N°C 146/12 Journal officiel des Communautés européennes 5.6.91 
II 
(Actes préparatoires) 
COMMISSION 
Proposition de règlement (CEE) du Conseil établissant des mesures communautaires de lutte 
contre la maladie de Newcastle 
(91/C 146/14) 
COM(91) 137 final 
(Présentée par la Commission le 16 mai 1991.) 
LE CONSEIL DES COMMUNAUTÉS EUROPÉENNES, 
vu le traité instituant la Communauté économique euro­
péenne, et notamment son article 43, 
vu la proposition de la Commission, 
vu l'avis du Parlement européen, 
vu l'avis du Comité économique et social, 
considérant que la volaille figure à l'annexe II du traité; 
que la commercialisation de la volaille constitue une 
importante source de revenus pour la population agri­
cole; 
considérant qu'il est nécessaire d'instituer, au niveau 
communautaire, les mesures de lutte à arrêter en cas 
d'apparition de la maladie de Newcastle en vue de 
préserver le développement du secteur de la volaille et de 
contribuer à la protection de la santé animale dans la 
Communauté; 
considérant que la maladie de Newcastle peut, dès son 
apparition, prendre un caractère épizootique provoquant 
une mortalité et des perturbations telles qu'elles risquent 
de compromettre notablement la rentabilité de l'ensemble 
du secteur de l'élevage de volaille; 
considérant que des mesures doivent être prises dès que 
la présence de la maladie est suspectée afin de permettre 
une lutte immédiate et efficace lorsqu'elle est confirmée; 
que cette lutte doit être modulée par les autorités compé­
tentes pour tenir compte du fait qu'un pays pratique ou non une politique de vaccination prophylactique sur tout 
ou partie de son territoire; 
considérant qu'il est nécessaire d'éviter toute extension 
de la maladie dès son apparition par un contrôle précis 
des mouvements des animaux et de l'utilisation des 
produits susceptibles d'être contaminés ainsi que par un 
recours éventuel à la vaccination; 
considérant que le diagnostic de la maladie doit être 
effectué sous l'égide du laboratoire responsable dont la 
coordination doit être assurée par le laboratoire de réfé­
rence communautaire; 
considérant qu'il est nécessaire de prévoir l'élaboration, 
par les États membres qui vaccinent, de plans de vaccina­
tion et de fournir à la Commission et aux États membres 
des informations concernant lesdits plans; 
considérant qu'il convient de confier à la Commission la 
tâche d'arrêter les mesures d'application nécessaires, 
A ARRÊTÉ LE PRÉSENT RÈGLEMENT: 
Article premier 
1. Le présent règlement définit les mesures commu­
nautaires de lutte à appliquer en cas d'apparition de la 
maladie de Newcastle dans les élevages de volailles 
autres que les pigeons voyageurs, sans préjudice des 
dispositions communautaires régissant les échanges intra­
communautaires . 
2. Le présent règlement ne s'applique pas en cas de 
découverte de la maladie de Newcastle chez d'autres 
oiseaux, y compris les pigeons voyageurs; dans ce cas, 
toutefois, l'État membre concerné signale à la Commis­
sion toutes les mesures qu'il a prises. 
5.6.91 Journal officiel des Communautés européennes N°C 146/13 
Article 2 
1. Aux fins du présent règlement, les définitions figu­
rant à l'article 2 de la directive 90/539/CEE du 
Conseil (') s'appliquent le cas échéant. 
En outre, on entend par: 
a) volaille infectée, toute volaille: 
— sur laquelle la présence de la maladie de 
Newcastle a été officiellement confirmée à la suite 
d'un examen effectué par un laboratoire agréé 
ou 
— sur laquelle, s'il s'agit d'un second foyer ou d'un 
foyer ultérieur, des symptômes cliniques ou des 
lésions post mortem propres à la maladie de 
Newcastle ont été constatés; 
b) volaille suspecte d'être infectée: toute volaille présentant 
des symptômes cliniques ou des lésions post mortem 
permettant de suspecter raisonnablement la présence 
de la maladie de Newcastle; 
c) volaille suspecte d'être contaminée: toute volaille 
susceptible d'avoir été directement ou indirectement 
au contact du virus de la maladie de Newcastle; 
d) eaux grasses: les déchets de cuisine, de restaurants ou, 
le cas échéant, d'industries travaillant les viandes; 
e) autorité compétente: l'autorité vétérinaire désignée à 
cet effet par l'administration nationale du pays en 
cause, directement responsable devant l'administration 
nationale au sens du présent règlement et émettant ses 
avis par le biais de l'administration nationale; 
f) vétérinaire officiel: le vétérinaire désigné par l'autorité 
compétente de l'État membre. 
Article 3 
Toute suspicion de maladie de Newcastle doit être noti­
fiée immédiatement à l'autorité compétente. 
Article 4 
1. Lorsque des volailles sont suspectes d'être infectées 
ou contaminées par la maladie de Newcastle, le vétéri­
naire officiel doit immédiatement mener une enquête 
visant à confirmer ou à infirmer la présence de ladite 
maladie; en particulier, il effectue ou fait effectuer les 
prélèvements adéquats en vue des examens de labora­
toire. 2. Dès la notification de la suspicion, l'autorité 
compétente fait placer l'exploitation sous surveillance 
officielle et ordonne notamment: 
a) le recensement de toutes les catégories de volaille de 
l'exploitation en précisant pour chacune d'elles le 
nombre de volailles qui sont mortes, de celles qui 
présentent des signes cliniques et de celles qui ne 
présentent aucun signe. Toutes ces données doivent 
être tenues à jour et produites sur demande et 
peuvent être contrôlées à chaque visite; 
b) la séquestration de toutes les volailles de l'exploitation 
dans leurs locaux d'hébergement ou dans tout lieu 
permettant leur isolement hors du contact d'autres 
volatiles; 
c) l'interdiction de tout mouvement de volailles en 
provenance ou à destination de l'exploitation; 
d) l'interdiction: 
— de tout mouvement de personnes, d'autres 
animaux et de véhicules en provenance ou à desti­
nation de l'exploitation, 
— de tout mouvement de viandes ou de cadavres de 
volailles, d'aliments des animaux, de matériel, de 
déchets, de litières ou de tout ce qui est suscep­
tible de transmettre la maladie de Newcastle 
sauf autorisation délivrée par l'autorité compétente; 
e) l'interdiction de sortir des oeufs de l'exploitation, à 
l'exclusion des œufs pour la consommation désin­
fectés selon une méthode agréée par le vétérinaire 
officiel; 
f) la mise en place de moyens appropriés de désinfection 
aux entrées et sorties des bâtiments hébergeant des 
volailles ainsi qu'à celles de l'exploitation; 
g) la réalisation d'une enquête épidémiologique, confor­
mément à l'article 7. 
