1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 1
Dette dokument er et dokumentationsredskab, og institutionerne påtager sig intet ansvar herfor
►B RÅDETS DIREKTIV
af 22. november 1973
om harmonisering af medlemsstaternes lovgivning om kontrolmetoderne for de anionaktive over-
fladeaktive stoffers biologiske nedbrydningsevne
(73/405/EØF)
(EFT L 347 af 17.12.1973, s. 53)
Ændret ved:
Tidende
nr. side dato
►M1 Rådets direktiv af 31. marts 1982 (82/243/EØF) L 109 18 22.4.1982
▼B
RÅDETS DIREKTIV
af 22. november 1973
om harmonisering af medlemsstaternes lovgivning om kontrolmeto-
derne for de anionaktive overfladeaktive stoffers biologiske
nedbrydningsevne
(73/405/EØF)
RÅDET FOR DE EUROPÆISKE FÆLLESSKABER HAR —
under henvisning til traktaten om oprettelse af Det europæiske økono-
miske Fællesskab, særlig artikel 100,
under henvisning til Rådets direktiv af 22. november 1973 om harmo-
nisering af medlemsstaternes lovgivning om vaske- ogrengøringsmidler (
1), særlig artikel 4,
under henvisning til forslag fra Kommissionen,
under henvisning til udtalelse fra Europa-Parlamentet (2),
under henvisning til udtalelse fra Det økonomiske og sociale
Udvalg (3), og
ud fra følgende betragtninger:
For at tillade medlemsstaterne at måle størrelsen af de anionaktive
overfladeaktive stoffers biologiske nedbrydningsevne er det belejligt athenvise til kontrolmetoder, som allerede bliver benyttet til dette i vissemedlemsstater. I tilfælde af indvendinger er det på den anden sidenødvendigt, at kontrollen af den biologiske nedbrydningsevne bliver
foretaget efter en fælles referencemetode;
således bør man, som foreskrevet i artikel 4 i direktiv af 22. november
1973, fastsætte passende tolerancer på målingen af den biologiskenedbrydningsevne for at sikre sig mod kontrolmetodernes usikkerhed,som kunne føre til beslutninger om kassering, som kunne have betyde-
lige økonomiske følger; en beslutning om kassering skal således ikke
tages, medmindre en analyse påviser en størrelse af biologisk nedbryd-ningsevne på mindre end 80% —
UDSTEDT FØLGENDE DIREKTIV:
Artikel 1
Dette direktiv angår kontrolmetoder for de anionaktive overfladeaktive
stoffers biologiske nedbrydningsevnei ►M1vaske- og rengørings-
midler således som disse er omhandlet i artikel 1 i direktiv 73/404/EØF.◄
Artikel 2
I overensstemmelse med bestemmelserne i artikel 4 i direktiv 73/404/
EØF forbyder medlemsstaterne markedsføring og anvendelse på deresområde af et vaske- og rengøringsmiddel såfremt måling af graden afbiologisk nedbrydelighed for de anioniske overfladeaktive stoffer inde-holdt i dette vaske- og rengøringsmiddel giver et resultat på mindre end
80%, idet denne måling foretages efter en af følgende metoder:
— OECD-metoden, offentliggjort i OECDs tekniske rapport af 11. juni
1976 om »Proposed method for the determination of the biodegra-dability of surfactants used in synthetic detergents«;
— metode gældende iForbundsrepubli kken Tyskland, stadfæstet ved
»Verordnung über die Abbaubarkeit anionischer und nichtanioni-scher grenzflächenakuver Stoffe in Wasch- und1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 2
(1) Se side 51 i denne Tidende (SIC! EFT nr. L 347 af 17. 12. 1973, s. 51).
(2) EFT nr. C 10 af 5. 2. 1972, s. 29.
