13.5.83 JournalofficieldesCommunautés européennes N°L126/23
DIRECTIVE DUCONSEIL
du18avril1983
concernantlafixationdelignesdirectricespourl'évaluationdecertainsproduitsutilisésdans
l'alimentation desanimaux
(83/228/CEE)
LECONSEILDESCOMMUNAUTÉS EUROPEENNES ,
vuletraitéinstituantlaCommunauté économiqueeuro­
péenne,
vuladirective82/471/CEEduConseil,du30juin1982,
concernantcertainsproduitsutilisésdansl'alimentation
desanimauxi1),etnotammentsonarticle7,
vulapropositiondelaCommission ,
considérantqueladirective82/471/CEEprévoitque
l'examendesproduitsappartenantàcertainsgroupesdoit
êtreeffectuésurlabased'undossiertransmisofficielle­
mentauxÉtatsmembresetàlaCommission ;
considérantquecesdossiersdoiventpermettredevérifier
quelesproduitsencauserépondentauxprincipes
générauximposésparladirectivepourtouteinscription
denouveauxproduitsàl'annexe;
considérantqu'ilestapparunécessairedeprévoirqueces
dossierssoientétablisselondeslignesdirectricescommu­
nesdéfinissant,pourchaqueprincipe,lesdonnéesscien­
tifiquespermettantd'identifieretdecaractériserles
produitsconcernésainsiquelesétudesnécessairespour
évaluerleurspropriétésnutritionnelles etleurseffets
biologiques ;queceslignesdirectricesdoiventêtreappli­
cablesàladateàlaquelleladirective82/471/CEEsera
elle-mêmeapplicable;
considérantqueleslignesdirectricesconstituentavant
toutunguidedeportéegénérale;que,selonlanaturedu
produitoulesconditionsdesonemploi,l'étenduedes
étudesnécessairespourévaluersespropriétésouseseffets
pourravarier;considérantqueleslignesdirectricesontétéétabliessurla
basedesconnaissances scientifiquesettechniquesactu­
ellesetqu'ellespourrontêtreadaptées,lecaséchéant,à
touteévolutiondanscedomaine,
AARRÊTÉLAPRÉSENTEDIRECTIVE :
Articlepremier
LesÉtatsmembresprescriventquelesdossiersdes
produitsénumérésauxpoints1.1et1.2del'annexedela
directive82/471/CEEsontétablisselonleslignesdirec­
tricesfigurantàl'annexedelaprésentedirective.
Article2
LesÉtatsmembresmettentenvigueurlesdispositions
législatives,réglementairesouadministratives nécessaires
pourseconformeràlaprésentedirectivele13juillet1984
auplustard.Ilseninformentimmédiatement laCommis­
sion.
Article3
LesÉtatsmembressontdestinatairesdelaprésente
directive .
FaitàLuxembourg ,le18avril1983.
ParleConseil
Leprésident
I.KIECHLE
0)JOn°L213du21.7.1982,p.8.

N°L126/24 JournalofficieldesCommunautés européennes 13.5.83
ANNEXE
LIGNESDIRECTRICES POURL'ÉVALUATION DECERTAINSPRODUITSUTILISÉSDANS
L'ALIMENTATION DESANIMAUX
Considérations générales
Lesprésenteslignesdirectricesconstituentunguidedestinéàl'établissementdesdossiersdesproduitsvisés
auxpoints1.1et1.2del'annexedeladirective82/471/CEE,obtenusparculturedemicro-organismes et
susceptiblesd'êtreadmiscommenouvellessourcesdeprotéinesdansl'alimentationdesanimaux.Ces
dossiersdoiventpermettred'évaluerlesproduitsconcernésdansl'étatactueldesconnaissances etde
s'assurerqu'ilsrépondentauxprincipesfondamentaux imposéspourleuradmissionetfaisantl'objetde
l'article6paragraphe2deladirectiveprécitée.
