2)

Ainet E 960c(i) käsitleva kande järele lisatakse järgmised kanded: „E 960c(ii) STEVIA LEHTEDEST EKSTRAHEERITUD KÕRGE PUHTUSASTMEGA A-REBAUDIOSIIDI ENSÜMAATILISE MUUNDAMISE TEEL TOODETUD M-REBAUDIOSIID Sünonüümid Määratlus Stevia lehtedest ekstraheeritud kõrge puhtusastmega A-rebaudiosiidi ensümaatilise muundamise teel saadud M-rebaudiosiid on stevioolglükosiid, mis koosneb peamiselt M-rebaudiosiidist ja sisaldab vähesel määral muid stevioolglükosiide, näiteks A-rebaudiosiidi ja D-rebaudiosiidi. M-rebaudiosiidi saadakse Stevia rebaudiana Bertoni taimest ekstraheeritud stevioolglükosiidi A-rebaudiosiidi kõrge puhtusastmega (95 % stevioolglükosiide) ekstrakti ensümaatilise biomuundamise teel geneetiliselt muundatud E. coli (pPM294, pFAF170 ja pSK401) abil toodetud UDP-glükosüültransferaasi ja sahharoosi süntaasiga, mis hõlbustavad glükosiidsideme teket glükoosi ülekandmisel sahharoosilt ja UDP-glükoosilt stevioolglükosiididele. Pärast seda, kui ensüümid on tahke ja vedela faasi eraldamise ja kuumtöötluse teel eemaldatud, kasutatakse M-rebaudiosiidi puhastamiseks selle kontsentreerimist vaigule adsorbeerimise teel ning sellele järgnevat stevioolglükosiidide ümberkristallimist; selle tulemusena saadakse lõpptoode, milles M-rebaudiosiidi sisaldus on vähemalt 95 %. E. coli (pPM294, pFAF170 ja pSK401) elujõulised rakud ja nende DNA ei tohi olla kõnealuses toidu lisaaines tuvastatavad. Keemiline nimetus M-rebaudiosiid: 13-[(2-O-β-D-glükopüranosüül-3-O-β-D-glükopüranosüül-β-D-glükopüranosüül)oksü]kaur-16-een-18-happe 2-O-β-D-glükopüranosüül-3-O-β-D-glükopüranosüül-β-D-glükopüranosüülester Molekulivalem Triviaalnimetus Valem Teisendustegur M-rebaudiosiid C56H90O33 0,25 Molekulmass ja CASi nr Triviaalnimetus CASi number Molekulmass (g/mol) M-rebaudiosiid 1220616-44–3 1 291,29 Analüütiliselt määratud sisaldus M-rebaudiosiidi sisaldus kuivaines vähemalt 95 % Kirjeldus Pulber, värvusega valgest helekollaseni, sahharoosist ligikaudu 150–350 korda magusam (sahharoosi 5 % ekvivalentlahuse puhul) Määramine Lahustuvus Vees täielikult lahustuv kuni vähelahustuv pH 4,5–7,0 (lahus osade suhtega 1: 100) Puhtus Tuhk Mitte üle 1 % Massikadu kuivatamisel Mitte üle 6 % (105 °C, 2 tundi) Lahusti jäägid Etanool: mitte üle 5 000 mg/kg Arseen Mitte üle 0,015 mg/kg Plii Mitte üle 0,2 mg/kg Kaadmium Mitte üle 0,015 mg/kg Elavhõbe Mitte üle 0,07 mg/kg Valgujäägid Mitte üle 5 mg/kg Osakeste suurus Mitte alla 74 μm [kasutatakse sõela nr 200, mille puhul osakeste piirsuurus on 74 μm] E 960c(iii) STEVIA LEHTEDEST EKSTRAHEERITUD KÕRGE PUHTUSASTMEGA A-REBAUDIOSIIDI ENSÜMAATILISE MUUNDAMISE TEEL TOODETUD D-REBAUDIOSIID Sünonüümid Määratlus Stevia lehtedest ekstraheeritud kõrge puhtusastmega A-rebaudiosiidi ensümaatilise muundamise teel saadud D-rebaudiosiid on stevioolglükosiid, mis koosneb peamiselt D-rebaudiosiidist ja sisaldab vähesel määral muid stevioolglükosiide, näiteks A-rebaudiosiidi ja M-rebaudiosiidi. D-rebaudiosiidi saadakse Stevia rebaudiana Bertoni taimest ekstraheeritud stevioolglükosiidi A-rebaudiosiidi kõrge puhtusastmega (95 % stevioolglükosiide) ekstrakti ensümaatilise biomuundamise teel geneetiliselt muundatud E. coli (pPM294, pFAF170 ja pSK401) abil toodetud UDP-glükosüültransferaasi ja sahharoosi süntaasiga, mis hõlbustavad glükosiidsideme teket glükoosi ülekandmisel sahharoosilt ja UDP-glükoosilt stevioolglükosiididele. Pärast seda, kui ensüümid on tahke ja vedela faasi eraldamise ja kuumtöötluse teel eemaldatud, kasutatakse D-rebaudiosiidi puhastamiseks selle kontsentreerimist vaigule adsorbeerimise teel ning sellele järgnevat stevioolglükosiidide ümberkristallimist; selle tulemusena saadakse lõpptoode, milles D-rebaudiosiidi ja A-rebaudiosiidi sisaldus kokku on vähemalt 95 %. E. coli (pPM294, pFAF170 