KOMMISSIONEN FOR DE EUROPÆISKE FÆLLESSKABER 
Bruxelles, den 24.07.1996 
KOM(96) 365 endelig udg. 
BERETNING FRA KOMMISSIONEN 
UDVIKLING, VALIDERING OG JURIDISK GODKENDELSE AF 
ALTERNATIVE FORSØGSMETODER TIL ERSTATNING AF FORSØG MED 
LEVENDE DYR I KOSMETIKSEKTOREN 
1995 

UDVIKLING, VALIDERING OG JURIDISK GODKENDELSE AF 
ALTERNATIVE FORSØGSMETODER TIL ERSTATNING AF FORSØG MED 
LEVENDE DYR I KOSMETIKSEKTOREN 
1995 
RESUME 
I - INDLEDNING 
Kommissionens forpligtelser 
I direktiv 76/768/EØF, artikel 4, stk. 1, litra i), som ændret ved direktiv 93/35/EØF, 
hedder det, at medlemsstaterne forbyder markedsføring af kosmetiske produkter, som 
indeholder ...bestanddele eller forbindelser heraf, der er blevet afprøvet på dyr efter den 
1. januar 1998. 
Formuleringen "forbindelser heraf' er ikke længere tvetydig for Kommissionen at se, for 
den mener, at forbudet også omfatter færdige kosmetiske produkter. 
Forbudets indførelse skal ses i forbindelse med udviklingen af "tilfredsstillende metoder, 
der kan anvendes i stedet for dyreforsøg ... og at ... det ... er blevet videnskabeligt 
valideret, at de ... yder samme beskyttelse for forbrugeren". 
Med henblik på at fremskaffe regelmæssige oplysninger om udviklingen i situationen 
specificeres det: Kommissionen skal årligt fremlægge en rapport for Europa-Parlamentet 
og Rådet vedrørende de fremskridt, der er nået indenfor udvikling, validering og juridisk 
godkendelse af metoder, der kan anvendes i stedet for dyreforsøg. Rapporten skal 
indeholde præcise data om, hvor mange og hvilken slags forsøg, der er blevet gennemført 
på dyr for så vidt angår kosmetiske midler. 
Rapport for 1994 
Den første rapport blev fremlagt i 1994. I den opregnede man interessante, men 
begrænsede resultater, som ikke gjorde det muligt at erstatte dyreforsøg, men som dog 
kunne bidrage til at reducere antallet af anvendte dyr. Udsigterne var dog rimelig 
optimistiske for validering af alternative metoder til testning af øjenirritation, perkutan 
absorption, fototoksicitet/fotoirritation og basistestning af mutagenicitet. Det blev end­
videre fremhævet, at det med det daværende kendskab ikke var særlig sandsynligt, at man 
ville kunne erstatte dyreforsøg helt ved undersøgelse af toksicitet i forbindelse med 
evaluering af den systematiske risiko, dvs. forbundet med en påvirkning gennem blodet 
på hele organismen efter perkutan absorption. 
II - RAPPORT FOR 1995 
Formålet med rapporten, begrebet potentiel risiko for menneskers sundhed, er det samme 
som i forbindelse med rapporten for 1994. 
De berørte aktører er fortsat: 
Europa-Kommissionen: GD XI, GD-FFC, GD XXIV, GD XII 
den europæiske industri repræsenteret af COLIPA, Forbindelsesudvalget for 
Europæiske Sammenslutninger af Industrier på Parfumeri-, Kosmetik- og 
Hudplej eområdet 
Den amerikanske administration og CFTA (Cosmetic, Toiletry and Fragrance 
Association) 
Den japanske administration og JO A (Japanese Cosmetics Industry Association) 
OECD 
1- Præcisering af vaiideringsfaserne 
Validering er den proces, hvorved man evaluerer og kontrollerer relevans og pålidelighed 
i forbindelse med en test, som er udviklet til et givet formål. Denne proces har vist sig 
at være mere kompleks end forventet og tager længere tid end beregnet. Det har været 
nødvendigt at definere faserne i evalueringen af nye tests bedre (udvikling af en test og 
udarbejdelse af en protokol; forhåndsvalidering; egentlig validering; uvildig bedømmelse 
af undersøgelsen; vejen til juridisk godkendelse). 
2 - Initiativerne 
De forskellige aktører har taget mange initiativer med henblik på at nå de foreskrevne 
mål. 
GDXI 
GD XI er ansvarlig dels for direktiv 86/609/EØF om beskyttelse af dyr, der 
anvendes til forsøg og andre videnskabelige formål, og skal derfor indsamle 
statistiske oplysninger om de anvendte dyr, dels direktiv 67/548/EØF om 
klassificering, emballering og mærkning af farlige stoffer, hvis bilag indeholder 
en definition af de forsøgsmetoder, der er anerkendt af EU. 
GD-FFC 
• ECVAM (Det Europæiske Center for Validering af Alternative Metoder) 
har allerede organiseret 14 seminarer om udvikling og validering af 
alternative metoder. Syv af dem vedrørte kosmetiske produkters sikkerhed, 
og rapporterne er offentliggjort. Der foreligger yderligere to rapporter om 
forhåndsvalidering og validering. 
• ECB (Det Europæiske Kontor for Kemiske Stoffer) giver GD XI den 
nødvendige tekniske og videnskabelige støtte. 
GD XXIV/VUK (Det Videnskabelige Udvalg for Kosmetologi) 
• GD XXIV spiller en rolle som primus motor i forbindelse med de 
iværksatte aktioner, eftersom det er ansvarlig for kosmetikdirektivet og på 
Kommissionens vegne skal forberede et forslag til foranstaltninger med 
henblik på at udskyde fristen for forbud mod dyreforsøg, hvis det viser sig 
at blive nødvendigt. 
• VUK og VUK's underudvalg, som særlig beskæftiger sig med alternative 
metoder, har vurderet forskellige dokumenter og dossierer fremlagt af 
COLIPA. De har endvidere vedtaget et dokument med titlen "Påkrævede 
oplysninger i forbindelse med den videnskabelige evaluering af valide-
ringsundersøgelserne, for så vidt angår alternative tests, der skal kunne 
bruges i evalueringen af kosmetiske midlers sikkerhed". 
GDXII 
GD XII har finansieret forskellige forskningsprogrammer om udvikling og 
validering af alternative metoder. 
COLIPA/SCAAT (Styringsudvalg for alternativer til dyreforsøg) 
Ud over at udarbejde dossierer og deltage i mange undersøgelser organiserede 
COLIPA et internationalt videnskabeligt symposium om alternativer til dyreforsøg 
i Bruxelles den 29. og 30. november 1995. 
USA 
• Den amerikanske regering søger aktivt at fremme internationalt 
samarbejde, som kan muliggøre henstillinger. 
• FDA (Food and Drug Administration), det statslige organ, der er ansvarligt 
for kosmetiksikkerhed, giver udtryk for bekymring med hensyn til 
udelukkelsen af dyreforsøg, når direktiv 93/35/EØF træder i kraft. 
OECD 
OECD offentliggør retningslinjer for testning af toksicitet, som er godkendt af 
medlemsstaterne. I øjeblikket drøfter man en retningslinje vedrørende testning af 
perkutan absorption in vitro. 
3 - Statistikker over dyreforsøg 
Det har været vanskeligt at indsamle specifikke data om kosmetikbestanddele og 
-produkter, fordi indsamlingen af data over, hvor mange dyr der anvendes til forsøg og 
andre videnskabelige formål, i henhold til direktiv 86/609/EØF, ikke er fastsat til at skulle 
foregå årligt. 
8 medlemsstater har tilkendegivet, at der ikke var anvendt dyr til at teste færdige 
kosmetikprodukter på deres territorium (Italien, Grækenland, Belgien, Irland, 
Sverige, Finland, Luxembourg, Tyskland). 
UV 
6 medlemsstater har tilkendegivet, at der ikke var anvendt dyr til at teste 
kosmetikbestanddele på deres territorium (Grækenland, Nederlandene, Irland, 
Sverige, Finland, Luxembourg). 
3 medlemsstater (Østrig, Frankrig, Det Forenede Kongerige) har sat tal på 
oplysningerne, idet det dog i nogle tilfælde anføres, at tallene ikke kan fortolkes, 
og at der hersker usikkerhed om overensstemmelsen med virkeligheden. 
Det skal endvidere bemærkes, at visse medlemsstater, som ikke selv producerer 
bestanddele, kan anvende bestanddele, der er blevet testet i andre medlemsstater eller i 
lande uden for EU, og at visse bestanddele kan være blevet testet til andre formål. 
4 - Konklusioner og perspektiver vedrørende udvikling af alternative metoder til 
testning af toksicitet i forbindelse med evaluering af sikkerheden af kosmetiske produkter 
og bestanddele heraf. 
4-1 Bestanddele 
Fototoksicitet/fotoirritation (kutan reaktion efter epikutan anvendelse af et kemisk 
stof i forbindelse med UV-stråling). Det vedrører særlig UV-filtre. 
