Soluble Proteins of Guinea Pig Seminal Vesicle Lumen: Purification and Partial Characterization

Summary Luminal contents of guinea pig seminal vesicle were extracted with 0.154 M NaCl and the soluble protein fraction was studied by DEAE-cellulose and Sephadex G-100 column chromatography; anionic, cationic, and SDS-polyacrylamide disc gel electrophoresis; isoelectric focusing; molecular weight determinations by SDS-polyacrylamide disc gel electrophoresis; analysis for neutral carbohydrate; sucrose density-gradient centrifugation for determination of sedimentation coefficients; and amino acid analyses. Four protein fractions (referred to as proteins 1, 2, 3, and 4 in order of elution) were obtained by DEAE-cellulose column chromatography. Proteins 1, 2, and 4 gave single major bands in multiple disc gel electrophoretic systems. Protein 3 gave one major band and one minor component believed to be a fragment of a primary vesicular protein. Protein 1 is very basic and probably represents the clotting protein of guinea pig semen. The three nonclotting proteins could not be detected in serum and are probably intrinsic to seminal vesicle epithelium. All four proteins were found in animals weighing 700 g or more; only two of the three nonclotting proteins were found in more than half of the younger animals. This makes it even more likely that one or more of the nonclotting proteins could serve as a useful gene marker in studies of androgen mechanisms. Zusammenfassung Bei der Aufarbeitung des Inhaltes der Samenblasen von Meerschweinchen wurden 4 Proteinfraktionen mittels der DEAE-Cellulose-Saulen-Chromatographie nachgewiesen. Alle 4 Fraktionen wurden bei Tieren gefunden, die mehr als 700 g wogen. Das Protein 1 reprasentiert wahrscheinlich das Gerinnungsprotein des Meerschweinchenspermas. Die drei Nichtgerinnungsproteine konnten nicht im Serum bestimmt werden und sind wahrscheinlich wesentlich fur das Samenblasenepithel. Zwei der drei Nichtgerinnungsproteine wurden in mehr als der Halfte der Jungtiere nachgewiesen. Es wird die Frage diskutiert ob moglicherweise eins oder mehrere der Nichtgerinnungsproteine als Gen-Markierer bei Studien des Androgenmechanismus dienen konnen. Resumen Se extrajo el contenido de la vesicula seminal del cobaya con CINa 0.154 M y la fraction de proteina soluble se estudio mediante cromatografia en columna de celulosa DEAE y Sephadex G-100; electroforesis anionica, cationica y gel de poliacrilamida-SDS; analisis para los carbohidratos neutros; determination de coefficientes de sedimentation por centrifugacion en diferentes gradientes de densidad de sucrosa; y analisis de aminoacidos. Se obtuvieron 4 fracciones proteicas (referidas como proteinas 1, 2, 3, y 4 segun el orden de elucion) por cromatografia en columna de celulosa DEAE. Las proteinas 1, 2, y 4 dieron una sola banda grande en multiples sistemas electroforeticos sobre gel. La proteina 3 dio una banda mayor y un componente menor considerado como un fragmento de una proteina vesicular primaria. La proteina 1 es muy basic a y probablemente representa la proteina coagulante del semen de cobaya. Las tres proteinas no coagulantes no se pudieron detectar en el suero y son probablemente intrinsecas al epitelio de las vesiculas seminales. Las 4 proteinas se encontraron en animates con peso de 700 g. o mas. Solo dos de las tres proteinas no coagulantes se encontraron en mas de la mitad de los animales mas jovenes. Esto hacemas probable que una o mas de las proteinas no coagulantes pueda servir como un util marcador genico en los estudios de mecanismos androgenicos.