1973L0046 — ES — 26.05.1999 — 004.001 — 1
Estedocumentoesuninstrumentodedocumentaciónynocomprometelaresponsabilidaddelasinstituciones
►B CUARTADIRECTIVADELACOMISIÓN
de5dediciembre de1972
porlaquesedeterminanmétodosdeanálisiscomunitariosparaelcontroloficialdelosalimentos
paraanimales
(73/46/CEE)
(DO L 83 de 30.3.1973, p. 21)
Modificada por:
Diario Oficial
nopágina fecha
►M1Directiva 81/680/CEE de la Comisión de 30 de julio de 1981 L 246 32 29.8.1981
►M2Directiva 92/89/CEE de la Comisión de 3 de noviembre de 1992 L 344 35 26.11.1992
►M3Directiva 98/54/CE de la Comisión de 16 de julio de 1998 L 208 49 24.7.1998
►M4Directiva 1999/27/CE de la Comisión de 20 de abril de 1999 L 118 36 6.5.1999
▼B
CUARTADIRECTIVADELACOMISIÓN
de5dediciembre de1972
por la que sedeterminanmétodos de análisis comunitarios para el
controloficial delosalimentosparaanimales
(73/46/CEE)
LA COMISIÓN DE LAS COMUNIDADES EUROPEAS,
Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Económica Europea,Vista la Directiva del Consejo, de 20 de julio de 1970, relativa a la
introducción de métodos de toma de muestras y de análisis comunita-
riospara el control oficial de losalimentospara aninales(
1), modificada
por la Directiva 72/275/CEE de 20 de julio de 1972(2), y, en particular,
su artículo 2,
Considerando que la Directiva antes mencionada pré que los controles
oficiales de los alimentos para animales dirigidos a comprobar si serespetan las condiciones establecidas en virtud de las disposicioneslegales, reglamentarias o administrativas referentes a la calidad y al a
composición de los mencionados alimentos se efectúen según los
métodos de toma de muestras y de análisis comunitarios;
Considerando que las Directivas n
o71/250/CEE, no71/393/CEE y no72/
199/CEE de la Comisión, de 15 de junio de 1971(3), 18 de noviembre
de 1971(4) y 27 de abril de 1972(5), respectivamente, han establecido
ya determinados métodos de análisis comunitariós; que, habida cuenta
del grado de avance de los trabajos efectuados desde entonces, es
conveniente establecer una cuarta serie de métodos;
Considerando que las medidas previstas en la presente Directiva se
ajustan al dictamen del Comité permanente de la alimentación animal;
HA ADOPTADO LA PRESENTE DIRECTIVA:
Artículo 1
Los Estados miembros dispondrán que los análisis para los controles
oficiales de los alimentos para animales, en lo que se refiere a loscontenidos en humedad de las grasas y aceites animales y vegetales,así como a los contenidos en magnesio y en celulosa bruta de los
alimentos, se efectuarán según los métodos descritos en el Anexo I de
la presente Directiva.
Artículo 3
LosEs tadosmiembrosaplicarán a mástardar el 1 de enero de 1974,
las disposiciones legales, reglamentarias o administrativas necesarias
para cumplir las disposiciones de la presente Directiva. Informarán deello inmediatamente a la Comisión.
Artículo 4
Los destinatarios de la presente Directiva serán los Estados miembros,1973L0046 — ES — 26.05.1999 — 004.001 — 2
(1)D O noL 170 de 3. 8. 1970, p. 2.
(2)D O noL 171 de 29. 7. 1972, p. 39.
(3)D O noL 155 de 12. 7. 1971, p. 13.
(4)D O noL 279 de 20. 12. 1971, p. 7.
(5)D O noL 123 de 29. 5. 1972, p. 6.▼M1
▼M4
▼B
▼B
ANEXO I
1.DETERMINACIÓNDELAHUMEDADENLASGRASASYACEITES
ANIMALESYVEGETALES
1.Objetivoycampodeaplicación
El método permite determinar el contenido en humedad (agua y otrasmate-
rias volátiles) de las grasas y aceites animales y vegetales.
2.Principio
La muestra se somete a desecación a 103 ºC hasta que cese la disminución
de la masa. La parte de masa se determina pro pesada.
