PROTOKOL TIL DEN EUROPAEISKE OVERENSKOMST om udveksling af terapeutiske stoffer af menneskelig oprindelse

DEL I GENERELLE BESTEMMELSER

A. MAERKNING

En etiket paa engelsk og fransk, der er i overensstemmelse med det paagaeldende eksempel i bilag 2 til 10 til denne protokol, skal vaere paaklaebet hver beholder eller infusionssaet.

B. EMBALLAGE OG FORSENDELSE

Humant fuldblod skal forsendes i beholdere, hvori der holdes en temperatur paa 4 til 6 C under hele transporten.

Denne betingelse kraeves ikke opfyldt for de i protokollen naevnte derivater.

C. PRODUKTER OG APPARATUR

Produkter og apparatur, der er omtalt i denne protokols del II, skal vaere sterile, fri for pyrogener og ugiftige.

Det henstilles, at infusionssaettet samt de oploesningsmidler, der er noedvendige til de toerrede produkter, medsendes hver forsendelse.

D. UGIFTIGHEDEN VED BLODTRANSFUSIONSUDSTYR AF PLAST

Udstyret skal opfylde bestemmelserne i bilag 11 til denne protokol.

DEL 2 SAERLIGE BESTEMMELSER

1. HUMANT FULDBLOD

Humant fuldblod er blod, som er blandet med en passende antikoagulant, efter tapning fra et menneske i normal sundhedstilstand.

Blodet maa ikke vaere taget fra et menneske:

a) som vides at lide af eller have lidt af syfilis eller hepatitis,

b) hvis blod ikke er kontrolleret for syfilitisk infektion med negativt resultat,

eller

c) som, saa vidt det kan konstateres ved laegeundersoegelse og gennemgang af personens anamnese, kan vaere baerer af sygdomme, der kan overfoeres ved blodtransfusion.

Blodet skal tappes aseptisk gennem et lukket system af sterile slanger og ledes ned i en steril beholder, hvori oploesningen af antikoagulant er anbragt foer sterilisation af beholderen. Det anvendte udstyr skal vaere frit for pyrogener.

Straks efter blodtapningen skal beholderen lukkes og afkoeles til 4 til 6 C, og den maa derefter foerst aabnes umiddelbart foer blodet skal anvendes.

Blodet opsamles i en sur citratoploesning, der indeholder glucose. Der maa hverken tilsaettes antiseptiske eller bakteriostatiske stoffer. Antikoagulantoploesningens volumen maa ikke overstige 220 ml pr. liter humant fuldblod, og haemoglobinkoncentrationen maa ikke vaere mindre end 97 gram pr. liter.

Blodtype

Blodtypen inden for AB0-systemet skal vaere bestemt ved undersoegelse af saavel blodlegemer som serum, og blodtypen inden for Rh-systemet skal vaere bestemt ved undersoegelse af blodlegemerne fra en anden proeve af donors blod. Hvis der findes en national standardmetode eller en nationalt anbefalet metode til blodtypebestemmelse, skal denne metode anvendes.

Betegnelsen Rh-negativ maa kun benyttes, naar specifikke proever har vist, at der hverken er C-, D-, Du- eller E-antigener til stede. Alt andet blod skal maerkes Rh-positiv.

Blod, der udveksles i henhold til denne aftale, boer kun gives til ricipienter med hertil svarende AB0-type.

Opbevaring

Humant fuldblod skal befinde sig i en steril beholder, der er lukket paa en saadan maade at mikroorganismer holdes ude, og opbevares ved en temperatur paa 4 til 6 C indtil brugen, undtagen i de tidsrum, der er noedvendige til undersoegelse og transport ved en hoejere temperatur.

Saadanne tidsrum maa ikke overskride 30 minutter, hvorefter blodet straks efter nedkoeles til 4 til 6 C.

Maerkning

Beholderens etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af etiketeksemplet (bilag 2).

Rhesustypen skal anfoeres som »positiv« eller »negativ« eller forkortet som »POS« eller »NEG«.

1a. KONCENTRAT AF HUMANE ROEDE BLODLEGEMER

Et koncentrat af humane roede blodlegemer er en enhed humant fuldblod, hvorfra stoerstedelen af plasmaet er fjernet.

Det indeholder hovedparten af de roede blodlegemer i den enhed, hvoraf det er fremstillet ; andre cellebestanddele kan vaere til stede eller vaere delvis fjernet.

Den flydende del af koncentratet bestaar enten af tilbageblevet plasma eller en passende kunstigt fremstillet isotonisk vandig oploesning, der er tilsat efter fjernelse af plasmaet. De roede blodlegemers volumen boer udgoere 65 til 75 % af produktets samlede volumen, men hvis koncentrationen af roede blodlegemer er stoerre, skal den omtrentlige erythrocytvolumenprocent (haematokrit) vaere angivet paa etiketten.

Alle faser i fremstillingen skal udfoeres under aseptiske forhold : fjernelse af plasma foretages i et sterilt lukket system og kun ved aftrykning. Der maa hverken tilsaettes antiseptiske eller bakteriostatiske midler.

Blodtype og opbevaring som for humant fuldblod.

Maerkning

Beholderens etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af etiketeksemplet (bilag 2a).

