2002D0225 — ES — 16.03.2002 — 000.001 — 1
Estedocumentoesuninstrumentodedocumentaciónynocomprometelaresponsabilidaddelasinstituciones
►B DECISIÓNDELACOMISIÓN
de15demarzode2002
por la que se establecen normas detalladas para la aplicación de la Directiva 91/492/CEE del
Consejo en lo que se refiere a los niveles máximos y los métodos de análisis de determinadas
biotoxinasmarinasenmoluscosbivalvos,equinodermos,tunicadosygasterópodosmarinos
[notificada con el número C(2002) 1001]
(TextopertinenteaefectosdelEEE)
(2002/225/CE)
(DO L 75 de 16.3.2002, p. 62)
Rectificada por:
►C1Rectificación, DO L 46 de 20.2.2003, p. 32 (2002/225/CE)
▼B
DECISIÓNDELACOMISIÓN
de15demarzode2002
porlaqueseestablecennormasdetalladasparalaaplicacióndela
Directiva91/492/CEEdelConsejoenloqueserefierealosnivelesmáximos y los métodos de análisis de determinadas biotoxinasmarinas en moluscos bivalvos, equinodermos, tunicados y gasteró-
podosmarinos
[notificada con el número C(2002) 1001]
(TextopertinenteaefectosdelEEE)
(2002/225/CE)
LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS,
Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Europea,
Vista la Directiva 91/492/CEE del Consejo, de 15 de julio de 1991, por
la que se fijan las normas sanitarias aplicables a la producción y puestaen el mercado de moluscos bivalvos vivos (
1), cuya última modifica-
ción la constituye la Directiva 97/79/CE (2), y, en particular, los
puntos 3 y 5 del capítulo V de su anexo,
Considerando lo siguiente:
(1) El punto 7 del capítulo V del anexo de la Directiva 91/492/CEE
establece que los métodos habituales de análisis biológico nodeben dar reacción positiva respecto de la presencia de toxinadiarreica de los moluscos (DSP, «Diarrhetic Shellfish Poison»)
en las partes comestibles de los moluscos (cuerpo entero o cual-
quier parte comestible por separado).
(2) Está científicamente demostrado que algunas biotoxinas marinas,como las del grupo de la intoxicación diarreica (DSP) [ácidoocadaico (OA) y dinofisistoxinas (DTX)], así como las yesoto-
xinas (YTX), las pectenotoxinas (PTX) y los azaspirácidos
(AZA), constituyen un peligro grave para la salud humanacuando están presentes por encima de determinados límites enmoluscos bivalvos, equinodermos, tunicados o gasterópodosmarinos.
(3) Los recientes estudios científicos hacen posible ahora establecerniveles máximos y métodos de análisis de esas biotoxinas.
(4) Los Estados miembros deben armonizar y aplicar nivelesmáximos y métodos de análisis a fin de proteger la salud
humana.
(5) Además de los métodos de análisis biológicos, deben aceptarse
métodos de detección alternativos, como son los métodosquímicos y los ensayos in vitro , si se demuestra que son tan
eficaces como el método biológico y que su aplicación propor-
ciona un nivel equivalente de protección de la salud pública.
(6) Los niveles máximos propuestos se basan en datos provisionalesy, porlo tanto, deben volvera evaluar se cuando se disponga de
nuevas pruebas científicas.
(7) Las medidas previstas en la presente Decisión se ajustan al
dictamen del Comité veterinario permanente.
HA ADOPTADO LA PRESENTE DECISIÓN:
Artículo 1
La presente Decisión establece los niveles máximos de las biotoxinas
marinas del grupo de la intoxicación diarreica (DSP) (ácido ocadaicoy dinofisistoxinas), yesotoxinas, pectenotoxinas y azaspirácidos, así2002D0225 — ES — 16.03.2002 — 000.001 — 2
(1) DO L 268 de 24.9.1991, p. 1.
(2) DO L 24 de 30.1.1998, p. 31.
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como los métodos de análisis que deben emplearse para su detección.
Se aplica a los moluscos bivalvos, los equinodermos, los tunicados ylos gasterópodos marinos destinados al consumo humano directo o a
una transformación previa al consumo.
Artículo 2
El nivel máximo total de ácido ocadaico, dinofisistoxinas y pectenoto-
xinas en los animales contemplados en el artículo 1 (el cuerpo entero ocualquier parte comestible por separado) será de 160 µg de equiva-
lentes de ácido ocadaico/kg. Los métodos de análisis se establecen enel anexo.
Artículo 3
El nivel máximo de yesotoxinas en los animales contemplados en el
artículo 1 (el cuerpo entero o cualquier parte comestible por separado)será de 1 mg de equivalente de yesotoxina/kg. Los métodos de análisis
se establecen en el anexo.
