1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 1
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►BDIRECTIVEDU CONSEIL
du 26 juin 1964
relative à des problèmes de police sanitaire en matière d'échanges intracommunautaires d'ani-
maux des espèces bovine et porcine
(64/432/CEE)
(JO P 121 du 29.7.1964, p. 1977)
Modifiée par:
Journal officiel
nopage date
►M1 Directive 66/600/CEE du Conseil du 25 octobre 1966 P 192 3294 27.10.1966
►M2 Directive 70/360/CEE du Conseil du 13 juillet 1970 L 157 40 18.7.1970
►M3 Directive 71/285/CEE du Conseil du 19 juillet 1971 L 179 1 9.8.1971
►M4 Directive 72/97/CEE du Conseil du 7 février 1972 L 38 95 12.2.1972
►M5 Directive 72/445/CEE du Conseil du 28 décembre 1972 L 298 49 31.12.1972
►M6 Directive 72/462/CEE du Conseil du 12 décembre 1972 L 302 28 31.12.1972
►M7 Directive 73/150/CEE du Conseil du 5 juin 1973 L 172 18 28.6.1973
►M8 Directive 74/387/CEE du Conseil du 15 juillet 1974 L 202 36 24.7.1974
►M9 Directive 75/379/CEE du Conseil du 24 juin 1975 L 172 17 3.7.1975
►M10 Directive 77/98/CEE du Conseil du 21 décembre 1976 L 26 81 31.1.1977
►M11 Directive 79/109/CEE du Conseil du 24 janvier 1979 L 29 20 3.2.1979
►M12 Directive 79/111/CEE du Conseil du 24 janvier 1979 L 29 26 3.2.1979
►M13 Directive 80/219/CEE du Conseil du 22 janvier 1980 L 47 25 21.2.1980
►M14 Directive 80/1098/CEE du Conseil du 11 novembre 1980 L 325 11 1.12.1980
►M15 Directive 80/1102/CEE du Conseil du 11 novembre 1980 L 325 18 1.12.1980
►M16 modifiée par la directive 85/571/CEE du Conseil du 19 décembre
1985L 372 12 31.12.1985
►M17 Directive 80/1274/CEE du Conseil du 22 décembre 1980 L 375 75 31.12.1980
►M18 Directive 81/476/CEE du Conseil du 24 juin 1981 L 186 20 8.7.1981
►M19 Directive 82/61/CEE du Conseil du 26 janvier 1982 L 29 13 6.2.1982
►M20 Directive 82/893/CEE du Conseil du 21 décembre 1982 L 378 57 31.12.1982
►M21 Directive 83/646/CEE du Conseil du 13 décembre 1983 L 360 44 23.12.1983
►M22 Directive 84/336/CEE du Conseil du 19 juin 1984 L 177 22 4.7.1984
►M23 Directive 84/643/CEE du Conseil du 11 décembre 1984 L 339 27 27.12.1984
►M24 Directive 84/644/CEE du Conseil du 11 décembre 1984 L 339 30 27.12.1984
►M25 Directive 85/320/CEE du Conseil du 12 juin 1985 L 168 36 28.6.1985
►M26 Règlement(CEE) no3768/85 du Conseil du 20 décembre 1985 L 362 8 31.12.1985
►M27 Directive 85/586/CEE du Conseil du 20 décembre 1985 L 372 44 31.12.1985
►M28 Décision 87/231/CEE du Conseil du 7 avril 1987 L 99 18 11.4.1987
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►M29 Directive 87/489/CEE du Conseil du 22 septembre 1987 L 280 28 3.10.1987
►M30 Directive 88/406/CEE du Conseil du 14 juin 1988 L 194 1 22.7.1988
►M31 Directive 89/360/CEE du Conseil du 30 mai 1989 L 153 29 6.6.1989
►M32 Directive 89/662/CEE du Conseil du 11 décembre 1989 L 395 13 30.12.1989
►M33 Directive 90/422/CEE du Conseil du 26 juin 1990 L 224 9 18.8.1990
►M34 Directive 90/423/CEE du Conseil du 26 juin 1990 L 224 13 18.8.1990
►M35 Directive 90/425/CEE du Conseil du 26 juin 1990 L 224 29 18.8.1990
►M36 Directive 91/499/CEE du Conseil du 26 juin 1991 L 268 107 24.9.1991
►M37 Directive 91/687/CEE du Conseil du 11 décembre 1991 L 377 16 31.12.1991
►M38 Directive 92/65/CEE du Conseil du 13 juillet 1992 L 268 54 14.9.1992
►M39 Directive 92/102/CEE du Conseil du 27 novembre 1992 L 355 32 5.12.1992
►M40 Directive 94/42/CE du Conseil du 27 juillet 1994 L 201 26 4.8.1994
►M41 Directive 95/25/CE du Conseil du 22 juin 1995 L 243 16 11.10.1995
►M42 Directive 97/12/CE du Conseil du 17 mars 1997 L 109 1 25.4.1997
►M43 modifiée par la directive 98/99/CE du Conseil du 14 décembre 1998 L 358 107 31.12.1998
►M44 Directive 98/46/CE du Conseil du 24 juin 1998 L 198 22 15.7.1998
►M45 Directive 2000/15/CE du Parlement européen et du Conseil du 10 avril
2000L 105 34 3.5.2000
►M46 Directive 2000/20/CE du Parlement européen et du Conseil du 16 mai
2000L 163 35 4.7.2000
►M47 Décision 2001/298/CE de la Commission du 30 mars 2001 L 102 63 12.4.2001
►M48 Règlement(CE) no535/2002 de la Commission du 21 mars 2002 L 80 22 23.3.2002
►M49 Règlement(CE) no1226/2002 de la Commission du 8 juillet2002 L 179 13 9.7.2002
Modifiée par:
►A1 Acte d'adhésion du Danemark, de l'Irlande et du Royaume-Uni de
Grande-Bretagne et d'Irlande du NordL 73 14 27.3.1972
(adapté par la décision du Conseil du 1erjanvier 1973) L 2 1 1.1.1973
►A2 Acte d'adhésion de la Grèce L 291 17 19.11.1979
►A3 Acte d'adhésion de l'Autriche, de la Finlande et de la Suède C 241 21 29.8.1994
(adapté par la décision 95/1/CE, Euratom, CECA du Conseil) L 1 1 1.1.1995
►A4 Acte relatif aux conditions d'adhésion à l'Union européenne de la Répu-
blique tchèque, de la République d'Estonie, de la République de Chypre,de la République de Lettonie, de la République de Lituanie, de la Répu-
blique de Hongrie, de la République de Malte, de la République de
Pologne, de la République de Slovénie etde la République slovaque, etaux adaptations des traités sur lesquels est fondée l'Union européenneL 236 33 23.9.2003
Rectifiée par:
►C1 Rectificatif, JO P 176 du 5.11.1964, p. 2799 (64/432/CEE)
►C2 Rectificatif, JO P 32 du 24.2.1966, p. 480 (64/432/CEE)
►C3 Rectificatif, JO L 72 du 25.3.1972, p. 23 (71/285/CEE)
►C4 Rectificatif, JO L 64 du 10.3.1977, p. 28 (77/98/CEE)
►C5 Rectificatif, JO L 49 du 24.2.1981, p. 16 (80/1098/CEE)
►C6 Rectificatif, JO L 329 du 17.11.1981, p. 22 (80/1102/CEE)
►C7 Rectificatif, JO L 192 du 2.7.1982, p. 23 (82/61/CEE)
►C8 Rectificatif, JO L 133 du 22.5.1985, p. 32 (84/643/CEE)
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►C9 Rectificatif, JO L 42 du 13.2.1985, p. 20 (84/644/CEE)
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DIRECTIVEDU CONSEIL
du 26 juin 1964
relative à des problèmes de police sanitaire en matière d'échanges
intracommunautaires d'animaux des espèces bovine et porcine
(64/432/CEE)
LE CONSEIL DE LA COMMUNAUTÉ ÉCONOMIQUE EUROPÉENNE,
vu le traité instituant la Communauté économique européenne et
notamment ses articles 43 et 100,
vu la proposition de la Commission,vu l'avis de l'Assemblée (
1),
vu l'avis du Comité économique et social (2),
considérantque le règlementno20 du Conseil portant établissement
graduel d'une organisation commune des marchés dans le secteur de laviande de porc (
3) est déjà entré en application ►C1etque le règle-
mentno14/64/CEE du Conseil portant établissement graduel d'une
organisation commune des marchés dans le secteur de la viande bovineestdéjà ent ré en vigueur ◄etque ces règlement s concernentégale-
mentles échanges d'animaux vivant s;
considérantque le règlementn
o20 substitue aux multiples et tradition-
nelles mesures de protection à la frontière un système uniforme, destiné
notamment à faciliter les échanges intracommunautaires; ►C1que le
règlementno14/64/CEE du Conseil ◄tend également à éliminer les
obstacles à ces échanges;
considérant que la mise en application des règlements susmentionnés
n'aura pas les effets escomptés aussi longtemps que les échanges intra-
communautaires des animaux des espèces bovine et porcine setrouveront freinés par les disparités existant dans les États membresen matière de prescriptions sanitaires;
considérantqu'il estnécessaire, pour éliminer ces disparit és, de prendre
des mesures, dans le cadre de la politique agricole commune et parallè-
lement aux règlements déjà arrêtés ou en préparation en ce quiconcerne l'établissement graduel d'organisations communes desmarchés; qu'il fautdonc procéder à un rapprochementdes disposit ionsdes États membres en matière de police sanitaire;
considérant que le droit que les États membres ont, en vertu de l'article
36 du traité, de continuer à maintenir les interdictions ou restrictionsd'importation, d'exportation ou de transit justifiées par des raisons deprotection de la santé et de la vie des personnes et des animaux, nesupprime pas néanmoins pour eux l'obligation de réaliser le rapproche-
ment des dispositions sur lesquelles ces interdictions et restrictions sont
basées, dans la mesure où les disparités de ces dispositions constituentdes entraves pour la mise en œuvre et le fonctionnement de la politiqueagricole commune;
considérantque dans le cadre de ce rapprochement , il fautimposer au
pays expéditeur l'obligation de veiller à ce que les bovins et porcins
d'élevage, de rente ou de boucherie destinés aux échanges intracommu-nautaires, les lieux de provenance et d'embarquement de ces animauxainsi que les moyens de transport satisfassent à certaines conditions depolice sanitaire en vue de garantir que ces animaux ne constituent pas
une source de propagation de maladies contagieuses;
considérant qu'afin que les États membres puissent avoir des assurances
en ce qui concerne le respectde ces condit ions, il estnécessaire deprévoir la délivrance, par un vétérinaire officiel, d'un certificat de salu-brité qui accompagne les animaux jusqu'au lieu de destination;1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 4
(1)J O no61 du 19. 4. 1963, p. 1254/63.
(2) Voir p. 2009/64 du présentJournal officiel.
(3)J O no30 du 20. 4. 1962, p. 945/62.
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considérant que les États membres doivent disposer de la faculté de
refuser l'introduction sur leur territoire de bovins et de porcins lorsqu'ilest constaté qu'ils sont atteints, ou suspects d'être atteints, d'une
maladie contagieuse, lorsque, sans en être atteints, ils peuvent propager
cette maladie, ou enfin lorsqu'ils ne répondent pas aux dispositionscommunautaires en matière de police sanitaire;
considérant qu'il n'est pas justifié de permettre aux États membres de
refuser l'introduction de bovins et de porcins sur leur territoire pourdes raisons autres que celles relevant de la police sanitaire et que, dèslors, si des raisons ne s'y opposentpas etsi l'expédit eur ou son manda-taire en fait la demande, il faut lui permettre de réexpédier les animaux
dans le pays expéditeur;
considérant que pour permettre aux intéressés d'apprécier les raisons
qui ont été à la base d'une interdiction ou d'une restriction, il importe
que les motifs de celle-ci soient portés à la connaissance de l'expéditeur
ou de son mandataire ainsi que de l'autorité centrale compétente dupays expéditeur;
considérantqu'il convientde donner à l'expédit eur, dans le cas où un
litige sur le bien-fondé d'une interdiction ou d'une restriction surgiraitentre lui et l'autorité de l'État membre destinataire, la possibilité dedemander l'avis d'un expert vétérinaire, choisi sur une liste établie parla Commission;
considérantqu'il estapparu possible d'assouplir dans cert ains cas et
pour certaines catégories d'animaux les dispositions générales prévuespar la présente directive, sans courir des risques sur le plan sanitaire,
en permettant que des dérogations générales ou spéciales soient accor-
dées par les États membres destinataires;
considérantque pour cert ains domaines pour lesquels des problèmes
spéciaux se posent, le rapprochement des dispositions des Étatsmembres ne peut être réalisé qu'après une étude plus approfondie;
A ARRÊTÉ LA PRÉSENTE DIRECTIVE:
Article premier
La présente directive est applicable aux échanges intracommunautaires
d'animaux de l'espèce bovine etd'animaux de l'espèce porcine, à
l'exception du porc sauvage tel que défini à l'article 2 point e) de la
directive 80/217/CEE (1), sans préjudice des dispositions prévues dans
les directives 80/215/CEE (2), 85/511/CEE, 88/407/CEE (3), 89/608/
CEE (4), 90/425/CEE, 90/429/CEE (5), 90/667/CEE (6), 91/496/CEE,
91/628/CEE (7), 92/102/CEE (8), 92/119/CEE, etdans la décision 90/
424/CEE (9).1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 5
(1)J O noL 47 du 21. 2. 1980, p. 11. Directive modifiée en dernier lieu par la
décision 93/384/CEE (JO noL 166 du 8. 7. 1993, p. 34).
(2)J O noL 47 du 21. 12. 1980, p. 4. Directive modifiée en dernier lieu par la
directive 91/687/CEE (JO noL 377 du 31. 12. 1991, p. 16).
(3)J O noL 194 du 22. 7. 1988, p. 10. Directive modifiée en dernier lieu par la
directive 93/60/CEE (JO noL 186 du 28. 7. 1993, p. 28).
(4)J O noL 351 du 2. 12. 1989, p. 34.
(5)J O noL 224 du 18. 8. 1990, p. 62. Directive modifiée en dernier lieu par
l'acte d'adhésion de 1994.
(6)J O noL 363 du 27. 12. 1990, p. 51. Directive modifiée en dernier lieu par la
directive 92/118/CEE.
(7)J O noL 340 du 11. 12. 1991, p. 17. Directive modifiée en dernier lieu par la
directive 95/29/CE (JO noL 148 du 30. 6. 1995, p. 52).
(8)J O noL 355 du 5. 12. 1992, p. 32. Directive modifiée par l'acte d'adhésion
de 1994.
(9)J O noL 224 du 18. 8. 1990, p. 19. Décision modifiée en dernier lieu par la
décision 94/370/CE (JO noL 168 du 2. 7. 1994, p. 31).▼C1
▼B
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▼M42
Article 2
1. Les définitions figurant à l'article 2 de la directive 90/425/CEE et
à l'article 2 de la directive 91/628/CEE sont d'application.
2. En outre, pour les besoins de la présente directive, on entend par:
a)troupeau: un animal ou l'ensemble des animaux gardés dans une
exploitation [au sens de l'article 2 point b) de la directive 92/102/
CEE] comme une unité épidémiologique; si plusieurs troupeauxsont présents dans une même exploitation, ils doivent former une
unité distincte ayant le même statut sanitaire;
b)animal de boucherie: l'animal de l'espèce bovine (y compris les
espècesBison bison etBubalus bubalus ) ou l'animal de l'espèce
porcine destiné à être conduit à l'abattoir ou dans un centre de
rassemblement dont il ne peut sortir que pour aller à l'abattage;
c)animaux d'élevage ou de rente: les animaux des espèces bovine (y
compris les espèces Bison bison etBubalus bubalus ) etporcine
autres que ceux mentionnés au point b), notamment ceux destinésà l'élevage, à la production de lait ou de viande, ou au travail, aux
concours ou aux expositions, à l'exception des animaux participant
à des manifestations culturelles et sportives;
d)troupeau bovin officiellement indemne de tuberculose: le troupeau
bovin qui satisfait aux conditions fixées à ►
M43 l'annexe A,
sectionI,points1et2◄;
e)État membre ourégion d'un État membre officiellement indemne de
tuberculose: l'État membre ou la partie du territoire d'un État
membresatisfaisantauxconditionsfixéesà►
M43l'annexe A, section I, points 4 et 5 ◄; 
f)troupeau bovin officiellement indemne de brucellose: le troupeau
bovin qui satisfait aux conditions fixées à ►M43 l'annexe A,
section II, points 1 et 2 ◄;
g)région officiellement indemne de brucellose: la région d'un État
membre qui satisfait aux conditions fixées à l'annexe A section IIpoints 7, 8 et 9;
h)État membre officiellement indemne de brucellose: l'État membre
qui satisfait aux conditions fixées à ►
M43 l'annexe A, section II,
points 7, 8 et 9 ◄;
i)troupeau bovin indemne de brucellose: le troupeau bovin qui satis-
faitaux condit ions fixées à ►M43 l'annexe A, section II, points 4
et5◄;
j)troupeau officiellement indemne de leucose bovine enzootique: le
troupeau qui satisfait aux conditions fixées à l'annexe D chapitre Isections A et B;
k)État membre ourégion officiellement indemne de leucose bovine
enzootique: la région ou l'État membre qui remplissent les
exigences fixées à ►
M43 l'annexe D, chapitre I, sections E et
F◄;
l)vétérinaire officiel: le vétérinaire désigné par l'autorité centrale
compétente;
m)vétérinaire agréé: tout vétérinaire agréé par l'autorité compétente
conformément à l'article 14 paragraphe 3 section B;
n)maladies dont la notification est obligatoire: les maladies énumé-
rées à l'annexe E partie I;
o)centre de rassemblement: tout emplacement, y compris les exploi-
tations, les centres de collecte et les marchés, où sont rassemblés
des animaux de l'espèce bovine ou porcine issus de différentes
exploitations d'origine en vue de la constitution de lots d'animauxdestinés aux échanges. Ces centres de rassemblement doivent êtreagréés à des fins commerciales etsat isfaire aux exigences prévuesà l'article 11;
p)région: partie du territoire d'un État membre dont la superficie est
d'au moins 2 000 km
2et qui est soumise au contrôle des autorités1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 6
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compétentes et inclut au moins l'une des régions administratives
suivantes:
— Belgique: province — provincie
— Allemagne: Regierungsbezirk
— Danemark: amtou île
— France: département
— Italie: provincia
— Luxembourg: —
— Pays-Bas: rvv-kring
— Royaume-Uni: Angleterre, pays de Galles et Irlande du Nord:
county Écosse: district ou island area
— Irlande: county
— Grèce: νοµός
— Espagne: provincia
— Portugal: continent: distrito; autres parties du territoire
portugais: região autónoma
— Autriche: Bezirk— Suède: län
— Finlande: lääni/län
— République tchèque: kraj
— Estonie: maakond
— Chypre: επαρχία ( district)
— Lettonie: rajons
— Lituanie: apskritis
— Hongrie: megye
— Malte: —
— Pologne: powiat
— Slovenie: obmo čje
— Slovaquie: kraj;
q)négociant: toute personne physique ou morale qui achète et vend
directement ou indirectement des animaux à des fins commerciales,qui procède à une rotation régulière de ces animaux, qui, dans unintervalle maximal de 30 jours après l'achat d'animaux, les revendou les déplace des premières installations à d'autres installations ne
lui appartenant pas et qui est enregistré et satisfait aux conditions
prévues à l'article 13.
