The fluorescent antibody technique for diagnosis of equine histoplasmosis (epizootic lymphangitis).

Summary The fluorescent antibody technique (FA) was evaluated as a diagnostic aid for the diagnosis of equine histoplasmosis, using sera from ten clinical cases of epizootic lymphangitis. The globulin fraction was separated, quantitated and then labelled with fluorescein isothiocynate. Of several antigen fixatives, heat-fixation was the best. Conjugated sera diluted 1:5 yielded the highest fluorescence intensity with heat-fixed mycelial antigen preparations. Acetone and P-formaldehyde treated preparations gave a less efficient intensity. Glutaraldehyde was the least effective fixative. The test confirmed that humoral antibody formation occurs during the course of the infection and the results seem promising for the use of FA as a diagnostic aid. Zusammenfassung Die Benutzung der fluoreszierenden Antikorpertechnik fur den Nachweis von equiner Histoplasmose (epizootischer Lymphangitis) Die fluoreszierende Antikorpertechnik wurde erstmals zum Nachweis der Histoplasmose der Pferde (epizootische Lymphangitis) herangezogen. Die Seren stammten von 10 klinischen Fallen. Die Globulinfraktion wurde abgetrennt und mit Fluorescein-Isothiocyanat markiert. Mehrere Methoden der Antigenfixierung wurden ausprobiert. Am besten geeignet war die Hitzefixation. 1: 5 verdunnte konjugierte Seren zeigten die hochste Fluoreszenz-aktivitat mit hitzefixierten Antigenpraparationen aus dem Mycel. Mit Azeton und p-Formaldehyd behandelte Praparationen ergaben eine schlechtere Intensitat, Glutaraldehyd war am wenigsten geeignet. Wahrend der Infektion kommt es zur Bildung humoraler Antikorper, die mit dem Test nachweisbar waren. Die erzielten Ergebnisse lassen den Test als geeignet fur die Diagnose erscheinen. Resume La technique des anticorps fluorescents pour le diagnostic de l'histoplasmose equine (Lymphangite epizootique) La technique des anticorps fluorescents a ete utilisee pour la premiere fois dans la mise en evidence de l'histoplasmose chez les chevaux (lymphangite epizootique). Les serums provenaient de 10 cas cliniques. La fraction des globulines a ete separee et marquee avec l'isothiocyanate de fluoresceine. Differentes methodes de fixation de l'antigene ont ete testees. La fixation thermique fut la plus appropriee. Des serums conjuges dilues 1: 5 ont montre la plus forte activite fluorescente avec des preparations d'antigene fixees a la chaleur a partir du mycele. Des preparations traitees a l'acetone et au p-formaldehyde ont rendu une intensite moins bonne et le glutaraldehyde fut le moins approprie. II est apparu pendant l'infection une formation d'anticorps humoraux qui ont ete mis en evidence par le test. Les resultats obtenus laissent apparaitre que le test est valable pour le diagnostic. Resumen El uso de la tecnica de anticuerpos fluorescentes en el diagnostico de la histoplasmosis equina (linfangitis epizootica) Por vez primera se recurrio a la tecnica de anticuerpos fluorescentes para la puesta en evidencia de la histoplasmosis de los caballos (linfangitis epizootica). Los sueros sanguineos procedian de 10 casos clinicos. Se separo la fraccion globulinica, marcandose con isotiocianato de fluoresceina. Se probaron varias tecnicas para la fijacion del antigeno. La mas adecuada era la fijacion termica. Sueros conjugados, diluidos a 1: 5, mostraron la actividad de fluorescencia maxima con preparaciones de antigeno miceliar fijadas con el calor. Las preparaciones tratadas con acetona y p-formaldehido acusaron una intensidad peor, mientras que el glutaraldehido era el menos apropiado para este fin. Durante la infeccion se forman anticuerpos humorales, identificables con la prueba. Los resultados obtenidos indican que la prueba es adecuada para establecer el diagnostico.