cyanic-selkie/wikianc huggingface dataset:
Gran Buenos Aires
Decreto-llei 70/48
Anque'l conceutu apaez muncho depués, el decretu/llei 70/48 define aquellos conceyos pertenecientes alministrativamente a la Provincia, lo que constitúi puramente'l Conurbano bonaerense, anque contempla tamién a la Ciudá. Según el mesmu denominar oficialmente como Gran Buenos Aires al área urbano y rural de los siguientes 14 partíos cercanos a la ciudá de Buenos Aires:
Dichu decretu foi promulgáu'l 8 de xineru de 1948, mientres la gobernación de Domingo Mercante, ante la necesidá de determinar les llendes del área qu'arrodiaba a la ciudá de Buenos Aires, cola cual pretendía establecese un Plan Regulador acorde a los criterios utilizaos pol urbanismu modernu.
Decretu 760/79
Sancionáu'l 20 d'abril de 1979. redefinió los partíos, según la nueva distribución operada nel tiempu, tresformando en 19 a los 14 orixinales.
Llei 10806
Promulgada'l 19 de setiembre de 1989, col propósitu d'establecer los requisitos pa la declaración de ciudá a pueblos o llocalidaes de la Provincia. Llista de la mesma los partíos del conurbano y les diferencia claramente del Gran La Plata y reconoz los mesmos 19 conceyos como integrantes del conurbano bonaerense.
Llei 11247
Promulgada'l 26 de mayu de 1992, creó'l llamáu "Fondu del Conurbano Bonaerense", destináu a la realización d'obres y aplicación de distintos programes sociales nos partíos del conurbano, aumentando estos de 19 a 23 conceyos.
Amiéstense:
Llei 11746
Incorpora la nueva distribución establecida en 1994, a partir de la creación de nuevos partíos sobre los esistentes ya incorpora otros más al conurbano, que pasa a tar integráu por 29 conceyos.
Llei 13473/06
Promulgada'l 1 de xunu de 2006, delimita el Conurbano bonaerense nun área territorial entendida por 33 conceyos arrexuntaos en 8 distintes zones:
Criteriu demográficu
En 1947, mientres el Cuartu Censu Xeneral de la Nación, la Direición d'Estadístiques introdució per primer vegada nes sos publicaciones el términu Gran Buenos Aires pa referise a una nueva unidá censal integrada pola Capital Federal y los partíos de la provincia de Buenos Aires que la arrodien. Anguaño'l Institutu Nacional d'Estadístiques y Censos (Indec) define demográficamente los términos rellacionaos col Gran Buenos Aires de la siguiente manera:
Conurbano bonaerense
Llamaos Partíos del Gran Buenos Aires pol Indec, ye un grupu integráu históricamente por 24 conceyos qu'arrodien a la ciudá de Buenos Aires, conocíos como Conurbano bonaerense. Dientro d'él estremen dos subgrupos:
Gran Buenos Aires (GBA)
thumb|N'azul, el Gran Buenos Aires: la ciudá de Buenos Aires (o Capital Federal) + 24 partíos del conurbano. El Indec define al Gran Buenos Aires (GBA) puramente dichu como l'área de 3.833 km² integrada pela ciudá de Buenos Aires más los partíos del Gran Buenos Aires —nel sentíu alministrativu, esto ye, los 24 partíos completos— que la arrodien. El términu ye utilizáu tantu nel área económica como social, salvu bien contaes esceiciones.
El Indec tamién utiliza la espresión Rexón Gran Buenos Aires (Rexón GBA), nes sos publicaciones, pa definir a la mesma área. Esta reemplazó definitivamente, a partir d'agostu de 2003, a la espresión Rexón Metropolitana pa referise a dicha área de la ciudá más 24 partíos, polo que pueden atopase testos de la so autoría con esta última espresión pero que nun se refieren a la Rexón Metropolitana de Buenos Aires (RMBA) en sentíu estrictu.
Tremáu Gran Buenos Aires (AGBA)
thumb|N'azul, Tremáu Gran Buenos Aires. thumb|300px|L'[[avenida General Paz ye una autopista de gran importancia nel fluxu automotor ente la ciudá y la provincia de Buenos Aires.]] El Tremáu Gran Buenos Aires (AGBA) toma lo que se denomina "llurdiu urbanu", ye dicir la zona hasta onde llega la continuidá de viviendes, buscando definir una realidá esencialmente móvil. Llamada tamién envolvente de población o llocalidá censal.
La definición del Tremáu Gran Buenos Aires ye más amplia pero tamién menos precisa que la de Gran Buenos Aires, tomando la ciudá de Buenos Aires, la superficie total de 14 partíos de la provincia de Buenos Aires y la parcial d'otros 16. La superficie del tremáu suma 2.590 km², un 10% más que los 2.353 km² correspondientes a la superficie del área censada en 1991, reflexando que'l llurdiu urbanu continua estendiéndose a un ritmu mayor que'l de la crecedera de la población, a pesar de los intentos de frenar dicha espansión al traviés de la regulación d'usos del suelu reglamentada pola llei 8912/77 de la provincia de Buenos Aires.
