title: Investigation of platelet adhesion properties of Von-Willebrand-Factor drug candidates
Creators: name: Sindelar, Karoline
Publisher: name: :none
Year: 2008

description: Der Von Willebrand Faktor (VWF) ist einer der wichtigsten Faktoren des Blutgerinnungssystems. Er bindet Thrombozyten an die Kollagenfasern von rupturierten Gefäßwänden. Patienten, die unter der Von Willebrand Krankheit leiden, haben entweder zu geringe VWF Konzentrationen im Blut oder durch Mutationen veränderte VWF-Funktionen. Für diese Patienten ist VWF Substitution lebensnotwendig. Diese Diplomarbeit untersucht die Thrombozytenadhäsion von fünf verschiedenen VWF Konzentraten: (a) plasmagereinigtes VWF/Faktor VIII Konzentrat (Immunate#09HZ2000I), (b) Pro-rekombinater VWF 298, (c) reifer rekombinanter VWF 158, (d) plasmagereinigter VWF 09/47, und (e) plasmagereinigter VWF 07 42/3. Diese Konznetrate wurden ohne und mit Zusatz von rekombinantem und plasmagereinigtem Faktor VIII auf ihre Thrombozytenbindung hin untersucht. Die Experimente wurden mit Hilfe eines Flusskammersystems getestet, welches den Blutfluss durch ein verletztes Blutgefäß simulierte. Als Untersuchungslösung wurden Erythrozyten, Thrombozyten, eine Pufferlösung und das jeweilige VWF Konzentrat gemischt. Diese Mischung diente als Blutersatz. Glasplättchen wurden mit Kollagen beschichtet um die zerstörte Gefäßwand zu imitieren, während eine Pumpe für die richtige Scherspannung eines rupturierten Gefäßes sorgte. Anschließend wurden die kollagenbeschichteten Glasplättchen gefärbt und die gebildeten Thromben wurden mittels eines Bildverarbeitungsprogramms gezählt und ausgewertet. Die Ergebnisse zeigen, dass das plasmagereinigte VWF/Faktor VIII Konzentrat (Immunate#09HZ2000I) und der plasmagereinigte VWF 09/47 die beste Thrombozytenadhäsion erzielen. Die manuelle Zugabe von Faktor VIII hat die Thrombozytenadhäsionseigenschaften der Konzentrate nicht wesentlich beeinflusst. Die Ergebnisse sind aber nicht eindeutig und unterliegen teils hohen Schwankungen. Diese stammen unter anderem von den verschiedenen Blutproben, die von anonymen Spendern kamen.
description: The von Willebrand factor (VWF) is a key factor in the blood coagulation system. It binds platelets to collagen fibres of ruptured vessel walls. Patients with von Willebrand desease have a decreased VWF level in their blood or mutations in their VWF protein leading to dysfunction. For these patients, it is vital to receive VWF substitutes. This diploma thesis investigates the platelet adhesion properties of five different VWF substitutes: (a) plasma-derived VWF/factor VIII concentrate (Immunate#09HZ2000I), (b) Pro-recombinant VWF 298, (c) mature recombinant VWF 158, (d) plasma-derived VWF 09/47, (e) plasma-derived VWF 07 42/3. These concentrates were tested in their pure version and with addition of recombinant and plasma-derived factor VIII. The experiments were carried out in a flow chamber system, simulating the blood flow through a ruptured blood vessel. A solution containing erythrocytes, platelets, buffer, and the VWF concentrate was used as blood imitation. Collagen-coated glass plates functioned as the ruptured vessel wall, while a pump ensured a proper wall shear stress rate. Clots of platelets on the glass plates were subsequently visually detected and counted by a computer programme. The results indicate that the plasma-derived VWF/factor VIII concentrate (Immunate#09HZ2000I) and the plasma-derived VWF 09/47 performed best. The addition of factor VIII did not noticeably influence the platelet adhesion properties. In the light of the scattering results and the influence of individual blood samples from unknown donors, the results are unsteady and need to be verified.