1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—1
Estedocumentoesuninstrumentodedocumentaciónynocomprometelaresponsabilidaddelasinstituciones
►B DIRECTIVADELCONSEJO
de26dejuniode1964
relativa a problemas de policía sanitaria en materia de intercambios intracomunitarios de
animalesdelasespeciesbovinayporcina
(64/432/CEE)
(DOP121de29.7.1964,p.1977)
Modificadapor:
DiarioOficial
nopágina fecha
►M1Directiva66/600/CEEdelConsejode25deoctubrede1966 P192 3294 27.10.1966
►M2Directive70/360/CEEduConseildu13juillet1970(*) L157 40 18.7.1970
►M3Directiva71/285/CEEdelConsejode19dejuliode1971 L179 1 9.8.1971
►M4Directiva72/97/CEEdelConsejode7defebrerode1972 L38 95 12.2.1972
►M5Directiva72/445/CEEdelConsejode28dediciembrede1972 L298 49 31.12.1972
►M6Directiva72/462/CEEdelConsejode12dediciembrede1972 L302 28 31.12.1972
►M7Directiva73/150/CEEdelConsejode5dejuniode1973 L172 18 28.6.1973
►M8Directive74/387/CEEduConseildu15juillet1974(*) L202 36 24.7.1974
►M9Directive75/379/CEEduConseildu24juin1975(*) L172 17 3.7.1975
►M10Directiva77/98/CEEdelConsejode21dediciembrede1976 L26 81 31.1.1977
►M11Directiva79/109/CEEdelConsejode24deenerode1979 L29 20 3.2.1979
►M12Directiva79/111/CEEdelConsejode24deenerode1979 L29 26 3.2.1979
►M13Directiva80/219/CEEdelConsejode22deenerode1980 L47 25 21.2.1980
►M14Directiva80/1098/CEEdelConsejode11denoviembrede1980 L325 11 1.12.1980
►M15Directiva80/1102/CEEdelConsejode11denoviembrede1980 L325 18 1.12.1980
►M16modificada por la Directiva 85/571/CEE del Consejo de 19 de
diciembrede1985L372 12 31.12.1985
►M17Directiva80/1274/CEEdelConsejode22dediciembrede1980 L375 75 31.12.1980
►M18Directiva81/476/CEEdelConsejode24dejuniode1981 L186 20 8.7.1981
►M19Directiva82/61/CEEdelConsejode26deenerode1982 L29 13 6.2.1982
►M20Directive82/893/CEEduConseildu21décembre1982(*) L378 57 31.12.1982
►M21Directive83/646/CEEduConseildu13décembre1983(*) L360 44 23.12.1983
►M22Directiva84/336/CEEdelConsejode19dejuniode1984 L177 22 4.7.1984
►M23Directiva84/643/CEEdelConsejode11dediciembrede1984 L339 27 27.12.1984
►M24Directiva84/644/CEEdelConsejode11dediciembrede1984 L339 30 27.12.1984
►M25Directiva85/320/CEEdelConsejode12dejuniode1985 L168 36 28.6.1985
►
M27Directiva85/586/CEEdelConsejode20dediciembrede1985L3724431.12.1985
►M26Reglamento(CEE)no3768/85delConsejode20dediciembrede1985L362831.12.1985
(*) Noexisteversiónenespañoldeesteacto.
1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—2
►M28Decisión87/231/CEEdelConsejode7deabrilde1987 L99 18 11.4.1987
►M29Directiva87/489/CEEdelConsejode22deseptiembrede1987 L280 28 3.10.1987
►M30Directiva88/406/CEEdelConsejode14dejuniode1988 L194 1 22.7.1988
►M31Directiva89/360/CEEdelConsejode30demayode1989 L153 29 6.6.1989
►M32Directiva89/662/CEEdelConsejode11dediciembrede1989 L395 13 30.12.1989
►M33Directiva90/422/CEEdelConsejode26dejuniode1990 L224 9 18.8.1990
►M34Directiva90/423/CEEdelConsejode26dejuniode1990 L224 13 18.8.1990
►M35Directiva90/425/CEEdelConsejode26dejuniode1990 L224 29 18.8.1990
►M36Directiva91/499/CEEdelConsejode26dejuniode1991 L268 107 24.9.1991
►M37Directiva91/687/CEEdelConsejode11dediciembrede1991 L377 16 31.12.1991
►M38Directiva92/65/CEEdelConsejode13dejuliode1992 L268 54 14.9.1992
►M39Directiva92/102/CEEdelConsejode27denoviembrede1992 L355 32 5.12.1992
►M40Directiva94/42/CEdelConsejode27dejuliode1994 L201 26 4.8.1994
►M41Directiva95/25/CEdelConsejode22dejuniode1995 L243 16 11.10.1995
►M42Directiva97/12/CEdelConsejode17demarzode1997 L109 1 25.4.1997
►M43modificadapor laDirectiva98/99/CEdelConsejode14dediciembre
de1998L358 107 31.12.1998
►M44Directiva98/46/CEdelConsejode24dejuniode1998 L198 22 15.7.1998
►M45Directiva 2000/15/CE del Parlamento Europeo y del Consejo de 10 deabrilde2000L105 34 3.5.2000
►
M46Directiva 2000/20/CE del Parlamento Europeo y del Consejo de 16 demayode2000L163 35 4.7.2000
►
M47Decisión2001/298/CEdelaComisiónde30demarzode2001 L102 63 12.4.2001
►M48Reglamento(CE)no535/2002delaComisiónde21demarzode2002 L80 22 23.3.2002
►M49Reglamento(CE)no1226/2002delaComisiónde8dejuliode2002 L179 13 9.7.2002
Modificadapor:
►A1Acta deadhesión deDinamarca, deIrlanda ydel Reino Unidode Gran
BretañaeIrlandadelNorteL73 14 27.3.1972
(adaptadaporDecisióndelConsejode1deenerode1973)(*) L2 1 1.1.1973
►A2ActadeadhesióndeGrecia L291 17 19.11.1979
►A3ActadeadhesióndeAustria,deFinlandiaydeSuecia C241 21 29.8.1994
(adaptadaporDecisión95/1/CE,Euratom,CECAdelConsejo) L1 1 1.1.1995
▼B
DIRECTIVADELCONSEJO
de26dejuniode1964
relativa a problemas de policía sanitaria en materia de intercam-
biosintracomunitariosdeanimalesdelasespeciesbovinayporcina
(64/432/CEE)
ELCONSEJODELACOMUNIDADECONÓMICAEUROPEA,
Visto el Tratado constitutivo de la Comunidad Económica Europea y,
enparticular,susartículos43y100,
VistalaPropuestadelaComisión,
VistoeldictamendelParlamentoEuropeo(1),
VistoeldictamendelComitéeconómicoysocial(2),
ConsiderandoqueelReglamento no20delConsejosobreelestableci-
mientogradualdeunaorganizacióncomúndemercadoenelsectordelacarnedeporcino(
3)haentradoyaenaplicaciónyquesehaprevisto
un reglamento semejante para el sector de la carne de vacuno y que
dichos reglamentos se refieren igualmente a los intercambios de
animalesvivos;
Considerando que el Reglamento no20sustituye las múltiples y tradi-
cionalesmedidasdeprotecciónenlafronteraporunsistemauniforme,
destinado, en particular, a facilitar los intercambios intracomunitarios;
que el reglamento previsto para la carne de vacuno tiende también aeliminarlosobstáculosadichosintercambios;
Considerando quela aplicación de losreglamentos antes mencionados
nolograrálosefectosesperadosmientraslosintercambiosintracomuni-
tarios de los animales de las especies bovina y porcina se veanfrenados por las disparidades existentes en los Estados miembros enmateriadedisposicionessanitarias;
Considerando que, para acabar con dichas disparidades, es necesario
adoptarmedidas,enelmarcodelapolíticaagrícolacomúnyparalela-mente a los reglamentos ya adoptados o en preparación en lo querespecta al establecimiento gradual de organizaciones comunes demercado; que, por lo tanto, hay que proceder a una aproximación de
las disposiciones de los Estados miembros en materia de policía sani-
taria;
Considerandoqueelderechoque,envirtuddelartículo36delTratado,
tienenlosEstadosmiembrosdeseguirmanteniendolasprohibicioneso
restriccionesalaimportación,alaexportaciónoaltránsitojustificadas
porrazonesdeproteccióndelasaludydelavidadelaspersonasydelosanimales,noleseximedelaobligaciónderealizarlaaproximaciónde las disposiciones en que se basan dichas prohibiciones y restric-ciones, en la medida en que las disparidades de dichas disposiciones
constituyan obstáculos para la ejecución y funcionamiento de la
políticaagrariacomún;
Considerando que, en el marco de dicha aproximación, hay que
imponer alpaísexportador laobligación develarporquelosvacunos
yporcinosdereproducción,deproducciónodeabastodestinadosalos
intercambios intracomunitarios, los lugares de procedencia y deembarquededichosanimalesasícomolosmediosdetransportereúnandeterminadas condiciones de policía sanitaria a fin de garantizar quedichosanimalesnoconstituyanunafuentedepropagacióndeenferme-dadescontagiosas;1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—3
(1)D Ono61de19.4.1963,p.1254/63.
(2)D Ono122de29.7.1964,p.2009/64.
(3)D Ono30de20.4.1962,p.945/62.
▼B
Considerando que, para que los Estados miembros puedan tener
garantías en lo que concierne al cumplimiento de dichas condiciones,es necesario prever la expedición, por un veterinario oficial, de un
certificadodeinspecciónveterinariaqueacompañealosanimaleshasta
ellugardedestino;
ConsiderandoquelosEstadosmiembrosdebendisponerdelafacultad
de negar la entrada en su territorio de vacunos y porcinos cuando sehaya comprobado o se sospeche que han contraído una enfermedadcontagiosa,cuando,sinhaberlacontraído,puedanpropagardichaenfer-medad o, finalmente, cuando no cumplan las disposiciones
comunitariasenmateriadepolicíasanitaria;
ConsiderandoquenohayrazonesparapermitiralosEstadosmiembros
que prohiban la entrada de vacunos y de porcinos en su territorio por
razones distintas de las de policía sanitaria y que, por lo tanto, si nohayrazónqueloimpidaysielexpedidorosumandatariohanpresen-tado la solicitud, hay que autorizarle a reexpedir los animales al paísexportador;
Considerando que para hacer posible que los interesados comprendan
las razones que han determinado una prohibición ouna restricción, esimportantequelosmotivosdelamismaseponganenconocimientodel
expedidorodesumandatarioasícomodelaautoridadcentralcompe-
tentedelpaísexportador;
Considerando que conviene ofrecer al expedidor, en el caso de que
surja un litigio sobre la justificación de una prohibición o de unarestricción entre él y la autoridad del Estado miembro destinatario, laposibilidad de solicitar el dictamen de un experto veterinario, elegidodeunalistaelaboradaporlaComisión;
Considerando que resulta posible flexibilizar en determinados casos y
para determinadas categorías de animales las disposiciones generalesprevistasporlapresenteDirectiva, sincorrerriesgosenelplanosani-
tario, permitiendo a los Estados miembros destinatarios que concedan
excepcionesgeneralesoespeciales;
Considerando que, en algunos sectores en los que se plantean
problemas especiales, la aproximación de las disposiciones de losEstadosmiembrossólosepuederealizartrasunestudiomásprofundo;
Considerando que debe preverse un procedimiento simplificado de
modificación para los Anexos B a D, ya que las normas que figuranen ellos tienen carácter técnico y están sujetas a evolución; que, porlotanto,convieneencargaralaComisiónlarealizacióndetalesmodi-ficaciones,previaconsultaalosEstadosmiembros;
HAADOPTADOLAPRESENTEDIRECTIVA:
Artículo 1
La presente Directiva será aplicable al comercio intracomunitario de
animales de la especie bovina y de animales de la especie porcinaexcepto eljabalí, talcomo sedefine enlaletra e)delartículo 2delaDirectiva80/217/CEE(
1),sinperjuiciodelasdisposicionesestablecidas
enlasDirectivas80/215/CEE(2),85/511/CEE,88/407/CEE(3),89/608/
CEE(4), 90/425/CEE, 90/429/CEE(5), 90/667/CEE(6), 91/496/CEE,1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—4
(1)D OnoL 47 de 21. 12. 1980, p. 11. Directiva cuya última modificación la
constituyelaDecisión93/384/CEE(DOnoL166de8.7.1993,p.34).
(2)D OnoL 47 de 21. 12. 1980, p. 4. Directiva cuya última modificación la
constituyelaDirectiva91/687/CEE(DOnoL377de31.12.1991,p.16).
(3)D OnoL 194 de 22. 7. 1988, p. 10. Directiva cuya última modificación la
constituyelaDirectiva93/60/CEE(DOnoL186de28.7.1993,p.28).
(4)D OnoL351de2.12.1989,p.34.
(5)D OnoL 224 de 18. 8. 1990, p. 62. Directiva cuya última modificación la
constituyeelActadeadhesiónde1994.
(6)D OnoL363de27.12.1990,p.51.Directivacuyaúltimamodificaciónla
constituyelaDirectiva92/118/CEE.▼M42
▼M42
91/628/CEE(1),92/102/CEE(2)y92/119/CEEyenlaDecisión90/424/
CEE(3).
Artículo 2
1. A efectos de la presente Directiva, se aplicarán las definiciones
quefiguranenelartículo2delaDirectiva90/425/CEEyenelartículo
2delaDirectiva91/628/CEE.
2. Además, a efectos de la presente Directiva, se aplicarán las
siguientesdefiniciones:
a) «rebaño»: un animal o un grupo de animales mantenido en una
explotación [conarregloalaletrab)delartículo 2delaDirectiva92/102/CEE]encalidaddeunidadepidemiológica;siexistenvariosrebaños en una misma explotación, éstos deberán formar unaunidaddiferenciada,conelmismoestatutosanitario;
b) «animal de abasto»: el animal de la especie bovina (incluidas las
especies Bison bisonyBubalus bubalus ) o porcina destinado al
matadero o a un centro de concentración desde el que sólo puedasertrasladadoalmatadero;
c) «animalesdereproducción»o«deproducción»:losanimalesdela
especie bovina (incluidas las especies Bison bisonyBubalus
bubalus) o porcina no contemplados en la letra b), incluidos los
destinadosalareproducción, alaproducción deleche odecarne,
al tiro, a certámenes o a exposiciones, exceptuando los animales
queparticipenenmanifestacionesculturalesydeportivas;
d) «rebaño bovino oficialmente indemne de tuberculosis»: el rebaño
de la especie bovina que se ajuste a las condiciones establecidasen►
M43lospuntos1y2delaparteIdelAnexoA ◄;
e) «Estado miembro» o «región de un Estado miembro oficialmente
indemne de tuberculosis»: el Estado miembro o la parte del terri-torio de un Estado miembro que cumpla las condicionesestablecidas en ►
M43los puntos4y5d el aparte I del Anexo
A◄;
f) «rebaño bovino oficialmente indemne de brucelosis»: elrebaño de
la especie bovina que se ajuste a las condiciones de ►M43los
puntos1y2delaparteIIdelAnexoA ◄;
g) «región oficialmente indemne de brucelosis»: la región de un
Estado miembro que cumpla las condiciones de los puntos 7, 8 y9delaparteIIdelAnexoA;
h) «Estado miembro oficialmente indemne de brucelosis»: el Estado
miembro que se ajuste a las condiciones establecidas en►
M43lospuntos7,8y9delaparteIIdelAnexoA ◄;
i) «rebaño bovino indemne de brucelosis»: el rebaño de la especie
bovinaquecumplalascondicionesde ►M43lospuntos4y5de
laparteIIdelAnexoA ◄;
j) «rebaño oficialmente indemne de leucosis enzóotica bovina»: el
rebaño que se ajuste a las condiciones de las letras A y B delcapítulo1delAnexoD;
k) «Estado miembro» o «región oficialmente indemne de leucosis
enzóoticabovina»:elEstadomiembroolaregiónquecumplanlascondiciones establecidas en ►
M43las letras E y F del capítulo I
delAnexoD ◄;
l) «veterinario oficial»: el veterinario designado por la autoridad
centralcompetente;1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—5
(1)D OnoL340de11.12.1991,p.17.Directivacuyaúltimamodificaciónla
constituyelaDirectiva95/29/CE(DOnoL148de30.6.1995,p.52).
(2)D OnoL 355 de 5. 12. 1992, p. 32. Directiva cuya última modificación la
constituyeelActadeadhesiónde1994.
(3)D OnoL 224 de 18. 8. 1990, p. 19. Decisión cuya última modificación la
constituyelaDecisión94/370/CE(DOnoL168de2.7.1994,p.31).
▼M42
m) «veterinario autorizado»: cualquier veterinario autorizado por la
autoridad competente de conformidad con lo dispuesto en la letraBdelapartado3delartículo14;
n) «enfermedades de notificación obligatoria»: las enfermedades que
seenumeranenelAnexoE(I);
o) «centro de concentración»: cualquier emplazamiento, incluidos las
explotaciones, los centros de recogida y los mercados, en los quese reúna a animales de las especies bovina o porcina procedentesdedistintasexplotacionesparaformarlotesdeanimalesdestinadosal comercio. Estos centros de concentración deberán estar autori-
zados para fines comerciales y deberán cumplir los requisitos
contempladosenelartículo11.
p) «región»:lapartedelterritoriodeunEstadomiembrocuyasuper-
ficie abarque como mínimo 2000 km
2y que esté sujeta a
inspección por parte de las autoridades competentes e incluya almenosunadelassiguientesregionesadministrativas:
— Bélgica: province—provincie,
— Alemania: Regierungsbezirk,
— Dinamarca: amtoisla,
— Francia: département,
— Italia: provincia,
— Luxemburgo: —,
— PaísesBajos: rvv-kring,
— ReinoUnido: Inglaterra, Gales e Irlanda del Norte: county, Escocia:
districtoislandarea,
— Irlanda: county,
— Grecia: NOMOS( νοµός),
— España: provincia,
— Portugal: continente: distrito, y las demás partes del territorio de
Portugal:regiãoautónoma,
— Austria: Bezirk,
— Suecia: län,
— Finlandia: lääni/län;
q) «comerciante»: toda persona física o jurídica que compra y vende
animalesdirectaoindirectamente,confinescomerciales, quetieneunacifradenegociosregularcondichosanimales,que,enunplazo
máximodetreintadíasdespuésdeadquirirlosanimales,losvende
olostrasladadelasprimerasinstalacionesaotrasquenoleperte-necen, que está registrado y que cumple las condicionesestablecidasenelartículo13.
Artículo 3
1. CadaEstadomiembrovelaráporquesóloseexpidandesuterri-
toriocondestinoaldeotroEstadomiembrolosanimalesquecumplan
lascondicionespertinentesdelapresenteDirectiva.
2. Losanimalesdelasespeciesbovinayporcinacontempladosenla
presenteDirectivadeberán:
a) sersometidos
— auncontroldeidentidad,y
— aunexamenclínicoporpartedeunveterinariooficialdentrode
las24horasqueprecedansusalidaynomostrarsignosclínicos
deenfermedad;
b) procederdeunaexplotaciónodeunazonaquenohayaestado,por
motivossanitarios, sujeta aunaprohibición oaunarestricción queafecte a las especies de que se trata en virtud de la legislacióncomunitariaonacionalodeambas;1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—6
▼M42
c) estaridentificadosconarregloalodispuestoenlaDirectiva92/102/
CEE;
d) no estar destinados al sacrificio o sometidos a una restricción en
virtuddeunprogramanacionaloregionaldeerradicacióndeenfer-medadescontagiosasoinfecciosas;
e) cumplirlodispuestoenlosartículos4y5.
