Diagnose der Mykoplasmen‐Mastitis beim Rind mit Hilfe von fluoreszierenden Antikörpern

Zusammenfassung Fur die Diagnose der Mykoplasmen-Mastitis des Rindes wurde eine Methode zum Nachweis von Mykoplasmen im Milchausstrich unter Benutzung von fluoreszierenden Antikorpern entwickelt. Die Antikorper stammten von Kaninchen, die mit Mycoplasma agalactiae var. bovis (Stamm Donetta) immunisiert worden waren. Bei neun mit diesem Mykoplasmen-Stamm infizierten Euter-Vierteln wurden die Erreger mit dieser Methode vor oder bei dem ersten Auftreten von makroskopisch feststellbaren Milchveranderungen und bis zu 45 Tagen post infect, innerhalb weniger Stunden erkannt, wahrend bei der Kultivierung auf Blutagarplatten funf Tage verstrichen, bis Mykoplasmen-Kolonien sichtbar wurden. In vierzig Milchproben von Kuhen, die aus anderen Grunden an Mastitis erkrankt waren, konnten mit der gleichen Methode Mykoplasmen nicht festgestellt werden; falsche positive Ergebnisse kamen also nicht zur Beobachtung. In Ausstrichen von 29 Mykoplasmen-Stammen farbten sich die sechs Mykoplasmen-Stamme, die von naturlichen Mastitis-Fallen stammten, im Gegensatz zu den 23 Stammen anderer Herkunft spezifisch an. Aufgrund dieser Untersuchungs-Ergebnisse kann die Immunofluoreszenz-Methode fur die Diagnose der Mykoplasmen-Mastitis als schnell und zuverlassig empfohlen werden. Summary Diagnosis of Mycoplasma mastitis with the aid of fluorescent antibodies A fluorescent antibody technique was developed for the diagnosis of bovine Mycoplasma mastitis. Antibodies were produced in rabbits immunized with Mycoplasma agalactiae var. bovis (Donetta strain). With this technique it was possible to demonstrate Mycoplasma organisms in milk smears from 9 infected quarters before or at least by the time clinical signs became apparent and up to 45 days postinfection. Diagnosis was possible within a few hours using this method, while it took at least 5 days to obtain visible colonies on agar plates. Forty milk samples from cows with mastitis due to other causes were tested by this method. Mycoplasma organisms were not demonstrated so false positives did not occur. Smears from 29 Mycoplasma strains were investigated with these same fluorescent antibodies. All 6 strains from natural mastitis outbreaks were stained while 23 strains from other sources were not. It appears that the fluorescent antibody technique is a reliable and rapid method for the diagnosis of bovine Mycoplasma mastitis. Resume Diagnostic de la mastite a mycoplasmes chez la vache a l'aide d'anticorps fluorescents Une methode a ete mise au point pour diagnostiquer la mastite a mycoplasmes chez la vache, qui consiste a utiliser des anticorps fluorescents pour mettre en evidence les mycoplasmes dans les frottis du lait. Les anticorps furent obtenus en immunisant des lapins avec Mycoplasma agalactiae var. bovis (souche Donetta). Grâce a cette methode, nous sommes parvenus a deceler l'agent en quelques heures, dans 9 quartiers infectes avec cette souche de mycoplasmes, avant ou des l'apparition de l'alteration macroscopique du lait et ceci jusqu'a 45 jours apres l'infection, alors qu'il faut compter 5 jours jusqu'a la formation de colonies de mycoplasmes visibles dans les cultures sur plaques au sang. Sur 40 echantillons de lait de vaches atteintes de mastites d'origines diverses, nous n'avons pas trouve de mycoplasmes par cette methode, ce qui exclut la presence de faux resultats positifs. Sur le frottis de 29 souaes de mycoplasmes, nous n'avons obtenu de fluorescence specifique qu'avec les 6 soues provenant des cas naturels de mastite et non avec les 23 autres souches d'origines diverses. Sur la base de ces observations, on peut recommander la methode par immunofluorescence pour un diagnostic rapide et precis de la mastite a mycoplasmes. Resumen Diagnostico de la mamitis micoplasmatica en la vaca con ayuda de los anticuerpos fluorescentes Para diagnosticar la mamitis por micoplasmas en vacas, se elaboro una tecnica para identificar micoplasmas en el frote lacteo utilizando anticuerpos fluorescentes. Los anticurpos procedian de conejos, inmunizados con Mycoplasma agalactiae var. bovis (estirpe Donetta). En nueve cuarterones infectados con esta cepa micoplasmatica se reconocieron los agentes etiologicos con la tecnica mencionada antes o al aparecer las primeras alteraciones lacteas comprobables macroscopicamente y hasta 45 dias post infectionem, en el plazo de pocas horas, mientras que con el cultivo en placas de agar-sangre transcurrian cinco dias hasta tornarse visibles las colonias de micoplasmas. En cuarenta muestras lacteas de vaca, que habian enfermado de mastitis por otras causas, con el mismo procedimiento no pudieron verificarse micoplasmas; por tanto, no se observaron resultados positivos falsos. En frotes de 29 estirpes de micoplasmas, se coloreaban especificamente las seis cepas micoplasmaticas procedentes de los casos naturales de mastitis, en contraposicion a las 23 cepas de otro origen. Fundamentados en estos resultados de investigacion, se puede recomendar el metodo de inmunofluorescencia para el diagnostico de la mamitis micoplasmatica por ser rapido y seguro.