Resultaterne af fase II af EU/COLIPA's internationale valideringsundersøgelse af 
in vitro-tests vedrørende fototoksicitet har allerede åbnet mulighed for væsentlige 
fremskridt. Fase III er planlagt. Det bliver nødvendigt med en supplerende 
undersøgelse af UV-filtre. Validering kan forventes i den nærmeste fremtid. 
Perkutan absorption 
Det forventes, at en ny retningslinje for in vitro-testning af perkutan absorption 
vil blive godkendt i den nærmeste fremtid af medlemsstaterne og OECD . 
Kutan irritation 
Det foreslås at evaluere kosmetiske bestanddeles kutane irritation på frivillige 
forsøgspersoner. Det forudsætter dog, at forudgående undersøgelser af den toksiske 
risiko giver tilstrækkelig garanti. 
Kutan sensibilisering 
Evaluering in vitro af kutan sensibilisering forudsætter nærmere undersøgelser af 
sensibiliseringens mekanistiske grundlag, inden man kan overveje at foretage en 
valideringsundersøgelse. 
Øjenirritation 
Resultaterne af valideringsundersøgelsen om alternativer til Draiza-testen af 
øjenirritation var skuffende (EU/Home Office-undersøgelsen og COLIPA-
undersøgelsen), for så vidt som ingen af testene opfyldte undersøgelsernes 
målsætninger. Det er muligt at gå mere fleksibelt til værks, hvis man accepterer 
en kombination af videnskabeligt validerede metoder og en evaluering af nye 
produkters og deres bestanddeles toksicitet på grundlag af en sammenligning med 
passende standardkontrolstoffer (benchmark). 
t 
\V 
Fotomutagenicitet (samtlige ændringer af det genetiske materiales informative 
indhold i forbindelse med UV-stråling). 
Der er foreslået henstillinger om de kriterier, der skal vedtages med henblik på at 
definere protokoller for tests in vitro. 
Hudkorrosion 
Der anvendes ikke korrosive bestanddele i kosmetiske produkter. Men ECVAM's 
valideringsundersøgelse af tests af hudkorrosion kan anvendes i screeningsfasen 
og give oplysninger, som er absolut nødvendige, før tests på frivillige 
forsøgspersoner kan overvejes. 
Mutagenicitet 
Der anvendes løbende tests in vitro til evaluering af kosmetiske bestanddeles 
mutagene potentiel. Tests in vivo anvendes kun, når tests in vitro giver 
tvivlsomme resultater. 
Inden for en overskuelig fremtid bliver det sandsynligvis ikke muligt at erstatte 
tests in vivo til evaluering af den systematiske risiko, som f.eks. testning af akut 
toksicitet, subkronisk toksicitet, carcinogenicitet, og mutagenicitet. Med 
videreudviklingen af de anvendte metoder er det dog allerede blevet muligt at 
reducere antallet af anvendte dyr betydeligt. 
4-2 Færdige kosmetikprodukter 
Færdige kosmetikprodukters øjentolerance og kutane tolerance kan normalt 
evalueres in vitro, forudsat at man på forhånd kender bestanddelenes 
toksicitetsdata og fysisk-kemiske egenskaber, og at de giver tilstrækkelig garanti. 
Færdige kosmetikprodukters kutane kompatibilitet (ingen kutan irritation) kan 
evalueres på mennesker, forudsat at det sker inden for rammerne af strengt 
overvågede kliniske undersøgelser. 
Det er vigtigt at understrege, at anvendelse af frivillige forsøgspersoner som et 
erstatningsalternativ til dyreforsøg, må overvejes med største forsigtighed. Sådanne 
undersøgelser, som har en klar etisk dimension, bør kun tillades, når undersøgelser 
in vivo og/eller in vitro har vist, at der ikke er risiko for alvorlige følgevirkninger. 
Sammenlagt - Validering af alternative metoder til evaluering af perkutan 
absorption og fotoirritation i forbindelse med bestanddele, 
til evaluering af øjentolerance og kutan tolerance for 
færdige produkter, kan forventes i den nærmeste fremtid. 
Udfærdigelse af alternative metoder til evaluering af 
øjenirritation, kutan irritation og kutan sensibilisering i 
forbindelse med bestanddele forudsætter forudgående 
Der bliver ikke udfærdiget in vitro-metoder på områder med 
en systematisk risiko inden for en overskuelig fremtid, 
selvom det er muligt at reducere antallet af dyr. 
V. 
GLOSSARY 
CAPT: Committee of Adaptation to Technical Progress 
C A AT: Centre for Alternatives to Animal Testing (John Hopkins University. USA) 
CFTA: Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association (USA) 
COLIPA: European Cosmetic, Toiletry and Perfumery Association 
DEREK: Deductive Estimation of Risk from Existing Knowledge 
ECB: European Chemicals Bureau 
ECVAM: European Centre for the Validation of Alternative Methods 
ERGATT: European Research Group for Alternatives in Toxicity Testing 
ES AC: ECVAM Scientific Advisory Committee 
EU: European Union 
EU/HO international validation study: 
European Union/Home Office international validation study 
FDA: Food and Drug Administration (USA) 
FDCA. Food, Drug and Cosmetics Act (USA) 
FLT: Fluorescein Leakage Test 
FRAME: Fund for the Replacement of Animals in Medical Experiments 
GLP: Good Laboratory Practice 
ICCVAM: US Inter-Agency Coordinating Committee for the Validation of Alternative 
Methods 
IFAW: International Fund for Animal Welfare 
IRAG: Interagency Regulatory Alternatives Group 
IVTIP: In Vitro Testing Industrial Platform 
JO A: Japanese Cosmetics Industry Association 
JRC: Joint Research Centre 
MMAS: Modified Maximum Average Score 
MHW: Ministry for Health and Welfare (Japan) 
NIEHS: National Institute of Environmental Health Sciences (USA) 
NRU: Neutral Red Uptake Assay 
NTP: National Toxicology Program (USA) 
PM: Prediction Model 
OECD: Organisation for Economic Cooperation and Development 
QSAR: Quantitative Structure-Activity Relationships 
RBC: Red Blood Cell Haemolysis Test 
SCAAT. Steering Committee on Alternatives to Animal Testing 
SCC: Scientific Committee on Cosmetology 
SIAT: Scweizerisches Institut fur Alternativen zu Tierversuchen 
TEA: Tissue Equivalent Assay 
UV: Ultra Violet 
ZEBET: Zentrastelle zur Erfassung und Bewertung von Ersatz und Ergånzungs-
methoden zum Tierversuch im Bundesgesundheitsamt 
VI 
INDHOLDSFORTEGNELSE 
SIDE 
A. INDLEDNING 2 
B. PRÆCISERING AF VALIDERINGSFASERNE 2-5 
- Validering af alternative metoder anvendt til forskellige formål 3 
- Faser i evalueringen af nye tests 3 
C. INITIATIVERNE 11995 5-14 
Aktørerne 5 
Initiativer 6 
1. Den Europæiske Union 
GDXI 6 
GD-FFC 7 
GD AX7WCSC 9 
GDXII 12 
COLIPA/SCAAT 12 
2. USA 14 
3. JAPAN 14 
4. OECD 14 
D. STATUS OVER, HVOR LANGT MAN ER NÅET MED ARBEJDET 15-19 
E. STATISTIKKER OVER DYREFORSØG 20-21 
F. KONKLUSIONER 21-22 
G. PERSPEKTIVER 23-24 
A. INDLEDNING 
Nærværende rapport er den anden rapport, som Kommissionen er 
blevet pålagt at fremlægge årligt for Europa-Parlamentet og for 
Rådet, og den vedrører de fremskridt, der er nået inden for 
udvikling, validering og juridisk godkendelse af metoder, der 
kan anvendes i stedet for dyreforsøg til afprøvning af 
kosmetiske midler. 
"Koumissionen skal årligt fremlægge en rapport for 
Europa-Parlamentet og Rådet vedrørende de fremskridt, der 
er nået inden for udvikling, validering og juridisk 
godkendelse af metoder, der kan anvendes i stedet for 
dyreforsøg. Rapporten skal indeholde præcise data om, 
hvor mange og hvilken slags forsøg, der er blevet 
gennemført på dyr for så vidt angår kosmetiske midler. 
Medlemsstaterne er forpligtede til at indhente disse 
oplysninger som supplement til den indsamling af 
statistikker, som de pålægges at foretage i henhold til 
direktiv 86/609/EØF (L 358 af 18.12.86, s.l) om 
beskyttelse af dyr, der anvendes til forsøg og andre 
videnskabelige formål. Det ligger i særdeleshed 
Kommissionen på sinde at få fremmet udviklingen, 
valideringen og den juridiske godkendelse af 
forsøgsmetoder, hvori der ikke anvendes levende dyr. " 
(Direktiv 93/35/EØF, art. 4 (i) (L 151 af 23.6.93, s. 
32)). 
