1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 1
Trattandosidiunsemplice strumentodidocumentazione,essononimpegnalaresponsabilitàdelleistituzioni
►B DIRETTIVADELCONSIGLIO
del22novembre1973
concernente il ravvicinamento delle legislazioni degli Stati membri relative ai metodi di controllo
dellabiodegradabilitàdeitensioattivianionici
(73/405/CEE)
(GU L 347 del 17.12.1973, pag. 53)
Modificata da:
Gazzetta ufficiale
n. pag. data
►M1Direttiva del Consiglio del 31 marzo 1982 (82/243/CEE) L 109 18 22.4.1982
▼B
DIRETTIVADELCONSIGLIO
del22novembre1973
concernente il ravvicinamento delle legislazioni degli Stati membri
relativeaimetodidicontrollodellabiodegradabilitàdeitensioattivi
anionici
(73/405/CEE)
IL CONSIGLIO DELLE COMUNITÀ EUROPEE,
visto il trattato che istituisce la Comunità economica europea, in parti-
colare l'articolo 100,
vista la direttiva del Consiglio del 22 novembre 1973 concernente il
ravvicinamento delle legislazioni degli Stati membri relative ai deter-
genti(1), in particolare l'articolo 4,
vista la proposta della Commissione,visto il parere del Parlamento europeo(
2),
visto il parere del Comitato economico e sociale(3),
considerando che, per consentire agli Stati membri di misurare il tasso
di biodegradabilità dei tensioattivi anionici, è opportuno riferirsi aimetodi di controllo già applicati a tal fine in alcuni Stati membri; che,in caso di contestazione, è invece necessario che il controllo della
biodegradabilità venga effettuato secondo un metodo di riferimento
comune;
considerando che è opportuno, come prevede l'articolo 4 della direttiva
del 22 novembre 1973, fissare tolleranze appropriate per la misura
della biodegradabilità, onde premunirsi contro le incertezze dei metodi
di controllo che potrebbero portare a decisioni di rigetto con graviconseguenze economiche; che tali decisioni di rigetto devono pertantoessere prese soltanto se le analisi indicano un tasso di biodegradabilitàinferiore all'80%,
HA ADOTTATO LA PRESENTE DIRETTIVA:
Articolo 1
La presente direttiva concerne i metodi di controllo della biodegrada-
bilità dei tensioattivi anionici ►M1presenti nei detergenti
contemplati dall'articolo 1 della direttiva 73/404/CEE ◄.
Articolo 2
Conformemente alle disposizioni dell'articolo 4 della direttiva 73/404/
CEE concernente i detergenti, gli Stati membri vietano l'immissionesul mercato e l'impiego nel loro territorio di un detergente se la misu-razione del tasso di biodegradabilità dei tensioattivi anionici in essocontenuti dà un risultato inferiore all'80 %, determinato mediante unodei seguenti metodi:
— metodo OCSE, pubblicato nella relazione tecnica dell'OCSE dell'11
giugno 1976 «Proposition de méthode pour la détermination de labiodégradabilité des agents de surface utilisés dans les détergentssynthétiques»;
— metodo in vigore in Germania, approvato con «Verordnung über die
Abbaubarkeit anionischer und nichtionischer grenzflächenaktiver
Stoffe in Wasch- und Reinigungsmitteln» del 30 gennaio 1977,pubblicato nel Bundesgesetzblatt 1977, parte I, pag. 244, nel testo1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 2
(1) Vedasi pagina 51 della presente Gazzetta ufficiale (SIC! GU n. L 347 del
17. 12. 1973, pag. 51).
(2) GU n. C 10 del 5. 2. 1972, pag. 29.
(3) GU n. C 89 del 23. 8. 1972, pag. 13.▼M1
▼M1
del regolamento che modifica detto regolamento, del 18 giugno
1980, pubblicato nel Bundesgesetzblatt 1980, parte I, pag. 706;
— metodo in vigore in Francia, approvato con decreto del 28 dicembre
1977 pubblicato nel Journal officiel de la République française del
18 gennaio 1978, pagine 514/515, e norma sperimentale T 73/260,
giugno 1981, pubblicata dall' «Association française de normalisa-
tion» (AFNOR);
— metodo in vigore nel Regno Unito denominato «Porous Pot Test»,
descritto nella relazione tecnica n. 70 (1978) del Water Research
Centre.
