Limitations of heterologous reagents in the elucidation of blood group H(O) specific structures.

Summary Over 120 monosaccharides, simple glycosides and polysaccharides have been investigated for their ability to inhibit the action of heterologous anti-H(O) antibody-like substances in eel serum and Lotus tetragonolobus seeds on human H(O) antigens. Previously held ideas on the stereospecificity of serological reactions do not apply to the eel serum antibody, for while L-fucose and some of its derivatives are highly active substances, equal activity is also found among substituted members of the D-series in both hemagglutination and precipitation inhibition tests. The relative inhibitory activities of the various fucose derivatives in the precipitin inhibition assay did not parallel those found in the hemagglutination inhibition test. In the Lotus system significant activity was observed for D-allose and its derivatives and for substituted D-glucoses. These sugars are not related to fucose which was thought to be the structure complementary to the reactive site of the Lotus agglutinin. The studies presented here show the limitations of such heterologous agents in the prediction of immunochemically specific groups. On the other hand, this investigation has also confirmed their value in the analysis of chemical structures provided stringent precautions in the interpretation of the results are taken and the serological findings are properly correlated with strictly chemical analysis. Resume Plus de 120 monosaccharides, glycosides simples et polysaccharides ont ete etudies quant a leur capacite d'inhiber l'action d'« anticorps » anti-H (O) du serum d'anguilles et des semences de lotus tetragonolobus sur des antigenes humains H (O). Les idees admises precedemment sur la stereospecificite des reactions serologiques ne s'appliquent pas a l'anticorps de serum d'anguille; en effet, alors que le L-fucose et certains de ses derives sont des substances hautement actives, on trouve une activite egale chez les homologues substitues des series D dans les tests d'inhibition de l'hemagglutination et de la precipitation. Les activites inhibitrices relatives des divers derives du fucose lors des essais d'inhibition ne furent pas paralleles a celles trouvees dans le test d'inhibition de l'hemagglutination. Dans le systeme Lotus, une activite importante fut observee pour le D-allose et ses derives et pour les D-glucose substitutes. Ces sucres ne sont pas apparentes au fucose que l'on pensait etre la structure complementaire du groupe reactif de l'agglutinine de Lotus. Les etudes presentees ici demontrent que les limites de ces agents heterologues pour la mise en evidence de groupe immunochimiquement specifique n'est pas sure. D'autre part, cette etude a confirme la valeur de telles methodes dans l'analyse des structures chimiques, pour autant que de grandes precautions soient prises dans l'interpretation des resultats et que les resultats serologiques soient correctement confrontes avec l'analyse purement chimique. Zusammenfussung Es wurden mehr als 120 Monosaccharide, einfache Glykoside sowie Polysaccharide auf ihre Hemmwirkung auf die heterologen Anti-H(O)-Antikorper ahnlichen Substanzen des Aalserums und der Lotus tetragonolobus-Samen gegenuber menschlicher H(O)-Antigenen gepruft. Die fruheren Vorstellungen uber die Stereospezifitat serologischer Reaktionen lassen sich nicht auf den Aalserumantikorper anwenden, da dessen Aktivitat einerseits durch L-Fukose und einige ihrer Abkommlinge, anderseits aber auch durch substituierte Verbindungen der D-Reihe sowohl in der Hamagglutination als auch in der Prazipitationshemmung gehemmt werden kann. Der im Prazipitationshemmungsversuch gefundene Hemmwert der verschiedenen Fukosederivate lief nicht parallel zu den bei der Hamagglutinationshemmung festgestellten Werten. Im Lotus-System wurde bei D-Allose und ihren Abkommlingen sowie bei substituierten D-Glukosen eine ausgepragte Aktivitat gefunden. Diese Zucker sind nicht verwandt mit der Fukose, die nach den bisherigen Anschauungen als Komplementarstruktur des Lotus-Agglutinins betrachtet wurde. Die vorgelegten Daten zeigen deutlich, das durch Verwendung heterologer Substanzen in bezug auf den Nachweis immunochemisch spezifischer Gruppen nur bedingt schlussige Ergebnisse erzielt werden konnen. Trotzdem sind solche Untersuchungen zur Erfassung der chemischen Struktur reaktiver Gruppen von hohem Wert. Eine kritische Beurteilung der Ergebnisse ist unerlaslich und die serologischen Befunde mussen mit den chemischen Analysedaten streng korreliert werden.