Bortset fra målsætningerne, aktørerne og de potentielle risici 
for menneskets helbred, som ikke er ændret i forhold til sidste 
år, vil nærværende rapport gennemgå de punkter, der er 
behandlet i den første årsrapport (KOM (94)606). 
præcisering af valideringsfaserne (B) 
initiativerne i 1995 (C) 
status over, hvor langt man er nået med arbejdet (D) 
statistikker over dyreforsøg (E) 
konklusioner (F) 
perspektiver (G) 
B. PRÆCISERING AF 
VALIDERINGSFASERNE 
Kommissionens hovedmålsætning er fortsat at fremme udvikling og 
validering samt vedtagelse af love om alternative metoder, der 
kan yde forbrugeren mindst samme beskyttelsesniveau som det, 
der kan opnås ved dyreforsøg. 
Validering er den proces, hvorved man evaluerer og kontrollerer 
relevans og pålidelighed i forbindelse med en test, som er 
udviklet til et givent formål. 
Det har vist sig, at man for at opnå dette resultat skal 
igennem flere faser, end man først havde regnet med, ligesom 
processen har vist sig at være mere kompleks end beregnet. 
På den første Amden-workshop (Schweiz, 1990) opstillede man det 
væsentligste teoretiske grundlag for valideringsprocessen, 
nemlig validering i det enkelte laboratorium, 
evalueringsudveksling laboratorierne imellem, udvikling af 
databaser samt evaluering af resultaterne. 
Den erfaring, man har gjort i forbindelse med de undersøgelser, 
der har været i gang siden 1990, har vist, at det er nødvendigt 
at give en mere præcis definition af de forskellige 
målsætninger i forbindelse med valideringsundersøgelserne samt 
at integrere flere faser i evalueringen af nye tests. 
ECVAM (Det Europæiske Center for Validering af Alternative 
Metoder), en enhed under Det Fælles Forskningscenters (ISPRA) 
Miljøinstitut er stærkt involveret i valideringsdebatten og er 
kommet med væsentlige bidrag på følgende områder: 
praktiske aspekter i forbindelse med validering 
forhåndsvalidering 
internationale diskussioner med ICCVAM (US - Inter-Agency 
Coordinating Committee for the Validation of Alternative 
Methods) og med OECD angående harmonisering af 
validerings- og godkendelseskriterierne. 
Ved den anden Amden-workshop (den 24.-28. januar 1994), som var 
organiseret af ECVAM og ERGATT (European Research Group for 
Alternatives in Toxicity Testing), blev der anbefalet nogle 
retningslinjer vedrørende de praktiske og logistiske aspekter i 
forbindelse med validering af alternative tests; disse 
anbefalinger figurerer i ECVAMs rapport nr. 5. 
Validering af alternative metoder anvendt til forskellige 
formål 
Validering af alternative tests kan foretages med fire 
hovedmåltyper for øje. Der skelnes mellem: 
1. Validering af alternative procedurer til brug i 
undersøgelser, som der ikke er opstillet regler for. 
2. Validering af alternative tests, der er beregnet til at 
skulle indgå i forskriftsmæssige retningslinjer. 
3. Validering af alternative tests, der skal erstatte 
eksisterende retningslinjer. 
4. Validering af alternative tests, der er beregnet til at 
tilvejebringe en del af de oplysninger, der er påkrævet i 
henhold til foreskrevne retningslinjer. 
Faser i evalueringen af nye tests 
1. Udvikling af en test og udarbejdelse af en protokol 
De kriterier, der skal tages højde for i forbindelse med 
udviklingen af en test, omfatter primært en beskrivelse af 
metodegrundlaget, en definition af testens videnskabelige 
målsætning, en specificering af de biologiske reaktioner og af 
disses omfang, samt angivelse og fortolkning af resultaterne 
via en beregningsmodel. 
Beregningsmodellen skal gøre det muligt at konvertere et 
resultat, der er opnået ved hjælp af en alternativ metode, 
således at det kan anvendes til en korrekt beregning af in 
vivo-toksiciteten. 
Beregningsmodellen er af afgørende betydning for et vellykket 
resultat af et valideringsprogram. Den gør det muligt at teste 
én klart defineret hypotese, at evaluere testens anvendelighed 
objektivt, ligesom den kan bruges som vejledning i forbindelse 
med planlægningen af valideringsundersøgelsen. 
2. Forhåndsvalidering 
Erfaringen har vist, at resultaterne af omfattende og dyre 
valideringsundersøgelser kan blive stærkt forringet, hvis de, 
der leder undersøgelserne, ikke insisterer på at få udleveret 
optimerede testprotokoller og beviser på disses anvendelighed, 
inden den formelle valideringsundersøgelse starter. 
Forhåndsvalideringens mål er beskrevet i rapport nr. l fra 
"ECVAM Prevalidation Task Force", hvor der også gives en 
skematisk oversigt over forhåndsvalideringsproceduren. 
Målsætningerne for en forhåndsvalidering er følgende: 
at optimere og standardisere protokollen 
at evaluere, i hvor høj grad metoden lader sig overføre. 
Udførelsen af forhåndsvalideringen omfatter følgende tre faser: 
en forbedring af protokollen, der indebærer et samarbejde 
mellem det laboratorium, som har udviklet metoden, og det 
laboratorium, der skal optimere metoden 
overførelse af protokollen, således at de to første 
laboratorier samarbejder med det laboratorium, som 
metoden skal overføres til 
en blindprøve, hvori der som et minimum skal være 
deltagelse fra de tre laboratorier, der har til opgave at 
undersøge protokollens anvendelighed. 
3. Validering 
Valideringsfasen omfatter en formel undersøgelse med deltagelse 
af forskellige laboratorier. 
De vigtigste faser er som følger: 
udformning af undersøgelsen 
valg af tests 
valg af laboratorier 
valg og distribution af testmaterialer 
indsamling og analyse af resultaterne 
evaluering af undersøgelsen. 
4. uvildig bedømmelse af undersøgelsens gennemførelse og 
resultater 
En objektiv evaluering af værdien af de videnskabeligt 
validerede tests via en sammenligning med andre tests, idet der 
tages højde for målsætningerne for valideringen. 
5. Vejen til juridisk godkendelse 
Det er vigtigt, at en ny metode, der anses for at være 
fyldestgørende valideret til at kunne erstatte en eksisterende 
metode, opnår bredest mulig international anerkendelse. OECDs 
retningslinjer for tests er således vigtige i denne sammenhæng, 
eftersom de anvendes i forbindelse med gennemførelse af tests i 
medlemslandene i Europa og Nordamerika samt i Japan, Australien 
og New Zealand. 
I henhold til OECD-Aftalen om Gensidig Godkendelse af Data har 
medlemslandene indgået aftale om gensidig godkendelse af data 
hidrørende fra tests udført i overensstemmelse med OECDs 
retningslinjer for tests, forudsat at principperne for god 
laboratoriepraksis er opfyldt. OECD har fastlagt en procedure 
for opdatering af retningslinjer for tests og for indførelse af 
nye testmetoder. 
C. INITIATIVERNE I 1995 
AKTØRERNE 
Det skal her endnu engang anføres, at aktørerne i forbindelse 
med fremme af forskning, udvikling og validering af alternative 
metoder er følgende: 
BEN EUROPÆISKE UNION 
Europa-Kommissionen 
Adskillige af Kommissionens tjenestegrene beskæftiger sig med 
anliggender vedrørende dyreforsøg og udviklingen og 
evalueringen af alternative metoder. 
GD XI, Miljø, Nuklear Sikkerhed og Civilbeskyttelse forvalter 
direktiv 86/609/EØF om beskyttelse af dyr, der anvendes til 
forsøg og andre videnskabelige formål, og direktiv 67/548/EØF 
om klassificering, emballering og mærkning af farlige stoffer. 
GD-FFC, Det Fælles Forskningscenter 
ECVAM, Det Europæiske Center for Validering af 
Alternative Metoder 
ESAC, ECVAMs Videnskabelige Rådgivende Udvalg 
ECB, Det Europæiske Kontor for Kemiske Stoffer 
GD XXIV: Forbrugerpolitik 
4. kontor, Kvalitetspolitik og produktmarkedet, forvalter 
kosmetik-direktivet (76/768/EØF) 
CSC: Det Videnskabelige Udvalg for Kosmetologi (VUK), 
rådgivende udvalg for Kommissionen 
GD XII, Videnskab, Forskning og Udvikling giver tilskud til 
forskningsprogrammer. 
Den Europæiske Industri 
COLIPA - Forbindelsesudvalget for Europæiske Sammenslutninger 
af Industrier på Parfumeri-, Kosmetik- og Hudplejeområdet - har 
nedsat SCAAT-Udvalget (jf. nedenfor): 
SCAAT - Styringsudvalget for Alternativer til Dyreforsøg 
- overvåger COLIPAs valideringsundersøgelser og 
koordinerer kosmetikindustriens valideringsindsats på 
verdensplan. 