Touteslesétudesindiquéesdansceslignesdirectricespourrontêtrerequiseset,sinécessaire,des
complémentsd'informationpourrontêtredemandés.Enrèglegénérale,touteslesinformationsvisantà
établirl'identitédumicro-organisme etlacompositiondumilieudecultureainsiqueleprocédéde
fabrication,lescaractéristiques ,laprésentation ,lesconditionsd'emploi,lesméthodesdecontrôleetles
propriétésnutritionnelles duproduitdevrontêtrefournies.Ilenserademêmedesinformationsnécessaires
pourévaluerlatoléranceduproduitparlesespècesciblesainsiquelesrisquespouvantrésulterdirectement
ouindirectementdesonemploiàl'égarddel'hommeetdel'environnement .Lesétudestoxicologiques
requisesàceteffetdépendrontdelanatureduproduit,desespècesanimalesconcernéesetdumétabolisme
duproduitchezl'animaldelaboratoire .
Ladocumentation àfournircomprendradesrapportsdétaillés,présentésdansl'ordreetselonla
numérotationproposésdansleslignesdirectricesetaccompagnésd'unsommaire.L'absencedetouteétude
prévuedevraêtremotivée.Lespublicationscitéesenréférenceserontannexées.
Observations
Dansceslignesdirectrices,leterme«produit»seréfèreauproduitprotéiniquedansl'étatoùilseraprésenté
commealimentoucomposantd'unalimentpouranimaux.
Toutemodificationintervenantdansleprocédédefabricationd'unproduitoudanssesconditionsd'emploi
devraêtrenotifiéeetpourranécessiterlaprésentationd'undossierappropriéàunenouvelle
évaluation .
Présentation desétudes
I.Micro-orgahisme ,milieudecultureetprocédédefabrication,caractéristiques duproduit,présenta­
tionetconditionsd'emploi,méthodesdecontrôle
II.Étudesdespropriétésnutritionnelles duproduit
III.Étudesconcernantlesconséquencesbiologiquesdel'utilisationduproduitdansl'alimentationdes
animaux
IV.Autresétudesappropriées
CHAPITRE PREMIER
MICRO-ORGANISME ,MILIEUDECULTUREETPROCÉDÉDEFABRICATION ,
CARACTÉRISTIQUES DUPRODUIT,PRÉSENTATION ETCONDITIONS D'EMPLOI,
MÉTHODES DECONTRÔLE
1.MICRO-ORGANISME
1.1.Taxonomie,provenance,morphologie ,propriétésbiologiques,manipulationgénétiqueéven­
tuelle.
1.2.Innocuité,possibilitésdesurvieendehorsdufermenteuretconséquenceséventuellessur
l'environnement .
1.3.Constanceetpuretédessouchescultivées.Méthodesutiliséespourvérifiercescritères.
2.MILIEUDECULTUREETPROCÉDÉDEFABRICATION
2.1.Compositiondusubstrat,dessubstancesajoutées,etc.
2.2.Procédésdefabrication,dedessicationetdepurification .Procédédedévitalisationdumicro­
organisme.Méthodesutiliséespourvérifierlaconstancedelacompositionduproduitdecultureet
pourdétecterlescontaminations chimiques,physiquesoubiologiqueséventuellesaucoursdela
production .
2.3.Procédéstechniquesdepréparationpourl'emploi.

13.5.83 JournalofficieldesCommunautés européennes N°L126/25
3.CARACTERISTIQUES DUPRODUIT
3.1.Propriétésphysiquesetphysico-chimiques :morphologiemacroscopique etmicroscopique ,
granulométrie ,densité,poidsspécifique,hygroscopicité ,solubilité,propriétésélectrostatiques ,
etc.
3.2.Compositionchimiqueetcaractéristiques :
3.2.1.Teneursenhumidité,protéinesbrutes,matièresgrassesbrutes,cellulosebrute,cendresbrutes,
hydratesdecarbone.Limitesdevariationdecesteneurs.
3.2.2.Teneursenazotetotal,protéines,acidesnucléiques,azoteammoniacal ,azoteamidique,nitrateset
nitrites.Compositionqualitativeetquantitativedesacidesaminéstotauxetlibresetdesbases
puriquesetpyrimidiques .
3.2.3.Compositionqualitativeetquantitativedeslipidestotaux;acidesgras,matièresinsaponifiables ,
pigmentsliposolubles,phospholipides .