Articolo 3
Nell'ambito della procedura di cui all'articolo 5, paragrafo 2, della
direttiva 73/404/CEE, il parere del laboratorio è dato, per quantoriguarda i tensioattivi anionici, in base al metodo di riferimento (provadi conferma) descritto nell'allegato della presente direttiva».
Articolo 3 bis
Le modifiche necessarie per adeguare l'allegato al progresso tecnico
sono adottate conformemente alla procedura stabilita all'articolo 7 ter
della direttiva 73/404/CEE.
Articolo 4
1. Gli Stati membri mettono in vigore le disposizioni legislative,
regolamentari e amministrative necessarie per conformarsi alla presentedirettiva entro il termine di diciotto mesi dalla notifica e ne informanoimmediatamente la Commissione.
2. Gli Stati membri provvedono a comunicare alla Commissione il
testo delle disposizioni essenziali di diritto interno che essi adottano
nel settore disciplinato dalla presente direttiva.
Articolo 5
Gli Stati membri sono destinatari della presente direttiva.1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 3
▼B
▼M1
ALLEGATO
DETERMINAZIONE DELLA BIODEGRADABILITÀ DEI TENSIOAT-
TIVIANIONICI
Metododiriferimento (provadiconferma)
CAPITOLO 1
1.1.Definizione
Ai sensi della presente direttiva si intendono per tensioattivi anionici
quei tensioattivi che, dopo essere passati attraverso scambiatori di
cationi e di anioni, vengono separati mediante eluizione frazionata e
determinati come sostanza attiva al blu di metilene (MBAS) con il
metodo di analisi descritto al capitolo 3.
1.2.Attrezzaturanecessaria
Il metodo di misura si basa sull'impiego di un piccolo impianto di fanghi
attivi schematizzato nella figura 1 e descritto in modo più particolareg-
giato nella figura 2.
L'impianto è composto di un recipiente di alimentazione A contenente
l'effluente sintetico, d'una pompa dosatrice B, d'un serbatoio d'aerazione
C, di un sedimentatore D, di una pompa ad aria compressa E per rici-
clare i fanghi attivi e di un recipiente F per la raccolta dell'effluente
trattato.
I recipienti A ed F devono essere di vetro o di una idonea materia
plastica e di una capacità di almeno 24 litri. La pompa B alimenterà
regolarmente di effluente sintetico il serbatoio d'aerazione; in funziona-
mento normale, detto serbatoio conterrà tre litri della miscela. In cima al
cono interno del serbatoio C è sospeso un setto poroso in vetro G desti-
nato all' aerazione. La quantità d'aria immessa dal dispositivo
d'aerazione sarà misurata con flusso-metro H.
1.3.Effluentesintetico
Per effettuare questa prova servirsi di un effluente sintetico.Disciogliere per ogni litro di acqua potabile le seguenti sostanze:— 160 mg di peptone,
— 110 mg di estratto di carne,
— 30 mg di urea [CO (NH
2)2],
— 7 mg di cloruro di sodio (NaCl),— 4 mg di cloruro di calcio (CaCl
22H2O),
— 2 mg di solfato di magnesio (MgSO4—7H2O),
— 28 mg di fosfato bipotassico (K2HPO4),
— 20 ± 2 mg di MBAS.
Estrarre la MBAS dal prodotto oggetto della prova secondo il metodo
indicato al capitolo 2. Rinnovare ogni giorno tale effluente sintetico.
1.4.Preparazione deicampioni
1.4.1. I tensioattivi anionici puri possono essere esaminati tali quali. Calcolare
il tenore di MBAS allo scopo di preparare l'effluente sintetico (1.3).
1.4.2. In caso di prodotti formulati, determinare i tenori di MBAS e di sapone.
Effettuare un'estrazione alcolica ed una separazione della MBAS (vedi
capitolo 2). Il tenore di MBAS estratto deve essere noto per preparare
l'effluente sintetico.
