DIRECTIVE DE LA COMMISSION

du 29 avril 1981

portant fixation de la méthode communautaire d'analyses pour le contrôle officiel du chlorure de vinyle cédé par les matériaux et objets aux denrées alimentaires

(81/432/CEE)

LA COMMISSION DES COMMUNAUTÉS EUROPÉENNES,

vu le traité instituant la Communauté économique européenne,

vu la directive 78/142/CEE du Conseil, du 30 janvier 1978, relative au rapprochement des législations des États membres en ce qui concerne les matériaux et objets contenant du chlorure de vinyle monomère destinés à entrer en contact avec les denrées alimentaires (1), et notamment son article 3,

considérant qu'il est prévu à l'article 2 de la directive 78/142/CEE que les matériaux et objets ne doivent pas céder aux denrées alimentaires qui sont mises en contact ou ont été mises en contact avec ces matériaux et objets une quantité de chlorure de vinyle détectable au moyen d'une méthode ayant une limite de détection de 0,01 milligramme par kilogramme, et, à l'article 3, que cette limite doit être contrôlée au moyen d'une méthode d'analyse communautaire;

considérant que, sur la base d'une série d'essais inter-laboratoires, la méthode décrite dans l'annexe s'est révélée suffisamment exacte et reproductible pour être adoptée comme méthode communautaire;

considérant que la mesure prévue par la présente directive est conforme à l'avis du comité permanent des denrées alimentaires,

A ARRÊTÉ LA PRÉSENTE DIRECTIVE:

Article premier

L'analyse nécessaire au contrôle officiel du chlorure de vinyle cédé par les matériaux et objets aux denrées alimentaires est effectuée selon la méthode décrite dans l'annexe.

Article 2

Les États membres mettent en vigueur les dispositions législatives, réglementaires et administratives nécessaires pour se conformer à la présente directive au plus tard le 1er octobre 1982. Ils en informent immédiatement la Commission.

Article 3

Les États membres sont destinataires de la présente directive.

(1) JO no L 44 du 15. 2. 1978, p. 15.

ANNEXE

DÉTERMINATION DU CHLORURE DE VINYLE CÉDÉ PAR LES MATÉRIAUX ET OBJETS AUX DENRÉES ALIMENTAIRES

1. OBJET ET DOMAINE D'APPLICATION

La méthode permet de déterminer la teneur en chlorure de vinyle des denrées alimentaires.

2. PRINCIPE

La teneur en chlorure de vinyle (CV) des denrées alimentaires est déterminée par chromatographie en phase gazeuse selon la technique dite «espace de tête».

3. RÉACTIFS

3.1. Chlorure de vinyle (CV) de pureté supérieure à 99,5 % (v/v).

3.2. N,N-diméthylacétamide (DMA), exempt d'impuretés susceptibles d'avoir les mêmes temps de rétention que le CV ou que l'étalon interne (3.3), dans les conditions d'essai.

3.3. Éther diéthylique ou 2-cis-butène, dans le DMA (3.2) comme étalon interne. Ces étalons internes doivent être exempts d'impuretés susceptibles d'avoir les mêmes temps de rétention que le CV, dans les conditions de l'essai.

3.4. Eau distillée ou déminéralisée de pureté équivalente.

4. APPAREILLAGE

NB:

Seuls les instruments ou éléments d'appareils de type spécial ou correspondant à des spécifications particulières ont été mentionnés. Les appareils et équipements de laboratoire usuels sont censés être disponibles.

4.1. Un chromatographe en phase gazeuse muni d'un dispositif automatique d'échantillonnage «espace de tête» ou équipé des appareils nécessaires pour l'injection manuelle de l'échantillon.

4.2. Un détecteur à ionisation de flamme ou autres détecteurs mentionnés au point 7.

4.3. Une colonne à chromatographie en phase gazeuse. La colonne doit permettre la séparation des pics de l'air, du CV et de l'étalon interne, lorsque ce dernier a été utilisé. En outre le système combiné des points 4.2 et 4.3 doit permettre que le signal obtenu à l'aide d'une solution de CV à 0,005 mg/1 de DMA ou de CV à 0,005 mg/kg de DMA, soit égal à au moins cinq fois le bruit de fond.