Artículo 4
1. Desdesusalidadelaexplotación deorigenhastasullegada ala
explotación de destino en el territorio de otro Estado miembro, losanimalesdelasespeciesbovinayporcinacontempladosenlapresenteDirectiva no podrán en ningún momento estar en contacto con otrosanimalesbiunguladosquenotenganelmismoestatutosanitario.
2. Losanimalesdelasespeciesbovinayporcinacontempladosenla
presente Directiva deberán ser transportados en medios de transporteque reúnan los requisitos de la Directiva 91/628/CEE y, además, losestablecidosenelartículo12.
3. Las normas que rigen las condiciones de autorización de los
lugares en los que pueda efectuarse la limpieza y la desinfección se
adoptaránconarregloalprocedimientoestablecidoenelartículo17.
Artículo 5
1. Durante el transporte a su lugar de destino, los animales de las
especies bovina y porcina contemplados en la presente Directivadeberán ir acompañados de un certificado sanitario ►
M43conforme
al modelo 1 o al modelo 2 que figuran en el anexo F, segúnconvenga ◄. El certificado constará de una sola hoja o, cuando se
requiera más de una página, se presentará de manera que todas las
páginas formen parte de un conjunto indivisible, y llevará un número
deserie.Seráexpedidoeldíadelexamenveterinarioyestaráredactadoalmenosenunodelosidiomasoficialesdelpaísdedestino.Elcertifi-cado tendrá una validez de diez días a partir de la fecha del controlsanitario.
2. Los controles sanitarios para la expedición del certificado sani-
tario(incluidaslasgarantíasadicionales) aunlotedeanimalespodrán
realizarseenlaexplotacióndeorigenoenuncentrodeconcentración.A tal efecto, la autoridad competente velará por que todo certificadosanitario sea expedido por el veterinario oficial al término de lasinspecciones,visitasycontrolesestablecidosenlapresenteDirectiva.
Noobstante,porloqueserefierea:
a) los animales procedentes de centros de concentración autorizados,
dichocertificadopodráexpedirse:
— basándose en el documento oficial relativo a las informaciones
necesarias completado por el veterinario oficial responsable de
laexplotacióndeorigen,o
— basándose en el ►
M43certificado conforme al modelo 1 o al
modelo 2 que figuran en el anexo F, según convenga ◄,y
cuyas secciones A y B estén debidamente cumplimentadas ycertificadas por el veterinario oficial responsable de la explota-cióndeorigen;
b) losanimalesprocedentesdeunaexplotacióncualificadaconarreglo
alsistemaderedesprevistoenelartículo14,estecertificadopodráexpedirse:
— basándose en el documento oficial que contenga las informa-
ciones necesarias, completado por el veterinario autorizadoresponsabledelaexplotacióndeorigen,o
— basándose en el ►
M43certificado conforme al modelo 1 o al
modelo 2 que figuran en el anexo F, según convenga ◄,y
cuyas secciones A y B estén debidamente cumplimentadas ycertificadas por el veterinario autorizado responsable de laexplotacióndeorigen.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—7
▼M42
Enestaocasión,elveterinariooficialgarantizará,cuandoseanecesario,
el respeto de las garantías adicionales establecidas por la legislacióncomunitaria.
3. El veterinario que tiene la responsabilidad oficial del centro de
concentración llevará a cabo todos los controles necesarios en losanimalesencuantoéstoslleguenalmismo.
4. El veterinario oficial que cumplimente ►
M43la sección C del
certificado conforme al modelo 1 o al modelo 2 que figuran en elanexo F, según convenga ◄tendrá que velar por que se registre el
movimiento de animales en el sistema ANIMO el día que expida el
certificado.
5. Losanimales contemplados enlapresenteDirectiva podrántran-
sitar por un centro de concentración situado en el territorio de unEstado miembro distinto del de destino. En tal caso, el►
M43certificado conforme al modelo 1 o al modelo 2 que figuran
en el anexo F,según convenga ◄►M43(incluida la sección C) ◄
deberá ser cumplimentado por el veterinario oficial responsable delEstado miembro de origen de los animales. El veterinario oficialresponsable del centro de concentración facilitará al Estado miembrodedestinounacertificaciónexpidiendounsegundocertificadoanálogo
al►
M43certificadoconformealmodelo1oalmodelo2quefiguran
en el anexo F, según convenga ◄, en el que anotará el número de
seriedelcertificadooriginalyqueadjuntaráalcertificado originaloauna copia autenticada del mismo. En este caso, el período de validezcombinadadelcertificadonopodrásersuperioralprevistoenelapar-tado1.
Artículo 6
1. Ademásdelosrequisitosestablecidosenlosartículos3,4y5,los
animales dereproducción oproducción deberán cumplir lossiguientesrequisitos:
— haber permanecido en una sola explotación durante un período de
treintadíasantesdesucarga,odesdesunacimientoenlaexplota-
ción de origen en caso de edades inferiores a treinta días. Elveterinario oficial deberá comprobar,alavistadelaidentificaciónoficial prevista enlaletra c)delapartado 2delartículo 3ydelosregistrosoficiales, quelosanimaleshancumplidoestacondiciónyque son originarios de la Comunidad o han sido importados desde
untercerpaísqueseajustealalegislaciónveterinariadelaComu-
nidad.
Noobstante,enelcasodeanimalesquetransitenporuncentrode
concentración autorizado situado en el Estado miembro de origen,la duración de la concentración de dichos animales fuera de laexplotacióndeorigennopodrápasardeseisdías;
— porloqueserefierealosanimalesimportadosdesdeuntercerpaís
aunEstadomiembrodistintodelEstadodedestinofinal,sertrans-portadosalEstadomiembrodedestinolomásrápidamenteposible
alamparodeuncertificadoexpedidoconarregloalartículo7dela
Directiva91/496/CEE;
— cuando se trata de animales importados de un tercer país, a su
llegada a destino y antes de cualquier otra circulación, ajustarse alas obligaciones establecidas en la presente Directiva y, en parti-cular,alaobligación deestancia previstaenelprimerguión,ynopodrán introducirse en el rebaño hasta que el veterinario respon-
sable de la explotación haya constatado que no es previsible que
dichosanimalesalterenelestatutosanitariodelaexplotación.
Si en una explotación se introduce un animal de un tercer país,
ningún animal de dicha explotación podrá ser comercializado enun plazo de treinta días a partir de la introducción del animalimportado salvo que éste esté completamente aislado del resto delosanimalesdelaexplotación.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—8
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2. Ademásdelosrequisitosestablecidosenlosartículos3,4y5,los
bovinos de reproducción o producción deberán cumplir los siguientesrequisitos:
a) proceder de una explotación de bovinos oficialmente indemne de
tuberculosis y, en caso de que su edad supere las seis semanas,haber dado resultado negativo en una intradermotuberculinizaciónrealizada durante los treinta días anteriores a su salida del rebañodeorigenconarregloalodispuestoenlaletrad)delpunto32del
AnexoB.
Estaintradermotuberculinización noseráobligatoriaencasodeque
losanimalesseanoriginariosdeunEstadomiembroodeunaparte
del territorio de un Estado miembro que se haya declarado oficial-
menteindemnedetuberculosisodeunEstadomiembroopartedelterritoriodeunEstadomiembroqueformepartedeunareddevigi-lanciareconocida;
b) cuandosetratadeanimalesnocastradosdeedadessuperioresalos
doce meses y procedentes de una explotación de bovinos oficial-mente indemne de brucelosis, haber presentado un título brucelarinferior a 30 unidades internacionales aglutinantes por mililitro en
unaseroaglutinación (ocualquier otrapruebaaprobadamediante el
procedimiento del Comité veterinario permanente previa adopciónde los protocolos pertinentes) practicada durante los treinta díaspreviosalasalidadelrebañodeorigenyconarregloalodispuestoenlaparteAdelAnexoC.
Esta seroaglutinación (o cualquier prueba aprobada mediante el
procedimiento del Comité veterinario permanente previa adopciónde los protocolos pertinentes) no se requerirá en caso de que losanimalesprocedandeunEstadomiembroodeunapartedeEstado
miembro reconocidos oficialmente indemnes de brucelosis o de un
Estado miembro o parte del territorio de un Estado miembro queformepartedeunareddevigilanciareconocida;
c) proceder de un rebaño oficialmente indemne de leucosis enzoótica
bovina y cuyos animales, si superan los doce meses de edad, handado resultado negativo a una prueba individual realizada durantelostreintadíasanterioresasusalidadelrebañodeorigenycumplenlodispuestoenelAnexoD.
Esta prueba no será obligatoria en caso de que los animales sean
originarios de un Estado miembro o de una parte del territorio deun Estado miembro que se hayan declarado oficialmente indemnesde leucosis enzoótica bovina o de un Estado miembro o parte del
territoriodeunEstadomiembroqueformepartedeunareddevigi-
lanciareconocida;
d) nohaberestadoencontactoenningúnmomento,desdesusalidade
la explotación de origen hasta su llegada a destino, con animales
quesólocumplanlosrequisitosdelapartado3;
e) hastael31dediciembrede2000noseráprecisocumplirlosrequi-
sitos establecidos, en las letras a) ob) cuando se trate de animalesdelaespeciebovinadeedadinferioralos30mesesdestinadosalaproduccióndecarneyque:
— procedan de una explotación bovina oficialmente indemne de
tuberculosisydebrucelosis,
— vayan acompañados de un certificado sanitario conforme al
punto 7 de la sección A del anexo F, modelo 1, debidamente
cumplimentado,
— esténbajosupervisiónhastaqueseansacrificados,— no hayan entrado en contacto, durante su transporte, con
animales de la especie bovina que no procedan de rebañosoficialmenteindemnesdeesasenfermedades,
siempreycuando:
— elloseapliqueexclusivamentealcomercioentreEstadosmiem-
bros o entre regiones de Estados miembros que gocen de lasmismas condiciones sanitarias en lo que respecta a latuberculosisolabrucelosis,1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—9
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— el Estado miembro destinatario adopte las medidas oportunas
paraimpedirlacontaminaciónderebañosnativos,
— los Estados miembros establezcan un sistema adecuado de
controles por sondeo, de inspecciones y de verificaciones quegaranticelaaplicacióneficazdelapresentenormativa,
— laComisióncontrolelacorrectaaplicacióndelapresenteDirec-
tiva a fin de garantizar que los Estados miembros cumplen
íntegramentelanormativa.
3. Ademásdelosrequisitosestablecidosenlosartículos3,4y5,los
bovinosdeabastodeberán proceder derebañosoficialmente indemnes
detuberculosis,oficialmenteindemnesdeleucosisenzoóticabovina,y,
en elcaso debovinosnocastrados, derebaños oficialmente indemnesdebrucelosis.
No obstante, hasta el ►
M4631 de diciembre de 2000 ◄, los países
destinatariospodránconcederaEspañaautorizacionesgeneralesolimi-
tadas de introducción en su territorio de animales de abasto de laespecie bovina procedentes de rebaños no oficialmente indemnes detuberculosis, de leucosis enzoótica bovina y de brucelosis, siemprequedichosanimales:
— hayansidosometidos,conresultadonegativo,dentrodelperíodode
treintadíasanterioresalacarga,alaspruebasadecuadasprescritas
enlosAnexosB,CyD,
— asusllegadaalpaísdedestinohayansidoconducidosdirectamente
a un matadero y sacrificados lo antes posible, pero a más tardarsetentaydoshorasdespuésdesullegada,conarregloalasnormasdepolicíasanitaria.
Artículo 7
Los animales de abasto que, una vez llegados al país de destino, se
lleven:
— bienaunmatadero,deberánsersacrificadosloantesposible,peroa
mástardarsetentaydoshorasdespuésdesullegada,conarregloalasnormasdepolicíasanitaria;
— bien a un centro de concentración autorizado, deberán ser condu-
cidos después del mercado al matadero, donde serán sacrificadosloantes posible, pero amás tardar enel plazo de tresdías labora-blesdespuésdesullegadaalcentrodeconcentración,conarregloalas normas de policía sanitaria. En ningún momento, entre su
llegadaalcentrodeconcentraciónysullegadaalmatadero,podrán
entrar en contacto con animales biungulados distintos de los quecumplenlascondicionesdelapresenteDirectiva.
Artículo 8
LosEstadosmiembros velarán porquelasospecha delapresencia de
una de las enfermedades enumeradas en el Anexo E (I) sea objeto denotificaciónobligatoriaeinmediataalaautoridadcompetente.
Cada Estado miembro enviará a la Comisión, a más tardar el 31 de
mayo de cada año, y por primera vez en 1999, una relación detalladadeloscasosdeenfermedadesdelascontempladasenelAnexoE(I)odecualquierotraenfermedadsujetaagarantíasadicionalesprevistasenla legislación comunitaria que se hayan producido en su territoriodurante elañonatural anterior, asícomo unarelación detallada delos
programas de control o de erradicación en curso. Estas informaciones
se basarán en criterios uniformes que se establecerán de acuerdo conel procedimiento previsto en el artículo 17. La Comisión transmitiráestainformaciónalosEstadosmiembrosenelmarcodelComitévete-rinario permanente y podrá usarla en relación con las decisiones
contempladasenlosAnexosAyD.
Artículo 9
1. UnEstadomiembro quedispongadeunprogramanacionalobli-
gatoriodeluchacontraunaenfermedadcontagiosadelasrecogidasen1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—10
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▼M42
la lista del Anexo E (II) en la totalidad o parte de su territorio podrá
presentardichoprogramaalaComisión,indicandoenparticular:
— ladistribucióndelaenfermedadensuterritorio,
— la justificación del programa, tomando en consideración la impor-
tancia de la enfermedad y las ventajas que se espera obtener delprogramaenrelaciónconsuscostes,
— eláreageográficaenlaquesevayaaaplicarelprograma,
— los diferentes estatutos aplicables a las explotaciones, las normas
que den derecho a cada estatuto y los procedimientos de pruebaquevayanausarse,
— los procedimientos de seguimiento del programa, cuyos resultados
deberánsercomunicadosalmenosunavezalañoalaComisión,
— lasmedidasquedebanadoptarsesi,porcualquierrazón,unaexplo-
taciónpierdesuestatuto,
— las medidas que deben adoptarse si los resultados de las pruebas
realizadasenelmarcodelprogramasonpositivos.
2. La Comisión examinará los programas presentados por los
Estados miembros. Los programas contemplados en el apartado 1podrán ser aprobados, cuando cumplan los criterios establecidos en el
mismo apartado, con arreglo al procedimiento del artículo 17. Con
arreglo al mismo procedimiento se definirán, al mismo tiempo que laaprobación de los programas, o, a más tardar, tres meses después, lasgarantías complementarias generales o limitadas que puedan exigirseen el comercio intracomunitario. Tales garantías no deberán ir másalládelasqueapliqueelEstadomiembroaescalanacional.
3. Los programas presentados por los Estados miembros podrán
modificarse o completarse de conformidad con el procedimiento esta-blecido en el artículo 17. Las modificaciones o adiciones respecto de
programasquehayansidoaprobadosanteriormenteodegarantías que
hayansidodefinidasconarregloalapartado2podránaprobarsesegúnelmismoprocedimiento.
Artículo 10
1. CuandounEstadomiembroconsiderequesuterritorioestátotalo
parcialmente indemne de una de las enfermedades enumeradas en elAnexo E (II), presentará a la Comisión los justificantes adecuados,queincluirán,enparticular:
— lanaturalezadelaenfermedadysuhistorialensuterritorio,
— los resultados de las pruebas de control basadas en una investiga-
ción serológica, microbiológica, patológica o epidemiológica y enelhechodequelaenfermedaddebeserdeclaradaobligatoriamentealasautoridadescompetentes,
— elperíododuranteelcualsehayaefectuadoelcontrol,
— siprocede,elperíododuranteelcualhayaestadoprohibidalavacu-
nación contra la enfermedad y la zona geográfica afectada pordichaprohibición,
— lasnormasadoptadasparacomprobarlaausenciadelaenfermedad.
2. La Comisión examinará la documentación presentada por los
Estados miembros. Las garantías complementarias generales o limi-tadas que puedan exigirse en el comercio intracomunitario podrán
definirse con arreglo al procedimiento del artículo 17. Tales garantías
nodeberán irmásallá de las queaplique el Estado miembro a escalanacional.
3. ElEstadomiembro interesado notificará a laComisióncualquier
cambio en los datos contemplados en el apartado 1 que esté relacio-nado con la enfermedad y, en particular, con nuevos brotes de lamisma. A la vista de la información comunicada, las garantías defi-nidas de conformidad con el apartado 2 podrán ser modificadas oretiradasconarregloalprocedimientoestablecidoenelartículo17.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—11
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Artículo 11
1. Los Estados miembros velarán por que, para recibir la autoriza-
ción de la autoridad competente, los centros de concentración
cumplan,almenos,lassiguientescondiciones.Deberán:
a) estar bajo el control de un veterinario oficial, que garantizará, en
particular, el cumplimiento de lo dispuesto en los apartados 1 y 2delartículo4;
b) estar situados en una zona que no sea objeto de prohibición o
restricción con arreglo a la legislación comunitaria pertinente o a
lalegislaciónnacional;
c) haber sido limpiados y desinfectados antes de cada utilización, de
acuerdoconlasinstruccionesdelveterinariooficial;
d) deberánposeer,enfuncióndelascapacidadesdeacogida:
— unainstalación dedicada exclusivamente aestefincuando sela
usecomocentrodeconcentración;
— instalacionesadecuadasparacargar,descargaryalbergarconve-
nientemente a los animales, abrevarlos, alimentarlos yproporcionarles loscuidadosquepudierannecesitar; estasinsta-
lacionesdeberánpoderselimpiarydesinfectarfácilmente;
— infraestructurasdeinspecciónadecuadas;— infraestructurasdeaislamientoadecuadas;— equipos adecuados de limpieza y desinfección de los locales y
deloscamiones;
— unazonadealmacenamiento suficienteparaelforraje,layacija
yelestiércol;
— unsistemaadecuadodedesagüe;— unaoficinaolocalparaelveterinariooficial;
e) aceptar únicamente animales identificados y que provengan de
rebañosoficialmenteindemnesdetuberculosis,brucelosisyleucosis
oanimales deabasto querespondana lascondiciones fijadas enla
presenteDirectiva,y,enparticular,lasestablecidasenelapartado3del artículo 6. A tal fin, al admitir animales, el propietario delcentro o el responsable del mismo comprobará o hará comprobarlasmarcasdeidentificacióndelosanimales,losdocumentossanita-riosuotrosdocumentosdeacompañamientopropiosdelasespecies
ocategoríasdequesetrate;
f) serobjeto deinspecciones periódicas afindecomprobar elmante-
nimientodelascondicionesquepermitieronlaautorización.
