massa del liquido contenuto nel picnometro = p + m − p ″.
Massa volumica apparente a t ºC:
ρtº C¼pþm/C0p00
V20 ºC
Calcolare la massa volumica a 20 ºC con l'aiuto di una delle tabelle
di correzione riportate di seguito, in funzione della natura del liquido
studiato: vino secco (tabella II), mosto naturale o concentrato
(tabella III), vino dolce (tabella IV).
Si esprime ladensità 20 ºC/20 ºC del vino dividendo lama ssavolu-
micaa20 ºC per 0,998203.
4.3.2. Utilizzazione di una bilancia monopiatto (1)
Pesare il pallone tara, sia T1la sua massa.
Calcolare dT = T1−T0.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 7
(1) Al punto 6 del presente capitolo si riporta un esempio numerico.
▼B
Massa del picnometro vuoto al momento della misurazione = P − m
+ dT.
Pesare il picnometro riempito con il campione preparato per l'analisi
(3), seguendo le istruzioni riportate al punto 4.2.1. Sia P2lama ssa
misurata a t ºC.
Massa del liquido contenuto nel picnometro a t ºC = P2−( P−m+
dT).
Massa volumica apparente a t ºC:
ρtº C¼P2/C0P/C0mþdT ðÞ
V20 ºC
Calcolare la massa volumica a 20 ºC del liquido studiato (vino
secco, mosto naturale e concentrato, vino dolce) con il procedimento
indicato al punto 4.3.1.
Ladensità 20 ºC/20 ºC si ottiene dividendo lama ssavolumicaa20
ºC per 0,998203.
4.3.3. Ripetibilità sulla massa volumica:
— per i vini secchi e amabili: r = 0,00010;
— per i vini dolci: r = 0,00018.
4.3.4. Riproducibilità sulla massa volumica:
— per i vini secchi e amabili: R = 0,00037;
— per i vini dolci: R = 0,00045.
5. METODI USUALI
5.1.Areometro
5.1.1. Apparecchiatura
5.1.1.1. Areometro
Per quanto riguarda le dimensioni e le graduazioni, gli areometri
devono soddisfare alle prescrizioni dell'ISO.
Essi debbono avere una carena cilindrica ed una cannello di sezione
circolare di almeno 3 mm di diametro. Per i vini secchi, devono
essere graduati da 0,983 a 1,003 in millesimi e quinti di millesimo.
Ogni millesimo deve distare almeno 5 mm dal millesimo successivo.
Per la misura della densità dei vini dealcolizzati, dei vini dolci e dei
mosti, si userà una serie di 5 areometri graduati rispettivamente da
1,000 a1,030; 1,030 a1,060; 1,060 a1,090; 1,090 a1,120; 1,120 a
1,150. Questi apparecchi devono essere tarati in masse volumiche a
20 ºC con divisioni almeno in millesimi e mezzi millesimi. Ogni
millesimo deve inoltre distare almeno 3 mm dal millesimo succes-
sivo.
Questi areometri devono essere graduati in modo da essere letti alla
«sommità del menisco». L'indicazione della graduazione in massa
volumicaa20 ºC o in densità rela tivaa20 ºC e dellaletturaa l
livello del menisco sarà riportata sia sulla scala graduata, sia su una
striscia di carta inclusa nella carena.
Questi apparecchi debbono essere controllati da un servizio ufficiale.
5.1.1.2. Termometro di precisione graduato almeno in 0,5 ºC.
5.1.1.3. Provettacilindricadi 36 mm di dia metro interno e di 320 mm di
altezza, mantenuta verticalmente mediante un supporto a viti calanti.
5.1.2. Modo di operare
Tecnicadi unamisura zione
Porre, nella provetta 5.1.1.3, 250 ml del campione preparato per
l'analisi (3), introdurre l'areometro e il termometro. Effettuare la
lettura sul termometro un minuto dopo aver agitato per realizzare
l'equilibrio termico. Togliere il termometro e leggere lama ssavolu-
mica apparente a t ºC sullo stelo dell'areometro dopo un minuto di
riposo.
Correggere la massa volumica apparente letta a t ºC dell'azione della
temperatura mediante le tabelle: vini secchi (tabella V), mosti
(tabella VI) e vini contenenti zucchero (tabella VII).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 8
▼B
Ladensità 20 ºC/20 ºC si ottiene dividendo lama ssavolumicaa20
ºC per 0,998203.
5.2.Densimetriapermezzodellabilanciaidrostatica
5.2.1. Apparecchiatura
5.2.1.1. Bilancia idrostatica
La bilancia idrostatica, con portata di almeno 100 g, deve essere
sensibile a1/10 di mg.
Sotto ciascun piatto è fissato un galleggiante in vetro pyrex di
almeno 20 ml di volume. Questi due galleggianti identici sono
sospesi con un filo di diametro inferiore o uguale a 0,1 mm.
Il galleggiante sospeso sotto il piatto di destra deve poter essere
introdotto in unaprovettacilindricamunitadi un segno di livello.
Questa provetta deve avere un diametro interno maggiore di almeno
6 mm di quello del galleggiante. Quest'ultimo deve poter essere
contenuto per intero nel volume della provetta situato al di sotto
del segno di riferimento, mentre lasuperficie del liquido su cui va
effettuata la misura deve essere attraversata soltanto dal filo di
sospensione. Latempera turadel liquido contenuto nellaprovettaè
misurata con un termometro graduato in quinti di grado.
Si può anche usare una bilancia idrostatica monopiatto.
5.2.2. Modo di operare
5.2.2.1. Ta ra turadi unabila nciaidrosta tica
Con i due galleggianti nell'aria, raggiungere l'equilibrio collocando
sul piatto di destra i pesi di precisione p.
Riempire la provetta di acqua fino al segno di riferimento, leggere la
temperatura t ºC dopo agitazione e riposo di 2-3 minuti. Ristabilire
l'equilibrio per mezzo di pesi di precisione collocati sul piatto di
destra, siano p ′questi pesi.
Il volume del galleggiante a 20 ºC:
V20 ºC=( p′− p) (F + 0,0012)
F = fattore dato dalla tabella I alla temperatura t ºC.peV
20 ºCsono le caratteristiche del galleggiante.
5.2.2.2. Tecnicadi misura zione
Immergere il galleggiante nella provetta riempita di vino (o di
mosto) fino al segno di riferimento. Leggere la temperatura t ºC del
vino (o del mosto), siano:
p″i pesi di precisione necessari a ristabilire l'equilibrio
ρt ºC, la massa volumica apparente:
ρtº C¼p00/C0p ðÞ
Vþ0;0012
Riportare questa massa volumica a 20 ºC mediante una delle tabelle
II, III o IV.
6. ESEMPIO DI CALCOLO DELLA MASSA VOLUMICA A 20 ºC E
DELLA DENSITÀ A 20 ºC/20 ºC (METODO DI RIFERIMENTO)
6.1.Picnometria subilanciaaduepiatti
6.1.1. Determinazione delle costanti del picnometro
1. Pesata del picnometro pulito ed asciutto:
Tara = picnometro + p
p = 104,9454 g
2. Pesata del picnometro pieno d'acqua alla temperatura t ºC:
Tara = picnometro + acqua + p ′
p′= 1,2396 g per t = 20,5 ºC1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 9
▼B
3. Calcolo della massa d'aria contenuta nel picnometro:
m = 0,0012 (p − p ′)
m = 0,0012 (104,9454 − 1,2396)
m = 0,1244 g
4. Caratteristiche da tenere presenti:
Tara del picnometro vuoto: p + mp + m = 104,9454 + 0,1244
p + m = 105,0698 g
Volume a20 ºC = (p + m − p ′)·F
tº C
F20,50 ºC= 1,001900
V20 ºC= (105,0698 − 1,2396) · 1,001900
V20 ºC= 104,0275 ml
Massa dell'acqua a 20 ºC = V20 ºC· 0,998203
M20 ºC= 103,8405 g
6.1.2. Determinazione della massa volumica a 20º C e della densità 20º C/
20º C di un vino secco:
p″= 1,2622 a17,80 ºC
ρ17;80 ºC105 ;0698 /C01;2622
104 ;0275
ρ17,80 ºC= 0,99788 g/ml
La tabella II consente di calcolare ρ20 ºCapa rtire da ρt ºC mediante
larela zione:
ρ20 ºC¼ρtº C±c
1000
Per t = 17,80 ºC e per un titolo alcolometrico di 11 % vol, si trova c
= 0,54
ρ20 ºC¼0;99788 /C00;54
1000
ρ20 ºC= 0,99734 g/ml
d20 ºC
20 ºC¼0;99734
0;998203¼0;99913
6.2.Picnometria subilanciamonopiatto
6.2.1. Determinazioni delle costanti del picnometro
1. Pesata del picnometro pulito e asciutto
P = 67,7913 g
2. Pesata del picnometro pieno d'acqua alla temperatura t ºC
P1= 169,2715 a21,65 ºC
3. Calcolo della massa d'aria contenuta nel picnometro:
m = 0,0012 (P1−P )
m = 0,0012 × 101,4802m = 0,1218 g1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 10
▼B
4. Caratteristiche da tenere presenti:
Tara del picnometro vuoto: P − m
P − m = 67,7913 − 0,1218
P − m = 67,6695 g
Volume a20 ºC = [P1− (P − m)] Ftº C
F21,65 ºC= 1,002140
V20 ºC= (169,2715 − 67,6695) × 1,002140
V20 ºC= 101,8194 ml
Massa dell'acqua a 20 ºC = V20 ºC× 0,998203
M20 ºC= 101,6364 g
Massa del pallone tara: To
To= 171,9160 g.
6.2.2. Determinazione della massa volumica a 20º C e della densità 20º C/
20º C di un vino secco:
T1= 171,9178 g
dT = 171,9178 − 171,9160 = 0,0018 g
P − m + dT = 67,6695 + 0,0018 = 67,6713 gP
2= 169,2799 a18 ºC
ρ18 ºC169 ;2799 /C067;6713
101 ;8194
ρ18 ºC= 0,99793 g/ml
La tabella II consente di calcolare ρ2 0ºC apa rtire da ρtº C
mediante la relazione:
ρ20 ºC¼ρtº C±c
1000
Per t = 18 ºC con un titolo alcolometrico di 11 % vol, si trova c =
0,49
ρ20 ºC0;99793 /C00;49
1000
ρ20 ºC= 0,99744 g/ml
d20 ºC
20 ºC¼0;99744
0;998203¼0;999231990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 11
▼B
TABELLAI
FattoriF
per i quali bisogna moltiplicare la massa dell'acqua contenuta nel picnometro in pyrex a tº per calco-
lare il volume del picnometro a 20 ºC
tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F tºC F
10,0 1,000398 13,0 1,000691 16,0 1,001097 19,0 1,001608 22,0 1,002215 25,0 1,002916 28,0 1,003704
,1 1,000406 ,1 1,000703 ,1 1,001113 ,1 1,001627 ,1 1,002238 ,1 1,002941 ,1 1,003731
,2 1,000414 ,2 1,000714 ,2 1,001128 ,2 1,001646 ,2 1,002260 ,2 1,002966 ,2 1,003759
,3 1,000422 ,3 1,000726 ,3 1,001144 ,3 1,001665 ,3 1,002282 ,3 1,002990 ,3 1,003787
,4 1,000430 ,4 1,000738 ,4 1,001159 ,4 1,001684 ,4 1,002304 ,4 1,003015 ,4 1,003815
10,5 1,000439 13,5 1,000752 16,5 1,001175 19,5 1,001703 22,5 1,002326 25,5 1,003041 28,5 1,003843
,6 1,000447 ,6 1,000764 ,6 1,001191 ,6 1,001722 ,6 1,002349 ,6 1,003066 ,6 1,003871
,7 1,000456 ,7 1,000777 ,7 1,001207 ,7 1,001741 ,7 1,002372 ,7 1,003092 ,7 1,003899
,8 1,000465 ,8 1,000789 ,8 1,001223 ,8 1,001761 ,8 1,002394 ,8 1,003117 ,8 1,003928
,9 1,000474 ,9 1,000803 ,9 1,001239 ,9 1,001780 ,9 1,002417 ,9 1,003143 ,9 1,003956
11,0 1,000483 14,0 1,000816 17,0 1,001257 20,0 1,001800 23,0 1,002439 26,0 1,003168 29,0 1,003984
,1 1,000492 ,1 1,000829 ,1 1,001273 ,1 1,001819 ,1 1,002462 ,1 1,003194 ,1 1,004013
,2 1,000501 ,2 1,000842 ,2 1,001290 ,2 1,001839 ,2 1,002485 ,2 1,003222 ,2 1,004042
,3 1,000511 ,3 1,000855 ,3 1,001306 ,3 1,001859 ,3 1,002508 ,3 1,003247 ,3 1,004071
,4 1,000520 ,4 1,000868 ,4 1,001323 ,4 1,001880 ,4 1,002531 ,4 1,003273 ,4 1,004099
11,5 1,000530 14,5 1,000882 17,5 1,001340 20,5 1,001900 23,5 1,002555 26,5 1,003299 29,5 1,004128
,6 1,000540 ,6 1,000895 ,6 1,001357 ,6 1,001920 ,6 1,002578 ,6 1,003326 ,6 1,004158
,7 1,000550 ,7 1,000909 ,7 1,001374 ,7 1,001941 ,7 1,002602 ,7 1,003352 ,7 1,004187
,8 1,000560 ,8 1,000923 ,8 1,001391 ,8 1,001961 ,8 1,002625 ,8 1,003379 ,8 1,004216
,9 1,000570 ,9 1,000937 ,9 1,001409 ,9 1,001982 ,9 1,002649 ,9 1,003405 ,9 1,004245
12,0 1,000580 15,0 1,000951 18,0 1,001427 21,0 1,002002 24,0 1,002672 27,0 1,003432 30,0 1,004275
,1 1,000591 ,1 1,000965 ,1 1,001445 ,1 1,002023 ,1 1,002696 ,1 1,003458
,2 1,000601 ,2 1,000979 ,2 1,001462 ,2 1,002044 ,2 1,002720 ,2 1,003485
,3 1,000612 ,3 1,000993 ,3 1,001480 ,3 1,002065 ,3 1,002745 ,3 1,003513
,4 1,000623 ,4 1,001008 ,4 1,001498 ,4 1,002086 ,4 1,002769 ,4 1,003540
12,5 1,000634 15,5 1,001022 18,5 1,001516 21,5 1,002107 24,5 1,002793 27,5 1,003567
,6 1,000645 ,6 1,001037 ,6 1,001534 ,6 1,002129 ,6 1,002817 ,6 1,003594
,7 1,000656 ,7 1,001052 ,7 1,001552 ,7 1,002151 ,7 1,002842 ,7 1,003621
,8 1,000668 ,8 1,001067 ,8 1,001570 ,8 1,002172 ,8 1,002866 ,8 1,003649
,9 1,000679 ,9 1,001082 ,9 1,001589 ,9 1,002194 ,9 1,002891 ,9 1,0036761990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 12
▼B
TABELLA II
Tabella delle correzioni c per la temperatura sulla massa volumica dei vini secchi e dei vini secchi privati
dell'alcole misurataatºconunpicnometroinpyrexperricondurreilrisultatoa20ºC
ρ20¼ρt±c
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− se tº è inferiore a20 ºC
+ se tº è superiore a20 ºC
Titolo alcolometrico
056789 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0 2 1 2 2 2 3 2 4 2 5 2 6 2 7Temperatura in ºC10 1,59 1,64 1,67 1,71 1,77 1,84 1,91 2,01 2,11 2,22 2,34 2,46 2,60 2,73 2,88 3,03 3,19 3,35 3,52 3,70 3,87 4,06 4,25 4,44
11 1,48 1,53 1,56 1,60 1,64 1,70 1,77 1,86 1,95 2,05 2,16 2,27 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,06 3,21 3,36 3,53 3,69 3,86 4,03
12 1,36 1,40 1,43 1,46 1,50 1,56 1,62 1,69 1,78 1,86 1,96 2,05 2,16 2,27 2,38 2,50 2,62 2,75 2,88 3,02 3,16 3,31 3,46 3,61
13 1,22 1,26 1,28 1,32 1,35 1,40 1,45 1,52 1,59 1,67 1,75 1,83 1,92 2,01 2,11 2,22 2,32 2,44 2,55 2,67 2,79 2,92 3,05 3,18
14 1,08 1,11 1,13 1,16 1,19 1,23 1,27 1,33 1,39 1,46 1,52 1,60 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,11 2,21 2,31 2,42 2,52 2,63 2,74
15 0,92 0,96 0,97 0,99 1,02 1,05 1,09 1,13 1,19 1,24 1,30 1,36 1,42 1,48 1,55 1,63 1,70 1,78 1,86 1,95 2,03 2,12 2,21 2,3016 0,76 0,79 0,80 0,81 0,84 0,86 0,89 0,93 0,97 1,01 1,06 1,10 1,16 1,21 1,26 1,32 1,38 1,44 1,51 1,57 1,64 1,71 1,78 1,85
17 0,59 0,61 0,62 0,63 0,65 0,67 0,69 0,72 0,75 0,78 0,81 0,85 0,88 0,95 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,25 1,30 1,35 1,40
18 0,40 0,42 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,49 0,51 0,53 0,55 0,57 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,74 0,77 0,81 0,84 0,87 0,91 0,94
19 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47
20
21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54 0,56 0,59 0,61 0,63 0,66 0,69 0,71 0,74 0,77 0,80 0,83 0,87 0,90 0,93 0,97
23 0,68 0,70 0,71 0,72 0,74 0,76 0,78 0,80 0,83 0,86 0,90 0,93 0,96 1,00 1,03 1,08 1,13 1,17 1,22 1,26 1,31 1,37 1,41 1,46
24 0,93 0,96 0,97 0,99 1,01 1,03 1,06 1,10 1,13 1,18 1,22 1,26 1,31 1,36 1,41 1,47 1,52 1,58 1,64 1,71 1,77 1,84 1,90 1,97
25 1,19 1,23 1,25 1,27 1,29 1,32 1,36 1,40 1,45 1,50 1,55 1,61 1,67 1,73 1,80 1,86 1,93 2,00 2,08 2,16 2,24 2,32 2,40 2,4826 1,47 1,51 1,53 1,56 1,59 1,62 1,67 1,72 1,77 1,83 1,90 1,96 2,03 2,11 2,19 2,27 2,35 2,44 2,53 2,62 2,72 2,81 2,91 3,01
27 1,75 1,80 1,82 1,85 1,89 1,93 1,98 2,04 2,11 2,18 2,25 2,33 2,41 2,50 2,59 2,68 2,78 2,88 2,98 3,09 3,20 3,31 3,42 3,53
28 2,04 2,10 2,13 2,16 2,20 2,25 2,31 2,38 2,45 2,53 2,62 2,70 2,80 2,89 3,00 3,10 3,21 3,32 3,45 3,57 3,69 3,82 3,94 4,07
29 2,34 2,41 2,44 2,48 2,53 2,58 2,65 2,72 2,81 2,89 2,99 3,09 3,19 3,30 3,42 3,53 3,65 3,78 3,92 4,05 4,19 4,33 4,47 4,61
30 2,66 2,73 2,77 2,81 2,86 2,92 3,00 3,08 3,17 3,27 3,37 3,48 3,59 3,72 3,84 3,97 4,11 4,25 4,40 4,55 4,70 4,85 4,92 5,17
Nota:Si può utilizzare questa tabella per trasformare la densità d20tin d2020.
TABELLA III
Tabella delle correzioni c per la temperatura sulla massa volumica dei mosti naturali e dei mosti concentrati
misurataatºconunpicnometroinpyrexperricondurreil risultatoa20ºC
ρ20¼ρt±c
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− se tº è inferiore a20 ºC
+ se tº è superiore a20 ºC
Massa volumica
1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36Temperatura in ºC10º 2,31 2,48 2,66 2,82 2,99 3,13 3,30 3,44 3,59 3,73 3,88 4,01 4,28 4,52 4,76 4,98 5,18 5,42 5,56 5,73 5,90 6,05
11º 2,12 2,28 2,42 2,57 2,72 2,86 2,99 3,12 3,25 3,37 3,50 3,62 3,85 4,08 4,29 4,48 4,67 4,84 5,00 5,16 5,31 5,45
12º 1,92 2,06 2,19 2,32 2,45 2,58 2,70 2,82 2,94 3,04 3,15 3,26 3,47 3,67 3,85 4,03 4,20 4,36 4,51 4,65 4,78 4,91
13º 1,72 1,84 1,95 2,06 2,17 2,27 2,38 2,48 2,58 2,69 2,78 2,88 3,05 3,22 3,39 3,55 3,65 3,84 3,98 4,11 4,24 4,36
14º 1,52 1,62 1,72 1,81 1,90 2,00 2,09 2,17 2,26 2,34 2,43 2,51 2,66 2,82 2,96 3,09 3,22 3,34 3,45 3,56 3,67 3,76
15º 1,28 1,36 1,44 1,52 1,60 1,67 1,75 1,82 1,89 1,96 2,04 2,11 2,24 2,36 2,48 2,59 2,69 2,79 2,88 2,97 3,03 3,10
16º 1,05 1,12 1,18 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,55 1,60 1,66 1,71 1,81 1,90 2,00 2,08 2,16 2,24 2,30 2,37 2,43 2,49
17º 0,80 0,86 0,90 0,95 1,00 1,04 1,09 1,13 1,18 1,22 1,26 1,30 1,37 1,44 1,51 1,57 1,62 1,68 1,72 1,76 1,80 1,84
18º 0,56 0,59 0,62 0,66 0,68 0,72 0,75 0,77 0,80 0,83 0,85 0,88 0,93 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,16 1,19 1,21 1,24
19º 0,29 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62
20º21º 0,29 0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,58 0,59 0,60 0,61 0,62 0,62
22º 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,79 0,81 0,84 0,87 0,90 0,96 1,00 1,05 1,09 1,12 1,15 1,18 1,20 1,22 1,23
23º 0,89 0,94 0,99 1,03 1,08 1,12 1,16 1,20 1,25 1,29 1,33 1,37 1,44 1,51 1,57 1,63 1,67 1,73 1,77 1,80 1,82 1,84
24º 1,20 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,66 1,71 1,77 1,82 1,92 2,01 2,10 2,17 2,24 2,30 2,36 2,40 2,42 2,44
25º 1,51 1,59 1,66 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,23 2,30 2,42 2,53 2,63 2,72 2,82 2,89 2,95 2,99 3,01 3,0526º 1,84 1,92 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,42 2,50 2,58 2,65 2,73 2,87 3,00 3,13 3,25 3,36 3,47 3,57 3,65 3,72 3,79
27º 2,17 2,26 2,36 2,46 2,56 2,66 2,75 2,84 2,93 3,01 3,10 3,18 3,35 3,50 3,66 3,80 3,93 4,06 4,16 4,26 4,35 4,42
28º 2,50 2,62 2,74 2,85 2,96 3,07 3,18 3,28 3,40 3,50 3,60 3,69 3,87 4,04 4,21 4,36 4,50 4,64 4,75 4,86 4,94 5,00
29º 2,86 2,98 3,10 3,22 3,35 3,47 3,59 3,70 3,82 3,93 4,03 4,14 4,34 4,53 4,72 4,89 5,05 5,20 5,34 5,46 5,56 5,64
30º 3,20 3,35 3,49 3,64 3,77 3,91 4,05 4,17 4,30 4,43 4,55 4,67 4,90 5,12 5,39 5,51 5,68 5,84 5,96 6,08 6,16 6,22
Nota:Si può utilizzare questa tabella per trasformare la densità d20tin d2020.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 13
▼B
TABELLA IV
Tabella delle correzioni c per la temperatura sulla massa volumica dei vini di 13 % vol o più contenenti
zuccheroresiduomisurataconpicnometroinpyrexatºperricondurreilrisultatoa20ºC
ρ20¼ρt±c
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− se tº è inferiore a20 ºC
+ se tº è superiore a20 ºC
Vino a13 % vol. Vino a15 % vol. Vino a17 % vol.
Massa volumica Massa volumica Massa volumica
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperatura in ºC10º 2,36 2,71 3,06 3,42 3,72 3,96 4,32 2,64 2,99 3,36 3,68 3,99 4,30 4,59 2,94 3,29 3,64 3,98 4,29 4,60 4,89
11º 2,17 2,49 2,80 2,99 3,39 3,65 3,90 2,42 2,73 3,05 3,34 3,63 3,89 4,15 2,69 3,00 3,32 3,61 3,90 4,16 4,41
12º 1,97 2,25 2,53 2,79 3,05 3,29 3,52 2,19 2,47 2,75 3,01 3,27 3,51 3,73 2,42 2,70 2,98 3,24 3,50 3,74 3,96
13º 1,78 2,02 2,25 2,47 2,69 2,89 3,09 1,97 2,21 2,44 2,66 2,87 3,08 3,29 2,18 2,42 2,64 2,87 3,08 3,29 3,49
14º 1,57 1,78 1,98 2,16 2,35 2,53 2,70 1,74 1,94 2,14 2,32 2,52 2,69 2,86 1,91 2,11 2,31 2,50 2,69 2,86 3,03
15º 1,32 1,49 1,66 1,82 1,97 2,12 2,26 1,46 1,63 1,79 1,95 2,10 2,25 2,39 1,60 1,77 1,93 2,09 2,24 2,39 2,5316º 1,08 1,22 1,36 1,48 1,61 1,73 1,84 1,18 1,32 1,46 1,59 1,71 1,83 1,94 1,30 1,44 1,58 1,71 1,83 1,95 2,06
17º 0,83 0,94 1,04 1,13 1,22 1,31 1,40 0,91 1,02 1,12 1,21 1,30 1,39 1,48 1,00 1,10 1,20 1,30 1,39 1,48 1,56
18º 0,58 0,64 0,71 0,78 0,84 0,89 0,95 0,63 0,69 0,76 0,83 0,89 0,94 1,00 0,69 0,75 0,82 0,89 0,95 1,00 1,06
19º 0,30 0,34 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,37 0,40 0,43 0,46 0,49 0,52 0,36 0,39 0,42 0,46 0,49 0,52 0,54
20º21º 0,30 0,33 0,36 0,40 0,43 0,46 0,49 0,33 0,36 0,39 0,43 0,46 0,49 0,51 0,35 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54
22º 0,60 0,67 0,73 0,80 0,85 0,91 0,98 0,65 0,72 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 0,71 0,78 0,84 0,90 0,96 1,01 1,07
23º 0,93 1,02 1,12 1,22 1,30 1,39 1,49 1,01 1,10 1,20 1,29 1,38 1,46 1,55 1,10 1,19 1,29 1,38 1,46 1,55 1,63
24º 1,27 1,39 1,50 1,61 1,74 1,84 1,95 1,37 1,49 1,59 1,72 1,84 1,95 2,06 1,48 1,60 1,71 1,83 1,95 2,06 2,17
25º 1,61 1,75 1,90 2,05 2,19 2,33 2,47 1,73 1,87 2,02 2,17 2,31 2,45 2,59 1,87 2,01 2,16 2,31 2,45 2,59 2,73
26º 1,94 2,12 2,29 2,47 2,63 2,79 2,95 2,09 2,27 2,44 2,62 2,78 2,94 3,10 2,26 2,44 2,61 2,79 2,95 3,11 3,26
27º 2,30 2,51 2,70 2,90 3,09 3,27 3,44 2,48 2,68 2,87 3,07 3,27 3,45 3,62 2,67 2,88 3,07 3,27 3,46 3,64 3,81
28º 2,66 2,90 3,13 3,35 3,57 3,86 4,00 2,86 3,10 3,23 3,55 3,77 3,99 4,20 3,08 3,31 3,55 3,76 3,99 4,21 4,41
29º 3,05 3,31 3,56 3,79 4,04 4,27 4,49 3,28 3,53 3,77 4,02 4,26 4,49 4,71 3,52 3,77 4,01 4,26 4,50 4,73 4,95
30º 3,44 3,70 3,99 4,28 4,54 4,80 5,06 3,68 3,94 4,23 4,52 4,79 5,05 5,30 3,95 4,22 4,51 4,79 5,07 5,32 5,57
Vino a19 % vol. Vino a21 % vol.
Massa volumica Massa volumica
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperatura in ºC10º 3,27 3,62 3,97 4,30 4,62 4,92 5,21 3,62 3,97 4,32 4,66 4,97 5,27 5,56
11º 2,99 3,30 3,61 3,90 4,19 4,45 4,70 3,28 3,61 3,92 4,22 4,50 4,76 5,01
12º 2,68 2,96 3,24 3,50 3,76 4,00 4,21 2,96 3,24 3,52 3,78 4,03 4,27 4,49
13º 2,40 2,64 2,87 3,09 3,30 3,51 3,71 2,64 2,88 3,11 3,33 3,54 3,74 3,95
14º 2,11 2,31 2,51 2,69 2,88 3,05 3,22 2,31 2,51 2,71 2,89 3,08 3,25 3,43
15º 1,76 1,93 2,09 2,25 2,40 2,55 2,69 1,93 2,10 2,26 2,42 2,57 2,72 2,8616º 1,43 1,57 1,70 1,83 1,95 2,08 2,18 1,56 1,70 1,84 1,97 2,09 2,21 2,32
17º 1,09 1,20 1,30 1,39 1,48 1,57 1,65 1,20 1,31 1,41 1,50 1,59 1,68 1,77
18º 0,76 0,82 0,88 0,95 1,01 1,06 1,12 0,82 0,88 0,95 1,01 1,08 1,13 1,18
19º 0,39 0,42 0,45 0,49 0,52 0,55 0,57 0,42 0,46 0,49 0,52 0,55 0,58 0,61
20º
21º 0,38 0,42 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,41 0,45 0,48 0,51 0,54 0,57 0,60
22º 0,78 0,84 0,90 0,96 1,02 1,07 1,13 0,84 0,90 0,96 1,02 1,08 1,14 1,19
23º 1,19 1,28 1,38 1,47 1,55 1,64 1,72 1,29 1,39 1,48 1,57 1,65 1,74 1,82
24º 1,60 1,72 1,83 1,95 2,06 2,18 2,29 1,73 1,85 1,96 2,08 2,19 2,31 2,42
25º 2,02 2,16 2,31 2,46 2,60 2,74 2,88 2,18 2,32 2,47 2,62 2,76 2,90 3,0426º 2,44 2,62 2,79 2,96 3,12 3,28 3,43 2,53 2,81 2,97 3,15 3,31 3,47 3,62
27º 2,88 3,08 3,27 3,42 3,66 3,84 4,01 3,10 3,30 3,47 3,69 3,88 4,06 4,23
28º 3,31 3,54 3,78 4,00 4,22 4,44 4,64 3,56 3,79 4,03 4,25 4,47 4,69 4,89
29º 3,78 4,03 4,27 4,52 4,76 4,99 5,21 4,06 4,31 4,55 4,80 5,04 5,27 5,48
30º 4,24 4,51 4,80 5,08 5,36 5,61 5,86 4,54 4,82 5,11 5,39 5,66 5,91 6,161990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 14
▼B
TABELLA V
Tabella delle correzioni c per la temperatura sulla massa volumica dei vini secchi e dei vini secchi privati
dell'alcolemisurataatºmedianteunareometroodunpicnometroinvetroordinarioatºperricondurreilrisul-
tatoa20ºC
ρ20¼ρt±c
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− se tº è inferiore a20 ºC
+ se tº è superiore a20 ºC
Titolo alcolometrico
0 5 6 7 8 9 1 01 11 21 31 41 51 61 71 81 92 02 12 22 32 42 52 62 7Temperatura in ºC10º 1,45 1,51 1,55 1,58 1,64 1,70 1,78 1,88 1,98 2,09 2,21 2,34 2,47 2,60 2,75 2,90 3,06 3,22 3,39 3,57 3,75 3,93 4,12 4,31
11º 1,35 1,40 1,43 1,47 1,52 1,58 1,65 1,73 1,83 1,93 2,03 2,15 2,26 2,38 2,51 2,65 2,78 2,93 3,08 3,24 3,40 3,57 3,73 3,90
12º 1,24 1,28 1,31 1,34 1,39 1,44 1,50 1,58 1,66 1,75 1,84 1,94 2,04 2,15 2,26 2,38 2,51 2,63 2,77 2,91 3,05 3,19 3,34 3,49
13º 1,12 1,16 1,18 1,21 1,25 1,30 1,35 1,42 1,49 1,56 1,64 1,73 1,82 1,91 2,01 2,11 2,22 2,33 2,45 2,57 2,69 2,81 2,95 3,07
14º 0,99 1,03 1,05 1,07 1,11 1,14 1,19 1,24 1,31 1,37 1,44 1,52 1,59 1,67 1,75 1,84 1,93 2,03 2,13 2,23 2,33 2,44 2,55 2,66
15º 0,86 0,89 0,90 0,92 0,95 0,98 1,02 1,07 1,12 1,17 1,23 1,29 1,35 1,42 1,49 1,56 1,63 1,71 1,80 1,88 1,96 2,05 2,14 2,2316º 0,71 0,73 0,74 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,91 0,96 0,99 1,05 1,10 1,15 1,21 1,27 1,33 1,39 1,45 1,52 1,59 1,66 1,73 1,80
17º 0,55 0,57 0,57 0,59 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,74 0,77 0,81 0,84 0,88 0,92 0,96 1,01 1,05 1,11 1,15 1,20 1,26 1,31 1,36
18º 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,68 0,71 0,74 0,78 0,81 0,85 0,88 0,91
19º 0,19 0,20 0,20 0,21 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46
20º21º 0,21 0,22 0,22 0,23 0,23 0,24 0,25 0,25 0,26 0,27 0,29 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48
22º 0,43 0,45 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,52 0,54 0,56 0,58 0,60 0,63 0,65 0,68 0,71 0,73 0,77 0,80 0,83 0,86 0,89 0,93 0,96
23º 0,67 0,69 0,70 0,71 0,72 0,74 0,77 0,79 0,82 0,85 0,88 0,91 0,95 0,99 1,03 1,07 1,12 1,16 1,21 1,25 1,30 1,35 1,40 1,45
24º 0,91 0,93 0,95 0,97 0,99 1,01 1,04 1,07 1,11 1,15 1,20 1,24 1,29 1,34 1,39 1,45 1,50 1,56 1,62 1,69 1,76 1,82 1,88 1,95
25º 1,16 1,19 1,21 1,23 1,26 1,29 1,33 1,37 1,42 1,47 1,52 1,57 1,63 1,70 1,76 1,83 1,90 1,97 2,05 2,13 2,21 2,29 2,37 2,4526º 1,42 1,46 1,49 1,51 1,54 1,58 1,62 1,67 1,73 1,79 1,85 1,92 1,99 2,07 2,14 2,22 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,77 2,86 2,96
27º 1,69 1,74 1,77 1,80 1,83 1,88 1,93 1,98 2,05 2,12 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,72 2,82 2,93 3,04 3,14 3,25 3,37 3,48
28º 1,97 2,03 2,06 2,09 2,14 2,19 2,24 2,31 2,38 2,46 2,55 2,63 2,73 2,83 2,93 3,03 3,14 3,26 3,38 3,50 3,62 3,75 3,85 4,00
29º 2,26 2,33 2,37 2,40 2,45 2,50 2,57 2,64 2,73 2,82 2,91 2,99 3,11 3,22 3,34 3,45 3,58 3,70 3,84 3,97 4,11 4,25 4,39 4,54
30º 2,56 2,64 2,67 2,72 2,77 2,83 2,90 2,98 3,08 3,18 3,28 3,38 3,50 3,62 3,75 3,88 4,02 4,16 4,30 4,46 4,61 4,76 4,92 5,07
Nota:Si può utilizzare questa tabella per trasformare la densità d20tin d2020.
TABELLA VI
Tabella delle correzioni c per la temperatura sulla massa volumica dei mosti naturali e dei mosti concentrati
misurataatºmedianteunpicnometroodunareometro invetroordinarioperricondurreilrisultatoa20ºC
ρ20¼ρt±c
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− se tº è inferiore a20 ºC
+ se tº è superiore a20 ºC
Massa volumica
1,05 1,06 1,07 1,08 1,09 1,10 1,11 1,12 1,13 1,14 1,15 1,16 1,18 1,20 1,22 1,24 1,26 1,28 1,30 1,32 1,34 1,36Temperatura in ºC10º 2,17 2,34 2,52 2,68 2,85 2,99 3,16 3,29 3,44 3,58 3,73 3,86 4,13 4,36 4,60 4,82 5,02 5,25 5,39 5,56 5,73 5,87
11º 2,00 2,16 2,29 2,44 2,59 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,37 3,48 3,71 3,94 4,15 4,33 4,52 4,69 4,85 5,01 5,15 5,29
12º 1,81 1,95 2,08 2,21 2,34 2,47 2,58 2,70 2,82 2,92 3,03 3,14 3,35 3,55 3,72 3,90 4,07 4,23 4,37 4,52 4,64 4,77
13º 1,62 1,74 1,85 1,96 2,07 2,17 2,28 2,38 2,48 2,59 2,68 2,77 2,94 3,11 3,28 3,44 3,54 3,72 3,86 3,99 4,12 4,24
14º 1,44 1,54 1,64 1,73 1,82 1,92 2,00 2,08 2,17 2,25 2,34 2,42 2,57 2,73 2,86 2,99 3,12 3,24 3,35 3,46 3,57 3,65
15º 1,21 1,29 1,37 1,45 1,53 1,60 1,68 1,75 1,82 1,89 1,97 2,03 2,16 2,28 2,40 2,51 2,61 2,71 2,80 2,89 2,94 3,0116º 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,54 1,60 1,65 1,75 1,84 1,94 2,02 2,09 2,17 2,23 2,30 2,36 2,42
17º 0,76 0,82 0,86 0,91 0,96 1,00 1,05 1,09 1,14 1,18 1,22 1,25 1,32 1,39 1,46 1,52 1,57 1,63 1,67 1,71 1,75 1,79
18º 0,53 0,56 0,59 0,63 0,65 0,69 0,72 0,74 0,77 0,80 0,82 0,85 0,90 0,95 0,99 1,02 1,06 1,09 1,13 1,16 1,18 1,20
19º 0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,43 0,43 0,46 0,48 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60
20º21º 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,51 0,54 0,56 0,57 0,58 0,59 0,60 0,60
22º 0,55 0,58 0,61 0,64 0,67 0,70 0,73 0,76 0,78 0,81 0,84 0,87 0,93 0,97 1,02 1,06 1,09 1,12 1,15 1,17 1,19 1,19
23º 0,85 0,90 0,95 0,99 1,04 1,08 1,12 1,16 1,21 1,25 1,29 1,32 1,39 1,46 1,52 1,58 1,62 1,68 1,72 1,75 1,77 1,79
24º 1,15 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,48 1,54 1,60 1,65 1,71 1,76 1,86 1,95 2,04 2,11 2,17 2,23 2,29 2,33 2,35 2,37
25º 1,44 1,52 1,59 1,67 1,74 1,81 1,88 1,95 2,02 2,09 2,16 2,22 2,34 2,45 2,55 2,64 2,74 2,81 2,87 2,90 2,92 2,96
26º 1,76 1,84 1,93 2,02 2,10 2,18 2,25 2,33 2,41 2,49 2,56 2,64 2,78 2,91 3,03 3,15 3,26 3,37 3,47 3,55 3,62 3,60
27º 2,07 2,16 2,26 2,36 2,46 2,56 2,65 2,74 2,83 2,91 3,00 3,07 3,24 3,39 3,55 3,69 3,82 3,94 4,04 4,14 4,23 4,30
28º 2,39 2,51 2,63 2,74 2,85 2,96 3,06 3,16 3,28 3,38 3,48 3,57 3,75 3,92 4,08 4,23 4,37 4,51 4,62 4,73 4,80 4,86
29º 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22 3,34 3,46 3,57 3,69 3,80 3,90 4,00 4,20 4,39 4,58 4,74 4,90 5,05 5,19 5,31 5,40 5,48
30º 3,06 3,21 3,35 3,50 3,63 3,77 3,91 4,02 4,15 4,28 4,40 4,52 4,75 4,96 5,16 5,35 5,52 5,67 5,79 5,91 5,99 6,04
Nota:Si può utilizzare questa tabella per trasformare la densità d20tin d2020.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 15
▼B
TABELLA VII
Tabella delle correzioni c per la temperatura sulla massa volumica dei vini di 13 % vol o più contenenti
zucchero residuomisuratamedianteareometro opicnometroinvetroordinarioatºperricondurlaa20ºC
ρ20¼ρt±c
1000/C144/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C146− se tº è inferiore a20 ºC
+ se tº è superiore a20 ºC
Vino a13 % volume Vino a15 % volume Vino a17 % volume
Massa volumica Massa volumica Massa volumica
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperatura in ºC10º 2,24 2,58 2,93 3,27 3,59 3,89 4,18 2,51 2,85 3,20 3,54 3,85 4,02 4,46 2,81 3,15 3,50 3,84 4,15 4,45 4,74
11º 2,06 2,37 2,69 2,97 3,26 3,53 3,78 2,31 2,61 2,93 3,21 3,51 3,64 4,02 2,57 2,89 3,20 3,49 3,77 4,03 4,28
12º 1,87 2,14 2,42 2,67 2,94 3,17 3,40 2,09 2,36 2,64 2,90 3,16 3,27 3,61 2,32 2,60 2,87 3,13 3,39 3,63 3,84
13º 1,69 1,93 2,14 2,37 2,59 2,80 3,00 1,88 2,12 2,34 2,56 2,78 2,88 3,19 2,09 2,33 2,55 2,77 2,98 3,19 3,39
14º 1,49 1,70 1,90 2,09 2,27 2,44 2,61 1,67 1,86 2,06 2,25 2,45 2,51 2,77 1,83 2,03 2,23 2,42 2,61 2,77 2,94
15º 1,25 1,42 1,59 1,75 1,90 2,05 2,19 1,39 1,56 1,72 1,88 2,03 2,11 2,32 1,54 1,71 1,87 2,03 2,18 2,32 2,4716º 1,03 1,17 1,30 1,43 1,55 1,67 1,78 1,06 1,27 1,40 1,53 1,65 1,77 1,88 1,25 1,39 1,52 1,65 1,77 1,89 2,00
17º 0,80 0,90 1,00 1,09 1,17 1,27 1,36 0,87 0,98 1,08 1,17 1,26 1,35 1,44 0,96 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,52
18º 0,54 0,61 0,68 0,75 0,81 0,86 0,92 0,60 0,66 0,73 0,80 0,85 0,91 0,97 0,66 0,72 0,79 0,86 0,92 0,97 1,03
19º 0,29 0,33 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,32 0,36 0,39 0,42 0,45 0,48 0,51 0,35 0,38 0,41 0,45 0,48 0,51 0,53
20º21º 0,29 0,32 0,35 0,39 0,42 0,45 0,47 0,32 0,35 0,38 0,42 0,45 0,48 0,50 0,34 0,38 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53
22º 0,57 0,64 0,70 0,76 0,82 0,88 0,93 0,63 0,69 0,75 0,81 0,87 0,93 0,98 0,68 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04
23º 0,89 0,98 1,08 1,17 1,26 1,34 1,43 0,97 1,06 1,16 1,25 1,34 1,42 1,51 1,06 1,15 1,25 1,34 1,42 1,51 1,59
24º 1,22 1,34 1,44 1,56 1,68 1,79 1,90 1,32 1,44 1,54 1,66 1,78 1,89 2,00 1,43 1,56 1,65 1,77 1,89 2,00 2,11
25º 1,61 1,68 1,83 1,98 2,12 2,26 2,40 1,66 1,81 1,96 2,11 2,25 2,39 2,52 1,80 1,94 2,09 2,24 2,39 2,52 2,66
26º 1,87 2,05 2,22 2,40 2,56 2,71 2,87 2,02 2,20 2,37 2,54 2,70 2,85 3,01 2,18 2,36 2,53 2,71 2,86 3,02 3,17
27º 2,21 2,42 2,60 2,80 3,00 3,18 3,35 2,39 2,59 2,78 2,98 3,17 3,35 3,52 2,58 2,78 2,97 3,17 3,36 3,54 3,71
28º 2,56 2,80 3,02 3,25 3,47 3,67 3,89 2,75 2,89 3,22 3,44 3,66 3,86 4,07 2,97 3,21 3,44 3,66 3,88 4,09 4,30
29º 2,93 3,19 3,43 3,66 3,91 4,14 4,37 3,16 3,41 3,65 3,89 4,13 4,36 4,59 3,40 3,66 3,89 4,13 4,38 4,61 4,82
30º 3,31 3,57 3,86 4,15 4,41 4,66 4,92 3,55 3,81 4,10 4,38 4,66 4,90 5,16 3,82 4,08 4,37 4,65 4,93 5,17 5,42
Vino a19 % volume Vino a21 % volume
Massa volumica Massa volumica
1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120 1,000 1,020 1,040 1,060 1,080 1,100 1,120Temperatura in ºC10º 3,14 3,48 3,83 4,17 4,48 4,78 5,07 3,50 3,84 4,19 4,52 4,83 5,12 5,41
11º 2,87 3,18 3,49 3,78 4,06 4,32 4,57 3,18 3,49 3,80 4,09 4,34 4,63 4,88
12º 2,58 2,86 3,13 3,39 3,65 3,88 4,10 2,86 3,13 3,41 3,67 3,92 4,15 4,37
13º 2,31 2,55 2,77 2,99 3,20 3,41 3,61 2,56 2,79 3,01 3,23 3,44 3,65 3,85
14º 2,03 2,23 2,43 2,61 2,80 2,96 3,13 2,23 2,43 2,63 2,81 3,00 3,16 3,33
15º 1,69 1,86 2,02 2,18 2,33 2,48 2,62 1,86 2,03 2,19 2,35 2,50 2,65 2,8016º 1,38 1,52 1,65 1,78 1,90 2,02 2,13 1,51 1,65 1,78 1,91 2,03 2,15 2,26
17º 1,06 1,16 1,26 1,35 1,44 1,53 1,62 1,15 1,25 1,35 1,45 1,54 1,63 1,71
18º 0,73 0,79 0,85 0,92 0,98 1,03 1,09 0,79 0,85 0,92 0,98 1,05 1,10 1,15
19º 0,38 0,41 0,44 0,48 0,51 0,52 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59
20º
21º 0,37 0,41 0,44 0,47 0,50 0,53 0,56 0,41 0,44 0,47 0,51 0,54 0,57 0,59
22º 0,75 0,81 0,87 0,93 0,99 1,04 1,10 0,81 0,88 0,94 1,00 1,06 1,10 1,17
23º 1,15 1,30 1,34 1,43 1,51 1,60 1,68 1,25 1,34 1,44 1,63 1,61 1,70 1,78
24º 1,55 1,67 1,77 1,89 2,00 2,11 2,23 1,68 1,80 1,90 2,02 2,13 2,25 2,36
25º 1,95 2,09 2,24 2,39 2,53 2,67 2,71 2,11 2,25 2,40 2,55 2,69 2,83 2,9726º 2,36 2,54 2,71 2,89 3,04 3,20 3,35 2,55 2,73 2,90 3,07 3,22 3,38 3,54
27º 2,79 2,99 3,18 3,38 3,57 3,75 3,92 3,01 3,20 3,40 3,59 3,78 3,96 4,13
28º 3,20 3,44 3,66 3,89 4,11 4,32 4,53 3,46 3,69 3,93 4,15 4,36 4,58 4,77
29º 3,66 3,92 4,15 4,40 4,64 4,87 5,08 3,95 4,20 4,43 4,68 4,92 5,15 5,36
30º 4,11 4,37 4,66 4,94 5,22 5,46 5,71 4,42 4,68 4,97 5,25 5,53 5,77 6,021990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 16
▼B
2.DETERMINAZIONEDELTENOREZUCCHERINODEIMOSTI,DEI
MOSTI CONCENTRATI E DEI MOSTI CONCENTRATI RETTIFI-
CATIMEDIANTERIFRATTOMETRIA
1. PRINCIPIO DEL METODO
Si riporta l'indice di rifrazione a 20 ºC, espresso in valore assoluto o
in percento in massa di saccarosio, nella tabella corrispondente per
ottenere il grado zuccherino in grammi/litro o in grammi per chilo-
grammo di mosto, di mosto concentrato e di mosto concentrato
rettificato.
2. APPARECCHIATURA
2.1.RifrattometrotipoAbbé
Il rifrattometro deve essere dotato di una scala che indichi:
— la percentuale in massa di saccarosio con l'approssimazione dello
0,1 %
— oppure gli indici di rifrazione con quattro cifre decimali.
Il rifrattometro deve essere provvisto di un termometro con una scala
compresaa lmeno tra+ 15 ºC e + 25 ºC e di un dispositivo di circo-
lazione d'acqua che consenta di effettuare le misurazioni a una
temperatura di 20 ºC ± 5 ºC.
Occorre seguire scrupolosamente le istruzioni per l'impiego dello
strumento, in particolare per quanto riguarda la taratura e la sorgente
luminosa.
3. PREPARAZIONE DEL CAMPIONE3.1.Mostiemosticoncentrati
Filtrare eventualmente i mosti con una garza asciutta piegata in
quattro e, dopo aver eliminato le prime gocce di filtrato, effettuare
la determinazione sul prodotto filtrato.
3.2.Mostoconcentratorettificato
Utilizzare, a seconda della concentrazione, il mosto concentrato retti-
ficato oppure la soluzione ottenuta portando a 500 g, con acqua, 200
g di mosto concentrato rettificato pesato accuratamente.
4. MODO DI OPERARE
Portare il campione ad una temperatura prossima ai 20 ºC. Deporre
una piccola presa di campione sul prisma inferiore del rifrattometro,
avendo cura che, pressando i prisma l'uno contro l'altro, il campione
coprauniformemente lasuperficie del vetro, ed effettua re lamisura
seguendo le istruzioni per l'uso dell'apparecchio in questione.
Leggere la percentuale in massa di saccarosio con la precisione dello
0,1 % oppure l'indice di rifrazione con 4 cifre decimali.
Effettuare almeno due determinazioni sullo stesso campione prepa-
rato. Rilevare la temperatura t ºC.
5. CALCOLI
5.1.Correzione ditemperatura
5.1.1. Apparecchi graduati in % in massa di saccarosio: per la correzione
della temperatura ricorrere alla tabella I.
5.1.2. Apparecchi graduati in indice di rifrazione: riportare l'indice misu-
rato a t ºC nella tabella II per ottenere (colonna 1) il corrispondente
valore della percentuale in massa di saccarosio a t ºC. Tale valore
viene quindi corretto rispetto alla temperatura ed espresso a 20 ºC
per mezzo dellata bellaI.
5.2.Tenorezuccherinodeimostiedeimosticoncentrati
Riportare nella tabella II la percentuale in massa di saccarosio a 20
ºC per ottenere il tenore zuccherino in grammi/litro e in grammi/
chilogrammo. Il tenore zuccherino è espresso in zucchero invertito
con unacifradecima le.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 17
▼B
5.3.Tenorezuccherinodelmostoconcentratorettificato
Riportare la percentuale in massa di saccarosio a 20 ºC nella tabella
III per ottenere il tenore zuccherino in grammi/litro e in grammi/
chilogrammo. Il tenore zuccherino è espresso in zucchero invertito
con unacifradecima le.
Se la misura è stata effettuata sul mosto concentrato rettificato
diluito, moltiplicare il risultato per il fattore di diluizione.
5.4.Indice di rifrazione dei mosti, dei mosti concentrati e dei mosti
concentratirettificati
Riportare nella tabella II la percentuale in massa di saccarosio a 20
ºC per ricavare l'indice di rifrazione a 20 ºC. Tale valore è espresso
con quattro cifre decimali.
TABELLA I
Correzione daapportare nelcasoincuilapercentualeinmassadisaccarosio siastatadetermi-
nataaunatemperaturadiversada20ºC
Temperatura
ºCSaccarosio in grammi per 100 g di prodotto
5 1 01 52 03 04 05 06 07 07 5
Sottrarre
15 0,25 0,27 0,31 0,31 0,34 0,35 0,36 0,37 0,36 0,36
16 0,21 0,23 0,27 0,27 0,29 0,31 0,31 0,32 0,31 0,2317 0,16 0,18 0,20 0,20 0,22 0,23 0,23 0,23 0,20 0,1718 0,11 0,12 0,14 0,15 0,16 0,16 0,15 0,12 0,12 0,0919 0,06 0,07 0,08 0,08 0,08 0,09 0,09 0,08 0,07 0,05
Addizionare
21 0,06 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,07
22 0,12 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14 0,14
23 0,18 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,2224 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28 0,28 0,28 0,29 0,2925 0,30 0,32 0,32 0,34 0,36 0,36 0,36 0,36 0,36 0,37
Nota:Le variazioni di temperatura per rapportare a 20 ºC non devono superare ± 5 ºC.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 18
▼B
TABELLA II
La tabella riporta il tenore zuccherino (1)dei mosti e dei mosti concentrati espresso in grammi/
litro eingrammi/chilogrammo, determinato per mezzo di unrifrattometro graduatoin percen-
tualeinmassadisaccarosioa20ºCoinindicedirifrazionea20ºC.Èancheriportatalamassa
volumicaa20ºC.
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
10.0 1.34781 1.0390 82.3 79.2 4,89
10.1 1.34798 1.0394 83.4 80.2 4,95
10.2 1.34814 1.0398 84.5 81.3 5,02
10.3 1.34830 1.0402 85.6 82.2 5,09
10.4 1.34845 1.0406 86.6 83.2 5,14
10.5 1.34860 1.0410 87.6 84.1 5,20
10.6 1.34875 1.0414 88.6 85.1 5,26
10.7 1.34890 1.0419 89.7 86.1 5,33
10.8 1.34906 1.0423 90.8 87.1 5,39
10.9 1.34921 1.0427 91.8 88.1 5,45
11.0 1.34936 1.0431 92.9 89.1 5,52
11.1 1.34952 1.0435 94.0 90.0 5,58
11.2 1.34968 1.0439 95.0 91.0 5,64
11.3 1.34984 1.0443 96.1 92.0 5,71
11.4 1.34999 1.0447 97.1 92.9 5,77
11.5 1.35015 1.0452 98.2 94.0 5,83
11.6 1.35031 1.0456 99.3 95.0 5,90
11.7 1.35046 1.0460 100.3 95.9 5,96
11.8 1.35062 1.0464 101.4 96.9 6,02
11.9 1.35077 1.0468 102.5 97.9 6,09
12.0 1.35092 1.0473 103.6 98.9 6,15
12.1 1.35108 1.0477 104.7 99.9 6,22
12.2 1.35124 1.0481 105.7 100.8 6,28
12.3 1.35140 1.0485 106.8 101.9 6,35
12.4 1.35156 1.0489 107.9 102.9 6,41
12.5 1.35172 1.0494 109.0 103.8 6,47
12.6 1.35187 1.0498 110.0 104.8 6,53
12.7 1.35203 1.0502 111.1 105.8 6,60
12.8 1.35219 1.0506 112.2 106.8 6,66
12.9 1.35234 1.0510 113.2 107.8 6,73
13.0 1.35249 1.0514 114.3 108.7 6,79
13.1 1.35266 1.0519 115.4 109.7 6,86
13.2 1.35282 1.0523 116.5 110.7 6,92
13.3 1.35298 1.0527 117.6 111.7 6,99
13.4 1.35313 1.0531 118.6 112.6 7,05
13.5 1.35329 1.0536 119.7 113.6 7,11
13.6 1.35345 1.0540 120.8 114.6 7,18
13.7 1.35360 1.0544 121.8 115.6 7,24
13.8 1.35376 1.0548 122.9 116.5 7,30
13.9 1.35391 1.0552 124.0 117.5 7,37
14.0 1.35407 1.0557 125.1 118.5 7,43
14.1 1.35424 1.0561 126.2 119.5 7,50
14.2 1.35440 1.0565 127.3 120.5 7,56
14.3 1.35456 1.0569 128.4 121.5 7,63
14.4 1.35472 1.0574 129.5 122.5 7,69
14.5 1.35488 1.0578 130.6 123.4 7,76
14.6 1.35503 1.0582 131.6 124.4 7,82
14.7 1.35519 1.0586 132.7 125.4 7,88
14.8 1.35535 1.0591 133.8 126.3 7,95
14.9 1.35551 1.0595 134.9 127.3 8,011990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 19
(1) Il tenore in zucchero è espresso come zucchero invertito.