4.4. Des fioles ou flacons contenant l'échantillon sont munis de septa en silicone ou en caoutchouc butylique. L'utilisation des procédés manuels d'échantillonnage peut entraîner, lors du prélèvement de l'échantillon dans l'espace de tête au moyen d'une seringue, la formation d'un vide partiel dans la fiole ou le flacon. Aussi est-il recommandé d'utiliser des fioles plus grandes si l'on applique des procédés manuels ne permettant pas de pressuriser les fioles avant le prélèvement des échantillons.

4.5. Micro-seringues.

4.6. Seringues à gaz pour l'échantillonnage manuel dans l'espace de tête.

4.7. Balance analytique, précision 0,1 mg.

5. MODE OPÉRATOIRE

ATTENTION: le CV est une substance dangereuse gazeuse à la température ambiante, c'est pourquoi la préparation des solutions doit être réalisée dans une hotte bien ventilée.

NB:

prendre toutes les précautions nécessaires pour éviter toute perte de CV ou de DMA,

en cas d'utilisation de techniques d'échantillonnage manuel, un étalon interne (3.3) devrait être employé,

en cas d'utilisation d'un étalon interne, employer la même solution pendant toute l'opération.

5.1. Préparation de la solution étalon de CV (solution A)

5.1.1. Solution étalon concentrée de CV à 2 000 mg/kg environ

Peser, à 0,1 mg près, un récipient en verre approprié; ajouter dans ce récipient une certaine quantité (par exemple 50 ml) de DMA (3.2). Peser à nouveau. Ajouter au DMA une certaine quantité (par exemple 0,1 g) de CV (3.1) à l'état liquide ou gazeux, en l'injectant lentement dans le DMA. Pour ajouter le CV, on peut également le faire barboter dans le DMA, à condition d'utiliser un dispositif permettant d'éviter les pertes de DMA. Peser de nouveau, à 0,1 mg près. Attendre deux heures pour atteindre l'équilibre. Si un étalon interne est utilisé, ajouter l'étalon interne de telle façon que la concentration de l'étalon interne dans la solution étalon de CV soit la même que dans la solution d'étalon interne préparée au point 3.3. Conserver la solution étalon dans un réfrigérateur.

5.1.2. Préparation de la solution étalon diluée de CV

Peser une quantité de solution étalon concentrée de CV (5.1.1) et étendre à un volume ou à un poids connu de DMA (3.2) ou d'une solution étalon interne (3.3). La concentration de la solution étalon diluée ainsi obtenue (solution A) s'exprime en mg/1 ou mg/kg.

5.1.3. Préparation de la courbe d'étalonnage à l'aide de la solution A

NB:

la courbe doit être composée d'au moins sept paires de points,

la répétabilité des mesures (1) doit être inférieure à 0,002 mg CV/1 ou kg de DMA,

la courbe doit être calculée à partir de ces points par la méthode des moindres carrés, c'est-à-dire que la ligne de régression doit être calculée à l'aide de l'équation suivante:

y = a1 x + a0

dans laquelle:

et

ou

y = la hauteur ou la surface des pics pour chaque détermination, x = la concentration correspondante sur la ligne de régression, n = le nombre de détermination effectuées (n ≥ 14),

la courbe doit être linéaire: c'est-à-dire que l'écart type (s) des différences entre les réponses mesurées (yi) et la valeur correspondante des réponses calculées à partir de la ligne de régression (zi) divisée par la valeur moyenne (y) de toute les réponses mesurées ne doit pas dépasser 0,07.

Ceci sera calculé ainsi:

où:

et

où:

yi = chaque réponse individuelle mesurée, zi = la valeur correspondante de la réponse (yi) sur la ligne de régression calculé, n = ≥ 14.

