1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 1
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►BRÈGLEMENT (CEE) No4154/87 DE LA COMMISSION
du 22 décembre 1987
définissant les méthodes d'analyse et autres dispositions de caractère technique nécessaires pour
l'application du règlement (CEE) no3033/80 du Conseil relatif au régime d'échanges applicable à
certaines marchandises résultant de la transformation de produits agricoles
(JO L 392 du 31.12.1987, p. 19)
Modifié par:
Journal officiel
nopage date
►M1 Règlement(CE) no203/98 de la Commission du 26 janvier 1998 L 21 6 28.1.1998
▼B
RÈGLEMENT (CEE) No4154/87 DE LA COMMISSION
du 22 décembre 1987
définissant les méthodes d'analyse et autres dispositions de carac-
tère technique nécessaires pour l'application du règlement (CEE)n
o3033/80 du Conseil relatif au régime d'échanges applicable à
certaines marchandises résultant de la transformation de produits
agricoles
LA COMMISSION DES COMMUNAUTÉS EUROPÉENNES,
vu le traité instituant la Communauté économique européenne,
vu le règlement(CEE) no2658/87 du Conseil, du 23 juillet1987, relat if
à la nomenclature tarifaire et statistique et au tarif douaniercommun (
1), modifié par le règlement(CEE) no3985/87 (2), etnot am-
mentson art icle 9,
considérantque le règlement(CEE) no1061/69 de la Commission (3),
modifié en dernier lieu par le règlement(CEE) no1822/86 (4), a défini
les méthodes d'analyse pour l'application du règlement (CEE) no1059/
69 du Conseil (5); que le règlement(CEE) no1059/69 estabrogé et
remplacé par le règlement(CEE) no3033/80 du Conseil (6), modifié
en dernier lieu par le règlement(CEE) no3743/87 (7);
considérant que les modalités d'application du règlement (CEE) no
3033/80, en ce qui concerne les importations, sont fixées par le règle-
ment(CEE) no3034/80 du Conseil, du 11 novembre 1980, fixantles
quantités des produits de base considérées comme entrées dans la fabri-cation de marchandises relevant du règlement (CEE) n
o3033/80
modifiantle règlement(CEE) no950/68 relatif au tarif douanier
commun (8), modifié en dernier lieu par le règlement(CEE) no4091/
87 (9);
considérant que, afin de tenir compte de l'évolution scientifique et tech-
nique des méthodes d'analyse et de continuer à assurer un traitementuniforme à l'importation dans la Communauté des marchandisesauxquelles s'applique le règlement(CEE) n
o3033/80, il y a lieu
d'abroger etde remplacer le règlement(CEE) no1061/69;
considérantque les mesures prévues au présentrèglementsont
conformes à avis du comité de la nomenclature,
A ARRÊTÉ LE PRÉSENT RÈGLEMENT:
Article premier
Le présent règlement définit les méthodes d'analyse communautaires
nécessaires pour l'application des règlements (CEE) no3033/80 (en ce
qui concerne les importations) et (CEE) no3034/80, ou à défaut, la
nature des opérations analytiques à suivre ou le principe d'une méthode
à appliquer.
Article 2
Conformémentaux définit ions reprises dans l'annexe III du règlement
(CEE) no3034/80 relatives à la teneur en amidon/glucose et à la teneur
en saccharose/sucre interverti/isoglucose et pour l'application desannexes II et III dudit règlement, les formules, procédures et méthodessuivantes sont utilisées:1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 2
(1)J O noL 256 du 7. 9. 1987, p. 1.
(2)J O noL 376 du 31. 12. 1987, p. 1.
(3)J O noL 141 du 12. 6. 1969, p. 24.
(4)J O noL 158 du 13. 6. 1986, p. 1.
(5)J O noL 141 du 12. 6. 1969, p. 1.
(6)J O noL 323 du 29. 11. 1980, p. 1.
(7)J O noL 352 du 15. 12. 1987, p. 29.
(8)J O noL 323 du 29. 11. 1980, p. 7.
(9)J O noL 382 du 31. 12. 1987, p. 27.
