*****

KOMMISSIONENS DIREKTIV

af 7. juni 1984

om aendring af bilagene til Raadets direktiv 77/96/EOEF om trikinundersoegelse i forbindelse med indfoersel af fersk koed af tamsvin fra tredjelande

(84/319/EOEF)

KOMMISSIONEN FOR DE EUROPAEISKE

FAELLESSKABER HAR -

under henvisning til traktaten om oprettelse af Det europaeiske oekonomiske Faellesskab,

under henvisning til Raadets direktiv 77/96/EOEF af 21. december 1976 om trikinundersoegelse i forbindelse med indfoersel af fersk koed af tamsvin fra tredjelande (1), senest aendret ved direktiv 83/91/EOEF (2), saerlig artikel 8, og

ud fra foelgende betragtninger:

Nyligt gennemfoerte undersoegelser har gjort det muligt at tage visse metoder i brug til undersoegelse af svinekoed for trikiner; disse metoder giver tilsvarende sundhedsmaessige garanti som de hidtil anvendte metoder; bilag I til direktiv 77/96/EOEF boer foelgelig suppleres;

for at lette gennemfoerelsen af trikinundersoegelsen boer det overlades til tredjelandene og medlemsstaterne selv at vaelge, hvilken af de fastlagte metoder, de vil anvende;

der boer ske visse tekniske tilpasninger af de trikinundersoegelsesmetoder, der anvendes i oejeblikket, og af de betingelser, som skal opfyldes af laboratorier til paavisning af trikiner;

de i dette direktiv fastsatte foranstaltninger er i overensstemmelse med udtalelse fra Den staaende Veterinaerkomité -

UDSTEDT FOELGENDE DIREKTIV:

Artikel 1

Bilagene til direktiv 77/96/EOEF aendres som anfoert i bilaget.

Artikel 2

Medlemsstaterne saetter de noedvendige administrativt eller ved lov fastsatte bestemmelser i kraft for senest den 1. januar 1985 at efterkomme dette direktiv. De underretter straks Kommissionen herom.

Artikel 3

Dette direktiv er rettet til medlemsstaterne.

Udfaerdiget i Bruxelles, den 7. juni 1984.

Paa Kommissionens vegne

Poul DALSAGER

Medlem af Kommissionen

(1) EFT nr. L 26 af 31. 1. 1977, s. 67.

(2) EFT nr. L 59 af 5. 3. 1983, s. 34.

BILAG

A. Bilag I aendres saaledes:

1. I punkt II a):

- affattes tiende led saaledes:

»stereomikroskop (15-40 gange forstoerrelse) med tilstraekkeligt lys«.

- affattes sidste led saaledes:

»- fordoejelsesvaeske bestaaende af:

10 g pepsin (80 pr. g FIP: Fédération Internationale de Pharmacie), 5 ml HCL (mindst 37 %), der blandes op med ledningsvand, saaledes at der er en liter i alt.«

2. Punkt III affattes saaledes:

»III. FORDOEJELSESMETODEN TIL UNDERSOEGELSE AF SAMLEPROEVER

a) Apparatur og reagenser

- kniv og pincet til indsamling af proever,

- koedkvaern med huller med diameter mellem 2 og 3 mm,

- en 3-liter erlenmeyerkolbe med gummi- eller vatprop,

- en konisk skilletragt, rumindhold 2 000 ml,

- et almindeligt A-stativ, ca. 28 cm langt og med 80 cm stang,

- en ring, ca. 10-11 cm i diameter, der kan monteres paa stativet,

- en klemme med flad skruestik (23 × 40 mm) som kan saettes paa stativet ved hjaelp af en dobbelt spaendering,

- en si (med en maskevidde paa 177 micron) med udvendig diameter paa 11 cm, med traadnet af messing eller rustfrit staal,

- en tragt med indvendig diameter paa ikke under 12 cm,

- 100 ml maaleglas,

- et stereomikroskop (15-40 × forstoerrelse) med tilstraekkeligt lys, eller et trikinoskop med horisontalt bord til kompressoriet med tilstraekkeligt lys,

