1973L0046 — IT — 26.05.1999 — 004.001 — 1
Trattandosidiunsemplicestrumentodidocumentazione,essononimpegnalaresponsabilitàdelleistituzioni
►B QUARTADIRETTIVADELLACOMMISSIONE
del5dicembre1972
chefissaimetodid'analisicomunitaripericontrolliufficialideglialimentiperglianimali
(73/46/CEE)
(GU L 83 del 30.3.1973, pag. 21)
Modificata da:
Gazzetta ufficiale
n. pag. data
►M1Direttiva 81/680/CEE della Commissione del 30 luglio 1981 L 246 32 29.8.1981
►M2Direttiva 92/89/CEE della Commissione del 3 novembre 1992 L 344 35 26.11.1992
►M3Direttiva 98/54/CE della Commissione del 16 luglio 1998 L 208 49 24.7.1998
►M4Direttiva 1999/27/CE della Commissione del 20 aprile 1999 L 118 36 6.5.1999
▼B
QUARTADIRETTIVADELLACOMMISSIONE
del5dicembre1972
chefissaimetodid'analisicomunitaripericontrolli ufficialidegli
alimentiperglianimali
(73/46/CEE)
LA COMMISSIONE DELLE COMUNITÀ EUROPEE,
visto il trattato che istituisce la Comunità economica europea,vista la direttiva del Consiglio, del 20 luglio 1970, concernente l'intro-
duzione di modi di prelevamento dei campioni e di metodi d'analisi
comunitari per il controllo ufficiale degli alimenti per gli animali(
1),
modificata dalla direttiva n. 72/275/CEE del 20 luglio 1972(2), in parti-
colare l'articolo 2,
considerando che la suddetta direttiva prevede che i controlli ufficiali
degli alimenti per gli animali destinati a constatare l'osservanza dellecondizioni prescritte in virtù delle disposizioni legislative, regolamen-tari o amministrative concernenti le qualità e la composizione degli
alimenti per gli animali, siano effettuati secondo i modi di preleva-
mento di campioni ed i metodi di analisi comunitari;
considerando che le direttive n. 71/250/CEE, n. 71/393/CEE e n. 72/
199/CEE della Commissione, del 15 giugno 1971(
3), del 18 novembre
1971(4) e del 27 aprile 1972(5) hanno già fissato un certo numero di
metodi di analisi comunitari; che, tenuto conto dello stato d'avanza-
mento dei lavori sin qui effettuati, è necessario adottare una quarta
serie di metodi;
considerando che le misure previste dalla presente direttiva sono
conformi al parere del Comitato permanente degli alimenti per glianimali,
HA ADOTTATO LA PRESENTE DIRETTIVA:
Articolo 1
Gli Stati membri prescrivono che le analisi per i controlli ufficiali degli
alimenti per gli animali, per quanto riguarda il contenuto in umidità deigrassi e degli oli animali e vegetali e per quanto riguarda i contenuti in
magnesio e con cellulosa grezza degli alimenti, siano effettuate
secondo i metodi descritti all' allegato I della presente direttiva.
Articolo 3
Gli Stati membri mettono in vigore, non oltre il 1ogennaio 1974, le
disposizioni legislative, regolamentari o amministrative necessarie per
conformarsi alle disposizioni della presente direttiva e ne informanoimmediatamente la Commissione.
Articolo 4
Gli Stati membri sono destinatari della presente direttiva.1973L0046 — IT — 26.05.1999 — 004.001 — 2
(1) GU n. L 170 del 3. 8. 1970, pag 2.
(2) GU n. L 171 del 29. 7. 1972, pag. 39.
(3) GU n. L 155 del 12. 7. 1971, pag. 13.
(4) GU n. L 279 del 20. 12. 1971, pag. 7.
(5) GU n. L 123 del 29. 5. 1972, pag. 6.▼M1
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ALLEGATO I
1.DETERMINAZIONE DELL'UMIDITÀ NEI GRASSI E NEGLI OLI
ANIMALIEVEGETALI
1.Scopoecampod'applicazione
Il metodo permette di determinare il contenuto in umidità (acqua ed altre
materie volatili) dei grassi e degli oli animali e vegetali.
2.Principio
Il campione viene sottoposto ad essiccazione a 103ºC fino a cessazione della
diminuzione di massa. La perdita di massa viene determinata per pesata.