Article 3
1. Chaque État membre veille à ce que seuls soient expédiés de son
territoire vers le territoire d'un autre État membre les animaux quiremplissent les conditions pertinentes fixées par la présente directive.
2. Les animaux des espèces bovine etporcine visés par la présent e
directive doivent:
a) subir:
— un contrôle d'identification
et
— un examen clinique effectué par un vétérinaire officiel dans les
24 heures précédantleur départetne présent er aucun signeclinique de maladie;
b) ne pas avoir été acquis dans une exploitation ni dans une zone
faisant l'objet, pour des motifs de police sanitaire, d'une interdiction1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 7
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ou d'une restriction concernant l'espèce en cause, conformément à la
législation communautaire et/ou nationale;
c) être identifiés conformément aux dispositions de la directive 92/102/
CEE;
d) ne pas être des animaux à abattre ni faire l'objet de restrictions de
police sanitaire dans le cadre d'un programme d'éradication desmaladies contagieuses ou infectieuses appliqué par un État membreou une région;
e) être conformes aux dispositions des articles 4 et 5.
Article 4
1. Les animaux des espèces bovine etporcine visés par la présent e
directive ne doivent à aucun moment, entre leur départ de l'exploitation
d'origine et leur arrivée à destination sur le territoire d'un autre État
membre, entrer en contact avec d'autres biongulés qui n'ont pas lemême statut sanitaire.
2. Les animaux des espèces bovine etporcine visés par la présent e
directive doivent être acheminés par des moyens de transport répondantaux conditions fixées dans la directive 91/628/CEE ainsi qu'à cellesprévues à l'article 12.
3. Les règles régissant les conditions d'agrément des emplacements
où peuvent être pratiqués le nettoyage et la désinfection sont détermi-nées selon la procédure prévue à l'article 17.
Article 5
1. Les animaux des espèces bovine etporcine visés par la présent e
directive doivent être accompagnés au cours de leur transport vers leur
lieu de destination ►
M43 d'un certificat sanitaire conforme, selon le
cas, soitau modèle 1, soitau modèle 2 figurantà l'annexe F ◄.C e
certificat doit comporter un seul feuillet, ou, lorsque plus d'une pageestnécessaire, celles-ci doiventêt re disposées de manière que chaquepaire ou groupe de pages fasse partie d'un tout indivisible, et un
numéro de série. Il doit être rédigé le jour du contrôle sanitaire, au
moins dans l'une des langues officielles du pays de destination. Sadurée de validité est de 10 jours à compter de la date du contrôle sani-taire.
2. Les contrôles sanitaires pour la délivrance du certificat sanitaire
(y compris des garanties additionnelles) pour un lot d'animaux peuventêtre effectués dans l'exploitation d'origine ou dans un centre de rassem-blement. À cet effet, l'autorité compétente veille à ce que toutecertification sanitaire soit établie par le vétérinaire officiel à l'issue
des inspections, visites et contrôles prévus par la présente directive.
Toutefois, en ce qui concerne:
a) les animaux issus de centres de rassemblement agréés, cette certifi-
cation peut être établie:
— sur la base du documentofficiel concernantles informat ions
nécessaires complété par le vétérinaire officiel responsable del'exploitation d'origine
ou
— sur la base ►
M43 d'un certificat conforme, selon le cas, soit au
modèle 1, soitau modèle 2 figurantà l'annexe F ◄, etdontles
parties A et B sont dûment complétées et attestées par le vétéri-
naire officiel responsable de l'exploitation d'origine;
b) les animaux issus d'une exploitation qualifiée au titre du réseau
prévu à l'article 14, cette certification peut être établie:
— sur la base du document officiel contenant les informations
nécessaires, complété par le vétérinaire agréé responsable del'exploitation d'origine
ou
— sur la base ►
M43 d'un certificat conforme, selon le cas, soit au
modèle 1, soitau modèle 2 figurantà l'annexe F ◄, etdontles1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 8
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parties A et B sont dûment complétées et attestées par le vétéri-
naire agréé responsable de l'exploitation d'origine.
À cette occasion, le vétérinaire officiel garantira, si nécessaire, le
respect des garanties additionnelles prévues par la législation commu-
nautaire.
3. Le vétérinaire officiel responsable du centre de rassemblement
procède à tous les contrôles nécessaires sur les animaux dès leurarrivée.
4. Le vétérinaire officiel qui remplit ►
M43 la section C du certi-
ficatconforme, selon le cas, soitau modèle 1, soitau modèle 2figurantà l'annexe F ◄est tenu de veiller à l'enregistrement du
mouvementdes animaux dans le syst ème ANIMO le jour de la déli-
vrance du certificat.
5. Les animaux visés par la présente directive peuvent transiter par
un centre de rassemblement situé sur le territoire d'un État membre quin'est pas l'État membre de destination. Dans ce cas, ►
M43 le certi-
ficatconforme, selon le cas, soitau modèle 1, soitau modèle 2
figurantà l'annexe F ◄►M43 (y compris la partie C) ◄doitêt re
rempli par le vétérinaire officiel responsable de l'État membre dont lesanimaux sont originaires. Le vétérinaire officiel responsable du centrede rassemblement fournit une attestation pour l'État membre de destina-tion en remplissant un second certificat analogue ►
M43 au certificat
conforme, selon le cas, soitau modèle 1, soitau modèle 2 figurantà
l'annexe F ◄, où il inscritle numéro de série du cert ificatoriginal et
qu'il joint au certificat original ou à une copie certifiée conforme de cecertificat. Dans ce cas, la durée de validité combinée du certificat nepeutpas dépasser la durée prévue au paragraphe 1.
Article 6
1. Outre les exigences énoncées aux articles 3, 4 et 5, les animaux
d'élevage ou de rente doivent:
— avoir séjourné dans une seule exploitation pendant une période de
30 jours avantl'embarquement , ou depuis leur naissance dansl'exploitation d'origine quand ils sont âgés de moins de 30 jours.Le vétérinaire officiel doit, sur la base de l'identification officielleprévue à l'article 3 paragraphe 2 point c) et des documents officiels,
avoir la certitude que les animaux ont rempli cette condition et, en
outre, qu'ils sont originaires d'un des pays de la Communauté ouqu'ils ont été importés d'un pays tiers conformément à la législationcommunautaire en matière de police sanitaire.
Toutefois, pour les animaux qui transitent par un centre de rassem-
blement agréé situé dans l'État membre d'origine, la durée derassemblement desdits animaux en dehors de l'exploitation d'originene pourra pas excéder 6 jours,
— en ce qui concerne les animaux importés d'un pays tiers dans un
État membre qui n'est pas celui de leur destination ultime, être
acheminés sur le territoire de l'État membre de destination dans les
délais les plus brefs sous le couvert du certificat délivré en vertu del'article 7 de la directive 91/496/CEE,
— dans le cas d'animaux importés d'un pays tiers, à leur arrivée sur le
lieu de destination et avant tout autre mouvement, satisfaire auxexigences de la présente directive, et notamment à l'obligation deséjour prévue au premier tiret, et ils ne peuvent être introduits
dans le troupeau avant que le vétérinaire responsable de cette
exploitation ne se soit assuré que les animaux en question ne sontpas susceptibles de mettre en péril le statut sanitaire de l'exploita-tion.
Si un animal d'un pays tiers est introduit dans une exploitation,
aucun animal de l'exploitation ne peut être négocié pendant les 30jours suivant l'introduction, sauf si l'animal importé est complète-ment isolé des autres animaux de l'exploitation.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 9
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2. Outre les exigences énoncées aux articles 3, 4 et 5, les animaux
d'élevage ou de rente de l'espèce bovine doivent:
a) provenir d'une exploitation bovine officiellement indemne de tuber-
culose et, dans le cas d'animaux âgés de plus de six semaines, avoirréagi négativement à une intradermo-tuberculination effectuée au
cours des 30 jours précédant leur sortie du troupeau d'origine,
conformémentaux disposit ions de l'annexe B point32 d).
Cette intradermo-tuberculination n'est pas nécessaire si les animaux
proviennent d'un État membre ou d'une partie du territoire d'un Étatmembre reconnus officiellementindemnes de t uberculose ou d'unÉtat membre ou d'une partie du territoire d'un État membre faisantpartie d'un réseau de surveillance reconnu;
b) dans le cas d'animaux non castrés provenant d'une exploitation
bovine officiellementindemne de brucellose etâgés de plus de
douze mois, avoir présenté un titre brucellique inférieur à 30 unitésinternationales agglutinantes par millilitre lors d'une séro-agglutina-tion [ou tout autre test agréé par une procédure au titre du comitévétérinaire permanent (CVP) après l'adoption des protocoles perti-
nents] effectuée dans les 30 jours précédant la sortie du troupeau
d'origine et conformément aux dispositions de l'annexe C section A.
Cette séro-agglutination (ou tout test agréé par une procédure du
CVP après l'adoption des protocoles pertinents) n'est pas nécessairesi les animaux sont originaires d'un État membre ou d'une partie duterritoire d'un État membre reconnus officiellement indemnes de
brucellose ou d'un État membre ou d'une partie du territoire d'un
État membre faisant partie d'un réseau de surveillance reconnu;
c) provenir d'une exploitation officiellement indemne de leucose
bovine enzootique et, dans le cas d'animaux âgés de plus de douzemois, avoir réagi négativement à un test individuel effectué au coursdes 30 jours précédant leur sortie du troupeau d'origine et répondantaux dispositions de l'annexe D.
Ce test n'est pas nécessaire si les animaux sont originaires d'un État
membre ou d'une partie du territoire d'un État membre reconnus
officiellement indemnes de leucose bovine enzootique ou d'un Étatmembre ou d'une partie du territoire d'un État membre faisant partied'un réseau de surveillance reconnu;
d) à aucun moment entre la sortie de l'exploitation d'origine et l'arrivée
sur le lieu de destination, n'entrer en contact avec des animaux
répondantseulementaux exigences du paragraphe 3;
e) jusqu'au 31 décembre 2000, ne pas être soumis aux exigences de
tests prévues au point a) ou b), dans le cas de bovins âgés de moins
de trente mois et destinés à la production de viande qui:
— proviennent d'une exploitation bovine officiellement indemne de
tuberculose et de brucellose,
— sont accompagnés d'un certificat sanitaire conforme au point 7,
section A, de l'annexe F, modèle 1 dûment complété,
— restent sous surveillance jusqu'à leur abattage,— n'ont pas été en contact au cours du transport avec des bovins ne
provenantpas de t roupeaux officiellementindemnes de ces
maladies
etpour aut antque:
— ces arrangements soient limités aux échanges entre États
membres ou régions d'États membres ayant le même statut sani-taire en matière de tuberculose ou de brucellose,
— l'État membre de destination prenne toutes les mesures néces-
saires pour éviter toute contamination des troupeaux indigènes,
— les États membres mettent en place un système adéquat de véri-
fications par sondage, d'inspections et de contrôles visant àassurer une mise en œuvre efficace de la présente réglementa-tion,1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 10
▼M46
▼M46
— la Commission contrôle l'application correcte de la présente
directive afin de garantir que les États membres respectent inté-gralement la réglementation.
3. Outre les exigences des articles 3, 4 et 5, les animaux de
boucherie de l'espèce bovine doiventprovenir de t roupeaux officielle-
ment indemnes de tuberculose ou de leucose bovine enzootique et,dans le cas des bovins non castrés, de troupeaux officiellementindemnes de brucellose.
Toutefois, jusqu'au ►
M46 31 décembre 2000 ◄, les pays destina-
taires peuvent accorder à l'Espagne des autorisations générales oulimitées d'introduction sur leur territoire d'animaux de boucherie del'espèce bovine issus de troupeaux non officiellement indemnes detuberculose, de leucose bovine enzootique et de brucellose, pour autant
que ces animaux:
— aient été soumis avec résultat négatif, dans les trente jours précé-
dant l'embarquement, aux tests appropriés prescrits aux annexes B,Ce tD ,
— soientdirect ementacheminés, dès leur arrivée dans le pays de
destination, dans un abattoir et y être abattus dans les délais les
plus brefs etau plus t ard 72 heures après leur arrivée, conformé-mentaux exigences de police sanit aire.
Article 7
Les animaux de boucherie qui, à leur arrivée dans le pays de destina-
tion, ont été conduits:
— soit dans un abattoir, doivent être abattus dans les délais les plus
bref etau plus t ard 72 heures après leur arrivée, conformémentaux exigences de police sanitaire,
— soit dans un centre de rassemblement agréé, doivent être conduits
après le marché à un abattoir pour y être abattus dans les délaisles plus brefs et au plus tard dans les trois jours ouvrables aprèsleur arrivée au centre de rassemblement, conformément auxexigences de police sanitaire. À aucun moment, entre leur arrivée
au centre de rassemblement et leur arrivée à l'abattoir, ils ne
peuvent entrer en contact avec des animaux biongulés autres queceux qui remplissent les conditions prévues par la présente direc-tive.
Article 8
Les États membres veillent à ce que la suspicion de la présence de
l'une des maladies visées à l'annexe E partie I fasse l'objet d'une notifi-
cation obligatoire et immédiate à l'autorité compétente.
Chaque État membre transmet à la Commission avant le 31 mai de
chaque année, etpour la première fois en 1999, un bilan dét aillé des
cas des maladies visées à l'annexe E partie I ou de toute autre maladie
soumise à des garanties additionnelles prévues par la législationcommunautaire sur son territoire au cours de l'année écoulée ainsiqu'un bilan détaillé sur les programmes de contrôle ou d'éradicationen cours. Ces informations seront fondées sur des critères uniformes àétablir selon la procédure prévue à l'article 17. La Commission commu-
nique ces informations aux États membres dans le cadre du comité
vétérinaire permanent et peut notamment les utiliser en relation avecles décisions visées aux annexes A etD.
Article 9
1. Un État membre qui a un programme national obligatoire de lutte
contre l'une des maladies contagieuses énumérées à l'annexe E partie IIpour tout ou partie de son territoire peut soumettre à la Commissionledit programme en indiquant notamment:
— la situation de la maladie sur son territoire,1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 11
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▼M42
— la justification du programme compte tenu de l'importance de la
maladie et des avantages attendus du programme par rapport à soncoût,
— la zone géographique dans laquelle le programme va être appliqué,— les différents statuts applicables aux établissements et les normes
qui doivent être atteintes dans chaque catégorie, ainsi que les procé-dures de test,
— les procédures de contrôle de ce programme, dont les résultats
doivent être transmis au moins une fois par an à la Commission,
— la conséquence à tirer lors de la perte du statut de l'établissement
pour quelque raison que ce soit,
— les mesures à prendre en cas de résultats positifs constatés lors de
contrôles effectués conformément aux dispositions du programme.
2. La Commission examine les programmes communiqués par les
États membres. Les programmes visés au paragraphe 1 peuvent être
approuvés dans le respect des critères mentionnés au paragraphe 1
selon la procédure prévue à l'article 17. Selon la même procédure, lesgaranties complémentaires, générales ou limitées, pouvant être exigéesdans les échanges intracommunautaires, ne sont précisées en mêmetemps que ou au plus tard trois mois après l'approbation des
programmes. Ces garanties doivent être au maximum équivalentes à
celles que l'État membre met en œuvre dans le cadre national.
3. Les programmes soumis par les États membres peuvent être
modifiés ou complétés selon la procédure prévue à l'article 17. Lesmodifications ou compléments apportés à un programme antérieure-mentapprouvé ou aux garant ies définies conformémentau paragraphe2 peuventêt re approuvés selon la même procédure.
Article 10
1. Un État membre qui estime qu'il est totalement ou en partie
indemne de l'une des maladies énumérées à l'annexe E partie II soumetà la Commission les justifications appropriées. Il précise en particulier:
— la nature de la maladie et l'historique de son apparition sur son
territoire,
— les résultats des tests de surveillance fondés sur une recherche
sérologique, microbiologique, pathologique ou épidémiologique et
sur le fait que cette maladie est à déclaration obligatoire auprès
des autorités compétentes,
— la durée de la surveillance effectuée,
— éventuellement, la période durant laquelle la vaccination contre la
maladie a été interdite et la zone géographique concernée par cetteinterdiction,
— les règles permettant le contrôle de l'absence de la maladie.
2. La Commission examine les justifications communiquées par les
États membres. Les garanties complémentaires, générales ou limitées,pouvant être exigées dans les échanges intracommunautaires peuventêtre définies selon la procédure prévue à l'article 17. Ces garanties
doivent être au maximum équivalentes à celles que l'État membre met
en œuvre dans le cadre national.
3. L'État membre concerné communique à la Commission toute
modification des justifications mentionnées au paragraphe 1 se rappor-tant à la maladie, notamment en ce qui concerne toute nouvelleapparition de la maladie. À la lumière des informations communiquées,les garanties définies conformément au paragraphe 2 peuvent êtremodifiées ou supprimées selon la procédure prévue à l'article 17.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 12
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Article 11
1. Les États membres veillent à ce que les centres de rassemble-
ment, pour être agréés par l'autorité compétente, répondent au moins
aux conditions suivantes. Ils doivent:
a) être sous le contrôle d'un vétérinaire officiel qui veille, en particu-
lier, à ce que les dispositions de l'article 4 paragraphes 1 et 2soientrespect ées;
b) être situés dans une zone qui n'est pas soumise à une interdiction ou
à une restriction conformément à la législation communautaire perti-
nente ou la législation nationale;
c) être préalablement nettoyés et désinfectés avant chaque utilisation
selon les instructions du vétérinaire officiel;
d) disposer en fonction des capacités d'accueil:
— d'une installation exclusivement destinée à cet usage lorsqu'ils
sont utilisés comme centre de rassemblement,
— des installations appropriées pour charger et décharger les
animaux, les héberger convenablement, les abreuver et lesnourrir et leur administrer tout traitement dont ils devraient faire
l'objet; ces installations doivent être faciles à nettoyer et à désin-
fecter,
— des infrastructures d'inspection appropriées,— des infrastructures d'isolation appropriées,— d'un équipement approprié pour le nettoyage et la désinfection
des salles etdes camions,
— d'une surface de stockage suffisante pour le fourrage, la litière et
le fumier,
— d'un système adéquat pour la collecte des eaux usées,— d'un bureau ou local pour le vétérinaire officiel;
e) admettre uniquement des animaux identifiés provenant de troupeaux
officiellementindemnes de t uberculose, de brucellose etde leucose
ou des animaux de boucherie répondantaux condit ions fixées par laprésente directive, et en particulier à celles prévues à l'article 6paragraphe 3. À ceteffet , lorsque des animaux sontadmis, lepropriétaire ou la personne responsable du centre vérifie ou faitvérifier les marques d'identification des animaux ainsi que les docu-
ments sanitaires ou autres documents d'accompagnement propres
aux espèces ou catégories concernées;
f) faire l'objetd'inspect ions régulières en vue de s'assurer que les
conditions d'agrément restent remplies.
2. Le propriétaire ou la personne responsable du centre de rassem-
blement est tenu, soit sur la base du document d'accompagnement,soit sur la base des numéros ou marques d'identification des animaux,
d'inscrire dans un registre ou support informatique et de conserver
pendant au moins trois ans les informations suivantes:
— le nom du propriétaire, l'origine, la date d'entrée, la date de sortie,
le nombre et l'identification des animaux de l'espèce bovine ou le
numéro d'enregistrement de l'exploitation d'origine ou du troupeaud'origine des porcs entrant dans le centre ainsi que leur destinationproposée,
— le numéro d'enregistrement du transporteur et le numéro de licence
du camion qui décharge ou charge les animaux dans le centre.