2. El propietario del centro de concentración o el responsable del
mismo, bien basándose en el documento de acompañamiento, o bienen los números o marcas de identificación de los animales, deberáinscribir en un registro o soporte informático, que conservará durante
almenostresaños,lassiguientesinformaciones:
— elnombredelpropietario,elorigen,lafechadeentradaydesalida,
elnúmeroylaidentificacióndelosanimalesdelaespeciebovinao
el número de registro de la explotación de origen o del rebaño de
origendelosanimalesdelaespecieporcinaqueentrenenelcentroysudestinopropuesto;
— el número de registro del transportista y el número de licencia del
camiónqueentregueorecojaalosanimalesdelcentro.
3. La autoridad competente asignará un número de autorización a
cada centro de concentración autorizado. Dicha autorización podrálimitarse a una especie determinada o a animales de reproducción oproducciónoaanimalesdeabasto.Laautoridadcompetentenotificaráa la Comisión la lista de loscentros de concentración autorizados,asícomo,ensucaso,laslistasactualizadas.LaComisióncomunicaráestas
informaciones a losEstadosmiembros en elmarco del Comité veteri-
nariopermanente.
4. Laautoridadcompetentepodrásuspenderoretirarlaautorización
en caso de incumplimiento del presente artículo o de otras disposi-ciones adecuadas de la presente Directiva o de cualquier otra1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—12
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Directiva pertinente en materia de policía sanitaria. Podrá volver a
concederse la autorización cuando la autoridad competente constateque el centro de concentración cumple todas las disposiciones perti-
nentesdelapresenteDirectiva.
5. La autoridad competente se cerciorará de que, cuando estén en
funcionamiento, los centros de concentración tengan un número sufi-ciente de veterinarios oficiales para llevar a cabo todas las tareas que
lescorresponden.
6. Las posibles normas de desarrollo necesarias para la aplicación
uniforme del presente artículo se fijarán con arreglo al procedimientoestablecidoenelartículo17.
Artículo 12
1. LosEstadosmiembrosvelaránporquelostransportistasalosque
hace referencia el artículo 5 de la Directiva 91/628/CEE cumplan lassiguientescondicionesadicionales:
a) paraeltransportedeanimalesdeberánutilizarmediosdetransporte
que:
— hayansidoconstruidosdetalformaquelasheces,layacijaoel
forrajenopuedanderramarseocaerdesdeelvehículo,
— hayan sido limpiados y desinfectados con ayuda de desinfec-
tantes autorizados por la autoridad competente, inmediatamentedespuésdecada transportedeanimales odecualquier productoque pueda afectar a la salud de los animales, y, en caso nece-sario,antesdecualquierotrocargamentodeanimales;
b) dispondrán de instalaciones de limpieza y desinfección adecuadas,
aprobadas porla autoridad competente, incluidas instalaciones paraelalmacenamientodelayacijayelestiércol,obienprobarándocu-
mentalmente que estas operaciones son realizadas por terceros
aprobadosporlaautoridadcompetente.
2. El transportista, para cada vehículo que efectúe el transporte de
animales,llevaráymantendráduranteunperíodomínimodetresaños
unregistroquecontendrá,almenos,lasiguienteinformación:
i) los lugares y fechas de recogida y el nombre o nombre comercial
delaexplotación odelcentro deconcentración enelquesereco-
gieronlosanimales;
ii) loslugaresyfechasdeentregayelnombreonombrecomercialy
direccióndeldestinatarioodelosdestinatarios;
iii) laespecieyelnúmerodeanimalestransportados;
iv) lafechayellugardedesinfección;
v) los detalles de la documentación de acompañamiento (número de
seriedeloscertificados,etc.).
3. Lostransportistasvelaránporqueellotedeanimalesnoentreen
contacto en ningún momento con animales de un estatuto inferior,desde su salida de la explotación o del centro de concentración deorigenhastasullegadaadestino.
4. Los Estados miembros velarán por que los transportistas se
comprometanporescritoa:
— tomartodaslasmedidasnecesarias paracumplirlapresenteDirec-
tiva y, en particular las disposiciones contempladas en el presenteartículo y relativas a los documentos adecuados que deben acom-pañaralosanimales,
— confiar el transporte de los animales a personal que cuente con la
capacidad, la competencia profesional y los conocimientos necesa-
rios.
5. En caso de incumplimiento de las disposiciones del presente
artículo serán aplicables mutatis mutandis , por razones de sanidad
animal,losrequisitosestablecidosenelartículo18delaDirectiva91/628/CEE.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—13
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Artículo 13
1. Los Estados miembros velarán por que todos los comerciantes
estén registrados, aprobados, la autoridad competente les atribuya unnúmero de autorización y cumplan, al menos, las siguientes condi-ciones:
a) únicamente comerciarán con animales identificados y que
provengan de rebaños oficialmente indemnes de tuberculosis,
brucelosis y leucosis o animales de abasto que cumplan las condi-ciones fijadas en la presente Directiva, y, en particular, lasestablecidasenelapartado3delartículo6.Atalfin,elcomerciantevelará por que los animales estén correctamente identificados y
vayan acompañados de los documentos sanitarios correspondientes
propiosdelasespeciesdequesetrate.
Noobstante,laautoridadcompetente podráautorizarlacomerciali-
zacióndeanimalesidentificadosquenorespondanalascondiciones
establecidas en el primer párrafo siempre que los animales seanconducidos inmediatamente a un matadero en el Estado miembrode origen sin transitar por sus instalaciones, para ser sacrificadosallíloantesposibleconelfindeevitartodapropagacióndeenfer-
medades.Deberánadoptarsetodaslasdisposicionesnecesariaspara
que dichos animales, desde su entrada en el matadero, no puedanentrar en contacto con otros animales y para que se les sacrifiqueporseparadodelosdemásanimales;
b) el comerciante, bien basándose en el documento de acompaña-
miento, o bien en los números o marcas de identificación de losanimales, deberáinscribir enunregistroosoporteinformático, queconservarádurantealmenostresaños,lassiguientesinformaciones:
— el nombre del propietario, el origen, la fecha de compra, las
categorías, el número y la identificación de los animales de la
especie bovina o el número de registro de la explotación de
origen o del rebaño de origen de los animales de la especieporcinaadquiridos,
— elnúmeroderegistrodeltransportistay/oelnúmerodelicencia
delcamiónqueentregueorecojaalosanimales,
— el nombre y dirección del comprador y el destino de los
animales,
— las copias de los planes de viaje y/o el número de serie de los
certificadossanitarios;
c) cuando el comerciante mantenga animales en sus instalaciones,
velaráporque:
— seemprenda unaformación específica delpersonalquesehaga
cargo de los animales en lo que respecta a la aplicación de losrequisitosdelapresenteDirectivayalcuidadoyalaproteccióndelosanimales,
— el veterinario oficial someta periódicamente a los animales
adquiridosacontroles,y,ensucaso,apruebas,ysetomentodas
las medidas necesarias para evitar la propagación de enferme-dades.
2. LosEstadosmiembros velarán porquecada instalación utilizada
por el comerciante para el ejercicio de su profesión esté registrada y
dotada por la autoridad competente de un número de autorización, y
porquecumplan,almenos,lassiguientescondiciones:
a) estarbajolasupervisióndeunveterinariooficial;
b) estar situadas en una zona que no sea objeto de prohibición o
restricción con arreglo a la legislación comunitaria pertinente o alalegislaciónnacional;
c) poseer:
— instalaciones adecuadas, decapacidad suficiente, yenparticular
infraestructuras de inspección adecuadas e infraestructuras deaislamiento para poder aislar a todos los animales en caso debrotedeunaenfermedadcontagiosa,1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—14
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— instalaciones adecuadas para descargar y, cuando sea necesario,
albergar convenientemente a los animales, abrevarlos, alimen-tarlos y proporcionarles los cuidados que pudieran necesitar;
estas instalaciones deberán poderse limpiar y desinfectar fácil-
mente,
— unasuperficiesuficientepararecibirlayacijayelestiércol,
— unsistemaadecuadodedesagüe;
d) antes de cada utilización se deberán limpiar y desinfectar, de
acuerdoconlasinstruccionesdelveterinariooficial.
3. Laautoridadcompetentepodrásuspenderoretirarlaautorización
en caso de incumplimiento del presente artículo o de otras disposi-ciones adecuadas de la presente Directiva o de cualquier otraDirectiva pertinente en materia de policía sanitaria. Podrá volver aconcederse la autorización cuando la autoridad competente constate
que el comerciante cumple todas las disposiciones pertinentes de la
presenteDirectiva.
4. Laautoridadcompetentellevaráacaboinspeccionesperiódicasa
fin de comprobar el cumplimiento de los requisitos adecuados delpresenteartículo.
Artículo 14
1. La autoridad competente de un Estado miembro podrá instaurar
unsistemaderedesdevigilancia.
El sistema de redes de vigilancia deberá estar compuesto, como
mínimo,de:
— losrebaños,
— elpropietariodelaexplotaciónocualquierpersonafísicaojurídica
quesearesponsabledelamisma,
— el veterinario autorizado o el veterinario oficial responsable de la
explotación,
— elserviciooficialdeveterinariadelEstadomiembro,
— loslaboratoriosoficialesdediagnósticoveterinarioocualquierotro
laboratorioautorizadoporlaautoridadcompetente,
— unabasededatosinformatizada.
Losveterinariosoficialesdelosmataderosydeloscentrosdeconcen-
traciónautorizadosestaránasociadosalsistemaderedes.
2. Dicho sistema de redes de vigilancia tendrá como objetivo prin-
cipal la calificación oficial de las explotaciones, el mantenimiento deestacalificaciónmedianteinspeccionesperiódicas,larecogidadedatosepidemiológicos y la vigilancia de las enfermedades, de modo que se
garanticeelrespetodetodaslasprescripcionesdelapresenteDirectiva
odecualquierotraDirectivapertinenteenmateriadepolicíasanitaria.
Dicho sistema de redes de vigilancia será obligatorio en todas las
explotaciones del territorio del Estado miembro que haya instaurado
tal sistema. No obstante, la autoridad competente podrá autorizar lainstauración de dicho sistema de redes en una parte del territorio quesecompongadeunaovariasregionesadyacentes,talcomoestándefi-nidas en la letra p) del apartado 2 del artículo 2. En caso de que seconcediera dicha excepción, la circulación de animales hacia dicha
parte del territorio a partir de otras regiones que no formen parte del
sistema de redes sesometerá a las disposiciones de la presente Direc-tiva.
La autoridad competente fijará las obligaciones y los derechos a los
que deberán atenerse los veterinarios autorizados, la persona respon-sable de la explotación o su propietario y cualquier otro participanteenelsistema,incluidalapersonaresponsabledelaconcesióndelcerti-ficadosanitario.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—15
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3. Laautoridad competente velará porquelasobligaciones estable-
cidasenelapartado2incluyanalmenoslosiguiente:
A. Cadapropietarioopersonaresponsabledeunaexplotacióndeberá:
i) garantizar,mediantecontratooactojurídico,losserviciosdeun
veterinarioautorizadoporlaautoridadcompetente;
ii) recurririnmediatamentealveterinarioautorizadoresponsablede
unaexplotación encuantosospechelaexistencia deunaenfer-
medad contagiosa o de cualquier enfermedad de notificaciónobligatoria;
iii) informar al veterinario autorizado de toda introducción de
animalesensuexplotación;
iv) aislar a losanimales antes deintroducirlos ensuexplotación a
fin de que el veterinario autorizado compruebe, en su caso
mediantelaspruebasprescritas,sipuedemantenerseelestatutodelaexplotación.
B. Losveterinariosautorizadosconarregloalaletram)delapartado2
del artículo 2 estarán sometidos al control de la autoridad compe-
tenteydeberáncumplirlossiguientesrequisitos:
i) reunirlascondicionesnecesariasparaejercerlaprofesiónvete-
rinaria;
ii) notenerrelacionesfinancierasofamiliaresconelpropietarioo
conlapersonaresponsabledelaexplotación;
iii) poseerconocimientosespecializadosenmateriadepolicíasani-
tariaaplicable alasespeciesdequesetrate.Estosignificaquedeberán:
— actualizar periódicamente sus conocimientos, en particular
enlorelativoalareglamentaciónsanitariacorrespondiente,
— cumplir los requisitos establecidos por la autoridad compe-
tenteparagarantizarelbuenfuncionamientodelared,
— facilitar información al propietario o a la persona respon-
sable de la explotación y prestarle asistencia a fin de quesetomentodaslasmedidasnecesariasparaquesemantenga
elestatutodelaexplotación, enparticularconarregloalos
programas acordados de común acuerdo con la autoridadcompetente,
— velarporquesecumplanlosrequisitosrelativosa:
i) la identificación y el certificado sanitario de los
animales del rebaño, los animales introducidos y losadquiridos,
ii) laobligacióndedeclararlasenfermedadesinfecciosasy
cualquier otro factor de riesgo para la salud o el bien-estaranimalyparalasaludhumana,
iii) el establecimiento, en la medida de lo posible, de la
causa de mortalidad delosanimales yel lugar a dondedebenserexpedidos,
iv) las condiciones higiénicas del rebaño y de las unidades
deproduccióndeganado.
Si el buen funcionamiento del sistema lo requiere, cada
Estado miembro podrá restringir la responsabilidad de losveterinarios yunnúmerolimitadodeexplotaciones oaunazonageográficadeterminada.
La autoridad competente elaborará listas de veterinarios
autorizados y de explotaciones autorizadas que participenen la red. Si la autoridad competente considera que uno de
los participantes en la red ya no cumple las condiciones
arriba mencionadas, cancelará oretirará la autorización, sinperjuiciodecualquierotrasanciónquepudiereseraplicable.
C. Labasededatosinformatizadadeberácontener,comomínimo,las
siguientesinformaciones:
1) Paracadaanimal:
— elcódigodeidentificación,
— lafechadenacimiento,1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—16
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— elsexo,
— larazaoelpelaje,
— el código de identificación de la madre o, en el caso de un
animalimportado deuntercerpaís,elnúmerodeidentifica-
ción atribuido tras el control con arreglo a la Directiva 92/102/CEE y que esté vinculado al número de identificacióndeorigen,
— elnúmerodeidentificacióndelaexplotacióndenacimiento,
— losnúmerosdeexplotacióndetodaslasexplotacionesenlas
quesehayamantenidoalanimalylasfechasdecadacircu-
lación,
— lafechadesumuerteodesusacrificio.
2) Paracadaexplotación:
— unnúmerodeidentificaciónconsistente—ademásdelcódigo
delpaís—enuncódigoconunmáximode12caracteres,
— elnombreyladireccióndeltitular.
3) La base de datos deberá permitir en todo momento disponer de
lasinformacionessiguientes:
— el número de identificación de todos los animales de la
especiebovinapresentesenunaexplotacióny,enelcasode
grupos de animales de la especie porcina, el número deregistro de la explotación de origen o del rebaño de origen,asícomoelnúmerodecertificadosanitario,ensucaso,
— una lista de toda circulación de cada animal a partir de la
explotación de nacimiento o, en el caso de los animalesimportados deterceros países, de la explotación de importa-ción; y, en el caso de grupos de animales de la especie
porcina, el número de registro de la última explotación o
del último rebaño y, en el caso de animales importados detercerospaíses,laexplotacióndeimportación.
Estasinformacionesseconservaránenlabasededatoshastaque
hayan pasado tres años seguidos desde la muerte del animal dela especie bovina o hasta que hayan pasado tres años seguidos
desde que se hizo el registro cuando se trate de registros de
animalesdelaespecieporcina.
No obstante, por lo que se refiere a los animales de la especie
porcina,sóloseránaplicableslospuntos2,3y4.
4) Con objeto de garantizar el carácter operativo de las distintas
bases de datos informatizadas nacionales sobre los animales dela especie porcina, se adoptarán con arreglo al procedimientocontemplado en el artículo 17 las normas de desarrollo perti-nentes, incluida la información que las bases de datosnacionalesdeberáncontener.
4. Todos los otros participantes en la red que no sean los contem-
plados en las partes A y B del apartado 3 operarán bajo laresponsabilidad de la autoridad competente. La autoridad competente
de cada Estado miembro será responsable del establecimiento de la
red, y, para garantizar su buen funcionamiento, procederá a controlarlaredconregularidad.
5. LosEstadosmiembrosqueapliquenunsistemaderedesdevigi-
lanciatalcomosehadefinidoenlosapartados1a4,operativoduranteunperíodo dedoce mesescomo mínimo, deberán solicitar a laComi-siónqueloapruebeconarregloalprocedimientodelartículo17.
Atalfin,laComisiónexaminará ladocumentaciónpresentada porlos
Estadosmiembros.
Los expertos de la Comisión validarán los sistemas de redes con la
ayudadeunprocedimientodeauditoría.
Si los resultados de dichas auditorías son favorables, la Comisión, en
un plazo de noventa días a partir de la recepción de la solicitud de1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—17
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aprobación, transmitirá al Comité veterinario permanente un informe
acompañadodelaspropuestasadecuadas.
En caso de constatarse infracciones repetidas, podrá suspenderse la
autorización del sistema de red de vigilancia con arreglo al procedi-miento establecido en el artículo 17 a petición de la Comisión o deunoovariosEstadosmiembros.
6. Los Estados miembros que hayan dispuesto en todo su territorio
un sistema de red de vigilancia reconocido tal como establece elpresente artículo estarán autorizados a no aplicar el segundo guión delaletraa)delapartado2delartículo3alacirculacióndelosanimales
contempladosenlapresenteDirectivaenelinteriordesuterritorio.
7. Amástardar el31dediciembre de1999,elConsejo,basándose
enuninformedelaComisiónacompañadodepropuestassobrelasquese pronunciará por mayoría cualificada, revisará las disposiciones del
presente artículo, a la luz de la experiencia adquirida, con vistas a
modificarlas, actualizarlas o, si procediera, ampliar su aplicación atodoslosEstadosmiembros.
8. Lafinanciacióndelsistemadereddevigilanciaseabordaráenel
marco de la revisión del Anexo B de la Directiva 85/73/CEE(
1), con
arregloalodispuestoenelartículo8delaDirectiva96/43/CE.
Artículo 15
1. Los Estados miembros adoptarán las medidas específicas
adecuadasparasancionartodainfracciónalapresenteDirectiva, tantosifuerecometidaporunapersonafísicacomoporunapersonajurídica.
2. Si se comprobare que no se respetan o no se han respetado las
disposiciones de la presente Directiva, la autoridad competente dellugar donde se hubiere hecho dicha comprobación deberá tomar lasmedidas adecuadas tanto para salvaguardar la salud de los animalescomoparaprevenirtodapropagacióndeenfermedades.
Según los casos, esta medida de la autoridad competente podrá
consistirentomarlasdisposicionesnecesariaspara:
a) terminar el viaje o reexpedir a los animales a su punto de partida
por el trayeto más directo, siempre que con dicha medida no sepongaenpeligrolasaludoelbienestardelosanimales;
b) albergar convenientemente a los animales y suministrarles los
cuidadosnecesariosencasodeinterrupcióndelviaje;
c) hacer sacrificar a los animales. El destino y la utilización de las
canalesdedichosanimalesestánregulados:
— enlasdisposicionesestablecidasenlaDirectiva64/433/CEE(
2),
— o en las disposiciones establecidas en la Directiva 90/667/CEE
cuando el estatuto sanitario de los animales no puede estable-
cerse o cuando éstos pueden presentar un riesgo en materia de
sanidadanimalodesaludpública.
Noobstante,enloscasosenqueconvengaaplicarlasdisposiciones
establecidas en la Directiva 90/667/CEE, deberá concederse unplazo de regularización alpropietario oa surepresentante antes derecurrir a esta última posibilidad. En este caso serán aplicables lasdisposicionesdelapartado3delpresenteartículo.