1.5.Funzionamentodell'impianto
Riempire anzitutto il serbatoio d'aerazione C e il sedimentatore D con
effluente sintetico. Fissare il sedimeritatore D ad un'altezza tale che il
serbatoio d'aerazione C contenga 3 litri.
L'inoculazione avviene introducendo 3 ml di un effluente secondario di
buona qualità, raccolto di recente da un impianto di trattamento di
liquami di origine prevalentemente domestica. L'effluente dev'essere
mantenuto in condizioni aerobiche nel periodo compreso tra la campio-
natura e l'utilizzazione. Azionare quindi il dispositivo di aerazione G, la
pompa ad aria compressa E e la pompa dosatrice B. L'effluente sintetico
deve passare nel serbatoio d'aerazione C con una portata di 1 litro
all'ora, corrispondente a un tempo medio di ritenzione di tre ore.1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 4
▼M1
Regolare il ritmo d'aerazione in modo che il contenuto del serbatoio C si
mantenga costantemente in sospensione e che il tenore di ossigeno
disciolto sia almeno di 2 mg/l. Impedire la formazione di schiuma con
mezzi adeguati; astenersi però dall'usare agenti antischiuma che eserci-
tino una azione inibitrice sui fanghi attivi o che contengano MBAS.
Regolare la pompa E in modo che nel serbatoio d'aerazione C la rimessa
in circolazione dei fanghi attivi provenienti dal sedimentatore sia
continua e regolare. Rimettere in circolazione almeno una volta al
giorno, mediante spazzolatura o con qualsiasi altro mezzo idoneo, i
fanghi accumulatisi sulla parte superiore del serbatoio d'aerazione C,
nel fondo del sedimentatore D o nel circuito di circolazione. Se il fango
non decanta, favorirne la sedimentazione aggiungendo, ripetutamente se
necessario, 2 ml di una soluzione al 5% di cloruro ferrico.
Raccogliere per ventiquattro ore nel serbatorio F la soluzione uscente
dal sedimentatore D; dopo tale periodo prelevare un campione, previa
omogeneizzazione della miscela. Pulire quindi accuratamente il serba-
toio F.
1.6.Controllodeldispositivodimisura
Determinare immediatamente prima dell'uso il tenore di MBAS (in mg/
l) dell'effluente sintetico.
Subito dopo il prelievo, determinare, per analisi con lo stesso metodo, il
tenore di MBAS (mg/l) dell'acqua residua raccolta per ventiquattro ore
nel serbatoio F; in caso contrario i campioni devono essere conservati,
preferibilmente per congelazione. Determinare la concentrazione con
un'approssimazione di 0,1 mg di MBAS/l.
Per controllare il buon funzionamento del dispositivo, misurare almeno
due volte alla settimana la domanda chimica in ossigeno (COD) o il
carbonio organico disciolto (DOC) dell'effluente filtrato attraverso fibre
di vetro accumulatosi nel serbatoio F e dell'effluente sintetico filtrato del
serbatoio A.
La riduzione del COD o del DOC deve stabilizzarsi quando la degrada-
zione quotidiana della MBAS è quasi regolare, vale a dire alla fine del
periodo iniziale indicato nella figura 3.
Determinare due volte alla settimana in g/l il tenore di sostanze secche
minerali in sospensione nei fanghi attivi raccolti nel serbatoio d'aerea-
zione. Se questo supera i 2,5 g/l, eliminare l'eccesso di fanghi attivi.
Eseguire la prova di biodegradabilità a temperatura ambiente; tale
temperatura deve essere costante e mantenuta tra 292 e 297 K (19-
24 ºC).
1.7.Calcolodellabiodegradabilità
Calcolare ogni giorno la percentuale di degradazione della MBAS a
partire dal tenore di MBAS espresso in mg/l dell'effluente sintetico e
del corrispondente effluente residuo raccolto nel serbatoio F. Rappresen-
tare graficamente, come nella figura 3, i valori di biodegradabilità
ottenuti.
