++++

KOMMISSIONENS BESLUTNING

af 21 . december 1979

om bemyndigelse af Danmark og Forbundsrepublikken Tyskland til ved indbringelse paa deres omraade af avls - eller brugskvaeg at anvende saerlige sundhedsmaessige garantier med henblik paa bekaempelse af leukose

( Den danske og den tyske tekst er de eneste autentiske )

( 80/235/EOEF )

KOMMISSIONEN FOR DE EUROPAEISKE FAELLESSKABER HAR -

under henvisning til traktaten om oprettelse af Det europaeiske oekonomiske Faellesskab ,

under henvisning til Raadets direktiv 64/432/EOEF af 26 . juni 1964 om veterinaerpolitimaessige problemer ved handel inden for Faellesskabet med kvaeg og svin ( 1 ) , senest aendret ved direktiv 79/580/EOEF af 26 . juni 1979 ( 2 ) , saerlig artikel 8 , stk . 2 , og

ud fra foelgende betragtninger :

Ifoelge artikel 8 , stk . 2 , i Raadets direktiv 64/432/EOEF kan en medlemsstat bemyndiges til i henhold til den i artikel 12 fastsatte fremgangsmaade og paa de ved denne fremgangsmaade fastsatte betingelser ved handel inden for Faellesskabet at anvende sundhedsmaessige garantier , der hoejst svarer til de garantier , som denne medlemsstat kraever inden for rammerne af et nationalt program vedroerende forebyggelse af en smitsom sygdom hos kvaeg og svin , som ikke er omtalt i bilag E til naevnte direktiv ;

ved Kommissionens beslutning 77/331/EOEF af 22 . april 1977 ( 3 ) , senest aendret ved beslutning 79/80/EOEF af 22 . december 1978 ( 4 ) , er Danmark allerede ved denne fremgangsmaade blevet bemyndiget til at anvende saerlige sundhedsmaessige garantier med henblik paa forebyggelse af leukose ved indfoersel af avls - eller brugskvaeg ;

ved Kommissionens beslutning 73/30/EOEF af 23 . januar 1973 ( 5 ) , senest aendret ved beslutning 79/80/EOEF af 22 . december 1978 ( 4 ) , er Forbundsrepublikken Tyskland allerede ved denne fremgangsmaade blevet bemyndiget til at anvende saerlige sundhedsmaessige garantier med henblik paa forebyggelse af leukose ved indfoersel af avls - eller brugskvaeg ;

ved skrivelser af henholdsvis 20 . november og 5 . november 1979 har Danmark og Forbundsrepublikken Tyskland anmodet om tilladelse til at anvende saerlige sundhedsmaessige garantier ved indfoersel fra en medlemsstat af avls - eller brugskvaeg , der navnlig er beregnet til at indlemmes i besaetninger , som ikke mistaenkes for at have leukose ;

Danmark og Forbundsrepublikken Tyskland har forelagt nationale planer for fremskyndet udryddelse af leukose , som Kommissionen har godkendt ved beslutning 78/481/EOEF ( 6 ) og 79/48/EOEF ( 7 ) ; disse planer er for tiden under gennemfoerelse ;

de saerlige sundhedsmaessige garantier , som Danmark og Forbundsrepublikken Tyskland oensker at anvende ved handel inden for Faellesskabet med avls - eller brugskvaeg , svarer hoejst til de garantier , som disse medlemsstater anvender inden for rammerne af deres nationale programmer vedroerende forebyggelse af leukose ; anmodningeren kan derfor imoedekommes ;

Danmark og Forbundsrepublikken Tyskland har anmodet om , at bemyndigelserne traeder i kraft den 1 . januar 1980 ; bemyndigelserne boer gives for en begraenset periode for ikke at hindre en senere harmonisering ;

de i denne beslutning fastsatte foranstaltninger er i overensstemmelse med udtalelse fra Den staaende Veterinaerkomité -

VEDTAGET FOELGENDE BESLUTNING :

Artikel 1

Fra den 1 . januar 1980 og indtil den 31 . december 1980 bemyndiges Danmark og Forbundsrepublikken Tyskland til ved indbringelse paa deres omraade fra en anden medlemsstat af avls - eller brugskvaeg , der er beregnet til at indlemmes i besaetninger , som ikke mistaenkes for at have leukose , at anvende de i artikel 2 fastsatte sundhedsmaessige garantier .

