Heat stable human plasma protein fractions electrophoretically rich in albumin.

Summary The effect of increasing ethanol Concentration and decreasing pH on the separation of Fraction II +III from human plasma on the heat stability of the protein fraction in the supernatant fluid remaining has been studied. When the ethanol concentrations used to separate Fraction II + III were 30 to 35% and the pH and temperature maintained at 6.3 to 6.8 and -5° C, respectively, the plasma protein fractions obtained from the supernatant fluids showed electrophoretically, an albumin concentration of 88 to 92%. On heating for 10 hours at 60° C very little of a fast moving component in the ultracentrifuge and very little change in the electrophoresis patterns were observed. Nephelometric changes due to heating were also quite small. The ratio of the area of the main ultra centrifugal component of the heated fractions to that of the unheated was 0.97 to 0.90. Thus, these findings stand in contrast to the results obtained with earlier methods which approximated the corresponding steps of the Cohn group [1]. When the ethanol concentration used to separate the Fraction II + III proteins was 25%, the fractions obtained from the supernatant fluid showed electrophoretically, an albumin concentration of 80 to 83%. On heating of this fraction for 10 hours at 60° C the amount of fast moving component in the ultracentrifuge was larger and the change in the electrophoretic patterns was greater than those observed above. Nephelometric changes were also greater. The ratio of the areas of the main ultracentrifuge component of the heated fraction to that of the unheated was 0.92. Resume L'effet de l'augmentation de la concentration de l'ethanol et de la diminution du pH sur la separation des fractions II et III du plasma humain et sur la thermostabilite des fractions proteiniques dans le liquide surnageant residuel a ete etudie. Quand les concentrations d'ethanol utilisees pour separer la fraction II + III est de 30 a 35%, et, le pH et la temperature maintenue de 6,3 a 6,8 et a -5° C respectivement, les fractions plasmatiques obtennes a partir du surnageant montrent a l'analyse electrophoretique une concentration d'albumine se situant entre 88 et 92%. Apres chauffage de 10 heures a 60' C, il y a tres peu de composant a sedimentation rapide a l'ultracentrifugation et l'image electrophoretique ne presente que de tres faibles modifications. Les modifications nephelometriques dues au chauffage sont aussi tres faibles. Le rapport des surfaces des composants principaux observes a l'ultracentrifugation entre les fractions chauffees et non chauffees est de 0,97 a 0,98. Ainsi, ces decouvertes contragtent avec les resultats obtenus avec les produits de fractionnement fabriques selon les anciennes methodes derivdees des donnees du groupe de Cohn [1]. En effet, lorsque la concentration en ethanol pour la preparation des fractions II+III du plasma est de 25%, les fractions obtenues dans le liquide surnageant montrcnt a l'analyse electrophoretique une concentration d'albumine de 80 a 82%. Apres chauffage de cette fraction a 60° C pendant 10 heures, la quantite du composant a sedimentation rapide a l'ultracentrifugation est plus grande, et les modifications de l'image electrophoretique sont plus marquees que celles observees avec la methode precedente. Les modifications nephelometriques sont aussi plus accentuees. Le rapport des surfaces des composants principaux observes a l'ultracentrifugation entre les fractions chauffees et non chauffees est de 0,92. Zusammenfassung: Der Einflus steigender Athanolkonzentrationen und sinkender pH-Werte bei der Abtrennung der Cohnschen Fraktion II+III aus humanem Plasma auf die Warmestabilitat der Proteinfraktion in der uberstehenden Losung wurde untersucht. Sofern die Athanolkonzentratiou zur Abtrennung der Fraktion II + III auf 30–35% erhoht wurde, wahrend das pH 6,3–6,8 und die Temperatur -5° C betrugen, wies die im Uberstehenden verbleibende Proteinfraktion einen Alburningehalt von 88–92% auf. Nach dem Erwarmen einer 5%igen Losung dieser Fraktion wahrend 10 h auf 60° C waren in der Ultrazentrifuge nur eine sehr geringe schnellere Komponente und in der Elektrophorese nur kleine Anderungen featstellbar. Die Trubungszunahme durch die Warmebehandlung war gering. Das Verhaltnis der Hauptkomponente der erhitzten zur unerhitzten Losung in der Ultrazentrifuge war 0,97 bis 0,98. Diese Befunde sind im Widerspruch zu den mit alteren Methoden, die sich an die Cohnschen Verfahren [1] anlehnten, gefundenen Ergebnissen. Wenn die Athanolkonzentration zur Abtrennung der Fraktion II + III 250% betrug, zeigte die Proteinfraktion in der uberstehenden Losung einen Albumingehalt von 80–82%. Nach der Warmebehandlung dieser Fraktion wahrend 10 h bei 60° C war die schnelle Komponente in der UZ groser und die Aderungen in der Elektrophorese waren starker ausgepragt. Auch waren die Trubungszunahmen erheblicher. Das Verhaltnis der Hauptkomponenten der erhitzten und der unerhitzten Praparate in der Ultrazentrifuge war 0,92.