3.Equipo
3.1. Recipiente de fondo plano, de material resistente a la corrosión,
diámetro: 8 a 9 cm altura: 3 cm aproximadamente
3.2. Termómetro de mercurio, de bulba reforzada, y cámara de dilatación en
la extremidad superior, graduado de 80 ºC aproximadamente a 110 ºC al
menos, longitud: 10 cm aproximadamente
3.3. Baño de arena o placa calorífera eléctrica3.4. Desecador, conteniendo un deshidratante eficaz3.5. Balanza analítica
4.Métodooperatorio
Pesar, con precisión de 1 mg, 20 g aproximadamente de la muestra homoge-
neizada en el recipiente (3.1) seco y tarado, conteniendo el termómetro (3.2).
Calentar sobre el baño de arena o la placa calorífera (3.3), agitando constan-
temente con la ayuda de un termómetro, de forma que la temperatura alcance
90 ºC en 7 minutosaproximadamente.
Reducir la intensidad del calentamiento siguiendo la frecuencia con la que
ascienden las burbujas desde el fondo del recipiente. La temparatura no
debe exeder de 105 ºC. Continuar agitando, rozando el fondo del recipiente,
hasta que cese la formación de burbujas.
Para garantizar la completa eliminación de la humedad, repetir variasvecese
calentamiento a 103 ºC ± 2 ºC, refrigerando a 93 ºC entre los sucesivoscalentamientos. Dejar refrigerar a continuación en el desecador (3.4) hasta
la temperatura ambiente y pesar. Repetir esta operación hasta que la pérdida
de masa entre dos pesadas sucesivas no exceda en más de 2 mg.
N.B.Un aumento de la masa de la muestra después de un calentamiento
repetido indica una oxidación de la grasa. En este caso, calcular el
resultado a partir de la pesada efectuada inmediatamente antes del
comienzo del aumento de masa.
5.Cálculodelosresultados
El contenido en porcentaje de la muestra viene dado por la fórmula:
M
1/C0M2 ðÞ /C1100
Mo
en la que:
Mo= masa, en gramos, de la toma de muestra,
M1= masa, en gramos, del recipiente con su contenido, antes de calenta-
miento,
M2= masa, en gramos, del recipiente con su contenido, después del calen-
tamiento.
Los resultados inferiores a 0.05 % deben referirse por la mención «menos del
0,05 %».
RepetibilidadLa diferencia entre losres ultadosde dosdeterminacionesparalelasefectuadas
sobre una misma muestra no debe exceder del 0,05 % en valor absoluto.1973L0046 — ES — 26.05.1999 — 004.001 — 3
▼B
2.DETERMINACIÓNDELMAGNESIO
— por espectrofotometría de absorción atómica —
1.Objetivoyámbitodeaplicación
El método permite determinar el magnesio en la alimentación animal. Está
especialmente indicado para determinar los contenidos en magnesio infe-
rioresal 5 %.
2.Principio
La muestra se incinera y se pone en solución en el ácido clorhídrico diluido.
Si no contiene sustancias orgánicas, se pone directamente en solución en el
ácido clorhídrico. La solución es diluida y el contenido en magnesio se deter-
mina por espectrofotometría de absorción atómica a 285,2 nm, por
comparación con lass olucionesde calibrado.
3.Reactivos
3.1. Acido clorhídrico p.a., d: 1,16
3.2. Acido clorhídrico p.a., d: 1,193.3. Magnesio, en cinta o hilo, o sulfato de magnesio MgSO
4.7 H2O p.a.
secado en vacío a la temperatura ambiente.
