KOMMISSIONENS FORORDNING (EOEF) Nr. 4154/87 af 22. december 1987 om fastlaeggelse af de analysemetoder og andre bestemmelser af teknisk art, der skal anvendes i forbindelse med Raadets forordning (EOEF) nr. 3033/80 om fastsaettelse af en ordning for handelen med visse varer fremstillet af landbrugsprodukter

KOMMISSIONEN FOR DE EUROPAEISKE FAELLESSKABER HAR - under henvisning til Traktaten om Oprettelse af Det Europaeiske OEkonomiske Faellesskab, under henvisning til Raadets forordning (EOEF) nr. 2658/87 af 23. juli 1987 om told- og statistiknomenklaturen og Den Faelles Toldtarif (1), aendret ved forordning (EOEF) nr. 3985/87 (2), saerlig artikel 9, og ud fra foelgende betragtninger: Ved Kommissionens forordning (EOEF) nr. 1061/69 (3), senest aendret ved forordning (EOEF) nr. 1822/86 (4), fastlaegges hvilke analysemetoder, der skal anvendes i forbindelse med Raadets forordning (EOEF) nr. 1059/69 (5); forordning (EOEF) nr. 1059/69 er ophaevet og erstattet med Raadets forordning (EOEF) nr. 3033/80 (6), senest aendret ved forordning (EOEF) nr. 3743/87 (7); i henhold til gennemfoerelsesbestemmelserne for forordning (EOEF) nr. 3033/80, nemlig om import, der fastsat i Raadets forordning (EOEF) nr. 3034/80 af 11. november 1980 om fastsaettelse af de maengder basisprodukter, der anses for medgaaet til fremstilling af varer, der henhoerer under forordning (EOEF) nr. 3033/80, og om aendring af forordning (EOEF) nr. 950/68 om Den Faelles Toldtarif (8), senest aendret ved forordning (EOEF) nr. 4091/87 (9), fastlaegges maengden af de basisprodukter, der kan anses som medgaaet til varefremstillingen svarende til forordning (EOEF) nr. 3033/80; for at tage den videnskabelige og tekniske udvikling af analysemetoder i betragtning, og for at sikre en fortsat ensartet behandling af importerede varer henhoerende under forordning (EOEF) nr. 3033/80, er der grund til at ophaeve og erstatte forordning (EOEF) nr. 1061/69; de i denne forordning fastsatte foranstaltninger er i overensstemmelse med udtalelse fra Nomenklaturudvalget - UDSTEDT FOELGENDE FORDORDNING:

Artikel 1

I denne forordning fastlaegges de analysemetoder, der skal anvendes i forbindelse med forordning (EOEF) nr. 3033/80 (for saa vidt angaar indfoersel) og (EOEF) nr. 3034/80 eller, hvis en analysemetode mangler, arten af de analyseoperationer, der skal udfoeres, eller princippet for en metode, der skal anvendes.