Rhesustypen skal anfoeres som »positiv« eller »negativ« eller forkortet som »POS« eller »NEG«.

Dersom der er tilsat en kunstigt fremstillet vandig oploesning, skal maengden og sammensaetningen heraf ligeledes vaere angivet paa etiketten.

2. TOERRET HUMANT PLASMA

Toerret humant plasma fremstilles ved inddampning af den vaeske, der udskilles ved centrifugering eller sedimentation af humant fuldblod.

Under fremstillingen maa der hverken tilsaettes antiseptiske, bakteriostatiske eller andre stoffer. Toerret humant plasma fremkommer ved frysetoerring eller enhver anden metode, hvor der ikke finder denaturering af proteiner sted. Det toerrede produkt skal vaere let oploeseligt i en maengde vand, der er lige saa stor som volumenet af den vaeske, hvoraf stoffet er fremstillet. Proteinkoncentrationen i den saaledes fremkomne oploesning maa ikke vaere mindre end 45 g pr. liter, og der maa ikke vaere synlige tegn paa haemolyseprodukter. Haemagglutinintiteren maa ikke vaere stoerre end 1 : 32.

Toerret humant plasma fremstillet af en eller to blodportioner

Donationer, der er vist at have et betaenkeligt hoejt indhold af isohaemolysiner (bestemt paa en frisk serumproeve) eller af immunhaemagglutininer, afvises. Hvis plasmaet ikke er samlet og frosset inden 48 timer efter blodtapningen, skal hver enhed kontrolleres for sterilitet ved dyrkning af mindst 10 ml.

Toerret humant plasma fremstillet efter blanding af mere end to portioner

Blandinger, der har vist at have et betaenkeligt hoejt indhold af immunhaemagglutininer eller af isohaemolysiner, afvises. For at undgaa uoenskede virkninger, der skyldes produkter fra bakterievaekst i plasmaet, maa enkeltportioner ikke anvendes, hvis der er tegn paa bakteriekontaminering, og hver blanding skal kontrolleres for sterilitet ved dyrkning af mindst 10 ml. For at opnaa mindst mulig risiko for overfoering af serumhepatitis skal plasma fremstilles af blandinger, der ikke bestaar af mere end 12 portioner, eller ved enhver anden metode, der er vist at indebaere en tilsvarende lav risiko.

Oploeselighed i vand

Der tilsaettes en maengde vand, der er lige saa stor som volumenet af den vaeske, hvoraf proeven er fremstillet ; ved 15 til 20 C oploeses stoffet fuldstaendigt i loebet af hoejst 10 minutter.

Identifikation

En kendt maengde af produktet oploeses i et volumen vand, der er lige saa stort som volumenet af den vaeske, hvoraf det er fremstillet ; oploesningen underkastes foelgende proever:

i) ved faeldningskontrol med specifikke antisera vises det kun at indeholde humane plasmaproteiner;

ii) til 1 ml saettes en passende maengde thrombin eller calciumchlorid ; der sker koagulation, som kan fremskyndes ved inkubering ved 37 C.

Vaegttab ved toerring

Ved toerring over phosphorpentoxid ved et tryk paa hoejst 0,02 mm kviksoelv i 24 timer maa toerret humant plasmas vaegttab ikke vaere stoerre end 0,5 %.

Sterilitet

Efter rekonstitution skal slutproduktet vaere sterilt, naar det undersoeges ved hjaelp af en passende bakteriologisk metode.

Opbevaring

Toerret humant plasma opbevares i steril beholder under vakuum eller paafyldt nitrogen, med lukke, der forhindrer indtraengen af mikroorganismer og saa vidt muligt ogsaa fugtighed, og beskyttet mod lys ved en temperatur paa under 20 C.

Maerkning

Beholderens etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af etiketeksemplet (bilag 3).

3. HUMANT ALBUMIN OG HUMAN PLASMAPROTEINFRAKTION

Humant albumin og human plasmaproteinfraktion er praeparater af den proteinbestanddel, som udgoer ca. 60 % af det samlede proteinindhold i plasmaet fra humant fuldblod.

Den anvendte fremstillingsmetode skal vaere af en saadan art, at produktet opfylder de heri beskrevne krav. Uanset om slutproduktet er flydende eller toerret, skal praeparatet efter tilsaetning af en eller flere stabilisatorer have vaeret opvarmet i flydende form i slutbeholderen til 60 C ± 0,5 C i 10 timer, saaledes at det smitstof, der foraarsager serumhepatitis, er oedelagt. Under fremstillingen maa der hverken tilsaettes antiseptiske eller bakteriostatiske stoffer.

I praeparater af humant albumin skal mindst 95 % af proteinindholdet vaere albumin. I praeparater af human plasmaproteininfraktion skal mindst 85 % af proteinmassen vaere albumin. Begge praeparater skal indeholde mere end 10 mg immunglobulin G pr. g produkt.

Naar slutproduktet er frysetoerret, skal det indeholde mindst 950 mg protein pr. g produkt.

Humant plasmaproteininfraktion som oploesning skal have en samlet proteinkoncentration paa mellem 45 og 50 g pr. liter. Humant albumin som oploesning skal have en samlet proteinkoncentration paa mindst 45 g pr. liter.