3.4. Solución de sal de estroncio (cloruro o nitrato) al 2,5 por ciento (p/v) de
estroncio (= 76,08 g de SrCl2.6 H2O p. a./1 o 60,38 g de Sr (NO3)2p. a. /
1)
3.5. Solución de calibrado de magnesio: pesar, con precisión de 1 mg, 1 g de
magnesio (3.3), separando previamente y con cuidado de su película de
ócido, o una cantidad correspondiente de sulfato de magnesio (3.3),
introducirlo en un matriz aforado de 1 000 ml, añadir 80 ml de ácido
clorhídrico (3.1), dejar disolver y completar a 1 000 ml con agua, 1 ml
de dicha solución contiene 1 000 mg de magnesio
4.Equipo
4.1. Crusoles de incineración de platino, cuarzo o porcelana4.2. Horno de barro eléctrico, con termostato
4.3. Espectrofotómetro de absorción atómica
5.Métodooperatorio
5.1.Puesta en solución
5.1.1.Alimentos constituidos exclusivamente por sustancias minerales
Pesar con precisión de 1 mg, 5 g de la muestra e introducirlos en
un matraz aforado de 500 ml con 250 a 300 ml de agua. Añadir
40 ml de ácido clorhídrico (3.1), llevar a ebullición y mantener el
líquido en ebullición lenta durante 30 minutos. Dejar refrigerar,
completar el volumen mediante agua, homogeneizar y filtrar en
un vaso seco a través de un filtro de pliegue seco. Rechazar los
30 primerosml del filtrado.
En presencia de silicio, tratar 5 g de la muestras mediante una
cantidad suficiente (15 a 30 ml) de ácido clorhídrico (3.2) y
evaporar en seco sobre un baño de agua. Continuar tal como se
indica en 5.1.2, a partir de la tercera frase.
5.1.2.Alimentos constituidos esencialmente por sustancias minerales
Pesar, con precisión de 1 mg, 5 mg de la muestra en un crisol de
incineración e incinerar a 550 ºC en el horno de barro hasta la
obtención de cenizasexentasde partículascarbónicas . Para
eliminar el silicio, añadir a las cenizas una cantidad suficiente
(15 a 30 ml) de ácido clorhídrico (3.2) y evaporar en seco sobre
un baño de agua. Secar a continuación durante una hora en la
estufa a 105 ºC. Volver a tomar el residuo mediante 10 ml de
ácido clorhídrico (3.1) y transferir con la ayuda de agua caliente
a un matraz aforado de 500 ml. Llevar a ebullición, dejar refri-
gerar y completar el volumen mediante agua. Homogeneizar y
filtrar en un vaso seco a través de un filtro de pliegues seco.
Rechazar los30 primerosml del filtrado.1973L0046 — ES — 26.05.1999 — 004.001 — 4
▼B
5.1.3.Alimentos formados esencialmente por sustancias orgánicas
Pesar, con precisión de 1 mg, 5 g de la muestra en un crisol de
incineración e incinerar en un horno de barro, hasta la obtención
de cenizas exentas de partículas carbonosas. Recoger las cenizas
mediante 5 ml de ácido clorhídrico (3.2), evaporar en seco sobre
un baño de agua y secar a continuación durante una hora en la
estufa a 105 ºC, para insolubilizar el silicio. Recoger el residuo
mediante 5 ml de ácido clorhídrico (3.1), transvasar con ayuda
de agua caliente en un matraz aforado de 250 ml, llevar a ebulli-
ción, dejar refrigerar y completar el volumen mediante agua.
Homogeneizar y filtrar en un vaso seco a través de un filtro de
plieguess eco. Rechazar los30 primerosmilímetrosdel filtrado.
5.2.Medición de la absorción atómica
Preparar, diluyendo la solución de calibrado (3.5) mediante agua, al
menos 5 soluciones de referencia de concentraciones crecientes, esco-
gidasen función de la zona de medida óptima del es pectrofotómetro.
Añadir a cada solución 10 ml de solución de sal de estroncio (3.4) y
completar a continuación al volumen de 100 ml mediante agua.
Diluir mediante agua una partate alícuota del filtrado obtenido en 5.1.1,
5.1.2 o 5.1.3 de forma que se obtenga una concentración en magnesio
comprendida en loslímitesde concentración de lass olucionesde refe-
rencia. La concentración en ácido clorhídrico de dicha solución no debe
exceder de 0,4 N. Añadir 10 ml de solución de sal de estroncio (3.4) y
completar a continuación al volumen a 100 ml mediante agua.
Medir la absorción de la solución que haya de determinarse y de las
soluciones de referencia mediante la longitud de onda de 285,2 nm.
6.Cálculosdelosresultados
Calcular la cantidad de magnesio de la muestra a partir de las soluciones de
referencia. Expresar el resultado en porcentaje de la muestra.