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
15.0 1.35567 1.0599 136.0 128.3 8,08
15.1 1.35583 1.0603 137.1 129.3 8,15
15.2 1.35599 1.0608 138.2 130.3 8,21
15.3 1.35615 1.0612 139.3 131.3 8,27
15.4 1.35631 1.0616 140.4 132.3 8,34
15.5 1.35648 1.0621 141.5 133.2 8,41
15.6 1.35664 1.0625 142.6 134.2 8,47
15.7 1.35680 1.0629 143.7 135.2 8,54
15.8 1.35696 1.0633 144.8 136.2 8,60
15.9 1.35712 1.0638 145.9 137.2 8,67
16.0 1.35728 1.0642 147.0 138.1 8,73
16.1 1.35744 1.0646 148.1 139.1 8,80
16.2 1.35760 1.0651 149.2 140.1 8,86
16.3 1.35776 1.0655 150.3 141.1 8,93
16.4 1.35793 1.0660 151.5 142.1 9,00
16.5 1.35809 1.0664 152.6 143.1 9,06
16.6 1.35825 1.0668 153.7 144.1 9,13
16.7 1.35842 1.0672 154.8 145.0 9,20
16.8 1.35858 1.0677 155.9 146.0 9,26
16.9 1.35874 1.0681 157.0 147.0 9,33
17.0 1.35890 1.0685 158.1 148.0 9,39
17.1 1.35907 1.0690 159.3 149.0 9,46
17.2 1.35923 1.0694 160.4 150.0 9,53
17.3 1.35939 1.0699 161.5 151.0 9,59
17.4 1.35955 1.0703 162.6 151.9 9,66
17.5 1.35972 1.0707 163.7 152.9 9,73
17.6 1.35988 1.0711 164.8 153.9 9,79
17.7 1.36004 1.0716 165.9 154.8 9,86
17.8 1.36020 1.0720 167.0 155.8 9,92
17.9 1.36036 1.0724 168.1 156.8 9,99
18.0 1.36053 1.0729 169.3 157.8 10,06
18.1 1.36070 1.0733 170.4 158.8 10,12
18.2 1.36086 1.0738 171.5 159.7 10,19
18.3 1.36102 1.0742 172.6 160.7 10,25
18.4 1.36119 1.0746 173.7 161.6 10,32
18.5 1.36136 1.0751 174.9 162.6 10,39
18.6 1.36152 1.0755 176.0 163.6 10,46
18.7 1.36169 1.0760 177.2 164.6 10,53
18.8 1.36185 1.0764 178.3 165.6 10,59
18.9 1.36201 1.0768 179.4 166.6 10,66
19.0 1.36217 1.0773 180.5 167.6 10,72
19.1 1.36234 1.0777 181.7 168.6 10,80
19.2 1.36251 1.0782 182.8 169.5 10,86
19.3 1.36267 1.0786 183.9 170.5 10,93
19.4 1.36284 1.0791 185.1 171.5 11,00
19.5 1.36301 1.0795 186.3 172.5 11,07
19.6 1.36318 1.0800 187.4 173.5 11,13
19.7 1.36335 1.0804 188.6 174.5 11,21
19.8 1.36351 1.0809 189.7 175.5 11,27
19.9 1.36367 1.0813 190.8 176.5 11,341990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 20
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
20.0 1.36383 1.0817 191.9 177.4 11,40
20.1 1.36400 1.0822 193.1 178.4 11,47
20.2 1.36417 1.0826 194.2 179.4 11,54
20.3 1.36434 1.0831 195.3 180.4 11,60
20.4 1.36451 1.0835 196.5 181.4 11,67
20.5 1.36468 1.0840 197.7 182.3 11,75
20.6 1.36484 1.0844 198.8 183.3 11,81
20.7 1.36501 1.0849 200.0 184.3 11,88
20.8 1.36518 1.0853 201.1 185.3 11,96
20.9 1.36534 1.0857 202.2 186.2 12,01
21.0 1.36550 1.0862 203.3 187.2 12,08
21.1 1.36568 1.0866 204.5 188.2 12,15
21.2 1.36585 1.0871 205.7 189.2 12,22
21.3 1.36601 1.0875 206.8 190.2 12,29
21.4 1.36618 1.0880 207.9 191.1 12,35
21.5 1.36635 1.0884 209.1 192.1 12,42
21.6 1.36652 1.0889 210.3 193.1 12,49
21.7 1.36669 1.0893 211.4 194.1 12,56
21.8 1.36685 1.0897 212.5 195.0 12,63
21.9 1.36702 1.0902 213.6 196.0 12,69
22.0 1.36719 1.0906 214.8 196.9 12,76
22.1 1.36736 1.0911 216.0 198.0 12,83
22.2 1.36753 1.0916 217.2 199.0 12,90
22.3 1.36770 1.0920 218.3 199.9 12,97
22.4 1.36787 1.0925 219.5 200.9 13,04
22.5 1.36804 1.0929 220.6 201.8 13,11
22.6 1.36820 1.0933 221.7 202.8 13,17
22.7 1.36837 1.0938 222.9 203.8 13,24
22.8 1.36854 1.0943 224.1 204.8 13,31
22.9 1.36871 1.0947 225.2 205.8 13,38
23.0 1.36888 1.0952 226.4 206.7 13,45
23.1 1.36905 1.0956 227.6 207.7 13,52
23.2 1.36922 1.0961 228.7 208.7 13,59
23.3 1.36939 1.0965 229.9 209.7 13,66
23.4 1.36956 1.0970 231.1 210.7 13,73
23.5 1.36973 1.0975 232.3 211.6 13,80
23.6 1.36991 1.0979 233.4 212.6 13,87
23.7 1.37008 1.0984 234.6 213.6 13,94
23.8 1.37025 1.0988 235.8 214.6 14,01
23.9 1.37042 1.0993 237.0 215.6 14,08
24.0 1.37059 1.0998 238.2 216.6 14,15
24.1 1.37076 1.1007 239.3 217.4 14,22
24.2 1.37093 1.1011 240.3 218.2 14,28
24.3 1.37110 1.1016 241.6 219.4 14,35
24.4 1.37128 1.1022 243.0 220.5 14,44
24.5 1.37145 1.1026 244.0 221.3 14,50
24.6 1.37162 1.1030 245.0 222.1 14,56
24.7 1.37180 1.1035 246.4 223.2 14,64
24.8 1.37197 1.1041 247.7 224.4 14,72
24.9 1.37214 1.1045 248.7 225.2 14,781990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 21
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
25.0 1.37232 1.1049 249.7 226.0 14,84
25.1 1.37249 1.1053 250.7 226.8 14,90
25.2 1.37266 1.1057 251.7 227.6 14,96
25.3 1.37283 1.1062 253.0 228.7 15,03
25.4 1.37300 1.1068 254.4 229.9 15,11
25.5 1.37317 1.1072 255.4 230.7 15,17
25.6 1.37335 1.1076 256.4 231.5 15,23
25.7 1.37353 1.1081 257.8 232.6 15,32
25.8 1.37370 1.1087 259.1 233.7 15,39
25.9 1.37387 1.1091 260.1 234.5 15,45
26.0 1.37405 1.1095 261.1 235.3 15,51
26.1 1.37423 1.1100 262.5 236.4 15,60
26.2 1.37440 1.1106 263.8 237.5 15,67
26.3 1.37457 1.1110 264.8 238.3 15,73
26.4 1.37475 1.1114 265.8 239.2 15,79
26.5 1.37493 1.1119 267.2 240.3 15,88
26.6 1.37510 1.1125 268.5 241.4 15,95
26.7 1.37528 1.1129 269.5 242.2 16,01
26.8 1.37545 1.1133 270.5 243.0 16,07
26.9 1.37562 1.1138 271.8 244.1 16,15
27.0 1.37580 1.1144 273.2 245.2 16,23
27.1 1.37598 1.1148 274.2 246.0 16,29
27.2 1.37615 1.1152 275.2 246.8 16,35
27.3 1.37632 1.1157 276.5 247.9 16,43
27.4 1.37650 1.1163 277.9 249.0 16,51
27.5 1.37667 1.1167 278.9 249.8 16,57
27.6 1.37685 1.1171 279.9 250.6 16,63
27.7 1.37703 1.1176 281.3 251.6 16,71
27.8 1.37721 1.1182 282.6 252.7 16,79
27.9 1.37739 1.1186 283.6 253.5 16,85
28.0 1.37757 1.1190 284.6 254.3 16,91
28.1 1.37775 1.1195 286.0 255.4 16,99
28.2 1.37793 1.1201 287.3 256.5 17,07
28.3 1.37810 1.1205 288.3 257.3 17,13
28.4 1.37828 1.1209 289.3 258.1 17,19
28.5 1.37846 1.1214 290.7 259.2 17,27
28.6 1.37863 1.1220 292.0 260.3 17,35
28.7 1.37881 1.1224 293.0 261.0 17,41
28.8 1.37899 1.1228 294.0 261.8 17,47
28.9 1.37917 1.1233 295.3 262.9 17,55
29.0 1.37935 1.1239 296.7 264.0 17,63
29.1 1.37953 1.1244 298.1 265.1 17,71
29.2 1.37971 1.1250 299.4 266.1 17,79
29.3 1.37988 1.1254 300.4 266.9 17,85
29.4 1.38006 1.1258 301.4 267.7 17,91
29.5 1.38024 1.1263 302.8 268.8 17,99
29.6 1.38042 1.1269 304.1 269.9 18,07
29.7 1.38060 1.1273 305.1 270.6 18,13
29.8 1.38078 1.1277 306.1 271.4 18,19
29.9 1.38096 1.1282 307.4 272.5 18,261990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 22
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
30.0 1.38114 1.1288 308.8 273.6 18,35
30.1 1.38132 1.1293 310.0 274.5 18,42
30.2 1.38150 1.1298 311.2 275.5 18,49
30.3 1.38168 1.1302 312.4 276.4 18,56
30.4 1.38186 1.1307 313.6 277.3 18,63
30.5 1.38204 1.1312 314.8 278.3 18,70
30.6 1.38222 1.1317 316.0 279.2 18,77
30.7 1.38240 1.1322 317.2 280.2 18,85
30.8 1.38258 1.1327 318.4 281.1 18,92
30.9 1.38276 1.1332 319.6 282.0 18,99
31.0 1.38294 1.1336 320.8 283.0 19,06
31.1 1.38312 1.1341 322.0 283.9 19,13
31.2 1.38330 1.1346 323.2 284.9 19,20
31.3 1.38349 1.1351 324.4 285.8 19,27
31.4 1.38367 1.1356 325.6 286.8 19,35
31.5 1.38385 1.1361 326.8 287.7 19,42
31.6 1.38403 1.1366 328.1 288.6 19,49
31.7 1.38421 1.1371 329.3 289.6 19,56
31.8 1.38440 1.1376 330.5 290.5 19,64
31.9 1.38458 1.1380 331.7 291.5 19,71
32.0 1.38476 1.1385 332.9 292.4 19,78
32.1 1.38494 1.1391 334.2 293.4 19,86
32.2 1.38513 1.1396 335.5 294.4 19,93
32.3 1.38531 1.1401 336.7 295.4 20,00
32.4 1.38550 1.1406 338.0 296.4 20,08
32.5 1.38568 1.1411 339.3 297.3 20,16
32.6 1.38586 1.1416 340.6 298.3 20,24
32.7 1.38605 1.1422 341.9 299.3 20,31
32.8 1.38623 1.1427 343.1 300.3 20,38
32.9 1.38642 1.1432 344.4 301.3 20,46
33.0 1.38660 1.1437 345.7 302.3 20,54
33.1 1.38678 1.1442 346.9 303.2 20,61
33.2 1.38697 1.1447 348.1 304.1 20,68
33.3 1.38715 1.1452 349.3 305.0 20,75
33.4 1.38734 1.1457 350.5 305.9 20,82
33.5 1.38753 1.1461 351.7 306.9 20,90
33.6 1.38771 1.1466 352.9 307.8 20,97
33.7 1.38790 1.1471 354.1 308.7 21,04
33.8 1.38808 1.1476 355.3 309.6 21,11
33.9 1.38827 1.1481 356.5 310.5 21,18
34.0 1.38845 1.1486 357.7 311.4 21,25
34.1 1.38864 1.1491 359.0 312.4 21,33
34.2 1.38882 1.1496 360.3 313.4 21,41
34.3 1.38901 1.1501 361.5 314.3 21,48
34.4 1.38919 1.1506 362.8 315.3 21,55
34.5 1.38938 1.1512 364.1 316.3 21,63
34.6 1.38957 1.1517 365.4 317.3 21,71
34.7 1.38975 1.1522 366.7 318.2 21,79
34.8 1.38994 1.1527 367.9 319.2 21,86
34.9 1.39012 1.1532 369.2 320.2 21,941990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 23
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
35.0 1.39031 1.1537 370.5 321.1 22,01
35.1 1.39050 1.1543 371.8 322.1 22,09
35.2 1.39069 1.1548 373.0 323.0 22,16
35.3 1.39087 1.1553 374.3 324.0 22,24
35.4 1.39106 1.1558 375.6 325.0 22,32
35.5 1.39125 1.1563 376,9 325.9 22,39
35.6 1.39144 1.1568 378.1 326.9 22,45
35.7 1.39163 1.1573 379.4 327.8 22,54
35.8 1.39181 1.1579 380.7 328.8 22,62
35.9 1.39200 1.1584 381.9 329.7 22,69
36.0 1.39219 1.1589 383.2 330.7 22,77
36.1 1.39238 1.1594 384.5 331.6 22,85
36.2 1.39257 1.1599 385.8 332.6 22,92
36.3 1.39276 1.1604 387.0 333.5 22,99
36.4 1.39295 1.1610 388.3 334.5 23,07
36.5 1.39314 1.1615 389.6 335.4 23,15
36.6 1.39332 1.1620 390.9 336.4 23,22
36.7 1.39351 1.1625 392.2 337.3 23,30
36.8 1.39370 1.1630 393.4 338.3 23,37
36.9 1.39389 1.1635 394.7 339.2 23,45
37.0 1.39408 1.1641 396.0 340.2 23,53
37.1 1.39427 1.1646 397.3 341.1 23,60
37.2 1.39446 1.1651 398.6 342.1 23,68
37.3 1.39465 1.1656 399.8 343.0 23,75
37.4 1.39484 1.1661 401.1 344.0 23,83
37.5 1.39504 1.1666 402.4 344.9 23,91
37.6 1.39523 1.1672 403.7 345.9 23,99
37.7 1.39542 1.1677 405.0 346.8 24,06
37.8 1.39561 1.1682 406.2 347.7 24,13
37.9 1.39580 1.1687 407.5 348.7 24,21
38.0 1.39599 1.1692 408.8 349.6 24,29
38.1 1.39618 1.1698 410.1 350.6 24,37
38.2 1.39637 1.1703 411.3 351.5 24,44
38.3 1.39657 1.1708 412.6 352.4 24,51
38.4 1.39676 1.1713 413.9 353.4 24,59
38.5 1.39695 1.1718 415.2 354.3 24,67
38.6 1.39714 1.1723 416.4 355.2 24,74
38.7 1.39733 1.1728 417.7 356.1 24,82
38.8 1.39753 1.1733 419.0 357.1 24,90
38.9 1.39772 1.1739 420.2 358.0 24,97
39.0 1.39791 1.1744 421.5 358.9 25,04
39.1 1.39810 1.1749 422.8 359.8 25,12
39.2 1.39830 1.1754 424.1 360.8 25,20
39.3 1.39849 1.1759 425.3 361.7 25,27
39.4 1.39869 1.1764 426.6 362.6 25,35
39.5 1.39888 1.1770 427.9 363.6 25,42
39.6 1.39907 1.1775 429.2 364.5 25,50
39.7 1.39927 1.1780 430.5 365.4 25,58
39.8 1.39946 1.1785 431.7 366.3 25,65
39.9 1.39966 1.1790 433.0 367.3 25,731990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 24
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
40.0 1.39985 1.1796 434.3 368.2 25,80
40.1 1.40004 1.1801 435.6 369.2 25,88
40.2 1.40024 1.1806 437.0 370.1 25,96
40.3 1.40043 1.1812 438.3 371.1 26,04
40.4 1.40063 1.1817 439.7 372.1 26,12
40.5 1.40083 1.1823 441.0 373.0 26,20
40.6 1.40102 1.1828 442.3 374.0 26,28
40.7 1.40122 1.1833 443.7 374.9 26,36
40.8 1.40141 1.1839 445.0 375.9 26,44
40.9 1.40161 1.1844 446.4 376.9 26,52
41.0 1.40180 1.1850 447.7 377.8 26,60
41.1 1.40200 1.1855 449.0 378.7 26,68
41.2 1.40219 1.1860 450.2 379.6 26,75
41.3 1.40239 1.1865 451.5 380.5 26,83
41.4 1.40259 1.1870 452.8 381.4 26,90
41.5 1.40279 1.1875 454.1 382.3 26,98
41.6 1.40298 1.1881 455.3 383.2 27,05
41.7 1.40318 1.1886 456.6 384.2 27,13
41.8 1.40338 1.1891 457.9 385.1 27,21
41.9 1.40357 1.1896 459.1 386.0 27,28
42.0 1.40377 1.1901 460.4 386.9 27,35
42.1 1.40397 1.1907 461.7 387.8 27,43
42.2 1.40417 1.1912 463.1 388.8 27,52
42.3 1.40436 1.1917 464.4 389.7 27,59
42.4 1.40456 1.1923 465.8 390.7 27,68
42.5 1.40476 1.1928 467.2 391.6 27,76
42.6 1.40496 1.1934 468.5 392.6 27,84
42.7 1.40516 1.1939 469.9 393.5 27,92
42.8 1.40535 1.1945 471.2 394.5 28,00
42.9 1.40555 1.1950 472.6 395.4 28,08
43.0 1.40575 1.1956 473.9 396.4 28,16
43.1 1.40595 1.1961 475.2 397.3 28,23
43.2 1.40615 1.1967 476.6 398.3 28,32
43.3 1.40635 1.1972 477.9 399.2 28,40
43.4 1.40655 1.1977 479.3 400.1 28,48
43.5 1.40675 1.1983 480.6 401.1 28,56
43.6 1.40695 1.1988 481.9 402.0 28,63
43.7 1.40715 1.1994 483.3 402.9 28,72
43.8 1.40735 1.1999 484.6 403.9 28,79
43.9 1.40755 1.2005 486.0 404.8 28,88
44.0 1.40775 1.2010 487.3 405.7 28,95
44.1 1.40795 1.2015 488.6 406.7 29,03
44.2 1.40815 1.2021 490.0 407.6 29,11
44.3 1.40836 1.2026 491.3 408.5 29,19
44.4 1.40856 1.2032 492.7 409.5 29,27
44.5 1.40876 1.2037 494.0 410.4 29,35
44.6 1.40896 1.2042 495.3 411.3 29,43
44.7 1.40916 1.2048 496.7 412.3 29,51
44.8 1.40937 1.2053 498.0 413.2 29,59
44.9 1.40957 1.2059 499.4 414.1 29,671990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 25
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
45.0 1.40977 1.2064 500.7 415.0 29,75
45.1 1.40997 1.2070 502.1 416.0 29,83
45.2 1.41018 1.2076 503.5 417.0 29,92
45.3 1.41038 1.2081 504.9 417.9 30,00
45.4 1.41058 1.2087 506.3 418.9 30,08
45.5 1.41079 1.2093 507.8 419.9 30,17
45.6 1.41099 1.2098 509.2 420.9 30,25
45.7 1.41119 1.2104 510.6 421.8 30,34
45.8 1.41139 1.2110 512.0 422.8 30,42
45.9 1.41160 1.2115 513.4 423.7 30,50
46.0 1.41180 1.2121 514.8 424.7 30,59
46.1 1.41200 1.2127 516.1 425.6 30,66
46.2 1.41221 1.2132 517.5 426.5 30,75
46.3 1.41241 1.2137 518.8 427.5 30,82
46.4 1.41262 1.2143 520.2 428.4 30,91
46.5 1.41282 1.2148 521.5 429.3 30,99
46.6 1.41302 1.2154 522.8 430.2 31,06
46.7 1.41323 1.2159 524.2 431.1 31,15
46.8 1.41343 1.2165 525.5 432.0 31,22
46.9 1.41364 1.2170 526.9 432.9 31,31
47.0 1.41384 1.2175 528.2 433.8 31,38
47.1 1.41405 1.2181 529.6 434.8 31,47
47.2 1.41425 1.2187 531.0 435.7 31,55
47.3 1.41446 1.2192 532.4 436.7 31,63
47.4 1.41466 1.2198 533.8 437.6 31,72
47.5 1.41487 1.2204 535.3 438.6 31,81
47.6 1.41508 1.2210 536.7 439.5 31,89
47.7 1.41528 1.2215 538.1 440.5 31,97
47.8 1.41549 1.2221 539.5 441.4 32,05
47.9 1.41569 1.2227 540.9 442.4 32,14
48.0 1.41590 1.2232 542.3 443.3 32,22
48.1 1.41611 1.2238 543.6 444.2 32,30
48.2 1.41632 1.2243 545.0 445.1 32,38
48.3 1.41652 1.2249 546.3 446.0 32,46
48.4 1.41673 1.2254 547.7 446.9 32,59
48.5 1.41694 1.2260 549.1 447.8 32,63
48.6 1.41715 1.2265 550.4 448.7 32,70
48.7 1.41736 1.2271 551.8 449.7 32,79
48.8 1.41756 1.2276 553.1 450.6 32,86
48.9 1.41777 1.2282 554.5 451.4 32,95
49.0 1.41798 1.2287 555.8 452.3 33,02
49.1 1.41819 1.2293 557.2 453.3 33,11
49.2 1.41840 1.2298 558.6 454.2 33,19
49.3 1.41861 1.2304 560.0 455.1 33,27
49.4 1.41882 1.2310 561.4 456.1 33,36
49.5 1.41903 1.2315 562.8 457.0 33,44
49.6 1.41924 1.2321 564.2 457.9 33,52
49.7 1.41945 1.2327 565.6 458.8 33,61
49.8 1.41966 1.2332 567.0 459.8 33,69
49.9 1.41987 1.2338 568.4 460.7 33,771990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 26
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
50.0 1.42008 1.2344 569.8 461.6 33,86
50.1 1.42029 1.2349 571.2 462.5 33,94
50.2 1.42050 1.2355 572.6 463.5 34,02
50.3 1.42071 1.2361 574.0 464.4 34,10
50.4 1.42092 1.2366 575.4 465.3 34,19
50.5 1.42114 1.2372 576.9 466.2 34,28
50.6 1.42135 1.2378 578.3 467.2 34,36
50.7 1.42156 1.2384 579.7 468.1 34,44
50.8 1.42177 1.2389 581.1 469.0 34,53
50.9 1.42198 1.2395 582.5 469.9 34,61
51.0 1.42219 1.2401 583.9 470.9 34,69
51.1 1.42240 1.2407 585.4 471.8 34,78
51.2 1.42261 1.2413 586.9 472.8 34,87
51.3 1.42283 1.2419 588.3 473.8 34,95
51.4 1.42304 1.2425 589.8 474.7 35,04
51.5 1.42325 1.2431 591.3 475.7 35,13
51.6 1.42346 1.2437 592.8 476.6 35,22
51.7 1.42367 1.2443 594.3 477.6 35,31
51.8 1.42389 1.2449 595.7 478.6 35,39
51.9 1.42410 1.2455 597.2 479.5 35,48
52.0 1.42431 1.2461 598.7 480.5 35,57
52.1 1.42452 1.2466 600.1 481.4 35,65
52.2 1.42474 1.2472 601.5 482.3 35,74
52.3 1.42495 1.2478 602.9 483.2 35,82
52.4 1.42517 1.2483 604.3 484.1 35,91
52.5 1.42538 1.2489 605.8 485.0 35,99
52.6 1.42559 1.2495 607.2 485.9 36,08
52.7 1.42581 1.2500 608.6 486.8 36,16
52.8 1.42602 1.2506 610.0 487.7 36,24
52.9 1.42624 1.2512 611.4 488.6 36,33
53.0 1.42645 1.2518 612.8 489.6 36,41
53.1 1.42666 1.2524 614.3 490.5 36,50
53.2 1.42686 1.2530 615.8 491.4 36,59
53.3 1.42707 1.2536 617.2 492.4 36,67
53.4 1.42727 1.2542 618.7 493.3 36,76
53.5 1.42748 1.2548 620.2 494.3 36,85
53.6 1.42769 1.2554 621.7 495.2 36,94
53.7 1.42789 1.2560 623.2 496.2 37,03
53.8 1.42810 1.2566 624.6 497.1 37,11
53.9 1.42830 1.2571 626.1 498.0 37,20
54.0 1.42851 1.2577 627.6 499.0 37,29
54.1 1.42874 1.2583 629.0 499.9 37,37
54.2 1.42897 1.2589 630.4 500.8 37,45
54.3 1.42919 1.2595 631.8 501.7 37,54
54.4 1.42942 1.2600 633.2 502.6 37,62
54.5 1.42965 1.2606 634.7 503.5 37,71
54.6 1.42988 1.2612 636.1 504.3 37,79
54.7 1.43011 1.2617 637.5 505.2 37,88
54.8 1.43033 1.2623 638.9 506.1 37,96
54.9 1.43056 1.2629 640.3 507.0 38,041990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 27
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
55.0 1.43079 1.2635 641.7 507.9 38,11
55.1 1.43101 1.2640 643.2 508.8 38,22
55.2 1.43123 1.2646 644.6 509.7 38,30
55.3 1.43145 1.2652 646.1 510.7 38,39
55.4 1.43167 1.2658 647.6 511.6 38,48
55.5 1.43189 1.2664 649.1 512.5 38,57
55.6 1.43210 1.2670 650.5 513.4 38,65
55.7 1.43232 1.2676 652.0 514.3 38,74
55.8 1.43254 1.2682 653.5 515.3 38,83
55.9 1.43276 1.2688 654.9 516.2 38,91
56.0 1.43298 1.2694 656.4 517.1 39,00
56.1 1.43320 1.2700 657.9 518.0 39,09
56.2 1.43342 1.2706 659.4 518.9 39,18
56.3 1.43364 1.2712 660.8 519.9 39,26
56.4 1.43386 1.2718 662.3 520.8 39,35
56.5 1.43409 1.2724 663.8 521.7 39,44
56.6 1.43431 1.2730 665.3 522.6 39,53
56.7 1.43453 1.2736 666.8 523.5 39,62
56.8 1.43475 1.2742 668.2 524.4 39,70
56.9 1.43497 1.2748 669.7 525.4 39,79
57.0 1.43519 1.2754 671.2 526.3 39,88
57.1 1.43541 1.2760 672.7 527.2 39,97
57.2 1.43563 1.2766 674.3 528.2 40,06
57.3 1.43586 1.2773 675.8 529.1 40,15
57.4 1.43608 1.2779 677.4 530.1 40,25
57.5 1.43630 1.2785 678.9 531.0 40,34
57.6 1.43652 1.2791 680.4 532.0 40,43
57.7 1.43674 1.2797 682.0 532.9 40,52
57.8 1.43697 1.2804 683.5 533.8 40,61
57.9 1.43719 1.2810 685.1 534.8 40,70
58.0 1.43741 1.2816 686.6 535.7 40,80
58.1 1.43763 1.2822 688.1 536.6 40,88
58.2 1.43786 1.2828 689.6 537.5 40,97
58.3 1.43808 1.2834 691.0 538.4 41,06
58.4 1.43831 1.2840 692.5 539.3 41,14
58.5 1.43854 1.2846 694.0 540.2 41,23
58.6 1.43876 1.2852 695.5 541.1 41,32
58.7 1.43899 1.2858 697.0 542.0 41,41
58.8 1.43921 1.2864 698.4 542.9 41,50
58.9 1.43944 1.2870 699.9 543.8 41,58
59.0 1.43966 1.2876 701.4 544.7 41,67
59.1 1.43989 1.2882 702.9 545.7 41,76
59.2 1.44011 1.2888 704.5 546.6 41,86
59.3 1.44034 1.2895 706.0 547.5 41,95
59.4 1.44056 1.2901 707.6 548.5 42,04
59.5 1.44079 1.2907 709.1 549.4 42,13
59.6 1.44102 1.2913 710.6 550.3 42,22
59.7 1.44124 1.2920 712.2 551.2 42,32
59.8 1.44147 1.2926 713.7 552.2 42,41
59.9 1.44169 1.2932 715.3 553.1 42,501990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 28
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
60.0 1.44192 1.2938 716.8 554.0 42,59
60.1 1.44215 1.2944 718.3 554.9 42,68
60.2 1.44237 1.2950 719.8 555.8 42,77
60.3 1.44260 1.2956 721.2 556.7 42,85
60.4 1.44283 1.2962 722.7 557.6 42,94
60.5 1.44306 1.2968 724.2 558.4 43,03
60.6 1.44328 1.2974 725.7 559.3 43,12
60.7 1.44351 1.2980 727.2 560.2 43,21
60.8 1.44374 1.2986 728.6 561.1 43,29
60.9 1.44396 1.2992 730.1 562.0 43,38
61.0 1.44419 1.2998 731.6 562.8 43,47
61.1 1.44442 1.3004 733.1 563.8 43,56
61.2 1.44465 1.3011 734.7 564.7 43,65
61.3 1.44488 1.3017 736.2 565.6 43,74
61.4 1.44511 1.3023 737.8 566.5 43,84
61.5 1.44533 1.3030 739.4 567.4 43,93
61.6 1.44556 1.3036 740.9 568.4 44,02
61.7 1.44579 1.3042 742.5 569.3 44,12
61.8 1.44602 1.3048 744.0 570.2 44,21
61.9 1.44625 1.3055 745.6 571.1 44,30
62.0 1.44648 1.3061 747.1 572.0 44,39
62.1 1.44671 1.3067 748.6 572.9 44,48
62.2 1.44694 1.3073 750.2 573.8 44,57
62.3 1.44717 1.3080 751.7 574.7 44,66
62.4 1.44740 1.3086 753.3 575.6 44,76
62.5 1.44764 1.3092 754.8 576.5 44,85
62.6 1.44787 1.3098 756.3 577.4 44,94
62.7 1.44810 1.3104 757.9 578.3 45,03
62.8 1.44833 1.3111 759.4 579.2 45,12
62.9 1.44856 1.3117 761.0 580.1 45,21
63.0 1.44879 1.3123 762.5 581.0 45,31
63.1 1.44902 1.3130 764.1 582.0 45,40
63.2 1.44926 1.3136 765.7 582.9 45,49
63.3 1.44949 1.3143 767.3 583.8 45,59
63.4 1.44972 1.3149 768.9 584.8 45,69
63.5 1.44996 1.3156 770.6 585.7 45,79
63.6 1.45019 1.3162 772.2 586.6 45,88
63.7 1.45042 1.3169 773.8 587.6 45,98
63.8 1.45065 1.3175 775.4 588.5 46,07
63.9 1.45089 1.3182 777.0 589.4 46,17
64.0 1.45112 1.3188 778.6 590.4 46,26
64.1 1.45135 1.3195 780.1 591.3 46,35
64.2 1.45159 1.3201 781.7 592.1 46,45
64.3 1.45183 1.3207 783.2 593.0 46,53
64.4 1.45206 1.3213 784.8 593.9 46,63
64.5 1.45230 1.3219 786.3 594.8 46,72
64.6 1.45253 1.3226 787.8 595.7 46,81
64.7 1.45276 1.3232 789.4 596.6 46,90
64.8 1.45300 1.3238 790.9 597.5 46,99
64.9 1.45324 1.3244 792.5 598.3 47,091990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 29
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
65.0 1.45347 1.3251 794.0 599.2 47,18
65.1 1.45371 1.3257 795.6 600.1 47,27
65.2 1.45394 1.3264 797.2 601.1 47,37
65.3 1.45418 1.3270 798.8 602.0 47,46
65.4 1.45441 1.3277 800.4 602.9 47,56
65.5 1.45465 1.3283 802.1 603.8 47,66
65.6 1.45489 1.3290 803.7 604.7 47,75
65.7 1.45512 1.3296 805.3 605.6 47,85
65.8 1.45536 1.3303 806.9 606.6 47,94
65.9 1.45559 1.3309 808.5 607.5 48,04
66.0 1.45583 1.3316 810.1 608.4 48,13
66.1 1.45607 1.3322 811.6 609.3 48,22
66.2 1.45630 1.3328 813.2 610.1 48,32
66.3 1.45654 1.3335 814.8 611.0 48,41
66.4 1.45678 1.3341 816.3 611.9 48,50
66.5 1.45702 1.3347 817.9 612.8 48,60
66.6 1.45725 1.3353 819.4 613.6 48,69
66.7 1.45749 1.3360 820.9 614.5 48,77
66.8 1.45773 1.3366 822.5 615.4 48,87
66.9 1.45796 1.3372 824.1 616.2 48,97
67.0 1.45820 1.3378 825.6 617.1 49,05
67.1 1.45844 1.3385 827.2 618.0 49,15
67.2 1.45868 1.3391 828.8 618.9 49,24
67.3 1.45892 1.3398 830.4 619.8 49,34
67.4 1.45916 1.3404 832.0 620.7 49,43
67.5 1.45940 1.3411 833.7 621.6 49,53
67.6 1.45964 1.3418 835.3 622.5 49,63
67.7 1.45988 1.3424 836.9 623.4 49,73
67.8 1.46012 1.3431 838.5 624.3 49,82
67.9 1.46036 1.3437 840.1 625.2 49,92
68.0 1.46060 1.3444 841.7 626.1 50,01
68.1 1.46084 1.3450 843.4 627.0 50,11
68.2 1.46108 1.3457 845.1 628.0 50,21
68.3 1.46132 1.3464 846.7 628.9 50,31
68.4 1.46156 1.3471 848.4 629.8 50,41
68.5 1.46181 1.3478 850.1 630.8 50,51
68.6 1.46205 1.3484 851.8 631.7 50,61
68.7 1.46229 1.3491 853.5 632.6 50,71
68.8 1.46253 1.3498 855.1 633.5 50,81
68.9 1.46277 1.3505 856.8 634.5 50,91
69.0 1.46301 1.3512 858.5 635.4 51,01
69.1 1.46325 1.3518 860.1 636.3 51,10
69.2 1.46350 1.3525 861.7 637.2 51,20
69.3 1.46374 1.3531 863.3 638.0 51,29
69.4 1.46398 1.3538 864.9 638.9 51,39
69.5 1.46423 1.3544 866.6 639.8 51,49
69.6 1.46447 1.3551 868.2 640.7 51,58
69.7 1.46471 1.3557 869.8 641.6 51,68
69.8 1.46495 1.3564 871.4 642.4 51,78
69.9 1.46520 1.3570 873.0 643.3 51,871990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 30
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
70.0 1.46544 1.3577 874.6 644.2 51,97
70.1 1.46568 1.3583 876.2 645.1 52,06
70.2 1.46593 1.3590 877.8 645.9 52,15
70.3 1.46618 1.3596 879.4 646.8 52,25
70.4 1.46642 1.3603 881.0 647.7 52,35
70.5 1.46667 1.3609 882.7 648.6 52,45
70.6 1.46691 1.3616 884.3 649.4 52,54
70.7 1.46715 1.2622 885.9 650.3 52,64
70.8 1.46740 1.3629 887.5 651.2 52,73
70.9 1.46765 1.3635 889.1 652.1 52,83
71.0 1.46789 1.3642 890.7 652.9 52,92
71.1 1.46814 1.3649 892.4 653.8 53,02
71.2 1.46838 1.3655 894.1 654.7 53,12
71.3 1.46863 1.3662 895.7 655.6 53,22
71.4 1.46888 1.3669 897.4 656.5 53,32
71.5 1.46913 1.3676 899.1 657.4 53,42
71.6 1.46937 1.3683 900.8 658.3 53,52
71.7 1.46962 1.3689 902.5 659.2 53,62
71.8 1.46987 1.3696 904.1 660.1 53,72
71.9 1.47011 1.3703 905.8 661.0 53,82
72.0 1.47036 1.3710 907.5 661.9 53,92
72.1 1.47061 1.3717 909.2 662.8 54,02
72.2 1.47086 1.3723 910.8 663.7 54,12
72.3 1.47110 1.3730 912.5 664.6 54,22
72.4 1.47135 1.3737 914.2 665.5 54,32
72.5 1.47160 1.3744 915.9 666.4 54,42
72.6 1.47185 1.3750 917.5 667.3 54,51
72.7 1.47210 1.3757 919.2 668.2 54,62
72.8 1.47234 1.3764 920.9 669.0 54,72
72.9 1.47259 1.3771 922.5 669.9 54,81
73.0 1.47284 1.3777 924.2 670.8 54,91
73.1 1.47309 1.3784 925.9 671.7 55,01
73.2 1.47334 1.3791 927.6 672.6 55,11
73.3 1.47359 1.3798 929.2 673.5 55,21
73.4 1.47384 1.3804 930.9 674.4 55,31
73.5 1.47409 1.3811 932.6 675.2 55,41
73.6 1.47434 1.3818 934.3 676.1 55,51
73.7 1.47459 1.3825 936.0 677.0 55,61
73.8 1.47484 1.3832 937.6 677.9 55,71
73.9 1.47509 1.3838 939.3 678.8 55,81
74.0 1.47534 1.3845 941.0 679.7 55,91
74.1 1.47559 1.3852 942.7 680.5 56,01
74.2 1.47584 1.3859 944.4 681.4 56,11
74.3 1.47609 1.3866 946.0 682.3 56,21
74.4 1.47634 1.3872 947.7 683.2 56,31
74.5 1.47660 1.3879 949.4 684.0 56,41
74.6 1.47685 1.3886 951.1 684.9 56,51
74.7 1.47710 1.3893 952.8 685.8 56,61
74.8 1.47735 1.3900 954.4 686.7 56,71
74.9 1.47760 1.3906 956.1 687.5 56,811990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 31
▼B
TABELLA III
La tabella riporta il tenore zuccherino (1)dei mosti concentrati rettificati in grammi/litro e in
grammi/chilogrammo, determinato per mezzo di un rifrattometro graduato in percentuale in
massa di saccarosio a 20 ºC oppure in indice di rifrazione a 20 ºC. È anche riportata la massa
volumicaa20ºC.
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
50.0 1.42008 1.2342 627.6 508.5 37,28
50.1 1.42029 1.2348 629.3 509.6 37,38
50.2 1.42050 1.2355 630.9 510.6 37,48
50.3 1.42071 1.2362 632.4 511.6 37,56
50.4 1.42092 1.2367 634.1 512.7 37,66
50.5 1.42113 1.2374 635.7 513.7 37,76
50.6 1.42135 1.2381 637.3 514.7 37,85
50.7 1.42156 1.2386 638.7 515.7 37,94
50.8 1.42177 1.2391 640.4 516.8 38,04
50.9 1.42198 1.2396 641.9 517.8 38,13
51.0 1.42219 1.2401 643.4 518.8 38,22
51.1 1.42240 1.2406 645.0 519.9 38,31
51.2 1.42261 1.2411 646.5 520.9 38,40
51.3 1.42282 1.2416 648.1 522.0 38,50
51.4 1.42304 1.2421 649.6 523.0 38,59
51.5 1.42325 1.2427 651.2 524.0 38,68
51.6 1.42347 1.2434 652.9 525.1 38,78
51.7 1.42368 1.2441 654.5 526.1 38,88
51.8 1.42389 1.2447 656.1 527.1 38,97
51.9 1.42410 1.2454 657.8 528.2 39,07
52.0 1.42432 1.2461 659.4 529.2 39,17
52.1 1.42453 1.2466 661.0 530.2 39,26
52.2 1.42475 1.2470 662.5 531.3 39,35
52.3 1.42496 1.2475 664.1 532.3 39,45
52.4 1.42517 1.2480 665.6 533.3 39,54
52.5 1.42538 1.2486 667.2 534.4 39,63
52.6 1.42560 1.2493 668.9 535.4 39,73
52.7 1.42581 1.2500 670.5 536.4 39,83
52.8 1.42603 1.2506 672.2 537.5 39,93
52.9 1.42624 1.2513 673.8 538.5 40,02
53.0 1.42645 1.2520 675.5 539.5 40,12
53.1 1.42667 1.2525 677.1 540.6 40,22
53.2 1.42689 1.2530 678.5 541.5 40,30
53.3 1.42711 1.2535 680.2 542.6 40,40
53.4 1.42733 1.2540 681.8 543.7 40,50
53.5 1.42754 1.2546 683.4 544.7 40,59
53.6 1.42776 1.2553 685.1 545.8 40,69
53.7 1.42797 1.2560 686.7 546.7 40,79
53.8 1.42819 1.2566 688.4 547.8 40,89
53.9 1.42840 1.2573 690.1 548.9 40,99
54.0 1.42861 1.2580 691.7 549.8 41,09
54.1 1.42884 1.2585 693.3 550.9 41,18
54.2 1.42906 1.2590 694.9 551.9 41,28
54.3 1.42927 1.2595 696.5 553.0 41,37
54.4 1.42949 1.2600 698.1 554.0 41,47
54.5 1.42971 1.2606 699.7 555.1 41,56
54.6 1.42993 1.2613 701.4 556.1 41,66
54.7 1.43014 1.2620 703.1 557.1 41,76
54.8 1.43036 1.2625 704.7 558.2 41,86
54.9 1.43058 1.2630 706.2 559.1 41,951990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 32
(1) Il tenore in zucchero è espresso come zucchero invertito.
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
55.0 1.43079 1.2635 707.8 560.2 42,04
55.1 1.43102 1.2639 709.4 561.3 42,14
55.2 1.43124 1.2645 711.0 562.3 42,23
55.3 1.43146 1.2652 712.7 563.3 42,33
55.4 1.43168 1.2659 714.4 564.3 42,44
55.5 1.43189 1.2665 716.1 565.4 42,54
55.6 1.43211 1.2672 717.8 566.4 42,64
55.7 1.43233 1.2679 719.5 567.5 42,74
55.8 1.43255 1.2685 721.1 568.5 42,83
55.9 1.43277 1.2692 722.8 569.5 42,93
56.0 1.43298 1.2699 724.5 570.5 43,04
56.1 1.43321 1.2703 726.1 571.6 43,13
56.2 1.43343 1.2708 727.7 572.6 43,23
56.3 1.43365 1.2713 729.3 573.7 43,32
56.4 1.43387 1.2718 730.9 574.7 43,42
56.5 1.43409 1.2724 732.6 575.8 43,52
56.6 1.43431 1.2731 734.3 576.8 43,62
56.7 1.43454 1.2738 736.0 577.8 43,72
56.8 1.43476 1.2744 737.6 578.8 43,81
56.9 1.43498 1.2751 739.4 579.9 43,92
57.0 1.43519 1.2758 741.1 580.9 44,02
57.1 1.43542 1.2763 742.8 582.0 44,12
57.2 1.43564 1.2768 744.4 583.0 44,22
57.3 1.43586 1.2773 745.9 584.0 44,31
57.4 1.43609 1.2778 747.6 585.1 44,41
57.5 1.43631 1.2784 749.3 586.1 44,51
57.6 1.43653 1.2791 751.0 587.1 44,61
57.7 1.43675 1.2798 752.7 588.1 44,71
57.8 1.43698 1.2804 754.4 589.2 44,81
57.9 1.43720 1.2810 756.1 590.2 44,91
58.0 1.43741 1.2818 757.8 591.2 45,01
58.1 1.43764 1.2822 759.5 592.3 45,11
58.2 1.43784 1.2827 761.1 593.4 45,21
58.3 1.43809 1.2832 762.6 594.3 45,30
58.4 1.43832 1.2837 764.3 595.4 45,40
58.5 1.43854 1.2843 766.0 596.4 45,50
58.6 1.43877 1.2850 767.8 597.5 45,61
58.7 1.43899 1.2857 769.5 598.5 45,71
58.8 1.43922 1.2863 771.1 599.5 45,80
58.9 1.43944 1.2869 772.9 600.6 45,91
59.0 1.43966 1.2876 774.6 601.6 46,01
59.1 1.43988 1.2882 776.3 602.6 46,11
59.2 1.44011 1.2889 778.1 603.7 46,22
59.3 1.44034 1.2896 779.8 604.7 46,32
59.4 1.44057 1.2902 781.6 605.8 46,43
59.5 1.44079 1.2909 783.3 606.8 46,53
59.6 1.44102 1.2916 785.2 607.9 46,64
59.7 1.44124 1.2921 786.8 608.9 46,74
59.8 1.44147 1.2926 788.4 609.9 46,83
59.9 1.44169 1.2931 790.0 610.9 46,931990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 33
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
60.0 1.44192 1.2936 791.7 612.0 47,03
60.1 1.44215 1.2942 793.3 613.0 47,12
60.2 1.44238 1.2949 795.2 614.1 47,23
60.3 1.44260 1.2956 796.9 615.1 47,34
60.4 1.44283 1.2962 798.6 616.1 47,44
60.5 1.44305 1.2969 800.5 617.2 47,55
60.6 1.44328 1.2976 802.2 618.2 47,65
60.7 1.44351 1.2981 803.9 619.3 47,75
60.8 1.44374 1.2986 805.5 620.3 47,85
60.9 1.44397 1.2991 807.1 621.3 47,94
61.0 1.44419 1.2996 808.7 622.3 48,04
61.1 1.44442 1.3002 810.5 623.4 48,14
61.2 1.44465 1.3009 812.3 624.4 48,25
61.3 1.44488 1.3016 814.2 625.5 48,36
61.4 1.44511 1.3022 815.8 626.5 48,46
61.5 1.44534 1.3029 817.7 627.6 48,57
61.6 1.44557 1.3036 819.4 628.6 48,67
61.7 1.44580 1.3042 821.3 629.7 48,79
61.8 1.44603 1.3049 823.0 630.7 48,89
61.9 1.44626 1.3056 824.8 631.7 48,99
62.0 1.44648 1.3062 826.6 632.8 49,10
62.1 1.44672 1.3068 828.3 633.8 49,20
62.2 1.44695 1.3075 830.0 634.8 49,30
62.3 1.44718 1.3080 831.8 635.9 49,40
62.4 1.44741 1.3085 833.4 636.9 49,50
62.5 1.44764 1.3090 835.1 638.0 49,60
62.6 1.44787 1.3095 836.8 639.0 49,71
62.7 1.44810 1.3101 838.5 640.0 49,81
62.8 1.44833 1.3108 840.2 641.0 49,91
62.9 1.44856 1.3115 842.1 642.1 50,02
63.0 1.44879 1.3121 843.8 643.1 50,12
63.1 1.44902 1.3128 845.7 644.2 50,23
63.2 1.44926 1.3135 847.5 645.2 50,34
63.3 1.44949 1.3141 849.3 646.3 50,45
63.4 1.44972 1.3148 851.1 647.3 50,56
63.5 1.44995 1.3155 853.0 648.4 50,67
63.6 1.45019 1.3161 854.7 649.4 50,77
63.7 1.45042 1.3168 856.5 650.4 50,88
63.8 1.45065 1.3175 858.4 651.5 50,99
63.9 1.45088 1.3180 860.0 652.5 51,08
64.0 1.45112 1.3185 861.6 653.5 51,18
64.1 1.45135 1.3190 863.4 654.6 51,29
64.2 1.45158 1.3195 865.1 655.6 51,39
64.3 1.45181 1.3201 866.9 656.7 51,49
64.4 1.45205 1.3208 868.7 657.7 51,60
64.5 1.45228 1.3215 870.6 658.8 51,71
64.6 1.45252 1.3221 872.3 659.8 51,81
64.7 1.45275 1.3228 874.1 660.8 51,92
64.8 1.45299 1.3235 876.0 661.9 52,03
64.9 1.45322 1.3241 877.8 662.9 52,141990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 34
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
65.0 1.45347 1.3248 879.7 664.0 52,25
65.1 1.45369 1.3255 881.5 665.0 52,36
65.2 1.45393 1.3261 883.2 666.0 52,46
65.3 1.45416 1.3268 885.0 667.0 52,57
65.4 1.45440 1.3275 886.9 668.1 52,68
65.5 1.45463 1.3281 888.8 669.2 52,79
65.6 1.45487 1.3288 890.6 670.2 52,90
65.7 1.45510 1.3295 892.4 671.2 53,01
65.8 1.45534 1.3301 894.2 672.3 53,12
65.9 1.45557 1.3308 896.0 673.3 53,22
66.0 1.45583 1.3315 898.0 674.4 53,34
66.1 1.45605 1.3320 899.6 675.4 53,44
66.2 1.45629 1.3325 901.3 676.4 53,54
66.3 1.45652 1.3330 903.1 677.5 53,64
66.4 1.45676 1.3335 904.8 678.5 53,75
66.5 1.45700 1.3341 906.7 679.6 53,86
66.6 1.45724 1.3348 908.5 680.6 53,96
66.7 1.45747 1.3355 910.4 681.7 54,08
66.8 1.45771 1.3361 912.2 682.7 54,18
66.9 1.45795 1.3367 913.9 683.7 54,29
67.0 1.45820 1.3374 915.9 684.8 54,40
67.1 1.45843 1.3380 917.6 685.8 54,51
67.2 1.45867 1.3387 919.6 686.9 54,62
67.3 1.45890 1.3395 921.4 687.9 54,73
67.4 1.45914 1.3400 923.1 688.9 54,83
67.5 1.45938 1.3407 925.1 690.0 54,95
67.6 1.45962 1.3415 927.0 691.0 55,06
67.7 1.45986 1.3420 928.8 692.1 55,17
67.8 1.46010 1.3427 930.6 693.1 55,28
67.9 1.46034 1.3434 932.6 694.2 55,40
68.0 1.46060 1.3440 934.4 695.2 55,50
68.1 1.46082 1.3447 936.2 696.2 55,61
68.2 1.46106 1.3454 938.0 697.2 55,72
68.3 1.46130 1.3460 939.9 698.3 55,83
68.4 1.46154 1.3466 941.8 699.4 55,94
68.5 1.46178 1.3473 943.7 700.4 56,06
68.6 1.46202 1.3479 945.4 701.4 56,16
68.7 1.46226 1.3486 947.4 702.5 56,28
68.8 1.46251 1.3493 949.2 703.5 56,38
68.9 1.46275 1.3499 951.1 704.6 56,50
69.0 1.46301 1.3506 953.0 705.6 56,61
69.1 1.46323 1.3513 954.8 706.6 56,72
69.2 1.46347 1.3519 956.7 707.7 56,83
69.3 1.46371 1.3526 958.6 708.7 56,94
69.4 1.46396 1.3533 960.6 709.8 57,06
69.5 1.46420 1.3539 962.4 710.8 57,17
69.6 1.46444 1.3546 964.3 711.9 57,28
69.7 1.46468 1.3553 966.2 712.9 57,39
69.8 1.46493 1.3560 968.2 714.0 57,51
69.9 1.46517 1.3566 970.0 715.0 57,621990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 35
▼B
Saccarosio
% (m/m)Indice di
rifrazione a 20
ºCMassa volumica
a20 ºCZucchero in
g/lZucchero in
g/kgTitolo
alcolometrico
% vol. a20 ºC
70.0 1.46544 1.3573 971.8 716.0 57,72
70.1 1.46565 1.3579 973.8 717.1 57,84
70.2 1.46590 1.3586 975.6 718.1 57,95
70.3 1.46614 1.3593 977.6 719.2 58,07
70.4 1.46639 1.3599 979.4 720.2 58,18
70.5 1.46663 1.3606 981.3 721.2 58,29
70.6 1.46688 1.3613 983.3 722.3 58,41
70.7 1.46712 1.3619 985.2 723.4 58,52
70.8 1.46737 1.3626 987.1 724.4 58,63
70.9 1.46761 1.3633 988.9 725.4 58,74
71.0 1.46789 1.3639 990.9 726.5 58,86
71.1 1.46810 1.3646 992.8 727.5 58,97
71.2 1.46835 1.3653 994.8 728.6 59,09
71.3 1.46859 1.3659 996.6 729.6 59,20
71.4 1.46884 1.3665 998.5 730.7 59,31
71.5 1.46908 1.3672 1 000.4 731.7 59,42
71.6 1.46933 1.3678 1 002.2 732.7 59,53
71.7 1.46957 1.3685 1 004.2 733.8 59,65
71.8 1.46982 1.3692 1 006.1 734.8 59,76
71.9 1.47007 1.3698 1 008.0 735.9 59,88
72.0 1.47036 1.3705 1 009.9 736.9 59,99
72.1 1.47056 1.3712 1 012.0 738.0 60,11
72.2 1.47081 1.3718 1 013.8 739.0 60,22
72.3 1.47106 1.3725 1 015.7 740.0 60,33
72.4 1.47131 1.3732 1 017.7 741.1 60,45
72.5 1.47155 1.3738 1 019.5 742.1 60,56
72.6 1.47180 1.3745 1 021.5 743.2 60,68
72.7 1.47205 1.3752 1 023.4 744.2 60,79
72.8 1.47230 1.3758 1 025.4 745.3 60,91
72.9 1.47254 1.3765 1 027.3 746.3 61,02
73.0 1.47284 1.3772 1 029.3 747.4 61,14
73.1 1.47304 1.3778 1 031.2 748.4 61,25
73.2 1.47329 1.3785 1 033.2 749.5 61,37
73.3 1.47354 1.3792 1 035.1 750.5 61,48
73.4 1.47379 1.3798 1 037.1 751.6 61,60
73.5 1.47404 1.3805 1 039.0 752.6 61,72
73.6 1.47429 1.3812 1 040.9 753.6 61,83
73.7 1.47454 1.3818 1 042.8 754.7 61,94
73.8 1.47479 1.3825 1 044.8 755.7 62,06
73.9 1.47504 1.3832 1 046.8 756.8 62,18
74.0 1.47534 1.3838 1 048.6 757.8 62,28
74.1 1.47554 1.3845 1 050.7 758.9 62,41
74.2 1.47579 1.3852 1 052.6 759.9 62,52
74.3 1.47604 1.3858 1 054.6 761.0 62,64
74.4 1.47629 1.3865 1 056.5 762.0 62,76
74.5 1.47654 1.3871 1 058.5 763.1 62,87
74.6 1.47679 1.3878 1 060.4 764.1 62,99
74.7 1.47704 1.3885 1 062.3 765.1 63,10
74.8 1.47730 1.3892 1 064.4 766.2 63,23
74.9 1.47755 1.3898 1 066.3 767.2 63,33
75.0 1.47785 1.3905 1 068.3 768.3 63,461990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 36
▼B
3.TITOLOALCOLOMETRICOVOLUMICO
1. DEFINIZIONE
Il titolo alcolometrico volumico è uguale al numero di litri di etanolo
contenuti in 100 l di vino. Detti volumi si intendono misurati alla
temperatura di 20 ºC. Il simbolo è «% vol».
Osservazione:
Nel titolo alcolometrico oltre all'etanolo sono compresi i suoi
omologhi e gli esteri etilici che passano nel distillato.
2. PRINCIPIO DEI METODI2.1.Distillazione del vino alcalinizzato con una sospensione di idro-
ssidodicalcio
Determinazione del titolo alcolometrico del distillato.
2.2.Metodo di riferimento: determinazione della massa volumica del
distillato mediante picnometria.
2.3.Metodiusuali
2.3.1. Determinazione del titolo alcolometrico del distillato per aerometria
2.3.2. Determinazione del titolo alcolometrico del distillato per densime-
tria mediante bilancia idrostatica
2.3.3. Determinazione del titolo alcolometrico del distillato mediante
rifrattometria
Nota:Per esprimere il titolo alcolometrico partendo dalla massa volumica
del distillato, utilizzare le tabelle pratiche I, II e III riportate nell'al-
legato II del presente capitolo. Queste sono state calcolate a partire
dalla tabella alcolometrica internazionale pubblicata nel 1972
dall'Organizzazione internazionale di metrologia legale nella racco-
mandazione n. 22 ed adottata dall'OIV (assemblea generale del
1974). Nella tabella I è riportata l'equazione generale che correla il
titolo alcolometrico volumico e la massa volumica delle miscele
idroalcoliche in funzione della temperatura.
3. DISTILLAZIONE3.1.Apparecchiatura
3.1.1. Apparecchio di distillazione costituito da:
— un pallone da 1 litro a smerigliatura normalizzata;
— una colonna di rettifica alta circa 20 cm o qualsiasi altro disposi-
tivo atto ad impedire il traseinamento;
— unasorgente di ca lore; occorre prevedere un opportuno disposi-
tivo che impedisca la pirogenazione delle sostanze che
compongono l'estratto;
— un refrigerante terminante con un tubo affilato che porti il distil-
lato nel fondo del pallone di raccolta tarato contenente alcunimillilitri di acqua.
3.1.2. Dispositivo per l'estrazione in corrente di vapore costituita da:
1. un generatore di vapore d'acqua;
2. un gorgogliatore;
3. unacolonnadi rettifica ;
4. un refrigerante.
Si può utilizzare qualunque modello di apparecchio di distillazione o
di apparecchio di estrazione in corrente di vapore d'acqua a condi-
zione che rispondano al saggio seguente: distillare 5 volte di
seguito una miscela idroalcolica a 10 % vol. Dopo l'ultima distilla-
zione, il distillato deve presentare un titolo alcolometrico di almeno
9,9 % vol, vale a dire che nel corso di ciascuna distillazione non si
deve perdere una quantità di alcool superiore a 0,02 % vol.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 37
▼B
3.2.Reattivi
3.2.1. Sospensione di idrossido di calcio 2 M
Si ottiene versando con cautela 1 l di acqua calda (60-70 ºC) su 120
g di calce viva CaO.
3.3.Preparazione delcampione
I vini giovani o i vini spumanti devono essere preliminarmente
privati della maggior parte del biossido di carbonio agitando 250-
300 ml di vino in un pallone di 500 ml.
3.4.Mododioperare
Prelevare mediante un pallone tarato 200 ml di vino.Annotare la sua temperatura.
Versarli nel pallone dell'apparecchiatura di distillazione o nel gorgo-
gliatore dell'apparecchio di estrazione in corrente di vapore d'acqua.
Risciacquare quattro volte il pallone tarato con 5 ml di acqua che si
aggiunge nel pallone o nel gorgogliatore. Aggiungere 10 ml di idro-
ssido di calcio (3.2.1) ed alcuni frammenti di materiale poroso inerte
(pietra pomice) nel caso della distillazione.
Raccogliere il distillato nel pallone tarato da 200 ml che è stato
utilizzato per misurare il vino.
Raccogliere, nel caso della distillazione, un volume uguale ai tre
quarti circa del volume iniziale mentre, nel caso dell'estrazione in
vapore d'acqua, raccogliere 198-199 ml di distillato. Portare a 200
millilitri con acqua distillata a una temperatura uguale a quella
iniziale, con l'approssimazione di ± 2 ºC.
Mescolare con cautela.
Avvertenza
Nel caso di vini particolarmente ricchi di ioni ammoniacali, ridistil-
lare eventualmente il distillato nelle condizioni descritte
precedentemente sostituendo lasospensione di idrossido di ca lcio
con 1 ml di acido solforico al 10 % (v/v).
4. METODO DI RIFERIMENTO:
Determinazione del titolo alcolometrico del distillato per picnome-
tria.
4.1.Apparecchiatura
4.1.1. Utilizzare il picnometro tarato come riportato al capitolo «massa
volumica».
4.2.Mododioperare
Effettuare la determinazione della massa volumica apparente del
distillato (3.4) a t ºC come indicato nel capitolo 1 «Massa volumica»
ai punti 4.3.1 e 4.3.2; sia ρ
tº Ctale massa volumica.
4.3.Espressionedeirisultati
4.3.1. Modo di calcolare
Esprimere il titolo alcolometrico a 20 ºC mediante la tabella I. Nella
tabella cercare sulla linea orizzontale corrispondente alla temperatura
T intera immediatamente inferiore a tº la più piccola massa volumica
superiore a ρt. Utilizzare la differenza tabulare letta sotto tale massa
volumica per calcolare la massa volumica ρalla temperatura intera
considerata T.
Sulla riga di detta temperatura T, dalla massa volumica ρ′della
tabella immediatamente superiore a ρsi sottrae la massa volumica
calcolata. Questa differenza va divisa per la differenza tabulare letta
adestradellama ssavolumica ρ′. Il quoziente dà la parte decimale
del titolo alcolometrico, mentre la parte del grado stesso è indicata
in testa alla colonna ove figura la massa volumica ρ′.
Nell'allegato del presente capitolo è illustrato un esempio di calcolo
del titolo alcolometrico.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 38
▼B
Avvertenza
Per tale correzione di temperatura, è stato elaborato un programma
di calcolo che consente eventualmente di effettuarla automatica-
mente.
4.3.2. Ripetibilità (r):
r = 0,10 % vol
4.3.3. Riproducibilità (R):
R = 0,19 % vol
5. METODI USUALI
5.1.Areometria
5.1.1. Apparecchiatura
5.1.1.1. Alcolometro
L'alcolometro deve rispondere alle specifiche per gli apparecchi
della classe I o della classe II definite nella raccomandazione inter-
nazionale n. 44 «Alcolometri e areometri per l'alcole» dell'OIML(Organizzazione internazionale di metrologia legale).
5.1.1.2. Termometro graduato in gradi e decimi di grado da 0 a 40 ºC,
controllato con l'approssimazione di 1/20 di grado.
5.1.1.3. Cilindro di 36 mm di diametro e 320 mm di altezza tenuto vertical-
mente mediante un supporto con viti calanti.
5.1.2. Modo di operare
Versare il distillato (3.4) nel cilindro che va tenuto bene in posizione
verticale. Introdurre il termometro e l'alcolometro. Effettuare la
lettura della temperatura un minuto dopo aver agitato per ottenere
uniformità di temperatura tra il cilindro, il termometro, l'alcolometro
e il distillato.
Estrarre il termometro e leggere il titolo alcolometrico apparente
dopo un minuto di riposo. Effettuare almeno tre letture con l'ausilio
di una lente d'ingrandimento. Il titolo apparente misurato a t ºC sarà
corretto dell'influenza della temperatura mediante la tabella II.
È necessario che la tempertura del liquido sia poco diversa dalla
temperatura ambiente (al massimo 5 ºC di differenza).
5.2.Densimetriamediantebilanciaidrostatica
5.2.1. Apparecchiatura
Utilizzare la bilancia idrostatica come indicato al capitolo «Massa
volumica».
5.2.2. Modo di operare
Procedere alla determinazione della massa volumica apparente a t ºC
del distillato come indicato al capitolo 1 «Massa volumica» al punto
5.2.2.
5.2.3. Espressione dei risultati
Esprimere il titolo alcolometrico a 20 ºC seguendo le indicazioni
riportate al punto 4.3.1 per mezzo della tabella I, se il galleggiante
è di pirex, o della tabella III se il galleggiante è di vetro ordinario.
5.3.Rifrattometria
5.3.1. Apparecchiatura
5.3.1.1. Rifrattometro atto a misurare gli indici di rifrazione compresi tra
1,330 e 1,346.
A seconda del tipo di apparecchio, le misure vanno fatte:
— a 20 ºC, mediante l'uso di un dispositivo appropriato;
— oppure alla temperatura ambiente t ºC misurata per mezzo di un
termometro con precisione di almeno 0,05 ºC. L'apparecchio
deve essere corredato di una tabella di correzione della tempera-
tura.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 39
▼B
5.3.2. Modo di operare
Effettuare la misura dell'indice di rifrazione sul distillato di vino
(3.4) seguendo il modo di operare previsto per il tipo di apparecchio
utilizzato.
5.3.3. Espressione dei risultati
La tabella IV riporta il titolo alcolometrico corrispondente all'indice
di rifrazione a 20 ºC.
Osservazione
La tabella IV dà la corrispondenza tra gli indici di rifrazione delle
miscele idroalcoliche pure e quelle dei distillati di vino. Nel caso
dei distillati di vino essa tiene conto delle impurezze del distillato
(in prevalenza alcoli superiori). La presenza di metanolo provoca
una diminuzione dell'indice di rifrazione e quindi del titolo alcolo-
metrico.
6. ESEMPIO DI CALCOLO DEL TITOLO ALCOLOMETRICO DI
UN VINO
6.1.Picnometria subilanciaaduepiatti
6.1.1. Le costanti del picnometro sono state determinate e calcolate come
indicato al capitolo 1 «Massa volumica e densità relativa» (6.1.1).
6.1.2. Pesata del picnometro pieno di distillato
Esempio numerico
Tara = picnometro + distillato a t ºC + p ″/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146t ºC = 18,90 ºC
t ºC corretto = 18,70 ºC
p″ = 2,8074 g
p+m−p ″= massa del distillato a t ºC 105,0698 − 2,8074 = 102,2624 g
Massa volumica apparente a t ºC
ρ
t¼pþm/C0p00
volume del picnometro a20 ºC/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C146ρ
18;70 ºC¼102 ;2624
104 ;0229¼0;983076
6.1.3. Calcolo del titolo alcolometrico
Riferirsi alla tabella delle masse volu-
miche apparenti delle miscele idro-alco-
liche adiverse tempera ture, come
indicato precedentemente/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146Sulla riga 18 ºC della tabella delle masse
volumiche apparenti, la più piccola massa
superiore alla massa osservata 0,983076 è
0,98398, nellacolonna11 %.
Lama ssavolumicaa18 ºC è:
(98307,6 + 0,7 × 22) 10
−5= 0,98323
0,98398 − 0,98323 = 0,00075.
La parte decimale del titolo alcolometrico
è 75/114 = 0,65.
Il titolo alcolometrico è:
11,65 % vol.
6.2.Picnometria subilanciamonopiatto
6.2.1. Le costanti del picnometro sono state determinate e calcolate al capi-
tolo 1 «Massa volumica e densità relativa» (6.2.1).
6.2.2. Pesata del picnometro pieno di distillato
Peso del pallone tara al momento
della determinazione (in grammi): T1= 171,9178
Picnometro pieno di distillato a 20,50
ºC (in grammi): P2= 167,84381990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 40
▼B
Variazione della spinta dell'aria: dT = 171,9178 − 171,9160
= + 0,0018
Massa del distillato a 20,50 ºC: Lt= 167,8438 − (67,6695 + 0,0018)
= 100,1725
Massa volumica apparente del distil-
lato ρ20;50 ºC¼100 ;1725
101 ;8194¼0;983825
6.2.3. Calcolo del titolo alcolometrico
Riferirsi alla tabella delle masse volu-
miche apparenti delle miscele idro-alco-
liche adiverse tempera ture, come
indicato precedentemente/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C146Sulla riga 20 ºC della tabella delle masse
volumiche apparenti, la più piccola massa
superiore alla massa osservata 0,983825 è
0,98471, nellacolonna10 %.
Lama ssavolumicaa20 ºC è:
(98382,5 + 0,50 × 24) 10
−5= 0,983945
0,98471 − 0,983945 = 0,000765.
La parte decimale del titolo alcolometrico
è 76,5/119 = 0,64.
Il titolo alcolometrico è:
10,64 % vol.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 41
▼B
FORMULA PER IL CALCOLO DELLE TABELLE ALCOLOMETRICHE
DELLE MISCELE DI ALCOLE ETILICO ED ACQUA
Lama ssavolumica« ρ», espressain chilogra mmi per metro cubo (kg/m3), di una
miscela di alcole etilico e di acqua alla temperatura t, espressa in gradi Celsius,
è data dalla formula seguente in funzione:
— del titolo massico p espresso con un numero decimale (1);
— della temperatura t espressa in gradi Celsius (E.I.P.T. 68);
— dei coefficienti numerici riportati di seguito.
La formula è valida per le temperature comprese tra − 20 ºC e + 40 ºC.
Coefficienti numerici dellaformula
kAk
kg/m3Bk
1 9,982 012 300 · 102− 2,061 851 3 · 10−1kg/(m3· ºC)
2 − 1,929 769 495 · 102− 5,268 254 2 · 10−3kg/(m3·º C2)
3 3,891 238 958 · 1023,613 001 3 · 10−5kg/(m3·º C3)
4 − 1,668 103 923 · 103− 3,895 770 2 · 10−7kg/(m3·º C4)
5 1,352 215 441 · 1047,169 354 0 · 10−9kg/(m3·º C5)
6 − 8,829 278 388 · 104− 9,973 923 1 · 10−11kg/(m3·º C6)
7 3,062 874 042 · 105
8 − 6,138 381 234 · 105
9 7,470 172 998 · 105
10 − 5,478 461 354 · 105
11 2,234 460 334 · 105
12 − 3,903 285 426 · 104
kC1,k
kg/(m3· ºC)C2,k
kg/(m3·º C2)
1 1,693 443 461 530 087 · 10−1− 1,193 013 005 057 010 · 10−2
2 − 1,046 914 743 455 169 · 1012,517 399 633 803 461 · 10−1
3 7,196 353 469 546 523 · 101− 2,170 575 700 536 993
4 − 7,047 478 054 272 792 · 1021,353 034 988 843 029 · 101
5 3,924 090 430 035 045 · 103− 5,029 988 758 547 014 · 101
6 − 1,210 164 659 068 747 · 1041,096 355 666 577 570 · 102
7 2,248 646 550 400 788 · 104− 1,422 753 946 421 155 · 102
8 − 2,605 562 982 188 164 · 1041,080 435 942 856 230 · 102
9 1,852 373 922 069 467 · 104− 4,414 153 236 817 392 · 101
10 − 7,420 201 433 430 137 · 1037,442 971 530 188 783
11 1,285 617 841 998 974 · 103
kC3,k
kg/(m3·º C3)C4,k
kg/(m3·º C4)C5,k
kg/(m3·º C5)
1 − 6,802 995 733 503 803 · 10−44,075 376 675 622 027 · 10−6− 2,788 074 354 782 409 · 10−8
2 1,876 837 790 289 664 · 10−2− 8,763 058 573 471 110 · 10−61,345 612 883 493 354 · 10−8
3 − 2,002 561 813 734 156 · 10−16,515 031 360 099 368 · 10−6
4 1,022 992 966 719 220 − 1,515 784 836 987 210 · 10−6
5 − 2,895 696 483 903 638
6 4,810 060 584 300 675
7 − 4,672 147 440 794 683
8 2,458 043 105 903 461
9 − 5,411 227 621 436 812 · 10−11990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 42
(1) Esempio: per un titolo massico del 12 %: p = 0,12.