3. L'autorité compétente délivre un numéro d'agrément à chaque
centre de rassemblement agréé. Cet agrément peut être limité à uneespèce particulière ou aux animaux d'élevage et de rente ou auxanimaux de boucherie. L'autorité compétente notifie à la Commissionla liste des centres de rassemblement agréés ainsi que les mises à jour
éventuelles. La Commission communique ces informations aux États
membres dans le cadre du comité vétérinaire permanent.
4. L'autorité compétente peut suspendre ou retirer l'agrément en cas
de non-respect du présent article ou d'autres dispositions appropriées dela présente directive ou de toute autre directive pertinente en matière de1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 13
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police sanitaire. L'agrément peut être rétabli lorsque l'autorité compé-
tente s'est assurée que le centre de rassemblement est entièrementconforme à toutes les dispositions appropriées de la présente directive.
5. L'autorité compétente s'assure que les centres de rassemblement,
lorsqu'ils sont en fonctionnement, disposent d'un nombre suffisant de
vétérinaires officiels pour effectuer toutes les tâches qui leur incom-
bent.
6. Les éventuelles modalités d'application nécessaires à l'application
uniforme du présentart icle sontfixées selon la procédure prévue àl'article 17.
Article 12
1. Les États membres veillent à ce que les transporteurs visés à
l'article 5 de la directive 91/628/CEE remplissent les conditions addi-
tionnelles suivantes:
a) pour le transport d'animaux, ils doivent utiliser des moyens de trans-
portqui soient :
— construits de telle manière que les fèces, litières et fourrages ne
puissents'échapper ou s'écouler du véhicule,
— nettoyés et désinfectés à l'aide de désinfectants autorisés par
l'autorité compétente, immédiatement après chaque transportd'animaux ou de tout produit pouvant affecter la santé animale,etsi nécessaire avantt outnouveau chargementd'animaux;
b) ils doivent soit avoir des installations de nettoyage et de désinfec-
tion appropriées approuvées par l'autorité compétente, y compris
les lieux de stockage pour la litière et le fumier, soit fournir lapreuve que ces opérations sont effectuées par des tiers approuvéspar l'autorité compétente.
2. Le transporteur doit, pour chaque véhicule assurant le transport
d'animaux, s'assurer de la tenue d'un registre contenant au moins lesinformations suivantes, qui sont conservées pendant au moins trois ans:
i) le lieu et la date de chargement, et le nom ou la raison sociale de
l'exploitation ou du centre de rassemblement où les animaux sontchargés;
ii) le lieu etla dat e de livraison, etle nom ou la raison sociale ainsi
que l'adresse du ou des destinataires;
iii) l'espèce et le nombre des animaux transportés;
iv) la date et le lieu de la désinfection;
v) les détails des documents d'accompagnement (numéro de série,
etc.).
3. Les transporteurs veillent à ce qu'à aucun moment, depuis le
départ de l'exploitation ou du centre de rassemblement d'origine jusqu'à
l'arrivée à destination, le lot d'animaux n'entre en contact avec desanimaux d'un statut inférieur.
4. Les États membres s'assurent que les transporteurs s'engagent par
écrit à respecter les conditions suivantes:
— prendre toutes les mesures nécessaires pour se conformer à la
présente directive, et notamment aux dispositions prévues auprésent article et se rapportant à la documentation appropriée qui
doitaccompagner les animaux,
— confier le transport des animaux à des personnes qui possèdent les
aptitudes, les compétences professionnelles et les connaissances
nécessaires.
5. En cas de non respect des dispositions du présent article, les
exigences prévues à l'article 18 de la directive 91/628/CEE sont appli-
cablesmutatis mutandis pour des raisons de santé animale.
Article 13
1. Les États membres veillent à ce que tous les négociants soient
enregistrés, approuvés et se voient attribuer un numéro d'agrément par1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 14
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l'autorité compétente, et à ce qu'ils remplissent au moins les conditions
suivantes:
a) ils doiventuniquementfaire le commerce des animaux ident ifiés
provenant de troupeaux officiellement indemnes de tuberculose, debrucellose etde leucose ou d'animaux de boucherie répondantauxconditions fixées par la présente directive, et en particulier à cellesprévues à l'article 6 paragraphe 3. À cet effet, le négociant s'assure
que les animaux sont correctement identifiés et accompagnés des
documents sanitaires appropriés aux espèces concernées.
Toutefois, l'autorité compétente peut autoriser des transactions d'ani-
maux identifiés ne répondant pas aux conditions prévues au premieralinéa pour autant que ces animaux soient acheminés immédiate-ment dans un abattoir dans l'État membre d'origine sans transiterpar leurs installations, en vue d'y être abattus le plus rapidement
possible afin d'éviter toute propagation des maladies. Les disposi-
tions nécessaires devront être prises pour que ces animaux, dès leurarrivée à l'abattoir, ne puissent entrer en contact avec d'autresanimaux et afin qu'ils soient abattus séparément d'autres animaux;
b) le négociantestt enu, soitsur la base du documentd'accompagne-
mentdes animaux, soitsur la base des numéros ou marquesd'identification des animaux, d'inscrire dans un registre ou supportinformatique et de conserver pendant au moins trois ans les données
suivantes:
— le nom du propriétaire, l'origine, la date d'achat, les catégories,
le nombre et l'identification des animaux de l'espèce bovine oule numéro d'enregistrement de l'exploitation d'origine ou du trou-peau d'origine des porcs achetés,
— le numéro d'enregistrement du transporteur et/ou le numéro de
licence du camion qui livre etcharge les animaux,
— le nom et l'adresse de l'acheteur et la destination des animaux,
— des copies du plan de marché, et/ou le numéro de série des certi-
ficats sanitaires;
c) lorsque le négociant détient des animaux dans ses installations, il
veillera à ce que:
— une formation spécifique du personnel en charge des animaux
soit entreprise en ce qui concerne l'application des exigences dela présente directive ainsi que les soins à assurer aux animaux etleur bien-être,
— des contrôles et, le cas échéant, des tests soient régulièrement
effectués par le vétérinaire officiel sur les animaux et que toutesles mesures nécessaires soient prises pour éviter la propagationd'une maladie.
2. Les États membres veillent à ce que chaque installation utilisée
par les négociants pour l'exercice de leur profession soit enregistrée etdotée par l'autorité compétente d'un numéro d'agrément, et à ce qu'ellesoit conforme au moins aux conditions suivantes:
a) être sous le contrôle d'un vétérinaire officiel;
b) être situées dans une zone qui n'est pas soumise à une interdiction
ou restriction conformément à la législation communautaire perti-
nente ou à la législation nationale;
c) disposer:
— des installations appropriées d'une capacité suffisante, et en
particulier des infrastructures d'inspection appropriées et desinfrastructures d'isolation de manière à pouvoir isoler tous lesanimaux en cas d'apparition d'une maladie contagieuse,
— des installations appropriées pour décharger les animaux et, au
besoin, les héberger convenablement, les abreuver et les nourrir
et pour leur administrer tout traitement qu'ils auraient à subir;
ces installations doivent être faciles à nettoyer et à désinfecter,
— d'une surface suffisante pour la réception de la litière et du
fumier,
— d'un système adéquat pour la collecte des eaux usées;1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 15
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d) elle doit être préalablement nettoyée et désinfectée avant chaque
utilisation selon les instructions du vétérinaire officiel.
3. L'autorité compétente peut suspendre ou retirer l'agrément en cas
de non-respect du présent article ou d'autres dispositions appropriées de
la présente directive ou de toute autre directive pertinente en matière de
police sanitaire. L'agrément peut être rétabli lorsque l'autorité compé-tente s'est assurée que le négociant s'est conformé aux dispositionsappropriées de la présente directive.
4. L'autorité compétente doit effectuer des inspections régulières
pour s'assurer que les exigences appropriées du présentart icle sontremplies.
Article 14
1. L'autorité compétente d'un État membre peut instaurer un système
de réseaux de surveillance.
Le système de réseaux de surveillance doit au moins se composer:
— des troupeaux,
— du propriétaire de l'exploitation ou de toute personne physique ou
morale qui en a la responsabilité,
— du vétérinaire agréé ou du vétérinaire officiel responsable de
l'exploitation,
— du service vétérinaire officiel de l'État membre,
— des laboratoires officiels de diagnostic vétérinaire ou de tout labora-
toire agréé par l'autorité compétente,
— d'une base de données informatisée.
Les vétérinaires officiels des abattoirs et des centres de rassemblement
agréés serontassociés au syst ème de réseaux.
2. Le système de réseaux de surveillance a pour objectifs principaux
la qualification officielle des exploitations, le maintien de cette qualifi-
cation par des inspections régulières, la collecte de données
épidémiologiques etla surveillance des maladies de manière à garant irle respect de toutes les prescriptions de la présente directive ou de touteautre directive pertinente en matière de police sanitaire.
Ce système de réseaux de surveillance est obligatoire dans toutes les
exploitations du territoire de l'État membre qui a mis en place un telsystème. Toutefois, l'autorité compétente peut autoriser l'instauration
d'un tel système de réseaux sur une partie du territoire se composant
d'une ou de plusieurs régions contiguës telles que définies à l'article 2paragraphe 2 point p). Dans le cas où cette dérogation est accordée, lesmouvements des animaux vers cette partie du territoire à partir d'autresrégions ne faisant pas partie du système de réseaux sont soumis auxdispositions de la présente directive.
L'autorité compétente fixe les obligations et les droits auxquels doivent
se conformer les vétérinaires agréés, la personne responsable de
l'exploitation ou son propriétaire et tout autre participant au système,y compris la personne responsable de l'octroi de la certification sani-taire.
3. L'autorité compétente veille à ce que les obligations visées au
paragraphe 2 soientau moins les suivant es.
A. Tout propriétaire d'une exploitation ou toute personne qui en
assume la responsabilité doit:
i) s'assurer, par contrat ou acte juridique, les services d'un vétéri-
naire agréé par l'autorité compétente;
ii) faire appel immédiatement au vétérinaire agréé responsable de
l'exploitation dès qu'il suspecte l'existence d'une maladie conta-
gieuse ou d'une maladie dont la notification est obligatoire;
iii) informer le vétérinaire agréé de toute introduction d'animaux
dans son exploitation;
iv) isoler les animaux avant de les introduire dans son exploitation
afin de permettre au vétérinaire agréé de vérifier, le cas échéant1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 16
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à l'aide des tests requis, si le statut de l'exploitation peut être
maintenu.
B. Le vétérinaire agréé visé à l'article 2 paragraphe 2 point m) est
soumis au contrôle de l'autorité compétente et doit se conformer
aux prescriptions suivantes. Il doit:
i) remplir les conditions nécessaires pour exercer la profession de
vétérinaire;
ii) n'avoir aucun lien d'intérêt financier ni familial avec le proprié-
taire ou la personne responsable de l'exploitation;
iii) posséder des connaissances particulières dans le domaine de la
police sanitaire applicable aux animaux de l'espèce concernée,ce qui implique qu'il doit:
— régulièrement actualiser ses connaissances, en particulier en
ce qui concerne la réglementation sanitaire applicable,
— remplir les conditions fixées par l'autorité compétente pour
garantir le bon fonctionnement du réseau,
— informer etaider le propriét aire ou la personne responsable
de l'exploitation afin que toutes les mesures soient prises
pour que le statut de l'exploitation soit maintenu, notamment
sur la base de programmes arrêtés de commun accord avecl'autorité compétente,
— veiller au respect des prescriptions relatives à:
i) l'identification et la certification sanitaire des animaux
du troupeau, des animaux introduits et de ceux qui sont
négociés;
ii) l'obligation de déclarer les maladies infectieuses et tout
autre facteur de risque pour la santé ou le bien-être des
animaux etpour la sant é humaine;
iii) l'établissement, dans la mesure du possible, de la cause
de mortalité des animaux et le lieu où ils doivent êtreexpédiés;
iv) les conditions d'hygiène du troupeau et des unités de
production animale.
Si le bon fonctionnement du système l'exige, chaque État
membre peut restreindre la responsabilité des vétérinaires à
un nombre limité d'exploitations ou à une aire géographique
donnée.
L'autorité compétente établit des listes de vétérinaires agréés
et des exploitations agréées participant au réseau. Si l'auto-rité compétente estime qu'un des participants au réseau ne
remplitplus les condit ions définies ci-dessus, elle suspend
ou retire l'agrément sans préjudice de toute autre sanctionéventuellement applicable.
C. La base de données informatisée doit contenir au moins les infor-
mations suivantes.
1) Pour chaque animal:
— le code d'identification,
— la date de naissance,
— le sexe,
— la race ou la robe,— le code d'identification de la mère ou, dans le cas d'un animal
importé d'un pays tiers, le numéro d'identification attribué
après contrôle conformément à la directive 92/102/CEE etqui sont en liaison avec le numéro d'identification d'origine,
— le numéro d'identification de l'exploitation de naissance,
— les numéros d'identification de toutes les exploitations où
l'animal a été détenu et les dates de chaque mouvement,
— la date du décès ou de l'abattage.
2) Pour chaque exploitation:
— un numéro d'identification consistant — outre le code du
pays — en un code n'excédantpas 12 caract ères,1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 17
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— le nom et l'adresse du détenteur.
3) La base de données devra permettre à tout moment de disposer
des informations suivantes:
— le numéro d'identification de tous les animaux de l'espèce
bovine présents dans une exploitation ou, dans le cas degroupes d'animaux de l'espèce porcine, le numéro d'enregis-
trement de l'exploitation d'origine ou du troupeau d'origine,
ainsi que le cas échéant le numéro du certificat sanitaire,
— une liste de tous les mouvements de chaque animal de
l'espèce bovine à partir de l'exploitation de naissance ou,pour les animaux importés de pays tiers, de l'exploitationd'importation et, pour les groupes d'animaux de l'espèceporcine, le numéro d'enregistrement de la dernière exploita-tion ou du dernier troupeau ainsi que, pour les animaux
importés de pays tiers, l'exploitation d'importation.
Ces informations seront conservées dans la base de données
jusqu'à ce que trois années consécutives se soient écoulées aprèsle décès de l'animal de l'espèce bovine ou après l'enregistrement,
dans le cas où il estprocédé à l'enregist rementdes animaux de
l'espèce porcine.
Toutefois, en ce qui concerne les animaux de l'espèce porcine,
seuls les points 2, 3 et 4 sont d'application.
4) Afin de garantir le caractère opérationnel des bases de données
informatisées nationales concernant les animaux de l'espèceporcine, les modalités d'application appropriées, y compris lesinformations que les bases de données nationales doiventcontenir, sont arrêtées selon la procédure prévue à l'article 17.
4. Tous les participants au réseau autres que ceux visés au para-
graphe 3 rubriques A et B opèrent sous la responsabilité de l'autorité
compétente. L'autorité compétente de chaque État membre est respon-
sable de la mise en place du réseau et, en vue de son bonfonctionnement, elle procède à des contrôles réguliers du réseau.
5. Les États membres qui mettent en place un système de réseaux de
surveillance comme défini aux paragraphes 1 à 4, opérationnel pendantune période d'au moins douze mois, demandentà la Commission del'approuver selon la procédure prévue à l'article 17.
À cet effet, la Commission examine la documentation présentée par les
États membres.
Les experts de la Commission valident les systèmes de réseaux à l'aide
d'un système d'audits.
Si les résultats de ces audits sont favorables, la Commission, dans un
délai de 90 jours à partir de la réception de la demande d'approbation,transmet au comité vétérinaire permanent un rapport accompagné despropositions appropriées.
En cas de constat d'infractions répétées, l'agrément du système de
réseau de surveillance peutêt re suspendu selon la procédure prévue à
l'article 17 sur demande de la Commission ou de un ou plusieurs États
membres.
6. Les États membres qui ont mis en place sur tout leur territoire un
système de réseaux de surveillance reconnu, tel que prévu au présentarticle, sont autorisés à ne pas appliquer l'article 3 paragraphe 2 pointa) deuxième tiret aux mouvements des animaux visés par la présente
directive à l'intérieur de leur territoire.
7. Le 31 décembre 1999 au plus tard, le Conseil réexamine, sur la
base d'un rapportde la Commission accompagné de proposit ions surlesquelles il statue à la majorité qualifiée, les dispositions du présentarticle à la lumière de l'expérience acquise en vue de les modifier, deles actualiser et, le cas échéant, de les étendre à tous les Étatsmembres.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 18
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8. Le financementdu syst ème de réseaux de surveillance sera
abordé dans le cadre de la révision de l'annexe B de la directive 85/73/CEE (
1), conformément aux dispositions prévues à l'article 8 de la
directive 96/43/CE.
Article 15
1. Les États membres arrêtent les mesures spécifiques appropriées
pour sanctionner toute infraction à la présente directive, qu'elle soit lefaitd'une personne physique ou d'une personne morale.
2. S'il est confirmé que les dispositions de la présente directive ne
sont pas ou n'ont pas été respectées, l'autorité compétente du lieu oùce constat est effectué doit prendre les mesures appropriées tant poursauvegarder la santé des animaux que pour prévenir toute diffusion de
maladie.
Selon le cas, cette mesure de l'autorité compétente peut consister à
prendre les dispositions voulues pour:
a) terminer le voyage ou renvoyer les animaux à leur lieu de départ par
l'itinéraire le plus direct, pour autant que cette mesure ne risque pasde mettre en danger la santé ou le bien-être des animaux;
b) héberger convenablementles animaux etleur donner les soins
nécessaires, en cas d'interruption du voyage;
c) faire abattre les animaux. La destination et l'utilisation de ces
animaux après abattage sont réglées:
— selon les dispositions prévues par la directive 64/433/CEE (
2),
— selon les dispositions prévues par la directive 90/667/CEE
lorsque le statut sanitaire des animaux ne peut pas être établi
ou lorsqu'ils sont susceptibles de présenter un risque en matièrede santé animale ou de santé publique. Toutefois, dans le cas oùil convient d'appliquer les dispositions prévues par la directive90/667/CEE, un délai de régularisation doit être accordé au
propriétaire ou à son mandataire avant de recourir à cette
dernière possibilité. Dans ce cas, les dispositions du paragraphe3 du présent article sont d'application.
3. L'autorité compétente de l'État membre de destination avertit
immédiatement l'autorité compétente de l'État membre d'origine à lasuite du constat de toute infraction à la présente directive.
Les États membres, conformément aux dispositions établies par la
directive 89/608/CEE, s'accordent mutuellement assistance par l'appli-
cation de la présente directive, et plus particulièrement en vue
d'assurer le respect des dispositions prévues au présent article.
4. Le présent article n'affecte pas les règles nationales applicables en
matière de sanctions pénales.
Article 16
1. Les annexes A etD chapit re I ainsi que les annexes E etF sont
modifiées par le Conseil statuant à la majorité qualifiée sur propositionde la Commission, en vue notamment de leur adaptation à l'évolutiontechnologique et scientifique.
Les annexes B, C etD chapit re II sontmodifiées par la Commission
selon la procédure prévue à l'article 17.
Toutefois:
a) avantle 1
erjuillet1997, la Commission soumetau Conseil une
proposition de modification des annexes A et D chapitre I en vuede leur mise à jour et, si nécessaire, elle appliquera la même procé-1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 19
(1)J O noL 32 du 5. 2. 1985, p. 14. Directive modifiée en dernier lieu par la
directive 96/43/CE (JO noL 162 du 1. 7. 1996, p. 1).