USA 
CTFA - Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association 
JAPAN 
JCIA - Japanese Cosmetics Industry Association 
ORGANISATIONEN FOR ØKONOMISK SAMARBEJDE OG UDVIKLING (OECD) 
OECD offentliggør retningslinjer for forsøg, som medlemslandene 
har godkendt samstemmende. De pågældende retningslinjer er 
næsten identiske med EU's forsøgsmetoder i Bilag V og giver -
med princippet om gensidig anerkendelse af data - mulighed for 
harmonisering på internationalt plan og for en rationel 
fremgangsmåde ved anvendelse af de 3 R'er. 
INITIATIVER 
1. DEN EUROPÆISKE UNION 
GD XI 
GD XI, Miljø, Nuklear Sikkerhed og Civilbeskyttelse er med 
medlemsstaterne nået til enighed om den bedste måde at gribe 
det an på, når der hvert andet år skal indsamles statistiske 
data i henhold til artikel 13 og artikel 26 i direktiv 
86/609/EØF om beskyttelse af dyr, der anvendes til forsøg og 
andre videnskabelige formål. De skemaer, som medlemsstaterne i 
denne sammenhæng skal udfylde, indeholder en rubrik for 
angivelse af det samlede antal dyr, der er anvendt til testning 
af kosmetiske midler. GD XI er endvidere ansvarlig for 
gennemførelsen af direktiv 67/548/EØF og for Den Europæiske 
Unions testmetoder som fastlagt i Kommissionens direktiv 
87/302/EØF og i bilag til Kommissionens direktiv 92/69/EØF (Del 
B - metoder til bestemmelse af toksicitetsgrad). 
GD XI har støttet EU/HOs internationale valideringsundersøgelse 
om alternativer til Draize-testen af øjenirritation og 
ligeledes EU/COLIPAs internationale valideringsundersøgelse af 
fototoksicitet in vitro. 
GD FFC 
ECVAM (Det Europæiske Center for Validering af Alternative 
Metoder) står til rådighed for alle de GD'er, der er involveret 
i spørgsmålet om alternative metoder. 
ECVAM blev oprettet af Europa-Kommissionen i oktober 1991 i 
henhold til en meddelelse fra Kommissionen til Rådet og Europa-
Parlamentet og i overensstemmelse med artikel 23 i direktiv 
86/609/EØF, hvori det hedder: "Kommissionen og medlemsstaterne 
skal fremme forskning i udvikling og validering af alternative 
metoder, som kan give lige så omfattende oplysninger som dem, 
der opnås ved forsøg med dyr, men som indebærer anvendelse af 
færre dyr eller mindre smertefulde fremgangsmåder; de træffer 
alle øvrige foranstaltninger, som de anser for velegnede til 
fremme af forskningen på dette område." 
ECVAM har først og fremmest til opgave at: 
1. Koordinere valideringen af de alternative testmetoder på 
EU-plan. 
2. Fungere som et sted for udveksling af erfaringer og 
information om udviklingen af alternative testmetoder. 
3. Oprette, udvikle og forvalte en database vedrørende 
alternat ive procedurer. 
4. Fremme dialogen mellem lovgivere, erhvervsfolk, 
biomedicinske videnskabsfolk og dyrevelfærdsgrupper med 
henblik på udvikling, validering og international 
anerkendelse af alternative testmetoder. 
ECVAMs åbningskonference, der blev organiseret i Ispra den 18. 
oktober 1994, var helliget debatten om validering af 
alternative erstatningsmetoder. På denne konference drøftedes 
ECVAMs rolle i forbindelse med udvikling, validering og 
godkendelse af alternative tests og teststrategier, en rolle, 
der kan resumeres således: 
at bidrage til udarbejdelsen af retningslinjer gennem 
selve valideringsprocessen, eftersom denne har så tæt 
tilknytning til udvikling og godkendelse af relevante og 
pålidelige tests beregnet til specifikke formål; 
at fastsætte prioriteter under hensyntagen til, hvor 
langt man videnskabeligt er nået inden for specifikke 
områder; 
at sikre, at de alternative tests omfatter simple 
biologiske reaktioner, der er tydelige og veldefinerede 
og baseret på en fyldestgørende indsigt i de 
grundlæggende mekani smer; 
at fremme fremgangsmåder, der indbefatter flere 
discipliner på én gang med henblik på udvikling af 
integrerede teststrategier, som omfatter QSAR-relationer 
(Quantitative structure acitivity relations), biokinetik 
samt celle- og vævskulturmetoder; 
at forsøge at løse de problemer, der er forbundet med 
manglen på testmateriale og dermed på in vivo-data af god 
kvalitet; 
at fremme fornyet evaluering af eksisterende 
retningslinjer og foreskrevne procedurer; 
at opnå konsensus ved at samarbejde med relevante organer 
inden for regeringerne, erhvervslivet, akademikerkredse 
o.lign.; 
at opstille kriterier for validering og uvildig 
evaluering af resultaterne fra valideringsundersøgelserne 
samt for juridisk godkendelse af alternative tests og 
teststrategier; dette foregår via et aktivt samarbejde 
med bl.a. OECD og ICCVAM (Inter-Agency Coordinating 
Committee for the Validation of Alternative Methods, 
USA) . 
ECVAM har indtil videre organiseret adskillige workshops med 
udvikling og validering af alternative tests som emne, og 
centret har offentliggjort rapporterne fra 14 af disse 
workshops. ECVAM har prioriteret testning af kosmetiske midler 
højt, og cte rapporter, der er af direkte interesse for 
evalueringen af kosmetiske midlers sikkerhed, er følgende: 
- rapport 2 - Test af fototoksicitet in vitro (1994) 
- rapport 5 - Praktiske aspekter af valideringen af 
procedurerne for toksicitetstests (1995) 
- rapport 6 - En forhånds-valideringsundersøgelse af in 
vitro-tests af hudkorrosion (1995) 
- rapport 7 - Udvikling og validering af forsøg uden dyr 
samt teststrategier; indkredsning af en 
koordineret strategi til at imødekomme de 
udfordringer og de muligheder, som den sjette 
ændring af kosmetikdirektivet (1995) 
indebærer 
- rapport 8 - En integreret anvendelse af alternative 
fremgangsmåder til at beregne toksiske risici 
(1995) 
- rapport 11 - De tre R'er: Vejen frem (1995) 
- rapport 13 - Metoder til at vurdere perkutan absorption 
(offentliggjort i 1996). 
Der offentliggjordes yderligere to rapporter i 1995 om: 
validering af alternative testmetoder 
den første rapport fra ECVAMs Task Force for 
Forhåndsvalidering. 
Blandt ECVAMs prioriterede emner på området testning af 
kosmetiske midler for perioden 1995-1998 kan nævnes: 
tiltagende toksicitet 
metabolisme 
korrosionsfølsomhed 
fototoksicitet 
hudpenetration 
øjen- og hudirritation 
sensibilisering 
Det Europæiske Kontor for Kemiske Stoffer yder teknisk og 
videnskabelig assistance til GD XI vedrørende klassificering og 
mærkning af farlige stoffer, anmeldelse af nye stoffer, 
eksisterende kemiske stoffer, kontrol med eksport/import af 
farlige stoffer og testmetoder (i overensstemmelse med bilag V 
i direktiv 67/548/EØF). Der er etableret tæt kontakt mellem Det 
Europæiske Kontor for Kemiske Stoffer og ECVAM, hvad angår 
alternative erstatnings-testmetoder og ændring af procedurer, 
hvori indgår dyreforsøg, med henblik på at mindske antallet af 
anvendte dyr og at gøre testene mindre smertefulde for de dyr, 
der anvendes til forsøg på områder, hvor det ifølge gældende 
lov er påkrævet, at der udføres tests på dyr. 
GD XXIV / VUK (CSC) 
GD XXIV - Forbrugerpolitik, som forvalter kosmetikdirektivet 
(direktiv 76/768/EØF) spiller fortsat en rolle som primus motor 
og har udvidet aktiviteterne med henblik på i så vid 
udstrækning som muligt at opfylde bestemmelserne i direktiv 
93/35/EØF inden for de fastsatte frister. 
I tilfælde af at de alternative metoder ikke er blevet 
videnskabeligt valideret og juridisk godkendt, skal GD XXIV for 
Kommissionen forberede et forslag til foranstaltninger med 
henblik på at udskyde fristen for forbud mod dyreforsøg, i 
overensstemmelse med den procedure, der er foreskrevet af 
Udvalget for Tilpasning til Den Tekniske Udvikling (artikel 10 
i direktiv 76/768/EØF). 
Dette udvalg (Udvalget for Tilpasning til Den Tekniske 
Udvikling) består af repræsentanter for medlemsstaterne og har 
en repræsentant for Kommissionen som formand. Formanden 
forelægger udvalget forslag til de foranstaltninger, der skal 
træffes. 
Der afgives udtalelse på grundlag af kvalificeret 
stemmeflertal. 
I overensstemmelse med den nye fælles beslutningsprocedure vil 
Europa-Parlamentet samtidig og på de samme betingelser blive 
un« /eel 
underrettet om ethvert forslag til foranstaltninger, der bliver 
forelagt udvalget. 