▼B
TABELLA
TITOLO ALCOLOMETRICO INTERNAZIONALE A 20 ºC
Tabelladellemassevolumicheapparentidimisceleidroalcoliche misurateconpicnometroinvetropyrex
Massevolumicheatºcorrette dellaspintadell'aria
tºTitolo alcolometrico volumico in %
01234567891 0 1 1
0º 999,64 1,50 998,14 1,44 996,70 1,40 995,30 1,35 993,95 1,30 992,65 1,24 991,41 1,19 990,22 1,14 989,08 1,10 987,98 1,05 986,93 1,00 985,93 0,95
−0,07 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02 −0,01
1º 999,71 1,51 998,20 1,44 996,76 1,40 995,36 1,35 994,01 1,30 992,71 1,24 991,47 1,20 990,27 1,15 989,12 1,11 988,01 1,06 986,95 1,01 985,94 0,97
−0,05 −0,05 −0,04 −0,04 −0,04 −0,04 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,01 0,00
2º 999,76 1,51 998,25 1,45 996,80 1,40 995,40 1,35 994,05 1,30 992,75 1,25 991,50 1,20 990,30 1,16 989,14 1,11 988,03 1,07 986,96 1,02 985,94 0,98
−0,03 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 −0,01 0,00 0,01 0,02
3º 999,79 1,51 998,28 1,45 996,83 1,41 995,42 1,35 994,07 1,30 992,77 1,25 991,52 1,21 990,31 1,16 989,15 1,12 988,03 1,08 986,95 1,03 985,92 1,00
−0,02 −0,02 −0,01 −0,02 −0,01 −0,01 0,00 0,00 0,01 0,02 0,03 0,04
4º 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,36 994,08 1,30 992,78 1,26 991,52 1,21 990,31 1,17 989,14 1,13 988,01 1,09 986,92 1,04 985,88 1,00
0,00 0,00 0,00 0,00 0,01 0,02 0,02 0,02 0,02 0,03 0,04 0,05
5º 999,81 1,51 998,30 1,46 996,84 1,40 995,44 1,37 994,07 1,31 992,76 1,26 991,50 1,21 990,29 1,17 989,12 1,14 987,98 1,10 986,88 1,05 985,83 1,01
0,01 0,01 0,01 0,02 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,05 0,05 0,06
6º 999,80 1,51 998,29 1,46 996,83 1,41 995,42 1,36 994,06 1,32 992,74 1,27 991,47 1,22 990,25 1,18 989,07 1,14 987,93 1,10 986,83 1,06 985,77 1,03
0,03 0,03 0,03 0,03 0,04 0,04 0,04 0,05 0,06 0,07 0,08 0,09
7º 999,77 1,51 998,26 1,46 996,80 1,41 995,39 1,37 994,02 1,32 992,70 1,27 991,43 1,23 990,20 1,19 989,01 1,15 987,86 1,11 986,75 1,07 985,68 1,03
0,05 0,04 0,04 0,05 0,05 0,05 0,05 0,06 0,06 0,07 0,08 0,09
8º 999,72 1,50 998,22 1,46 996,76 1,42 995,34 1,37 993,97 1,32 992,65 1,27 991,38 1,24 990,14 1,19 988,95 1,16 987,79 1,12 986,67 1,08 985,59 1,05
0,05 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,07 0,07 0,08 0,09 0,10 0,11
9º 999,67 1,51 998,16 1,46 996,70 1,42 995,28 1,37 993,91 1,32 992,59 1,28 991,31 1,24 990,07 1,20 988,87 1,17 987,70 1,13 986,57 1,09 985,48 1,06
0,07 0,07 0,07 0,07 0,07 0,08 0,08 0,09 0,09 0,10 0,11 0,12
10º 999,60 1,51 998,09 1,46 996,63 1,42 995,21 1,37 993,84 1,33 992,51 1,28 991,23 1,25 989,98 1,20 988,78 1,17 987,60 1,14 986,46 1,10 985,36 1,06
0,09 0,09 0,09 0,08 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,12 0,13
11º 999,51 1,51 998,00 1,46 996,54 1,41 995,13 1,38 993,75 1,33 992,42 1,29 991,13 1,25 989,88 1,21 988,67 1,18 987,49 1,15 986,34 1,11 985,23 1,07
0,10 0,09 0,09 0,10 0,10 0,11 0,11 0,11 0,12 0,13 0,13 0,14
12º 999,41 1,50 997,91 1,46 996,45 1,42 995,03 1,38 993,65 1,34 992,31 1,29 991,02 1,25 989,77 1,22 988,55 1,19 987,36 1,15 986,21 1,12 985,09 1,09
0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,11 0,12 0,12 0,13 0,14 0,15 0,16
13º 999,30 1,50 997,80 1,46 996,34 1,42 994,92 1,38 993,54 1,34 992,20 1,30 990,90 1,25 989,65 1,23 988,42 1,20 987,22 1,16 986,06 1,13 984,93 1,09
0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16
14º 999,18 1,50 997,68 1,46 996,22 1,43 994,79 1,38 993,41 1,34 992,07 1,30 990,77 1,26 989,51 1,23 988,28 1,21 987,07 1,17 985,90 1,13 984,77 1,11
0,13 0,14 0,14 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,16 0,17 0,18
15º 999,05 1,51 997,54 1,46 996,08 1,42 994,66 1,38 993,28 1,35 991,93 1,30 990,63 1,27 989,36 1,24 988,12 1,21 986,91 1,18 985,73 1,14 984,59 1,12
0,15 0,14 0,14 0,15 0,15 0,15 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,19
16º 998,90 1,50 997,40 1,46 995,94 1,43 994,51 1,38 993,13 1,35 991,78 1,31 990,47 1,27 989,20 1,25 987,95 1,21 986,74 1,19 985,55 1,15 984,40 1,13
0,16 0,16 0,16 0,16 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,19 0,20
17º 998,74 1,50 997,24 1,46 995,78 1,43 994,35 1,38 992,97 1,36 991,61 1,31 990,30 1,28 989,02 1,25 987,77 1,22 986,55 1,19 985,36 1,16 984,20 1,14
0,17 0,17 0,17 0,16 0,17 0,17 0,18 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22
18º 998,57 1,50 997,07 1,46 995,61 1,42 994,19 1,39 992,80 1,36 991,44 1,32 990,12 1,28 988,84 1,26 987,58 1,23 986,35 1,20 985,15 1,17 983,98 1,14
0,18 0,18 0,18 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,20 0,21 0,22
19º 998,39 1,50 996,89 1,46 995,43 1,43 994,00 1,39 992,61 1,36 991,25 1,32 989,93 1,29 988,64 1,26 987,38 1,23 986,15 1,21 984,94 1,10 983,76 1,16
0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,19 0,20 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24
20º 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16
tºTitolo alcolometrico volumico in %
01234567891 0 1 1
20º 998,20 1,50 996,70 1,46 995,24 1,43 993,81 1,39 992,42 1,36 991,06 1,33 989,73 1,29 988,44 1,27 987,17 1,24 985,93 1,22 984,71 1,19 983,52 1,16
0,20 0,20 0,20 0,20 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24
21º 998,00 1,50 996,50 1,46 995,04 1,43 993,61 1,40 992,21 1,36 990,85 1,33 989,52 1,30 988,22 1,27 986,95 1,25 985,70 1,23 984,47 1,19 983,28 1,18
0,21 0,21 0,21 0,21 0,21 0,22 0,22 0,23 0,24 0,24 0,24 0,26
22º 997,79 1,50 996,29 1,46 994,83 1,43 993,40 1,40 992,00 1,37 990,63 1,33 989,30 1,31 987,99 1,28 986,71 1,25 985,46 1,23 984,23 1,21 983,02 1,18
0,22 0,22 0,23 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,25
23º 997,57 1,50 996,07 1,47 994,60 1,43 993,17 1,40 991,77 1,37 990,40 1,34 989,06 1,31 987,75 1,28 986,47 1,26 985,21 1,24 983,97 1,20 982,77 1,20
0,24 0,23 0,23 0,23 0,24 0,24 0,24 0,25 0,26 0,26 0,27 0,29
24º 997,33 1,49 995,84 1,47 994,37 1,43 992,94 1,41 991,53 1,37 990,16 1,34 988,82 1,32 987,50 1,29 986,21 1,26 984,95 1,25 983,70 1,22 982,48 1,20
0,24 0,25 0,24 0,25 0,24 0,25 0,26 0,26 0,26 0,27 0,28 0,28
25º 997,09 1,50 995,59 1,46 994,13 1,44 992,69 1,40 991,29 1,38 989,91 1,35 988,56 1,32 987,24 1,29 985,95 1,27 984,68 1,26 983,42 1,22 982,20 1,21
0,25 0,25 0,26 0,25 0,26 0,26 0,26 0,26 0,28 0,28 0,28 0,30
26º 996,84 1,50 995,34 1,47 993,87 1,43 992,44 1,41 991,03 1,38 989,65 1,35 988,30 1,32 986,98 1,31 985,67 1,27 984,40 1,26 983,14 1,24 981,90 1,22
0,26 0,26 0,26 0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,30 0,30
27º 996,58 1,50 995,08 1,47 993,61 1,44 992,17 1,41 990,76 1,38 989,38 1,35 988,03 1,33 986,70 1,31 985,39 1,28 984,11 1,27 982,84 1,24 981,60 1,23
0,27 0,27 0,27 0,27 0,28 0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,32
28º 996,31 1,50 994,81 1,47 993,34 1,44 991,90 1,42 990,48 1,38 989,10 1,36 987,74 1,33 986,41 1,31 985,10 1,29 983,81 1,28 982,53 1,25 981,28 1,23
0,28 0,28 0,28 0,29 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32
29º 996,03 1,50 994,53 1,47 993,06 1,45 991,61 1,41 990,20 1,39 988,81 1,36 987,45 1,34 986,11 1,32 984,79 1,29 983,50 1,28 982,22 1,26 980,96 1,24
0,28 0,29 0,29 0,29 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,32 0,32 0,33
30º 995,75 1,51 994,24 1,47 992,77 1,45 991,32 1,42 989,90 1,39 988,51 1,37 987,14 1,34 985,80 1,32 984,48 1,30 983,18 1,28 981,90 1,27 980,63 1,25
0,30 0,30 0,30 0,30 0,31 0,31 0,31 0,31 0,32 0,33 0,34 0,34
31º 995,45 1,51 993,94 1,47 992,47 1,45 991,02 1,43 989,59 1,39 988,20 1,37 986,83 1,34 985,49 1,33 984,16 1,31 982,85 1,29 981,56 1,27 980,29 1,26
0,31 0,31 0,31 0,32 0,31 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,36
32º 995,14 1,51 993,63 1,47 992,16 1,46 990,70 1,42 989,28 1,40 987,88 1,37 986,51 1,35 985,16 1,33 983,83 1,32 982,51 1,30 981,21 1,28 979,93 1,26
0,31 0,31 0,32 0,32 0,32 0,33 0,33 0,34 0,35 0,35 0,35 0,35
33º 994,83 1,51 993,32 1,48 991,84 1,46 990,38 1,42 988,96 1,41 987,55 1,37 986,18 1,36 984,82 1,34 983,48 1,32 982,16 1,30 980,86 1,28 979,58 1,28
0,32 0,33 0,33 0,33 0,35 0,34 0,35 0,35 0,34 0,35 0,36 0,37
34º 994,51 1,52 992,99 1,48 991,51 1,46 990,05 1,44 988,61 1,40 987,21 1,38 985,83 1,36 984,47 1,33 983,14 1,33 981,81 1,31 980,50 1,29 979,21 1,28
0,33 0,33 0,34 0,35 0,34 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,36 0,37
35º 994,18 1,52 992,66 1,49 991,17 1,47 989,70 1,43 988,27 1,41 986,86 1,38 985,48 1,36 984,12 1,34 982,78 1,33 981,45 1,31 980,14 1,30 978,84 1,29
0,34 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38
36º 993,84 1,53 992,31 1,49 990,82 1,47 989,35 1,43 987,92 1,41 986,51 1,38 985,13 1,37 983,76 1,34 982,42 1,34 981,08 1,31 979,77 1,31 978,46 1,29
0,35 0,35 0,36 0,35 0,36 0,36 0,37 0,37 0,38 0,37 0,39 0,39
37º 993,49 1,53 991,96 1,50 990,46 1,46 989,00 1,44 987,56 1,41 986,15 1,39 984,76 1,37 983,39 1,35 982,04 1,33 980,71 1,33 979,38 1,31 978,07 1,30
0,36 0,36 0,36 0,37 0,37 0,37 0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39
38º 993,13 1,53 991,60 1,50 990,10 1,47 988,63 1,44 987,19 1,41 985,78 1,39 984,39 1,37 983,02 1,36 981,66 1,34 980,32 1,32 979,00 1,32 977,68 1,31
0,36 0,37 0,37 0,37 0,38 0,38 0,38 0,39 0,38 0,39 0,40 0,40
39º 992,77 1,54 991,23 1,50 989,73 1,47 988,26 1,45 986,81 1,41 985,40 1,39 984,01 1,38 982,63 1,35 981,28 1,35 979,93 1,33 978,60 1,32 977,28 1,32
0,37 0,37 0,38 0,39 0,38 0,39 0,39 0,39 0,40 0,39 0,40 0,41
40º 992,40 1,54 990,86 1,51 989,35 1,48 987,87 1,44 986,43 1,42 985,01 1,39 983,62 1,38 982,24 1,36 980,88 1,34 979,54 1,34 978,20 1,33 976,87 1,321990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 43
▼B
tºTitolo alcolometrico volumico in %
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
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−0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
2 986,96 1,02 985,94 0,98 984,96 0,94 984,02 0,91 983,11 0,88 982,23 0,84 981,39 0,81 980,58 0,79 979,79 0,77 979,02 0,76 978,26 0,75 977,51 0,74
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9 986,57 1,09 985,48 1,06 984,42 1,02 983,40 1,00 982,40 0,98 981,42 0,95 980,47 0,93 979,54 0,92 978,62 0,89 977,73 0,90 976,83 0,89 975,94 0,89
0,11 0,12 0,12 0,14 0,16 0,17 0,18 0,20 0,20 0,23 0,24 0,26
10 986,46 1,10 985,36 1,06 984,30 1,04 983,26 1,02 982,24 0,99 981,25 0,96 980,29 0,95 979,34 0,92 978,42 0,92 977,50 0,91 976,59 0,91 975,68 0,91
0,12 0,13 0,14 0,16 0,16 0,17 0,19 0,20 0,23 0,25 0,27 0,29
11 986,34 1,11 985,23 1,07 984,16 1,06 983,10 1,02 982,08 1,00 981,08 0,98 980,10 0,96 979,14 0,95 978,19 0,94 977,25 0,93 976,32 0,93 975,39 0,92
0,13 0,14 0,16 0,16 0,18 0,19 0,21 0,22 0,24 0,25 0,27 0,28
12 986,21 1,12 985,09 1,09 984,00 1,06 982,94 1,04 981,90 1,01 980,89 1,00 979,89 0,97 978,92 0,97 977,95 0,95 977,00 0,95 976,05 0,94 975,11 0,95
0,15 0,16 0,16 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28 0,30
13 986,06 1,13 984,93 1,09 983,84 1,08 982,76 1,05 981,71 1,02 980,69 1,01 979,68 0,99 978,69 0,98 977,71 0,97 976,74 0,97 975,77 0,96 974,81 0,96
0,16 0,16 0,18 0,18 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30
14 985,90 1,13 984,77 1,11 983,66 1,08 982,58 1,07 981,51 1,04 980,47 1,02 979,45 1,00 978,45 1,00 977,45 0,98 976,47 0,98 975,49 0,98 975,51 0,98
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,24 0,25 0,26 0,28 0,30 0,32
15 985,73 1,14 984,59 1,12 983,47 1,09 982,38 1,08 981,30 1,05 960,25 1,04 979,21 1,01 978,20 1,01 977,19 1,00 976,19 1,00 975,19 1,00 974,19 1,00
0,18 0,19 0,20 0,22 0,22 0,24 0,24 0,27 0,28 0,30 0,31 0,32
16 985,55 1,15 984,40 1,13 983,27 1,11 982,16 1,08 981,08 1,07 980,01 1,04 978,97 1,04 977,93 1,02 976,91 1,02 975,89 1,01 974,88 1,01 973,87 1,02
0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,33
17 985,36 1,16 984,20 1,14 983,06 1,12 981,94 1,09 980,85 1,08 979,77 1,06 978,71 1,05 977,66 1,04 976,62 1,03 975,59 1,03 974,56 1,02 973,54 1,04
0,21 0,22 0,22 0,23 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,35
18 985,15 1,17 983,98 1,14 982,84 1,13 981,71 1,11 980,60 1,09 979,51 1,07 978,44 1,06 977,38 1,05 976,33 1,05 975,28 1,04 974,24 1,05 973,19 1,05
0,21 0,22 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,34 0,35
19 984,94 1,18 983,76 1,16 982,60 1,13 981,47 1,12 980,35 1,10 979,25 1,09 978,16 1,07 977,09 1,07 976,02 1,06 974,96 1,06 973,90 1,06 972,84 1,06
0,23 0,24 0,24 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,36
20 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
tºTitolo alcolometrico volumico in %
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
20º 984,71 1,19 983,52 1,16 982,36 1,15 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
0,24 0,24 0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33 0,34 0,36 0,37
21º 984,47 1,19 983,28 1,18 982,10 1,15 980,95 1,14 978,81 1,12 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,10 975,38 1,09 974,29 1,09 973,20 1,09 972,11 1,09
0,24 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,35 0,36 0,37
22º 984,23 1,21 983,02 1,18 981,84 1,17 980,67 1,15 979,52 1,13 978,39 1,12 977,27 1,12 976,15 1,10 975,05 1,11 973,94 1,10 972,84 1,10 971,74 1,12
0,26 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,35 0,37 0,39
23º 983,97 1,20 982,77 1,20 981,57 1,18 980,39 1,16 979,23 1,15 978,08 1,13 976,95 1,13 975,82 1,12 974,70 1,11 973,59 1,12 972,47 1,12 972,47 1,12
0,27 0,29 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40
24º 983,70 1,22 982,48 1,20 981,28 1,18 980,10 1,17 978,93 1,16 977,77 1,15 976,62 1,13 975,49 1,14 974,35 1,13 973,22 1,13 972,09 1,14 970,95 1,14
0,28 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40
25º 983,42 1,22 982,20 1,21 980,99 1,20 979,79 1,18 978,61 1,17 977,44 1,15 976,29 1,15 975,14 1,15 973,99 1,14 972,85 1,15 971,70 1,15 970,55 1,16
0,28 0,30 0,31 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41
26º 983,14 1,24 981,90 1,22 980,68 1,20 979,48 1,19 978,29 1,18 977,11 1,17 975,94 1,16 974,78 1,16 973,62 1,16 972,46 1,16 971,30 1,16 970,14 1,17
0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,42
27º 982,84 1,24 981,60 1,23 980,37 1,21 979,16 1,20 977,96 1,19 976,77 1,18 975,59 1,17 974,42 1,18 973,24 1,17 972,07 1,17 970,90 1,18 969,72 1,18
0,31 0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,38 0,38 0,40 0,41 0,43
28º 982,53 1,25 981,28 1,23 980,05 1,22 978,83 1,21 977,62 1,20 976,42 1,19 975,23 1,19 974,04 1,18 972,86 1,19 971,67 1,18 970,49 1,20 969,29 1,20
0,31 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,42 0,43
29º 982,22 1,26 980,96 1,24 979,72 1,23 978,49 1,22 977,27 1,21 976,06 1,20 974,86 1,20 973,66 1,20 972,46 1,19 971,27 1,20 970,07 1,21 968,86 1,22
0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,41 0,43 0,44 0,45
30º 981,90 1,27 980,63 1,25 979,38 1,24 978,14 1,23 976,91 1,22 975,69 1,21 974,48 1,22 973,26 1,21 972,05 1,21 970,84 1,21 969,63 1,22 968,41 1,23
0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,40 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45
31º 981,56 1,27 980,29 1,26 979,03 1,25 977,78 1,24 976,54 1,23 975,31 1,23 974,08 1,22 972,86 1,22 971,64 1,22 970,42 1,23 969,19 1,23 967,96 1,24
0,35 0,36 0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,46
32º 981,21 1,28 979,93 1,26 978,67 1,26 977,41 1,25 976,16 1,24 974,92 1,23 973,69 1,23 972,46 1,24 971,22 1,23 969,99 1,24 968,75 1,25 967,50 1,25
0,35 0,35 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,45 0,46
33º 980,86 1,28 979,58 1,28 978,30 1,26 977,04 1,26 975,78 1,25 974,53 1,24 973,29 1,25 972,04 1,24 970,80 1,25 969,55 1,25 968,30 1,26 967,04 1,27
0,36 0,37 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47
34º 980,50 1,29 979,21 1,28 977,93 1,27 976,66 1,27 975,39 1,26 974,13 1,25 972,88 1,26 971,62 1,25 970,37 1,26 969,11 1,27 967,84 1,27 966,57 1,29
0,36 0,37 0,38 0,39 0,39 0,40 0,42 0,42 0,44 0,46 0,46 0,48
35º 980,14 1,30 978,84 1,29 977,55 1,28 976,27 1,27 975,00 1,27 973,73 1,27 972,46 1,26 971,20 1,27 969,93 1,28 968,65 1,27 967,38 1,29 966,09 1,30
0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,45 0,47 0,48
36º 979,77 1,31 978,46 1,29 977,17 1,29 975,88 1,28 974,60 1,28 973,32 1,28 972,04 1,28 970,76 1,28 969,48 1,28 968,20 1,29 966,91 1,30 965,61 1,32
0,39 0,39 0,40 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49
37º 978,38 1,31 978,07 1,30 976,77 1,29 975,48 1,29 974,19 1,29 972,90 1,29 971,61 1,29 970,32 1,29 969,03 1,30 967,73 1,30 966,43 1,31 965,12 1,33
0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50
38º 979,00 1,32 977,68 1,31 976,37 1,30 975,07 1,30 973,77 1,30 972,47 1,30 971,17 1,30 969,87 1,30 968,57 1,31 967,26 1,32 965,94 1,32 964,62 1,34
0,40 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50
39º 978,60 1,32 977,28 1,32 975,96 1,31 974,65 1,30 973,35 1,31 972,04 1,31 970,73 1,31 969,42 1,32 968,10 1,32 966,78 1,33 965,45 1,33 964,12 1,36
0,40 0,41 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47 0,48 0,49 0,51
40º 978,20 1,33 976,87 1,32 975,55 1,32 974,23 1,31 972,92 1,32 971,60 1,32 970,28 1,32 968,96 1,33 967,63 1,33 966,30 1,34 964,96 1,35 963,61 1,371990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 44
▼B
tºTitolo alcolometrico volumico in %
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
0 978,56 0,70 977,86 0,70 977,16 0,69 976,47 0,71 975,76 0,71 975,05 0,72 974,33 0,75 973,58 0,77 972,81 0,80 972,01 0,83 971,18 0,87 970,31 0,90
0,14 0,17 0,19 0,22 0,24 0,26 0,29 0,31 0,34 0,36 0,39 0,41
1 978,42 0,73 977,69 0,72 976,97 0,72 976,25 0,73 975,52 0,73 974,79 0,75 974,04 0,77 973,27 0,80 972,47 0,82 971,65 0,86 970,79 0,89 969,90 0,92
0,16 0,18 0,20 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,37 0,39 0,41
2 978,26 0,75 977,51 0,74 976,77 0,75 976,02 0,75 975,27 0,76 974,51 0,77 973,74 0,79 972,95 0,82 972,13 0,85 971,28 0,88 970,40 0,91 969,49 0,95
0,17 0,19 0,22 0,23 0,26 0,28 0,31 0,33 0,36 0,38 0,40 0,42
3 978,09 0,77 977,32 0,77 976,55 0,76 975,79 0,78 975,01 0,78 974,23 0,80 973,43 0,81 972,62 0,85 971,77 0,87 970,90 0,90 970,00 0,93 969,07 0,98
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0,19 0,22 0,23 0,26 0,27 0,30 0,33 0,35 0,37 0,39 0,42 0,44
5 977,72 0,82 976,90 0,80 976,10 0,82 975,28 0,81 974,47 0,83 973,64 0,85 972,79 0,86 971,93 0,89 971,04 0,91 970,13 0,95 969,18 0,98 968,20 1,01
0,21 0,22 0,25 0,26 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,44
6 977,51 0,83 976,68 0,83 975,85 0,83 975,02 0,84 974,18 0,85 973,33 0,87 972,46 0,86 971,58 0,91 970,67 0,94 969,73 0,97 968,76 1,00 967,76 1,03
0,21 0,23 0,25 0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44
7 977,30 0,85 976,45 0,85 975,60 0,86 974,74 0,86 973,88 0,87 973,01 0,89 972,12 0,90 971,22 0,93 970,29 0,96 969,33 0,99 968,34 1,02 967,32 1,06
0,23 0,25 0,27 0,28 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,43 0,46
8 977,07 0,87 976,20 0,87 975,33 0,87 974,46 0,89 973,57 0,89 972,68 0,91 971,77 0,92 970,85 0,96 969,89 0,98 968,91 1,00 967,91 1,05 966,86 1,07
0,24 0,26 0,28 0,30 0,31 0,34 0,35 0,38 0,39 0,41 0,44 0,46
9 976,83 0,89 975,94 0,89 975,05 0,89 974,16 0,90 973,26 0,92 972,34 0,92 971,42 0,95 970,47 0,97 969,50 1,00 968,50 1,03 967,47 1,07 966,40 1,09
0,24 0,26 0,28 0,30 0,33 0,34 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46
10 976,59 0,91 975,68 0,91 974,77 0,91 973,86 0,93 972,93 0,93 972,00 0,95 971,05 0,97 970,08 0,99 969,09 1,02 968,07 1,05 967,02 1,08 965,94 1,12
0,27 0,29 0,30 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,46 0,47
11 976,32 0,93 975,39 0,92 974,47 0,94 973,53 0,94 972,59 0,95 971,64 0,97 970,67 0,99 969,68 1,01 968,67 1,04 967,63 1,07 966,56 1,09 965,47 1,13
0,27 0,28 0,31 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48
12 976,05 0,94 975,11 0,95 974,16 0,95 973,21 0,96 972,25 0,97 971,28 0,99 970,29 1,01 969,28 1,03 968,25 1,06 967,19 1,08 966,11 1,12 964,99 1,15
0,28 0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
13 975,77 0,96 974,81 0,96 973,85 0,97 972,88 0,98 971,90 0,99 970,91 1,01 969,90 1,03 968,87 1,05 967,82 1,08 966,74 1,10 965,64 1,14 964,50 1,17
0,28 0,30 0,32 0,34 0,36 0,38 0,40 0,41 0,43 0,45 0,47 0,49
14 975,49 0,98 974,51 0,98 973,53 0,99 972,54 1,00 971,54 1,01 970,53 1,03 969,50 1,04 968,46 1,07 967,39 1,10 966,29 1,12 965,17 1,16 964,01 1,19
0,30 0,32 0,34 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,46 0,48 0,49
15 975,19 1,00 974,19 1,00 973,19 1,00 972,19 1,02 971,17 1,03 970,14 1,04 969,10 1,06 968,04 1,09 966,95 1,12 965,83 1,14 964,69 1,17 963,52 1,21
0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,46 0,48 0,51
16 974,88 1,01 973,87 1,02 972,85 1,02 971,83 1,03 970,80 1,05 969,75 1,06 968,69 1,08 967,61 1,11 966,50 1,13 965,37 1,16 964,21 1,20 963,01 1,22
0,32 0,33 0,35 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,48 0,50 0,50
17 974,56 1,02 973,54 1,04 972,50 1,04 971,46 1,05 970,41 1,06 969,35 1,08 968,27 1,10 967,17 1,12 966,05 1,16 964,89 1,18 963,71 1,20 962,51 1,24
0,32 0,35 0,36 0,37 0,39 0,41 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,52
18 974,24 1,05 973,19 1,05 972,14 1,05 971,09 1,07 970,02 1,08 968,94 1,10 967,84 1,12 966,72 1,14 965,58 1,17 964,41 1,19 963,22 1,23 961,99 1,25
0,34 0,35 0,36 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,52
19 973,90 1,06 972,84 1,06 971,78 1,08 970,70 1,08 969,62 1,10 968,52 1,11 967,41 1,14 966,27 1,16 965,11 1,18 963,93 1,21 962,72 1,25 961,47 1,27
0,34 0,36 0,38 0,39 0,41 0,42 0,45 0,46 0,47 0,49 0,51 0,52
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
tºTitolo alcolometrico volumico in %
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,14 966,96 1,15 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
0,36 0,37 0,38 0,40 0,42 0,44 0,45 0,46 0,49 0,50 0,52 0,53
21 973,20 1,09 972,11 1,09 971,02 1,11 969,91 1,12 968,79 1,13 967,66 1,15 966,51 1,16 965,35 1,20 964,15 1,21 962,94 1,25 961,69 1,27 960,42 1,31
0,36 0,37 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,48 0,49 0,51 0,52 0,54
22 972,84 1,10 971,74 1,12 970,62 1,12 969,50 1,13 968,37 1,15 967,22 1,16 966,06 1,19 964,87 1,21 963,66 1,23 962,43 1,26 961,17 1,29 959,88 1,32
0,37 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,55
23 972,47 1,12 971,35 1,13 970,22 1,14 969,08 1,14 967,94 1,17 966,77 1,18 965,59 1,20 964,39 1,22 963,17 1,25 961,92 1,28 960,64 1,31 959,33 1,33
0,38 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,54 0,55
24 972,09 1,14 970,95 1,14 969,81 1,15 968,66 1,16 967,50 1,18 966,32 1,20 965,12 1,22 963,90 1,24 962,66 1,26 961,40 1,30 960,10 1,32 958,78 1,35
0,39 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55
25 971,70 1,15 970,55 1,16 969,39 1,16 968,23 1,18 967,05 1,20 965,85 1,21 964,64 1,23 963,41 1,26 962,15 1,28 960,87 1,31 959,56 1,33 958,23 1,37
0,40 0,41 0,42 0,44 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,57
26 971,30 1,16 970,14 1,17 968,97 1,18 967,79 1,20 966,59 1,21 965,38 1,23 964,15 1,24 962,91 1,27 961,64 1,30 960,34 1,32 959,02 1,36 957,66 1,38
0,40 0,42 0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56
27 970,90 1,18 969,72 1,18 968,54 1,20 967,34 1,21 966,13 1,23 964,90 1,24 963,66 1,26 962,40 1,29 961,11 1,31 959,80 1,34 958,46 1,36 957,10 1,40
0,41 0,43 0,45 0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,54 0,56 0,57 0,59
28 970,49 1,20 969,29 1,20 968,09 1,21 966,88 1,22 965,66 1,24 964,42 1,26 963,16 1,28 961,88 1,31 960,57 1,33 959,24 1,35 957,89 1,38 956,51 1,41
0,42 0,43 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52 0,53 0,53 0,55 0,56 0,58
29 970,07 1,21 968,86 1,22 967,64 1,23 966,41 1,24 965,17 1,25 963,92 1,28 962,64 1,29 961,35 1,31 960,04 1,35 958,69 1,36 957,33 1,40 955,93 1,42
0,44 0,45 0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,55 0,55 0,58 0,58
30 969,63 1,22 968,41 1,23 967,18 1,24 965,94 1,26 964,68 1,26 963,42 1,29 962,13 1,31 960,82 1,33 959,49 1,35 958,14 1,39 956,75 1,40 955,35 1,44
0,44 0,45 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,57 0,58 0,60
31 969,19 1,23 967,96 1,24 966,72 1,26 965,46 1,27 964,19 1,28 962,91 1,30 961,61 1,32 960,29 1,35 958,94 1,37 957,57 1,40 956,17 1,42 954,75 1,44
0,44 0,46 0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59
32 968,75 1,25 967,50 1,25 966,25 1,27 964,98 1,29 963,69 1,29 962,40 1,32 961,08 1,33 959,75 1,36 958,39 1,39 957,00 1,41 955,59 1,43 954,16 1,46
0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,57 0,57 0,59 0,61
33 968,30 1,26 967,04 1,27 965,77 1,28 964,49 1,30 963,19 1,31 961,88 1,33 960,55 1,35 959,20 1,38 957,82 1,39 956,43 1,43 955,00 1,45 953,55 1,47
0,46 0,47 0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,56 0,56 0,59 0,59 0,60
34 967,84 1,27 966,57 1,29 965,28 1,29 963,99 1,31 962,68 1,33 961,35 1,34 960,01 1,37 958,64 1,38 957,26 1,42 955,84 1,43 954,41 1,46 952,95 1,49
0,46 0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58 0,58 0,60 0,62
35 967,38 1,29 966,09 1,30 964,79 1,31 963,48 1,32 962,16 1,34 960,82 1,36 959,46 1,38 958,08 1,40 956,68 1,42 955,26 1,45 953,81 1,48 952,33 1,50
0,47 0,48 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62
36 966,91 1,30 965,61 1,32 964,29 1,32 962,97 1,34 961,63 1,35 960,28 1,37 958,91 1,40 957,51 1,41 956,10 1,44 954,66 1,46 953,20 1,49 951,71 1,51
0,48 0,49 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,59 0,60 0,61 0,62
37 966,43 1,31 965,12 1,33 963,79 1,34 962,45 1,35 961,10 1,37 959,73 1,38 958,35 1,41 956,94 1,43 955,51 1,45 954,06 1,47 952,59 1,50 951,09 1,53
0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63
38 965,94 1,32 964,62 1,34 963,28 1,35 961,93 1,37 960,56 1,38 959,18 1,40 957,78 1,42 956,36 1,44 954,92 1,46 953,46 1,49 951,97 1,51 950,46 1,54
0,49 0,50 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64
39 965,45 1,33 964,12 1,36 962,76 1,36 961,40 1,38 960,02 1,40 958,62 1,41 957,21 1,43 955,78 1,46 954,32 1,47 952,85 1,50 951,35 1,53 949,82 1,55
0,49 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59 0,60 0,62 0,63 0,64
40 964,96 1,35 963,61 1,37 962,24 1,38 960,86 1,39 959,47 1,41 958,06 1,43 956,63 1,44 955,19 1,47 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54 949,18 1,571990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 45
▼B
TABELLA II
TITOLO ALCOLOMETRICO INTERNAZIONALE A 20 ºC
Tabelladellecorrezionidaapportarealtitoloalcolometricoapparentepercorreggerel'influenzadellatempera-
tura
Aggiungere o sottrarre al titolo alcolometrico apparente a tº C (alcolometro in vetro ordinario) la correzione qui sotto
indicata.
Titolo alcolometrico apparente a tºC
01234567891 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6Temperatura0º
Aggiungere0,76 0,77 0,82 0,87 0,95 1,04 1,16 1,31 1,49 1,70 1,95 2,26 2,62 3,03 3,49 4,02 4,56
1º 0,81 0,83 0,87 0,92 1,00 1,09 1,20 1,35 1,52 1,73 1,97 2,26 2,59 2,97 3,40 3,87 4,36
2º 0,85 0,87 0,92 0,97 1,04 1,13 1,24 1,38 1,54 1,74 1,97 2,24 2,54 2,89 3,29 3,72 4,17
3º 0,88 0,91 0,95 1,00 1,07 1,15 1,26 1,39 1,55 1,73 1,95 2,20 2,48 2,80 3,16 3,55 3,95
4º 0,90 0,92 0,97 1,02 1,09 1,17 1,27 1,40 1,55 1,72 1,92 2,15 2,41 2,71 3,03 3,38 3,75
5º 0,91 0,93 0,98 1,03 1,10 1,17 1,27 1,39 1,53 1,69 1,87 2,08 2,33 2,60 2,89 3,21 3,54
6º 0,92 0,94 0,98 1,02 1,09 1,16 1,25 1,37 1,50 1,65 1,82 2,01 2,23 2,47 2,74 3,02 3,32
7º 0,91 0,93 0,97 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,45 1,59 1,75 1,92 2,12 2,34 2,58 2,83 3,108º 0,89 0,91 0,94 0,98 1,04 1,11 1,19 1,28 1,39 1,52 1,66 1,82 2,00 2,20 2,42 2,65 2,88
9º 0,86 0,88 0,91 0,95 1,01 1,07 1,14 1,23 1,33 1,44 1,57 1,71 1,87 2,05 2,24 2,44 2,65
10º 0,82 0,84 0,87 0,91 0,96 1,01 1,08 1,16 1,25 1,35 1,47 1,60 1,74 1,89 2,06 2,24 2,43
11º 0,78 0,79 0,82 0,86 0,90 0,95 1,01 1,08 1,16 1,25 1,36 1,47 1,60 1,73 1,88 2,03 2,20
12º 0,72 0,74 0,76 0,79 0,83 0,88 0,93 0,99 1,07 1,15 1,24 1,34 1,44 1,56 1,69 1,82 1,9613º 0,66 0,67 0,69 0,72 0,76 0,80 0,84 0,90 0,96 1,03 1,11 1,19 1,28 1,38 1,49 1,61 1,7314º 0,59 0,60 0,62 0,64 0,67 0,71 0,74 0,79 0,85 0,91 0,97 1,04 1,12 1,20 1,29 1,39 1,49
15º 0,51 0,52 0,53 0,55 0,58 0,61 0,64 0,68 0,73 0,77 0,83 0,89 0,95 1,02 1,09 1,16 1,24
16º 0,42 0,43 0,44 0,46 0,48 0,50 0,53 0,56 0,60 0,63 0,67 0,72 0,77 0,82 0,88 0,94 1,00
17º 0,33 0,33 0,34 0,35 0,37 0,39 0,41 0,43 0,46 0,48 0,51 0,55 0,59 0,62 0,67 0,71 0,75
18º 0,23 0,23 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,31 0,33 0,35 0,37 0,40 0,42 0,45 0,48 0,5119º 0,12 0,12 0,12 0,12 0,13 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25
Titolo alcolometrico apparente a tºC
01234567891 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6Temperatura21º
Sottrarre0,13 0,13 0,13 0,14 0,14 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,19 0,20 0,22 0,23 0,25 0,26
22º 0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,34 0,36 0,37 0,39 0,41 0,44 0,47 0,49 0,5223º 0,40 0,41 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,54 0,57 0,60 0,63 0,66 0,70 0,74 0,7824º 0,55 0,56 0,58 0,60 0,62 0,64 0,67 0,70 0,73 0,77 0,81 0,85 0,89 0,94 0,99 1,04
25º 0,69 0,71 0,73 0,76 0,79 0,82 0,85 0,89 0,93 0,97 1,02 1,07 1,13 1,19 1,25 1,3126º 0,85 0,87 0,90 0,93 0,96 1,00 1,04 1,08 1,13 1,18 1,24 1,30 1,36 1,43 1,50 1,57
27º 1,03 1,07 1,11 1,15 1,19 1,23 1,28 1,34 1,40 1,46 1,53 1,60 1,68 1,76 1,8428º 1,21 1,25 1,29 1,33 1,38 1,43 1,49 1,55 1,62 1,69 1,77 1,85 1,93 2,02 2,1129º 1,39 1,43 1,47 1,52 1,58 1,63 1,70 1,76 1,84 1,92 2,01 2,10 2,19 2,29 2,39
30º 1,57 1,61 1,66 1,72 1,78 1,84 1,91 1,98 2,07 2,15 2,25 2,35 2,45 2,56 2,67
31º 1,75 1,80 1,86 1,92 1,98 2,05 2,13 2,21 2,30 2,39 2,49 2,60 2,71 2,83 2,94
32º 1,94 2,00 2,06 2,13 2,20 2,27 2,35 2,44 2,53 2,63 2,74 2,86 2,97 3,09 3,22
33º 2,20 2,27 2,34 2,42 2,50 2,58 2,67 2,77 2,88 2,99 3,12 3,24 3,37 3,51
34º 2,41 2,48 2,56 2,64 2,72 2,81 2,91 3,02 3,13 3,25 3,38 3,51 3,65 3,79
35º 2,62 2,70 2,78 2,86 2,95 3,05 3,16 3,27 3,39 3,51 3,64 3,78 3,93 4,08
36º 2,83 2,91 3,00 3,09 3,19 3,29 3,41 3,53 3,65 3,78 3,91 4,05 4,21 4,37
37º 3,13 3,23 3,33 3,43 3,54 3,65 3,78 3,91 4,04 4,18 4,33 4,49 4,6538º 3,36 3,47 3,57 3,68 3,79 3,91 4,03 4,17 4,31 4,46 4,61 4,77 4,94
39º 3,59 3,70 3,81 3,93 4,05 4,17 4,30 4,44 4,58 4,74 4,90 5,06 5,23
40º 3,82 3,94 4,06 4,18 4,31 4,44 4,57 4,71 4,86 5,02 5,19 5,36 5,531990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 46
▼B
Titolo alcolometrico apparente a tºC
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30Temperatura0º
Sottrarre3,49 4,02 4,56 5,11 5,65 6,16 6,63 7,05 7,39 7,67 7,91 8,07 8,20 8,30 8,36 8,39 8,40
1º 3,40 3,87 4,36 4,86 5,35 5,82 6,26 6,64 6,96 7,23 7,45 7,62 7,75 7,85 7,91 7,95 7,96
2º 3,29 3,72 4,17 4,61 5,05 5,49 5,89 6,25 6,55 6,81 7,02 7,18 7,31 7,40 7,47 7,51 7,533º 3,16 3,55 3,95 4,36 4,77 5,17 5,53 5,85 6,14 6,39 6,59 6,74 6,86 6,97 7,03 7,07 7,094º 3,03 3,38 3,75 4,11 4,48 4,84 5,17 5,48 5,74 5,97 6,16 6,31 6,43 6,53 6,59 6,63 6,66
5º 2,89 3,21 3,54 3,86 4,20 4,52 4,83 5,11 5,35 5,56 5,74 5,89 6,00 6,10 6,16 6,20 6,236º 2,74 3,02 3,32 3,61 3,91 4,21 4,49 4,74 4,96 5,16 5,33 5,47 5,58 5,67 5,73 5,77 5,80
7º 2,58 2,83 3,10 3,36 3,63 3,90 4,15 4,38 4,58 4,77 4,92 5,05 5,15 5,24 5,30 5,34 5,378º 2,42 2,65 2,88 3,11 3,35 3,59 3,81 4,02 4,21 4,38 4,52 4,64 4,74 4,81 4,87 4,92 4,959º 2,24 2,44 2,65 2,86 3,07 3,28 3,48 3,67 3,84 3,99 4,12 4,23 4,32 4,39 4,45 4,50 4,53
10º 2,06 2,24 2,43 2,61 2,80 2,98 3,16 3,33 3,48 3,61 3,73 3,83 3,91 3,98 4,03 4,08 4,11
11º 1,88 2,03 2,20 2,36 2,52 2,68 2,83 2,98 3,12 3,24 3,34 3,43 3,50 3,57 3,62 3,66 3,69
12º 1,69 1,82 1,96 2,10 2,24 2,38 2,51 2,64 2,76 2,87 2,96 3,04 3,10 3,16 3,21 3,25 3,27
13º 1,49 1,61 1,73 1,84 1,96 2,08 2,20 2,31 2,41 2,50 2,58 2,65 2,71 2,76 2,80 2,83 2,8514º 1,29 1,39 1,49 1,58 1,68 1,78 1,88 1,97 2,06 2,13 2,20 2,26 2,31 2,36 2,39 2,42 2,44
15º 1,09 1,16 1,24 1,32 1,40 1,48 1,56 1,64 1,71 1,77 1,83 1,88 1,92 1,96 1,98 2,01 2,03
16º 0,88 0,94 1,00 1,06 1,12 1,19 1,25 1,31 1,36 1,41 1,46 1,50 1,53 1,56 1,58 1,60 1,62
17º 0,67 0,71 0,75 0,80 0,84 0,89 0,94 0,98 1,02 1,05 1,09 1,12 1,14 1,17 1,18 1,20 1,2118º 0,45 0,48 0,51 0,53 0,56 0,59 0,62 0,65 0,68 0,70 0,72 0,74 0,76 0,78 0,79 0,80 0,81
19º 0,23 0,24 0,25 0,27 0,28 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,40 0,41
Titolo alcolometrico apparente a tºC
14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30Temperatura21º
Sottrarre0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,35 0,37 0,38 0,38 0,39 0,39 0,40
22º 0,47 0,49 0,52 0,55 0,57 0,60 0,62 0,65 0,67 0,70 0,72 0,74 0,75 0,76 0,78 0,79 0,8023º 0,70 0,74 0,78 0,82 0,86 0,90 0,93 0,97 1,01 1,04 1,07 1,10 1,12 1,15 1,17 1,18 1,1924º 0,94 0,99 1,04 1,10 1,15 1,20 1,25 1,29 1,34 1,39 1,43 1,46 1,50 1,53 1,55 1,57 1,59
25º 1,19 1,25 1,31 1,37 1,43 1,49 1,56 1,62 1,68 1,73 1,78 1,83 1,87 1,90 1,94 1,97 1,99
26º 1,43 1,50 1,57 1,65 1,73 1,80 1,87 1,94 2,01 2,07 2,13 2,19 2,24 2,28 2,32 2,35 2,38
27º 1,68 1,76 1,84 1,93 2,01 2,10 2,18 2,26 2,34 2,41 2,48 2,55 2,61 2,66 2,70 2,74 2,77
28º 1,93 2,02 2,11 2,21 2,31 2,40 2,49 2,58 2,67 2,76 2,83 2,90 2,98 3,03 3,08 3,13 3,1729º 2,19 2,29 2,39 2,50 2,60 2,70 2,81 2,91 3,00 3,09 3,18 3,26 3,34 3,40 3,46 3,51 3,55
30º 2,45 2,56 2,67 2,78 2,90 3,01 3,12 3,23 3,34 3,44 3,53 3,62 3,70 3,77 3,84 3,90 3,95
31º 2,71 2,83 2,94 3,07 3,19 3,31 3,43 3,55 3,67 3,78 3,88 3,98 4,07 4,15 4,22 4,28 4,33
32º 2,97 3,09 3,22 3,36 3,49 3,62 3,74 3,87 4,00 4,11 4,22 4,33 4,43 4,51 4,59 4,66 4,72
33º 3,24 3,37 3,51 3,65 3,79 3,92 4,06 4,20 4,33 4,45 4,57 4,68 4,79 4,88 4,97 5,04 5,10
34º 3,51 3,65 3,79 3,94 4,09 4,23 4,37 4,52 4,66 4,79 4,91 5,03 5,15 5,25 5,34 5,42 5,49
35º 3,78 3,93 4,08 4,23 4,38 4,53 4,69 4,84 4,98 5,12 5,26 5,38 5,50 5,61 5,71 5,80 5,87
36º 4,05 4,21 4,37 4,52 4,68 4,84 5,00 5,16 5,31 5,46 5,60 5,73 5,86 5,97 6,08 6,17 6,25
37º 4,33 4,49 4,65 4,82 4,98 5,15 5,31 5,48 5,64 5,80 5,95 6,09 6,22 6,33 6,44 6,54 6,6338º 4,61 4,77 4,94 5,12 5,29 5,46 5,63 5,80 5,97 6,13 6,29 6,43 6,57 6,69 6,81 6,92 7,01
39º 4,90 5,06 5,23 5,41 5,59 5,77 5,94 6,12 6,30 6,47 6,63 6,78 6,93 7,06 7,18 7,29 7,39
40º 5,19 5,36 5,53 5,71 5,90 6,08 6,26 6,44 6,62 6,80 6,97 7,13 7,28 7,41 7,54 7,66 7,761990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 47
▼B
TABELLA III
TITOLO ALCOLOMETRICO INTERNAZIONALE A 20 ºC
Tavoladellemassevolumicheapparentidellemisceleidroalcoliche
Apparecchiinvetroordinario
Masse volumiche a tº C, corrette della spinta dell'aria
tºTitolo alcolometrico volumico in %
01234567891 0 1 1
0 999,34 1,52 997,82 1,45 996,37 1,39 994,98 1,35 993,63 1,29 992,34 1,24 991,10 1,18 989,92 1,15 988,77 1,09 987,68 1,05 986,63 1,00 985,63 0,96
−0,09 −0,09 −0,09 −0,08 −0,08 −0,08 −0,07 −0,05 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02
1 999,43 1,52 997,91 1,45 996,46 1,40 995,06 1,35 993,71 1,29 992,42 1,25 991,17 1,20 989,97 1,15 988,82 1,10 987,72 1,06 986,66 1,01 985,65 0,97
−0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,06 −0,05 −0,05 −0,04 −0,03 −0,02 −0,02 −0,01
2 999,49 1,52 997,97 1,40 996,52 1,40 995,12 1,35 993,77 1,30 992,47 1,25 991,22 1,21 990,01 1,16 988,85 1,11 987,74 1,06 986,68 1,02 985,66 0,98
−0,05 −0,05 −0,04 −0,04 −0,04 −0,04 −0,03 −0,03 −0,03 −0,02 0,00 0,01
3 999,54 1,52 998,02 1,46 996,56 1,40 995,16 1,35 993,81 1,30 992,51 1,26 991,25 1,21 990,04 1,16 988,88 1,12 987,76 1,08 986,68 1,03 985,65 0,99
−0,03 −0,03 −0,03 −0,03 −0,02 −0,02 −0,02 −0,01 0,00 0,01 0,01 0,02
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▼B
tºTitolo alcolometrico volumico in %
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
0 986,63 1,00 985,63 0,96 984,67 0,92 983,75 0,87 982,88 0,84 982,04 0,81 981,23 0,77 980,46 0,75 979,71 0,73 978,98 0,72 978,26 0,70 977,56 0,70
−0,03 −0,02 −0,01 0,00 0,02 0,04 0,05 0,07 0,09 0,11 0,13 0,15
1 986,66 1,01 985,65 0,97 984,68 0,93 983,75 0,89 982,86 0,86 982,00 0,82 981,18 0,79 980,39 0,77 979,62 0,75 978,87 0,74 978,13 0,72 977,41 0,72
−0,02 −0,01 0,00 0,01 0,03 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,17
2 986,68 1,02 985,66 0,98 984,68 0,94 983,74 0,91 982,83 0,87 981,96 0,84 981,12 0,81 980,31 0,79 979,52 0,77 978,75 0,76 977,99 0,75 977,24 0,74
0,00 0,01 0,02 0,04 0,05 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
3 986,68 1,03 985,65 0,99 984,66 0,96 983,70 0,92 982,78 0,88 981,90 0,86 981,04 0,83 980,21 0,81 979,40 0,79 978,61 0,78 977,83 0,77 977,06 0,76
0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,07 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18
4 986,67 1,04 985,63 1,00 984,63 0,97 983,66 0,93 982,73 0,90 981,83 0,87 980,96 0,85 980,11 0,83 979,28 0,81 978,47 0,80 977,67 0,79 976,88 0,79
0,02 0,03 0,05 0,06 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,16 0,18 0,20
5 986,65 1,05 985,60 1,02 984,58 0,98 983,60 0,95 982,65 0,91 981,74 0,89 980,85 0,87 979,98 0,84 979,14 0,83 978,31 0,82 977,49 0,81 976,68 0,81
0,04 0,06 0,06 0,07 0,08 0,10 0,11 0,13 0,15 0,17 0,19 0,21
6 986,61 1,07 985,54 1,02 984,52 0,99 983,53 0,96 982,57 0,93 981,64 0,90 980,74 0,89 979,85 0,86 978,99 0,85 978,14 0,84 977,30 0,83 976,47 0,83
0,05 0,06 0,08 0,09 0,10 0,12 0,14 0,15 0,17 0,19 0,20 0,22
7 986,56 1,08 985,48 1,04 984,44 1,00 983,44 0,97 982,47 0,95 981,52 0,92 980,60 0,90 979,70 0,88 978,82 0,87 977,95 0,85 977,10 0,85 976,25 0,85
0,07 0,08 0,09 0,10 0,11 0,12 0,14 0,16 0,18 0,19 0,21 0,23
8 986,49 1,09 985,40 1,05 984,35 1,01 983,34 0,98 982,36 0,96 981,40 0,94 980,46 0,92 979,54 0,90 978,64 0,88 977,76 0,87 976,89 0,87 976,02 0,87
0,08 0,08 0,09 0,11 0,13 0,14 0,15 0,16 0,18 0,20 0,22 0,24
9 986,41 1,09 985,32 1,06 984,26 1,03 983,23 1,00 982,23 0,97 981,26 0,95 980,31 0,93 979,38 0,92 978,48 0,90 977,56 0,89 976,67 0,89 975,78 0,89
0,10 0,11 0,12 0,13 0,14 0,16 0,17 0,18 0,19 0,21 0,23 0,25
10 986,31 1,10 985,21 1,07 984,14 1,04 983,10 1,01 982,09 0,99 981,10 0,96 980,14 0,94 979,20 0,93 978,27 0,92 977,35 0,91 976,44 0,91 975,53 0,91
0,10 0,11 0,12 0,13 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,23 0,25 0,27
11 986,21 1,11 985,10 1,08 984,02 1,05 982,97 1,03 981,94 1,00 980,94 0,97 979,97 0,96 979,01 0,95 978,06 0,94 977,12 0,93 976,19 0,93 975,26 0,92
0,12 0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,21 0,22 0,24 0,26 0,27
12 986,09 1,12 984,97 1,09 983,88 1,06 982,82 1,04 981,78 1,01 980,77 0,99 979,78 0,98 978,80 0,96 977,84 0,96 976,88 0,95 975,93 0,94 974,99 0,94
0,13 0,14 0,15 0,16 0,17 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,26 0,28
13 985,96 1,13 984,83 1,10 983,73 1,07 982,66 1,05 981,61 1,03 980,58 1,00 979,58 0,99 978,59 0,98 977,61 0,97 976,64 0,97 975,67 0,96 974,71 0,96
0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,23 0,24 0,26 0,27 0,29
14 985,81 1,14 984,67 1,11 983,56 1,08 982,48 1,06 981,42 1,04 980,38 1,02 979,36 1,00 978,36 0,99 977,37 0,99 976,38 0,98 975,40 0,98 974,42 0,98
0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,20 0,22 0,24 0,26 0,27 0,28 0,30
15 985,66 1,15 984,51 1,12 983,39 1,09 982,30 1,07 981,23 1,05 980,18 1,04 979,14 1,02 978,12 1,01 977,11 1,00 976,11 0,99 975,12 1,00 974,12 1,00
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,22 0,23 0,25 0,26 0,28 0,30 0,31
16 985,49 1,16 984,33 1,13 983,20 1,10 982,10 1,08 981,02 1,06 979,96 1,05 978,91 1,04 977,87 1,02 976,85 1,02 975,83 1,01 974,82 1,01 973,81 1,02
0,17 0,18 0,19 0,20 0,21 0,23 0,24 0,25 0,27 0,29 0,30 0,31
17 985,32 1,17 984,15 1,14 983,01 1,11 981,90 1,09 980,81 1,08 979,73 1,06 978,67 1,05 977,62 1,04 976,58 1,04 975,54 1,02 974,52 1,02 973,50 1,04
0,19 0,19 0,20 0,22 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,33
18 985,13 1,17 983,96 1,15 982,81 1,13 981,68 1,11 980,57 1,09 979,48 1,07 978,41 1,06 977,35 1,05 976,30 1,05 975,25 1,04 974,21 1,04 973,17 1,05
0,20 0,21 0,22 0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,29 0,30 0,32 0,34
19 984,93 1,18 983,75 1,16 982,59 1,14 981,45 1,12 980,33 1,10 979,23 1,08 978,15 1,07 977,08 1,07 976,01 1,06 974,94 1,05 973,89 1,06 972,83 1,06
0,22 0,23 0,24 0,24 0,25 0,26 0,28 0,29 0,30 0,31 0,33 0,35
20 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
tºTitolo alcolometrico volumico in %
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21
20º 984,71 1,19 983,52 1,17 982,35 1,14 981,21 1,13 980,08 1,11 978,97 1,10 977,87 1,08 976,79 1,08 975,71 1,08 974,63 1,07 973,56 1,08 972,48 1,08
0,23 0,23 0,23 0,25 0,26 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36
21º 984,48 1,19 983,29 1,17 982,12 1,16 980,96 1,14 979,82 1,13 978,69 1,11 977,58 1,10 976,48 1,09 975,39 1,09 974,30 1,09 973,21 1,09 972,12 1,09
0,23 0,24 0,25 0,26 0,27 0,28 0,29 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36
22 984,25 1,20 983,05 1,18 981,97 1,17 980,70 1,15 979,55 1,14 978,41 1,12 977,29 1,12 976,17 1,10 975,07 1,10 973,97 1,10 972,86 1,10 971,76 1,11
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23 984,01 1,21 982,80 1,19 981,61 1,18 980,43 1,16 979,27 1,15 978,12 1,13 976,99 1,13 975,86 1,12 974,74 1,11 973,63 1,12 972,51 1,12 971,39 1,13
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24 983,76 1,22 982,54 1,20 981,34 1,19 980,15 1,17 978,98 1,16 977,82 1,14 976,68 1,14 975,54 1,13 974,41 1,13 973,28 1,13 972,15 1,14 971,01 1,14
0,26 0,27 0,28 0,29 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39
25 983,50 1,23 982,27 1,21 981,06 1,20 979,86 1,18 978,68 1,17 977,51 1,16 976,36 1,15 975,21 1,15 974,06 1,14 972,92 1,15 971,77 1,15 970,62 1,15
0,27 0,28 0,29 0,29 0,30 0,31 0,33 0,34 0,35 0,37 0,38 0,39
26 983,23 1,24 981,99 1,22 980,77 1,20 979,57 1,19 978,38 1,18 977,20 1,17 976,03 1,16 974,87 1,16 973,71 1,16 972,55 1,16 971,39 1,16 970,23 1,17
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27 982,94 1,24 981,70 1,23 980,47 1,21 979,26 1,20 978,06 1,19 976,87 1,18 975,69 1,18 974,51 1,17 973,34 1,17 972,17 1,17 921,00 1,18 969,82 1,18
0,29 0,30 0,30 0,31 0,32 0,33 0,35 0,36 0,38 0,39 0,40 0,41
28 982,65 1,25 981,40 1,23 980,17 1,22 978,95 1,21 977,74 1,20 976,54 1,20 975,34 1,19 974,15 1,19 972,96 1,18 971,78 1,18 970,60 1,19 969,41 1,20
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30 982,04 1,27 980,77 1,25 979,52 1,24 978,28 1,23 977,05 1,22 975,83 1,21 974,62 1,21 973,41 1,21 972,20 1,21 970,99 1,21 969,78 1,22 968,56 1,23
0,32 0,32 0,33 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43
31 981,72 1,27 980,45 1,26 979,19 1,25 977,94 1,24 976,70 1,23 975,47 1,22 974,25 1,22 973,03 1,22 971,81 1,22 970,59 1,23 969,36 1,23 968,13 1,24
0,33 0,34 0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,45
32 981,39 1,28 980,11 1,26 978,85 1,26 977,59 1,25 976,34 1,24 975,10 1,23 973,87 1,23 972,64 1,23 971,41 1,24 970,17 1,24 968,93 1,25 967,68 1,26
0,34 0,34 0,35 0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45
33 981,05 1,28 979,77 1,27 978,50 1,26 977,24 1,26 975,78 1,25 974,73 1,25 973,48 1,24 972,24 1,24 971,00 1,25 969,75 1,25 968,50 1,27 967,23 1,27
0,34 0,35 0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,45 0,45
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0,36 0,37 0,37 0,38 0,38 0,39 0,40 0,42 0,43 0,44 0,45 0,47
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0,36 0,37 0,38 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,47
37 979,65 1,32 978,33 1,30 977,03 1,30 975,73 1,29 974,44 1,29 973,15 1,29 971,86 1,29 970,57 1,29 969,28 1,29 967,99 1,30 966,69 1,32 965,37 1,32
0,38 0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,46 0,47 0,48
38 979,27 1,32 977,95 1,31 976,64 1,30 975,34 1,30 974,04 1,30 972,74 1,30 971,44 1,30 970,14 1,30 968,84 1,31 967,53 1,31 966,22 1,33 964,89 1,34
0,38 0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,43 0,44 0,45 0,46 0,48 0,49
39 978,89 1,33 977,56 1,31 976,25 1,31 974,94 1,31 973,63 1,31 972,32 1,31 971,01 1,31 969,70 1,31 968,39 1,32 967,07 1,33 965,74 1,34 964,40 1,36
0,39 0,39 0,40 0,41 0,42 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,49 0,50
40 978,50 1,33 977,17 1,32 975,85 1,32 974,53 1,32 973,21 1,31 971,90 1,32 970,58 1,33 969,25 1,33 967,92 1,33 966,59 1,34 965,25 1,35 963,90 1,371990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 49
▼B
tºTitolo alcolometrico volumico in %
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
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0,30 0,31 0,33 0,35 0,37 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,49
17 974,52 1,02 973,50 1,04 972,46 1,04 971,42 1,05 970,37 1,06 969,31 1,08 968,23 1,10 967,13 1,12 966,01 1,15 964,86 1,18 963,68 1,21 962,47 1,24
0,31 0,33 0,34 0,36 0,38 0,40 0,42 0,43 0,45 0,47 0,48 0,50
18 974,21 1,04 973,17 1,05 972,12 1,06 971,06 1,07 969,99 1,08 968,91 1,10 967,81 1,11 966,70 1,14 965,56 1,17 964,39 1,19 963,20 1,23 961,97 1,26
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19 973,89 1,06 972,83 1,06 971,77 1,07 970,70 1,09 969,61 1,10 968,51 1,11 967,39 1,13 966,26 1,16 965,10 1,18 963,92 1,21 962,71 1,24 961,47 1,28
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20 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,14 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
tºTitolo alcolometrico volumico in %
20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31
20º 973,56 1,08 972,48 1,08 971,40 1,09 970,31 1,10 969,21 1,11 968,10 1,13 966,97 1,16 965,81 1,17 964,64 1,20 963,44 1,23 962,21 1,26 960,95 1,29
0,35 0,36 0,37 0,39 0,40 0,42 0,44 0,45 0,47 0,49 0,50 0,52
21º 973,21 1,09 972,12 1,09 971,03 1,11 969,92 1,11 968,81 1,13 967,68 1,15 966,53 1,17 965,36 1,19 964,17 1,22 962,95 1,24 961,71 1,28 960,43 1,31
0,35 0,36 0,38 0,39 0,41 0,43 0,44 0,46 0,48 0,49 0,51 0,52
22 972,86 1,10 971,76 1,11 970,65 1,12 969,53 1,13 968,40 1,15 967,25 1,16 966,09 1,19 964,90 1,21 963,69 1,23 962,46 1,26 961,20 1,29 959,91 1,32
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23 972,51 1,12 971,39 1,13 970,26 1,13 969,13 1,15 967,98 1,16 966,82 1,18 965,64 1,20 964,44 1,23 963,21 1,25 961,96 1,28 960,68 1,30 959,38 1,33
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30 969,78 1,22 968,56 1,23 967,33 1,24 966,09 1,25 964,84 1,27 963,57 1,29 962,28 1,31 960,97 1,33 959,64 1,35 958,29 1,38 956,91 1,41 955,50 1,44
0,42 0,43 0,44 0,45 0,47 0,49 0,51 0,52 0,53 0,55 0,56 0,58
31 969,36 1,23 968,13 1,24 966,89 1,25 965,64 1,27 964,37 1,29 963,08 1,31 961,77 1,32 960,45 1,34 959,11 1,37 957,74 1,39 956,35 1,43 954,92 1,45
0,43 0,45 0,46 0,48 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,56 0,57 0,58
32 968,93 1,25 967,68 1,25 966,43 1,27 965,16 1,28 963,88 1,30 962,58 1,32 961,26 1,33 959,93 1,36 958,57 1,39 957,18 1,40 955,78 1,44 954,34 1,47
0,43 0,45 0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,59
33 968,50 1,27 967,23 1,27 965,96 1,28 964,68 1,30 963,38 1,31 962,07 1,33 960,74 1,35 959,39 1,37 958,02 1,40 956,62 1,42 955,20 1,45 953,75 1,48
0,45 0,45 0,47 0,49 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60
34 968,05 1,27 966,78 1,29 965,49 1,30 964,19 1,31 962,88 1,32 961,56 1,34 960,22 1,37 958,85 1,38 957,47 1,41 956,06 1,44 954,62 1,47 953,15 1,49
0,45 0,47 0,48 0,49 0,50 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60
35 967,60 1,29 996,31 1,30 965,01 1,31 963,70 1,32 962,38 1,34 961,04 1,36 959,68 1,38 958,30 1,40 956,90 1,42 955,48 1,45 954,03 1,48 952,55 1,50
0,45 0,47 0,48 0,49 0,51 0,53 0,54 0,55 0,57 0,59 0,60 0,61
36 967,15 1,31 965,84 1,31 964,53 1,32 963,21 1,34 961,87 1,36 960,51 1,37 959,14 1,39 957,75 1,42 956,33 1,44 954,89 1,46 953,43 1,49 951,94 1,51
0,46 0,47 0,48 0,50 0,52 0,53 0,55 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61
37 966,69 1,32 965,37 1,32 964,05 1,34 962,71 1,36 961,35 1,37 959,98 1,39 958,59 1,40 957,19 1,43 955,76 1,45 954,31 1,48 952,83 1,50 951,33 1,52
0,47 0,48 0,50 0,51 0,52 0,54 0,55 0,57 0,58 0,59 0,60 0,61
38 966,22 1,33 964,89 1,34 963,55 1,35 962,20 1,37 960,83 1,39 959,44 1,40 958,04 1,42 956,62 1,44 955,18 1,46 953,72 1,49 952,23 1,51 950,72 1,54
0,48 0,49 0,51 0,52 0,53 0,54 0,56 0,57 0,58 0,60 0,61 0,62
39 965,74 1,34 964,40 1,36 963,04 1,36 961,68 1,38 960,30 1,40 958,90 1,42 957,48 1,43 956,05 1,45 954,60 1,48 953,12 1,50 951,62 1,52 950,10 1,55
0,49 0,50 0,51 0,53 0,54 0,55 0,56 0,58 0,60 0,61 0,62 0,64
40 965,25 1,35 963,90 1,37 962,53 1,38 961,15 1,39 959,76 1,41 958,35 1,43 956,92 1,45 955,47 1,47 954,00 1,49 952,51 1,51 951,00 1,54 949,49 1,561990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 50
▼B
TABELLA IV
Tabella di corrispondenza tra gli indici di rifrazione a 20 ºC e i titoli alcolometrici a 20 ºC delle miscele idro-
alcoliche pureedeidistillati
1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 51
▼B
4.ESTRATTOSECCOTOTALE
Sostanzesecchetotali
1. DEFINIZIONE
L'estratto secco totale o sostanze secche totali è costituito dall'in-
sieme di tutte le sostanze che, in condizioni fisiche determinate,
non volatilizzano. Queste condizioni fisiche debbono essere fissate
in modo tale che le sostanze componenti tale estratto subiscano il
minimo di alterazione possibile.
L'estratto non riduttore è l'estratto secco totale dal quale sono stati
detratti gli zuccheri totali.
L'estratto ridotto è l'estratto secco dal quale sono stati detratti gli
zuccheri totali eccedenti 1 g/l, il solfato di potassio eccedente 1 g/l,
il mannitolo, se presente, e tutte le sostanze chimiche eventualmente
aggiunte al vino.
Il resto di estratto è l'estratto non riduttore dal quale è stata detratta
l'acidità fissa, espressa in acido tartarico.
L'estratto è espresso in grammi per litro e dev'essere determinato con
l'approssimazione di 0,5 g.
2. PRINCIPIO DEL METODO
Metodo unico: metodo densimetrico.L'estratto secco totale è calcolato indirettamente in base al valore
della densità del mosto e, nel caso del vino, in base alla densità del
vino dealcolizzato.
Questo estratto secco è espresso dalla quantità di saccarosio che,
disciolta in una quantità d'acqua sufficiente ad avere un litro, dà
una soluzione avente la stessa densità del mosto o del vino dealco-
lizzato. Questa quantità è fornita dalla tabella I.
3. MODO DI OPERARE
Ladensità rela tivad
2020del «vino dealcolizzato »( dr) è calcolata con
laformula :
dr=dv−da+ 1,000
dove
dv= densità relativa del vino a 20 ºC (corretta per l'acidità vola-
tile) (1)
da= densità relativa a 20 ºC della miscela idroalcolica avente lo
stesso titolo alcolometrico del vino
Il valore di drpuò anche essere calcolato in base alle masse volu-
miche a20 ºC, ρvdel vino e ρadella miscela idroalcolica allo
stesso titolo alcolometrico, mediante la formula:
dr= 1,0018 ( ρv−ρa) + 1,000
dove il coefficiente 1,0018 può praticamente essere assimilato ad 1
allorché ρvè inferiore ad 1,05, come avviene nella maggioranza dei
casi.
4. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
Riportare la densità dr2 020del vino dealcolizzato o la densità d2020del
mosto nella tabella I per ricavare il peso dell'estratto secco totale in
grammi per litro.
Il peso dell'estratto secco totale è espresso in g/l con una cifra deci-
male.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 52
(1) Prima di effettuare questo calcolo, la densità relativa (o la massa volumica) del vino,
misurata nel modo sopra indicato, dev'essere corretta dall'azione dell'acidità volatilesecondo laformula :d
v=d2020− 0,0000086 aoppure ρv=ρ20− 0,0000086 a
nella quale a rappresenta la quantità di acidità volatile espressa in milliequivalenti per
litro.