(2)J O no121 du 29. 7. 1964, p. 2012/64. Directive modifiée en dernier lieu par
la directive 95/23/CE (JO noL 243 du 11. 10. 1995, p. 7).
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dure à l'annexe F. Le Conseil se prononce à la majorité qualifiée sur
ces propositions avant le 1erjanvier 1998;
b) avantle 30 juin 1998, la Commission, selon la procédure prévue à
l'article 17 et sur la base de l'avis du comité scientifique vétérinaire,metà jour etmodifie si nécessaire les annexes B, C etD chapit re II,de manière à les adapter à l'évolution scientifique.
2. Au plus tard le 31 décembre 1999, le Conseil réexamine, sur la
base d'un rapportde la Commission accompagné des proposit ionsappropriées sur lesquelles il statue à la majorité qualifiée, les disposi-tions de la présente directive à la lumière de l'expérience acquise envue de les modifier etde les act ualiser afin de se conformer aux règles
prévues pour la réalisation du marché intérieur.
3. Lorsque cela se révèle nécessaire pour faciliter le passage aux
nouveaux arrangements prévus par la présente directive, la Commission
peut adopter, conformément à la procédure prévue à l'article 17 bis, des
mesures transitoires applicables pour une période ne dépassant pasdeux ans.
Article 17
1. La Commission est assistée par le comité vétérinaire permanent
institué par la décision 68/361/CEE (ci-après dénommé «comité»).
2. Dans le cas où il estfaitréférence au présentparagraphe, les art i-
cles 5 et7 de la décision 1999/468/CE s'appliquent .
La période prévue à l'article 5, paragraphe 6, de la décision 1999/468/
CE estfixée à t rois mois.
3. Le comité adopte son règlement intérieur.
Article 17 bis
1. La Commission est assistée par le comité vétérinaire permanent
institué par la décision 68/361/CEE (ci-après dénommé «comité»).
2. Dans le cas où il estfaitréférence au présentparagraphe, les art i-
cles 5 et7 de la décision 1999/468/CE s'appliquent , dans le respectdes
dispositions de l'article 8 de celle-ci.
La période prévue à l'article 5, paragraphe 6, de la décision 1999/468/
CE estfixée à t rois mois.
3. Le comité adopte son règlement intérieur.
Article 18
Les États membres qui n'ont pas instauré un système de réseaux de
surveillance agréé veillentà ce qu'une base de données informat iséeconforme aux dispositions prévues à l'article 14 soit pleinement opéra-
tionnelle, comme suit:
a) pour les animaux de l'espèce bovine, à compter du 31 décembre
1999;
b) pour le registre des exploitations d'animaux de l'espèce porcine
conforme aux dispositions de l'article 14, paragraphe 3, rubrique C,point2, à compt er du 31 décembre 2000;
c) pour les mouvements d'animaux de l'espèce porcine conformes aux
dispositions de l'article 14, paragraphe 3, rubrique C, point 3:
— à partir de l'exploitation de naissance, au plus tard le 31
décembre 2001,
— à partir de toutes les autres exploitations, au plus tard le 31
décembre 2002.
Chaque mouvementd'animaux de l'espèce porcine sera enregist ré dans
la base de données. L'enregistrement comprendra au minimum lenombre d'animaux déplacés, le numéro d'identification de l'exploitation1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 20
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ou du troupeau de départ, le numéro d'identification de l'exploitation ou
du troupeau d'arrivée, la date de départ et la date d'arrivée.
Article 19
Les règles prévues par la directive 90/425/CEE sont applicables notam-
ment en ce qui concerne les contrôles à l'origine, l'organisation et les
suites à donner aux contrôles à effectuer par le pays destinataire, etles mesures de sauvegarde à mettre en œuvre.
Article 20
Les États membres sont destinataires de la présente directive.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 21
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ANNEXE A
I.Troupeau bovin officiellement indemne de tuberculose
Aux fins de la présente section I, on entend par «bovins»: tous les animaux
bovins, à l'exception des animaux participant à des manifestations culturelles
ou sportives.
1. Un troupeau bovin est officiellement indemne de tuberculose si:
a) tous les animaux sont exempts de manifestations cliniques de tuber-
culose;
b) tous les bovins âgés de plus de six semaines ont présenté une réac-
tion négative à au moins deux intradermo-tuberculinations officielles
pratiquées selon les dispositions de l'annexe B, la première six mois
après la fin des opérations d'assainissement du troupeau et la
seconde six mois après la première, ou, si le troupeau se compose
uniquementd'animaux originaires de t roupeaux officiellement
indemnes de tuberculose, la première est pratiquée au moins soixante
jours après le regroupementetla seconde n'estpas nécessaire;
c) à la suite du premier test visé au point b), aucun bovin âgé de plus
de six semaines n'a été introduit dans le troupeau s'il n'a pas présenté
de réaction négative à une intradermo-tuberculination effectuée et
analysée selon les dispositions de l'annexe B et pratiquée dans les
trente jours précédant ou dans les trente jours suivant la date de son
introduction dans le troupeau; dans ce dernier cas, l'animal (les
animaux) doit (doivent) être isolé(s) physiquement des autres
animaux du troupeau de manière à éviter tout contact direct ou indi-
rect avec les autres animaux jusqu'à ce que la preuve d'une réaction
négative soit apportée.
Toutefois, pour les mouvements d'animaux sur son territoire, l'auto-
rité compétente peut ne pas exiger ce test pour les animaux
provenant d'un troupeau officiellement indemne de tuberculose, sauf
s'il s'agit d'un État membre dans lequel l'autorité compétente exige
ce test à la date du 1erjanvier 1998 — et ce, jusqu'à l'obtention du
statut de région officiellement indemne de tuberculose — pour les
animaux faisant l'objet d'échanges entre troupeaux participant à un
réseau au sens de l'article 14.
2. Un troupeau bovin conserve son statut de troupeau officiellement
indemne de tuberculose si:
a) les conditions exposées au points 1 a) et 1 c) continuent de s'appli-
quer;
b) tous les animaux introduits dans l'exploitation proviennent de trou-
peaux ayant le statut de troupeau officiellement indemne de
tuberculose;
c) tous les animaux de l'exploitation, à l'exception des veaux âgés de
moins de six semaines et nés dans cette exploitation, sont soumis à
une tuberculination de routine conformément aux dispositions de
l'annexe B à un rythme annuel.
Toutefois, l'autorité compétente d'un État membre peut, pour l'État
membre ou la partie de l'État membre où la totalité des troupeaux
bovins est soumise à un programme officiel de lutte contre la tuber-
culose, modifier comme suit la fréquence des tests de routine:
— si la moyenne — déterminée le 31 décembre de chaque année —
des pourcentages annuels des troupeaux bovins dont il est
confirmé qu'ils ont été infectés de tuberculose n'est pas supé-
rieure à 1 % de la totalité des troupeaux de la zone déterminée
au cours des deux plus récentes périodes de contrôle se succédant
à un rythme annuel, l'intervalle entre les tests de routine prati-
qués sur les troupeaux peut être porté à deux ans et les mâlesdestinés à l'engraissement au sein d'une unité épidémiologique
isolée peuvent être dispensés des tests tuberculiniques pour
autant qu'ils proviennent d'un troupeau officiellement indemne
de tuberculose et que l'autorité compétente garantisse que les
mâles destinés à l'engraissement ne seront pas utilisés pour l'éle-
vage et seront directement acheminés à l'abattage,
— si la moyenne — déterminée le 31 décembre de chaque année —
des pourcentages annuels des troupeaux bovins dont il est
confirmé qu'ils ont été infectés de tuberculose n'est pas supé-
rieure à 0,2 % de la totalité des troupeaux de la zone
déterminée au cours des deux plus récentes périodes de contrôle
se succédant à deux ans d'intervalle, l'intervalle entre les tests de1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 22
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routine et/ou l'âge auquel les animaux devont être soumis à ces
tests peut être porté à vingt-quatre mois,
— si la moyenne — déterminée à la date du 31 décembre de chaque
année — des pourcentages annuels des troupeaux bovins dont il
est confirmé qu'ils ont été infectés de tuberculose n'est pas supé-
rieure à 0,1 % de la totalité de la zone déterminée au cours des
deux plus récentes périodes de contrôle se succédant à trois ans
d'intervalle, l'intervalle entre les tests de routine peut être porté à
quatre ans ou, pour autant que les conditions suivantes soient
remplies, l'autorité compétente peut dispenser de l'obligation de
soumettre les troupeaux à une tuberculination, à condition que:
1) avant d'être introduits dans un troupeau, tous les bovins subi-
ssent avec résultat négatif une intradermo-tuberculination
ou
2) tous les bovins abattus fassent l'objet d'une recherche des
lésions de tuberculose et que celles-ci soient soumises à un
examen histopathologique et bactériologique pour la mise en
évidence de la tuberculose.
L'autorité compétente peut également augmenter la fréquence des
tests tuberculiniques en ce qui concerne l'État membre ou la partie
de l'État membre concerné(e) si l'ampleur de la maladie a augmenté.
3A. Le statut de troupeau officiellement indemne de tuberculose est
suspendue si:
a) les conditions exposées au point 2 ne sont plus remplies
ou
b) un animal, voire plusieurs, estou sontconsidéré(s) avoir présent é
une réaction positive à une tuberculination, ou si un cas suspect de
tuberculose a été constaté lors de l'inspection post mortem .
Lorsqu'on estime qu'un animal réagit de manière positive, il est
éliminé du troupeau et abattu. Des tests post mortem ainsi que des
analyses de laboratoire et des analyses épidémiologiques appropriés
sont effectués sur l'animal présentant une réaction positive ou sur la
carcasse de l'animal suspect. Le statut du troupeau demeure
suspendu jusqu'à ce que tous les examens de laboratoire soient
terminés. Si la présence de tuberculose n'est pas confirmée, la
suppression du statut de troupeau officiellement indemne de tubercu-
lose peut être levée à la suite d'un test pratiqué sur tous les animaux
âgés de plus de six semaines et ayant donné des résultats négatifs au
moins quarante-deux jours après l'élimination de l'animal ayant
présenté une réaction positive
ou
c) le troupeau comprend des animaux dont le statut est indéterminé, tel
que décrit à l'annexe B. Dans ce cas, le statut du troupeau reste
suspendu jusqu'à ce que le statut des animaux soit clarifié. Ces
animaux doivent être isolés des autres animaux du troupeau jusqu'à
ce que leur statut soit clarifié, soit par un nouveau test quarante-deux
jours plus tard, soit par des tests post mortem etdes analyses de
laboratoire;
d) toutefois, par dérogation aux exigences prévues au point c), dans un
État membre où l'autorité compétente pratique des tests de routine
sur les troupeaux au moyen de la tuberculination de comparaison
décrite à l'annexe B, et dans le cas d'un troupeau dans lequel aucunanimal présentant une réaction confirmée n'a été signalé pendant au
moins trois ans, l'autorité compétente peut décider de ne pas limiter
les mouvements des autres animaux du troupeau, à condition que le
statut de tout animal présentant une réaction douteuse soit déterminé
par un nouveau test quarante-deux jours plus tard et qu'aucun mal de
l'exploitation ne puisse participer aux échanges intracommunautaires
tant que le statut de tout animal présentant une réaction douteuse n'a
pas été déterminé. Si, lors du nouveau test, un animal présente une
réaction positive ou continue de présenter une réaction douteuse, les
conditions du point b) s'appliquent. Si la présence de la maladie est
confirmée par la suite, tous les animaux quittant l'exploitation à
partir du moment où le dernier test pratiqué sur le troupeau a été
satisfaisant doivent être localisés et faire l'objet d'un test.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 23
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3B. Le statut de troupeau officiellement indemne de tuberculose est retiré si
la présence de la tuberculose est confirmée par l'isolement de M bovis
lors d'examens en laboratoire.
L'autorité compétente peut retirer ce statut si:
a) les conditions exposées au point 2 ne sont plus remplies
ou
b) des lésions caractéristiques de la tuberculose sont constatées lors des
examens post mortem
ou
c) une enquête épidémiologique conclut à la probabilité d'une infection
ou
d) pour toute autre raison jugée nécessaire pour les besoins du contrôle
de la tuberculose bovine.
La localisation et le contrôle de tout troupeau considéré comme étant
affecté par la tuberculose sont effectués par l'autorité compétente. Le
statut de troupeau officiellement indemne de tuberculose reste suspendu
jusqu'à ce que le nettoyage et la désinfection des locaux et des outils
aient été effectués et jusqu'à ce que tous les animaux âgés de plus de
six semaines aient présenté une réaction négative à au moins deux
tuberculinations consécutives, la première ayant lieu soixante jours au
moins etla seconde quat re mois au moins etdouze mois au plus après
l'élimination du dernier animal ayant présenté une réaction positive.
4. Sur la base des informations fournies conformément à l'article 8, un État
membre ou une partie du territoire d'un État membre peuvent être
déclarés officiellementindemnes de t uberculose conformémentà la
procédure prévue à l'article 17 s'ils remplissent les conditions suivantes:
a) le pourcentage des troupeaux bovins dont il est confirmé qu'ils ont
été infectés de tuberculose n'a pas été supérieur à 0,1 % par an
pendant six années consécutives et au moins 99,9 % des troupeaux
ont été déclarés officiellement indemnes de tuberculose chaque
année au cours des six dernières années, le calcul de ce dernier pour-
centage devant être effectué le 31 décembre de chaque année;
b) chaque bovin est identifié conformément à la législation communau-
taire;
c) tous les bovins abattus sont soumis à une inspection post mortem
officielle;
d) les procédures de suspension et de retrait du statut de troupeau offi-
ciellement indemne de tuberculose sont respectées.
5. L'État membre ou la partie du territoire de l'État membre conservent
leur statut de zones officiellement indemnes de tuberculose si les condi-
tions fixées aux points 4 a) à d) continuent à être remplies. Toutefois,
s'il est avéré qu'un changement important est intervenu dans la situation
en matière de tuberculose dans un État membre ou dans une partie du
territoire d'un État membre ayant été reconnus officiellement indemnes
de tuberculose, la Commission peut, conformément à la procédure
prévue à l'article 17, décider de suspendre ou de révoquer le statut
jusqu'à ce que les conditions fixées par la décision soient remplies.
II.Troupeau bovin indemne de brucellose et officiellement indemne de
brucellose
Aux fins de la présente section, on n'entend par «bovins»: tous les animaux
bovins, à l'exception des mâles destinés à l'engraissement pour autant qu'ils
proviennent d'un troupeau officiellement indemne de brucellose et que l'auto-
rité compétente garantisse que les mâles destinés à l'engraissement ne seront
pas utilisés pour l'élevage et seront directement acheminés à l'abattage.
1. Un troupeau bovin est officiellement indemne de brucellose:
a) s'il ne comprend aucun bovin vacciné contre la brucellose, à moins
qu'il ne s'agisse de femelles ayantét é vaccinées depuis au moins
trois ans;
b) si tous les bovins sont exempts de signes cliniques de brucellose
depuis au moins six mois;1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 24
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c) si tous les bovins âgés de plus de douze mois ont été soumis à l'une
des séries de tests suivantes, avec résultat négatif conformément aux
dispositions de l'annexe C:
i) deux épreuves sérologiques, telles que décrites au point 10, prati-
quées à des intervalles de trois mois au moins et de douze mois
au plus;
ii) trois épreuves sur échantillons de lait à des intervalles de trois
mois suivies d'une épreuve sérologique telle que décrite au point
10, pratiquée au moins six semaines plus tard;
d) si tout bovin introduit dans le troupeau provient d'un troupeau ayant
le statut de troupeau officiellement indemne de brucellose et, dans le
cas de bovins âgés de plus de douze mois, s'il a présenté un titre
brucellique inférieur à 30 unités internationales (UI) agglutinantes
par millilitre lors d'une épreuve de séro-agglutination pratiquée selon
les dispositions de l'annexe C ou s'il a présenté une réaction négative
lors de tout autre test approuvé selon la procédure prévue à l'article
17, dans les trente jours ayant précédé ou suivi la date de son intro-
duction dans le troupeau; dans ce dernier cas, l'animal (les animaux)
doit (doivent) être isolé(s) physiquement des autres animaux du trou-
peau de manière à éviter un contact direct avec les autres animaux
jusqu'à ce que la preuve d'une réaction négative soit apportée.
2. Un troupeau bovin conserve son statut de troupeau officiellement
indemne de brucellose si:
a) l'une des séries d'épreuves suivantes est effectuée chaque année avec
des résultats négatifs conformément aux dispositions de l'annexe C:
i) trois épreuves de l'anneau sur le lait pratiquées à des intervalles
d'au moins trois mois;
ii) trois épreuves ELISA sur le fait effectuées à des intervalles d'au
moins trois mois;
iii) deux épreuves de l'anneau sur le lait effectuées à un intervalle
d'au moins trois mois suivies d'une épreuve sérologique visée
au point 10 pratiquée au moins six semaines plus tard;
iv) deux épreuves ELISA sur le lait effectuées à un intervalle d'au
moins trois mois suivies d'une épreuve sérologique visée au
point 10 pratiquée au moins six semaines plus tard;
v) deux épreuves sérologiques effectuées à un intervalle de trois
mois au moins etde douze mois au plus.
Toutefois, l'autorité compétente d'un État membre peut, pour l'État
membre ou la partie du territoire de l'État membre qui n'est pas offi-
ciellement indemne de brucellose, mais dont tous les troupeaux
bovins sont soumis à un programme officiel de lutte contre la brucel-
lose, modifier comme suit la fréquence des contrôles de routine:
— lorsque le pourcentage des troupeaux bovins infectés n'est pas su-
périeur à 1 %, il suffitde procéder annuellementà deux épreuves
de l'anneau sur le laitou à deux épreuves ELISA sur le laità un
intervalle d'au moins trois mois, ou à une épreuve sérologique,
— lorsque au moins 99,8 % des troupeaux bovins sont reconnus
officiellementindemnes de brucellose depuis quat re ans au
minimum, l'intervalle entre les contrôles peut être porté à deux
ans si tous les animaux âgés de plus de douze mois font l'objet
de tests, ou ceux-ci peuvent être limités aux animaux âgés de
plus de vingt-quatre mois si les troupeaux continuent de faire
l'objet de tests chaque année. Les contrôles doivent être effectués
à l'aide de l'une des épreuves sérologiques décrites au point 10;
b) tous les bovins introduits dans le troupeau proviennent de troupeaux
officiellementindemnes de brucellose et , dans le cas de bovins âgés
de plus de douze mois, s'ils ont présenté un titre brucellique inférieur
à 30 UI agglutinantes par millilitre lors d'une épreuve de séro-agglu-
tination pratiquée selon les dispositions de l'annexe C ou s'ils ont
présenté une réaction négative lors de tout autre test approuvé selon
la procédure prévue à l'article 17 dans les trente jours ayant précédé
ou suivi l'introduction dans le troupeau; dans ce dernier cas, l'animal
(les animaux) doit (doivent) être isolé(s) physiquement des autres
animaux du troupeau de manière à éviter un contact direct ou indi-
rect avec les autres animaux jusqu'à ce que la preuve d'une réactionnégative soit apportée.