Det toerrede produkts oploeselighed

Der tilsaettes vand op til det anfoerte volumen ; det toerrede praeparat skal vaere fuldstaendig oploeseligt.

Stabilitet

Ved sammenligning af oploesningerne foer og efter

varmebehandling maa der ved viskositets- og turbiditetsmaalinger, ultracentrifugering og elektroforese ikke vaere tegn paa signifikant denaturering af de oploeste proteiner. Efter opvarmning til 57 C og mekanisk rystning i seks timer ved denne temperatur skal oploesningen vaere helt fri for synlige partikler.

Identifikation

i) Ved faeldningskontrol med specifikke antisera skal det godtgoeres, at begge praeparater indeholder humane plasmaproteiner.

ii) Ved elektroforese (moving boundary-teknikken) under acceptable og passende betingelser skal det godtgoeres, at den proteinfraktion, der har samme mobilitet som albuminbestanddelen i normalt humant plasma, udgoer mindst 95 % af proteinindholdet i praeparater af humant albumin eller mindst 85 % af proteinindholdet i praeparater af human plasmaproteinfraktion.

Natriumindhold og natriumkoncentration

Natriumindholdet i saltfattigt humant albumin maa hoejst vaere 0,61 mmol pr. g albumin. I andre praeparater af humant albumin og i human plasmaproteinfraktion maa natriumkoncentrationen ikke overstige 0,15 mol pr. liter oploesning eller rekonstitueret toerret produkt.

Kaliumkoncentration

Kaliumkoncentrationen i human plasmaproteinfraktion maa ikke overstige 2 mmol pr. liter oploesning eller rekonstitueret toerret produkt.

Surhedsgrad

Begge praeparaters pH skal vaere 6,8 ± 0,2, naar det maales ved en temperatur paa 15 til 25 C i en oploesning, der er fortyndet til en proteinkoncentration paa 10 g pr. liter ved hjlp af en oploesning indeholdende 0,15 mol natriumchlorid pr. liter.

Vaegttab ved toerring

Ved toerring over phosphorpentoxid ved et tryk paa hoejst 0,02 mm kviksoelv i 24 timer maa toerrede praeparaters vaegttab hoejst vaere 0,5 %.

Sterilitet

Slutproduktet skal vaere sterilt, naar det undersoeges ved hjaelp af en passende bakteriologisk metode.

Opbevaring

Toerret humant albumin opbevares i steril beholder under vakuum eller paafyldt nitrogen, med lukke, der forhindrer indtraengen af mikroorganismer og saa vidt muligt ogsaa fugtighed, og beskyttet mod lys ved en temperatur paa under 20 C.

Oploesningen af humant albumin og human plasmaproteinfraktion opbevares i sterile beholdere, der er lukket paa en saadan maade, at mikroorganismer holdes ude, og beskyttet mod lys ved en temperatur paa 4 til 6 C.

Maerkning

Beholderens etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af det paagaeldende etiketeksempel (bilag 4). For oploesninger er fremstillingsdatoen den dato, hvor varmebehandling i slutbeholderen har fundet sted.

4. NORMALT HUMANT IMMUNGLOBULIN

Normalt humant immunglobulin er et praeparat af de plasmaproteiner, der fremstilles af humant fuldblod, og som indeholder antistoffer som normale voksne menneskers. Det fremstilles af en blanding af humant plasma i flydende form fra mindst 1 000 donorer.

Den anvendte fremstillingsmetode skal vaere af en saadan art, at produktet opfylder de heri stillede krav, og at overfoersel af serumhepatitis med slutproduktet udelukkes. Yderligere skal fremstillingsmetoden koncentrere antistofferne i udgangsmaterialet i en tilstraekkelig maengde i slutproduktet. For hvert slutpraeparat skal det ved titrering af antistoffer i udgangsmaterialet og slutproduktet mod mindst et virus og et bakterietoksin godtgoeres, at fremgangsmaaden er tilfredsstillende i denne henseende. Der skal vaelges antistoffer, for hvilket der findes anerkendte titreringsmetoder.

Under fremstillingen maa der hverken tilsaettes antiseptiske eller bakteriostatiske stoffer ; der kan til slutproduktet saettes et passende konserveringsmiddel og en stabilisator med henblik paa at bevare slutproduktets bakteriesterilitet og stabilitet.

Slutproduktet udleveres som en oploesning, hvori immunglobulinkoncentrationen skal vaere paa 100 til 170 g pr. liter.

Identifikation

i) Ved faeldningskontrol med specifikke antisera skal det vises kun at indeholde humane plasmaproteiner.

ii) Ved elektroforese (moving boundary-teknikken) under acceptable og passende betingelser har mindst 90 % af proteinmassen samme mobilitet som gammakomponenten af globuliner fra normalt humant plasma.

Stabilitet

Foer og efter opvarmningen af slutoploesningen til 37 C i syv dage boer der ikke vaere synlige tegn paa udfaeldning eller uklarhed. Det tilraades endvidere at foretage kontrol ved ultracentrifugering med henblik paa at bestemme graden af nedbrydning af produktet til bestanddele med lavere molekylvaegt.

Den anvendte metode boer vaere godkendt af den nationale kontrolmyndighed.

