2.

nakon unosa za E 960c(i) umeću se sljedeći unosi: „E 960c(ii) REBAUDIOZID M PROIZVEDEN ENZIMSKOM KONVERZIJOM VISOKO PROČIŠĆENIH EKSTRAKATA REBAUDIOZIDA A IZ LISTOVA STEVIJE Sinonimi Definicija Rebaudiozid M proizveden enzimskom konverzijom visoko pročišćenih ekstrakata rebaudiozida A iz listova stevije je steviol glikozid koji se uglavnom sastoji od rebaudiozida M i manjih količina drugih steviol glikozida kao što su rebaudiozid A i rebaudiozid D. Rebaudiozid M proizvodi se enzimskom konverzijom visoko pročišćenih ekstrakata steviol glikozida rebaudiozid A (95 % steviol glikozida) dobivenih iz biljke Stevia rebaudiana Bertoni upotrebom enzima UDP-glukoziltransferaze i saharoze sintaze koje proizvode genetski modificirani sojevi bakterije E. coli (pPM294, pFAF170 i pSK401) koji olakšavaju prijenos glukoze iz saharoze i UDP-glukoze u steviol glikozide putem glikosidnih veza. Nakon uklanjanja enzimâ separacijom krutih tvari od tekućine i toplinskom obradom, pročišćavanje uključuje koncentraciju rebaudiozida M adsorpcijom smole, nakon čega slijedi rekristalizacija rebaudiozida M, čime nastaje konačni proizvod koji sadržava najmanje 95 % rebaudiozida M. Žive stanice bakterije E. coli (pPM294, pFAF170 i pSK401) i njihov DNK ne smiju biti potvrđeni u prehrambenom aditivu. Kemijsko ime Rebaudiozid M: 13-[(2-O-β-D-glukopiranozil-3-O-β-D-glukopiranozil-β-D-glukopiranozil)oksi]kaur-16-en-18-onska kiselina, 2-O-β-D-glukopiranozil-3-O-β-D-glukopiranozil-β-D-glukopiranozil ester Molekulska formula Uobičajeni naziv Formula Konverzijski faktor Rebaudiozid M C56H90O33 0,25 Molekulska masa i CAS broj Uobičajeni naziv CAS broj Molekulska masa (g/mol) Rebaudiozid M 1220616-44-3 1 291,29 Analiza Najmanje 95 % rebaudiozida M na suhoj osnovi. Opis Bijeli do svijetložuti prah, oko 150 do 350 puta slađi od saharoze (kod 5 %-tnog ekvivalenta saharoze). Identifikacija Topljivost Lako topljiv do slabo topljiv u vodi pH Između 4,5 i 7,0 (otopina 1-u-100) Čistoća Ukupni pepeo Najviše 1 % Gubitak pri sušenju Najviše 6 % (105 °C, 2 sata) Ostaci otapala Najviše 5 000 mg/kg etanola Arsen Najviše 0,015 mg/kg Olovo Najviše 0,2 mg/kg Kadmij Najviše 0,015 mg/kg Živa Najviše 0,07 mg/kg Ostaci bjelančevina Najviše 5 mg/kg Veličina čestica Najmanje 74 μm [korištenjem sita otvora #200 s ograničenjem veličine čestica od 74 μm] E 960c(iii) REBAUDIOZID D PROIZVEDEN ENZIMSKOM KONVERZIJOM VISOKO PROČIŠĆENIH EKSTRAKATA REBAUDIOZIDA A IZ LISTOVA STEVIJE Sinonimi Definicija Rebaudiozid D proizveden enzimskom konverzijom visoko pročišćenih ekstrakata rebaudiozida A iz listova stevije je steviol glikozid koji se uglavnom sastoji od rebaudiozida D i manjih količina drugih steviol glikozida kao što su rebaudiozid A i rebaudiozid M. Rebaudiozid D proizvodi se enzimskom konverzijom visoko pročišćenih ekstrakata steviol glikozida rebaudiozid A (95 % steviol glikozida) dobivenih iz biljke Stevia rebaudiana Bertoni upotrebom enzima UDP-glukoziltransferaze i saharoze sintaze koje proizvode genetski modificirani sojevi bakterije E. coli (pPM294, pFAF170 i pSK401) koji olakšavaju prijenos glukoze iz saharoze i UDP-glukoze u steviol glikozide putem glikosidnih veza. Nakon uklanjanja enzimâ separacijom krutih tvari od tekućine i toplinskom obradom, pročišćavanje uključuje koncentraciju rebaudiozida D adsorpcijom smole, nakon čega slijedi rekristalizacija steviol glikozidâ, čime nastaje konačni proizvod koji sadržava najmanje 95 % rebaudiozida D i rebaudiozida A. Žive stanice bakterije E. coli (pPM294, pFAF170 and pSK401) i njihov