Toutefois, le test visé au point b) peut ne pas être exigé dans les
États membres ou les régions des États membres où, depuis deux
ans au moins, le pourcentage de troupeaux bovins infectés de brucel-
lose n'estpas supérieur à 0,2 % etsi l'animal provientd'un t roupeau
bovin officiellement indemne de brucellose situé dans cet État1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 25
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membre ou dans cette région et n'est pas entré en contact avec des
bovins de statut inférieur à l'occasion de son transport;
c) par dérogation au point b), les bovins provenant d'un troupeau bovin
indemne de brucellose peuvent être introduits dans un troupeau offi-
ciellementindemne de brucellose s'ils sontâgés d'au moins dix-huit
mois et vaccinés contre la brucellose, le vaccin ayant été pratiqué
plus d'un an auparavant.
Ces animaux doivent avoir présenté, dans les trente jours précédant
l'introduction, un titre brucellique inférieur à 30 UI agglutinantes par
millilitre et un résultat négatif au test de fixation du complément ou
à un autre test approuvé selon la procédure prévue à l'article 17.
Si, toutefois, conformément aux dispositions de l'alinéa précédent,
une femelle bovine provenantd'un t roupeau indemne de brucellose
est introduite dans un troupeau officiellement indemne de brucellose,
ce dernier estconsidéré comme indemne de brucellose pendantdeux
ans à partir de la date d'introduction du dernier animal vacciné.
3A. Le statut de troupeau officiellement indemne de brucellose est suspendu
si:
a) les conditions exposées aux points 1 et 2 ne sont plus remplies
ou
b) sur la base de résultats de tests effectués en laboratoire ou pour des
raisons cliniques, on suspecte la présence de brucellose chez un ou
plusieurs bovins et si les animaux suspects ont été abattus ou isolés
de manière à éviter tout contact direct ou indirect avec les autres
animaux.
Lorsque les animaux ont été abattus et ne peuvent donc plus être soumis
à des tests, la suspension peut être levée si deux séro-agglutinations
effectuées conformément aux dispositions de l'annexe C sur tous les
bovins du troupeau âgés du plus de douze mois donnent un titre infé-
rieur à 30 UI agglutinantes par millilitre. Le premier test est effectué
au moins trente jours après l'élimination de l'animal et le second au
moins soixante jours plus tard.
Lorsque l'animal a été isolé des autres animaux du troupeau, il peut être
réintroduit dans le troupeau et le statut de celui-ci peut être rétabli à la
suite:
a) d'une épreuve de séro-agglutination qui a donné un titre inférieur à
30 UI agglutinantes par millilitre et si un test de fixation du complé-
ment donne un résultat négatif
ou
b) de toute autre combinaison de tests approuvée selon la procédure
prévue à l'article 17, qui a donné un résultat négatif.
3B. Le statut de troupeau officiellement indemne de brucellose est retiré si
les résultats de tests effectués en laboratoire ou d'analyses épidémiologi-
ques ontconfirmé la présence d'une infect ion brucellique dans le
troupeau.
Le statut de ce troupeau ne peut être rétabli avant que soit tous les
bovins présents dans le troupeau au moment de la première manifesta-
tion de la maladie aient été abattus, soit tout le troupeau ait été soumis à
un test de contrôle et tous les animaux âgés de plus de douze mois aient
présenté un résultat négatif à deux tests consécutifs effectués à des
intervalles de soixante jours, le premier intervenant trente jours au
moins après l'élimination de l'animal (des animaux) ayant présenté uné
réaction positive.
Dans le cas de femelles bovines gravides au momentde la première
manifestation de la maladie, le dernier test doit être effectué au moins
vingtetun jours après que le dernier animal gravide au momentde la
première manifestation de la maladie a mis bas.
4. Un troupeau bovin est indemne de brucellose s'il remplit les conditions
fixées aux points 1 b) et 1 c), lorsqu'une vaccination a été effectuée, si:
i) les femelles bovines ontét é vaccinées:
— avantl'âge de six mois à l'aide du vaccin vivantbuck 19
ou
— avantl'âge de quinze mois à l'aide du vaccin t ué adjuvé 45/20
contrôlé et approuvé
ou1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 26
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— avec d'autres vaccins agréés selon la procédure prévue à l'article
17;
ii) les bovins âgés de moins de trente mois qui ont été vaccinés à l'aide
du vaccin vivant buck 19 peuvent présenter un titre brucellique su-
périeur à 30 UI, mais inférieur à 80 UI agglutinantes par millilitre,
pour autant qu'ils présentent, lors de la réaction de fixation du
complément, un titre inférieur à 30 unités CEE s'il s'agit de femelles
vaccinées depuis moins de douze mois ou un titre inférieur à 20
unités CEE dans tous les autres cas.
5. Un troupeau bovin conserve le statut de troupeau indemne de brucel-
lose:
i) s'il estsoumis à l'une des séries d'épreuves énumérées au point2 a);
ii) si les bovins introduits dans le troupeau satisfont aux exigences
prévues au point2 b) ou:
— proviennent de troupeaux ayant le statut de troupeaux indemnes
de brucellose et, lorsqu'il s'agit de bovins âgés de plus de douze
mois, ont présenté dans les trente jours avant l'introduction dans
le troupeau ou placés en isolement après l'introduction un titre
inférieur à 30 Ul agglutinantes par millilitre lors d'une épreuve
de séro-agglutination et une réaction de fixation du complément
négative conformément aux dispositions de l'annexe C
ou
— proviennent de troupeaux ayant le statut de troupeaux indemnes
de brucellose, sont âgés de moins de trente mois et ont été
vaccinés à l'aide du vaccin vivant buck 19 s'ils présentent un titre
brucellique supérieur à 30 Ul, mais inférieur à 80 Ul aggluti-
nantes par millilitre, pour autant qu'ils présentent, lors de la
réaction de la fixation du complément, un titre inférieur à 30
unités CEE s'il s'agit de femelles vaccinées depuis moins de
douze mois ou un titre inférieur à 20 unités CEE dans tous les
autres cas.
6A. Le statut de troupeau indemne de brucellose est suspendu si:
a) les conditions exposées aux points 4 et 5 n'ont pas été remplies
ou
b) sur la base des résultats de tests effectués en laboratoire ou pour des
raisons cliniques, on suspecte la présence de brucellose chez un ou
plusieurs bovins âgés de plus de trente mois et l'animal (les
animaux) suspect(s) a (ont) été abattu(s) ou isolé(s) de manière à
éviter tout contact direct ou indirect avec les autres animaux.
Lorsque l'animal a été isolé, il peut être réintroduit dans le troupeau et
le statut de celui-ci peut être rétabli si, par la suite, une épreuve de séro-
agglutination donne un titre inférieur à 30 Ul agglutinantes par millilitre
et si un test de fixation du complément, ou tout autre test approuvé
selon la procédure prévue à l'article 17, donne un résultat négatif.
Lorsque les animaux ont été abattus et ne peuvent donc plus être soumis
à des tests, la suspension peut être levée si deux séro-agglutinations,
effectuées conformément aux dispositions de l'annexe C sur tous les
bovins de l'exploitation âgés de plus de douze mois, donnent un titre
inférieur à 30 Ul agglutinantes par millilitre. Le premier test est effectué
au moins trente jours après l'élimination de l'animal, et le second test au
moins soixante jours plus tard.
Si les animaux à tester visés aux deux alinéas précédents sont âgés de
moins de trente mois et ont été vaccinés à l'aide d'un vaccin vivant buck
19, ils peuvent être considérés comme négatifs si le résultat d'une
épreuve de séro-agglutination est supérieur à 30 Ul, mais inférieur à
80 Ul agglutinantes par millilitre, pour autant qu'ils présentent, lors de
la fixation du complément, un résultat inférieur à 30 unités CEE s'il
s'agitde femelles vaccinées depuis moins de douze mois ou inférieur à
20 unités CEE dans tous les autres cas.
6B. Le statut de troupeau indemne de brucellose est retiré si les résultats de
tests effectués en laboratoire ou d'analyses épidémiologiques ont
confirmé la présence d'une infection brucellique dans le troupeau. Le
statut de ce troupeau ne peut être rétabli avant que soit tous les bovins
présents dans le troupeau au moment de la première manifestation de la
maladie aient été abattus, soit tout le troupeau ait été soumis à un test
de contrôle et tous les animaux non vaccinés âgés de plus de douze
mois aient présenté un résultat négatif à deux tests consécutifs effectués
à soixante jours d'intervalle, le premier intervenant trente jours au moins
après l'élimination de l'animal (des animaux) ayant présenté une réac-
tion positive.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 27
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Si tous les animaux à tester visées à l'alinéa précédent sont âgés de
moins de trente mois et ont été vaccinés à l'aide d'un vaccin vivant
buck 19, ils peuvent être considérés comme négatifs s'ils présentent un
titre brucellique supérieur à 30 Ul, mais inférieur à 80 Ul agglutinantes
par millilitre, pour autant qu'ils présentent, lors de la fixation du
complément, un titre inférieur à 30 unités CEE s'il s'agit de femelles
vaccinées depuis moins de douze mois ou un titre inférieur à 20 unités
CEE dans tous les autres cas.
Dans le cas de femelles bovines gravides au momentde la première
manifestation de la maladie, le dernier test doit être effectué au moins
vingtetun jours après que le dernier animal gravide au momentde la
première manifestation de la maladie a mis bas.
7. Un État membre ou une région d'un État membre peuvent être déclarés
officiellementindemnes de brucellose conformémentà la procédure
prévue à l'article 17 si les conditions suivantes sont remplies:
a) aucun cas d'avortement dû à une infection brucellique ni aucune
isolation de B. abortus n'ont été enregistrés depuis au moins trois
ans et au moins 99,8 % des troupeaux ont obtenu le statut d'officiel-
lementindemnes de brucellose chaque année au cours des cinq
dernières années, le calcul de ce pourcentage devant être effectué le
31 décembre de chaque année. Toutefois, lorsque l'autorité compé-
tente adopte une politique d'abattage de l'ensemble du troupeau, elle
pourra ne pas tenir compte, lors de ce calcul, des incidents isolés
décelés lors d'une enquête épidémiologique et qui seraient dus à
l'introduction d'animaux provenant de l'extérieur de l'État membre
ou d'une partie de l'État membre et de cheptels d'une partie de cet
État membre dont le statut a été retiré ou suspendu pour des raisons
autres que la suspicion de brucellose, pour autant que l'autorité
centrale compétente de l'État membre concerné par ces incidents
procède à leur recensementannuel pour les communiquer à la
Commission, conformémentà l'art icle 8, paragraphe 2
et
b) chaque bovin est identifié conformément à la législation communau-
taire
et
c) la notification des cas d'avortement est obligatoire et ces derniers
font l'objet d'une enquête par l'autorité compétente.
8. Sous réserve du point 9, un État membre ou une région d'un État
membre déclarés officiellementindemnes de brucellose conserventce
statut si:
a) les conditions fixées aux points 7 a) et 7 b) continuent à être
remplies et que la notification de cas d'avortement suspectés d'être
dus à la brucellose estobligat oire etque ces derniers fontl'objet
d'une enquête par l'autorité compétente;
b) chaque année, au cours des cinq premières années qui suivent
l'obtention du statut, tous les bovins âgés de plus de vingt-quatre
mois, dans 20 % au moins des troupeaux, ont fait l'objet de tests et
ont présenté une réaction négative lors d'une épreuve sérologique
effectuée conformément à l'annexe C, ou, dans le cas des troupeaux
laitiers, par un examen d'échantillons de lait conformément à
l'annexe C;
c) tout bovin dont on suspecte qu'il est infecté de brucellose est signalé
à l'autorité compétente et soumis à une enquête épidémiologique
officielle ayant pour objet de détecter la brucellose comprenant au
moins deux épreuves sérologiques sur le sang, parmi lesquelles
l'épreuve de fixation du complément, ainsi qu'une analyse microbio-
logique d'échantillons appropriés;
d) pendant la période suspecte, qui se prolonge jusqu'à ce que les tests
prévus au point c) aient donné des résultats négatifs, le statut de
troupeau officiellement indemne de brucellose du troupeau d'origine
ou de transit du bovin suspect et des troupeaux présentant avec lui
un lien épidémiologique estsuspendu;
e) dans le cas d'un foyer de brucellose évolutive, tous les bovins ont été
abattus. Les animaux des espèces sensibles restants seront soumis
aux tests appropriés; les locaux et le matériel seront nettoyés et
désinfectés.
9. Un État membre ou une région d'un État membre déclaré(e) officielle-
mentindemne de brucellose signale à la Commission t ous les cas de1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 28
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brucellose qu'elle enregistre. S'il est avéré qu'un changement important
est intervenu dans la situation concernant la brucellose dans un État
membre ou dans une partie d'un État membre ayant été reconnu(e) offi-
ciellementindemne de brucellose, la Commission peut , conformémentà
la procédure prévue à l'article 17, proposer que le statut soit suspendu
ou révoqué, jusqu'à ce que les conditions fixées par la décision aient
été remplies.
10. Aux fins de la présente section II, on entend par «épreuve sérologique»:
une épreuve de séro-agglutination, une épreuve à l'antigène brucellique
tamponné, une épreuve de fixation du complément, une épreuve de
plasmo-agglutination, une épreuve de l'anneau sur plasma, une épreuve
de micro-agglutination ou une épreuve ELISA individuelle sur le sang,
telles que décrites à l'annexe C. Tout autre test diagnostique approuvé
selon la proécédure prévue à l'article 17 et décrit à l'annexe C sera
également accepté aux fins de la présente section II. On entend par
«épreuve sur le lait»: une épreuve de l'anneau sur le lait ou une épreuve
ELISA sur le faitconformémentà l'annexe C.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 29
▼M49
ANNEXE B
TUBERCULOSE
1. IDENTIFICATION DE L'AGENT
La présence du Mycobacterium bovis (M.bovis ), agentde la t ubercu-
lose bovine, sur des échantillons cliniques et post mortem peut être
établie par l'examen de frottis colorés ou de techniques d'immunope-
roxydase etconfirmée par cult ure de l'organisme sur un milieu
d'isolementprimaire.
Le tissu pathologique pour la confirmation de la présence du M. bovis
doitêt re prélevé sur des ganglions anormaux etdes organes parenchy-
mateux tels que les poumons, le foie, la rate, etc. Dans les cas où
l'animal ne présente pas de lésions pathologiques, des échantillons
devront être prélevés sur les ganglions rétropharyngiens, les ganglions
pulmonaires, les ganglions médiastinaux, les ganglions lymphatiques
supramammaires, les ganglions maxillaires etcert ains ganglions
mésantériques et hépatiques, pour procéder à leur examen et à leur
culture.
L'identification d'isolats peut habituellement se faire en déterminant
les propriétés biochimiques et les spécificités de culture. La réaction
en chaîne à la polymérase (PCR) peut aussi être utilisée pour détecter
le complexe de tuberculose M. tuberculosis . Les techniques d'analyse
de l'ADN peuventse révéler plus rapides etplus fiables que les
méthodes biochimiques pour différencier le Mycobacterium bovis des
autres membres du complexe de tuberculose M. tuberculosis. Les
empreintes génétiques permettent d'établir la différence entre les
différentes souches du Mycobacterium bovis et elles permettront de
décrire les modèles de l'origine ainsi que les modes de transmission
etde cont agion du Mycobacterium bovis .
Les techniques et les moyens utilisés, leur standardisation et l'inter-
prétation des résultats doivent être conformes aux indications
figurantau chapit re 2.3.1 (brucellose bovine) du manuel des normes
pour les tests de diagnostic et les vaccins (4eédition, 2000) de l'OIE.
2. TEST CUTANÉ À LA TUBERCULINE
Les dérivés protéiques purifiés de la tuberculine qui remplissent les
conditions établies au point 2.1 seront utilisés pour réaliser le test
cutané officiel à la tuberculine en suivant les procédures mentionnées
au point2.2.
2.1.Normes applicables à la tuberculine (bovine et aviaire)
2.1.1. Définition
Le dérivé protéique purifié (tuberculine PPD, bovine ou aviaire) est
une préparation obtenue en faisant subir un traitement thermique à
des produits de croissance et de lyse du Mycobacterium bovis et
du Mycobacterium avium (selon le cas) capables de
révéler une hypersensibilité retardée chez un animal
sensibilisé à des micro-organismes de la même espèce.
2.1.2. Production
Elle est obtenue à partir de fractions solubles dans l'eau préparées en
chauffant à la vapeur lâchée librement, puis en filtrant des cultures de
M. bovis etM. avium (selon le cas) élevées dans un milieu
synthétique liquide. La fraction active du filtrat,
composée essent iellementde prot éines, estisolée par
précipit at ion, lavée etfaitl'objetd'une nouvelle dissolu-
tion. On peut ajouter un produit de protection
antimicrobien qui ne provoque pas de fausses réactions
positives comme le phénol. La préparation stérile finale,
exempte de mycobactéries, est répartie dans des condi-
tions d'asepsie, dans des récipients en verre inviolables
qui sont ensuite fermés afin d'éviter toute contamination.
La préparation peut être lyophilisée.
2.1.3. Identification du produit
Injecter par voie intradermique plusieurs doses calibrées à différents
endroits sur des cobayes albinos correctement sensibilisés, ne pesant
pas moins de 250 grammes chacun. Après 24 à 28 heures, des réac-1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 30
▼M49
tions apparaissent sous forme d'œdèmes avec érythème, avec ou sans
nécrose aux points d'injection. L'ampleur et la gravité des réactions
varient selon la dose injectée. Les cobayes insensibilisés ne présentent
aucune réaction à des injections de ce type.
2.1.4. Tests
2.1.4.1. pH: le pH estde 6,5 à 7,5.2.1.4.2. Phénol: si la préparation à examiner contient du phénol, sa concentra-
tion ne doit pas être supérieure à 5 g/l.
2.1.4.3. Effet sensibilisant: utiliser un groupe de 3 cobayes qui n'ont été traités
avec aucun matériel interférant avec le test. À trois reprises, à cinq
jours d'intervalle, injecter par voie intradermique à chaque cobaye
une dose de la préparation à examiner équivalente à 500 UI dans
0,1 ml. Quinze à vingt-et-un jours après la première injection, injecter
la même dose (500 UI) par voie intradermique à ces animaux et à un
groupe de contrôle de trois cobayes de même poids et n'ayant pas
reçu au préalable d'injections de tuberculine. 24 à 48 heures après
les dernières injections, les réactions des deux groupes ne présentent
pas de grandes différences.
2.1.4.4. Toxicité: utiliser deux cobayes, pesant au moins 250 grammes chacun
et n'ayant été traités au préalable avec aucun matériel interférant avec
le test. Injecter par voie sous-cutanée à chaque cobaye 0,5 ml de la
préparation à examiner. Observer les animaux pendant sept jours.
Pendantla période d'observat ion, il ne se produitaucun effetanormal.
2.1.4.5. Stérilité: il convient d'effectuer le test de stérilité prescrit par la
monographie sur les vaccins à usage vétérinaire, 4
eédition (2002),
de la Pharmacopée européenne.
2.1.5. Activité
On détermine l'activité du dérivé protéique purifié de la tuberculine
(bovine et aviaire) en comparant les réactions produites chez les
cobayes sensibilisés par l'injection intradermique d'une série de dilu-
tions de la préparation à examiner à celles produites par les
concentrations connues d'une préparation de référence de dérivé
protéique purifié de la tuberculine (bovine et aviaire, selon le cas)
mesurée en unités internationales.
