Colletotrichin Causes Rapid Membrane Damage to Plant Cells

The effect of colletotrichin, purified from Colletotricbum tabacum, on a diverse array of physiological processes was determined. Colletotrichin caused rapid loss of membrane integrity, as measured by cellular electrolyte leakage, in leaf discs of tobacco, cucumber, and four nightshade (Solanum) species floated on a 0.3 mM solution of the phy to toxin. The first ultrastructural damage observable was plasmolysis and disruption of the plasmalemma. Loss of membrane integrity occurred at similar rates in light or darkness and was dependent upon the presence of atmospheric oxygen. Membrane destruction was associated with an increase in malondialdehyde formation, an indicator of membrane lipid peroxidation. However, several free radical-quenching compounds did not reduce the effect of colletotrichin on cellular leakage. No direct effect of colletotrichin was found on photosynthesis, respiration, ATPase activity, or membrane-generated proton gradients. Calcium uptake and transport by plant roots were inhibited by the compound; however, the effect was relatively slow and was probably a secondary effect. Colletotrichin acted synergistically with atrazine, additively with paraquat, and antagonistically with acifluorfen. Acifluorfen activity requires oxidation of plastidsynthesized protoporphyrinogen to protoporphyrin IX at the plasmalemma. This process was inhibited by colletotrichin. These data indicate that colletotrichin causes oxidative plasmalemma destruction by an unknown mechanism. Zusammenfassung Colletotrichin verursacht eine rasche Beschadigung der Membran in Pflanzenzellen Ermittelt wurde der Einflus von CoEetotrichin, gereinigt aus Colletotrichum tabacum, auf eine Reihe von physiologischen Prozessen. Blattscheiben von Tabak, Gurken und vier Nachtschattengewachsen (Solanum spp.), die auf einer 0,3 mM-Losung des Phytotoxins schwammen, zeigten eine rasche Beschadigung der Membran, festgestellt durch zellularen Elektrolytenverlust, als Folge der Colletotrichin-Behandlung. Eine Plasmolyse und der Zerfall des Plasmalemmas wurde als erste ultrastrukturelle Beobachtung ermittelt. Ein Verlust der Membranintegritat ereignete sich mit einer ahnlichen Geschwindigkeit im Licht wie in Dunkelheit, und zwar in Abhangigkeit vom Vorhandensein von atmospharischem Sauerstoff. Die Membranzerstorung war mit einer Erhohung der Malondialdehydproduktion verbunden, ein Zeichen der Membranlipidperoxidation. Einige, Freie Radikale loschende Substanzen konnten jedoch den CoUetotrichin-Einflus auf den zellularen Verlust nicht reduzieren. Ein direkter Einflus des Colletotrichins auf die Photosynthese, die Atmung, die ATPase- Aktivitat oder auf membranerzeugte Protongradienten wurde nicht festgestellt. Die Kalziumaufnahme und dessen Transport durch Pflanzenwurzeln wurde durch die Verbindung gehemmt, dies erfolgte relativ langsam und konnte daher als sekundare Wirkung der Substanz betrachtet werden. Colletotrichin wirkte synergistisch mit Atrazin, erganzend mit Paraquat, und antagonistisch mit Acifluorfen. Acifluorfen-Aktivitat benotigt eine Oxidation des plastid-synthetizierten Protoporphyrinogen zu Protoporphyrin IX an der Plasmalemma. Dies wurde durch CoUetotrichin unterdriickt. Die Ergebnisse dieser Untersuchung zeigen, das Colletotrichin eine oxidative Zerstorung des Plasmalemmas durch einen noch unbekannten Mechanismus verursacht.