Artikel 2

I overensstemmelse med definitionerne i bilag III til forordning (EOEF) nr. 3034/80 for indholdet af stivelse/glucose, saccharose/invertsukker/isoglucose og ved anvendelse af bilag II og III til samme forordning benyttes foelgende formler, procedurer og metoder: 1. Indhold af stivelse/glucose(udtrykt som 100 % vandfri stivelse i varer, som de forefindes)a) (Z F) × 0,9,naar glucoseindholdet ikke er mindre end fructoseindholdet, ellerb)(Z G) × 0,9,naar glucoseindholdet er mindre end fructoseindholdethvor:Z = glucoseindhold bestemt efter metoden beskrevet i bilag I F=fructoseindhold bestemt ved HPLC (hoejtryksvaeskekromatografi) G=glucoseindhold bestemt ved HPLC.I tilfaelde litra a) gaelder det, at saafremt der er paavist tilstedevaerelse af lactosehydrolysat og/eller maengder af lactose og galactose, traekkes et glucoseindhold svarende til galactoseindholdet (bestemt ved HPLC), fra glucoseindholdet (Z), foer der foretages nogen anden beregning. 2.Indhold af saccharose/invertsukker/isoglucose(udtrykt som saccharose i varer, som de forefindes)a)S + (2F) × 0,95,naar glucoseindholdet ikke er mindre end fructoseindholdetb)S + (G + F) × 0,95,naar glucoseindholdet er mindre end fructoseindholdethvor:S=saccharoseindhold bestemt ved HPLC F=fructoseindhold bestemt ved HPLC G=glucoseindhold bestemt ved HPLC.Saafremt der er paavist tilstedevaerelse af lactosehydrolysat og/eller maengder af lactose og galactose, traekkes et glucoseindhold svarende til galactoseindholdet (bestemt ved HPLC), fra glucoseindholdet (G), foer der foretages nogen anden beregning. 3. Indhold af maelkefedta) Med forbehold af bestemmelserne under litra b) bestemmes indholdet af maelkefedt i vaegtprocent ved ekstraktion med petroleumether efter hydrolyse med saltsyre.b)Saafremt der i varen ogsaa paavises andre fedtstoffer end maelkefedt, anvendes foelgende procedure: - det totale fedtindhold i vaegtprocent i varen bestemmes som beskrevet under litra a) -indhold af smoersyre i vaegtprocent i det totale fedtindhold bestemmes ved metoden IUPAC nr. 2310 (reference: Pure and Applied Chemistry nr. 58, nr. 10, s. 1419-1428, fra 1986) -indholdet af maelkefedt i vaegtprocent i varen beregnes ved at gange maengden af smoersyre i det totale fedtindhold med faktoren 27, gange det fremkomne resultat med det totale fedtindhold i vaegtprocent og dividere dette resultat med 100. 4.Indhold af maelkeproteina)Med forbehold af bestemmelserne under litra b) beregnes indholdet af maelkeproteiner i varen ved at gange kvaelstofindholdet (bestemt ved Kjeldahl-metoden) med faktoren 6,38.b)Saafremt der i varen ogsaa konstateres bestanddele indeholdende andre proteiner end maelkeproteiner: -bestemmes det samlede kvaelstofindhold ved Kjeldahl-metoden -beregnes indholdet af maelkeproteiner som beskrevet under litra a), idet der fra det samlede kvaelstofindhold traekkes kvaelstofindholdet svarende til ikke-maelkeproteinerne, foer den ganges med faktoren 6,38.

Artikel 3

I forbindelse med bilag I til forordning (EOEF) nr. 3034/80 anvendes foelgende metoder og/eller procedurer: 1. Ved tarifering af varer henhoerende under KN-kode 0403 10 51 til 0403 10 59, 0403 10 91 til 0403 10 99, 0403 90 71 til 0403 90 79 og 0403 90 91 til 0403 90 99 bestemmes maelkefedtindholdet ifoelge den i artikel 2, nr. 3, beskrevne metode.2.Ved tarifering af varer henhoerende under KN-kode 1704 10 11 til 1704 10 99 og 1905 20 10 til 1905 20 90 bestemmes saccharoseindholdet, herunder invertsukker beregnet som saccharose, ifoelge en HPLC-metode. Som invertsukker beregnet som saccharose forstaas den aritmetiske sum af fructose og glucose ganget med 0,95.3.Ved tarifering af varer henhoerende under KN-kode 1806 10 10 til 1806 10 90 bestemmes indholdet af saccharose/invertsukker/isoglucose ifoelge de i artikel 2, nr. 2, anfoerte formler, metoder og procedurer.4.Ved tarifering af varer henhoerende under KN-kode 3505 20 10 til 3505 20 90 bestemmes indholdet af stivelse, dekstrin eller anden modificeret stivelse ifoelge den i bilag II beskrevne metode.5.Ved tarifering af varer henhoerende under KN-kode 3809 10 10 til 3809 10 90 bestemmes indholdet af stivelsesprodukter ifoelge den i bilag II beskrevne metode.6.Ved tarifering af varer henhoerende under KN-kode 1901 90 11 og 1901 90 19 foretages afgraensningen mellem de to koder paa grundlag af toerstofindholdet, bestemt ved toerring ved en temperatur paa 103° C ± 2° C indtil konstant vaegt.7.Ved tarifering af varer henhoerende under KN-kode 1902 19 10 og 1902 19 90 skal indholdet af mel af bloed hvede i pastaprodukter bestemmes efter den i bilag III anfoerte metode. 8.Indholdet af mannitol og D-glucitol (sorbitol) af varer henhoerende under KN-kode 2905 44 11 til 2905 44 99 og 3823 60 11 til 3823 60 99 bestemmes efter en metode baseret paa hoejtryksvaeskekromatografi (HPLC).

