2.

U poglavlju III. dodaje se sljedeći dio: „III.3. ODREĐIVANJE HLAPIVE KISELOSTI JAKIH ALKOHOLNIH PIĆA 1. Područje primjene Metoda je validirana u međulaboratorijskom ispitivanju za rum, brandy, rakiju od komine i rakiju od voća na razinama u rasponu od 30 mg/l do 641 mg/l. 2. Referentni standardi ISO 3696: 1987 Voda za analitičku uporabu – Specifikacija i metode ispitivanja. 3. Definicije 3.1. Hlapiva kiselost izračunava se oduzimanjem fiksne kiselosti od ukupne kiselosti. 3.2. Ukupna kiselost jest zbroj titracijskih kiselosti. 3.3. Fiksna kiselost jest kiselost rezidua preostalog nakon isparavanja jakog alkoholnog pića do suhoće. 4. Načelo Ukupna kiselost i fiksna kiselost utvrđuju se titracijom ili potenciometarskom titracijom. 5. Reagensi i materijali Tijekom analize, osim ako nije drukčije navedeno, upotrebljavaju se samo reagensi priznate analitičke kvalitete i stupnja kvalitete vode od najmanje 3, kako je definirano u normi ISO 3696:1987. 5.1. 0,01 M otopina natrijeva hidroksida (NaOH) 5.2. Otopina miješanog indikatora: Odvagne se 0,1 g bojila indigo carmine i 0,1 g fenol crvene. Rastopi ih se u 40 ml vode i do 100 ml napuni etanolom. 6. Uređaji i oprema Neizravna laboratorijska oprema, stakleni pribor A razreda i sljedeće: 6.1. Pumpa za vodu 6.2. Rotirajući isparivač ili ultrazvučna kupelj 6.3. Oprema za potenciometarsku titraciju (neobvezno) 7. Uzorkovanje i uzorci Uzorci se skladište na sobnoj temperaturi prije analize. 8. Postupak 8.1. Ukupna kiselost 8.1.1. Priprema uzorka Jako alkoholno piće ozračuje se ultrazvukom ili miješanjem dvije minute u vakuumu kako bi se iz njega uklonio ugljikov dioksid ako je to potrebno. 8.1.2. Titracija U Erlenmeyerovu tikvicu od 500 ml pipetira se 25 ml jakog alkoholnog pića. Doda se oko 200 ml ohlađene prokuhane destilirane vode (svakodnevno svježe pripremljene) i dvije do šest kapi otopine miješanog indikatora (5.2.). Titrira se s 0,01 M otopine natrijeva hidroksida (5.1.) sve dok se boja ne promijeni iz žutozelene u ljubičastu kod bezbojnih jakih alkoholnih pića, odnosno iz žutosmeđe u crvenosmeđu u slučaju jakih alkoholnih pića smeđe boje. Titracija može biti i potenciometarska, do pH od 7,5. Volumen 0,01 M dodane otopine natrijevog hidroksida označiti s n1 ml. 8.1.3. Izračun Ukupna kiselost (engl. total acidity, TA) izražena u miliekvivalentima po litri jakog alkoholnog pića odgovara 0,4 × n1. Ukupna kiselost (TA) izražena u miligramima octene kiseline po litri jakog alkoholnog pića odgovara 24 × n1. 8.2. Fiksna kiselost 8.2.1. Priprema uzorka Ispariti 25 ml jakog alkoholnog pića do suhoće. Pipetirati 25 ml jakog alkoholnog pića u cilindričnoj posudi za isparavanje s ravnim dnom promjera 55 mm. Tijekom prvog sata isparavanja, posuda za isparavanje stavi se na poklopac kipuće vodene kupelji tako da tekućina neće vreti jer bi to moglo dovesti do gubitka zbog prskanja. Sušenje se završi stavljanjem posude za isparavanje na dva sata u sušionik na 105 °C. Posudu za isparavanje ostaviti da se ohladi u sušioniku. 8.2.2. Titracija Otopiti rezidue preostale nakon isparavanja ohlađenom prokuhanom destiliranom vodom (svakodnevno svježe pripremljenom) i dopuniti do približno 100 ml te dodati dvije do šest kapi otopine miješanog indikatora (5.2.). Titrirati s 0,01 M otopine natrijeva hidroksida (5.1.). Titracija može biti i potenciometarska, do pH od 7,5. Volumen 0,01 M dodane otopine natrijevog hidroksida označiti s n2 ml. 8.2.3. Izračun Fiksna kiselost (engl. fixed acidity, FA) izražena u miliekvivalentima po litri jakog alkoholnog pića odgovara 0,4 × n2. Fiksna kiselost (FA) izražena u miligramima octene kiseline po litri jakog alkoholnog pića odgovara 24 × n2. 9. Izračun hlapive kiselosti 9.1. Izraženo u miliekvivalentima po litri: Neka je: TA = ukupna kiselost u miliekvivalentima po litri FA = fiksna kiselost u miliekvivalentima po litri Hlapiva kiselost, VA (engl. volatile acidity) u miliekvivalentima po litri odgovara: TA – FA 9.2. Izraženo u miligramima octene kiseline po litri: Neka je: TA′ = ukupna kiselost u miligramima octene kiseline po litri FA′ = fiksna kiselost u miligramima octene kiseline po litri Hlapiva kiselost, VA u miligramima octene kiseline po litri odgovara: TA′ – FA′ 9.3. Izraženo u gramima octene kiseline po hektolitru čistog stopostotnog alkohola odgovara: pri čemu je A alkoholna jakost po volumenu jakog alkoholnog pića. 10. Svojstva metode (preciznost) 10.1. Statistički rezultati međulaboratorijskog ispitivanja Sljedeći podaci su dobiveni iz međunarodnog ispitivanja svojstava metode koje je provedeno u skladu s međunarodno dogovorenim postupcima [1] [2]. Godina međulaboratorijskog ispitivanja 2000. Broj laboratorija 18 Broj uzoraka 6

Uzorci A B C D E F Broj laboratorija zadržan nakon odbacivanja ekstremnih vrijednosti 16 18 18 14 18 18 Broj ekstremnih vrijednosti (laboratorija) 2 4 Broj prihvaćenih rezultata 32 36 36 28 36 36 Srednja vrijednost [mg/l] 272* 241* 30 591* 641* 46 107 492 Standardna devijacija ponovljivosti, sr [mg/l] 8,0 3,6 15,0 3,7 6,7 8,5 Relativna standardna devijacija ponovljivosti, RSDr [%] 3,1 11,8 2,4 8,0 6,2 1,7 Granica ponovljivosti, r [mg/l] 23 10 42 10 19 24 Standardna devijacija obnovljivosti, sR [mg/l] 8,5 8,4 25,0 4,55 13,4 24,4 Relativna standardna devijacija obnovljivosti, RSDR [%] 3,3 27,8 4,1 9,9 12,5 5,0 Granica obnovljivosti, R [mg/l] 24 23 70 13 38 68 Vrste uzoraka: A brandy od šljiva; razina razdiobe* B rum I.; dvostruke slijepe probe C rum II.; razina razdiobe* D šljivovica; dvostruke slijepe probe E brandy; dvostruke slijepe probe F rakija od komine; dvostruke slijepe probe [1] Protocol for the Design, Conduct and Interpretation of Method- Performance Studies, Horwitz, W. (1995.) Pure and Applied Chemistry 67, 332. – 343. [2] Horwitz, W. (1982.) Analytical Chemistry 54, 67.A – 76.A.”