Artículo 4
El nivel máximo de azaspirácidos en los animales contemplados en el
artículo 1 (el cuerpo entero o cualquier parte comestible por separado)será de 160 µg de equivalentes de azaspirácido/kg. Los métodos de
análisis se establecen en el anexo.
Artículo 5
Cuando los resultados de los análisis efectuados demuestren que hay
discrepancias entre los diferentes métodos, el bioensayo en ratonesdeberá considerarse el método de referencia.
Artículo 6
Los destinatarios de la presente Decisión serán los Estados miembros.2002D0225 — ES — 16.03.2002 — 000.001 — 3
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ANEXO
MÉTODOSDEDETECCIÓN
Métodosbiológicos
Para la detección de las toxinas mencionadas en el artículo 1, pueden utilizarse
una serie de bioensayos en ratones que varían según la porción objeto de ensayo
(el hepatopáncreas o el cuerpo entero) y los disolventes que se emplean en las
fases de extracción y purificación. De estos últimos dependen también la sensi-
bilidad y la selectividad, lo cual debe tenerse en cuenta a la hora de decidir el
método que se va a utilizar, a fin de cubrir toda la gama de toxinas.
Para la detección de ácido ocadaico, dinofisistoxinas, pectenotoxinas y yesoto-
xinas puede utilizarse un único bioensayo en ratones con extracción de
acetona, que puede completarse, si es necesario, con fases de separación
líquido-líquido con acetato de etilo y agua o con diclorometano y agua, a fin
de eliminar las posibles interferencias. La detección de azaspirácidos a los
niveles reglamentarios por medio de este procedimiento requiere el uso del
cuerpo entero como porción de ensayo.
En cada ensayo deben emplearse tres ratones. La muerte de dos de ellos en las
veinticuatro horas posteriores a la inoculación en cada uno de los tres ratones de
un extracto equivalente a 5 g de hepatopáncreas o 25 g de cuerpo entero debe
considerarse un resultado positivo de la presencia de una o más de las toxinas
mencionadas en el artículo 1 a niveles superiores a los establecidos en los
artículos 2, 3 y 4.
El bioensayo en ratones con extracción de acetona seguida de separación
líquido-líquido con éter dietílico puede utilizarse para ►C1detectarácido
ocadaico, dinofisistoxinas, pectenotoxinas y azaspirácidos, pero no yesotoxinas,
pues durante la fase de separación ◄pueden producirse pérdidas de ►C1de
estas últimas toxinas ◄. Para cada ensayo deben emplearse tres ratones. La
muerte de dos de ellos en las 24 horas posteriores a la inoculación en cada uno
de los tres ratones de un extracto equivalente a 5 g de hepatopáncreas o 25 g de
cuerpo entero ►C1debe considerarse un resultado positivo de la presencia de
ácido ocadaico, dinofisistoxinas, pectenotoxinas y azaspirácidos a niveles supe-
riores a los establecidos en los artículos 2 y 4. ◄
El bioensayo en ratas permite detectar ácido ocadaico, dinofisistoxinas y azas-
pirácidos. Para cada ensayo deben emplearse tres ratas. Una reacción diarreica
en cualquiera de las tres ratas se considera un resultado positivo de la presencia
de ácido ocadaico, dinofisistoxinas y azaspirácidos a niveles superiores a los
establecidos en los artículos 2 y 4.
Métodosdedetecciónalternativos
Como métodos alternativos a los de análisis biológicos pueden utilizarse la
cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) con detección fluorimétrica, la
cromatografía líquida (LC) — espectometría de masa (MS) o ensayos inmuno-
lógicos y funcionales como el de inhibición de fosfatasas, ►C1a condición de
que, porsepar ado o combinados, sean, al menos igual de eficaces que los
métodos biológicos que su aplicación proporcione un nivel equivalente de
protección de la salud pública, y que puedan detectar como mínimo los
siguientes análogos: ◄
— ácido ocadaico y dinofisistoxinas; para detectar la presencia de DTX3 puede
ser necesaria una fase de hidrólisis,
— pectenotoxinas: PTX1 y PTX2,
— yesotoxinas: YTX, 45 OH YTX, Homo YTX y 45 OH Homo YTX,
— azaspirácidos: AZA1, AZA2 y AZA3.
Si se descubren nuevos análogos importantes en relación con la salud pública,
►C1deberán incluirse en los análisis. ◄Sin embargo, habrá que disponer de
patrones antes de poder hacer análisis químicos. La toxicidad total se calculará
mediante factores de conversión basados en los datos sobre la toxicidad de cada
toxina.
Las características de resolución de estos métodos deben definirse tras ser vali-
dados conforme a un protocolo acordado a nivel internacional.2002D0225 — ES — 16.03.2002 — 000.001 — 4