"Hvis der ikke er sket tilstrækkelige fremskridt inden 
for udviklingen af metoder, der på tilfredsstillende vis 
kan erstatte dyreforsøg, især for så vidt angår de 
tilfælde, hvor de alternative forsøgsmetoder på trods af 
alle tænkelige bestræbelser ikke er blevet videnskabeligt 
valideret som værende i stand til at yde forbrugerne en 
tilsvarende grad af beskyttelse, og idet der tages højde 
for OECD-direktiverne om toksicitets-tests, skal 
Kommissionen senest den l. januar 199 7 fremlægge et 
forslag til foranstaltninger med henblik på at udskyde 
denne bestemmelses ikrafttrædelse med en tilstrækkelig 
frist, som under ingen omstændigheder må være mindre end 
to år, sådan som proceduren er foreskrevet i artikel 10. 
Inden Kommissionen fremsætter dette forslag, skal den 
høre Det videnskabelige Udvalg for Kosmetologi" (direktiv 
93/35/EØF, art. 4 (i)) . 
GD XXIV har gentagne gange anmodet medlemsstaterne om at 
opfylde deres forpligtelser til at indsamle præcise data om 
dyreforsøg, der udføres i forbindelse med bestanddele og 
færdige kosmetikprodukter. Den indsamling af statistiske data, 
som er foreskrevet i direktiv 93/35/EØF omfatter mere end de 
generelle data, som er foreskrevet i direktiv 86/609/EØF. 
Medlemsstaterne er blevet anmodet om at fremlægge mere 
detaljerede resultater på årsbasis. 
GD XXIV har haft løbende kontakt med GD XI og ECVAM og har 
fremmet kommunikationen mellem alle aktørerne. 
VUKt Det Videnskabelige Udvalg for Kosmetologi er et rådgivende 
udvalg for Kommissionen, og dets opgave er at afgive en 
videnskabelig udtalelse til GD XXIV angående mulighederne for 
anvendelse af validerede alternative metoder til evaluering af, 
hvor sikre kosmetikprodukter er at bruge for mennesker. 
VUKs Underudvalg om Alternative Metoder og Retningslinjer 
organiserede to arbejdsmøder (den 2. februar og den 11. maj) og 
to fælles møder med SCAAT/COLIPA (den 19. september og den l. 
december); i løbet af disse møder gennemførtes følgende 
aktiviteter: 
1. Evaluering af de af COLIPA fremlagte dokumenter og 
oplysninger 
In vitro-fotoirritation (EU/fCOLIPA) 
Analysen af de data, som COLIPA har tilvejebragt, dvs. af de 
delresultater fra forhåndsvalideringsfasen, som er udgivet i 
faglitteraturen, samt delvise oplysninger om 
valideringsundersøgelsernes fase 2, har ikke gjort det muligt 
10 
for VUK at afgive en videnskabelig udtalelse om forslaget i 
dets helhed. VUK understreger dog, at dyremodellerne ikke egner 
sig til at beregne fototoksiske virkninger hos mennesker og 
mener, at undersøgelsen af det fototoksiske potentiale "in 
vitro" er et vigtigt skridt i evalueringen af sikkerheden af de 
kosmetik-produkter, der indeholder UV-filtre. 
Perkutan absorption in vitro (COLIPA) 
Efter at have analyseret de dokumenter, som COLIPA har 
fremlagt, dvs. de retningslinjer for prøvninger af perkutan 
absorption in vitro, standardprotokollerne samt en generel 
oversigt over det indbyrdes forhold in vitro/in vivo, anbefaler 
VUK, at man præsenterer den perkutane nin vitro"-
absorptionsmetode på ensartet vis, og at man supplerer den med 
resultater fra såvel de enkelte laboratorier som fra de 
koordinerede laboratorie-undersøgelser; der skal være anvendt 
test testmateriale og -hjælpestoffer ud fra et hensigtsmæssigt 
valg. 
Fotomutagenicitet (COLIPA) 
COLIPAs anbefalinger i den endelige rapport, der er blevet 
overdraget til VUK, angiver de krav, der skal tages højde for i 
forbindelse med definitionen af prøveprotokollerne. 
VUK beklager, at det endnu ikke er muligt at basere 
evalueringen af fotomutagenicitetspotentialet i UV-filtre på 
behørigt validerede metoder, på trods af at udvalget i 1990 
opstillede de overordnede krav til gennemførelsen af 
fotomutagenicitetstests (SPC/803/90; SPC * Tjenesten for 
Forbrugerpolitik). 
2. Påkrævede oplysninger i forbindelse med den 
videnskabelige evaluering af valideringsundersøgelserae 
for så vidt angår alternative tests, der skal kunne 
bruges i evalueringen af kosmetiske midlers sikkerhed. 
I betragtning af de problemer, der er forbundet med validering 
af alternative metoder, vurderede VUK, at det var relevant at 
udarbejde en dokument, som kunne udgøre et direkte bidrag til 
de fremtidige valideringsundersøgelser. 
I denne rapport tages der højde for de kvalitative og de 
kvantitative aspekter i forbindelse med validering. De valgte 
kriterier: 
vedrører den videnskabelige validering af tests 
gør det muligt at måle toksicitetsgraden 
kan anvendes på kosmetiske bestanddele 
omfatter en definition af fremgangsmåderne ved 
udarbejdelsen af statistikker. 
11 
Det gøres helt klart, hvor nødvendigt det er at tilvejebringe 
beviser for optimeringen af protokollerne, samt at formalisere 
forholdet mellem in vitro-data og in vivo-data i form af en 
matematisk relation. 
GD XII 
GD XII, Videnskab, Forskning og Udvikling giver tilskud til 
forskningsprogrammer, som bl.a. omfatter udvikling og 
validering af alternative metoder i henhold til Rådets og 
Europa-Parlamentets afgørelse nr. lllO/94/EF af 26. april 1994 
om det fjerde rammeprogram for forskning og teknologisk 
udvikling, som indeholder følgende instruks: "Når som helst det 
er muligt, erstattes dyreforsøg med in vitro-forsøg eller andre 
metoder..." 
GD XII har støttet adskillige programmer om udvikling og 
validering af in vitro-tests, og andre er aktuelt under 
afvikling. Nogle af projekterne vil kunne være af interesse for 
kosmetiksektoren: 
BRIDGE - Endelig rapport (EUR 15777, offentliggjort i 1995) 
Udvikling af en in vitro-test til beregning af 
sensibiliserende forbindelser. 
BIOTECH (1992-1994) 
Nogle af projekterne omhandler in vitro-undersøgelser af 
tiltagende toksicitet. 
BIOTECH (1994-1998) 
Arbejdsprogrammet omfatter prænormativ forskning og 
udvikling af farmako-toksikologiske in vitro-tests som 
alternativ til dyreforsøg. 
IVTIP (In Vitro Testing Industrial Platform): forum oprettet 
med henblik på at forbedre kontakten mellem 
teknologiproducenter og brugere. Der afholdtes to møder i 1995, 
som omhandlede henholdsvis afviklingen af det fjerde 
rammeprogram og opnåede fremskridt hvad angår validering. 
For hvert enkelt forskningsområde har SCAAT oprettet specifikke 
arbejdsgrupper bestående af diverse eksperter med henblik på at 
gennemføre valideringsbestræbelserne. 
COLIPA organiserede et internationalt videnskabeligt symposium 
i Bruxelles den 29. og 30. november 1995 om alternativer til 
dyreforsøg, hvori deltog repræsentanter fra erhvervslivet, de 
12 
videnskabelige kredse, Kommissionen, Europa-Parlamentet og 
foreninger til dyrenes beskyttelse. 
Ved den første række møder, der omhandlede VALIDERING, 
understregedes beregningsmodellernes vigtige rolle, og der blev 
gjort status over de igangværende valideringsundersøgelser af 
fotoirritation og øjenirritation. Møderækken afsluttedes med en 
rundbordsdiskussion om perspektiverne for en lovgivningsmæssig 
tilnærmelse. 
den anden række møder omhandlede UDVIKLING og omfattede 
præsentationer af perkutan absorption, kutan kompatibilitet og 
kutan sensibilisering. 
Den tredje rækker møder drejede sig om EVALUERING AF 
SIKKERHEDEN, og her kom man ind på VUKs initiativer og på de 
britiske og tyske lovgivningsmyndigheders tiltag. Det blev 
understreget, hvor vigtigt det er at stille de videnskabelige 
data til rådighed, som kan støtte kosmetikindustriens interne 
undersøgelser og strategier med henblik på evaluering af de 
færdige produkters sikkerhed. 
Præsentationerne blev suppleret med en plakatudstilling, i 
forbindelse med denne udstilling blev der stillet en brochure 
til rådighed for deltagerne, hvor der var opstillet en 
skematisk oversigt over IFAWs strategi (International Fund for 
Animal Welfare = Den Internationale Fond for Dyrevelfærd). Da 
det fremgår helt tydeligt, at det ikke er muligt blot at 
erstatte dyreforsøg med in vitro-tests, fremlagde IFAW en 
fasestrategi, der hovedsagelig er baseret på 
erstatningsalternativer, der gør det muligt at anvende celler 
og væv fra mennesker; IFAW udelukker således enhver form for in 
vivo-dyreforsøg, idet de anbefaler, at man udfører in vivo-
prøver på frivillige personer. 