▼B
1)Teneur en amidon/glucose
(exprimée en amidon 100 % à l'état sec, sur la marchandise en
l'état)
a) (Z − F) × 0,9,
quand la teneur en glucose est supérieure ou égale à celle du
fructose, ou
b) (Z − G) × 0,9,
quand la teneur en glucose est inférieure à celle du fructose
où:
Z = teneur en glucose déterminée par la méthode décrite dans
l'annexe I du présentrèglement ;
F = teneur en fructose déterminée per HPLC (chromatographie
en phase liquide haute précision);
G = teneur en glucose déterminée par HPLC.
Dans le cas du point1 sous a), lorsque la présence d'un hydrolysat
de lactose est déclarée et/ou des quantités de lactose et de galactose
sont mises en évidence, une teneur en glucose (déterminée parHPLC), équivalente à celle du galactose (déterminée par HPLC)est déduite de la teneur totale en glucose (Z) avant que tout autrecalcul ne soiteffect ué.
2)Teneur en saccharose/sucre interverti/isoglucose
(exprimée en saccharose, sur la marchandise en l'état)
a) S + (2F) × 0,95,
quand la teneur en glucose est supérieure ou égale à celle du
fructose;
b) S + (G + F) × 0,95,
quand la teneur en glucose est inférieure à celle du fructose
où:
S = teneur en saccharose déterminée par HPLC;
F = teneur en fructose déterminée par HPLC;G = teneur en glucose déterminée par HPLC.
Lorsque la présence d'un hydrolysat de lactose est déclarée et/ou des
quantités de lactose et de galactose sont mises en évidence, uneteneur en glucose équivalente à celle du galactose (déterminée parHPLC) est déduite de la teneur en glucose (G) avant que tout autre
calcul ne soiteffect ué.
3)Matières grasses provenant du lait
a) Sous réserve des dispositions reprises au point b), la teneur en
poids en matière grasse du lait de la marchandise en l'état est
déterminée par l'extraction à l'éther de pétrole après hydrolyse à
l'acide chlorhydrique;
b) Lorsque, dans la composition de la marchandise, des matières
grasses autres que celles du lait sont également déclarées, laprocédure suivante est appliquée:
— la teneur en poids en % en matière grasse (totale) de la
marchandise en l'état est déterminée comme mentionné aupointa),
— pour la détermination des matières grasses provenant du lait,
une méthode utilisant l'extraction à l'éther de pétrole,précédée par l'hydrolyse par l'acide chlorhydrique etsuiviepar la chromatographie en phase gazeuse des esters méthyli-ques des acides gras estappliquée. Pour aut antque la
présence de matières grasses provenant du lait soit mise en
évidence, leur pourcentage est calculé en multipliant le pour-centage de butyrate de méthyle par 25 avant de multiplier lavaleur ainsi obtenue par la teneur totale en poids de matièresgrasses, exprimée en pourcentage, de la marchandise en l'étatetde la diviser par 100.1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 3
▼M1
▼B
4)Teneur en protéine du lait
a) Sous réserve des dispositions reprises sous b) ci-après, la teneur
en protéines du lait de la marchandise en l'état est calculée enmultipliant la teneur en azote (déterminée par la méthode Kjel-dahl) par le facteur 6,38.
b) Lorsque, dans la composition de la marchandise, des composants
contenant des protéines autres que les protéines du lait sontégalementdéclarés:
— la teneur en azote totale (en pourcentage en poids) est déter-
minée par la méthode Kjeldahl,
— la teneur en protéines du lait est calculée comme sous a) ci-
avant en soustrayant de la teneur en azote totale en pourcen-tage en poids) la teneur en azote correspondant aux protéines
autres que celles du lait.
Article 3
Pour l'application de l'annexe I du règlement (CEE) n
o3034/80, les
méthodes et/ou procédures suivantes sont utilisées:
1) Pour le classement des produits repris sous les sous-positions
0403 10 51 à 0403 10 59 et0403 10 91 à 0403 10 99 et0403 90 71à 0403 90 79 et0403 90 91 à 0403 90 99 de la nomenclat ure
combinée, la détermination de la teneur en poids des matières
grasses provenant du lait se fait selon la méthode décrite à l'article2 point3.
2) Pour le classement des produits repris sous les sous-positions
1704 10 11 à 1704 10 99 et1905 20 10 à 1905 20 90 de la nomen-clature combinée, la détermination du saccharose y compris lesucre interverti calculé en saccharose est effectuée selon uneméthode HPLC. Par sucre interverti calculé en saccharose on entend
la somme arithmétique du fructose et du glucose à part égale multi-
pliée par 0,95.