Artikel 2

De i artikel 1 naevnte sundhedsmaessige garantier bestaar i fremlaeggelse af en attest , udfaerdiget i hvert fald paa bestemmelseslandets sprog og udstedt paa afladningsdagen af en kompetent embedsdyrlaege til godtgoerelse af :

1 . at intet i de for dyrlaegen officielt foreliggende oplysninger tyder paa , at der i de seneste tre aar har vaeret leukosetilfaelde i oprindelsesbesaetningen , og at besaetningsejeren skriftligt har erklaeret , dels at han ikke har konstateret symptomer paa leukose i besaetningen , og dels at det eller de dyr , der er bestemt til handel inden for Faellesskabet , enten er foedt eller opdraettet i besaetningen , eller har vaeret i besaetningen de seneste 12 maaneder ;

2 . at alle dyr i oprindelsesbesaetningen , der er over 12 maaneder gamle , i loebet af de seneste 12 maaneder har reageret negativt paa en serologisk proeve , der er gennemfoert i overensstemmelse med bilag A , eller har reageret negativt paa en haematologisk proeve , der er gennemfoert i overensstemmelse med bilag B .

Artikel 3

Denne beslutning er rettet til kongeriget Danmark og Forbundsrepublikken Tyskland .

Udfaerdiget i Bruxelles , den 21 . december 1979 .

Paa Kommissionens vegne

Finn GUNDELACH

Naestformand

( 1 ) EFT nr . 121 af 29 . 7 . 1964 , s . 1977/64 .

( 2 ) EFT nr . L 158 af 26 . 6 . 1979 , s . 17 .

( 3 ) EFT nr . L 116 af 7 . 5 . 1977 , s . 13 .

( 4 ) EFT nr . L 17 af 21 . 1 . 1979 , s . 22 .

( 5 ) EFT nr . L 77 af 26 . 3 . 1973 , s . 40 .

( 6 ) EFT nr . L 152 af 8 . 6 . 1978 , s . 23 .

( 7 ) EFT nr . L 13 af 19 . 1 . 1979 , s . 63 .

BILAG A

A . Agar-gel-immunodiffusionsproeven

1 . Til proeven anvendes et antigen , der indeholder glycoproteiner fra kvaegleukosevirus . Antigenet standardiseres efter et standardserum ( E.I . serum ) fra Statens veterinaere Serumlaboratorium , Koebenhavn .

2 . De nedenfor angivne officielle institutter er ansvarlige for , at standardantigenet til laboratoriebrug korrigeres efter det officielle EOEF-standardserum ( E.I . serum ) fra Statens veterinaere Serumlaboratorium , Koebenhavn .

a ) Tyskland : Bundesforschungsanstalt fuer Viruskrankheiten der Tiere , Tuebingen ,

b ) Danmark : Statens veterinaere Serumlaboratorium , Koebenhavn .

3 . Standardantigener til laboratoriebrug sendes mindst én gang om aaret til de under punkt 2 angivne referencelaboratorier for at blive proevet over for det officielle EOEF-standardserum . Ud over denne standardisering kan det anvendte antigen korrigeres som angivet i afsnit B .

4 . Reagenserne til proeven omfatter :

a ) antigen : antigenet skal indeholde specifikke glycoproteiner fra enzootisk kvaegleukosevirus , som er standardiseret efter det officielle EOEF-serum ;

b ) det serum , der skal proeves ;

c ) kendt positivit kontrolserum ;

d ) agar-gel ,

0,8 % agar ,

8,5 % NaCl ,

0,05 M TRIS-buffer , pH 7,2

15 ml af denne agar haeldes i en petriskaal med en diameter paa 85 mm , hvilket giver et 2,6 mm tykt agarlag .

5 . I agaren udskaeres syv fugtfri huller helt til skaalens bund ; hullerne skal danne et moenster med et hul i midten og de oevrige seks huller som en cirkel rundt om .

midterhullets diameter : 4 mm ,

periferihullernes diameter : 6 mm ,

afstand mellem midterhul og periferihuller : 3 mm .

6 . Midterhullet fyldes med standardantigenet . Periferihul 1 og 4 ( se tegningen ) fyldes med kendt positiv serum , og hul 2 , 3 , 5 og 6 fyldes med de sera , der skal proeves . Hullerne fyldes , indtil menisken forsvinder : JFR . EFT

7 . Dette giver foelgende reagensmaender :

antigen : 32 mikroliter ,

kontrolserum : 73 mikroliter ,

sera , der skal proeves : 73 mikroliter .

8 . Herefter henstaar det 72 timer ved stuetemperatur ( 20 til 27 * C ) i et lukket fugtighedskammer .

9 . Proeven kan aflaeses efter 24 og 48 timer , men aflaesning af det endelige resultat maa foerst ske efter 72 timer ;

a ) det serum , der skal proeves , er positivt , hvis det danner en specifik praecipitinlinje med BLV-antigenet og en helt identisk linje med kontrolserumet ;

b ) det serum , der skal proeves , er negativt , hvis det ikke danner en specifik linje med BLV-antigenet , og hvis det ikke afboejer kontrolserumets linje ;

c ) reaktionen anses for usikker , hvis den :

i ) afboejer kontrolserumets linje mod hullet med BLV-antigen uden at danne en synlig praecipitinlinje med antigenet , eller

ii ) hvis den hverken kan aflaeses som positiv eller negativ .