Pour tester l'activité, sensibiliser au moins neuf cobayes albinos, de
400 à 600 grammes chacun, par une injection intramusculaire
profonde de 0,0001 mg de masse humide de M. bovis vivantde
souche AN5, en suspension dans 0,5 ml d'une solution de
9 g/l de chlorure de sodium R pour la tuberculine bovine,
ou une dose appropriée de M. avium inactivé ou vivant,
pour la tuberculine aviaire. Quatre semaines au moins
après la sensibilisation des cobayes, raser les flancs des
animaux afin de disposer de l'espace nécessaire pour un
maximum de quatre points d'injection de chaque côté.
Préparer des dilutions de la préparation à examiner et de
la préparation de référence en utilisant une solution
saline isotonique tamponnée de phosphates (pH entre 6,5
et 7,5) contenant 0,005 g/l de polysorbate 80 R. Utiliser
a um o i n str o i sd o s e sd el ap r é p a r a ti o nd er é f é r e n c ee t
autant de la préparation à examiner. Choisir les doses de
sorte que les lésions produites aient un diamètre de 8 à
25 mm. Répartir les dilutions de manière aléatoire sur les
points en utilisant un carré latin. Injecter chaque dose par
voie intradermique dans un volume constant de 0,1 ou
0,2 ml. Après 24 à 48 heures, mesurer les diamètres des
lésions et calculer le résultat du test, en utilisant les
méthodes statistiques habituelles et en se basant sur
l'hypothèse que les diamètres des lésions sont directement
proportionnels au logarithme de la concentration des
tuberculines.
Le test ne sera valable que si les limites d'erreur (P = 0,95) sont su-
périeures à 50 % et inférieures à 200 % de l'activité estimée.
L'activité estimée est supérieure à 66 % et inférieure à 150 % de la
puissance déclarée de la tuberculine bovine. L'activité calculée sera
supérieure à 75 % etinférieure à 133 % de la puissance déclarée de
la tuberculine aviaire. L'activité déclarée sera supérieure à 20 000 UI/
ml pour les deux tuberculines (bovine et aviaire).
2.1.6. Stockage
Stocker à l'abri de la lumière, à une température de 5 ± 3 ºC.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 31
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2.1.7. Étiquetage
L'étiquette doit indiquer:
— l'activité en unités internationales par millilitre,
— le nom et la quantité des substances ajoutées,
— pour les préparations lyophilisées:
— le nom et le volume du liquide de reconstitution à ajouter,
— que le produit doit être utilisé immédiatement après reconstitu-
tion.
2.2.Procédures de test
2.2.1. Les tests suivants sont reconnus comme tuberculinations intradermi-
ques officielles:
— le test intradermique simple: ce test requiert une seule injection de
tuberculine bovine,
— le test intradermique comparatif: ce test requiert l'administration
simultanée d'une injection de tuberculine bovine et d'une injection
de tuberculine aviaire.
2.2.2. La dose de tuberculine injectée sera:
— égale ou supérieure à 2 000 UI de tuberculine bovine,
— égale ou supérieure à 2 000 UI de tuberculine aviaire.
2.2.3. Le volume de chaque injection ne dépassera pas 0,2 ml.
2.2.4. Les tests de tuberculine seront réalisés en injectant la tuberculine dans
la peau du cou. Les points d'injection se situeront à limite des tiers
antérieur et médian du cou. Lorsque les deux types de tuberculine,
bovine etaviaire, serontinject és à un même animal, le pointd'injec-
tion de la tuberculine aviaire sera situé à 10 cm de la crête du cou et
celui de la tuberculine bovine, 12,5 cm plus bas, sur une ligne à peu
près parallèle à la ligne de l'épaule ou sur les côtés du cou; sur les
animaux jeunes où il n'y a pas d'espace pour séparer suffisamment
les points d'injection sur un côté du cou, on administrera une injection
de chaque côté du cou, à des points identiques, au centre du tiers
médian du cou.
2.2.5. La technique de tuberculination et l'interprétation des réactions seront
les suivantes:
2.2.5.1. Technique
Les points d'injection seront poinçonnés et nettoyés. Dans chaque
zone de peau poinçonnée, on prendra un pli de peau entre le pouce
et l'index, on le mesurera à l'aide d'un compas et on notera le résultat.
La dose de tuberculine sera ensuite injectée par une méthode garantis-
sant son administration par voie intradermique. On pourra utiliser
pour cela l'aiguille courte et stérile, bord biseauté vers l'extérieur,
d'une seringue graduée contenant de la tuberculine, que l'on introduira
dans les couches les plus profondes de la peau. On s'assurera que
l'injection a été faite correctement en palpant un petit gonflement de
la taille d'un petit pois à chaque point d'injection. On mesurera à
nouveau l'épaisseur du pli de la peau de chaque pointd'inject ion 72
heures (+/– 4 h) après l'injection et on notera le résultat.
2.2.5.2. Interprétation des réactions
L'interprétation des résultats se fera sur la base des observations clini-
ques et de la ou des augmentations enregistrées de l'épaisseur des plis
de la peau notées aux points d'injection 72 heures après l'injection de
la ou des tuberculines.
a) Réaction négative: on qualifie la réaction de négative si on
observe seulement un gonflement limité, avec une augmentation
de l'épaisseur du pli de la peau ne dépassantpas 2 mm, sans signes
cliniques tels qu'un œdème diffus ou étendu, une exsudation, une
nécrose, une douleur ou une inflammation des canaux lymphati-
ques de cette région ou des ganglions lymphatiques.
b) Réaction douteuse: on qualifie la réaction de douteuse si on
n'observe aucun des signes cliniques mentionnés au point a) et si
l'augmentation de l'épaisseur du pli de la peau est supérieure à
2 mm etinférieure à 4 mm.
c) Réaction positive: on qualifie la réaction de positive si on observe
des signes cliniques mentionnés au point a) ou une augmentation
de 4 mm ou plus de l'épaisseur du pli de la peau au pointd'injec-
tion.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 32
▼M49
2.2.5.3. L'interprétation des tuberculinations intradermiques officielles sera la
suivante:
2.2.5.3.1. Testint radermique simple:
a) positif: réaction positive chez le bovin comme celle décrite au
pointc) du point2.2.5.2;
b) douteux: réaction douteuse comme celle décrite au point b) du
point2.2.5.2;
c) négatif: réaction négative chez le bovin comme celle décrite au
pointa) du point2.2.5.2.
Les animaux chez qui le test intradermique simple a donné des résul-
tats douteux seront soumis à une autre tuberculination après un délai
minimal de quarante-deux jours.
Les animaux chez qui ce deuxième test ne donne pas de résultats
négatifs seront considérés comme positifs.
Les animaux chez qui le test intradermique simple donnera des résul-
tats positifs pourront être soumis à un test intradermique comparatif si
on soupçonne l'existence d'une réaction positive fausse ou d'une réac-
tion d'interférence.
2.2.5.3.2. Test intradermique comparatif pour la détermination et le maintien du
statut de troupeau officiellement indemne de tuberculose:
a) positif: on assiste à une réaction positive chez le bovin lorsque l'on
esten présence de signes cliniques ou que la t uberculine bovine a
pour conséquence que l'épaisseur du pli de la peau estsupérieure
de plus de 4 mm à la réaction à la tuberculine aviaire;
b) douteux: on assiste à une réaction positive ou douteuse chez le
bovin lorsqu'il y a absence de signes cliniques etque la t ubercu-
line bovine entraîne une réaction positive ou douteuse dans
laquelle l'épaisseur du pli de la peau estde 1 à 4 mm supérieure
à la réaction à la tuberculine aviaire;
c) négatif: on assiste à une réaction négative chez le bovin lorsqu'il y
a absence de signes cliniques et que la tuberculine bovine entraîne
une réaction négative ou une réaction positive ou douteuse avec
augmentation de l'épaisseur du pli de la peau égale ou inférieure
à une réaction positive ou douteuse à la tuberculine aviaire.
Les animaux chez qui les tests intradermiques comparatifs ont donné
des résultats douteux devront être soumis à un autre test, après un
délai minimal de quarante-deux jours. Les animaux chez qui le
deuxième test ne donne pas de résultats négatifs seront considérés
comme positifs.
2.2.5.3.3. Le statut de troupeau officiellement indemne de tuberculose pourra
être suspendu et les animaux de ce troupeau ne pourront pas faire
l'objet d'échanges commerciaux intracommunautaires jusqu'à ce que
le statut des animaux suivants soit réglé:
a) les animaux qui ont été considérés comme douteux lors du test
intradermique simple;
b) les animaux qui ont été considérés comme positifs lors du test
intradermique simple mais qui attendent de subir un nouvel
examen sous forme de test intradermique comparatif;
c) les animaux qui ont été considérés comme douteux lors du test
intradermique comparatif.
2.2.5.3.4. Lorsque la législation communautaire exige que les animaux soient
soumis à un test intradermique avant un déplacement, le test sera
interprété de sorte qu'aucun animal montrant une augmentation de
l'épaisseur du pli de la peau supérieure à 2 mm ou présentant des
signes cliniques ne fasse l'objetd'échanges commerciaux int racommu-
nautaires.
2.2.5.3.5. Afin de permettre la détection du nombre maximal d'animaux infectés
ou malades dans un troupeau ou dans une région, les États membres
pourront modifier les critères d'interprétation du test afin d'en
améliorer la sensibilité en considérant toutes les réactions douteuses
mentionnées aux points b) des points 2.2.5.3.1. et 2.2.5.3.2. comme
des réactions positives.
3. TESTS SUPPLÉMENTAIRES
Afin de permettre la détection du nombre maximal d'animaux infectés
ou malades dans un troupeau ou dans une région, les États membres
pourront autoriser, en plus de la tuberculination, l'utilisation du
dosage de l'interféron gamma mentionné au chapitre 2.3.3 (tubercu-1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 33
▼M49
lose bovine) de la 4eédition (2000) du manuel des normes pour les
tests de diagnostic et les vaccins de l'Office international des épizoo-
ties (OIE).
4. INSTITUTS D'ÉTAT ET LABORATOIRES NATIONAUX DE
RÉFÉRENCE
4.1.Tâches et responsabilités
Les instituts d'État et les laboratoires de référence repris au point 4.2
seront chargés du contrôle officiel des tuberculines ou des réactifs
mentionnés aux points 2 et 3 dans leurs pays respectifs afin de
garantir leur adéquation avec les normes mentionnées ci-dessus.
4.2.Liste des instituts d'État et des laboratoires nationaux de réfé-
rence
1) Allemagne
Paul-Ehrlich Institut (PEI), Bundesamt für Sera und Impstoffe, D-23207 Langen; Bundesinstitut für gesundheitlichen Verbraucher-
chutz und Veterinärmedizin — Bereich Jena — D-07743 Jena
2) Belgique
Insitut scientifique de la santé publique — Louis Pasteur, rue
Juliette Wytsman 14, B-1050 Bruxelles
3) France
Laboratoire national des médicaments vétérinaires, Fougères
4) Grand-Duché de Luxembourg
Institut du pays fournisseur
5) Italie
Istituto superiore di Sanità, Rome
6) Pays-Bas
Centraal Instituut voor Dierziekte Controle Lelystad (CIDC-
Lelystad), Lelystad
7) Danemark
Danmarks Veterinærinstitut, Bülowsvej 27, DK-1790 Copen-
hague
8) Irlande
Institut du pays fournisseur
9) Royaume-Uni
Veterinary Laboratory Agency, Addlestone, Weybridge
10) Grèce
Κέντρο Κτηνιατρικών Ιδρυµάτων, Νεαπόλεως 25, GR-153
10Αθήνα
11) Espagne
Laboratorio de Sanidad y Producción Animal de Granada
12) Portugal
Laboratório Nacional de Investigação Veterinária, Lisbonne
13) Autriche
Bundesanstalt für veterinärmedizinische Untersuchungen,Mödling
14) Finlande
Eläinlääkintä- ja elintarviketutkimuslaitos — Forskningsanstalten
för veterinärmedicin och livsmedel, Helsinki
15) Suède
Satens veterinärmedicinska anstalt, Uppsala
16)Républiquetchèque
Státní veterinární ústav Praha, Sídlištní 24/136, 165 03 Praha 6;
Ústavprostátníkontroluveterinárníchbiopreparátůaléčiv,Hudcova56A,62100Brno
17)Estonie1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 34
▼A4
Ravimiamet, Ravila 19, 50411 Tartu
▼A4
18)Chypre
ΕργαστήριοΑναφοράςγιατιςΑσθένειεςτωνΖώων,
ΚτηνιατρικέςΥπηρεσίες1417Λευκωσία,
(National Reference LaboratoryforAnimalHealthVeterinary
Services, CY-1417 Nicosia)
19)Lettonie
Valstsveterinārmedicīnasdiagnostikascentrs,Lejupes iela 3,
LV-1076Rīga
20)Lituanie
Nacionalinėveterinarijoslaboratorija,J.Kairiūkščiog. 10, LT-2021
21)Hongrie
ÁllatgyógyászatiOltóanyag-,Gyógyszer-ésTakarmá nyellenőrző
Intézet(ÁOGYTI),Pf.318.,Szállásu.7.,HU-1475 Budapest
22)Malte
Institutdupaysfournisseur
23)Pologne
LaboratoriumZakładuMikrobiologiiPaństwowego Instytutu
Weterynaryjnego,Al.Partyzantów57,PL-24-100 Puławy
24)Slovenie:
Nacionalniveterinarskiinštitut,Gerbičeva60,SI-1000 Ljubljana  
25)Slovaquie:
Ústavštátnejkontrolyveterinárnychbiopreparátova
liečiv,Biovetská34,SK-94901Nitrá1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 35
Vilnius
▼M48
ANNEXE C
BRUCELLOSE
1. IDENTIFICATION DE L'AGENT
La démonstration par coloration acido-résistante modifiée ou immunos-
pécifique de la présence d'organismes ayantla morphologie de Brucella
dans des matières abortives, des sécrétions vaginales ou du lait indique
la possibilité de brucellose, notamment lorsqu'elle est corroborée par
des tests sérologiques.
Après avoir isolé les micro-organismes, l'espèce etle biovar doivent
être identifiés par lyse de phages et/ou des tests du métabolisme
oxydatif selon des critères culturaux, biochimiques et sérologiques.
Les techniques et les moyens utilisés, leur standardisation et l'interpré-
tation des résultats doivent être conformes aux indications figurant dans
le Manuel des normes de l'OIE pour les tests de diagnostic et les
vaccins, quatrième édition, 2000, chapitre 2.3.1 (brucellose bovine),
chapit re 2.4.2 (brucellose caprine etovine) etchapit re 2.6.2 (brucellose
porcine).
2. TESTS IMMUNOLOGIQUES2.1.Normes
2.1.1. La souche n
o99 de Weybridge ou la souche USDA 1119-3 du biovar 1
deBrucella abortus doit être utilisée pour la préparation de tous les
antigènes employés dans le test au rose bengale, l'épreuve de séro-
agglutination, l'épreuve de fixation du complément et l'épreuve de
l'anneau sur le lait.
2.1.2. Le sérum étalon pour les tests susmentionnés est le sérum étalon inter-
national de l'OIE (OIEISS) antérieurement dénommé second sérum
étalon international anti- Brucella abortus de l'OMS.
2.1.3. Les sérums étalons pour les tests ELISA sont les suivants:
— le sérum étalon de référence international de l'OIE (OIEISS),
— le sérum étalon ELISA faiblement positif de l'OIE (OIEELI-
SAWPSS),
— le sérum étalon ELISA fortement positif de l'OIE (OIEELISASPSS),
— le sérum étalon ELISA négatif de l'OIE (OIEELISANSS).
2.1.4. Les sérums étalons énumérés ci-dessus sont fournis par l'Agence des
laboratoires vétérinaires [«Veterinary Laboratories Agency (VLA)»],
de Weybridge (Royaume-Uni).
2.1.5. Les sérums étalons OIEISS, OIEELISAWPSS, OIEELISASPSS etOIEE-
LISANSS sont des étalons primaires internationaux à partir desquels des
étalons secondaires nationaux («étalons de travail») doivent être établis
pour chaque test dans chaque État membre.
2.2.Épreuves d'immuno-absorption enzymatique (ELISA) ou autres
épreuves d'agglutination destinées à la détection de la brucellose
bovine dansle sérum ou le lait
2.2.1.Matériel et réactifs
La technique utilisée et l'interprétation des résultats doivent avoir été
validées conformément aux principes établis au chapitre 1.1.3 de la
quatrième édition de 2000 du Manuel des normes pour les tests de diag-
nost ic etles vaccins de l'OIE etdoiventcomprendre au minimum des
études de laboratoire et de diagnostic.
2.2.2.Standardisation de l'épreuve
2.2.2.1. Standardisation de la procédure de test pour les échantillons individuels
de sérum:
a) une prédilution du sérum OIEISS au 1/150 (1) ou une prédilution du
sérum OIEELISAWPSS au 1/2 ou une prédilution du sérum OIEELI-1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 36
(1) Aux fins de la présente annexe, les dilutions indiquées pour la préparation des réactifs
liquides sont exprimées par exemple comme 1/150, c'est-à-dire une dilution de 1 pour
150.
▼M48
SASPSS au 1/16 réalisée dans un sérum négatif (ou dans un mélange
de sérums négatifs) doit produire une réaction positive;
b) une prédilution du sérum OIEISS au 1/600 ou une prédilution du
sérum OIEELISAWPSS au 1/8 ou une prédilution du sérum OIEELI-
SASPSS au 1/64 réalisée dans un sérum négatif (ou dans un mélange
de sérums négatifs) doit produire une réaction négative;
c) le sérum OIEELISANSS doit dans tous les cas produire une réaction
négative.
2.2.2.2. Standardisation de la procédure de test pour les échantillons de sérums
en mélange:
a) une prédilution du sérum OIEISS au 1/150 ou une prédilution du
sérum OIEELISAWPSS au 1/2 ou une prédilution du sérum OIEELI-
SASPSS au 1/16 réalisée dans un sérum négatif (ou dans un mélange
de sérums négatifs) et à nouveau diluée dans des sérums négatifs
avec un facteur de dilution identique au nombre de sérums consti-
tuant le mélange doit produire une réaction positive;
b) le sérum OIEELISANSS doit dans tous les cas produire une réaction
négative;
c) le test doit être en mesure de détecter la présence d'une infection
chez un seul animal du groupe d'animaux dontdes échant illons de
sérum constituent le mélange.
2.2.2.3. Standardisation de la procédure de test pour les mélanges de lait ou de
lactosérum:
a) une prédilution du sérum OIEISS au 1/1000 ou une prédilution du
sérum OIEELISAWPSS au 1/16 ou une prédilution du sérum OIEE-
LISASPSS au 1/125 réalisée dans un sérum négatif (ou dans un
mélange de sérums négatifs) et diluée à nouveau au 1/10 dans du
lait négatif doit produire une réaction positive;
b) le sérum OIEELISANSS dilué au 1/10 dans du laitnégat if doit
produire dans tous les cas une réaction négative;
c) le test doit être en mesure de détecter la présence d'une infection
chez un seul animal du groupe d'animaux dontdes échant illons de
lait ou de lactosérum constituent le mélange.
2.2.3.Conditions d'utilisation des tests ELISA dans le diagnostic de la brucel-
lose bovine
2.2.3.1. Si l'on utilise les conditions de standardisation susmentionnées pour les
tests ELISA sur des échantillons de sérum, la sensibilité diagnostique
de l'ELISA doit être égale ou supérieure à celle du test au rose bengale
ou de l'épreuve de fixation du complément compte tenu de la situation
épidémiologique dans laquelle l'épreuve estut ilisée.
