EFFECT OF IONIC STRENGTH ON THE SEROLOGIC BEHAVIOR OF RED CELL ISOANTIBODIES.

Summary The effect of a low ionic strength environment on the serologic activity of 64 anti-sera was studied by substituting iso-osmotic glycine for buffer in the diluent. Some enhancement was achieved with most antibodies, both complete and incomplete, except for antibodies with ABO and Lewis specificity. Red cell sensitization and possibly agglutination of sensitized cells appear to be enhanced in the presence of a low ionic strength milieu. A reduction of ionic strength from 0.26 to about 0.07 results in reducing the antiserum requirement by about one-half. The most marked enhancement occurred with Rh isoantibodies and the glycine-antiglobulin technique enhanced significantly the detection of “low grade” Du cells. Enzyme modification and low ionic strength (glycine-buffer) appear to be equivalent in potentiating antibody activity except that antigens inactivated by enzymes (M) are enhanced by glycine-buffer and other antigens enhanced by enzymes (Le) are not potentiated by glycine-buffer. These findings indicate that a low ionic strength diluent is most useful as a supplemental technique and should not displace current techniques until more experience is available. Resume L'effct d'un milieu de basse force ionique sur l'activite serologique de 64 antiserums a ete etudie en utilisant un tampon iso-osmotique au glycocolle pour les dilutions. On a observe une augmentation de l'activite de la plupart des anticorps ccmplets et incomplete sauf pour les anticorps de specificite ABO et Lewis. La sensibilisation des erythrocytes et l'agglutination possible des erythrocytes sensibilises semble etre augmentee en presence de milieu a force ionique basse. Une reduction de la force ionique de 0,26 a 0,07 permet de reduire de moitie la quantite d'anti-serum requise. L'augmentation la plus marquee a ete obtenue avec les iso-anticorps anti-Rhesus et la technique a l'antiglobuline-glycocolle augmente d'une maniere significative la mise en evidence des erythrocytes Du. Les modifications obtenues par les enzymes et par les tampons glycocolles a basse force ionique semblent etre equivalentes en ce qui concerne la potentialisation de l'activite des anticorps, sauf pour les antigenes inactives par les enzymes (M) qui sont augmentes par le tampon glycocolle et les antigenes potentialises par les enzymes qui ne le sont pas par le tampon glycocolle. Ces faits demontrent qu'un solvant a basse force ionique est surtout utilisable comme une technique complementaire et qu' il ne doit pas faire ecarter les techniques usuelles jusqu'a ce qu'on ait davantage d'experience a ce sujet. Zusammenfassung Zum Studium des Einflusses eines Milieus mit niederer Ionenstarke auf die serologische Aktivitat von 64 Antiseren wurde der Puffer der Aufschwemmungsflussigkeit durch isoosmotisches Glyzin ersetzt. Mit Ausnahme der ABO- und Lewis-spezifischen Antikurper wurde bei den meisten Antikurpern, sowohl bei kompletten wie auch bei inkompletten, eine Verstarkung der Reaktionen beobachtet. Sowohl die Sensibili-sierung der Erythrozyten als wahrscheinlich auch ihre Agglutination werden in einem Milieu niederer Ionenstarke verstarkt. Durch Herabsetzung der Ionenstarke von 0,26 auf ca. 0,07 gelingt es, den Antiserumbedarf auf ca. die Halfte zu senken. Die ausgesprochenste Verstarkung wurde bei Rh-Isoantikurpern beobachtet. Mit Hilfe der Glyzin-Antiglobulintechnik gelang es, “low grade” Du-Zellen wesentlich besser zu erfassen. Die Enzymmodifikation der Zellen und die Herabsetzung der Ionenstarke (Glyzin-Puffer) sind hinsichtlich ihres Verstarkereffektes gegenuber der Antikurperaktivitat ungefahr gleichwertig. Dabei ist allerdings zu berucksichtigen, das Antigene, die durch Enzyme inaktiviert werden (M), im Glyzin-Puffer verstarkt erscheinen, wahrend andere Antigene, die durch Enzyme verstarkt werden (Le), durch den Glyzin-Puffer keine Verstarkung erfahren. Die vorgelegten Ergebnisse zeigen, das die Herabsetzung der Ionenstarke eine brauchbare zusatzliche blut-gruppenserologische Methode darstellt, welche aber, bevor zusatzliche Erfahrungen vorliegen, die bisher ublichen Techniken noch nicht zu ersetzen vermag.