3) Pour le classement des produits repris sous les sous-positions
1806 10 10 à 1806 10 90 de la nomenclature combinée, la détermi-
nation du saccharose/sucre interverti/isoglucose est effectuée selon
les formules, méthode et procédures reprises dans l'article 2 point 2.
4) Pour le classement des produits repris sous les sous-positions
3505 20 10 à 3505 20 90 de la nomenclature combinée, la détermi-
nation d'amidon ou fécule, de dextrines ou d'autres amidons oufécules modifiées est effectuée selon la méthode reprise dansl'annexe II.
5) Pour le classement des produits repris sous les sous-positions
3809 10 10 à 3809 10 90 de la nomenclature combinée, la détermi-nation de matières amylacées est effectuée selon la méthode reprisedans l'annexe II.
6) Pour le classement des produits repris sous les sous-positions
1901 90 11 et 1901 90 19 de la nomenclature combinée, la distinc-tion entre les deux sous-positions se fait sur base de ladétermination de l'extrait sec qui est effectuée par séchage à la
température de 103 ± 2 ºC jusqu'à poids constant.
7) Pour le classement de produits dans les sous-positions 1902 19 10 et
1902 19 90 de la nomenclature combinée, la présence de farines et
semoules de blé tendre dans les pâtes alimentaires est recherchée
d'après la méthode reprise dans l'annexe III.
8) Le dosage du mannitol et du D-glucitol (sorbitol) contenu dans les
marchandises relevantdes sous- posit ions 2905 44 11 à 2905 44 99
et 3823 60 11 à 3823 60 99 de la nomenclature combinée est déter-
minée d'après une méthode basée sur la chromatographie de hauteprécision en phase liquide (HPLC).
Article 4
1. Un bulletin d'analyse est établi.2. Le bulletin d'analyse doit indiquer notamment:1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 4
▼B
— toutes les indications relatives à l'identification de l'échantillon,
— la méthode communautaire utilisée et la référence exacte du texte
légal la reprenant; ou, le cas échéant, la référence à une méthodedétaillée reprenant la nature des opérations analytiques à suivre oule principe d'une méthode à appliquer indiqués dans le présent
règlement,
— les éléments susceptibles d'avoir influencé les résultats,
— les résultats de l'analyse compte tenu de l'expression de ceux-ci
dans la méthode utilisée et de l'expression dictée pour les besoins
des services douaniers ou de gestion qui ont demandé l'analyse.
Article 5
Le règlement(CEE) n
o1061/69 estabrogé.
Article 6
Le présentrèglementent re en vigueur le 1erjanvier 1988.
Le présent règlement est obligatoire dans tous ses éléments et directe-
ment applicable dans tout État membre.1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 5
▼B
ANNEXE I
DÉTERMINATION DE LA TENNEUR EN AMIDON ET EN SES
PRODUITS DE DÉGRADATIONY COMPRIS LE GLUCOSE
1.Objet et domaine d'application
a) La méthode permet de déterminer la teneur en poids en amidon et en
ses produits de dégradation y compris le glusoce, soit «amidon»,
b) La teneur en «amidon» visée ci-dessus est égale à la valeur E, telle
qu'elle est calculée au point 6 de la présente méthode.
2.Principe
L'échantillon est désagrégé au moyen d'hydroxyde de sodium et
l'«amidon» scindé en unités de glucose avec de l'amyloglucosidase. Le
dosage du glucose est effectué par voie enzymatique.
3.Réactifs
(utiliser de l'eau bidistillée).
3.1. Solution d'hydroxyde de sodium 0,5 N (0,5 mol/l).3.2. Acide acétique (glacial) à 96 % au moins.
3.3. Solution de l'amyloglycosidase:
immédiatement avant l'emploi, dissoudre environ 10 mg d'amyloglucosi-
dase (EC 3.2.1.3) (6 U/mg) dans 1 ml d'eau (
1).
3.4. Tampon triéthanolamine:
dissoudre 14,0 g de chlorhydrate de triéthanolamine [chlorure de tris(2-
hydroxyethyl)ammonium] et 0,25 g de sulfate de magnésium
(MgSO47H2O) dans 80 ml d'eau, y ajouter environ 5 ml de solution
d'hydroxyde de sodium 5 N (5 mol/l) etajust er le pH à 7,6 au moyen
d'une solution d'hydroxyde de sodium 1 N (1 mol/l).
