PREGUNTA ESCRITA E-0316/03

de Chris Davies (ELDR) a la Comisión

(10 de febrero de 2003)

Asunto: Estudios de validación sin recurso a la experimentación animal

En julio de 2002, el CEVMA(1) elaboró una lista de 13 ensayos que no necesitan el recurso a la experimentación animal y que serán técnicamente aplicables en 2003 en el marco de los estudios de prevalidación y de validación:

- Método cutáneo que permite reproducir un tipo de piel humana

- Ensayo funcional de integridad cutánea

- Estudios QSAR o de resonancia magnética sobre la irritación ocular

- Estudios QSAR por medio de un sistema DEREK sobre la toxicidad sistémica aguda

- Pruebas biocinéticas in vitro sobre el metabolismo

- Cultivo biocinético en solución de células hepáticas humanas

- Cultivos de células neuronales y de líneas celulares de neuroblastomas modelizadas en tres dimensiones que sirven para el estudio de la toxicidad del sistema/órgano objetivo (neurotoxicidad)

- Cultivos de células neuronales y gliales que sirven para el estudio de la neurotoxicidad y de la toxicidad de los órganos objetivo

- Ensayo in vitro del micronúcleo sobre la genotoxicidad y el potencial genotóxico de la sustancia cancerígena

- Ensayo de líneas celulares de Leydig sobre la toxicidad reproductiva (fertilidad masculina)

- Sistemas celulares que sirven para el estudio de los enlaces a los receptores en el marco de la perturbación endocrina

- Estudios QSAR sobre los enlaces a los receptores en el marco de la perturbación endocrina.

¿Puede confirmar la Comisión que está en curso un estudio de prevalidación o de validación para cada uno de estos ensayos? En caso negativo, ¿puede explicar la Comisión estos retrasos y cuándo se puede esperar que comiencen?

(1) Centro Europeo para la Validación de Métodos Alternativos, en su informe Alternative (non animal) Methods for Chemicals Testing: Current Status and Future Prospects.

Respuesta del Sr. Busquin en nombre de la Comisión

(27 de febrero de 2003)

En julio de 2002, el CEVMA(1) elaboró una lista de 13 ensayos que no necesitan el recurso a la experimentación animal y que serán técnicamente aplicables en 2003 en el marco de los estudios de prevalidación y de validación:

- Método cutáneo que permite reproducir un tipo de piel humana.

- Ensayo funcional de integridad cutánea.

Validación en curso de los ensayos del método cutáneo de reproducción de piel humana (Epiderm y Episkin) y del ensayo funcional de integridad cutánea (SIFT) para irritaciones cutáneas graves; el proyecto está a la espera de culminar el procedimiento administrativo (licitación).

- Estudios sobre toxicidad sistémica aguda distintos de los QSAR/DEREK.

En 2002, el CEVMA inició un estudio conjunto de validación con el ICCVAM (American Interagency Coordinating Committee on the Validation of Alternative Methods).

El objetivo principal de este estudio es evaluar la pertinencia de dos ensayos de citotoxicidad basal, el ensayo de citotoxicidad por captación de colorante vital rojo neutro en células BALB/c 3T3 y el ensayo de citotoxicidad por captación de colorante vital rojo neutro en queratinocita humana normal, para la mejora y reducción de la experimentación con animales en los ensayos de toxicidad oral aguda.

Está previsto concluir el estudio para finales de 2003 o principios de 2004.

- Pruebas biocinéticas in vitro sobre el metabolismo.

Fase I: En 2003 se iniciarán estudios de prevalidación con fracciones subcelulares de hepatocitos humanos o con líneas celulares obtenidas por ingeniería genética que expresen genes humanos para determinar los efectos por mediación metabólica.

Fase II: Concluido el estudio de prevalidación de modelos in vitro para la evaluación de los efectos del polimorfismo enzimático en el metabolismo.

- Cultivo biocinético en solución de células hepáticas humanas.

Fase II: En 2003 se inicia el estudio de prevalidación de los cultivos en solución de células hepáticas humanas para la evaluación de la inducción de enzimas clave de biotransformación.

- Cultivos de células neuronales en tres dimensiones para el estudio de la toxicidad del sistema/órgano objetivo (neurotoxicidad).

En 2003 se han puesto en marcha estudios de prevalidación con cultivos de células en 3D (agregados). Se ha establecido el modelo.

- Líneas celulares de neuroblastomas.

El CEVMA está evaluando el modelo en la actualidad. Fase I: en 2003 se inicia la prevalidación de las líneas celulares de neuroblastomas.

- Cultivos de células neuronales y gliares que sirven para el estudio de la neurotoxicidad y de la toxicidad de los órganos objetivo.

El modelo se está evaluando en el CEVMA. Fase I: en 2003 se inician los estudios de prevalidación con cultivos mixtos de células neuronales y gliares.

- Ensayo in vitro del micronúcleo sobre la genotoxicidad y el potencial genotóxico de la sustancia cancerígena.

El ensayo ha sido ampliamente utilizado por parte de los socios del CEVMA (Universidad Autónoma de Barcelona y Universidad de Pisa) dentro del contrato del estudio sobre el Ensayo de transformación celular. El contrato finaliza el presente mes y el 26 de febrero se celebrará una reunión final con ambos socios. Se discutirá una posible validación.

- Ensayo de líneas celulares de Leydig sobre la toxicidad reproductiva (fertilidad masculina).

El contrato negociado no pudo financiarse en 2002 y está previsto para 2003. Pasará a formar parte de un Proyecto integrado de toxicidad reproductiva gestionado por el CEVMA.

- Sistemas celulares para el estudio de los enlaces con los receptores en el marco de la perturbación endocrina.

- Estudios QSAR sobre los enlaces a los receptores en el marco de la perturbación endocrina.

El CEVMA se ha unido a una iniciativa de validación de la Organización para la Cooperación y el Desarrollo Económicos (OCDE) cuya primera reunión está prevista para marzo de 2003.

- Toxicidad sistémica aguda QSAR/DEREK.

- Estudios QSAR de resonancia magnética sobre irritación ocular.

A través de los esfuerzos conjuntos de la Oficina Europea de las Sustancias Químicas y del CEVMA, el Centro Común de Investigación (CCI) tiene previsto validar en lo que queda de año relaciones cuantitativas estructura/actividad (QSAR) para algunos puntos finales. No obstante, el plan de estudios de validación de análisis QSAR está pendiente de los resultados de las conversaciones que se están desarrollando en la actualidad a nivel de la OCDE sobre criterios de aceptabilidad de análisis QSAR reconocidos internacionalmente. Está previsto establecer un conjunto mínimo de criterios para evaluar si los análisis QSAR están listos para la validación (equivalente a los criterios del desarrollo de pruebas del CEVMA para el inicio de prevalidación de los ensayos in vitro), y un conjunto de criterios adicionales que se aplican al final del proceso de validación de los análisis QSAR para juzgar su validez científica. Por lo tanto, los análisis QSAR que sean sometidos a la validación deberán cumplir ciertos criterios de aceptabilidad. Por todo ello, es probable que el plazo para la validación de los análisis QSAR se revise de acuerdo con una evaluación en profundidad de QSAR específicos, que no se llevó a cabo durante la preparación del informe del CEVMA.

(1) European Centre for the Validation of Alternative Methods, in its report Alternative (Non-animal) Methods for Chemicals Testing: Current Status and Future Prospects.