3. LaautoridadcompetentedelEstadomiembrodedestinoadvertirá
inmediatamente a la autoridad competente del Estado miembro deorigencuandoconstatecualquierinfracciónalapresenteDirectiva.
Los Estados miembros, de conformidad con lo dispuesto en la Direc-
tiva 89/608/CEE, se prestarán mutua asistencia para la aplicación de1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—18
(1)D OnoL 32 de 5. 2. 1985, p. 14. Directiva cuya última modificación la
constituyelaDirectiva96/43/CE(DOnoL162de1.7.1996,p.1).
(2)D Ono121de29.7.1964,p.2012/64.Directivacuyaúltimamodificaciónla
constituyelaDirectiva95/23/CE(DOnoL243de11.10.1995,p.7).
▼M42
la presente Directiva, y más concretamente para garantizar el cumpli-
mientodelasdisposicionesestablecidasenelpresenteartículo.
4. Elpresenteartículonoafectaráalasnormasnacionalesaplicables
enmateriadesancionespenales.
Artículo 16
1. ElAnexoA,elcapítuloIdelAnexoDylosAnexosEyFserán
modificados por el Consejo, que se pronunciará por mayoría cualifi-cada a propuesta de la Comisión, con vistas, especialmente, aadaptarlosalaevolucióntecnológicaycientífica.
LosAnexosB,CyelcapítuloIIdelAnexoDseránmodificadosporla
Comisiónconarregloalprocedimientoestablecidoenelartículo17.
Noobstante:
a) antes del1dejulio de1997,laComisiónsometerá alConsejouna
propuestademodificación delAnexoAydelcapítuloIdelAnexoDconelfindeactualizarlosy,sifuerenecesario,aplicaráelmismoprocedimiento al Anexo F. El Consejo se pronunciará por mayoríacualificadasobreestaspropuestasantesdel1deenerode1998;
b) antes del 30 de junio de 1998, la Comisión, de acuerdo con el
procedimientoprevistoenelartículo17ybasándoseeneldictamen
del Comité científico veterinario, actualizará y modificará si fuere
necesariolosAnexosB,CyelcapítuloIIdelAnexoDparaadap-tarlosalaevolucióncientífica.
2. Amástardar el31dediciembre de1999,elConsejo,basándose
enuninformedelaComisiónacompañadodelaspropuestasadecuadas
sobre las que se pronunciará por mayoría cualificada, revisará lasdisposicionesdelapresenteDirectiva,alaluzdelaexperienciaadqui-rida, con vistas a modificarlas y actualizarlas para adecuarse a lasnormasprevistasparalarealizacióndelmercadointerior.
3. Cuando resulte necesario para facilitar la transición al nuevo
sistemaestablecidoporlapresenteDirectiva,laComisión,conarreglo
alprocedimiento previstoenelartículo 17 bis,podráadoptarmedidas
transitoriascuyaduraciónnopodráexcederdedosaños.
Artículo 17
1. LaComisiónestaráasistidaporelComitéveterinariopermanente
creado mediante la Decisión 68/361/CEE, denominado en lo sucesivo«elComité».
2. Enloscasosenquesehagareferenciaalpresenteapartado,serán
deaplicaciónlosartículos5y7delaDecisión1999/468/CE.
El plazo a que hace referencia en el apartado 6 del artículo 5 de la
Decisión1999/468/CEquedafijadoentresmeses.
3. ElComitéaprobarásureglamentointerno.
Artículo 17bis
1. LaComisiónestaráasistidaporelComitéveterinariopermanente
creado mediante la Decisión 68/361/CEE, denominado en lo sucesivo
«elComité».
2. Enloscasosenquesehagareferenciaalpresenteapartado,serán
de aplicación los artículos 5 y 7 de la Decisión 1999/468/CE, obser-vandolodispuestoensuartículo8.
Elplazoaquesehacereferencia enelapartado6delartículo 5dela
Decisión1999/468/CEquedafijadoentresmeses.
3. ElComitéaprobarásureglamentointerno.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—19
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Artículo 18
LosEstadosmiembrosquenohubiereninstauradounsistemaderedes
devigilanciaautorizadasvelaránporqueseaplenamenteoperativauna
base de datos informatizada conforme a lo dispuesto en el artículo 14
delamanerasiguiente:
a) porloqueserefierealosanimalesdelaespeciebovina,apartirdel
31dediciembrede1999;
b) porloqueserefiere alregistro deexplotaciones deanimales dela
especie porcina, en cumplimiento de las disposiciones establecidas
en el punto 2 de la letra c) del apartado 3 del artículo 14, a partir
del31dediciembrede2000;
c) por lo que se refiere a los movimientos de los animales de la
especie porcina, en cumplimiento de las disposiciones establecidas
enelpunto3delaletrac)delapartado3delartículo14:
— desde su explotación de nacimiento, no más tarde del 31 de
diciembrede2001,
— desde cualquier otra explotación, no más tarde del 31 de
diciembrede2002.
Cadamovimientodeanimalesdelaespecieporcinaseráregistradoen
labasededatos.Elregistroincluirácomomínimoelnúmerodecerdos
transportados, el número de identificación de la explotación o de la
manada de procedencia, el número de identificación de la explotaciónodelamanadadedestino,lafechadepartidaylafechadellegada.
Artículo 19
Las normas establecidas en la Directiva 90/425/CEE serán aplicables,
enparticular,aloscontrolesenellugardeorigen,alaorganizaciónyel seguimiento de los controles que deba llevar a cabo el país dedestinoyalasmedidasdesalvaguardiaquehayandeadoptarse.
Artículo 20
LosdestinatariosdelapresenteDirectivaseránlosEstadosmiembros.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—20
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ANEXO A
I.Rebañobovinooficialmente indemnedetuberculosis
A efectos de la presente sección, se entenderá por «bovinos» todos los
bovinosexceptolosanimalesqueparticipenenacontecimientosculturaleso
deportivos.
1. Se considerará «rebaño bovino oficialmente indemne de tuberculosis»
aquelenelque:
a) todoslosanimalesesténexentosdesignosclínicosdetuberculosis;
b) todos los bovinos de más de seis semanas hayan dado resultados
negativos en al menos dos pruebas intradérmicas de la tuberculina
oficiales realizadas con arreglo al anexo B, la primera, seis meses
después de la eliminación de cualquier infección del rebaño, y la
segunda, seis meses después; o, en caso de que el rebaño se
componga exclusivamente de animales procedentes de rebaños
oficialmente indemnes de tuberculosis, la primera prueba deberá
realizarse al menos sesenta días después de la composición del
rebañoylasegundanoseránecesaria;
c) traslarealizacióndelaprimerapruebamencionadaenlaletrab),no
se haya introducido en el rebaño ningún animal de más de seis
semanasquenohayareaccionadonegativamenteaunapruebaintra-
dérmicadelatuberculina realizada yevaluadaconarregloalanexo
B en los treinta días anteriores o en los treinta días siguientes a su
introducción en el rebaño; en este último caso, el animal o los
animales deberán aislarse físicamente del resto del ganado, de
maneraqueseevitetodocontactodirectooindirectoconlosdemás
animales,hastaquedenresultadosnegativos.
Noobstante,laautoridadcompetentepodránoexigirquesellevea
cabodichapruebaparalacirculación deanimalesensuterritoriosi
el animal procede de un rebaño oficialmente indemne de
tuberculosis, excepto en los Estados miembros en los que, el 1 de
enero de 1998 y hasta la obtención del estatuto de región oficial-
mente indemne de tuberculosis, la autoridad competente exigía la
realización de dichas pruebas en los animales que circularan entre
rebañosparticipantesenunsistemaderedesconarregloaloestable-
cidoenelartículo14.
2. Un rebaño bovino mantendrá su estatuto de rebaño oficialmente
indemnedetuberculosissi:
a) siguencumpliéndoselascondicionesestablecidasenlasletrasa)yc)
delpunto1;
b) todoslosanimalesqueentrenenlaexplotaciónprocedenderebaños
conestatutoderebañooficialmenteindemnedetuberculosis;
c) todoslosanimales de la explotación, con excepción de los terneros
de menos de seis semanas nacidos en ella, se someten a intervalos
anuales a pruebas ordinarias intradérmicas de la tuberculina de
conformidadconelanexoB.
Noobstante,encasodequetodoslosrebañosbovinosdeunEstado
miembroodeunapartedeunEstadomiembroesténsometidosaun
programaoficialdeluchacontralatuberculosis,laautoridadcompe-
tentededichoEstadomiembropodrácambiarlafrecuenciadeestas
pruebasordinariasdelmodosiguiente:
— silamedia—determinada el31dediciembredecadaaño—de
los porcentajes anuales de rebaños bovinos en los que se haya
confirmado una infección de tuberculosis no es superior al 1 %
de todos los rebaños del área definida durante los dos últimos
períodos anuales de vigilancia, el intervalo entre las pruebas
ordinarias practicadas sobrelosrebaños podrá aumentarse a dosañosysepodrádispensardepruebasdetuberculinaalosmachos
de engorde de una unidad epidemiológica aislada siempre que
pertenezcan a rebaños oficialmente indemnes de tuberculosis y
que la autoridad competente garantice que los machos de
engorde no se usarán para la reproducción y que se enviarán
directamenteasacrificio;
— silamedia—determinada el31dediciembredecadaaño—de
los porcentajes anuales de rebaños bovinos en los que se haya
confirmadounainfeccióndetuberculosisnoessuperioral0,2%
de todos los rebaños del área definida durante los dos últimos
períodos bienales de vigilancia, el intervalo entre las pruebas
ordinarias podrá ampliarse a tres años y/o la edad a la que los1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—21
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animalesdeberánsufrirdichaspruebaspodráalcanzarlosveinti-
cuatromeses;
— silamedia—determinada el31dediciembredecadaaño—de
los porcentajes anuales de rebaños bovinos en los que se haya
confirmadounainfeccióndetuberculosisnoessuperioral0,1%
de todos los rebaños del área definida durante los dos últimos
períodos trienales de vigilancia, el intervalo entre las pruebas
ordinarias podrá extenderse a cuatro años o, si se reúnen las
siguientescondiciones,laautoridadcompetentepodráeximirlos
rebañosdelaspruebasdetuberculina:
1) que,antesdelaintroducciónenunrebaño,todoslosbovinos
sesometan,conresultadonegativo,aunapruebaintradérmica
delatuberculina
o
2) que todos los bovinos sacrificados sean objeto de una
búsquedadelesionestuberculosas,yquesesometaaéstasa
unexamenhistopatológicoybacteriológico paraladetección
delbacilotuberculoso.
La autoridad competente podrá también aumentar la frecuencia de
laspruebasdetuberculinaporloqueserefiereaunEstadomiembro
o a una parte del territorio de un Estado miembro en caso de que
aumenteelniveldeinfección.
3A. El estatuto de rebaño oficialmente indemne de tuberculosis se
suspenderási:
a) nosecumplenyalascondicionesmencionadasenelpunto2;
o
b) se considera que uno o varios animales han reaccionado positiva-
mente a una prueba de tuberculina, o se sospecha que existe un
casodetuberculosisenunexamen post mortem.
Cuando se considere que un animal reacciona a la prueba de
tuberculina,deberáapartarsedelrebañoysacrificarse.Sellevarána
cabo los exámenes post mortem, de laboratorio y epidemiológicos
adecuados en dicho animal o en su cadáver. El estatuto del rebaño
permanecerá suspendido hasta que se hayan completado todos los
exámenes de laboratorio. Si no se confirmare la presencia de
tuberculosis, podrá levantarse la suspensión del estatuto de rebaño
oficialmente indemne de tuberculosis una vez se haya llevado a
cabounapruebaenlosanimalesdemásdeseissemanasconresul-
tado negativo al menos cuarenta y dos días después de haber
apartado del rebaño al animal o animales que hubieren reaccionado
alapruebadetuberculina;
o
c) el rebaño contiene animales cuyo estatuto debe determinarse tal
como describe el anexo B. En ese caso, el estatuto del rebaño
quedará suspendido hasta que se aclare el estatuto de los animales.
Dichos animales deberán aislarse del resto del rebaño hasta que se
aclare su estatuto, ya sea mediante una nueva prueba transcurridos
cuarentaydosdíasomedianteunexamen post mortemydelabora-
torio;
d) sinembargo,ynoobstantelodispuestoenlaletrac),enlosEstados
miembros en los que la autoridad competente lleve a cabo pruebas
ordinariasen losrebañosmediante la tuberculinización comparativa
aque serefiere elanexo B,cuandonosehaya confirmado laexis-
tencia de animales que hubieren reaccionado positivamente a las
pruebas al menos en los últimos tres años, la autoridad competente
podrá decidir no restringir la circulación de otros animales delrebaño siempre que el estatuto de todos los animales que hubieren
reaccionado positivamente pero de manera no concluyente se
resuelva mediante una prueba más cuarenta y dos días después y
queningúnanimaldelaexplotaciónpuedaserobjetodeintercambio
comunitario hasta que no se haya resuelto el estatuto de todos los
animalesquehubierenreaccionadopositivamenteperonodemanera
concluyente. Si en dicha prueba posterior algún animal reaccionare
positivamente o continuare presentando una reacción positiva pero
no concluyente, se aplicarán las condiciones de la letra b). Si la
presencia de enfermedad se confirmare posteriormente, todos los
animalesquehubierenabandonadolaexplotacióndesdeelmomento
delaúltima pruebaclara realizada enelrebaño seránlocalizados y
sometidosapruebas.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—22
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3B. Elestatutoderebañooficialmenteindemnedetuberculosisseretirarási
se confirmare la presencia de tuberculosis mediante el aislamiento del
M. bovis bacterium enelexamendelaboratorio.
Laautoridadcompetentepodráretirarelestatutosi:
a) nosecumplierenylascondicionesmencionadasenelapartado2,o
b) se observaren lesiones clásicas de tuberculosis en el examen post
mortem,o
c) una investigación epidemiológica estableciere la probabilidad de la
infección,o
d) por cualesquiera otras razones que se consideren necesarias para el
controldelatuberculosisbovina.
Laautoridadcompetentellevaráacabolalocalizaciónylaspruebasen
cualquierrebañoqueseconsidereepidemiológicamente relacionado.El
estatutoderebañooficialmenteindemnedetuberculosisseguiráestando
retiradohastaquesehayanefectuadoellavadoyladesinfeccióndelos
locales y utensilios y todos los animales de más de seis semanas de
edad hayan reaccionado negativamente por lo menos a dos pruebas
consecutivas de tuberculina, la primera, como mínimo sesenta días, y
la segunda, como mínimo cuatro meses y como máximo doce meses
despuésdelaretirada delúltimoanimal quehayadadoresultadoposi-
tivo.
4. Sobre la base de la información facilitada de conformidad con el
artículo 8, un Estado miembro o una parte del territorio de un Estado
miembro podrá declararse oficialmente indemne de tuberculosis con
arreglo al procedimiento establecido en el artículo 17 si cumple las
condicionessiguientes:
a) elporcentajederebañosbovinoscuyainfeccióncontuberculosisha
sidoconfirmadanohasuperadoel0,1%anualdetodoslosrebaños
duranteseisañosconsecutivosyalmenosun99,9%delosrebaños
han conseguido el estatuto de rebaños oficialmente indemnes de
tuberculosis durante seis años consecutivos, habiéndose procedido
alcálculodeesteúltimoporcentajeel31dediciembredecadaaño
natural;
b) todos y cada uno de los animales bovinos estarán identificados con
arregloalodispuestoenlalegislacióncomunitaria;
c) todos los bovinos sacrificados son sometidos a un examen post
mortemoficial;
d) secumplen losprocedimientos desuspensiónyretirada delestatuto
derebañooficialmenteindemnedetuberculosis.
5. Un Estado miembro o una parte del territorio de un Estado miembro
mantendrá su estatuto de zona oficialmente indemne de tuberculosis si
siguen dándose las condiciones establecidas en las letras a) a d) del
punto4.Noobstante,siexistenpruebasquedenotenuncambiosignifi-
cativo en la situación de la tuberculosis en un Estado miembro o una
parte del territorio de un Estado miembro que hayan sido reconocidos
oficialmente indemnes de tuberculosis, la Comisión podrá tomar, de
conformidadconelprocedimientoestablecidoenelartículo17,ladeci-
sióndesuspenderoanularelestatutohastaquesehayancumplidolos
requisitosdeladecisión.
II.Rebañobovinooficialmente indemneoindemnedebrucelosis
A efectos de la presente sección, se considerarán «bovinos» todos los
animales de la especie bovina, con excepción de los machos de engorde
siempre que procedan de rebaños oficialmente indemnes de brucelosis y
que la autoridad competente garantice que no se utilizarán los animales de
engordeparalareproducciónyqueseenviarándirectamenteasacrificio.
1. Se considerará «rebaño bovino oficialmente indemne de brucelosis»
aquelenelque:
a) nohayabovinosquehayansidovacunadoscontralabrucelosis,con
excepcióndelashembrasvacunadasalmenostresañosantes;
b) todos los bovinos hayan permanecido exentos de signos clínicos de
brucelosisdurantealmenosseismeses;1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—23
▼M46
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▼M44
c) todos los bovinos de más de doce meses hayan sido sometidos a
alguna de las siguientes baterías de pruebas, con resultados nega-
tivos,deacuerdoconelanexoC:
i) dospruebasserológicas,talycomoseespecificanenelpunto10,
con un intervalo de más de tres meses y de menos de doce
meses;
ii) tres pruebas de muestras de la leche a intervalos de tres meses,
seguidas de una prueba serológica, tal y como se especifica en
elpunto10,almenosseissemanasdespués;
d) todo bovino que se incorpore al rebaño oficialmente indemne de
brucelosis y, en el caso de los bovinos de más de doce meses de
edad, muestra un título brucelar inferior a 30 unidades internacio-
nales aglutinantes por mililitro en una seroaglutinación practicada
con arreglo al anexo C o reacciona negativamente a cualquier otra
prueba autorizada de conformidad con el procedimiento establecido
enelartículo17durantelostreintadíasanterioresolostreintadías
posteriores ala fecha de suincorporación al rebaño; en este último
caso, el animal o los animales deberán aislarse físicamente de los
otros animales del rebaño de tal modo que se evite el contacto
directo o indirecto con los demás animales hasta que el resultado
delaspruebasseanegativo.
2. Un rebaño bovino mantendrá su estatuto de rebaño oficialmente
indemnedebrucelosissi:
a) se realiza anualmente una de las siguientes baterías de pruebas con
resultadonegativo,deconformidadconelanexoC:
i) tres pruebas de anillo (ring test)de la leche a intervalos de al
menostresmeses;
ii) tres pruebas ELISA de la leche efectuadas a intervalos de al
menostresmeses;
iii) dospruebasdelanillo (ring test)delalecheconunintervalode
al menos tres meses, seguidas de la prueba serológica indicada
enelpunto10almenosseissemanasdespués;
iv) dospruebasELISAdelalecheefectuadasconunintervalodeal
menos tres meses, seguidas de la prueba serológica indicada en
elpunto10almenosseissemanasdespués;
v) dospruebasserológicasconunintervalodealmenostresmeses
ydenomásdedocemeses.