Compléter à 100 ml avec de l'eau. Ce tampon se conserve au moins
quatre semaines à 4 ºC.
3.5. Solution de NADP (Nicotinamide Adénine Dinicléotide phosphate, sel
disodique):
dissoudre 60 mg de NADP dans 6 ml d'eau. Cette solution se conserve
pendantau moins quat re semaines à 4 ºC.
3.6. Solution de ATP (Adénosine-5'-triphosphate, sel disodique):
dissoudre 300 mg d'ATP. 3H2O et300 mg d'hydrogénocarbonat e de
sodium (NaHCO3) dans 6 ml d'eau. Cette solution se conserve pendant
au moins quatre semaines à 4 ºC.
3.7. Suspension de HK/G6P-DH (Hexokinase-EC 2.7.1.1) etde glucose-6-
phosphate deshydrogènase (EC 1.1.1.49):
mettre en suspension 280 U HK et 140 U G6P-DH dans 1 ml de solution
de sulfate d'ammonium (C = 3,2 mol/l). Cette suspension se conserve
pendantau moins une année à 4 ºC.
4.Appareillage
4.1. Agitateur magnétique avec bain-marie à 60 ºC.
4.2. Barreaux aimantés.
4.3. Spectrophotomètre U.V. muni avec cuves de 1 cm.
4.4. Pipettes pour l'analyse enzymatique.1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 6
(1) U est l'unité internationale de l'activité enzymatique.
▼B
5.Mode opératoire
5.1.Désagrégation au moyen d'hydroxyde de sodium et hydrolyse enzyma-
tique de l'«amidon»:
5.1.1. D'après la teneur présumée en «amidon», choisir les pesées ci-après (la
teneur en «amidon» ne devrait pas dépasser 0,4 g par pesée).
Teneur en «amidon»
présumée du produiten
g/100 gPesée approximative,en
gramme
(P)Volume du ballon jaugé
en mlFacteur de dilution
jusqu'au litre
(f)
> 70 0,35-0,4 500 2
20-70 max. 0,5 500 2
5-20 max. 1 250 4
< 5 max. 2 200 5
5.1.2. Peser (avec une précision de 0,1 mg) l'échantillon.
5.1.3. Ajouter 50 ml de solution d'hydroxyde de sodium 0,5 N (3.1) et maintenir
sous agitation constante pendant trente minutes dans le bain-marie de
l'agitateur magnétique (4.1), à 60 ºC.
5.1.4. Ajuster le pH à 4,6-4,8 avec quelques ml d'acide acétique concentré (3.2).5.1.5. Placer dans le bain-marie avec l'agitateur magnétique (4.1), à 60 ºC,
ajouter 1,0 ml de solution de l'enzyme (3.3) et laisser agir pendant trente
minutes, sous agitation.
5.1.6. Après refroidissement, transvaser quantitativement dans le ballon jaugé
(5.1.1) indiqué etajust er jusqu'à la marque avec de l'eau.
5.1.7. Si nécessaire, filtrer à travers un filtre plissé (voir remarque au point 1).
5.2.Dosage du glucose
5.2.1. La solution d'essai doit contenir 100-1 000 mg de glucose par litre, ce qui
correspond à un ∆Ε
340qui se situe entre 0,1-1,0.
La solution d'essai diluée dans une proportion de 1 + 30 avec de l'eau ne
doitpas présent er à 340 nm, une absorbance dépassant0,4 (mesurée par
rapportà l'air).
5.2.2. Amener le tampon (3.4) à la température ambiante (20 ºC).5.2.3. La température des réactifs et de l'échantillon doit être de 20 à 25 ºC.5.2.4. Mesurer l'absorbance à 340 nm par rapportà l'air (pas de cuve dans le
trajet optique de référence).
5.2.5. Exécution selon le schéma de pipetage repris ci-dessous:
Introduire dans les cuvesTémoin
(ml)Essai
(ml)
Tampon (réactif 3.4) 1,00 1,00
NADP (réactif 3.5) 0,10 0,10ATP (réactif 3.6) 0,10 0,10
Solution d'essai: (5.1.6 ou
5.1.7)— 0,10
Eau bidistillée 2,00 1,90
Mélanger, après environ 3 minutes mesurer l'absorbance des solutions (E
1). Déclencher la
réaction par addition de:
HK/G6P-DH (réactif 3.7) 0,02 0,02Mélanger, attendre la fin de la réaction (env. 15 mn) et mesurer l'absorbance des solutions
(E
2). Tenir compte d'éventuelles réactions de dérive.
