Μελέτη της λειτουργικοποίησης νανοσωματιδίων χρυσού επικαλυμμένα με χιτοζάνη για ανίχνευση cTnT με τη χρήση ηλεκτροχημικών βιοαισθητήρων
Creators: name: Γεωργιάδης, Δούκας-Ευάγγελος Αναστασίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2022
Subjects: Ηλεκτροχημικός βιοαισθητήρας
Νανοσωματίδια χρυσού
Τροπονίνη T
Electrochemical biosensor
Gold nanoparticles
Troponin T

description: Η Διπλωματική Εργασία έχει ως σκοπό την αποτίμηση και όσο το δυνατόν βελτίωση της δυνατότητας ανίχνευσης της καρδιακής τροπονίνης T με τη χρήση ηλεκτροχημικών αισθητήρων, οι οποίοι έχουν ως βάση της λειτουργικοποίησής τους νανοσωματίδια Au επικαλυμμένα με χιτοζάνη και ως φορέα αναγνώρισης τη σύνδεση αντιγόνου-αντισώματος. Πρωταρχικά, -συντέθηκαν μια σειρά από- νανοσωματίδια Au με διαφορετικές συγκεντρώσεις χιτοζάνης, τα οποία χαρακτηρίστηκαν με τεχνικές, όπως φασματοσκοπία ορατού υπεριώδους UV/Vis, δυναμική σκέδαση φωτός (DLS), μικροσκοπία ατομικών δυνάμεων (AFM), φασματοσκοπία IR με μετασχηματισμό Fourier (FT-IR) και κάποια από αυτά που θεωρήθηκαν κατάλληλα μετά από την αντίδρασή τους με το αντίσωμα της cTnT χρησιμοποιήθηκαν για την βιολειτουργικοποίηση του αισθητήρα. Ο ηλεκτροχημικός αισθητήρας κατασκευάστηκε με τη μέθοδο του screen printing, αποτελούμενος από ένα σύστημα τριών ηλεκτροδίων αναφοράς (RE), εργασίας (WE) και βοηθητικού (CE), με την όλη διαδικασία της λειτουργικοποίησης να λαμβάνει χώρα πάνω στο ηλεκτρόδιο εργασίας, το οποίο χαρακτηρίστηκε με Φασματοσκοπία Raman. Ως οξειδοαναγωγικό ζεύγος του συστήματος χρησιμοποιήθηκε το σύστημα ενός υγρού κρυστάλλου Br-Py, ενώ για τη μείωση της μη ειδικής προσρόφησης από την αντίδραση του αντισώματος cTnT με το αντίστοιχο αντιγόνο cTnT χρησιμοποιήθηκε το αμινοξύ γλυκίνη. Στο τέλος, έγινε προσπάθεια βελτιστοποίησης της καμπύλης αναφοράς του συστήματος επηρεάζοντας μια βασική παράμετρο του συστήματος, τη συγκέντρωση του αντισώματος που αντιδρούσε με τα νανοσωματίδια χρυσού επικαλυμμένα με χιτοζάνη.
description: The goal of this diploma is to improve the potential of detection of cardiac Tropοnin T (cTnT) with the use of electrochemical sensors, which have as a basis the biofunctionalization of gold nanoparticles capped with chitosan. At first, gold nanoparticles with different concentrations of chitosan were synthesized and then characterized using a variety of techniques, sο as UV/Vis spectrophotometry, dynamic light scattering (DLS), atomic force microscopy (AFM), and FT-IR spectroscopy and then some of them that were suitable were used for the biofunctionalization. The sensor, on the other hand, was created using the technique of ‘’Screen Printing’’, consisting of a three electrode system having a reference electrode (RE), working and counter electrodes (WE &amp; CE), with all the process of biofunctionalization taking place on the working electrode, whereas Raman spectroscopy was used to assess the working electrode. As a redox probe, the liquid crystal system of Br-Py was used and for the prevention of the non-specific adsorption, the amino acid glycine was used. In the end, there was an attempt to optimize the calibration curve of the system, affecting a crucial parameter of the system, the antibody concentration of cTnT that reacted with gold nanoparticles capped with chitosan.