Noobstante,encasodequetodoslosrebañosbovinosdeunEstado
miembroodeunapartedeunEstadomiembroquenoesténoficial-
menteindemnesdebrucelosisesténsometidosaunprogramaoficial
paracombatirlabrucelosis,laautoridadcompetentededichoEstado
miembro podrá cambiar la frecuencia de las pruebas ordinarias del
modosiguiente:
— silosrebañosbovinosinfectadosnosuperanel1%,podrábastar
con efectuar cada año dos pruebas del anillo de la leche o dos
pruebas ELISA de la leche con un intervalo de al menos tres
meses,ounapruebaserológica;
— si al menos el 99,8 % de los rebaños bovinos han sido recono-
cidos oficialmente indemnes de brucelosis al menos durante
cuatro años, el intervalo entre loscontroles podrá incrementarse
adosañossisesometenapruebatodoslosanimalesdemásde
doce meses de edad, o podrán someterse a prueba sólo los
animales de más de veinticuatro meses de edad si se someten a
prueba los rebaños cada año. Los controles deberán realizarse
utilizando una de las pruebas serológicas mencionadas en el
punto10;
b) todos los bovinos que entren en el rebaño proceden de rebaños
oficialmente indemnes de brucelosis y los bovinos de más de doce
mesesmuestranuntítulobrucelar inferiora30unidadesinternacio-
nalespormililitro enunaseroaglutinación practicada conarregloal
anexoCoreaccionan negativamente acualquierotrapruebaautori-
zadadeconformidadconelprocedimientoestablecidoenelartículo
17durante lostreinta días anteriores o lostreinta días posteriores a
lafechadesuincorporaciónalrebaño;enesteúltimocaso,elanimal
olosanimalesdeberánaislarsefísicamentedelosotrosanimalesdel
rebaño de tal modoque seevite elcontacto directo oindirecto con
los demás animales hasta que el resultado de las pruebas sea nega-
tivo.
Noobstante,lapruebadescritaenlaletrab)podránorequerirseen
los Estados miembros o en las regiones del territorio de Estados
miembros en los que, desde al menos dos años antes, el porcentaje
de rebaños bovinos infectados de brucelosis no haya excedido del1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—24
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0,2 % y en caso de que el animal proceda de un rebaño bovino
oficialmente indemne de brucelosis de uno de esos Estados miem-
bros o regiones del territorio de Estados miembros y no haya
estado en contacto, durante el transporte, con bovinos de estatuto
inferior;
c) noobstanelodispuestoenlaletrab),podránintroducirsebovinosde
un rebaño bovino indemne de brucelosis en un rebaño oficialmente
indemne de brucelosis si son mayores de dieciocho meses y, en
casodehabersidovacunadoscontralabrucelosis,lavacunación se
harealizadomásdeunañoantes.
Enlostreinta díaspreviosasuintroducción, esosanimalesdeberán
haber dado un título brucelar inferior a 30 unidades internacionales
aglutinantes por mililitro y un resultado negativo en una prueba de
fijación del complemento u otra prueba autorizada de conformidad
conelprocedimientoestablecidoenelartículo17.
Sin embargo, cuando un bovino hembra procedente de un rebaño
indemne de brucelosis se introduzca en un rebaño oficialmente
indemne de brucelosis en las condiciones del apartado anterior,
dichorebañoseconsideraráindemnedebrucelosisdurantedosaños
apartirdelafechadeintroduccióndelúltimoanimalvacunado.
3A. El estatuto de rebaño oficialmente de brucelosis deberá ser supendido
si:
a) nosecumplenyalascondicionesdelospuntos1y2;o
b) a raíz de los resultados de pruebas de laboratorio o por motivos
clínicos, se sospecha que uno o varios bovinos tienen brucelosis y
se han sacrificado o aislado los animales sospechosos para evitar
todocontactodirectooindirectoconlosdemásanimales.
Cuando el animal haya sido sacrificado y no pueda ya someterse a
pruebas,lasuspensiónpodrálevantarse sidospruebasdeseroaglutina-
ción,realizadasconarregloalanexoCentodoslosbovinosdelrebaño
mayores de doce meses, muestran un título brucelar inferior a 30
unidades internacionales aglutinantes por mililitro. La primera prueba
serealizaráalmenostreintadíasdespuésdelaretiradadelanimalyla
segunda,almenossesentadíasdespués.
Cuandoelanimal hayasidoaislado delosdemás animales delrebaño,
podrávolveraintroducirseenelrebañoyéstepodrárecuperarsuesta-
tutotras:
a) unapruebadeseroaglutinación quehayamostradountítuloinferior
a30unidadesinternacionales aglutinantes pormililitro yhayadado
resultadonegativoenunapruebadefijacióndelcomplemento,o
b) un resultado negativo en cualquier otra combinación de pruebas
autorizadas para ello conarreglo alprocedimiento establecido enel
artículo17.
3B. Cuandolaspruebasdelaboratorioolasinvestigacionesepidemiológicas
confirmenlainfeccióndebrucelosisenunrebaño,seleretiraráelesta-
tutoderebañooficialmenteindemnedebrucelosis.
El rebaño no recuperará su estatuto hasta que todos los bovinos
presentes en el rebaño en el momento de la aparición del brote hayan
sidosacrificados,oelrebañohayasidosometidoapruebasytodoslos
animales de más de doce meses de edad hayan dado resultados nega-
tivos en dos pruebas consecutivas con un intervalo de sesenta días, la
primera de las cuales se llevará a cabo al menos treinta días después
delaretiradadelanimaloanimalesquehayandadoresultadopositivo.
En el caso de las hembras preñadas en el momento de aparición del
foco, la última prueba deberá efectuarse por lo menos veintiún días
despuésdequehayaparidolaúltimadeellas.
4. Un rebaño bovino se considerará indemne de brucelosis si cumple las
condiciones de las letras b) yc) del punto 1 ysi se ha llevado a cabo
lavacunacióncomosigue:
i) lashembrashansidovacunadas:
— antesdelosseismesesdeedad,convacunavivadelacepa19,o
— antes de los quince meses de edad, con vacuna inactivada con
coadyuvante45/20oficialmentecontroladayautorizada,o
— conotrasvacunasautorizadasconarregloalprocedimientoesta-
blecidoenelartículo17;
ii) los bovinos de menos de treinta meses que hayan sido vacunados
convacunavivadelacepa19podrándarenlapruebadeseroaglu-
tinación un resultado superior a 30, pero inferior a 80 unidades1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—25
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internacionales aglutinantes por mililitro, siempre que en la prueba
defijacióndelcomplementodenresultadosinferioresa30unidades
CEE en el caso de las hembras vacunadas menos de doce meses
antesoinferiora20unidadesCEEentodoslosdemáscasos.
5. Un rebaño bovino conservará su estatuto de explotación indemne de
brucelosissi:
i) silesometeaunadelasbateríasdepruebasprevistasenlaletraa)
delpunto2;
ii) los bovinos que se introduzcan en el rebaño cumplen los requisitos
delaletrab)delpunto2,o:
— proceden de rebaños con estatuto de rebaño indemne de
brucelosis y, en el caso de los bovinos de más de doce meses,
handado,enlostreinta díaspreviosaoenaislamiento después
de su introducción en el rebaño, un resultado inferior a 30
unidades internacionales aglutinantes pormililitro en una seroa-
glutinaciónyunresultadonegativoenunapruebadefijacióndel
complementoconarregloalanexoC,o
— proceden de rebaños con estatuto de rebaño indemne de
brucelosis, tienen menos de treinta meses y han sido vacunados
convacuna vivade lacepa 19sidan unresultado enla prueba
de seroaglutinación superior a 30 pero inferior a 80 unidades
internacionales aglutinantes por mililitro, siempre que en la
prueba de fijación del complemento den un resultado inferior a
30 unidades CEE en el caso de las hembras vacunadas menos
de doce mesesantes o inferior a 20 unidades CEE en todos los
demáscasos.
6A. Elestatutoderebañoindemnedebrucelosisserásuspendidosi:
a) nosecumplenlascondicionesdelospuntos4y5;o
b) araízdelosresultadosdelaspruebasdelaboratorio opormotivos
clínicos, se sospecha que uno o varios bovinos de más de treinta
meses de edad tienen brucelosis y se han sacrificado o aislado el
animal o animales para evitar todo contacto directo o indirecto con
losdemásanimales.
Cuando el animal haya sido aislado, podrá volver a introducirse en el
rebaño y éste podrá recuperar su estatuto en caso de que muestre un
título de seroaglutinación inferior a 30 unidades internacionales agluti-
nantespormililitroyhayadadonegativoenunapruebadefijacióndel
complemento oenotrapruebaautorizada conarreglo alprocedimiento
establecidoenelartículo17.
Cuandolosanimaleshayansidosacrificadosynopuedanyasometerse
a pruebas, la suspensiónpodrá levantarse si dospruebas de seroagluti-
nación, realizadas con arreglo al anexo C en todos los bovinos del
rebaño mayores de doce meses, muestran un título brucelar inferior a
30 unidades internacionales aglutinantes por mililitro. La primera
prueba se realizará al menos treinta días después de la retirada del
animal,ylasegunda,elmenossesentadíasdespués.
Cuando losanimales que hayan de ser sometidos a prueba conforme a
los dos párrafos anteriores tengan menos de treinta meses de edad y
hayan sido vacunados con vacuna viva de la cepa 19 podrán conside-
rarse negativos si dan en la prueba de seroaglutinación un resultado
superior a 30 pero inferior a 80 unidades internacionales aglutinantes
por mililitro, siempre que en la prueba de fijación del complemento
denunresultadoinferiora30unidadesCEEenelcasodelashembras
vacunadasmenosdedocemesesantes,oinferiora20unidadesCEEen
todoslosdemáscasos.
6B. Elestatutoderebañoindemnedebrucelosisseretirarásilaspruebasde
laboratorioolasinvestigacionesepidemiológicasconfirmanlainfección
de brucelosis en un rebaño. El rebaño no recuperará su estatuto hasta
queobientodoslosbovinospresentesenelrebañoenelmomento de
la aparición del brote hayan sido sacrificados o el rebaño haya sufrido
pruebas y todos los animales no vacunados de más de doce meses de
edad hayan dado resultados negativos en dos pruebas consecutivas a
sesenta días de intervalo, la primera de las cuales se llevará a cabo al
menos treinta días después de la retirada del animal o animales que
dieronresultadopositivo.
Cuando todos los animales que deban someterse a pruebas y que se
mencionan en el párrafo anterior tengan una edad inferior a treinta
meses y hayan sido vacunados con vacuna viva de la cepa 19, podrán
considerarse negativos si presentan un título brucelar superior a 30
unidades internacionales pero inferior a 80 unidades internacionales1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—26
▼M44
aglutinantes pormilímetrosiempreycuandopresenten,enelmomento
delafijacióndelcomplemento,untítuloinferiora30unidadesCEEsi
setratadehembrasvacunadasenlosdocemesesanterioresountítulo
inferiora20unidadesCEEentodoslosdemáscasos.
En el caso de las hembras preñadas en el momento de aparición del
brote,laúltimapruebasellevaráacaboalmenosveintiúndíasdespués
del parto de la última hembra preñada en el momento de la aparición
delbrote.
7. Un Estado miembro o una parte del territorio de un Estado miembro
podrán ser declarados oficialmente indemnes de brucelosis con arreglo
al procedimiento establecido en el artículo 17 si cumplen las condi-
cionessiguientes:
a) noseharegistradoningúncasodeabortoporbrucelosisnideaisla-
miento de B. abortus bacterium durante al menos tres años y al
menos 99,8 % de los rebaños han logrado obtener el estatuto de
rebaños oficialmente indemnes de brucelosis anualmente durante
cinco años consecutivos, habiéndose procedido al cálculo de este
último porcentaje el 31 de diciembre de cada año natural. No
obstante, cuando la autoridad competente adopte una política de
sacrificio total del rebaño, los incidentes aislados que la investiga-
ción epidemiológica muestre que se deben a la introducción de
animales de fuera del Estado miembro o de la parte del territorio
del Estado miembro y procedentes de rebaños cuyo estatuto de
rebaños oficialmente indemnes de brucelosis ha sido suspendido o
retirado por motivos distintos de la sospecha de enfermedad no
deberántenerse encuenta aefectos delcáculo anterior siempre que
la autoridad central competente del Estado miembro interesado en
tales incidentes haga un informe anual dirigido a la Comisión de
conformidadconelapartado2delartículo8;y
b) todos y cada uno de los animales bovinos estarán identificados con
arregloalodispuestoenlalegislacióncomunitaria,y
c) lacomunicacióndeloscasosdeabortoesobligatoriaydichoscasos
soninvestigadosporlaautoridadcompetente.
8. A condición de que se aplique el punto 9, un Estado miembro o una
parte del territorio de un Estado miembro o una parte del territorio de
un Estado miembro declarados oficialmente indemnes de brucelosis
conservaránsuestatutosi:
a) secumplentodavíalascondicionesdelasletrasa)yb)delpunto7y
esobligatoria la notificación de loscasosde aborto sospechososde
ser debidos a la brucelosis, que son sometidos a investigación por
partedelaautoridadcompetente;
b) cada año durante los cinco primeros años tras haber alcanzado el
estatuto, todos los bovinos de más de veinticuatro meses en no
menosdel20%delosrebañoshansidosometidosapruebasyhan
reaccionado negativamente a una prueba serológica realizada con
arreglo a lo dispuesto en el anexo C, o, cuando se trate de rebaños
lecheros,alexamendemuestrasdelechedeacuerdoconelanexoC;
c) senotificanalaautoridadcompetentetodoslosbovinossospechosos
deestarinfectadosconbrucelosisycadaunodeellosessometidoa
una investigación epidemiológica oficial para la detección de la
enfermedad, que comprenderá al menos dos pruebas serológicas de
la sangre, incluida la prueba de fijación del complemento, y un
examenmicrobiológicodelasmuestrasoportunas;
d) durante el período de sospecha, que se prolongará hasta que se
obtengan resultados negativos en las pruebas previstas en la letra
c), se suspenderá el estatuto de rebaño oficialmente indemne de
brucelosisdelrebañodeorigenotránsitodelbovinosospechoyde
losrebañosquetenganvínculosepidemiológicosconelmismo;
e) encasodefocosdebrucelosisevolutiva,todoslosbovinoshansido
sacrificados. Los animales de las restantes especies sensibles se
someterán a las pruebas adecuadas y se limpiarán y desinfectarán
loslocalesyelmaterial.
9. El Estado miembro o una parte del territorio de un Estado miembro
declaradosoficialmenteindemnesdebrucelosiscomunicaránalaComi-
sión todos los casos de brucelosis. Si hay pruebas de un cambio
significativo de la situación con respecto a la brucelosis en un Estado
miembrooenunapartedelterritoriodeunEstadomiembroquehayan
sido reconocidos oficialmente indemnes de brucelosis, la Comisión
podráproponer,conarregloalprocedimiento establecido enelartículo1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—27
▼M46
▼M44
▼M44
17, que su estatuto sea suspendido o retirado hasta que se hayan
cumplidolosrequisitosdelaDecisión.
10. A efectos de la presente sección II, se considerarán «pruebas seroló-
gicas» las pruebas de seroaglutinación, del antígeno brucelar
tamponado, de fijación del complemento, de plasmoaglutinación, del
anillo efectuada con plasma, de microaglutinación o la prueba ELISA
efectuada con sangre individual, con arreglo al anexo C. A efectos de
lapresentesección,seaceptarátambiéntodaotrapruebadediagnóstico
autorizada con arreglo al procedimiento establecido enel artículo 17y
descrita en el anexo C. Por «prueba de la leche» se entenderá una
pruebadelanillo (ring test)delalecheounapruebaELISAdelaleche
conarregloalanexoC.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—28
▼M49
ANEXO B
TUBERCULOSIS
1. IDENTIFICACIÓNDELAGENTE
La presencia de Mycobacterium bovis (M. bovis) , agente de la
tuberculosisbovina,enmuestrasclínicasydeautopsiapuededemos-
trarse examinando frotis teñidos o mediante técnicas de
inmunoperoxidasa y confirmarse mediante cultivo del organismo en
mediodeaislamientoprimario.
Elmaterialpatológicoparalaconfirmaciónde M. bovisdebetomarse
deganglioslinfáticosanormalesyórganosparenquimatosos,comolos
pulmones, el hígado, el bazo, etc. Cuando el animal no presente
lesionespatológicas,deberánrecogersemuestrasdelosganglioslinfá-
ticos retrofaríngeos, bronquiales, mediastínicos, supramamarios y
mandibulares,asícomodealgunosganglioslinfáticosmesentéricosy
delhígado,parasuexamenycultivo.
Laidentificación delascepasaisladaspodrárealizarsehabitualmente
determinando las propiedades bioquímicas y de cultivo. También
podráemplearselareacciónencadenadelapolimerasaparaladetec-
ción del complejo de M. tuberculosis . Las técnicas de análisis del
ADN pueden resultar más rápidas y fiables que los métodos bioquí-
micos para la diferenciación de M. bovisde otros miembros del
complejo de M. tuberculosis . La huella genética permite distinguir
entre diferentes cepas de M. bovisy posibilitará la descripción de
patronesdelorigen,transmisiónypropagaciónde M. bovis.
Lastécnicasymediosutilizados,sunormalizaciónylainterpretación
delosresultadosdebenajustarsealosqueseprecisanenelcapítulo
2.3.3(tuberculosisbovina)delacuartaedición(2000)del Manual de
normas para las pruebas de diagnóstico y las vacunas de la OIE .
2. INTRADERMOTUBERCULINIZACIÓN
Los derivados proteínicos purificados de la tuberculina que cumplan
las normas establecidas en el apartado 2.1 se utilizarán para realizar
la intradermotuberculinización oficial con arreglo a los procedi-
mientosmencionadosenelapartado2.2.
2.1.Normasaplicablesalatuberculina(bovinayaviar)
2.1.1. Definición
Elderivadoproteínicopurificadodelatuberculina(bovinaoaviar)es
un preparado que se obtiene, previo calentamiento, de productos del
crecimiento y la lisis de Mycobacterium bovis o Mycobacterium
avium(segúncorresponda),capaz deponerdemanifiesto hipersensi-
bilidadretardadaenunanimalsensibilizadoalosmicroorganismosde
lamismaespecie.
2.1.2. Producción
Seobtieneapartirdefraccioneshidrosolublespreparadascalentando
en vapor libre y filtrando posteriormente cultivos de M. bovis o M.
avium(segúncorresponda)enunmediolíquidosintético.Lafracción
activa del filtrado, consistente principalmente en proteínas, se aísla
medianteprecipitación,selavaysevuelveadisolver.Puedeañadirse
un conservante antimicrobiano que no produzca reacciones positivas
falsas,comoelfenol.Lapreparaciónestérilfinal,libredemicobacte-
rias, se distribuye asépticamente en recipientes de vidrio inviolables
que se cierran después para evitar que se contaminen. El preparado
puedeliofilizarse.
2.1.3. Identificación del producto
Inyectar por vía intradérmica en puntos diferentes varias dosis
graduadas a cobayas albinos sensibilizados convenientemente, cada
unodeloscualesdebepesaralmenos250g.Alcabodeunperíodo
de 24 a 28 horas, se producen reacciones en forma de hinchazones
edematosas con eritema, acompañadas o no de necrosis en el punto
de inyección. El tamaño e importancia de las reacciones varía de
acuerdo con la dosis. Los cobayas que no se hayan sensibilizado no
presentanreacciónainyeccionesdeestetipo.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—29
▼M49
2.1.4. Pruebas
2.1.4.1. pH:elpHdebeoscilarentre6,5y7,5.2.1.4.2. Fenol: si el preparado que vaya a examinarse contiene fenol, su
concentraciónnodebesersuperiora5g/l.