2.2.3.2. Si l'on utilise les conditions de standardisation susmentionnées pour
l'ELISA sur des échantillons de lait de mélange, la sensibilité diagnos-
tique de l'ELISA doit être égale ou supérieure à celle de l'épreuve de
l'anneau sur le lait compte tenu non seulement de la situation épidémio-
logique mais égalementdes effect ifs moyens ou élevés des élevages
considérés.
2.2.3.3. Lorsque les tests ELISA sont utilisés à des fins de certification confor-
mément à l'article 6, paragraphe 1, ou pour l'établissement et le
maintien du statut d'un troupeau conformément à l'annexe A, titre II,
point 10, le mélange d'échantillons de sérum doit être effectué de
manière à ce que les résultats des tests puissent être rapportés de
manière indiscutable aux différents animaux inclus dans le mélange.
Tout test de confirmation doit être effectué sur des échantillons de
sérum individuels.
2.2.3.4. Les tests ELISA peuvent être appliqués à un échantillon de lait prélevé
sur le lait collecté dans une exploitation comptant au moins 30 % de
vaches en période de lactation. Si cette méthode est utilisée, des
mesures doivent être prises afin que les échantillons prélevés pour être
examinés puissent être rapportés de manière indiscutable aux différents
animaux dont provient le lait. Tout test de confirmation doit être
effectué sur des échantillons de sérum individuels.
2.3.Test de fixation du complément (TFC)
2.3.1. L'antigène consiste en une suspension bactérienne dans une solution
saline phénolée [NaCl à 0,85 % (m/v) etphénol à 0,5 % (v/v)] ou
dans du tampon véronal. Les antigènes peuvent être livrés à l'état
concentré pour autant que le facteur de dilution à utiliser soit mentionné1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 37
▼M48
sur l'étiquette du flacon. L'antigène doit être stocké à une température
de 4 ºC etne doitpas êt re congelé.
2.3.2. Les sérums doivent être inactivés de la manière suivante:
— sérum bovin: à une température de 56 à 60 ºC pendant 30 à 50
minutes,
— sérum porcin: à une température de 60 ºC pendant 30 à 50 minutes.
2.3.3. Afin d'obtenir une réaction satisfaisante, il convient d'utiliser une dose
de complémentsupérieure à la dose minimale nécessaire pour une
hémolyse complète.
2.3.4. Les contrôles suivants doivent être effectués lors de chaque série
d'épreuves de fixation du complément:
a) contrôle du pouvoir anticomplémentaire du sérum;
b) contrôle de l'antigène;
c) contrôle des hématies sensibilisées;
d) contrôle du complément;
e) contrôle à l'aide d'un sérum positif de la sensibilité au déclenche-
mentde la réact ion;
f) contrôle de la spécificité de la réaction à l'aide d'un sérum négatif.
2.3.5.Calcul des résultats:
Le sérum étalon OIEISS contient 1 000 unités internationales de FC
(UIFC) par ml. Si le sérum étalon est testé dans une méthode donnée,
le résultat est exprimé sous la forme d'un titre (TOIEISS). Le résultat de
l'épreuve pour un sérum exprimé sous la forme de titre (TSERUM) doit
être converti en UIFC par ml. De manière à convertir l'expression d'un
titre en UIFC, le facteur F nécessaire à la conversion du titre d'un
sérum inconnu (TSERUM) éprouvé au moyen de cette méthode est obtenu
au moyen de la formule suivante:
etle cont enu en UIFC par ml du sérum (UIFCSERUM) par la formule:
2.3.6.Interprétation des résultats:
Un sérum contenant 20 UIFC par ml est considéré comme positif.
2.4.Épreuve de l'anneau sur le lait
2.4.1. L'antigène consiste en une suspension bactérienne dans une solution
saline phénolée [NaCl à 0,85 % (m/v) etphénol à 0,5 % (v/v)] colorée
à l'hématoxyline. L'antigène doit être stocké à une température de 4 ºC
etne doitpas êt re congelé.
2.4.2. La sensibilité de l'antigène doit être étalonnée par rapport au sérum
étalon OIEISS de manière à obtenir une réaction positive avec une dilu-
tion du 1/500 de ce sérum étalon dans du lait négatif et une réaction
négative à une dilution du 1/1 000 de ce même sérum.
2.4.3. L'épreuve de l'anneau doit être effectuée sur des échantillons représen-
tatifs du contenu de chaque bidon de lait ou du contenu de chaque tank
de l'exploitation.
2.4.4. Les échantillons de lait ne doivent pas avoir été congelés, chauffés ni
violemmentagit és.
2.4.5. La réaction doit être réalisée en utilisant l'une des méthodes suivantes:
— sur une colonne de laitd'au moins 25 mm de haut eur etun volume
de lait de 1 ml additionné de 0,03 ou 0,05 ml d'un antigène coloré
et titré,
— sur une colonne de laitd'au moins 25 mm de haut eur etun volume
de lait de 2 ml additionné de 0,05 ml d'un antigène coloré et titré,
— sur un volume de lait de 8 ml additionné de 0,08 ml d'un antigène
coloré et titré.
2.4.6 Le mélange de lait et d'antigène doit être incubé à 37 ºC pendant 60
minutes et l'épreuve doit être effectuée parallèlement sur des laits de
contrôle positif et négatif. La sensibilité de l'épreuve est améliorée si
l'incubation est prolongée à 4 ºC durant une période de 16 à 24 heures.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 38
▼M48
2.4.7. Interprétation des résultats:
a) réaction négative: lait coloré, crème non colorée;
b) réaction positive:
— laitetcrème colorés de façon ident ique, ou
— laitnon coloré etcrème colorée.
2.5.Épreuve sur lame au rose bengale (RB)
2.5.1. L'antigène consiste en une suspension bactérienne dans un diluant
d'antigène de Brucella tamponné à pH 3,65 ± 0,05 colorée au rose
bengale. L'antigène doit être livré prêt à l'emploi, stocké à une tempéra-
ture de 4 ºC et ne doit pas être congelé.
2.5.2. L'antigène est préparé sans référence à la concentration cellulaire, mais
sa sensibilité doit être étalonnée par rapport au sérum étalon OIEISS de
manière à obtenir une réaction positive pour une dilution du sérum de
1/45 et une réaction négative pour une dilution du 1/55.
2.5.3. Le test RB est réalisé de la manière suivante:
a) le sérum (20-30 µl) estmélangé avec un volume égal d'ant igène sur
un carreau blanc ou une plaque émaillée pour produire une zone
d'un diamètre de 2 cm environ. Le mélange est agité délicatement
pendant 4 minutes à la température ambiante puis est observé sous
un bon éclairage pour visualiser toute agglutination;
b) une méthode automatisée peut être utilisée pour autant qu'elle soit au
moins aussi sensible et exacte que la méthode manuelle.
2.5.4.Interprétation des résultats:
Toute réaction visible est considérée comme positive à moins que le
séchage ne soitexcessif sur les bords.
Des sérums de contrôle positifs et négatifs doivent être inclus dans
chaque série d'épreuves.
2.6.Épreuve de séro-agglutination
2.6.1. L'antigène consiste en une suspension bactérienne dans une solution
saline au phénol [NaCl à 0,85 % (m/v) etphénol à 0,5 % (v/v)]. Le
formaldéhyde ne doit pas être utilisé.
L'antigène peut être livré à l'état concentré pour autant que le facteur de
dilution à utiliser soit mentionné sur l'étiquette du flacon.
De l'EDTA peut être ajouté à la suspension d'antigène jusqu'à l'obten-
tion d'une dilution finale d'épreuve de 5 mM afin de réduire le taux de
réactions faussement positives dans l'épreuve de séro-agglutination. Le
pH doit ultérieurement être réajusté à 7,2 dans la suspension d'antigène.
2.6.2. Le sérum étalon OIEISS contient 1 000 unités internationales d'aggluti-
nation.
2.6.3. L'antigène est préparé sans référence à la concentration cellulaire mais
sa sensibilité doit être étalonnée par rapport au sérum étalon OIEISS de
manière à obtenir une agglutination de 50 % pour une dilution finale du
sérum entre le 1/600 et le 1/1 000 ou une agglutination de 75 % pour
une dilution finale du sérum entre le 1/500 et le 1/750.
Il peut également être utile de comparer la réactivité des nouveaux lots
d'antigène et des lots d'antigène étalonnés antérieurement en utilisant un
groupe de sérums définis.
2.6.4. Le test est effectué dans des tubes ou sur des microplaques. Le mélange
d'antigène et de dilutions de sérum doit être incubé pendant une durée
de 16 à 24 heures à une température de 37 ºC.
Trois dilutions au moins doivent être préparées pour chaque sérum. Les
dilutions de sérum suspect doivent être effectuées de manière à ce que
la lecture de la réaction à la limite de la positivité soit réalisée dans le
tube intermédiaire (ou le puits intermédiaire pour la méthode des micro-
plaques).
2.6.5.Interprétation des résultats:
Le degré d'agglutination de Brucella dans un sérum doitêt re exprimé
en UI par ml.
Un sérum contenant 30 UI par ml ou plus est considéré comme positif.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 39
▼M48
3. TESTS COMPLÉMENTAIRES
3.1.Test cutané de la brucellose
3.1.1.Conditions d'utilisation du test
a) Le test cutané de la brucellose ne peut pas être utilisé à des fins de
certification dans les échanges intracommunautaires.
b) Le test cutané de la brucellose est l'une des épreuves les plus spéci-
fiques pour la détection de la brucellose chez les animaux non
vaccinés; le diagnostic ne doit toutefois pas reposer uniquement sur
des réactions intradermiques positives.
c) Les animaux de l'espèce bovine ayant produit un résultat négatif à
l'un des tests sérologiques définis à la présente annexe et une réac-
tion positive au test cutané de la brucellose sont considérés comme
infectés.
d) Les animaux de l'espèce bovine ayant donné un résultat positif à l'un
des tests sérologiques définis à la présente annexe peuvent être
soumis à un test cutané de la brucellose afin de confirmer l'interpré-
tation des résultats des tests sérologiques notamment quand une
réaction croisée avec des anticorps dirigés contre d'autres bactéries
ne peut être exclue dans le cas des troupeaux indemnes ou officiel-
lementindemnes de brucellose.
3.1.2. L'épreuve doit être effectuée en utilisant une préparation allergénique
standardisée et définie ne contenant pas d'antigène lipopolyosidique
(LPS) lisse, celui-ci pouvant provoquer des réactions inflammatoires
non spécifiques ou interférer avec des tests sérologiques ultérieurs.
L'une de ces préparations est la brucelline INRA provenant d'une
souche non lisse de B. melitensis . Les conditions de sa production sont
décrites en détail à la section B2 du chapitre 2.4.2 du Manuel des
normes pour les tests de diagnostic et les vaccins de l'OIE, quatrième
édition, 2000.
3.1.3.Procédure du test
3.1.3.1. Un volume de 0,1 ml d'allergène de la brucellose estinject é par voie
intradermique au pli caudal, au flanc ou sur le côté de l'encolure.
3.1.3.2. Le test est lu au bout de 48 à 72 heures.
3.1.3.3. Avant l'injection et lors du réexamen, l'épaisseur de la peau au site
d'injection est mesurée avec un cutimètre.
3.1.3.4. Interprétation des résultats:
Les réactions fortes sont facilement identifiables en raison d'une inflam-
mation et d'une induration locales.
Un épaississementde la peau de 1,5 à 2 mm estconsidéré comme réac-
tion positive au test cutané de la brucellose.
3.2.Test d'immuno-absorption enzymatique de compétition (cELISA)
3.2.1.Conditions d'utilisation du test cELISA
a) Le test cELISA ne peut pas être utilisé à des fins de certification
dans les échanges intracommunautaires.
b) Le test cELISA a été démontré comme plus spécifique que par
exemple le test ELISA indirect et peut ainsi être utilisé pour aider
à l'interprétation de résultats de tests sérologiques.
3.2.2.Procédure du test
Le test sera mis en œuvre selon les prescriptions du chapitre 2.3.1. 2) a)
du Manuel des normes de l'OIE pour les tests de diagnostic et les
vaccins, quatrième édition, 2000.
4. LABORATOIRES NATIONAUX DE RÉFÉRENCE4.1.Tâches et responsabilités
Les tâches des laboratoires nationaux de référence sont les suivantes:
a) approbation des résultats des études de validation démontrant la
fiabilité de la méthode de test utilisée dans l'État membre;
b) détermination du nombre maximal d'échantillons pouvant constituer
un mélange dans les kits ELISA utilisés;1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 40
▼M48
c) étalonnage des sérums étalons nationaux secondaires («étalons de
travail») par rapport au sérum étalon primaire international visé au
paragraphe 2.1;
d) contrôles de la qualité de tous les lots de kits ELISA et d'antigènes
utilisés dans l'État membre;
e) coopération au sein du réseau des laboratoires nationaux de réfé-
rence pour la brucellose.
4.2.Liste des laboratoires nationaux de référence
BELGIQUECentre d'études et de recherches vétérinaires et agrochimiques
(CERVA/CODA)
Groeselenberg 99B-1180 Bruxelles
RÉPUBLIQUE TCHÈQUE
Státní veterinární ústav Olomouc, Jakoubka ze St říbra 1, 779 00
Olomouc
DANEMARK
Danish Veterinary Institute
Bulowsvej 27DK-1790 Copenhagen
ALLEMAGNE
Bundesinstitut für Gesundheitlichen Verbraucherschutz und Veterinär-
medizin (BGVV)
Nationales Veterinärmedizinisches Referenzlabor für Brucellose
Postfach 33 00 13
D-14191 Berlin
ESTONIE
institut du pays fournisseur
GRÈCE
Veterinary Laboratory of Larissa
Department of Microbiology6th km of National Road Larissa-TrikalaGR-4111 10 Larissa
ESPAGNE
Laboratorio Central de Veterinaria de Santa Fe
Camino del Jau S/NE-18320 Santa Fe (Granada)
FRANCELaboratoire national et OIE/FAO de référence pour la brucellose
Agence française de sécurité sanitaire des aliments (AFSSA)
BP 67F-94703 Maisons-AlfortCedex
IRLANDEBrucellosis Laboratory
Model Farm Road
CorkIrlande
ITALIEIstituto Zooprofilattico Sperimentale dell'Abruzzo e del Molise
Via Campo Boario
I-64100 Teramo
CHYPRE
Εργαστήριο Αναφοράς για τις Ασθένειες των Ζώων ,
Κτηνιατρικές Υπηρεσίες , 1417Λευκωσία National Reference Labo-
ratory for Animal Health, Veterinary Services,1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 41
▼A4
▼M48
▼A4
▼M48
▼A4
▼A4
CY-1417 Nicosia
LETTONIE
Valsts veterin ārmedic īnas diagnostikas centrs, Lejupes iela 3,
LV-1076 R īga
LITUANIENacionalin ėveterinarijos laboratorija, J. Kairi ūkščio g. 10,
LT-2021 Vilnius
LUXEMBOURG
State Laboratory for Veterinarian Medicine
54, avenue Gaston Diderich
BP 2081
L-1020 Luxembourg
HONGRIE
Állatgyógyászati Oltóanyag-, Gyógyszer- és Takarmányellen őrző
Intézet (ÁOGYTI),
Pf. 318., Szállás u. 7., H-1475 Budapest
MALTE
Institut du pays fournisseur
PAYS-BAS
Centraal Instituut DierziekteControle
CIDC-LelystadHoutribweg 39PO Box 2004
8203 AA Lelystad
Nederland
AUTRICHEBundesanstalt für veterinärmedizinische Untersuchungen
Robert-Koch-Gasse 17
A-2340 Modling
POLOGNE
Laboratorium Zakładu Mikrobiologii Pa ństwowego Instytutu Weteryna-
ryjnego, Al. Partyzantów 57, PL-24-100 Puławy
PORTUGAL
Laboratório Nacional de Investigação Veterinária (LNIV)
Estrada de Benfica, n.
o701
P-1549-011 Lisboa
SLOVÉNIE
Nacionalni veterinarski inštitut, Gerbi čeva 60,
SI-1000 Ljubljana
SLOVAQUIEŠtátny veterinárny ústav, Pod dráhami 918,
SK-960 86 Zvolen
FINLANDE
National Veterinary and Food Research Institute
Hämeentie 57
PO Box 45
FIN-00581 Helsinki
SUÈDE
National Veterinary Institute
S-751 89 Uppsala
ROYAUME-UNI
1) FAO/WHO Collaborating Centre for Reference and Research on
Brucellosis1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 42
▼M48
▼A4
▼M48
▼A4
▼M48
▼A4
▼M48
▼M48
Veterinary Laboratories Agency
New Haw
Addlestone
Surrey KT15 3NB
United Kingdom
2) Immunodiagnostics Department
Veterinary Sciences Division
Stoney Road Stormont
BelfastBT4 3SD
United Kingdom1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 43
▼M44
ANNEXE D
CHAPITRE I
TROUPEAUX, ÉTATS MEMBRES ET RÉGIONS OFFICIELLEMENT
INDEMNESDE LEUCOSE BOVINE ENZOOTIQUE
A. Un troupeau est officiellement indemne de leucose bovine enzootique si:
i) aucun cas de leucose bovine enzootique n'a été décelé dans le troupeau
ni confirmé au cours des deux dernières années, que ce soitcliniquement
ou à la suite d'un test pratiqué en laboratoire
et
ii) tous les animaux de plus de vingt-quatre mois ont présenté une réaction
négative au cours des douze derniers mois à deux tests pratiqués confor-
mément à la présente annexe, à un intervalle de quatre mois au moins
ou
iii) il remplit les exigences prévues au point i) et est situé dans un État
membre ou une région officiellementindemne de leucose bovine enzoo-
tique.
B. Un troupeau conserve son statut de troupeau officiellement indemne de
leucose bovine enzootique si:
i) la condition prévue à la section A, point i), continue d'être remplie;
ii) tous les animaux introduits dans le troupeau proviennent d'un troupeau
officiellementindemne de leucose bovine enzoot ique;
iii) tous les animaux de plus de vingt-quatre mois continuent de présenter
une réaction négative à un test pratiqué conformément au chapitre II àdes intervalles de trois ans;
iv) les animaux d'élevage introduits dans un troupeau et provenant d'un pays
tiers ont été importés conformément à la directive 72/462/CEE.
C. Le statut de troupeau officiellement indemne de leucose est suspendu si les
conditions énumérées à la section B ne sont pas remplies, ou si, sur la basede tests effectués en laboratoire ou pour des raisons cliniques, un ou
plusieurs bovins sont suspectés d'être atteints de leucose bovine enzootique
et si l'animal (les animaux) suspect(s) a (ont) été immédiatement abattu(s).
D. Le statut reste suspendu jusqu'à ce que les exigences suivantes soient
remplies:
1. Si, dans un troupeau officiellement indemne de leucose bovine enzoo-
tique, un animal isolé a présenté une réaction positive à l'un des tests
visés au chapitre II ou lorsqu'un animal d'un troupeau est suspecté d'être
atteint de l'infection:
i) l'animal, ayant présenté une réaction positive et, s'il s'agit d'une
vache, le cas échéant ses veaux doivent quitter le troupeau pour être
abattus sous contrôle des autorités vétérinaires;
ii) tous les animaux du troupeau âgés de plus de douze mois ont été
soumis avec un résultat négatif à deux tests sérologiques (à un inter-
valle de quatre mois au moins et de douze mois au plus) effectués
conformément au chapitre II trois mois au moins après élimination
de l'animal ayant présenté une réaction positive et de sa progéniture
éventuelle;
iii) une enquête épidémiologique a été menée et a donné des résultats
négatifs et les troupeaux présentant un lien épidémiologique avec letroupeau infecté ont été soumis aux mesures prévues au point ii).
