Ανάπτυξη και επικύρωση αναλυτικής μεθόδου χρωματογραφίας υγρού για τον προσδιορισμό αντισταμινικών φαρμακευτικών ενώσεων σε ούρα ανθρώπου μετά από μικροεκχύλιση FPSE
Creators: name: Παπαδούλη, Κυριακή Νικολάου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2023
Subjects: Αντισταμινικές φαρμακευτικές ενώσεις
Υγρή Xρωματογραφία Υψηλής Απόδοσης
Τεχνική Εκχύλισης σε Υφασμάτινο Μέσο
Antihistamines drugs
High Pressure Liquid Chromatography
Fabric Phase Sorptive Extraction

description: Η διφαινυδραμίνη, η χλωροφαινυραμίνη και η καρβινοξαμίνη είναι αντισταμινικά φάρμακα. Οι συγκεκριμένες φαρμακευτικές ενώσεις χρησιμοποιούνται συχνά για την αντιμετώπιση των συμπτωμάτων της αλλεργίας, της δακρύρροιας, της ρινικής καταρροής και επιπλέον μπορούν να χρησιμοποιηθούν για την κοινή γρίπη και τον πυρετό. Είναι πολύ σημαντικό να ακολουθούνται οι συμβουλές των ειδικών γιατρών και των φαρμακοποιών με σκοπό την αποφυγή των ανεπιθύμητων ενεργειών. Τα ανθρώπινα ούρα, ως βιολογικό δείγμα, παρουσιάζουν αρκετά πλεονεκτήματα όπως η ευκολία συλλογής τους σε ουροσυλλέκτη χωρίς να απαιτείται η χρήση κάποιου ειδικού εξοπλισμού και μπορούν να συλλέγονται συχνά καθώς παράγονται από τον ανθρώπινο οργανισμό πολλές φορές κατά την διάρκεια της ημέρας. Η τεχνική εκχύλισης σε υφασμάτινο μέσο είναι μία καινοτόμα μέθοδος προκατεργασίας των δειγμάτων η οποία χρησιμοποιείται στην αναλυτική χημεία για την προσυγκέντρωση των αναλυτών από διάφορα υποστρώματα. Η συγκεκριμένη τεχνική περιλαμβάνει την χρήση ενός υφάσματος ως υπόστρωμα με ένα μία λεπτή στρώση προσροφητικού υλικού με σκοπό την εκχύλιση των φαρμακευτικών ουσιών ενδιαφέροντος. Διάφορες παράμετροι μπορούν να επηρεάσουν την ανάκτηση των ενώσεων από το προσροφητικό υλικό όπως είναι ο τύπος και το μέγεθος του προσροφητικού υλικού, το pH του δείγματος, ο ρυθμός ανάδευσης, η ιονική ισχύς, ο όγκος του δείγματος, ο χρόνος εκχύλισης και τέλος ο όγκος και ο χρόνος του διαλύτη έκλουσης. Η βελτιστοποίηση των συγκεκριμένων παραμέτρων παίζει καθοριστικό ρόλο στην απόκτηση των καλύτερων ποσοστών ανάκτησης της εκχύλισης. Ο σκοπός της συγκεκριμένης εργασίας ήταν η ανάπτυξη και η επικύρωση μίας αναλυτικής μεθόδου για τον ταυτόχρονο προσδιορισμό τριών αντισταμινικών φαρμάκων σε ανθρώπινα ούρα χρησιμοποιώντας την τεχνική προκατεργασίας FPSE και τεχνική ανάλυσης HPLC-UV. Το προσροφητικό υλικό πολυτετραυδροφουράνιο επιλέχθηκε ως το καταλληλότερο για την συγκεκριμένη μέθοδο και το οποίο μπορεί να επαναχρησιμοποιηθεί για τουλάχιστον 15 φορές χωρίς να ελαττώνεται η εκχυλιστική του ικανότητα. Τα πειραματικά αποτελέσματα έδειξαν συμφωνία με τα όρια και τις κατευθυντήριες οδηγίες όπως ορίζονται από τον FDA για τα βιολογικά δείγματα. Συγκεκριμένα, η γραμμικότητα της μεθόδου εξετάστηκε σε ένα εύρος συγκεντρώσεων από 0.1-5 μg/mL, το LOD και το LOQ υπολογίστηκαν 0.1 και 0.03 μg/mL αντίστοιχα, η intra-day και inter-day ακρίβεια εκφράστηκε ως %RR και υπολογίστηκε από 88.1-113.7%, η intra-day και inter-day πιστότητα εκφράστηκε ως % RSD και υπολογίστηκε να είναι λιγότερο από 12.7% για όλες τις περιπτώσεις. Τέλος, το τελικό πρωτόκολλο εφαρμόστηκε για τον προσδιορισμό της διφαινυδραμίνης και της χλωροφαινυραμίνης σε πραγματικά ανθρώπινα ούρα μετά από χορήγηση σιροπιού και δισκίων αντίστοιχα.
description: Diphenhydramine, chlorpheniramine and carbinoxamine are all antihistamine medications. They are commonly used to relieve symptoms associated with allergies, such as watery eyes, runny nose and they can also be used to alleviate symptoms of the common cold and hay fever. It’s important to note that these medications should be used as directed and under the guidance of a healthcare professional. Human urine has several advantages as a biological substrate such as it can be easily collected in a sterile container without the need for specialized equipment and they can be collected frequently, as it is naturally produced by body multiple times a day. Fabric Phase Sorptive Extracton (FPSE) is an innovative sample preparation technique used in analytical chemistry for the extraction and preconcentration of target analytes from various sample matrices. It involves the use of a fibrous sorbent, typically a thin fabric coated with a sorbent phase, to extract and retain the analytes of interest. Several parameters can influence the recovery in FPSE such as type of sorbent and surface area, sample pH, stirring speed, ion power, sample volume, extraction time, type of, volume of desorption solvent and desorption time. Optimizing these parameters through method development experiments is crucial to achieving high extraction recovery. The purpose of this paper was to develop and validate a method for the determination of three antihistamine drugs in human urine using FPSE and HPLC-UV. Sol gel poly(tetrahydrofuran) (PTHF) has been identified as the most suitable fabric phase sorbent membrane in Fabric Phase Sorptive Extraction (FPSE) for this method and it can be reused for at least 15 times. The method meets the specific requirements and guidelines set by FDA for the analysis of biological samples. The linearity of the method was examined in the range of 0.1- 5 μg/mL and LOD and LOQ were 0.1 and 0.03 μg/mL, the intraday and inter day accuracy expressed as % relative recovery ranged between 88.1-113.7 % and the intra and inter day precision expressed as % relative standard deviation was less than 12.7 % in all cases. The final protocol was successfully employed to accurately determine specific antihistamines in real human urine samplesfollowing the oral administration of a tablet containing chlorpheniramine and a syrup containing diphenydramine.