Spontaneous appearance of cytopathology and rat C-type virus (WF-1) in a rat embryo cell line.

An established line (WF-1) of Wistar/Furth rat embryo cells spontaneously developed cytopathology after about 2 years in vitro. The cellular changes appeared within 5–7 days after subculturing of the cultures and consisted of altered rounded and fusiform cells with dark, prominent nuclei. These changes increased after removal of bovine amniotic fluid from the culture nutrient but were not apparent if the cultures were subcultured at 3–4 day intervals. Most of the altered cells were viable, but they failed to multioly under the conditions employed. Electron microscopical examination of the WF-1 cells revealed numerous extracellular and budding C-type virus particles. The cells, when inoculated into rats, produced progressively growing fibrosarcomas which also contained C-type particles. Initially the WF-1 virus failed to produce visible effects in the REL line of Sprague-Dawley rat embryo cells. Several months later, upon concentration and banding at 1.16 g/cm3 in a sucrose gradient, low-titered infectious virus of about I TCID50 per 10,000 virus particles was recovered. This produced foci of predominantly viable rounded cells in REL cultures similar to those induced by the C-type virus (RMTDV or BV-1) previously isolated from chemically induced rat mammary tumors. Immune BV-1 serum prevented the WF-1 virus from producing these cellular effects. Tests for properties characteristic of murine leukemia viruses (gs-1 antigen, gs-3 interspecies antigen, and the XC reaction) were negative indicating that the WF-1 virus was not a mouse virus. These observations suggested that upon prolonged cultivation in vitro the WF-1 rat embryo cells spontaneously liberated a rat C-type virus related to the BV-1. Whether the cell-altering and partially lethal effects produced by the WF-1 virus were due to some cytopathic C-type particles in a generally non-cytopathic population or reflected the concentration of only one biological type of particles needs further study. Apparition spontanee D'une cytopathologie et d'un virus du type C (WF-1) particulier au rat dans une lignee cellulaire de l'embryon de rat Dans une lignee etablie (WF-1) de cellules d'embryon de rat Wistar/Furth, on a observe l'apparition d'une cytopathologie spontanee apres environ deux ans in vitro. Les alterations cellulaires ont comence dans les 5 a 7 jours suivant la constitution de sous-cultures; il s'agissait de cellules alterees, arrondies et fusiformes, avec des nouyaux sombres et proeminents. Ces alterations ont augmente apres que l'on a retire le liquide amniotque bovin de la substance nutritive des cultures, mais elles ne sont pas apparues lorsque les cultures ont ete sous-cultivees a 3 ou 4 jours d'inter valle. La plupart des cellules alterees etaient viables, mais elles ne sont pas parvenues e se multiplier dans les conditions de l'experience. L'examen des cellules WF-1 au microscope electronique a revele la presence de nombreuses particules virales de type C extracellulaires ou en formation sur les cellules. Lorsqu'elles etaient inoculees a des rats, les cellules produisaient des fibrosarcomes se developpant progressivement, qui contenaient egalement des particules de type C. A l'origine, le virus WF-1 n'a pas produit d'effets visibles sur la lignee REL de cellules d'embryons de rats Sprague-Dawley. Plusieurs mois apres, la concentration et la separation en bandes a 1.16 g/cm3 en gradient de sucrose a permis de recuperer du virus infectieux a faible titre (environ 1 TCI50 pour 10 000 particules virales). On a alors observe dans les cultures REL des foyers generalement formes de cellules rondes viables, semblables a celles qui sont induites par les virus du type C (RMTDV ou BV-1) et qui avaient deja ete isolees a partir de tumeurs mammaires de rats induites chimiquement. Les immunserums contre le BV-1 empěchent le virus WF-1 de produire ces effets cellulaires. Les tests sur les proprietes caracteristiques des virus de la leucemie murine (antigene gs-1, antigene inter-especes gs-3 et reaction XC) etaient negatifs, ce qui indique que le virus WF-1 n'est pas un virus de souris. Ces observations donnent a penser que si l'on prolonge la culture in vitro, les cellules d'embryon de rat WF-1 liberent spontanement un virus de type C particulier au rat et lie au BV-1. Il est necessaire d'effectuer des etudes complementaires pour savoir si l'alteration cellulaire et les effets partiellement lethaux produits par le virus WF-1 sont dus a des particules cytopathiques de type C presentes dans une population generalement non cytopathique ou a la concentration d'un seul type biologique de particules.