title: Pilzendophyten aus Alpinia malaccensis und Curcuma sp.
Creators: name: Zahradnik, Celine
Publisher: name: :none
Year: 2010

description: Im Rahmen dieser Diplomarbeit wurden verschiedene Methoden zur Oberflächensterilisierung und Isolierung endophytischer Pilze aus Rhizomen von Alpinia malaccensis und Wurzeln von Curcuma sp. (Zingiberaceae) getestet. Es konnten fünf Pilz-Endophyten isoliert und mittels DNA-Sequenzierung charakterisiert werden. Ihre Dichlormethan-Extrakte konnten mittels Dünnschichtchromatographie und Hochdruckflüssigkeitschromatographie phytochemisch charakterisiert und mit den jeweiligen Pflanzenextrakten verglichen wurden. Dabei konnten keinerlei Übereinstimmungen der Inhaltsstoffprofile von Pilzen und Pflanzen festgestellt werden. Physiologische Tests zur Bestimmung der Temperaturoptima ergaben für alle Isolate ein Wachstumsoptimum von 22°C, mit Ausnahme von Neosartorya fischeri, dessen Optimum bei 37°C lag. Weiters wurde der Einfluss der Pflanzenextrakte von Alpinia malaccensis und Curcuma sp. auf die Wachstumsgeschwindigkeit der Pilze untersucht. Das Alpinia-Medium führte bei Penicillium commune (EP2) zu schnellerem Wachstum als das Curcuma-Medium und das extraktfreie Kontrollmedium. Hingegen ist das Wachstum des aus Curcuma sp. isolierten Pilzes Penicillium purpurogenum (EPC) auf dem Alpinia-Medium vollständig gehemmt. Dünnschichtbioautographien mit Sporen von Cladosporium sphaerospermum zeigten für alle Isolate mit Ausnahme von Neosartorya fischeri moderate antifungale Wirkung. Ebenso zeigten die Extrakte der Pilzisolate in Fraßversuchen an Spodoptera-Larven moderate Wirkung. Mit Ausnahme von Neosartorya fischeri (EPC) wurde eine mehr oder weniger hohe Sterblichkeitsrate der Larven beobachtet. Kompetitionstests der Endophyten untereinander sowie gegen C. sphaerospermum ergaben eine erhöhte Konkurrenzfähigkeit für Penicillium commune (EP2), Penicillium commune (EP1) und Neosartorya fischeri (EP3) gegenüber Cladosporium sphaerospermum und Penicillium purpurogenum (EPC).
description: Within the framework of this diploma thesis different methods for surface sterilization and isolation of fungal endophytes from rhizomes of Alpinia malaccensis and roots of Curcuma sp. (Zingiberaceae) were tested. Five endophytes were isolated and characterized through DNA-sequencing. Their dichloromethane extracts were phytochemically characterized by thin layer chromatography (TLC) and high performance liquid chromatography (HPLC) and compared with the profiles of the plant extracts. Profiles of extracts of endophytes proved to be completely different. Physiological tests showed a growth optimum of 22°C for all isolates except Neosartorya fischeri, which preferred higher temperatures of 37°C. Furthermore the effect of plant extracts of Alpinia malaccensis and Curcuma sp. on the growth speed of the fungi were analyzed. The Alpinia-medium lead to a more increased growth speed of Penicillium commune (EP2) than the Curcuma-medium and the extract-free control-medium. By contrast, growth of the endophyte Penicillium purpurogenum (EPC) isolated from Curcuma sp. was completely inhibited. Thin layer bioautography with spores from Cladosporium sphaerospermum showed moderate antifungal activity for all isolates except for Neosartorya fischeri (EP3). Similar results were obtained with feeding experiments on Spodoptera-larvae, where all isolates except of Neosartorya fischeri (EP3) showed a more or less existent mortality rate. Competition tests between endophytes and against Cladosporium sphaerospermum showed increased competitiveness of Penicillium commune (EP1), Penicillium commune (EP2) und Neosartorya fischeri (EP3), opposite to Cladosporium sphaerospermum and Penicillium purpurogenum (EPC).