Si la réaction n'est pas terminée après quinze minutes, continuez à lire les absorbances de
cinq minutes en cinq minutes jusqu'à ce que l'augmentation de l'absorbance soit constante
sur cinq minutes, et ensuite, extrapolez l'absorbance au temps de l'addition de la suspension
3.7 (voir remarques au point2).1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 7
▼B
5.2.6. Pour les témoins et l'essai, calculer la différence d'absorbance. E2-E1.
Soustraire la différence d'absorbance du témoin de celle de l'essai (= ∆Ε):
∆Ε=∆Εessai−∆Εtémoin
De cette différence, on obtient la teneur en glucose de la solution d'essai:
Teneur en glucose, en g/l de la solution d'essai
Gl¼3;22/C2180 ;16
6;3/C21/C20;1/C21 000/C2∆Ε340¼0;921/C2∆Ε340
(3,22 = volume de la solution à mesurer; 1 = trajet de la lumière dans la
cuvette; 0,1 = volume de la solution de l'échantillon; 180,16 = masse
moléculaire de glucose)
5.2.7. Si la mesure de l'absorbance à 340 mm n'estpas possible, la mesure peut
être effectuée à la longueur d'onde de 365 nm ou 334 nm. Dans ce cas, le
chiffre 6,3 de la formule Gl ci-dessus estremplacé par le chiffre 3,5 ou
6,18 respectivement.
6.Calcul et expression des résultats:
a) Teneur en «Amidon» E en g/100 g:
E¼100/C20;9/C2Gl
p/C2f
b) Teneur en «glucose» Z en g/100 g:
Z¼100/C2Gl
p/C2f
où:
Gl = glucose, en g/l (5.2.6);
f = facteur de dilution (5.1.1);p = pesée de l'échantillon, en g;0,9 = facteur de conversion du glucose en l'amidon.
Remarques
1. Au cas où il est constaté une inhibition des enzymes, il est conseillé d'appli-
quer la méthode des «ajouts dosés» en utilisant de l'amidon pur.
2. Au cas où il est constaté que la solution ne peut pas être filtrée selon 5.1.7, le
chimiste prend les mesures appropriées.1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 8
▼B
ANNEXE II
DÉTERMINATION DE LA TENEUR EN AMIDON OU FÉCULE,
DEXTRINES OU AUTRES AMIDONS OU FÉCULES MODIFIÉS,
CONTENUS DANS LES MARCHANDISES RELEVANT DES SOUS-
POSITIONS 35052010 À 35052090 DE LA NOMENCLATURE
COMBINÉE AINSI QU'EN MATIÈRES AMYLACÉES CONTENUES
DANS LES MARCHANDISES RELEVANT DES SOUS-POSITIONS
38091010 À 38091090 DE LA NOMENCLATURECOMBINÉE
I.Principe
Par hydrolyse acide, l'amidon est transformée en sucres réducteurs qui sont
dosés volumétriquement au moyen de la liqueur de Fehling.
II.Appareillage et réactifs
1. Ballon de 250 ml environ;
2. Fiole jaugée de 200 ml;
3. Burette graduée de 25 ml;
4. Acide chlorhydrique de densité 1,19;5. Solution de potasse caustique;
6. Charbon décolorant;
7. Liqueur de Fehling;
8. Solution de bleu de méthylène à 1 %.
III.Mode opératoire
Dans un ballon d'environ 250 ml introduire une prise d'essai correspondant
à une quantité d'amidon d'environ 1 gramme. Ajouter 100 ml d'eau distillée
et 2 ml d'acide chlorhydrique. Porter à ébullition à reflux pendant 3 heures.
Transvaser le contenu du ballon ainsi que le produit de son rinçage dans
une fiole jaugée de 200 ml et y ajouter la solution de potasse caustique
jusqu'à réaction légèrement acide. Compléter le volume à 200 ml par de
l'eau distillée et filtrer le tout sur un peu de charbon décolorant.