▼B
TABELLA I
peril calcolodeltenoreinestrattoseccototale(grammiperlitro)
Densità relativa
con 2 cifre deci-
maliTerza cifra decimale della densità relativa
0123456789
Grammi di estratto per litro
1,00 0 2,6 5,1 7,7 10,3 12,9 15,4 18,0 20,6 23,2
1,01 25,8 28,4 31,0 33,6 36,2 38,8 41,3 43,9 46,5 49,1
1,02 51,7 54,3 56,9 59,5 62,1 64,7 67,3 69,9 72,5 75,1
1,03 77,7 80,3 82,9 85,5 88,1 90,7 93,3 95,9 98,5 101,1
1,04 103,7 106,3 109,0 111,6 114,2 116,8 119,4 122,0 124,6 127,2
1,05 129,8 132,4 135,0 137,6 140,3 142,9 145,5 148,1 150,7 153,3
1,06 155,9 158,6 161,2 163,8 166,4 169,0 171,6 174,3 176,9 179,5
1,07 182,1 184,8 187,4 190,0 192,6 195,2 197,8 200,5 203,1 205,81,08 208,4 211,0 213,6 216,2 218,9 221,5 224,1 226,8 229,4 232,0
1,09 234,7 237,3 239,9 242,5 245,2 247,8 250,4 253,1 255,7 258,4
1,10 261,0 263,6 266,3 268,9 271,5 274,2 276,8 279,5 282,1 284,8
1,11 287,4 290,0 292,7 295,3 298,0 300,6 303,3 305,9 308,6 311,2
1,12 313,9 316,5 319,2 321,8 324,5 327,1 329,8 332,4 335,1 337,8
1,13 340,4 343,0 345,7 348,3 351,0 353,7 356,3 359,0 361,6 364,3
1,14 366,9 369,6 372,3 375,0 377,6 380,3 382,9 385,6 388,3 390,9
1,15 393,6 396,2 398,9 401,6 404,3 406,9 409,6 412,3 415,0 417,6
1,16 420,3 423,0 425,7 428,3 431,0 433,7 436,4 439,0 441,7 444,4
1,17 447,1 449,8 452,4 455,2 457,8 460,5 463,2 465,9 468,6 471,3
1,18 473,9 476,6 479,3 482,0 484,7 487,4 490,1 492,8 495,5 498,2
1,19 500,9 503,5 506,2 508,9 511,6 514,3 517,0 519,7 522,4 525,1
1,20 527,8 —————————
Tabella di interpolazione
Quarta cifra deci-
male della
densità relativagrammi di
estratto per litroQuarta cifra deci-
male della
densità relativagrammi di
estratto per litroQuarta cifra deci-
male della
densità relativagrammi di
estratto per litro
1 0,3 4 1,0 7 1,8
2 0,5 5 1,3 8 2,1
3 0,8 6 1,6 9 2,31990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 53
▼B
5.ZUCCHERIRIDUTTORI
1. DEFINIZIONE
Gli zuccheri riduttori sono costituiti dall'insieme degli zuccheri a
funzione chetonica o aldeidica dosati in base alla loro azione ridu-
cente sulla soluzione cupro-alcalina.
2. PRINCIPIO DEI METODI2.1.Defecazione
2.1.1. Metodo di riferimento: passaggio del vino neutralizzato e dealcoliz-
zato su una colonna scambiatrice di anioni sotto forma di acetato,
dove i suoi anioni vengono scambiati con ioni acetici, e successiva
defecazione con acetato neutro di piombo.
2.1.2. Metodi usuali: il vino viene trattato con uno dei seguenti reattivi:
2.1.2.1. Acetato neutro di piombo
2.1.2.2. Ferrocianuro II di zinco
2.2.Dosaggio
2.2.1. Metodo unico: dopo aver fatto reagire il vino o il mosto defecati con
una quantità determinata di soluzione cupro-alcalina, l'eccesso di
ioni rameici viene dosato per iodometria.
3. DEFECAZIONE
Il liquido nel quale vanno dosati gli zuccheri deve avere un conte-
nuto in zuccheri compreso tra0,5 e 5 g/l.
Se il vino è secco, bisogna evitare di diluirlo durante la defecazione;
se è dolce, esso vadiluito nel corso delladefeca zione, in modo da
portare il contenuto in zuccheri entro i limiti indicati secondo la
tabella seguente.
DenominazioneContenuto in zuccheri,
in grammi per litro,
compreso fraMassa volumica
compresafraDiluizione dapreve-
dere (%)
Mosti e mistelle > 125 > 1,038 1
Vini dolci, alcoliz-
zati o meno25 e 125 1,005 e 1,038 4
Vini amabili 5 e 25 0,997 e 1,005 20
Vini secchi < 5 < 0,997 nessunadiluizione
3.1.Metododiriferimento
3.1.1. Reattivi
3.1.1.1. Soluzione di acido cloridrico (HCl), 1 M3.1.1.2. Soluzione di idrossido di sodio (NaOH), 1 M
3.1.1.3. Soluzione di acido acetico (CH
3COOH), 4 M
3.1.1.4. Soluzione di idrossido di sodio (NaOH), 2 M3.1.1.5. Resina scambiatrice di anioni [tipo Dowex 3 (20 — 50 mesh) o
resina equivalente] preparata nel modo seguente:
In fondo ad una buretta collocare un piccolo tampone di lana di
vetro e 15 ml di resina scambiatrice di anioni (3.1.1.5).
Al momento dellamessain funzione, sottoporre laresinaa2 cicli
completi di rigenerazione con passaggi alternati di soluzioni M di
acido cloridrico (3.1.1.1) e di idrossido di sodio (3.1.1.2). Dopo il
lavaggio con 50 ml di acqua distillata, travasare la resina in un
becher, aggiungere 50 ml di una soluzione 4 M di acido acetico
(3.1.1.3) ed agitare per 5 minuti Riempire nuovamente la buretta e
far passare attraverso la colonna 100 ml di soluzione di acido acetico
4 M (3.1.1.3) (è preferibile disporre di unariservadi resinaconser-
vata in un recipiente riempito con la soluzione 4 M di acido acetico).
Lavare la colonna con acqua distillata sino a neutralità dell'effluente.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 54
▼B
Rigenerazione della resina. Far passare 150 ml di una soluzione 2 M
di idrossido di sodio per eliminare gli acidi e gran parte delle
sostanze coloranti fissate sulla resina. Lavare con 100 ml d'acque.
Far passare 100 ml di soluzione 4 M di acido acetico. Lavare la
colonnasino aneutra lità dell'effluente.
3.1.1.6. Soluzione di acetato neutro di piombo (approssimativamente satura):
Acetato neutro di piombo Pb (CH3COO)2·3
H2O 250 g
Acqua molto calda q.b.a: 500 ml
Agitare sino a dissoluzione.
3.1.1.7. Carbonato di calcio, Ca CO3.
3.1.2. Modo di operare
3.1.2.1. Vini secchi
Introdurre 50 ml di vino in un recipiente cilindrico del diametro di
10-12 cm circa ed addizionare ½ (n − 0,5) ml di una soluzione M di
idrossido di sodio (3.1.1.2) (dove n è il volume di unasoluzione 0,1
M di idrossido di sodio impiegato per il dosaggio dell'acidità totale
su 10 ml di vino); evaporare su bagnomaria bollente con l'aiuto di un
getto di aria calda sino a ridurre la quantità di liquido a circa 20 ml.
Fare defluire 3 ml di tale liquido ogni 2 minuti attraverso la colonna
scambiatrice di anioni in forma di acetato (3.1.1.5). Raccogliere
l'effluente in un matraccio tarato da 100 ml. Lavare sei volte il reci-
piente e la colonna con 10 ml di acqua distillata, aggiungere
agitando 2,5 ml di soluzione satura di acetato di piombo (3.1.1.6) e
0,5 g di carbonato di calcio (3.1.1.7); agitare a più riprese e lasciare
riposare almeno 15 minuti; portare a volume con acqua. Filtrare.
1 ml di questo filtrato corrisponde a 0,5 ml di vino.
3.1.2.2. Mosti, mistelle, vini dolci e vini amabili
Si riportano a titolo indicativo alcune diluizioni.
1.Mosti e mistelle
Diluire al 10 % il liquido da analizzare e prelevare 10 ml di tale
diluizione.
2.Vini dolci, alcolizzati o meno, di massa volumica compresa tra
1,005 e 1,038. Prelevare 20 ml di liquido da analizzare previa-
mente diluito al 20 %.
3.Vini amabili, di massa volumica compresa tra 0,997 e 1,005.
Prelevare 20 ml di vino non diluito.
Fare defluire il volume di vino o di mosto sopra indicato attra-
verso la colonna scambiatrice di anioni sotto forma di acetato
nellamisuradi 3 ml ogni due minuti. Ra ccogliere l'effluente in
un pallone tarato da 100 ml, lavare la colonna con acqua fino ad
ottenere 90 ml circa di effluente. Aggiungere 0,5 g di carbonato
di calcio, 1 ml di una soluzione satura di acetato di piombo;
agitare e lasciare riposare per almeno 15 minuti agitando di
tanto in tanto; portare a volume con acqua. Filtrare.
In questi casi:
1) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,01 ml di mosto o di mistella,
2) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,04 ml di vino dolce,
3) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,20 ml di vino amabile.
3.2.Metodiusuali
3.2.1. Defecazione con acetato neutro di piombo
3.2.1.1. Reattivi
Soluzione di acetato neutro di piombo (approssimativamente satura)
(vedi 3.1.1.6)
Carbonato di calcio1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 55
▼B
3.2.1.2. Modo di operare
3.2.1.2.1. Vini secchi
Introdurre 50 ml di vino in un pallone tarato da 100 ml; aggiungere
½ (n − 0,5) ml di soluzione M di idrossido di sodio (3.1.1.2), dove n
è il volume di soluzione 0,1 M utilizzato per dosare l'acidità totale di
10 ml di vino. Aggiungere agitando 2,5 ml di soluzione satura di
acetato di piombo (3.1.1.6) e 0,5 g di carbonato di calcio (3.1.1.7);
agitare a più riprese e lasciare riposare per almeno 15 minuti; portare
a volume con acqua. Filtrare.
1 ml di filtrato corrisponde a 0,5 ml di vino.
3.2.1.2.2. Mosti, mistelle, vini dolci e vini amabili
In un pallone tarato da 100 ml, introdurre un volume di vino o di
mosto o di mistelladefinito come segue (le diluizioni sono riporta te
atitolo indica tivo):
1.Mosti e mistelle.
Diluire al 10 % il liquido da analizzare; prelevare 10 ml di tale
diluizione.
2.Vini dolci, alcolizzati o meno, di massa volumica compresa tra
1,005 e 1,038. Prelevare 20 ml del liquido da analizzare, previa-
mente diluito al 20 %.
3.Vini amabili, di massa volumica compresa fra 0,997 e 1,005.
Prelevare 20 ml di vino non diluito.
Aggiungere 0,5 g di carbonato di calcio, circa 60 ml di acqua e
0,5 offure 1o2m ld i soluzione satura di acetato di piombo;
agitare e lasciare riposare per almeno 15 minuti agitando di
tanto in tanto. Portare a volume con acqua. Filtrare.
In questi casi:1) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,01 ml di mosto o di mistella,
2) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,004 ml di vino dolce,3) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,20 ml di vino pastoso.
3.2.2. Defecazione con ferrocianuro di zinco
Questo procedimento di defecazione dovrà essere utilizzato soltanto
per i vini bianchi, i vini dolci poco colorati e i mosti.
3.2.2.1. Reattivi3.2.2.1.1. Soluzione I di ferrocianuro (II) di potassio:
ferrocianuro di potassio [K
4Fe (CN)6·3H2O]: 150 g
Acquaq. b. a : 1 000 ml
3.2.2.1.2. Soluzione II di solfato di zinco:
solfato di zinco (Zn SO4·7H2O): 300 g
acqua q. b. a: 1 000 ml
3.2.2.2. Modo di operare
Introdurre in un pallone tarato da 100 ml un volume di vino (o di
mosto o di mistella) definito come segue, le diluizioni vengono
date a titolo indicativo:
1)Mosti e mistelle.
Diluire al 10 % il liquido da analizzare, prelevare 10 ml di tale
diluizione.
2)Vini dolci, alcolizzati o meno, lacui ma ssavolumicaè compresa
fra 1,005 e 1,038. Prelevare 20 ml di liquido da analizzarepreviamente diluito al 20 %.
3)Vini amabili, lacui ma ssavolumicaè compresafra0,997 e
1,005. Prelevare 20 ml di vino non diluito.
4)Vini secchi, prelevare 50 ml di vino non diluito
Aggiungere 5 ml di soluzione I di ferrocianuro di potassio
(3.2.2.1.1) e 5 ml di soluzione II di solfato di zinco (3.2.2.1.2).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 56
▼B
Mescolare. Portare a volume con acqua. Attendere 10 minuti e
filtrare.
In questi casi:
1) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,01 ml di mosto o di mistella,
2) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,004 ml di vino dolce,3) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,20 ml di vino amabile,4) 1 ml di filtrato corrisponde a 0,50 ml di vino secco.
4. DOSAGGIO
4.1.Reattivi
4.1.1. Soluzione cupro-alcalina:
Solfato di rame puro (CuSO
4·5H2O): 25 g
Acido citrico (C6H8O7·H2O) 50 g
Carbonato di sodio cristallizzato (Na2CO3·1 0
H2O): 388 g
Acquaq.b. a : 1 000 ml
Sciogliere il solfato di rame in 100 ml di acqua, l'acido citrico in
300 ml di acqua e il carbonato di sodio in 300-400 ml di acqua
calda. Mescolare la soluzione di acido citrico e la soluzione di
carbonato di sodio. Aggiungere quindi la soluzione di solfato di
rame e portare a 1 l.
4.1.2. Soluzione di ioduro di potassio al 30 %:
ioduro di potassio (KI): 30 g
acqua q.b. a: 100 ml
Conservare in bottiglia di vetro scuro.
4.1.3. Acido solforico al 25 %:
Acido solforico (H2SO4)ρ20= 1,84 g/ml: 25 g
acqua q.b. a: 100 ml
Versare l'acido nell'acqua, lasciare raffreddare e portare a 100 ml.
4.1.4. Salda d'amido a 5 g/l:
Disperdere 5 g di amido in circa 500 ml di acqua. Portare a ebolli-
zione agitando e mantenere l'ebollizione per 10 minuti; aggiungere
200 g di cloruro di sodio (NaCl) e, dopo il raffreddamento, portare
a1l .
— Tiosolfato di sodio, soluzione 0,1 M
— Soluzione di zucchero invertito di 5 g/l:
soluzione da utilizzare per verificare la tecnica di dosaggio.
In un pallone tarato da 200 ml introdurre:
saccarosio (C12H22O11): 4,75 g
acqua, circa: 100 ml
acido cloridrico (HCl) ( ρ20= 1,16 − 1,19 g/
ml): 5 ml
Immergere il pallone in bagnomaria a 60 ºC per il tempo sufficiente
affinché la soluzione raggiunga la temperatura di 50 ºC, da mante-
nere per 15 minuti. Lasciare quindi raffreddare il pallone
spontaneamente per 30 minuti immergendolo poi in un bagno diacqua fredda. Travasare quindi in un pallone tarato da 1 l e portare
avolume; questasoluzione si ma ntiene per un mese. Al momento
dell'impiego neutralizzare la quantità prelevata (tale soluzione è
approssimativamente 0,06 M acida), con una soluzione di idrossido
di sodio.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 57
▼B
4.2.Mododioperare
In un pallone da 300 ml, introdurre 25 ml di soluzione cupro-alca-
lina, 15 ml di acqua e 10 ml di soluzione defecante. Questo volume
di soluzione zuccherinanon deve contenere più di 60 mg di
zucchero invertito.
Aggiungere alcuni granuli di pietra pomice. Adattare al pallone un
refrigerante a ricadere e portare ad ebollizione entro 2 minuti.
Mantenere l'ebollizione per 10 minuti esatti.
Raffreddare immediatamente in corrente d'acqua fredda. Completato
il raffreddamento aggiungere 10 ml di soluzione di ioduro di
potassio al 30 % (4.1.2), 25 ml di acido solforico al 25 % (4.1.3) e
2 ml di salda d'amido (4. 1.4).
Titolare con la soluzione 0,1 M di tiosolfato di sodio (4.1.5). Sia n il
numero di millilitri utilizzati.
Effettuare a parte una prova in bianco, sostituendo i 25 ml di solu-
zione zuccherina con 25 ml di acqua distillata. Sia n ′il volume di
tiosolfato impiegato.
4.3.Espressionedeirisultati
4.3.1. Calcoli
Laqua ntità di zucchero del rino, espressain zucchero invertito,
contenuta nel campione in esame, è riportata nella tabella seguente
in funzione del numero (n ′− n) di millilitri di tiosolfato utilizzati.
Esprimere il tenore di zucchero in grammi di zucchero invertito per
litro con una cifra decimale, tenendo conto delle diluizioni effettuate
nel corso della defecazione e del volume del di campione.
4.3.2. Ripetibilità
r = 0,015 xi
xi= concentrazione di zucchero invertito in g/l del campione
4.3.3. Riproducibilità
R = 0,058 xi
xi= concentrazione di zucchero invertito in g/l del campione
Tabella di corrispondenza tra il volume di soluzione 0,1 M di tiosolfato di sodio = (n ′− n) ml e laqua ntità di
zuccheri riduttori in mg
Na2S2O3(ml 0,1 M)Zuccheri riduttori
(mg)Diff.Na2S2O3(ml 0,1 M)Zuccheri riduttori
(mg)Diff.
1 2,4 2,4 13 33,0 2,7
2 4,8 2,4 14 35,7 2,8
3 7,2 2,5 15 38,5 2,8
4 9,7 2,5 16 41,3 2,9
5 12,2 2,5 17 44,2 2,9
6 14,7 2,6 18 47,2 2,9
7 17,2 2,6 19 50,0 3,0
8 19,8 2,6 20 53,0 3,0
9 22,4 2,6 21 56,0 3,1
10 25,0 2,6 22 59,1 3,1
11 27,6 2,7 23 62,2
12 30,3 2,71990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 58
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6.SACCAROSIO
1. PRINCIPIO DEI METODI
I. Metodo ri ricerca qualitativa per cromatografia su strato sottile. Il
saccarosio è separato dagli altri zuccheri per cromatografia su
strato sottile di cellulosa e rivelato per mezzo del reattivo urea-
acido cloridrico in stufa a 105 ºC.
II. Metodo di ricerca e di dosaggio per cromatografia liquida ad alta
risoluzione. Il saccarosio viene separato su colonna di silice addi-
zionata di alchilammina e rivelato per rifrattometria. Il dosaggio
viene effettuato rispetto ad uno standard esterno analizzato nelle
stesse condizioni.
Osservazione:
Lagenuinità di un mosto o di un vino può essere controlla tacon
il metodo dellaRMN del deuterio descrittaper larivela zione
dello zuccheraggio dei mosti, dei mosti concentrati, dei mosti
concentrati rettificati e dei vini.
Per la ricerca ed il dosaggio del saccarosio può essere impiegato
il metodo gascromatografico descritto nel capitolo 42, lettera f).
2. METODO DI RICERCA QUALITATIVA PER CROMATO-
GRAFIA SU STRATO SOTTILE
2.1.Materiale
2.1.1. Lastre per cromatografia ricoperte di uno strato sottile di cellulosa.
2.1.2. Vasca cromatografica
2.1.3. Siringa micrometrica o micropipetta
2.1.4. Stufa termostatabile a 105 ± 2º C
2.2.Reattivi
2.2.1. Carbone decolorante
2.2.2. Fase mobile: cloruro di metilene — acido acetico (d20o— 1,05 g/ml)
— etanolo — metanolo — acqua (50: 25: 9: 6: 10)
2.2.3. Rivelatore
Urea: 5 g
Acido cloridrico 2 M: 20 ml
Etanolo: 100 ml
2.2.4. Soluzione di riferimento
Glucosio: 35 g
Fruttosio: 35 g
Saccarosio: 0,5 g
Acquaq.b. a : 1 000 ml
2.3.Mododioperare
2.3.1. Preparazione del campione
Se il mosto o il vino è fortemente colorato, decolorarlo trattandolo
con carbone attivo.
Nel caso di mosto concentrato rettificato, usare la soluzione avente
un tenore zuccherino del 25 % (m/m) (25º Brix) preparata come
indicato al capitolo «Determinazione del pH» al punto 4.1.2 e
diluirla a un quarto portando da 25 ml a 100 ml con acqua in pallone
tarato.
2.3.2. Cromatogramma
A 2,5 cm dal bordo inferiore della lastra cromatografica deporre:
— 10 µl del campione;
— 10 µl dellasoluzione di riferimento.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 59
▼B
Porre la lastra nella vasca per cromatografia satura dei vapori della
fase mobile e lasciar migrare il solvente fino ad un centimetro dal
bordo superiore. Togliere la lastra e asciugarla in corrente di aria
calda. Ripetere due volte la migrazione asciugando ogni volta la
lastra. Polverizzare uniformemente sulla lastra 15 ml del rivelatore
e porlain stufaa105 ºC per 5 minuti.
2.4.Risultati
Il saccarosio ed il fruttosio danno macchie di colore blu intenso su
fondo bianco; il glucosio dà una macchia verdastra meno intensa.
3. METODO DI RICERCA E DI DETERMINAZIONE PER CROMA-
TOGRAFIA LIQUIDA AD ALTA RISOLUZIONE
Le condizioni cromatografiche sono date a titolo indicativo.
3.1.Apparecchiatura
3.1.1. Cromatografo in fase liquida ad alta risoluzione corredato di:
1) un iniettore (loop) da10 µl,2) un rivelatore, rifrattometro differenziale o rifrattometro interfe-
rometro,
3) una colonna di silice con alchilammina legata (lunghezza 250
mm e diametro interno 4 mm),
4) unaprecolonnariempitacon lastessafa se,
5) un dispositivo per isolare o termostatare (30 ºC) l'insieme preco-
lonna-colonna,
6) un registratore ed eventualmente un integratore,
7) flusso dellafa se mobile: 1 ml/minuto.
3.1.2. Dispositivo di filtrazione sumembrana (0,45 µm)
3.2.Reattivi
3.2.1. Acqua bidistillata
3.2.2. Acetonitrile (CH
3CN) di qualità HPLC
3.2.3. Fase mobile: acetonitrile-acqua, previamente filtrati su membrana
(0,45 µm), (80 − 20 v/v)
Detta fase mobile deve essere degassificata prima dell'uso.
3.2.4. Soluzione di riferimento: soluzione acquosa di saccarosio di 1,2 g/l.
Filtrarla su membrana (0,45 µm).
3.3.Mododioperare
3.3.1. Preparazione del campione
— Per i vini e i mosti,
filtrare su membrana (0,45 µm).
— Per i mosti concentrati rettificati, utilizzare la soluzione che si
ottiene diluendo il mosto concentrato rettificato al 40 % m/v
come indicato al capitolo «acidità totale» (5.1.2) e filtrarla su
membrana (0,45 µm).
3.3.2. Determinazione cromatografica
Iniettare in fasi successive nel cromatografo 10 µl della soluzione di
riferimento e 10 µl del campione preparato come indicato al punto
3.3.1.
Ripetere le iniezioni nello stesso ordine.Registrare il cromatogramma.
Il tempo di ritenzione del saccarosio è di circa 10 minuti.
3.4.Calcoli
Utilizzare per il calcolo la media delle due risposte ottenute per la
soluzione di riferimento e per il campione.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 60
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3.4.1. Per i vini e i mosti
Calcolare il tenore in g/l.
3.4.2. Per i mosti concentrati ed i mosti concentrati rettificati
Sia C = g/l il tenore in saccarosio della soluzione del mosto concen-
trato rettificato al 40 % (m/v).
Tenore zuccherino in grammi per chilogrammo di mosto concentrato
rettificato: 2,5 · C
3.5.Espressionedeirisultati
Il tenore in saccarosio si esprime con una cifra decimale in g/l nel
caso dei vini, dei mosti e dei mosti concentrati rettificati nel caso
dei mosti concentrati rettificati, in g/kg.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 61
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7.GLUCOSIOEFRUTTOSIO
1. DEFINIZIONE
Il glucosio ed il fruttosio possono essere determinati singolarmente
con un metodo enzimatico, al solo scopo di calcolare il rapporto
glucosio/fruttosio.
2. PRINCIPIO
Il glucosio e il fruttosio sono fosforilati con adenosina-trifosfato
(ATP) con una reazione enzimatica catalizzata dall'esochinasi (HK)
e danno glucosio-6-fosfato (G6P) e fruttosio-6-fosfato (F6P):
glucosio + ATP
 G6P + ADP
fruttosio + ATP
 F6P + ADP
In un primo tempo il glucosio-6-fosfato viene ossidato a gluconato-
6-fosfato dal nicotinammide-adenina-dinucleotide-fosfato (NADP) in
presenza dell'enzima glucosio-6-fosfato-deidrogenasi (G6PDH). La
quantità di nicotinammide-adenina-dinucleotide-fosfato ridotto
(NADPH) che si forma corrisponde alla quantità di glucosio-6-
fosfato e quindi a quella del glucosio.
G6P + NADP+
Gluconato-6-fosfato + NADPH +
H+
Il nicotinammide-adenina-dinulceotide-fosfato ridotto si dosa per
assorbimento a 340 nm.
Al termine di questa reazione, il fruttosio-6-fosfato viene trasformato
dall'azione della fosfoglucosio-isomerasi (PGI) in glucosio-6-fosfato
F6P
 G6P
Il glucosio-6-fosfato reagisce di nuovo con il nicotinammide-
adenina-dinucleotide-fosfato per dare gluconato-6-fosfato e nicoti-
nammide-adenina-dinucleotide-fosfato ridotto; questo viene quindi
dosato.
3. APPARECCHIATURA
— Spettrofotometro in grado di effettuare misurazioni a 340 nm,
valore massimo di assorbimento del NADPH. Trattandosi di
misure assolute (senza curva di taratura, ma con riferimento al
coefficiente di estinzione del NADPH) le scale delle lunghezze
d'onda e delle assorbanze dell'apparecchio devono essere control-
late.
In mancanza di quest'apparecchiatura, utilizzare uno spettrofoto-
metro aspettro discontinuo che consentadi effettua re le misure a
334 nm o a365 nm.
— Celle di vetro avente un cammino ottico di 1 cm o celle
monouso.
— Pipette per provaenzima ticada0,02- 0,05- 0,01- 0,2 ml.
4. REATTIVI
4.1.Soluzione1: tampone (trietanolammina 0,3 M; pH = 7,6; 4 · 10−3M
in Mg++) sciogliere 11,2 g di cloridrato di trietanolammina (C2H5)3N·
HCl) e 0,2 g di Mg SO4·7H2O in 150 ml di acqua bidistillata,
aggiungere circa 4 ml di soluzione 5 M di idrossido di sodio
(NaOH) per ottenere un pH uguale a 7,6 e portare a 200 ml.
Questa soluzione tampone può essere conservata a + 4 ºC per quattro
settimane.
4.2.Soluzione 2: soluzione di nicotinammide-adenina-dinucleotide-
fosfato (circa 11,5 · 10−3M): sciogliere 50 mg di nicotinammide-
adenina-dinucleotide-fosfato bisodico in 5 ml di acqua bidistillata.
La soluzione si conserva a +4 ºC per quattro settimane.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 62
▼B
4.3.Soluzione 3: soluzione di adenosina-5 ′-trifosfato (circa 81 · 10−3M):
sciogliere 250 mg di adenosina-5 ′-trifosfato disodico e 250 mg di
bicarbonato di sodio NaHCO3in 5 ml di acqua bidistillata.
Questa soluzione si mantiene a + 4 ºC per quattro settimane.
4.4.Soluzione 4: Esochinasi/glucosio-6-fosfato-deidrogenasi: miscelare
0,5 ml di esochinasi (2 mg di proteina/ml, cioè 280 U/ml) e 0,5 ml
di glucosio-6-fosfato-deidrogenasi (1 mg di proteina per ml).
A + 4 ºC lasoluzione si conservaper un a nno.
4.5Soluzione 5: fosfoglucosio-isomerasi (2 mg di proteina per ml, cioè
700 U/ml). Lasospensione viene utilizza tasenzadiluizione.
A + 4 ºC circalasoluzione si conservaper un a nno.
Nota:
l'insieme dei reattivi per il dosaggio si trova pronto in commercio.
5. MODO DI OPERARE5.1.Preparazione delcampione
Effettuare le seguenti diluizioni in funzione della quantità presunta
di glucosio + fruttosio per litro:
Misuraa340 e 334 nm 365 nmDiluizione con
acquaFattore F di dilui-
zione
fino a0,4 g/l 0,8 g/l — —
fino a4,0 g/l 8,0 g/l 1+ 9 10
fino a10,0 g/l 20,0 g/l 1+ 24 25
fino a20,0 g/l 40,0 g/l 1+ 49 50fino a40,0 g/l 80,0 g/l 1+ 99 100al di sopra di 40,0 g/l 80,0 g/l 1+999 1 000
5.2.Dosaggio
Regolato lo spettrofotometro sulla lunghezza d'onda di 340 nm,
effettuare le misure rispetto all'aria (senza la cella sul percorso
ottico) o rispetto all'acqua.
Temperatura 20—25 ºC.
In 2 celle aventi un cammino ottico di 1 cm, introdurre:
Provain
biancoCampione
Soluzione 1 (4.1) (portata a 20
ºC)2,50 ml 2,50 ml
Soluzione 2 (4.2) 0,10 ml 0,10 ml
Soluzione 3 (4.3) 0,10 ml 0,10 ml
Campione da determinare 0,20 ml
Acquabidistilla ta 0,20 ml
Mescolare e dopo circa 3 minuti leggere l'assorbanza delle soluzioni
(A
1). Provocare la reazione aggiungendo:
Soluzione 4 (4.4) 0,02 ml 0,02 ml
Mescolare; aspettare 15 minuti; effettuare la misura dell'assorbanza e
verificare dopo 2 minuti che la reazione sia terminata (A2).
Aggiungere immediatamente:
Soluzione 5 (4.5) 0,02 ml 0,02 ml
Mescolare; effettuare la lettura dopo 10 minuti; verificare l'arresto
dellarea zione dopo 2 minuti (A3).
Determinare le differenze di assorbanza:1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 63
▼B
A2−A1che corrisponde al glucosio,
A3−A2che corrisponde al fruttosio,
per la prova in bianco e per il campione.Determinare la differenza di assorbanza tra la prova in bianco ( ∆A
T)
ed il campione ( ∆AD) e fissare:
per il glucosio: ∆AG=∆AC−∆AB
per il fruttosio: ∆AF=∆AC−∆AB
Osservazione:
il tempo necessario per l'azione degli enzimi può variare da un lotto
all'altro. Qui sopra è riportato soltanto a titolo indicativo. Si racco-
manda di determinarlo per ciascun lotto.
5.3.Espressionedeirisultati
5.3.1. Calcolo
La formula generale per il calcolo delle concentrazioni è la seguente:
C¼V/C1PM
ε/C1d/C1v/C11000∆Ag =lðÞ
V = volume dellasoluzione impiega taper laprova(ml)
v = volume del campione (ml)PM = massa molecolare della sostanza da dosare
d = cammino ottico della cella (cm)
ε= coefficiente di assorbimento dell'NADPH a 340 nm = 6,3
(m mole
−1·l·c m−1)
V = 2,92 ml per ladetermina zione del glucosio
V = 2,94 ml per ladetermina zione del fruttosiov = 0,20 ml
PM = 180
d= 1
Si ottiene:
Per il glucosio: Cg/l = 0,417 · ∆A
G
Per il fruttosio: Cg/l = 0,420 · ∆AF
Se per preparare il campione, è stata effettuata una diluizione, molti-
plicare il risultato per il fattore F.
Osservazione:
Per misure effettuate alle lunghezze d'onda 334 o 365 nm si ottiene:
— misuraa334 nm: ε= 6,2 (m mole−1·l·c m−1)
per il glucosio: Cg/l = 0,425 · ∆AG
per il fruttosio: Cg/l = 0,428 · ∆AF
— misuraa365 nm: ε= 3,4 (m mole−1·l·c m−1)
per il glucosio: Cg/l = 0,773 · ∆AG
per il fruttosio: Cg/l = 0,778 · ∆AF
5.3.2. Ripetibilità (r)
r = 0,056 xi
5.3.3. Riproducibilità (R)
R = 0,12 + 0,076 xi
xi= tenore in glucosio o fruttosio in grammi per litro1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 64
▼B
8.RIVELAZIONEDELL'AUMENTODELTITOLOALCOLOMETRICO
NATURALE DEI MOSTI DI UVE, DEI MOSTI DI UVE CONCEN-
TRATI, DEI MOSTI DI UVE CONCENTRATI RETTIFICATI E DEI
VINI MEDIANTE LA RISONANZA MAGNETICA NUCLEARE DEL
DEUTERIO(RMN—FINS/SNIF—NMR)
1. DEFINIZIONE
Gli atomi di deuterio contenuti negli zuccheri e nell'acqua di un
mosto di uvasi ridistribuiscono dopo lafermenta zione nelle mole-
cole I, II, III e IV del vino:
CH2DC H2OH CH3CHD OH
II I
CH3CH2OD HOD
III IV
L'aggiunta di zuccheri esogeni (zuccheraggio a secco) prima della
fermentazione del mosto si ripercuoterà sulla ridistribuzione del
deuterio.
Rispetto ai valori dei parametri relativi ad un vino campione naturale
dellastessaregione, lo zucchera ggio con zucchero esogeno provo-
cherà le seguenti variazioni:
Parametri
Vino(D/H)I(D/H)II(D/H)WQR
— Naturale
— Arricchito
— zucchero di barbabietola
— zucchero di canna
/C148/C147/C147/C147/C149/C147/C147/C147/C150
 — zucchero di mais
(D/H)I: rapporto isotopico nella molecola I
(D/H)II: rapporto isotopico nella molecola II
(D/H)WQ: rapporto isotopico dell'acqua e del vino
R = 2(D/H)II/(D/H)I, esprime ladistribuzione rela tivadel deuterio
nelle molecole I e II; R viene direttamente misurato a partire
dalle intensità h dei segnali e quindi R = 3hII/hI.
(D/H)Icaratterizza soprattutto la specie vegetale che ha sintetizzato
lo zucchero ed in misura minore la geografia del luogo di raccolta
(natura dell'acqua impiegata per la fotosintesi).
(D/H)IIrappresenta la climatologia del luogo di produzione delle uve
(qualità dell'acqua piovana e condizioni meteorologiche) ed in
misura minore, la concentrazione zuccherina del mosto iniziale.
(D/H)WQrappresenta la climatologia del luogo di produzione e la
ricchezzain zucchero del mosto inizia le.
2. PRINCIPIO
La determinazione dei parametri sopra definiti [(R, (D/H)I, (D/H)II)],
è effettuata per RMN del deuterio sull'etanolo estratto dal vino o dai
prodotti di fermentazione del mosto, del mosto concentrato, del
mosto concentrato rettificato ottenuti in determinate condizioni.
Essa è eventualmente completata con la determinazione del rapporto
isotopico dell'acqua estratta dal vino, (D/H)WQe del rapporto isoto-
pico 13C/12Cdell'etanolo.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 65
▼M5
▼B
3. PREPARAZIONE DEL CAMPIONE PER L'ANALISI
3.1.Estrazionedell'etanoloedell'acquadalvino
Osservazione:Può essere utilizzata qualsiasi apparecchiatura per l'estrazione dell'e-
tanolo a condizione che permetta di recuperare il 98-98,5 %
dell'alcol del vino ottenendo un distillato che abbia un titolo
compreso trail 92 e il 93 % ma s. (95 % vol).
3.1.1. Apparecchiature e reattivi
— Dispositivo per l'estrazione dell'etanolo (figura 1) comprendente:
— riscaldatore semisferico elettrico con variatore di tensione
— matraccio sferico da un litro con collo smerigliato
— colonna Cadiot con asta rotante (mobile in teflon)
— matracci conici con collo smerigliato da 125 ml
— bottiglie con tappodi di plastica da 125 e 60 ml
— Reattivi per il dosaggio dell'acqua con la tecnica di Karl Fischer
(ad esempio Merck 9241 e 9243)
3.1.2. Modo di operare
3.1.2.1. Determinare il titolo alcolometrico del vino con l'approssimazione di
0,05 % vol.
Siat
v.
3.1.2.2. Estrazione dell'etanolo
Versare una presa di campione omogeneo di 500 ml di vino avente
titolo alcolometrico tvnel pallone dell'apparecchiatura per la distilla-
zione che abbia un tasso di riflusso costante di circa 0,9. Collocare
un matraccio con smerigliatura da 125 ml, preventivamente tarato,
per la raccolta del distillato. Raccogliere il liquido che distilla tra
78,0 e 78,2 ºC pari a circa 40-60 ml. Interrompere l'operazione per
5 minuti quando la temperatura supera i 78,5 ºC.
Non appena la temperatura raggiunge nuovamente i 78 ºC tornare a
prelevare il distillato sino a 78,5 ºC e ripetere tale operazione fino a
quando la temperatura, dopo aver interrotto il prelievo ed aver fatto
continuare l'operazione in circuito chiuso, non decresce più. La
distillazione completa dura circa 5 ore. Questo procedimento
consente di recuperare il 98-98,5 % dell'alcool totale del vino, in
un distillato al 92-93 % in massa (95 % vol), titolo per il quale
sono state fissate le condizioni RMN descritte al paragrafo 4.
Pesare l'etanolo estratto.In un flacone da 60 ml conservare una parte (60 ml) omogenea delle
code di distillazione, che rappresenta l'acqua del vino. Determinare
eventualmente il suo rapporto isotopico.
Osservazione:se si dispone di uno spettrometro con sonda da 10 mm (vedi para-
grafo 4), saramo sufficienti 300 ml di vino.
3.1.2.3. Determinazione del titolo alcolometrico dell'alcol
estratto
Su un campione di circa 0,5 ml di alcol, di massa p esattamente
nota, determinare il tenore in acqua con il metodo Karl Fischer e
siaesso p ′g.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 66
▼B
Figura 1 — Dispositivo per l'estrazione dell'etanolo
Il titolo massico dell'etanolo è dato da
tD
m¼p/C0p0
p/C2100
3.2.Fermentazione dei mosti, dei mosti concentrati e dei mosti
concentratirettificati
3.2.1. Materiali e reattivi
— Acido tartarico
— Bacto Yeast Nitrogen (Base without amino acids) DIFCO— Lieviti secchi attivi (Saccharomyces cerevisiae)1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 67
▼B
Se si conosce il rapporto isotopico dell'acqua del mosto, i lieviti
possono essere preventivamente riattivati insemensandoli per 5
minuti in una piccola quantità di acqua tiepida non distillata (1 g in
50 ml), avente un rapporto isotopico vicino a quello dell'acqua del
mosto.
Quando non si conosce il rapporto isotopico dell'acqua del mosto, è
preferibile insemensare direttamente.
La quantità di lieviti secchi da utilizzare è dell'ordine di 1 g, cioè
circa1010cellule per 1 l di mosto.
Recipiente per lafermenta zione da1,5 l munito di un dispositivo che
consenta di operare senza contatto con l'aria e di condensare i vapori
di alcol in modo che durante la fermentazione non si abbia alcuna
perdita di etanolo. La percentuale di conversione degli zuccheri
fermentescibili in etanolo deve essere superiore al 98 %.
3.2.2. Modo di operare
3.2.2.1. Mosti
— Mosti freschi
Versare un litro di mosto di cui sia stata previamente determinata
laconcentra zione in zuccheri fermentescibili, nel recipiente
destinato alla fermentazione. Aggiungere 1 g di lieviti secchi
precedentemente riattivati. Collocare il dispositivo che consente
di operare fuori dal contatto con l'aria. Effettuare la fermenta-
zione ad una temperatura prossima a 20 ºC sino all'esaurimento
degli zuccheri. Dopo aver determinato il titolo alcolometrico del
prodotto della fermentazione e calcolato la percentuale di
conversione degli zuccheri in alcol, centrifugare il liquido
fermentato ottenuto e distillarlo per estrarre l'etanolo.
— Mosti mutizzati con anidride solforosa
Desolfitare un volume di mosto di poco superiore ad un litro (1,2
l) per gorgogliamento di una corrente di azoto nel mosto riscal-
dato in bagnomaria a 70-80 ºC in riflusso sino a quando il tenore
di anidride solforosa totale sia inferiore a 200 mg/l. Aver cura di
non provocare alcuna concentrazione del mosto per evaporazione
dell'acqua utilizzando un refrigerante efficace.
Versare un litro di mosto desolfitato nel recipiente da fermenta-
zione e continuare come indicato per i mosti freschi.
Osservazione:
Se per solfitare il mosto è stato impiegato del metabisolfito di
potassio, prima del desolfitaggio occorre addizionare a quest'ul-
timo dell'acido solforico nella misura di 0,25 ml di acido
solforico concentrato ( ρ20= 1,84 g/ml) per grammo di metabisol-
fito impiegato in un litro di mosto.
3.2.2.2. Mosti concentrati
Nel recipiente di fermentazione versare un volume V ml di mosto
concentrato contenente circa 170 g di zucchero. Completare il
volume ad 1 l con (1 000 − V) ml di acqua avente lo stesso rapporto
isotopico dell'acqua del mosto naturale testimone. Insemensare come
indicato al punto 3.2.1. Aggiungere 3 grammi di Bacto Yeast
Nitrogen (Base without amino acids DIFCO). Omogeneizzare e
continuare come prima.
3.2.2.3. Mosti concentrati rettificati
Procedere come descritto al punto 3.2.2.2 portando al volume di un
litro con (1 000 − V) ml di acqua avente lo stesso rapporto isotopico
dell'acqua del mosto naturale testimone in cui sono stati sciolti 3
grammi di acido tartarico.
Osservazione:
Conservare 50 ml di campione di mosto, di mosto desolfitato, di
mosto concentrato o di mosto concentrato rettificato per l'eventuale
estrazione dell'acqua e la determinazione del suo rapporto isotopico
(D/H)WQ.
L'estrazione dell'acqua dai mosti potrà essere effettuata molto
semplicemente per distillazione azeotropica con toluene.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 68
▼B
3.3.Preparazione delcampionedialcolperlamisuraRMN
3.3.1. Reattivi
N,N-tetrametilurea (TMU): utilizzare un campione di riferimento di
TMU avente rapporto isotopico D/H conosciuto e controllato. Tale
campione può essere fornito da:
Direction générale Science, recherche et développement
Bureau communautaire de référenceRue de laLoi 200
B-1049 Bruxelles
3.3.2. Modo di operare
— SondaRMN con dia metro da15 mm:
Introdune in una bottiglia preventivamente tarata, 7 ml dell'alcol
ottenuto al punto 3.1.2 e pesarli con l'approssimazione di 0,1 mg,
siam
Ala massa; introdurre quindi 3 ml dello standard interno
(TMU) e pesare nuovamente con l'approssimazione di 0,1 mg,
siamstla massa. Omogeneizzare la miscela per agitazione.
— SondaRMN, dia metro 10 mm:
3,2 ml di alcol e 1,3 ml di TMU sono sufficienti.A secondadel tipo di spettrometro e di sondautilizza ti (vedi
paragrafo 4), aggiungere come sostanza di stabilizzazione del
campo frequenza (lock) una quantità sufficiente di esafluoroben-
zene.
SpettrometroSonda
10 mm 15 mm
7,05 T 150 µl 200 µl
9 , 4T 3 5µ l 5 0µ l
3.4.Preparazione del campione di acqua per la misurazione RMN,
che servirà eventualmente a determinarne il suo rapporto isoto-
pico.
3.4.1. Reattivi
N,N-tetrametilurea (TMU): vedi 3.3.1
3.4.2. Modo di operare
Introdune in una bottiglia preventivamente tarata 3 ml di acqua otte-
nuta come al punto 3.1.2 o al punto 3.2 (Osservazione); pesare con
l'approssimazione di 0,1 mg (m ′E); aggiungere quindi 4 ml dello
standard interno (TMU) e pesarlo con l'approssimazione di 0,1 mg
(m′st); omogeneizzare la miscela per agitazione.
Osservazione:
Se il laboratorio dispone di uno spettrometro di massa di rapporti
isotopici, tale misura potrà essere effettuata su detto strumento in
modo da alleggerire il carico dello spettrometro RMN. È in effetti
necessario verificare il rapporto TIV(5.2) per ciascuna serie di vini
studiata.
4. REGISTRAZIONE DEGLI SPETTRI RMN2H DELL'ALCOL E
DELL'ACQUA
Determinazione dei parametri isotopici
4.1.Apparecchiatura
— Spettrometro RMN corredato di una sonda specifica «deuterio»
regolata alla frequenza caratteristicaodel campo (Bo)( ad
esempio, per Bo= 7,05 T,o= 46,05 MHz e per Bo= 9,4 T,o=
61,4 MHz), avente un canale di disaccoppiamento del protone
(B2) e un canale di stabilizzazione del campo frequenza (lock),
alla frequenza del fluoro.
La risoluzione, misurata sullo spettro, trasformato senza moltipli-
cazione esponenziale (cioè LB = O) (figura 2b) e espressa
dall'ampiezza a metà altezza dei picchi metile e metilene dell'e-
tanolo e del picco metile del TMU, deve essere inferiore a 0,51990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 69
▼B
Hz. La sensibilità, misurata con un fattore di moltiplicazione
esponenziale LB uguale a 2 (figura 2a), deve essere maggiore o
uguale a 150 per il picco metile dell'etanolo al 95 % in vol
(93,5 % mas). In queste condizioni, l'intervallo fiduciale della
misura dell'altezza del segnale, calcolato per una probabilità del
97,5 % (prova a un'ala) e per 10 ripetizioni dello spettro, è di
0,35 %.
— Campionatore automatico eventuale.— Software per l'elaborazione dei dati.
— Tubi portacampione da 15 mm o da 10 mm a seconda del potere
risolutivo dello spettrometro.
4.2.Regolazionedellospettrometroeverifiche
4.2.1. Regolazione
Procedere alle normali regolazioni di omogeneità e di sensibilità
seguendo le indicazioni del costruttore.
4.2.2. Verifica della validità delle regolazioni
Utilizzare etanoli di riferimento, contrassegnati con le lettere C, V e
B, che presentino una composizione isotopica diversa ma tarata con
precisione. Siano C = alcol di canna da zucchero o di mais, V =
alcol di vino e B = alcol di barbabietola. Tali campioni sono forniti
dal BCR (3.3.1).
Seguendo il procedimento di cui al punto 4.3, determinare i valori
isotopici di questi alcol e trascriverli C
mis,Vmis,Bmis. (Vedi 5.3).
Confrontarli con i rispettivi valori di riferimento dati, contrassegnati
daCst,Bst,Vst(vedi 5.3).
Figura2a
Spettro RMN2H di un etanolo di vino con uno standard interno
(TMU: N,N tetrametilurea)1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 70
▼B
Figura2b
Spettro2H dell'etanolo realizzato nelle stesse condizioni della figura
2a senza moltiplicazione esponenziale (LB = O)
Lo scarto tipo di ripetibilità ottenuto sulla media di 10 ripetizioni di
ciascuno spettro deve essere inferiore a 0,01 per il rapporto R ed
inferiore a0,3 ppm per (D/H)Ie per (D/H)II.
I valori medi ottenuti per i vari parametri isotopici [(R, (D/H)I, (D/
H)II)] devono cadere nel corrispondente scarto tipo di ripetibilità
dato, per tali parametri, per i tre alcol di riferimento, del BCR in
caso contrario occorre effettuare nuovamente la regolazione.
4.3.RegistrazionedeglispettriRMN
Porre il campione di alcol preparato come in 3.3 (o quello di acqua
preparato come in 3.4) in un tubo da 15 o da 10 mm e introdurlo
nellasonda .
Gli spettri RMN devono essere ottenuti nelle seguenti condizioni:
— la temperatura della sonda: (ad esempio 302 K) deve essere
costante;
— tempo di acquisizione di almeno 6,8 secondi per 1200 Hz di
ampiezza spettrale (Memoria 16 K, cioè circa 20 ppm a 61,4
MHz, oppure circa27 ppm a46,1 MHz.);
— impulso: 90 º;
— regolare il termine di acquisizione; il suo valore deve essere
dello stesso ordine di grandezza dei tempi di campionamento
(«dwell time»);
— rivelazione in quadratura: fissare l' «offset» 01 tra i segnali —
OD — CHD per l'etanolo e tra i segnali HOD e TMU per
l'acqua;
— determinare il valore dell' «offset» di disaccoppiamento 02 utiliz-
zando lo spettro protonico misurato dalla bobina di
disaccoppiamento sullo stesso tubo. Si ottiene un buon disaccop-
piamento quando O2si trova al centro dell'intervallo di frequenza
esistente trai gruppi CH3- e -CH2-. Utilizzare il disaccoppia-
mento a banda larga.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 71
▼B
Effettuare per ciascuno spettro un numero di accumulazioni NS
sufficiente ad ottenere il rapporto segnale/rumore dato al punto 4-1
e ripetere NE = 10 volte tale serie di NS accumulazioni. I valori di
NS dipendono dal tipo di spettrometro e di sonda utilizzati (vedi 4) e
si sceglierà ad esempio:
SpettrometroSonda
10 mm 15 mm
7,05 T NS = 304 NS = 200
9,04 T NS = 200 NS = 128
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
5.1.Casodell'etanolo
Per ciascuno dei 10 spettri determinare (vedi spettro RMN dell'eta-
nolo, figura2a ):
—R¼3hII
hI¼3/C1altezza del picco II CH 3CHD OH ðÞ
altezza del picco I CH 2DC H 2OH ðÞ
—D=HðÞI¼1;5866 /C1TI/C1mst
mA/C1D=HðÞst
tD
m
—D=HðÞII¼2;3799 /C1TII/C1mst
mA/C1D=HðÞst
tD
m
dove
—TI¼altezza del picco I CH 2DC H 2OH ðÞ
altezza del picco dello standard interno TMU ðÞ
—TII¼altezza del picco II CH 3D CHD OH ðÞ
altezza del picco dello standard interno TMU ðÞ
—C H3CHDO HmstemA(vedi 3.3.2)
—tmD(vedi 3.1.2.3)
— (D/H)st= rapporto isotopico dello standard interno (TMU) indi-
cato sulla confezione fornita dal BCR.
L'utilizzazione dell'altezza dei segnali al posto delle superfici misu-
rabili con minore precisione suppone larghezze uguali a metà altezza
e questa è un'approssimazione ragionevole (figura 2 b).
5.2.Casodell'acqua
Quando il rapporto isotopico dell'acqua è determinato con l'RMN,
partendo dalla miscela acqua-TMU, si usa la seguente relazione:
—D=HðÞQ
W¼0;9306 /C1TIV/C1m0
st
m0E/C1D=HðÞst
dove
—TIV¼Superficie del picco HOD ðÞdell’acqua estratta dal vino
Superficie del picco dello standard interno TMU ðÞ
—m′stet m′Evedi 3.4.2
— (D/H)st= rapporto isotopico dello standard interno (TMU) indi-
cato sulla confezione fornita dal BCR
5.3. Per ciascuno dei parametri isotopici, calcolare la media di 10 deter-
minazioni e l'intervallo fiduciale.
Un software opzionale (ad esempio RMN-FINS) adattabile all'elabo-
ratore dello spettrometro consente di effettuare in linea tali calcoli.
Osservazione:Se, dopo la regolazione dello spettrometro, si ha uno scarto sistema-
tico tra i valori medi ottenuti per le caratteristiche isotopiche degli
alcoli di riferimento (4.2.2) e i valori indicati dal BCR, a meno dello
scarto-tipo, si potrà applicare la seguente correzione per ottenere il
valore reale di un campione X qualsiasi.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 72
▼B
L'interpolazione si effettuerà prendendo i valori dei campioni di rife-
rimento immediatamente superiore e inferiore a quello del campione
X.
Sia(D/H)iX
misil valore misurato e (D/H)iX
corril valore corretto; si avrà:
(D/H)iX
corr= (D/H)iB
st+α[ (D/H)iX
mis− (D/H)iB
mis]
dove
α¼D=HðÞVst
i/C0D=HðÞBst
i
D=HðÞVmis
i/C0D=HðÞBmis
i
Esempio:
Campioni di riferimento forniti e tarati dal BCR:(D/H)
IV
st= 102,0 ppm (D/H)IB
st= 91,95 ppm
Campioni di riferimento misurati dal laboratorio:
(D/H)IV
mis= 102,8 ppm (D/H)IB
mis= 93,0 ppm
Campione sospetto non corretto:(D/H)
IX
mis= 100,2 ppm
Si calcola α= 1,0255 e (D/H)IX
corr= 99,3 ppm
6. INTERPRETAZIONE DEI RISULTATI
Confrontare il valore RXottenuto per il rapporto R del campione
sospetto con i rapporti ottenuti per i vini testimoni. Se il valore di
RXsi discosta di più di 2 scarti tipo dal valore medio RTottenuto
per i vini testimoni, vi è presunzione di adulterazione.
6.1.Aumento del titolo alcolometrico naturale con aggiunta di
zuccherodibarbabietolaodicannaoconglucosiodimais
6.1.1. Vini
RXmaggiore di RT: presunzione di addizione di zucchero di barba-
bietola.
RXinferiore aRT: presunzione di addizione di zucchero da canna o
di zucchero dama is.
Notare che (D/H)IIXe (D/H)WQXsono aumentati.
Esaminare (D/H)IX. Vi è presunzione di:
— arricchimento con zucchero da barbabietola:
(D/H)IIXdel campione sospetto è inferiore a (D/H)IT, valore
medio ottenuto con i campioni di riferimento, di oltre uno scartotipo;
— arricchimento con zucchero da canna o da mais:
(D/H)
IXè maggiore di (D/H)IT, di oltre uno scarto tipo sulla
misura.
— Calcolo dell'arricchimento E, espresso in % in volume di
etanolo:
— Caso di arricchimento con zucchero di barbabietola:
E % vol ¼tVD=HðÞT
I/C0D=HðÞX
I
D=HðÞT
I/C0D=HðÞB
I
(D/H)IB= rapporto isotopico per il sito I dell'alcol d barba-
bietola:
(D/H)IB= 92.5 (1)
tV= titolo alcolometrico del vino analizzato (X)1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 73
(1) Questi valori sono dati in attesa della costituzione di una banca dati comunitaria.
▼B
— Caso di arricchimento con zucchero di canna o di mais:
E % vol ¼tVD=HðÞX
I/C0D=HðÞT
I
D=HðÞC
I/C0D=HðÞT
I
(D/H)IC= rapporto isotopico per il sito I dell'alcol di
canna da zucchero o di mais:
(D/H)IC= 110,5 (1)
tV= titolo alcolometrico del vino analizzato (X)
6.1.2. Mosti, mosti concentrati e mosti concentrati rettificati
I valori dei parametri isotopici dell'alcol estratto, come indicato al
punto 3.1 del prodotto fermentato ottenuto (3.2) dal mosto, dal
mosto concentrato e dal mosto concentrato rettificato, vengono
esaminati secondo quanto prescritto in 6 «interpretazione dei risul-
tati» (6.1.1) confrontandoli con l'alcol estratto dal prodotto di
fermentazione dei mosti naturali testimoni.
L'arricchimento, E % vol, esprime il volume di alcol apportato al
prodotto fermentato. Conoscendo l'eventuale diluizione effettuata
prima della fermentazione (mosti concentrati e mosti concentrati
rettificati) ammettendo che 16,83 g di zucchero danno l'1 % vol di
alcol, calcolare la quantità in massa di zucchero aggiunto per litro
di mosto, di mosto concentrato o di mosto concentrato rettificato.
6.2.Aumento del titolo alcolometrico naturale con l'aggiunta di una
miscela di zucchero di barbabietola e di zucchero di canna o di
glucosiodimais
I rapporti istotopici (D/H)Ie R risultano meno modificati che nel
caso di arricchimento con un solo tipo di zucchero.
(D/H)IIe (D/H)WQrisultano aumentati.
La conferma di queste aggiunte può aversi determinando il rapporto
13C/12C dell'etanolo con lo spettrometria di massa; questo rapporto
risulterà in tale caso aumentato.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 74
(1) Questi relazi sono dati in ottese della costituzione di una banca dati comunitaria.
▼B
9.CENERI
1. DEFINIZIONE
Con il termine ceneri si intende l'insieme dei prodotti ottenuti per
incenerimento del residuo dell'evaporazione del vino, condotto in
modo da ottenere la totalità dei cationi (ad esclusione dello ione
ammonio) sotto forma di carbonati o di altri sali minerali anidri.
2. PRINCIPIO DEL METODO
Incenerimento dell'estratto del vino, effettuato fra 500 e 550 ºC fino
acombustione completadel ca rbonio.
3. APPARECCHIATURA
3.1. Bagnomaria a 100 ºC
3.2. Bilancia con sensibilità di un decimo di milligrammo3.3. Piastra riscaldante o evaporatore all'infrarosso
3.4. Forno elettrico con termoregolatore
3.5. Essiccatore3.6. Capsula in platino a fondo piano del diametro di 70 mm ed altezza
di 25 mm
4. MODO DI OPERARE
Versare 20 ml di vino nella capsula in platino previamente tarata (P
og). Fare evaporare su bagnomaria a 100 ºC, scaldare il residuo sulla
piastra riscaldante a 200 ºC o sotto l'evaporatore all'infrarosso, fino a
carbonizzazione. Quando non si ha più emissione di vapore, porre la
capsula nel forno elettrico portato alla temperatura di 525 ± 25 ºC.
Dopo 15 minuti di carbonizzazione, ritirare la capusla dal forno,
aggiungere 5 ml di acqua distillata che vengono successivamente
fatti evaporare sul bagnomaria o sotto l'evaporatore all'infrarosso e
riscaldare di nuovo a 525 ºC per una decina di minuti.
Se la combustione delle particelle carboniose non è completa, rico-
minciare le operazioni di lavaggio delle particelle carboniose, di
evaporazione dell'acqua e di incenerimento.
Per i vini ricchi di zucchero, conviene, precedentemente alla prima
calcinazione, aggiungere all'estratto alcune gocce di olio vegetale
puro per impedire che il contenuto trabocchi.
Dopo raffreddamento in essiccatore, pesare la capsula; sia P1gi l
peso.
Il peso delle ceneri corrispondente al campione prelevato per la
prova(20 ml) è p = (P1−Po)g .
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
5.1. Metodo di calcolo
Il peso P delle ceneri epresso in grammi per litro con due cifre deci-
mali sarà:
P=5 0·p1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 75
▼B
10.ALCALINITÀDELLECENERI
1. DEFINIZIONE
Si denomina l'alcalinità delle ceneri la somma dei cationi, diversi
dall'ammonio, combinati agli acidi organici del vino.
2. PRINCIPIO DEL METODO
Titolazione in presenza di metilarancio delle ceneri solubilizzate a
caldo con un eccesso noto di acido titolato.
3. REATTIVI E MATERIALE
3.1. Soluzione 0,05 M di acido solforico (H2SO4)
3.2. Soluzione 0,1 M di idrossido di sodio (NaOH)3.3. Soluzioni in acqua distillata di metilarancio allo 0,1 %
3.4. Bagnomaria a 100 ºC
4. MODO DI OPERARE
Aggiungere nella capsula di platino contenente le ceneri di 20 ml di
vino 10 ml di soluzione 0,05 M di acido solforico (3.1); porre la
capsula su bagnomaria a 100 ºC per 15 minuti circa, rompendo il
residuo con l'aiuto di una bacchetta di vetro per agevolare la disso-
luzione. Aggiungere quindi due gocce di soluzione di metilarancio e
titolare l'eccesso di acido solforico con la soluzione 0,1 M di idro-
ssido di sodio (3.2) fino a viraggio al giallo dell'indicatore.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
Metodo di calcolo
L'alcalinità delle ceneri espressa in milliequivalenti per litro, con una
cifra decimale sarà:
A = 5 (10 − n)n = numero di millilitri di idrossido di sodio 0,1 M1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 76
▼B
11.CLORURI
1. PRINCIPIO DEL METODO
I cloruri vengono dosati direttamente nel vino mediante potenziome-
triafa cendo uso dell'elettrodo Ag/AgCl.
2. APPARECCHIATURA
2.1. pH metro millivoltmetro graduato almeno di 2 in 2 mV2.2. Agitatore magnetico
2.3. Elettrodo Ag/AgCl, con una soluzione satura di nitrato di potassio
come elettrolita
2.4. Microburetta graduata a 1/100 di ml
2.5. Cronometro
3. REATTIVI
3.1. Soluzione standard di cloruri: 2,1027 g di cloruro di potassio, KCl
(massimo 0,005 % guadi Brix), essiccati prima dell'uso mediante
conservazione per qualche giorno in un essiccatore, vengono sciolti
in acqua distillata e portati al volume di 1 litro. 1 ml di questa solu-
zione contiene 1 mg di Cl
−.
3.2. Soluzione titolata di nitrato di argento: 4,7912 g di nitrato di
argento, AgNO3, vengono sciolti e portati al volume di 1 litro in
una soluzione alcolica al 10 % (v/v): 1 ml di questa soluzione corri-
sponde a1 mg di Cl−.
3.3. Acido nitrico almeno al 65 % ( ρ20= 1,40 g/ml).
4. MODO DI OPERARE
4.1. 5,0 ml di soluzione standard di cloruri vengono introdotti in un reci-
piente cilindrico di 150 ml sistemato su un agitatore magnetico,
diluiti a 100 ml circa con acqua distillata ed acidificati con 1,0 ml
di acido nitrico al 65 % minimo. Dopo l'immersione dell'elettrodo,
titolare aggiungendo con la microburetta la soluzione titolata di
nitrato di argento, agitando moderatamente. Le aggiunte effettuate
sono, all'inizio di 1,00 ml per i primi 4 ml, leggere i valori corri-
spondenti in millivolt. Aggiungere poi i 2 ml successivi suddivisi in
frazioni di 0,20 ml. Riprendere infine le aggiunte di 1 ml per volta,
finché non saranno stati aggiunti in totale 10 ml. Dopo ciascuna
aggiunta aspettare circa 30 secondi prima di effettuare la lettura dei
millivolt corrispondenti. Portare i valori ottenuti su carta millime-
trata, in funzione dei millilitri di soluzione titolata corrispondenti e
determinare il potenziale del punto di equivalenza in base al punto
singolo dellacurvaottenuta .
4.2. In un recipiente cilindrico da150 ml vengono introdotti 5 ml della
soluzione standard di cloruri, nonché 95 ml di acqua distillata e 1 ml
di acido nitrico al 65 % minimo. Immergere l'elettrodo e titolare
agitando fino a ottenimento del potenziale del punto di equivalenza.
Questa determinazione viene ripetuta fino al raggiungimento di una
buona concordanza tra i risultati. È necessario effettuare questo
controllo prima di ciascuna serie di dosaggi dei cloruri nei campioni.
4.3. 50 ml di vino da analizzare vengono introdotti in un recipiente cilin-
drico da 150 ml. Aggiungere 50 ml di acqua distillata e 1 ml di
acido nitrico di concentrazione non inferiore al 65 % e titolare
secondo il procedimento indicato al punto 4.2.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 77
▼B
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
5.1.Calcoli
Se n rappresenta il numero dei millilitri di soluzione titolata di
nitrato d'argento, il tenore in cloruri del prodotto in esame è:
20 × n espresso in milligrammi di Cl per litro,
0,5633 × n espresso in milliequivalenti per litro,
32,9 × n espresso in milligrammi di cloruro di sodio per litro.
5.2.Ripetibilità(r)
r = 1,2 mg di C1 per litro
r = 0,03 meq/l
r = 2,0 mg NaCl/l
5.3.Riproducibilità(R)
R = 4,1 mg di Cl per litro
R = 0,12 meq/l
R = 6,8 mg NaCl/l
6. Osservazioni:
Dosaggio molto preciso.Si fa riferimento alla curva di titolazione completa ottenuta durante
il dosaggio del prodotto in esame mediante la soluzione di nitrato di
argento.
a) Versare 50 ml di vino da analizzare in un recipiente cilindrico da
150 ml. Aggiungere 50 ml di acqua distillata e 1 ml di acido
nitrico ad una concentrazione non inferiore al 65 %. Titolare per
mezzo della soluzione di nitrato di argento, procedendo ad
aggiunte di 0,5 ml per le quali si rileva il corrispondente poten-
ziale in millivolt. Dedurre da questa prima titolazione il volume
approssimativo di soluzione di nitrato di argento necessario.
b) Ricominciare il dosaggio nelle stesse condizioni. Procedere all'i-
nizio ad aggiunte di 0,5 ml di soluzione titolante fino a che il
volume aggiunto è inferiore di 1,5-2 ml al volume determinato
in a). Procedere quindi ad aggiunte di 0,2 ml; continuare le
aggiunte al di là del punto di equivalenza approssimativamente
individuato, in modo simmetrico, mediante aggiunta di 0,2 e poi
di 0,5 ml.
Il punto finale del dosaggio ed il volume di soluzione di nitrato di
argento esattamente consumato viene ottenuto:
— tracciando la curva e determinando il punto di equivalenza,
oppure
— con il calcolo:
V¼V
0þ∆Vi∆∆E1
∆∆E1þ∆∆E2
dove:
V = volume di soluzione titolata al punto di equivalenza
V′= volume di soluzione titolata prima del più grande
salto di potenziale
∆Vi= volume costante delle frazioni di soluzione titolata
aggiunte, ovvero 0,2 ml
∆∆E1= differenza di potenziale prima della più grande varia-
zione di potenziale
∆∆E2= seconda differenza di potenziale dopo la più grande
variazione di potenziale1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 78
▼B
Esempio:
Volume di soluzione titolata
di AgNO3Potenziale E
in mVDifferenza
∆EDifferenza
seconda
∆∆E
0 204
4
0,2 208 0
4
0,4 212 2
6
0,6 218 0
6
0,8 224 0
6
1,0 230 2
8
1,2 238 4
12
1,4 250 10
22
1,6 272 22
44
1,8 316 10
34
2,0 350 8
26
2,2 376 6
20
2,4 396
In questo esempio il punto finale della titolazione è situato tra 1,6 e
1,8 ml: perché è in questo intervallo che appare il più grande salto di
potenziale ( ∆E = 44 mV). Il volume di soluzione titolata di nitrato di
argento consumato per dosare i cloruri nella aliquota di sostanza da
analizzare è il seguente:
V¼1;6þ0;222
22þ10¼1;74 ml1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 79
▼B
12.SOLFATI
1. PRINCIPIO DEI METODI1.1.Metododiriferimento
Precipitazione del solfato di bario e pesata. Il fosfato di bario preci-
pitato nelle stesse condizioni viene eliminato mediante lavaggio del
precipitato con acido cloridrico.