3. En attendant la mise en vigueur des mesures offi­
cielles prévues au paragraphe 2, le propriétaire ou le 
détenteur de tout élevage de volailles suspect de la 
maladie prend toutes les mesures raisonnables pour se 
conformer aux dispositions du paragraphe 2, particuliè­
rement des points b) à e). 
4. L'autorité compétente peut étendre l'une quel­
conque des mesures prévues au paragraphe 2 à d'autres 
exploitations dans le cas où leur implantation, leur topo­
graphie ou les contacts avec l'exploitation où la maladie 
est suspectée permettent de soupçonner une possibilité de 
contamination. 
(') JO n° L 303 du 31. 10. 1990, p. 6. 5. Les mesures visées aux paragraphes 2, 3 et 4 ne 
sont levées que lorsque la suspicion de maladie de 
Newcastle est infirmée par le vétérinaire officiel. 
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Article 5 
1. Dès que la présence de la maladie de Newcastle est 
officiellement confirmée dans une exploitation, l'autorité 
compétente ordonne, en complément des mesures 
énumérées à l'article 4 paragraphe 2: 
a) la mise à mort sur place de toutes les volailles de 
l'exploitation. Les volailles mortes ou mises à mort et 
tous les oeufs doivent être détruits. Ces opérations 
doivent être effectuées de manière à réduire le plus 
possible les risques de propagation de la maladie; 
b) la destruction ou le traitement approprié de toutes les 
matières ou déchets, tels les aliments, les litières et 
fumiers, susceptibles d'être contaminés; ce traitement, 
effectué conformément aux instructions du vétérinaire 
officiel devra assurer la destruction du virus de la 
maladie de Newcastle éventuellement présent; 
c) la recherche, dans toute la mesure du possible, et la 
destruction des viandes des volailles provenant de 
l'exploitation, abattues au cours de la période 
présumée d'incubation de la maladie; 
d) la recherche, dans toute la mesure du possible, et la 
destruction des œufs pondus pendant la période 
présumée d'incubation et sortis de l'exploitation étant 
entendu que les volailles déjà issues de ces œufs 
doivent être placées sous surveillance officielle; 
e) après l'exécution des opérations énumérées au point 
a), le nettoyage et la désinfection des bâtiments 
utilisés pour l'hébergement des volailles et de leurs 
abords, des véhicules de transport et de tout matériel 
susceptible d'être contaminé, conformément à l'article 
H; 
f) le respect, après l'exécution des opérations prévues au 
point e), d'un délai sanitaire d'au moins vingt-et-un 
jours; 
g) la réalisation d'une enquête épidémiologique, confor­
mément à l'article 7. 
2. L'autorité compétente peut étendre les mesures 
prévues au paragraphe 1 à d'autres exploitations voisines 
dans le cas où leur implantation, leur topographie ou le 
contact avec l'exploitation où la maladie a été confirmée 
permettent de suspecter une contamination éventuelle. 
Article 6 
1. Dans le cas d'exploitations comprenant deux ou 
plusieurs troupeaux distincts, l'autorité compétente peut 
déroger aux exigences énoncées à l'article 5 paragraphe 
1 point a) en ce qui concerne les troupeaux sains d'une 
exploitation infectée, pour autant que le vétérinaire offi­
ciel ait confirmé que la structure et l'importance de ces 
unités ainsi que les opérations qui y sont effectuées sont 
telles qu'elles sont complètement distinctes sur le plan de 
l'hébergement, de l'entretien et de l'alimentation et 
compte tenu de leur éventuelle immunité vaccinale, de 
telle sorte que les risques de propagation du virus de la 
maladie de Newcastle entre ces unités soient aussi faibles 
que possible. 2. Conformément à la procédure de l'article 24, la 
Commission fixe les critères à appliquer pour l'octroi 
d'une dérogation prévue au paragraphe 1. 
Article 7 
1. L'enquête épidémiologique porte sur: 
— la durée de la période pendant laquelle la maladie de 
Newcastle peut avoir existé dans l'exploitation, 
— l'origine possible de la maladie de Newcastle dans 
l'exploitation et l'identification des autres exploita­
tions dans lesquelles se trouvent des volailles ayant pu 
être infectées ou contaminées à partir de cette même 
source, 
— les mouvements des personnes, des volailles ou 
d'autres animaux, des véhicules, des œufs, des 
viandes et cadavres et de tout matériel ou matière 
susceptibles d'avoir transporté le virus de la maladie 
de Newcastle à partir ou en direction des exploita­
tions en cause. 
2. Une cellule de crise est mise en place en vue de 
coordonner totalement toutes les mesures nécessaires 
pour assurer l'éradication de la maladie de Newcastle 
dans les meilleurs délais et en vue de mettre en œuvre 
l'enquête épidémiologique. 
Les règles générales concernant les cellules de crise 
nationales et la cellule de crise communautaire établies 
dans le règlement (CEE) n° .../... du Conseil sont 
applicables. 
Article 8 
1. Lorsque le vétérinaire officiel a des raisons de 
suspecter que les volailles d'une exploitation peuvent 
avoir été contaminées par suite de mouvements de 
personnes, d'animaux, de véhicules ou de tout autre 
manière, ladite exploitation est placée sous contrôle offi­
ciel conformément au paragraphe 2. 
2. Le contrôle officiel a pour but de détecter immédia­
tement toute suspicion de maladie de Newcastle, de 
procéder au recensement et au contrôle des mouvements 
de volailles ainsi que de prendre éventuellement les 
mesures prévues au paragraphe 3. 
3. Lorsqu'une exploitation a été soumise au contrôle 
officiel, conformément aux dispositions des paragraphes 
1 et 2, l'autorité compétente interdit la sortie des volailles 
de l'exploitation si ce n'est pour le transport direct vers 
un abattoir sous contrôle officiel en vue de leur abattage 
immédiat. Préalablement à l'octroi de ladite autorisation, 
le vétérinaire officiel doit avoir effectué un examen 
clinique des volailles permettant d'exclure la présence de 
la maladie de Newcastle dans l'exploitation. Les restric­
tions de mouvements prévues ci-avant doivent être appli­
quées pendant une période d'au moins vingt-et-un jours 
à compter du dernier jour de contamination potentielle; 
si, pendant cette période de vingt-et-un jours, on 
découvre qu'une contamination a pu avoir lieu, la 
période de restriction ne pourra pas être inférieure à sept 
jours. 
5.6.91 Journal officiel des Communautés européennes N°C 146/15 
4. Lorsqu'elle estime que les conditions le permettent, 
l'autorité compétente peut limiter les mesures prévues au 
présent article à une partie de l'exploitation et aux 
volailles qui s'y trouvent, pour autant que lesdites 
volailles y aient été hébergées, entretenues et alimentées 
de façon totalement séparée et par un personnel distinct. 