I tilfaelde af usikker reaktion kan proeven gentages med koncentreret serum .

B . Metode til standardisering af antigener

Oploesninger og materialer :

1 . 40 ml 1,6 % agarose i 0,05 M Tris/HCl buffer , pH 7,2 med 8,5 % NaCl .

2 . 15 ml kvaegleukoseserum , der kun indeholder antistoffer til glycoproteiner af kvaegleukosevirus ; fortynding 1 : 10 i 0,05 M Tris/HCl buffer , pH 7,2 med 8,5 % NaCl .

3 . 15 ml kvaegleukoseserum , der kun indeholder antistoffer til glycoproteiner af kvaegleukosevirus ; fortynding 1 : 5 i 0,05 M Tris/HCl buffer , pH 7,2 med 8,5 % NaCl .

4 . Fire petriskaale af plast med en diameter paa 85 mm .

5 . En dorn med en diameter paa 4 til 6 mm .

6 . Referenceantigen .

7 . Det antigen , der skal standardiseres .

8 . Vandbad ( 56 * C ) .

Fremgangsmaade :

Agarosen ( 1,6 % ) oploeses i Tris/HCl buffer ved forsigtig opvarmning til 100 * C . Den hensaettes derefter i vandbad paa 56 * C i ca . en time . Ogsaa kvaegleukosesrumfortyndingerne hensaettes i vandbad paa 56 * C .

Nu blandes 15 ml af den 56 grader varme agaroseoploesning med de 15 ml kvaegleukoseserum ( 1 : 10 ) og omrystes hurtigt ; derefter haeldes det i to petriskaale , 15 ml i hver . Det samme goeres med kvaegleukoseserumet i fortyndingen 1 : 5 .

Naar agarosen er stoerknet , laves der huller paa foelgende maade :

Petriskaal nr . 1 : JFR . EFT

Petriskaal nr . 2 : JFR . EFT

Petriskaal nr . 3 : JFR . EFT

Petriskaal nr . 4 : JFR . EFT

Tilsaetning af antigen :

I . Petriskaal 1 og 3

hul A = ufortyndet referenceantigen ,

hul B = referenceantigen , fortynding 1 : 2 ,

hul C og E = referenceantigen ,

hul D = ufortyndet antigen , der skal proeves .

II . Petriskaal 2 og 4

hul A = ufortyndet antigen , der skal proeves ,

hul B = antigen , der skal proeves , fortynding 1 : 2 ,

hul C = antigen , der skal proeves , fortynding 1 : 4 ,

hul D = antigen , der skal proeves , fortydning 1 : 8 .

Bemaerkninger :

1 . For at faa optimal udfaeldning boer forsoeget foretages med to serumfortyndinger ( 1 : 5 og 1 : 10 ) .

2 . Hvis udfaeldningsdiameteren er for lille med begge fortyndinger , fortyndes serumet yderligere .

3 . Hvis udfaeldningsdiameteren med begge fortyndinger er for stor og udviskes , vaelges en mindre fortyndet serum .

4 . Agarosens endelige koncentration skal vaere 0,8 % ; serumkoncentrationernes henholdsvis 5 % og 10 % .

5 . De maalte diametre indsaettes i foelgende koordinatsystem . Den fortynding af det antigen , der skal proeves , som har samme diameter som referenceantigenet , er den fortynding , der skal anvendes : JFR . EFT

BILAG B

Bedoemmelsen af resultaterne af den i artikel 2 , punkt 2 , naevnte blodproeve sker efter foelgende regler :

a ) det absolute antal leucocyter og procentdelen af lymfocyter laegges til grund ; antallet af lymfocyter i alt pr . mm3 er afgoerende og beregnes efter foelgende formel :

antal i alt af leukocyter/mm3 gange procentdel lymfocyter/100

b ) antallet af lymfocyter skal anses for at vaere unormalt stort ved foelgende resultater :

for kvaeg :

- over to , men ikke over tre aar gammelt : mere end 10 500 lymfocyter/mm3 ,

- over tre , men ikke over fire aar gammelt : mere end 9 500 lymfocyter/mm3 ,

- over fire , men ikke over fem aar gammelt : mere end 8 500 lymfocyter/mm3 ,

- over fem , men ikke over seks aar gammelt : mere end 8 000 lymfocyter/mm3 ,

- over seks aar gammelt : mere end 7 500 lymfocyter/mm3 ;

c ) saafremt resultatet af den i artikel 2 , punkt 2 , naevnte blodproeve viser et relativt hoejt antal lymfocyter , dvs . et antal , der er mindre end 2 000 under de under litra b ) naevnte tal , skal samme proeve straks underkastes en ny undersoegelse , og resultatet heraf skal laegges til grund for den endelige beregning .