El Tremáu Gran Buenos Aires, en sentíu estrictu, estender por 31 unidaes alministratives, a les cualos atópense otra 4 en procesu d'agregamientu:
Otros criterios
Extraoficialmente diversos autores adopten otres definiciones pa definir distintes escales de la Buenos Aires metropolitana, a saber:
Criterios definíos pol Observatoriu Urbanu Local
L'Observatoriu Urbanu Local - Buenos Aires Metropolitana (OUL-BAM) forma parte de la rede d'Observatorios Urbanos de ONX-hábitat y define distintes árees xeográfiques pa contribuyir nos foros de discutiniu ente los actores pertinentes, gubernamentales y non gubernamentales, amás d'evaluar y monitorear les polítiques públiques urbanes, y contribuyir a la formulación d'apurras pal resolución de les problemátiques encaraes polos distintos niveles de decisión nel ámbitu del Área Metropolitana de Buenos Aires. Diches árees son:
Área Metropolitana de Buenos Aires (AMBA)
thumb|[[Tigre (Buenos Aires)|Tigre, llocalidá de la zona norte del Gran Buenos Aires.]] thumb|Monumentu a Nicolás Avellaneda, [[Avellaneda (Buenos Aires)|Avellaneda]] right|thumb|[[Aeropuertu Internacional Ministru Pistarini, na llocalidá d'Ezeiza, ye la principal terminal aérea internacional d'Arxentina]] El Área Metropolitana de Buenos Aires (AMBA) coincide cola área xeográfica onde'l Indec define'l Tremáu Gran Buenos Aires (AGBA) aplicando criterios de continuidá física. Abarca total o parcialmente 35 unidaes alministratives, totalizando en 2011 una área de 2.681 km²:
Zona Metropolitana de Buenos Aires (ZMBA)
right|thumb|[[Temaikèn, en Belén de Escobar, ye l'únicu bioparque de l'Arxentina aprobáu pola Asociación de Zoolóxicos y Acuarios]] thumb|right|[[Tecnópolis, nel Partíu de Vicente López, ye la megamuestra de ciencia, teunoloxía, industria y arte más grande d'América Llatina.]] La Zona Metropolitana de Buenos Aires (ZMBA) o Zona Metropolitana del Gran Buenos Aires (ZMGBA) ye l'área xeográfica que toma la totalidá de les unidaes alministratives que'l Indec considera como integrantes del Tremáu Gran Buenos Aires (AGBA) aplicando criterios de continuidá física. L'aplicación mecánica d'esti conceutu deriva nel agrupamientu arbitrariu de delles xurisdicciones (seríen los casos estremos de La Plata y Cañuelas que solo s'integren a la AGBA en menos del 15 % de la so población respeutiva), polo cual solo incorporar como partes de la ZMGBA aquelles xurisdicciones onde la porción de la población qu'habita'l territoriu tremáu supera'l 30 % de la población total urbana de la unidá territorial considerada y per otra parte onde la cabecera de dicha xurisdicción tamién forma parte de la aglomeración. D'esta miente, abarca entós la totalidá de 31 unidaes alministratives, sobre una área de 6.118 km²:
Courlans
Courlans ye una comuña francesa del departamentu de Jura, na rexón de Borgoña-Francu Condáu. Llenda con.
Gran Buenos Aires
Zona Metropolitana de Buenos Aires (ZMBA)
Son los mesmos conceyos qu'integren el AMBA, quitando a La Plata, Berisso, Ensenada y Cañuelas.
Courlans
Tien una población de y una superficie de  km².
Gran Buenos Aires
Rexón Metropolitana de Buenos Aires (RMBA)
thumb|La [[Catedral de La Plata, d'estilu neogóticu, ye unu de los templos católicos más grandes d'América Llatina.]] La Rexón Metropolitana de Buenos Aires (RMBA) ye l'área xeográfica que toma la totalidá de los asentamientos urbanos, y les sos respeutives árees d'influencia, integraos funcionalmente cola área urbana principal. Les variables utilizaes pa definir dicha área son diverses, siendo la más abarcativa aquella qu'arrexunta les unidaes alministratives definíes pol criteriu funcional d'identificación a partir del área de «comutado», ye dicir basáu nel movimientu diariu que realicen les persones pa satisfaer les sos necesidaes, principalmente llaborales, pero tamién educatives, de salú y de consumu. Esos movimientos diarios, o movimientos pendulares, tienen cierta correspondencia cola estructura de tresporte de la RMBA. Toma 44 unidaes alministratives, sobre una área de 18.380 km²:
Criteriu definíu pola Direición d'Ordenamientu Urbanu y Territorial
La Direición d'Ordenamientu Urbanu y Territorial de la provincia de Buenos Aires (DPOUT) hai delimitado l'área denomada como Rexón Metropolitana de Buenos Aires (RMBA) pa ellaborar el Plan Estratéxicu Territorial vixente, en función de los grandes componentes de la organización territorial:
Esta delimitación de la rexón coincide cola adoptada pol Observatoriu Metropolitanu dependiente del Conceyu Profesional d'Arquiteutura y Urbanismu de l'Arxentina (CPAU) y pola Fundación Metropolitana.
Rexón Metropolitana de Buenos Aires (RMBA)
thumb|Imaxe satelital de la Rexón Metropolitana de Buenos Aires.([[NASA)]]
Pa la Direición d'Ordenamientu Urbanu y Territorial, la Rexón Metropolitana de Buenos Aires (RMBA) ye l'área xeográfica que toma les siguientes xurisdicciones, sobre una superficie de 13.975 km²:
Clasificaciones dientro del Conurbano
Asina definíu, dientro del Conurbano bonaerense davezu estrémense tamién los gordones o corones, una serie d'aniellos socesivos allugaos según la so proximidá alredor de la ciudá de Buenos Aires. Esta clasificación supón una cierta homoxeneidá pa cada unu d'ellos, resultáu de los distintos momentos en que se desenvolvieron a midida que estendíase'l tremáu, les sos condiciones habitacionales, la infraestructura presente y la densidá de población. Escluyir nesta carauterización a los partíos pertenecientes al Gran La Plata.
right|thumb|El [[Río Matanza-Riachuelo|Regatu dixebra la ciudá de Buenos Aires de la zona sur del conurbano (imaxe de la ponte Nicolás Avellaneda).]] Tamién suel estremase'l Conurbano bonaerense en tres zones xeográfiques: norte, oeste y sur.
thumb|Vista aérea nocherniega d'un sector de la zona oeste del Conurbano.
Población
D'alcuerdu a los datos del censu 2010 la población del área varia, según el criteriu adoptáu, dende los 9 916 715 habitantes nel Conurbano a los 14 839 026 habitantes nel casu de la Rexón Metropolitana de Buenos Aires na so máxima estensión, según la definición de la Direición d'Ordenamientu Urbanu y Territorial de la provincia de Buenos Aires (DOUT).
Esto implica que la crecedera foi del orde del 11,7 % (4,1 % na Ciudá Autónoma y 14,2 % nel conurbano). Esta magnitú representa en 2010 el 34,9 % del total de la República, daqué más que'l 33,2 % de 2001 y el 34,6 % de 1991.