Nel caso dei mosti o dei vini ricchi di anidride solforosa, è neces-
saria una desolfitazione preliminare mediante ebollizione al riparo
dall'aria.
1.2.Metodorapidodiprova
Classificazione dei vini in diverse categorie mediante un metodo
detto dei limiti, basato sulla precipitazione del solfato di bario
mediante una soluzione titolata di ione bario.
2. METODO DI RIFERIMENTO2.1.Reattivi
2.1.1. Acido cloridrico in soluzione 2 M.2.1.2. Cloruro di bario in soluzione di 200 g/l di BaCl
2,2 H2O.
2.2.Mododioperare
2.2.1. Caso generale
In unaprovettadacentrifugada50 ml introdurre 40 ml di ca mpione
da analizzare; aggiungere 2 ml di acido cloridrico 2 M e 2 ml di
soluzione di cloruro di bario di 200 g/l; agitare con una bacchetta
di vetro; lavare la bacchetta con poca acqua distillata e lasciare a
riposo per 5 minuti. Centrifugare per 5 minuti, poi decantare con
precauzione il liquido surnatante.
Lavare quindi il precipitato di solfato di bario procedendo come
segue: aggiungere 10 ml di acido cloridrico 2 M, mettere il precipi-
tato in sospensione e centrifugare per 5 minuti. Separare con
precauzione il liquido surnatante. Ripetere due volte il lavaggio del
precipitato nelle stesse condizioni con 15 ml di acqua distillata ogni
volta.
Travasare quantitativamente lavando con acqua distillata il precipi-
tato in una capsula di platino tarata e sistemarla su un bagnomaria
a 100 ºC fino a evaporazione a secco. Il precipitato essiccato viene
calcinato parecchie volte brevemente su fiamma fino a ottenimento
di un residuo bianco. Lasciar raffreddare in un essiccatore e pesare.
Sia m la massa in milligrammi di solfato di bario ottenuta.
2.2.2. Caso particolare: mosti solfitati e vino a elevato tenore di anidride
solforosa
Procedere in primo luogo all'eliminazione dell'anidride solforosa.In una beuta da 500 ml munita di imbuto separatore e di tubo di
scarico introdurre 25 ml d'acqua e 1 ml di acido cloridrico ( ρ
20=
1,15 — 1,18 g/ml). Far bollire questa soluzione per eliminare l'aria e
introdurre 100 ml di vino attraverso l'imbuto separatore, mantenendo
l'ebollizione. Continuare l'ebollizione finché il volume del liquido
contenuto nella beuta viene ridotto a circa 75 ml e travasarlo quanti-
tativamente, previo raffreddamento, in un matraccio tarato da 100
ml. Portare a volume con acqua. Procedere al dosaggio dei solfati
su un'aliquota di 40 ml, come indicato al punto 2.2.1.
2.3.Espressionedeirisultati
2.3.1. Calcoli
Il tenore in solfati, espresso in milligrammi per litro di solfato di
potassio, K2SO4è di:
18,67 × mIl tenore del mosto o del vino in solfati viene espresso in milli-
grammi per litro di solfato di potassio, senza decimali.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 80
▼B
2.3.2. Ripetibilità (r)
Fino a1 000 mg/l: r = 27 mg/l
Attorno a1 500 mg/l: r = 41 mg/l
2.3.3. Riproducibilità (R)
Fino a1 000 mg/l: R = 51 mg/l
Attorno a1 500 mg/l: R = 81 mg/l
3. SAGGIO RAPIDO3.1.Reattivi
3.1.1. Soluzione titolata di cloruro di bario
2,804 g di cloruro di bario, BaCl
2,2 H2O e 10 ml di acido cloridrico (
ρ20= 1,15 — 1,18 g/ml) vengono sciolti in una quantità d'acqua
sufficiente aottenere 1 l di soluzione, 1 ml di questasoluzione
precipita un quantitativo di ioni solfato equivalente a 2 mg di solfato
di potassio.
3.1.2. Acido solforico ( ρ20= 1,84 g/ml) in soluzione diluita1/10 (m/v)
3.2.Mododioperare
In tre provette porre 10 m µdi mosto o di vino; aggiungere al n. 1:
3,5 ml, al n. 2: 5 ml e al n. 3: 10 ml della soluzione di cloruro di
bario. Agitare e portare a ebollizione; lasciar riposare 1-2 h. Il
liquido di ogni provetta, decantato, viene filtrato e diviso in due
porzioni. In una aggiungere qualche goccia della soluzione diluita
di acido solforico, nell'altra aggiungere qualche goccia della solu-
zione di cloruro di bario. Esaminare ogni provetta e osservare la
sualimpidezzao lasuatorbidità. L'interpreta zione viene da tanella
tabella seguente.
Vino Cloruro di barioVino filtrato +
acido solforico
diluitosoluzione di
cloruro di bario
1aprova(ml) (ml) torbido limpido
10 3,5(meno di 0,7 g di K2SO4/l)
limpido torbido
(oltre 0,7 g di K2SO4/l)
2aprova10 5torbido limpido
(meno di 1 g di K2SO4/l)
limpido torbido
(oltre 1 g di K2SO4/l)
3aprova10 10torbido limpido
(meno di 2 g di K2SO4/l)
limpido torbido
(oltre 2 g di K2SO4/l)1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 81
▼B
13.ACIDITÀTOTALE
1. DEFINIZIONE
L'acidità totale è la somma delle acidità titolabili allorché si porta il
pH a 7 per addizione di una soluzione alcalina titolata.
Il biossido di carbonio non è compreso nell'acidità totale.
2. PRINCIPIO DI METODO
Titolazione potenziometrica o titolazione in presenza di blu di
bromotimolo, come indicatore di fine reazione, per confronto con
un campione colorato.
3. REATTIVI
3.1. Soluzione tampone a pH 7,0:
fosfato monopotassico KH2PO4: 107,3 g
soluzione M di idrossido di sodio (NaOH): 500 mlacqua q.b. a: 1 000 ml
Le soluzioni tampone reperibili in commercio possono essere utiliz-
zate.
3.2. Soluzione 0,1 M di idrossido di sodio (NaOH).
3.3. Soluzione di blu di bromotimolo a4 g/l.
Blu di bromotimolo (C
27H28Br2O5S):… ............. 4g
Alcool neutro a96 % vol: …...................... 200 ml
Dopo aver solubilizzato aggiungere:
Acquaesente daCO2:… ........................... 200ml
Soluzione M di idrossido di sodio
q.b. acolora zione blu-verde (pH = 7): … ........... 7,5ml
Acquaq.b. a : …................................... 1 000 ml
4. APPARECCHIATURA
4.1. Pompa per vuoto ad acqua.4.2. Beutadavuoto da500 ml.
4.3. Potenziometro con scala tarata in unità di pH e relativi elettrodi.
L'elettrodo di vetro deve essere conservato in acqua distillata. L'elet-
trodo al calomelano-cloruro di potassio saturo deve essere
conservato in una soluzione satura di cloruro di potassio. Nella
maggior parte dei casi si usa un elettrodo combinato; conservarlo in
acqua distillata.
4.4. Recipiente cilindrico da50 ml per i vini e da100 ml per i mosti
concentrati rettificati.
5. MODO DI OPERARE5.1.Preparazione delcampione
5.1.1. Vini
Eliminazione del biossido di carbonio. Porre in una beuta da vuoto
50 ml di vino; agitare e fare contemporaneamente il vuoto mediante
la pompa ad acqua. L'agitazione deve durare 1-2 minuti.
5.1.2. Mosti concentrati rettificati
Introdurre 200 g di mosto concentrato rettificato pesato esattamente,
in un pallone tarato da 500 ml. Portare a volume con acqua. Omoge-
neizzare.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 82
▼B
5.2.Titolazionepotenziometrica
5.2.1. Taratura del pHmetro
Si effettua a 20 ºC seguendo le istruzioni date per l'apparecchio
utilizzato con la soluzione tampone a pH 7 a 20 ºC.
5.2.2. Modo di operare
In un recipiente cilindrico (4.4) versare una quantità del campione
preparato come descritto al punto 5.1 pari a 10 ml nel caso del
vino ed a 50 ml nel caso del mosto concentrato rettificato. Aggiun-
gere 10 ml circa di acqua distillata e aggiungere con la buretta la
soluzione 0,1 M di idrossido di sodio (3.2) sino aporta re il pH a7
a 20 ºC. L'addizione della soluzione alcalina deve essere effettuata
lentamente sotto costante agitazione. Sia n il numero di ml di
NaOH 0,1 M utilizzati.
5.3.Titolazioneconindicatore (blu di bromotimolo)
5.3.1. Prova preliminare: fissazione dello standard di colorazione
Versare in un recipiente cilindrico (4.4) 25 ml di acqua distillata
bollita, 1 ml di soluzione di blu di bromotimolo (3.3) e una quantità
di campione preparato come descritto al punto 5.1 pari a 10 ml nel
caso del vino ed a 50 ml nel caso del mosto concentrato rettificato.
Aggiungere lasoluzione 0,1 M di idrossido di sodio (3.2) sino a d
ottenere unacolora zione blu-verde. Aggiungere 5 ml dellasoluzione
tampone a pH 7 (3.1).
5.3.2. Dosaggio
Versare in un recipiente cilindrico (4.4) 30 ml di acqua distillata
bollita, 1 ml di soluzione di blu di bromotimolo (3.3), un volume di
campione, preparato come indicato al punto 5.1, da 10 ml nel caso
del vino e da 50 ml nel caso di mosto concentrato rettificato.
Aggiungere lasoluzione 0,1 M di idrossido di sodio (3.2) sino a d
ottenere una colorazione identica a quella ottenuta con il saggio
preliminare (5.3.1). Sia n il numero di ml di soluzione di idrossido
di sodio 0,1 M versati.
6. ESPRESSIONE DEL RISULTATI6.1.Metododicalcolo
6.1.1. Vini
L'acidità totale, espressa in milliequivalenti per litro, sarà:
A = 10 n,
il valore è dato con una cifra decimale.L'acidità toale, espressa in grammi di acido tartarico per litro, sarà:
A′= 0,075 · A,
il valore è dato con una cifra decimale.
6.1.2. Mosti concentrati rettificati
— Acidità totale espressa in milliequivalenti per chilogrammo di
mosto concentrato rettificato: a = 5 · n
— Acidità totale espressa in milliequivalenti per chilogrammo di
zuccheri totali:
A¼
500/C1n
P
dove P = tenore percentuale (m/m) in zuccheri totali.
Il valore è dato con una cifra decimale.
6.2.Ripetibilità(r):perlatitolazione conl'indicatore
r = 0,9 meq/l
r = 0,07 g di acido tartarico/l1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 83
▼B
6.3.Riproducibilità(R):perlatitolazione conl'indicatore (5.3)
Per i vini bianchi e rosati:
R = 3,6 meq/l
R = 0,3 g di acido tartarico/l
Per i vini rossi:R = 5,1 meq/l
R = 0,4 g di acido tartarico/l1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 84
▼B
14.ACIDITÀVOLATILE
1. DEFINIZIONE
L'acidità volatile è costituita dagli acidi appartenenti alla serie
acetica che si trovano nel vino allo stato libero o come sali.
2. PRINCIPIO DEL METODO
Titolazione degli acidi volatili separati dal vino per trascinamento in
corrente di vapore d'acqua e rettifica dei vapori.
Il vino viene prima liberato dal biossido di carbonio.In queste condizioni occorre sottrarre dall'acidità del distillato
l'acidità del biossido di zolfo libero e combinato che è stato distil-
lato.
Occorre anche detrarre l'acidità dovuta all'acido sorbico eventual-
mente aggiunto al vino.
Nota:
L'acido salicilico utilizzato in taluni paesi prima dell'analisi per
stabilizzare i vini, si ritrova in parte nel distillato. È quindi neces-
sario dosarlo e detrarlo dall'acidità volatile. Il metodo di dosaggio è
riportato nel punto 7 al presente capitolo.
3. REATTIVI
3.1. Acido tartarico cristallizzato (C
4H6O6)
3.2. Soluzione 0,1 M di idrossido di sodio (NaOH)
3.3. Soluzione di fenolftaleina all'1 % in alcol neutro al 96 % vol
3.4. Acido cloridrico ( ρ20= 1,18 — 1,19 g/ml) diluito ¼ (v/v)
3.5. Soluzione 0,005 M di iodio (I2)
3.6. Ioduro di potassio cristallizzato (KI)
3.7. Salda di amido a 5 g/l
Disperdere 5 g di amido in circa 500 ml di acqua. Portare all'ebolli-
zione agitando e mantenerla per 10 minuti; aggiungere 200 g di
cloruro di sodio. Dopo aver lasciato raffreddare portare a 1 l.
3.8. Soluzione satura di tetraborato di sodio (Na2B4O7,1 0H2O), cioè
circa55 g/l a20 ºC.
4. APPARECCHIATURA
4.1. Apparecchio di distillazione in corrente di vapore di acqua composto
da:
1. un generatore di vapore d'acqua; il vapore d'acqua prodotto deve
essere esente dabiossido di ca rbonio;
2. un gorgogliatore;3. unacolonnadi rettifica ;4. un refrigerante.
L'apparecchio deve soddisfare alle condizioni definite dai
seguenti tre saggi:
a) Versare nel gorgogliatore 20 ml di acqua bollita; raccogliere
250 ml di distillato ed addizionarvi 0,1 ml di soluzione 0,1
M di idrossido di sodio (3.2) e 2 gocce dellasoluzione di
fenolftaleina (3.3); la colorazione rosa deve mantenersi stabile
per almeno 10 secondi (vapore d'acqua esente da biossido di
carbonio).
b) Versare nel gorgogliatore 20 ml di una soluzione 0,1 M di
acido acetico. Raccogliere 250 ml di distillato. Titolare con
lasoluzione 0,1 M di idrossido di sodio (3.2). Il volume
impiegato deve essere almeno pari a 19,9 ml (acido acetico
trascinato ≥99,5 %).
c) Versare nel gorgogliatore 20 ml di una soluzione M di acido
lattico. Raccogliere 250 ml di distillato e titolarne l'acidità con
lasoluzione 0,1 M di idrossido di sodio (3.2).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 85
▼B
Il volume impiegato deve essere inferiore o uguale a 1,0 ml
(acido lattico distillato ≤0,5 %).
Gli apparecchi o le tecniche che soddisfano a questi saggi
sono da considerare apparecchi o tecniche ufficiali internazio-
nali.
4.2. Pompa per vuoto a caduta d'acqua.4.3. Beutadavuoto.
5. MODO DI OPERARE
5.1.Preparazione delcampione: eliminazione del biossido di carbonio.
Versare circa 50 ml di vino in una beuta da vuoto; agitare e creare
contemporaneamente il vuoto per mezzo della pompa per vuoto a
caduta d'acqua. L'agitazione deve durare 1 o 2 minuti.
5.2.Trascinamentoincorrente divapored'acqua
Versare nel gorgogliatore 20 ml di vino privato, come descritto al
punto 5.1, del biossido di carbonio. Aggiungere circa 0,5 g di acido
tartarico (3.1). Raccogliere almeno 250 ml di distillato.
5.3.Titolazione
Titolare con la soluzione 0,1 M di idrossido di sodio (3.2) in
presenzadi due gocce di soluzione di fenolfta leina(3.3), sian il
volume in ml impiegato.
Aggiungere 4 gocce di acido cloridrico diluito ¼ (3.4), 2 ml di salda
di amido (3.7) ed alcuni cristalli di ioduro di potassio (3.6). Titolare
il biossido di zolfo libero con lasoluzione 0,005 M di iodio (3.5).
Sian′il volume in ml impiegato.
Aggiungere la soluzione satura di tetraborato di sodio (3.8) sino al
ritorno del colore rosa. Titolare il biossido di zolfo combinato con
lasoluzione 0,005 M di iodio (3.5). Sian ″il volume in ml impie-
gato.
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
6.1.Procedimentodicalcolo
L'acidità volatile espressa in milliequivalenti per litro, con una cifra
decimale, sarà:
A = 5 (n − 0,1 n ′− 0,05 n ″)
L'acidità volatile espressa in grammi di acido acetico per litro con
due cifre decimali, sarà:
0,300 (n − 0,1 n ′− 0,05 n ″)
6.2.Ripetibilità(r)
r = 0,7 meq/l
r = 0,04 g di acido acetico/l
6.3.Riproducibilità(R)
R = 1,3 meq/l
R = 0,08 g di acido acetico/l
6.4.Viniaddizionatidiacidosorbico
Poiché con i primi 250 ml di distillato viene trascinato il 96 %
dell'acido sorbico, occorre detrarre la sua acidità dall'acidità volatile
tenendo conto che 100 mg di acido sorbico, corrispondono ad una
acidità di 0,89 milliequivalenti o di 0,053 g di acido acetico e cono-
scendo il tenore di acido sorbico (mg/l) determinato a parte.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 86
▼B
7. DETERMINAZIONE DELL'ACIDO SALICILICO TRASCINATO
NEL DISTILLATO DELL'ACIDITÀ VOLATILE
7.1.Principio
Una volta determinata l'acidità volatile ed effettuata la correzione
per il biossido di zolfo, la presenza di acido salicilico è caratteriz-
zata, dopo acidificazione, dalla colorazione violetta che si forma
per addizione di un sale di ferro III.
La determinazione dell'acido salicilico trascinato nel distillato con
l'acidità volatile, è effettuata su un secondo distillato avente lo stesso
volume di quello su cui è stato effettuato il dosaggio dell'acidità
volatile. In tale distillato, si determina l'acido salicilico con un
metodo colorimetrico per confronto. Lo si detrae quindi dall'acidità
del distillato.
7.2.Reattivi
7.2.1. Acido cloridrico (HCl) ( ρ20= 1,18 — 1,19 g/ml)
7.2.2. Tiosolfato di sodio (Na2S2O3;5H2O) in soluzione 0,1 M.
7.2.3. Soluzione di solfato ferrico ammonico [Fe2(SO4)3· (NH4)2SO4·2 4
H2O] al 10 % (m/v).
7.2.4. Soluzione di salicilato di sodio 0,01 M
Soluzione contenente 1,60 g/l di salicilato di sodio (Na C7H5O3).
7.3.Mododioperare
7.3.1. Caratterizzazione dell'acido salicilico nel distillato dell'acidità vola-
tile
Subito dopo avere determinato l'acidità volatile ed averla corretta per
il biossido di zolfo libero e combinato, aggiungere nella beuta 0,5 ml
di acido cloridrico (7.2.1), 3 ml della soluzione 0,1 M di tiosolfato di
sodio (7.2.2) ed 1 ml della soluzione di solfato ferrico ammonico
(7.2.3).
In presenza di acido salicilico si ha la formazione di una colorazione
violetta.
7.3.2. Dosaggio dell'acido salicilico
Nella beuta conica di cui al punto precedente segnare con un trattino
di riferimento il volume del distillato. Svuotare e quindi lavare la
beuta.
Sottoporre a distillazione in corrente di vapori d'acqua una nuova
presa di campione da 20 ml di vino e raccogliere il distillato nella
beuta riempiendola sino al trattino di riferimento. Aggiungere 0,3
ml di acido cloridrico (7.2.1) e 1 ml della soluzione di solfato ferrico
ammonico (7.2.3). Il contenuto della beuta assume una colorazione
violetta.
Versare, in una beuta identica a quella recante la tacca di riferi-
mento, acqua distillata sino a raggiungere lo stesso livello del
distillato. Aggiungere 0,3 ml di acido cloridrico (7.2.1) e 1 ml di
soluzione di solfato ferrico ammonico (7.2.3). Aggiungere con una
buretta la soluzione di salicilato di sodio 0,01 M (7.2.4) sino ad otte-
nere unacolora zione violettadellastessaintensità di quelladella
beutacontenente il distilla to di vino.
Sian/tripleprimeil numero di millilitri utilizzati.
7.4.Correzione dell'acidità volatile
Detrarre 0,1 · n /tripleprimeml dal volume di n ml di soluzione di idrossido di
sodio 0,1 M impiegato per titolare l'acidità del distillato in sede di
dosaggio dell'ecidità volatile.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 87
▼B
15.ACIDITÀFISSA
1. PRINCIPIO
L'acidità fissa è determinata per differenza tra l'acidità totale e
l'acidità volatile.
2. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
L'acidità fissa si esprime:
— in milliequivalenti per litro,
— in grammi di acido tartarico per litro.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 88
▼B
16.ACIDOTARTARICO
1. PRINCIPIO DEI METODI1.1.Metododiriferimento
L'acido tartarico, precipitato sotto forma di racemato di calcio, viene
dosato per via ponderale. Tale dosaggio può essere completato da un
dosaggio volumetrico di confronto. Le condizioni di precipitazione
(pH, volume totale impiegato, concentrazioni degli ioni precipitanti)sono tali che il racemato di calcio precipita completamente, mentre
il tartrato di calcio levogiro D(−) rimane in soluzione.
Il vino, quando è stato addizionato di acido metatartarico che rende
incompleta la precipitazione del racemato di calcio, dovrà essere
previamente idrolizzato.
1.2.Metodousuale
L'acido tartarico, isolato mediante una colonna scambiatrice di
anioni, è dosato colorimetricamente nell'eluato grazie alla colora-
zione rossa che dà con l'acido vanadico. Questo eluato contiene
anche gli acidi lattico e malico, che non interferiscono nell'analisi.
2. METODO DI RIFERIMENTO2.1.Metodoponderale
2.1.1. Reattivi
2.1.1.1. Soluzione di acetato di calcio, contenente 10 g/l di calcio:
Carbonato di calcio (CaCO
3):…...................... 25 g
Acido acetico glaciale (CH3COOH) ( ρ20= 1,05 g/ml): … 40 ml
Acquaq.b. a .: … ...................................... 1000 l
2.1.1.2. Racemato di calcio cristallizzato: Ca C4O6H4:4 H2O
In un becher da400 ml introdurre 20 ml di unasoluzione di a cido
L(+) tartarico contenente 5 g/l, 20 ml di una soluzione di D(−)
tartrato di ammonio a 6, 126 g/l e 6 ml della soluzione di acetato
di calcio contenente 10 g/l di calcio (2.1.1.1).
Lasciar precipitare per due ore. Raccogliere il precipitato su un
crogiuolo filtrante di porosità n. 4 e lavarlo in tre riprese con 30 ml
circa di acqua distillata. Essiccare in stufa a 70 ºC fino a peso
costante. Con le quantità di reattivo adoperate si ottengono circa
340 mg di racemato di calcio cristallizzato.
Conservare in recipiente chiuso.
2.1.1.3. Soluzione precipitante (pH 4,75):
— acido D(−)tartarico: …......................... 122 mg
— idrossido di ammonio ( ρ20= 0,97 g/ml) diluitaa l
25% (v/v): ….................................. 0,3 ml
— soluzione di acetato di calcio contenente 10 g/l
di calcio:....................................... 8,8 ml
— acqua q.b. a: …................................ 1 000 ml
Sciogliere l'acido D(−) tartarico e aggiungere l'idrossido di
ammonio; portare il volume a 900 ml con acqua; aggiungere 8,8 ml
di soluzione di acetato di calcio (2.1.1.1), agitare, aggiustare il pH a
4,75 con l'acido acetico. Portare a 1 litro.
Poiché il racemato di calcio è leggermente solubile in questo liquido,
è opportuno aggiungere 5 mg/l di racemato di calcio, agitare per 12
ore e filtrare.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 89
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2.1.2. Modo di operare
2.1.2.1. Vini non addizionati di acido metatartarico
In un becher da600 ml, porre 500 ml di soluzione precipita nte e 10
ml di vino. Mescolare e favorire la precipitazione sfregando le pareti
del becher con l'estremità di una bacchetta di vetro. Lasciar precipi-
tare per 12 ore (una notte).
Filtrare su crogiuolo filtrante di porosità n. 4, tarato e collocato su
una beuta a vuoto pulita, facendo in modo che il liquido porti con
sé il precipitato. Risciacquare col filtrato il recipiente di precipita-
zione, in maniera da raccogliere le ultime particelle di precipitato.
Essiccare in stufa a 70 ºC fino a peso costante. Pesare: sia p il peso
di racemato di calcio CaC4O6H4cristallizzato con 4 molecole
d'acqua.
2.1.2.2. Vini addizionati di acido metatartarico
In caso di presenza effettiva o sospetta di acido metatartarico nel
vino, procedere all'idrolisi di tale acido nelle condizioni seguenti:
In una beuta da 50 ml versare 10 ml di vino e 0,4 ml di acido
acetico glaciale (CH3COOH, ρ20= 1,05 g/ml). Chiudere labeuta
con un tappo fornito di paraspruzzi e far bollire per 30 minuti.
Dopo raffreddamento, travasare in un becher il liquido contenuto
nella beuta; risciacquare per due volte la beuta con 5 ml d'acqua e
proseguire come indicato più sopra.
Nel calcolo finale, l'acido metatartarico viene computato come acido
tartarico.
2.1.3. Espressioni dei risultati
Una molecola di racemato di calcio corrisponde a mezza molecola di
acido L(+)tartarico del vino.
La quantità di acido tartarico per litro di vino espressa in milliequi-
valenti con una cifra decimale, è uguale a: 384,5 p.
La quantità di acido tartarico per litro di vino, espressa con una cifra
decimale in grammi di acido tartarico, è uguale a: 28,84 p.
La quantità di acido tartarico per litro di vino, espressa con una cifra
decimale in grammi di tartrato acido di potassio, è uguale a: 36,15 p.
2.2.Dosaggiovolumetricodiconfronto
2.2.1. Reattivi
2.2.1.1. Acido cloridrico (HCI) ( ρ20= 1,18 - 1,19 g/ml) diluito 1/5 (v/v)
2.2.1.2. Soluzione di EDTA 0,05 M:
EDTA (sale disodico biidrato dell'acido etilendiammi-
notetracetico (C10H14N2O8Na2;2 H2O): … ................ 18,61 g
Acqua distillata q.b. a: ….............................. 1 000 ml
2.2.1.3. Soluzione d'idrossido di sodio al 40 % (p/v):
Idrossido di sodio (NaOH): …........................ 40 g
Acqua distillata q.b. a: …............................. 100 ml
2.2.1.4. Indicatore complessometrico all'acido calconcarbonico 1 % (m/m):
Acido calconcarbonico o acido 2-idrossi-4-sulfo-1-nafti-
lazo-3-naftoico (C21H14H2O7S, 3H2O): ...................... 1g
Solfato di sodio anidro (Na2SO4):…...................... 100g
2.2.2. Modo di operare
Dopo pesata, rimettere il crogiuolo contenente il precipitato di race-
mato di calcio sulla beuta da vuoto e sciogliere il precipitato con 10
ml di acido cloridrico diluito (2.2.1.1). Lavare il crogiuolo filtrante
con 50 ml di acqua distillata.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 90
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Aggiungere 5 ml di soluzione di idrossido di sodio al 40 % (2.2.1.3)
e 30 mg circa di indicatore (2.2.1.4). Titolare con l'EDTA 0,05 M
(2.2.1.2). Sian il numero di ml impiega ti.
2.2.3. Espressione dei risultati
La quantità di acido tartarico per litro di vino espressa con una cifra
decimale in milliequivalenti, è uguale a: 5 n.
La quantità di acido tartarico per litro di vino espressa con una cifra
decimale, in grammi di acido tartarico, è uguale a: 0,375 n.
La quantità di acido tartarico per litro di vino espresso con una cifra
decimale, in grammi di tartrato acido di potassio, è uguale a: 0,470
n.
3. METODO USUALE
3.1.Reattivi
3.1.1. Per il trattamento preliminare del vino
3.1.1.1. Acido acetico (CH3COOH ρ20= 1,05 g/ml) diluito al 30 % (v/v).
3.1.1.2. Scambiatore di anioni di forte basicità (per esempio scambiatore di
anioni III Merck 20-50 mesh) sotto forma di acetato. Preparare una
sospensione dello scambiatore (100 g circa) in 200 ml di acido
acetico al 30 % (3.1.1.1).
Lasciare in contatto per almeno 24 ore prima dell'utilizzazione.
Conservare lo scambiatore in acido acetico al 30 % per dosaggi ulte-
riori.
3.1.1.3. Acido acetico CH3COOH ( ρ20= 1,05 g/ml) diluito allo 0,5 % (v/v).
3.1.1.4. Soluzione di solfato di sodio a 7,1 g per 100 ml.
Sciogliere 71 g di solfato di sodio (Na2SO4) anidro in acqua distillata
e portare a 1 000 ml con acqua distillata.
3.1.2. Per il dosaggio dell'acido tartarico
3.1.2.1. Soluzione di acetato di sodio (CH3COONa) al 27 % (m/v).
Sciogliere 270 g di acetato di sodio anidro, CH3COONain a cqua
distillata e portare a 1 000 ml.
3.1.2.2. Reattivo vanadico:
Sciogliere 10 g di metavanadato di ammonio, (NH4VO3) in 150 ml
di soluzione di idrossido di sodio 1 M (3.1.2.10). Travasare questa
soluzione in un matraccio tarato da 500 ml, aggiungere 200 ml della
soluzione di acetato di sodio al 27 % (3.1.2.1). Portare a 500 ml con
acqua distillata.
3.1.2.3. Soluzione di H2SO4(1 M).
3.1.2.4. Soluzione di H2SO4(0,5 M).
3.1.2.5. Soluzione di H2SO4(0,05 M).
3.1.2.6. Soluzione di acido periodico (0,05 M).
In un matraccio tarato da 1 000 ml, introdurre 10,696 g di periodato
di sodio, NaIO4, 50 ml di acido solforico 0,5 M (3.1.2.4) e portare a
1 000 ml con acqua distillata.
3.1.2.7. Soluzione di glicerolo al 10 % (m/v).
In un matraccio tarato da 100 ml, porre 10 g di glicerolo C3H8O3;
portare a 100 ml con acqua distillata.
3.1.2.8. Soluzione di solfato di sodio a 7,1 g per 100 ml (vedi 3.1.1.4).
3.1.2.9. Soluzione di acido tartarico a 1 g/l.
Introdurre, in un matraccio tarato da 500 ml, 0,5 g di acido tartarico,
6,66 ml di soluzione di idrossido di sodio 1 M (3.1.2.10) e portare a
500 ml con la soluzione di solfato di sodio al 7,1 % (3.1.1.4).
3.1.2.10. Soluzione di idrossido di sodio, NaOH, 1 M.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 91
▼B
3.2.Apparecchiatura
3.2.1. Colonne di vetro lungo circa300 mm e con dia metro interno di 10-
11 mm, munitadi un rubinetto.
3.2.2. Spettrofotometro per misure di assorbanza a 490 nm corredato di
celle aca mmino ottico di 10 mm.
3.3.Mododioperare
3.3.1. Preparazione della colonna scambiatrice di ioni
Porre nellacolonnadi vetro soprail rubinetto (3.2.1), un ta mpone di
lana di vetro e impregnarlo di acqua distillata. Versare nella colonna
10 ml della sospensione di scambiatore di ioni sotto forma di acetato
(3.1.1.2). Lasciare decantare. Porre un tampone di lana di vetro sulla
superficie dello scambiatore depositato (in modo da evitare che
durante gli ulteriori lavaggi lo scambiatore sia rimesso in sospen-
sione).
Lo scambiatore deve essere usato una sola volta.
3.3.2. Isolamento degli acidi organici
Con il rubinetto aperto, lasciare defluire la soluzione di acido acetico
sino a circa 2-3 mm al di sopra del tampone di lana di vetro situato
sopra lo scambiatore.
Aggiungere 10 ml di soluzione di acido acetico allo 0,5 % (3.1.1.3),
lasciando quindi defluire il liquido sino allo stesso livello della
precedente operazione. Ripetere il lavaggio altre 4 volte.
Dopo l'ultimo lavaggio, tenendo chiuso il rubinetto, versare sullo
scambiatore 10 ml di vino o di mosto. Lasciare defluire il vino
gocciaagoccia(flusso medio di 1 gocciaa l secondo) e sospendere
il deflusso immediatamente al di sopra dello scambiatore. Aggiun-
gere nuovamente nella colonna 10 ml di soluzione di acido acetico
allo 0,5 % (3.1.1.3), lasciare defluire alla stessa velocità della prece-
dente operazione e lavare ancora 7 volte utilizzando ogni volta 10
ml di acqua. All'ultimo lavaggio, chiudere il rubinetto non appena
il livello del liquido si trova poco al di sopra del tampone di lana
di vetro superiore.
Eluire gli acidi fissati sullo scambiatore mediante la soluzione di
solfato di sodio al 7,1 % (3.1.1.4); raccogliere l'eluato in un
matraccio tarato da 100 ml riempiendolo sino al segno di riferi-
mento.
3.3.3. Dosaggio dell'acido tartarico
3.3.3.1. Vini non addizionati di acido metatartarico.
In due beute, aeb, introdurre 20 ml di eluato.
Labeuta aserve per ladetermina zione mentre labeuta bnellaqua le
l'acido tartarico viene distrutto per azione dell'acido periodico, serve
per laprovain bia nco.
Introdurre nellabeuta a:
— 2 ml di H2SO4M (3.1.2.3),
— 5 ml di H2SO40,05 M (3.1.2.5),
— 1 ml di glicerolo al 10 % (3.1.2.7);
Introdurre nellabeuta b:
— 2 ml di H2SO4M (3.1.2.3),
— 5 ml di soluzione di acido periodico 0,05 M (3.1.2.6).
Aspettare 15 minuti; aggiungere:
1 ml di soluzione di glicerolo al 10 % (3.1.2.7) per distruggere
l'eccesso di acido periodico.
Aspettare 2 minuti.
Versare quindi agitando, dapprima nella beuta be subito dopo nella
beutaa, 5 ml di reattivo vanadico (3.1.2.2). Fare scattare immediata-
mente un cronometro e versare il contenuto delle beute aebnelle
celle dello spettrofotometro. Dopo 90 secondi misurare l'assorbanza
a490 nm del liquido proveniente da llabeuta a(dosaggio) in
confronto al bianco (beuta b).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 92
▼B
Se l'eluato è troppo ricco in acido tartarico e l'assorbanza è quindi
troppo elevata, diluirlo con la soluzione di solfato di sodio al 7,1 %
e procedere alla misura della soluzione diluita.
3.3.3.2. Vini addizionati di acido metatartarico
Nel caso di un vino addizionato di acido metatartarico o che si
sospetti tale, procedere all'idrolisi di tale acido come è indicato per
il metodo di riferimento.
Dopo raffreddamento, versare il contenuto della beuta e le acque di
lavaggio (2 volte 5 ml) in testa alla colonna dello scambiatore.
Continuare come sopra descritto.
Nel risultato del dosaggio l'acido metatartarico è espresso come
acido tartarico.
3.3.4. Determinazione della curva di taratura
Versare 10, 20, 30, 40 e 50 ml della soluzione di acido tartarico a 1
g/l (3.1.2.9) nei palloni tarati da 100 ml e portare a volume con la
soluzione di solfato di sodio al 7,1 %/100 ml (3.1.1.4). Le concentra-
zioni di queste soluzioni corrispondono ad eluati di vini contenenti
1, 2, 3, 4 e 5 g di acido tartarico per litro.
Versare, in 2 beute aeb, 20 ml di queste soluzioni e continuare
come descritto sopraper l'elua to di vino.
La rappresentazione grafica delle assorbanze di queste soluzioni in
funzione del tenore in acido tartarico è una retta che si incurva
leggermente in prossimità dello zero. Se occorre, disegnare con
maggiore precisione questa parte della curva misurando soluzioni a
titolo esattamente noto inferiori a 1,0 g/l.
3.3.5. Espressione dei risultati
Riportare l'assorbanza misurata per l'eluato sulla curva di taratura per
ottenere il tenore in acido tartarico del vino espresso in grammi per
litro con unacifradecima le.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 93
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17.ACIDOCITRICO
1. PRINCIPIO DEI METODO
L'acido citrico viene trasformato in ossalacetato e acetato in una
reazione catalizzata dalla citrato-liasi (CL):
citrato
 ossalacetato + acetato
In presenza della malato-deidrogenasi (MDH) e della lattato-deidro-
genasi (LDH), l'ossalacetato e il suo derivato di decarbossilazione, il
piruvato, vengono ridotti dal nicotinammide — adenina-dinucleotide
ridotto (NADH) a L-malato ed a L-lattado:
Ossalacetato + NADH + H+
L-malato + NAD+
Piruvato + NADH + H+
L-lattato + NAD+
In queste reazioni, la quantità di NADH ossidato a NAD+è propor-
zionale al citrato presente. L'ossidazione dell'NADH viene misurata
dalla diminuzione della sua assorbanza alla lunghezza d'onda di 340
nm.
2. REATTIVI
2.1. Tampone a pH 7,8
(glicilglicina0,51 M; pH 7,8 Zn2+: 0,6 · 10−3M):
sciogliere in circa 70 ml di acqua bidistillata 7,13 g di glicilglicina;
portare il pH a 7,8 con circa 13 ml di soluzione di idrossido di sodio
5 M; addizionare 10 ml di soluzione di cloruro di zinco ZnCl280
mg/100 ml; portare a 100 ml con acqua bidistillata.
La soluzione rimane stabile a + 4 ºC per almeno 4 settimane.
2.2. Soluzione di nicotinammide-adenina-dinucleotide ridotto (NADH),
circa6 · 10−3M, sciogliere 30 mg di NADH e 60 mg di NaHCO3in 6 ml di acqua bidistillata.
2.3. Soluzione di malato deidrogenasi/lattato deidrogenasi (MDH/LDH)
(0,5 mg MDH/ml; 2,5 mg/ml): miscelare 0,1 ml di MDH (5 mg
MDH/ml), 0,4 ml di soluzione di solfato di ammonio (3,2 M) l 0,5
ml di LDH (5 mg/ml). A 4 ºC questa sospensione si mantiene stabile
per almeno un anno.
2.4. Citrato-liasi CL (5 mg di proteina/ml): sciogliere in un ml di acqua
ghiacciata 168 mg di liofilizzato. Alla temperatura di 4 ºC la solu-
zione si mantiene stabile per almeno una settimana e se congelata
per almeno 4 settimane.
Prima del dosaggio si raccomanda di procedere alla verifica dell'at-
tività dell'enzima.
2.5. Polivinilpolipirrolidone (PVPP)
Nota:L'insieme dei reattivi necessari per la determinazione si trova pronto
in commercio.
3. APPARECCHIATURA
3.1. Spettrofotometro in grado di effettuare misurazioni a 340 nm,
massimo di assorbimento dell'NADH.
In alternativa si può usare, il fotometro a spettro discontinuo con
lunghezzad'ondaa334 nm o a365 nm. Poiché si tra ttadi misure
assolute di assorbanza (senza curva di taratura ma con riferimento
al coefficiente di estinzione del NADH), occorre controllare le scale
delle lunghezze d'onda e delle assorbanze dell'apparecchio.
3.2. Celle di vetro con cammino ottico di 1 cm o celle monouso.
3.3. Micropipette per il prelievo di volumi compresi tra0,02 e 2 ml.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 94
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4. PREPARAZIONE DEL CAMPIONE
Il dosaggio del citrato si effettua in genere direttamente sul vino
senzapreventivadecolora zione o diluizione, acondizione che il
tenore in acido citrico sia inferiore a 400 mg/l. In caso contrario
diluire il vino in modo che la concentrazione in citrato sia compresa
tra 20 e 400 mg/l (quantità di citrato nella presa di campione
compresafra5 µg e 80 µg).
Nel caso del vino rosso ricco di composti fenolici, si raccomanda di
trattarlo preliminarmente con la PVPP:
mettere in sospensione nell'acqua 0,2 gr circa di PVPP, lasciare ripo-
sare per 15 minuti. Filtrare su filtro a pieghe.
Addizionare a 10 ml di vino versato in una beuta conica da 50 ml, il
PVPP umido prelevato dal filtro con la spatola. Agitare per 2-3
minuti. Filtrare.
5. MODO DI OPERARE
Regolato lo spettrofotometro sulla lunghezza d'onda di 340 nm,
effettuare le misure di assorbanza in celle da 1 cm dopo aver aggiu-
stato l'apparecchio allo zero di assorbanza contro aria (senza la cella
sul percorso ottico).
Introdurre nelle celle da1 cm:
bianco campione
soluzione 2.1 1,00 ml 1,00 ml
soluzione 2.2 0,10 ml 0,10 ml
campione — 0,20 ml
acqua bidistillata 2,00 ml 1,80 ml
soluzione 2.3 0,02 ml 0,02 ml
Mescolare; dopo circa 5 minuti leggere le assorbanze della soluzione
del bianco e di quella del campione (A1).
Aggiungere:
soluzione 2.4 0,02 ml 0,02 ml
Mescolare; attendere che la reazione abbia termine (circa 5 minuti) e
leggere le assorbanze della soluzione del bianco e del campione
(A2).
Determinare le differenze di assorbanza (A1−A2) del bianco e del
campione.
Sottrarre la differenza delle assorbanze del bianco dalla differenza
delle assorbanze del campione: ∆A= ∆AC−∆AB
Nota:
il tempo necessario per l'azione degli enzimi può variare da un lotto
all'altro; qui viene dato soltanto a titolo indicativo. Se ne racco-
manda la determinazione per ciascun lotto.
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
Il tenore in acido citrico è dato in mg per litro (mg/l) senza cifre
decimali.
6.1.Metododicalcolo
La concentrazione in milligrammi per litro è data dalla seguente
formulagenera le:
C¼V/C1PM
ε/C1d/C1v/C1∆A
dove:
V = volume in ml dellasoluzione impiega taper laprova(in
questo caso 3,14 ml)1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 95
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v = volume del campione in ml (in questo caso 0,2 ml)
PM = peso molecolare della sostanza da dosare (in questo caso
acido citrico anidro = 192,1)
d = cammino ottico della cella in cm (in questo caso 1 cm)
ε= coefficiente di assorbanza dell'NADH a 340 nm,
ε= 6,3 mmole−1·l·c m−1.
Si ottiene:C = 479 · ∆A
Se per preparare il campione è stata effettuata una diluizione, molti-
plicare il risultato per il fattore di diluizione.
Nota:
a334 nm: C = 488 · ∆A(ε= 6,2 mmole
−1·l·c m−1)
a365 nm: C = 887 · ∆A(ε= 3,4 mmole−1·l·c m−1)
6.2.Ripetibilità(r)
Tenore in acido citrico inferiore a 400 mg/l: r = 14 mg/l
Tenore in acido citrico superiore a 400 mg/l: r = 28 mg/l
6.3.Riproducibilità(R)
Tenore in acido citrico inferiore a 400 mg/l: R = 39 mg/l
Tenore in acido citrico superiore a 400 mg/l: R = 65 mg/l.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 96
▼B
18.ACIDOLATTICO
1. PRINCIPIO DEL METODO1.1.Metododiriferimento
L'acido lattico totale (L-lattato e D-lattato) viene ossidato, in
presenza di nicotinammide-adenina-dinucleotide (NAD), a piruvato
mediante una reazione catalizzata dalla L-lattato deidrogenasi (L-
LDH) e dalla D-lattato deidrogenasi (D-LDH).
L'equilibrio della reazione è spostato verso il lattato. L'eliminazione
del piruvato dal mezzo di reazione sposta l'equilibrio della reazione
nel verso della formazione di piruvato. In presenza di L-glutammato,
il piruvato è trasformato in L-alanina con una reazione catalizzata
dal glutammato-piruvato-transaminasi (GPT)
(1)L-lattato + NAD
+
piruvato + NADH + H+
(2)D-lattato + NAD+
piruvato + NADH + H+
(3)Piruvato + L-glutammato
 L-alanina + α-chetoglu-
tarato
La formazione di NADH, misurata dall'aumento di assorbanza alla
lunghezza d'onda di 340 nm, è proporzionale alla quantità di lattato
presente.
Nota:
L'acido L-lattico può essere determinato singolarmente mediante le
reazioni (1) e (3).
L'acido D-lattico può essere determinato singolarmente mediante le
reazioni (2) e (3).
1.2.Metodousuale
L'acido lattico, separato su colonna di resina scambiatrice di anioni
viene ossidato a etanale e dosato per colorimetria dopo reazione con
nitroprussiato di sodio e piperidina.
2. METODO DI RIFERIMENTO2.1.Reattivi
2.1.1. Soluzione ta mpone apH 10 (glicilglicinaa0,6 mole/l; L-gluta m-
mato a 0,1 mole/l).
Sciogliere in circa 50 ml di acqua bidistillata 4,75 g di glicilglicina,
e 0,88 g di acido L-glutammico; portare a pH 10 con alcuni ml di
soluzione di idrossido di sodio a10 M e porta re a60 ml con a cqua
bidistillata.
Alla temperatura di 4 ºC la soluzione si mantiene stabile per almeno
12 settimane.
2.1.2. Soluzione di nicotinammide-adenina-dinucleotide (NAD) a circa 40 ·
10
−3M; sciogliere in 30 ml di acqua bidistillata 900 mg di NAD.
Alla temperatura di 4 ºC la soluzione si mantiene stabile per almeno
4 settimane.
2.1.3. Sospensione di glutammato-piruvato-transaminasi (GPT) a 20 mg/
ml. Alla temperatura di 4 ºC la sospensione si mantiene stabile per
almeno 1 anno.
2.1.4. Sospensione di L-lattato-deidrogenasi (L-LDH) a 5 mg/ml. Alla
temperatura di 4 ºC la sospensione si mantiene stabile per almeno 1
anno.
2.1.5. Sospensione di D-lattato-deidrogenasi (D-LDH) a 5 mg/ml. Alla
temperatura di 4 ºC la sospensione si mantiene stabile per almeno 1
anno.
Prima del dosaggio si raccomanda di procedere alla verifica dell'at-
tività dell'enzima.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 97
▼B
Nota:
Il complesso dei reattivi necessari è reperibile in commercio.
2.2.Apparecchiatura
2.2.1. Spettrofotometro in grado di effettuare misurazioni a 340 nm, e
massimo di assorbimento dell'NADH.
In alternativa può essere impiegato un fotometro a spettro discon-
tinuo con lunghezzad'ondaa334 nm o a365 nm.
Poiché si tratta di misurazioni assolute di assorbanza (senza curva di
taratura, ma con riferimento al coefficiente di estinzione del NADH),
occorre controllare le scale delle lunghezze d'onda e delle assorbanze
dell'apparecchio.
2.2.2. Celle di vetro con cammino ottico da 1 cm o celle monouso.
2.2.3. Micropipette per il prelievo di volumi compresi tra0,02 e 2 ml.
2.3.Preparazione delcampione
Evitare di toccare con le dita la parte di vetreria che viene a contatto
con il mezzo di reazione in quanto ciò potrebbe apportare acido L-
lattico che falserebbe il risultato.
Se la concentrazione in acido lattico è inferiore a 100 mg/l, il
dosaggio del lattato si effettua in genere direttamente sul vino senza
decolorazione preliminare e senza diluizione. Se la concentrazione in
acido lattico è compresa tra:
100 mg/l e 1 g/l, diluire1/10con acqua bidistillata,
1 g/l e 2,5 g/l, diluire1/25con acqua bidistillata,
2,5 g/l e 5 g/l, diluire1/50con acqua bidistillata.
2.4.Mododioperare
2.4.1. Dosaggio dell'acido lattico totale
Prima di procedere al dosaggio la soluzione tampone deve essere
portata a 20-25 ºC.
Regolato lo spettrofotometro sulla lunghezza d'onda di 340 nm,
effettuare le misure di assorbanza nelle celle da 1 cm, aggiustando
l'apparecchio allo zero di assorbanza contro aria (togliendo la cella
dal percorso ottico) o contro acqua.
Introdurre nelle celle da1 cm:
bianco campione
soluzione 2.2.1 1,00 ml 1,00 ml
soluzione 2.1.2 0,20 ml 0,20 ml
acqua bidistillata 1,00 ml 0,80 ml
sospensione 2.1.3 0,02 ml 0,02 ml
campione — 0,20 ml
Mescolare mediante una bacchetta di vetro o di materiale sintetico
provvista di una estremità appiattita; dopo circa 5 minuti misurare
le assorbanze delle soluzioni del bianco e del campione (A1).
Aggiungere 0,02 ml di soluzione 2.1.4 e 0,05 ml di soluzione 2.1.5,
omogeneizzare, attendere la fine della reazione circa 30 minuti misu-
rare le assorbanze delle soluzioni del bianco e del campione (A2).
Determinare le differenze di assorbanza (A2−A1) del bianco e del
campione.
Detrarre la differenza di assorbanza del bianco dalla differenza di
assorbanza del campione:
∆A= ∆AC−∆AB1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 98
▼B
2.4.2. Dosaggio dell'acido L-lattico e dell'acido D-lattico
Il dosaggio dell'acido L-lattico e D-lattico può essere realizzato
singolarmente applicando il modo di operare indicato per l'acido
lattico totale, ma operando come segue una volta determinato A1:
Aggiungere 0,02 ml di soluzione 2.1.4, omogeneizzare, aspettare la
fine della reazione (circa 20 minuti) e misurare le assorbanze delle
soluzioni del bianco e del campione (A2).
Aggiungere 0,05 ml di soluzione 2.1.5, omogeneizzare, attendere che
la reazione abbia termine (30 minuti circa) e misurare le assorbanze
delle soluzioni del bianco e del campione (A3).
Determinare le differenze di assorbanze (A2−A1) per l'acido L-
lattico e (A3−A2) per l'acido D-lattico del bianco e del campione.
Detrarre la differenza di assorbanza del bianco dalla differenza di
assorbanze del campione:
∆A= ∆AC−∆AB
Nota:
Il tempo necessario per l'azione degli enzimi può variare da un lotto
all'altro. Qui viene riportato soltanto a titolo indicativo. Se ne racco-
manda la determinazione per ciascun lotto. Quando si dosa soltanto
l'acido L-lattico, il tempo di incubazione dopo l'addizione della L-
lattato deidrogenasi può essere ridotto a 10 minuti.
2.5. Espressione dei risultati
La concentrazione in acido lattico è espressa in grammi per litro (g/
l) con unacifradecima le.
2.5.1. Procedimento di calcolo
La concentrazione in grammi per litro si calcola mediante la formula
generale:
C¼V/C1PM
ε/C1d/C1v/C11000/C1∆A
V = volume in ml dellasoluzione impiega taper laprova(V =
2,24 ml per l'acido L-lattico, V = 2,29 ml per l'acido D-
lattico e per l'acido lattico totale)
v = volume del campione in ml (in questo caso 0,2 ml)PM = peso molecolare della sostanza da dosare (in questo caso
acido DL lattico = 90,08)
d = cammino ottico della cella in cm (in questo caso 1 cm)ε= coefficiente di assorbanza dell'NADH a 340 nm,
ε= 6,3 (mmole
−1·l·c m−1).
2.5.1.1. Acido lattico totale e acido D-lattico
C = 0,164 · ∆A
Se per la preparazione del campione è stata effettuata una diluizione,
moltiplicare il risultato per il fattore di diluizione.
Avvertenza:
Misuraa334 nm: C = 0,167 · ∆A(ε= 6,2 mmole−1·l·c m−1)
Misuraa365 nm: C = 0,303 · ∆A(ε= 3,4 mmole−1·l·c m−1)
2.5.1.2. Acido L-lattico
C = 0,160 · ∆A
Se per la preparazione del campione è stata effettuata una diluizione,
moltiplicare il risultato per il fattore di diluizione.
Avvertenza:misuraa334 nm: C = 0,163 · ∆A(ε= 6,2 mmole
−1·l·c m−1)
misuraa365 nm: C = 0,297 · ∆A(ε= 3,4 mmole−1·l·c m−1)
2.5.2. Ripetibilità (r)
r = 0,02 + 0,07 Xig/l1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 99
▼B
Xi= concentrazione in acido lattico del campione espressa in
grammi per litro
2.5.3. Riproducibilità (R)
R = 0,05 + 0,125 Xig/l
Xi= concentrazione in acido lattico del campione espressa in
grammi per litro
3. METODO USUALE
3.1.1. Per il trattamento preliminare del vino
Fare riferimento al punto 3.1.1 del capitolo «acido tartarico»,
metodo usuale.
3.1.2. Per il dosaggio dell'acido lattico
3.1.2.1. Soluzione 0,1 M di solfato di cerio IV in acido solforico 0,35 M.
Sciogliere afreddo 40,431 g di solfa to di cerio IV Ce(SO4)2 · 4H2O,
in 350 ml di una soluzione M di acido solforico titolata con esat-
tezza (3.1.2.4). Portare a 1 000 ml con acqua distillata.
3.1.2.2. Soluzione di idrossido di sodio (NaOH) 2,5 M.
3.1.2.3. Soluzione di acetato di sodio a 270 g per litro (preparata con acetato
di sodio secco CH3COONa).
3.1.2.4. Soluzione di acido solforico (H2SO4)1M .
3.1.2.5. Soluzione di nitroprussiato di sodio [Na2(Fe(CN)5NO) · 2H2O] al 2 %
(m/v).
Conservare al buio in un flacone ben chiuso.
Periodo massimo di conservazione della soluzione: 8 giorni.
3.1.2.6. Soluzione di piperidina(C5H11N) al 10 % (v/v).
3.1.2.7. Soluzione di acido lattico M.
Diluire 100 ml di acido lattico (C3H6O3) in 400 ml di acqua. Versare
questa soluzione in una capsula e riscaldarla in bagno di acqua
bollente per ore 4 reintegrando ogni tanto il volume con acqua distil-
lata. Dopo raffreddamento portare a un litro. Titolare l'acido lattico
su 10 ml di questasoluzione con unasoluzione di idrossido di sodio
M (3.1.2.8). Portare la soluzione a 1 M di acido lattico (90 g).
3.1.2.8. Soluzione di idrossido di sodio (NaOH) 1 M.
3.2.Apparecchiatura
3.2.1. Colonnain vetro di circa300 mm di lunghezzae con dia metro
interno da10-11 mm, provvistadi un regola tore di flusso (rubinetto).
3.2.2. Bagnomarie regolato a 65 ºC.3.2.3. Spettrofotometro regolato alla lunghezza d'onda di 570 nm corredato
di celle aca mmino ottico da1 cm.
3.3.Mododioperare
3.3.1. Preparazione della colonna di scambiatori di ioni
Fare riferimento al punto 3.3.1 del capitolo «acido tartarico»,
metodo usuale.
3.3.2. Isolamento degli acidi organici
Fare riferimento al punto 3.3.2 del capitolo «acido tartarico»,
metodo usuale.
3.3.3. Dosaggio dell'acido lattico
Versare 10 ml di eluato in una provetta da 50 ml provvista di un
tappo smerigliato, aggiungere 10 ml di soluzione di solfato di cerio
(3.1.2.1). Agitare; mettere la provetta in bagnomaria termostatatato a
65 ºC, per 10 minuti esatti. Al momento dell'immersione sollevare
per qualche secondo il tappo di vetro in modo da compensare la
pressione dovuta al riscaldamento, chiudendo quindi ermeticamente
la provetta in modo da evitare le perdite di etanale formatosi.
Estrarre quindi il tubo dal bagno, raffreddare in acqua corrente sino1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 100
▼B
a una temperatura prossima ai 20 ºC, aggiungere 5 ml della solu-
zione di idrossido di sodio 2,5 M (3.1.2.2), mescolare e filtrare.
Prelevare 15 ml di filtrato e versarli in una beuta da 50 ml, con
tappo smerigliato, contenente una miscela omogenea di 5 ml di solu-
zione di acetato di sodio al 27 % (3.1.2.3) e di 2 ml di acido
solforico M (3.1.2.4). Aggiungere 5 ml dellasoluzione di nitroprus-
siato di sodio (3.1.2.5), mescolare, aggiungere quindi 5 ml della
soluzione di piperidina (3.1.2.6), mescolare rapidamente e introdurre
immediatamente la soluzione ottenuta nella cella dello spettrofoto-
metro. Misurare la colorazione prodotta, che varia dal verde al
violetto, a 570 nm rispetto all'aria (senza cella nel cammino ottico);
essa aumenta per poi diminuire rapidamente.
Seguire l'andamento dell'assorbanza corrispondente e scegliere come
valore definitivo il suo valore massimo.
Se l'eluato è troppo ricco in acido lattico e l'assorbanza è troppo
elevata, diluire l'eluato con la soluzione di solfato di sodio al 7,1 %
(3.1.1) ed effettuare la misura sulla soluzione diluita.
3.3.4. Determinazione della curva di taratura
Introdurre 10 ml della soluzione di acido lattico 1 M (3.1.2.7) e 10
ml di soluzione titolata di idrossido di sodio 1 M (3.1.2.8) in un
matraccio tarato da 1 000 ml e portare a volume con la soluzione
di solfato di sodio al 7,1 %. Prelevarne quindi, 5, 10, 15, 20 e 25
ml e versarli in palloni tarati da 100 ml. Portare a volume con la
soluzione di solfato di sodio al 7,1 % (3.1.1). Prelevare 10 ml delle
soluzioni così ottenute e determinare per ciascuna di esse il valore
dell'assorbanza secondo il procedimento descritto al punto 3.3.3 per
l'eluato.
Queste soluzioni corrispondono agli eluati ottenuti da vini contenenti
0,45 - 0,9 - 1,35 - 1,80 e 2,25 g/l di acido lattico.
La rappresentazione grafica delle assorbanze di queste soluzioni in
funzione del tenore in acido lattico è una retta.
3.4.Espressionedeirisultati
Riportando sulla curva di taratura l'assorbanza misurata per l'eluato
si ottiene il tenore in acido lattico del vino espresso in grammi per
litro.
Tale tenore deve essere espresso con una cifra decimale.Nota:
i vini contenenti più di 250 mg/l di biossido di zolfo possono presen-
tare una certa concentrazione di acido etanalsolfonico che viene
computato come acido lattico. In questo caso bisogna correggere il
risultato della determinazione con quello ottenuto con la seguente
operazione complementare: in una provetta con tappo smerigliato
mescolare 15 ml di eluato con 5 ml di acetato di sodio al 27 %(3.1.2.3) e 2 ml di H
2SO40,775 M (77,5 ml H2SO4M portati a 100
ml con acqua distillata). Come nella determinazione dell'acido
lattico, si aggiungono quindi 5 ml di nitroprussiato di sodio al 2 %
(3.1.2.5) e 5 ml di piperidina al 10 % (3.1.2.6). Dopo aver mesco-
lato, misurare l'assorbanza nelle condizioni descritte per la
determinazione dell'acido lattico. Riportando tale valore dell'assor-
banza sulla retta di taratura si ottiene il valore apparente B
dell'acido lattico in grammi per litro dovuto all'acido etanalsolfonico.
Se L' è il tenore apparente in acido lattico del vino espresso in
grammi per litro, il tenore effettivo L in acido lattico si ottiene con:
L = L' − B · 0,4 (g/l).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 101
▼B
19.ACIDOL-MALICO
1. PRINCIPIO DEL METODO
L'acido L-malico (L-malato) viene ossidato in presenza di nicoti-
nammide-adenina-dinucleotide (NAD), a ossalacetato mediante una
reazione catalizzata dalla L-malato-deidrogenasi (L-MDH).
L'equilibrio della reazione è spostato verso il malato. L'eliminazione
dell'ossalacetato dal mezzo di reazione sposta l'equilibrio della
reazione nel senso della formazione dell'ossalacetato. In presenza di
L-glutammato, l'ossalacetato viene trasformato in L-aspartato,
mediante una reazione catalizzata dalla glutammato-ossalacelato-
transaminasi (GOT).
(1)L-malato + NAD+
ossalacetato + NADH + H+
(2)Ossalacetato + L-glutammato
 L-aspartato + α-
chetoglutarato.
La formazione di NADH misurata attraverso l'aumento di assorbanza
alla lunghezza d'onda di 340 nm, è proporzionale alla quantità di L-
malato presente.
2. REATTIVI
2.1. Tampone a pH 10
(glicilglicina 0,60 M, L-glutammato 0,1 M)
Sciogliere in circa 50 ml di acqua bidistillata 4,75 g di glicilglicina e
0,88 g di acido L-glutammico; correggere il pH a 10 con circa 4,6
ml di soluzione di idrossido di sodio 10 M e portare a 60 ml con
acqua bidistillata.
Alla temperatura di 4 ºC la soluzione si mantiene stabile per almeno
12 settimane.
2.2. Soluzione di nicotinammide-adenina-dinucleotide (NAD), circa 47 ·
10−3M: sciogliere in 12 ml di acqua bidistillata 420 mg di NAD.
Alla temperatura di + 4 ºC la soluzione si mantiene stabile per
almeno 4 settimane.
2.3. Sospensione di glutammato-ossalacetato-transaminasi (GOT) a 2 mg/
ml. Alla temperatura di + 4 ºC la sospensione si mantiene stabile per
almeno un anno.
2.4. Soluzione di L-malato-deidrogenasi (L-MDH) a 5 mg/ml. Alla
temperatura di + 4 ºC la soluzione si mantiene stabile per almeno
un anno.
Osservazione:Il complesso dei reattivi necessari per il dosaggio è reperibile in
commercio.
3. APPARECCHIATURA
3.1. Spettrofotometro in grado di effettuare misurazioni a 340 nm,
massimo di assorbimento dell'NADH
In alternativa può essere utilizzato un fotometro a spettro discon-
tinuo con lunghezzad'ondaa334 nm o a365 nm.
Poiché si tratta di misurazioni assolute di assorbanza (senza curva di
taratura, ma riferite al coefficiente di estinzione dell'NADH), occorre
controllare le scale delle lunghezze d'onda e delle assorbanze dell'ap-
parecchio.
3.2. Celle di vetro con un cammino ottico di 1 cm o celle monouso.
3.3. Micropipette che consentano di prelevare volumi compresi tra 0,01 e
2 ml.
4. PREPARAZIONE DEL CAMPIONE
In genere la determinazione dell'L-malato si effettua direttamente sul
vino senzapreventivadecolora zione e senzadiluizione, acondizione
che il tenore in acido L-malico sia inferiore a 350 mg/l per misura-
zioni a 365 nm. In caso contrario, diluire il vino con acqua1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 102
▼B
bidistillata in modo che la concentrazione in L-malato si porti fra 30
e 350 mg/l (quantità di L-malato nel campione di saggio compresa
fra3 e 35 µg).
Se la concentrazione di malato nel vino è inferiore a 30 mg/l, il
volume della pesata può essere aumentato sino ad 1 ml. In questo
caso ridurre il volume di acqua da aggiungere in modo da avere gli
stessi volumi totali nelle due celle.
5. MODO DI OPERARE
Con lo spettrofotometro regolato sulla lunghezza d'onda 340 nm,
effettuare le misure di assorbanza nelle celle aventi un cammino
ottico di 1 cm, aggiustando l'apparecchio allo zero di assorbanza
contro aria (togliendo la cella dal percorso ottico) o contro acqua.
Introdurre nelle celle da1 cm:
Bianco Campione
Soluzione 2.1 1,00 ml 1,00 ml
Soluzione 2.2 0,20 ml 0,20 ml
Acquadistilla ta 1,00 ml 0,90 ml
Sospensione 2.3 0,01 ml 0,01 ml
Campione — 0,10 ml
Mescolare. Dopo circa 3 minuti, misurare le assorbanze delle solu-
zioni del bianco e del campione da dosare (A1).
Aggiungere:
Soluzione 2.4 0,01 ml 0,01 ml
Mescolare. Attendere la fine della reazione (circa 5-10 minuti) e
misurare le assorbanze delle soluzioni del bianco e del campione
(A2).
Determinare le differenze delle assorbanze (A2−A1) del bianco e
del campione.
Detrarre la differenza delle assorbanze del bianco dalla differenza
delle assorbanze del campione.
∆A= ∆AC−∆AB
Osservazione:
Il tempo necessario per l'azione degli enzimi può variare da un lotto
all'altro. Quello sopra riportato è dato soltanto a titolo indicativo. Si
raccomanda di determinarlo per ciascun lotto.
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
La concentrazione in acido L-malico è espressa in grammi per litro
(g/l) con unacifradecima le.
6.1.Metododicalcolo
La concentrazione in grammi per litro è calcolata con la formula
generale:
C¼V/C1PM
ε/C1d/C1v/C11000 /C1∆A
V = volume in ml dellasoluzione impiega taper laprova(in
questo caso 2,22 ml)
v = volume del campione in ml (in questo caso 0,1 ml)
PM = peso molecolare della sostanza da dosare (in questo caso
acido L-malico = 134,09)
d = cammino ottico della cella in cm (in questo caso 1 cm)
ε= coefficiente di assorbanza del NADH: a 340 nm ε= 6,3
mmole−1·l·c m−11990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 103
▼B
Per il L-malato si ottiene:
C = 0,473 · ∆A g/l.
Se per la preparazione del campione è stata effettuata una diluizione,
moltiplicare il risultato per il fattore di diluizione.
Nota:
misuraa334 nm C = 0,482 × ∆A
misuraa365 nm C = 0,876 × ∆A
6.2.Ripetibilità(r)
r = 0,03 + 0,034 xi
xi= concentrazione in acido malico del campione espressa in g/l.
6.3.Riproducibilità(R)
R = 0,05 + 0,071 xi
xi= concentrazione in acido malico del campione in g/l.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 104
▼M7
20.ACIDOD-MALICO
(dosaggio con metodo enzimatico)
1. PRINCIPIO
In presenza di D-malato-deidrogenasi (D-MDH), l'acido D-malico
(D-malato) viene ossidato in ossalacetato dalla nicotinammide-
adenina-dinucleotide (NAD). L'ossalacetato formato è trasformato
in piruvato e biossido di carbonio.