Calcolare la biodegradabilità della MBAS come se fosse la media arit-
metica dei valori ottenuti nei ventun giorni successivi al periodo iniziale,
durante i quali la biodegradazione deve essere stata regolare e l'impianto
deve aver funzionato senza inconvenienti. In nessun caso la durata del
periodo iniziale dovrà superare le sei settimane.
Calcolare la biodegradazione quotidiana con un'approssimazione dello
0,1 %; il risultato finale deve però essere arrotondato all'unità più vicina.
In alcuni casi, la frequenza dei prelievi può essere ridotta; per calcolare
la media, utilizzare però i risultati di almeno quattordici prelievi quoti-
diani distribuiti sul periodo di ventun giorni che fa seguito al periodo
iniziale.
CAPITOLO 2
TRATTAMENTO PRELIMINARE DEI PRODOTTI DA ESAMINARE
2.1.Osservazionipreliminari
2.1.1.Trattamento dei campioni
Il trattamento dei tensioattivi anionici e dei detergenti, prima della deter-
minazione del grado di biodegradabilità nella prova di conferma, è il
seguente:1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 5
▼M1
Prodotti Trattamento
Tensioattivi anionici Nessuno
Detergenti Estrazione alcolica seguita da separazione
mediante scambio ionico e eluizione
frazionata dallo scambiatore anionico
Lo scopo dell'estrazione alcolica è di eliminare dai prodotti in
commercio i componenti insolubili ed inorganici che potrebbero falsare
la prova di biodegradabilità.
2.1.2.Metodo di scambio ionico
Per eseguire correttamente le prove di biodegradabilità, è necessario
isolare e separare i tensioattivi anionici dal sapone e dai tensioattivi
non ionici e cationici.
Questo risultato è ottenuto con una tecnica di scambio ionico usando
una resina scambiatrice di anioni macroporosa e opportuni eluenti per
l'eluizione frazionata. In tal modo vengono isolati con un'unica opera-
zione il sapone e i tensioattivi anionici e non ionici.
2.1.3.Controllo analitico
Dopo l'omogeneizzazione, la concentrazione dei tensioattivi anionici nel
detergente viene determinata sulla base del tenore di MBAS. Il tenore di
sapone è determinato con un opportuno metodo. Questa analisi del pro-
dotto serve per calcolare le quantità necessarie alla preparazione delle
frazioni destinate alle prove di biodegradabilità.
L'estrazione quantitativa non è necessaria; tuttavia è opportuno estrarre
almeno l'80% dei tensioattivi anionici. Normalmente si ottiene il 90% e
più.
2.2.Principio
Da un campione omogeneo (polvere, paste e liquidi previamente essic-
cati) si ottiene un estratto etanolico che contiene i tensioattivi, il sapone
e altri componenti solubili in alcole del campione di detergente.
L'estratto etanolico viene evaporato sino ad essiccazione, disciolto in
una miscela isopropanolo/acqua e la soluzione ottenuta viene passata
attraverso un dispositivo misto, composto di uno scambiatore cationico
fortemente acido e di uno scambiatore anionico macroporoso scaldato
fino a 323 K (50 ºC). Questa temperatura è necessaria per evitare la
precipitazione di acidi grassi in ambiente acido.
I tensioattivi non ionici rimangono nell'effluente.
Gli acidi grassi del sapone vengono separati mediante eluizione con
etanolo contenente CO2. I tensioattivi anionici sono allora ottenuti sotto
forma di sali di ammonio mediante eluizione con una soluzione acquosa
isopropanolica di bicarbonato di ammonio. Detti sali di ammonio
vengono utilizzati nella prova di degradazione.
I tensioattivi cationici, che potrebbero falsare la prova di biodegrada-
bilità ed il metodo di analisi, sono eliminati dallo scambiatore
cationico posto sopra lo scambiatore anionico.
2.3.Sostanzechimiche eattrezzatura
2.3.1. Acqua deionizzata.
2.3.2. Etanolo, 95% v/v (C2H5OH) (denaturante ammesso: metiletilchetone o
metanolo).
2.3.3. Miscela isopropanolo/acqua (50/50 v/v):
— 50 parti involume di isopropanolo (CH3CHOH ·CH3)e
— 50 parti in volume di acqua (2.3.1).