Surhedsgrad

Slutoploesningens pH skal vaere 6,8 ± 0,4, naar det maales ved en temperatur paa 15 til 25 C i en oploesning, der er fortyndet til en proteinkoncentration paa 10 g pr. liter med en oploesning, der indeholder 0,15 mol natriumchlorid pr. liter.

Sterilitet

Slutproduktet skal vaere sterilt, naar det undersoeges ved hjaelp af en passende bakteriologisk metode.

Opbevaring

Oploesninger af humant immunglobulin skal opbevares i steril beholder med lukke, der forhindrer indtraengen af mikroorganismer, beskyttet mod lys ved en temperatur paa 4 til 6 C.

Maerkning

Beholderens etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af etiketeksemplet (bilag 5).

Fremstillingsdatoen er datoen for paafyldning af slutbeholderen.

5. SPECIFIKKE HUMANE IMMUNGLOBULINER

Specifikke humane immunglobuliner indeholder antistoffer mod naermere angivne virale eller bakterielle stoffer. De tillades derfor fremstillet af blandinger af et mindre antal blodportioner.

Foelgende specifikke humane immunglobuliner er underkastet disse krav:

- humant immunglobulin mod tetanus,

- humant immunglobulin mod vaccinia.

Der vil muligvis blive udviklet andre specifikke immunglobuliner, og naar den paagaeldende internationale standard foreligger, boer de styrkebestemmes i forhold til denne standard, og deres styrke anfoeres i internationale enheder.

Humant immunglobulin mod vaccinia skal indeholde mindst 500 IE pr. ml vacciniaantistof, bestemt ved en neutralisationstest paa chorion-allantoismembraner eller i vaevskultur. Humant immunglobulin mod tetanus skal indeholde mindst 50 IE pr. ml tetanusantitoksin, bestemt ved en neutralisationstest i dyr.

Specifikke humane immunglobuliner skal endvidere opfylde de krav, der i afsnit 4 er beskrevet for normalt humant immunglobulin.

Afhaengigt af antistofindholdet tillades immunglobulinkoncentrationen i slutoploesningen at variere mellem 100 og 170 g pr. 1.

Maerkning

Beholderens etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af etiketeksemplet (bilag 5).

Endvidere skal styrken vaere anfoert i internationale enheder i forhold til den paagaeldende internationale standard eller det paagaeldende internationale referencepraeparat.

6. TOERRET HUMANT FIBRINOGEN

Toerret humant fibrinogen er et toerret praeparat, der indeholder den oploeselige bestanddel af flydende humant plasma, som ved tilsaetning af thrombin omdannes til fibrin. Den anvendte fremstillingsmetode skal vaere af en saadan art, at produktet opfylder de heri beskrevne krav og risikoen for overfoersel af serumhepatitis er mindst mulig. Plasmablandinger, der benyttes til fremstilling af fibrinogen, boer bestaa af saa faa portioner som muligt.

Under fremstillingen maa der hverken tilsaettes antiseptiske eller bakteriostatiske stoffer. Slutproduktet skal vaere frysetoerret.

Oploeselighed

Der tilsaettes vand til det anfoerte volumen ; det toerrede praeparat skal vaere fuldstaendig oploeseligt.

Inden for 60 minutter efter rekonstitution maa der ikke forekomme udfaeldning.

Identifikation

i) Ved faeldningskontrol med specifikke antisera skal det vises kun at indeholde humane plasmaproteiner.

ii) Det netop rekonstituerede produkt har den egenskab, at det koagulerer ved tilsaetning af thrombin. Naar der saettes thrombin til en oploesning af humant fibrinogen i samme koncentration som i frisktappet normalt plasma, skal koagulation ske inden for et tidsrum, der ikke er mere end to gange koagulationstiden for frisk normalt plasma efter tilsaetning af thrombin.

iii) Koagulabelt protein. Mindst 50 % af den samlede proteinmaengde skal kunne koaguleres af thrombin.

Vaegttab ved toerring

Ved toerring over phosphorpentoxid ved et tryk paa hoejst 0,02 mm kviksoelv i 24 timer maa praeparatets vaegttab hoejst vaere paa 0,5 %.

Sterilitet

Efter rekonstitution skal slutproduktet vaere sterilt, naar det undersoeges ved hjaelp af en passende bakteriologisk metode.

Opbevaring

Humant fibrinogen skal opbevares under nitrogen eller vakuum i en steril beholder, der er lukket paa en saadan maade, at mikroorganismer og saa vidt muligt fugt holdes ude, og beskyttet mod lys ved den anbefalede temperatur.

Maerkning

Beholderens etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af etiketeksemplet (bilag 6).

Fremstillingsdatoen er datoen for den sidste oploesningsproces foer frysetoerring.

7. TOERRET ELLER FROSSET HUMAN KOAGULATIONSFAKTOR VIII

I. Krav til donorer

Donorer skal vaere raske og maa i saerdeleshed ikke have nogen smitsom sygdom, svarende til kriterierne for toerret humant plasma.

II. Krav til praeparater

Sterilitet og ugiftighed

Slutproduktet skal vaere sterilt og frit for pyrogener.

Hvis kryopraecipitering foretages i plastposer, maa produktet ikke indeholde organisk oploesningsmiddel eller andre fremmede stoffer, der findes i fryseblandingen. At saadanne produkter traenger gennem plastposens vaeg kan forhindres ved, at posen anbringes i en andenuigennemtraengelig pose under hele immersionsperioden.