RepetibilidadLa diferencia entre losres ultadosde dosdeterminacionesparalelasefectuadas
sobre la misma muestra no debe exceder del 5 por ciento en valor relativo.
3.DETERMINACIÓNDELAFIBRABRUTA
1.Objetoycampodeaplicación
Este método permite determinar en los piensos las substancias orgánicas
libres de grasas e insolubles en medio ácido y alcalino, convencionalmente
denominadasfibra bruta.
2.Principio
La muestra, en su caso desengrasada, se trata sucesivamente con soluciones
en ebullición de ácido sulfúrico e hidróxido de potasio, de concentraciones
determinadas. Se separa el residuo por filtración mediante filtro de vidrio
sinterizado, se lava, se seca, se pesa y se calcina a una temperatura compren-
dida entre 475 y 500 ºC. La pérdida de peso debida a la calcinación
corresponde a la fibra bruta de la muestra de ensayo.
3.Reactivos
3.1. Ácido sulfúrico, c = 0,13 mol/l.3.2. Agente antiespumante (por ejemplo, n-octanol).3.3. Coadyuvante de filtración Celite 545 o equivalente, calentado a 500 ºC
durante cuatro horas(véas e 8.6).
3.4.Acetona.
3.5. Éter de petróleo ligero — intervalo de ebullición 40-60 ºC.
3.6. Ácido clorhídrico, c = 0,5 mol/l.3.7. Solución de hidróxido de potasio, c = 0,23 mol/l.1973L0046 — ES — 26.05.1999 — 004.001 — 5
▼M2
▼M2
4.Aparatos
4.1. Aparatos de calentamiento para la digestión con ácido sulfúrico o solu-
ción de hidróxido de potasio, equipado con un soporte para el crisol
filtrante (4.2) y con un tubo de salida provisto de un grifo para hacer
el vacío y evacuar el líquido y, en su caso, con aire comprimido para
aplicar contrapresión. Cada día, antes de su utilización, calentarlo
previamente con agua hirviendo durante cinco minutos.
4.2. Crisol filtrante de vidrio, de 50 ml, con una placa filtrante de vidrio
sinterizado fundido, de porosidad comprendida entre 40 y 90 µm. Antes
de utilizarlo por primera vez, calentar a 500 ºC durante algunosminutos
y enfriar (8.6).
4.3. Columna resistente a la ebullición, de 270 ml como mínimo, con
condensador de reflujo.
4.4. Estufa de secado con termostato.
4.5. Horno de mufla, con termostato.4.6. Aparato de extracción en frío, compuesto por un soporte para el crisol
filtrante (4.2) y un tubo de descarga provisto de un grifo para hacer
vacío y evacuar el líquido.
4.7. Juntasde conexión para unir el aparato de calentamiento (4.1), el cris ol
(4.2) y la columna (4.3) y conectar el extractor de frío (4.6) y el crisol.
5.Procedimiento
Pesar 1 g de muestra con una aproximación de 1 mg, en su caso previa
preparación (véase 8.1, 8.2 y 8.3), y ponerlo en un crisol (4.2) y añadir un
gramo de coadyuvante de filtración (3.3).
Acoplar el aparato de calentamiento (4.1) y el crisol filtrante (4.2), y unir a
continuación la columna (4.3) y el crisol. Poner en el vaso 150 ml de ácido
sulfúrico (3.1) calentado previamente hasta el punto de ebullición y añadir
algunas gotas de antiespumante (3.2) en caso necesario. Llevar el líquido a
ebullición en 5 ± 2 minutosy dejar hervir enérgicamente durante 30 minutos
exactos.
Abrir el grifo del tubo de descarga (4.1) y filtrar al vacío el ácido sulfúrico a
través del crisol filtrante. Lavar tres veces al vacío el residuo del crisol
filtrante utilizando 30 ml de agua hirviendo cada vez. Después de cada
lavado, secar el residuo del filtro de aspiración.
Cerrar el grifo de salida y añadir a la columna 150 ml de solución de hidró-
xido de potasio (3.7) hirviendo. Añadir unas gotas de antiespumante (3.2).
Llevar el líquido a ebullición en 5 ± 2 minutosy dejar hervir enérgicamente
durante 30 minutos exactos. Filtrar el residuo y lavar tal como se ha indicado
para el tratamiento con ácido sulfúrico.