(3) EFT nr. C 89 af 23. 8. 1972, s. 13.▼M1
▼M1
Reinigungsmittel«af 30. januar 1977, offentliggjort i »Bundesge-
setzblatt«, 1977, 1. del, s. 244, som den foreligger i forordningenom ændring af denne forordning af 18. juni 1980, offentliggjort i
»Bundesgesetzblatt«, 1980, 1. del, side 706;
— metode gældende iFrankri g, stadfæstet ved arrété af 28. december
1977 offentliggjort i »Journal Officiel de la République Française«
af 18. januar 1978, s. 514-515, og forsøgsnorm T 73-60, juni1981,offentliggjort af Det franske Standardiseringsråd (AFNOR);
— metode gældende iDet Forenede Kongeri ge, benævnt »Porous Pot
Test« og beskrevet itekni sk rapport nr. 70 (1978) fra »WaterResearch Centre«.
Artikel 3
Ved anvendelse af fremgangsmåden i artikel 5, stk. 2, i direktiv 73/
404/EØF fremsættes laboratoriets erklæring med hensyn til anioniskeoverfladeaktive stoffer på grundlag af den referencemetode (kontrol-
prøve), der er beskrevet i bilaget til dette direktiv.
Artikel 3a
De ændringer, der er nødvendige for at tilpasse bilagene til den
tekniske udvikling, vedtages i overensstemmelse med proceduren i
artikel 7b i direktiv 73/404/EØF.
Artikel 4
1. Medlemsstaterne sætter de nødvendige administrative eller ved
lov fastsatte bestemmelser i kraft, for at efterkomme dette direktivinden for 18 måneder fra dets meddelelse og underretter omgåendeKommissionen herom.
2. Medlemsstaterne drager omsorg for at meddele Kommissionen
ordlyden af vigtige bestemmelser i national ret, som de vedtager inden
for rammerne af dette direktiv.
Artikel 5
Dette direktiv er rettet til medlemsstaterne.1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 3
▼B
▼M1
BILAG
BESTEMMELSE AF ANIONISKE OVERFLADEAKTIVE STOFFERS
BIOLOGISKENEDBRYDELIGHED
Referencemetode (kontrolprøve)
KAPITEL 1
1.1.Definition
Ved anioniske overfladeaktive stoffer forstås i dette direktiv de overfla-
deaktive stoffer, der efter passage gennem kation- og anionbyttere
adskilles ved fraktionseluering og bestemmes som methylenblåt aktivt
stof (MBAS) ifølge den analytiske fremgangsmåde, der er beskrevet i
kapitel 3.
1.2.Nødvendigt udstyr
Målemetoden er baseret på anvendelse af et renseanlæg med aktiveret
slam, der er skematiseret i fig. 1 og nærmere beskrevet i fig. 2. Udstyret
består af en beholder A til opbevaring af det kunstige spildevand, en
doseringspumpe B, en beluftningsbeholder C, en sedimentationsbeholder
D, en airliftpumpe E til returløb af det aktiverede slam og en beholder F
til opsamling af det behandlede spildevand. Beholderne A og F skal
enten være af glas eller af et egnet plastmateriale og rumme mindst 24
liter. Pumpen B skal sikre en konstant tilførsel af kunstigt spildevand til
beluftningsbeholderen; under normale anvendelsesforhold skal denne
beholder indeholde 3 liter blanding. Et sintret glas G, der benyttes til
beluftni ng, er anbragt ibeholderen C øverst idennes nedre kegle. Den
luftmængde, der blæses ind af beluftningsanordningen, skal registreres
ved hjælp af et flowmeter H.
1.3.Kunstigt spildevand
Til udførelse af denne test anvendes kunstigt spildevand.
Der opløses pr. liter vandværksvand:— 160 mg pepton,
— 110 mg kødekstrakt,
— 30 mg urinstof CO (NH
2)2,
— 7 mg natriumchlorid NaCI,— 4 mg calciumchlorid (CaCl
2.2H2O),
— 2 mg magnesiumsulfat MgSQ4.7H2O),
— 28 mg dikaliumhydrogenphosphat K2HPO4), og
— 20 ± 2 mg MBAS.
MBAS ekstraheres fra det produkt, der skal undersøges, ifølge den i
kapitel 2 angivne metode. Det kunstige spildevand skal fremstilles hver
dag.
1.4.Tilberedning af prøver
1.4.1. Ikke-sammensatte overflade aktive stoffer kan undersøges uden forbe-
handling. MBAS-indholdet må bestemmes, for at fremstillingen af det
kunstige spildevand (1.3) kan finde sted.