- hvis der benyttes trikinoskop: et larvetaellebassin, der fremstilles af 3 mm tykke acrylplader:

i) bundstykket skal vaere 180 × 40 mm og skal vaere inddelt i felter;

ii) sidestykkerne skal vaere 230 × 20 mm;

iii) endestykkerne skal vaere 40 × 20 mm; bundstykke og endestykker anbringes mellem sidestykkerne, saa der dannes en skaal med to smaa haandtag i begge ender; bundstykkets overside skal ligge 7-9 mm over den nederste kant af den af side- og endestykker dannede ramme; delene samles ved hjaelp af en lim der er egnet til materialet;

- et antal petriskaale med en diameter paa 9 cm (hvis der anvendes stereomikroskop), der paa undersiden er forsynet med 10 × 10 mm store undersoegelsesfelter indridset med et spidst instrument,

- et antal 10 liter spande, der kan anvendes til dekontaminering ved formolbehandling af apparaturet og den resterende fordoejelsesvaeske i tilfaelde af positiv reaktion,

- koncentreret (37 %) saltsyre,

- pepsin, styrke: 1: 10 000 NF (U.S. National Formulary)

svarende til 1: 12 500 BP (British Pharmacopoea)

svarende til 2 000 FIP (Fédération Internationale de Pharmacie),

- bakker med 50 afmaerkede felter, der hver kan rumme 2 g koed,

- en vaegt der kan veje med en noejagtighed paa 0,1 g. b) Udtagning af proever

1. Ved hele dyrekroppe udtages der en proeve paa ca. 2 g af en af diafragmapillerne ved overgangen til den senede del. Hvis diafragmapillerne mangler, udtages der en proeve paa mindst 2 g af diafragmas ribbens- eller brystbensafsnit eller af tunge-, kaebe- eller bugmuskulaturen.

2. Ved koedstykker udtages der en fedtfattig proeve paa ca. 2 g af skeletmuskulaturen saa taet som muligt ved ben eller sener.

c) Metode

1. i) Komplette samleproever (bestaaende af 100 enkeltproever)

Der udtages ca. 1 g af hver af de 100 proever. Samleproeven males i koedkvaernen.

Det malede koed laegges i 3-Liter erlenmeyerkolben sammen med 7 g pepsin, ca. 2 liter ledningsvand, ca. 40-41°C og 25 ml koncentreret saltsyre. Blandingen rystes, saa pepsinen oploeses.

Oploesningens pH-vaerdi vil vaere ca. 1,5-2.

- Erlenmeyerkolben saettes i varmeskab ved 40-41 °C i ca. 4 timer til fordoejelse. Kolben rystes regelmaessigt i loebet af fordoejelsesprocessen, mindst to gange i timen.

- Den fordoejede oploesning filtreres gennem sien ned i den koniske 2-liter skilletragt og henstaar uroert i stativet i mindst en time.

- Ialt ca. 45 ml aftappes fra skilletragten i et maaleglas og fordeles i tre petriskaale, som i bunden er opdelt i kvadrater med ca. 15 ml i hver.

- Hver petriskaal undersoeges minutioest under stereomikroskopet for trikinlarver.

- Hvis der anvendes larvetaellebassiner, fordeles de 45 ml i to af disse og undersoeges med trikinoskopet.

Larverne viser sig som snoede organismer i bundfaldet og ligner naesten urfjedre. De er lette at identificere, og udviser ofte spiralbevaegelser, naar vandet er lunkent.

- Fordoejelsesvaeskerne undersoeges, saa snart de er parat. Undersoegelsen maa under ingen omstaendigheder udsaettes til den foelgende dag.

Hvis proeverne er uklare, eller hvis de ikke er undersoegt i loebet af 30 minutter, behandles de paa foelgende maade. Den endelige proeve paa 45 ml haeldes i et maaleglas og henstaar i 10 minutter. Derefter opsuges 30 ml af supernatanten, og til de resterende 15 ml tilsaettes saa meget ledningsvand, at vaesken fylder 45 ml. Efter at vaesken har henstaaet til bundfaeldning yderligere 10 minutter, opsuges 30 ml af supernatanten, og de resterende 15 ml haeldes i en petriskaal eller et larvetaellebassin til undersoegelse. Maaleglasset skylles med 10 ml ledningsvand og dette skyllevand overfoeres til proeven i petriskaalen eller larvetaellebassinet for at blive undersoegt.

ii) Mindre samleproever (under 100 enkeltproever)