2.3.4. Soluzione di anidride carbonica in etanolo (approssimativamente 0,1%
di CO2):
mediante un tubicino di alimentazione munito di un setto di vetro
poroso incorporato passare la CO2attraverso l'etanolo (2.3.2) per 10
minuti. Usare soltanto soluzioni preparate di fresco.1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 6
▼M1
2.3.5. Soluzione di bicarbonato di ammonio (60/40 v/v):
0,3 mol di NH4HCO3in 1000 ml di miscela isopropanolo/acqua
composta di 60 parti di isopropanolo e 40 parti di acqua (2.3.1).
2.3.6. Scambiatore di cationi (KAT), fortemente acido, resistente all'alcole (50-
100 mesh).
2.3.7. Scambiatore di anioni (AAT), macroporoso, Merck Lewatit, MP 7080
(70-150 mesh) o equivalente.
2.3.8. Acido cloridrico (10% HCl p/p).2.3.9. Pallone da 2 000 ml a fondo tondo con tappo conico di vetro smerigliato
e condensatore a riflusso.
2.3.10. Imbuto-filtro di 90 mm di diametro (riscaldabile) per filtri di carta.2.3.11. Beuta per filtrazione a vuoto avente una capacità di 2 000 ml.2.3.12. Colonne di scambio con camicia riscaldante e rubinetto: tubo interno di
60 mm di diametro e 450 mm di altezza (figura 4).
2.3.13. Bagnomaria.2.3.14. Forno per essiccazione a vuoto.2.3.15. Termostato.2.3.16. Evaporatore rotante.2.4.Estrazioneeseparazionedeitensioattivianionici
2.4.1.Preparazione dell'estratto
La quantità di tensioattivi necessaria alla prova di degradabilità è di
circa 50 g di MBAS.
Di norma, la quantità di prodotto da estrarre non deve superare 1 000 g,
ma può rivelarsi necessario estrarre maggiori quantità di campione.
Per motivi di ordine pratico, il limite massimo è fissato, nella maggior
parte dei casi, a 5000 g nella preparazione degli estratti per le prove di
biodegradabilità.
L'esperienza ha dimostrato che è più vantaggioso ricorrere a varie
piccole estrazioni anziché ad un'estrazione di grande quantità. Per
quanto concerne gli scambiatori, le quantità specificate sono sufficienti
per lavorare con 600-700 mmol di tensioattivi e sapone.
2.4.2.Isolamento dei componenti solubili in alcole
Aggiungere 250 g del detergente da analizzare a 1250 ml di etanolo e,
agitando, portare la miscela all'ebollizione sotto riflusso per un'ora.
Filtrare la soluzione alcolica bollente attraverso un filtro a pori larghi
posto su di un imbuto scaldato a 323 K (50 ºC) e aspirare rapidamente.
Lavare la beuta e l'imbuto filtrante con 200 ml circa di etanolo caldo.
Raccogliere il filtrato e il liquido di lavaggio in una beuta per filtrazione
a vuoto.
In caso di prodotti pastosi o liquidi, accertarsi che il campione non
contenga più di 55 g di tensioattivi anionici e 35 g di sapone. Evaporare
il campione pesato sino ad essiccazione. Disciogliere il residuo in
2 000 ml di etanolo e procedere come sopra.
Nel caso di polveri di debole densità apparente (< 300 g/l) siraccoman-
dadiaumetare la proporzione d'etanolo nel rapporto di 20: 1.
Far evaporare il filtrato di etanolo sino ad essiccazione, di preferenza
con un evaporatore rotante. Ripetere l'operazione se occorre una
maggiore quantità di estratto. Disciogliere la totalità del residuo in
5 000 ml di una miscela di isopropanolo/acqua.
2.4.3.Preparazione delle colonne di scambio ionico
Colonna di scambio cationicoVersare 600 ml di resina scambiatrice di cationi (2.3.6) in un becher di
3 000 ml e aggiungere 2000 ml di acido cloridrico (2.3.8). Lasciare
riposare per circa due ore agitando ad intervalli. Decantare l'acido e
trasferire la resina nella colonna (2.3.12) mediante acqua deionizzata.
