Nephritic factor: Description of a new quantitative assay and findings in glomerulonephritis

Nephritic factor: Description of a new quantitative assay and findings in glomerulonephritis. A sensitive, quantitative test for nephritic factor (NF) in human serum is reported. The test is based on the capacity of NF to initiate fluid phase consumption of the third complement (C) component in the presence of magnesium ions (Mg ++ ) and of factors of the alternative pathway of C activation. These factors as well as C3 and C5 were supplied by the incorporation of normal human serum (NHS) into the assay mixture. In order to prevent C3 (and C5) consumption via the Ca ++ and Mg ++ -dependent classical pathway, the test was performed in the presence of the chelating agent Mg-ethylene bis (oxyethylenenitrilo) tetraacetic acid (Mg EGTA) which interacts preferentially with Ca ++ . The Mg EGTA concentration was found to be critical, a final concentration of 5 m M in the assay mixture being required for optimal results. By its heat stability (54° to 56°C, 30 min), NF could be distinguished from other, heat-labile NF-like factors. The NF test was applied to five categories of patients with glomerulonephritis (GN). Heat-stable NF activity was found in seven of 17 sera in the membranoproliferative glomerulonephritis (MPGN) group. Two of the 12 acute poststreptococcal GN sera had NF-like activity which disappeared upon heating. Serum C3 and proactivator (PA) concentrations varied widely in all groups but a clear positive relationship was found between the presence of NF and low serum C3 concentrations in MPGN. Renal immunofluorescence in MPGN indicated a lesser amount of lg deposited in glomeruli from patients with NF when compared to the NF negative patients. Both groups had heavy C3 deposits. The availability of a sensitive, quantitative assay for NF may help to provide further insight into the various pathogenic mechanisms in different forms of MPGN. Facteur nephritique: Description d'un nouveau dosage quantitatif et constatations dans les glomerulonephrites. Un dosage quantitatif et sensible du facteur nephritique (NF) dans le serum humain est decrit. Le dosage repose sur la capacite de NF d'initier la consommation en phase liquide du troisieme composant due complement (C) en presence d'ions magnesium (Mg ++ ) et des facteurs de la voie alterne d'activation du complement. Ces facteurs, de meme que C3 et C5, sont fournis par l'adjonction de serum humain normal (NHS) au milieu de reaction. Pour empecher la consommation de C3 (et de C5) par la voie classique Ca ++ et Mg ++ dependante le dosage est realise en presence du chelateur Mg-ethylene bis (oxyethylenenitrilo) acide tetra-acetique (Mg EGTA) qui interagit preferentiellement avec Ca ++ . Il a ete constate que la concentration de Mg EGTA est critique, une concentration finale de 5 m M dans le milieu de reaction est necessaire pour des resultats optimaux. NF peut etre distingue des autres facteurs semblables mais thermolabiles par sa stabilite a la chaleur (54° a 56°C, 30 min). Le dosage de NF a ete utilise dans cinq groupes de malades atteints de glomerulonephrites (GN). Une activite NF thermostable a ete trouvee dans le serum de 7/17 sujets du groupe des GN membrano-proliferatives. Le serum de deux des douze sujets atteints de GN aigue post-streptococcique a montre une activite semblable a NF mais qui a disparu apres chauffage. Les concentrations de C3 et de pro-activateur (PA) etaient variables dans tous les groupes, cependant une correlation positive nette a ete constatee entre la presence de NF et des concentrations basses de C3 dans la MPGN. L'immunofluorescence du tissu renal dans la MPGN a montre une moindre quantite d'Ig deposee dans les glomerules des malades qui avaient le facteur NF par comparaison aux malades NF negatifs. Les deux groupes avaient des depots importants de C3. La disponibilite d'un dosage sensible et quantitatif de NF peut aider a atteindre une meilleure comprehension des divers mecanismes pathogeniques dans les differentes formes de MPGN.