1996R1082 — FR — 03.02.1999 — 001.001 — 1
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►B RÈGLEMENT (CE) No1082/96 DE LA COMMISSION
du 14 juin 1996
portant établissement d’une méthode de référence pour déterminer la quantité d’ester éthylique de
l’acide ß-apo-8 /prime1-caroténique dans le beurre concentré et le beurre
(JO L 142 du 15.6.1996, p. 26)
Modifié par:
Journal officiel
no page date
►M1Règlement (CE) no175/1999 de la Commission du 26 janvier 1999 L 20 22 27.1.1999
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RÈGLEMENT (CE) No1082/96 DE LA COMMISSION
du 14 juin 1996
portant établissement d’une méthode de référence pour déterminer
la quantité d’ester éthylique de l’acide ß-apo-8 /prime1-caroténique dans le
beurre concentré et le beurre
LA COMMISSION DES COMMUNAUTÉS EUROPÉENNES,
vu le traité instituant la Communauté européenne,
vu le règlement (CEE) no804/68 du Conseil, du 27 juin 1968, portant
organisation commune des marchés dans le secteur du lait et desproduits laitiers (
1), modifié en dernier lieu par le règlement (CE) no
2931/95 de la Commission (2), et notamment son article 6 paragraphe 7
et son article 12 paragraphe 3,
considérant que le règlement (CEE) no570/88 de la Commission, du 16
février 1988, relatif à la vente à prix réduit de beurre et à l’octroi d’uneaide au beurre et au beurre concentré destinés à la fabrication deproduits de pâtisserie, de glaces alimentaires et autres produits alimen-taires (
3), modifié en dernier lieu par le règlement (CE) no531/96 (4),
prévoit le traçage du beurre subventionné et du beurre concentré danscertaines circonstances, afin de garantir la régularité de l’utilisationfinale;
considérant que, compte tenu de l’importance du traçage pour le bon
fonctionnement du programme et afin de garantir l’égalité de traitementdes opérateurs qui y participent, il est opportun d’établir des méthodescommunes pour déterminer les quantités de traceurs dont il est questiondans le règlement (CEE) n
o570/88;
considérant qu’il est difficile d’établir ces méthodes de référence pour
tous les traceurs en même temps; que l’établissement d’une méthode deréférence pour déterminer la quantité d’ester éthylique de l’acide ß-apo-8/prime1-caroténique dans le beurre concentré ou le beurre constitue une
nouvelle étape dans cette direction;
considérant que les mesures prévues par le présent règlement sont
conformes à l’avis du comité de gestion du lait et des produits laitiers,
A ARRÊTÉ LE PRÉSENT RÈGLEMENT:
Article premier
La méthode d’analyse de référence décrite en annexe est appliquée pour
déterminer la quantité d’ester éthylique de l’acide ß-apo-8 /prime1-caroténique
dans le beurre concentré ou le beurre, conformément au►
M1règlement (CE) no2571/97 ◄.
Le beurre concentré ou le beurre est considéré comme tracé conformé-
ment à l’article 6 du ►M1règlement (CE) no2571/97 ◄si les résul-
tats obtenus sont conformes aux spécifications du point 8 de l’annexe.
Article 2
Le présent règlement entre en vigueur le troisième jour suivant celui de
sa publication au Journal officiel des Communautés européennes .
Il est applicable à partir du 1eroctobre 1996.
Le présent règlement est obligatoire dans tous ses éléments et directe-
ment applicable dans tout État membre.
(1)J OnoL 148 du 28. 6. 1968, p. 13.
(2)J OnoL 307 du 20. 12. 1995, p. 10.
(3)J OnoL 55 du 1. 3. 1988, p. 31.
(4)J OnoL 78 du 28. 3. 1996, p. 13.
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ANNEXE
DÉTERMINATION DE LA QUANTITÉ D’ESTER ÉTHYLIQUE DE
L’ACIDE ß-APO-8 /prime1-CAROTÉNIQUE DANS LE BEURRE CONCENTRÉ
ET LE BEURRE PAR SPECTROMÉTRIE
1.Portée et champ d’application
La méthode décrit une procédure pour déterminer la quantité d’ester
éthylique de l’acide ß-apo-8 /prime1-caroténique (ester apo-caroténique) dans le
beurre concentré et le beurre. L’ester apo-caroténique est la somme detoutes les substances présentes dans un concentré d’échantillons obtenudans les conditions décrites dans la méthode, qui absorbent le rayonne-ment à 440 nm. Elle est applicable aux échantillons reçus en vertu durèglement (CEE) n
o570/88.