D'esta manera'l Tremáu Gran Buenos Aires constitúi pola so cantidá d'habitantes la mayor concentración urbana de l'Arxentina, la segunda de Suramérica (detrás de São Paulo), la tercera de Llatinoamérica (detrás de Méxicu, D.F. y São Paulo), la cuarta d'América (detrás de Ciudá de Méxicu, São Paulo y Nueva York) y la ventena aglomeración del mundu.
El siguiente cuadru amuesa la población del área metropolitana según cada unu de los distintos criterios que la definen y los partíos que cada unu d'estes abarca, según les resultaos del censu 2010:
Zona rural nel Gran Buenos Aires
Los partíos de Berisso, Brandsen, Campana, Cañuelas, Ensenada, Esaltación de la Cruz, Florencio Varela, Xeneral Las Heras, Xeneral Rodríguez, Pilar,, La Plata, Luján, Zárate entá tienen llocalidaes rurales y paraxes, allugaos cerca de les urbanizaciones.
Llocalidaes y/o Pueblos Rurales:
Damon Wayans
Damon Kyle Wayans ye un comediante en vivu, escritor y actor d'Estaos Xuníos qu'empezó la so carrera en 1982. Protagonista del sitcom My Wife and Kids. Ye un miembru de la Familia Wayans.
Mariano Acosta
Mariano Acosta foi un políticu arxentín. Apenes terminó los sos estudios secundarios coló a Europa, d'onde retornó en 1853, tres la cayida del gobernador Juan Manuel de Rosas, a que la so causa nun quixera sumase na adolescencia. Foi unu de los redactores de la Constitución del Estáu de Buenos Aires nesi añu. En 1862 foi ministru de Gobiernu de Mariano Saavedra y fundador del pueblu de Saladillo. Ocupó'l cargu de gobernador de Buenos Aires ente 1872 y 1874, cuando foi escoyíu vicepresidente de la Nación xunto a Nicolás Avellaneda.
Biografía
Tornó a l'actividá parllamentaria bonaerense al añu siguiente y foi nomáu como Comisionado d'Inmigración. Una disputa col gobernador Pastor Obligado, obligar a retirase de l'actividá pública ente 1855 y 1860, cuando ye electu convencional constituyente provincial. Acosta casar en 1857 con Remedios Oromi, una sobrina de Remedios de Escalada, esposa del xeneral José de San Martín. El gobernador Mariano Saavedra designar Ministru de Gobiernu en 1862, ya integró la Comisión d'Asistencia Veteranos ente 1866 y 1872. Acosta, en 1871, foi asesor llegal del, daquella apocayá formáu, Ferrocarril Oeste, y foi presidente del Bancu de la Provincia de Buenos Aires. Tornó de volao a la llexislatura, y en 1872, foi electu Gobernador de la Provincia de Buenos Aires. Realizó numberoses obres d'infraestructura ya iniciatives públiques; designó al primer inxenieru arxentín Luis Huergo, pa la planificación de rutes y canales. Como gobernador promulgó una nueva constitución n'avientu de 1873, y al poco tiempu, foi nomáu nel Partíu Autonomista Nacional, como compañeru de fórmula de Nicolás Avellaneda pa presidente.
Electu en setiembre de 1874, Avellaneda y Acosta fueron opositores a Bartolomé Mitre, quien caltenía rivalidaes col benefactor d'Avellaneda, el saliente vicepresidente Adolfo Alsina. Acosta coordinó'l programa de construcción d'escuela qu'Avellaneda heredara del so predecesor, Domingo Sarmiento. Foi presidente de la Comisión pa la repartición de los restos del Xeneral San Martín dende Francia, creáu por Avellaneda en 1874, que finalmente se cumplió en 1880.
Acosta retirar de la vida pública en 1880, y finó en Buenos Aires en setiembre de 1893, a los 68 años. Por ser llaicu franciscanu, Acosta foi atapecíu y soterráu na cripta de la Ilesia San Francisco naquella ciudá.
Courlaoux
Courlaoux ye una comuña francesa del departamentu de Jura, na rexón de Borgoña-Francu Condáu. Llenda con.
Tien una población de y una superficie de  km².
Bizién
Bizién , n'aragonés, o Vicién, n'español, ye un conceyu de la contorna Hoya d'Huesca, provincia d'Huesca (España). Ta asitiáu a 9 km al sur de Huesca nun altor a la que se llega pela carretera HU-V-8102 qu'enllaza cola A-1212.
Fiestes
Día 29 de setiembre n'honor de San Miguel
Piles
Piles ye un llugar de la parroquia de Villardebeyo nel conceyu asturianu de Llanera.
Nunatsiavut
Nunatsiavut ye una área reclamada polos Inuit en Canadá (distintu del territoriu Nunavut). Atopar ente Llabrador y Quebec. Nel 2002 propúnxose una autonomía llindada pol gobiernu de Terranova y Llabrador.
Piles
Alcuéntrase a 10,00 km de Posada, la capital del conceyu, a un altor mediu de 174 msnm y tien una población de.
La Rebollá (Pedroveya)
La Rebollá ye un llugar de la parroquia de Pedroveya, nel conceyu asturianu de Quirós.
Alcuéntrase a 22,4 km de Bárzana, la capital del conceyu, a un altor mediu de 671 msnm y tien una población de.
Eladio Victoria
Eladio Victoria y Victoria (30 de xunetu de 1864 - 27 de xunetu de 1939) foi presidente provisional de la República Dominicana en 1911 y depués presidente constitucional en 1912.
Vida familiar y política
Eladio Victoria foi fíu d'Alejandro Victoria y de Josefa Victoria. Recibió'l llamatu de "Quiquí". Nel so gobiernu los Victoria aportaron a una de les families más poderoses del país, casu similar al de los Trujillo.
Victoria ocupó posiciones d'importancia dientro del gobiernu dominicanu xunto al so acompañante Jose Gabriel, ente les cualos cítense: Secretariu d'Estáu de Fomentu y Obres Públiques, Ministru d'Instrucción Pública, Ministru de Facienda y Comerciu, según otros cargos. Tamién ocupó'l cargu de Senador.
El so gobiernu namái duró once meses y foi obligáu a arrenunciar pol Plan Wilson.
Presidencia constitucional
Depués del asesinatu del presidente Ramón Cáceres el 19 de payares de 1911, el Congresu escoyó a Eladio Victoria como Presidente provisional por dos meses con encargu de convocar a nueves eleiciones, de les cualos el mesmu resultó electu como presidente constitucional, juramentándose nel cargu'l 27 de febreru de 1912.