Article 9 
1. Dès que le diagnostic de maladie de Newcastle est 
officiellement confirmé, l'autorité compétente délimite, 
autour de l'exploitation infectée, une zone infectée 
comportant une zone de protection d'un rayon minimal 
de trois kilomètres et une zone de surveillance d'un 
rayon minimal de dix kilomètres. La délimitation de ces 
zones doit tenir compte des barrières naturelles et de 
l'épidémiologie du foyer. 
2. Les mesures appliquées dans la zone de protection 
comprennent: 
a) l'identification de toutes les exploitations détenant des 
volailles à l'intérieur de la zone; 
b) des visites périodiques à toutes les exploitations déte­
nant des volailles, un examen clinique desdites 
volailles, comprenant, le cas échéant, un prélèvement 
d'échantillons à des fins d'examen de laboratoire, 
étant entendu qu'un registre des visites et des obser­
vations faites doit être tenu; 
c) le maintien de toutes les volailles dans leurs locaux 
d'hébergement ou dans tout autre lieu permettant leur 
isolement; 
d) la mise en place de moyens appropriés de désinfection 
aux entrées et sorties des exploitations; 
e) le contrôle des mouvements des personnes manipulant 
des volailles, des cadavres de volailles et des œufs 
ainsi que le contrôle des véhicules transportant des 
volailles, des cadavres et des oeufs en provenance ou à 
destination des exploitations; le transport des volailles 
est généralement interdit sauf par les grands axes 
routiers ou ferroviaires; 
f) l'interdiction de sortie des volailles et d'oeufs à couver 
de l'exploitation où ils se trouvent, sauf si l'autorité 
compétente a autorisé le transport: 
i) de volailles en vue de l'abattage immédiat dans un 
abattoir situé de préférence dans la zone infectée 
ou, si cela n'est pas possible, dans un autre abat­
toir situé en dehors de la zone et désigné par 
l'autorité compétente. Les viandes de ces volailles 
sont munies de la marque spéciale de salubrité 
prévue à l'article 6 paragraphe 1 du règlement 
(CEE) n° . . . du Conseil concernant les conditions 
de police sanitaire régissant les échanges intra­
communautaires et les importations en prove­
nance de pays tiers de viandes fraîches de volaille 
et de viandes fraîches de gibier à plume d'élevage; ii) de poussins de un jour ou de poulettes prêtes à la 
ponte vers une exploitation située dans la région 
infectée et dans laquelle il n'y a aucune autre 
volaille. Cette exploitation doit être placée sous le 
contrôle officiel prévu à l'article 8 paragraphe 2; 
iii) d'oeufs à couver vers un couvoir situé dans la 
zone infectée ou vers un couvoir situé hors de la 
zone et désigné par l'autorité compétente, étant 
entendu que les oeufs et leurs emballages doivent 
être désinfectés avant le départ. 
Les mouvements prévus aux points i), ii) et iii) doivent 
être directement exécutés, sous contrôle officiel. Ils ne 
peuvent être autorisés qu'après une visite sanitaire de 
l'exploitation par le vétérinaire officiel. Les moyens de 
transport utilisés doivent être nettoyés et désinfectés 
avant et après leur utilisation; 
g) l'interdiction d'enlever ou d'épandre sans autorisation 
les lisiers et fumiers de volaille; 
h) l'interdiction de tenir des foires, des marchés, des 
expositions et d'autres rassemblements de volailles ou 
d'oiseaux. 
3. La levée des mesures appliquées dans la zone de 
protection intervient au plus tôt 21 jours après l'exécu­
tion, conformément aux dispositions de l'article 11, des 
opérations préliminaires de nettoyage et de désinfection 
dans l'exploitation infectée. La zone de protection est 
alors comprise dans la zone de surveillance. 
4. Les mesures appliquées dans la zone de surveillance 
comprennent: 
a) l'identification de toutes les exploitations détenant des 
volailles dans la zone; 
b) le contrôle des mouvements des volailles et d'oeufs à 
couver à l'intérieur de la zone; 
c) l'interdiction des mouvements de volailles hors de la 
zone pendant les quinze premiers jours, sauf pour les 
acheminer directement vers un abattoir situé en 
dehors de la zone infectée et désigné par l'autorité 
compétente. Les viandes de ces volailles sont munies 
de la marque spéciale de salubrité prévue à l'article 6 
du règlement (CEE) n? .../.. . concernant les condi­
tions de police sanitaire régissant les échanges intra­
communautaires et les importations en provenance de 
pays tiers de viandes fraîches de volaille et de viandes 
fraîches de gibier à plume d'élevage; 
d) l'interdiction des mouvements d'oeufs à couver hors 
de la zone infectée, sauf vers des locaux désignés par 
l'autorité compétente. Les œufs et leurs emballages 
doivent être désinfectés avant le départ; 
e) l'interdiction des mouvements de fumiers et de litières 
de volailles hors de la zone; 
N°C 146/16 Journal officiel des Communautés européennes 5.6.91 
f) l'interdiction de tenir des foires, des marchés, des 
expositions et d'autres rassemblements de volailles ou 
d'autres oiseaux; 
g) sans préjudice des cas prévus aux points b) et c) 
l'interdiction de transporter des volailles, à l'exclusion 
du transit par les grands axes routiers ou ferroviaires. 
5. La levée des mesures appliquées dans la zone de 
surveillance intervient au plus tôt trente jours après 
l'exécution, conformément aux dispositions de l'article 
11, des opérations préliminaires de nettoyage et de 
désinfection dans l'exploitation infectée. 
Article 10 
1. L'autorité compétente fixe les modalités permettant 
de retracer les mouvements d'oeufs et de volailles. 
2. Le propriétaire ou détenteur de volailles est tenu de 
fournir à l'autorité compétente, à la demande de celle-ci, 
les renseignements concernant les mouvements de 
volailles et d'oeufs à destination ou en provenance de son 
exploitation. 
3. Toute personne pratiquant le transport ou le 
commerce de volailles et d'œufs doit être en mesure de 
fournir à l'autorité compétente les informations concer­
nant les mouvements des volailles et d'oeufs qu'elle a 
transportés ou commercialisés et d'apporter tout élément 
se rapportant à ces informations. 
Article 11 
1. Les désinfectants à utiliser ainsi que leurs concen­
trations doivent être approuvés par l'autorité compétente. 
2. Les opérations de nettoyage et de désinfection 
doivent être effectuées sous contrôle officiel, conformé­
ment aux instructions du vétérinaire officiel. 
Article 12 
Les prélèvements d'échantillons et les examens de labora­
toire visant à déceler la présence du virus de la maladie 
de Newcastle doivent être réalisés conformément à 
l'annexe I. 