1.4.2. Sammensatte produkter analyseres for MBAS-og sæbeindhold. De
underkastes en alkoholisk ekstraktion og fraseparering af MBAS (se
kapitel 2). Ekstraktets indhold af MBAS må kendes, for at det kunstige
spildevand kan fremstilles.
1.5.Anlæggets virkemåde
Først fylder man beluftningsbeholderen C og sedimentationsbeholderen
D med kunstigt spildevand. Sedimentationsbeholderen D skal fastgøres
i en såden højde, at beluftningsbeholderen C indeholder 3 liter. Podning
foretages ved at tilsætte 3 ml sekundært afløb af en god kvalitet, nylig
opsamlet fra et rensningsanlæg, der fortrinsvis behandler husspildevand.
Afløbsprøven må opbevares under aerobe betingelser i perioden fra
udtagningen til anvendelsen. Derefter sætter man lufttilførselsanord-
ningen G, airliftpumpen E og doseringspumpen B i gang. Det kunstige
spildevand må passere gennem beluftningsbeholderen C med en
hastighed på 1 liter pr. time svarende til en gennemsnitlig opholdstid
på 3 timer.1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 4
▼M1
Beluftningen justeres på en sådan måde, at indholdet i beholderen C
konstant holdes opslemmet, og at koncentrationen af opløst ilt er mindst
2 mg/l. Skumdannelse forhindres med passende midler; man må dog
ikke anvende skumdæmpningsmidler, der kan hæmme det aktiverede
slam eller som indeholder MBAS. Airliftpumpen E justeres på en
sådan måde, at der opretholdes en kontinuerlig og regelmæssig recirku-
lation af aktiveret slam fra sedimentationsbeholderen D til
beluftningsbeholderen C. Slam, der har samlet sig øverst i beluftnings-
beholderen C, på bunden af sedimentationsbeholderen D eller i
slangerne, skal igen bringes i cirkulation mindst én gang daglig ved
hjælp af børstning eller en anden egnet fremgangsmåde. Såfremt
slammet ikke sætter sig, kan man øge sedimentationsevnen ved at
tilsætte 2 ml portioner af en 5% ferrichloridopløsning, om nødvendigt
flere gange.
Overløbet fra sedimentationsbeholderen D opsamles i beholderen F i
løbet af 24 timer; derefter udtages en prøve efter en omhyggelig opblan-
ding. Beholderen F renses herefter omhyggeligt.
1.6.Kontrol af måleudstyr
Det kunstige spildevands indhold af MBAS (udtrykt i mg/l) bestemmes
umiddelbart før anvendelsen.
Indholdet af MBAS (udtrykt img/l) ioverløbet, der er opsamlet iløbet
af 24 timer i beholderen F, skal analyseres efter samme metode umid-
delbart efter opsamlingen; hvis dette ikke er muligt, må prøverne
opbevares, så de ikke nedbrydes, helst ved frysning. Koncentrationen
skal måles med en nøjagtighed på 0,1 mg MBAS pr.1.
For at kontrollere, at processen forløber tilfredsstillende, måler man
mindst to gange om ugen det kemiske iltforbrug (COD) eller koncentra-
tionen af opløst organisk kulstof (DOC) i det gennem glasfiber filtrerede
overløb, der er opsamlet i beholderen F og i det filtrerede kunstige spil-
devand ibeholderen A.
Produktionen af COD og DOC vil blive konstant, når en nogenlunde
regelmæssig nedbrydning af MBAS opnås, det vil sige ved slutningen
af indkøringsfasen angivet i fig. 3.
Indholdet af uorganisk tørstof i det aktiverede slam i beluftningstanken
skal bestemmes to gange om ugen (udtrykt ig/l). Hvi s dette er mere end
2,5 g/l, må den overskydende mængde aktiveret slam fjernes.
Bionedbrydningstesten udføres ved stuetemperatur, der skal være nogen-
lunde konstant og holdes mellem 292 og 297 K (19-24 C).