Indtil 15 enkeltproever kan saettes til en samleproeve bestaaende af 100 enkeltproever og undersoeges sammen med disse. Saafremt mere end 15 proever og mindre end 100 proever skal undersoeges reduceres maengden af fordoejelsesvaeske proportionalt. 2. Hvis resultatet af undersoegelsen af en samleproeve er positivt eller usikkert udtages der i overensstemmelse med punkt b) en ny proeve paa 20 g fra hvert svin. Proeverne fra 5 svin undersoeges samlet efter ovennaevnte metode. Paa denne maade undersoeges proever fra 20 grupper à 5 svin. Hvis der paavises trikiner i en samleproeve fra 5 svin, indsamles der nye proever à 20 g fra hvert dyr i gruppen, og disse proever undersoeges hver for sig i overensstemmelse med ovennaevnte metode.«

3. Som punkt IV, V og VI indsaettes:

»IV. DEN MEKANISKE FORDOEJELSESMETODE TIL UNDERSOEGELSE AF SAMLEPROEVER VED SEDIMENTERINGSTEKNIK

a) Apparatur og reagenser

- kniv eller saks til udtagning af proever,

- bakker med 50 afmaerkede felter, der hver kan rumme 2 g koed,

- en Stomacher Lab-blender, model 3500 Thermo,

- plastposer, der passer til blenderen,

- 2-liters koniske skilletragte, helst med teflonhaner,

- stativer, ringe og klemmer,

- sier, med en maskevidde paa 177 micron og en udvendig diameter paa 11 cm og med traadnet af rustfrit staal,

- tragte med en indvendig diameter paa mindst 12 cm til underlag for sierne,

- 100 ml-maaleglas,

- 25 ml-dispenser,

- 3-liters baegerglas,

- ske eller glasstang til omroering af fordoejelsesvaesken i baegerglasset,

- en plastsproejte forsynet med en sugespids,

- en maaleske, rumindhold 6 g,

- et termometer, der inden for omraadet 1-100°C kan maale med en noejagtighed paa 0,5 °C,

- en vibrator, f. eks, en el-barbermaskine, hvor »hovedet« er fjernet,

- et relae, der kan taende og afbryde med et minuts inteval,

- et trikinoskop med vandret bord eller et stereomikroskop med tilstraekkeligt lys,

- et larvetaellebassin (hvis der benyttes trikinoskop); larvetaellebassinet fremstilles af 3 mm tykke acrylplader:

i) bundstykket skal vaere 180 × 40 mm og vaere inddelt i felter;

ii) sidestykkerne skal vaere 230 × 20 mm;

iii) endestykkerne skal vaere 40 × 20 mm;

bundstykket og endestykkerne anbringes mellem sidestykkerne, saa der dannes en skaal med to smaa haandtag i begge ender; bundstykkets overside skal ligge 7-9 mm over den nederste kant af den ramme side- og endestykkerne danner; delene samles ved hjaelp af en lim, der er egnet til materialet;

- et antal petriskaale med en dimaeter paa 9 cm (hvis der anvendes stereomikroskop), der paa undersiden er forsynet med 10 × 10 mm store felter indridset med et spidst instrument,

- saltsyre 17,5 %,

- pepsin, styrke 1: 10 000 NF (U.S. National Formulary)

svarende til 1: 12 500 BP (British Pharmacopoeia)

svarende til 2 000 FIP (Fédération Internationale de Pharmacie),

- et antal 10-liters spande, der kan anvendes til dekontaminering ved for eksempel formolbehandling af apparatur og den resterende fordoejelsesvaeske i tilfaelde af positiv reaktion,

- en vaegt, der kan veje med en noejagtighed paa 0,1 g. b) Udtagning af proever

1. Fra hele dyrekroppe udtages der en proeve paa ca. 2 g af en af diafragmapillerne ved overgangen til den senede del. Hvis diafragmapillerne mangler, udtages der en proeve paa ca. 2 g af diafragmas ribbens- eller brystbensdel eller af kaebe- eller bugmuskulaturen.

2. Fra udskaarne koedstykker tages der en fedtfattig proeve paa ca. 2 g af skeletmuskulaturen saa taet som muligt ved ben eller sener.

c) Metode

1. Udfoerelse

i) Komplette samleproever (bestaaende af 100 enkeltproever)

- En dobbelt plastpose anbringes i blenderen, og temperaturen indstilles til 40-41°C.

- 1,5 l vand, der er forvarmet til 32-35°C haeldes i den inderste plastpose og opvarmes til 40-41°C.

- Vandet i blenderen tilsaettes 25 ml saltsyre (17,5 %).