Article 13 
1. Dans chaque État membre sont désignés: 
a) un ou plusieurs laboratoires nationaux disposant 
d'installations et d'un personnel spécialisé leur 
permettant de réaliser en permanence le typage des 
caractéristiques antigéniques et biologiques du virus 
de la maladie de Newcastle et de confirmer les résul­
tats obtenus par les laboratoires régionaux de 
diagnostic; 
b) un ou plusieurs laboratoires nationaux chargés de 
contrôler les réactifs utilisés par les laboratoires régio­
naux de diagnostic; c) un ou plusieurs instituts ou laboratoires en mesure de 
contrôler l'efficacité, l'activité et la pureté des vaccins 
utilisés pour la prophylaxie dans ce pays ou stockés 
pour faire face à une intervention d'urgence. 
2. Les laboratoires nationaux visés à l'annexe II sont 
responsables de la coordination des normes et des 
méthodes de diagnostic, de l'utilisation de réactifs et du 
testage des vaccins. 
3. Les laboratoires nationaux de la maladie de 
Newcastle visés au paragraphe 2 sont responsables de la 
coordination des normes et des méthodes de diagnostic 
fixées par chaque laboratoire de diagnostic de la maladie 
de Newcastle dans l'État membre. À cette fin, ils: 
a) peuvent fournir des réactifs de diagnostic aux labora­
toires régionaux; 
b) contrôlent la qualité de tous les réactifs de diagnostic 
utilisés dans ledit État membre; 
c) organisent périodiquement des tests comparatifs; 
d) conservent des isolats du virus de la maladie de 
Newcastle provenant de cas confirmés dans ledit État 
membre; 
e) veillent à confirmer les résultats positifs obtenus dans 
les laboratoires de diagnostic régionaux. 
4. Les laboratoires nationaux énumérés à l'annexe II 
coopèrent avec le laboratoire de référence communau­
taire visé à l'article 14. 
Article 14 
Le laboratoire de référence communautaire de la maladie 
de Newcastle est indiqué à l'annexe III. Les compétences 
et obligations de ce laboratoire sont définies pour autant 
qu'elles ne soient pas déjà couvertes par l'article 28 de la 
décision 90/424/CEE du Conseil (') conformément à la 
procédure prévue à l'article 24. 
Article 15 
1. La vaccination contre la maladie de Newcastle à 
l'aide de vaccins autorisés par l'autorité compétente peut 
être pratiquée dans le cadre de mesures de prophylaxie 
ou en complément dv"? mesures de lutte prises lors de 
l'apparition de la maladie. 
2. Seuls sont autorisés les vaccins répondant aux 
conditions suivantes: 
a) les vaccins sont conformes aux exigences de la Phar­
macopée européenne et ont été produits, contrôlés et 
distribués sous surveillance officielle; 
(') JO n° L 224 du 18. 8. 1990, p. 19. 
5. 6. 91 Journal officiel des Communautés européennes N°C 146/17 
b) les vaccins importés des pays tiers satisfont aux 
exigences du point a) ; 
3. D'autres critères concernant l'utilisation de vaccins 
contre la maladie de Newcastle peuvent être établis selon 
la procédure prévue à l'article 24. 
Article 16 
1. Tout État membre pratiquant la vaccination 
préventive volontaire ou obligatoire contre la maladie de 
Newcastle en informe la Commission et les autres États 
membres. 
2. L'information donnée conformément au paragraphe 
1 doit préciser: 
— les caractéristiques et la composition de chaque 
vaccin utilisé, 
— les modalités de contrôle de la distribution, du 
stockage et de l'utilisation des vaccins, 
— les espèces et les catégories de volailles pouvant ou 
devant être soumises à la vaccination, 
— les zones dans lesquelles la vaccination peut ou doit 
être pratiquée. 
Article 17 
1. Lors de la confirmation de la maladie de 
Newcastle, l'autorité compétente peut, afin de compléter 
les autres mesures de lutte prévues par le présent règle­
ment, définir une zone territoriale et une période où sera 
réalisée dans les meilleurs délais, sous contrôle officiel, 
la vaccination systématique (vaccination d'urgence) 
d'espèces désignées de volailles. Un État membre procé­
dant à une vaccination d'urgence informe la Commission 
et les autres États membres dans le cadre du comité vété­
rinaire permanent institué par la décision 68/361/CEE 
du Conseil ('), de la situation à l'égard de la maladie de 
Newcastle et du programme de vaccination d'urgence. 
2. Dans le cas prévu au paragraphe 1, la vaccination 
ou la revaccination des volailles est interdite dans 
l'exploitation soumise aux restrictions visées à l'article 4. 
3. Dans le cas prévu au paragraphe 1: 
a) les espèces désignées de volailles à vacciner doivent 
l'être dans les délais les plus brefs; 
b) toute volaille d'une espèce désignée, née ou introduite 
dans une exploitation de la zone vaccinale, doit être 
ou avoir été vaccinée; 
(') JO n° L 255 du 18. 10. 1968, p. 23. c) pendant tout le déroulement des opérations de vacci­
nation prévues au paragraphe 1, la sortie des volailles 
appartenant aux espèces désignées, détenues dans les 
exploitations situées dans la zone de vaccination est 
interdite sauf: 
— pour les poussins de un jour acheminés vers une 
exploitation où ils doivent être vaccinés, située à 
l'intérieur de la zone vaccinale, 
— pour les volailles acheminées directement vers un 
abattoir situé dans la zone vaccinale pour y être 
immédiatement abattues. Si l'abattoir est situé en 
dehors de la zone vaccinale, les mouvements de 
volailles ne sont autorisés qu'après que le vétéri­
naire officiel a effectué une visite sanitaire de 
l'exploitation; 
d) lorsque les opérations de vaccination prévues au point 
a) ont été achevées, la sortie de la zone vaccinale peut 
être autorisée: 
— pour les poussins de un jour destinés à la produc­
tion de viande acheminés vers une exploitation où 
ils doivent être vaccinés, l'exploitation doit être 
maintenue sous surveillance jusqu'à ce que les 
poulets qui y ont été transportés aient été abattus, 
— pour les volailles vaccinées depuis plus de vingt-
et-un jours et destinées à l'abattage immédiat, 
— pour les oeufs à couver issus de volailles de repro­
duction vaccinées au moins trois semaines aupara­
vant, étant entendu qu'ils doivent avoir subi, ainsi 
que leurs emballages, une désinfection préalable. 
4. Les mesures prévues au paragraphe 3 points b) et d) 
sont maintenues pendant une période de trois mois après 
la fin des opérations de vaccination visées au paragraphe 
1; elles peuvent être renouvelées pour une ou plusieurs 
périodes supplémentaires de trois mois. 
5. Par dérogation aux dispositions du paragraphe 3 
points a) et b), l'autorité compétente peut soustraire à la 
vaccination systématique prévue certains troupeaux de 
volailles d'une valeur scientifique particulière, à condi­
tion que toutes les dispositions soient prises par l'autorité 
compétente pour en assurer la protection sanitaire et 
qu'ils soient soumis à une surveillance sérologique pério­
dique. 