1.7.Beregning af den biologiske nedbrydelighed
Nedbrydningsgraden af MBAS udtrykt i procent skal beregnes dagligt
på grundlag af MBAS-indholdet i det kunstige spildevand (udtrykt i
mg/l) og idet ti lsvarende overløb opsamlet ibeholderen F. De nedbryd-
ningstal, man får, skal fremstilles grafisk som vist i fig. 3.
MBAS' biologiske nedbrydelighed skal beregnes som det aritmetiske
gennemsnit af de tal, der er opnået i løbet af de 21 dage, som følger
efter indkøringsfasen. Inden for de 21 dage skal nedbrydningen have
været regelmæssig, og anlægget skal have virket problemfrit. Indkø-ringsfasen må under ingen omstændigheder overstige 6 uger.
De daglige værdier for nedbrydeligheden beregnes med en nøjagtighed
på 0,1%, men det endelige resultat afrundes til nærmeste hele procenttal.
I visse tilfælde kan prøveudtagningshyppigheden reduceres, men til
beregning af gennemsnittet skal dog benyttes mindst 14 resultater,
opnået i løbet af de 21 dage, der følger efter indkøringsfasen.
KAPITEL 2
FORBEHANDLING AF DE PRODUKTER, DER SKAL UNDERSØGES
2.1.Indledende bemærkninger
2.1.1.Behandling af prøvene
Anioniske overfladeaktive stoffer og sammensatte vaske- og rengørings-
midler behandles forud for bestemmelsen af den biologiske
nedbrydelighed ved kontroltesten, som følger:1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 5
▼M1
Produkt Behandling
Anioniske overfladeaktive
stofferIngen
Sammensatte vaske- og
rengøringsmidlerAlkoholisk ekstraktion efterfulgt af frase-
parering af de anioniske overfladeaktive
stoffer ved ionbytning
Formålet med den alkoholiske ekstraktion er at fjerne de uopløselige og
uorganiske bestanddele af handelsprodukter, da de under visse omstæn-
digheder kan virke forstyrrende på nedbrydningstesten.
2.1.2.Ionbytningsproceduren
Isolering og fraseparering af anioniske overfladeaktive stoffer fra sæbe,
nonioniske og kationiske overfladeaktive stoffer er nødvendig for at
sikre en nøjagtig bestemmelse af den biologiske nedbrydelighed.
Dette opnås ved en ionbytningsteknik, hvor der anvendes et makroporøst
ionbyttermateriale og elueringsvæsker egnede til fraktioneringseluering.
Man kan således isolere sæbe, anioniske og nonioniske overfladeaktive
stoffer ved én proces.
2.1.3.Analytisk kontrol
Efter homogenisering bestemmes koncentrationen af anioniske overfla-
deaktive stoffer i vaske- eller rengøringsmidlet i overensstemmelse med
analysemetoderne til bestemmelse af MBAS. Sæbeindholdet bestemmesved en passende analytisk metode. Disse analyser af produktet er
nødvendige for at beregne, hvor store mængder, det er nødvendigt at
anvende for at fremstille fraktionerne til prøvning af den biologiske
nedbrydelighed.
En kvantitativ ekstraktion er ikke nødvendig; man bør imidlertid tilsigte
at få mindst 80% af de anioniske overfladeaktive stoffer ekstraheret.
Normalt opnås 90% eller mere.
2.2.Princip
Fra en homogen prøve (pulver, pasta eller tørret væske) fremstilles et
ethanolekstrakt, der vil indeholde de overfladeaktive stoffer, sæbe og
andre alkoholopløselige bestanddele af prøven af vaske- eller rengø-
ringsmidlet.
Ethanolekstraktet inddampes til tørhed, opløses i en isopropanol/vand-
blanding, og den opnåede opløsning sendes gennem en kombineret
stærkt sur kationbytter/makroporøs anionbytter, der er opvarmet til
323 K (50 ºC). Denne temperatur er nødvendig for at undgå udfældning
af fede syrer idet sure mi ljø.
De nonioniske overfladeaktive stoffer forbliver i gennemløbet.Sæbens fedtsyrer adskilles ved eluering med ethanol indeholdende CO
2.