Artikel 4

1. Der skal udarbejdes en analyserapport. 2. Analyserapporten skal indeholde foelgende oplysninger:- enhver information, der er noedvendig for identifikation af proeven-den anvendte metode og noejagtig henvisning til den retsakt, hvori den er anfoert, eller i givet fald henvisning til en detaljeret metode, der specificerer de analyseoperationer, der skal udfoeres, eller princippet for en metode, der skal anvendes, som angivet i denne forordning-enhver faktor, som kan taenkes at have haft indvirkning paa resultaterne-analyseresultaterne under hensyntagen til den maade, de er udtrykt paa i den anvendte metode og de udtryk, der dikteres af behovet hos de told- eller administrative myndigheder, som har anmodet om analysen.

Artikel 5

Forordning (EOEF) nr. 1061/69 ophaeves.

Artikel 6

Denne forordning traeder i kraft den 1. januar 1988.

Denne forordning er bindende i alle enkeltheder og gaelder umiddelbart i hver medlemsstat. Udfaerdiget i Bruxelles, den 22. december 1987. Paa Kommissionens vegne COCKFIELD Naestformand

(1) EFT nr. L 256 af 7. 9. 1987, s. 1.

(2) EFT nr. L 376 af 31. 12. 1987, s. 1.

(3) EFT nr. L 141 af 12. 6. 1969, s. 24.

(4) EFT nr. L 158 af 13. 6. 1986, s. 1.

(5) EFT nr. L 141 af 12. 6. 1969, s. 1.

(6) EFT nr. L 323 af 29. 11. 1980, s. 1.

(7) EFT nr. L 352 af 15. 12. 1987, s. 29.

(8) EFT nr. L 323 af 29. 11. 1980, s. 7.

(9) EFT nr. L 382 af 31. 12. 1987, s. 27..