2.1.4.3. Efectosensibilizante:emplearungrupodetrescobayasquenohayan
sidotratados conningúnmaterial que puedainterferir conlaprueba.
Entresocasiones,aintervalosdecincodías,inyectarporvíaintradér-
micaacadacobayaunadosisdelpreparadoquesevayaaexaminar,
equivalente a 500 UI en 0,1 ml. Entre 15 y 21 días después de la
tercera inyección, inyectar la misma dosis (500 UI)por vía intradér-
mica a esos animales y a un grupo de control de tres cobayas del
mismopesoalosquenoseleshayainyectadopreviamente tubercu-
lina. Entre 24 y 28 horas después de las últimas inyecciones, las
reaccionesdelosdosgruposnosonmuydiferentes.
2.1.4.4. Toxicidad:empleardoscobayas,cadaunodeloscualesdebepesaral
menos 250 g, que no hayan sido tratados previamente con ningún
material que pueda interferir con la prueba. Inyectar por vía
subcutánea a cada animal 0,5 ml del preparado que se vaya a
examinar. Observarlosanimales durante sietedías.Enelperiodode
observaciónnoseproducenefectosanormales.
2.1.4.5. Esterilidad: se debe cumplir la prueba de esterilidad prescrita en la
monografía sobre vacunas de uso veterinario de la cuarta edición
(2002)delaFarmacopeaEuropea.
2.1.5. Actividad
La actividad del derivado proteínico purificado de la tuberculina
(bovina y aviar) se determina comparando las reacciones producidas
en cobayas sensibilizados mediante la inyección intradérmica de una
serie de diluciones del preparado que se vaya a examinar con las
producidas por concentraciones conocidas de un preparado de refe-
rencia de derivado proteínico purificado de tuberculina (bovina o
aviar,segúncorresponda),calibradoenunidadesinternacionales.
Para probar la actividad, sensibilizar como mínimo nueve cobayas
albinos, cada uno de los cuales debe pesar entre 400 y 600 g,
mediante una inyección intramuscular profunda de 0,0001 mg de
masa húmeda de M. bovis vivo de la cepa AN5, suspendida en
0,5mldeunasoluciónde9g/ldeclorurodesodioR,enelcasode
latuberculinabovina,ounadosisadecuadadeM.aviuminactivadoo
vivo, en el de la tuberculina aviar. Transcurridas al menos cuatro
semanas tras la sensibilización de los cobayas, afeitar los costados
de los animales para disponer de espacio para un máximo de cuatro
puntos de inyección en cada lado. Preparar diluciones del preparado
quesevaya aexaminar ydel preparado de referencia utilizando una
solución salina isotónica amortiguadora de fosfatos (pH 6,5-7,5) que
contenga 0,005 g/l de polisorbato 80 R. Utilizar al menos tres dosis
del preparado de referencia y otras tantas del preparado que vaya a
examinarse. Escoger las dosis de modo que las lesiones producidas
tenganundiámetro comprendidoentre8y25mm.Distribuiraleato-
riamente las diluciones entre los puntos valiéndose de un cuadrado
latino. Inyectar cada dosis intradérmicamente en un volumen cons-
tante de 0,1 o 0,2 ml. Transcurridas entre 24 y 28 horas, medir los
diámetros de las lesiones y calcular el resultado de la prueba utili-
zando los métodos estadísticos habituales, basándose en el supuesto
dequelosdiámetros delaslesionessondirectamente proporcionales
allogaritmodelaconcentracióndelastuberculinas.
La prueba no será válida a menos que los límites de error (con una
confianza P = 0,95) estén ente el 50 % y el 200 % de la actividad
calculada.Laactividadcalculada estaráentreel66%yel150%de
laactividaddeclaradadelatuberculinabovina.Laactividadcalculada
estará entre el 75 % y el 133 % de la actividad declarada de la
tuberculina aviar. La actividad declarada será al menos igual a
20000UI/mlparaambastuberculinas(bovinayaviar).
2.1.6. Almacenamiento
Almacenaralabrigodelaluz,aunatemperaturade5±3C.
2.1.7. Etiquetado
Laetiquetadebeindicar:
— laactividadenunidadesinternacionalespormililitro,
— elnombreylacantidaddelaseventualessustanciasañadidas,1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—30
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— enelcasodepreparadosliofilizados:
— el nombre y volumen del líquido reconstituyente que debe
añadirse,
— que el producto debe utilizarse inmediatamente después de la
reconstitución.
2.2.Procedimientosdeprueba
2.2.1. Seconsideraránintradermotuberculinizaciones oficiales:
— la intradermotuberculinización sencilla: esta prueba requiere una
únicainyeccióndetuberculinabovina;
— la intradermotuberculinización de comparación: esta prueba
requiere una inyección de tuberculina bovina y una inyección de
tuberculinaaviar,administradassimultáneamente.
2.2.2. Ladosisdetuberculinainyectadaserá:
— igualosuperiora2000UIdetuberculinabovina,
— igualosuperiora2000UIdetuberculinaaviar.
2.2.3. Elvolumendecadainyecciónnorebasarálos0,2ml.
2.2.4. Lastuberculinizacionesserealizaráninyectandotuberculinaenlapiel
del cuello. Los puntos de inyección estarán situados en el límite de
losterciosanteriorymediodelcuello.Cuandoseinyectetuberculina
aviarybovinaalmismoanimal,elpuntodeinyeccióndelatubercu-
linaaviarestarásituadoaunos10cmdelbordesuperiordelcuelloy
el de la tuberculina bovina, unos 12,5 cmm ás abajo en una línea
aproximadamente paralela a la del hombro o en lados diferentes del
cuello; tratándose de animales jóvenes en los que no haya espacio
para separar suficientemente los puntos de inyección en un lado del
cuello,seadministraráunainyecciónacadaladodelcuelloenpuntos
idénticos,enelcentrodelterciomediodeéste.
2.2.5. Latécnicadelatuberculinizaciónylainterpretacióndelasreacciones
seránlassiguientes:
2.2.5.1. Técnica
Lospuntosdeinyecciónserasuraránylimpiarán.Encadazonarasu-
rada se tomará un pliegue de piel entre el índice y el pulgar, se
medirá con un compás y se anotará el resultado. A continuación se
inyectará la dosis de tuberculina siguiendo un método que garantice
que aquella se administra intradérmicamente. Podrá utilizarse una
agujacortaestéril,conlapartebiseladahaciafuera,deunajeringuilla
graduada que contenga tuberculina, que se insertará oblicuamente en
lascapasmásprofundasdelapiel.Paraconfirmarsiunainyecciónse
haefectuadocorrectamentedeberápalparseunahinchazóndeltamaño
de un guisante en cada punto de inyección. El grosor del pliegue de
pieldecadapuntodeinyecciónsemedirádenuevo72horas(+/-4h)
despuésdelainyecciónyseanotaráelresultado.
2.2.5.2. Interpretación de las reacciones
Lainterpretacióndelasreaccionessebasaráenobservacionesclínicas
y en el aumento de grosor de los pliegues de piel en los puntos de
inyección, anotados 72 horas después de haber inyectado la tubercu-
lina.
a) Reacciónnegativa:sóloseobservaunahinchazónlimitada,conun
aumento del grosor del pliegue de piel no superior a 2 mm, sin
signos clínicos tales como edema difuso o extensivo, exudación,
necrosis, dolor o inflamación de los conductos linfáticos de esa
regiónodelosganglioslinfáticos.
b) Reacción dudosa: no se observa ninguno de los signos clínicos
mencionados enlaletra a)yelaumento degrosordelpliegue de
pielessuperiora2mmeinferiora4.
c) Reacciónpositiva:seobservansignosclínicosdelosmencionados
enlaletraa)oelgrosordelplieguedepieldelpuntodeinyección
aumenta4mmomás.
2.2.5.3. La interpretación de las intradermotuberculinizaciones oficiales será
lasiguiente:
2.2.5.3.1. Intradermotuberculinización sencilla:
a) positiva: reacción bovina positiva como la descrita en la letra c)
delapartado2.2.5.2;
b) dudosa: reacción dudosa como la descrita en la letra b) del apar-
tado2.2.5.2;1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—31
▼M49
c) negativa: reacción bovina negativa como ladescrita en la letra a)
delapartado2.2.5.2.
Losanimales enlosquelaintradermotuberculinización sencilla haya
dado resultados dudosos serán sometidos a otra tuberculinización
despuésdeunplazomínimode42días.
Losanimales en losque esta segunda prueba no dé resultados nega-
tivosseconsideraránpositivos.
Los animales en los que la intradermotuberculinización sencilla dé
resultados positivos podrán someterse a una intradermotuberculiniza-
ción de comparación si se sospecha la existencia de una reacción
positivafalsaounareaccióndeinterferencia.
2.2.5.3.2. Intradermotuberculinización de comparación para la determinación y
el mantenimiento de la calificación de explotación oficialmente libre
detuberculosis:
a) positiva:reacciónbovinapositivaqueseasuperiorenmásde4mm
alareacciónaviar,opresenciadesignosclínicos;
b) dudosa: reacción bovina positiva o dudosa que sea de 1 a 4 mm
superioralareacciónaviar,yausenciadesignosclínicos;
c) negativa: reacción bovina negativa, o reacción bovina positiva o
dudosaperoqueseaigualoinferioraunareacciónaviarpositiva
odudosa,yausenciadesignosclínicosenamboscasos.
Los animales en los que la intradermotuberculinización de compara-
ción haya dado resultados dudosos deberán ser sometidos a otra
tuberculinización transcurrido un plazo mínimo de 42 días. Los
animales en los que esta segunda prueba no dé resultados negativos
seconsideraránpositivos.
2.2.5.3.3. Lacalificacióndeexplotaciónoficialmentelibredetuberculosispodrá
suspenderse y los animales procedentes de ella no podrán ser objeto
de intercambios comerciales intracomunitarios mientras no se deter-
minelacalificacióndelosanimalessiguientes:
a) animalesquesehayanconsideradodudososenlaintradermotuber-
culinizaciónsencilla;
b) animales que se hayan considerado positivos en la intradermotu-
berculinización sencilla, pero que deban someterse de nuevo a
unapruebaporintradermotuberculinización decomparación;
c) animalesquesehayanconsideradodudososenlaintradermotuber-
culinizacióndecomparación.
2.2.5.3.4. Cuandola legislación comunitaria exija que losanimales sesometan
aunaintradermotuberculinizaciónantesdesutraslado,seinterpretará
lapruebaparaqueningúnanimalquemuestreunaumentodelgrosor
del pliegue de la piel superior a 2 mm o la presencia de signos
clínicosseaobjetodeintercambioscomercialesintracomunitarios.
2.2.5.3.5. Parapermitirladeteccióndelmáximonúmerodeanimalesinfectados
o enfermos de una explotación o una región, los Estados miembros
podránmodificarloscriteriosparalainterpretación delapruebacon
el fin de mejorar la sensibilidad de ésta considerando que todas las
reacciones dudosas mencionadas en la letra b) de los apartados
2.2.5.3.1.y2.2.5.3.2.sonreaccionespositivas.
3. PRUEBASSUPLEMENTARIAS
Parapermitirladeteccióndelmáximonúmerodeanimalesinfectados
o enfermos de una explotación o una región, los Estados miembros
podrán autorizar el empleo de la prueba de interferón gamma a que
serefiere elcapítulo2.3.3.(tuberculosisbovina)delacuartaedición
(2000)del Manual de normas para las pruebas de diagnóstico y las
vacunas de la OIE ,ademásdelatuberculinización.
4. INSTITUTOS ESTATALES Y LABORATORIOS NACIONALES
DEREFERENCIA
4.1.Tareasycompetencias
Losinstitutosestatalesyloslaboratoriosdereferenciaqueserecogen
en el apartado 4.2 se encargarán de la comprobación oficial de las
tuberculinas o los reactivos a que se refieren los apartados 2 y 3 en
sus países respectivos para garantizar que se ajustan a las normas
anteriormentemencionadas.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—32
▼M49
4.2.Listadeinstitutospúblicosylaboratoriosnacionalesdereferencia
1) Alemania:
Paul-EhrlichInstitut(PEI),BundesamtfürSeraundImpstoffe,D-
23207 Langen; Bundesinstitut für gesundheitlichen Verbraucher-
chutzundVeterinärmedizin—BereichJena—D-07743Jena.
2) Bélgica:
Institut Scientifique de la Santé Publique — Louis Pasteur, 14
RueJulietteWytsman—B-1050Bruselas.
3) Francia:
Laboratoirenationaldesmédicamentsvétérinaires,Fougères.
4) GranDucadodeLuxemburgo:
Institutodelpaísproveedor.
5) Italia:
IstitutosuperiorediSanità,Roma.
6) PaísesBajos:
Centraal Instituut voor Dierziekte Controle Lelystad (CIDC-
Lelystad),Lelystad.
7) Dinamarca:
Danmarks Veterinærinstitut, Bülowsvej 27, DK-1790 Copen-
hague.
8) Irlanda:
Institutodelpaísproveedor.
9) ReinoUnido:
VeterinaryLaboratoryAgency,Addlestone,Weybridge.
10) Grecia:
Κέντρο Κτηνιατρικών Ιδρυµάτων, Νεαπόλεως 25, 153 10
Atenas.
11) España:
LaboratoriodeSanidadyProducciónAnimaldeGranada.
12) Portugal:
LaboratórioNacionaldeInvestigaçãoVeterinária,Lisboa.
13) Austria:
Bundesanstalt für veterinärmedizinische Untersuchungen,
Mödling.
14) Finlandia:
Eläinlääkintä- ja elintarviketutkimuslaitos — Forskningsanstalten
förveterinärmedicin ochlivsmedel,Helsinki.
15) Suecia:
Statensveterinärmedicinskaanstalt,Uppsala.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—33
▼M48
ANEXO C
BRUCELOSIS
1. IDENTIFICACIÓNDELAGENTE
La demostración, mediante tinción inmunoespecífica o ácido-resistente
modificada, delapresencia deorganismosconmorfología de Brucella
en material procedente de abortos, flujo vaginal o leche indica posibi-
lidaddebrucelosis,especialmenteencasodequedichademostraciónse
veaconfirmadaporresultadosdepruebasserológicas.
Unavezaisladoslosmicroorganismos,debenidentificarselaespeciey
elbiovarmediantelisisporfagosopruebasdelmetabolismooxidativo
ycriteriosdecultivo,bioquímicosyserológicos.
Las técnicas y medios utilizados, su normalización y la interpretación
de los resultados deben ajustarse a lo dispuesto en los capítulos 2.3.1
(brucelosis bovina), 2.4.2 (brucelosis caprina y ovina) y 2.6.2
(brucelosisporcina)delacuartaediciónde2000delManualdenormas
parapruebasdediagnósticoyvacunasdelaOIE.
2. PRUEBASINMUNOLÓGICAS
2.1.Patrones
2.1.1. Paralapreparacióndetodoslosantígenosutilizados enlaspruebasde
rosadeBengala,deaglutinacióndelsuero,defijacióndelcomplemento
ydelanillo enleche deberá utilizarse lacepa Weybridge 99olacepa
USDA1119-3delbiovar1de Brucella abortus .
2.1.2. Elsueropatróndereferenciaparalaspruebasarribamencionadasesel
sueropatróndereferenciainternacionaldelaOIE,anteriormentedeno-
minadosegundosueroanti- Brucella abortus internacionaldelaOMS.
2.1.3. Los sueros patrón de referencia para las pruebas ELISA son los
siguientes:
— elsueropatróndereferenciainternacionaldelaOIE,
— elsueropatrónELISAdébilmentepositivodelaOIE,— elsueropatrónELISAfuertementepositivodelaOIE,— elsueropatrónELISAnegativodelaOIE.
2.1.4. Lossuerospatrón arriba mencionados pueden obtenerse en la Agencia
de Laboratorios Veterinarios (Veterinary Laboratories Agency, VLA)
deWeybridge(ReinoUnido).
2.1.5. Lossuerospatrónmencionadosenelpunto2.1.3sonpatronesprimarios
internacionales de los cuales deben establecerse para cada prueba en
cada Estado miembro patrones nacionales secundarios de referencia
(enadelante,«detrabajo»).
2.2.Pruebas de inmunoabsorción enzimática (ELISA) u otras pruebas
aglutinantes para la detección de la brucelosis bovina en suero o
leche
2.2.1.Material y reactivos
La técnica empleada y la interpretación de los resultados deberán
haberse validado de conformidad con los principios establecidos en el
capítulo1.1.3delacuartaediciónde2000delManualdenormaspara
pruebasdediagnósticoyvacunasdelaOIEydeberánincluiralmenos
estudiosdelaboratorioydediagnóstico.
2.2.2.Normalización de la prueba
2.2.2.1. Normalización del procedimiento de la prueba para muestras indivi-
dualesdesuero:
a) una pre-dilución al 1/150(
1) de suero patrón de referencia interna-
cional de la OIE, una pre-dilución al ½ de suero patrón ELISA
débilmente positivo de la OIE o una pre-dilución al 1/16 de suero
patrónELISAfuertementepositivodelaOIErealizadaenunsuero1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—34
(1) A efectos del presente anexo, las diluciones para preparar los reactivos líquidos se
expresan,porejemplo,como1/150,loqueindicaunadiluciónde1en150.
▼M48
negativo (o en una mezcla de sueros negativos) debe dar reacción
positiva;
b) unapre-diluciónal1/600desueropatróndereferenciainternacional
de la OIE, una pre-dilución al 1/8 de suero patrón ELISA débil-
mente positivo de la OIE o una pre-dilución al 1/64 de suero
patrónELISAfuertementepositivodelaOIErealizadaenunsuero
negativo (o en una mezcla de sueros negativos) debe dar reacción
negativa;
c) elsueropatrónELISAnegativodelaOIEdebedarsiemprereacción
negativa.
2.2.2.2. Normalizacióndelprocedimientodelapruebaparamuestrasmezcladas
desuero:
a) unapre-diluciónal1/150desueropatróndereferenciainternacional
delaOIE,unapre-diluciónal½desueropatrónELISAdébilmente
positivodelaOIEounapre-diluciónal1/16desueropatrónELISA
fuertementepositivodelaOIErealizadaenunsueronegativo(oen
unamezcladesuerosnegativos)ydiluidadenuevoensuerosnega-
tivosporelnúmerodemuestras quecomponen lamezcla debedar
reacciónpositiva;
b) elsueropatrónELISAnegativodelaOIEdebedarsiemprereacción
negativa;
c) lapruebadebesercapazdedetectarindiciosdeinfecciónenunsolo
animal del grupode animales de losque se hayan mezclado mues-
trasdesuero.