Verser ensuite la solution dans une burette graduée et réduire 10 ml de
liqueur de Fehling selon la méthode ci-après:
Dans un ballon à fond platd'environ 250 ml, verser 10 ml de liqueur de
Fehling (5 ml de solution A et 5 ml de solution B). Agiter jusqu'à obtention
d'une solution claire, puis ajouter 40 ml d'eau distillée ainsi qu'une petite
quantité de quartz ou de pierre ponce.
Placer le ballon sur une plaque d'amiante de forme carrée percée en son
milieu d'une ouverture circulaire d'un diamètre de 6 cm environ, reposant
elle-même sur une toile métallique. Chauffer le ballon de manière que le
liquide commence à bouillir au boutde 2 minut es environ.
Ajouter au liquide en ébullition, à l'aide d'une burette, des quantités succes-
sives de la solution sucrée jusqu'à ce que la couleur bleue de la liqueur de
Fehling devienne à peine perceptible; ajouter alors, à titre d'indicateur, 2 ou
3 gouttes de solution de bleu de méthylène, puis compléter la titration en
ajoutant goutte à goutte une nouvelle quantité de la solution sucrée jusqu'à
disparition de la couleur bleue de l'indicateur.
Pour plus de précision, répéter la titration dans les mêmes conditions en
ajoutant cependant, en une seule fois, la presque totalité de la solution
sucrée nécessaire à la réduction de la liqueur de Fehling. Dans cette
deuxième titration, la réduction de la liqueur de Fehling doit s'opérer dans
un délai de 3 minutes. Continuer l'ébullition pendant exactement 2 minutes.
Titrer en ajoutant goutte à goutte pendant la troisième minute jusqu'à la
disparation de la couleur bleue de l'indicateur.
Le pourcentage en poids d'amidon de l'échantillon est déterminé au moyen
de la formule suivante:
amidon % ¼T/C2200/C2100
n/C2p/C20;95
dans laquelle:
T: représente la quantié en grammes de dextrose anhydre correspondant
à 10 ml de liqueur de Fehling (5 ml de solution A + 5 ml de solu-1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 9
▼B
tion B). Ce titre est de 0,04945 g de dextrose anhydre lorsque la
solution A contient 17,636 g de cuivre par litre;
n: représente le nombre de ml de la solution sucrée utilisée pour la
titration;
p: représente le poids de la prise d'essai;0,95: représente le taux de conversion du dextrose anhydre en amidon.
IV.Préparation de la liqueur de Fehling
Solution A: Dissoudre, dans une fiole jaugée au moyen d'eau distillée,
69,278 g de sulfate de cuivre cristallisé pur pour analyse
(CuSO
4·5H2O) exempt de fer et ajuster la solution au
volume d'un litre au moyen d'eau distillée. Le titre exact de
cette solution devra être vérifié au moyen d'une détermina-
tion quantitative du cuivre.
Solution B: Dissoudre, dans une fiole jaugée, au moyen d'eau distillée,
100 g d'hydroxyde de sodium et 346 g de tartrate double de
sodium et de potassium (sel de Seignette) et ajuster la solu-
tion au volume d'un litre au moyen d'eau distillée.
Les deux solutions A et B doivent être mélangées à volume égal immédia-
tement avant utilisation. 10 ml de liqueur de Fehling (5 ml de solution A +
5 ml de solution B) sont complètement réduits, si l'on opère dans les condi-
tions indiquées sous III, par 0,04945 g de dextrose anhydre.1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 10
▼B
ANNEXE III
RECHERCHE DE LA PRÉSENCE DE FARINE OU DE SEMOULE DE
BLÉ TENDREDANS LES PÂTES ALIMENTAIRES
(d'après la méthode Young et Gilles, modifiée par Bernaerts et Gruner)
I.Principe
Un extrait de l'échantillon des pâtes alimentaires à analyser est préparé en
utilisant un solvant non polaire.
Cet extrait est chromatographié sur couche mince de gel de silice de fa ηon
à séparer les stérols présents en différentes fractions sous forme de bandes.
Suivant le nombre de bandes intenses révélées, il est possible de déterminer
si le produitexaminé estfabriqué, soitexclusivementà part ir de blé dur ou
de blé tendre, soit à partir d'un mélange de ces deux produits. Il est égale-
ment possible de déterminer si des neufs ont été ajoutés à ces matières
premières.
IIAppareillage et réactifs
1. Homogénéiseur ou broyeur permettant d'obtenir une mouture passant à
travers un tamis normalisé d'une ouverture de mailles de 0,200 mm.