- Derefter tilsaettes 100 proever à ca. 1 g (ved 25-30°C) som er udtaget fra samtlige enkeltproever i overensstemmelse med punkt b).

- Endelig tilsaettes 6 g pepsin. Raekkefoelgen for tilsaetninger skal noeje overholdes for at undgaa nedbrydning af pepsinet.

- Posens indhold behandles nu i blenderen i 25 minuter.

- Posen tages ud af blenderen og fordoejelsesvaesken haeldes igennem sien ned i et 3-liters baegerglas.

- Posen skylles med ca. 100 ml vand, som derefter bruges til skylning af sien og derved haeldes sammen med filtratet i baegerglasset.

Indtil 15 enkeltproever kan saettes til en samleproeve bestaaende af 100 enkeltproever og undersoeges sammen med disse.

ii) Mindre samleproever (under 100 enkeltproever)

- En dobbelt plastpose anbringes i blenderen, og temperaturen indstilles til 40-41°C.

- Fordoejelsesvaesken fremstilles ved at blande ca. 1,5 l vand og 25 ml saltsyre (17,5 %). Derefter tilsaettes 6 g pepsin, og det hele blandes ved 40-41°C. Denne raekkefoelge skal noeje overholdes for at undgaa nedbrydning af pepsinet.

- Af fordoejelsesvaesken afmaales en maengde , der svarer til 15 ml pr. g proeve (eksempel: til 30 proever afmaales 30 × 15 ml = 450 ml); den afmaalte vaeske haeldes i den inderste af de to plastposer, og der tilsaettes proever à ca. 1 g (ved 25-30° C), som er udtaget fra samtlige enkeltproever i overensstemmelse med punkt b).

- I den yderste plastpose haeldes varmt vand (ca. 41° C), saa den samlede vaeskemaengde i de to poser bliver 1,5 l.

- Posens indhold behandles nu i blenderen i 25 minutter.

- Posen tages ud af blenderen og fordoejelsesvaesken haeldes gennem sien ned i et 3-liters baegerglas.

- Posen skylles med ca. 100 ml vand, som derefter bruges til skylning af sien og derved haeldes sammen med filtratet i baegerglasset.

2. Paavisning af larver ved bundfaeldning

- Der tilsaettes is (300-400 g skaelis eller anden findelt is) til fordoejelsesvaesken, saa maengden bliver ca. 2 1. Vaesken omroeres, indtil isen er smeltet.

Til mindre samleproever (se punkt ii) saettes en tilsvarende mindre maengde is.

- Den afkoelede fordoejelsesvaeske haeldes i en 2-liters skilletragt, udstyret med en vibrator i en ekstra klemme. - Vaesken henstaar til bundfaeldning i 30 minutter; i denne periode paavirkes skilletragten ved intermitterende vibration, dvs. vibration i 1 minut og pause i 1 minut.

- Efter 30 minutters forloeb aftappes en bundfaldsproeve paa 60 ml hurtigt ned i et maaleglas (100 ml).

(Efter brugen rengoeres tragten med et overfladeaktivt rengoeringsmiddel).

- Proeven paa 60 ml henstaar i mindst 10 minutter, hvorefter supernatanten opsuges, indtil der er 15 ml tilbage til undersoegelse for forekomst af larver.

- Til opsugning kan anvendes en engangssproejte forsynet med plastroer.

Roeret skal have en saadan laengde, at der bliver 15 ml tilbage i maaleglasset, naar sproejtens flanger hviler mod glassets overkant.

- De 15 ml overfoeres enten til et larvetaellebassin ved undersoegelse med trikinoskop eller til to petriskaale ved undersoegelse med stereomikroskop.

- Fordoejelsesvaeskerne undersoeges, saa snart de er parat. Undersoegelsen maa under ingen omstaendigheder udsaettes til foelgende dag.

Hvis proeverne er uklare, eller hvis de ikke er undersoegt i loebet af 30 minutter, klares de paa foelgende maade. Den endelige proeve paa 60 ml haeldes i et maaleglas og henstaar i 10 minutter. Derefter opsuges 45 ml af supernatanten, og til de resterende 15 ml saettes saa meget ledningsvand, at vaesken fylder 45 ml. Efter at vaesken har henstaaet til bundfaeldning i yderligere 10 minutter, opsuges 30 ml af supernatanten, og de resterende 15 ml haeldes i en petriskaal eller et larvetaellebassin til undersoegelse. Maaleglasset skylles med 10 ml ledningsvand og dette skyllevand overfoeres til proeven i petriskaalen eller larvetaellebassinet for at blive undersoegt.