De anioniske overfladeaktive stoffer fås derefter som ammoniumsalte
ved eluering med en vandig isopropanolopløsning af ammoniumbicar-
bonat. Disse ammoniumsalte anvendes til bionedbrydelighedstesten.
Kationiske overfladeaktive stoffer, der kan forstyrre bionedbrydeligheds-
testen og de analytiske procedurer, fjernes af kationbytteren, der er
placeret oven på anionbytteren.
2.3.Kemikalier og udstyr
2.3.1. Dejoniseret vand.
2.3.2. Ethanol, 95% (v/v) (C2H5OH) (tilladt denatureringsmiddel: methylethyl-
keton eller methanol).
2.3.3. Isopropanol/vand-blanding (50/50 v/v):
— rumfangsdele isopropanol (CH3CHOH.CH3), og
— 50 rumfangsdele vand (2.3.1.).
2.3.4. Opløsning af kuldioxid i vand (CO2):
under anvendelse af et rør med indbygget glasfilter ledes kuldioxid
(CO2) gennem ethanolen (2.3.2) i 10 minutter. Anvend kun frisklavede
opløsninger.
2.3.5. Ammoniumbicarbonatopløsning (60/40 v/v):1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 6
▼M1
0,3 mol NH4HCO3i 1 000 ml af en isopropanol/vand-blanding, der
består af 60 rumfangsdele isopropanol og 40 rumfangsdele vand (2.3.1).
2.3.6. Kationbytter (KAT) stærkt sur, resistent mod alkohol (50-100 mesh).2.3.7. Anionbytter (AAT), makroporøs, Merck Lewatit MP 7080 (70-150 mesh)
eller tilsvarende.
2.3.8. Saltsyre, 10% HCl (w/w).2.3.9. 2 000 ml rundbundet kolbe med slib og tilbagesvaler.2.3.10. 90 mm (diameter) sugefilterholder (som kan opvarmes) til papirfiltre.2.3.11. 2 000 ml sugekolbe.2.3.12. Ionbytterkolonne med varmekappe og hane:Indre diameter 60 mm og
indre højde 450 mm (fig. 4).
2.3.13. Vandbad2.3.14. Vacuumtørreovn.2.3.15. Termostat.2.3.16. Rotationsfordamper.2.4.Fremstilling af ekstrakt og fraseparering af anioniske overfladeak-
tive stoffer
2.4.1.Fremstilling af ekstrakt
Den mængde overfladeaktive stoffer, der er nødvendig til nedbrydnings-
testen, er ca. 50 g MBAS.
Normalt vil den mængde af produktet, der skal ekstraheres, ikke over-
stige 1 000 g, men det kan være nødvendigt at ekstrahere yderligere
prøvemængder.
Af praktiske grunde vil der i de fleste tilfælde være tale om højst 5 000 g
ved fremstilling af ekstrakter til nedbrydningstesten.
Erfaringen har vist, at det er en fordel at foretage et antal mindre
ekstraktioner fremfor en større ekstraktion. De opgivne ionbytteregen-
skaber er beregnet på en arbeidskapacitet på 600-700 m mol
overfladeaktive stoffer og sæbe.
2.4.2.Isolering af alkoholopløselige bestanddele
Til 1 250 ml ethanol sættes 250 g af det vaske- eller rengøringsmiddel,
der skal analyseres. Blandingen opvarmes til kogning, og der koges med
omrøring og tilbagesvaling i 1 time. Den varme alkoholopløsning
hældes over på et iforvejen ti l 323 K (50 ºC) opvarmet groft poret suge-
filter, mens der suges kraftigt. Kolben og sugefiltret vaskes med ca.
200 ml varm ethanol. Filtratet og vaskevæsken opsamles i en sugekolbe.
I tilfælde af, at det er en pasta eller et flydende produkt, der skal analy-
seres, sikres det, at der ikke er mere end 55 g anioniske overfladeaktive
stoffer og 35 g sæbe i prøven. Denne vejede prøve inddampes til tørhed.
Remanensen opløses i2 000 ml ethanol og behandles som beskrevet
ovenfor.
I tilfælde af pulvere med lav rumvægt (< 300 g/l) anbefales det at øge
ethanolmængden til forholdet 20:1.