2. Tamis normalisé d'une ouverture de mailles de 0,200 mm.
3. Évaporateur sous pression réduite avec bain-marie.4. Plaque de verre, feuille d'aluminium ou autre support approprié de 20
cm x 20 cm recouvertd'une couche mince de gel de silice. Si on
prépare soi-même la couche mince, on utilisera du gel de silice
mélangé à environ 13 % de plâtre et on l'appliquera sur la plaque de
verre en couche de 0,25 mm avec un appareillage adéquateten suivant
les instructions des fabricants.
5. Micropipette permettant de mesurer 20 microlitres.
6. Cuve avec couvercle convenantpour le développementdes éhromat o-
grammes.
7. Nébulisateur.
8. Éther de pétrole de point d'ébullition compris entre 40 et 60 º C redis-
tillé avant l'emploi.
9. Éther éthylique anhydre p.a.
10. Tétrachlorure de carbone pour chromatographie redistillé avant
l'emploi.
11. Acide phosphomolybdique p.a.12. Alcool éthylique 94º
III.Mode opératoire
Moudre une vingtaine de grammes de l'échantillon à analyser de fa ηon
qu'ils passent en totalité à travers le tamis. Introduire la prise d'essai moulue
dans un flacon Erlenmeyer et recouvrir avec 150 ml d'éther de pétrole.
Laisser à la température ambiante jusqu'au lendemain. Agiter de temps en
temps.
Filtrer ensuite sur entonnoir B όchner muni d'une couche d'adjuvantde
filtration ou sur filtre plissé. Transvaser peu à peu la solution limpide
obtenue dans un ballon taré de 100 ml. Évaporer le solvant sous pression
réduite en chauffant le ballon au bain-marie à 40—50 ºC. Après évaporation
du solvant, continuer de chauffer sous pression réduite pendant 10 minutes.
Après refroidissement du ballon, déterminer le poids de l'extrait. Diluer
l'extrait dans de l'éther éthylique à raison de 1 ml d'éther éthylique par 60
milligrammes d'extrait.
Activer les couches minces en les portant à 130 º C pendant 3 heures.
Laisser refroidir dans un dessiccateur contenant du gel de silice. Les
plaques qui ne sont pas utilisées immédiatement sont conservées dans le
même dessiccateur.
Appliquer sur une couche, de préférence fra ξchement activée, 20 microlitres
de la solution limpide sous forme d'une bande de largeur constante de 3 cm
de long constituée de gouttelettes juxtaposées. Laisser évaporer le solvant.1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 11
▼B
Développer le chromatogramme à la température ambiante avec le tétra-
chlorure de carbone en utilisant une cuve chromatographique recouverte
sur les parois de papier filtre imbibé de solvant. Après une heure environ
le solvant a atteint une hauteur de 18 cm. Enlever la plaque et laisser
évaporer le solvantà l'air. Développer une seconde fois le chromat ogramme
de fa ηon à mieux séparer les bandes. Laisser évaporer à nouveau le solvant
à l'air.
Vaporiser la couche mince de gel de silice avec une solution de 20 %
d'acide phosphomolybdique dans l'alcool éthylique. La couleur de la couche
doitêt re uniformémentjaune. Révéler les bandes en pla ηantla plaque vapo-
risée pendant5 minut es à 110 º C.
IV.Interprétation du chromatogramme
Si le chromatogramme présente une seule bande principale intense possé-
dant un Rf d'environ 0,4—0,5, le blé utilisé pour la fabrication de la pâte
alimentaire est du blé dur. Si, par contre, deux bandes principales d'égale
intensité apparaissent, la matière première utilisée est du blé tendre. Les
mélanges de blé dur et de blé tendre peuvent être appréciés en évaluant
l'intensité relative des deux bandes.
Si l'on constate la présence de trois bandes (2 bandes à la hauteur des
bandes principales du blé tendre, plus une bande intermédiaire), il y a addi-
tion d'oeufs à la pâte. Dans ce cas, la matière première utilisée est du blé
dur si la bande supérieure est moins intense que la bande intermédaire.
Par. contre, si la bande supérieure est plus intense que la bande intermé-
diaire, la matière première utilisée est du blé tendre.1987R4154 — FR — 18.02.1998 — 001.001 — 12