Development of Immune Response to Experimental Bovine Trichophyton vervucosum Infection

— Cell mediated and humoral immune responses to experimental Trichophyton verrucosum infection were assessed by sequential cutaneous biopsies, antibody assessments and microscopic monitoring of fungal presence. Histopathologic examination showed the accrual of lymphocytes and other inflammatory cells in the dermis of infected sites. Immunoperoxidase staining of frozen sections with monoclonal antibody preparations revealed an influx of macrophages, BoCD4+ and B0CD8+ lymphocytes and γδ T cells from the 5th day to the 33rd day of infection. A moderate influx of B cells was observed. Protein G-colloidal gold staining revealed the presence of immunoglobulins in the dermis and superficial epidermal layers. Trichophyton specific serum antibodies appeared between days 33 and 55. Microscopic assessment of infected tissues revealed an increase in T, verrucosum elements (mycelium and ectothrix spores) from days 19 to 55. Fungal elements in infected areas did not decrease until after both humoral and cell mediated elements of the immune response were established. These responses imply a combination of cell mediated and humoral events were associated with T. verrucosum immunity and clearance in the calf. Resume— Le reponse immunitaire humorale et cellulaire a une infection experimentale aT. verrucosum a ete appreciee par des biospsies cutanees successives, des dosages d'anticorps et la recherche microscopique de champignons. L'examen histopathologique a montre un afflux de lymphocytes et d'autres cellules inflammatoires dane le derme des sites infectes. Les marquages en immunoperoxydase par un anticorps monoclonal de coupes congelees a montre un influx de macrophages, lymphocytes BoCD4+ et BoCD8+ et des cellules T γδ, du 5e au 33e jour de l'infection. Un marquage par une proteine G—or colloidal a revele d'immunogolglobulines dans le derme et les couches supeerficielles de l'epiderme. Les anticorps specifiques de Trichophyton sont apparus entre 33 et 55 jours. L'examen microscopique des tissus infectes a revele une augmentation du nombre d'elements de T. verrucosum (mycelium et spores ectothrix) du 19e au 55e jours. Les elements fongiques dans les zones infectees n'ont pas diminue avant que les reponses humorales et cellulaires ne solent etablies. Ces responses impliquent qu'une cooperation des reponses humorales et cellulaires etaient associees dans l'immunite et la defense contre T. verrucosum. Zusammenfassung— Die zellvermittelten und humoralen Immunantworten auf die experimentelle Infektion mit T. verrucosum wurden durch eine Serie von Hautbiopsien, Antikorperuntersuchungen und mikroskopischer Untersuchung auf das Vorhandensein von Pilzen ausgewertet. Die histopathologische Untersuchung zeigte eine Ansammlung von Lymphozyten und anderen Entzundungszellen in der Dermis der infizierten Stellen. Die Immunperoxidasefarbung der Gefrierschnitte mit monoklonalen Antikorperzubereitungen zeigte einen Influx von Makrophagen, BoCd4-und BoCD8-Lymphozyten und gamma-delta-T-Zellen vom 5. bis zum 33. Tag der Infektion. Es wurde auch ein masiger Influx von B-Zellen beobachtet. Die Protein-G-kolloidale Goldfarbung zeigte die Anwesenheit von Immunglobulinen in der Dermis und den oberflachlichen epidermalen Schichten. Trichophyton-spezifische Serumantikorper traten zwischen Tag 33 und 55 auf. Die mikroskopische Untersuchung infizierter Gewebe zeigte eine Zunahme von T. verrucosum-Bestandteilen (Myzel und exktothrixe Sporen) vom Tag 19 bis 55. Pilzteile in infizierten Bereichen verminderten sich weder, nachdem humorale, noch nachdem zellvermittelte Elemente der Immunantwort auftraten. Diese Reaktionen deuten an, das eine Kombination von zellvermittelten und humoralen Vorgangen im Zusammenhang mit T. verrucosum-Immumtat und Abheilung beim Kalb vorliegt. Resumen Por medio de biposias cutaneas secuenciales, medida de anticuerpos y examen microscopico de presencia de hongos, se estudio la respuesta inmunitaria de tipo humoral y celular producida por la infeccion experimental con T. verrucosum. El examen histopatologico revelo la presencia de agregacion de linfocitos y otras celulas inflamatorias procedentes de la dermis de los puntos infectados. La tintura por medio de inmunoperoxidasa de las secciones congeladas, con preparaciones monoclonales de anticuerpos, demostro un aflujo de macrofagos BoCD4 + y BoCD8 + linfocitos y linfocitos, Tαδ, desde el quinto hasta el dia 33 la infeccion. Tambien se observo un aflugo moderado de linfocitos B. La tintura aurica de proteina coloidal G revelo la presencia de inmunoglobulinas en al dermis y capas superficiales de la epidermis. Los anticuerpos especificos para la especie Trichophyton aparecieron entre los dias 33 y 55. El examen microscopico de los tejidos afectados demostro un incremento, de los elementos fungicos T. verrucosum (micelio y esporas exotricas) desde los dias 19 al 55. Los elementos fungicos en areas infectadas no disminuyeron hasta despues del establecimiento de ambos tipos de respuesta inmunitaria, humoral y celular. Estas respuestas implican que la combinacion de ciertos fenomenos de inmunidad celular y humoral, estan relacionados con la desaparicion y la inmunidad de la infeccion producia por T. verrucosum en el ternero.