Risokoen for, at plastposen rives itu under opbevaring i frosset tilstand, kan mindskes ved, at hver pose opbevares i en beskyttelsesaeske.

Erythrocytter, leukocytter og thrombicytter

Centrifugering skal finde sted paa en saadan maade, at blodets formede elementer fjernes saa hurtigt og saa fuldstaendigt som muligt efter blodtapningen.

Oploeselighed

Tilsaetning af den angivne maengde af det paagaeldende oploesningsmiddel skal foere til fuldstaendig oploesning af det toerrede produkt paa mindre end 30 minutter ved 37 C. Smaa fibrinogenaggregater, der let kan skilles fra, maa gerne blive tilbage.

Stabilitet

Efter oploesning af praeparatet maa der ved opbevaring ved 20 C i tre timer ikke vaere tegn paa udfaeldning.

Styrke

Det rekonstituerede praeparat skal indeholde den anfoerte mindstemaengde af faktor VIII, idet en enhed svarer til styrken af 1 ml, normalt gennemsnitsplasma ; styrken bestemmes ved en metode, der er godkendt af den ansvarlige nationale myndighed.

Manglende irregulaere antistoffer og, dersom praeparatet er bestemt for patienter med enhver AB0-type, en anti-A og anti-B antistoftiter paa hoejst 32.

Identifikation

Faeldningskontrol med specifikke antisera skal vise, at produktet kun indeholder humane plasmaproteiner.

Vaegttab ved toerring

Ved toerring over phosphorpentoxid ved et tryk paa hoejst 0,02 mm Hg i 24 timer maa frysetoerrede praeparaters vaegttab hoejst vaere paa 1,5 %.

Opbevaring

Human faktor VIII skal i dybfrossen tilstand opbevares ved en temperatur paa under - 30 C, i frysetoerret tilstand ved under 5 C, samt beskyttet mod lys. Det toerrede praeparat skal opbevares under vakuum eller paafyldt nitrogen, i sterilt glas, med lukke, der forhindrer indtraengen af alle mikroorganismer og saa vidt muligt ogsaa al fugtighed. Opbevaring i frosset tilstand maa ikke overskride seks maaneder og i toerret tilstand ikke et aar, medmindre praeparatet bliver kontrolleret med hensyn til styrke.

III. Maerkning

Praeparatets etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af etiketeksemplet (bilag 7).

8. TOERRET HUMAN KOAGULATIONSFAKTOR IX

I. Krav til donorer

Donorer skal vaere raske og maa i saerdeleshed ikke have nogen smitsom sygdom, svarende til kriterierne for toerret humant plasma.

II. Krav til koncentratet

Sterilitet og ugiftighed

Slutproduktet skal ved kontrol ved egnede metoder vaere sterilt og frit for pyrogener og maa hverken indeholde uoenskede vasodepressive eller respirationsaktive stoffer. Kontrollen for manglende indhold af vasodepressive stoffer udfoeres paa hund eller kat.

Oploeselighed

Tilsaetning af den angivne maengde oploesningsmiddel skal foere til fuldstaendig oploesning paa 10 minutter ved 37 C.

Thromboplastinaktivitet og mandlende frit thromcin

Normalt plasmas rekalcifikationstid, maalt ved 37 C efter tilsaetning af et lige saa stort volumen af forskellige fortyndinger af det rekonstituerede produkt, maa ikke vaere mindre end 40 sekunder. Det rekonstituerede produkt maa efter tilsaetning af et lige saa stort volumen fibrinogen (3 g/l) ikke koagulere i loebet af seks timer ved 37 C.

Styrke

Det rekonstruerede praeparat skal indeholde den anfoerte mindstemaengde af faktor IX, idet en enhed svarer til styrken af 1 ml normalt frisk gennemsnitsplasma ; styrken bestemmes ved en metode, der er godkendt af den ansvarlige nationale myndighed.

Effekt og stabilitet in vivo

Fremstillingsmetoden skal vaere af en saadan art, at intravenoes injektion af en dosis paa 50 enheder pr. kg legemsvaegt fra flere produktionspartier hos flere patienter under basale omstaendigheder, naar der ikke er specifikke inhibatorer til stede, medfoerer, at der i loebet af 15 minutter indtraeder en gennemsnitlig stigning paa mindst 300 enheder pr. liter plasma, og at den gennemsnitlige stigning efter 24 timer stadig er mindst 60 enheder pr. liter plasma.

Identifikation

Faeldningskontrol med specifikke antisera skal vise, at produktet udelukkende indeholder humane plasmaproteiner.

Vaegttab ved toerring

Ved toerring over phosphorpentoxid ved et tryk paa hoejst 0,02 mm kviksoelv i 24 timer maa produktets vaegttab hoejst vaere paa 1,5 %.

Opbevaring

Praeparaterne skal opbevares toert ved en temperatur paa under 5 C. De maa ikke opbevares i over to aar, medmindre deres styrke kontrolleres.

III. Maerkning

Praeparates etiket skal indeholde alle de oplysninger, der fremgaar af etiketeksemplet (bilag 8).