D-malato þNADþ/harpoonleftrightD-MDHpiruvato þCO2þNADH þHþ
La formazione di NADH, misurata tramite l'aumento dell'assorbanza
alla lunghezza d'onda di 334, 340 o 365 nm, è proporzionale allaquantità di D-malato presente.
2. REATTIVI
I reattivi che consentono circa 30 determinazioni si trovano in
commercio in confezioni costituiti daun kit comprendente:
a) Flacone n. 1 contenente circa 30 ml di soluzione tampone Hepes
acido [N-(2-idrossietil)piperazin-N'-2-etano] solfonico, pH = 9,0 e
stabilizzatori;
b) Flacone n. 2 contenente circa 210 mg di NAD liofilizzato;
c) Tre flaconi n. 3 contenenti D-MDH liofilizzato, con titolo 8 unità
circa.
Preparazione dellesoluzioni
1. Utilizzare il contenuto del flacone n. 1 senza diluizione. Portare
lasoluzione a20-25 ºC primadell'uso.
2. Sciogliere il contenuto del flacone n. 2 in 4 ml di acqua bidistil-
lata.
3. Sciogliere il contenuto di uno dei flaconi n. 3 in 0,6 ml di acqua
bidistillata. Portare la soluzione a 20-25 ºC prima dell'uso.
Stabilitàdellesoluzioni
Il contenuto del flacone n. 1 si conserva a + 4 ºC per almeno un
anno; la soluzione 2 si conserva a + 4 ºC per circa 3 settimane e a
− 20 ºC per due mesi; lasoluzione 3 si conservaper 5 giorni a+ 4 ºC.
3. APPARECCHIATURA
3.1. Spettrofotometro in grado di effettuare misurazioni a 340 nm,
massimo di assorbimento del NADH. In alternativa, può essere
utilizzato un fotometro a spettro discontinuo in grado di effettuare
misurazioni a 334 nm o a 365 nm. Poiché si tratta di misure assolute
dell'assorbanza (assenza di gamma di taratura, ma riferimento al
coefficiente di estinzione del NADH), devono essere controllate le
scale delle lunghezze d'onda e delle assorbanze dello strumento.
3.2. Celle di vetro con cammino ottico di 1 cm o celle monouso.3.3. Micropipette che consentano di prelevare volumi compresi tra 0,01 e
2 ml.
4. PREPARAZIONE DEL CAMPIONE
Il dosaggio del D-malato viene effettuato, di norma, direttamente sul
vino senza decolorazione preliminare.
La quantità di D-malato nella cella deve essere compresa tra 2 e
50µg, e pertanto occorre diluire il vino in modo tale che la concen-
trazione di malato sia compresa tra 0,02 e 0,5 g/l oppure 0,02 e 0,3 g/
l, asecondadello strumento utilizza to.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 105
▼M7
Tabella di diluizione
Quantità stimata di D-malato/litro
Diluzione con
acquaFattore di dilu-
zioni FMisuraa :
340 o 334 nm 365 nm
< 0,3 g < 0,5 g — 1
0,3 - 3,0 g 0,5 - 5,0 g 1 + 9 10
5. MODO DI OPERARE
Lo spettrofotometro è regolato sulla lunghezza d'onda di 340 nm, le
misurazioni dell'assorbanza sono effettuate nelle celle con cammino
ottico di 1 cm; l'assorbanza zero è regolata rispetto all'aria (senza
cella sul cammino ottico) o rispetto all'acqua.
Nelle celle con cammino ottico di 1 cm, introdurre:
Bianco Aliquota in esame
Soluzione 1 1,00 ml 1,00 ml
Soluzione 2 0,10 ml 0,10 ml
Acquabidistilla ta 1,80 ml 1,70 ml
Campione — 0,10 ml
Mescolare. Dopo circa 6 minuti, misurare le assorbanze delle solu-
zioni del bianco e dell'aliquota in esame (A1).
Aggiungere:
Bianco Aliquota in esame
Soluzione 3 0,05 ml 0,05 ml
Mescolare. Attendere la fine della reazione (circa 20 minuti) e misu-
rare le assorbanze delle soluzioni del bianco e dell'aliquota in esame
(A2).
Determinare le differenze di assorbanza (A2−A1) del bianco ( ∆AT)
e dell'aliquota in esame ( ∆AE). Detrarre la differenza di assorbanza
del bianco dalla differenza di assorbanza dell'aliquota in esame:
∆A= ∆AE−∆AT.
Osservazione:
Il tempo necessario all'azione degli enzimi può variare a seconda del
lotto e pertanto il suo valore qui sopra fornito è solo a titolo indica-
tivo. Si raccomanda di determinarlo per ciascun lotto.
L'acido D-malico reagisce rapidamente. Un'attività supplementare
dell'enzima trasforma anche l'acido L-tartrico, anche se la velocità è
molto inferiore. È questo il motivo per cui si verificaunadebole
reazione parassita che può essere corretta per estrapolazione (cfr.
appendice A).
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
La concentrazione, in milligrammi per litro, è calcolata con la
seguente formulagenera le:
C¼V/C2PM
ε/C2d/C2ν/C2∆A
dove:
V = volume del bianco in ml (qui 2,95 ml)
v = volume del campione in ml (qui 0,1 ml)1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 106
▼M7
PM = peso molecolare della sostanza da dosare (qui acido D-
malico = 134,09)
d = cammino ottico della cella in cm (qui 1 cm)
ε= coefficiente di assorbimento del NADH:
a340 nm = 6,3 (1 mmol−1cm−1)
a365 nm = 3,4 (1 mmol−1cm−1)
a334 nm = 6,18 (1 mmol−1cm−1).
Se nella preparazione del campione è stata effettuata una diluizione,
moltiplicare il risultato per il fattore di diluizione.
La concentrazione in acido D-malico è espressa in milligrammi per
litro (mg/1) senzadecima li.
7. FEDELTÀ
I dati del test interlaboratori sulla fedeltà del metodo sono sintetiz-
zati nell'appendice B. I valori derivati dal test interlaboratori
possono essere inapplicabili a gamme di concentrazione dell'analita
e a matrici diverse da quelle indicate nell'appendice B.
7.1.Ripetibilità
La differenza assoluta tra 2 singoli risultati ottenuti su una materia
identica, da parte di un operatore che utilizza la stessa apparecchia-
tura, nel più breve intervallo di tempo, non dovrà essere maggiore
del valore di ripetibilità r in più del 5 % dei casi.
Il valore è:r = 11 mg/l
7.2.Riproducibilità
La differenza assoluta tra due singoli risultati ottenuti su una materia
identica in due laboratori non dovrà essere maggiore del valore di
riproducibilità R in più del 5 % dei casi.
Il valore è:R = 20 mg/l
8. OSSERVAZIONI
In considerazione della precisione del metodo, i valori di acido D-
malico inferiori a 50 mg/l devono, se necessario, essere confermati
con un altro metodo di analisi che si basi su un altro principio di
misura, ad esempio il metodo di Przyborski ed altri ( Mitteilungen
Klosterneuburg 43, 1993; 215-218. 1993 ).
L'aliquota di vino nella cella non deve essere superiore a 0,1 ml, allo
scopo di evitare eventuali inibizioni dell'attività enzimatica da parte
dei polifenoli.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 107
▼M7
Appendice A
Come trattare le reazioni parassite
Le reazioni parassite sono generalmente dovute a reazioni secondarie dell'en-
zima, alla presenza di altri enzimi nella matrice del campione o all'interazione
di uno o più elementi della matrice con un cofattore della reazione enzimatica.
Nella reazione normale I'assorbanza raggiunge un valore costante dopo un certo
tempo, in genere 10-20 minuti, a seconda della velocità della reazione enzima-
tica specifica. Tuttavia, in caso di reazioni secondarie, l'assorbanza non
raggiunge un valore costante, ma aumenta regolarmente nel tempo: questo tipo
di processo viene usualmente chiamato «reazione parassita».
Qualora si presenti questo problema, occorre misurare l'assorbanza della solu-
zione ad intervalli regolari (2-5 minuti), dopo il tempo necessario affinché la
soluzione-standard raggiunga la sua assorbanza finale. Quando l'assorbanza
aumenta regolarmente, procedere a 5 0 6 misure; operare quindi un'estrapola-
zione grafica o mediante calcolo per ottenere il valore dell'assorbanza della
soluzione al momento in cui è stato aggiunto l'enzima finale (T0). La differenza
di assorbanza estrapolata a quel momento (Af − Ai) viene utilizzata nel calcolo
della concentrazione del substrato.
Figura 1: reazione parassita1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 108
▼M7
Appendice B
Risultati statistici del test interlaboratori
Anno del test interlaboratori: 1995
Numero di laboratori: 8
Numero di campioni: 5 con aggiunta di acido D-malico
Campione ABCDE
Numero di laboratori considerati, dopo l'eliminazione
dei laboratori con risultati aberranti 7 8 7 8 7
Numero di laboratori con risultati aberranti 1 — 1 — 1
Numero di risultati accettati 35 41 35 41 36
Valore medio ( χ-) (mg/l) 161,7 65,9 33,1 106,9 111,0
Deviazione standard di ripetibilità (sr) (mg/l) 4,53 4,24 1,93 4,36 4,47
Deviazione standard relativa alla ripetibilità (RSDr)
(%) 2,8 6,4 5,8 4,1 4,00
Limite di ripetibilità (r) (mg/l) 12,7 11,9 5,4 12,2 12,5
Deviazione standard di riproducibilità (sR) (mg/l) 9,26 7,24 5,89 6,36 6,08
Deviazione standard relativa alla riproducibilità
(RSDR) (%) 5,7 11 17,8 5,9 5,5
Limite di riproducibilità (R) (mg/l) 25,9 20,3 16,5 17,8 17,0
Tipi di campioni:
A: vino rosso; B: vino rosso; C: vino bianco; D: vino bianco; E: vino bianco.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 109
▼B
21.ACIDOMALICOTOTALE
METODO USUALE
1. PRINCIPIO DEI METODO
L'acido malico separato per mezzo di una colonna scambiatrice di
anioni viene dosato colorimetricamente nell'eluato utilizzando la
colorazione gialla che si ottiene per azione dell'acido solforico al
96 % e dell'acido cromotropico. Le sostanze contenute nell'eluato
che interferiscono in questa reazione, contrariamente all'acido
malico, reagiscono con l'acido solforico all'86 % e l'acido cromotro-
pico.
Per eliminare quindi questa interferenza è sufficiente sottrarre
dall'assorbanza ottenuta dopo reazione con acido cromotropico ed
acido solforico al 96 % l'assorbanza ottenuta dopo reazione con
acido cromotropico ed acido solforico all'86 %.
2. APPARECCHIATURA
2.1. Colonnadi vetro lungacirca250 mm e con dia metro interno di 35
mm, munitadi rubinetto.
2.2. Colonnadi vetro lungacirca300 mm e con dia metro interno di 10-
11 mm, munitadi rubinetto.
2.3. Bagnomaria a 100 ºC.
2.4. Spettrofotometro che permetta di eseguire misure di assorbanza alla
lunghezzad'ondadi 420 nm con celle di 10 mm di ca mmino ottico.
3. REATTIVI
3.1. Scambiatore di anioni di forte basicità (per esempio Merck III).
3.2. Idrossido di sodio al 5 % (m/v).
3.3. Acido acetico al 30 % (m/v).
3.4. Acido acetico allo 0,5 % (m/v).
3.5. Soluzione di solfato di sodio (Na2SO4) al 10 % (m/v).
3.6. Acido solforico concentrato al 95-97 % (m/m).
3.7. Acido solforico all'86 % (m/m).
3.8. Soluzione di acido cromotropico al 5 % (m/v).
Da preparare volta per volta prima di ogni dosaggio sciogliendo 500
mg di cromatropato di sodio (C10H6Na2O8S2·2H2O) in 10 ml di
acqua distillata.
3.9. Soluzione di acido DL — malico di 0,5 g/l.
Sciogliere 250 mg di acido malico (C4H6O5) nellasoluzione di
solfato di sodio al 10 % (3.5) e portare a 500 ml con la stessa solu-
zione.
4. MODO DI OPERARE
4.1.Preparazione delloscambiatorediioni
Porre nellacolonnadi vetro 35 × 250 mm, a l di sopradel rubinetto,
un tampone di lana di vetro impregnato di acqua distillata. Versare
nella colonna lo scambiatore di ioni in sospensione in acqua
lasciando uno spazio libero di circa 50 mm al di sopra della super-
ficie dello scambiatore.
Dopo lavaggio con 1 000 ml di acqua distillata, riempire la colonna
con la soluzione di idrossido di sodio al 5 %, lasciare percolare il
liquido sino a circa 2-3 mm al di sopra della superficie dello scam-biatore di ioni, ripetere ancora per due volte questa operazione e
lasciare in contatto per un'ora. Lavare la colonna con 1 000 ml di
acqua distillata, riempire quindi la colonna con la soluzione di acido
acetico al 30 %, lasciar percolare il liquido sino a 2-3 mm circa al di
sopra della superficie dello scambiatore di ioni.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 110
▼B
Ripetere questa operazione per due volte e lasciare in contatto per
almeno ventiquattro ore prima dell'uso. Conservare lo scambiatore
di ioni in acido acetico al 30 % per i successivi dosaggi.
4.2.Preparazione dellacolonnaascambiatoreionico
Porre nellacolonnadi vetro 11 × 300 mm, a l di sopradel rubinetto,
un tampone di lana di vetro. Versare nella colonna lo scambiatore di
ioni preparato come descritto in 4.1 per un'altezza di 10 cm. Con il
rubinetto aperto lasciare percolare la soluzione di acido acetico al
30 % sino a circa 2-3 mm al di sopra della superficie della resina.
Lavare quindi con 50 ml della soluzione di acido acetico allo 0,5 %.
4.3.Isolamentodell'acido DL-malico
Versare sulla resina preparata come descritto in 4.2 10 ml di vino o
di mosto.
Lasciare percolare il vino, goccia a goccia (una goccia al secondo
circa), sino a circa 2-3 mm al di sopra della superficie della resina.
Lavare la colonna prima con 50 ml circa della soluzione di acido
acetico allo 0,5 % e dopo con circa 50 ml di acqua distillata; lasciare
percolare queste soluzioni con la stessa velocità del vino.
Eluire gli acidi fissati sulla resina a scambio ionico per mezzo della
soluzione di solfato di sodio al 10 % con la stessa velocità delle
operazioni precedenti (1 goccia al secondo), raccogliere l'eluato in
un pallone tarato da 100 ml sino al segno di taratura.
Laresinapuò essere rigenera tacome descritto in 4.1.
4.4.Dosaggiodell'acido malico
In due provette a tappo smerigliato, a bocca larga, da 30 ml, «A» e
«B», introdurre 1,0 ml di eluato e 1,0 ml della soluzione di acido
cromotropico al 5 %. Nella provetta «A» aggiungere 10,0 ml di
acido solforico all'86 % (bianco) e nella provetta «B» 10,0 ml di
acido solforico al 96 % (campione). Tappare ed agitare per ottenere
una perfetta omogeneità senza bagnare la parte smerigliata. Porre le
due provette per 10 minuti esatti nel bagno maria portato preventiva-
mente a ebollizione vivace. Far raffreddare le provette a 20 ºC al
buio.
Esattamente dopo 90 minuti dall'inizio del raffreddamento misurare
l'assorbanza della provetta «B» contro il bianco (provetta «A») alla
lunghezzad'ondadi 420 nm nelle celle da10 mm di ca mmino
ottico.
4.5.Curvaditaratura
In palloncini tarati da 50 ml versare 5 - 10 - 15 e 20 ml della solu-
zione di acido malico di 0,5 g/l; portare a segno con la soluzione disolfato di sodio al 10 %.
Le soluzioni così ottenute corrispondono ad eluati ottenuti a partire
da vini contenenti 0,5 - 1,0 - 1,5 e 2,0 g di acido DL-malico per
litro.
Continuare come indicato in 4.4.I valori dell'assorbanza ottenuti con queste soluzioni, riportati in
funzione dei tenori in acido malico corrispondenti, si allineano su
una retta passante per l'origine.
Poiché l'intensità della colorazione è notevolmente influenzata dalla
concentrazione dell'acido solforico, è necessario controllare la curva
di taratura per almeno un punto per ogni serie di misure per mettere
in evidenza una eventuale variazione della concentrazione dell'acido
solforico.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 111
▼B
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
Riportare l'assorbanza misurata per l'eluato sulla curva di taratura per
ottenere il tenore in acido DL-malico in grammi per litro con une
divradecima le.
Ripetibilità
tenore < 2 g/l: r = 0,1 g/l
tenore > 2 g/l: r = 0,2 g/l
Riproducibilità
R = 0,3 g/l1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 112
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22.ACIDOSORBICO
1. PRINCIPIO DEI METODI
1.1.Metodo di dosaggio per spettrofotometria di assorbimento
nell'ultravioletto
L'acido sorbico (acido 2,4 esadienoico trans, trans) estratto per distil-
lazione in corrente di vapor d'acqua, viene dosato nel distillato del
vino per spettrofotometria di assorbimento nell'ultravioletto. Le
sostanze che interferiscono sulla misura dell'assorbimento nell'ultra-
violetto vengono eliminate per evaporazione a secco dell'aliquota di
distillato prelevata, leggermente alcalinizzata con una soluzione di
idrossido di calcio. I tenori inferiori a 20 mg/l devono essere confer-
mati per cromatografia su strato sottile (sensibilità: 1 mg/l).
1.2.Metododidosaggiopergascromatografia
L'acido sorbico estratto con etere etilico è dosato per cromatografia
in fase gassosa in presenza di uno standard interno.
1.3.Metododiricerca ditracce percromatografia sustratosottile
L'acido sorbico, estratto con etere etilico, viene preparato per croma-
tografia su strato sottile. Se ne determina quindi
semiquantitativamente la concentrazione.
2. METODO DI DOSAGGIO PER SPETTROFOTOMETRIA DI
ASSORBIMENTO NELL'ULTRAVIOLETTO
2.1.Reattivi
2.1.1. Acido tartarico, C4H6O6, cristallizzato.
2.1.2. Soluzione d'idrossido di calcio, Ca (OH)2circa0,02 M.
2.1.3. Soluzione di riferimento di acido sorbico a 20 mg per litro.
Sciogliere 20 mg di acido sorbico, C6H8O2, in 2 ml circadi soluzione
0,1 M di idrossido di sodio. Versarli in un pallone tarato da 1 000 ml
e portare a volume con acqua. Si possono anche sciogliere 26,8 mg
di sorbato di potassio, C6H7KO2, in acqua e portarli a 1 000 ml con
acqua.
2.2.Apparecchiatura
2.2.1. Apparecchio di distillazione in corrente di vapore d'acqua (vedi
«Acidità volatile»).
2.2.2. Bagnomaria a 100 ºC.
2.2.3. Spettrofotometro regolato a 256 nm con celle in quarzo a cammino
ottico da1 cm.
2.3.Mododioperare
2.3.1. Distillazione
Versare nel gorgogliatore dell'apparecchio di distillazione in corrente
di vapore 10 ml di vino, aggiungere 1-2 g di acido tartarico (2.1.1).
Raccogliere 250 ml di distillato.
2.3.2. Curva di taratura
Preparare, per diluizione con acqua della soluzione di riferimento
(2.1.3), quattro soluzioni di riferimento aventi rispettivamente
concentrazione di 0,5 - 1 - 2,5 e 5 mg di acido sorbico per litro;
misurare con lo spettrofotometro le rispettive assorbanze a 256 nm,
rispetto all'acqua distillata. Tracciare la curva delle variazioni dell'as-
sorbanza in funzione della concentrazione delle soluzioni. La
variazione è lineare.
2.3.3. Dosaggio
Porre 5 ml di distillato in una capsula di 55 mm di diametro; aggiun-
gere 1 ml di soluzione di idrossido di calcio (2.1.2). Portare a secco
su bagnomaria bollente.
Riprendere il residuo con alcuni millilitri di acqua distillata, versare
quantitativamente in un matraccio tarato da 20 ml e portare a1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 113
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volume con le acque di lavaggio. Misurare con uno spettrofotometro
l'assorbanza a 256 nm rispetto a una soluzione in bianco ottenuta per
diluizione con acqua a 20 ml di 1 ml di soluzione di idrossido di
calcio (2.1.2).
Portare il valore dell'assorbanza misurato sulla retta di taratura e
determinare la concentrazione C della soluzione in acido sorbico.
Osservazione:Nella pratica corrente l'evaporazione a secco può essere trascurata.
Effettuare direttamente la misura dell'assorbanza sul distillato diluito
1:4 contro acqua distillata.
2.4.Espressionedeirisultati
2.4.1. Calcolo
La concentrazione in acido sorbico del vino espressa in milligrammi
per litro è uguale a:
100 × CdoveC = concentrazione in acido sorbico della soluzione analizzata per
spettrofotometria, espressa in milligrammi per litro.
3. METODO DI DOSAGGIO PER CROMATOGRAFIA IN FASE
GASSOSA
3.1.Reattivi
3.1.1. Etere etilico, (C
2H5)2O, distillato al momento dell'impiego.
3.1.2. Soluzione dello standard interno: soluzione di 1 g per litro di acido
undecanoico, C11H22O2, in etanolo al 95 % (vol.).
3.1.3. Soluzione di acido solforico, H2SO4(ρ20o= 1,84 g/ml), diluito a1/3
(v/v).
3.2.Apparecchiatura
3.2.1. Gascromatografo corredato da un rivelatore a ionizzazione di
fiamma e da una colonna in acciaio inossidabile (4 m × 1/8 di
pollice) trattata preliminarmente con dimetildiclorosilano e riempita
con una fase stazionaria costituita da una miscela di dietilenglicol
succinato (5 %) e di acido fosforico (1 %) (DEGS — H3PO4)od a
una miscela di dietilenglicol adipato (7 %) e di acido fosforico (1 %)
(DEGA — H3PO4) fissato su Gaschrom Q 80 — 100 mesh. Per il
trattamento con il dimetilclorosilano (DMDCS) far passare nella
colonna una soluzione in toluene di DMDCS al 2-3 %. Lavare
immediatamente la colonna con metanolo, far passare una corrente
di azoto, poi esoano e nuovamente corrente di azoto. Quindi riem-
pire lacolonna .
Condizioni operative:Temperatura del forno: 175 ºC.Temperatura dell'iniettore e del rivelatore: 230 ºC.
Gas vettore: azoto (flusso 20 ml/minuto).
3.2.2. Microsiringa da 10 microlitri graduata in 0,1 microlitri.
Osservazione:Altri tipi di colonne possono ugualmente permettere una buona sepa-
razione, in particolare la colonna capillare (FFAP, per esempio).
Il modo di operare descritto di seguito è dato a titolo di esempio.
3.3.Mododioperare
3.3.1. Preparazione del campione da analizzare
In una provetta in vetro da circa 40 ml, dotata di tappo smerigliato,
introdurre 20 ml di vino, aggiungere 2 ml di soluzione di standard
interno (3.1.2) e 1 ml di soluzione diluitadi a cido solforico (3.1.3).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 114
▼B
Dopo aver agitato capovolgendo più volte, aggiungere al contenuto
della provetta 10 ml di etere etilico (3.1.1). Estrarre l'acido sorbico
agitando la provetta per 5 minuti. Lasciare decantare.
3.3.2. Preparazione della soluzione di riferimento
Scegliere un vino il cui estratto in etere etilico dia un cromato-
gramma che non presenti alcun picco con tempo di ritenzione
dell'acido sorbico; aggiungere a questo vino 100 mg/l di acido
sorbico. Trattare 20 ml del campione così ottenuto secondo il modo
di operare descritto al punto 3.3.1.
3.3.3. Cromatografia
Iniettare successivamente nel cromatografo con una microsiringa 2
µl della fase eterea ottenuta al punto 3.3.2 e 2 µl della fase etereaottenutaa l punto 3.3.1.
Registrare i rispettivi cromatogrammi; verificare che i rispettivi
tempi di ritenzione dell'acido sorbico e dello standard interno siano
identici. Misurare l'altezza (o la superficie) di ciascuno dei picchi
ottenuti.
3.4.Espressionedeirisultati
3.4.1. Calcolo
La concentrazione in acido sorbico del vino analizzato, espressa in
milligrammi per litro, è uguale a:
100/C1h
H/C1I
i
H = altezza del picco dell'acido sorbico nella soluzione di riferi-
mento.
h = altezza del picco dell'acido sorbico nel campione da analiz-
zare.
I = altezza del picco dello standard interno nella soluzione di rife-
rimento.
i= altezza del picco dello standard interno nel campione da
analizzare.
Nota:la concentrazione in acido sorbico può essere determinata nello
stesso modo prendendo in considerazione la misura della superficie
dei rispettivi picchi.
4. METODO DI RICERCA DI TRACCE DI ACIDO SORBICO
MEDIANTE CROMATOGRAFIA SU STRATO SOTTILE
4.1.Reattivi
4.1.1. Etere etilico, (C
2H5)2O.
4.1.2. Soluzione acquosa di acido solforico, H2SO4(ρ20= 1,84 g/ml)
diluito a1/3 (v/v).
4.1.3. Soluzione di riferimento di acido sorbico in una miscela idroetano-
lica al 10 % di etanolo (vol.): 20 mg/l circa.
4.1.4. Fase mobile: esano — pentano — acido acetico (20:20:3)
(C6H14—C5H12—C H3COOH) ( ρ20= 1,05 g/ml).
4.2.Apparecchiatura
4.2.1. Lastre per cromatografia su strato sottile, pronte per l'uso, da 20 ×
20 cm ricoperte con gel di poliammide (spessore: 0,15 mm) addizio-
nato di un indicatore di fluorescenza.
4.2.2. Camera cromatografica per strato sottile.4.2.3. Micropipettao microsiringache consentadi deposita re volumi da5
µl con laprecisione di ± 0,1 µl.
4.2.4. Lampada a raggi ultravioletti (254 nm).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 115
▼B
4.3.Mododioperare
4.3.1. Preparazione del campione da analizzare
Versare in una provetta da circa 25 ml, provvista di tappo smeri-
gliato, 10 ml di vino, aggiungere 1 ml di soluzione di acido
solforico diluito (4.1.2) e 5 ml di etere etilico (4.1.1). Agitare capo-volgendo più volte. Lasciare decantare.
4.3.2. Preparazione delle soluzioni diluite di riferimento
Preparare, per diluizione della soluzione 4.1.3, cinque soluzioni
diluite di riferimento contenenti rispettivamente 2-4-6-8 e 10 mg di
acido sorbico per litro.
4.3.3. Cromatografia
Con unamicrosiringao unamicropipettadeporre, a2 cm da l bordo
inferiore della lastra, 5 µl della fase eterea ottenuta al punto 4.3.1 e 5
µl di ciascuna delle soluzioni diluite di riferimento (4.3.2), distan-
ziando i depositi tra di loro di 2 cm.
Versare la fase mobile (4.1.4) nella camera cromatografica sino a
raggiungere un'altezza di circa 0,5 cm e lasciare che l'atmosfera
della camera si saturi dei vapori dei solventi. Introdurre la lastra
nella vaschetta. Lasciare sviluppare il cromatogramma per 12-15
cm (la durata dello sviluppo è di circa 30 minuti). Asciugare la lastra
in corrente di aria fredda. Esaminare il cromatogramma sotto luce
ultravioletta a 254 nm.
La macchie relative all'acido sorbico hanno una colorazione viola
scuro sul fondo giallo fluorescente della lastra.
4.4.Espressionedeirisultati
Il confronto fra le intensità della macchia del campione da analizzare
e quelladelle ma cchie delle soluzioni di riferimento consente di
valutare semiquantitativamente la concentrazione in acido sorbico
fra 2 e 10 mg per litro. Per determinare una concentrazione uguale
a1 mg per litro occorrerà un deposito di 10 µl di soluzione del
campione da analizzare, mentre per determinare concentrazioni supe-
riori a10 mg per litro il volume del deposito dellasoluzione da
analizzare dovrà essere inferiore a 5 µl (da misurare con una micro-
siringa).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 116
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23.ACIDOL-ASCORBICO
1. PRINCIPIO DEI METODI
I metodi proposti consentono di dosare l'acido L-ascorbico e l'acido
deidroascorbico presenti nei vini o nei mosti.
1.1.Metododiriferimento (fluorimetrico)
L'acido L-ascorbico è ossidato ad acido deidroascorbico con
l'impiego del carbone attivo. Tale composto per reazione con l'orto-
fenilendiammina (O.P.D.A.) forma un composto fluorescente. Un
bianco in presenza di acido borico consente di determinare la fluore-scenza parassita (per formazione di un complesso acido borico —
acido deidroascorbico) e di sottrarla quindi dal dosaggio fluorime-
trico.
1.2.Metodousuale(colorimetrico)
L'acido L-ascorbico viene ossidato con iodio in acido deidroascor-
bico, composto che viene quindi precipitato dalla 2,4
dinitrofenilidrazina come bis (2,4-dinitrofenilidrazone). Dopo separa-
zione per cromatografia su strato sottile e solubilizzazione in
ambiente acetico, questo composto di colorazione rossa viene dosato
per spettrofotometriaa500 nm.
2. METODO DI RIFERIMENTO (METODO FLUORIMETRICO)
2.1.Reattivi
2.1.1. Soluzione di dicloridrato di orto-fenilendiammina (C
6H10Cl2N2)a
0,02 g per 100 ml, preparati al momento.
2.1.2. Soluzione di acetato di sodio triidrato (CH3COONa3H2O), a500 g/l.
2.1.3. Soluzione mista di acido borico e di acetato di sodio.
Sciogliere 3 g di acido borico, H3BO3, in 100 ml di soluzione di
acetato di sodio (2.1.2). Questa soluzione deve essere preparata al
momento dell'uso.
2.1.4. Soluzione di acido acetico glaciale, (CH3COOH ( ρ20= 1,05 g/ml)
diluito al 56 % (v/v) a pH 1,2 circa.
2.1.5. Soluzione di riferimento di acido L-ascorbico da 1 g per litro.
Sciogliere immediatamente prima dell'impiego 50 mg di acido L-
ascorbico, C6H8O6, previamente disidratato in un essiccatore al riparo
dalla luce, in 50 ml di soluzione di acido acetico (2.1.4).
2.1.6. Carbone attivo molto puro per analisi (1)
Porre, in una beuta da 2 l, 100 g di carbone attivo, aggiungere 500
ml di unasoluzione di a cido cloridrico, (HCl) ( ρ20= 1,19 g/ml) al
10 % (v/v). Portare a ebollizione, filtrare su filtro in vetro sinteriz-
zato di porosità 3. Raccogliere il carbone così trattato in una beuta
da 2 l, aggiungere 1 l di acqua, agitare e filtrare su filtro di vetro
sinterizzato di porosità 3. Ripetere due volte l'operazione. Porre il
residuo in una stufa regolata a 115 ± 5 ºC per 12 ore (ad esempio
unanotte).
2.2.Apparecchiatura
2.2.1. Fluorimetro. Utilizzare uno spettrofluorimetro dotato di una lampada
a spettro continuo regolandolo sulla potenza minima della lampada.
Le lunghezze d'onda di eccitazione e di emissione ottimali per la
prova saranno determinate previamente e in funzione dell'apparec-
chio impiegato. A titolo indicativo la lunghezza d'onda di
eccitazione si situa intorno ai 350 nm, e la lunghezza d'onda di emis-
sione intorno ai 430 nm. Celle di 1 cm di cammino ottico.
2.2.2. Filtro in vetro sinterizzato di porosità 3.
2.2.3. Provette (diametro /asymptequal10 mm).
2.2.4. Agitatore per provette.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 117
(1) Unadelle denomina zioni commercia li è «norite».
▼B
2.3.Mododioperare
2.3.1. Preparazione del campione di vino o di mosto
Prelevare un volume di vino o di mosto e diluirlo a 100 ml in un
matraccio tarato con la soluzione di acido acetico al 56 % (2.1.4),
in modo da ottenere una soluzione la cui concentrazione in acido
L-ascorbico sia compresa fra 0 e 60 mg/l. Agitare per omogeneiz-
zare il contenuto del matraccio tarato. Aggiungere 2 g di carbone
attivo (2.1.6) e lasciare a contatto per 15 minuti agitando di tanto
in tanto. Filtrare su carta da filtro ordinaria eliminando i primi milli-
litri di filtrato. In due matracci tarati da 100 ml introdurre, in uno, 5
ml della soluzione mista di acido barico e di acetato di sodio (2.1.3)
(testimone), nell'altro, 5 ml della soluzione di acetato di sodio (2.1.2)
(campione). Lasciare a contatto per 15 minuti agitando di tanto in
tanto, e completare a 100 ml con acqua distillata.
Prelevare 2 ml del contenuto di ciascun matraccio, aggiungere 5 ml
di soluzione di ortofenilendiammina (2.1.1), agitare; lasciare svilup-
pare la reazione per 30 minuti in assenza di luce ed effettuare quindi
lamisuraa llo spettrofluorimetro.
2.3.2. Curva di taratura
In tre matracci tarati da 100 ml porre rispettivamente 2, 4, 6 ml della
soluzione di riferimento di acido L-ascorbico (2.1.5), completare a
100 ml con la soluzione di acido acetico (2.1.4), agitando per
omogeneizzare. Le soluzioni di riferimento preparate contengono
rispettivamente 2-4-6 mg/100 ml.
Aggiungere 2 g di carbone attivo (2.1.6) in ciascuno dei matracci e
lasciare a contatto per 15 minuti agitando di tanto in tanto. Filtrare
su carta da filtro ordinaria eliminando i primi millilitri. Introdurre
rispettivamente 5 ml di ciascuno dei filtrati raccolti nei tre matracci
da100 ml (primaserie), ripetere l'opera zione con un secondaserie di
tre matracci tarati. Aggiungere in ciascuno dei matracci della prima
serie (corrispondenti al testimone) 5 ml di soluzione mista di acido
borico e acetato di sodio (2.1.3) e in ciascun matraccio della seconda
serie 5 ml di soluzione di acetato di sodio (2.1.2).
Lasciare a contatto per 15 minuti agitando di tanto in tanto, e
completare a 100 ml con acqua distillata. Prelevare 2 ml del conte-
nuto di ciascuno dei matracci, aggiungere 5 ml di soluzione di
ortofenilendiammina (2.1.1), agitare, lasciare sviluppare la reazione
per 30 minuti in assenza di luce ed effettuare quindi la misura allo
spettrofluorimetro.
2.3.3. Determinazione fluorimetrica
Regolare per ciascuna soluzione della curva di taratura e per la solu-
zione del dosaggio lo zero della scala delle misure sul bianco
corrispondente. Effettuare quindi la misurazione dell'intensità della
fluorescenzaper ogni soluzione dellaserie atitolo noto e dellaserie
del campione per il dosaggio.
Tracciare la curva di taratura; essa deve risultare lineare e passare
per l'origine degli assi. Riportare su tale retta il valore relativo al
dosaggio e sottrarre il tenore C in acido L-ascorbico + acido
deidroascorbico della soluzione analizzata.
2.3.4. Espressione dei risultati
La concentrazione del vino in acido L-ascorbico + acido deidroa-
scorbico espressa in milligrammi per litro sarà:
C·FF = fattore di diluizione.
3. METODO USUALE (COLORIMETRICO)
3.1.Reattivi
3.1.1. Soluzione di acido metafosforico al 30 % (m/v).
Prelevare 30 g di acido metafosforico, (HPO
3)npreviamente maci-
nato in un mortaio. Lavare rapidamente per immersione e agitando
in acqua distillata. Sciogliere l'acido lavato in acqua distillata
agitando in un matraccio tarato da 100 ml, portare al volume; la
soluzione ottenutahaunaconcentra zione di circail 30 % (m/v) in
acido metafosforico.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 118
▼B
3.1.2. Soluzione di acido metafosforico al 3 % (m/v), preparata al
momento dell'uso diluendo 1: 10 lasoluzione 3.1.1 con a cquadistil-
lata.
3.1.3. Soluzione di acido metafosforico all' 1 % (m/v) preparata al
momento dell'uso diluendo 1: 30 lasoluzione 3.1.1 con a cquadistil-
lata.
3.1.4. Sospensione di poliammide
Mettere in sospensione 10 g di polvere di poliammide per cromato-
grafia in 60 ml di acqua distillata e lasciare in contatto per 2 ore. La
quantità preparata è sufficiente per 4 determinazioni.
3.1.5. Tiourea(H2NCSNH2).
3.1.6. Soluzione di iodio (I2) 0,05 M.
3.1.7. Soluzione di 2,4-dinitrofenilidrazina al 6 % (m/v). Mettere in
sospensione 6 g di 2,4-dinitrofenilidrazina (C6H6N4O4)i n5 0m ld i
acido acetico glaciale ( ρ20= 1,05 g/ml), aggiungere 50 ml di acido
solforico ( ρ20= 1,84 g/ml) e agitare per sciogliere la 2,4-dinitrofeni-
lidrazina.
3.1.8. Acetato di etile (C4H8O2) addizionato del 2 % (v/v) di acido acetico
glaciale (3.1.12).
3.1.9. Cloroformio (CHCl3).
3.1.10. Soluzione acquosa di amido allo 0,5 % (m/v).3.1.11. Fase mobile:
acetato di etile …......................................... 50 vol.
cloroformio …............................................ 60 vol.acido acetico … ........................................... 5 vol.
Prima dell'impiego lasciare riposare la miscela solvente per 12 ore.
3.1.12. Acido acetico glaciale (CH
3COOH) ( ρ20= 1,05 g/ml).
3.1.13. Soluzione di acido L-ascorbico a 0,1 g per 100 ml di soluzione di
acido metafosforico all'1 % (3.1.3).
3.2.Apparecchiatura
3.2.1. Centrifuga da laboratorio e relativi tubi da 50 ml di capacità prov-
visti di tappo smerigliato.
3.2.2. Bagnomaria termostatato tra 5 e 10 ºC.
3.2.3. Bagnomaria termostatato a 20 ºC.
3.2.4. Lastre per cromatografia su strato sottile pronte all'uso, da 20 × 20
cm, ricoperte con gel di silice G (spessore 0,25 o 0,3 mm).
3.2.5. Camera cromatografica.
3.2.6. Micropipettache consentadi dosa re volumi da0,2 ml.3.2.7. Spettrofotometro per misure di assorbanza a 500 nm corredato di
celle aca mmino ottico da1 cm.
3.3.Mododioperare
3.3.1. Ossidazione dell'acido L-ascorbico in acido deidroascorbico
Versare 50 ml di vino in un matraccio tarato da 100 ml, aggiungere
15 ml di sospensione di poliammide (3.1.4) e portare a volume con
la soluzione di acido metafosforico al 3 % (3.1.2). Lasciare riposare
1 ora, agitando spesso. Filtrare su filtro a pieghe. Mettere 20 ml di
filtrato in un tubo da centrifuga, aggiungere 1 ml di soluzione 0,05
M di iodio (3.1.6). Omogeneizzare il contenuto agitando il tubo da
centrifuga tappato e dopo 1 minuto ridurre l'eccesso di iodio aggiun-
gendo 25 mg circadi tiourea .
3.3.2. Formazione ed estrazione del bis (2,4-dinitrofenilidrazone) dell'a-
cido dichetogulonico
Mettere la provetta in un bagno d'acqua a temperatura compresa fra
5 e 10 ºC; aggiungere 4 ml di soluzione di 2,4-dinitrofenilidrazina
(3.1.7). Omogeneizzare il contenuto del tubo, evitando di bagnare il1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 119
▼B
tappo di vetro. Conservare poi il tubo ben chiuso in un bagno
d'acqua a 20 ºC per circa 16 ore (una nottata, per esempio).
Aggiungere nel tubo da centrifuga 15 ml di acetato di etile (3.1.8),
chiudere il tubo e agitare per 30 secondi. Centrifugare poi per 5
minuti applicando una forza centrifuga di 350-400 g. Prelevare con
una pipetta 10 ml dell'acetato di etile utilizzato per l'estrazione e
versarli in una beuta con tappo smerigliato. Aggiungere al contenuto
del tubo da centrifuga 5 ml di acetato di etile (3.1.8). Tappare il
tubo. Agitare per 30 secondi e centrifugare quindi per 5 minuti alla
stessa velocità. Prelevare 5 ml dell'acetato di etile utilizzato per
l'estrazione ed aggiungerlo alla soluzione della prima estrazione
nella beuta. Omogeneizzare la miscela agitando.
3.3.3. Separazione del bis (2.4-dinitrofenilidrazone) per cromatografia: da
effettuare entro 2 ore dall'estrazione (3.3.2).
Lasciando un margine di 2 cm nella parte inferiore ed in quella late-
rale della lastra, depositare su tutta la linea di partenza 0,2 ml
dell'estratto in acetato di etile. Versare la fase mobile (3.1.11) nella
vasea per un'altezza di 1 cm e lasciare che l'ambiente si saturi di
vapori dei solventi. Introdurre quindi la lastra, lasciare migrare il
solvente sino al bordo superiore, e farla quindi asciugare per un'ora
sotto cappa ventilata. Grattare con una spatola, perpendicolarmente
alla direzione di migrazione, la zona di colorazione rossa (caratteri-
stica del 2,4-dinitrofenilidrazone). Raccogliere la polvere ottenuta su
un foglio di carta lucida e trasferirla quantitativamente in una beuta
con tappo smerigliato, aggiungendo 4 ml di acido acetico (3.1.12).
Lasciare riposare per 30 minuti, agitando spesso. Filtrare su carta
dafiltro apieghe diretta mente nellacelladello spettrofotometro
(3.2.7). Il filtrato ottenuto dev'essere limpido. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze a 500 nm con l'acido acetico (3.1.12) e misu-
rare l'assorbanza della soluzione.
3.3.4. Curva di taratura
Versare in 3 palloni tarati da 100 ml rispettivamente 5-10 e 15 ml di
soluzione di acido L-ascorbico (3.1.1.3) e portare a volume con la
soluzione di acido metafosforico all' 1 % (3.1.3). Le soluzioni otte-
nute hanno una concentrazione in acido ascorbico rispettivamente di
50-100 e 150 mg/litro.
Su 50 ml di ciascuna di queste soluzioni seguire il modo di operare
descritto ai punti 3.3.1, 3.3.2 e 3.3.3. Tracciare la curva di taratura
che deve essere una retta e deve passare per l'origine.
3.3.5. Espressione dei risultati
La concentrazione del vino in acido L-ascorbico + acido deidroa-
scorbico si esprime in milligrammi per litro.
3.3.5.1. Calcolo
Riportare sulla retta di taratura il valore dell'assorbanza misurata al
punto 3.3.3 e ricavare il valore della concentrazione in acido L-
ascorbico + acido deidroascorbico della soluzione analizzata.
NB:
Se la concentrazione in acido L-ascorbico + acido deidroascorbico è
superiore a150 mg/l, ridurre il volume dellapresadi ca mpione a25-
20 o 10 ml di vino, moltiplicando il risultato ottenuto per il fattore di
diluizione F.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 120
▼B
24.pH
1. PRINCIPIO
Misuradelladifferenzadi potenzia le fradue elettrodi immersi nel
liquido in esame. Uno degli elettrodi ha un potenziale che è una
funzione definita del pH del liquido, mentre l'altro ha un potenziale
fisso e noto e costituisce l'elettrodo di riferimento.
2. APPARECCHIATURA
2.1. pHmetro a scala graduata in unità pH in modo da consentire delle
misurazioni con un'approssimazione di almeno 0,05 unità.
2.2. Elettrodi.
2.2.1. Elettrodi in vetro, da conservare in acqua distillata.
2.2.2. Elettrodi di riferimento a calomelano e cloruro di potassio saturo,
conservati in una soluzione satura di cloruro di potassio.
2.2.3. Oppure un elettrodo combinato da conservare in acqua distillata.
3. REATTIVI
3.1. Soluzioni tampone:
3.1.1. Soluzione satura di tartrato acido di potassio. Soluzione contenente
almeno 5,7 g/l di tartrato acido di potassio (C4H5KO6) a20 ºC. Ta le
soluzione può conservarsi fino a 2 mesi in presenza di 0,1 g di
timolo per 200 ml.
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1463,57 a20 ºC
3,56 a25 ºC
3,55 a30 ºC
3.1.2. Soluzione 0,05 M di ftalato acido di potassio. Soluzione contenente
10,211 g/l di ftalato acido di potassio (C
8H5KO4) a20 ºC.
(Tempo massimo di conservazione: 2 mesi).
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1463,999 a15 ºC
4,003 a20 ºC
4,008 a25 ºC4,015 a30 ºC
3.1.3. Soluzione contenente:
Fosfato monopotassico, KH
2PO4… ....................... 3,402 g
Fosfato dipotassico, K2HPO4….......................... 4,354 g
Acquaq.b.a . ….......................................... 1 l
(Tempo massimo di conservazione: 2 mesi)
pH/C144/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C145/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C147/C1466,90 a15 ºC
6,88 a20 ºC
6,86 a25 ºC6,85 a30 ºC
NB:
Possono essere impiegate anche le soluzioni tampone di riferimento
reperibili in commercio.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 121
▼B
4. MODO DI OPERARE
4.1.Preparazione delcampioneperl'analisi
4.1.1. Mosto e vino
Operare direttamente sul mosto o sul vino.
4.1.2. Mosto concentrato rettificato
Diluire il mosto concentrato rettificato con acqua per ottenere una
concentrazione di 25 ± 0,5 % (m/m) in zuccheri totali (25 ºBrix).
Se P è il tenore percentuale (m/m) in zuccheri totali del mosto
concentrato rettificato, pesare una quantità uguale a:
2500
P
e completare a 100 g con acqua. L'acqua utilizzata deve avere una
conduttività inferiore a2 microsiemens per centimetro.
4.2.Azzeramentodell'apparecchio
Prima di effettuare le misurazioni occorre azzerare l'apparecchio,
seguendo le indicazioni date per l'apparecchio utilizzato.
4.3.TaraturadelpHmetro
La taratura si effettua a 20 ºC seguendo le indicazioni date per
l'apparecchio utilizzato con le soluzioni tampone a pH 6,88 e 3,57
a20 ºC. Utilizza re lasoluzione ta mpone apH 4,00 a20 ºC per
controllare la calibratura della scala.
4.4.Misura
Immergere l'elettrodo nel campione da analizzare la cui temperatura
dev'essere compresafra20 e 25 ºC e il più possibile vicinaa20 ºC.
Leggere direttamente sulla scala il valore del pH.
Effettuare almeno due determinazioni sullo stesso campione.
Prendere come risultato la media aritmetica delle due determina-
zioni.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
Il pH del mosto, del vino o dellasoluzione a l 25 % (m/m) (25 ºBrix)
del mosto concentrato rettificato è espressa con 2 cifre decimali.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 122
▼B
25.ANIDRIDESOLFOROSA
1. DEFINIZIONE
Si chiama anidride solforosa l'anidride solforosa presente nel mosto
o nel vino nelle forme seguenti: H2SO3, HSO3−, il cui equilibrio
dipende dal pH e dalla temperatura:
H2SO3
H++ HSO3-
H2SO3rappresenta l'anidride solforosa molecolare.
Si chiama anidride solforosa totale l'insieme delle varie forme di
anidride solforosa presenti nel vino allo stato libero o combinato.
2. ANIDRIDE SOLFOROSA LIBERA E TOTALE
2.1.Principio deimetodi
2.1.1. Metodo di riferimento
2.1.1.1. Vini e mosti
L'anidride solforosa viene trascinata da una corrente di aria o di
azoto e viene fisata ed ossidata per gorgogliamento in una soluzione
diluita neutra di perossido di idrogeno. L'acido solforico formato
viene dosato con una soluzione titolata di idrossido di sodio. L'ani-
dride solforosa libera viene estratta dal vino per trascinamento a
freddo (10 ºC).
L'anidride solforosa totale viene estratta dal vino per trascinamento a
caldo (100 ºC circa).
2.1.1.2. Mosti concentrati rettificati
L'anidride solforosa totale è estratta per trascinamento a caldo (circa
100 ºC) del mosto rettificato concentrato previamente diluito.
2.1.2. Metodo rapido (vini e mosti)
L'anidride solforosa libera viene dosata mediante titolazione iodome-
tricadiretta .
Si dosa quindi l'anidride solforosa combinata mediante titolazione
iodometrica effettuata dopo idrolisi alcalina. Sommandola all'ani-
dride solforosa libera, si ottiene l'anidride solforosa totale.
2.2.Metododiriferimento
2.2.1. Apparecchiatura
2.2.1.1. L'apparecchio utilizzato deve essere conforme allo schema qui ripor-
tato, in particolare per quanto riguarda il refrigerante.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 123
▼B
Fig. 1
Ledimensionisonoriportateinmillimetri. Idiametriinternidei
4 tubi concentrici che costituiscono il refrigerante sono: 45, 34,
27e10mm.
Il tubo di adduzione del gas nel gorgogliatore «B» termina con una
sferetta dal diametro di 1 cm portante sulla circonferenza massima
orizzontale 20 fori del diametro di 0,2 mm. Esso può ugualmente
terminare con una piastra di vetro sinterizzato che assicuri la forma-
zione di un elevato numero di bolle molto piccole che consentano di
realizzare un buon contatto fra le fasi gassose e liquide.
Il flusso di gas attraverso l'apparecchio deve essere di circa 40 l/h.
La bottiglia posta a destra dell'apparecchio ha lo scopo di limitare
al valore di 20-30 cm di acqua la depressione prodotta dalla pompa
a caduta d'acqua. Per poter regolare tale depressione in modo da
avere un flusso corretto, è opportuno inserire fra il gorgogliatore e
la bottiglia un flussimetro a tubo semicapillare.
2.2.1.2. Microburetta2.2.2. Reattivi
2.2.2.1. Acido fosforico all'85 % (H
3PO4)(ρ20= 1,71 g/ml).
2.2.2.2. Soluzione di perossido di idrogeno a9,1 g di H2O2/l (3 volumi).
2.2.2.3. Reattivo indicatore:
rosso di metile …........................................ 100 mg
blu di metilene … ........................................ 50mg
alcol a 50 % vol. …..................................... 100 ml
2.2.2.4. Soluzione di idrossido di sodio (NaOH), 0,01 M.
2.2.3. Modo di operare
2.2.3.1. Dosaggio dell'anidride solforosa libera
Prima del dosaggio il vino deve essere mantenuto per due giorni a
20 ºC in una bottiglia piena e tappata.
— Porre nel gorgogliatore «B» da 2 a 3 ml di soluzione di peros-
sido di idrogeno (2.2.2.2) 2 gocce di indicatore; neutralizzare
quindi lasoluzione di perossido di idrogeno con unasoluzione
0,01 M di idrossido di sodio (2.2.2.4). Collegare il gorgogliatore
all'apparecchiatura.
— Nel pallone «A» da 250 ml dell'apparecchio di distillazione
introdurre 50 ml di campione e 15 ml di acido fosforico
(2.2.2.1). Collegare il pallone.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 124
▼B
Fare quindi gorgogliare l'aria (o l'azoto) per 15 minuti. L'anidride
solforosa libera trascinata viene ossidata ad acido solforico.
Togliere il gorgogliatore dell'apparecchio e titolare l'acido forma-
tosi con lasoluzione di idrossido di sodio 0,01 M (2.2.2.4). Sian
il numero di ml utilizzati.
2.2.3.2. Espressione dei risultati
L'anidride solforosa libera è espressa in mg/l senza decimali.
2.2.3.2.1. Calcolo
Anidride solforosaliberain mg/l: 6,4 n.
2.2.3.3. Dosaggio dell'anidride solforosa totale
2.2.3.3.1. Per i mosti concentrati rettificati, utilizzare la soluzione ottenuta
diluendo il campione per l'analisi al 40 % (m/v) come indicato al
punto 5.1.2 del capitolo «Acidità totale». Introdurre nel pallone
«A» da 250 ml dell'apparecchio, 50 ml di tale soluzione e 5 ml di
acido fosforico (2.2.2.1). Collegare il pallone con l'apparecchiatura.
2.2.3.3.2. Vini e mosti
Tenore presunto del campione ≤50 mg/l di SO2totale. Versare nel
pallone «A» da 250 ml dell'apparecchio, 50 ml di campione e 15 ml
di acido fosforico (2.2.2.1). Collegare il pallone con l'apparecchia-
tura.
Tuttavia, sino al ►M331 agosto 1996 ◄al più tardi, per determi-
nare il tenore in anidride solforosa dei succhi d'uva si usano 5 ml di
acido fosforico (2.2.2.1) diluiti al 25 % (m/v).
2.2.3.3.3. Tenore presunto del campione ≥50 mg/l di SO2totale. Versare nel
pallone «A» da 100 ml dell'apparecchio 20 ml di campione e 5 ml di
acido fosforico (2.2.2.1). Collegare il pallone con l'apparecchiatura.
Porre nel gorgogliatore «B» 2 × 3 ml di soluzione di perossido di
idrogeno (2.2.2.2), neutralizzarla come sopra e portare il vino conte-
nuto nel pallone «A» ad ebollizione per mezzo di una piccola
fiamma alta 4-5 cm che deve lambire direttamente il fondo del
pallone. Per evitare la piroscissione delle sostanze estrattive del
vino sulle pareti del pallone, posarlo, anziché su una rete metallica,
su un disco provvisto di un foro del diametro di 30 mm.
Mantenere l'ebollizione durante il passaggio della corrente d'aria (o
di azoto). Entro 15 minuti l'anidride solforosa totale viene estratta
ed ossidata. Dosare quindi l'acido solforico formatosi con la solu-
zione 0,01 M di idrossido di sodio (2.2.2.4). Sian il numero di ml
utilizzati.
2.2.3.4. Espressione dei risultati
L'anidride solforosa totale è espressa in milligrammi/litro (mg/l) o in
milligrammi/chilogrammo (mg/kg) di zuccheri totali senza cifre
decimali.
2.2.4.2.1. Calcolo
Vini e mostiAnidride solforosatota le in mg/l:
— Campioni poveri di anidride solforosa (quantità di campione
analizzata 50 ml):
6,4 · n
— Altri campioni (quantità di campione analizzata 20 ml):
16 · n
Mosti concentrati rettificati
Anidride solforosa in milligrammi per chilo di zuccheri totali
(quantità di campione analizzato preparato come in 2.2.3.3.1, 50 ml):
1600 /C1n
P
P = tenore percentuale (m/m) in zuccheri totali.
2.2.3.4.2. Ripetibilità (r)
Tenore < 50 mg/l (presadi ca mpione 50 ml), r = 1 mg/l
Tenore > 50 mg/l (presadi ca mpione 20 ml), r = 6 mg/l1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 125
▼B
2.2.3.2.3. Riproducibilità
Tenore < 50 mg/l (presadi ca mpione 50 ml), R = 9 mg/l
Tenore > 50 mg/l (presadi ca mpione 20 ml), R = 15 mg/l
2.3.Metodorapidodiprova
2.3.1. Reattivi
2.3.1.1. EDTA (Complexon III): sale bisodico dell'acido etilendiamminote-
tracetico (C10H14N2Na2O8·2 H2O).
2.3.1.2. Soluzione 4 M di idrossido di sodio NaOH (160 g/l).
2.3.1.3. Soluzione di acido solforico H2SO4(ρ20= 1,84 g/ml) al 10 % (v/v).
2.3.1.4. Salda d'amido soluzione a 5 g/l.
Disperdere 5 g di amido in circa 500 ml di acqua. Portare ad ebolli-
zione agitando e mantenerla per 10 minuti; aggiungere 200 g di
cloruro di sodio (NaCl) e dopo raffreddamento portare a 1 litro.
2.3.1.5. Soluzione 0,025 M di iodio (I2)
2.3.2. Materiale
2.3.2.1. Beutada500 ml.2.3.2.2. Buretta.2.3.2.3. Pipette da1, 2, 5 e 50 ml.2.3.3. Modo di operare
2.3.3.1. Anidride solforosalibera
In unabeutada500 ml, versa re:
— 50 ml di vino
— 5 ml di salda d'amido (2.3.1.4)— 30 mg di EDTA (2.3.1.1)
— 3 ml di H
2SO4al 10 % (2.3.1.3)
Titolare immediatamente con la soluzione 0,025 M di iodio (2.3.1.5)
sino a quando la colorazione blu persiste nettamente per 10-15
secondi. Sian ml il volume di iodio utilizza to.
2.3.3.2. Anidride solforosacombina ta
Aggiungere 8 ml di soluzione 4 M di idrossido di sodio (2.3.1.2),
agitare una sola volta e lasciare a contatto per 5 minuti. Versare in
un sol colpo, agitando energicamente, il contenuto di un piccolo
becher nel quale siano stati posti 10 ml di acido solforico al 10 %
(2.3.1.3). Titolare immediatamente con la soluzione 0,025 M di iodio
(2.3.1.5). Sian ′il volume di iodio impiegato.
Aggiungere 20 ml di soluzione 4 M di idrossido di sodio (2.3.1.2), e
lasciare a contatto per cinque minuti dopo aver agitato una sola
volta. Diluire con 200 ml di acqua molto fredda.
Agitando energicamente aggiungere, versando in un sol colpo da un
becher riempito precedentemente, 30 ml di acido solforico al 10 %
(2.3.1.3). Titolare con la soluzione 0,025 M di iodio (2.3.1.5) l'ani-
dride solforosa liberata; sia n ″il volume di iodio impiegato.
2.3.4. Espressione dei risultati
2.3.4.1. Calcolo
Anidride solforosaliberain milligra mmi per litro: 32 n.Anidride solforosatota le in mg/l: 32 (n + n ′+n″).
Osservazioni:1) Per i vini rossi poveri in SO
2è opportuno impiegare iodio con
una molarità inferiore a 0,025 M (per esempio: 0,01 M). In tal
caso sostituire nelle formule sopra riportate il coefficiente 32
con 12,8.
2) Per i vini rossi, torna utile illuminare il vino dal basso con un
fascio di luce gialla ottenuta mediante una lampada elettrica
comune e una soluzione di cromato di potassio oppure mediante
una lampada a vapori di sodio. La trasparenza del vino, che1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 126
▼B
diviene opaco appena raggiunto il viraggio della salda d'amido,
va osservata in una camera oscura.
3) Quando la quantità di anidride solforosa trovata è prossima o
superiore al limite legale, è opportuno dosare l'anidride solforosa
totale con il metodo di riferimento.
4) Quando interessa particolarmente il dosaggio dell'anidride solfo-
rosa, questo verrà convenzionalmente determinato su un
campione mantenuto per due giorni al riparo dall'aria e alla
temperatura di 20 ºC prima dell'analisi, che sarà eseguita
anch'essa a tale temperatura.
5) Poiché alcune sostanze vengono ossidate dallo iodio in ambiente
acido, per un dosaggio più preciso occorre valutare la quantità di
iodio consumata da tali sostanze. A tale scopo, prima di effet-
tuare la titolazione con lo iodio, occorre combinare l'anidride
solforosa libera con un eccesso di aldeide acetica o propionica.
In unabeutada300 ml a ggiungere a50 ml di vino 5 ml di solu-
zione di aldeide acetica (C2H4O) a7 g/l oppure 5 ml di una
soluzione di aldeide propionica (C3H6O) a10 g/l.
Chiudere con un tappo e lasciare riposare per almeno 30 minuti.
Aggiungere 3 ml di acido solforico al 10 % (2.3.1.3) e la solu-
zione 0,025 M di iodio (2.3.1.5) in quantità sufficiente per
ottenere il viraggio della salda di amido. Sia n /tripleprimeil volume di
iodio impiegato. Questo valore deve essere detratto da n (SO2libera) e da n + n ′+n″(SO2totale).
In genere, il valore di n /tripleprimeè basso: 0,2-0,3 ml di iodio 0,025 M.
Se il vino è stato addizionato di acido ascorbico, n /tripleprimerisultamolto
più elevato e si può, almeno approssimativamente, misurare la
quantità di questo prodotto mediante il valore di n /tripleprime, sapendo
che 1 ml di iodio 0,025 M ossida 4,4 mg di acido ascorbico.
Attraverso la misura di n /tripleprime, si possono così riconoscere senza
difficoltà i vini che sono stati addizionati di acido ascorbico in
quantità superiore a 20 mg/l, sempre che questo non si sia
trasformato in prodotti di ossidazione.
3. ANIDRIDE SOLFOROSA MOLECOLARE
3.1.Principio delmetodo
La percentuale di anidride solforosa molecolare, H2SO3, nell'anidride
solforosa libera viene valutata in funzione del pH, del titolo alcolo-
metrico e della temperatura.
Per una data temperatura e un dato titolo alcolometrico:
H2SO3
H++ HSO 3/C0
(1) H2SO3 ½/C138 ¼L
10pH/C0pkM ðÞþ1
dove
pKM=p KT/C0Aﬃﬃ
ip
IþBﬃﬃ
ip
L= H 2SO3 ½/C138 þHSO3/C0 ½/C138
i = forzaionica .
A e B = coefficienti che variano con la temperatura e con il titolo
alcolometrico.
KT= costante termodinamica di dissociazione; il valore di pkTè
dato nella tabella 1 in funzione del titolo alcolometrico e
della temperatura.
KM= costante mista di dissociazione.
Attribuendo alla forza ionica i il valore medio 0,038, la tabella 2 dà i
valori di pkMin funzione della temperatura e del titolo alcolometrico.
Il tenore in anidride solforosa molecolare ottenuto dalla relazione (1)
è dato nella tabella 3 in funzione del pH, della temperatura e del
titolo alcolometrico.
3.2.Calcolo
Conoscendo il pH del vino ed il relativo titolo alcolometrico, la
percentuale di anidride solforosa molecolare per una data tempera-
tura t ºC, è data nella tabella 3; sia X %.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 127
▼B
Tenore in anidride solforosa molecolare espresso in mg/l:
X·CC = tenore in anidride solforosa libera espresso in mg/l.
TABELLA 1
ValoredellacostantetermodinamicapK
T
Alcool % in
volumeTemperatura in ºC
20 25 30 35 40
0 1,798 2,000 2,219 2,334 2,493
5 1,897 2,098 2,299 2,397 2,527
10 1,997 2,198 2,394 2,488 2,606
15 2,099 2,301 2,503 2,607 2,728
20 2,203 2,406 2,628 2,754 2,895
TABELLA 2
Valore dellacostantemistapKM(I=0,038)
Alcool % in
volumeTemperatura in ºC
20 25 30 35 40
0 1,723 1,925 2,143 2,257 2,416
5 1,819 2,020 2,220 2,317 2,446
10 1,916 2,116 2,311 2,405 2,522
15 2,014 2,216 2,417 2,520 2,640
20 2,114 2,317 2,538 2,663 2,803
TABELLA 3
Anidride solforosa molecolare in percentuale di anidride solforosa libera (I
=0,038)
pHT = 20 ºC
Alcool % in volume
0 5 10 15 20
2,8 7,73 9,46 11,55 14,07 17,09
2,9 6,24 7,66 9,40 11,51 14,07
3,0 5,02 6,18 7,61 9,36 11,51
3,1 4,03 4,98 6,14 7,58 9,36
3,2 3,22 3,99 4,94 6,12 7,58
3,3 2,58 3,20 3,98 4,92 6,12
3,4 2,06 2,56 3,18 3,95 4,92
3,5 1,64 2,04 2,54 3,16 3,95
3,6 1,31 1,63 2,03 2,53 3,16
3,7 1,04 1,30 1,62 2,02 2,53
3,8 0,83 1,03 1,29 1,61 2,02
T = 25 ºC
2,8 11,47 14,23 17,15 20,67 24,752,9 9,58 11,65 14,12 17,15 22,71
3,0 7,76 9,48 11,55 14,12 17,18
3,1 6,27 7,68 9,40 11,55 14,15
3,2 5,04 6,20 7,61 9,40 11,58
3,3 4,05 4,99 6,14 7,61 9,42
3,4 3,24 4,00 4,94 6,14 7,63
3,5 2,60 3,20 3,97 4,94 6,16
3,6 2,07 2,56 3,18 3,97 4,55
3,7 1,65 2,05 2,54 3,18 3,98
3,8 1,32 1,63 2,03 2,54 3,181990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 128
▼B
pHT = 20 ºC
Alcool % in volume
0 5 10 15 20
T = 30 ºC
2,8 18,05 20,83 24,49 29,28 35,36
2,9 14,89 17,28 20,48 24,75 30,29
3,0 12,20 14,23 16,98 20,71 25,66
3,1 9,94 11,65 13,98 17,18 21,52
3,2 8,06 9,48 11,44 14,15 17,88
3,3 6,51 7,68 9,30 11,58 14,75
3,4 5,24 6,20 7,53 9,42 12,08
3,5 4,21 4,99 6,08 7,63 9,84
3,6 3,37 4,00 4,89 6,16 7,98
3,7 2,69 3,21 3,92 4,95 6,44
3,8 2,16 2,56 3,14 3,98 5,19
T = 35 ºC
2,8 22,27 24,75 28,71 34,42 42,18
2,9 18,53 20,71 24,24 29,42 36,69
3,0 15,31 17,18 20,26 24,88 31,52
3,1 12,55 14,15 16,79 20,83 26,77
3,2 10,24 11,58 13,82 17,28 22,51
3,3 8,31 9,42 11,30 14,23 18,74
3,4 6,71 7,63 9,19 11,65 15,49
3,5 5,44 6,16 7,44 9,48 12,71
3,6 4,34 4,95 6,00 7,68 10,36
3,7 3,48 3,98 4,88 6,20 8,41
3,8 2,78 3,18 3,87 4,99 6,80
T = 40 ºC
2,8 29,23 30,68 34,52 40,89 50,142,9 24,70 26,01 29,52 35,47 44,74
3,0 20,67 21,83 24,96 30,39 38,85
3,1 17,15 18,16 20,90 25,75 33,54
3,2 14,12 14,98 17,35 21,60 28,62
3,3 11,55 12,28 14,29 17,96 24,15
3,4 9,40 10,00 11,70 14,81 20,19
3,5 7,61 8,11 9,52 12,13 16,73
3,6 6,14 6,56 7,71 9,88 13,77
3,7 4,94 5,28 6,22 8,01 11,25
3,8 3,97 4,24 5,01 6,47 9,151990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 129
▼B
26.SODIO
1. PRINCIPIO DEI METODI1.1.Metodo di riferimento: Spettrofotometria di assorbimento
atomico
Il sodio viene dosato direttamente nel vino per spettrofotometria di
assorbimento atomico dopo addizione di un tampone spettrale di
cloruro di cesio per evitare la ionizzazione del sodio.