3.Apparecchiatura
3.1. Recipiente a fondo piano, di materiale resistente alla corrosione,
diametro: da cm 8 a 9, altezza: circa cm 3
3.2. Termometro a mercurio con bulbo rinforzato e camera di espansione
all'estremità superiore, graduato da circa 80ºC ad almeno 110ºC,
lunghezza: circa cm 10.
3.3. Bagno di sabbia o piastra elettrica riscaldante
3.4. Essiccatore, contenente un efficace disidratante3.5. Bilancia analitica
4.Mododioperare
Pesare, con l'approssimazione di mg 1, circa g 20 del campione omogeneiz-
zato nel recipiente (3.1), essiccato e tarato, contenente il termometro (3.2).
Riscaldare sul bagno di sabbia o sulla piastra riscaldante (3.3), agitando
continuamente con il termometro, in modo da far salire la temperatura a
90ºC in circa 7 minuti.
Ridurre l'intensità del riscaldamento secondo la frequenza con la quale le
bolle risalgono dal fondo del recipiente. La temperatura non deve superare i
105ºC. Continuare ad agitare raschiando il fondo del recipiente sino a quando
non si formano più bolle.
Per assicurare l'eliminazione completa dell'umidità, riscaldare più volte a
103ºC ± 2ºC, raffreddando a 93ºC tra i riscaldamenti successivi. Lasciar
quindi raffreddare nell'essiccatore (3.4), sino a temperatura ambiente e
pesare. Ripetere l'operazione fino a quando la perdita di massa tra due pesate
successive non supera mg 2.
N.B.Un aumento della massa del campione dopo i ripetuti riscaldamenti
indica un'ossidazione del grasso. In questo caso, calcolare il risultato
basandosi sulla pesata effettuata immediatamente prima che la massa
abbia incominciato ad aumentare.
5.Calcolodeirisultati
Il contenuto in umidità, in per cento del campione, è dato dalla seguente
formula:
(M
1−M2)·Mo100
in cui:M
o= massa, in grammi, della quantità di prodotto sottoposta all'analisi
M1= massa, in grammi, del recipiente con il suo contenuto prima del
riscaldamento
M2= massa, in grammi, del recipiente con il suo contenuto dopo il riscal-
damento.
I risultati inferiori a 0,05 % debbono essere riportati con la dizione «meno di
0,05 %».
Ripetibilità
La differenza tra i risultati di due determinazioni parallele, effettuate sullo
stesso campione, non deve oltrepassare 0,05 % in valore assoluto.1973L0046 — IT — 26.05.1999 — 004.001 — 3
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2.DETERMINAZIONEDELMAGNESIO
— per spettrofotometria d'assorbimento atomico —
1.Scopoecampodiapplicazione
Il metodo permette di determinare il magnesio nei mangimi. Esso è partico-
larmente adatto per determinare i contenuti di magnesio inferiori al 5 %.
2.Principio
Il campione viene incenerito e sciolto nell'acido cloridrico diluito. Se non
contiene sostanze organiche, viene sciolto direttamente all'acido cloridrico
diluito. La soluzione viene diluita e il contenuto di magnesio viene determi-
nato con la spettrofotometria d'assorbimento atomico a 285,2 nm, per
raffronto con soluzioni tipo.
3.Reattivi
3.1. Acido cloridrico p.a., d: 1,163.2. Acido cloridrico p.a., d: 1,19
3.3. Magnesio, in nastro o filo, o solfato di magnesio MgSO
4·7H2O p.a.
essiccato nel vuoto a temperatura ambiente
3.4. Soluzione di sale di stronzio (cloruro o nitrato) al 2,5 % (p/v) di stronzio
(= 76,08 g di SrCl2·6H2O p.a./1 o 60,38 g di Sr (NO3)2p.a./1).
3.5. Soluzione tipo di magnesio: pesare, con la precisione di mg 1, g 1 di
magnesio (3.3) liberato con cura della pellicola di ossido od una quantità
corrispondente di solfato di magnesio (3.3), introdurlo in un pallone
tarato da ml 1 000, aggiungere ml 80 di acido cloridrico (3.1), lasciare
sciogliere e portare a ml 1000 aggiungendo acqua; ml 1 di tale solu-
zione contiene mg 1,000 di magnesio.
