Induction and detection of cell‐mediated reactions with different Blastomyces dermatitidis antigenic preparations

Summary. Blastomyces dermatitidis yeast-phase antigens (killed cell, KWY; lysate, Lys; and filtrate, Fil) from canine isolate T-58 were compared with respect to the induction and detection of cellular immune responses in mice. The antigens exhibited good sensitivity and specificity when used to detect a delayed-type hypersensitivity (DTH) response in mice previously immunized with T-58 or Histoplasma capsulatum antigens. Greater reactivity was observed with the KWY and Lys antigens as DTH-inducing agents (immunogens) than with the Fil antigen. The antigens were also compared with regard to the induction and detection of a lympho-proliferative reaction using splenocytes from normal and sensitized mice, and optimal reactivity was demonstrated with the KWY and Fil antigen preparations both as immunogens (absorbance values 0.22–1.60 and 0.20–0.90, respectively) and as in vitro testing antigens (absorbance values 0.60–1.60 and 0.35–1.00 respectively) (P<0.01). Peritoneal macrophages from mice sensitized with Fil and KWY antigens showed the greatest in vitro replication inhibition (RI) of B. dermatitidis yeast cells (RI values of 53% and 50% respectively) (P<0.05). When mitogenic or antigenic lymphocytic supernatants were compared with respect to their ability to enhance the phagocytic activity of unelicited macrophages from normal mice to kill yeast cells, the T-cell mitogens (concanavalin A and phytohaemagglutinin) optimally activated the naive macrophages (45% and 44% RI respectively) compared with the B-cell mitogen (LPS) (23% RI) (P<0.05). Similar results were obtained with the lymphocytic supernatants from mice immunized with KWY cells when activated using KWY or Fil antigens (46% and 40% RI respectively) (P<0.05). Zusammenfassung. Es wurden vier unterschiedliche Hefephase-Antigene (Ganzzell-AG; KWY-AG, ein Lysatantigen; Lysat-Filtrat-AG; Fil-AG) des Blastomyces dermatitidis-Stammes T-58 (Isolat vom Hund) prapariert und hmsichtlich der Induktion zellularer Immunreaktionen an Mausen und deren Erfassung vergleichend untersucht. Die Antigene zeigten gute Sensitivitat und Spezifitat in der Erfassung einer Uberempfindlichkeitsreaktion vom verzogerten Typ (DTH) an Mausen, die vorher mit T-58- oder Histoplasma capsulatum-Antigenen immunisiert worden waren. Mit KWY-AG und Lysat-Filtrat-AG als Immunogenen war eine intensivere DTH-Aktivitat zu beobachten als mit Fil-AG. Die Antigene wurden ferner verglichen hinsichtlich der Induktion und Detektion einer lymphoproliferativen Reaktion an Splenozyten von normalen und sensibilisierten Mausen; hier wurden sowohl mit KWY-AG und Fil-AG optimale Reaktionen erreicht. Peritoneal-makrophagen von Mausen, die mit Fil-AG und KWY-AG sensibilisiert worden waren zeigten in vitro die groste Vermehrungshemmung von B. dermatitidis-Hefephasezellen. Wenn mitogene oder antigene Lymphosyten-Uberstande verglichcii wurden in ihrer Fahigkcit, die Phdgozytose-uncl Abtotungs-Aktivitat nicht-aktivierter Makro-phagen normaler Mause fur Hefephase-Zellen zuerhohen, zeigte sich, daR T-Zell-Mitogene (Con-Auiid PHA) im Gegensatz zum B-Zell-Mitogen LPS naive Makrophagen optimal aktivierten. Ahnliche Ergebiiisse wurden mil Lymphozyten-Uberstan-den von Mausen erhalten, die iiiit KWY-AG immunisiert worden waren, wenn diese mit KWYZcllen oder W A G aktiviert worden waren.