2002D0225 — IT — 16.03.2002 — 000.001 — 1
Trattandosidiunsemplice strumentodidocumentazione,essononimpegnalaresponsabilitàdelleistituzioni
►B DECISIONEDELLACOMMISSIONE
del15marzo2002
che fissa norme specifiche per l'attuazione della direttiva 91/492/CEE del Consiglio per quanto
concerne i tenori massimi e i metodi d'analisi di talune biotossine marine in molluschi bivalvi,
echinodermi, tunicatiegasteropodimarini
[notificata con il numero C(2002) 1001]
(Testorilevante aifinidelSEE)
(2002/225/CE)
(GU L 75 del 16.3.2002, pag. 62)
Rettificata da:
►C1Rettifica, GU L 46 del 20.2.2003, pag. 32 (2002/225/CE)
▼B
DECISIONEDELLACOMMISSIONE
del15marzo2002
che fissa norme specifiche per l'attuazione della direttiva 91/492/
CEEdelConsiglioperquantoconcerneitenorimassimieimetodid'analisi di talune biotossine marine in molluschi bivalvi, echino-
dermi, tunicatiegasteropodimarini
[notificata con il numero C(2002) 1001]
(Testorilevante aifinidelSEE)
(2002/225/CE)
LA COMMISSIONE DELLE COMUNITÀ EUROPEE,
visto il trattato che istituisce la Comunità europea,
vista la direttiva 91/492/CEE del Consiglio, del 15 luglio 1991, che
stabilisce le norme sanitarie applicabili alla produzione e alla commer-
cializzazione dei molluschi bivalvi vivi (1), modificata da ultimo dalla
direttiva 97/79/CE (2), in particolare il capitolo V, paragrafi 3 e 5,
dell'allegato,
considerando quanto segue:
(1)Il capitolo V, punto 7, dell'allegato alla direttiva 91/492/CEE
stabilisce che i consueti metodi di analisi biologica non devonodare reazione positiva alla presenza di veleno diarreogeno(«Diarrhetic Shellfish Poisoning» — DSP) nelle parti commesti-
bili dei molluschi (corpo intero o parti consumabili
separatamente).
(2)È scientificamente provato che alcune biotossine marine qualiquelle del complesso DSP [acido okadaico (OA) e dinophysitos-sine (DTX)], come pure le yessotossine (YTX), le pectenotossine(PTX) e gli azaspiracid (AZA), costituiscono un grave rischioper la salute umana qualora presenti oltre certi limiti nei mollu-schi bivalvi, negli echinodermi, nei tunicati o nei gasteropodi
marini.
(3)Alla luce di recenti studi scientifici, è ora possibile stabilire i
tenori massimi e i metodi d'analisi per queste biotossine.
(4)I tenori massimi e i metodi d'analisi devono essere armonizzati eattuati dagli Stati membri per proteggere la salute umana.
(5)Oltre ai metodi di analisi biologica, saranno accettati metodialternativi di rilevamento, quali metodi chimici e test in vitro,purché sia dimostrato che le prestazioni dei metodi prescelti
non sono meno efficaci di quelle del metodo biologico e che la
loro applicazione fornisce un livello equivalente di tutela dellasalute pubblica.
(6)I tenori massimi proposti si basano su dati provvisori e dovrannoessere riesaminati quando saranno disponibili nuovi risultatiscientifici.
(7)Le disposizioni previste dalla presente decisione sono conformial parere del comitato veterinario permanente,
HA ADOTTATO LA PRESENTE DECISIONE:
Articolo 1
La presente decisione stabilisce i tenori massimi di biotossine marine
del complesso DSP (acido okadaico e dinophysitossine), yessotossine,
pectenotossine e azaspiracid, nonché i metodi d'analisi da impiegareper la loro determinazione. Si applica a molluschi bivalvi, echinodermi,2002D0225 — IT — 16.03.2002 — 000.001 — 2
(1) GU L 268 del 24.9.1991, pag. 1.
(2) GU L 24 del 30.1.1998, pag. 31.
▼B
tunicati e gasteropodi marini destinati al consumo umano immediato o
ad ulteriore lavorazione prima del consumo.
Articolo 2
Il tenore massimo complessivo di acido okadaico, dinophysitossine e
pectenotossine negli animali di cui all'articolo 1 (corpo intero o parti
consumabili separatamente) è fissato a 160 µg di equivalente acido
okadaico/kg. I metodi d'analisi sono definiti nell'allegato.
Articolo 3
Il tenore massimo di yessotossine negli animali di cui all'articolo 1
(corpo intero o parti consumabili separatamente) è fissato a 1 mg diequivalente yessotossina/kg. I metodi d'analisi sono definiti nell'alle-gato.