Pa caltenese nel poder, Victoria gastó grandes sumes de dineru, anque dicha aición nun frenó'l so escalabru. Por ello los Estaos Xuníos, ante la medrana de perder los sos beneficios nel país, realizaron una intervención político y militar na República Dominicana. Esto terminó col arrenunciu del presidente Victoria'l 26 de payares de 1912. Nel so llugar foi escoyíu presidente l'arzobispu Adolfo Alejandro Nouel, cuñáu de la so hermana Luisa Hortensia Victoria y Victoria, asumiendo'l 1 d'avientu de 1912. Foi maríu de Pamela Medina Sueru.
Idioma nihali
El nihali o nahali (dacuando equivocadamente consideráu como kalto) ye una llingua aisllada falada nel centru d'India (estaos de Madhya Pradesh y Maharastra) por unes 2000 persones (en 1991) d'un grupu étnicu formáu por unes 5000 persones. L'área tribal de los nihali atopar al sur del ríu Tapti, alredor de l'aldega de Tembi nel distritu de Nimar de les Provincies centrales mientres el Raj británicu, anguaño ye parte de Madhya Pradesh. La llingua tien un gran númberu de pallabres emprestaes de les llingües vecines, con un 60-70% de términos aparentemente procedentes del korku y otru 25% de vocabulariu y muncha de la so morfoloxía, tomáu de les llingües dravídiques y el marathi, anque gran parte del so vocabulariu básicu nun puede rellacionase col d'otres llingües, como por casu los numberales y les pallabres pa 'sangre' y 'güevu'.
Franciscus Kuiper (1962) foi'l primeru en suxurir qu'esta llingua podría ser una llingua aisllada, con un nucleu léxicu ayenu al korku y les llingües dravídiques, procedente de poblaciones d'India ensin rellacionar coles llingües munda o les llingües dravídiques. Sicasí Kuiper nun esclúi qu'esti nucleu básicu pudiera tar emparentáu coles llingües munda, como'l korku.
Historia
Los nihali vivieron mientres sieglu nuna rellación simbiótica, pero socialmente inferior xunto a los korku. Los falantes de nihali son billingües en korku y nihali, y frecuentemente usaben el nihali pa evitar ser entendíos por otres persones. Kuiper suxurió tamién que les diferencies podríen habese orginado como un xíriga, o como criptolecto (llingua secreta). Norman Zide describió la situación d'esta manera: "Los préstamos en nihali son muncho más masivos qu'en dellos exemplos de llibros de testu sobre l'albanés. Seique sían más comparables nesti respectu con dalgunos de los dialeutos de romanín más relexicalizados, como los falaos por xitanos n'Europa Occidental o Estaos Xuníos. La hestoria recién de los nihalis inclúi la matanza entamada per parte de gobernantes rexonales a principios del sieglu XIX, esto debió aparentemente al vandolerismo destructivu creciente que practicaben. De magar, el grupu abrasada en tamañu- actuó frecuentemente como rapiñadores y lladrones, [...] Los nihalis fueron multillingües dende hai enforma, y usen el nihali más o menos como una llingua secreta que usualmente nun s'amuesa a los estraños. Dalgunos de los primeros investigadores que trataron d'estudiar esta llingua, aparentemente fueron refugaos y engañaos deliberdadamente."
Anguaño, los nihali lleven una manera de vida similar al de los kalto, esto, combináu col fechu de que los kalto fueron llamaos dacuando nihali, llevó al tracamundiu de que les dos llingües son la mesma, tracamundiu que foi repitida diverses vegaes nes descripciones llingüísticu y etnolóxicu.
Kacie Castle
Kacie Castle ye una actriz pornográfica y modelu erótica estauxunidense.
Biografía
Natural de Miami, en terminando l'institutu empezó a trabayar nuna tienda de trabayu al per mayor y de secretaria, realizando les trescripciones de les xuntes d'una empresa. Cansada del so trabayu empezó a realizar shows eróticos como modelu de cámara web en 2014. En ganando notoriedá como camgirl entró na industria pornográfica en setiembre de 2015, debutando como actriz a los 28 años, grabando la so primer escena pa Reality Kings.
Como actriz, rodó pa productores como Evil Angel, Kick Ass, Mofos, Devil's Film, Reality Kings, Kink.com, Lethal Hardcore, Bangbros, Hustler, ATK, Desperate Pleasures, Nubiles o -y Wood Productions, ente otres.
En 2018 recibió la so primer nominación nos Premios AVN na categoría de Meyor escena escandalosa de sexu, xunto a Violet Monroe y Lily Lane, por Añal Punishment for Llambe Millennials.
Rodó más de 50 películes como actriz.
Delles películes sos son All In, ButtSex Cuties, Deep In That Ass 2, Fuck My Ass With Kacie Castle, Manhandled 7, Menage A Tranny, Rectal Workout 2, Step Siblings Caught 8, Swallowed o Whore's Ink 3.
El Pontón (Villardebeyo)
El Pontón ye un llugar de la parroquia de Villardebeyo nel conceyu asturianu de Llanera.
Alcuéntrase a 10,00 km de Posada, la capital del conceyu, a un altor mediu de 155 msnm y tien una población de.
Hiroaki Sato
Hiroaki Sato (佐藤 弘明, ), foi un futbolista xaponés.
Pentru legionari
Pentru legionari (Pa los mios lexonarios) ye un llibru autobiográficu de Zelea Codreanu, dirixente de movimientu fascista rumanu Guardia de Fierro, espublizáu por primer vez en 1936. El llibru foi descritu pol historiador Irina Livezeanu como que yera a Codreanu lo que'l Mein Kampf yera a Adolf Hitler. Publicóse primero en Sibiu porque nun pasó la censura en Bucarest.
El llibru ye una narrativa en primer persona que describe'l papel de lideraldgu de Codreanu nuna serie de movimientos políticos, "El Guardia del Nacional Conscience", la "Lliga de Defensa Nacional Cristiana", la "Lexón de San Miguel Arcánxel", y finalmente, la Guardia de Fierro. El so oxetivu dientro d'estos movimientos yera defender la Gran Rumanía, creada de recién, escontra de los sos enemigos, particularmente, la Xunión Soviética y los xudíos. Les narraciones tán entrepolaes con cites d'intelectuales rumanos, según con retayos de periódicos contemporáneos.