4.Apparecchiatura
4.1. Crogiolo da incenerimento di platino, quarzo o porcellana
4.2. Forno elettrico a muffola, provvisto di termostato4.3. Spettrofotometro d'assorbimento atomico
5.Mododioperare
5.1Preparazione della soluzione
5.1.1.Alimenti costituiti esclusivamente da sostanze minerali
Pesare, con l'approssimazione di mg 1, g 5 del campione, intro-
durli in un pallone tarato da ml 500 con ml 250 a 300 d'acqua.
Aggiungere ml 40 di acido cloridrico (3.1). Portare ad ebollizionee lasciare bollire lentamente il liquido per 30 minuti. Lasciare
raffreddare, portare a volume con acqua, mescolare e filtrare su
filtro di carta a pieghe asciutto. Scartare i primi ml 30 di filtrato.
In presenza di silice trattare g 5 di campione con una quantità
sufficiente (ml 15 a 30) di acido cloridrico (3.2) ed evaporare a
secco a bagnomaria. Proseguire come indicato in 5.1.2 a partire
dal 3º periodo.
5.1.2.Alimenti costituiti essenzialmente da sostanze minerale
Pesare, con l'approssimazione di mg 1, g 5 del campione in un
crogiolo da incenerimento ed incenerire a 550ºC in un forno a
muffola, sino ad ottenere ceneri esenti da particelle carboniose.
Per eliminare la silice, aggiungere alle ceneri una quantità suffi-
ciente (ml 15 a 30) di acido cloridrico (3.2), ed evaporare a
secco su bagnomaria. Essiccare poi per un'ora in stufa a 105ºC.
Riprendere il residuo con ml 10 di acido cloridrico (3.1) e trasfe-
rire, mediante acqua calda, in pallone tarato da ml 500. Portare
all'ebollizione, lasciar raffreddare e portare a volume con acqua.
Mescolare e filtrare su filtro di carta asciutto in un bicchiere
asciutto. Scartare i primi ml 30 di filtrato.
5.1.3.Alimenti costituiti essenzialmente da sostanze organiche
Pesare, con l'approssimazione di mg 1, g 5 del campione in un
crogiolo da incenerimento e incenerire a 550ºC in un forno a
muffola, sino a ottenere ceneri esenti da particelle carboniose.1973L0046 — IT — 26.05.1999 — 004.001 — 4
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Riprendere le ceneri con ml 5 di acido cloridrico (3.2), evaporare
a secco in bagno maria ed essiccare quindi per un'ora in una stufa
a 105ºC per insolubilizzare la silice. Riprendere il residuo con ml
5 di acido cloridrico (3.1), trasferire, con l'ausilio di acqua calda,
in un pallone tarato da ml 250, portare all'ebollizione, lasciar
raffreddare e portare a volume con acqua. Mescolare e filtrare su
filtro di carta asciutto in un bicchiere asciutto. Scartare i primi ml
30 di filtrato.
5.2Misura dell'assorbimento atomico
Preparare almeno 5 soluzioni di riferimento a concentrazioni crescenti,
scelte in funzione della zona di misurazione optimum dello spettrofoto-
metro, diluendo con acqua la soluzione campione (3.5). Aggiungere a
ciascuna soluzione ml 10 di soluzione di sale di stronzio (3.4) e comple-
tare quindi il volume a ml 100 mediante aggiunta d'acqua.
Diluire con acqua una parte del filtrato ottenuto in 5.1.1, 5.1.2 o in 5.1.3
in modo da ottenere una concentrazione di magnesio compresa fra i
limiti di concentrazione delle soluzioni di riferimento. La concentrazione
di acido cloridrico di questa soluzione non deve essere superiore a 0,4 N.
Aggiungere ml 10 di soluzione di sale di stronzio (3.4) e completare
quindi il volume a ml 100 mediante aggiunta d'acqua.
Misurare l'assobimento della soluzione da determinare e delle soluzioni
di riferimento alla lunghezza d'onda di 285,2 nm.
6.Calcolodeirisultati
Determinare la quantità di magnesio del campione riferendosi alle soluzioni
campione. Esprimere il risultato in percento del campione.
Ripetibilità
La differenza tra i risultati di due determinazioni parallele effettuate su di
uno stesso campione non deve essere superiore al 5 %, in valore relativo.