Det ethanoliske filtrat inddampes til tørhed, helst ved hjælp af en rota-
tionsfordamper. Denne operationen gentages, hvis en større mængde
ekstrakt kræves. Remanensen opløses i5 000 ml i sopropanol/vand-blan-
ding.
2.4.3.Fremstilling af ionbytterkolonner
Kationbytterkolonne600 ml kationbytter (2.3.6.) hældes op i et 3 000 ml bægerglas og
dækkes ved tilsætning af 2 000 ml saltsyre (2.3.8). Blandingen henstår
i mindst 2 timer under lejlighedsvis omrøring. Syren fradekanteres, og
ionbyttermaterialet overføres til kolonnen (2.3.12) ved hjælp af deioni-
seret vand. Kolonnen bør være forsynet med en prop af glasuld.
Kolonnen udvaskes med deioniseret vand med en væskehastighed på
10-30 ml/min., indtil eluatet er chloridfrit. Vandet fortrænges ved hjælp
af 2 000 ml isopropanol/ vand-blanding (2.3.3), der tilsættes med en
hastighed på 10-30 ml/minutter. lonbytterkolonnen er nu klar.
Anionbytterkolonne1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 7
▼M1
600 ml anionbytter (2.3.7) hældes op i et 3 000 ml bægerglas og dækkes
ved tilsætning af 2 000 ml deioniseret vand. lonbytteren henstår til
kvældning i mindst 2 timer. lonbyttermaterialet overføres til kolonnen
ved hjælp af deioniseret vand. Kolonnen bør være forsynet med en
prop af glasuld.
Kolonnen udvaskes med 0,3 M ammoniumhydrogencarbonatopløsning
(2.3.5), indtil eluatet er chloridfrit. Dette kræver ca. 5 000 ml opløsning.
Der udvaskses igen med 2 000 ml deioniseret vand. Vandet fortrænges
med 2 000 ml isopropanol/vand-blanding (2.3.3) med en hastighed på
10-30 ml/min. lonbytterkolonnen er nu på OH-form og klar til brug.
2.4.4.Ionbytningsproceduren
Ionbytterkolonnerne forbindes således, at kationbytterkolonnen er
anbragt oven på anionbytterkolonnen. Kolonnerne opvarmes til 323 K
(50 ºC) ved hjælp af en termostat. 5 000 ml af opløsningen, der er frem-
stillet under (2.4.2), opvarmes til 333 K (60 ºC) og sendes gennem
ionbytterkolonnerne med en hastighed på 20 ml/min. Kolonnerne
udvaskes med 1 000 ml varm isopropanol/vand-blanding (2.3.3).
For at isolere de anioniske overfladeaktive stoffer (MBAS) adskilles
KAT-kolonnen fra AAT-kolonnen. Ved anvendelse af 5 000 ml
ethanol/CO2opløsning (323 K (50 ºC) (2.3.4) elueres sæbens fedtsyrer
ud af AAT-kolonnen. Eluatet bortkastes.
Derefter elueres MBAS ud af AAT-kolonnen med 5 000 ml ammonium-
bicarbonatopløsning (2.3.3), og eluatet inddampes til tørhed på et
dampbad eller en rotationsfordamper. Remanensen indeholder MBAS
(som ammoniumsalt) og muligvis ikke-overfladeaktive anioner, som
ikke har nogen skadelig indvirkning på bionedbrydelighedstesten. Der
tilsættes deioniseret vand, indtil et defineret rumfang er opnået, og
MBAS-indholdet bestemmes ifølge kapitel 3 i en prøve. Opløsningen
anvendes som en standardopløsning af anioniske overfladeaktive stoffer
til bionedbrydelighedstesten. Opløsningen skal opbevares ved en tempe-
ratur på under 278 K (50 ºC).
2.4.5.Regenering af ionbyttermaterialet
Kationbytteren bortkastes efter brug.Anionbyttermaterialet kan regenereres ved at sende yderligere ammoni-
umbicarbonatopløsning (2.3.5) gennem kolonnen med en
væskehastighed på ca. 10 ml/min., indtil eluatet er fri for anioniske
overfladeaktive stoffer (methylenblåt test). For at vaske sendes derefter
2 000 ml isopropanol/vand-blanding (2.3.3) gennem anionbytteren.