La colonna deve contenere un tampone di lana di vetro. Lavare la
colonna con acqua deionizzata ad una velocità di flusso di 10-30 ml/
minuto fino a che l'eluato sia esente da cloruri. Spostare l'acqua con
2 000 ml di miscela isopropanolo/acqua (2.3.3) ad una velocità di flusso1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 7
▼M1
di 10-30 ml/minuto. La colonna di scambio è ora pronta per l'opera-
zione.
Colonna di scambio anionico
Versare 600 ml di resina scambiatrice di anioni (2.3.7) in un becher di
3 000 ml e aggiungere 2 000 ml di acqua deionizzata. Lasciare gonfiare
lo scambiatore per almeno due ore. Trasferire la resina nella colonna
mediante acqua deionizzata. La colonna deve contenere un supporto di
lana di vetro deionizzata, che funge da strato di supporto per lo scam-
biatore.
Lavare la colonna con una soluzione di bicarbonato di ammonio 0,3 mol
(2.3.5) fino a completa eliminazione del cloruro. Questa operazione
richiede circa 5 000 ml di soluzione. Lavare nuovamente con 2 000 ml
di acqua deionizzata. Spostare l'acqua con 2000 ml di miscela isopropa-
nolo/acqua (2.3.3) ad una velocità di flusso di 10-30 ml al minuto. La
colonna scambiatrice è ora in forma OH e pronta per l'uso.
2.4.4.Metodo di scambio ionico
Collegare le colonne scambiatrici in modo che la colonna scambiatrice
di cationi sia situata alla sommità della colonna scambiatrice di anioni.
Riscaldare le colonne a 323 K (50 ºC) con l'impiego di un termostato.
Riscaldare 5 000 ml della soluzione ottenuta al punto 2.4.2 a 333 K
(60 ºC) e filtrare la soluzione attraverso la combinazione di scambiatori
alla velocità di flusso di 20 ml/minuto. Lavare le colonne con 1 litro di
miscela calda isopropanolo/acqua (2.3.3).
Per ottenere i tensioattivi anionici (MBAS) disinserire la colonna KAT.
Con 5 000 ml di soluzione etanolo/CO2riscaldata a 323 K (50 ºC)
(2.3.4) eluire gli acidi grassi del sapone dalla colonna KAT. Scartare
l'eluato.
Eluire quindi le MBAS della colonna AAT con 5000 ml di soluzione di
bicarbonato di ammonio (2.3.5). Evaporare l'eluato sino ad essiccazione
su un bagno di vapore o in un evaporatore rotante. Il residuo contiene
MBAS (sotto forma di sale di ammonio) e gli eventuali prodotti anionici
non tensioattivi che non alterano la prova di biodegradabilità. Aggiun-
gere acqua deionizzata sino ad un volume determinato e calcolare il
tenore di MBAS in una frazione come al capitolo 3. La soluzione viene
impiegata come soluzione standard dei detergenti anionici per la prova
di biodegradabilità. Mantenere la soluzione ad una temperatura inferiore
a 278 K (5 ºC).
2.4.5.Rigenerazione delle resine scambiatrici
Gettare lo scambiatore cationico dopo l'uso.
Rigenerare la resina scambiatrice di anioni facendo passare un'ulteriore
quantità di soluzione di bicarbonato di ammonio (2.3.5) attraverso la
colonna ad una velocità di flusso approssimativamente di 10 ml/minuto
sino a quando l'eluato è privo di tensioattivi anionici (prova al blu di
metilene). Lavare quindi lo scambiatore anionico facendovi passare
2 000 ml di miscela isopropanolo/acqua (2.3.3). Lo scambiatore anio-
nico è nuovamente pronto per l'uso.