3. Hvis resultatet af undersoegelsen af en samleproeve er positivt eller usikkert udtages der i overensstemmelse med punkt b) en ny proeve paa 20 g fra hvert svin. Proeverne fra 5 svin undersoeges samlet efter ovennaevnte metode. Paa denne maade undersoeges proever fra 20 grupper à 5 svin. Hvis der paavises trikiner i en samleproeve fra 5 svin, udtages der nye proever à 20 g fra hvert dyr i gruppen, og disse proever undersoeges hver for sig i overensstemmelse med ovennaevnte metode.

V. DEN MEKANISKE FORDOEJELSESMETODE TIL UNDERSOEGELSE AF SAMLEPROEVER VED FILTRERINGSTEKNIK

a) Apparatur og reagenser

Som anfoert under metode IV, punkt a) samt foelgende

- en 1-liters Gelman-tragt komplet med filterholder (diameter 45 mm),

- finmaskede sier; en si bestaar af:

et cirkelrundt rustfrit traadnet med en maskevidde paa 35 micron og en diameter paa 45 mm;

to gummiringe, der er fremstillet af 1 mm tykt gummi; den ydre diameter skal vaere 45 mm og den indre 38 mm;

det cirkelrunde traadnet anbringes mellem de to gummiringe, og det hele samles ved hjaelp af en to-komponentlim, der er egnet til sammenklaebning af de to materialer;

- en 3-liters Erlenmeyerkolbe med sideroer (sugekolbe),

- en vakuumpumpe (vandpumpe),

- plastposer, der kan rumme mindst 80 ml,

- udstyr til tillodning af plastposerne,

- rennilase, styrke 1:150 000 Soxhlet-enheder pr. g.

b) Indsamling af proever

Se metode IV, punkt b). c) Metode

1. Udfoerelse

i) Komplette samleproever (bestaaende af 100 enkeltproever)

Se metode IV, punkt c), punkt 1. i).

ii) Mindre samleproever (under 100 enkeltproever)

Se metode IV, punkt c) punkt 1. ii).

2. Paavisning af larver ved filtrering

- Der tilsaettes is (300-400 g skaelis eller anden findelt is) til fordoejelsesvaesken, saa maengden bliver ca. 2 1.

Til mindre samleproever saettes en tilsvarende mindre maengde is.

- Vaesken omroeres indtil isen er smeltet. Den koelede vaeske henstaar derefter i mindst 3 minutter, for at larverne kan rulle sig op i spiraler.

- Gelman-tragten med en finmasket si i filterholderen anbringes paa Erlenmeyerkolben, der forbindes med en vakuumpumpe.

- Fordoejelsesvaesken haeldes i Gelmantragten og sies. Vaeskens passage gennem sien kan ved filtreringens slutning lettes ved forsigtig sugning med vakuumpumpen. Sugningen standses, inden sien er toer, dvs. naar der er 2-5 ml vaeske tilbage i tragten.

- Naar vaesken er siet, fjernes sien og anbringes i en plastpose (80 ml) med 15-20 ml rennilaseoploesning. Oploesningen fremstilles ved at blande 2 g rennilase med 100 ml ledningsvand.

- Plastposen tillodes dobbelt og anbringes i blenderen mellem den fyldte inderste pose og den yderste pose.

- Blenderen skal arbejde i 3 minutter , baade naar det drejer sig om en komplet og om en mindre samleproeve.

- Efter 3 minutters forloeb fjernes plastposen med sien og rennilaseoploesningen fra blenderen og aabnes med en saks. Vaesken haeldes i et larvetaellebassin eller i en petriskaal. Posen med sien skylles med 5-10 ml vand, som derefter haeldes i larvetaellebassinet ved undersoegelse med trikinoskop eller i petriskaalen ved undersoegelse med stereomikroskop.

- Fordoejelsesvaeskerne undersoeges, saa snart de er parat. Undersoegelsen maa under ingen omstaendigheder udsaettes til den foelgende dag.

Bemaerk. Der maa kun anvendes helt rene si-skiver. Urene sier maa aldrig faa lov til at toerre.

Sierne kan renses ved, at de anbringes i rennilaseoploesningen natten over. Inden de tages i brug, boer de ved hjaelp af blenderen skylles i en frisklavet rennilaseoploesning.