1.2.Metodousuale:Fotometria difiamma
Il sodio viene dosato direttamente nel vino diluito al 10 % mediante
fotometria di fiamma.
2. METODO DI RIFERIMENTO
2.1.Reattivi
2.1.1. Soluzione di sodio di 1 g per litro
Utilizzare una soluzione standard di sodio di 1 g/l del tipo in
commercio. Questa soluzione può essere preparata sciogliendo
2,542 g di cloruro di sodio NaCl essiccato, in acqua distillata e
portando il volume ad un litro.
Conservare questa soluzione in una bottiglia di polietilene.
2.1.2. Soluzione modello:
Acido citrico C
6H8O7·H2O…....................... 3,5 g
Saccarosio C12H22O11… .............................. 1,5 g
Glicerolo C3H8O3…................................. 5,0 g
Cloruro di calcio anidro Ca Cl2…................... 50 mg
Cloruro di magnesio anidro Mg Cl2…............... 50 mg
Alcol assoluto C2H5OH…........................... 50 ml
Acquaq.b. a…...................................... 500 ml
2.1.3. Soluzione di cloruro di cesio al 5 % in cesio
Sciogliere 6,330 g di cloruro di cesio CsCl in 100 ml di acqua distil-
lata.
2.2.Apparecchiatura
2.2.1. Spettrofotometro di assorbimento atomico. Gas di alimentazione del
bruciatore: aria e acetilene.
2.2.2. Lampada a catodo cavo al sodio.
2.3.Mododioperare
2.3.1. Preparazione del campione
Prelevare 2,5 ml di vino versandoli in un pallone tarato da 50 ml;
aggiungere 1 ml di soluzione di cloruro di cesio (2.1.3) e portare a
volume con acqua distillata.
2.3.2. Taratura
Versare in una serie di palloni tarati da 100 ml 5,0 ml di soluzione
modello; aggiungere in ciascuno di essi rispettivamente 0 - 2,5 - 5 -
7,5 - 10 ml dellasoluzione di sodio a1 g/l (2.1.1), previa mente
diluita1/100; a ggiungere in tutti i recipienti 2 ml dellasoluzione di
cloruro di cesio (2.1.3) e completare a 100 ml con acqua distillata.
Le soluzioni di taratura preparate hanno una concentrazione rispetti-
vamente di 0 - 0,25 - 0,50 - 0,75 - 1,00 mg di sodio per litro e
contengono 1 g di cesio per litro. Queste soluzioni devono essere
conservate in bottiglie di polietilene.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 130
▼B
2.3.3. Dosaggio
Regolare la lunghezza d'onda a 589,0 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con la soluzione modello contenente 1 g di
cesio per litro (2.3.2). Aspirare direttamente il vino diluito nel
bruciatore dello spettrofotometro, quindi successivamente le solu-
zioni di taratura (2.3.2). Leggere le assorbanze, effettuare le
determinazioni in doppio.
2.4.Espressionedeirisultati
2.4.1. Calcolo
Tracciare la curva dell'assorbanza in funzione della concentrazione
di sodio delle soluzioni di taratura.
Riportare il valore medio delle assorbanze ottenute per il campione
su tale curva e determinare la concentrazione C di sodio in milli-
grammi per litro.
La concentrazione di sodio espressa in milligrammi per litro di vino,
senza cifre decimali, sarà:
20 · C
2.4.2. Ripetibilità (r)
r = 1 + 0,024 Ximg/l
doveX
i= concentrazione in sodio del campione espressa in mg/l.
2.4.3. Riproducibilità (R)
R = 2,5 + 0,05 Ximg/l
doveX
i= concentrazione in sodio del campione espressa in mg/l.
3. METODO USUALE3.1.Reattivi
3.1.1. Soluzione di riferimento di sodio a 20 mg per litro
Alcool assoluto (C
2H5OH) …....................... 10 ml
Acido citrico (C6H8O7,H2O)….................... 700 mg
Saccarosio (C12H22O11)…........................... 300 mg
Glicerolo (C3H8O3)… .............................. 1000 mg
Tartrato acido di potassio (C4H5KO6) …............ 481,3 mg
Cloruro di calcio anidro (Ca Cl2)… ................ 10 mg
Cloruro di magnesio anidro (Mg Cl2)…............ 10 mg
Cloruro di sodio seccato (NaCl) … ................. 50,84 mg
Acquaq.b. a….................................... 1 l
3.1.2. Soluzione di diluizione.
Alcool assoluto (C2H5OH) …....................... 10 ml
Acido citrico (C6H8O7·H2O) ….................... 700 mg
Saccarosio (C12H22O11)…........................... 300 mg
Glicerolo (C3H8O3)… .............................. 1000 mg
Tartrato acido di potassio (C4H5KO6) …............ 481,3 mg
Cloruro di calcio anidro (Ca Cl2)… ................ 10 mg
Cloruro di magnesio anidro (Mg Cl2)…............ 10 mg
Acquaq.b. a….................................... 1 l1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 131
▼B
Per prepare le soluzioni 3.1.1 e 3.1.2 sciogliere il tartrato acido di
potassio in circa 500 ml di acqua distillata molto calda, mescolare
lasoluzione con gli a ltri componenti precedentemente sciolti in 400
ml di acqua distillata e completare ad 1 litro.
Aggiungere alle soluzioni 2 gocce di isotiocianato di allile e conser-
varle in bottiglie in polietilene.
3.2.Apparecchiatura
3.2.1. Fotometro a fiamma alimentato con miscela aria/butano.
3.3.Mododioperare
3.3.1. Taratura
In cinque palloni tarati da 100 ml versare 5 - 10 - 15 - 20 - 25 ml
dellasoluzione di sodio a20 mg/l (3.1.1) e completa re a100 ml con
lasoluzione di diluizione (3.1.2). Le soluzioni ottenute contengono
rispettivamente 1 - 2 - 3 - 4 - 5 mg di sodio per litro.
3.3.2. Dosaggio
Effettuare le misure a 589,0 nm. Regolare il 100 % di trasmissione
con acqua distillata. Aspirare direttamente nel bruciatore del foto-
metro una dopo l'altra la serie di soluzioni di taratura (3.3.1),
quindi il vino diluito al 10 % con acqua distillata e rilevare le
percentuali di trasmissione. Se necessario, diluire il vino già diluito
al 10 %, con la soluzione di diluizione (3.1.2).
3.4.Espressionedeirisultati
3.4.1. Calcolo
Tracciare la curva delle variazioni della percentuale di trasmissione
in funzione della concentrazione di sodio delle soluzioni di taratura.
Riportare il valore della trasmissione ottenuta per il campione di
vino diluito su tale curva e ricavare la concentrazione C in sodio.
La concentrazione in milligrammi di sodio per litro, senza cifre deci-
mali è data da:
C·F
F = fattore di diluizione
3.4.2. Ripetibilità (r)
(tranne i vini liquorosi) r = 1,4 mg/l
vini liquorosi: r = 2,0 mg/l
3.4.3. Riproducibilità (R)
R = 4,7 + 0,008 Ximg/l
Xi= concentrazione in sodio del campione espressa in mg/l.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 132
▼B
27.POTASSIO
1. PRINCIPIO DEI METODI
1.1.Metododiriferimento
Il potassio viene dosato direttamente nel vino diluito per spettrofoto-
metria di assorbimento atomico dopo addizione di un tampone
spettrale di cloruro di cesio per evitare la ionizzazione del potassio.
1.2.Metodousuale
Il potassio viene dosato direttamente nel vino diluito per fotometria
di fiamma.
2. METODO DI RIFERIMENTO
2.1.Reattivi
2.1.1. Soluzione di potassio di 1 g per litro
Usare una soluzione standard di potassio di 1 g/l del tipo in
commercio. Questa soluzione può essere preparata sciogliendo
4,813 g di tartrato acido di potassio (C4H5KO6) in acqua distillata e
portando il volume ad un litro.
2.1.2. Soluzione modello:
Acido citrico (C6H8O7·H2O) …...................... 3,5 g
Saccarosio (C12H22O11)…............................. 1,5 g
Glicerolo (C3H8O3)… ................................ 5,0 g
Cloruro di calcio anidro (Ca Cl2)… .................. 50 mg
Cloruro di magnesio anidro (Mg Cl2)….............. 50 mg
Alcol assoluto (C2H5OH)… .......................... 50 ml
Acquaq b. a… ...................................... 500 ml
2.1.3. Soluzione di cloruro di cesio al 5 % in cesio
Sciogliere 6,330 g di cloruro di cesio CSCl in 100 ml di acqua distil-
lata.
2.2.Apparecchiatura
2.2.1. Spettrofotometro di assorbimento atomico. Gas di alimentazione del
bruciatore: aria e acetilene.
2.2.2. Lampada a catodo cavo al potassio.
2.3.Mododioperare
2.3.1. Preparazione del campione
Prelevare 2,5 ml di vino (previamente diluito al 10 %), versarli in un
pallone tarato da 50 ml; aggiungere 1 ml di soluzione di cloruro di
cesio (2.1.3) e portare a volume con acqua distillata.
2.3.2. Taratura
Versare in una serie di palloni tarati da 100 ml 5 ml di soluzione
modello (2.1.2); aggiungere rispettivamente 0 - 2,0 - 4,0 - 6,0 - 8,0
ml della soluzione di potassio di 1 g/l (2.1.1) (previamente diluita al
10 %); aggiungere in tutti i palloni 2 ml della soluzione di cloruro di
cesio (2.1.3) e portare il volume a 100 ml con acqua distillata. Le
soluzioni di taratura preparate hanno un titolo rispettivamente di 0 -
2 - 4 - 6 - 8 mg di potassio per litro e contengono 1 g di cesio per
litro; vanno conservate in flaconi di polietilene.
2.3.3. Dosaggio
Regolare la lunghezza d'onda a 769,9 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con la soluzione modello contenente 1 g di
cesio per litro (2.3.2). Aspirare direttamente il vino diluito (2.3.1)
nel bruciatore dello spettrofotometro, quindi successivamente le1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 133
▼B
soluzioni di taratura (2.3.2). Leggere le assorbanze, effettuare le
determinazioni in doppio.
2.4.Espressionedeirisultati
2.4.1. Calcolo
Tracciare la curva di variazione dell'assorbanza in funzione della
concentrazione di potassio delle soluzioni di taratura. Riportare il
valore medio delle assorbanze ottenute per il campione di vino
diluito su tale curva e determinare la concentrazione C di potassio
in milligrammi per litro.
La concentrazione di potassio espressa in milligrammi per litro di
vino, è data da: F · C dove F= fattore di diluizione (in questo caso
200)
2.4.2. Ripetibilità (r)
r = 35 mg/l
2.4.3. Riproducibilità (R)
R = 66 mg/l
2.4.4. Altre espressioni dei risultati
— in milliequivalenti per litro: 0,0256 · F · C
— in tartrato acido di potassio in milligrammi per litro: 4,813 · F ·
C
3. METODO USUALE: SPETTROFOTOMETRIA DI FIAMMA
3.1.Reattivi
3.1.1. Soluzione di riferimento di potassio di 100 mg per litro
Alcool assoluto (C2H5OH) …....................... 10 ml
Acido citrico (C6H8O7,H2O)….................... 700 mg
Saccarosio (C12H22O11)…........................... 300 mg
Glicerolo (C3H8O3)… .............................. 1000 mg
Cloruro di sodio (NaCl) … ......................... 50,8 mg
Cloruro di calcio anidro (Ca Cl2)… ................ 10 mg
Cloruro di magnesio anidro (Mg Cl2)…............ 10 mg
Tartrato acido di potassio essiccato (C4H5KO6) ….. 481,3 mg
Acquaq.b. a….................................... 1 000 ml
Per preparare questa soluzione sciogliere il tartrato acido di potassio
in circa 500 ml di acqua distillata molto calda, mescolare la solu-
zione con gli altri componenti precedentemente sciolti in 400 ml diacqua distillata e completare ad 1 litro.
3.1.2. Soluzione di diluizione
Alcool assoluto (C
2H5OH) …....................... 10 ml
Acido citrico (C6H8O7·H2O) ….................... 700 mg
Saccarosio (C12H22O11)…........................... 300 mg
Glicerolo (C3H8O3)… .............................. 1000 mg
Cloruro di sodio (NaCl) … ......................... 50,8 mg
Cloruro di calcio anidro (Ca Cl2)… ................ 10 mg
Cloruro di magnesio anidro (MgCl2)…............ 10 mg
Acido tartarico (C4H6O6)…........................ 383 mg
Acquaq.b. a….................................... 1 000 ml
Aggiungere alle soluzioni 2 gocce di isotiocianato di allile e conser-
varle in flaconi di polietilene.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 134
▼B
3.2.Apparecchiatura
3.2.1. Fotometro a fiamma alimentato con miscela aria/butano.
3.3.Mododioperare
3.3.1. Taratura
In quattro palloni tarati da 100 ml versare 25 - 50 - 75 - 100 ml
dellasoluzione di riferimento (3.1.1) e completa re a100 ml con lasoluzione di diluizione (3.1.2). Le soluzioni ottenute contengono
rispettivamente 25 - 50 - 75 - 100 mg per litro di potassio.
3.3.2. Dosaggio
Effettuare le letture a 766 nm. Regolare il 100 % di trasmissione con
acqua distillata. Aspirare direttamente nel bruciatore del fotometro
una dopo l'altra la serie di soluzioni di taratura (3.3.1), quindi il
vino diluito al 10 % con acqua distillata e rilevare le percentuali di
trasmissione. Se necessario, diluire nuovamente il vino già diluito al
10 %, con lasoluzione di diluizione (3.1.2).
3.4.Espressionedeirisultati
3.4.1. Calcolo
Tracciare la curva di variazione delle percentuali di trasmissione in
funzione della concentrazione di potassio delle soluzioni di taratura.
Riportare il valore della trasmissione ottenuta per il campione di
vino diluito su tale curva e determinare la concentrazione C in
potassio. La concentrazione in milligrammi di potassio per litro,
senza cifre decimali, è data da:
C·F
doveF = fattore di diluizione
3.4.2. Ripetibilità (r)
r = 17 mg/l.
3.4.3. Riproducibilità (R)
R = 66 mg/l.
3.4.4. Altre espressioni dei risultati:
— in milliequivalenti per litro: 0,0256 · F · C
— in tartrato acido di potassio in milligrammi per litro: 4,813 · F ·
C.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 135
▼B
28.MAGNESIO
1. PRINCIPIO
Il magnesio viene dosato direttamente nel vino opportunamente
diluito mediante spettrofotometria di assorbimento atomico.
2. REAGENTI
2.1.Soluzioneditaraturaconcentratadimagnesiodi1g/l.
Utilizzare una soluzione standard di 1 g/l magnesio reperibile in
commercio. Tale soluzione può essere preparata sciogliendo 8,3646
g di cloruro di magnesio (MgCl2,6H2O) in acqua distillata e
portando il volume ad 1 litro.
2.2.Soluzioneditaraturadiluita:5mgdimagnesioperlitro.
Osservazione:Conservare le soluzioni di taratura di magnesio in flaconi in polieti-
lene.
3. APPARECCHIATURA
3.1. Spettrofotometro di assorbimento atomico dotato di un bruciatore
alimentato con aria e acetilene.
3.2. Lampada a catodo cavo al magnesio.
4. MODO DI OPERARE4.1.Preparazione delcampione
Diluire il vino all' 1 % con acqua distillata.
4.2.Taratura
In una serie di palloni tarati da 100 ml, versare 5 - 10 - 15 - 20 ml
della soluzione 2.2 e completare a 100 ml con acqua distillata. Le
soluzioni ottenute contengono rispettivamente 0,25 - 0,50 - 0,75 - 1
mg di magnesio per litro. Conservarle in flaconi di polietilene.
4.3.Dosaggio
Selezionare la lunghezza d'onda a 285 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con acqua distillata. Aspirare direttamente il
vino diluito nel bruciatore dello spettrofotometro ripetendo quindi
l'operazione con le varie soluzioni di taratura preparate al punto
4.2. Rilevare le assorbanze; effettuare le determinazioni in doppio.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
5.1.Calcolo
Tracciare la curva di variazione dell'assorbanza in funzione della
concentrazione in magnesio delle soluzioni di taratura.
Riportare il valore medio delle assorbanze ottenute per il campione
di vino diluito su detta curva e determinare la concentrazione C di
magnesio.
La concentrazione di magnesio espressa in milligrammi per litro di
vino senza cifre decimali è data da:
100 · C
5.2.Ripetibilità(r)
r = 3 mg/l
5.3.Riproducibilità(R)
R = 8 mg/l1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 136
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29.CALCIO
1. PRINCIPIO
Il calcio viene dosato direttamente nel vino opportunamente diluito
mediante spettrofotometria di assorbimento atomico dopo addizione
di un tampone spettrale.
2. REAGENTI
2.1.Soluzioneditaratura a1gdicalcio perlitro.
Utilizzare una soluzione standard di calcio reperibile in commercio,
di un g/l. Tale soluzione può essere preparata sciogliendo 2,5 g di
carbonato di calcio, CA CO3, nella quantità di HCL al 10 % (v/v)
sufficiente a scioglierla, portando quindi il volume ad 1 l con acqua
distillata.
2.2.Soluzioneditaraturadiluitaa50mgdicalcio perlitro.
Osservazione:conservare le soluzioni di taratura di calcio in flaconi di polietilene.
2.3.Soluzionedicloruro dilantaniodi50g/linlantanio.
Sciogliere 13,369 g di cloruro di lantanio (La Cl
3·7H2O) in acqua
distillata; aggiungere 1 ml di HCl diluito al 10 % (v/v) e portare il
volume a100 ml.
3. APPARECCHIATURA
3.1. Spettrofotometro di assorbimento atomico dotato di un bruciatore
alimentato con aria/acetilene.
3.2. Lampada a catodo cavo al calcio.
4. MODO DI OPERARE
4.1.Preparazione delcampione
In un pallone da 20 ml versare 1 ml di vino, 2 ml di soluzione 2.3 e
portare a volume con acqua distillata. Il titolo in lantanio del vino
diluito al 5 % è di 5 g/l.
Osservazione:Per i vini dolci, è sufficiente la concentrazione di 5 g di lantanio per
litro acondizione che ladiluizione porti il tenore in zuccheri ameno
di 2,5 g/l. Per concentrazioni in zuccheri superiori occorre portare il
tenore in lantanio a 10 g/l.
4.2.Taratura
Porre in cinque palloni tarati da 100 ml rispettivamente 0 - 5 - 10 -
15 - e 20 ml della soluzione 2.2; aggiungere in tutti i palloni 10 ml
della soluzione 2.3 e portare il volume a 100 ml con acqua distillata.
Le soluzioni di taratura così preparate contengono rispettivamente 0
- 2,5 - 5 - 7,5 e 10 mg di calcio per litro e 5 g di lantanio per litro.
Conservare queste soluzioni in flaconi di polietilene.
4.3.Dosaggio
Selezionare la lunghezza d'onda di 422,7 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con la soluzione contenente 5 g di lantanio
per litro (4.2). Aspirare direttamente il vino diluito nel bruciatore
dello spettrofotometro e quindi, una dopo l'altra, le soluzioni di tara-
tura preparate al punto 4.2. Rilevare le assorbanze. Effettuare le
determinazioni in doppio.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
5.1.Calcolo
Tracciare la curva di variazione dell'assorbanza in funzione della
concentrazione in calcio delle soluzioni di taratura.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 137
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Riportare il valore medio delle assorbanze ottenute per il campione
di vino diluito su tale curva e determinare la concentrazione C di
calcio. La concentrazione in calcio, espressa in mg/l di vino
mediante numeri interi, è data da:
20 · C
5.2.Ripetibilità(r)
tenore < 60 mg/l: r = 2,7 mg/l
tenore > 60 mg/l: r = 4 mg/l
5.3.Riproducibilità(R)
R = 0,114 xi − 0,5
Xi= concentrazione in mg/l del campione.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 138
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30.FERRO
1. PRINCIPIO DEL METODI
Metododiriferimento
Il ferro viene dosato direttamente per spettrofotometria di assorbi-
mento atomico previa opportuna diluizione del vino ed
eliminazione dell'alcool.
Metodousuale
Dopo mineralizzazione del vino mediante perossido di idrogeno, il
ferro III viene portato allo stato di ferro II e viene quindi dosato
grazie alla colorazione rossa che dà con l'ortofenantrolina.
2. METODO DI RIFERIMENTO2.1.Reattivi
2.1.1. Soluzione di taratura concentrata di ferro III di 1 g/l.
Utilizzare una soluzione standard del tipo in commercio di 1 g /l.
Tale soluzione può essere preparata sciogliendo 8,6341 g di solfato
ferrico ammonico [FeNH
4(SO4)2· 12H2O] in acqua distillata legger-
mente acidificata con acido cloridrico M e portando il volume ad 1 l.
2.1.2. Soluzione di taratura diluita di ferro di 100 mg/l.
2.2.Apparecchiatura
2.2.1. Evaporatore rotante con bagnomaria termoregolato.2.2.2. Spettrofotometro di assorbimento atomico dotato di un bruciatore
alimentato con aria/acetilene.
2.2.3. Lampada a catodo cavo al ferro.
2.3.Mododioperare
2.3.1. Preparazione del campione
Eliminare l'alcol del vino per concentrazione del suo volume a circa
la metà mediante un evaporatore rotativo (50-60 ºC). Riportare al
volume iniziale con acqua distillata.
Prima del dosaggio effettuare, se necessario, una diluizione.
2.3.2. Taratura
In cinque palloni tarati da 100 ml, porre 1 - 2 - 3 - 4 - 5 ml della
soluzione di ferro di 100 mg/l (2.1.2) e portare a 100 ml con acqua
distillata. Le soluzioni preparate contengono rispettivamente 1 - 2 - 3
- 4 - 5 mg di ferro per litro.
Conservare queste soluzioni in flaconi di polietilene.
2.3.3. Dosaggio
Regolare la lunghezza d'onda a 248,3 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con l'acqua distillata. Aspirare direttamente
nel bruciatore dello spettrofotometro il campione diluito e quindi le
varie soluzioni di taratura preparate al punto 2.3.2. Leggere le assor-
banze. Effettuare le determinazioni in doppio.
2.4.Espressionedeirisultati
2.4.1. Calcolo
Tracciare la curva di variazione dell'assorbanza in funzione della
concentrazione in ferro delle soluzioni di taratura. Riportare il valore
medio delle assorbanze ottenute per il campione di vino diluito su
tale curva e determinare la concentrazione in ferro C.
Laconcentra zione in ferro espressain mg/l di vino, con unacifra
decimale, è data da:
C·FF = fattore di diluizione1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 139
▼B
3. METODO USUALE
3.1.Reattivi
3.1.1. Soluzione di perossido di idrogeno (H2O2) al 30 % (m/v) esente da
ferro.
3.1.2. Soluzione 1 M di acido cloridrico (HCl) esente da ferro.3.1.3. Idrossido di ammonio (NH
4OH) ( ρ20= 0,92 g/ml).
3.1.4. Pietra pomice trattata con acido cloridrico bollente diluito 1:2 e
lavata con acqua distillata.
3.1.5. Soluzione di idrochinone (C6H6O2) al 2,5 %, acidificata con 1 ml di
acido solforico ( ρ20= 1,84 g/ml) per 100 ml di soluzione. Conservare
tale soluzione in frigorifero in flacone giallo e sostituirla non appena
si riscontri laminimatra cciadi imbrunimento.
3.1.6. Soluzione di solfito di sodio (Na2SO3) al 20 %, preparata con solfito
di sodio e anidro.
3.1.7. Soluzione di ortofenantrolina (C12H8N2.H2O) allo 0,5 % in alcool al
96 % vol.
3.1.8. Soluzione di acetato di ammonio (CH3COONH4) al 20 % (m/v).
3.1.9. Soluzione di ferro III di 1 g/l di ferro. Utilizzare una soluzione stan-
dard disponibile in commercio. Questa soluzione può essere
preparata sciogliendo 8,6341 g di solfato ferrico ammonico
[NH4Fe(SO4)2· 12H2O] in 100 ml di soluzione 1M di acido clori-
drico (3.1.2) e portando il volume ad 1 litro con la soluzione 1M di
acido cloridrico (3.1.2).
3.1.10. Soluzione di taratura diluita di ferro di 100 mg/l.
3.2.Apparecchiatura
3.2.1. Pallone di Kjeldahl da 100 ml.3.2.2. Spettrofotometro in grado di effettuare misurazioni a 508 nm.
3.3.Mododioperare
3.3.1. Mineralizzazione
3.3.1.1. Vino con tenore in zuccheri inferiore a50 g/l:
Introdurre in un pallone di Kjeldahl 25 ml di vino, 10 ml di solu-
zione di perossido di idrogeno (3.1.1) ed alcuni granuli di pietra
pomice (3.1.4). Concentrare il liquido sino ad un volume di 2-3 ml.
Dopo il raffreddamento, aggiungere al residuo ottenuto, senza
bagnare le pareti del pallone, la quantità di idrossido di ammonio
(3.1.3) necessaria per alcalinizzare l'ambiente e per precipitare gli
idrossidi.
Dopo il raffreddamento, addizionare al liquido alcalino la quantità di
soluzione M di acido cloridrico (3.1.2) necessaria a sciogliere il
precipitato degli idrossidi e travasare quindi la soluzione ottenuta in
una pallone tarato da 100 ml. Lavare quindi il pallone di Kjeldahl
con la soluzione M di acido cloridrico (3.1.2) e portare il volume a
100 ml con lastessasoluzione.
3.3.1.2. Mosti e vini il cui tenore in zuccheri è superiore a50 g/l:3.3.1.2.1. Tenore in zuccheri compreso tra50 e 200 g/l:
trattare 25 ml del campione di mosto o di vino con 20 ml di solu-
zione di perossido d'idrogeno (3.1.1).
Continuare come descritto in 3.3.1.1.
3.3.1.2.2. Tenore in zuccheri superiore a200 g/l:
trattare i campioni di mosto o di vino secondo il modo di operare
3.3.1.2.1, previa diluizione ad 1/2 o anche ad 1/4.
3.3.2. Prova in bianco
Effettuare una prova in bianco con acqua distillata utilizzando lo
stesso volume di perossido di idrogeno (3.1.1) utilizzato per la mine-
ralizzazione e seguendo il procedimento descritto al punto 3.3.1.1.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 140
▼B
3.3.3. Dosaggio
Prelevare 20 ml della soluzione cloridrica del prodotto di mineraliz-
zazione del campione (3.3.1.1) e 20 ml della soluzione cloridrica
«prova in bianco» (3.3.2), versandoli in 2 palloni tarati da 50 ml.
Aggiungere in ciascun pallone 2 ml della soluzione di idrochinone
(3.1.5), 2 ml dellasoluzione di solfito (3.1.6) ed 1 ml dellasoluzione
di ortofenantrolina (3.1.7). Lasciare riposare per 15 minuti, per favo-
rire lariduzione daferro III aferro II. Aggiungere 10 ml della
soluzione di acetato di ammonio (3.1.8), portare il volume a 50 ml
con acqua distillata ed agitare i due palloni tarati. Misurare l'assor-
banza della soluzione da dosare a 508 nm regolando lo zero della
scala delle assorbanze con la soluzione della prova in bianco.
3.3.4. Taratura
Porre in quattro palloni tarati da 50 ml 0,5 - 1 - 1,5 - 2 ml della
soluzione a 100 mg/l di ferro (3.1.10) e 20 ml di acqua distillata;
procedere quindi secondo il modo di operare descritto al punto
3.3.3. Queste soluzioni corrispondono rispettivamente a 50 - 100 -
150 - 200 microgrammi di ferro.
3.4.Espressionedeirisultati
3.4.1. Calcolo
Tracciare la curva delle variazioni dell'assorbanza in funzione della
concentrazione in ferro delle soluzioni di taratura. Riportare l'assor-
banza ottenuta per la soluzione da esaminare e determinare la
concentrazione di ferro C presente in 20 ml della soluzione clori-
drica di mineralizzazione, corrispondenti a 5 ml del campione da
analizzare.
Laconcentra zione del ferro in mg/l di vino, espressacon unacifra
decimale, è data da:
200 · C
Se il vino (o il mosto) è stato diluito, la concentrazione del ferro
espressa in mg/l con una cifra decimale, è data da:
2 0 0·C·FF = fattore di diluizione.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 141
▼B
31.RAME
1. PRINCIPIO DEL METODO
È basato sull'impiego della spettrofotometria di assorbimento
atomico.
2. APPARECCHIATURA
2.1. Capsula di platino.2.2. Spettrofotometro di assorbimento atomico.2.3. Lampada a catodo cavo al rame.2.4. Gas di alimentazione: aria acetiline o protossido di azoto/acetilene.
3. REATTIVI
3.1. Rame metallo.3.2. Acido nitrico concentrato (HNO
3)6 5%( ρ20= 1,38 g/ml).
3.3. Acido nitrico diluito 1/2 (v/v).
3.4.Soluzionediramea1g/l
Utilizzare una soluzione standard di rame del tipo in commercio.
Questa soluzione può essere preparata pesando 1,000 g di rame
metallico e trasferendo quantitativamente in un matraccio tarato da
1 000 ml. Aggiungere acido nitrico diluito 1/2 (3.3) nella quantità
esattamente necessaria a sciogliere il metallo e quindi 10 ml di acido
nitrico concentrato (3.2); portare infine a volume con acqua bidistil-
lata.
3.5.Soluzionediramea100mg/l
Prelevare 10 ml della soluzione 3.4 e versarli in un pallone tarato da
100 ml portando a volume con acqua bidistillata.
4. PROCEDIMENTO4.1.Preparazione delcampioneedosaggiodelrame
Se occorre preparare una diluizione appropriata con acqua bidistil-
lata.
4.2.Taratura
Prelevare 0,5 - 1 - 2 ml della soluzione 3.5 (100 mg di rame per
litro), porli in matracci tarati da 100 ml portando a volume con
acqua bidistillata; le soluzioni ottenute contengono rispettivamente
0,5 - 1 - 2 mg/l di rame.
4.3.Dosaggio
Selezionare la lunghezza d'onda a 324,8 nm, regolare lo zero della
scala delle assorbanze con acqua bidistillata. Aspirare direttamente
il campione diluito nel bruciatore dello spettrofotometro e dopo,una dopo l'altra, le soluzioni di taratura preparate in 4.2. Leggere le
assorbanze. Effettuare le determinazioni in doppio.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI5.1.Calcolo
Tracciare la curva di variazione dell'assorbanza in funzione della
concentrazione in rame delle soluzioni di taratura.
Riportare il valore dell'assorbanza letta per il campione di vino
diluito sulla curva di taratura e rilevare la concentrazione C in mg/l.
Se F è fattore di diluizione, il tenore in rame del vino, espresso in
milligrammi per litro con due cifre decimali è: F · C
Osservazioni:
a) Le soluzioni per la costruzione della curva di taratura e le dilui-
zioni del campione devono comunque essere scelte sia in1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 142
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funzione della sensibilità dell'apparecchiatura usata che della
concentrazione del metallo presente nel campione.
b) Per concentrazioni molto basse di rame nel campione in esame
operare nel modo seguente: porre 100 ml del campione in una
capsula di platino, evaporare su bagnomaria a 100 ºC fino a
consistenza sciropposa, aggiungere goccia a goccia 2,5 ml di
acido nitrico concentrato (3.2) cercando di coprire tutto il fondo
della capsula. Procedere cautamente all'incenerimento del residuo
su piastra riscaldante elettrica oppure su piccola fiamma; intro-
durre quindi la capsula in forno a muffola regolato alla
temperatura di 500 º ± 25 ºC, lasciandola per circa un'ora. Dopo
raffreddamento umettare le ceneri con 1 ml di acido nitrico
concentrato (3.2), spappolandole con una bacchetta di vetro;
evaporare e carbonizzare nuovamente con le stesse modalità.
Portare nuovamente la capsula in muffola per 15 minuti; ripetere
almeno tre volte il trattamento con acido nitrico concentrato
(3.2). Solubilizzare le ceneri aggiungendo nella capsula 1 ml di
acido nitrico concentrato (3.2) e 2 ml di acqua bidistillata; trava-
sare in un matraccio tarato da 10 ml. Lavare tre volte la capsula
con 2 ml per volta di acqua bidistillata, portare infine a volume
con acqua bidistillata.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 143
▼B
32.CADMIO
1. PRINCIPIO DEL METODO
Il cadmio viene dosato direttamente nel vino mediante spettrofoto-
metria di assorbimento atomico senza fiamma.
2. APPARECCHIATURA
Tutta la vetreria dev'essere preliminarmente lavata con acido nitrico
concentrato caldo (70-80 ºC) e sciacquata con acqua bidistillata.
2.1. Spettrofotometro ad assorbimento atomico provvisto di un forno a
grafite, di un correttore di rumori di fondo e di un registratore multi-
potenziometrico.
2.2. Lampada a catodo cavo al cadmio.
2.3. Micropipette di 5 µl munite di ghiere speciali per misure di assorbi-
mento atomico.
3. REATTIVI
L'acqua usata deve essere acqua bidistillata in un apparecchio di
vetro borosilicato oppure acqua di purezza equivalente. Tutti i reat-
tivi devono essere di purezza analitica riconosciuta e in particolare
esenti daca dmio.
3.1. Acido fosforico all'85 % ( ρ20= 1,71 g/ml).
3.2. Soluzione di acido fosforico ottenuta portando 8 ml di acido fosfo-
rico a 100 ml con acqua.
3.3. Soluzione 0,02 M di sale bisodico dell'acido etilendiamminotetrace-
tico (EDTA).
3.4. Soluzione tampone a pH 9, ottenuta sciogliendo, in un pallone tarato
da 100 ml, 5,4 g di cloruro di ammonio in qualche millilitro d'acqua,
aggiungendo 35 ml di soluzione di idrossido di ammonio ( ρ20= 0,92
g/ml) diluita al 25 % (v/v) e portando a volume con acqua.
3.5. Nero eriocromo T: diluizione solidaa ll'1 % (m/m) in cloruro di
sodio.
3.6.Solfatodicadmio(3CdSO4·8H2O).
Il titolo del solfato di cadmio dev'essere verificato operando come
segue:
pesare esattamente 102,6 mg del campione di solfato di cadmio,
immetterlo quantitativamente in un becher con acqua, agitare fino a
scioglimento; aggiungere 5 ml di soluzione tampone a pH 9 e circa
20 mg di nero eriocromo T. Titolare con soluzione di EDTA finché
l'indicatore vira al blu.
Il volume di EDTA utilizzato deve essere pari a 20 ml; se esso varia
di poco, correggere in conseguenza l'aliquota di solfato di cadmio
pesata utilizzata per la preparazione della soluzione di riferimento.
3.7.Soluzionediriferimento dicadmiodi1gperlitro.
Usare una soluzione standard esistente in commercio. Questa solu-
zione può essere ottenuta sciogliendo 2,2820 g di solfato di cadmio
in acqua e portando il volume a 1 litro. Conservare la soluzione in
un flacone di vetro borosilicato a tappo smerigliato.
4. MODO DI OPERARE4.1.Preparazione delcampione
Diluire il vino 1:2 (v/v) con lasoluzione di a cido fosforico.
4.2.Preparazione dellesoluzionidellacurvaditaratura
Partendo dalla soluzione di riferimento di cadmio preparare
mediante diluizioni successive soluzioni contenenti rispettivamente
2,5 - 5 - 10 - 15 microgrammi di cadmio per litro.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 144
▼B
4.3.Determinazione
4.3.1. Programma del forno (proposto a titolo indicativo):
Essiccazione a 100 ºC per 30 secondi.Mineralizzazione a 900 ºC per 20 secondi.
Atomizzazione a 2 250 ºC per 2-3 secondi.
Erogazione di azoto (gas di lavaggio): 6 litri/minuto.NB:
Alla fine dell'operazione, portare la temperatura fino a 2 700 ºC per
depurare il forno.
4.3.2. Misure di assorbimento atomico
Selezionare la lunghezza d'onda a 228,8 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con acqua bidistillata. Iniettare nel forno,
mediante micropipetta, per tre volte, 5 µl di ciascuna delle soluzioni
della gamma di taratura e della soluzione del campione da analiz-
zare. Registrare le assorbanze misurate. Calcolare il valore medio
dell'assorbanza partendo dai risultati relativi alle tre iniezioni.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
5.1.Mododicalcolo
Tracciare la curva delle variazioni dell'assorbanza in funzione delle
concentrazioni di cadmio delle soluzioni della gamma di taratura. La
variazione è lineare. Riportare il valore medio dell'assorbanza della
soluzione del campione sulla retta di taratura, dedurne la concentra-
zione C in cadmio. La concentrazione in cadmio espressa in
microgrammi per litro di vino è pari a:
2·C1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 145
▼B
33.ARGENTO
1. PRINCIPIO DEL METODO
È basato sull'impiego della spettrofotometria di assorbimento
atomico previa mineralizzazione del campione.
2. APPARECCHIATURA
2.1. Capsula di platino.
2.2. Bagnomaria termostato a 100 ºC.2.3. Muffolaregola taa500-525 ºC.2.4. Spettrofotometro di assorbimento atomico.2.5. Lampada a catodo cavo ad argento.2.6. Gas di alimentazione: aria acetilene.
3. REATTIVI
3.1. Nitrato d'argento (AgNO
3).
3.2. Acido nitrico concentrato (HNO3)6 5%( ρ20= 1,38 g/ml).
3.3. Acido nitrico diluito1/10(v/v).
3.4. Soluzione d'argento di 1 g/l.
Usare una soluzione standard di argento del tipo in commercio.Tale soluzione può essere preparata sciogliendo 1,575 g di nitrato
d'argento in acido nitrico diluito e completando il volume a 1 000
ml con acido nitrico diluito.
3.5.Soluzioned'argentoa10mg/l.
Diluire 10 ml dellasoluzione 3.4 a1 000 ml con a cido nitrico
diluito.
4. PROCEDIMENTO
4.1.Preparazione delcampione
Porre 20 ml del campione in capsula di platino, evaporare a secco su
bagnomaria bollente a 100 ºC. Incenerire in muffola fino a ceneri
bianche a 500-525 ºC. Riprendere le ceneri con 1 ml di acido nitrico
concentrato (3.2), evaporare a bagnomaria a 100 ºC, ripetere
l'aggiunta di 1 ml di acido nitrico (3.2) e l'evaporazione. Aggiungere
5 ml di acido nitrico diluito (3.3) e scaldare leggermente sino a
dissoluzione.
4.2.Taratura
Una serie di matracci tarati da 100 ml si pongono 2 - 4 - 6 - 8 - 10 e
20 ml di soluzione 3.5 d'argento di 10 mg/l, si porta a volume con
acido nitrico diluito (3.3). Tali soluzioni contengono 0,20 - 0,40 -
0,60 - 0,80 - 1,0 e 2,0 mg/l d'argento.
4.3.Dosaggio
Selezionare la lunghezza d'onda a 328,1 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con l'acido nitrico diluito 3.3. Aspirare diret-
tamente nel bruciatore dello spettrofotometro la soluzione del
campione ottenuta in 4.1 e dopo, successivamente, le soluzioni di
taratura. Leggere le assorbanze. Effettuare le determinazioni in
doppio.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
5.1.Calcolo
Tracciare la curva della variazione dell'assorbanza in funzione della
concentrazione in argento delle soluzioni di taratura.
Riportare il valore dell'assorbanza letto per il dosaggio (4.1) sulla
curva di taratura e ricavare la concentrazione C in mg/l.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 146
▼B
Il tenore in argento del vino, espresso in milligrammi per litro,
espresso con due cifre decimali, è dato da: 0,25 C.
Osservazione:
Le soluzioni di riferimento per la determinazione della curva di tara-
tura, la quantità di campione prelevato e il volume finale di liquidopossono essere modificati in funzione della sensibilità dell'apparec-
chiatura usata.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 147
▼B
34.ZINCO
1. PRINCIPIO
Lo zinco viene dosato direttamente nel vino dealcolizzato mediante
spettrofotometria di assorbimento atomico.
2. REATTIVI
L'acqua impiegata deve essere acqua bidistillata in un apparecchio in
vetro borosilicato oppure acqua di purezza equivalente.
2.1. Soluzione di taratura di zinco ad 1 g/l.
Utilizzare una soluzione standard di zinco del tipo in commercio.
Tale soluzione può essere preparata sciogliendo 4,3975 g di solfato
di zinco (Zn SO4·7H2O) in acqua e portando il volume ad un litro.
2.2. Soluzione standard diluita di zinco a 100 mg/l.
3. APPARECCHIATURA
3.1. Evaporatore rotante con bagnomaria termostatato.
3.2. Spettrofotometro di assorbimento atomico con un bruciatore alimen-
tato ad aria/acetilene.
3.3. Lampada a catodo cavo allo zinco.
4. MODO DI OPERARE4.1.Preparazione delcampione
Eliminare l'alcol riducendo a metà 100 ml di vino posti in un evapo-
ratore rotativo (temperatura: 50-60 ºC). Riportare al volume iniziale
di 100 ml con acqua bidistillata.
4.2.TARATURA
In quattro palloni tarati da 100 ml, porre 0,5 - 1 - 1,5 - 2 ml della
soluzione di zinco a 100 mg/l (2.2) e portare al segno di taratura con
acqua bidistillata. Le soluzioni di taratura corrispondono rispettiva-
mente a0,5 - 1 - 1,5 · 2 mg di zinco per litro.
4.3.Dosaggio
Regolare la lunghezza d'onda a 213,9 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con acqua bidistillata. Aspirare direttamente
nel bruciatore dello spettrofotometro il vino e quindi le varie solu-
zioni di taratura. Leggere le assorbanze. Effettuare le
determinazioni in doppio.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI5.1.Calcolo
Tracciare la curva di variazione dell'assorbanza in funzione della
concentrazione in zinco delle soluzioni di taratura. Riportare il
valore medio delle assorbanze ottenute per il vino e determinare la
concentrazione di zinco in milligrammi per litro di vino con una
cifradecima le.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 148
▼B
35.PIOMBO
1. PRINCIPIO DEL METODO
Il piombo viene dosato direttamente nel vino mediante spettrofoto-
metria di assorbimento atomico senza fiamma.
2. APPARECCHIATURA
Tutta la vetreria dev'essere preliminarmente lavata con acido nitrico
concentrato caldo (70-80 ºC) e sciacquata con acqua bidistillata.
2.1. Spettrofotometro di assorbimento atomico provvisto di forno a
grafite, di correttore di assorbimento non specifico e di registratore
multipotenziometrico.
2.2. Lampada a catodo cavo al piombo.
2.3. Micropipette da 5 µl munite di ghiere speciali per misure di assorbi-
mento atomico.
3. REATTIVI
Tutti i reattivi devono essere di purezza analitica riconosciuta e in
particolare devono essere esenti da piombo. L'acqua utilizzata deve
essere acqua bidistillata in un apparecchio di vetro borosilicato o
acqua di purezza equivalente.
3.1. Acido fosforico all'85 % ( ρ20= 1,71 g/ml)
3.2. Soluzione di acido fosforico ottenuta portando 8 ml di acido fosfo-
rico a100 ml con a cqua
3.3. Acido nitrico ( ρ20= 1,38 g/ml)
3.4. Soluzione di piombo da1 g per litro
Usare una soluzione standard del commercio. Questa soluzione può
essere ottenutasciogliendo 1,600 g di nitra to di piombo II Pb (NO3)2,
in acido nitrico diluito all'1 % (v/v) e portando al volume di 1 litro.
Conservare la soluzione in un flacone di vetro borosilicato a tappo
smerigliato.
4. MODO DI OPERARE
4.1.Preparazione delcampione
Diluire il vino 1:2 oppure 1:3 con lasoluzione di a cido fosforico
(3.2) secondo laconcentra zione presuntadi piombo.
4.2.Preparazione dellesoluzioniditaratura
A partire dalla soluzione di riferimento di piombo 3.4, preparare,
mediante diluizioni successive con acqua bidistillata, soluzioni
contenenti rispettivamente 25-50-100-150 microgrammi di piombo
per litro.
4.3.Determinazione
4.3.1. Programma del forno (proposto a titolo indicativo):
Essiccazione a 100 ºC per 30 secondi.
Mineralizzazione a 900 ºC per 20 secondi.
Atomizzazione a 2 250 ºC per 2-3 secondi.
Flusso di azoto (gas di lavaggio): 6 litri/minuto.
NB:
Alla fine dell'operazione portare la temperatura fino a 2 700 ºC, onde
pulire il forno.
4.3.2. Misure
Selezionare la lunghezza d'onda di 217 nm. Regolare lo zero della
scala delle assorbanze con acqua bidistillata. Iniettare nel forno
programmato, mediante una micropipetta, per tre volte, 5 µl di
ciascuna delle soluzioni di taratura e della soluzione del campione
da analizzare. Registrare le assorbanze misurate. Calcolare il valore
dell'assorbanza partendo dai risultati relativi alle tre iniezioni.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 149
▼B
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
5.1.Calcolo
Tracciare la curva delle variazioni dell'assorbanza in funzione delle
concentrazioni di piombo delle soluzioni di taratura. La variazione è
lineare. Riportare il valore medio dell'assorbanza della soluzione del
campione sulla retta di taratura e ricavare la concentrazione C in
piombo. La concentrazione di piombo espressa in microgrammi per
litro di vino è pari a:
C×F
dove:F = fattore di diluizione1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 150
▼B
36.FLUORURI
1. PRINCIPIO
Il tenore di fluoruri del vino, addizionato di una soluzione tampone,
viene determinato mediante un elettrodo specifico a membrana
solida. Il potenziale misurato è proporzionale al logaritmo dell'at-
tività degli ioni fluoruro nel mezzo studiato conformemente alla
relazione:
E=Eo± S log aF
dove:E = potenziale dell'elettrodo ionico specifico misurato rispetto
all'elettrodo di riferimento nel mezzo studiato.
E
o= potenziale standard della cella di misura.
S = fattore di Nernst, a 25 ºC il fattore di Nernst teorico è uguale
a59,2 mV.
aF= attività degli ioni fluoruro nella soluzione studiata.
2. APPARECCHIATURA
2.1. Elettrodo a membrana cristallina specifico dello ione fluoro.
2.2. Elettrodo di riferimento (calomelano oppure Ag/AgCl).
2.3. Millivoltmetro (pHmetro con una graduazione in millivolt), preci-
sione 0,1 mV.
2.4. Agitatore magnetico con piastra isolante per proteggere la soluzione
analizzata dal calore del motore. Cilindro agitatore ricoperto di
plastica (polietilene o materiale equivalente).
2.5. Becher in plastica, da 30 o da 50 ml e flaconi di plastica (polietilene
o materiale equivalente).
2.6. Pipette di precisione (pipette graduate in microlitri o qualsiasi altra
pipettaequiva lente).
3. REATTIVI
3.1. Soluzione madre di fluoruro a 1 g/l
Utilizzare una soluzione standard del commercio a 1 g/l. Questa
soluzione può essere preparata sciogliendo 2,210 g di fluoruro di
sodio (essiccato 3-4 ore a 105 ºC) in acqua distillata. Portare al
volume di 1 000 ml con acqua distillata. La soluzione viene conser-
vata in un flacone di plastica.
3.2. Soluzioni standard di fluoruro di concentrazione appropriata
vengono preparate mediante diluizione della soluzione madre con
acqua distillata e conservate in flaconi di plastica. Le soluzioni stan-
dard il cui tenore di fluoruro è dell'ordine del mg/l devono essere
preparate estemporaneamente.
3.3. Soluzione tampone pH 5,5
A 10 g di acido cicloesandiammino (1,2) tetracetico (CDTA) viene
aggiunta acqua (circa 50 ml); aggiungere una soluzione contenente
58 g di cloruro di sodio e 29,4 g di citrato trisodico in 700 ml di
acqua distillata. Il CDTA viene sciolto aggiungendo una soluzione
di idrossido di sodio al 32 % (m/v) (circa 6 ml).
Aggiungere infine 57 ml di acido acetico ( ρ20= 1,05 g/ml) e portare
il pH a5,5 con lasoluzione di idrossido di sodio a l 32 % (circa45
ml). Lasciar raffreddare e portare al volume di un litro con acqua
distillata.
4. MODO DI OPERARE
Osservazione preliminare:È necessario controllare che tutte le soluzioni conservino, durante la
misurazione, una temperatura di 25 ± 1 ºC (uno scarto di ± 1 ºC
provocaunamodificadi circa± 0,2 mV).
4.1.Metododiretto
In un becher di plastica introdurre un volume definito di vino e un
volume uguale di soluzione tampone.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 151
▼B
La soluzione viene agitata in modo omogeneo e moderato. Quando
l'apparecchio indicatore è stabile (la stabilità viene ottenuta allorché
il potenziale varia al massimo di 0,2-0,3 mV/3 minuti), leggere il
valore del potenziale in mV.
4.2.Metododelleaggiunte
Senza interrompere l'agitazione, il mezzo studiato viene addizionato,
mediante pipetta di precisione, di un volume noto di soluzione stan-
dard di fluoruro. Quando l'apparecchio indicatore è stabile, leggere il
valore del potenziale in mV.
Scegliere la concentrazione della soluzione standard aggiunta come
segue:
a) raddoppiare o triplicare la concentrazione in fluoruro del mezzo
studiato;
b) il volume del mezzo studiato deve restare praticamente costante
(aumento del volume ≤1 %).
Lacondizione b) semplificai ca lcoli (vedi 5).La concentrazione approssimativa del mezzo studiato viene letta su
una retta di taratura tracciata in coordinate semilogaritmiche con
soluzioni standard contenenti 0,1 - 0,2 - 0,5 - 1,0 - 2,0 mg/l di fluo-
ruri.
Osservazione:se la concentrazione approssimativa del mezzo studiato supera il
campo di concentrazione delle soluzioni standard, diluire il
campione.
Esempio:
Sia0,25 mg/l F
−il tenore approssimativo del mezzo studiato
(volume 20 ml); la concentrazione deve essere maggiorata di 0,25
mg/l. A questo scopo aggiungere, ad esempio alla soluzione, con la
pipetta di precisione appropriata, 0,20 ml (= 1 %) di una soluzione
standard contenente 25 mg/l F−oppure 0,050 ml di unasoluzione
standard da 100 mg/l F−.
5. CALCOLI
Il tenore di fluoruri del mezzo studiato, espresso in mg/l, si ottiene
con laformulaseguente:
CF¼Va/C2Ca
Vo/C21
antilog ∆E=S ðÞ /C0 1
dove:
CF= concentrazione in fluoruro del mezzo studiato (mg/l).
Ca= concentrazione del fluoruro aggiunto (mg/l) nel mezzo
studiato (Va).
Vo= volume iniziale del mezzo studiato prima dell'aggiunta (ml).
Va= volume dellasoluzione a ggiunta(ml).
∆E = differenzatrai potenzia li E1ed E2ottenuti ai punti 4.1 e 4.2
(mV).
S = fattore di Nernst della soluzione in esame.
Se Vaè molto vicino aVo(vedi 4.2) laformulasi semplificae
diventa:
CF¼Ca/C21
antilog ∆E=S ðÞ /C0 1
Il valore ottenuto deve essere moltiplicato per il fattore di diluizione
derivante dall'aggiunta del tampone.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 152
▼B
37.ANIDRIDECARBONICA
1. PRINCIPIO DEI METODI
1.1.Metododiriferimento
1.1.1. Vini tranquilli (sovrappressione CO2≤0,5 · 105Pa)(1)
Il volume di vino prelevato dal campione, portato a temperatura
prossima a O ºC, viene versato in un eccesso di soluzione titolata
di idrossido di sodio, sufficiente aporta re il pH a10-11. Si titola
con una soluzione acida in presenza di anidrasi carbonica. Il conte-
nuto in CO2viene ricavato dal volume di soluzione acida impiegato
per passare da pH 8,6 (forma bicarbonato) a pH 4,0 (acido carbo-
nico). Una titolazione di riferimento, effettuata nelle stesse
condizioni sul vino privato di CO2, permette di tener conto del
volume di soluzione di idrossido di sodio consumato dagli acidi del
vino.
1.1.2. Vini frizzanti e spumanti
Il campione di vino da analizzare viene portato a temperatura pros-
sima al suo punto di congelamento. Dopo prelevamento di un dato
volume, destinato a servire da riferimento dopo eliminazione di
CO2, si alcalinizza il resto della bottiglia per fissare tutta l'anidride
carbonica sotto forma di Na2CO3. Si titolacon unasoluzione a cida
in presenza di anidrasi carbonica. Il tenore di CO2viene ricavato
dal volume di soluzione acida impiegata per passare da pH 8,6
(forma bicarbonato) a pH 4,0 (acido carbonico). Una titolazione di
riferimento, effettuata nelle stesse condizioni sul vino privato di
CO2, permette di tener conto del volume di soluzione di idrossido
di sodio consumata dagli acidi del vino.
1.2.Metodousuale: vini frizzanti e spumanti
Metodo manometrico: misurazione della sovrappressione dell'ani-
dride carbonica direttamente nella bottiglia mediante un afrometro.
2. METODO DI RIFERIMENTO
2.1.Vini tranquilli (sovrappressione dell'anidride carbonica ≤0,5 ·
105Pa).
2.1.1. Apparecchiatura
2.1.1.1. Agitatore magnetico.2.1.1.2. pHmetro2.1.2. Reattivi
2.1.2.1. Soluzione titolata di idrossido di sodio (NaOH), 0,1 M.
2.1.2.2. Soluzione titolata di acido solforico (H
2SO4), 0,05 M.
2.1.2.3. Soluzione di anidrasi carbonica, a 1 g/l.
2.1.3. Modo di operare
Raffreddare a temperatura prossima a O ºC tanto il campione di vino
quanto la pipetta da 10 ml destinata al suo prelevamento.
Versare in un becher da 100 ml 25 ml di soluzione d'idrossido di
sodio (2.1.2.1); aggiungere due gocce di soluzione acquosa di
anidrasi carbonica (2.1.2.3). Introdurre 10 ml di vino mediante la
pipetta raffreddata a 0 ºC.
Porre il becher sull'agitatore magnetico, collocare l'elettrodo e la
barretta magnetica e procedere ad agitazione moderata.
Quando il liquido è tornato a temperatura ambiente, titolare lenta-
mente con lasoluzione di a cido solforico (2.1.2.2) fino apH 8,6.
Continuare l'aggiunta di acido solforico (2.1.2.2) fino a pH 4,0. Sia n
ml il volume utilizzato per passare dal pH 8,6 a 4,0.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 153
(1)1 05pascal (Pa) = 1 bar.
▼B
Procedere quindi all'eliminazione della CO2su 50 ml di vino circa,
agitando sotto vuoto per tre minuti e riscaldando il recipiente in
bagnomaria a 25 ºC circa.
Ripetere su 10 ml di vino privato di CO2le operazioni sopra
descritte: sian ml il volume utilizza to.
2.1.4. Espressione dei risultati
1 ml di soluzione titolata di idrossido di sodio 0,1 M corrisponde a
4,4 mg di CO2.
Laqua ntità di CO2, espressa in g per litro di vino, è data dall'espres-
sione:
0,44 (n − n).Essasi esprime con due cifre decima li.Osservazione:Nel caso dei vini a basso contenuto di CO
2(CO2< 1 g/l), l'aggiunta
di anidrasi carbonica per catalizzare l'idratazione di CO2non è
necessaria.
2.2.Vinifrizzanti espumanti
2.2.1. Apparecchiatura
2.2.1.1. Agitatore magnetico.2.2.1.2. pHmetro.2.2.2. Reattivi
2.2.2.1. Soluzione di idrossido di sodio (NaOH), al 50 % (m/m).
2.2.2.2. Soluzione titolata di acido solforico (H
2SO4), 0,05 M.
2.2.2.3. Soluzione di anidrasi carbonica a 1 g/l.2.2.3 Modo di operare
Sulla bottiglia di vino da analizzare, tracciare un segno di riferi-
mento al livello del riempimento e raffreddare fino a congelamento
incipiente.
Lasciare che la bottiglia si riscaldi leggermente, agitando di
continuo, fino a scomparsa dei cristalli di ghiaccio.
Stappare rapidamente, e mettere da parte, in un cilindro graduato, da
45 a 50 ml di vino, che serviranno al dosaggio di riferimento. Il
volume esatto (v ml) di questo prelievo sarà determinato leggendolo
sul cilindro, dopo il suo ritorno alla temperatura ambiente.
Appena effettuato il prelevamento, aggiungere 20 ml di soluzione di
idrossido di sodio (2.2.2.1) nella bottiglia se questa ha una capacità
di 750 ml.
Attendere che il vino sia tornato a temperatura ambiente.In un becher da 100 ml, introdurre 30 ml di acqua distillata bollita e
due gocce della soluzione di anidrasi carboncia (2.2.2.3). Aggiungere
10 ml di vino alcalinizzato.
Porre il becher sull'agitatore magnetico, introdurre l'elettrodo e la
barretta magnetica e procedere ad agitazione moderata.
Titolare lentamente con la soluzione di acido solforico (2.2.2.2) fino
apH 8,6.
Proseguire la titolazione con acido solforico (2.2.2.2) fino a pH 4,0.
Sian ml il volume utilizza to frapH 8,6 e 4,0.
Procedere quindi all'eliminazione della CO
2dai v ml di vino messi
da parte per il dosaggio di riferimento, agitando sotto vuoto per tre
minuti e riscaldando il recipiente su bagnomaria a 25ºC circa. Intro-
durre 10 ml di vino privato di CO2in 30 ml di acqua distillata bollita
e aggiungere 2 - 3 gocce di soluzione di idrossido di sodio (2.2.2.1)
per portare il pH a 10 - 11. Operare poi nel modo più sopra
descritto. Siano n' i ml di acido solforico 0,05 M impiegati.
2.2.4. Espressione dei risultati
1 ml dellasoluzione di a cido solforico 0,05 M corrisponde a4,4 mg
di CO2.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 154
▼B
Vuotare la bottiglia del vino alcalinizzato in essa contenuto e deter-
minare con l'approssimazione di 1 ml il volume iniziale del vino
riempiendola con acqua fino al segno di riferimento: sia V ml.
Laqua ntità di CO2, espressa in g per litro di vino, è data dall'espres-
sione:
0;44 n /C0n0ðÞ /C1V/C0vþ20
V/C0v
ed è espressacon due cifre decima li.
2.3.Calcolodellasovrappressione
La sovrappressione a 20 ºC, Paph20espressa in pascals, è data dalla
formula
Paph20¼Q
1;951/C210/C050;86/C00;01 A ðÞ 1/C00;00144 S ðÞ/C0Patm
dove:
Q: tenore di CO2in g/l di vino
A: titolo alcolometrico del vino a 20 ºC
S: tenore in zuccheri in g/l di vino
Patm: pressione atmosferica espressa in pascals
3. METODO USUALE (VINI FRIZZANTI E VINI SPUMANTI)3.1.Apparecchiatura
3.1.1. Afrometro
Lo strumento che consente di misurare la sovrappressione nelle
bottiglie di vini frizzanti o spumanti si chiama afrometro. La sua
formaè diversaasecondadellachiusuradellabottiglia(ca psula
metallica, tappo a corona, tappo in sughero o in plastica, vedi figure
1 e 2).
L'apparecchio è graduato in pascal (abbreviazione Pa) (
1). È più
pratico usare come unità il 10−5pascal (10−5Pa) o il kilopascal (kPa).
Esistono diverse classi di afrometro. La classe di un manometro è la
precisione della lettura rispetto al fondo scala espressa in percentuale
(esempio manometro 1 000 kPa classe 1, significa pressione di
utilizzazione massima 1 000 kPa, lettura a ± 10 kPa). Per misure di
precisione si raccomanda la classe 1.
Gli afrometri devono essere verificati con regolarità (almeno una
volta all'anno).
3.2.Mododioperare
La misura deve essere effettuata su bottiglie la cui temperatura sia
stabilizzata da almeno 24 ore.
Dopo aver forato la capsula o il tappo, per effettuare la lettura
occorre agitare vigorosamente la bottiglia sino ad ottenere una pres-
sione costante.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 155
(1) 1 pascal (Pa) = 1 N/m2=1 0−5bar.
▼B
Figura1: Afrometro per ca psule
 Figura2: Afrometro per ta ppi
3.3.Espressionedeirisultati
La sovrappressione a 20 ºC (Paph20) è espressa in pascal (Pa) o in
Kilopascal (kPa).
Essadeve essere coerente con laprecisione del ma nometro
(esempio: 6,3 105Paoppure 630 kPae non 6,33 105Pao 633 kPa
per un manometro di classe 1 e fondo scala 1 000 kPa).
Quando la temperatura a cui si effettua la misura è diversa da 20 ºC,
per riportarla a 20 ºC è opportuno effettuare una correzione moltipli-
cando il valore della pressione misurata per il coefficiente
Paph20
Papht
che si ricava dalla tabella 1.
4. RELAZIONE TRA LA PRESSIONE E LA QUANTITÀ DI BIOS-
SIDO DI CARBONIO CONTENUTO IN UN VINO
SPUMANTE (1)
A partire dal valore della sovrappressione a 20 ºC (Paph20), si calcola
la pressione assoluta a 20 ºC (Pabs20) con laformula :
Pabs20= Patm + Paph20
dove Patm è la pressione atmosferica espressa in pascal.La quantità di anidride carbonica contenuta in un vino è data dalle
seguenti relazioni:
— in litri di CO
2per litro di vino:
0,987 · 10−5Pabs20(0,86 − 0,01A) (1 − 0,00144 S)
— in grammi di CO2per litro di vino:
1,951 · 10−5Pabs20(0,86 − 0,01A) (1 − 0,00144 S) in cui:
A è il titolo alcolometrico del vino a 20 ºC.
S è il tenore in zuccheri del vino, espresso in grammi per litro.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 156
(1) Si trascurano gli altri gas (O2,N2, ecc.), presenti in quantità troppo piccole per avere
un'influenzasullasovra ppressione.
▼B
TABELLA 1
Rapporto tra la sovrappressione Paph20di un vino frizzante o spumante a
20ºCelasovrappressionePaphtaunatemperaturat
0 1,85 13 1,24
1 1,80 14 1,20
2 1,74 15 1,16
3 1,68 16 1,13
4 1,64 17 1,09
5 1,59 18 1,06
6 1,54 19 1,03
7 1,50 20 1,00
8 1,45 21 0,97
9 1,40 22 0,95
10 1,36 23 0,93
11 1,32 24 0,91
12 1,28 25 0,881990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 157
▼M7
38.DERIVATICIANICI
(Attenzione: rispettare le prescrizioni di sicurezza per le manipolazioni dei
prodotti chimici, per la clorammina T, la piridina, il cianuro di potassio, l'acido
cloridrico e l'acido fosforico. Per lo smaltimento dei prodotti usati, attenersi a
modalità conformi alle norme e ai regolamenti ecologici in materia. Opportuna
cautela per l'acido cianidrico liberato nella distillazione del vino acidificato).
1. PRINCIPIO
L'acido cianidrico libero e totale del vino viene liberato per idrolisi
acida e separato per distillazione. Dopo reazione con la clorammina
T e la piridina, il dialdeide glutaconico formato è dosato per colori-
metria, grazie alla colorazione blu che manifesta con l'acido dimetil
1,3 barbiturico.
2. APPARECCHIATURA2.1.Apparecchiaturadidistillazione
Utilizzare l'apparecchiatura di distillazione descritta per la determi-
nazione del titolo alcolometrico volumico del vino
2.2. Pallone da 500 ml a smerigliatura normalizzata2.3. Bagnomaria termostatato a 20 ºC2.4. Spettrofotometro che consenta misurazioni dell'assorbanza alla
lunghezzad'ondadi 590 nm
2.5. Celle di vetro o celle monouso con cammino ottico di 20 mm
3. REAGENTI
3.1. Acido fosforico (H
3PO4) al 25 % (m/v)
3.2. Soluzione di clorammina T(C7H7ClNNaO2S, 3H2O) al 3 % (m/v)
3.3. Soluzione di acido 1,3-dimetilbarbiturico: sciogliere 3,658 g di acido
1,3-dimetilbarbiturico (C6H8N2O3) in 15 ml di piridinae 3 ml di
acido cloridrico ( ρ20= 1,19 g/ml) e portare a 50 ml con acqua distil-
lata.
3.4. Cianuro di potassio (KCN)3.5. Soluzione di ioduro di potassio (KI) al 10 % (m/v)3.6. Soluzione di nitrato d'argento (AgNO
3), 0,1 M
4. MODO DI OPERARE4.1.Distillazione
Nel pallone da 500 ml (2.2) introdurre 25 ml di vino, 50 ml di acqua
distillata, 1 ml di acido fosforico (3.1) ed alcune perle di vetro. Posi-
zionare immediatamente il pallone sull'apparecchio di distillazione.
