title: Protektive Effekte konjugierter Linolsäure im Rahmen der ZNS-Autoimmunität
Creators: name: Hartwig, Marvin
Publisher: name: University of Muenster, Institutional Repository MIAMI
Year: 2025
Subjects: subject: 610 Medicine and health

description: In dieser Arbeit wurde eine protektive Wirkung der konjugierten Linolsäure (CLA) im Rahmen der ZNS-Autoimmunität evaluiert. Im murinen Modell der spontanen opticospinalen Enzephalomyelitis (OSE) konnten Effekte einer diätetischen Supplementation der CLA auf die Erkrankung der Tiere gezeigt werden. Es fand sich eine deutlich geringere Zellinfiltration in das ZNS. Im Detail wurden T- und B-Zell-Antworten der Tiere untersucht. Weiterhin erfolgte der Nachweis einer verminderten T-Zell-Antwort unter CLA-Einfluss in vitro. Diese in vitro Ergebnisse konnten auch mit humanen Zellen reproduziert werden. Letztlich gelang durch eine ex vivo Restimulation von Zellen aus dem Liquor von RRMS-Patienten der Nachweis einer inhibitorischen Wirkung der CLA auf diese bereits im Autoimmunkontext aktivierten Lymphozyten. Weitere Studien zur Rolle der CLA als protektiver Substanz für die additive Behandlung der Multiplen Sklerose sind notwendig und wurden teils bereits in Nachfolgeprojekten durchgeführt.
description: 1 Einleitung ..... 1
1.1 Multiple Sklerose ..... 1
1.1.1 Definition und Verlaufsformen ..... 1
1.1.2 Epidemiologie ..... 3
1.1.3 Ätiologie und Risikofaktoren ..... 5
1.1.4 Pathophysiologie und Pathologie ..... 11
1.1.5 Klinik und Diagnostik ..... 14
1.1.6 Medikamentöse Therapie ..... 15
1.2 Konjugierte Linolsäuren ..... 17
1.2.1 Chemische Struktur und Vorkommen ..... 17
1.2.2 Einflüsse auf Autoimmunerkrankungen ..... 19
1.3 Spontane opticospinale Enzephalomyelitis ..... 20
1.4 Zielsetzung der Arbeit und experimenteller Ansatz ..... 22
2 Material und Methoden ..... 24
2.1 Humane Proben ..... 24
2.2 Versuchstiere ..... 24
2.2.1 Mauslinien ..... 24
2.2.2 Klinischer Score ..... 25
2.3 Versuchsdiät und konjugierte Linolsäure ..... 26
2.4 Histologie ..... 27
2.5 Durchflusszytometrie ..... 28
2.6 ELISA ..... 30
2.7 Ex vivo Zytokin Detektion ..... 31
2.7.1 Detektion muriner Zytokine ..... 31
2.7.2 Detektion humaner Zytokine ..... 33
2.8 Zellkulturen ..... 34
2.8.1 Murine Zellkulturen ..... 34
2.8.2 Humane Zellkulturen: T-Zell Aktivierung und Differenzierung ..... 37
2.9 Medien ..... 38
2.10 Statistik ..... 38
3 Ergebnisse ..... 40
3.1 Wirkung einer diätetischen CLA-Supplementation im OSE-Modell ..... 40
3.1.1 Krankheitsbeginn und Verlauf ..... 40
3.1.2 Zellinvasion im ZNS ..... 49
3.1.3 Ex vivo Immunantwort im ZNS und in sekundären lymphatischen Organen ..... 51
3.2 Charakterisierung der Wirkung von CLA auf murine Lymphozyten ..... 59
3.2.1 Ex vivo T-Helferzell Antwort nach diätetischer CLA-Supplementation und in vitro B-Zell Interaktion ..... 59
3.2.2 In vitro Proliferation und Aktivierung von T-Helferzellen unter CLA-Einfluss ..... 61
3.2.3 In vitro Differenzierung von T-Helferzellen unter CLA-Einfluss ..... 63
3.2.4 12/15-Lipoxygenase als zelluläres Ziel der CLA in T-Helferzellen ..... 64
3.3 Wirkung von CLA auf menschliche T-Helferzellen im Gesunden und Kranken ..... 65
3.3.1 In vitro Proliferation und Aktivierung humaner T-Helferzellen unter CLA-Einfluss ..... 65
3.3.2 In vitro Differenzierung humaner T-Helferzellen unter CLA-Einfluss ..... 69
3.3.3 Ex vivo Immunantwort humaner T-Helferzellen aus Blut und Liquor unter CLA-Einfluss in vitro ..... 70
4 Diskussion ..... 74
4.1 Wirkung der CLA im OSE-Modell ..... 75
4.1.1 Krankheitsbeginn und Verlauf ..... 75
4.1.2 Zellinvasion im ZNS ..... 80
4.1.3 Ex vivo Immunantwort im ZNS und in sekundären lymphatischen Organen ..... 82
4.1.4 Beurteilung der OSE-Versuche ..... 91
4.2 Charakterisierung der Wirkung von CLA auf murine Lymphozyten ..... 95
4.2.1 Ex vivo T-Helferzell Antwort nach diätetischer CLA-Supplementation und in vitro B-Zell Interaktion ..... 96
4.2.2 In vitro Proliferation und Differenzierung von T-Helferzellen unter CLA-Einfluss ..... 96
4.2.3 Zelluläre Ziele der CLA ..... 98
4.3 Wirkung von CLA auf menschliche T-Helferzellen im Gesunden und Kranken ..... 101
4.3.1 Translation aus dem OSE-Modell ..... 101
4.3.2 In vitro und ex vivo Modulation humaner T-Helferzellen gesunder Spender unter CLA-Einfluss ..... 103
4.3.3 In vitro und ex vivo Modulation von T-Helferzellen aus Blut und Liquor von RRMS-Patienten unter CLA-Einfluss ..... 104
4.3.4 Explorative klinische Pilotstudie: Wirkung von CLA in RRMS-Patienten in vivo ..... 107
4.4 Ausblick ..... 108
5 Abkürzungen ..... 110
6 Abbildungen ..... 113
7 Tabellen ..... 115
8 Literatur ..... 116
9 Danksagung ..... 139
10 Lebenslauf ..... 140
11 Anhang ..... I