BILAG 1 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 2 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 2a TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 3 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 4 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 4 (fortsat 1) EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 4 (fortsat 2) EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 5 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 6 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 7 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 8 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 9 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 10 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE

BILAG 11 TIL PROTOKOLLEN EUROPARAADET EUROPAEISK OVERENSKOMST OM UDVEKSLING AF TERAPEUTISKE STOFFER AF MENNESKELIG OPRINDELSE UGIFTIGHEDEN AF BLODTRANSFUSIONSUDSTYR AF PLAST

I. KEMISK UNDERSOEGELSE

Undersoegelsen er beregnet paa blodtransfusionsudstyr af plast.

Dette udstyr falder i to hovedgrupper:

1. plastbeholdere til tapning, separation og opbevaring af blod og blodderivater,

2. plastsaet til blodtapning og -givning.

Proeverne skal udfoeres paa materiale, der er steriliseret ved hjaelp af den metode, der skal anvendes til den endelige sterilisation af udstyret.

Foelgende materiale skal undersoeges:

1. den plast, der benyttes til fremstilling af beholderne,

2. de slanger, der benyttes i beholderne, og

3. saet til blodtapning og -givning.

Beholderne undersoeges, foer de fyldes med antikoagulationsoploesning.

Hvis undersoegelsen imidlertid foretages med beholdere, der er paafyldt antikoagulantoploesning, skal der ved bedoemmelse af undersoegelsen af beholderen tages hensyn til resultaterne af den i afdeling III omhandlede graensevaerditest af selve antikoagulantoploesningen.

Producenter af transfusionsudstyr skal til den paagaeldende sundhedsmyndighed give detaljerede oplysninger om sammensaetningen af plastmaterialet eller- materialerne og andre materialer, der benyttes ved fremstillingen af udstyret, hvor bestanddelene i materialet eller materialerne kommer fra og hvorledes de fremstilles (eller i stedet forbindelsernes referencenummer), beskrivelse af metoden til fremstilling af udstyret, arten af anvendte additiver og klaebestoffer samt sterilisationsmetoden. Ovenstaaende maa paa ingen maade aendres uden forudgaaende forelaeggelse for og godkendelse hos den paagaeldende sundhedsmyndighed.

Hvert raavareparti, der anvendes til fremstilling af udstyret, skal betegnes med et partinummer, som producenten af udstyret registrerer sammen med numrene paa alle de partier af transfusionsudstyr, der fremstilles heraf, og resultaterne af alle undersoegelser vedroerende disse partier.

Der skal traeffes alle taenkelige forholdsregler for at mindske risikoen for udefra kommende kontaminering paa hvert trin i fremstillingsprocessen.

A. Fremstilling af ekstrakt og blindproeve

a) Til hele den nedenfor beskrevne proevning behoeves 1 250 cm2 plast (den samlede overflade paa begge sider af en plastfolieproeve paa 625 cm2). Proeven, hvorpaa der hverken maa vaere tryk eller etiket, skaeres eller klippes i stykker paa hoejst 10 cm2.

Laengden (L) af slanger beregnes i cm efter foelgende formel:

hvor D1 = indvendig diameter i cm,

D2 = udvendig diameter i cm.

Slangen skaeres eller klippes i ca. 10 cm lange stykker. Til ekstraktionen bruges der 10 ml vand for hver 50 cm2 overflade.

b) Plastfolie- eller -slangestykkerne anbringes i en beholder af borsilikatglas sammen med 250 ml pyrogenfrit destilleret vand, der er fremstillet i et effektivt destillationsapparat med kondensationsflader og opsamlingsroer af glas (1).

(1) Hvis plastmaterialet har vaeret i beroering med en antikoagulantoploesning anbringes stykkerne foerst i en lignende beholder med koldt destilleret vand (100 ml), og der rystes flere gange. Denne procedure gentages en gang.

Beholderens aabning daekkes med et omvendt baegerglas, og beholderen opvarmes dernaest i maettet damp ved 110 C i 30 minutter (autoklavering), hvorefter den hurtigt afkoeles til stuetemperatur og volumenet justeres til 250 ml med pyrogenfrit destilleret vand. Det har ingen betydning, om plastemnerne klaeber let sammen.

Varmefoelsomt plast kan opvarmes til 70 C i 72 timer i stedet for opvarmning i autoklav.

Der fremstilles en blindproeve paa samme maade, idet plastmaterialet udelades.

B. Undersoegelse af ekstraktet

1. Oxiderbart stof

Der overfoeres 20 ml ekstrakt til en Erlenmeyer-kolbe af borsilikatglas, og der tilsaettes 20 ml 2 mmol kaliumpermanganatoploesning og 1 ml 1 mol svovlsyre, hvorefter blandingen koges i tre minutter. Oploesningen afkoeles hurtigt, og der tilsaettes 0,1 g kaliumiodid og fem draaber stivelsesoploesning. Der titreres med en 10 mmol natriumthiosulfatoploesning.

Der udfoeres samtidig en blindtitrering.

Forskellen i den maengde thiosulfat, der medgaar til de to titreringer, overstiger ikke 2,00 ml af en 10 mmol natriumthiosulfatoploesning.

2. Chlorid

Ekstraktet opfylder en passende graensevaerditest for chlorid, som svarer til hoejst 11,2 ¶mol chlorid pr. liter.