Mediante un tubo sottile, travasare il distillato in una beuta graduata
da 50 ml contenente 10 ml d'acqua. La beuta viene immersa in
acqua ghiacciata. Raccogliere 30-35 ml di distillato (ossia circa
45 ml di liquido totale nella beuta graduata).
Lavare il tubo sottile del refrigerante con qualche millilitro di acqua
distillata, portare a 20 ºC il distillato e portarlo al livello della tacca
con acqua distillata.
4.2.Misurazione
Porre 25 ml di distillato in una beuta conica da 50 ml munita di
tappo smerigliato, aggiungere 1 ml di soluzione di clorammina T
(3.2) e tappare ermeticamente. Dopo esattamente 60 secondi aggiun-
gere 3 ml di soluzione di acido dimetil-1,3 barbiturico (3.3), tappare
ermeticamente e lasciar riposare per 10 minuti. Misurare quindi
l'assorbanza rispetto al bianco (25 ml di acqua distillata invece di
25 ml di distillato) alla lunghezza d'onda di 590 nm nelle celle con
cammino ottico di 20 mm.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 158
▼M7
5. COSTRUZIONE DELLA CURVA DI TARATURA
5.1.Titolazioneargentimetrica delcianurodipotassio
In una beuta graduata da 300 ml sciogliere circa 0,2 g di KCN (3.4)
esattamente pesata in 100 ml di acqua distillata. Aggiungere 0,2 ml
di soluzione di ioduro di potassio (3.5) e titolare con la soluzione di
nitrato di 0,1 M (3.6) sino ad ottenere una colorazione giallastra
stabile.
1 ml di soluzione 0,1 M di nitrato d'argento corrispondente a 13,2 mg
di KCN, calcolare il titolo del campione di KCN.
5.2.Curvadellostandard
5.2.1. Preparazione delle soluzioni standard
Unavoltanoto il titolo del KCN determina to secondo il punto 5.1,
preparare una soluzione standard contenente 30 mg/l di acido ciani-
drico (30 mg HCN /approxorequal72,3 mg KCN). Diluire questasoluzione a1/
10.
Introdurre 1,0- 2,0- 3,0- 4,0- e 5,0 ml della soluzione standard diluita
nelle beute graduate da 100 ml e portare al livello della tacca con
acqua distillata. Le soluzioni preparate hanno rispettivamente i titoli
30-60-90-120 e 150 µg/l di acido cianidrico.
5.2.2. Dosaggio
Prelevare 25 ml delle soluzioni così ottenute e proseguire come indi-
cato ai precedenti punti 4.1 e 4.2.
I valori delle assorbanze ottenuti con queste soluzioni standard ripor-
tati in funzione dei corrispondenti tenori di acido cianidrico sono
allineati su una retta passante per l'origine.
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
L'acido cianidrico è espresso in microgrammi per litro ( µg/l), senza
decimali.
6.1.Calcolo
Leggere il tenore di acido cianidrico sulla curva di taratura. Se è
stata effettuata una diluizione, moltiplicare il risultato per il fattore
di diluizione.
Ripetibilità (r) e riproducibilità (R)Vino bianco = r = 3,1 µg/l ossiacirca6 % · x
i
R= 12 µg/l ossiacirca25 % · xi
Vino rosso = r = 6,4 µg/l ossiacirca8 % · xi
R= 23 µg/l ossiacirca29 % · xi
xi= concentrazione media di HCN nel vino
xi= 48,4 µg/l per il vino bianco
xi= 80,5 µg/l per il vino rosso.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 159
▼B
39.ISOSOLFOCIANATODIALLILE
1. PRINCIPIO DEL METODO
L'isosolfocianato di allile, eventualmente presente nel vino, viene
raccolto per distillazione ed individuato per via gascromatografica.
2. REATTIVI
2.1. Etanolo assoluto.
2.2. Soluzione standard: soluzione in alcool assoluto di isosolfocianato di
allile contenente 15 mg/l di principio attivo.
2.3. Miscela frigorifera costituita da etanolo e ghiaccio secco (tempera-
tura− 60 ºC).
3. APPARECCHIATURA
3.1. Apparecchiatura da distillazione in corrente di azoto come da figura.
3.2. Mantello riscaldante termoregolabile.3.3. Flussimetro.3.4. Gascromatografo con rivelatore spettrofotometrico di fiamma munito
di filtro selettivo per composti solforati ( λ= 394 nm) o altro rivela-
tore adatto a tale determinazione.
3.5. Colonne cromatografiche in acciaio inossidabile, diametro interno 3
mm, lunghezza 3 m, riempite con carbowax 20 M al 10 % su cromo-
sorb WHP 80-100 mesh.
3.6. Microsiringhe da10 µl.
4. MODO DI OPERARE
Prelevare 2 l di vino e porli nel pallone da distillazione. Introdurre
pochi ml di etanolo (2.1) nei due tubi di raccolta fino a completa
immersione della parte porosa per la dispersione dei gas. Raffreddare
esternamente i due tubi con la miscela frigorifera. Collegare il
pallone ai tubi di raccolta ed iniziare l'immissione nell'apparecchio
di un flusso di azoto di circa 3 l l'ora. Riscaldare il vino a 80 ºC
regolando opportunamente la temperatura del mantello termoregola-
bile e raccogliere complessivamente 45-50 ml di distillato.
Stabilizzare il gascromatografo; a tal fine sono consigliate le
seguenti condizioni operative:
— temperatura dell'iniettore 200 ºC,
— temperatura della colonna 130 ºC,— gas di trasporto elio con un flusso di 20 ml al minuto.
Introdurre con l'apposita microsiringa una quantità di soluzione stan-
dard tale che il picco corrispondente all'isosolfocianato di allile
possa essere agevolmente individuato sul gascromatogramma.
Iniettare quindi un'aliquota del distillato e controllare se in corri-
spondenza del tempo di ritenzione dell'isosolfocianato di allile si ha
comparsa di picchi.
Nelle condizioni adottate nella prova, non vi sono normalmente
composti naturali del vino interferenti in corrispondenza del tempo
di ritenzione della sostanza ricercata.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 160
▼B
Apparecchiatura di distillazione in corrente di azoto
1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 161
▼B
40.CARATTERISTICHECROMATICHE
1. VINI E MOSTI1.1.Definizione
Per caratteristiche cromatiche di un vino si intende la luminosità e la
cromaticità.
La luminosità corrisponde alla trasmittanza. Essa varia in modo
inversamente proporzionale all'intensità del colore del vino.
La cromaticità corrisponde alla lunghezza d'onda dominante (che
caratterizza la tonalità) e alla purezza.
Convenzionalmente e per motivi pratici, le caratteristiche cromatiche
dei vini rossi e rosati vengono dichiarate mediante l'intensità del
colore e la tonalità, secondo un procedimento adottato come metodo
usuale.
1.2.Principio deimetodi
1.2.1. Metodo di riferimento
Metodo spettrofotometrico che permette il calcolo dei valori tristi-
molari e dei coefficienti tricromatici necessari alla specificazione
del colore nei termini definiti dalla «Commission Internationale de
l'Eclairage (CIE)».
1.2.2. Metodo usuale (applicabile ai vini rossi e rosati)
Metodo spettrofotometrico in cui le caratteristiche cromatiche sono
espresse convenzionalmente come segue:
L'intensità è data dalla somma delle assorbanze alle lunghezze
d'ondadi 420, 520 e 620 nm lette con celle da1 cm di ca mmino
ottico.
La tonalità del colore è espressa dal rapporto tra l'assorbanza a 420
nm e l'assorbanza a 520 nm.
1.3.Metododiriferimento
1.3.1. Apparecchiatura
1.3.1.1. Spettrofotometro in grado di effettuare misurazioni comprese tra 300
e 700 nm.
1.3.1.2. Celle di vetro, disponibili a coppie, con cammino ottico b pari a 0,1
- 0,2 - 0,5 - 1 - 2 e 4 cm.
1.3.2. Modo di operare
1.3.2.1. Preparazione del campione.
Se il vino è torbido, occorre chiarificarlo per centrifugazione.I vini giovani o spumanti, devono essere liberati dalla maggior parte
della loro anidride carbonica mediante agitazione sotto vuoto.
1.3.2.2. Misure
Il cammino ottico b delle celle impiegate deve essere scelto in modo
che l'assorbanza misurata sia compresa tra 0,3 e 0,7.
A titolo indicativo si consiglia di utilizzare celle da 2 cm (o 4 cm) di
cammino ottico per i vini bianchi, 1 cm per i vini rosati e 0,1 (o 0,2
cm) per i vini rossi.
Effettuare le misure spettrofotometriche prendendo come liquido di
riferimento, per regolare lo zero della scala delle assorbanze alle
lunghezze d'onda 445, 495, 550 e 625 nm, l'acqua distillata posta in
una cella avente lo stesso cammino ottico b.
Rilevare per il cammino ottico b le quattro assorbanze ottenute per il
vino; siano A
445,A495,A550,A625(con 3 decimali).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 162
▼B
1.3.3. Calcoli
Rilevare le trasmittanze (T %) corrispondenti riportando i valori
delle assorbanze per b cm di cammino ottico sulla tabella I; siano:
T445,T495,T550,T625.
— Calcolare i valori tristimolari X, Y e Z, espressi in frazioni deci-
mali:
X = 0,42 · T625+ 0,35 · T550+ 0,21 · T445
Y = 0,20 · T625+ 0,63 · T550+ 0,17 · T495
Z = 0,24 · T495+ 0,94 · T445
— Calcolare le coordinate del colore x e y:
x¼X
XþYþZy¼Y
XþYþZ
1.3.4. Espressione dei risultati
1.3.4.1. La luminosità relativa è data dal valore di Y espresso in percentuale.
(Per il nero Y % = 0, per l'incolore Y % = 100).
1.3.4.2. La cromaticità è espressa dalla lunghezza d'onda dominante e dalla
purezza. Queste si determinano ricorrendo al diagramma cromatico,
che rappresenta il locus di tutti i colori dello spettro, riportato in
figura1. In esso il punto zero corrisponde a llasorgente di luce
bianca impiegata, rappresentata dalla illuminante standard C di coor-
dinate xo= 0,3101 e yo= 0,3163, che rappresenta la luce del giorno
mediamente chiara.
— Lunghezzad'ondadomina nte.
Tracciare sul diagramma il punto C di coordinate x ed y. Se il
punto C cade all'esterno del triangolo AOB, tracciare prolungan-
dola, la retta che unisce il punto O con il punto C; questa
intersecail locus di cui soprain un punto S che corrisponde
alla lunghezza d'onda dominante.
Nel caso in cui il punto C cade all'interno del triangolo AOB,
tracciare la retta da C ad O; essa intersecherà il locus in un punto
che corrisponde alla lunghezza d'onda del colore complementare
del vino. Tale lunghezza d'onda è espressa con il relativo valore
seguito dalla lettera C.
— Purezza.
Quando il punto C cada all'esterno del triangolo AOB, la purezza
è espressa in percentuale dal rapporto:
100/C1distanza dal punto C al punto O
distanza dal punto O al punto S
Quando il punto C cada all'interno del triangolo AOC, la purezza
è espressa in percentuale dal rapporto:
100 ·distanza dal punto C al punto O (1)
distanza dal punto O al punto P
dove il punto P è il punto d'intersezione dellarettaOC con la
lineadelle porpore.
Se si conoscono x ed y, la purezza è anche data direttamente dai
diagrammi cromatici (figure 2, 3, 4, 5 e 6).
1.3.4.3. Risultati.
La luminosità, la cromaticità (espressa dalla lunghezza d'onda domi-
nante) e la purezza definiscono in modo completo il colore di un
vino.
Queste devono essere indicate sul certificato di analisi con il valore
del cammino ottico su cui sono state effettuate le misure.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 163
(1) Tale distanza va misurate nel verso OC.
▼B
4.METODOUSUALE
1.4.1. Apparecchiatura
1.4.1.1. Spettrofotometro in grado di effettuare misurazioni comprese tra 300
e 700 nm.
1.4.1.2. Celle di vetro disponibili in coppia, con cammino ottico b pari a 0,1
- 0,2 - 0,5 e 1 cm.
1.4.2. Trattamento preliminare del campione
Se il vino è torbido, chiarificarlo per centrifugazione.I vini giovani o spumanti devono essere liberati dalla maggior parte
dell' anidride carbonica, agitando sotto vuoto.
1.4.3. Modo di operare
Il cammino ottico b della cella di misura deve essere scelto in modo
che l'assorbanza A sia compresa tra 0,3 e 0,7.
Effettuare le misure spettrofotometriche, per poter regolatore lo zero
della scala delle assorbanze dell'apparecchio alle lunghezze d'onda
420, 520 e 620 nm, utilizzando come liquido di riferimento acqua
distillata posta in una cella con lo stesso cammino ottico b.
1.4.4. Espressione dei risultati
1.4.4.1. Calcoli.
Calcolare, per 1 cm di cammino ottico, le assorbanze relative alle tre
lunghezze d'ondadividendo per b, espresso in centimetri, le a ssor-
banze rilevate. Siano A
420,A520,A620.
L'intensità è convenzionalmente data da:I=A
420+A520+A620
Essaviene espressacon tre cifre decima li.La tonalità è data per convenzione da:
N¼
A420
A520
Essaviene espressacon tre cifre decima li.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 164
▼B
TABELLA I
Trasformazionedelleassorbanzeintrasmittanze(T%)
Modalità di impiego:Leggere la prima cifra decimale del valore dell'assorbanza nella
colonna verticale 1 e la seconda cifra decimale nella riga orizzontale
2.
Leggere il numero in corrispondenzadellaloro intersezione. Per
ottenere la trasmittanza, dividere tale valore per 10 se l'assorbanza
è inferiore a1, per 100 se è compresatra1 e 2, per 1 000 se è
compresatra2 e 3.
Avvertenza:
Il valore riportato in ciascuna casella in alto a destra consente di
tener conto per interpolazione della terza cifra decimale del valore
dell'assorbanza.
0123456789
0 1000
23977229552293321912218912087120851198321981319
1 79418776187591774117724167081669216676156611564615
2 63114617146031458914575135621354913537125251251312
3 50111490114791146811457104479436942710417104079
4 3989389938093718363835583478339833173248
5 3167309730272957288628272756269626362576
6 2516245524062345229522452195214520952045
7 1994195519041864182417841744170416641624
8 1583155415131484144414131383135313231293
9 1263123312031172115311221103107210531022
Esempio:
Assorbanza 0,47 1,47 2,47 3,47
T % 33,9 % 3,4 % 0,3 % 0 %
Le trasmittanze T % vengono espresse a meno dello 0,1 %.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 165
▼B
Figura1
Diagrammadicromaticitàrappresentanteillocusdituttiicolori
dellospettro.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 166
▼B
Figura2
Diagramma di cromaticità per i vini rosso vivo e i vini rosso
mattone.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 167
▼B
Figura3
Diagramma di cromaticità per i vini rosso vivo e i vini rosso
mattone.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 168
▼B
Figura4
Diagramma di cromaticità per i vini rosso vivo e i vini rosso
porpora.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 169
▼B
Figura5
Diagramma di cromaticità per i vini rosso vivo e i vini rosso
porpora.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 170
▼B
Figura6
Diagrammadicromaticitàperivinirossomattoneeivinirosso
porpora.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 171
▼B
2. MOSTI CONCENTRATI RETTIFICATI
2.1.Principio
Misurazione dell'assorbanza, a 425 nm sotto spessore di 1 cm, del
mosto concentrato rettificato la cui concentrazione in zuccheri è
stata portata al 25 % (m/m) (25 º Brix).
2.2.Apparecchiatura
2.2.1. Spettrofotometro che consentadi effettua re misure fra300 e 700 nm.
2.2.2. Celle di vetro, aca mmino ottico da1 cm.
2.2.3. Filtro amembra nacon porosità di 0,45 µm.
2.3.Mododioperare
2.3.1. Preparazione del campione
Utilizzare la soluzione il cui titolo in zuccheri è del 25 % (m/m) (25
º Brix) preparata secondo le indicazioni del punto 4.1.2 del capitolo
«pH». Filtrarla su filtro a membrana di porosità 0,45 µm.
2.3.2. Determinazione dell'assorbanza
Regolare l'assorbanza zero alla lunghezza d'onda 425 nm su una
cella di cammino ottico da 1 cm contenente acqua distillata.
Rilevare l'assorbanza A, a questa lunghezza d'onda, della soluzione
al 25 % in zuccheri (25 º Brix), ottenuta al punto 2.3.1, posta in
unacellaaca mmino ottico da1 cm.
2.4.Espressionedeirisultati
L'assorbanza a 425 nm del mosto concentrato rettificato in soluzione
al 25 % (m/m) in zuccheri (25 º Brix) è espressa con due cifre deci-
mali.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 172
▼B
41.INDICEDIFOLIN-CIOCALTEU
1. DEFINIZIONE
L'indice di Folin-Ciocalteu è il risultato che si ottiene applicando il
metodo seguente.
2. PRINCIPIO
L'insieme dei composti fenolici del vino viene ossidato dal reattivo
di Folin-Ciocalteu. Questo è costituito da una miscela di acido fosfo-
tungstico (H3PW12O40) e di acido fosfomolibdico (H3PMo12O40) che si
riduce, con l'ossidazione dei fenoli, a una miscela di ossidi blu di
tungsteno (W8O23) e di molibdeno (Mo8O23).
La colorazione blu prodotta ha un assorbimento massimo intorno a
750 nm. Essa è proporzionale al tenore in composti fenolici.
3. REATTIVI
I reattivi devono essere di qualità analitica. L'acqua utilizzata deve
essere distillata o avere purezza equivalente.
3.1.ReattivodiFolin-Ciocalteu
Questo reattivo si trova in commercio pronto per l'uso. Può essere
preparato nel modo seguente: sciogliere 100 g tungstato di sodio
(Na2WO4·2 H2O) e 25 g di molibdato di sodio (NaMoO4·2 H2O)
in 700 ml di acqua distillata; aggiungere 50 ml di acido fosforico
all '85 % ( ρ20= 1,71 g/ml) e 100 ml di acido cloridrico concentrato
(ρ20= 1,19 g/ml). Portare ad ebollizione in riflusso per 10 ore,
aggiungere quindi 150 g di solfato di litio (Li2SO4·H2O), alcune
gocce di bromo e portare nuovamente all'ebollizione per 15 minuti.
Raffreddare e portare ad 1 l con acqua distillata.
3.2. Soluzione al 20 % (m/v) di carbonato di sodio (Na2CO3) anidro.
4. APPARECCHIATURA
Comune dotazione di laboratorio, in particolare:
4.1. Palloni tarati da 100 ml.4.2. Spettrofotometro con lunghezzad'ondaa750 nm.
5. MODO DI OPERARE5.1.Vinirossi
In un pallone tarato da 100 ml (4.1), versare nell'ordine:
1 ml di vino diluito al 20 %
50 ml di acqua distillata
5 ml di reattivo di Folin-Ciocalteu (3.1)
20 ml di soluzione di carbonato di sodio (3.2).
Portare a 100 ml con acqua distillata.
Agitare per omogeneizzare. Attendere 30 minuti che la reazione sia
completa. Determinare l'assorbanza a 750 nm per 1 cm rispetto al
riferimento preparato con acqua distillata al posto del vino.
Se l'assorbanza letta non ha un valore prossimo a 0,3, è opportuno
ricominciare il procedimento, modificando la diluizione del vino in
modo da ottenere tale assorbanza.
5.2.Vinibianchi
Operare nelle stesse condizioni, su 1 ml di vino non diluito.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 173
▼B
5.3.Mosticoncentratirettificati
5.3.1. Preparazione del campione
Utilizzare la soluzione il cui tenore in zuccheri è del 25 % (m/m)
(25 º Brix) preparata secondo le indicazioni del punto 4.1.2, del
capitolo «pH».
5.3.2. Misura
Operare come descritto nel caso dei vini rossi (5.1) su 5 ml di
campione preparato come in 5.3.1 e misurare l'assorbanza rispetto a
un bianco preparato con 5 ml di una soluzione al 25 % (m/m) di
zucchero invertito.
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI6.1.Calcolo
Esprimere il risultato sotto forma di un indice ottenuto moltiplicando
l'assorbanza per 100, nel caso dei vini rossi diluiti al 20 % (o per il
fattore corrispondente alla diluizione operata) e per 20 nel caso dei
vini bianchi. Nel caso dei mosti concentrati rettificati l'assorbanza
deve essere moltiplicata per 16.
6.2.Ripetibilità
La differenza tra i risultati di due determinazioni effettuate simulta-
neamente o rapidamente l'una dopo l'altra dallo stesso analista, non
deve essere superiore a1.
Una buona ripetibilità dei risultati dipende dall'impiego rigorosa-
mente corretto dell'apparecchiatura (palloni tarati e celle).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 174
▼B
42.METODIDIANALISIPARTICOLARIPERMOSTICONCENTRATI
RETTIFICATI
a) CATIONI TOTALI1. PRINCIPIO
Si tratta la presa di campione con uno scambiatore di cationi forte-
mente acido. I cationi vengono scambiati con l'H
+e vengono espressi
per differenza tra l'acidità totale dell'effluente e quella della presa di
campione.
2. APPARECCHIATURA
2.1. Colonnain vetro dellalunghezzadi circa300 mm e di 10-11 mm di
diametro interno, provvista di un rubinetto.
2.2. pHmetro graduato almeno in decimi di unità pH.2.3. Elettrodi.
— Elettrodo in vetro, da conservare in acqua distillata,
— Elettrodo di riferimento al calomelano-cloruro di potassio saturo,
da conservare in soluzione satura di cloruro di potassio,
— oppure elettrodo combinato da conservare in acqua distillata.
3. REATTIVI
3.1. Scambiatore di cationi fortemente acido, nella forma H
+. Primadi
utilizzarla far gonfiare la resina immergendola in acqua per una
notte.
3.2. Soluzione 0,1 M di idrossido di sodio.3.3. Indicatore di pH (di carta).
4. MODO DI OPERARE
4.1.Preparazione delcampione
Utilizzare la soluzione ottenuta diluendo il mosto concentrato rettifi-
cato al 40 % (m/v) come indicato al punto 5.1.2 del capitolo
«Acidità totale».
4.2.Preparazione dellacolonnascambiatrice diioni
Introdurre nella colonna circa 10 ml di scambiatore di ioni preventi-
vamente gonfieto nella forma H
+; lavare la colonna con acqua
distillata sino ad eliminazione dell'acidità controllata mediante l'indi-
catore di carta.
4.3.Scambiodiioni
Fare passare attraverso la colonna, alla velocità di una goccia al
secondo, 100 ml della soluzione di mosto concentrato rettificato
preparata secondo le indicazioni del punto 4.1. Raccogliere
l'effluente in un becher. Lavare la colonna con 50 ml di acqua distil-
lata. Titolare l'acidità dell'effluente (comprese le acque di lavaggio)
con lasoluzione 0,1 M di idrossido di sodio sino a d ottenere un pH
7 a 20 ºC. Il liquido alcalino va aggiunto lentamente agitando in
continuazione la soluzione. Sia n ml il volume di soluzione 0,1 M
di idrossido di sodio impiegato.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
I cationi totali vengono espressi in milliequivalenti per chilo di
zuccheri totali con una cifra decimale.
5.1.Calcoli
— Acidità dell'effluente espressain milliequiva lenti per chilo di
mosto concentrato rettificato:
E = 2,5 · n
— Acidità totale del mosto concentrato rettificato in milliequivalenti
per chilo (vedi «Acidità totale», punto 6.1.2): a.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 175
▼B
— Cationi totali in milliequivalenti per chilo di zuccheri totali:
2;5n/C0a
P/C1100
P = Tenore percentuale (m/m) in zuccheri totali.
b) CONDUTTIVITÀ1. PRINCIPIO
Misuradellaconduttività elettricadi unacolonnadi liquido delimi-
tata da due elettrodi di platino paralleli fra di loro, che costituiscono
uno dei lati di un ponte di Wheatstone.
La conduttività varia con la temperatura ed è espressa a 20 ºC.
2. APPARECCHIATURA
2.1. Conduttimetro per misure di conduttività tra1 e 1 000 microsiemens
per cm.
2.2. Bagnomaria in grado di portare la temperatura dei campioni da
analizzare a circa 20 ºC (20 ± 2 ºC).
3. REATTIVI
3.1. Acqua demineralizzata la cui conduttività specifica sia inferiore a 2
microsiemens per cm a20 ºC.
3.2. Soluzione di cloruro di potassio di riferimento.
Sciogliere 0,581 g di cloruro di potassio, KCl, previamente essiccato
fino a massa costante alla temperatura di 105 ºC, in acqua deminera-
lizzata (3.1). Portare a un litro con acqua demineralizzata (3.1). Tale
soluzione haunaconduttività di 1 000 microsiemens per cm a20 ºC.
Può essere conservata per non più di 3 mesi.
4. MODO DI OPERARE4.1.Preparazione delcampione
Utilizzare la soluzione il cui tenore in zuccheri totali è del 25 % (m/
m) (25 º Brix) come indicato al capitolo «pH», al punto 4.1.2.
4.2.Determinazione dellaconduttività
Portare il campione da analizzare a 20 ºC per immersione in un
bagno d'acqua. Controllare la temperatura con l'approssimazione di
0,1 ºC.
Lavare due volte la cella di misura del conduttimetro con la solu-
zione da esaminare.
Misurare la conduttività espressa in microsiemens per cm.
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
Per la soluzione al 25 % (m/m) (25 º Brix) del mosto concentrato
rettificato, la conduttività è espressa in microsiemens per cm (µS
cm
−1) a20 ºC, senzacifre decima li.
5.1.Calcolo
Se l'apparecchio non è dotato di un compensatore di temperatura,
correggere la conduttività misurata mediante la tabella I. Se la
temperatura è inferiore a 20 ºC, aggiungere la correzione; se la
temperatura è superiore a 20 ºC, sottrarre la correzione.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 176
▼B
TABELLA I
Correzione dellaconduttività per tempera ture diverse da20 ºC, microsiemens cm−1
Condut-
tivitàTemperature
20,2
19,820,4
19,620,6
19,420,8
19,221,0
19,021,2
18,821,4
18,621,6
18,421,8
18,222,0 (1)
18,0 (2)
0 000 000000 0
5 0 001 111122 2
1 0 0 011 223334 41 5 0 112 334556 72 0 0 123 345678 92 5 0 123 46789 1 01 13 0 0 134 5789 1 1 1 21 3350 1 3 5 6 8 9 11 12 14 15400 2 3 5 7 9 11 12 14 16 18
4 5 0 2 3 6 81 01 21 41 61 8 2 0
5 0 0 2 4 7 91 11 31 51 82 0 2 2550 2 5 7 10 12 14 17 19 22 24600 3 5 8 11 13 16 18 21 24 26
(1) Sottrarre la correzione.
(2) Aggiungere lacorrezione.
c) IDROSSIMETILFURFURALE
1. PRINCIPIO DEI METODI
1.1.Metodocolorimetrico
Le aldeidi derivate dal furano, di cui l'idrossimetilfurfurale è la prin-
cipale, reagiscono con l'acido barbiturico e la paratoluidina per dare
un composto rosso che viene dosato per colorimetria a 550 nm.
1.2.Metodopercromatografia liquidaadaltarisoluzione(HPLC)
Separazione su colonna in fase inversa e determinazione a 280 nm.
2. METODO COLORIMETRICO
2.1.Apparecchiatura
2.1.1. Spettrofotometro per misure comprese fra300 e 700 nm.
2.1.2. Celle in vetro, aca mmino ottico da1 cm.
2.2.Reattivi
2.2.1. Acido barbiturico in soluzione allo 0,5 % (m/v).
Sciogliere 500 mg di acido barbiturico, C4O3N2H4, in acqua distillata
riscaldando leggermente in bagnomaria a 100 º; portare a 100 ml con
acqua distillata. La soluzione può essere conservata per circa una
settimana.
2.2.2. Paratoluidina in soluzione al 10 % (m/v).
10 g di paratoluidina, C6H4(CH3)NH2vengono posti in un pallone
tarato da 100 ml, aggiungere 50 ml di isopropanolo,
CH3CH(OH)CH3, e 10 ml di acido acetico glaciale, CH3COOH, ( ρ20= 1,05 g/ml); completare a 100 ml con isopropanolo. Questa solu-
zione dev'essere rinnovata ogni giorno.
2.2.3. Etanale (CH3CHO) in soluzione acquosa all'1 % (m/v). Da prepa-
rare al momento dell'uso.
2.2.4. Idrossimetilfurfurale, C6O3H6, in soluzione acquosa di 1 g/l.
Preparare per diluizioni successive delle soluzione contenenti 5 - 10
- 20 - 30 e 40 mg/l. Lasoluzione a1 g/l e le rela tive diluizioni
devono essere preparate al momento dell'uso.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 177
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2.3.Mododioperare
2.3.1. Preparazione del campione
Utilizzare la soluzione ottenuta diluendo il mosto concentrato rettifi-
cato al 40 % (m/v) come indicato al punto 5.1.2 del capitolo
«Acidità totale». Effettuare il dosaggio su 2 ml di tale soluzione.
2.3.2. Dosaggio colorimetrico
Porre in 2 flaconi aebda 25 ml tappati a smeriglio, 2 ml di
campione preparato come indicato al 2.3.1. Aggiungere in ciascun
flacone 5 ml di soluzione di paratoluidina (2.2.2); mescolare.
Aggiungere nel flacone b(bianco) 1 ml di acqua distillata e nel
flaconea(campione), 1 ml di soluzione di acido barbiturico (2.2.1).
Agitare per omogeneizzare. Travasare il contenuto dei flaconi nelle
celle dello spettrofotometro a cammino ottico da 1 cm. Dopo aver
regolato lo zero della scala delle assorbanze sul contenuto del
flaconeballa lunghezza d'onda di 550 nm, osservare la variazione
dell'assorbanza del contenuto del flacone arilevandone il valore
massimo A raggiunto nell'intervallo tra 2 e 5 minuti.
I campioni in cui il tenore in idrossimetilfurfurale è superiore ai 30
mg/l devono essere diluiti prima dell'analisi.
2.3.3. Determinazione della curva di taratura
Porre, in unaserie di due fla coni aebda25 ml, 2 ml di cia scuna
delle soluzioni di idrometilfurfurale da 5 - 10 - 20 - 30 e 40 mg/l
(2.2.4) e trattarli come descritto al punto 2.3.2.
La rappresentazione grafica delle assorbanze in funzione della
concentrazione in mg/l dell'idrossimetilfurfurale nelle soluzioni di
riferimento è una retta passante per l'origine.
2.4.Espressionedeirisultati
La concentrazione in idrossimetilfurfurale dei mosti concentrati retti-
ficati è espressa in milligrammi per chilogrammo di zuccheri totali.
2.4.1. Calcolo
La concentrazione C mg/l in idrossimetifurfurale del campione da
analizzare si ottiene riportando sulla curva di taratura l'assorbanza
A determinata per detto campione.
Concentrazione di idrossimetilfurfurale in milligrammi per chilo-
grammo di zuccheri totali:
250/C1C
P
P = tenore percentuale in zuccheri totali del mosto concentrato
rettificato.
3. METODO PER CROMATOGRAFIA LIQUIDA AD ALTA RISO-
LUZIONE
3.1.Apparecchiatura
3.1.1. Cromatografo in fase liquida ad alta risoluzione completa di:
— un iniettore a volume variabile (loop) da 5 o 10 µl,
— un rivelatore, spettrofotometro per effettuare misure a 280 nm,— una colonna di silice legata con octadecile (ad esempio:
Bondapak C
18— Corasil, Waters Ass.),
— un registratore, eventualmente un integratore.
Flusso dellafa se mobile: 1,5 ml/minuto.
3.1.2. Dispositivo di filtrazione sumembrana (0,45 µm)
3.2.Reattivi
3.2.1. Acqua bidistillata.
3.2.2. Metanolo, CH3OH, distillato o di qualità HPLC.
3.2.3. Acido acetico, CH3COOH ( ρ20= 1,05 g/ml).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 178
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3.2.4. Fase mobile: acqua — metanolo (3.2.2) — acido acetico (3.2.3)
previamente filtrati su membrana (0,45 µm), (40- 9- 1 v/v).
Detta fase mobile dev'essere preparata ogni giorno e degassata prima
dell'uso.
3.2.5. Soluzione di riferimento di idrossimetilfurfurale a 25 mg/l (m/v).
Versare in un pallone tarato da 100 ml, 25 g pesati esattamente di
idrossimetilfurfurale (C6H3O6) e portare a volume con metanolo
(3.2.2). Diluire la soluzione al 10 % con metanolo (3.2.2) e filtrarla
su membrana (0,45 µm).
Questa soluzione, mantenuta in frigorifero in un flacone di vetro
imbrunito e chiuso ermeticamente, si conserva per 2-3 mesi.
3.3.Mododioperare
3.3.1. Preparazione del campione
Utilizzare la soluzione ottenuta diluendo il mosto concentrato rettifi-
cato al 40 % (m/v) come indicato al capitolo «Acidità totale», punto
5.1.2, filtrata su membrana (0,45 µm).
3.3.2. Determinazione cromatografica
Iniettare nel cromatografo 5 (o 10) µl del campione preparato come
indicato al punto 3.3.1 e 5 (o 10) µl della soluzione di riferimento di
idrossimetilfurfurale (3.2.5). Registrare il cromatogramma.
Il tempo di ritenzione dell'idrossimetilfurfurale è circa 6-7 minuti.
3.4.ESPRESSIONEDEIRISULTATI
Il tenore in idrossimetilfurfurale dei mosti concentrati rettificati si
esprime in milligrammi per chilogrammo di zuccheri totali.
3.4.1. Calcolo
SiaC mg/l, il tenore in idrossimetilfurfura le dellasoluzione di mosto
concentrato rettificato al 40 % (m/v).
Concentrazione dell'idrossimetilfurfurale in milligrammi per chilo-
grammo di zuccheri totali:
250/C1C
P
P = tenore percentuale (m/m) in zuccheri totali del mosto concen-
trato retttificato.
d) METALLI PESANTI
1. PRINCIPII.Metodorapidodivalutazionedeimetallipesanti.
Nei mosti concentrati rettificati opportunamente diluiti i metalli
pesanti sono messi in evidenza dalla colorazione dovuta alla forma-
zione di solfuri. La loro valutazione è effettuata per confronto con
unasoluzione di riferimento di piombo corrispondente a l tenore
massimo ammissibile.
II.Determinazione del tenore di piombo per spettrofotometria di
assorbimentoatomico.
Il chelato formato dal piombo con il pirrolidinditiocarbammato di
ammonio viene estratto con il metilisobutilchetone di cui si misura
l'assorbanza a 283,3 nm. Si determina quindi il tenore in piombo
con il metodo delle aggiunte.
2. METODO RAPIDO DI VALUTAZIONE DEI METALLI PESANTI
2.1.Reattivi
2.1.1. Acido cloridrico al 70 % (m/v).
Prelevare 70 g di acido cloridrico, (HCl) ( ρ
20= 1,16 — 1,19 g/ml) e
portare a 100 ml con acqua.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 179
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2.1.2. Acido cloridrico diluito al 20 % (m/v).
Prelevare 20 g di acido cloridrico, (HCl) ( ρ20= 1,16 — 1,19 g/ml) e
completare a 100 ml con acqua.
2.1.3. Ammoniaca diluita.
Prelevare 14 g di ammoniaca, NH3(ρ20= 0,931 — 0,934 g/ml) e
portare a 100 ml con acqua.
2.1.4. Soluzione tampone a pH 3,5.
Sciogliere 25 g di acetato di ammonio, (CH3COONH4), in 25 ml di
acqua ed aggiungere 38 ml di acido cloridrico diluito (2.1.1). Se
occorre, aggiustare il pH con l'acido cloridrico diluito (2.1.2) o con
ammoniaca diluita (2.1.3) e portare a 100 ml con acqua.
2.1.5. Soluzione di tioacetammide, (C2H5NS), al 4 % (m/v).
2.1.6. Soluzione di glicerolo (C3H8O3) all '85 % (m/v).
(nD20o= 1,449 — 1,455).
2.1.7. Reattivo alla tioacetammide
Aggiungere a 0,2 ml di soluzione di tioacetammide (2.1.5), 1 ml
della miscela ottenuta con 5 ml di acqua, 15 ml di idrossido di in
soluzione sodio 1 M e 20 ml di glicerolo (2.1.6). Riscaldare in
bagnomaria a 100 ºC per 20 secondi. Preparare al momento dell'uso.
2.1.8. Soluzione di piombo a 0,002 g/l.
Preparare una soluzione a 1 g/l piombo sciogliendo in acqua 0,400 g
di nitrato di piombo, Pb (NO3)2, e portare a 250 ml con acqua. Al
momento dell'impiego diluire questasoluzione a l 2 ‰ (v/v) con
acqua in modo da ottenere la soluzione a 0,002 g/l.
2.2.Mododioperare
Diluire 10 g del campione di mosto concentrato rettificato in 10 ml
di acqua. Aggiungere 2 ml di soluzione tampone a pH 3,5 (2.1.4);
mescolare. Aggiungere 1,2 ml di reattivo alla tioacetammide
(2.1.7). Mescolare immediatamente. Preparare la soluzione di
confronto nelle stesse condizioni utilizzando 10 ml di soluzione a
0,002 g/l di piombo (2.1.8).
Dopo 2 minuti l'eventuale colorazione bruna della soluzione di
mosto concentrato rettificato non deve essere più intensa di quella
dellasoluzione di confronto.
2.3.Calcolo
Il saggio, nelle condizioni descritte, corrisponde ad un tenore
massimo ammissibile di metalli pesanti, espresso come piombo, di
2 mg/kg di mosto concentrato rettificato.
3. DETERMINAZIONE DEL TENORE DI PIOMBO PER SPETTRO-
FOTOMETRIA DI ASSORBIMENTO ATOMICO
3.1.Apparecchiatura
3.1.1. Spettrofotometro di assorbimento atomico completo di bruciatore
alimentato con aria-acetilene.
3.1.2. Lampada a catodo cavo al piombo.
3.2.Reattivi
3.2.1. Acido acetico diluito.
Prelevare 12 g di acido acetico glaciale ( ρ20= 1,05 g/ml) e comple-
tare a 100 ml con acqua.
3.2.2. Soluzione di pirrolidinditiocarbammato di ammonio, C5H12N2S2, all'
1 % (m/v).
3.2.3. Metilisobutilchetone, (CH3)2CHCH2COCH3.
3.2.4. Soluzione di piombo allo 0,010 g/l. Diluire all' 1 % (v/v) la solu-
zione di piombo a1 g/l (2.1.8).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 180
▼B
3.3.Mododioperare
3.3.1. Soluzione da esaminare
Diluire 10 g di mosto concentrato rettificato in una miscela a parti
uguali di acido acetico diluito (3.2.1) e di acqua e portare a 100 ml
con tale miscela.
Aggiungere 2 ml di soluzione di pirrolidinditiocarbammato di
ammonio (3.2.2) e 10 ml di metilisobutilchetone (3.2.3). Agitare al
riparo dalla luce diretta per 30 secondi. Fare separare i due strati.
Utilizzare lo strato di metilsobutilchetone.
3.3.2. Soluzione di riferimento
Preparare tre soluzioni di riferimento contenenti oltre ai 10 g di
mosto concentrato rettificato, rispettivamente 1, 2 e 3 ml della solu-
zione di piombo a 0,010 g/l (3.2.4). Trattarle come la soluzione in
esame.
3.3.3. Bianco
Preparare un bianco procedendo nelle stesse condizioni descritte al
punto 3.3.1 per la soluzione da esaminare ma senza aggiungere il
mosto concentrato rettificato.
3.3.4. Determinazione
Selezionare la lunghezza d'onda 283,3 nm.Polverizzare nella fiamma il metilisobutilchetone proveniente dal
saggio in bianco e regolare l'assorbanza zero.
Operando sugli estratti determinare le assorbanze corrispondenti alla
soluzione in esame ed alle soluzioni di riferimento.
3.4.Espressionedeirisultati
Esprimere il tenore di piombo in milligrammi per chilogrammo di
mosto concentrato rettificato con una cifra decimale.
3.4.1. Calcolo
Tracciare la curva che rappresenta la variazione delle assorbanze in
funzione della concentrazione di piombo addizionato alle soluzioni
di riferimento, ponendo la concentrazione della soluzione da esami-
nare uguale a zero.
Estrapolare la retta di congiunzione dei punti sono ad incontrare
l'asse delle concentrazioni dal lato negativo. La distanza di questo
punto dall'origine rappresenta la concentrazione in piombo della
soluzione da esaminare.
e) DETERMINAZIONE CHIMICA DELL'ETANOLO
Questo metodo di dosaggio è utilizzato per la determinazione del
titolo alcolometrico dei liquidi leggermente alcolici quali i mosti, i
mosti concentrati, i mosti concentrati rettificati.
1. PRINCIPIO
Distillazione semplice del liquido. Ossidazione dell'etanolo del distil-
lato mediante bicromato di potassio. Titolazione dell'eccesso di
bicromato con una soluzione di ferro II.
2. APPARECCHIATURA
2.1. Utilizzare l'apparecchio di distillazione descritto al punto 3.2. del
capitolo «Titolo alcolometrico».
3. REATTIVI
3.1.Soluzionedibicromatodipotassio
Sciogliere 33,600 g di bicromato di potassio (K
2Cr2O7) nellaqua ntità
di acqua sufficiente ad ottenere 1 l a 20 ºC.
Un millilitro di questasoluzione ossida7,8924 mg di a lcool.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 181
▼B
3.2.SoluzionedisolfatodiferroIIediammonio
Sciogliere 135 g di solfato di ferro II e di ammonio, FeSO4,
(NH4)2SO4·6H2O in acqua, aggiungere 20 ml di acido solforico
concentrato, H2SO4(ρ20= 1,84 g/ml), portare ad 1 l con acqua.
Questa soluzione, appena preparata, corrisponde all'incirca a metà
del suo volume di soluzione di bicromato. In seguito si ossida lenta-
mente.
3.3.Soluzionedipermanganatodipotassio
Sciogliere 1,088 g di permanganato di potassio, KMnO4, in una
quantità di acqua sufficiente per 1 litro.
3.4.Acidosolforico diluito½(v/v)
Aggiungere a 500 ml di acqua lentamente ed agitando 500 ml di
acido solforico, H2SO4(ρ20= 1,84 g/ml).
3.5.Reattivoall'ortofenantrolina ferrosa
Sciogliere 0,695 g di solfato ferroso (FeSO4·7 H2O) in 100 ml di
acqua, aggiungere 1,485 g di monoidrato di orto-fenantrolina
(C12H8N2·H2O). Riscaldare per favorire la dissoluzione. Questa
soluzione, di colore rosso vivo, si conservamolto bene.
4. MODO DI OPERARE4.1.Distillazione
Versare nel pallone di distillazione 100 g del mosto concentrato
rettificato e 100 ml di acqua. Raccogliere il distillato in un pallone
tarato da 100 ml e portare a volume con acqua.
4.2.Ossidazione
In una beuta con tappo smerigliato da 300 ml il cui collo termini con
una svasatura in modo da poter sciacquare il collo stesso senza
perdite, versare 20 ml di soluzione titolata di bicromato di potassio
(3.1), 20 ml di acido solforico diluito ½ (v/v) (3.4) e agitare.
Aggiungere 20 ml di distillato. Tappare la beuta, agitare e lasciare
trascorrere almeno 30 minuti agitando di tanto in tanto (beuta
«campione»).
4.3. Titolazione
Titolare l'eccesso di bicromato con la soluzione di solfato di ferro II
e ammonio (3.2) dopo aver aggiunto 4 gocce di reattivo all'ortofe-
nantrolina (3.5). Arrestare la titolazione quando la colorazione
passa dall'azzurro verde al marrone.
Per individuare con maggiore precisione il punto di viraggio, ritor-
nare dal marrone all'azzurro-verde con la soluzione di
permanganato di potassio (3.3). Sottrarre un decimo del volume
impiegato di questa soluzione dal volume della soluzione di solfato
di ferro II impiegato, sia n tale differenza.
Ripetere lo stesso procedimento titolando in una beuta identica alla
precedente le stesse quantità di reattivi sostituendo i 20 ml di distil-
lato con 20 ml di acqua (beuta «bianco»). Sia n ′ladifferenza .
5. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
L'etanolo è espresso in grammi per chilogrammo di zuccheri totali
con unacifradecima le.
5.1.Calcolo
n′ml di soluzione ferrosariducono 20 ml di soluzione di bicroma to
che ossidano 157,85 mg di etanolo puro.
Un millilitro di soluzione di ferro II halo stesso potere riducente di:
157 ;85
n0mg di etanolo1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 182
▼B
n′− n ml di soluzione di ferro II hanno lo stesso potere riducente di:
157 ;85/C1n0/C0n
n0mg di etanolo
Etanolo in g/kg di mosto concentrato rettificato:
7;892/C1n0/C0n
n0
Etanolo in g/kg di zuccheri totali:
789 ;2/C1n0/C0n
n0/C1P
dove
P = tenore percentuale (m/m) in zuccheri totali.
f) MESO-INOSITOLO, SCILLO-INOSITOLO E SACCAROSIO
1. PRINCIPIO DEL METODO
Cromatografia in fase gassosa di derivati silanizzati.
2. REAGENTI
2.1. Standard interno: xilitolo (soluzione acquosa di circa 10 g/l aggiunta
di una punta di spatola di sodio azide)
2.2. Bistrimetilsililtrifluoroacetamide — BSTFA — (C8H18F3NOSi2)
2.3. Trimetilclorosilano (C3H9ClSi)
2.4. Piridinap. a . (C5H5N)
2.5. Meso-inositolo (C6H12O6)
3. APPARECCHIATURA
3.1.Gascromatografodotatodi:
3.2. Colonna capillare (per esempio in silice fusa, OV 1, spessore del
film di 0,15 µ, lunghezzadi 25 m e dia metro interno di 0,3 mm).
Condizioni di lavoro: fase di trasporto: idrogeno o elio
— flusso del gas di trasporto: circa 2 ml/minuto,
— temperatura dell'iniettore e del rivelatore: 300 ºC,
— programmazione di temperatura: 1 minuto a 160 ºC, 4 ºC/minuto
fino a260 ºC, isotermaa260 ºC per 15 minuti,
— rapporto di splittaggio: circa 1 a 20.
3.3. Integratore.3.4. Siringamicrometricada10 µl.
3.5. Micropipette da50, 100 e 200 µl.
3.6. Fiale da 2 ml con tappo teflonato.3.7. Stufa.
4. MODO DI OPERARE
Circa 5 g di MCR, esattamente pesati in un matraccio da 50 ml sono
aggiunti di 1 ml di soluzione standard di xilitolo (2.1) e portati a
volume con acqua. Dopo omogeneizzazione del campione si prele-
vano 100 µl di soluzione che si pongono in fiala (3.6) e si portano
a secchezza sotto leggera corrente d'aria, previa eventuale aggiunta
di 100 µl di etanolo assoluto per facilitare l'evaporazione.
Il residuo si scioglie accuratamente in 100 µl di piridina (2.4), si
aggiungono 100 µl di bis-trimetilsililtrifluoroacetamide (2.2) e 10 µl
di trimetilclorosilano (2.3), si sigilla la fiala con tappo teflonato e si
pone in stufaa60 ºC per un'ora .1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 183
▼B
Si prelevano 0,5 µl del limpido iniettando ad ago vuoto e caldo con
lo splittaggio sopraindicato.
5. CALCOLO DEI FATTORI DI RISPOSTA
5.1.Sipreparaunasoluzionecontenente:
glucosio 60 g/l, fruttosio 60 g/l, meso-inositolo 1 g/l e saccarosio 1
g/l.
Si pesano 5 g di detta soluzione e si procede come al punto 4. Si
calcolano dal cromatogramma ottenuto i fattori di risposta del
meso-inositolo e del saccarosio rispetto allo xilitolo.
Per lo scillo-inositolo, non disponibile in commercio, che haun
tempo di ritenzione compreso fral'ultimo picco delle forme a nome-
riche del glucosio e quello del meso-inositolo (vedi figura allegata),
si usalo stesso fa ttore di rispostaottenuto per il meso-inositolo.
6. ESPRESSIONE DEI RISULTATI
6.1. Il meso-inositolo e lo scillo-inositolo si esprimono in mg/kg di
zuccheri totali. Il saccarosio si esprime in g/kg di mosto.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 184
▼B
Figura: Cromatogramma in fase gassosa del meso-inositolo, dello scillo-inositolo
e del saccarosio.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 185
▼M4
43.DETERMINAZIONE DEL RAPPORTO ISOTOPICO18O/16O
DELL'ACQUACONTENUTANEIVINI
I. DESCRIZIONE DEL METODO
1.ScopodelMetodo
Il presente metodo ha lo scopo di misurare il rapporto isotopico
18O/16O di acque di diverse origini. Il rapporto isotopico18O/16O può
essere espresso come deviazione δ‰ in relazione al valore del
rapporto isotopico del riferimento internazionale V.SMOW:
δiè0½/C138 ¼Ri
RSMOW/C01/C20/C21
/C21000
2.Principio
Il rapporto isotopico18O/16O è determinato per spettrometria di
massa dei rapporti isotopici (SMRI) a partire dalle correnti ioniche
m/z 46 (12C16O18O) e m/z 44 (12C16O2) prodotte dall'anidride carbo-
nica ottenuta dopo lo scambio con l'acqua contenuta nel vino,
secondo larea zione:
C16O2+H218O↔C16O18O+H216O
L'anidride carbonica della fase gassosa è utilizzata per l'analisi.
3.Reattivi
— Anidride carbonica per analisi
— SMOW (Standard Mean Ocean Water)— GISP (Greenland Ice Sheet Precipitation)— SLAP (Standard Light Arctic Precipitation)
— Acqua di riferimento del laboratorio, accuratamente tarata sui
campioni di riferimento dell'Agenzia internazionale per l'energia
atomica di Vienna (IAEA).
4.Apparecchiaturadilaboratorio
— Spettrometro di massa di rapporti isotopici, con ripetibilità
internadello 0,05 ‰;
— triplo collettore per la registrazione simultanea degli ioni m/z 44,
45 e 46, o, in mancanza di questo, doppio collettore per la misu-
razione degli ioni m/z 44 e 46;
— sistema termostatato (± 0,5 ºC) per raggiungere l'equilibrio tra la
CO
2e l'acqua contenuta nel vino;
— pompa a vuoto capace di raggiungere una pressione interna di
0,13 Pa;
— boccetta per il campione con volume di 15 ml e tubo capillare
annesso, con diametro interno dell'ordine di 0,015 mm;
— pipetta Eppendorf con puntale in plastica a perdere.
5.Determinazioni sperimentali
5.1. Metodo manuale
Modalità operative del metodo di equilibratura
Introduzione del campione
— Adattare un puntale alla pipetta Eppendorf a volume fisso di
1,5 ml e pipettare il liquido da analizzare in un pallone. Spal-
mare il collo del pallone con grasso al silicone e adattare il
pallone alla valvola, verificando che questa sia ben chiusa.
— Ripetere l'operazione per ciascun pallone della rampa di lavoro,
introducendo l'acqua di riferimento del laboratorio in uno dei
palloni.
Degassaggio della rampa
Raffreddare le due rampe con azoto liquido, quindi spurgare tutto il
sistema fino a 0,1 mm Hg aprendo le valvole.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 186
▼M4
Richiudere poi le valvole e lasciare riscaldare l'insieme. Ripetere il
ciclo di degassaggio fino a pressione costante.
Equilibra turadell'a cquae dellaCO2
Raffreddare la rampa di lavoro − 70 ºC (con una miscela di azoto
liquido e alcool) per far gelare l'acqua e mettere l'insieme sottovuoto. Dopo la stabilizzazione del vuoto, isolare la rampa mediante
la valvola e spurgare il sistema d'introduzione della CO
2. Introdurre
laCO2gassosa nella rampa di lavoro e, dopo averla isolata dal resto
del sistema, immergere la rampa nel bagno termostatato a 25 ºC
(± 0,5 ºC) per 12 ore (una notte). Per ottimizzare il tempo necessario
all'equilibratura si consiglia di preparare i campioni alla fine della
giornata e di lasciare che l'equilibrio si stabilisca durante la notte.
Trasferimento della CO2scambiata nelle celle di misura
Adattare alla linea a vuoto a lato della rampa di lavoro un portacam-
pioni capace di contenere un ugual numero di celle di misura e di
palloni contenenti la CO2scambiata. Spurgare accuratamente le celle
vuote e trasferire successivamente i gas scambiati contenuti nei
palloni nelle celle di misura raffreddate con l'azoto liquido. Lasciare
infine riscaldare le celle di misura a temperatura ambiente.
5.2. Utilizzazione di un apparecchio di scambio automatico
Per ottenere l'equilibrio riempire labocettaper il ca mpione con 2 ml
di vino o 2 ml d'acqua (riferimento di lavoro del laboratorio) e
raffreddarli a − 18 ºC. Adattare al sistema di equilibratura i porta-
campioni contenenti i prodotti congelati e, dopo aver fatto il vuoto
nel sistema, introdurre l'anidride carbonica ad una pressione di
800 hPa.
L'equilibrio è raggiunto a una temperatura di 22 ± 0,5 ºC dopo un
minimo di 5 ore e agitazione moderata. Poiché la durata dell'equili-
bratura dipende dalla forma geometrica della boccetta, è necessario
determinare in precedenza la durata ottimale per il sistema utilizzato.
Trasferire successivamente l'anidride carbonica contenuta nelle
boccette nella camera di introduzione dello spettrometro di massa
tramite un tubo capillare ed effettuare la misurazione secondo il
protocollo specifico per ciascun tipo di apparecchio.
6.Calcoloeespressionedeirisultati
Ladifferenzarela tiva δ′del rapporto della intensità degli ioni m/z
46 e 44 (I46/I44) tra il campione e il riferimento è espressa in ‰ dalla
relazione seguente:
δ0campione ¼I46=I44 ðÞ campione
I46=I44 ðÞ riferimento/C01/C20/C21
/C21000
Il tenore in18O del campione in rapporto al termine di riferimento
V.SMOW sulla scala V.SMOW-SLAP è dato dalla relazione:
δ018O ¼δ0campione /C0δ0SMOW
δ0SMOW /C0δ0SLAP/C20/C21
/C255;5
Il valore accettato per l'acqua dello SLAP è uguale a − 55,5 ‰
rispetto al V.SMOW. Il rapporto isotopico del riferimento deve
essere determinato dopo ogni serie di 10 misurazioni su campioni
sconosciuti.
7.Ripetibilitàeriproducibilità dellamisura
— La ripetibilità (r) è uguale allo 0,24 ‰
— la riproducibilità (R) è uguale allo 0,50 ‰.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 187
▼M7
44.DOSAGGIO DEL CARBAMMATO DI ETILE NEI VINI: METODO
DI RIVELAZIONE SELETTIVA PER CROMATOGRAFIA IN FASE
GASSOSA/SPETTROMETRIADIMASSA
(Applicabile nella determinazione del carbammato di etile per concentrazioni
comprese tra10 e 200 µg/l).
(Attenzione: rispettare le prescrizioni di sicurezza per le manipolazioni dei
prodotti chimici, per l'etanolo, l'acetone ed i prodotti cancerogeni: carbammato
di etile e diclorometano. Per lo smaltimento dei solventi usati attenersi a
modalità conformi alle norme e ai regolamenti ecologici in materia).
A.Principio delmetodo
Il carbammato di propile viene aggiunto ad un campione come standard
interno, lasoluzione viene diluitacon a cquae viene postain unacolonna
di estrazione in fase solida da 50 ml. Il carbammato di etile e il carbammato
di propile vengono eluiti con diclorometano.
L'eluato viene concentrato mediante un evaporatore a rotazione sotto vuoto.
Il concentrato viene analizzato per cromatografia in fase gassosa (CG); la
rivelazione viene effettuata mediante spettrometria di massa per fragmento-
metriain modo SIM (Selected ions monitoring).
B.Apparecchiaturaecondizioni cromatografiche (datiatitoloesemplifica-
tivo)
a) Gascromatografo/spettrometro di massa (CG/SM) ed eventualmente un
dispositivo di trasporto di campioni ed un sistema di trattamento dati o
equivalente.
Colonna capillare di silice 30 m (1) × 0,25 mm diametro interno 0,25 µm
di pellicola di tipo Carbowax 20M.
Modo di operare: iniettore 180 ºC, gas vettore elio a 1 ml/min. e a 25 ºC,
iniezione secondo il metodo «Splitless/split».
Programma temperatura: 40 ºC per 0,75 minuti, poi programmazione a
10 ºC/minuto sino a60 ºC, poi 3 ºC/minuto sino a150 ºC (2), arrivare a
220 ºC e poi mantenere a questa temperatura per 4,25 minuti. Il tempo di
ritenzione specifica del carbammato di etile è di 23-27 minuti, quello del
carbammato di metile è di 27-31 minuti.
Gascromatografo/spettrometro (CG/SM) interfaccia: linea di trasferimento
220 ºC. Parametri dello spettrometro di massa regolati manualmente con
perflurotributilammina ed ottimizzati per una sensibilità di massa più
bassa, modo di acquisizione (SIM), termine solvente e tempo di inizio
dell'acquisizione 22 minuti, tempo di mantenimento/ione 100 ms.
b) Evaporatore a rotazione sotto vuoto o dispositivo di concentrazione di
tipo KudernaDa nish
[NB:Il tasso di recupero del carbammato di etile del campione test, C(g),
deve essere compreso trail 90 e il 110 % dura nte il processo].
c) Beuta — a forma di pera, 300 ml, collo unico smerigliato.
d) Tubo di concentrazione — 4 ml, graduato, con un giunto a pellicola di
teflon e tappo.
C.Reattivi
a) Acetone — qualità LC
NB:(Verificare ogni lotto prima dell'utilizzazione in CG/SM per quanto
riguarda l'assenza di risposta per gli ioni di m/z 62, 74 e 89.)
b) Diclorometano
(NB:Analizzare ogni lotto prima dell'utilizzazione in CG/SM dopo
concentrazione 200 volte, concentrazione per verificare l'assenza di
rispostaper gli ioni di m/z 62, 74 e 89.)
c) Etanolo — anidro
d) Carbammato di etile (CE), soluzioni standard
1. Soluzione «madre» — 1,00 mg/ml. Pesare 100 mg CE
(purezza ≥99 %) in unabeutavolumetricada100 ml e diluire con
acetone.1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 188
(1) Per certi vini particolarmente ricchi, è consigliabile utilizzare una colonna capillare di
50 m di lunghezza.
(2) Per certi vini particolarmente ricchi, può essere consigliabile effettuare una programma-
zione dellatempera turadi 2 ºC/minuto.
▼M7
2. Soluzione standard di lavoro — 10,0 µg/ml. Trasferire 1 ml della solu-
zione «madre» CE in una beuta volumetrica da 100 ml e diluire con
acetone sino al livello della tacca.
e) Carbammato di propile (CP), soluzioni standard
1. Soluzione «madre» — 1,00 mg/ml. Pesare 100 mg CP (qualità reat-
tivo) in unabeutavolumetricada100 ml e diluire con a cetone sino
al livello della tacca.
2. Soluzione standard di lavoro — 10,0 µg/ml. Trasferire 1 ml della solu-
zione madre CP in una beuta volumetrica da 100 ml e diluire con
acetone sino al livello della tacca.
3. Soluzione standard interno CP — 400 ng/ml. Trasferire 4 ml di solu-
zione standard di lavoro in una beuta volumetrica da 100 ml e diluire
con acqua sino al livello della tacca.
f) Soluzioni standard calibrate CE-CP
Diluire le soluzioni standard di lavoro di CE, d) 2, e CP e) 2, con diclo-
rometano ottenendo:
1. (100 ng CE e 400 ng CP)/ml;
2. (200 ng CE e 400 ng CP)/ml;
3. (400 ng CE e 400 ng CP)/ml;4. (800 ng CE e 400 ng CP)/ml;
5. (1 600 ng CE e 400 ng CP)/ml.
g) Campione test — 100 ng CE/ml in 40 % di etanolo.
Trasferire 1 ml delle soluzioni standard di lavoro CE, d) 2 in una beuta
volumetrica da 100 ml e diluire con 40 % di etanolo sino al livello della
tacca.
h) Colonna di estrazione in fase solida — Materiale monouso, preconfezio-
nato con terra di diatomee, capacità 50 ml
NB:Prima dell'analisi, verificare ogni lotto di colonne di estrazione per il
recupero del CE e del CP, e l'assenza di risposta per gli ioni di m/z 62,
74 e 89. Preparare 100 ng CE/ml di campione test (g). Analizzare 5,00 ml
del campione test come descritto in D a), E e F. Il recupero di 90-110 ng
di CE/ml è soddisfacente. Adsorbenti con particelle di diametro irregolare
possono comportare flussi molto lenti che influiscono sul recupero del
CE e del CP. Se dopo diverse prove non si è ottenuto il 90-110 % del
valore del campione test, cambiare la colonna o utilizzare una curva di
taratura di recupero corretta per quantificare il CE. Per ottenere la curva
di taratura corretta, preparare delle soluzioni standard come descritto in f)
utilizzando 40 % di etanolo invece di diclorometano.
Analizzare 1 ml della soluzione standard di taratura come descritto in D,
EeF .
Costruire una nuova curva di taratura utilizzando il rapporto CE/CP degli
standard estratti.
D.Preparazione delcampionetest
Porre il materiale test in due becher distinti da 100 ml utilizzando le seguenti
quantità:
a) per vini con titolo alcolometrico volumico maggiore del 14 % vol.:
5,00 ± 0,01 ml;
b) per vini con titolo alcolometrico volumico pari al massimo al 14 % vol.:
20,00 ± 0,01 ml.
In ciascun becher aggiungere 1 ml di soluzione CP di standard interno, C e)
3 ed acqua per ottenere un volume totale di 40 ml (o 40 g).
E.Estrazione
Eseguire l'estrazione sotto la cappa aspirante con ventilazione adeguata.Trasferire il preparato di cui alla lettera D nella colonna di estrazione.Risciacquare il becher con 10 ml di acqua e trasferire l'acqua di risciacquo
nellacolonna .
Lasciare che il liquido si absorba nella colonna per 4 minuti. Eluire con 2 ×
80 ml di diclorometano. Raccogliere l'eluato in una beuta conica da 300 ml.
Evaporare l'eluato sino a 2-3 ml mediante l'evaporatore a rotazione in bagno-
maria a 30 ºC ( NB:non lasciare evaporare a secco).1990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 189
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Trasferire il residuo concentrato in un tubo graduato da 4 ml con una pipetta
Pasteur.
Sciacquare la beuta con 1 ml di diclorometano e trasferire il liquido di
lavaggio nel tubo. Concentrare il campione ad 1 ml in debole corrente di
azoto
Trasferire eventualmente il concentrato in una beuta del dispositivo di
trasporto del campione per l'analisi CG/SM.
F.AnalisiCG/SM
a) Curva di taratura
Iniettare 1 µl di ognuna delle soluzioni standard calibrate C f), in CG/SM.
Tracciare il grafico del rapporto delle aree CE-CP per la risposta dello
ione m/z 62 sull'asse delle ordinate e riportare sulle ascisse la quantità
di CE in ng/ml (ossia100, 200, 400, 800, 1 600 ng/ml).
b) Quantificazione CE
Iniettare 1 µl di estratto concentrato di E nel sistema CG/SM e calcolare
i1 rapporto delle aree CE-CP per lo ione m/z 62. Determinare la concen-
trazione CE (ng/ml) nell'estratto, utilizzando la curva di taratura standard
interno. Calcolare la concentrazione CE nel campione test (ng/ml) divi-
dendo la quantità di CE (ng) nell'estratto per il volume del campione
test (ml).
c) Verificadellapurezzadel CE
Determinare se le risposte per gli ioni di m/z 62, 74 e 89 appaiono nel
tempo di ritenzione del CE. Queste risposte sono le caratteristiche rispet-
tivamente dei principali fragmenti (M - C2H2)+ e (M - CH3)+ e dello ione
molecolare (M)+. La presenza di CE è confermata se le relative propor-
zioni di detti ioni non si discostano di oltre il 20 % dalle proporzioni
per lo standard di CE. È possibile che occorra riconcentrare l'estratto per
ottenere unarispostasufficiente per lo ione di m/z 89.
G.Analisicollaborativa
La tabella riporta i singoli risultati per il campione di prova pratica e per i
due tipi di vino.
L'applicazione del test di Cochran ha comportato l'eliminazione di una sola
coppia di risultati, sia per il vino con titolo alcolometrico maggiore di 14 %
vol. che per il vino con titolo alcolometrico minore o uguale a 14 % vol.,
ciascuno proveniente da un laboratorio differente.
La riproducibilità relativa tende a diminuire con l'aumento della concentra-
zione di carbammato di etile.
Risultati del metodo per la determinazione della presenza di carbammato di etile CE nelle
bevandealcoliche medianteCG/SM
CampioneMediadi
CE trovato
(ng/ml)Ricupero
di CE
aggiunto
(%)SrSRRSDr(%)RSDR(%)
Vino con titolo alcolo-
metrico maggiore di
14 % vol.40 1,59 4,77 4,01 12,02
80 89 3,32 7,00 4,14 8,74
162 90 8,20 11,11 5,05 6,84
Vino con titolo alcolo-
metrico minore di 14 %
vol.11 0,43 2,03 3,94 18,47
25 93 1,67 2,67 6,73 10,73
48 93 1,97 4,25 4,10 8,861990R2676 — IT — 21.04.1999 — 006.001 — 190