2.Principe
La matière grasse butyrique est dissoute dans de l’essence minérale légère
et l’absorbance est mesurée à 440 nm. La quantité d’ester apo-caroténiqueest déterminée par référence à une norme externe.
3.Équipement
3.1. Pipettes graduées à 0,25, 0,50, 0,75 et 1,0 ml3.2. Spectrophotomètre, conçu pour un usage à 440 nm (et 447-449 nm) et
équipé de cellules de 1 cm de longueur de chemin optique
3.3. Fioles volumétriques, 20 ml et 100 ml
4.Réactifs
Tous les réactifs doivent avoir un degré analytique reconnu.
4.1. Suspension d’ester apo-caroténique (environ 20 %)4.1.1. Établir le contenu de la suspension comme suit:
verser soigneusement 400 mg environ dans une fiole volumétrique de 100
ml et dissoudre dans de l’essence minérale (4.2); diluer avec de l’essenceminérale jusqu’à remplissage de la fiole. Diluer 5,0 ml de cette solutiondans 100 ml d’essence minérale (solution A). Diluer 5,0 ml de solution Adans 100 ml d’essence minérale. Mesurer l’absorbance à 447-449 nm(mesurer le maximum par rapport à l’essence minérale comme valeur deréférence en utilisant des cellules de 1 cm).
Teneur en ester apo-caroténique (%) =A
max·40 000
A·2 550
Amax= absorbance maximale de la solution de mesure
A = poids de l’échantillon (g)2 550 = valeur de référence A (1 %, 1 cm)
P exprime la pureté de la suspension (%).Remarque: l’ester apo-caroténique en suspension est sensible à l’air, à la
chaleur et à la lumière. Il peut se conserver environ douzemois dans son emballage original, fermé (scellé sous azote) etstocké dans un endroit frais. Après ouverture, le contenu doitêtre utilisé dans un bref délai.
4.1.2. Solution standard d’ester apo-caroténique, environ 0,2 mg/ml
Prélever environ, à 0,1 mg près, 0,100 g d’ester apo-caroténique en
suspension (4.1.1) (Wg), dissoudre dans de l’essence minérale (4.2), trans-férer quantitativement dans une fiole volumétrique de 100 ml et compléterjusqu’au trait avec de l’essence minérale.
Cette solution contient (W.P)/100 mg/ml d’ester apo-caroténique.Remarque: la solution doit être stockée dans un endroit frais, dans le
noir. Après un mois, elle n’est plus utilisable.
4.2. Essence minérale (40 - 60 °C).
4.3. Sulfate de sodium, anhydre, cristallisé, préalablement séché à 102 °C
pendant deux heures.
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5.Procédure
5.1. Préparation de l’échantillon test
5.1.1. Beurre concentré
Faire fondre l’échantillon dans un four à 45 °C environ.
5.1.2. Beurre
Faire fondre l’échantillon dans un four à 45 °C environ et en filtrer une
partie à l’aide d’un filtre contenant environ 10 g de sulfate de sodiumanhydre (4.3). L’opération doit se faire à l’abri de toute lumière naturelleou artificielle forte et la température doit être maintenue à 45 °C. Prélever
une quantité convenable de matière grasse butyrique.
5.2. Détermination
Prélever, à 1 mg près, enviro n1gd e beurre concentré ou de matière
grasse butyrique (5.1.2), (mg). Transférer quantitativement dans une fiolevolumétrique de 20 ml (Vml), remplir jusqu’au trait avec de l’essenceminérale (4.2) et mélanger soigneusement.
Déposer une petite quantité de ce mélange sur une cellule de 1 cm et
mesurer l’absorbance à 440 nm par rapport à de l’essence minéralecomme valeur de référence. On obtient la concentration d’ester apo-caro-ténique dans la solution par référence à la courbe d’étalonnage (C µg/ml).
5.3. Courbe d’étalonnage
Introduire à l’aide des pipettes graduées 0, 0,25, 0,5, 0,75 et 1,0 ml de
solution standard d’ester apo-caroténique (4.1.2) dans cinq fioles volumé-triques de 100 ml. Diluer en remplissant jusqu’au trait avec de l’essenceminérale (4.2) et mélanger.