CAPITOLO 3
DETERMINAZIONE DEI TENSIOATTIVI ANIONICI NELLA PROVA DI
BIODEGRADABILITÀ
3.1.Principio
Il metodo si basa sul fatto che il blu di metilene (colorante cationico)
forma sali blu con tensioattivi anionici che possono essere estratti
mediante cloroformio. Per eliminare eventuali interferenze, l'estrazione
viene effettuata dapprima mediante una soluzione alcalina e l'estratto
viene quindi trattato con una soluzione acida al blu di metilene. L'assor-
bimento della fase organica separata viene misurato fotometricamente
alla lunghezza d'onda di assorbimento massimo, pari a 650 nm.
3.2.Reattivieattrezzature
3.2.1. Soluzione tampone pH 10:
disciogliere 24 g di bicarbonato di sodio (NaHCO3) p.a. e 27 g di carbo-
nato di sodio anidro (Na2CO3) p.a. in acqua deionizzata e diluire a
1 000 ml.1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 8
▼M1
3.2.2. Soluzione neutra al blu di metilene:
disciogliere 0,35 g di blu di metilene p.a. in acqua deionizzata e diluire
a 1 000 ml. Preparare la soluzione almeno ventiquattro ore prima
dell'uso. L'assorbimento della fase cloroformica della prova in bianco,
misurato contro cloroformio puro, non deve superare 0,015 impiegando
una cella con un cammino ottico a 1 cm a 650 nm.
3.2.3. Soluzione acida al blu di metilene:
disciogliere 0,35 g di blu di metilene p.a. in 500 ml di acqua deionizzata
e mescolare con 6,5 ml di H2SO4(d = 1,84 g/ml). Diluire a 1 000 ml con
acqua deionizzata. Preparare la soluzione almeno ventiquattro ore prima
dell'uso. L'assorbimento della fase cloroformica della prova in bianco,
misurata contro cloroformio puro, non deve superare 0,015 impiegando
una cella con un cammino ottico a 1 cm a 650 nm.
3.2.4. Cloroformio (triclorometano) CHCl3p.a., di recente distillazione.
3.2.5. Estere metilico dell'acido dodecilbenzensolfonico.
3.2.6. Soluzione etanolica di idrossido di potassio, KOH 0,1 M.
3.2.7. Etanolo puro, C2H5OH.
3.2.8. Acido solforico, H2SO40,5 M.
3.2.9. Soluzione di fenolftaleina:
sciogliere un grammo di fenolftaleina in 50 ml di etanolo ed aggiungere
50 ml di acqua deionizzata agitando continuamente. Eliminare mediantefiltrazione l'eventuale precipitato ottenuto.
3.2.10. Soluzione metanolica di acido cloridrico: 250 ml di acido cloridrico
concentrato p.a. e 750 ml di mentanolo.
3.2.11. Imbuto separatore da 250 ml.
3.2.12. Matraccio tarato da 50 ml.
3.2.13. Matraccio tarato da 500 ml.
3.2.14. Matraccio tarato da 1000 ml.
3.2.15. Pallone a fondo tondo con tappo conico di vetro smerigliato e condensa-
tore a riflusso da 250 ml; granuli per facilitare l'ebollizione.
3.2.16. pH-metro.
3.2.17. Fotometro per misurazioni a 650 nm, con celle di 1-5 cm.
3.2.18. Carta da filtro qualitativa.
3.3.Metodo
I campioni per analisi non debbono essere prelevati attraverso uno strato
di schiuma. Dopo accurato lavaggio con acqua, la vetreria utilizzata per
l'analisi deve essere risciacquata a fondo con soluzione metanolica di
acido cloridrico (3.2.10) e quindi con acqua deionizzata prima dell'uso.
Filtrare l'affluente e l'effluente dell'impianto a fanghi attivi da esaminare
immediatamente dopo la campionatura. Scartare i primi 100 ml del
filtrato.