Symposiet understregede den vigtige rolle, som COLIPA 
(Europæisk Kosmetikindustri) spiller for udviklingen og 
valideringen af alternative metoder. De bestræbelser, som de 
store europæiske kosmetikfirmaer har udfoldet, er meget 
betydelige i betragtning af det store antal dyr der anvendes i 
kosmetik-forsøg, og den viden, man har opnået, er af væsentlig 
betydning også for andre industrigrene. 
Desuden bidrog symposiet til, at de forskellige aktører fik 
præcise videnskabelige oplysninger, ligesom det gav anledning 
til interessante meningsudvekslinger. 
Der blev lagt op til, at erhvervslivet og Kommissionen anlægger 
en fælles strategi for hurtigst muligt at erstatte dyreforsøg 
inden for områderne kutan kompatibilitet, fotoirritation og 
perkutan absorption. 
13 
2. USA 
USAs regering ønsker et internationalt samarbejde med henblik 
på anbefaling af en fremgangsmåde og fastlæggelse af 
kriterierne for vedtagelse af regler om nye alternative 
metoder, som tydeligt opstiller betingelserne for brug af disse 
metoder (biologiske reaktioner, relevans for de forskellige 
kategorier af stoffer, osv.). ICCVAM har afholdt en workshop om 
validering og juridisk godkendelse af alternative 
toksikologiske testmetoder, sponsoreret af National Institute 
of Environmental Health Sciences (NIEHS) og Det Nationale 
Toksikologiprogram (NTP) i december 1995 i Arlington, Virginia. 
Formålet med denne workshop var at drøfte udkastet til ICCVAMS 
rapport om anbefalinger vedrørende kriterier og 
valideringsprocesser samt juridisk godkendelse af nye og 
reviderede toksikologiske afprøvningsmetoder. 
Food and Drug Administration (FDA) er det statslige organ, der 
er ansvarligt for kosmetiksikkerhed. FDA har et interaktivt 
forhold til de offentlige og private instanser, der har med 
udvikling og validering af alternative tests at gøre, og FDA 
fokuserer på metoder, der fører til pålidelige videnskabelige 
data. 
FDA giver udtryk for bekymring med hensyn til udelukkelsen af 
dyreforsøg, når direktiv 93/35 træder i kraft. Visse kosmetiske 
midler, der er produceret i EU, kan risikere ikke at opfylde de 
sikkerhedskrav (sundhedsmæssige krav), som er fastsat af US 
FDCA (Food, Drug and Cosmetics Act = lov om madvarer, medicin 
og kosmetik). 
3. JAPAN 
Det henhører under det japanske ministerium for sundhed og 
velfærd at fastsætte retningslinjer for afprøvning og forsøg i 
Japan. Japanske forskergrupper beskæftiger sig især med 
validering af alternative tests, der kan træde i stedet for 
Draize-testen. Godkendelsen af disse tests afhænger af deres 
specifikke rolle i evalueringen af øjenirritation (screening 
eller erstatning: individuel test eller serietests). I henhold 
til JCLA vil det være svært til evalueringen af kosmetiske 
midlers sikkerhed at anbefale en test eller en testserie, hvis 
beregningsevne ikke svarer til in vivo-metodernes 
beregningsevne. 
4. OECD 
I oktober 1994 afholdtes det 5. møde i Gruppen af Nationale 
Koordinatorer af OECDs Program for Testretningslinjer, og det 
besluttedes da, at der skulle gøres en indsats med henblik på 
international harmonisering af de forskellige publicerede og 
14 
anerkendte koncepter vedrørende validering af alternative 
testmetoder. Med henblik på en international debat om dette 
spørgsmål fandt man det hensigtsmæssigt, at OECD gik ind og 
påtog sig rollen som forum for alle de involverede parter, for 
således at åbne mulighed for at opnå international konsensus om 
validerings- og godkendelseskriterier. De nationale 
koordinatorer understregede, at man i stedet for at udvikle 
endnu et koncept skulle anvende de eksisterende forslag som 
grundlag for en internationalt godkendt fremgangsmåde. I den 
forbindelse udtryktes der anerkendelse af det arbejde, der 
udføres på centre som CAAT (John Hopkins University Center for 
Alternatives to Animal Testing)i USA, ECVAM i EU, ERGATT og 
forskellige nationale centre og udvalg (f.eks. FRAME i UK, IRAG 
og ICCVAM i USA, NCA i Nederlandene, SIAT i Schweiz og ZEBET i 
Tyskland). 
De nationale koordinatorer var enige om, at en OECD workshop 
ville være den mest hensigtsmæssige fremgangsmåde, da alle 
parter med interesse for emnet således ville få mulighed for at 
drøfte det og søge at opnå konsensus. Endvidere blev det 
understreget, at det var vigtigt, at medlemsstaterne blandt 
deres repræsentanter havde ansvarlige for lovgivningsområdet. 
Sverige tilbød at være værtsland for workshoppen. 
En styringsgruppe nedsattes i januar 1995 med den opgave at 
rådgive OECDs Sekretariat om workshoppens struktur og 
emneområder og at bistå med udarbejdelsen af mødeprogrammet for 
workshoppen, der fastsattes til den 22.-24. januar 1996 i 
Solna, Sverige. ECVAM og ZEBET var repræsenteret i 
styringsgruppen. 
D. STATUS OVBR, HVOR LANGT MAN BR NÅET MED ARBEJDET 
METODER UNDER UDVIKLING OG VALIDERING 
Kutan øenjsibiliøering 
Sensibilisering er et område, der er genstand for en betydelig 
forskningsindsats, og som er yderst relevant for 
kosmetiksikkerhed. På det symposium, der afholdtes af COLIPA 
(den 29.-30. november 1995), blev der fremlagt en interessant 
fremgangsmåde til at evaluere kutan sensibilisering in vitro. 
En ECVAM workshop om kutan sensibilisering afholdtes i 1995; 
rapporten herfra vil blive offentliggjort i 1996. 
Forskellige kemiske forbindelsers struktur og 
sensibiliseringspotentiale har været genstand for omfattende 
undersøgelser, og edb-ekspertsystemer såsom DEREK (Deductive 
Estimation of Risk from Existing Knowledge = deduktiv 
risikovurdering ud fra allerede eksisterende viden) er under 
udvikling med henblik på at identificere de former for 
15 
strukturer, der giver anledning til ekstra årvågenhed, og som 
er forbundet med det kutane sensibiliseringspotentiale. En 
mulig beregningsmetode vil kunne baseres på måling af de 
molekylære signaler, der forårsages af sensibiliserende stoffer 
på cellekulturer. 
Særligt på dette område er det vigtigt at understrege, at 
beregning af sensibiliseringspotentialet hos mennesker 
forbliver et meget vanskeligt forehavende på grund af, at 
mennesker reagerer individuelt og forskelligt på 
påvirkningerne. 
Fotowutaganioitat - Validering (COLIPA) 
Siden 1990 har COLIPA fremlagt rapporter vedrørende UV-filtre, 
som indeholder data om fotomutagenicitet; disse data er opnået 
ved forskellige former for tests. 
COLIPA arrangerede en ringtest for at definere en passende 
protokol ved sammen med forskellige bakteriestammer at bruge 2 
stoffer, hvis fotomutagene potentiale er kendt, og som 
aktiveres af UVA-stråler. Resultaterne af denne ringtest har 
gjort det muligt at udfærdige anbefalinger for så vidt angår 
kriterierne for valg af bakteriestammer eller cellekulturer, 
solsimulator, teknikken til bestråling af prøverne, dosering af 
UV-stråler, dosering af de stoffer, der skal testes, og 
anvendelse af positive kontrolformer. Det er vanskeligt at 
planlægge en valideringsundersøgelse, når der ikke foreligger 
nogen in vivo-data, som man kan referere til. 
Perkutan absorption 
ECVAM, COLIPA og OECD har arbejdet tæt sammen med henblik på at 
fremme vedtagelsen af retningslinjer for testning af perkutan 
absorption in vitro. 
Fotoirritation/£ototokaiaitett validering - fu« II (BU/COLIPA) 
ECVAM og GD XI er repræsenteret i Direktionsudvalget for den 
undersøgelse, som ZEBET koordinerer, og som undersøger 
mulighederne for en supplerende valideringsundersøgelse, der 
skal kunne beregne den potentielle fotoirritation i UV-filtre, 
I den første fase (forhåndsvalidering) af undersøgelsen har 
analysen af resultater, der er opnået via tests af cellers 
levedygtighed, gjort det muligt at fastsætte en grænsefaktor, 
der adskiller fotoirritationsfremkaldende fra ikke-
fotoirritationsfremkaldende stoffer. Målsætningen for den anden 
fase (validering), som var planlagt som en blindprøve, var at 
finde ud af, om en almindeligt anvendt celle-toksicitetstest og 
16 
en test, der måler cellebeskadigelser (NRU-testen1 og den 
kombinerede RBC-test2 (fotohæmolyse (blodcelledrab) + 
hæmoglobin oxydering) er i stand til korrekt at beregne 
fotoirritationspotentialet for menneskers vedkommende, for så 
vidt angår 32 kemiske stoffer, som anvendes systemisk eller 
topisk. 