BILAG I

BESTEMMELSE AF STIVELSESINDHOLDET OG NEDBRYDNINGSPRODUKTER, HERI INKLUDERET GLUCOSE

1. Formaal og anvendelsea) Metoden tillader bestemmelse af stivelsesindholdet og nedbrydningsprodukter, heraf inkluderet glucose: »Stivelse«.b)»Stivelsesindholdet« naevnt under 1 a) er defineret som vaerdien E og udregnes som beskrevet under 6 i denne metode. 2.PrincipProeven oplukkes ved hjaelp af natriumhydroxid, og »stivelsen« spaltes i glucoseenheder med amyloglucosidase. Glucosen bestemmes enzymatisk. 3.Reagenser(Brug dobbelt-destilleret vand).3.1.0,5 N (0,5 mol/l) natriumhydroxidoploesning.3.2.96 % (min.) iseddikesyre.3.3.Amyloglucosidaseoploesning: Umiddelbart foer brug oploeses ca. 10 mg amyloglucosidase (EC 3.2.1.3.) (6 U pr. mg) i 1 ml vand (1).3.4.Triethanolaminpufferoploesning: 14,0 g triethanolaminchlorhydrat (tris(2-hydroxyethyl)ammoniumchlorid) og 0,25 g magnesiumsulfat (MgSO47H2O) oploeses i 80 ml vand. Der tilsaettes ca. 5 ml 5 Na (5 mol/l) natriumhydroxidoploesning, og indstilles til pH 7,6 ved hjaelp af 1 N (1 mol/l) natriumhydroxidoploesning. Der fyldes op til 100 ml med (dobbelt-destilleret) vand. Denne pufferoploesning holder sig i mindst fire uger ved 4° C.3.5.NADP-(Nicotinamid-adenin-dinucleotidphosphat, dinatriumsalt) oploesning: 60 mg NADP oploeses i 6 ml vand. Denne oploesning er holdbar i mindst fire uger ved 4° C.3.6.ATP-(Adenosin-5 -triphosphat, dinatriumsalt) oploesning: 300 mg ATP, 3H2O og 300 mg natriumhydrogencarbonat (NaHCO3), oploeses i 6 ml vand. Denne oploesning er holdbar i mindst fire uger ved 4° C.3.7.HK/G6P-DH-(Hexokinase (EC 2.7.1.1) og glucose-6-phosphatdehydrogenase (EC 1.1.1.49)): 280 U HK og 140 U G6P-DH suspenderes i, 1 ml 3,2 M ammoniumsulfatoploesning. Denne suspension er holdbar i mindst et aar ved 4° C. 4.Apparatur4.1.Magnetomroerertermostat (60° C).4.2.Magnetstave.4.3.UV-spectrofotometer med 1 cm kuvetter.4.4.Pipetter til enzymatisk analyse. 5.Metode5.1.Proeven oplukkes ved hjaelp af natriumhydroxid, og »stivelsen« underkastes enzymatisk hydrolyse:5.1.1.De afvejede proevemaengder vaelges efter det formodede indhold af »stivelse« som anfoert i nedenstaaende tabel (»stivelsesindholdet« i hver afvejet maengde maa ikke overstige 0,4 g): > TABELPOSITION>

5.2.6.Absorbsionsforskellen (E2 - E1) udregnes for blindproeven og maaleproeven. Blindproevens absorbsionsforskel (AEAAblind) fratraekkes maaleproeven (AEAAproeve): AEAA340 = AEAAproeve - AEAAblind Denne forskel giver glucoseindholdet Gl i proeveoploesningen, i g/l: Glucoseindhold i proeveoploesningen g/l >TABELPOSITION>

(3,22 = volume maaleoploesning (ml); 1: celletykkelse (cm); 0,1: volume moensteroploesning (ml)) Molvaegten af glucose er 180,16 (g/mol). 5.2.7.Hvis det af en eller anden aarsag ikke er muligt at maale ved 340 nm, kan man maale ved 365 nm eller 334 nm, blot man erstatter tallet 6,3 i formlen for Gl med tallet 3,5 henholdsvis 6.18. 6. Beregning af »stivelsesindholdet« Z>TABELPOSITION>

hvor Gl = glucose i g/l (5.2.6) f= fortyndingsfaktor (5.1.1) p= afvejet maengde proeve i g 0,9= omregningsfaktor fra glucose til stivelse. Bemaerkninger1. Saafremt det konstateres, at oploesningen ikke kan filtreres som i 5.1.7., maa kemikeren tage de noedvendige forholdsregler. 2.Saafremt der konstateres en haemning af enzymerne, tilraades det at anvende metoden »doserede tilsaettelser« med anvendelse af ren stivelse. (1) Hvor U er den internationale enhed for enzym-aktivitet.

BILAG II

BESTEMMELSE AF INDHOLDET AF STIVELSE, DEXTRIN ELLER ANDEN MODIFICERET STIVELSE INDEHOLDT I VARERNE HENHOERENDE UNDER KN-KODE 3505 20 10 TIL 3505 20 90 SAMT AF STIVELSE OG STIVELSESPRODUKTER INDEHOLDT I VARERNE HENHOERENDE UNDER KN-KODE 3809 10 10 TIL 3809 10 90