Prelevare una determinata quantità di campione, se necessario neutraliz-
zata, in un imbuto separatore da 250 ml (3.2.11). Il volume del
campione dovrebbe contenere da 20 a 150 mg di MBAS. Per tenori più
bassi in MBAS possono essere utilizzati sino a 100 ml del campione. Se
il quantitativo utilizzato è inferiore a 100 ml, diluire a 100 ml con acqua
deionizzata. Aggiungere al campione 10 ml di soluzione tampone
(3.2.1), 5 ml di soluzione neutra al blu di metilene (3.2.2) e 15 ml di
cloroformio (3.2.4). Agitare uniformemente la miscela, ma non troppo
energicamente, per un minuto; dopo la separazione della fase, versare
lo strato di cloroformio in un secondo imbuto separatore contenente
110 ml di acqua deionizzata e 5 ml di soluzione acida al blu di metilene
(3.2.3). Agitare la miscela per un minuto. Filtrare la fase cloroformica
attraverso un filtro di ovatta idrofila previamente trattato con alcole e
inumidito di cloroformio in un matraccio tarato (3.2.12).
Estrarre le soluzioni alcaline e acide tre volte, utilizzando 10 ml di
cloroformio per la seconda e la terza estrazione. Filtrare gli estratti
cloroformici combinati attraverso lo stesso filtro di ovatta idrofila e
portare a volume in un matraccio tarato da 50 ml (3.2.12) con il cloro-
formio utilizzato per il lavaggio del filtro. Misurare l'assorbimento della
soluzione cloroformica con un fotometro a 650 nm in cellette da 1-5 cm,1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 9
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rispetto al cloroformio puro. Effettuare una determinazione del bianco
con la procedura completa.
3.4.Curvaditaratura
Preparare una soluzione a titolo noto usando l'estere metilico dell'acido
dodecilbenzensolfonico (tipo tetrapropilene PM 340) dopo saponifica-zione a sale di potassio. La MBAS è calcolata come
dodecilbenzensolfonato di sodio (PM = 348).
Pesare da 400 a 450 mg di estere metilico dell'acido dodecilbenzensol-
fonico (3.2.5) con un'approssimazione di 0,1 mg in un pallone a fondo
tondo ed aggiungere 50 ml di soluzione etanolica di idrossido di
potassio (3.2.6) ed alcuni granuli per facilitare l'ebollizione. Dopo avere
montato il condensatore a riflusso, far bollire per un'ora. Raffreddare e
lavare il condensatore ed il giunto di vetro smerigliato con circa 30 ml
di etanolo, ed aggiungere queste acque di lavaggio al contenuto del
pallone. Titolare la soluzione con acido solftrico rispetto alla fenolfta-
leina fino a scomparsa della colorazione. Trasferire questa soluzione in
un matraccio tarato da 1 000 ml (3.2.14), portare a volume con acqua
deionizzata e mescolare.
Una parte di questa soluzione concentrata di tensioattivo viene quindi
ulteriormente diluita. Prelevare 25 ml, trasferire in un matraccio da
500 ml (3.2.13) e portare a volume con acqua deionizzata, quindi
mescolare.
Questa soluzione standard contiene E/C21;023
20000mg di MBAS per ml,
dove E è il peso del campione in mg.
Per costruire la curva di taratura, prelevare frazioni di 1, 2, 4, 6, 8 ml
della soluzione standard e diluire ciascuna di queste frazioni fino a
100 ml con acqua deionizzata. Procedere quindi come indicato al punto
3.3, inclusa la determinazione del bianco.
3.5.Calcolodeirisultati
Il tenore del tensioattivo anionico (MBAS) nel campione è desunto dalla
curva di taratura (3.4). Il contenuto di MBAS del campione è dato dalla
formula seguente:
mg MBAS /C21000
V= MBAS mg/l
dove V = volume del campione utilizzato in ml.
Esprimere i risultati come dodecilbenzenilsolfonato di sodio (PM 348).
3.6.Espressionedeirisultati
Esprimere i risultati come MBAS mg/l con un'approssimazione dello
0,1.1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 10
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Figura 1
A: Recipiente di alimentazione
B: Pompa dosatriceC: Serbatoio d'aerazione (capacità 3 l)D: Sedimentatore
E: Pompa ad aria compressa
F: Recipiente di raccoltaG: Aeratore (setto poroso in vetro)H: Flussometro ad aria1973L0405 — IT — 14.04.1982 — 001.001 — 11
Figura 2
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Figura 3
Calcolodellabiodegradabilità—Provadiconferma
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Figura 4
Colonnascambiatrice riscaldata
(Tutte le dimensioni sono espresse in mm)
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