6. La Commission suit l'évolution de la situation 
concernant la maladie et si nécessaire peut, conformé­
ment à la procédure fixée à l'article 24, prendre une 
décision notamment en rapport avec le contrôle des 
mouvements et de la vaccination. 
Article 18 
1. Lorsque, dans une région déterminée, une épizootie 
de maladie de Newcastle présente un caractère excep­
tionnellement grave et une tendance à la dispersion, 
l'État membre concerné: 
N°C 146/18 Journal officiel des Communautés européennes 5. 6. 91 
— déclare zone à haut risque sanitaire une zone territo-
rialement délimitée englobant au moins toutes les 
zones de protection et de surveillance établies dans 
cette zone, 
— applique les mesures prescrites à l'article 9 para­
graphe 3 dans la zone à haut risque sanitaire, 
— interdit la sortie de toute volaille vivante et des œufs 
à couver de la zone à haut risque sanitaire, 
— informe la Commission et les autres États membres 
dans le cadre du comité vétérinaire permanent sur la 
situation concernant la maladie et les mesures de 
lutte appliquées. 
2. Les frontières de la zone à haut risque sanitaire 
peuvent être revues par élimination progressive des zones 
de surveillance. Les mesures prévues au paragraphe 1 
sont levées après élimination de la dernière zone de 
surveillance. 
3. En cas de persistance d'une situation exceptionnel­
lement alarmante, l'ensemble des mesures à prendre par 
l'État membre concerné, notamment la détermination de 
la zone à haut risque sanitaire et les recours aux disposi­
tions de l'article 17, peut faire l'objet d'une décision 
selon la procédure prévue à l'article 24. 
Article 19 
1. L'utilisation, pour l'alimentation des volailles, des 
eaux grasses provenant des moyens de transport interna­
tionaux tels que navires, véhicules terrestres et aéronefs 
est interdite, ces eaux grasses devant être collectées et 
détruites sous contrôle officiel. 
2. L'utilisation, pour l'alimentation des volailles, 
d'eaux grasses autres que celles visées au paragraphe 1 
ou de déchets de volailles ne peut être autorisée qu'après 
un traitement par la chaleur assurant la destruction du 
virus de la maladie de Newcastle. 
3. Si nécessaire, la Commission fixe, conformément à 
la procédure de l'article 24, les critères d'application du 
paragraphe 2. 
Article 20 
1. Chaque État membre établit un plan d'urgence, 
spécifiant les mesures nationales à mettre en oeuvre en 
cas d'apparition de la maladie de Newcastle. 
Ce plan devrait permettre l'accès aux installations, à 
l'équipement, au personnel et à tout autre matériel 
approprié nécessaires pour une éradication rapide et effi­
cace du foyer. Il doit donner une indication précise des 
besoins en vaccin dont chaque État membre estime avoir 
besoin pour une vaccination d'urgence. 2. Les critères à appliquer à l'établissement du plan 
d'urgence sont ceux qui sont définis dans la décision 
91/42/CEE de la Commission ('), mutatis mutandis. 
Conformément à l'article 24, la Commission peut modi­
fier ou compléter les critères compte tenu de la nature 
spécifique de la maladie de Newcastle. 
3. Les plans établis conformément aux critères visés au 
paragraphe 2 sont soumis à la Commission au plus tard 
douze mois après l'entrée en vigueur du présent règle­
ment. 
4. La Commission examine les plans afin de déter­
miner s'ils permettent d'atteindre l'objectif visé et 
propose à l'État membre en cause toute modification 
nécessaire, notamment en vue de garantir qu'ils sont 
compatibles avec ceux des autres États membres. 
La Commission approuve les plans, éventuellement 
modifiés, conformément à la procédure fixée à l'article 
24. 
Les plans peuvent être modifiés ou complétés ultérieure­
ment selon la même procédure pour tenir compte de 
l'évolution de la situation. 
Article 21 
Les experts vétérinaires de la Commission peuvent, en 
collaboration avec les autorités de l'État membre en 
cause et dans la mesure nécessaire pour garantir une 
application uniforme du présent règlement, procéder à 
des contrôles sur place; la Commission informe les États 
membres des résultats de l'enquête. 
Un État membre sur le territoire duquel un contrôle est 
en cours fournit aux experts toute l'assistance nécessaire 
à l'accomplissement de leur mission. 
Les dispositions générales d'application du présent article 
sont fixées conformément à la procédure de l'article 24. 
Article 22 
Les modalités de participation financière de la Commu­
nauté aux actions découlant du présent règlement sont 
fixées dans la décision 90/424/CEE. 
Article 23 
Les annexes du présent règlement peuvent être modifiées 
par la Commission conformément à la procédure fixée à 
l'article 24, en particulier pour tenir compte de l'évolu­
tion des procédures de diagnostic. 
0) JO n° L 33 du 29. 1. 1991, p. 29. 
5.6.91 Journal officiel des Communautés européennes N°C 146/19 
Article 24 
1. La Commission est assistée par le comité vétérinaire 
permanent, ci-après dénommé «le comité». 
2. Au cas où il est fait référence à la procédure définie 
au présent article, les dispositions suivantes sont applica­
bles. 
Le représentant de la Commission soumet au comité un 
projet des mesures à prendre. Le comité émet son avis 
sur ce projet dans un délai que le président peut fixer en 
fonction de l'urgence de la question en cause, le cas 
échéant en procédant à un vote. L'avis est inscrit au procès-verbal; en outre, chaque État 
membre peut demander que son avis figure dans le 
compte rendu. 
La Commission tient le plus grand compte de l'avis émis 
par le comité. Elle informe le comité de la façon dont 
elle a tenu compte de cet avis. 
Article 25 
Le présent règlement entre en vigueur le 1er juillet 1991. 
Le présent règlement est obligatoire dans tous ses 
éléments et directement applicable dans tout État 
membre. 
ANNEXE I 
MÉTHODES DIAGNOSTIQUES POUR LA CONFIRMATION ET DIAGNOSTICS DIFFÉREN­
TIELS DE LA MALADIE DE NEWCASTLE 
Les procédures ci-après d'isolement et de caractérisation des virus de la maladie de Newcastle doivent être 
considérées comme des orientations et comme les minima à appliquer pour les diagnostics de la maladie. 
Le virus responsable de la maladie de Newcastle est le virus prototype des Paramyzoviridae. À l'heure 
actuelle, il existe neuf groupes de paramyxovirus aviaires pouvant être distingués sur le plan sérologique, 
dénommés en conséquence PMV-1 ,PMV-2, . . . PMV-9. Tous les virus de la maladie de Newcastle sont 
classés dans le groupe PMV-1. Pour les besoins des techniques de diagnostic permettant de confirmer la 
maladie de Newcastle et pour de diagnostic différentiel, la définition suivante est applicable. 