Codreanu dexó claru nel so llibru que la so ideoloxía nun ye compatible coles instituciones democrátiques lliberales. Tarrecía les eleiciones y el sistema parllamentariu y consideraraba'l so movimientu como parte d'una familia más grande d'ideoloxíes ultranacionalistes, que incluyía'l fascismu italianu y l'Alemaña nazi.
Myadestes obscurus
El solitariu Omao (Myadestes obscurus), ye una especie d'ave paseriforme de la familia Turdidae. Ye endémica de la islla de Ḥawai. Ta estrechamente rellacionáu colos otros túrdidos reinales de les islles de Ḥawai, el kāmaʻo, l'olomaʻo y el puaiohi. Distribúyese principalmente nes selves tropicales de les rexones del este y sureste de la islla Mayor. La población envalórase n'aprosimao 170 000 aves, polo que ye'l más común de los solitarios ḥawaianos. Al paecer tien una población estable, pero por cuenta de que la población entera de distribúi nun rangu pequeñu y ye endémicaa d'una sola islla, considérase vulnerable.
Hábitat
El omao una vegada vivió na mayor parte de la tierra de Ḥawai. Anguaño ta acutáu a les fasteres sur y este de la islla, sobremanera percima de los 1000 metros sobre'l nivel del mar, del 25 al 30 per cientu del so hábitat ancestral. El so hábitat preferíu ye'l monte tropical, pero puede atopase nes altes carbes en Mauna Loa. Los sos árboles preferíos inclúin el ʻōhiʻa y koa. Evita les zones con tacso mariellu (una vide invasora). Nes elevaciones más baxes, paez tar ganando una resistencia natural a la malaria aviar. Les amenaces a esta especie son la destrucción del so hábitat, el desenvolvimientu del turismu y l'agricultura, la depredación por animales selvaxes introducíos (principalmente aguarones, gatos y mangostes), planta invasores y el ganáu amontesáu como cabres y gochos.
Reaición en cadena de la polimerasa
thumb|Xel d'[[agarosa tiñíu con bromuru de etidio qu'amuesa dellos productos de PCR llograos por aciu l'usu de distintos cebadores, que presenten un baxu nivel d'especificidá.]]
Myadestes obscurus
Hábitat
El 'ōma'o describióse per primer vegada a la ciencia occidental en 1789 por Gmelin.
Reaición en cadena de la polimerasa
La reacción en cadena de la polimerasa, conocida como PCR poles sos sigles n'inglés (polymerase chain reaction), ye una téunica de bioloxía molecular desenvuelta en 1983 por Kary Mullis. El so oxetivu ye llograr un gran númberu de copies d'un fragmentu d'ADN particular, partiendo d'un mínimu; en teoría basta partir d'una única copia d'esi fragmentu orixinal, o molde.
Fundamentu ya importancia
Esta téunica encontar na propiedá natural de los ADN polimerasas pa retrucar hebras d'ADN, pa lo cual empléguense ciclos d'altes y baxes temperatures alternaes pa dixebrar les hebras d'ADN recién formaes ente sigo tres cada fase de replicación y, de siguío, dexar que les hebras d'ADN vuelvan xunise pa poder doblales nuevamente. La reacción en cadena de la polimerasa foi perfeccionada por Kary Mullis perteneciente a la Cetus Corporation en California, na década de 1980. Primeramente la téunica yera lenta, una y bones les polimerasas se desnaturalizaban al realizar los cambeos de temperatura y yera necesariu amestar nueves polimerasas en cada ciclu. Yá que les temperatures del ciclu (95 °C nes fases de desnaturalización del ADN) suponen la inmediata desnaturalización de toa proteína, empléguense ADN polimerasas termoestables, estrayíes de microorganismos afechos a vivir a eses temperatures, restrictives pa la mayoría de los seres vivos. Dichos microorganismos, xeneralmente arquies, son: Thermus aquaticus (polimerasa Taq), Pyrococcus furiosus (Pfu), Thermococcus litoralis (Vent) y Thermus thermophilus (Tth). Xeneralmente empléguense amiestos de polimerasas bien procesivas (Taq) con otres capaces de faer correición d'errores (Pfu, Vent).
thumb|Termociclador: aparatu nel que s'efectúa la PCR convencional. Güei, tol procesu de la PCR ta automatizado por aciu un aparatu llamáu termociclador, que dexa calecer y esfrecer los tubos de reacción pa controlar la temperatura necesario pa cada etapa de la reacción. Munchos termocicladores modernos faen usu del efeutu Peltier, que dexa tantu calecer como esfrecer los tubos a cencielles invirtiendo la corriente llétrica. Los tubos usaos pa PCR tienen una paré bien fina, lo que favorez una bona conductividá térmica, dexando que s'algame rápido'l equilibriu térmicu. Casi tolos termocicladores tienen un sistema que calez la tapa de zarru col fin d'evitar la condensación sobre los tubos de reacción. Los termocicladores más antiguos escarecíen d'esti sistema y solucionaben el problema de la condensación con una capa d'aceite na parte cimera del amiestu de reacción o con un pocu de cera dientro de los tubos. Anguaño esisten dellos termocicladores qu'utilicen o pueden utilizar aceite mineral nel tubu de PCR como los termocicladores de nueva xeneración de fluxu de aíre.
Polo xeneral, la PCR ye una téunica común y de normal indispensable en llaboratorios d'investigación médica y biolóxica pa una gran variedá d'aplicaciones. Ente elles inclúyense la clonación d'ADN pa la secuenciación, la filoxenia basada n'ADN, l'analís funcional de xenes, el diagnósticu de trestornos hereditarios, la identificación de buelgues xenétiques (usada en téuniques forenses y test de paternidá) y la detección y diagnósticu d'enfermedaes infeicioses.
