Διερεύνηση πιθανής θεραπευτικής δράσης της ερυθροποιητίνης σε μηχανισμούς κυτταρικού θανάτου σε πειραματικό μοντέλο πνευμονικής ίνωσης
Creators: name: Τσαβλής, Δρόσος Αριστείδη
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2020
Subjects: Πνευμονική ίνωση
Αυτοφαγία
Ερυθροποιητίνη
Pulmonary Fibrosis
Autophagy
Erythropoietin

description: Η πνευμονική ίνωση είναι μία φλεγμονώδης οντότητα που ανήκει στις διάχυτες παθήσεις του πνευμονικού παρεγχύματος, έχει προοδευτικά επιδεινούμενη πορεία, η οποία οδηγεί στο θάνατο, και χαρακτηρίζεται από μεταπλασία ινοβλαστών και υπερβολική εναπόθεση κολλαγόνου και εξωκυττάριων πρωτεϊνών στο διάμεσο πνευμονικό χώρο. Στην παρούσα μελέτη διερευνήθηκαν οι πιθανές δράσεις της ερυθροποιητίνης στην αυτοφαγία η οποία αποδεδειγμένα πυροδοτείται και εξελίσσεται στην πνευμονική ίνωση.Αναπτύχθηκε επιτυχώς ένα πειραματικό μοντέλο πνευμονικής ίνωσης με ενδοτραχειακή χορήγηση μπλεομυκίνης σε επίμυες της φυλής Wistar. Χρησιμοποιήθηκαν 50 επίμυες, οι οποίοι χωρίστηκαν σε 5 ομάδες. Ομάδα 1: επίμυες-μάρτυρες, που έλαβαν φυσιολογικό ορό ενδοτραχειακά και ενδοπεριτοναϊκά, Ομάδα 2: επίμυες που έλαβαν ενδοτραχειακά μπλεομυκίνη, Ομάδα 3: επίμυες που έλαβαν ενδοτραχειακά μπλεομυκίνη και ενδοπεριτοναϊκά ερυθροποιητίνη, Ομάδα 4: επίμυες που έλαβαν ενδοτραχειακά φυσιολογικό ορό και ενδοπεριτοναϊκά ερυθροποιητίνη, Ομάδα 5: επίμυες-μάρτυρες, που δεν έλαβαν καμία απολύτως ουσία. Η επιτυχία του πειραματικού μοντέλου έγκειται στο γεγονός ότι διαπιστώθηκαν, με την ιστοχημική χρώση της αιματοξυλίνης-εωσίνης, οι βαριές βλάβες της ίνωσης στον πνευμονικό ιστό. Σε όλα τα πειραματόζωα ελέγχθηκε με ανοσοϊστοχημικές μεθόδους η έκφραση των αυτοφαγικών ενζύμων Beclin 1 και LC3 (A και Β). Όσον αφορά στην έκταση των παθολογοανατομικών αλλοιώσεων λόγω ίνωσης, αποδείχτηκε, με μορφομετρική ανάλυση, μία στατιστικώς σημαντική ελάττωση της έκτασης αυτών στα ζώα που έλαβαν επιπλέον της μπλεομυκίνης και ερυθροποιητίνη (p&lt;0.005). Επίσης, στατιστικώς σημαντική ήταν η ελάττωση της έκφρασης και των δύο ενζυμικών παραγόντων που μελετήθηκαν, στα ζώα, στα οποία χορηγήθηκε ερυθροποιητίνη σε σύγκριση με αυτά, στα οποία δεν χορηγήθηκε (για όλα τα ένζυμα: p&lt;0.005).Η παρούσα μελέτη απέδειξε ότι η ερυθροποιητίνη λειτούργησε ανασταλτικά στην πορεία της πνευμονικής ίνωσης, εμπόδισε την απόπτωση και περιόρισε την αυτοφαγία, μέσα στις δύσκολες φλεγμονώδεις συνθήκες στις οποίες εξελίσσεται η ίνωση.
description: Pulmonary fibrosis is an inflammatory entity belonging to diffuse disease of the lung parenchyma, it has a progressively deteriorating course leading to death, and is characterized by fibroblasts’ proliferation and excessive deposition of collagen and extracellular proteins in interstitial pulmonary space. This study investigated the potential effect of erythropoietin on autophagy, which has been proved to be triggered in pulmonary fibrosis. An animal model of pulmonary fibrosis, caused by bleomycin intratracheal administration in Wistar rats, was successfully developed. Fifty rats were used, which were divided into five groups. Group 1: animals-witnesses which received saline intratracheally and intraperitoneally, Group 2: rats treated only with bleomycin intratracheally, Group 3: animals treated with bleomycin intratracheally and erythropoietin intraperitoneally, Group 4: animals-witnesses, which received saline intratrachealy and erythropoietin intraperitoneally, Group 5: rats which received no substance at all. The success of the model was due to the fact that with the histochemical stain of heamatoxiline-eosin the severe damage caused by the fibrosis to the lung tissue was proven.In all experimental animals, the expression of Beclin 1 and LC3 (A and B) autophagic enzymes was tested by immunohistochemical methods. Regarding the extent of pathological lesions due to fibrosis, proved by morphometric analysis, a statistically significant decrease in its size was found in animals treated with both bleomycin and erythropoietin (p&lt;0.005). Also statistically significant was the reduction of expression of the two studied enzymes in animals administered with erythropoietin, compared to those which were not treated (for all enzymes: p&lt;0.005).The present study managed to prove that Erythropoietin inhibited the course of pulmonary fibrosis, reduced the apoptosis and limited the autophagy in the difficult inflammatory conditions under which the pulmonary fibrosis develops.