On entend par maladie de Newcastle une infection de la volaille provoquée par toute souche aviaire du 
paramyxovirus 1 ayant, chez les poussins d'un jour, un indice de pathogénie intracérébrale (ICPI) supérieur 
à 0,7. 
CHAPITRE PREMIER 
Échantillonnage et traitement des échantillons 
1. Échantillons 
Écouvillonnages cloacaux (ou fèces) et écouvillonnages trachéaux d'oiseaux malades; fèces ou contenus 
des organes (intestin, encéphale, trachée, poumons, foie, rate et autres) manifestement infectés prove­
nant de cadavres frais d'oiseaux. 
2. Traitement des échantillons 
Les organes et tissus susmentionnés peuvent être groupés mais il est impératif que le matériel fécal soit 
traité séparément. Les écouvillonnages doivent être placés dans une quantité de milieu antibiotique suffi­
sante pour assurer leur immersion totale. Les échantillons de fèces et d'organes doivent être homogé­
néisés (à l'aide d'un mélangeur fermé ou d'un pilon et d'un mortier et de sable stérile) dans un milieu 
antibiotique jusqu'à l'obtention de suspensions à 10 à 20 % p/v dans le milieu. Laisser reposer les 
suspensions pendant deux heures environ à la température ambiante (ou plus longtemps à 4 °C), puis les 
clarifier par centrifugation (par exemple, 800 à 1 000 x g pendant dix minutes). 
N°C 146/20 Journal officiel des Communautés européennes 5. 6. 91 
3. Milieu antibiotique 
Différents laboratoires ont utilisé avec succès diverses formulations de milieux antibiotiques et les labo­
ratoires visés à l'annexe II seront en mesure d'offrir des conseils. Des concentrations élevées d'antibioti­
ques sont nécessaires pour les échantillons de fèces. Le mélange suivant est typique: 10 000 unités par 
millilitre de pénicilline, 10 milligrammes par millilitre de streptomycine, 0,25 milligramme par millilitre 
de gentamycine et 5 000 unités par millilitre de mycostatine dans une solution tamponnée au phosphate 
(PBS). Ces taux peuvent être cinq fois moins élevés pour les tissus et les écouvillonnages trachéaux. Pour 
le contrôle des Cblamydia, l'addition de 50 milligrammes par millilitre d'oxytétracycline est autorisée. 
Lors de la confection du milieu, il est impératif que le pH soit contrôlé après addition des antibiotiques 
et ajusté pour obtenir un pH compris entre 7,0 et 7,4. 
CHAPITRE 2 
Isolement du virus 
Isolement du virus dans les œufs embryonnés de poules 
Inoculer entre 0,1 et 0,2 millilitre du surnageant clarifié dans la cavité allantoïdienne d'au moins quatre 
œufs embryonnés de poules, mis à incuber pendant 8 à 10 jours. Idéalement, ces œufs devraient être issus 
d'un troupeau exempt d'organes pathogènes spécifiques (EOPS) mais si cela n'est pas possible, il est admis 
d'utiliser des œufs issus d'un troupeau reconnu exempt d'anticorps du virus de la maladie de Newcastle. 
Les œufs inoculés sont conservés à 37 °C et mirés quotidiennement. Au fur et à mesure, les œufs contenant 
des embryons morts ou mourants et tous les œufs restant après six jours d'inoculation doivent être réfri­
gérés à 4 °C et faire l'objet d'une recherche d'hémagglutinines à partir du liquide allantoïdien/amniotique. 
En l'absence d'hémagglutination, la procédure ci-avant est répétée en utilisant comme inoculum le liquide 
allantoïdien/amniotique non dilué. 
Lorsqu'il y a hémagglutination, la présence de bactéries doit être exclue par culture. S'il y a des bactéries, il 
est admis de passer les liquides par un filtre à membrane de 450 nm, d'ajouter un complément d'antibioti­
ques et d'inoculer les œufs embryonnés comme ci-avant. 
CHAPITRE 3 
Diagnostic différentiel 
1. Differentiation préliminaire 
L'intention est que tous les virus hémagglutinants soient soumis au laboratoire national à des fins 
d'identification complète, de caractérisation et de tests de pathogénicité. Toutefois, il est important de 
mettre en œuvre, dès que possible, des mesures intérimaires de lutte contre la maladie de Newcastle 
visant à limiter la propagation du virus et les laboratoires régionaux devraient être en mesure d'identifier 
la présence du virus de cette maladie. Les liquides hémagglutinants devraient donc être utilisés dans un 
test d'hémagglutination tel qu'il est décrit aux chapitres 5 et 6. Une inhibition positive, c'est-à-dire 2*, 
ou plus, à l'aide d'un antisérum polyclonal spécifique du virus de la maladie de Newcastle, d'un titre 
connu étant au moins 2', pourra servir d'identification préliminaire permettant la mise en place de 
mesures de contrôle intérimaires. 
2. Confirmation 
Le laboratoire national devrait effectuer le diagnostic différentiel complet de tout agent hémagglutinant. 
La confirmation du virus de la maladie de Newcastle devrait à nouveau se faire par inhibition à l'aide de 
tests d'inhibition de l'hémagglutination avec des anusérums monospécifiques de poulet. Des tests de 
recherche de l'indice de pathogénicité intracérébral selon la procédure décrite au chapitre 7 devraient 
être effectués sur tous les isolats positifs. Des indices de pathogénicité supérieurs à 0,7 indiquent la 
présence du virus et exigent la pleine application de mesures de contrôle. 
Des développements récents dans le typage des virus de la maladie de Newcastle, notamment les techni­
ques faisant appel à des anticorps monoclonaux, ont permis le groupage des souches et des isolats. En 
particulier, il existe des anticorps monoclonaux spécifiques des souches vaccinales utilisées dans la 
Communauté européenne qui peuvent être employés dans des tests simples d'inhibition de l'hémaggluti­
nation. 
Étant donné que des souches de vaccins vivants peuvent souvent être isolées à partir d'échantillons de 
volaille, les avantages que présente leur identification rapide par le laboratoire national sont évidents. 
Ces anticorps monoclonaux pourraient être obtenus auprès du laboratoire communautaire de référence 
et fournis aux laboratoires nationaux pour permettre la confirmation de l'isolement des virus vaccinaux. 
5.6.91 Journal officiel des Communautés européennes N° C 146/21 
Les laboratoires nationaux devraient soumettre tous les agents d'hémagglutination au laboratoire de 
référence communautaire. 
3. Poursuite du typage et caractérisation des isolats 
Le laboratoire de référence communautaire devrait recevoir tous les virus hémagglutinants des labora­
toires nationaux à des fins de complément d'études antigéniques et génétiques permettant de mieux 
comprendre l'épizootiologie de la maladie/des maladies au sein de la Communauté européenne, dans le 
cadre des fonctions et des obligations du laboratoire de référence. 