3.DETERMINAZIONEDELLAFIBRAGREZZA
1.Scopoecampodiapplicazione
Questo metodo rende possibile la determinazione nei mangimi della quota di
sostanza organica, esente da lipidi, insolubile in mezzi acidi e alcalini e
convenzionalmente denominata fibra grezza.
2.Principio
Il campione sgrassato, quando necessario, è trattato in sequenza con soluzioni
bollenti di acido solforico e idrossido di potassio a determinate concetrazioni.
Il residuo è separato per filtrazione su filtro di vetro sinterizzato, lavato,
seccato, pesato ed incenerito tra 475 e 500 ºC. La perdita di peso, dopo ince-
nerimento, corrisponde alla fibra grezza presente nel campione in esame.
3.Reattivi
3.1. Acido solforico, c = 0,13 moli/l.
3.2. Antischiuma (per esempio n-ottanolo).
3.3. Aiuto-filtrazione (Celite 545 o equivalente) trattato a 500 ºC per 4 ore
(8.6).
3.4. Acetone.3.5. Etere di petrolio (per esempio 40-60 ºC).
3.6. Acido cloridrico, c = 0,5 moli/l.
3.7. Idrossido di potassio, c = 0,23 moli/l.
4.Apparecchiature
4.1. Unità al caldo per il trattamento del campione in esame con la soluzione
di acido solforico o di idratato di potassio, munita di un supporto per il
crogiolo filtrante (4.2) e di un condotto con la valvola a più vie per lo
scarico del liquido e per il collegamento al vuoto e possibilmente ad un
sistema di aria compressa.1973L0046 — IT — 26.05.1999 — 004.001 — 5
▼M2
▼M2
Prima dell'uso, ogni giorno, preriscaldare per cinque minuti l'acqua della
caldaia, annessa all'unità per il lavaggio del residuo per il preriscalda-
mento dei reattivi.
4.2. Crogiolo di vetro filtrante, capacità 50 ml con setto di vetro filtrante
sinterizzato di porosità 40-90 ìm, condizionato a 500 ºC per breve
tempo, e raffreddato prima dell'uso.
4.3. Cilindro della capacità di almeno 270 ml portante un refrigerante a rica-
dere per l'ebollizione.
4.4. Stufa di essiccazione con termostato.4.5. Forno a muffola con termostato.4.6. Unità di estrazione a freddo consistente di un supporto per il crogiolo
filtrante (4.2) e munita di condotto con valvola per il vuoto e per lo
scarico dei liquidi.
4.7. Anelli di connessione in gomma per collegare all'unità a caldo (4.1) il
crogiolo (4.2) e il cilindro (4.3) e per collegare all'unità di estrazione a
freddo (4.6) il crogiolo.
5.Procedimento
Pesare, con la precisione di 1 mg, 1 g del campione preparato e introdurlo
nel crogiolo (4.2) (vedere le osservazioni 8.1, 8.2 e 8.3) ed aggiungere 1 g
di aiuto-filtrazione (3.3).
Sistemare il crogiolo nell'unità a caldo (4.2), collegarlo poi al cilindro (4.3).
Introdurre nel cilindro a crogiolo, già collegati, 150 ml di acido solforico
(3.1) preriscaldato vicino al punto di ebollizione e poche goccie di anti-
schiuma (3.2). Portare il liquido all'ebollizione entro 5 ± 2 minuti e far
bollire in modo vigoroso esattamente per 30 minuti.
Aprire la valvola di scarico e filtrare l'acido solforico sotto vuoto (4.1) attra-
verso il crogiolo filtrante. Lavare il residuo raccolto sul crogiolo tre volte
consecutive con porzioni di acqua bollente, impiegandone ogni volta 30 ml,
cercare di eliminare sotto vuoto il liquido fino a secchezza dopo ciascun
lavaggio.
Disinserire il vuoto e introdurre 150 ml di idrossido di potassio (3.7) preri-
scaldato vicino al punto di ebollizione, nel cilindro e crogiolo collegati,
aggiungere poche gocce di antischiuma (3.2). Portare il liquido all'ebollizione
5 ± 2 minuti e fare bollire in modo vigoroso esattamente per 30 minuti.
Filtrare e ripetere le operazioni di lavaggio usate per il trattamento con acido
solforico.