3. Ammoniak

Ekstraktet opfylder en passende graensevaerditest for ammoniak, som svarer til hoejst 120 ¶mol NH3 pr. liter.

4. Phosphorsyre - Phosphat

Ekstraktet opfylder graensevaerditesten for phosphat.

Graensevaerditest for phosphat 25 ml af ekstraktet inddampes til naesten toerhed i en Kjeldahl-kolbe, remanensen afkoeles, der tilsaettes to draaber svovlsyre og 1 ml salpetersyre, og blandingen opvarmes, indtil der fremkommer en hvid roeg, hvorefter der afkoeles.

Remanensen afkoeles, og der fyldes op med vand til 25 ml.

10 ml af oploesningen overfoeres til en 25 ml titreringskolbe, og der tilsaettes 8 ml ammoniummobylatsvovlsyreoploesning og 2 ml af en frisk fremstillet ascorbinsyreoploesning med en koncentration paa 100 g pr. 1. Blandingen opvarmes paa vandbad ved 50 C i 30 minutter, afkoeles og fortyndes til 25 ml. Oploesningens groenne eller blaa farve er ikke kraftigere end den, der fremkommer ved behandling af 25 ml af blindproeven paa samme maade.

5. Aciditet eller basicitet

10 ml af ekstraktet farves ikke roedt ved tilsaetning af 2 draaber phenolphthaleinoploesning og kraever ikke mere end 0,4 ml af en 10 mmol natriumhydroxidoploesning for at blive farvet roedt. Naar farven er fjernet ved tilsaetning af 0,08 ml af en 10 mmol saltsyreoploesning, fremkalder tilsaetning af fem draaber methylroedtoploesning en roed eller orangeroed farve.

6. Inddampningsrest

100 ml af ekstraktet inddampes til toerhed paa vandbad og toerres ved 105 C til konstant vaegt. Remenensen vejer hoejst 5,0 mg.

7. Klarhed og farve

Ved betragtning af ekstraktet i sammenligning med blindproeven gennem et 5 cm tykt vaeskelag er det klart og farveloest.

8. Smag og lugt

Sammenlignet med blindproeven har ekstraktet hverken lugt eller smag.

9. Saerlige grundstoffer

Ekstraktet opfylder passende graensevaerditests for:

i) samtlige af grundstofferne arsen, chrom, kobber, bly, silicium, soelv og tin, svarende til 1 ¶g/g.

ii) cadmium, svarende til 0,1 ¶g/g.

10. Gloederest

Gloedning af 1,0 g af plastmaterialet til konstant vaegt giver en remanens paa hoejst 1 mg.

11. Tungmetaller

Gloederesten oploeses i den mindst mulige maengde 2 mol saltsyreoploesning, om noedvendigt ved opvarmning. En passende graensevaerditest for tungmetaller udfoeres. Plastmaterialet ligger under en graense paa 5 ¶g/g, beregnet som Pb.

II. BIOLOGISK UNDERSOEGELSE

1. Ved den foerste vurdering af plastmaterialer til fremstilling af beholdere samt blodtapnings- og -givningssaet skal der med ekstrakt A foretages en undersoegelse med hensyn til unoedig toksicitet, og med ekstrakt B foretages en saadan undersoegelse af hvert nyt parti af det godkendte materiale ; ved disse undersoegelser foelges den fremgangsmaade, der er beskrevet i den nationale farmakopé, eller en anden metode, der er godkendt af den nationale kontrolmyndighed.

(Ekstrakt A og B er defineret i anmaerkningen nedenfor).

2. Ved den foerste vurdering af plastmaterialer til fremstilling af beholdere samt blodtapnings- og -givningssaet skal der med ekstrakt A foretages en undersoegelse med hensyn til pyrogenfrihed, og med ekstrakt C foretages en saadan undersoegelse dels af hvert nyt parti af det godkendte materiale, dels ved den loebende kontrol af beholdere samt blodtapnings- og -givningssaet ; ved disse undersoegelser foelges den fremgangsmaade, der er beskrevet i den nationale farmakopé, eller en anden metode, der er godkendt af den nationale kontrolmyndighed.

Den nationale kontrolmyndighed fastsaetter hyppigheden af pyrogenkontrollen med ekstrakt C. (Ekstrakt A og C er defineret i anmaerkningen nedenfor).

3. Ved den foerste vurdering af plastmaterialer til fremstilling af beholdere samt blodtapnings- og -givningssaet og af hvert nyt parti af det godkendte materiale skal der foretages en undersoegelse med hensyn til haemolytiske virkninger i buffersystemer med det ekstrakt, der er beskrevet i afsnit I.A ovenfor. (Metode og acceptabel graense, jf. tillaeg til dette bilag).

4. Ved den foerste vurdering af plastmaterialer til fremstilling af beholdere til blod skal der foretages en undersoegelse af roede blodlegemers in vivooverlevelse. Undersoegelsen skal gentages, hvis der foretages aendringer i sammensaetningen af det godkendte materiale. (Foreslaaede metoder og acceptable graenser, jf. tillaeg til dette bilag).

Anmaerkning

Ekstrakt A

fremstilles ved til de i I.A beskrevne ekstrakt at saette pyrogenfrit natriumchlorid til en slutkoncentration paa 9 g pr. liter.

