DOI: 10.20350/digitalcsic/17538
title: Impaired activation of p53 signaling pathway underlies spontaneous senescence in human vestibular schwannoma

description: [EN] [Background] Vestibular schwannomas (VS) are rare, age-associated tumors of the eighth cranial nerve. Their complex etiology and poorly defined molecular landscape prompted an investigation into cellular senescence as a contributing factor to tumor biology.
description: [EN] [Methods] Human VS and healthy peripheral nerve (PN) tissue samples, along with primary VS cultures, were analyzed using RNA sequencing (RNA-seq), senescence-associated β-galactosidase (SA-β-GAL) activity assays, RT-qPCR, western blotting, immunofluorescence and cell viability assays.
description: [EN] [Results] RNA-seq revealed differential expression of senescence-related genes in VS compared to PN. SA-β-GAL–positive cells were consistently observed in VS tissues but absent in PN. Primary VS cultures exhibited canonical features of senescence, including elevated SA-β-GAL activity, increased p16 protein levels, and upregulation of senescence-associated secretory phenotype (SASP) markers such as IL8, IL1B, CCL2 and MMP3. Notably, the extent of spontaneous senescence varied among VS cultures and correlated with differential sensitivity to bleomycin-induced senescence: cultures with lower baseline SA-β-GAL activity were more responsive to bleomycin. In contrast, cultures with higher spontaneous senescence showed impaired activation of the p53/p21 pathway and reduced sensitivity. Furthermore, VS cultures with low baseline senescence were susceptible to combined treatment with bleomycin and the senolytic agent navitoclax, which triggered apoptosis via the intrinsic pathway.
description: [EN] [Conclusion] Spontaneous cellular senescence in VS is characterized by p16 upregulation and SASP amplification, and is associated with impaired p53/p21 signaling and reduced responsiveness to senescence-inducing agents. These findings suggest that the senescent state of VS cells influences their molecular response to p53-mediated stress and may inform future strategies aimed at modulating senescence in tumor contexts.
description: [ES] [Antecedentes]: Los schwannomas vestibulares (SV) son tumores poco frecuentes asociados a la edad que afectan al octavo par craneal. Su compleja etiología y perfil molecular heterogéneo han sido las bases del estudio de la senescencia celular como factor que contribuye a la biología tumoral.
description: [ES] [Métodos]: Se analizaron muestras de tejido de SV humano y de nervios periféricos (NP) sanos, junto con cultivos primarios de SV, mediante secuenciación de ARN (RNA-seq), ensayos de actividad de β-galactosidasa asociada a la senescencia (SA-β-GAL), RT-qPCR, western blotting, inmunofluorescencia y ensayos de viabilidad celular.
description: [ES] [Resultados]: La secuenciación de ARN reveló una expresión diferencial de los genes relacionados con la senescencia en el SV en comparación con el NP. Se observaron células SA-β-GAL positivas de forma sistemática en los tejidos SV, pero no en los PN. Los cultivos primarios de SV mostraron características canónicas de senescencia, como una actividad SA-β-GAL elevada, un aumento de los niveles de proteína p16 y una regulación al alza de los marcadores del fenotipo secretor asociado a la senescencia (SASP), como IL8, IL1B, CCL2 y MMP3. Cabe destacar que el grado de senescencia espontánea variaba entre los cultivos SV y se correlacionaba con la sensibilidad a la bleomicina: los cultivos con una actividad SA-β-GAL basal más baja respondían mejor a este fármaco. Por el contrario, los cultivos con una senescencia espontánea más elevada mostraban una activación deficiente de la vía p53/p21 y una sensibilidad reducida. Además, los cultivos SV con baja senescencia basal eran susceptibles al tratamiento combinado con bleomicina y el agente senolítico navitoclax, que desencadenaba la apoptosis a través de la vía intrínseca.
description: [ES] [Conclusión]: La senescencia celular espontánea en SV se caracteriza por un incremento en la expresión de la proteína p16 y la amplificación de SASP, y se asocia con una alteración de la señalización p53/p21 y una menor respuesta a los agentes inductores de senescencia. Estos hallazgos sugieren que el estado senescente de las células SV influye en su respuesta molecular al estrés mediado por p53 y puede servir de base para futuras estrategias destinadas a modular la senescencia en contextos tumorales.