Reactivos
thumb|Tubos de PCR qu'alluguen l'amiestu nun volume total de 100 [[microlitro|μL.]] Pa realizar la téunica precísense:
Ciclu d'amplificación
thumb|300px|Esquema xeneral de la PCR. thumb|300px|Grau d'amplificación según el númberu de ciclos emplegaos. A: xel de agarosa (1: ladder, 2: productu específicu, 3: productu inespecíficu); B concentración d'ADN respeuto del tiempu; C llogaritmu de la concentración d'ADN respeuto del tiempu. El procesu de PCR polo xeneral consiste nuna serie de 20 a 35 cambeos repitíos de temperatura llamaos ciclos; cada ciclu suel consistir en 2-3 pasos a distintes temperatures. La PCR común realizar con ciclos que tienen tres pasos de temperatura. Los pasos de ciclos de cutiu tán precedíos por un choque térmicu (llamáu "hold") a alta temperatura (> 90 °C), y siguíu por otru hold a la fin del procesu pa la estensión de productu final o'l curtiu almacenaxe. Les temperatures usaes y el tiempu aplicáu en cada ciclu dependen de gran variedá de parámetros. Estos inclúin la enzima usada pa la síntesis d'ADN, la concentración d'iones divalentes y de los dNTP na reacción, y la temperatura d'unión de los cebadores, según el llargor del ADN que se desea amplificar.
Anguaño, casi tolos termocicladores dan la opción de realizar la reacción de PCR cola llamada " tapa caliente". Esto ye, que'l sistema del termociclador va aplicar calor a la parte de riba del vial que contién l'amiestu de PCR. Al empiezu, los llaboratorios qu'empezaron a usar los primeros aparatos que se comercializaron y que nun incluyíen esti sistema teníen que poner unes gotes d'aceite dientro del vial. L'oxetivu d'esti procedimientu, al igual que'l de la tapa caliente, ye evitar la condensación de la muestra, yá que nel eppendorf atópense dos fases:líquidu y gas. Al entestase la muestra, perdemos volume del amiestu. Sicasí, caleciendo la tapa o poniendo les gotes d'aceite evitamos esti procesu físicu, calteniendo casi intactu'l volume de la muestra.
Entamu
Esti pasu consiste en llevar la reacción hasta una temperatura de 94-96 °C (ó 98 °C si ta usándose una polimerasa termoestable estrema), que se caltién mientres 1-9 minutos. Esto namái ye necesariu para ADN polimerasas que rican activación por calor.
Desnaturalización
De primeres, se desnaturaliza l'ADN (dixébrense los dos cadenes de les cualos ta constituyíu). Esti pasu puede realizase de distintes maneres, siendo'l calentamientu (94-95 °C) de la muestra la forma más habitual. La temperatura a la cual decide realizase la desnaturalización depende, por casu, de la proporción de G+C que tenga la cadena, como tamién de la llongura de la mesma. Otros métodos, raramente emplegaos na téunica de la PCR, seríen la adición de sales o axentes químicos capaces de realizar la desnaturalización.
Alliniadura o unión del cebador
De siguío va producise la hibridación del cebador, esto ye, el cebador va xunir a la so secuencia complementaria nel ADN molde. Pa ello ye necesariu baxar la temperatura a 40-68 °C mientres 20-40 segundos (según el casu), dexando asina l'alliniadura. Los puente d'hidróxenu estables ente les cadenes d'ADN (unión ADN-ADN) namái se formen cuando la secuencia del cebador ye bien similar a la secuencia del ADN molde. La polimerasa xune l'híbridu de la cadena molde y el cebador, y empieza a sintetizar ADN. Los cebadores van actuar como llendes de la rexón de la molécula que va ser amplificada.
Estensión o elongación de la cadena
Actúa la polimerasa, tomando l'ADN molde pa sintetizar la cadena complementaria y partiendo del cebador como soporte inicial necesariu pa la síntesis de nuevu ADN. La polimerasa sintetiza una nueva hebra d'ADN complementaria a la hebra molde añediendo los dNTP complementarios en direición 5'→ 3', xuniendo'l grupu 5'-fosfatu de los dNTP col grupu 3'-hidroxilo del final de la hebra d'ADN creciente (la cual estiéndese). La temperatura pa esti pasu depende del ADN polimerasa qu'usemos. Pa la polimerasa Taq, la temperatura de máxima actividá ta en 75-80 °C (comúnmente 72 °C). El tiempu d'estensión depende tantu del ADN polimerasa usada como del llargor del fragmentu d'ADN que se va a amplificar. Hai una regla comúnmente usada: na so temperatura óptima, la polimerasa d'ADN polimerizará mil bases nun minutu.
Caltenimientu
Este ye un pasu que se lleva a cabu a 4-15 °C mientres un tiempu indefiníu pa caltener la reacción al curtiu plazu.
La PCR de normal realízase con un volume de reacción de 15-100 μL, en pequeños tubos de 0.2-0.5 mL que s'asitien nel termociclador.
Pa verificar que la PCR xeneró'l fragmentu d'ADN previstu, empléguense téuniques d'electroforesis, que dixebren los fragmentos d'ADN xeneraos d'alcuerdu a la so carga, esto ye, llargor, y, en menor midida y dependiendo de la matriz emplegada, al so tamañu: típicamente empléguense la electroforesis en xel de agarosa, pa fragmentos grandes; n'acrilamida, pa los más pequeños; y, de forma más rápida y aplicable a la PCR acomuñada a marcaje fluorescente, la electroforesis capilar. El/los tamañu/s de los productos de la PCR vienen determinaos por un marcador de pesu molecular d'ADN, que contién fragmentos d'ADN de tamañu conocíu, y que se cuerre nel xel xunto colos productos de PCR.
Optimización de la PCR
Na práutica, la PCR puede fallar por delles razones, ente elles:
PCR añerada
Téunica bien sensible de PCR na que'l productu d'una amplificación ye utilizáu como molde pa realizar una segunda amplificación con cebadores que s'alluguen dientro de la primer secuencia amplificada, esto ye, cuando tenemos el primer, como la so amplificación pueden xunise los cebadores y faise de nuevu una amplificación dientro del amplicón inicial. Esti tipu de PCR tien la ventaya de brindar alta sensibilidá y especificidá. La especificidá aumenta porque como ye amplificación d'un amplicón llográu primeramente, los cebadores namái van hibridar nun sitiu dientro de la molécula y la resultancia va ser una única banda. Asina, evitamos posibles hibridaciones inespecífiques de los cebadores. La desventaxa d'esta téunica ye que nun nos dexa cuantificar la muestra.