3.2.4.Compositiondelafractionglucidique .
3.2.5.Compositionqualitativeetquantitativedescomposantsminéraux.
3.2.6.Compositionqualitativeetquantitativedesvitamines.
3.2.7.Compositionqualitativeetquantitativedesautresconstituants :additifs,résidusdusubstratetde
solvants,autresrésiduspotentiellement nocifsdumétabolismedusubstrat,dumilieudeculture,du
procédédefabrication .
3.3.Contaminations microbiologiques duproduit.
3.4.Comportement etstabilitéduproduitenl'étatetmélangeàdesalimentsd'usagecourant,aucours
delaconservation .
4.PRÉSENTATION ETCONDITIONS D'EMPLOI
4.1.Dénominations prévuespourlacommercialisation duproduit.
4.2.Présentationsprévuespourlacommercialisation duproduit.
4.3.Emploisproposésduproduitenalimentationanimale.Concentrations proposéesdanslesaliments
completsetquantitésproposéesdanslesrationsquotidiennespourlesdifférentesespècesanimales
concernées .
5.MÉTHODES DECONTRÔLE
Méthodesd'analysequalitativeetquantitativedestinéesaucontrôleduproduitdanslesaliments
completsetcomplémentaires .
NB:Ladescriptiondecesméthodesdevraêtreaccompagnéed'indicationssurlaspécificité,la
sensibilité,leslimitesdedétection,lesmargesd'erreur,lesinterférenceséventuellesd'autres
substances .Deséchantillonsduproduitdanssesdifférentesprésentationsprévuesdevront
êtredisponibles .
CHAPITRE II
ÉTUDESDESPROPRIÉTÉS NUTRITIONNELLES DUPRODUIT
1.ÉVALUATION DELAVALEURPROTÉIQUE
1.1.Étudeschimiques,biochimiquesetmicrobiologiques .
1.2.Étudessuranimauxdelaboratoireencomparaisonavecdesprotéinesderéférence.
2.ÉTUDESSURESPÈCESCIBLES
Lesétudesindiquéesci-aprèsseferontsurchaqueespècecible,encomparaisonavecungroupe
d'animauxtémoinsrecevant,danslesmêmesconditionsd'équilibrealimentaire,unealimentation
traditionnellecontenantdesquantitéséquivalentesd'azoteprotéique,pourlesruminants,des
quantitéséquivalentesd'azotetotal.
2.1.Valeurdesupplémentation protéiqueeténergétiqueduproduitdanslesrationsdanslesconditions
pratiquesd'emploiproposées,àdifférentsstadesphysiologiques desanimaux(parexemple
croissance,gestation,ponte).
2.2.Influencesduproduit,danslesconditionspratiquesd'emploiproposées,surletauxdecroissance,
letauxdeconversiondesrations,lamorbidité,lamortalité.
2.3.Niveauxnutritionnelsoptimauxd'incorporationduproduitdanslesrations.
2.4.Effetsduproduitdanslesconditionspratiquesd'emploiproposéessurlesqualitéstechnologiques ,
organoleptiques ouautresdesproduitscomestiblesd'origineanimale.
3.CONDITIONS EXPÉRIMENTALES DESÉTUDESSURESPÈCESCIBLES
Donnerunedescriptiondétailléedesessaiseffectuésenprécisant:
3.1.L'espèce,larace,l'âgeetlesexedesanimaux,leurmoded'identification .

N°L126/26 JournalofficieldesCommunautéseuropéennes 13.5.83
3.2.Lenombredegroupesd'essaisettémoins;lenombred'animauxdechaquegroupe(cenombredevra
êtresuffisantpourpermettreuneanalysestatistiqueenappliquantdesparamètresstatistiques
appropriés).
3.3.Lestauxd'incorporation duproduit,lacompositionqualitativeetquantitativedelaration
alimentaireetsonanalyse.
3.4.Lelieudesessais,l'étatphysiologiqueetsanitairedesanimauxainsiquelesdifférentesconditions
d'élevage(selonlespratiquesenusagedanslaCommunauté ).
3.5.Luduréeexactedesessaisetlesdatesdesexamenspratiqués.
