Green muscardine disease of Hylobius pales (Herbst) (Coleoptera: Curculionidae)

The mode of infection of larval and adult Hylobius pales with Metarrhizium anisopliae, an entomopathogenic fungus, was investigated by means of histology, scanning electron microscopy and the controlled application of conidia. The objective of the study was to explain the large amounts of inoculum necessary to achieve high beetle mortality under field conditions. Spore germination was minimal on beetles and intermediate on larvae, apparently as a result of antibiosis from bacterial and fungal contaminants. High germination percentages resulted after the antibiotic principle was eliminated by surface-sterilizing insect parts. Germ tubes grew extensively over the host surface before they produced appressoria. Penetration of the integument was observed to only take place through procuticular portions, never through sclerites. While no proof for intestinal infection was obtained, invasion from within the buccal cavity was confirmed. Despite limitations imposed by antibiosis, the growth of germ tubes over the host surface and the impenetrability of sclerites, the following field trials with Metarrhizium against Hylobius are encouraged. Plants to be protected should be dipped in spore suspensions at the time of planting. Spores could be applied around the base of plants to be protected. Any means of infecting larvae would seem superior to efforts aimed at infecting the beetles. Zusammenfassung Metarrhizium-Krankheit von Hylobius pales (Herbst) (Col.: Curcul.) Mit Hilfe der Histologie und Raster Elektronenmikroskopie, sowie der gezielten Anwendung von Sporen wurde untersucht, wie der insektentotende Pilz Metarrhizium anisopliae die Larven und Imagines von Hylobius pales infiziert. Ziel der Studie war, die grosen Sporenmengen zu erklaren, die in Feldversuchen notig waren, um eine entsprechende Kafermortalitat herbeizufuhren. In der Anwesenheit von Bakterien und fremder Pilze keimten nur sehr wenige Sporen von Metarrhizium auf der Korperdecke der Kafer, jedoch mehr auf der von Larven. Sterilisierung der Oberflache von Insektenteilen vor der Beimpfung mit Metarrhizium schaltete die antibiotische Wirkung dieser Keime aus und die Sporen zeigten ausgezeichnete Keimkraft. Nach der Keimung wuchsen die Keimschlauche zunachst recht ausgedehnt uber die Insektenhaut und bildeten schlieslich Appressorien aus. Hyphen durchdrangen die Korperdecke nur in den weichen Teilen, nie in den Skleriten. Eine Invasion der Korperhohle vom Verdauungstrakt aus wurde nicht bestatigt, wohl aber aus der Mundhohle. Trotz der beobachteten antibiotischen Einflusse, dem ausgedehnten Wachstum der Keimschlauche uber die Korperdecke der Insekten und der Undurchdringlichkeit der Sklerite, die allesamt ihre Bedeutung fur die Sporendosis im Feldversuch haben, werden folgende Feldversuche mit Metarrhizium als biologischem Bekampfungsmittel gegen Hylobius vorgeschlagen. Die zu schutzenden Pflanzen sollten vor der Pflanzung in eine Sporensuspension getaucht oder Konidien am Fus dieser Pflanzen eingestreut werden. Jede Moglichkeit die Larven zu infizieren, ware Versuchen vorzuziehen, die auf eine Infektion der Imagines abzielen.