PCR in situ
La PCR in situ consiste nuna reacción de PCR en seiciones histolóxiques o célules, onde los productos xeneraos pueden visualizase nel sitiu d'amplificación. Ye realizada sobre preparaciones fixes nun portaoxetos. Na téunica de PCR in situ realízase una primer amplificación d'ADN blancu y depués detección por aciu hibridación in situ convencional con sondes d'ADN/ARN. D'esta manera pueden detectase cantidaes perpequeñes de xenoma. Esta teunoloxía ye de gran algame na capacidá d'amplificar específicamente una población de secuencies de menor representación.
PCR múltiple
PCR na cual amplifícase simultáneamente más d'una secuencia. Pa ello, combínense dos o más pares de cebadores nun mesmu tubu, xunto col restu de los reactivos de la reacción en cantidaes abondes, p'amplificar simultáneamente dellos segmentos d'ADN. Ventayes: información sobre dellos locus nuna sola reacción, menor cantidá de molde pal analís, menor cantidá de reactivos, rápida construcción de bases de datos. Desventaxes: pa llevala a cabu afechiscamente y ensin errores, riquir d'una cuidadosa optimización del procesu.
PCR con transcriptasa inversa (RT-PCR)
Ye una variante de la PCR na qu'usamos ARN como molde inicial en cuenta de ADN, y emplega una transcriptasa inversa (como Tth) pa realizar la síntesis d'un ADN complementariu al ARN (ADNc). D'esta forma, el desenvolvimientu inicial d'una RT-PCR sería:
PCR en tiempu real o PCR cuantitativu (qPCR)
Reacción de PCR que la so principal carauterística ye que dexa cuantificar la cantidá d'ADN o ARN presente na muestra orixinal, o pa identificar con una bien alta probabilidá, amueses d'ADN específiques a partir de la so temperatura de fusión (tamién denomináu valor Tm, del inglés melting temperature).
Puede estremase nes téuniques basaes en fluorocromos non específicos y nes téuniques basaes en sondes específiques.
Nes téuniques basaes en fluorocromos l'ADN, que ve multiplicada la so cantidá con cada ciclu, xunir al fluorocromo (xeneralmente SYBR Green) produciendo fluorescencia que ye midida pol termociclador aptu pa PCR en tiempu real. Dexa cuantificar namái una secuencia por reacción pero tien la ventaya d'utilizar cebadores normales pa la so realización. Ye muncho más económica que la qu'usa sondes específiques.
Les téuniques basaes en sondes específiques utilicen una sonda xunida a dos fluorocromos qu'hibrida na zona entemedia ente'l cebador direutu (forward) y l'inversu (reverse); cuando la sonda ta intacta, presenta una tresferencia enerxética de fluorescencia per resonancia (FRET). Felicidad FRET nun se produz cuando la sonda ta estropiada y los dos fluorocromos tán distantes, productu de l'actividá 5'-3' exonucleasa del ADN polimerasa. Esto dexa monitorizar el cambéu del patrón de fluorescencia y deducir el nivel d'amplificación del xen.
La mayoría d'estos inconvenientes solucionáronse cola introducción de la PCR realizada en tiempu real (Q-PCR), qu'esanicia cualquier procesu post-PCR yá que monitoriza la progresión de l'amplificación nel momentu que asocede. A diferencia de la PCR convencional (en puntu final), que mide l'acumuladura del ADN a la fin d'un númberu predeterminado de ciclos, con Q-PCR esto fai mientres el procesu d'amplificación usando fluorescencia, de forma que'l so aumentu ye proporcional a la cantidá d'ADN formada. El procesu puédese automatizar fácilmente usando un sistema que realice l'amplificación (termociclador) y que de la mesma sía capaz de lleer fluorescencia. Esiste una amplia ufierta d'aparatos nel mercáu. La mayoría pueden trabayar coles diverses opciones de marcáu fluorescente y son "abiertos", esto ye, dexen programar les condiciones d'amplificación y llectura de forma que'l so usu nun queda llindáu a unos reactivos determinaos.
center|Téunica TaqMan
Variaciones de la PCR básica
Dixebrar por una capa de cera los distintos componentes de la reacción. La cera fundir al algamar los 95 ℃ y ye entós cuando los componentes entren en contautu ::- Anticuerpos anti-polimerasa que tean bloquiando a la polimerasa. Al algamar los 95 ℃ estos anticuerpos se inactivan por cuenta de que se desnaturalizan y la polimerasa puede actuar
Aplicaciones
La téunica de la PCR tien ensame d'aplicaciones: yá en ciencia básica, como ferramienta de detección y/o xeneración de mancomunes de fragmentos d'ADN d'interés; yá en ciencia aplicada, como elementu escuédigu en sí mesmu, por casu en diagnósticu clínicu.
Investigación
La PCR convencional, emplégase como base pa ensame de téuniques nel llaboratoriu por cuenta del so robustez y rapidez. D'esta miente, la PCR de puntu final dexa controlar y detectar los fragmentos d'ADN d'interés. thumb|Clonación d'un segmentu d'ADN por aciu amplificación con cebadores que contienen una secuencia apta pa la [[recombinación dirixida con un plásmido.]] Una aplicación de la PCR d'estrema importancia ye la clonación de secuencies d'ADN en vectores, como pueden ser los plásmidos. Pa ello, empléguense cebadores que contienen nel so estremu 5' una curtia secuencia que dexa la interacción posterior con otra complementaria asitiada nel vector de clonación a emplegar. Por casu, puede incluyise una diana de restricción en dichos cebadores, de cuenta que, y si ésta nun esistía primeramente nel fragmentu y ye única nel vector, pueda efeutuase una ligación por aciu la ligasa de T4 tres la dixestión cola enzima de restricción apoderada de dambos elementos. Otru métodu asimilable a esta vía ye l'empléu de la recombinación empobinada; esto ye, afacer al 5' de los cebadores una secuencia que faculta a una recombinasa la recombinación empobinada con un vector dau.
