2)

L’annexe VI est modifiée comme suit: a) la partie II est modifiée comme suit: i) au chapitre 1, section 1, la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «Les visites sanitaires et l’échantillonnage aux fins de la surveillance visée à l’article 3, paragraphe 2, points b) ii) et b iii), doivent être conformes aux exigences suivantes:»; ii) le chapitre 2 est modifié comme suit: — à la section 1, la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «Les visites sanitaires et l’échantillonnage aux fins de la surveillance visée à l’article 3, paragraphe 2, points b) ii) et b iii), doivent être conformes aux exigences suivantes:»; — la section 5 est remplacée par le texte suivant: «Section 5 Méthodes d’échantillonnage et de diagnostic 1. Les organes ou tissus à prélever et à examiner doivent être les suivants: a) histologie: rein antérieur, foie, cœur, pancréas, intestins, rate et branchies; b) immunohistochimie: rein médian et cœur, y compris les valves et le bulbe artériel; c) analyse par techniques RT-PCR et RT-qPCR conventionnelles: rein médian et cœur; d) culture du virus: rein médian, cœur et rate; il est possible de regrouper des fragments d’organes provenant de cinq poissons au maximum. 2. La méthode de diagnostic à utiliser en vue de l’octroi ou du maintien du statut “indemne d’infection par des variants délétés dans la RHP du VAIS” conformément aux sections 2, 3 et 4 doit être l’analyse par RT-qPCR suivie des techniques RT-PCR conventionnelles et du séquençage du gène HE des échantillons positifs conformément aux méthodes et procédures détaillées approuvées par le LRUE pour les maladies des poissons. En cas de résultat positif à des variants délétés dans la RHP du VAIS à l’issue du séquençage, d’autres échantillons doivent être testés avant la mise en œuvre des premières mesures de lutte prévues aux articles 55 à 65. Ces échantillons doivent être testés comme suit, conformément aux méthodes et procédures détaillées approuvées par le LRUE pour les maladies des poissons: a) examen des échantillons par RT-qPCR, suivi des techniques RT-PCR conventionnelles et d’un séquençage du gène HE dans les échantillons positifs pour vérifier les délétions dans la RHP; ou b) détection de l’antigène du VAIS dans des préparations tissulaires à l’aide d’anticorps spécifiques dirigés contre le VAIS; ou c) isolement en culture cellulaire suivi d’une identification des variants délétés dans la RHP du VAIS. 3. Lorsqu’il est nécessaire de confirmer ou d’écarter une suspicion d’infection par des variants délétés dans la RHP du VAIS en vertu de l’article 55, les procédures de visite, d’échantillonnage et d’essai suivantes doivent être respectées: a) l’établissement suspect doit faire l’objet d’au moins une visite sanitaire et d’un échantillonnage portant sur dix poissons moribonds en présence de signes cliniques ou de lésions post-mortem évoquant une infection par des variants délétés dans la RHP du VAIS ou sur au moins 30 poissons en l’absence de signes cliniques ou de lésions post mortem. Les échantillons doivent être testés à l’aide d’une ou de plusieurs des méthodes de diagnostic indiquées au point 2, conformément aux procédures et méthodes de diagnostic détaillées approuvées par le LRUE pour les maladies des poissons; b) en cas de résultat positif pour les variants délétés dans la RHP du VAIS, d’autres échantillons doivent être testés avant la mise en œuvre des premières mesures de lutte prévues à l’article 58. Les suspicions d’infection par des variants délétés dans la RHP du VAIS doivent être confirmées conformément aux critères ci-après, suivant une ou plusieurs des méthodes et procédures de diagnostic détaillées approuvées par le LRUE pour les maladies des poissons: i) détection du VAIS par RT-qPCR, suivie des techniques RT-PCR conventionnelles et d’un séquençage du gène HE pour vérifier les délétions dans la RHP; ou ii) détection du VAIS dans des préparations tissulaires à l’aide d’anticorps spécifiques dirigés contre le VAIS; ou iii) isolement et identification du VAIS dans une culture de cellules provenant d’au moins un échantillon prélevé sur n’importe quel poisson issu de l’établissement; c) lorsque des signes cliniques, macropathologiques ou histopathologiques évoquant l’infection sont observés, ces constatations doivent être corroborées au moyen d’une ou de plusieurs des méthodes de diagnostic prévues au point 3 b), conformément aux méthodes et procédures de diagnostic détaillées approuvées par le LRUE pour les maladies des poissons. Une suspicion de variants délétés dans la RHP du VAIS peut être écartée lorsqu’il est établi, à l’issue des tests et visites sanitaires réalisés sur une période de 12 mois à partir de la date à laquelle la suspicion est née, qu’aucun élément supplémentaire ne prouve la présence du virus.»; iii) au chapitre 3, section 1, la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «Les visites sanitaires et l’échantillonnage aux fins de la surveillance visée à l’article 3, paragraphe 2, points b) ii) et b iii), doivent être conformes aux exigences suivantes:»; iv) au chapitre 4, section 1, la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «Les visites sanitaires et l’échantillonnage aux fins de la surveillance visée à l’article 3, paragraphe 2, points b) ii) et b iii), doivent être conformes aux exigences suivantes:»; v) au chapitre 5, section 1, la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «Les visites sanitaires et l’échantillonnage aux fins de la surveillance visée à l’article 3, paragraphe 2, points b) ii) et b iii), doivent être conformes aux exigences suivantes:»; vi) au chapitre 6, section 1, la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «Les visites sanitaires et l’échantillonnage aux fins de la surveillance visée à l’article 3, paragraphe 2, points b) ii) et b iii), doivent être conformes aux exigences suivantes:»; b) la partie III est modifiée comme suit: i) au chapitre 3, section 3, point b), la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «b) d’être repeuplé avec des mollusques provenant d’établissements qui:»; ii) au chapitre 4, section 3, point b), la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «b) d’être repeuplé avec des mollusques provenant d’établissements qui:» iii) au chapitre 5, section 3, point b), la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «b) d’être repeuplé avec des mollusques provenant d’établissements qui:»; iv) au chapitre 6, section 3, point b), la phrase introductive est remplacée par le texte suivant: «b) d’être repeuplé avec des crustacés provenant d’établissements qui:».