De foreløbige resultater af fase II, som afsluttedes i 1995, 
begrænser sig til NRU-testen, der blev brugt i alle 
laboratorier. RBC-protokollen blev kun brugt i 3 laboratorier. 
Der bliver foretaget supplerende statistiske evalueringer af en 
uvildig biostatistiker, og de vil foreligge i løbet af de 
første seks måneder af 1996. 
Øjenirritation - den endelige rapport om BU/RO-undereegeleen a£ alternativer 
til Draise-testen af øjenirritation 
Formålet med denne undersøgelse var at finde ud af, om ni 
alternative tests, enkeltvis eller kombineret, kunne erstatte 
Draize-testen for så vidt angår testmateriale, der fremkalder 
kraftig irritation, og med henblik på at evaluere kemiske 
stoffers irritationspotentiale, med eller uden forbindelse til 
den relevante kemiske kategori og inden for hele skalaen af 
målelige potentialer. 
Der er blevet analyseret 60 kemiske stoffer uafhængigt af 
hinanden i 37 laboratorier. Resultaterne herfra er blevet 
sammenlignet med MMAS-resultaterne (Modified Maximum Average 
Score) fra Draize-testen, ligesom de har været genstand for 
statistisk evaluering. 
Bortset fra beregningen af irritationspotentialet i stoffer, 
der påvirker overfladespændingen, var der ingen af de ni tests, 
der opfyldte de opstillede mål. 
I løbet af undersøgelsen blev der gjort mange værdifulde 
erfaringer, som der er taget hensyn til i planlægningen af 
COLIPA-undersøgelsen. På grundlag af disse erfaringer blev der 
endvidere afholdt en ECVAM workshop om praktiske aspekter i 
forbindelse med validering, og ECVAMs forhåndsvalideringssystem 
blev ligeledes udviklet på grundlag heraf. In vivo-dataenes 
variabilitet konstateredes at være en betydelig hindring for at 
fastslå relevansen og pålideligheden af in vivo-tests. 
1NRU: Neutral red uptake assay, bruger cellerne som mål og 
celletoksiciteten som biologisk resultat. 
2RBC: Red blood cell haemolysis test, evaluerer skader pa celle­
membranerne . 
17 
Øjenirritation - validering (COLIPA) 
Der er blevet foretaget validering af 23 kosmetiske bestanddele 
(stoffer der påvirker overfladespændingen, alkohol, 
konserveringsmidler), hvoraf de 20 også indgik i ovennævnte 
EU/HO-undersøgelse, samt af 32 kosmetiske formler [med en 
omfattende række fysisk-kemiske former]. Testmaterialet er 
blevet testet in vivo i overensstemmelse med OECDs 
retningslinjer (OECD405). 
Denne undersøgelses specifikke mål var at afgøre, om data fra 
10 in vitro-protokoller, der er almindeligt anvendt i kosmetik­
industrien (hvoraf de 5 også figurerer i EU/HO-undersøgelsen): 
stemmer tilfredsstillende overens med MMAS-resultaterne 
(modified maximum average score) 
stemmer tilfredsstillende overens med de individuelle 
betegnelser samt med den rekuperationstid, der er 
beskrevet i OECDs retningslinjer (OECD405) 
giver en korrekt beregning af øjenirritationspotentialet 
for kaninøjne på basis af alternative algoritmer. 
For første gang i en valideringsundersøgelse er der blevet 
opstillet beregningsmodeller inden undersøgelsens start. De 
definerer nøjagtigt de biologiske reaktioner, der er opnået i 
forbindelse med den enkelte in vitro-metode, samt hvordan den 
enkelte biologiske reaktion in vitro skal konverteres til en 
beregning af øjenirritationspotentiale. De beregningsmodeller, 
der er anvendt i denne undersøgelse, er baseret på historiske 
data, som man kan anvende med henblik på bestanddele og formler 
af interesse for kosmetikindustrien, og i særdeleshed med 
henblik på stoffer med et lavt til middelstort 
irritationspotentiale. 
Programmet har ikke gjort det muligt at nå frem til en 
fuldstændig validering, fordi det kun er et lille antal 
laboratorier, der har deltaget i programmets særlige 
prøvninger. Der er endnu ikke nogen af metoderne, der på 
forsvarlig vis kan erstatte Draize-øjenirritationstesten. 
Beregningsmodellernes pålidelighed evalueredes ved at finde 
frem til, om de fælles laboratorieundersøgelser var 
reproducerbare, og om de pågældende data befandt sig inden for 
de forud beregnede grænser, som var opstillet i de i forvejen 
definerede beregningsmodeller. 
RBC-testen viste en god reproducerbarhed i alle laboratorier; 
desuden opfylder den kravene til pålidelighed. 
18 
Der er tre af de testede protokoller, der i rimelig grad 
stemmer overens med de tilsvarende beregningsmodeller (FLT3, 
RBC, TEA4) , men supplerende undersøgelser er nødvendige for at 
få løst en række tekniske problemer, der er forbundet med 
beregningsmodellerne, inden man kan drage de endelige 
konklusioner om deres egenskaber. 
Dena« valideringsundersøgelse viser vigtigheden af "in vivo-
data af god kvalitet". 
Når der foreligger in vivo-data, er de velegnede til at 
evaluere risici. For at sammenligne in vivo- og in vitro-data, 
burde de to grupper data teoretisk set variere så lidt som 
muligt i forhold til hinanden, hvis man vil sikre en nøjagtig 
statistisk evaluering. Erfaringen har vist, at dette ikke altid 
er tilfældet. 
Ud fra resultaterne kan man se, at visse beregningsmodeller vil 
kunne forbedres og testes i forbindelse med en fremtidig 
undersøgelse. 
Kutan korrosions følsomhed: forhåndsevaluering (ECVAM) 
De fire tests af kutan korrosionsfølsomhed, der indgår i 
undersøgelsen, er genstand for evaluering og 
optimeringsbestræbelser (TER = transcutaneous electrical 
resistance, CORROSITEX, Skin 2) og EPISKIN) med henblik på at 
forberede en formel valideringsundersøgelse for 1996. 
Kutan kompatibilitet (COLIPA) 
Kutan kompatibilitet defineres som fravær af kutan irritation 
ved normal brug og ved den form for forkert brug, der med 
rimelighed kan forudses. 
Der er syv firmaer inden for COLIPAs medlemskreds, der under 
kontrollerede forhold evaluerer den kutane kompatibilitet i 
deres færdige produkter til menneskebrug, fordi 
irritationspotentialet i de fleste kosmetikprodukter er meget 
lavt. 
COLIPA har udviklet nogle retningslinjer for 
kompatibilitetsevalueringen af færdige kosmetikprodukter, der 
er fremstillet til menneskehud: 
FLT: fluoresceine leikage teet: maler skader på cellebarrierer. 
4TBA: Tieøue equivalent assay, maler den tid der kræves til at reducere 
en celles levedygtighed med 50% for så vidt angår menneskeceller i co-kultur. 
19 
der er taget hensyn til etiske krav: tests på mennesker 
skal udføres i overensstemmelse med Helsinki-erklæringen 
(1964, 1989) 
en forsigtig skridt-for-skridt testprocedure er en 
nødvendighed 
det præciseres, at det er nødvendigt at have forudgående 
kendskab til de testede produkters sammensætning og 
stabilitet, ligesom det er nødvendigt med en forudgående 
evaluering af toksicitetsdata for så vidt angår de 
bestanddele, der indgår i produkternes sammensætning. 
Man er i øjeblikket ved at udarbejde retningslinjer for 
kosmetikbestanddeles kutane kompatibilitet. 
Tests gennemført på frivillige forsøgpersoner (ECVAM) 
Tests gennemført på frivillige forsøgspersoner opregnes ofte 
sammen med andre erstatningsalternativer til dyreforsøg. De 
etiske, juridiske, sikkerhedsmæssige, logistiske og 
videnskabelige problemer, der er forbundet med sådanne tests er 
i øjeblikket genstand for forskningsundersøgelser forestået af 
ECVAM i samarbejde med Pavia Universitet og Nottingham 
Universitet tillige med en række kosmetikvirksomheder. 
B. STATISTIKKER OVER DYREFORSØG 
Indsamlingen af data over, hvor mange dyr der anvendes til 
forsøg og andre videnskabelige formål, i henhold til artikel 13 
og 26 i direktiv 86/609/EØF, er ikke fastsat til at skulle 
foregå årligt. 
Denne kendsgerning kan til dels forklare de vanskeligheder, der 
har været forbundet med årligt at indsamle specifikke data om 
kosmetikbestanddele og -produkter. 