Dopo il lavaggio finale e l'essiccazione sotto vuoto, scollegare il crogiolo
contenente il residuo e collegarlo all'unità di estrazione a freddo (4.6). Appli-
care il vuoto e lavare il residuo nel crogiolo 3 volte con acetone (3.4),
impiegandone ogni volta 25 ml. Dopo ciascun lavaggio fare sempre in
modo che tutto il residuo sia raccolto sul filtro, mantenendo il vuoto fino a
completa eliminazione dell'acetone.
Essiccare il crogiolo in stufa a 130 ºC fino a peso costante. Raffreddarlo poi
in essiccatore e pesarlo rapidamente. Trasferire il crogiolo in muffola ed
incenerire il contenuto a 475-500 ºC per almeno 30 minuti, sino a peso
costante.
Dopo ogni incenerimento raffreddare il crogiolo prima in muffola e poi in
essiccatore prima della pesata.
Eseguire una prova in bianco con solo i reattivi. La perdita di peso risultante
dopo l'incenerimento non deve superare i 4 mg.
6.Calcolodeirisultati
Il contenuto percentuale di fibra grezza nel campione è dato dall'espressione:
b/C0c ½/C138 /C2 100
a
dove
a = massa del campione in g.
b= perdita della massa dopo incenerimento a 475-500 ºC del residuo del
campione essiccato a 130 ºC in g.
c = perdita della massa dopo incenerimento del residuo del bianco essic-
cato a 130 ºC in g.1973L0046 — IT — 26.05.1999 — 004.001 — 6
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7.Ripetibilità
La differenza tra due determinazioni parallelamente effettuate sullo stesso
campione non deve eccedere:
— 0,3 valore assoluto per contenuto in fibra grezza più basso del 10 %,
— 3 % sul risultato più elevato, per contenuto in fibra grezza uguale o
maggiore di 10 %.
8.Osservazioni
8.1. I mangimi contenenti più del 10 % di lipidi grezzi debbono essere,
prima dell'analisi, sgrassati con etere di petrolio (3.5). A tale scopo,
porre il crogiolo (4.2) contenente il campione pesato nell'unità di estra-
zione a freddo (4.6), applicare il vuoto a lavare per tre volte consecutive
con 30 ml di etere di petrolio (3.5). Mantenere il crogiolo sotto vuoto
fino a completa eliminazione del solvente dal campione, e trasferirlo
poi nell'unità di estrazione a caldo (4.1) e continuare come descritto al
punto 5.
8.2. I mangimi, contenenti lipidi che non possono essere estratti direttamente
con etere di petrolio (3.5), debbono essere sgrassati come indicato al
punto 8.1 e sgrassati un'altra volta dopo ebollizione con acido.
Dopo ebollizione con acido e successivo lavaggio, collegare il crogiolo
nell'unità di estrazione a freddo (4.6) e lavarlo tre volte con acetone
impiegandone ogni volta 30 ml. Lavare poi con etere di petrolio sempre
3 volte con aliquote di 30 ml. Mantenere il campione sotto vuoto fino a
completa eliminazione del solvente e continuare l'analisi come descritto
al punto 5 iniziando con il trattamento con idrossido di potassio.
8.3. Se i mangimi contengono più del 5 % di carbonati, espressi come carbo-
nato di calcio, porre il crogiolo contenente il campione (4.2) nell'unità di
estrazione a caldo (4.1) e lavare il campione tre volte con acido clori-
drico (3.6) usando aliquote di 30 ml. Dopo ciascuna addizione lasciare
riposare il campione per almeno 1 minuto prima della filtrazione. Lavare
una volta con acqua e poi continuare come descritto al punto 5.
8.4. Se viene impiegato un apparecchio a più posti (diversi crogioli posti
nella stessa unità a caldo) non deve essere eseguita nella stessa serie di
analisi la determinazione in doppio dello stesso campione.
8.5. Se dopo ebollizione è difficile filtrare la soluzione acida o basica, intro-
durre aria compressa attraverso il condotto di scarico dell'unità a caldo
proseguendo poi la filtrazione.
8.6. La temperatura di incenerimento non deve superare i 500 ºC allo scopo
di allungare la vita dei filtri di vetro dei crogioli. Evitare con attenzione
di procurare sbalzi termici durante i cicli di riscaldamento e raffredda-
mento ai crogioli.1973L0046 — IT — 26.05.1999 — 004.001 — 7
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