Articolo 4
Il tenore massimo di azaspiracid negli animali di cui all'articolo 1
(corpo intero o parti consumabili separatamente) è fissato a 160 µgd i
equivalente azaspiracid/kg. I metodi d'analisi sono definiti nell'allegato.
Articolo 5
Nel caso in cui i risultati delle analisi condotte dimostrino discrepanze
tra i diversi metodi, il metodo di riferimento è il biotest sui topi.
Articolo 6
Gli Stati membri sono destinatari della presente decisione.2002D0225 — IT — 16.03.2002 — 000.001 — 3
▼B
ALLEGATO
METODIDIDETERMINAZIONE
Metodibiologici
Una serie di procedure di biotest sui topi, che differiscono nella parte test
(epatopancreas o corpo intero) e nei solventi utilizzati per le fasi di estrazione
e purificazione, può essere utilizzata per la determinazione delle tossine di cui
all'articolo 1. Sensitività e selettività dipendono dalla scelta dei solventi utiliz-
zati per le fasi di estrazione e purificazione e di ciò occorre tenere conto in
sede di decisione del metodo da utilizzare al fine di coprire l'intera gamma di
tossine.
Un unico biotest sui topi, che comporta estrazione di acetone, può essere utiliz-
zato per individuare acido okadaico, dinophysitossine, pectenotossine e
yessotossine. Il test può essere, se necessario, completato mediante fasi di sepa-
razione liquido/liquido con acetato d'etile/acqua o diclorometano/acqua per
eliminare potenziali interferenze. L'individuazione di azaspiracidi a livello rego-
lamentare mediante tale procedura richiede l'impiego del corpo intero nella
porzione test.
Per ogni test occorre utilizzare tre topi. La morte di due topi su tre entro 24 ore
dall'inoculazione in ciascuno di essi di un estratto equivalente a 5 g di epatopan-
creas o 25 g del corpo intero deve essere considerato un risultato positivo della
presenza di una o più delle tossine di cui all'articolo 1 a livelli superiori a quelli
fissati dall'articolo 2, dall'articolo 3 e dall'articolo 4.
Un biotest sui topi con estrazione di acetone mediante separazione liquido/
liquido con etere etilico può ►C1essere utilizzato per individuare acido
okadaico, tossine da dinoflagellate, pectenotossine e azaspiracidi, ma non per
individuare yessotossine in quanto perdite di tali tossine ◄possono verificarsi
nella fase di separazione. Per ogni test occorre utilizzare tre topi. La morte di
due topi su tre entro 24 ore dall'inoculazione in ciascuno di essi di un estratto
equivalente a 5 g di epatopancreas o 25 g del corpo intero ►C1deve essere
considerato un risultato positivo della presenza di acido okadaico, tossine da
dinoflagellate, pectenotossine e azaspiracidi a livelli superiori a quelli di cui
all'articolo 2 e all'articolo 4. ◄
Il biotest sui ratti può individuare acido okadaico, tossine da dinoflagellate e
azaspiracidi. Per ogni test occorre utilizzare tre ratti. Una reazione diarreogena
dei tre ratti è considerata risultato positivo della presenza di acido okadaico,
tossine da dinoflagellate e azaspiracidi a livelli superiori a quelli di cui all'arti-
colo 2 e all'articolo 4.
Metodialternativi dideterminazione
Una serie di metodi quali la cromatografia liquida ad alto rendimento (HPLC)
con determinazione fluorimetrica, la cromatografia liquida (LC)-spettrometria
di massa (MS), immunosaggi e test funzionali quali il test di inibizione della
fosfatasi possono essere utilizzati come metodi alternativi o complementari ai
metodi di prova biologici a condizione che, da soli o in combinazione, siano in
grado di determinare almeno ►C1i seguenti analoghi, che non siano meno
efficaci dei metodi biologici e che la loro applicazione fornisca un livello equi-
valente di tutela della salute pubblica: ◄
— acido okadaico e tossine da dinoflagellate: può risultare necessaria una fase
idrolitica per individuare la presenza di DTX3,
— pectenotossine: PTX1 e PTX2,
— yessotossine: YTX, 45 OH YTX, Homo YTX, e 45 OH Homo YTX,
— azaspiracidi: AZA1, AZA2 e AZA3.
Se vengono scoperti nuovi analoghi che rivestono importanza per la sanità
pubblica, occorre includerli nell'analisi. Dovranno essere disponibili degli stan-
dard prima che sia possibile l'analisi chimica. La tossicità complessiva è
calcolata valendosi di fattori di conversione basati sui dati di tossicità disponibili
per ciascuna tossina.
Le caratteristiche di rendimento di tali metodi devono essere definite e convali-
date da un protocollo concordato a livello internazionale.2002D0225 — IT — 16.03.2002 — 000.001 — 4