Απομόνωση και χαρακτηρισμός προβιοτικών ιδιοτήτων των μικροοργανισμών της εντερικής μικροχλωρίδας του εδώδιμου χερσαίου σαλιγκαριού Cornu aspersum maxima
Creators: name: Αμανετίδου, Ελένη Ιωάννη
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2018
Subjects: Προβιοτικές ιδιότητες
Εντερική μικροχλωρίδα
Χερσαίο σαλιγκάρι
Probiotic properties
Gut microflora
Land snail

description: Ο εντερικός μικροβιόκοσμος συμμετέχει στη διατήρηση και ενίσχυση της ομοιόστασης του εντέρου, ενώ προκαλεί καθοριστικές αλλαγές στη δομική και λειτουργική οργάνωση του ανοσοβιολογικού συστήματος του και οι συνέπειες του επηρεάζουν σε μεγάλο βαθμό την υγεία ολόκληρου του οργανισμού. Την ίδια στιγμή τα προβιοτικά, δηλαδή οι ζωντανοί μικροοργανισμοί, που όταν χορηγούνται σε επαρκείς ποσότητες προάγουν την υγεία του καταναλωτή, θέτουν τον εντερικό μικροβιόκοσμο ως θεραπευτικό στόχο. Προβιοτικά χρησιμοποιούνται εκτεταμένα στον άνθρωπο και σε εκτρεφόμενα σπονδυλωτά ζώα, αλλά οι γνώσεις μας είναι περιορισμένες όσον αφορά στη χρήση τους σε ασπόνδυλα ζώα, όπως τα σαλιγκάρια. Οι μονάδες σαλιγκαροτροφίας αντιμετωπίζουν σοβαρά προβλήματα και πλήττονται από μολυσματικές ασθένειες, οπότε είναι σημαντική η κατανόηση των αλληλεπιδράσεων των έμφυτων μηχανισμών άμυνας και της εντερικής μικροχλωρίδας των σαλιγκαριών για την πρόληψη και θεραπεία των ασθενειών αυτών. Στην παρούσα εργασία απομονώθηκαν αναερόβιοι μικροοργανισμοί από τον εντερικό σωλήνα του εδώδιμου χερσαίου σαλιγκαριού Cornu aspersum maxima και ακολούθησε η διερεύνηση των πιθανών προβιοτικών ιδιοτήτων τους. Απομονώθηκαν 54 αναερόβια βακτηριακά στελέχη, στα οποία έγινε διερεύνηση των προβιοτικών ιδιοτήτων τους. Στα στελέχη αυτά, αφού χαρακτηρίστηκαν φαινοτυπικά, πραγματοποιήθηκε ποιοτικός έλεγχος της ανάπτυξής τους παρουσία της εξωτερικής βλέννας, της γαστρικής βλέννας, των γαστρικών εκκρίσεων και όξινου pH (pH 3), ώστε να επιβεβαιωθεί η ικανότητα επιβίωσης τους στο γαστρεντερικό σύστημα. Ακολούθησε η διερεύνηση των χαρακτηριστικών της κυτταρικής τους επιφάνειας και συγκεκριμένα η ικανότητα σχηματισμού βιοϋμένιου, η ικανότητα αυτοσυσσωμάτωσης και η υδροφοβία της κυτταρικής επιφάνειας. Οι ιδιότητες αυτές σχετίζονται με τη δυνατότητα αποικισμού του εντερικού σωλήνα και την άσκηση της ευεργετικής δράσης τους. Μετά τη στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτωντα στελέχη ομαδοποιήθηκαν βάσει των in vitro ιδιοτήτων τους. Με τον τρόπο αυτό επιλέχθηκαν 5 βακτηριακά στελέχη. Τα στελέχη αυτά μαζί με ένα ακόμη τυχαίο στέλεχος, το οποίο ήταν αρνητικό ως προς τις in vitro ιδιότητες, επιλέχθηκαν για την in vivo διερεύνηση των ομοιοστατικών μηχανισμών έμφυτης άμυνας (φαγοκυττάρωση και χημειόταξη).
description: Gut microflora participates in maintaining homeostasis and causes major changes in the structural and functional organization of its immunobiological system. This affects the health of the entire organism. Probiotics, are living microorganisms which upon ingestion in adequate amounts confer health benefits to the host, set intestinal microbiota as a therapeutic target. Probiotics are extensively used in humans and farmed vertebrates, however our knowledge is limited regarding their use in invertebrate animals, such as snails. Snail farming faces serious problems including snail mortality and infectious diseases. It is important to understand the interactions of gut microflora with the innate defense mechanisms of snails, in order to prevent or treat these diseases. In this work, we have isolated anaerobic microorganisms from the intestinal tract of the edible land snail Cornu aspersum maxima and investigated their probiotic properties. Fifty four (54) strains of anaerobic bacteria where isolated, and tested for their properties. These strains were initially characterized phenotypically. Gastric maintenance of the bacteria in the intestinal tract was evaluated by determining their capacity to tolerate the presence of gastric and external mucus, gastric secretions and low pH, followed by the investigation of cell surface traits such as hydrophobicity, the ability to form biofilms and to autoaggregate. The results were statistically analyzed and the strains grouped according to their in vitro properties. Five (5) strains and another random strain were selected for the in vivo investigation of homeostatic mechanisms of innate defense such as chemotaxis and phagocytosis.