CHAPITRE 4 
Tests rapides de détection du virus et des anticorps de la maladie de Newcastle 
Tests rapides de détection du virus de la maladie de Newcastle chez les oiseaux vaccinés et de détection des 
anticorps chez les oiseaux non vaccinés 
1. Détection du virus de la maladie de Newcastle 
Différents tests rapides permettant de détecter directement les antigènes de la maladie de Newcastle ont 
été utilisés dans le diagnostic des infections chez des oiseaux vaccinés. Les plus couramment utilisés 
jusqu'à présent sont les tests aux anticorps fluorescents sur des sections longitudinales de la trachée et 
les tests aux anticorps à la péroxydase sur l'encéphale. Il n'y a aucune raison de douter que d'autres tests 
de détection directe de l'antigène puissent être utilisés pour les infections dues au virus de la maladie de 
Newcastle. 
L'inconvénient de ces tests est que l'examen de tous les sites potentiels de replication du virus de la 
maladie de Newcastle chez les oiseaux vaccinés est irréalisable. Par exemple, l'absence de l'évidence du 
virus dans la trachée n'exclut pas la replication du virus dans l'intesun. Aucune méthode directe de 
détection n'est recommandée pour un usage de routine dans le diagnostic de la maladie de Newcastle 
même si, dans des circonstances bien spécifiques, de tels tests peuvent jouer un rôle utile. 
2. Détection d'anticorps chez les oiseaux non vaccinés 
La majorité des laboratoires qui effectuent les diagnostics de la maladie de Newcastle sont familiarisés 
avec le test d'inhibition de l'hémagglutination et la recommandation donnée plus bas concerne ce test 
pour ce qui est de la mesure des anticorps du virus. Toutefois, des méthodes immuno-enzymatiques 
(ELISA) peuvent être utilisées avec succès pour déceler des anticorps antivirus. Il est suggéré que si 
quelqu'un souhaite utiliser un test ELISA au niveau d'un laboratoire régional, le test soit contrôlé par le 
laboratoire national visé à l'annexe II. 
a) Échantillons 
Les échantillons sanguins doivent être prélevés sur tous les oiseaux pour les troupeaux en comptant 
moins de vingt et sur vingt oiseaux pour les troupeaux plus importants (cela donne une probabilité de 
99 % de déceler au moins 1 sérum positif si 25 % ou plus des animaux du troupeau sont positifs, 
quelle que soit la taille du troupeau). Pour le test, il convient de laisser coaguler le sang et d'enlever 
le sérum. 
b) Recherche des anticorps 
Il conviendrait de rechercher la capacité des échantillons individuels de sérum à inhiber l'antigène 
hémagglutinant du virus de la maladie de Newcastle dans des tests standard d'inhibition de l'hémag­
glutination comme décrits au chapitre 6. 
Les avis sont partagés quant à la question de savoir s'il convient d'utiliser, pour le test d'inhibition de 
l'hémagglutination, 4 ou 8 unités hémagglutinantes. Il semble que les deux solutions soient valables 
et le choix devrait être laissé à la discrétion des laboratoires nationaux. 
Toutefois, l'antigène utilisé affectera le niveau auquel un sérum est considéré positif: pour 4 unités 
hémagglutinantes, est considéré positif tout sérum dont le titre est égal ou supérieur à 24, pour 8 
unités hémagglutinantes, tout sérum dont le titre est égal ou supérieur à 2\ 
N° C 146/22 Journal officiel des Communautés européennes 5.6.91 
CHAPITRE 5 
Test d'hémagglutination (HA) 
1. Réactifs 
a) Solution isotonique tamponnée au phosphate (PBS) (0,05M), avec un pH compris entre 7,0 et 7,4. 
b) Prélever des hématies en mélange provenant d'au moins trois poules exemptes d'organismes patho­
gènes spécifiques (si l'on n'en dispose pas, prélever du sang sur des oiseaux régulièrement contrôlés 
et reconnus exempts d'anticorps antivirus de la maladie de Newcastle) et les placer dans un volume 
égal de solution d'Alsever. Laver les cellules trois fois dans le PBS avant l'utilisation. Pour l'autre 
test, une suspension à 1 % (valeur hématocrite) dans PBS est recommandée. 
c) La souche Ulster 2C du virus de la maladie de Newcastle est recommandée pour servir d'antigène 
standard. 
2. Méthode 
a) Distribuer 0,025 millilitre de PBS dans chaque puits d'une microplaque en plastique (utiliser des 
fonds en V). 
b) Verser 0,025 millilitre de suspension du virus (c'est-à-dire de liquide allantoïde) dans le premier puits. 
c) Utiliser un microdilueur ou réaliser des dilutions par dédoublement du virus (1/2 à 1/4096) de puits 
en puits. 
d) Ajouter 0,025 millilitre de PBS dans chaque puits. 
e) Ajouter 0,025 millilitre d'hématies à 1 % dans chaque puits. 
f) Mélanger en tapotant doucement et laisser reposer à 4 "C. 
g) Lire les plaques 30 à 40 minutes plus tard lorsque la sédimentation des témoins est achevée. Pour lire, 
incliner la plaque pour observer la présence ou l'absence d'un flux en forme de larme des hématies. 
Les puits sans hémagglutination devraient s'écouler au même rythme que les cellules témoins sans 
virus. 
h) Le titre hémagglutinant correspond à la dilution la plus élevée entraînant l'agglutination des héma­
ties. Cette dilution peut être considérée comme contenant une unité hémagglutinante. Une méthode 
plus précise pour déterminer le titre hémagglutinant consiste à réaliser les tests HA sur des virus 
provenant d'une gamme complète de dilution initiale du type 1/3, 1/4, 1/5, 1/6, etc. Cette méthode 
est recommandée pour la préparation précise de l'antigène destiné aux tests d'inhibition de l'hémag-
glutination (voir chapitre 6). 
CHAPITRE 6 
Test d'inhibition de l'hémagglutination (HI) Test 
1. Réactifs (voir chapitre 5) 
a) PBS. 
b) Liquide allantoïdien contenant le virus, dilué dans du PBS et contenant 4 ou 8 unités hémaggluti-
nantes par 0,025 millilitre. 
c) Hématies de poulet à 1 %. 
d) Sérum témoin négatif de poulet. 
e) Sérum témoin positif. 