Ekstrakt B

Transfusionssaet. Et transfusionssaet fyldes saa meget som muligt med en steril pyrogenfri oploesning indeholdende 9 g natriumchlorid pr. liter. Enderne lukkes forsvarligt, og det fyldte saet nedsaenkes fuldstaendigt i vandbad ved 85 C i en time, hvorefter saettets indhold udtages.

Plastbeholder. Hvis beholderen er paafyldt antikoagulantoploesning, toemmes den og skylles med to gange 250 ml sterilt pyrogenfrit destilleret vand med en temperatur paa 20 C. Beholderen fyldes med 100 ml af en steril pyrogenfri oploesning indeholdende 9 g natriumchlorid pr. liter, lukkes forsvarligt og nedsaenkes i vandret stilling i vandbad ved 85 C i en time.

Beholderens indhold udtoemmes.

Ekstrakt C

Transfusionssaet. Gennem mindst 10 transfusionssaet ledes 40 ml steril pyrogenfri natriumchloridoploesning med en koncentration paa 9 g pr. liter ved stuetemperatur med en hastighed paa ca. 10 ml pr. minut. De samlede oploesninger undersoeges.

Tom plastbeholder. Mindst fire plastbeholdere fyldes med 100 ml af en steril pyrogenfri oploesning indeholdende 9,0 g natriumchlorid pr. liter gennem tilgangsslangerne ; efter ti minutter udtoemmes oploesningen gennem afgangsslangen.

Denne oploesning undersoeges.

Plastbeholder med antikoagulant (jf. afdeling III).

III. KRAV TIL ANTIKOAGULANTOPLOESNING I PLASTBEHOLDERE

Hver beholder skal indeholde antikoagulantoploesning i den maengde og med den sammensaetning, der paa etiketten er anfoert at svare til den maengde blod, der skal tappes.

Antikoagulantoploesningen og/eller de bestanddele, hvoraf den er fremstillet, skal opfylde kravene i det paagaeldende lands nationale farmakopé.

Antikoagulantoploesningen skal opfylde kravene i det paagaeldende lands nationale farmakopé med hensyn til tungmetalindhold, indhold af partikler, ugiftighed og indhold af pyrogener.

Tillaeg

BIOLOGISK UNDERSOEGELSE : GRAENSER OG METODER

A. Undersoegelse med hensyn til unoedig toksicitet

Jf. punkt II, 1 i bilaget ovenfor) : graenser som fastsat i den nationale farmakopé.

B. Undersoegelse med hensyn til pyrogenfrihed

(Jf. punkt II, 2 i bilaget ovenfor) : graense som fastsat i den nationale farmakopé.

C. Undersoegelse af haemolytiske virkninger i buffersystemer

(Jf. punkt II, 3 i bilaget ovenfor):

a) Graense:

En saltoploesning, der med hensyn til osmotisk virkning svarer til en oploesning indeholdende 5,0 g natriumchlorid pr. liter, maa ikke foere til mere end 10 % haemolyse, og haemolysen i en saltoploesning indeholdende 4,0 g pr. liter maa ikke afvige mere end 10 % fra haemolysen i den tilsvarende kontroloploesning.

b) Metode:

D. Undersoegelse af roede blodlegemers in vivo-overlevelse

(Jf. punkt I, 4 i bilaget ovenfor):

a) Graense:

Af erythrocytterne i humant fuldblod med ACD-antikoagulant, som har vaeret opbevaret ved 4 til 6 C i 21 dage, skal mindst 70 % have en overlevelsestid efter transfusion paa 24 timer. Den kan bestemmes efter en af de i b) nedenfor foreslaaede metoder.

b) Foreslaaede metoder:

1. Method of ISO/TC/76/WGD/3, App. E.

2. Ashby Technique - Ashby, W. The determination of the length of life of transfused blood corpuscules in man.J. Exp. Med. 29 : 267-82, 1919.Young L. E., Platzer, R. F. and Rafferty, J. A.

Differential agglutination of human erythrocytes.J. Lab. Clin. Med. 32 : 489-501, 1947.

3.The Gibson method - Gibson, J. G. and Scheitlin, W. A. A method employing radio-active chromium for assaying the viability of human erythrocytes returned to the circulation after refrigerated storage.J. Lab. Clin. Med. 46 : 679-88, 1955.

4. The strumia method - Strumia, M. M., Taylor, L., Sample A. B., Colwell, L. S. and Dugan, A. Uses and limitations of survival studies of erythrocytes tagged with Cr 51. Blood 10 : 429-40, 1955.

5. Cr51 - l125 technique - Button, L. N., Gibson, J. G. and Walter, C. W. Simultaneous determination of the volume of red cells and plasma for survival studies of stored blood. Transfusion 5 : 143-148, 1965.

6. Recommended Method for Radioisotope Red Cell Survival Studies Brit. J. Haemat. 21 : 241, 1971.

Udfaerdiget i Strassbourg, den 19. april 1982.

Franz KARASEK

Generalsekretaer

Bekraeftes at vaere en noejagtig genpart af den franske og engelske original, der er deponeret i Europaraadets arkiver.

Erik HARREMOES

Europaraadets direktoer for juridiske spoergsmaal