Som det er anført i afsnittet om aktiviteterne i GD XXIV og GD 
XI, har Kommissionen gentagne gange opfordret medlemsstaterne 
til at indsamle de fornødne statistiske oplysninger. 
1) 8 medlemsstater har tilkendegivet, at der ikke var 
anvendt dyr til at teste færdige kosmetikprodukter på 
deres territorium (Italien, Grækenland, Belgien, Irland, 
Sverige, Finland, Luxembourg, Tyskland) 
2) 6 medlemsstater har tilkendegivet, at der ikke var 
anvendt dyr til at teste kosmetikbestanddele på deres 
territorium (Grækenland, Nederlandene, Irland, Sverige, 
Finiand, Luxembourg) 
20 
3) Kun 3 medlemsstater (Østrig, Frankrig, Det Forenede 
Kongerige) har sat tal på oplysningerne om de anvendte 
forsøgsdyr, idet det dog i nogle tilfælde anføres, at 
tallene ikke er fortolkelige, og at der hersker 
usikkerhed om overensstemmelsen med virkeligheden. Under 
disse omstændigheder kan nærværende rapport ikke 
præsentere sammenlignende skemaer med talmæssige 
oplysninger, da sådanne skemaer ville give et fejlagtigt 
billede af de faktiske forhold. 
4) Hvad angår tilkendegivelserne om, at der ikke har været 
anvendt dyreforsøg, må man se med et vist forbehold på 
den informative værdi heraf, da nogle medlemsstater, der 
ikke selv producerer, utvivlsomt anvender bestanddele, 
der er blevet testet i andre medlemsstater eller andre 
lande uden for EU, og visse bestanddele, der indgår i 
kosmetikprodukter, kan være blevet testet til andre 
formål. 
Kommissionen beklager dybt, at den ikke råder over mere præcise 
data i øjeblikket, men understreger, at det er op til 
medlemsstaterne at indsamle de relevante data. 
F. KONKLUSIONER 
De fremskridt, man har kunnet konstatere i 1995 med hensyn til 
udvikling af alternative testmetoder og validering heraf kan 
sammenfattes således: 
1. Rapporten om fase II af EU/COLIPAs internationale 
valideringsundersøgelse af in vitro-tests vedrørende 
fototoksicitet (fotoirritation) vil foreligge i 1996, men 
det er allerede nu klart, at valideringen af NRU-
cellekulturtesten har været en succes. Deltagerne i 
undersøgelsen forventer, at et forslag til acceptable 
OECD-retningslinjer kan udarbejdes inden for de næste to 
år, efter at den endelige rapport om undersøgelsen er 
blevet offentliggjort, og der er foretaget nogle mindre 
justeringer af protokollerne. 
2. De erfaringer, som den europæiske kosmetik-industri har 
høstet inden for det problematiske område kutan 
absorption in vitro, konkretiseres i form af et forslag 
til en OECD-retningslinje for in vitro-tests. ECVAM og 
COLIPA har et tæt samarbejde med OECD m.fl. med henblik 
på at fremme vedtagelsen af retningslinjer for in vitro-
tests i OECD-medlemsstaterne. 
3. Resultaterne af EU/HOs internationale 
valideringsundersøgelse om alternativer til Draize-testen 
21 
af øjenirritation var skuffende, for så vidt som ingen af 
testene opfyldte undersøgelsens målsætninger. Der blev 
imidlertid indhøstet mange værdifulde erfaringer, som vil 
bidrage til en markant forbedring af kvaliteten af 
fremtidige valideringsundersøgelser. 
4. Den første fase af COLIPA-undersøgelserne vedrørende 
validering af alternativer til Draize-testen af 
øjenirritation, der blev gennemført på grundlag af en 
mere begrænset skala af materialer end EU/HO-
undersøgelsen, frembragte mere lovende resultater og 
viste værdien af at inddrage beregningsmodeller i 
testprotokoller. 
5. Som et resultat af COLIPA-undersøgelsen er der opstillet 
nogle anbefalinger for så vidt angår de kriterier, der 
bør tages hensyn til i forbindelse med definitionen af 
prøveprotokoller vedrørende fotomutagenicitet in vitro. 
6. Som et resultat af et andet COLIPA-initiativ er der 
udarbejdet retningslinjer vedrørende kompatibilitetstest 
af kosmetiske produkter og disses bestanddele anvendt på 
menneskehud. 
7. Anvendelse af frivillige forsøgspersoner som et 
erstatningsalternativ bør gøres til genstand for nærmere 
undersøgelse, men det skal understreges, at sådanne tests 
kun bør udføres på grundlag af resultater af forudgående 
in vivo og/eller in vitro-tests for ikke at risikere 
alvorlige følgevirkninger. 
8. Validering har vist sig at være vanskeligere, mere 
tidskrævende og mere kostbar end forventet. Man 
diskuterer fortsat, hvad validering egentlig vil sige, og 
hvorledes relevansen og pålideligheden af alternative 
metoder bedst kan kontrolleres. ECVAM, der spiller en 
central rolle i denne debat, har bidraget med en stor 
indsats på en lang række områder. 
9. ECVAMs forhåndsvalideringssystem, som i øjeblikket er 
genstand for international evaluering, kan formodes at 
forbedre valideringstestenes effektivitet og at medføre 
besparelser, såvel hvad angår tid som penge. 
10. Der har fundet drøftelser sted både internt i Europa og 
med USA og Japan om harmonisering af kriterierne 
vedrørende validering og godkendelse af alternative 
testmetoder til erstatning af dyreforsøg. 
c O. PERSPEKTIVER 
22 
1. Fremkomsten af mere realistiske forventninger til 
valideringsprocessen og de positive resultater af 
internationale diskussioner om kriterier for validering 
og godkendelse af alternative erstatningsmetoder kan 
forventes at resultere i betydelige fremskridt. 
2. Efter gennemførelsen af endnu en undersøgelse af kemiske 
stoffar af sårlig interesse for VUK vil der højst 
sandsynligt blive udarbejdet et forslag til 
forskriftsmæssige retningslinjer for in vitro-testning af 
fototoksicitet, som vil blive forelagt de lovgivende 
myndigheder til godkendelse. 
3. Det forvantes, at nye retningslinjer for in vitro-tests 
af kutan absorption i nærmeste fremtid vil blive godkendt 
af EU-medlemsstaterne og OECD-landene. 
4. Hurtige fremskridt kan forventes, hvad angår udviklingen 
af standardiserede og adækvate in vitro-metoder til 
beregning af sensibiliseringspotentiale. 
5. Dat ex vigtigt at overveje narmere, hvad man forventer af 
øjenirritationstests (in vivo og in vitro)• Det er 
imidlertid muligt at gå mere fleksibelt til værks, hvis 
man f.eks. godkender an evaluering af nye produkters og 
deres bestanddeles toksicitet på grundlag af en 
sammanligning mad passende standardkontrolstoffer 
(benchmark). 
6. Der kan drages større nytte af det faktum, at færdige 
kosmetikprodukters ølentolerance og kutane tolerance kan 
evalueres in vitro pa den udtrykkelige betingelse, at man 
på forhånd kander bestanddelenes toksicitetsdata og 
fysisk-kemi ske egenskaber. Ydermere kan de færdige 
kosmetikprodukters kutane kompatibilitet evalueres inden 
for rammerne af strengt overvågede kliniske 
undersøgelBex• 
7. ECVAMs valideringsundersøgelse af tests af hudkorrosion 
kan forventes at give positive resultater, som i så fald 
f.eks. vil kunne anvendes som en del af de oplysninger, 
dar anses for absolut nødvendige, før tests på mennesker 
kan tillades. 
8. Der vil blive lagt større vægt på en integreret 
anvendelse af flere forskellige fremgangsmåder (f.eks. 
edb-baserede beregninger, in vitro-tests) og på 
hierarkisk opbyggede afprøvningsstrategier med henblik på 
at reducere, forbedre betingelserne for eller erstatte 
anvendelsen af lavende dyr til forsøg. 
Dan sjette ændring af direktiv 76/768/EØF frembyder en 
enestående lejlighed til at gøre mærkbare fremskridt med hensyn 
23 
til at erstatte dyreforsøg med alternative forsøgernetoder på 
kosmetikområdet. Sådanne fremskridt finder rent faktisk sted, 
men hvis denne positive udvikling skal fortsætte, er det 
nødvendigt at opretholde gode forbindelser og et effektivt 
samarbejde mellem alle involverede parter, dvs. Kommissionen og 
dens rådgivende udvalg, medlemsstaterne, kosmetikindustrien og 
de lovgivende myndigheder. 
24 

ISSN 0254-1459 
KOM(96) 365 endelig udg. 
DOKUMENTER 
DA 10 15 05 03 
Katalognummer : CB-CO-96-366-DA-C 
ISBN 92-78-07190-0 
Kontoret for De Europæiske Fællesskabers Officielle Publikationer 
L-2985 Luxembourg 
2^