2.2.2.3. Normalizacióndelprocedimientodelapruebaparamuestrasmezcladas
delecheodelactosuero:
a) una pre-dilución al 1/1000 de suero patrón de referencia interna-
cional de la OIE, una pre-dilución al 1/16 de suero patrón ELISA
débilmente positivodelaOIEounapre-dilución al1/125desuero
patrónELISAfuertementepositivodelaOIErealizadaenunsuero
negativo (o en una mezcla de sueros negativos) y diluida de nuevo
al1/10enlechenegativa,debedarreacciónpositiva;
b) el suero patrón ELISA negativo de la OIEdiluido al 1/10 enleche
negativadebedarsiemprereacciónnegativa;
c) lapruebadebesercapazdedetectarindiciosdeinfecciónenunsolo
animal del grupode animales de losque se hayan mezclado mues-
trasdelecheodelactosuero.
2.2.3.Condiciones para el empleo de las pruebas ELISA en el diagnóstico de
la brucelosis bovina
2.2.3.1. Si se emplean las condiciones de calibración arriba mencionadas para
las pruebas ELISA con muestras de suero, la sensibilidad de diagnós-
tico de las pruebas ELISA debe ser igual o superior a la de la prueba
de rosa de Bengala o a la de la prueba de fijación del complemento,
teniendoencuentalasituaciónepidemiológicaenlaqueseutilicen.
2.2.3.2. Si se emplean las condiciones de calibración arriba mencionadas para
las pruebas ELISA con muestras de leche mezcladas, la sensibilidad
dediagnósticodelaspruebasELISAdebeserigual osuperioralade
la prueba del anillo en leche, teniendo en cuenta no sólo la situación
epidemiológica, sinotambién lossistemas de cría de ganado medios y
extremosquecabeesperar.
2.2.3.3. SilaspruebasELISAseemplean parala certificación deconformidad
con el apartado 1 del artículo 6 o para el establecimiento y manteni-
miento del estatuto de un rebaño de conformidad con el punto 10 del
título IIdel anexo A,debe llevarse acabo unamezcla de muestras de
suerodeformaquelosresultadosdelaspruebaspuedanvincularsesin
ningún género de dudas a los distintos animales incluidos en el
conjunto.Todapruebadeconfirmacióndebellevarseacaboconmues-
trasdesuerotomadasdeanimalesporseparado.
2.2.3.4. LaspruebasELISApuedenutilizarseconunamuestradelechetomada
delalecherecogidaenunaexplotaciónconalmenosun30%devacas
lecheras en fase de producción de leche. Si se emplea este método,
deben aplicarse medidas a fin de que las muestras tomadas para su
examen puedan vincularse sin ningún género de dudas a los distintos
animales de los que procede la leche. Toda prueba de confirmación
debe llevarse a cabo con muestras de suero tomadas de animales por
separado.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—35
▼M48
2.3.Pruebadefijacióndelcomplemento(FdC)
2.3.1. Elantígenoconsisteenunasuspensiónbacterianaensoluciónsalinade
fenol[NaClal0,85%(m/v)yfenolal0,5%(v/v)]oensoluciónamor-
tiguadora de veronal. Los antígenos pueden presentarse en forma
concentrada, siempre que en la etiqueta del frasco se indique el factor
dediluciónquedebeutilizarse.Elantígenodebealmacenarsea4ºCy
nodebecongelarse.
2.3.2. Lossuerosdebeninactivarsedelamanerasiguiente:
— suero bovino: a una temperatura de 56 a 60 ºC entre 30 y 50
minutos,
— sueroporcino:a60ºCentre30y50minutos.
2.3.3. Con objeto de provocar la reacción genuina en el procedimiento de la
prueba, se debe usar una dosis de complemento superior a la mínima
necesariaparalograrunahemólisiscompleta.
2.3.4. Al realizar la prueba de fijación del complemento, deben efectuarse
cadavezloscontrolessiguientes:
a) controldelefectoanticomplementario delsuero;
b) controldelantígeno;
c) controldeloshematíessensibilizados;
d) controldelcomplemento;
e) control de la sensibilidad al principio de la reacción, mediante un
sueropositivo;
f) control de la especificidad de la reacción, mediante un suero nega-
tivo.
2.3.5.Cálculo de los resultados
ElsueropatróndereferenciainternacionaldelaOIE(OIEISS)contiene
1000 unidades internacionales de prueba FdC por mililitro. Si este
sueropatrónsesometeapruebamedianteunmétododado,elresultado
se expresa como título (Toieiss). El resultado de la prueba con el suero
problema, indicado como título (Tsuero problema), debe expresarse en
unidades internacionales de prueba FdC por mililitro. El factor de
conversión (F) necesario para pasar el título de un suero problema
desconocido (Tsuero problema), examinado mediante dicho método, a su
expresiónenunidadesinternacionalesdepruebaFdCpuedeaveriguarse
mediantelasiguientefórmula:
yelcontenidodeunidadesinternacionales depruebaFdCpormililitro
desueroproblema(UIPFdCsueroproblema)mediantelasiguiente:
2.3.6.Interpretación de los resultados
Seconsiderapositivounsueroquecontenga20omásunidadesinterna-
cionalesdepruebaFdCpormililitro.
2.4.Pruebadelanilloenleche
2.4.1. Elantígenoconsisteenunasuspensiónbacterianaensoluciónsalinade
fenol[NaClal0,85%(m/v)yfenolal0,5%(v/v)]marcadaconhema-
toxilina.Elantígenodebealmacenarsea4ºCynodebecongelarse.
2.4.2. Lasensibilidad del antígeno debe estar normalizada en relación conel
suero patrón de referencia internacional de la OIE, de forma que el
antígeno dé reacción positiva con una dilución al 1/500 de este suero
patrón en leche negativa, mientras que con una dilución al 1/1000 dé
reacciónnegativa.
2.4.3. La prueba del anillo debe efectuarse con muestras que representen el
contenidodecadacántaraodecadacisternadelaexplotación.
2.4.4. Lasmuestrasdelechenodebenhabersecongelado,calentadonisome-
tidoafuerteagitación.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—36
▼M48
2.4.5. La reacción debe llevarse a cabo utilizando uno de los métodos
siguientes:
— con una columna de leche de al menos 25 mm de altura y con un
volumendelechede1mlalquesehayanañadido0,03mlo0,05ml
deunodelosantígenosmarcadosnormalizados,
— con una columna de leche de al menos 25 mm de altura y con un
volumendelechede2mlalquesehayanañadido0,05mldeuno
delosantígenosmarcadosnormalizados,
— conunvolumendelechede8mlalquesehayanañadido0,08ml
deunodelosantígenosmarcadosnormalizados.
2.4.6 La mezcla de leche y antígenos debe incubarse a 37 ºC durante 60
minutos,juntoconpatronesdetrabajonegativo ypositivo.Lasensibi-
lidaddelapruebaaumentasiseprorrogalaincubacióna4ºCdurante
unperíododeentre16y24horas.
2.4.7. Interpretacióndelosresultados:
a) reacciónnegativa:lechecoloreada,nataincolora;
b) reacciónpositiva:
— lecheynatadeidénticocolor,o
— lecheincoloraynatacoloreada.
2.5.PruebaderosadeBengalaenplaca
2.5.1. El antígeno consiste en una suspensión bacteriana en diluyente de
antígeno de brucela tamponado a un pH de 3,65 ± 0,05, marcado con
elcolorante rosadeBengala. Elantígeno debe suministrarse listo para
suuso,debealmacenarsea4ºCynodebecongelarse.
2.5.2. El antígeno no se prepara en función de la concentración celular, sino
que su sensibilidad debe normalizarse con relación al suero patrón de
referenciainternacionaldelaOIEdeformaqueelantígenodéreacción
positivaconunadilucióndesueroal1/45yreacciónnegativaconuna
diluciónal1/55.
2.5.3. La prueba de rosa de Bengala en placa debe realizarse de la manera
siguiente:
a) semezclan20-30 µldesueroconunvolumenigualdeantígenoen
una placa blanca de porcelana o de esmalte para obtener una zona
con un diámetro de 2 cm, aproximadamente. La mezcla se agita
suavemente durante 4 minutos a temperatura ambiente, tras lo que
seobservaconbuenailuminaciónparaversisehaproducidoaglu-
tinación;
b) se puede utilizar un método automatizado, pero debe ser al menos
tansensibleyexactocomoelmétodomanual.
2.5.4.Interpretación de los resultados
Toda reacción visible debe considerarse positiva, a menos que se
observeunexcesodesequedadalrededordelosbordes.
Encadaseriedepruebasdebenincluirsepatronesdetrabajopositivosy
negativos.
2.6.Pruebadeaglutinacióndelsuero
2.6.1. El antígeno consiste en una suspensión bacteriana en una solución
salina de fenol [NaCl al 0,85 % (m/v) y fenol al 0,5 % (v/v)]. No
debeutilizarseformaldehído.
Losantígenospuedenpresentarseenformaconcentrada,siemprequeen
la etiqueta del frasco se indique el factor de dilución que debe utili-
zarse.
SepuedeañadirEDTAalasuspensióndeantígenohastaalcanzar una
dilución final deprueba de5mMparareducir elnivel de falsosposi-
tivos en la prueba de aglutinación del suero. Posteriormente, se debe
reajustarelpHde7,2enlasuspensióndeantígeno.
2.6.2. El suero patrón de referencia internacional de la OIE contiene 1000
unidadesinternacionalesdeaglutinación.
2.6.3. El antígeno no se prepara en función de la concentración celular, sino
que su sensibilidad debe normalizarse con relación al suero patrón de
referencia internacional de la OIE de forma que el antígeno produzca
una aglutinación del 50 % con una dilución final del suero entre el 1/1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—37
▼M48
600yel1/1000,ounaaglutinacióndel75%conunadiluciónfinaldel
sueroentreel1/500yel1/750.
También puede resultar recomendable comparar la reactividad entre
lotes de antígeno nuevos y lotes de antígeno normalizados anterior-
menteutilizandoungrupodesuerosdefinidos.
2.6.4. Lapruebaserealizaentubosoenmicroplacas.Lamezcladeantígeno
y diluciones de suero debe incubarse durante un período de 16 a 24
horasa37ºC.
Decadasuerodebenprepararsealmenostresdiluciones.Lasdiluciones
desuerosospechosodebenrealizarsedeformaquelalecturadelareac-
ción al límite de positividad se realice en el tubo intermedio (o en el
pocillointermedioenelcasodelmétododelasmicroplacas).
2.6.5.Interpretación de los resultados
El grado de aglutinación de Brucellaen un suero debe expresarse en
UI/ml.
Seconsiderapositivounsueroquecontenga30omásUI/ml.
3. PRUEBASCOMPLEMENTARIAS3.1.Pruebacutáneadelabrucelosis
3.1.1.Condiciones para el empleo de esta prueba:
a) la prueba cutánea de la brucelosis no debe emplearse para fines de
certificaciónenelcomerciointracomunitario;
b) esta prueba es una de las más específicas para la detección de la
presencia de brucelosis en animales no vacunados; no obstante, no
se debe realizar el diagnóstico únicamente a partir de reacciones
intradérmicaspositivas;
c) debe considerarse que están infectados los animales de la especie
bovinaquesehayansometidoaunadelaspruebasserológicasdefi-
nidas en el presente anexo con un resultado negativo y que
reaccionenpositivamentealapruebacutáneadelabrucelosis;
d) los animales de la especie bovina que se hayan sometido a una de
laspruebasserológicasdefinidasenelpresenteanexoconunresul-
tado positivo pueden someterse a una prueba cutánea de la
brucelosis para confirmar la interpretación de los resultados de las
pruebas serológicas, especialmente cuando no pueda excluirse una
reacción cruzada con anticuerpos de otras bacterias en el caso de
los rebaños indemnes de brucelosis u oficialmente indemnes de
brucelosis.
3.1.2. Lapruebadebellevarseacabomedianteunpreparadoalergénicodela
brucelosisnormalizadoydefinidoquenocontengalipopolisacáridoliso
antigénico, ya que éste puede provocar reacciones inflamatorias ines-
pecíficasointerferirconpruebasserológicasposteriores.
UnpreparadodetalescaracterísticaseslabrucelinaINRA,queprocede
de una cepa no lisa de B. melitensis. Sus condiciones de producción
aparecen descritas detalladamente en la sección B2 del capítulo 2.4.2
de la cuarta edición de 2000 del Manual de normas para pruebas de
diagnósticoyvacunasdelaOIE.
3.1.3.Procedimiento de la prueba
3.1.3.1. Seinyectaporvíaintradérmicaunvolumende0,1mldealergenodela
brucelosisenelpliegue caudal, enlapiel delaijada oenunladodel
cuello.
3.1.3.2. Lapruebaseleeunaveztranscurridasde48a72horas.3.1.3.3. Antes de la inyección y en el momento de la lectura, se mide con un
piedereyelgrosordelapielenellugardelainyección.
3.1.3.4. Interpretacióndelosresultados
Lasreacciones fuertes sereconocen fácilmente porlainflamación yla
induraciónlocales.
Se considera que la reacción a la prueba cutánea de la brucelosis es
positivasiseproduceunaumentodelgrosordelapielde1,5a2mm.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—38
▼M48
3.2.Pruebadeinmunoabsorciónenzimática decompetición(ELISAc)
3.2.1.Condiciones para el empleo de esta prueba:
a) la ELISAc no debe emplearse con fines de certificación en el
comerciointracomunitario;
b) laELISAchamostradotenermayorespecificidadque,porejemplo,
laELISAindirecta, yporconsiguientepuedeusarseparaconfirmar
lainterpretacióndelosresultadosdelaspruebasserológicas.
3.2.2.Procedimiento de la prueba
La prueba debe realizarse de acuerdo con la letra a) del punto 2 del
capítulo2.3.1delacuartaediciónde2000delManualdenormaspara
pruebasdediagnósticoyvacunasdelaOIE.
4. LABORATORIOSNACIONALESDEREFERENCIA
4.1.Tareasyresponsabilidades
Loslaboratoriosnacionalesdereferenciarealizanlastareassiguientes:
a) aprobación de los resultados de los estudios de validación que
demuestrenlafiabilidaddelmétododepruebautilizadoenelEstado
miembro;
b) determinacióndelnúmeromáximodemuestrasquedebenmezclarse
enlasbateríasdeELISAutilizadas;
c) calibracióndelossuerospatrónnacionalessecundariosdereferencia
(«patronesdetrabajo»)frentealsueropatrónprimariointernacional
mencionadoenelpárrafo2.1;
d) controlesdecalidaddetodosloslotesdeantígenosydebateríasde
ELISAutilizadosenelEstadomiembro;
e) cooperacióndentrodelareddelaboratoriosnacionalesdereferencia
paralabrucelosisdelaUniónEuropea.
4.2.Listadelaboratoriosnacionalesdereferencia
BÉLGICACentre d'études et de recherches vétérinaires et agrochimiques
(CERVA/CODA)
Groeselenberg99B-1180Bruxelles/Brussel
DINAMARCADanishVeterinaryInstitute
Bulowsvej27
DK-1790Copenhague
ALEMANIABundesinstitut für Gesundheitlichen Verbraucherschutz und Veterinär-
medizin(BGVV)
NationalesVeterinärmedizinischesReferenzlaborfürBrucellosePostfach330013D-14191Berlín
GRECIAVeterinaryLaboratoryofLarissa
DepartmentofMicrobiology
6thkmofNationalRoadLarissa-Trikala
GR-411110Larissa
ESPAÑALaboratorioCentraldeVeterinariadeSantaFe
CaminodelJauS/NE-18320SantaFe(Granada)
FRANCIA
LaboratoirenationaletOIE/FAOderéférencepourlabrucellose
Agencefrançaisedesécuritésanitairedesaliments(AFSSA)BP67F-94703Maisons-AlfortCedex
IRLANDA
BrucellosisLaboratory1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—39
▼M48
ModelFarmRoad
Cork
Irlanda
ITALIA
IstitutoZooprofilatticoSperimentaledell'AbruzzoedelMolise
ViaCampoBoario
I-64100Teramo
LUXEMBURGO
StateLaboratoryforVeterinarianMedicine
54,av.GastonDiderich
B.P.2081
L-1020Luxemburgo
PAÍSESBAJOS
CentraalInstituutvoorDierziekteControle
CIDC-Lelystad
Houtribweg39POBox2004
8203AALelystad
PaísesBajos
AUSTRIABundesanstaltfürveterinärmedizinische Untersuchungen
Robert-Koch-Gasse17
A-2340Mödling
PORTUGAL
LaboratórioNacionaldeInvestigaçãoVeterinária(LNIV)
EstradadeBenfica,n.
o701
P-1549-011Lisboa
FINLANDIA
NationalVeterinaryandFoodResearchInstitute
Hämeentie57
POBox45
FIN-00581Helsinki
SUECIA
NationalVeterinaryInstitute
S-75189Uppsala
REINOUNIDO
1) FAO/WHO Collaborating Centre for Reference and Research on
Brucellosis
VeterinaryLaboratoriesAgency
NewHaw
Addlestone
SurreyKT153NB
ReinoUnido
2) ImmunodiagnosticsDepartment
VeterinarySciencesDivision
StoneyRoadStormont
BelfastBT43SD
ReinoUnido1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—40
▼M42
ANEXO D
CAPÍTULOI
REBAÑOS, ESTADOS MIEMBROS Y REGIONES OFICIALMENTE
INDEMNESDELEUCOSISENZOÓTICABOVINA
A. Unrebañoseconsideraráoficialmenteindemnedeleucosisenzoóticabovina
si:
i) no se han dado enél pruebas clínicas ni derivadas de losresultados de
pruebasdelaboratoriodeningúncasodeleucosisenzoóticabovinonise
haconfirmadoningúncasodeestaenfermedadenlosúltimosdosaños,
y
ii) todoslosanimalesdemásdeveinticuatromesesdeedadhandadoresul-
tado negativo en dos pruebas efectuadas durante los doce meses
anteriores de conformidad con el presente anexo, con un intervalo
mínimodecuatromeses,o
iii) cumplelosrequisitosdelincisoi)yestásituadoenunEstadomiembro
ounapartedelterritoriodeunEstadomiembrooficialmenteindemnede
leucosisenzoóticabovina.
B. Un rebaño conservará su estatuto de rebaño oficialmente indemne de
leucosisenzoóticabovinasi:
i) siguecumpliéndoselacondicióndelincisoi)delaparteA,
ii) los animales introducidos en él proceden de otro rebaño oficialmente
indemnedeleucosisenzoóticabovina,
iii) todos losanimales de más de veinticuatro meses de edad siguen dando
reacciónnegativaaunapruebarealizadadeconformidadconelcapítulo
IIaintervalosdetresaños,
iv) losanimalesdereproducciónintroducidosenunrebañoyoriginariosde
untercerpaíssehanimportadodeconformidadconlaDirectiva72/462/
CEE.
C. El estatuto de rebaño oficialmente indemne de leucosis se suspenderá en
casodenocumplirse lascondiciones delaparteB,osicomoresultado de
unapruebadelaboratoriooporrazonesclínicassesospechaqueunoomás
bovinos padecen de leucosis enzoótica bovina y los animales sospechosos
sonsacrificadosinmediatamente.