I. Metodens princip Ved syrehydrolyse soenderdeles stivelsen til reducerende sukker, der bestemmes volumetrisk ved hjaelp af Fehling-vaeske. II.Apparater og reagenser 1. Kolbe med et rumindhold paa ca. 250 ml 2. Maalekolbe med et rumindhold paa 200 ml 3. Burette med et rumindhold paa 25 ml 4. Saltsyre, vaegtfylde 1,19 5. Kaliumhydroxid i vandig oploesning 6. Aktivt kul 7. Fehling-vaeske I og Fehling-vaeske II 8. Metylenblaat i 1 pct. vandig oploesning. III.Forsoegets gennemfoerelse I en kolbe rummende ca. 250 ml indvejes saa meget maengde proeve, at det svarer til ca. 1 g stivelse, og der tilfoejes 100 ml destilleret vand og 2 ml saltsyre. Blandingen koges i tre timer under tilbagesvaling.Efter afkoeling haeldes kolbens indhold kvantitativt paa en maalekolbe rummende 200 ml, og der tilfoejes saa meget kaliumhydroxid, at oploesningen kun reagerer svagt surt. Derefter fyldes der op med destilleret vand indtil 200 ml, og vaesken filtreres gennem aktivt kul for at blive affarvet.Med denne oploesning fyldes derefter en burette, og 10 ml Fehling-vaeske reduceres paa foelgende maade:I en staalkolbe rummende ca. 250 ml haeldes 10 ml Fehling-vaeske (5 ml vaeske I og 5 ml vaeske II). Kolben rystes, indtil der fremkommer en klar oploesning, og derpaa tilfoejes 40 ml destilleret vand og lidt kvarts eller pimpsten.Kolben anbringes paa en kvadratisk plade af asbest, der i midten har en cirkelformet aabning med diameter ca. 6 cm. Asbestpladen laegges paa et traadnet. Kolben opvarmes nu saaledes, at vaesken begynder at koge i loebet af ca. 2 minutter.Den kogende vaeske tilsaettes derefter saa meget af sukkeroploesningen fra buretten, at Fehling-vaeskens blaa farve naesten ikke er synlig. Der tilsaettes nu 2-3 draaber metylenblaatoploesning som indikator, og titreringen fortsaettes ved yderligere draabevis tilsaetning af sukkeroploesningen, indtil indikatorens blaa farve forsvinder.Med henblik paa stoerre noejagtighed gentages titreringen under samme betingelser, idet dog naesten hele den maengde sukkeroploesning, der kraeves til reducering af Fehling-vaesken, tilsaettes paa en gang. Ved denne titrering skal Fehling-vaesken vaere fuldstaendig reduceret i loebet af 3 minutter.Fortsaet kogningen i noejagtig to minutter. Titreringen fortsaettes ved yderligere draabevis tilsaetning i det tredje minut indtil indikatorens blaa farve forsvinder.Proevens indhold af stivelse i vaegtprocent beregnes efter foelgende formel: >TABELPOSITION>

Heri betyder:T: et kvantum vandfri dextrose i g, der svarer til 10 ml Fehling-vaeske, 10 ml Fehling-vaeske (5 ml vaeske I og 5 ml vaeske II) svarer til 0,04945 g vandfri dextrose, naar vaeske I indeholder 17,636 g kobber pr. liter n:den ved titreringen forbrugte maengde sukkeroploesning i ml p:den indvejede maengde proeve 0,95:faktor til omregning af vandfri dextrose til stivelse. Sukker, der oprindelig er til stede i proeven, fratraekkes - efter omregning til den aekvivalente stivelsesmaengde - i den efter ovenstaaende formel udfundne procentsats. IV.Fremstilling af Fehling-vaeske Vaeske I: I en maalekolbe oploeses 69,278 g krystalliseret, analyserent, jernfrit kobbersulfat (CuSO4 7 5 H2O) i destilleret vand til 1 liter. Oploesningens noejagtige indhold af kobber kontrolleres ved en kvantitativ bestemmelse af dette.Vaeske II:I en maalekolbe oploeses 100 g natriumhydroxid og 346 g kaliumnatriumtartrat (Seignettesalt) i destilleret vand til 1 liter.De to vaesker I og II blandes i lige dele umiddelbart foer anvendelsen. 10 ml Fehling-vaeske (5 ml vaeske I og 5 ml vaeske II) reduceres fuldstaendigt af 0,04945 g vandfri dextrose, naar fremgangsmaaden er som beskrevet under III.