5.6.91 Journal officiel des Communautés européennes N° C 146/23 
2. Méthode 
a) Distribuer 0,025 millilitre de PBS dans tous les puits d'une microplaque plastique (puits à fond en V). 
b) Verser 0,025 millilitre de sérum dans le premier puits de la plaque. 
c) Utiliser un microdilueur pour réaliser les dilutions doubles de sérum de puits en puits. 
d) Ajouter 0,025 millilitre de liquide allantoïdien dilué contenant 4 ou 8 unités hémagglutinantes. 
e) Mélanger en tapotant doucement et laisser reposer la plaque à 4°C pendant un minimum de 
soixante minutes ou à la température ambiante pendant un minimum de trente minutes. 
f) Ajouter 0,025 millilitre d'hématies à 1 % dans tous les puits. 
g) Mélanger en tapotant doucement et laisser reposer à 4 °C. 
h) Lire les plaques après 30 à 40 minutes lorsque la sédimentation des hématies témoins est terminée. 
Lire en inclinant la plaque pour observer la présence ou l'absence d'un flux en forme de larme 
s'écoulant au même rythme que les puits témoins contenant des hématies (0,025 millilitre) et du PBS 
(0,05 millilitre) uniquement. 
i) Le titre HI correspond à la dilution la plus élevée d'antisérum entraînant une inhibition complète de 
4 à 8 unités du virus (le titrage du HA pour confirmer la présence du nombre requis d'unités hémag­
glutinantes doit être inclus pour chaque test HI). 
j) La validité des résultats dépend de l'obtention d'un titre inférieur à V pour 4 unités hémagglutinantes 
ou 22 pour 8 unités hémagglutinantes avec le sérum témoin négatif et d'un titre d'une dilution immé­
diatement supérieure ou immédiatement inférieure au titre connu du sérum témoin positif. 
CHAPITRE 7 
Indice de pathogénicité intracérébrale (IPIC) 
1. Diluer à 1/10 dans du liquide physiologique stérile du liquide allantoïdien infectieux fraîchement récolté 
(le titre HA doit être supérieur à 24) (l'emploi d'antibiotiques est interdit). 
2. Injecter par voie intracérébrale 0,05 millilitre du virus dilué à dix poussins de un jour (c'est-à-dire âgés 
de plus de 24 heures et de moins de 40 heures après Péclosion); ces poussins doivent être issus d'oeufs 
provenant d'un troupeau exempt d'organismes pathogènes spécifiques. 
3. Examiner-les sujets à 24 heures d'intervalle pendant 8 jours. 
4. À chaque observation, attribuer un coefficient à chaque animal: 0 = normal, 1 = malade, 2 = mort. 
5. Calculer l'incide selon l'exemple ci-après. 
Signes cliniques 
Normaux 
Malades 
Morts Jour suivant l'inoculation 
(nombre d'oiseaux) 
1 
10 
0 
0 2 
4 
6 
0 3 
0 
10 
0 4 
0 
4 
6 5 
0 
0 
10 6 
0 
0 
10 7 
0 
0 
10 g 
0 
0 
10 Total 
14 @ 0 
20 @ 1 
46 @ 2 
TOTAL Score 
- 0 
- 20 
- 92 
= 112 
Indice = résultat moyen par animal et par observations = 112/80 = 1,4. 
N°C 146/24 Journal officiel des Communautés européennes 5.6.91 
CHAPITRE 8 
Évaluation de la capacité à former des plages 
1. Il est généralement préférable d'utiliser une gamme de dilution du virus pour faire en sorte d'obtenir un 
nombre optimal de plages sur la plaque. Des dilutions décuples allant jusqu'à 10-r dans le PBS devraient 
être suffisantes. 
2. Des cultures monocouches confluentes de cellules d'embryon de poulet ou une lignée cellulaire appro­
priée (par exemple, Madin-Darby bovine kidney) sont préparées dans des boîtes de Pétri de 5 centimè­
tres de diamètre. 
3. Ajouter 0,2 millilitre de chaque dilution du virus dans chacune des deux boîtes de Pétri et laisser reposer 
trente minutes pour l'absorption du virus. 
4. Après avoir été lavées trois fois au PBS, les cellules infectées sont recouvertes d'un milieu approprié 
contenant de l'agar à 1 % p/v et éventuellement 0,01 milligramme par millilitre de trypsine. Il est impor­
tant de n'ajouter aucun sérum au milieu d'immersion. 
5. Après une incubation de 72 heures à 37 °C, les plages devraient être d'une taille suffisante. Pour une 
meilleure observation, enlever la couverture d'agar et colorer la culture monocouche à l'aide de crystal 
violet (0,5 % p/v) dans 25 % p/v d'éthanol. 
6. Tous les virus doivent présenter des plages claires lorsqu'ils sont incubés dans un milieu contenant de la 
trypsine. Lorsque les milieux de couverture ne contiennent pas de trypsine, seuls les virus virulents pour 
les poulets formeront des plages. 
ANNEXE II 
LISTE DES LABORATOIRES NATIONAUX DE LA MALADIE DE NEWCASTLE 
BELGIQUE Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, 
B-1180 Bruxelles 
DANEMARK National Veterinary Laboratory, Poultry Disease Division, 
Hangavej 2, DK-8200 Àrhus N 
RÉPUBLIQUE FÉDÉRALE Institut fur Kleintierzucht der Bundesforschungsanstalt fur 
D'ALLEMAGNE Landwirtschaft, Braunschweig-Vôlkenrode, Postfach 2 80, 
D-W-3100 Celle 
FRANCE Centre national d'études vétérinaires et alimentation — Labora­
toire central de recherches agricoles et porcine, boîte postale 53, 
F-22440 Ploufragan 
GRÈCE Institut de maladies infectieuses et parasitaires d'Athènes, 25 rue 
Napoleos, 153 10, Agia Paraskevi, Attiki 
IRLANDE Veterinary Research Laboratory, Abbotstown, Castleknock, 
IRL-Dublin 15 
ITALIE Istituto zooprofilattico sperimentale di Padova, via G. Orus n. 
2, 1-35100 Padova 
LUXEMBOURG Institut national de recherches vétérinaires, Groeselenberg 99, 
B-1180 Bruxelles 
PAYS-BAS Centraal Diergeneeskundig Instituut, Vestiging Virologie, 
Hourtibweg 39, NL-8221 RA Lelystad 
5.6.91 Journal officiel des Communautés européennes N° C 146/25 
PORTUGAL Laboratôrio Nacional de Investigaçào Veterinâria (LNIV), 
Estrada de Benfica, 701, P-1500 Lisboa 
ESPAGNE Laboratôrio de Sanidad y Producciôn Animal, Zona Franca, 
Circcunvalaciôn — Tramo 6, Esquina Calle 3, E-08004 Barce-
lona 
ROYAUME-UNI Central Veterinary Laboratory, New Haw, Weybridge, 
UK-Surrey KT15 3NB 
ANNEXE III 
NOM DU LABORATOIRE DE RÉFÉRENCE COMMUNAUTAIRE POUR LA MALADIE DE 
NEWCASTLE 
Central Veterinary Laboratory 
New Haw 
Weybridge 
UK-Surrey KT15 3NB