Αξιολόγηση των ανοσοχημικών τεχνικών στον έλεγχο χρήσης ψυχοτρόπων ουσιών
Creators: name: Τζιανής, Νικόλαος Γεωργίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2022
Subjects: Ανοσοχημικές τεχνικές
Έλεγχος χρήσης ψυχοτρόπων ουσιών
Ψευδώς θετικό αποτέλεσμα
Immunoassays
Psychotropic substance drug testing
False positive result

description: Η αναζήτηση (ανίχνευση) της χημικής ουσίας που προκάλεσε ένα τοξικό αποτέλεσμα, η ταυτοποίησή της και ο ποσοτικός προσδιορισμός, είναι το αντικείμενο της Αναλυτικής Τοξικολογίας. Για την ανίχνευση αυτή χρησιμοποιούνται δύο ειδών μέθοδοι. Οι διερευνητικές και οι επιβεβαιωτικές. Στις διερευνητικές μεθόδους ανήκουν οι ανοσοχημικές τεχνικές. Οι ανοσοχημικές τεχνικές είναι βιοαναλυτικές μέθοδοι στις οποίες η ανίχνευση ή/και η ποσοτικοποίηση της αναλυόμενης ουσίας βασίζεται στην αντίδραση ενός αντιγόνου με ένα αντίσωμα. Κυρίως αυτές οι μέθοδοι βασίζονται στην ανταγωνιστική αντίδραση μεταξύ σταθερής ποσότητας επισημασμένης αναλυόμενης ουσίας με την άγνωστη ποσότητα της στο προς ανάλυση δείγμα, για συγκεκριμένη ποσότητα ειδικών προς την αναλυόμενη ουσία αντισωμάτων. Όταν τα αντιδραστήρια αναμιγνύονται και επωάζονται, η αναλυόμενη ουσία συνδέεται με το αντίσωμα σχηματίζοντας το σύμπλοκο αντιγόνου – αντισώματος, το οποίο διαχωρίζεται από το αδέσμευτο κλάσμα του αντιδραστηρίου με φυσικό ή χημικό τρόπο. Η ανάλυση επιτυγχάνεται με την μέτρηση του προϊόντος της αντίδρασης αντιγόνου – αντισώματος. Υπάρχουν πολλές κατηγορίες ανοσοχημικών τεχνικών όπως η ραδιο-ανοσοχημική ανάλυση (RIA), η ενζυμο-ανοσοχημική ανάλυση (ΕΙΑ), η φθορο-ανοσοχημική ανάλυση (FIA), οι ανοσοχημικοί προσδιορισμοί χημειοφωταύγειας (CLIA), η λιποσωματική ανοσοδοκιμασία (LIA) και η Cloned Enzyme Donor Immunoassay (CEDIA), η κάθε μία με τα πλεονεκτήματα και τα μειονεκτήματα της. Με την χρήση λοιπόν αυτών των τεχνικών και συγκεκριμένα με το σύστημα COBAS INTEGRA 400 PLUS της εταιρείας ROCHE, αξιολογήθηκε η ανίχνευση εξαρτησιογόνων ουσιών (κανναβινοειδή, οπιούχα, κοκαΐνη, αμφεταμίνες, LSD, βενζοδιαζεπίνες) ως προς την ακρίβεια, την πιστότητα και πιθανές παρεμποδίσεις του τελικού αποτελέσματος. Μνημονεύθηκαν χαρακτηριστικά παραδείγματα τέτοιων παρεμπιδίσεων που οδήγησαν στο συμπέρασμα ότι αποτελούν ένα σημαντικό εργαλείο στο έλεγχο χρήσης ψυχοτρόπων ουσιών, όμως απαιτείται επιβεβαίωση των αποτελεσμάτων
description: The detection of the chemical that caused a toxic effect, its identification and quantification, is the subject of Analytical Toxicology. Two types of methods are used for this detection. The exploratory and the confirmatory. Immunoassays are exploratory methods. Immunoassays are bioanalytical methods in which the quantitation of the analyte depends on the reaction of an antigen (analyte) and an antibody. Principally, these methods are based on a competitive binding reaction between a fixed amount of labelled form of an analyte and a variable amount of unlabelled sample analyte for a limited amount of binding sites on a highly specific anti-analyte antibody. When these immunoanalytical reagents are mixed and incubated, the analyte is bound to the antibody forming an immune complex. This complex is separated from the unbound reagent fraction by physical or chemical separation technique. Analysis is achieved by measuring the label activity (e.g. radiation, fluorescence, or enzyme) in either of the bound or free fraction. There is a variety of immunoassays such as radioimmunoassay (RIA), enzyme immunoassay (EIA), fluorosence immunoassay (FIA), Chemiluminenscence immunoassay (CLIA), liposome immunoassay (LIA) and cloned enzyme donor immunoassay (CEDIA). Each of them has its own advantages and disadvantages. Using this methods and especially the system COBAS INTEGRA 400 plus of ROCHE we evaluated the detection of psychotropic substances (cannabinoids, opioids, cocaine, amphetamines, LSD and benzodiazepines) for the accuracy, fidelity and possible obstacles (or false positives) in the final result. We mentioned examples of these obstacles and we came into the conclusion that immunoassays are a great asset in psychotropic substance drug testing but there must be a confirmation of the result