Préparer deux séries d'au moins 7 fioles (4.4). Verser dans chaque fiole des volumes de solution étalon diluée de CV (5.1.2) et de DMA (3.2) ou de solution étalon interne (3.3) tels que les concentrations finales en CV des solutions en double soient approximativement égales à 0, 0,005, 0,010, 0,020, 0,030, 0,040, 0,050, etc. mg/1 ou mg/kg de DMA et que chaque fiole contienne le même volume total de solution. La quantité de solution étalon diluée de CV (5.1.2) doit être telle que le rapport entre le volume total (μl) de solution de CV ajoutée et la quantité (g ou ml) de DMA ou la solution étalon interne (3.3) ne dépasse pas 5. Sceller les fioles et procéder comme indiqué aux points 5.4.2, 5.4.3 et 5.4.5. Établir un diagramme comportant en ordonnées les aires (ou les hauteurs) des pics de CV des deux séries de fioles ou encore le rapport entre ces aires (ou les hauteurs) et celles relatives aux pics de l'étalon interne et, en abscisses, les concentrations des deux séries de solutions.

5.2. Vérification de la préparation des solutions étalon obtenues en 5.1

5.2.1. Préparation d'une deuxième solution étalon de CV (solution B)

Répéter l'opération décrite au point 5.1.1 et 5.1.2 pour obtenir une deuxième solution étalon diluée titrant dans ce cas 0,02 mg CV/1, ou 0,02 mg CV/kg de DMA ou de solution étalon interne. Verser cette solution dans deux fioles (4.4). Sceller les fioles et procéder comme indiqué aux points 5.4.2, 5.4.3 et 5.4.5.

5.2.2. Vérification de la solution A

Si la moyenne des deux dosages par chromatographie en phase gazeuse de la solution B (voir point 5.2.1) ne s'écarte pas de plus de 5 % du point correspondant de la courbe d'étalonnage obtenue en 5.1.3, la solution est validée. Si l'écart dépasse 5 %, rejeter toutes les solutions obtenues en 5.1 et 5.2 et recommencer toute l'opération.

5.3. Préparation de la courbe des additions

NB:

la courbe doit comprendre au moins 7 paires de points,

la courbe doit être calculée à partir de ces points par la méthode des moindres carrés (voir point 5.1.3 troisième tiret),

la courbe doit être linéaire, c'est-à-dire que l'écart type (s) des différences entre les réponses mesurées (yi) et la valeur correspondante des réponses calculées à partir de la ligne de régression (zi) divisée par la valeur moyenne ( ) de toutes les réponses mesurées ne doit pas dépasser 0,07 (voir point 5.1.3 quatrième tiret).

5.3.1. Préparation de l'échantillon

L'échantillon de la denrée alimentaire à analyser doit être représentatif de l'aliment tel qu'il a été remis à l'analyste. Par conséquent, la denrée doit être homogénéisée ou réduite en petits morceaux et homogénéisée, avant le prélèvement de l'échantillon.

5.3.2. Mode opératoire

Préparer deux séries d'au moins 7 fioles (4.4). Verser dans chaque fiole une quantité d'échantillon de la denrée à contrôler au moins égale à 5 g (voir point 5.3.1). Veiller à ce que cette quantité soit la même dans chaque fiole. Fermer immédiatement la fiole. Par gramme d'échantillon, ajouter à chaque fiole un millilitre d'eau distillée ou déminéralisée de pureté au moins équivalente ou, si nécessaire, d'un solvant approprié (note: dans le cas des denrées homogènes, l'adjonction d'eau distillée ou déminéralisée n'est pas nécessaire). Ajouter à chaque fiole des volumes de la solution étalon diluée CV (5.1.2) contenant, si on le juge utile, l'étalon interne (3.3), de sorte que les concentrations du CV ajouté dans les fioles soient égales à 0, 0,005, 0,010, 0,020, 0,030, 0,040 et 0,050, etc., mg/kg de denrée. S'assurer que le volume total de DMA ou de DMA contenant l'étalon interne (3.3) est le même dans chaque fiole. La quantité de solution étalon diluée de CV (5.1.2) et de DMA complémentaire éventuel, doit être tel que le rapport de volume total (μ1) de ces solutions et la quantité de denrée alimentaire (g) contenue dans la fiole soit aussi faible que possible et ne dépasse pas 5 et soit la même dans toutes les fioles. Sceller les fioles et procéder comme indiqué au point 5.4.

