title: Die Expression des Calcitonin receptor-like receptors in humanen Gliomen
title: The expression of the Calcitonin receptor-like receptor in human gliomas
Creators: name: Kappus, Christoph
Publisher: name: Philipps-Universität Marburg
Year: 2014
Subjects: Medizin, Gesundheit
Astrozytome
Calcitonin receptor-like receptor
Angiogenese
astrozytoma
Adrenomedullin
CGRP,
Gliom

description: In dieser Arbeit wurden humane
      Gliome vom WHO-Grad II-IV auf das Vorkommen des Calcitonin
      receptor-like Rezeptors untersucht. Hierzu erfolgte zunächst
      der Nachweis der CRLR-RNS in den humanen Gliomzellinien G 109
      und G 139, welche sich eindeutig posi-tiv zeigten. Sodann
      wurden paraffinasservierte Schnitte aus humanen Gliomen
      mittels im-munhistochemischer Färbung auf das Vorkommen des
      CRLRs untersucht. Hierzu diente ein Antikörper gegen den
      CRLR, die Visualisierung erfolgte mittels PAP-Methode. Die
      Auswertung erfolgte mittels Zählung im genormten
      Okularzählfeld. Hierbei wurden für jedes Präparat die CRLR-
      bzw. GFAP-positiven Zellen, sowie die Gesamtzellzahl und
      Färbeintensität im jeweiligen Präparat erfasst. In jedem
      Präparat erfolgte dabei die Zählung an 10 verschiedenen
      Stellen. Hierbei wurden 10 Tumore vom WHO °II, 10 Tumore vom
      WHO °III und 24 Tumore vom WHO °IV untersucht. Als
      Positivkontrollen diente das Gefäßendothel, als
      Negativkotrolle die äußere Gefäßwand. Insgesamt zeigten sich
      hierbei alle unersuchten Tumore CRLR- und GFAP-positiv. Eine
      Korrelation der CRLR-Expression mit dem WHO-Grad konnte
      hierbei weder nach Betrachtung der einfachen Positivität,
      noch nach Anwendung des IRS und somit Berücksichtigung der
      Färbeintensität des jeweiligen Präparates gefunden werden.
      Die stärkste Expression zeigten die Präparate vom WHO °III,
      jedoch ebenso die größte Varianz. Die niedrigste
      Expressionsstärke zeigten die Glioblastome (WHO °IV). Nach
      Anwendung des IRS zeigte sich in den Präparaten vom WHO °II
      eine signifikante negative Korrelation der GFAP- und
      CRLR-Expression (p&lt;0,05), was eine Zuahme der
      CRLR-Expression bei einer Abnahme der GFAP-Expression
      bedeutet, und was als Zunahme der CRLR-Dichte bei
      fortschreitender Entdifferenzierung interpretiert werden
      kann. Zusätzlich zur hohen Varianz der CRLR-Expressionsstärke
      in den Präparaten vom WHO °III zeigte sich hier auch eine
      deutliche Abweichung der Gesamtzelldichte in den verglichenen
      GFAP- und CRLR-Präparaten. Eine Erklärung hierfür bietet eine
      mögliche Inhomogenität dieser Tumore. Ein Fehler bei der
      Aufbereitung der Präparate als Ursache durch Auswaschung kann
      nicht ausgeschlossen werden, ist aber sehr unwahrscheinlich,
      da die Aufarbeitung einheitlich und größtenteils auch
      zeitgleich erfolgte. Ein direkter Vergleich der GFAP- mit der
      CRLR-Expressionsstärke in diesen Präparaten sollte trotzdem
      nur eingeschränkt erfolgen, wobei trotz möglichem Zellverlust
      bei der Aufbereitung die Gesamtzahl der CRLR-positiven
      Zel-len in diesen Präparaten deutlich über denen der übrigen
      Präparate liegt. Der Vergleich der CRLR-Expressionsstärke in
      Abhängigkeit vom WHO-Grad scheint daher zulässig. Insge-samt
      zeigten sich in allen Präparaten gefäßnahe und gefäßferne,
      sowie auch vereinzelte Neurone CRLR-positiv. Der eindeutige
      Nachweis des CRLR in humanen Gliomen vom WHO-Grad II-IV
      konnte somit erbracht werden. Seine Expressionsstärke
      scheint, abgesehen von den Präparaten vom WHO °II, kein Maß
      für die biologische Wertigkeit dieser Tumore zu sein.
      Aufgrund der inzwischen nachgewiesenen Effekte der Liganden
      dieses Rezeptors, insbesondere des Adrenomedullins, auf die
      Tumorgenese und Gefäßentwicklung, ist eine wichtige Rolle
      seitens Progress und Malignisierung von Gliomen
      naheliegend.
description: Aim of this study was to determine
      whether CRLR is expressed in human gliomas and the probable
      cellular targets of adrenomedullin. Methods: Biopsies from 95
      human gliomas of varying grade were processed for
      immunohistochemical analysis using a previously developed and
      characterised antibody to CRLR. Results: All tumour specimens
      were positive for CRLR. As previously found in normal
      peripheral tissues, CRLR immunostaining was particularly
      intense in the endothelial cells. This was evident in all the
      various vascular conformations that were observed, and which
      are typical of gliomas. In addition, clear immunostaining of
      tumour cells with astrocyte morphology was observed. These
      were preferentially localised around vessels. Conclusions:
      This study has shown for the first time that the CRLR protein
      is present in human glioma tissue. The expression of the
      receptor in endothelial cells and in astrocytic tumour cells
      is consistent with the evidence that its endogenous ligand,
      adrenomedullin, may influence glioma growth by means of both
      direct mitogenic and indirect angiogenic effects. CRLR may be
      a valuable target for effective therapeutic intervention in
      these malignant tumours.