Simplified measurement of p-aminohippurate and other arylamines in plasma and urine.

Simplified measurement of p-aminohippurate and other arylamines in plasma and urine. A rapid method is described for the determination of p-aminohippuric acid and other primary aromatic amines. Deproteinization and acidification of the sample were effected satisfactorily in one step by the addition of a buffered 1.0M dichloroacetate—0.3M p-toluenesulfonate reagent, at an optimal pH of 1.4 for the subsequent color reaction. This acidic reagent was also heat stable. Recoveries of p-aminohippurate and other arylamines from plasma were complete with use of this reagent as protein precipitant. Addition of ethanolic p-dimethylaminobenzaldehyde to the supernatant resulted in the prompt formation of a yellow complex, which measured photometrically in accordance with the Beer-Lambert law. The method was capable of measuring p-aminohippuric acid, p-aminobenzoic acid, p-aminosalicylic acid and sulfonamides containing the free p-amino radical. Urea, at high concentration, was the only one of several biological substances tested, which interfered appreciably with this method for p-aminohippurate analyses. The endogenous blank values of urine in this method appear negligible in renal plasma clearance studies with p-aminohippurate; they were largely removed by photometric readings at 465 nm rather than at 450 nm, or by urease pretreatment of the sample. This simplified method should be useful in analyzing biological fluids for primary arylamines and especially for the determination of p-aminohippuric acid in renal function studies. Determination simplifiee du para-amino hippurate et des autres amines aromatiques dans le plasma et l'urine. Une methode rapide de determination de l'acide para-amino hippurique et des autres amines aromatiques primaires est decrite. La deproteinisation et l'acidification de l'echantillon sont obtenues de facon satisfaisante en une etape par l'addition d'un reactif tamponne 1,0M dichloroacetate—0,3M p-toluenesulfanate a un pH optimum de 1,4 pour la reaction coloree ulterieure. Ce reactif acide est thermostable. Les recuperations de para-amino hippurate et d'autres amines aromatiques dans le plasma sont totales avec ce reactif utilise comme defecant. L'addition de p-dimethylaminobenzaldehyde ethanolique determine la formation rapide d'un complexe jaune qui peut etre mesure par photometrie suivant la loi de Beer-Lambert. La methode permet la determination de l'acide para-amino hippurique, de l'acide para-amino benzoique, de l'acide para-amino salicylique et des sulfamides contenant un radical libre para-amino. L'uree aux concentrations elevees, est la seule parmi diverses substances biologiques etudiees qui interfere de facon importante avec cette determination du para-amino hippurate. Les valeurs de blanc endogene de l'urine sont negligeables avec cette methode dans les determinations du debit plasmatique renal par la para-amino hippurate. Ces valeurs de blanc sont nettement diminuees par la lecture a 465 nm plutot qu'a 450 nm ou par le pre-traitement a l'urease de l'echantillon. Cette methode simplifiee pourrait etre utile pour l'analyse d'echantillons biologiques contenant des amines aromatiques primaires et particulierement pour la determination de l'acide para-amino hippurique dans l'etude des fonctions renales.