Después del último lavado, secar el residuo por aspiración, desconectar el
crisol y su contenido y conectarlo al extractor de frío (4.6). Aplicar vacío y
lavar tres veces el residuo, en el crisol utilizando 25 ml de acetona cada vez,
secándolo por aspiración después de cada lavado.
Secar el crisol filtrante a 130 ºC en la estufa hasta alcanzar un peso cons-
tante. Después de cada secado, enfriar en el desecador y pesar rápidamente.
Colocar a continuación el crisol en el horno de mufla y calcinar el contenido
a una temperatura comprendida entre 475 y 500 ºC durante 30 minutoscomo
mínimo.
Después de cada calcinación, enfriar, primero en el horno y después en el
desecador, antes de pesar.
Realizar una prueba en blanco sin la muestra. La pérdida de peso debida a la
calcinación no debe exceder de 4 mg.
6.Cálculodelosresultados
El contenido de fibra bruta en porcentaje de la muestra se expresa por la
fórmula:
b/C0c ðÞ /C2 100
a
a = masa de la muestra en g,
b = pérdida de masa por calcinación del residuo de la muestra después de
secar a 130 ºC,1973L0046 — ES — 26.05.1999 — 004.001 — 6
▼M2
c = pérdida de masa por calcinación del residuo de la prueba en blanco
después de secar a 130 ºC.
7.Repetibilidad
La diferencia entre dosdeterminacionesparalelasllevadasa cabo en la
misma muestra no deben exceder:
— 0,3 en valor absoluto para contenidos de fibra bruta inferiores al 10 %,
— el 3 % relativo al resultado más alto, para contenidos de fibra bruta
igualeso s uperioresal 10 %.
8.Observaciones
8.1. Los piensos con un contenido de grasa bruta superior al 10 % deben
desengrasarse con éter de petróleo (3.5) antes de efectuar su análisis.
Conectar el crisol filtrante (4.2), con la muestra previamente pesada, al
extractor de frío (4.6) y lavar tresvecesal vacío utilizando 30 ml de éter
de petróleo (3.5) cada vez. Secar la muestra por aspiración, conectar el
crisol con su contenido al aparato de calentamiento (4.1) y continuar con
arreglo al punto 5.
8.2. Los piensos que contengan grasas que no puedan extraerse directamente
con éter de petróleo (3.5) deben desengrasarse con arreglo al punto 8.1 y
someterse a un nuevo desengrasado después de haber sido tratados con
ácido en ebullición.
Después del tratamiento con ácido en ebullición y del lavado, unir el
crisol y su contenido al extractor de frío (4.6), lavar tres veces utilizando
30 ml de acetona cada vez y lavar a continuación otrastresvecesutili-
zando 30 ml de éter de petróleo cada vez. Secar el filtro por aspiración
y continuar el análisis con arreglo al punto 5, comenzando con el trata-
miento con hidróxido de potasio.
8.3. Si los piensos contienen más de un 5 % de carbonatos, expresados en
carbonato de calcio, conectar el crisol (4.2), con la muestra pesada, al
aparato de calentamiento (4.1). Lavar la muestra tres veces con 30 ml
de ácido clorhídrico (3.6). Después de cada adición, dejar reposar la
muestra durante un minuto aproximadamente antes de filtrar. Lavar una
vez con 30 ml de agua y seguir a continuación con arreglo al punto 5.
8.4. Si se utiliza una batería de aparatos (varios crisoles unidos al mismo
aparato de calentamiento), no deben realizarse dos determinaciones de
la misma muestra en la misma serie.
8.5. Si, después de la ebullición, resulta difícil filtrar las soluciones ácidas y
alcalinas, introducir aire comprimido por el tubo de descarga del aparato
de calentamiento y seguir filtrando a continuación.
8.6. Con objeto de alargar la duración de loscris olesfiltrantesde vidrio,
conviene que la temperatura de calcinación no supere los 500 ºC.
Asimismo, deben evitarse los cambios térmicos bruscos en los ciclos
de calentamiento y enfriamiento.1973L0046 — ES — 26.05.1999 — 004.001 — 7
▼M4