Distribution of endogenous albumin in the rat glomerulus: Role of hemodynamic factors in glomerular barrier function

Distribution of endogenous albumin in the rat glomerulus: Role of hemodynamic factors in glomerular barrier function. Using an ultrastructural immunoperoxidase technique, the distribution of endogenous albumin in the rat glomerulus was delineated under normal and abnormal hemodynamic conditions. Superficial glomeruli in anesthetized Munich-Wistar rats were rapidly fixed in situ by applying glutaraldehyde to the renal surface. Fixed tissue slices were treated with anti-rat albumin Fab fragments conjugated to horseradish peroxidase (HRP), and were then subjected to the Graham-Karnovsky ultrastructural peroxidase localization procedure. During normal blood flow, dense reaction product specific for albumin was largely confined to the glomerular capillary lumen and endothelial fenestrae, with only small amounts detectable in the lamina rara interna , and none deeper in the basement membrane (GBM) or in the urinary space. If cortical tissue was subjected to routine immersion fixation, or if fixation was performed in situ after ligation of the renal artery, reaction product was detected throughout the GBM and in the urinary space. If fixation was performed in situ after ligation of the renal artery and vein (or artery, vein and ureter), reaction product was found in the GBM and, in very large amounts, in the urinary space. If blood flow was restored for ten minutes after five minutes of renal pedicle (artery and vein) occlusion, the distribution of albumin returned to normal. Thus, glomerular barrier function depends upon the maintenance of normal blood flow conditions. Distribution de l'albumine endogene dans le glomerule du rat: role des facteurs hemodynamiques dans la fonction de barriere glomerulaire. La distribution de l'albumine endogene dans le glomerule du rat a ete precisee dans des conditions hemodynamiques normales et anormales au moyen d'une technique ultrastructurale utilisant l'immunoperoxidase. Les glomerules superficiels de rats Munich–Wistar ont ete rapidement fixes in situ par application de glutaraldehyde a la surface du rein. Des tranches de tissu fixe ont ete traitees par des fragments Fab anti-albumine de rat conjugues a de la peroxydase du raifort (HRP) puis soumises au procede de localisation ultrastructurale de la peroxydase de Graham–Karnovsky. Quand le debit sanguin est normal, le produit dense de reaction specifique de l'albumine est principalement localise dans les lumieres des capillaires glomerulaires et les fenetres endothelials. De faibles quantites sont detectables dans la lamina rara interna alors que plus profondement dans la membrane basale (GBM) ou dans l'espace urinaire il n'y a pas de produit de reaction. Quand le tissu cortical est soumis a la fixation par immersion, ou quand la fixation est realisee in situ mais apres ligature de l'artere renale, le produit de reaction est trouve dans toute la GBM et dans l'espace urinaire. Si la fixation est realisee in situ apres la ligature de l'artere et de la veine renales (ou de l'artere, de la veine et de l'uretere), le produit de reaction est detecte dans la GBM et, en grande quantite, dans l'espace urinaire. Quand le debit sanguin est retabli pendant dix minutes apres cinq minutes d'occlusion du pedicule renal (artere et veine), la distribution de l'albumine redevient normale. Ainsi la fonction de la barriere glomerulaire est dependante du maintien des conditions normales de debit sanguin.