Estradiol renal receptor molecules and estradiol-dependent antinatriuresis

Estradiol renal receptor molecules and estradiol-dependent antinatriuresis. A 35% decrease in urinary excretion of sodium was produced when 17β-estradiol was administered to adrenalectomized male rats in doses of 40 µg/day. Such estrogendependent retention of sodium independent of mineralocorticoid secretion suggests the possibility of a direct effect of estrogens on the renal tubule. We here report the presence of renal estradiol receptor molecules in the cytosol fraction of rat kidney homogenates incubated at 4° C for 3.5 hr with 1 to 4 × 10 -9 M 3 H-estradiol-17β. These estradiol receptor sites have an apparent K association of 6.1 × 10 10 liters/mole and a maximal binding capacity of 5.4 × 10 -14 moles per mg of cytosol protein. A tenfold excess of non-radioactive estradiol reduced [ 3 H] estradiol binding by 67%; the same amount of estriol reduced binding by 45%, while a series of nonestrogenic steroids had no significant effect on binding. After rat kidney slices were incubated at 37° C for 45 min with 10 -9 M 3 H-estradiol prior to preparation of subcellular fractions, a considerable amount of estradiol (1.5 × 10 -13 moles per mg of protein) was extracted from the purified nuclear fraction. The addition of a hundred-fold excess of non-radioactive estradiol to the incubation medium reduced the 3 H-estradiol in the nuclear fraction by 76%, while a hundredfold excess of aldosterone had no effect on nuclear content of estradiol. These results compare favorably to those obtained with receptor molecules from other estrogen-responsive tissues and provide presumptive evidence for the involvement of renal estradiol receptor sites in the effect of estrogens on sodium excretion. Molecules renales receptrices d'oestradiol et antinatriurese dependante de l'oestradiol. Le 17β-oestradiol administre a des rats mâles, surrenalectomises, a la dose de 40 µg/jour a produit une diminution de 35% de l'excretion urinaire du sodium. Une telle retention de sodium dependante des oestrogenes, independante des mineralocorticoides, suggere la possibilite d'un effet direct des oestrogenes sur le tube renal. Les auteurs rapportent la presence de molecules renales receptrices d'oestradiol dans le cytosol d'homogenats de reins de rats incubes a 4° C pendant 3.5 heures en presence de 3 H oestradiol-17β a la concentration de 1 a 4 × 10 -9 M. Ces sites recepteurs ont un K d'association apparent de 6.1 × 10 10 l/mole et une capacite d'association maximale de 5.4 × 10 -14 mole/mg de proteines du cytosol. Un exces d'un facteur 10 d'oestradiol froid reduisit la combinaison de l'oestradiol 3 H de 67%; la meme quantite d'oestriol reduisit la combinaison de 45%, cependant qu'une serie de steroides non oestrogenes n'avait pas d'effets significatifs sur la combinaison. Quand des tranches de rein de rat etaient incubees a 37° C pendant 45 minutes en presence d'oestradiol 3 H 10 -9 M avant la preparation de fractions subcellulaires, une quantite considerable d'oestradiol (1.5 × 10 -13 moles par g de proteines) etait extraite de la fraction nucleaire purifiee. L'addition d'un exces d'oestradiol non radioactif dans un facteur 100 au milieu d'incubation reduisit l'oestradiol 3 H dans la fraction nucleaire de 76% alors qu'un exces d'aldosterone dans un facteur 100 n'avait pas d'effet sur le contenu nucleaire en oestradiol. Ces resultats peuvent etre favorablement compares a ceux obtenus avec les molecules receptrices d'autres tissus sensibles aux oestrogenes et offrent un argument de presomption pour la mise en cause de sites recepteurs renaux de l'oestradiol dans l'effet des oestrogenes sur l'excretion du sodium.