3.6.Leseffetsdéfavorablessurvenusaucoursdesessaisetlemomentdeleurapparition .
CHAPITRE III
ÉTUDESCONCERNANT LESCONSÉQUENCES BIOLOGIQUES DEL'UTILISATION DU
PRODUITDANSL'ALIMENTATION DESANIMAUX
Lesétudesindiquéesdanscechapitresontdestinéesàévaluerlasécuritédel'emploiduproduitpourles
espècesciblesainsiquelesrisquespouvantrésulterdirectementouindirectementdecetemploiàl'égardde
l'hommeetdel'environnement .Lesétudestoxicologiques requisesàceteffetdépendrontdelanaturedu
produit,desespècesanimalesconcernéesetdumétabolismeduproduitchezl'animaldelaboratoire .
1.ETUDESSURESPECESCIBLES
Lesétudesindiquéesci-aprèsseferontsurchaqueespècecible,encomparaisonavecungroupe
d'animauxtémoinsrecevant,danslesmêmesconditionsd'équilibrealimentaire,unealimentation
traditionnellecontenantdesquantitéséquivalentesd'azoteprotéique,pourlesruminants,des
quantitéséquivalentesd'azotetotal.
1.1.Tauxmaximauxd'incorporation duproduitdanslarationjournalière,exemptsd'effets
défavorables .
1.2.Effetspossiblesduproduitsurlafertilitéetlareproduction ,siapproprié.
1.3.Effetsdel'ingestionduproduit,danslesconditionspratiquesd'emploiproposées,surles
micro-organismes delafloredigestive,effetssurlacolonisationdutubedigestifpardes
micro-organismes pathogènes .
1.4.Recherche,danslesconditionspratiquesd'emploiproposées,derésiduséventuelsduproduit
(substrat,milieudeculture,solvants,contaminants )danslesproduitscomestiblesd'origine
animale.
1.5.Recherche,danslesconditionspratiquesd'emploiproposées,derésiduséventuelsduproduit
(substrat,milieudeculture,solvants,contaminants )danslesexcrétas.
2.ÉTUDESSURANIMAUXDELABORATOIRE
2.1.Métabolisme
Devenirduproduitdansl'organisme :absorption,accumulation ,biotransformation ,élimina­
tion.
2.2.Mutagenèse
Recherchessurlespotentialitésmutagènesimputablesàdescontaminants (notamment,mycotoxi­
nesetbactéries)ouàdesrésidusduproduit(substrat,milieudeculture,solvants),incluantdes
essaisinvitroavecactivationmétabolique .
2.3.Étudesjtoxicologiques
Lesétudesindiquéesci-aprèsseferontencomparaisonavecdesgroupesd'animauxtémoins
recevant,danslesmêmesconditionsd'équilibrealimentaire,unrégimetraditionnelcontenantdes
quantitéséquivalentesd'azoteprotéique.Leseffetstoxiquesobservésferontl'objetd'étudesvisantà
enéluciderlacauseetlesmécanismesetàvérifier,enparticulier,qu'ilsnerésultentpasd'un
déséquilibrenutritionneloud'unsurdosageduproduitàl'étude.
2.3.1.Toxicitéàcourtterme(90joursaumoins)
Enrèglegénérale,cesétudesseronteffectuéessurdeuxespècesanimalesdontl'uneappartientà
l'ordredesrongeurs.Leproduitseraadministrédanslarationjournalière,aumoinsàdeuxtaux
d'incorporationdifférents.Ceux-ciserontchoisisdemanièreàdéterminersipossibleunniveausans
effetetunniveauentraînantuneffetdéfavorable .Lesgroupesd'animauxcomprendront unnombre
appropriédesujetsdechaquesexe.Ungroupetémoinseratoujoursinclus.
Ilyauralieud'enregistreràintervallesappropriéstouteslesdonnéesbiologiquessignificatives ,en
particuliercellesquiconcernentlacroissance,laconsommation d'aliments,l'hématologie ,

13.5.83 JournalofficieldesCommunautés européennes N°L126/27
l'analyseurinaire,lesparamètresbiochimiques ,lamortalité,lepoidsdesorganes,lessymptômes
traduisantdeseffetspathologiques ,lesaltérationshistologiquesdesprincipauxorganesettissus.