ja pSK401) elujõulised rakud ja nende DNA ei tohi olla kõnealuses toidu lisaaines tuvastatavad. Keemiline nimetus D-rebaudiosiid: 13-[(2-O-β-D-glükopüranosüül-3-O-β-D-glükopüranosüül-β-D-glükopüranosüül)oksü]kaur-16-een-18-happe 2-O-β-D-glükopüranosüül-β-D-glükopüranosüülester A-rebaudiosiid: 13-[(2-O-β-D-glükopüranosüül-3-O-β-D-glükopüranosüül-β-D-glükopüranosüül)oksü]kaur-16-een-18-happe β-D-glükopüranosüülester Molekulivalem Triviaalnimetus Valem Teisendustegur D-rebaudiosiid C50H80O28 0,29 A-rebaudiosiid C44H70O23 0,33 Molekulmass ja CASi nr Triviaalnimetus CASi number Molekulmass (g/mol) D-rebaudiosiid 63279-13–0 1 291,15 A-rebaudiosiid 58543-16–1 967,01 Analüütiliselt määratud sisaldus D-rebaudiosiidi ja A-rebaudiosiidi sisaldus kuivaines kokku vähemalt 95 % Kirjeldus Pulber, värvusega valgest helekollaseni, sahharoosist ligikaudu 150–350 korda magusam (sahharoosi 5 % ekvivalentlahuse puhul) Määramine Lahustuvus Vees täielikult lahustuv kuni vähelahustuv pH 4,5–7,0 (lahus osade suhtega 1: 100) Puhtus Tuhk Mitte üle 1 % Massikadu kuivatamisel Mitte üle 6 % (105 °C, 2 tundi) Lahusti jäägid Etanool: mitte üle 5 000 mg/kg Arseen Mitte üle 0,015 mg/kg Plii Mitte üle 0,2 mg/kg Kaadmium Mitte üle 0,015 mg/kg Elavhõbe Mitte üle 0,07 mg/kg Valgujäägid Mitte üle 5 mg/kg Osakeste suurus Mitte alla 74 μm [kasutatakse sõela nr 200, mille puhul osakeste piirsuurus on 74 μm] E 960c(iv) STEVIA LEHTEDEST EKSTRAHEERITUD KÕRGE PUHTUSASTMEGA STEVIOSIIDI ENSÜMAATILISE MUUNDAMISE TEEL TOODETUD AM-REBAUDIOSIID Sünonüümid Määratlus Stevia lehtedest ekstraheeritud kõrge puhtusastmega steviosiidi ensümaatilise muundamise teel saadud AM-rebaudiosiid on stevioolglükosiid, mis koosneb peamiselt AM-rebaudiosiidist ja sisaldab vähesel määral muid stevioolglükosiide, näiteks steviosiidi ja E-rebaudiosiidi. AM-rebaudiosiidi saadakse Stevia rebaudiana Bertoni taimedest ekstraheeritud stevioolglükosiidi steviosiidi kõrge puhtusastmega (95 % stevioolglükosiide) ekstrakti ensümaatilise biomuundamise teel geneetiliselt muundatud E. coli (pPM294, pFAF170 ja pSK401) abil toodetud UDP-glükosüültransferaasi ja sahharoosi süntaasiga, mis hõlbustavad glükosiidsideme teket glükoosi ülekandmisel sahharoosilt ja UDP-glükoosilt stevioolglükosiididele. Pärast seda, kui ensüümid on tahke ja vedela faasi eraldamise ja kuumtöötluse teel eemaldatud, kasutatakse AM-rebaudiosiidi puhastamiseks selle kontsentreerimist vaigule adsorbeerimise teel ning sellele järgnevat stevioolglükosiidide ümberkristallimist; selle tulemusena saadakse lõpptoode, milles AM-rebaudiosiidi sisaldus on vähemalt 95 %. E. coli (pPM294, pFAF170 ja pSK401) elujõulised rakud ja nende DNA ei tohi olla kõnealuses toidu lisaaines tuvastatavad. Keemiline nimetus AM-rebaudiosiid: 13-[(2-O-β-D-glükopüranosüül-β-D-glükopüranosüül)oksü]kaur-16-een-18-happe 2-O-β-D-glükopüranosüül-3-O-β-D-glükopüranosüül-β-D-glükopüranosüülester Molekulivalem Triviaalnimetus Valem Teisendustegur AM-rebaudiosiid C50H80O28 0,29 Molekulmass ja CASi nr Triviaalnimetus CASi number Molekulmass (g/mol) AM-rebaudiosiid 2222580-26-7 1 291,15 Analüüs AM-rebaudiosiidi sisaldus kuivaines vähemalt 95 % Kirjeldus Pulber, värvusega valgest helekollaseni, sahharoosist ligikaudu 150–350 korda magusam (sahharoosi 5 % ekvivalentlahuse puhul) Määramine Lahustuvus Vees täielikult lahustuv kuni vähelahustuv pH 4,5–7,0 (lahus osade suhtega 1: 100) Puhtus Tuhk Mitte üle 1 % Massikadu kuivatamisel Mitte üle 6 % (105 °C, 2 tundi) Lahusti jäägid Etanool: mitte üle 5 000 mg/kg Arseen Mitte üle 0,015 mg/kg Plii Mitte üle 0,2 mg/kg Kaadmium Mitte üle 0,015 mg/kg Elavhõbe Mitte üle 0,07 mg/kg Valgujäägid Mitte üle 5 mg/kg Osakeste suurus Mitte alla 74 μm [kasutatakse sõela nr 200, mille puhul osakeste piirsuurus on 74 μm]“