5.4. Détermination par chromatographie en phase gazeuse

5.4.1. Agiter les fioles en évitant que le liquide contenu entre en contact avec le septum (4.4), afin d'obtenir une solution ou une suspension des échantillons de denrée alimentaire aussi homogène que possible.

5.4.2. Placer pendant une durée de deux heures toutes les fioles scellées (5.2 et 5.3) dans un bain d'eau à 60 oC ± 1 oC afin d'atteindre l'équilibre. Agiter de nouveau, si nécessaire.

5.4.3. Prélever un échantillon de l'espace de tête de la fiole. Quand la technique manuelle de prélèvements est utilisée, on doit veiller à obtenir un échantillon reproductible (voir point 4.4); la seringue doit notamment être préchauffée à la température de l'échantillon. Mesurer la superficie (ou la hauteur) des pics afférents au CV et à l'étalon interne, lorsque ce dernier a été utilisé.

5.4.4. Établir un graphique comportant en ordonnées les aires (ou hauteurs) des pics de CV ou le rapport des aires (ou hauteurs) des pics de CV aux aires (ou hauteurs) des pics de l'étalon interne et en abscisses les quantités de CV ajoutées (mg) pour les quantités d'échantillon de denrée pesées dans chaque fiole (kg). Déterminer le point d'intersection avec l'abscisse. La valeur ainsi obtenue est celle de la concentration de CV dans l'échantillon de la denrée à examiner.

5.4.5. Enlever le DMA en excès de la colonne (4.3) suivant un procédé approprié, dès que les pics du DMA apparaissent sur le chromatogramme.

6. RÉSULTATS

Le CV cédé aux denrées alimentaires par les matériaux et objets examinés, exprimé en mg/kg, est défini comme la moyenne des deux déterminations (voir point 5.4), à condition que le critère de répétabilité (voir point 8) soit respecté.

7. CONFIRMATION DE LA PRÉSENCE DE CV

Dans les cas où le CV cédé aux denrées alimentaires par les matériaux et objets, calculé comme décrit au point 6 dépasse la limite fixée à l'article 2 paragraphe 2 de la directive 78/142/CEE du Conseil, du 30 janvier 1978, les valeurs obtenues pour chacune des deux déterminations effectuées (5.4) doivent être confirmées à l'aide de l'une des trois méthodes suivantes:

i) en utilisant au moins une autre colonne (4.3) à phase stationnaire d'une polarité différente. Procéder ainsi jusqu'à l'obtention d'un chromatogramme sur lequel n'apparaît aucune interférence entre les pics du CV et/ou les pics correspondant à l'étalon interne et les constituants de l'échantillon de la denrée;

ii) en employant d'autres détecteurs par exemple le détecteur de conductivité micro-électrolytique (2);

iii) en utilisant la spectrométrie de masse. Dans ce cas, si des ions moléculaires de masse-voisine (m/e) 62 et 64 sont trouvés dans une proportion 3:1, on peut estimer que cela confirme avec un haut degré de probabilité la présence du CV. En cas de doute, la totalité du spectre de masse doit être vérifiée.

8. Répétabilité

La différence entre les résultats de deux déterminations (5.4) parallèles effectuées simultanément ou rapidement l'une après l'autre sur le même échantillon par le même analyste, dans les mêmes conditions, ne doit pas dépasser 0,003 mg de CV par kg de denrée alimentaire.

(1) Voir recommandation ISO DIS 5725: 1977.

(2) voir le Journal of Chromatographie Science, vol. 12, mars 1974, p. 152.