Anionbytteren er herefter igen klar til brug.
KAPITEL 3
BESTEMMELSE AF ANIONISKE OVERFLADEAKTIVE STOFFER I
FORBINDELSE MED BIONEDBRYDELIGHEDSUNDERSØGELSE
3.1.Princip
Metoden er baseret på det faktum, at det kationiske farvestof methy-
lenblåt danner blå salte med anioniske overfladeaktive stoffer, som kan
ekstraheres med chloroform. For at eliminere interferenser gennemføres
ekstraktionen først fra en alkalisk opløsning, hvorefter ekstraktet rystes
med en sur opløsning af methylenblåt. Absorbansen af den udskilte
organiske fast måles fotometrisk ved bølgelængden med maksimal
absorption, 650 nm.
3.2.Reagenser og udstyr
3.2.1. Bufferopløsning, pH = 10:
24 g natriumbicarbonat (NaHCO
3) P.A. og 27 g vandfrinatri umcarbonat
(Na2CO3) P.A. opløses i deioniseret vand og fortyndes til 1 000 ml.
3.2.2. Neutral opløsning af methylenblåt:
0,35 g methylenblåt P.A. opløses i deioniseret vand og fortyndes til
1 000 ml. Opløsningen tilberedes mindst 24 timer før brug. Absorbansen
af den klare chloroformfase, målt i forhold til chloroform, må ikke over-
stige 0,015 pr. cm lagtykkelse ved 650 nm.
3.2.3. Sur opløsning af methylenblåt:
0,35 g methylenblåt P.A. opløses i 500 ml deioniseret vand og blandes
med 6,5 ml H2SO4(d = 1,84 g/ml). Der fortyndes med deioniseret vand
til 1 000 ml. Opløsningen tilberedes mindst 24 timer før brug. Absor-1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 8
▼M1
bansen af den klare chloroformfase, målt iforhold ti l chloroform, må
ikke overstige 0,015 pr. cm lagtykkelse ved 650 nm.
3.2.4. Chloroform (trichlormethan) CHCl3P.A., frisk destilleret.
3.2.5. Dodecylbenzensulfonsyremethylester.
3.2.6. Kaliumhydroxidopløsning i ethanol, KOH 0,1 M.3.2.7. Ren ethanol, C
2H5OH.
3.2.8. Svovlsyre, H2SO4) 0,5 M.
3.2.9. Phenolphtaleinopløsning:
1 g phenolphtalein opløses i 50 ml ethanol og tilsættes 50 ml deioniseret
vand under stadig omrøring. Eventuelt bundfald frafiltreres.
3.2.10. Saltsyre imethanol: 250 ml koncentreret saltsyre P.A. og 750 ml
methanol.
3.2.11. Skilletragt, 250 ml.
3.2.12. Målekolbe, 50 ml.
3.2.13. Målekolbe, 500 ml.3.2.14. Målekolbe, 1 000 ml.3.2.15. Rundbundet kolbe med slib og tilbageløbssvaler, 250 ml; granulat til
hindring af stødkogning.
3.2.16. pH-meter.3.2.17. Fotometer til målinger ved 650 nm, med kuvetter på 1-5 cm.
3.2.18. Kvalitativt filtrerpapir.
3.3.Fremgangsmåde
Analyseprøverne må ikke udtages gennem et skumlag.Efter grundig rensning med vand skylles det apparatur, der anvendes til
analysen, grundigt med saltsyre i methanol (3.2.10) og derefter med
deioniseret vand inden brug.
Filtrer tilløb og afløb fra det aktiverede slam anlæg umiddelbart efter
prøveudtagning. De første 100 ml af filtraterne bortkastes.