Lesrésultatsserontprésentésdemanièreexhaustiveetassortis,danslamesuredupossible,
d'évaluationsstatistiques .
2.3.2.Toxicitéàlongterme
Enrèglegénérale,cesétudesseronteffectuéessurdeuxespècesanimalesdontl'uneappartientà
l'ordredesrongeurs.Leproduitseraadministrédanslarationjournalière,aumoinsàdeuxtaux
d'incorporation différents.Laduréedel'expérienceseradedeuxansaumoinschezleratetde
80semainesaumoinschezlasouris.Lesgroupesd'animauxcomprendront unnombreapproprié
desujetsdechaquesexe.Ungroupetémoinseratoujoursinclus.
Lesexamensbiologiquesindiquésaupoint2.3.1seronteffectuésdepréférencesurunpetitgroupe
satellited'animaux(groupeséparédépendantdugroupeprincipal)àdesintervallesappropriésau
coursdel'étudeetsurlessujetssurvivantsàlafindel'étude.
2.3.3.Cancérogenèse
Pourl'étudedelacancérogenèse ,ilyauralieudenoterlemomentdel'apparition,lestypes
histologiques destumeursobservéesetleurincidence.Leseffetspouvantrésulterd'une
modificationdurégimealimentaire ,dueàl'incorporationduproduit,surl'incidencedestumeurs
ousurl'incidenceetl'évolutiondemaladiesserontévaluésenseréférantàdesgroupestémoins,
commeindiquéaupoint2.3.Lesrésultatsserontprésentésdemanièreexhaustiveetassortis,dans
lamesuredupossible,d'évaluationsstatistiques .
2.4.Autresétudes
Lesétudesdereproductions'étendrontsuraumoinsdeuxgénérationsenlignedirecteetpourront
êtrecombinéesàdesétudesd'embryotoxicité comprenantlatératogenèse .Uneattention
particulièreseraaccordéeàlafécondité,àlafertilité,àl'observationdesportéesaucoursdeleur
évolutionaprèslanaissance.Touteautreméthodescientifiquement justifiableetsusceptiblede
fournirdesrésultatsmesurables (parexempletoxicitéderelais)pourraêtrefournie.
2.5.Conditionsexpérimentales desétudessuranimauxdelaboratoire
Donnerunedescriptiondétailléedesessaiseffectuésenprécisant:
2.5.1.L'espèce,larace,l,asoucheetlesexedesanimaux.
2.5.2.Lenombredegroupesd'essaisettémoins,lenombred'animauxdechaquegroupe(cenombredevra
êtresuffisantpourpermettreuneanalysestatistiqueenappliquantdesparamètresstatistiques
appropriés).
2.5.3.Lestauxd'incorporation duproduit,lacompositionqualitativeetquantitativedelaration
alimentaireetsonanalyse.
2.5.4.L'ensembledesconditionsd'élevagependanttouteladuréedesessais.
2.5.5.Laduréeexactedesessaisetlesdatesdesexamenspratiqués.
2.5.6.Letauxetl'échelonnement delamortalitédanschaquelot.
2.5.7.Lessymptômescliniquesetlesmodificationspathologiques survenusaucoursdesessaisetle
momentdeleurapparition .
3.ÉTUDESCONCERNANT LEMILIEUAMBIANT
Selonlanaturedesrésiduséventuelsduproduit(substrat,milieudeculture,solvants,contami­
nants)danslesexcrétasdesespècescibles,desdonnéessurledevenirdecesrésidusdanslesfumiers,
lessolsetleseauxpourrontêtrerequisesavecleurseffetssurlabiologiedusol,lavégétationetlavie
aquatique.
CHAPITRE IV
AUTRESÉTUDESAPPROPRIÉES
Selonlanatureetlesconditionsd'emploiduproduit,desdonnéesconcernantlesphénomènesd'allergie,
d'irritationdelapeau,desmuqueusesoculaires,respiratoiresoudigestivespourrontêtrerequisesenvue
d'évaluerlesrisquespotentielslorsdelamanipulationduproduitetdelesprévenir.