Toutefois, l'autorité compétente peut accorder une dérogation à l'obliga-
tion d'abattage du veau d'une vache infectée lorsque ce veau a été séparé
de sa mère immédiatement après vêlage. Dans ce cas, le veau doit être
soumis aux exigences prévues au point2 iii).
2. Lorsque plus d'un animal provenantd'un t roupeau officiellementindemne
de leucose bovine enzootique a présenté une réaction positive à l'un destests visés au chapitre II ou lorsque l'on suspecte que plus d'un animal
d'un troupeau est atteint de l'infection:
i) tout animal ayant présenté une réaction positive et, s'il s'agit d'une
vache, ses veaux doivent quitter le troupeau pour être abattus souscontrôle des autorités vétérinaires;
ii) tous les animaux du troupeau âgés de plus de douze mois doivent
présenter une réaction négative à deux tests pratiqués conformémentau chapitre II à un intervalle de quatre mois au moins et de douze
mois au plus;1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 44
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iii) tous les autres animaux du troupeau doivent, après identification,
rester sur l'exploitation jusqu'à ce qu'ils aient dépassé l'âge de vingt-
quatre mois et aient été soumis aux tests prévus au chapitre II après
avoir atteint cet âge, l'autorité compétente pouvant toutefois permettre
que ces animaux soient directement acheminés à l'abattage sous
surveillance officielle;
iv) une enquête épidémiologique a été menée et a conduit à des résultats
négatifs et les troupeaux présentant un lien épidémiologique avec le
troupeau infecté ont été soumis aux mesures prévues au point ii).
Toutefois, l'autorité compétente peut accorder une dérogation à l'obliga-
tion d'abattage du veau d'une vache infectée lorsque ce veau a été séparé
de sa mère immédiatement après vêlage. Dans ce cas, le veau doit être
soumis aux exigences prévues au point2 iii).
E. Conformémentà la procédure prévue à l'art icle 17 etsur la base des infor-
mations fournies conformément à l'article 8, un État membre ou une partie
d'un État membre peut être considéré comme officiellement indemne de
leucose bovine enzootique si:
a) toutes les conditions prévues au point A sont remplies et si au moins
99,8 % des troupeaux bovins sont des troupeaux officiellement indemnes
de leucose bovine enzootique
ou
b) aucun cas de leucose bovine enzootique n'a été confirmé dans l'État
membre ou dans la partie de l'État membre au cours des trois dernières
années, etla présence de t umeurs donton soupçonne qu'elles sontdues
à une leucose bovine enzootique doit obligatoirement faire l'objet d'une
notification et doit donner lieu à une enquête,
et
s'il s'agit d'un État membre, les contrôles aléatoires pratiqués conformé-
ment au chapitre II pendant une période de deux ans sur tous les
animaux âgés de plus de vingt-quatre mois dans au moins 10 % des trou-
peaux ont donné des résultats négatifs
ou
s'il s'agit d'une partie d'un État membre, tous les animaux âgés de plus de
vingt-quatre mois ont été soumis à un test prévu au chapitre II avec des
résultats négatifs conformément au chapitre II pendant une période de
deux ans
ou
c) il est démontré au moyen de toute autre méthode, avec un taux de certi-
tude de 99 %, que moins de 0,2 % des troupeaux ont été infectés.
F. Un État membre ou une partie d'un État membre conservent leur statut
d'officiellementindemnes de leucose bovine enzoot ique si:
a) tous les animaux abattus sur le territoire de cet État membre ou de cette
partie sont soumis à une inspection post mortem officielle lors de laquelle
toutes les tumeurs qui pourraient être dues au virus de la leucose bovine
enzootique font l'objet d'un examen de laboratoire;
b) l'État membre informe la Commission de l'apparition de tous les cas de
leucose bovine enzootique dans la région;
c) tous les animaux présentant une réaction positive à un des tests prévus au
chapitre II sont abattus et le troupeau reste sous restriction jusqu'au réta-
blissement de son statut conformément à la section D;
d) tous les bovins âgés de plus de deux ans ont été testés, soit une fois au
cours des cinq premières années après l'obtention du statut conformément
au chapitre II, soit au cours des cinq premières années après l'obtention
du statut par toute autre méthode démontrant avec un taux de certitude
de 99 % que moins de 0,2 % des troupeaux ont été infectés. Toutefois,
lorsqu'aucun cas de leucose bovine enzootique n'a été enregistré dans
l'État membre ou dans la partie d'un État membre dans une proportion
d'un troupeau sur 10 000 pendant au moins trois ans, une décision peut
être prise selon la procédure de l'article 17 visant à réduire les contrôles
sérologiques de routine, pour autant que tous les bovins âgés de plus de
douze mois dans au moins 1 % des troupeaux, choisis au hasard chaque
année, aient été soumis à un test effectué conformément au chapitre II.
G. Un État membre ou une partie d'un État membre reconnu officiellement
indemne de leucose bovine enzootique voit ce statut suspendu, conformé-
ment à la procédure de l'article 17, s'il est avéré, à l'issue d'enquêtes
menées conformément au point F, qu'un changement important est intervenu
dans sa situation concernant la leucose bovine enzootique.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 45
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Ledit statut peut être rétabli conformément à la procédure prévue à l'article
17 si les critères fixés par cette même procédure sont remplis.
CHAPITRE II
ÉPREUVES POUR LA RECHERCHE DE LA LEUCOSE BOVINE
ENZOOTIQUE
La recherche de la leucose bovine enzootique est effectuée au moyen de
l'épreuve de l'immunodiffusion dans les conditions décrites aux sections A et B
ci-après ou par l'épreuve d'immuno-absorption enzymatique (Elisa) dans les
conditions décrites à la section C ci-après. La méthode d'immunodiffusion est
réservée aux tests individuels. Si les résultats des tests font l'objet d'une contes-
tation motivée, un contrôle complémentaire est pratiqué au moyen d'une épreuve
d'immunodiffusion.
A.Épreuved'immunodiffusionsurplaquedegélosepourlarecherchedela
leucose bovine enzootique
1. L'antigène à utiliser dans cette épreuve doit contenir des glycoprotéines
du virus de la leucose bovine. L'antigène doit être standardisé par
rapport à un sérum étalon (sérum El) fourni par le Statens Veterinære
Serum Laboratorium de Copenhague.
2. Les instituts d'État désignés ci-après doivent être chargés d'étalonner
l'antigène standard de travail du laboratoire par rapport au sérum étalon
officiel CEE (sérum El) fourni par le Statens Veterinære Serum Labora-
torium de Copenhague.
a) République fédérale d'Allemagne: Bundesforschungsanstalt für
Viruskrankheiten der Tiere, Tübingen;
b) Belgique: Institut national de recherches vétérinaires, Bruxelles;
c) France: Laboratoire national de pathologie bovine, Lyon;
d) Grand-duché de Luxembourg: —;
e) Italie: Istituto Zooprofilattico Sperimentale, Perugia;
f) Pays-Bas: Instituut voor Dierhonderij en Diergezondheid (ID-DLD),
Lelystad;
g) Danemark: Statens Veterinære Serum Laboratorium, Copenhague;h) Irlande: Veterinary Research Laboratory, Abbotstown, Dublin;
i) Royaume-Uni:
1. Grande-Bretagne: Veterinary Laboratory Agency, Addlestone,
Weybridge, England;
2. Irlande du Nord: Veterinary Research Laboratory, Stormont,
Belfast;
j) Espagne: Subdirección general de sanidad animal. Laboratorio de
sanidad y producción animal Algete (Madrid);
k) Portugal: Laboratório Nacional de Investigação Veterinária,
Lisbonne;
l) Grèce:Κέντρο Κτηνιατρικών Ιδρυµάτων Αθηνών, Νεαπόλεως
25, 15310 Αθήνα;
m) Autriche: Bundesanstalt für Tierseuchenbekämpfung, Mödling;
n) Finlande: eläinlääkintä- ja elintarvikelaitos, Helsinki/anstalten för
veterinärmedicin och livsmedel, Helsingfors;
o) Suède: Statens veterinärmedicinska anstalt, Uppsala;
p) République tchèque: Státní veterinární ústav Praha, Sídlištní 24/136,
165 03 Praha 6;
q) Estonie: Veterinaar- ja Toidulaboratoorium,
Kreutzwaldi 30, 51006 Tartu;
r) Chypre: National Reference Laboratory for Animal Health Veteri-
nary Services, CY-1417 Nicosia Εργαστήριο Αναφοράς για τις
Ασθένειες των Ζώων ,Κτηνιατρικές Υπηρεσίες , 1417
Λευκωσία ;
s) Lettonie: Valsts veterin ārmedic īnas diagnostikas centrs
Lejupes iela 3
LV-1076 R īga;1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 46
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▼A4
▼A4
t) Lituanie: Nacionalin ėveterinarijos laboratorija,
J. Kairi ūkščio g. 10,
LT-2021 Vilnius;
u) Hongrie: Országos Állategészségügyi Intézet (OÁI),Pf. 2., Tábornok
u. 2., H-1581 Budapest;
v) Malte: institut du pays fournisseur;
w) Pologne: Laboratorium Zakładu Biochemii Pa ństwowego Instytutu
Weterynaryjnego,
Al. Partyzantów 57, PL-24-100 Puławy;
x) Slovenie: Nacionalni veterinarski inštitut, Gerbi čeva 60,
SI-1000 Ljubljana;
y) Slovaquie: Štátny veterinárny ústav, Pod dráhami 918,
SK-960 86 Zvolen.
3. Les antigènes étalon utilisés au laboratoire doivent être présents au
moins une fois par an aux laboratoires de référence CEE énumérés au
point 2 pour y être testés par rapport au sérum étalon CEE. Indépendam-
ment de cette standardisation, l'antigène utilisé peut être étalonné
conformémentà la sect ion B.
4. L'épreuve met en œuvre les réactifs suivants:
a) antigène: l'antigène doit contenir des glycoprotéines spécifiques du
virus de leucose bovine enzootique qui a été standardisé par rapport
au sérum officiel CEE;
b) le sérum à tester;
c) un sérum de contrôle positif connu;
d) gélose;
0,8 % agar,
8,5 % NaCl,
tampon Tris 0,05 M, pH 7,2,
15 millilitres de cette gélose doivent être coulés dans une boîte de
Petri de 85 millimètres de diamètre, ce qui donne une profondeur
de 2,6 millimètres de gélose.
5. Un dispositif expérimental de sept loges exemptes d'humidité doit être
réalisé par perforation de la gélose jusqu'au fond de la plage; ce réseau
consiste en une loge centrale autour de laquelle s'ordonnent six loges
périphériques disposées en cercle.
Diamètre de la loge centrale: 4 millimètres
Diamètre des loges périphériques: 6 millimètres
Distance entre les loges centrales et périphériques: 3 millimètres.
6. La loge centrale doit être remplie de l'antigène étalon. Les loges péri-
phériques 1 et4 (schéma ci-dessous) sontremplies avec le sérum
positif connu, les loges 2, 3, 5 et 6 avec les sérums à tester. Les loges
doivent être remplies jusqu'à disparition du ménisque.
7. Les quantités obtenues sont les suivantes:
antigène: 32 microlitres,
sérum de contrôle: 73 microlitres,
sérum à tester: 73 microlitres.
8. L'incubation doit durer soixante-douze heures à température ambiante
(20-27ºC) dans une enceinte humide fermée.
9. L'épreuve peut être lue après vingt-quatre heures, puis après quarante-
huit heures, mais aucun résultat final ne peut être obtenu avant
soixante-douze heures:
a) un sérum à tester est positif s'il forme une courbe de précipitation
spécifique avec l'antigène du virus de la leucose bovine et si cette
courbe coïncide avec celle du sérum de contrôle;
b) un sérum à tester est négatif s'il ne donne pas une courbe de précipi-
tation spécifique avec l'antigène du virus de la leucose bovine et s'il
n'infléchitpas la courbe du sérum de cont rôle;1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 47
▼M42
▼M42
c) la réaction ne pourrait être considérée comme concluante si:
i) elle infléchit la courbe du sérum de contrôle vers la loge de l'anti-
gène du virus de la leucose bovine sans former une courbe de
précipitation visable avec l'antigène
ou
ii) s'il n'est pas possible de l'interpréter comme négative ou positive.
Pour les réactions non concluantes, on peut répéter l'épreuve et
utiliser du sérum concentré.
10. Toute autre configuration au tout autre dispositif de loges peut être
utilisé pour autant que le sérum E4 dilué au 1/10 dans du sérum négatif
puisse être identifié comme positif.
B.Méthode de standardisationde l'antigène
Solutions et matériels nécessaires
1. 40 millilitres de gélose à 1,6 % dans un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2
avec 8,5 % de NaCl;
2. 15 millilitres d'un sérum de leucose bovine n'ayant d'anticorps qu'à l'égard
des glycoprotéines du virus de la leucose bovine, sérum dilué au 1/10
dans un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 avec 8,5 % de NaCl;
3. 15 millilitres d'un sérum de la leucose bovine n'ayant d'anticorps qu'à
l'égard des glycoprotéines du virus de la leucose bovine, sérum dilué au
1/15 dans un tampon Tris 0,05 M/HCl, pH 7,2 avec 8,5 % NaCl;
4. quatre boîtes de Petri en matière plastique, d'un diamètre de 85 millimè-
tres;
5. un poinçon d'un diamètre de 4 à 6 millimètres;6. un antigène de référence;7. l'antigène à standardiser;8. un bain d'eau chaude (56 ºC).Mode opératoireDissoudre la gélose (1,6 %) dans le tampon Tris/HCl en chauffant avec
précaution jusqu'à 100ºC. Mettre en place le bain d'eau à 56 ºC pour environ
une heure. Placer en outre les solutions du sérum de la leucose bovine dans
le bain d'eau à 56 ºC.
Mélanger ensuite 15 millilitres de la solution de gélose à 56ºC avec les 15
millilitres de sérum de la leucose bovine (1:10), agiter rapidement et verser
dans deux boîtes de Petri, à raison de 15 millilitres par boîte. Recommencerles opérations précédemment décrites avec le sérum de la leucose bovine
dilué au 1/5.
Lorsque la gélose a durci, les trous y sont pratiqués de la manière suivante:Addition d'antigènes
i) Boîtes de Petri n
o1e t3 :
loge A = antigène de référence non dilué,
loge B = antigène de référence dilué à 1/2,loge C + E = antigènes de référence,
loge D = antigène à tester, non dilué.
ii) Boîtes de Petri n
o2e t4 :
loge A = antigène à tester, non dilué,
loge B = antigène à tester, dilué à 1/2,
loge C = antigène à tester, dilué à 1/4,loge D = antigène à tester, dilué à 1/8.
Instructions complémentaires1. L'expérience doit être effectuée avec deux degrés de dilution du sérum
(1:5 et 1:10) afin d'obtenir la précipitation optimale.
2. Si le diamètre de précipitation est trop faible pour chacun des deux
degrés de dilution, le sérum doit faire l'objet d'une dilution supplémen-
taire.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 48
▼M42
3. Si le diamètre de précipitation est excessif pour les deux degrés de dilu-
tion et si le précipité disparaît, un degré de dilution plus faible doit être
choisi pour le sérum.
4. La concentration finale de la gélose doit s'établir à 0,8 % et celle des
sérums à 5 % et à 10 % respectivement.
5. Noter les diamètres mesurés dans le système coordonné suivant. La dilu-
tion de travail est celle où on enregistre le même diamètre pour l'antigène
à tester que pour l'antigène de référence.
C.Épreuves d'immuno-absorption enzymatique (Elisa) pour la recherche
de la leucose bovine enzootique
1. Les matériels et réactifs à utiliser sont les suivants:
a) des microplaques pour phase solide, des cuvettes ou toute autre phase
solide;
b) l'antigène est fixé sur la phase solide avec ou sans l'aide d'anticorps de
captage polyclonaux ou monoclonaux. Dans le cas de la LBE, si l'anti-
gène est associé directement à la phase solide, tous les échantillons
soumis à l'examen présentant une réaction positive doivent être
examinés par rapport à l'antigène de contrôle. Celui-ci devrait êtreidentique à l'antigène examiné, sauf en ce qui concerne les antigènes
BLV. Si les anticorps de captage sont associés à la phase solide, les
anticorps ne doivent pas réagir à des antigènes autres que les antigènes
BLV;
c) le liquide biologique à examiner;
d) des contrôles positifs et négatifs correspondants;
e) le conjugué;
f) un substrat adapté à l'enzyme utilisé;
g) une solution d'obturation, si nécessaire;
h) des solutions pour la dilution des échantillons examinés, la préparation
des réactifs et le lavage;
i) un système de lecture approprié au substrat utilisé.
2.Standardisation et sensibilité du test
La sensibilité du test Elisa doit être d'un niveau tel que le sérum E4
présente une réaction positive lorsqu'il est dilué 10 fois (échantillons de
sérum) ou 250 fois (échantillons de lait) plus que la dilution obtenue à
partir d'échantillons mis en commun. Lors d'essais où les échantillons
(sérums et lait) sont examinés individuellement, le sérum E4 dilué à
raison de 1 pour 10 (sérum négatif) ou de 1 pour 250 (lait négatif) doit
présenter une réaction positive lorsqu'il est examiné dans la même dilu-
tion d'essai que celle utilisée pour les essais individuels. Les instituts
officiels indiqués au point A.2 seront responsables du contrôle de qualité
de la méthode Elisa, notamment pour déterminer, pour chaque lot de
production, le nombre d'échantillons à mettre en commun en fonction du
titre obtenu pour le sérum E4.
Le sérum E4 sera fourni par le laboratoire vétérinaire national de Copen-
hague.
3.Conditions d'utilisation du test Elisa pour la recherche de la LBE
La méthode Elisa peut être utilisée sur un échantillon de lait ou de lacto-
sérum de lait provenant d'une exploitation comprenant au moins 30 % de
vaches laitières en lactation.
En cas de recours à la faculté précitée, des mesures doivent être prises
pour assurer une correspondance entre les échantillons prélevés et les
animaux dontproviennentle laitou les sérums examinés.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 49
▼M42
ANNEXE E (I)
a)Maladies des bovins
— Fièvre aphteuse
— Rage— Tuberculose— Brucellose— Pleuropneumonie contagieuse bovine— Leucose bovine enzootique— Charbon bactéridien.
b)Maladies des porcs
— Rage
— Brucellose— Peste porcine classique— Peste porcine africaine— Fièvre aphteuse— Maladie vésiculeuse du porc— Charbon bactéridien.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 50
▼M42
ANNEXE E (II)
— Maladie d'Aujeszky
— Rhinotrachéite infectieuse bovine— Infection due à Brucella suis
— Gastro-entérite transmissible.1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 51
▼M44
ANNEXE F
Modèle 1
1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 52
▼M44
►(1)M461964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 53
▼M44
►(1)M471964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 54
▼M44
1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 55
▼M44
Modèle 2
1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 56
▼M44
►(1)M471964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 57
▼M44
1964L0432 — FR — 01.05.2004 — 009.001 — 58