En afmålt prøvemængde, om nødvendigt neutraliseret, anbringes i en
250 ml skilletragt (3.2.11). Prøvemængden bør indeholde mellem 20 og
150 mg MBAS. Med et MBAS-indhold i den lavere ende kan anvendes
op til 100 ml af prøven. Anvendes mindre end 100 ml, fortyndes til
100 ml med deioniseret vand. Der tilsættes 10 ml af bufferopløsning
(3.2.1), 5 ml neutral opløsning af methylenblåt (3.2.2) og 15 ml chloro-
form eller trichloromethan (3.2.4). Blandingen rystes regelmæssigt og
ikke for voldsomt i et minut. Efter faseadskillelse overføres chlorofor-
mlaget til en anden skilletragt indeholdende 110 ml deioniseret vand
og 5 ml sur opløsning af methylenblåt (3.2.3). Blandingen rystes i et
minut. Chloroformlaget hældes gennem en chloroformvædet bomulds-
fi lter, der iforvejen er renset ialkohol, over ien målekolbe (3.2.12).
De alkaliske og sure opløsninger ekstraheres tre gange, idet der
anvendes 10 ml chloroform til den anden og tredje ekstraktion. De
kombinerede chloroformekstrakter filtreres gennem samme bomuldsfilter
og fortyndes op til mærket i 50 ml kolben (3.2.12) med den chloroform,
der er benyttet til rensning af bomulden. Chloroformopløsningens absor-
bans måles med et fotometer ved 650 nm i1-5 cm kuvetter iforhold ti l
chloroform. Under hele proceduren foretages en blindværdibestemmelse.
3.4.Kalibreringskurve
Der tilberedes en kalibreringsopløsning fra standardopløsningen af dode-
cylbenzensulfonsyremethylester (tetrapropylen type molekylevægt 340)
efter forsæbning til kaliumsaltet. Indholdet af MBAS beregnes som
natriumdodecylbenzensulfonat (molekylevægt 348).
Der afvejes 400-450 mg dodecylbenzensulfonsyremethylester (3.2.5)
med 0,1 mg nøjagtighed i en rundbundet kolbe og tilsættes 50 ml
kaliumhydroxidopløsning i ethanol (3.2.6) og noget granulat til hindring
af stødkogning. Tilbageløbssvaleren anbringes, og der koges i en time.
Efter afkøling vaskes svaleren og samleleddet af glas med ca. 30 ml
ethanol, og dette ethanol tilsættes til kolbens indhold. Opløsningen
titreres med svovlsyre med phenolphtalein som indikator, indtil denne
bliver farveløs. Opløsningen overføres til en 1 000 ml målekolbe
(3.2.14), fortyndes op til mærket med deioniseret vand og blandes.1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 9
▼M1
En del af denne stamopløsning fortyndes derefter yderligere. Der
udtages 25 ml, som overføres til en 500 ml målekolbe (3.2.13),
fortyndes til mærket med deioniseret vand og blandes.
Denne standardopløsning indeholderE/C21;023
20 000mg MBAS pr. ml, hvor
E er prøvens vægt img.
Med henblik på fremstilling af kalibreringskurven udtages 1, 2, 4, 6 og
8 ml af standardopløsningen og fortyndes til 100 ml med deioniseret
vand. Derefter fortsættes som under 3.3, herunder en blindprøvebestem-
melse.
3.5.Beregning af resultater
Indholdet af anioniske overflade aktive stoffer i prøven som MBAS
aflæses af kalibreringskurven (3.4). MBAS-indholdet i prøven er givet
ved:
mg MBAS /C21000
V= MBAS mg/l
hvor V = volumen iml af den anvendte prøve.
Resultaterne udtrykkes som natriumdodecylbenzensulfonat (molekyle-
vægt 348).
3.6.Angivelse af resultater
Resultatet udtrykkes som mg MBAS/l med en nøjagtighed på 0,1.1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 10
▼M1
Fig. 1
A: En beholder til opvarmning af det kunstige spildevand
B: Doseringspumpe
C: Udluftningsbeholder (3 l indhold)
D: SedimentationsbeholderE: AirliftpumpeF: Beholder til opsamling af overløb
G: Sintret glas til beluftning
H: Flowmeter1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 11
Fig. 2
▼M11973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 12
Fig. 3
Beregning af den biologiske nedbrydelighed — Kontrolprøve
▼M11973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 13
▼M1
Fig. 4
Ionbytterkolonne med varmekappe
(Alle mål er imm)
1973L0405 — DA — 14.04.1982 — 001.001 — 14