Les concentrations des solutions s’échelonnent entre 0 et 2 µg/ml et sont
calculées de manière précise par référence à la concentration de la solutionstandard (4.1.2), (W.P)/100 mg/ml. Mesurer les absorbances à 440 nm parrapport à de l’essence minérale (4.2) comme valeur de référence.
Reporter les valeurs d’absorbance sur l’axe des ordonnées et les concen-
trations d’ester apo-caroténique sur l’axe des abscisses.
6.Calcul des résultats
6.1. La teneur en ester apo-caroténique, exprimée en mg/kg de produit, est
donnée par:
Beurre concentré: (C.V)/mBeurre: 0,82 (C.V)/moù:C = la teneur en ester apo-caroténique, µg/ml, donnée par la courbe
d’étalonnage (5.3),
m = la masse (g) de la portion test (5.2),0,82 = un coefficient correcteur pour la teneur en matière grasse buty-
rique du beurre.
7.Précision de la méthode
7.1. Répétitivité
7.1.1. Analyse du beurre
La différence de résultats entre deux déterminations effectuées sur du
matériel de test identique, dans le laps de temps le plus bref possible etpar un seul opérateur utilisant le même équipement ne devra pas excéder1,4 mg/kg.
7.1.2. Analyse du beurre concentré
La différence de résultats entre deux déterminations effectuées sur du
matériel de test identique, dans le laps de temps le plus bref possible etpar un seul opérateur utilisant le même équipement ne devra pas excéder1,6 mg/kg.
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7.2. Reproductibilité
7.2.1. Analyse du beurre
La différence de résultats entre deux déterminations effectuées sur du
matériel de test identique, par des opérateurs travaillant dans des labora-toires différents et utilisant des équipements différents ne devra pasexcéder 4,7 mg/kg.
7.2.2. Analyse du beurre concentré
La différence de résultats entre deux déterminations effectuées sur du
matériel de test identique, par des opérateurs travaillant dans des labora-toires différents et utilisant des équipements différents ne devra pasexcéder 5,3 mg/kg.
7.3. Source des données techniques
Les données techniques ont été définies sur la base d’une expérience
menée en 1995, qui impliquait onze laboratoires et qui portait sur douzeéchantillons tracés (six doubles aveugles) pour le beurre et sur douzeéchantillons tracés (six doubles aveugles) pour le beurre concentré.
8.Limites de tolérance
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M1
8.1. Pour vérifier si le produit a été tracé correctement, il faut prélever trois
échantillons du produit tracé.
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8.2. Beurre
8.2.1. Le taux d’incorporation pour le beurre, compte tenu de l’absorbance de
fond, est de 22 mg/kg.
▼M1
8.2.2. On utilise les résultats obtenus pour les trois échantillons à partir de
l’analyse du produit pour vérifier le taux et l’homogénéité de l’incorpora-tion du traceur, et on compare le plus faible de ces résultats avec leslimites suivantes [en prenant en considération la différence critique pourune probabilité de 95 % (DCr
95)]:
— 18,0 mg/kg (95 % du taux d’incorporation minimal),
— 13,0 mg/kg (70 % du taux d’incorporation minimal).
La concentration du traceur dans l’échantillon donnant le résultat le plus
faible est utilisée par interpolation entre 18,0 mg/kg et 13,0 mg/kg.
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8.3. Beurre concentré
8.3.1. Le taux d’incorporation pour le beurre concentré, compte tenu de l’absor-
bance de fond, est de 24 mg/kg.
▼M1
8.3.2. On utilise les résultats obtenus pour les trois échantillons à partir de
l’analyse du produit pour vérifier le taux et l’homogénéité de l’incorpora-tion du traceur, et on compare le plus faible de ces résultats avec leslimites suivantes [en prenant en considération la différence critique pourune probabilité de 95 % (DCr
95)]:
— 20,0 mg/kg (95 % du taux d’incorporation minimal),
— 14,0 mg/kg (70 % du taux d’incorporation minimal).
La concentration du traceur dans l’échantillon donnant le résultat le plus
faible est utilisée par interpolation entre 20,0 mg/kg et 14,0 mg/kg.