3. Hvis resultatet af undersoegelsen af en samleproeve er positivt eller usikkert, udtages der i overensstemmelse med punkt b) en ny proeve paa 20 g fra hvert svin. Proeverne fra 5 svin undersoeges samlet efter ovennaevnte metode. Paa denne maade undersoeges proever fra 20 grupper à 5 svin. Hvis der paavises trikiner i en samleproeve fra 5 svin, indsamles der nye proever à 20 g fra hvert dyr i gruppen, og disse proever undersoeges hver for sig i overensstemmelse med ovennaevnte metode.

VI. MAGNETROERERMETODEN TIL UNDERSOEGELSE AF SAMLEPROEVER

a) Apparatur og reagenser

- kniv og pincet til indsamling af proever,

- bakker med 50 afmaerkede felter, der hver kan rumme 2 g koed,

- en Moulinette-blender,

- magnetomroerere med termostatstyret varmeplade og teflonbeklaedte magnetstave ca. 5 cm lange, - 2-liters koniske skilletragte,

- stativer og klemmer og ringe,

- sier, med en maskevidde paa 177 micron og udvendig diameter paa 11 cm og traadnet af rustfrit staal,

- tragte med en udvendig diameter paa mindst 12 cm; tragtene skal kunne rumme sierne,

- 3-liters baegerglas,

- 50-ml maaleglas eller centrifugeglas,

- et trikinoskop med vandret bord eller et stereomikroskop med tilstraekkeligt lys,

- et larvetaellebassin (hvis der benyttes trikinoskop);

larvetaellebassinet fremstilles af 3 mm tykke acrylplader:

a) bundstykket skal vaere 180 × 40 mm og vaere inddelt i felter;

b) sidestykkerne skal vaere 230 × 20 mm;

c) endestykkerne skal vaere 40 × 20 mm;

bundstykke og endestykker anbringes mellem sidestykkerne, saa der dannes en skaal med to smaa haandtag i begge ender; bundstykkets overside skal ligge 7-9 mm over den nederste kant af den ramme side- og endestykkerne danner; delene samles ved hjaelp af en lim der er egnet til materialet;

- et antal petriskaale med en diameter paa 9 cm (hvis der anvendes stereomikroskop), der paa undersiden er forsynet med 10 × 10 mm store felter indridset med et spidst instrument,

- aluminiumsfolie,

- saltsyre, 25 %,

- pepsin, styrke: 1: 10 000 NF (U.S. National Formulary)

svarende til 1: 12 500 BP (British Pharmacopoea)

svarende til 2 000 FIP (Fédération Internationale de Pharmacie),

- ledningsvand, der er opvarmet til 46-48° C,

- et antal 10-liters spande, der kan anvendes til dekontaminering ved f.eks. formolbehandling af apparaturet og den resterende fordoejelsesvaeske i tilfaelde af positiv reaktion,

- en vaegt, der kan veje med en noejagtighed paa 0,1 g.

b) Udtagning af proever

1. Fra hele dyrekroppe udtages der en proeve paa ca. 2 g af en af diafragmapillerne ved overgangen til den senede del. Hvis diafragmapillerne mangler, udtages der en proeve paa ca. 2 g. af diafragmas ribbens- eller brystbensdel eller af kaebe- eller bugmuskulaturen.

2. Fra udskaarne koedstykker tages der en fedtfattig proeve paa ca. 2 g af skeletmuskulaturen saa taet som muligt ved ben eller sener.

c) Metode

1. i) Komplette samleproever (bestaaende af 100 enkeltproever)

- 100 proever à ca. 1 g udtages fra enkeltproever udtaget i overensstemmelse med punkt b) og hakkes i blenderen. Blenderen koeres 3-4 gange i ca. 1 sekund.

- Det hakkede koed anbringes i et 3-liters maalebaeger og overdryses med 10 g pepsin. 2 l ledningsvand opvarmes til 46-48° C og haeldes i baegerglasset sammen med 16 ml saltsyre.

- De koedholdige dele af blenderen skylles gentagne gange i fordoejelsesvaesken i baegerglasset for at fjerne tilbageblevne koedrester.