Medicina
En medicina, la PCR emplégase fundamentalmente como ferramienta de diagnosis (Coleman y Tsongalis, 2006):
Paleontoloxía, antropoloxía biolóxica, y ciencies forenses
Los campos de la paleontoloxía, antropoloxía biolóxica y la medicina y antropoloxía forense viéronse descomanadamente beneficiaos por esta téunica, yá que toes elles constrúin con frecuencia la conocencia de les sos correspondientes disciplines gracies a restos o buelgues de seres vivos. Unu de los materiales biolóxicos que más información puede apurrir ye l'ADN.
La relativa estabilidá d'ésti dexa que, anque estazáu, caltener mientres llargos periodos si les condiciones son aparentes. N'ocasiones les amueses intactes coles que puede cuntase son extraordinariamente pequeñes o tán deterioraes. La PCR soluciona dambos problemes y apurre cantidaes útiles pa posteriores pasos d'analises. En primer llugar aumenta la cantidá de material recuperáu a partir de muestres escases, yá que como yá se dixo enantes, en teoría basta una sola molécula por que'l procesu pueda tener llugar. Tamién por cuenta de la naturaleza de la téunica y el so propósitu d'amplificación de fragmentos pequeños, esta fragmentación nun torgar qu'esti ADN pueda ser emplegáu como molde pa una reacción de PCR.
Agronomía y diversidá
Tal que la PCR multiplex dexa producir buelgues xenétiques d'individuos concretos, dientro del marcu de la xenética forense, esisten métodos basaos na PCR que dexen discernir ente grupos infraespecíficos de cultivos d'interés agronómicu; por casu, de cultivares. Pa ello, empléguense oligonucleótidos d'un tamañu lo suficientemente pequeñu como por que ceben de forma relativamente inespecífica, anque siempres de tala forma que produzan un patrón de bandes discretu y interpretable. D'esta miente, la pauta llograda tres la electroforesis de los fragmentos tiende a arrexuntar a los individuos de mayor semeyanza, que tienen un comportamientu similar, de los que diverxen.
Historia
thumb|Electroforesis de proteínes [[SDS-PAGE resolviendo la polimerasa Taq.]] En 1971, un artículu publicáu por Kleppe et al. en Journal of Molecular Biology describió per primer vegada un métodu qu'usaba enzimes pa retrucar una secuencia pequeña d'ADN con cebadores in vitro. Sicasí, esti tempranu exemplu del principiu básicu de la PCR nun recibió muncha atención, y l'invención de la reacción en cadena de la polimerasa en 1983 ye xeneralmente atribuyida a Kary Mullis. Mullis ganó'l Premiu Nobel pol so trabayu en PCR.
Daqué bien a tener en cuenta na PCR ye que l'ADN polimerasa que s'use sía capaz de soportar les altes temperatures de >90 °C necesaries pa la separación de los dos hebras d'ADN de la doble héliz tres cada ciclu de replicación. Los ADN polimerasas que s'utilizaron originariamente pa los esperimentos in vitro previos a la PCR nun yeren capaces de soportar estes altes temperatures, polo que los primeros procedimientos pa retrucar l'ADN yeren bien ineficientes, llongures y riquíen grandes cantidaes d'ADN polimerasa.
El descubrimientu en 1968 de la polimerasa Taq, una polimerasa d'ADN estrayida de la bacteria termófila Thermus aquaticus qu'habita medios de bien alta temperatura (50-80 °C), esanició los grandes inconvenientes del métodu de la PCR. Esti ADN polimerasa ye estable a altes temperatures, permaneciendo activa hasta dempués de la desnaturalización del ADN, esaniciando la necesidá d'añedir a la reacción nueva polimerasa tres cada ciclu. Esti descubrimientu dexó automatizar el procesu, antes tan aburrible, acoplándolo al usu del termociclador.
Coles mesmes que desenvolvía la PCR en 1983, Mullis trabayaba en Emeryville, California (EE UU), pa una de les primeres empreses bioteunolóxiques, Cetus Corporation, onde yera responsable de sintetizar cadenes curties d'ADN. Mullis afirma que concibió la idea pa la PCR una nueche mientres cruciaba l'Autopista de la Mariña Pacífica (EE UU) nel so coche. Taba imaxinando una nueva forma d'analizar mutaciones nel ADN cuando se decató de que, en llugar d'eso, inventara un métodu p'amplificar rexones específiques d'ADN por aciu ciclos de duplicación repitíos usando ADN polimerasas. Mullis atribúi la invención d'esta téunica a los efeutos de la droga sicodélica y alucinógena LSD.
Na revista Scientific American, Mullis resumió'l procedimientu: "Empezando con una única molécula del material xenético ADN, la PCR puede xenerar 100 billones de molécules iguales nuna tarde. La reacción ye bono de faer, nun riquir más qu'un tubu de pruebes, unos pocos reactivos simples y una fonte de calor". Foi premiáu col Premiu Nobel de Química en 1993 pola so invención, y siete años dempués, él y los sos colegues del Cetus llevaron a la práutica la so propuesta. Sicasí, apaecieron discutinios y distintes versiones sobre les contribuciones intelectuales y práutiques d'otros científicos al trabayu de Mullis, y sobre si él foi l'inventor únicu del principiu de la PCR.
Guerres de patentes
La téunica de la PCR foi patentada por Cetus Corporation, onde Mullis trabayaba cuando inventó la téunica en 1983. La enzima polimerasa Taq foi tamién cubierta de patentes. Tuvieron llugar varios pleitos rellacionaos cola téunica, incluyendo un pleitu fracasáu xeneráu por DuPont. La compañía farmacéutica Hoffmann-La Roche adquirió los derechos de les patentes en 1992 y anguaño caltién les qu'entá tán protexíes.
Courtefontaine (Jura)
Courtefontaine ye una comuña francesa del departamentu de Jura, na rexón de Borgoña-Francu Condáu. Llenda con.
Tien una población de y una superficie de  km².
Alicia Keys
Alicia Cook Augello conocida como Alicia Keys, una cantante, actriz y compositora d'Estaos Xuníos de R&B y soul. Vendió más de 35 millones de discos a nivel mundial y ganó numberosos premios, incluyendo 15 Grammys, 17 Premios Billboard y trés American Music Awards. El so álbum debú Songs in A Minor (2001) ganó cinco Grammys.