DNK ne smiju biti potvrđeni u prehrambenom aditivu. Kemijsko ime Rebaudiozid D: 13-[(2-O-β-D-glukopiranozil-3-O-β-D-glukopiranozil-β-D-glukopiranozil)oksi]kaur-16-en-18-onska kiselina, 2-O-β-D-glukopiranozil-β-D-glukopiranozil ester. Rebaudiozid A: 13-[(2-O-β-D-glukopiranozil-3-O-β-D-glukopiranozil-β-D-glukopiranozil)oksi]kaur-16-en-18-onska kiselina, β-D-glukopiranozil ester Molekulska formula Uobičajeni naziv Formula Konverzijski faktor Rebaudiozid D C50H80O28 0,29 Rebaudiozid A C44H70O23 0,33 Molekulska masa i CAS broj Uobičajeni naziv CAS broj Molekulska masa (g/mol) Rebaudiozid D 63279-13-0 1 291,15 Rebaudiozid A 58543-16-1 967,01 Analiza Najmanje 95 % rebaudiozida D i A na suhoj osnovi. Opis Bijeli do svijetložuti prah, oko 150 do 350 puta slađi od saharoze (kod 5 %-tnog ekvivalenta saharoze). Identifikacija Topljivost Lako topljiv do slabo topljiv u vodi pH Između 4,5 i 7,0 (otopina 1-u-100) Čistoća Ukupni pepeo Najviše 1 % Gubitak pri sušenju Najviše 6 % (105 °C, 2 sata) Ostaci otapala Najviše 5 000 mg/kg etanola Arsen Najviše 0,015 mg/kg Olovo Najviše 0,2 mg/kg Kadmij Najviše 0,015 mg/kg Živa Najviše 0,07 mg/kg Ostaci bjelančevina Najviše 5 mg/kg Veličina čestica Najmanje 74 μm [korištenjem sita otvora #200 s ograničenjem veličine čestica od 74 μm] E 960c(iv) REBAUDIOZID AM PROIZVEDEN ENZIMSKOM KONVERZIJOM VISOKO PROČIŠĆENIH EKSTRAKATA STEVIOZIDA IZ LISTOVA STEVIJE Sinonimi Definicija Rebaudiozid AM proizveden enzimskom konverzijom visoko pročišćenih ekstrakata steviozida iz listova stevije je steviol glikozid koji se uglavnom sastoji od rebaudiozida AM i manjih količina drugih steviol glikozida kao što su steviozid i rebaudiozid E. Rebaudiozid AM proizvodi se enzimskom konverzijom visoko pročišćenih ekstrakata steviol glikozida rebaudiozid A (95 % steviol glikozida) dobivenih iz biljke Stevia rebaudiana Bertoni upotrebom enzima UDP-glukoziltransferaze i saharoze sintaze koje proizvode genetski modificirani sojevi bakterije E. coli (pPM294, pFAF170 i pSK401) koji olakšavaju prijenos glukoze iz saharoze i UDP-glukoze u steviol glikozide putem glikosidnih veza. Nakon uklanjanja enzimâ separacijom krutih tvari od tekućine i toplinskom obradom, pročišćavanje uključuje koncentraciju rebaudiozida AM adsorpcijom smole, nakon čega slijedi rekristalizacija steviol glikozidâ, čime nastaje konačni proizvod koji sadržava najmanje 95 % rebaudiozida AM. Žive stanice bakterije E. coli (pPM294, pFAF170 and pSK401) i njihov DNK ne smiju biti potvrđeni u prehrambenom aditivu. Kemijsko ime Rebaudiozid AM 13-[(2-O-β-D-glukopiranozil-β-D-glukopiranozil)oksi]kaur-16-en-18-onska kiselina, 2- O-β-D-glukopiranozil-3-O-β-D-glukopiranozil-β-D-glukopiranozil ester. Molekulska formula Uobičajeni naziv Formula Konverzijski faktor Rebaudiozid AM C50 H80 O28 0,29 Molekulska masa i CAS broj Uobičajeni naziv CAS broj Molekulska masa (g/mol) Rebaudiozid AM 2222580-26-7 1 291,15 Analiza Najmanje 95 % rebaudiozida AM na suhoj osnovi. Opis Bijeli do svijetložuti prah, oko 150 do 350 puta slađi od saharoze (kod 5 %-tnog ekvivalenta saharoze). Identifikacija Topljivost Lako topljiv do slabo topljiv u vodi pH Između 4,5 i 7,0 (otopina 1-u-100) Čistoća Ukupni pepeo Najviše 1 % Gubitak pri sušenju Najviše 6 % (105 °C, 2 sata) Ostaci otapala Najviše 5 000 mg/kg etanola Arsen Najviše 0,015 mg/kg Olovo Najviše 0,2 mg/kg Kadmij Najviše 0,015 mg/kg Živa Najviše 0,07 mg/kg Ostaci bjelančevina Najviše 5 mg/kg Veličina čestica Najmanje 74 μm [korištenjem sita otvora #200 s ograničenjem veličine čestica od 74 μm]”