D. El estatuto quedará suspendido hasta que se haya dado cumplimiento a los
requisitossiguientes:
1) Siunsoloanimaldeunrebañooficialmenteindemnedeleucosisenzoó-
tica bovina ha dado reacción positiva en una de las pruebas a que se
refiere el capítulo II, o se sospecha la existencia de infección en un
animaldeunrebaño:
i) elanimalquehayadadoreacciónpositiva,y,sisetratadeunavaca,
suternero,deberásalirdelrebañoparasersacrificadobajoelcontrol
delasautoridadesveterinarias;
ii) todoslosanimalesdelrebañodemásdedocemesesdeedaddeberán
haberdadoreacciónnegativaadospruebasserológicas(conuninter-
valo de cuatro meses como mínimo y de menos de doce meses)
realizadas conarreglo al capítulo IIalmenos tresmesesdespuésde
lasalidadelrebañodelanimalquehayareaccionadopositivamentey
desudescendencia;
iii) se ha efectuado una investigación epidemiológica con resultados
negativos y los rebaños epidemiológicamente vinculados con el
rebañoinfectadosehansometidoalasmedidasprevistasenelinciso
ii).
No obstante, la autoridad competente podrá eximir de la obligación de
sacrificar el ternero de una vaca infectada si dicho animal fue separado
de su madre inmediatamente después del parto. En tal caso, el ternero
quedarásujetoalosrequisitosestablecidosenelincisoiii)delpunto2.
2) Sivariosanimalesdeunrebañooficialmenteindemnedeleucosisenzoó-
tica bovina danreacción positiva enuna delas pruebasmencionadas en
el capítulo II, o se sospecha que más de un animal de un rebaño está
infectado:
i) todoslosanimalesquehayandadoreacciónpositiva,y,sisetratade
vacas, sus terneros, deberán salir de la explotación para ser sacrifi-
cadosbajoelcontroldelasautoridadesveterinarias;
ii) todoslosanimales demásdedocemesesdeedaddeberándarreac-
ciónnegativaadospruebasrealizadas conarregloalcapítuloIIcon1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—41
▼M44
▼M44
un intervalo de cuatro meses como mínimo y doce meses como
máximo;
iii) todos los demás animales, tras su identificación, se quedarán en la
explotación hasta que tengan más de veinticuatro meses de edad y
hayan sido sometidos a pruebas de conformidad con el capítulo II
después de haber cumplido dicha edad, excepto cuando la autoridad
competente permita quedichosanimales seanenviadosdirectamente
alsacrificiobajosupervisiónoficial;
iv) se ha efectuado una investigación epidemiológica con resultados
negativos y los rebaños epidemiológicamente vinculados con el
rebaño infectado han sido sometidos a las medidas previstas en el
incisoii).
No obstante, la autoridad competente podrá eximir de la obligación de
sacrificar el ternero de una vaca infectada si dicho animal fue separado
de su madre inmediatamente después del parto. En tal caso, el ternero
quedarásujetoalosrequisitosestablecidosenelincisoiii).
E. Conarregloalprocedimientoestablecidoenelartículo17ysobrelabasede
la información suministrada en virtud del artículo 8, un Estado miembro o
una parte del territorio de un Estado miembro podrán considerarse oficial-
menteindemnesdeleucosisenzoóticabovinasi:
a) sehancumplidotodaslascondicionesdelaparteAyalmenosel99,8%
delosrebañosbovinosestánoficialmenteindemnesdeleucosisenzoótica
bovina;
o
b) no se ha confirmado ningún caso de leucosis enzoótica bovina en el
Estado miembro ola parte del territorio del Estado miembro en lostres
últimosaños,ydebenotificarseobligatoriamentelapresenciadetumores
sospechosos de ser debidos a leucosis enzoótica bovina, habiéndose
investigadolacausa,y
cuando se trate de un Estado miembro, todos los animales de más de
veinticuatromesesdeedaddealmenosel10%delosrebaños,elegidos
alazar,hansidosometidosapruebasconresultadosnegativosdeconfor-
midadconelcapítuloIIenlosveinticuatromesesanteriores,o
si se trata de una parte del territorio de un Estado miembro, todos los
animales de más de veinticuatro meses de edad han sido sometidos a
unapruebaconarregloalcapítuloIIenlosveinticuatromesesanteriores
conresultadosnegativos;
o
c) cualquier otro método demuestra, con un índice de fiabilidad del 99 %,
queestáinfectadomenosdeun0,2%delosrebaños.
F. UnEstadomiembroounapartedelterritoriodeunEstadomiembroconser-
varánsuestatutodezonaoficialmenteindemnedeleucosisenzoóticabovina
si:
a) todoslosanimalessacrificadosenelterritorioolapartedelterritoriode
ese Estado miembro son sometidos a exámenes post mortemoficiales a
los que se envían todos lostumores que pudieran deberse al virus de la
leucosisenzoóticabovinaparasuexamenenlaboratorio;
b) elEstadomiembroinformaalaComisióndetodosloscasosdeleucosis
enzoóticabovinaquesurjanenlaregión;
c) todoslosanimalesquedenresultadopositivoenunadelaspruebasaque
se refiere el capítulo II son sacrificados y sus rebaños quedan sujetos a
restriccioneshastaqueserestablezca suestatutodeacuerdoconlaparte
D,y
d) todos los animales de más de dos años de edad han sido sometidos a
pruebas, bien sea una vez en los primeros cinco años tras la concesión
del estatuto de conformidad con el capítulo II o durante los primeros
cinco años tras la concesión del estatuto con arreglo a cualquier otro
procedimiento que demuestre con un grado de fiabilidad del 99 % que
menos del 0,2 % de los rebaños han sido infectados. No obstante, en
caso de que no se haya registrado ningún caso de leucosis enzoótica
bovina en un Estado miembro o una parte del territorio de un Estado
miembro en una proporción de un rebaño de cada diez mil durante al
menos tres años, podrá decidirse, con arreglo al procedimiento estable-
cidoenelartículo17,reducirlaspruebasserológicasordinariassiempre
quetodoslosbovinosdemásdedocemesesdeedadenalmenosel1%
delosrebaños,seleccionadosalazarcadaaño,hansidosometidosauna
pruebarealizadaconarregloalcapítuloII.
G. Elestatutodezonaoficialmenteindemnedeleucosisenzoóticabovinadeun
Estado miembro o una parte del territorio de un Estado miembro se1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—42
▼M44
suspenderá, de conformidad con el procedimiento establecido en el artículo
17,si,comoresultadodeinvestigacionesrealizadasconarregloalaparteF,
existen pruebas que denoten un cambio significativo en la situación de la
leucosis enzoótica bovina en un Estado miembro o una pate del territorio
de un Estado miembro que hayan sido reconocidos oficialmente indemnes
deleucosisenzoóticabovina.
Elestatutodezonaoficialmenteindemnedeleucosisenzoóticabovinapodrá
ser recuperado, de conformidad con el procedimiento establecido en el
artículo 17, cuando se cumplan los criterios establecidos en dicho procedi-
miento.
CAPÍTULOII
PRUEBAS PARA LA DETECCIÓN DE LA LEUCOSIS ENZOÓTICA
BOVINA
Ladeteccióndelaleucosisenzoóticabovinaserealizarámediantelapruebade
inmunodifusión,enlascondicionesdescritasenlaspartesAyB,omediantela
pruebadeinmunoabsorciónenzimática(ELISA)enlascondicionesdescritasen
laparteC.Elmétododeinmunodifusiónsóloseaplicaráenlaspruebasindivi-
duales. En el caso de que se cuestionen justificadamente los resultados de las
pruebas,sellevaráacabounapruebadeinmunodifusióncomocontrolcomple-
mentario.
A.Pruebasdeinmunodifusiónenplacasdegeldeagar
1. Elantígenoquehabrádeutilizarseenestapruebadeberácontenerglico-
proteínas del virus de la leucosis bovina. El antígeno deberá estar
contrastadoenrelaciónconunsueropatrón(sueroEl)suministradopor
elStatensVeterinaereSerumLaboratoriumdeCopenhague.
2. Losinstitutosestatalesdesignadosacontinuacióndeberánencargarsede
contrastarelantígenopatróndetrabajodellaboratorioenrelaciónconel
sueropatrónoficialCEE(sueroEl),suministradoporelStatensVeteri-
naereSerumLaboratoriumdeCopenhague.
a) Alemania: Bundesforschungsanstalt für Viruskrankheiten der Tiere,
Tubinga;
b) Bélgica:InstitutNationalderecherchesvétérinaires,Bruselas;
c) Francia:Laboratoirenationaldepathologiebovine,Lyon;
d) GranDucadodeLuxemburgo:
e) Italia:InstitutoZooprofilatticoSperimentale,Perugia;
f) Países Bajos: Centraal Diergeneeskundig Instituut, afdeling
Rotterdam;
g) Dinamarca:StatensVeterinaereSerumLaboratorium,Copenhague;
h) Irlanda:VeterinaryResearchLaboratory,Abbotstown,Dublín;
i) ReinoUnido:
1. Gran Bretaña: Veterinary Laboratory Agency, Addlestone,
Weybridge,Inglaterra;
2. Irlanda del Norte: Veterinary Research Laboratory, Stormont,
Belfast;
j) España: Subdirección general de sanidad animal, Laboratorio de
sanidadyproducciónanimaldeAlgete(Madrid);
k) Portugal:LaboratórioNacionaldeInvestigaçãoVeterinária,Lisboa;
l) Grecia: Κέντρο Κτηνιατρικών Ιδρυµάτων Αθηνών, Νεαπόλεως
25, 153 10 Αθήνα;
m) Austria:BundesanstaltfürTierseuchenbekämpfung,Mödling;
n) Finlandia: Eläinlääkintä — ja elintarvikelaitos, Helsinki/Anstalten
förveterinärmedicinochlivsmedel,Helsingfors;
o) Suecia:Statensveterinärmedicinskaanstalt,Uppsala.
3. Los antígenos patrón utilizados en el laboratorio deberán ser presen-
tados,porlomenosunavezalaño,enloslaboratorioscomunitariosde
referencia enumerados en el apartado 2, para someterlos a prueba en
relación con el suero patrón CEE. Independientemente de esta valora-
ción, el antígeno utilizado podrá ser controlado con arreglo a lo
dispuetoenlaparteB.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—43
▼M42
▼M42
4. Lapruebaaplicarálosreactivossiguientes:
a) antígeno: el antígeno deberá contener glicoproteínas específicas del
virus de la leucosis enzoótica bovina que haya sido contrastado
respectoalsuerooficialCEE;
b) elsueroparaprueba;
c) unsuerodecontrolpositivoconocido;
d) gelosa:
0,8%agar,
8,5%deNaCl,
tampónTris0,05M,pH7,2;deberán introducirse 15 ml de esta gelosa en una placa de Petri de
85 mm de diámetro, lo que dará una profundidad de 2,6 mm de
gelosa.
5. Se deberá hacer una red experimental de siete oquedades exentas de
humedad mediante perforación de la gelosa hasta el fondo de la placa;
dicharedconsistiráenunaoquedadcentralalrededordelacualseorde-
naránseisoquedadesperiféricasdispuestasencírculo.
Diámetrodelaoquedadcentral:4mm;Diámetrodelasoquedadesperiféricas:6mm;Distanciaentrelaoquedadcentralylasperiféricas:3mm.
6. Se deberá llenar de antígeno patrón la oquedad central. Las oquedades
periféricas1y4(veresquemainferior)sellenaránconelsueropositivo
conocido y las oquedades 2, 3, 5 y 6, con los sueros de prueba. Las
oquedadesdeberánllenarsehastaladesaparicióndelmenisco.
7. Lascantidadesobtenidasseránlassiguientes:
antígeno:32microlitros,
suerodecontrol:73microlitros,
suerodeprueba:73microlitros.
8. Laincubación deberá durar72horasatemperatura ambiente (20-27ºC)
enunrecintohúmedocerrado.
9. Lapruebapodráleerse24y48horasdespués,peronosepodráobtener
ningúnresultadofinalantesdetranscurridas72horas:
a) unsuerodepruebaserápositivosiformaunacurvadeprecipitación
específica conelantígeno delvirusdelaleucosisbovinaysidicha
curvacoincideconladelsuerodecontrol;
b) unsuerodepruebaseránegativosinodaunacurvadeprecipitación
específica con el antígeno del virus de la leucosis bovina y si no
desvíalacurvadelsuerodecontrol;
c) lareacciónnopodráconsiderarseconcluyentesi:
i) elsuerodesvíalacurvadelsuerodecontrolhacialaoquedaddel
antígeno del virusde laleucosisbovina sinformar una curvade
precipitaciónvisibleconelantígeno,o
ii) noesposibleinterpretarlacomonegativanicomopositiva.
Encasodereaccionesdudosas,podrárepetirselapruebayutilizarsuero
concentrado.
10. Podráutilizarsecualquierotraconfiguraciónoreddeoquedadessiempre
que el suero E4, en una dilución a 1: 10 en suero negativo, pueda ser
detectadocomopositivo.
B.Métododevaloracióndelantígeno
Soluciones y materiales necesarios:1. 40mldegelosade1,6%enuntampónTris0,05M/HCldepH7,2,con
8,5%deNaCl;
2. 15 ml de un suero de la leucosis bovina que sólo contenga anticuerpos
respectoalasglicoproteínasdelvirusdelaleucosisbovina,diluidoal1:
10enuntampónTris0,05M/HCldepH7,2,con8,5%deNaCl;
3. 15 ml de un suero de la leucosis bovina que sólo contenga anticuerpos
respectoalasglicoproteínas delvirusdelaleucosisbovina,diluidoa1:
5enuntampónTris0,05M/HCldepH7,2,con8,5%deNaCl;1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—44
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4. cuatroplacasdePetrideplásticodeundiámetrode85mm;
5. unpunzóndeundiámetrode4a6mm;
6. unantígenodereferencia;7. elantígenoquehayadevalorarse;8. unbañodeaguacaliente(56ºC).
Procedimiento:
Disolverlagelosa(1,6%)eneltampónTris/HClcalentandoconprecaución
hasta100ºC.Colocarenelbañodeaguaa56ºCduranteunahoraaproxima-
damente.Colocarademáslassolucionesdesuerodelaleucosisbovinaenel
bañodeaguaa56ºC.
Mezclaracontinuación15mldelasolucióndegelosaa56ºCconlos15ml
de suero de la leucosis bovina (1: 10), agitar rápidamente y verter en dos
placas de Petri a razón de 15 ml por placa. Repetir el procedimiento con
suerodelaleucosisbovinadiluidoa1:5.
Cuando la gelosa haya endurecido, se practicarán los agujeros de la forma
siguiente:
Adición de antígenos
i) PlacasdePetrinúmeros1y3:
oquedadA—antígenodereferencianodiluido,
oquedadB—antígenodereferenciadiluidoa1:2,oquedadesCyE—antígenodereferencia,
oquedadD—antígenodepruebanodiluido.
ii) PlacasdePetrinúmeros2y4:
oquedadA—antígenodepruebanodiluido,
oquedadB—antígenodepruebadiluidoa1:2,
oquedadC—antígenodepruebadiluidoa1:4,
oquedadD—antígenodepruebadiluidoa1:8.
Instrucciones complementarias:
1. Elexperimentodeberárealizarsecondosgradosdedilucióndelsuero(1:
5y1:10),afindeobtenerlaprecipitaciónóptima.
2. Si el diámetro de precipitación fuere excesivamente débil con los dos
gradosdedilución,elsuerodeberáserobjetodeunadiluciónsuplemen-
taria.
3. Si el diámetro de precipitación fuere excesivo para los dos grados de
dilución y si el precipitado desapareciere, se deberá escoger un grado
másdébildediluciónparaelsuero.
4. Laconcentraciónfinaldelagelosadeberáestablecerseen0,8%ylade
lossuerosen5yen10%,respectivamente.
5. Anotar los diámetros medidos en el sistema coordinado siguiente. La
dilución de trabajo será aquélla en la que se registre el mismo diámetro
paraelantígenodepruebaqueparaelantígenodereferencia.
C.Pruebadeinmunoabsorciónenzimática (ELISA)paraladetección dela
leucosisenzoóticabovina
1. Losmaterialesyreactivosquehabrándeutilizarsesonlossiguientes:
a) microplacasdefasesólida,platillosocualquierotrafasesólida;
b) el antígeno se fijará a la fase sólida con o sin ayuda de anticuerpos
captorespoliclonalesomonoclonales.Sielantígenoseasociadirecta-
mente a la fase sólida, todas las muestras de ensayo que den
reacciones positivas deberán someterse a nuevas pruebas con el
antígeno de control en el caso de la leucosis enzoótica bovina. El
antígeno de control deberá ser idéntico al antígeno examinado,
exceptoenelcasodelosantígenosVLB(virusdelaleucosisbovina).
Si los anticuerpos captores están asociados a la fase sólida, los anti-
cuerpossólodebenreaccionaranteantígenosVLB;
c) ellíquidobiológicoquesevayaaexaminar;
d) loscontrolespositivosynegativoscorrespondientes;
e) elconjugado;1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—45
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f) unsubstratoadaptadoalosenzimasutilizados;
g) encasonecesario,unasolucióndeinterrupción;h) solucionesparaladilucióndelasmuestrasdeensayo,paralasprepa-
racionesdereactivosyparaellavado;
i) unsistemadelecturaquecorrespondaalsubstratoutilizado.
2.Normalización y sensibilidad de la prueba
La sensibilidad de la prueba ELISA deberá ser de un nivel tal que el
suero E4 dé positivo tras diluirse 10 veces (muestras de suero) o 250
veces(muestrasdeleche)másqueladiluciónobtenidaapartirdemues-
tras individuales puestas en común. En ensayos en los que las muestras
(suero y leche) sean sometidas a pruebas por separado, el suero E4
diluidoenunaproporciónde1a10(sueronegativo)deberádarpositivo
cuando se someta a la prueba en la misma dilución de ensayo utilizada
para las pruebas individuales. Los institutos oficiales enumerados en el
punto 2 de la Parte A serán responsables del control de la calidad del
métodoELISAy,enparticular,dedeterminar,enfuncióndeltítuloobte-
nido con el suero E4, el número de muestras que deben ponerse en
comúndecadalotedeproductos.
El laboratorio veterinario nacional de Copenhague suministrará el suero
E4.
3.Condiciones de utilización de la prueba ELISA para la detección de la
leucosis enzoótica bovina
El método ELISA podrá aplicarse a una muestra de leche o lactosuero
tomada de la leche procedente de una explotación donde al menos un
30%delasvacasesténenperíododelactación.
Cuandoseutiliceestemétodo,deberánadoptarsemedidasquegaranticen
larelaciónentrelasmuestrastomadasylosanimalesdelosqueprocedan
lalecheolossuerosqueseexaminan.1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—46
▼M42
ANEXO E (I)
a)Enfermedadesdelosbovinos:
— Fiebreaftosa
— Rabia— Tuberculosis— Brucelosis— Pleuroneumoníacontagiosabovina— Leucosisenzoóticabovina— Carbuncobacteridiano
b)Enfermedadesdelosporcinos:
— Rabia
— Brucelosis— Pesteporcinaclásica— Pesteporcinaafricana— Fiebreaftosa— Enfermedadvesicularporcina— Carbuncobacteridiano1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—47
▼M42
ANEXO E (II)
— EnfermedaddeAujeszky
— Rinotraqueítisinfecciosabovina— InfecciónporBrucellasuis— Gastroenteritistransmisible1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—48
▼M44
ANEXO F
Modelo 1
1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—49
▼M44
►(1)M461964L0432—ES—29.07.2002—008.001—50
▼M44
►(1)M471964L0432—ES—29.07.2002—008.001—51
▼M44
1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—52
▼M44
Modelo 2
1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—53
▼M44
►(1)M471964L0432—ES—29.07.2002—008.001—54
▼M44
1964L0432—ES—29.07.2002—008.001—55