QUANTITATIVE ASPECTS OF THE ANTIGLOBULIN COMSUMPTION TEST.

Summary 1 The inhibiting effect of soluble and tissue fixed human gamma globulin (HGG) on the hemagglutination of anti-D (Rho) sensitized red blood cells by Coombs serum, called Antiglobulin Consumption Test (AGC-test), have been compared. 2 The amount of HGG required to give a certain consumption was about five times larger for tissue fixed than for soluble HGG. The minimum amount of HGG detectable averaged 1.0 μg/ml solution for soluble and 5.1 μg/ml suspension for tissue fixed HGG. Steric hindrance, differences in time and rate of reaction are mentioned as possible explanations for this difference. 3 Statistical evaluation demonstrates the high variance of the total of our tests on the basis of 95% probability of occurrence. Individual test groups (tests performed simultaneously on one plate) seem to have less variability. The consequences for the practical performance of the AGC-test are discussed and approximative amounts of tissue fixed gamma globulin for various results of a routine AGC-test are calculated. The test is qualified as a semiquantitative technique. Resume 1 L'effet inhibiteur des gamma-globulines humaines (GGH) en solution ou fixees aux tissus sur le test d'hemagglutination d'erythrocytes D (Rho) sensibilises par l'anti-D (Rho) incomplet et mis en presence de serum anti-globuline ou test de consommation de l'antiglobuline (test de CAG) ont ete compares. 2 La quantite necessaire de GGH pour donner une certaine consommation est environ cinq fois plus grande pour les gamma-globulines fixees aux tissus que pour les gamma-globulines solubles. La quantite minimum de GGH decelable est de 1 μg/ml de solution pour les gamma-globulines solubles et 5,1 μg/ml de suspension pour les gamma-globulines fixees aux tissus. Un empechement sterique, des modifications dans le temps et le degre de reaction sont mentionnes, comme des explications possibles a ce phenomene. 3 L'etude statistique demontre la haute variance du total de nos tests, sur la base d'un coefficient de securite de 95%. Les groupes de tests individuels (tests pratiques simultanement sur une seule plaque) semblent presenter une variabilite moindre. Les consequences pour la pratique habituelle du test de CAG sont discutees et les quantites approximatives de gamma-globulines fixees aux tissus pour la pratique routiniere du test de CAG sont calculees. Ce test est considere comme une technique semi-quantitative. Zusammenfassung 1 Es wurde die Hemmwirkung von gelostem und gewebsfixiertem menschlichem Gammaglobulin (HGG) auf die Hamagglutination Anti-D-(Rho)-sensibilisierter Erythrozyten durch Coombs-Serum [sog. Antiglobulinkonsumptionstest (AGC-Test)] vergleichend untersucht. 2 Falls das HGG an Gewebe fixiert war, war die fur einen gegebenen Antiglobulinverbrauch benotigte HGG-Menge ca. funfmal groser, als wenn sich das HGG in Losung befand. Die Nachweisgrenze lag bei gelostem HGG bei 1,0 μg/ml, bei gewebsfixiertem HGG bei 5,1 μg/ml. Dieser Unterschied beruht offensiehtlich auf sterischen Behinderungseffekten. Als weitere Ursachen sind aber auch Unterschiede im zeitlichen Ablauf der Reaktion in Erwagung zu ziehen. 3 Bei der statistischen Bearbeitung der Ergebnisse zeigte sich auf der Stufe der 95 %-Wahrscheinlichkeit eine erhebliche Streuung. Einzelversuchsansatze auf derselben Platte zeigen jedoch eine geringere Streuung. Die vorliegenden Ergebnisse werden hinsichtlich ihrer praktischen Bedeutung bei der Durchfuhrung des AGC-Tests ausgewertet. Auserdem werden Annaherungswerte fur die aus dem Routineverfahren ermittelbaren Mengen gewebsfixierten Gammaglobulins errechnet. Der Test ist unter die semi-quantitativen Methoden einzureihen.