- Magnetstaven anbringes i baegerglasset, der tildaekkes med aluminiumsfolie. - Baegerglasset anbringes paa magnetomroererens varmeplade, som skal vaere forvarmet og omroeringen paabegyndes. Magnetomroereren, skal forinden vaere indstillet saa den holder en konstant temperatur paa 44-46° C under hele processen. Under omroeringen skal fordoejelsesvaesken rotere saa hurtigt, at der dannes en dyb hvirvel uden sproejt.

- Vaesken omroeres i 30 minutter; derefter standses omroereren, og vaesken haeldes gennem sien over i skilletragten.

- Vaesken henstaar derefter i tragten i 30 minutter.

- Efter 30 minutters forloeb aftappes en vaeskeproeve paa 40 ml hurtigt ned i et maaleglas eller et centrifugeglas.

- Vaeskeproeven paa 40 ml henstaar derefter i 10 minutter, hvorefter 30 ml af supernatanten opsuges, saa der bliver 10 ml tilbage.

- De resterende 10 ml af bundfaldsproeven haeldes i et larvetaellebassin eller en petriskaal til undersoegelse.

- Maaleglas eller centrifugeglas skylles med ca. 10 ml ledningsvand, der derefter haeldes sammen med proeven i larvetaellesbassinet eller petriskaalen. Derefter undersoeges proeven med trikinoskop eller stereomikroskop.

- Fordoejelsesvaeskerne undersoeges, saa snart de er parat. Undersoegelsen maa under ingen omstaendigheder udsaettes til den foelgende dag.

Hvis proeverne ikke er undersoegt i loebet af 30 minutter klares de paa foelgende maade:

Den endelige proeve paa ca. 40 ml haeldes i et maaleglas og henstaar i 10 minuter. Derefter opsuges 30 ml af supernatanten og til de resterende 10 ml saettes saa meget ledningsvand, at vaesken fylder 40 ml. Efter at vaesken har henstaaet til bundfaeldning i yderligere 10 minutter opsuges 30 ml af supernatanten og de resterende 10 ml haeldes i et larvetaellebassin eller petriskaal til undersoegelse. Maaleglasset afvaskes med 10 ml ledningsvand og dette skyllevand overfoeres til proeven i petriskaalen eller larvetaellebassinet til undersoegelse.

Hvis en proeve er uklar ved undersoegelsen, haeldes den i et maaleglas, hvorefter der tilsaettes ledningsvand indtil 40 ml, hvorefter den foranbeskrevne fremgangsmaade foelges.

ii) Mindre samleproever (under 100 enkeltproever)

Om noedvendigt kan indtil 15 enkeltproever à 1 g saettes til en samlet portion paa 100 proever og undersoeges sammen med disse i overenstemmelse med punkt c) 1. i. Hvis der er mere end 15 enkeltproever, maa de undersoeges som en hel samleproeve. For samleproever paa indtil 50 proever kan fordoejelsesvaesken reduceres til 1 liter.

2. Hvis resultatet af en samleproeve er positivt eller usikkert udtages der i overensstemmelse med punkt b) en ny proeve paa 20 g fra hvert svin. Proeverne paa 5 svin undersoeges samlet efter ovennaevnte metode. Paa denne maade undersoeges proever fra 20 grupper à 5 svin. Hvis der paavises trikiner i en samleproeve fra 5 svin, indsamles der nye proever à 20 g fra hvert dyr i gruppen, og disse proever undersoeges hver for sig i overensstemmelse med ovennaevnte metode.«

B. Bilag II, kapitel I, punkt 1, aendres saaledes:

1. Litra b) affattes saaledes:

»b) et aflaaseligt lokale med tilstraekkeligt udstyr, hvis der anvendes trikonoskop til undersoegelsen.«

2. Litra f) ophaeves. Litra g), h), i), j), k), l), m) og n) bliver henholdsvis f), g), h), i), j), k), l) og m). 3. Litra g) affattes saaledes:

»g) et vaskerum til rensning og desinfektion af undersoegelsesredskaberne (f.eks. beholdere til proever, kompressorier, knive og sakse) forsynet med:

- et gulv af vandtaette materialer, der let lader sig rense og desinficere, og som ikke kan raadne,

- glatte vaegge, der i indtil 2 meters hoejde er daekket med en lys beklaedning eller med maling, som taaler afvaskning.

Denne bestemmelse finder ikke anvendelse, hvis de i punkt II, III, IV, V og VI i bilag I anfoerte metoder anvendes, og laboratoriet er udstyret med en stor, korrekt monteret vask.«.