Διακύμανση νουκλεοτιδίων και νουκλεοσιδίων στο πρωτόγαλα και το γάλα αιγών και προβάτων
Creators: name: Πλακαντάρα, Σοφία Πέτρου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2007
Subjects: Νουκλεοτίδια
Νουκλεοσίδια
Γάλα
Πρωτόγαλα
Αιγές
Πρόβατα
Nucleotides
Nucleosides
Milk
Colostrum
Goat
Sheep

description: Τα νουκλεοτίδια έχουν από καιρό αναγνωριστεί ως σημαντικές ενώσεις ιδιαίτερα για την ανάπτυξη των πρόωρων και των χαμηλού βάρους γέννησης βρεφών, ενώ πρόσφατα διαπιστώθηκε ο ρόλος τους και σε ειδικές κλινικές καταστάσεις. Κατά συνέπεια παρουσιάζει ενδιαφέρον η διερεύνηση της περιεκτικότητας του γάλακτος των μικρών μηρυκαστικών σε νουκλεοσίδια και νουκλεοτίδια με στόχο την ενδεχόμενη αξιοποίησή του για ειδικές κλινικές εφαρμογές. Η παρούσα μελέτη περιλαμβάνει την καταγραφή των επιπέδων συγκέντρωσης των νουκλεοτιδίων και νουκλεοσιδίων σε πρόβειο και αίγειο γάλα και της διακύμανσης της συγκέντρωσης κατά τις πρώτες 15 μέρες μετά τον τοκετό.Η συγκέντρωση πέντε νουκλεοσιδίων (κυτιδίνη, ουριδίνη, ινοσίνη, γουανοσίνη και αδενοσίνη), τεσσάρων νουκλεοτιδίων (κυτιδυλο-5’-μονοφωσφορικού οξέος, CMP, ουριδυλο-5’-μονοφωσφορικού οξέος, UMP, γουανοσινο-5’-μονοφωσφορικού οξέος, GMP,και αδενοσινο-5’-μονοφωσφορικού οξέος, AMP) και του οροτικού οξέος προσδιορίστηκαν σε πρωτόγαλα και γάλα 18 προβάτων και 18 αιγών ελληνικών φυλών. Η δειγματοληψία πραγματοποιήθηκε 1, 2, 3, 4, 5 και 15 μέρες μετά τον τοκετό και η ανάλυση έγινε με υγρή χρωματογραφία αντίστροφης φάσης (RP-HPLC). Λόγω της υψηλής παραλλακτικότητας μεταξύ των ατόμων τα αποτελέσματα αναλύθηκαν και αξιολογήθηκαν με τρεις στατιστικές μεθόδους (ανάλυση διακύμανσης, ανάλυση παραγόντων και διακριτή ανάλυση). Και οι τρεις μέθοδοι οδήγησαν στα ίδια συμπεράσματα.Η συνολική συγκέντρωση των νουκλεοσιδίων κυμαινόταν από 58 ως 185 μmol/l και από 54 ως 119 μmol/l αντίστοιχα για το πρόβειο και αίγειο πρωτόγαλα και γάλα. Τόσο η συνολική συγκέντρωση των νουκλεοσιδίων, όσο και αυτή του οροτικού οξέος δε διέφερε σημαντικά μεταξύ των ειδών (Ρ&gt;0,05). Κύριο νουκλεοσίδιο και στα δύο είδη γάλακτος ήταν η ουριδίνη, η οποία αποτελούσε &gt;60% του συνόλου. Το μέσο επίπεδο ινοσίνης και γουανοσίνης ήταν παρόμοιο στα δύο είδη γάλακτος. Η μέση συγκέντρωση της κυτιδίνης ήταν υψηλότερη στο πρόβειο γάλα (11,0 μmol/l) έναντι του αιγείου (4,5 μmol/l) και παρουσίαζε μια έξαρση την 4η μέρα μετά τον τοκετό. Αντίθετα, το αίγειο γάλα είχε τουλάχιστο διπλάσια συγκέντρωση αδενοσίνης συγκριτικά με το πρόβειο (2,8 και 8,9,μmol/l αντίστοιχα για το πρόβειο και το αίγειο γάλα, κατά μέσο όρο).Στην περίπτωση των νουκλεοτιδίων η συνολική συγκέντρωση διέφερε σημαντικά(Ρ&lt;0,05) μεταξύ των ειδών, κυμαινόμενη μεταξύ 294 και 836 μmol/l για το πρόβειο πρωτόγαλα και γάλα και 166 και 366 μmol/l για το αίγειο. Το πρόβειο γάλα ήταν πλουσιότερο σε νουκλεοτίδια από το αίγειο καθ’ όλη την περίοδο δειγματοληψίας. Το UMP αποτελούσε το κύριο νουκλεοτίδιο και στα δύο είδη.Η συνολική συγκέντρωση νουκλεοτιδίων ήταν σαφώς μεγαλύτερη της συγκέντρωσης νουκλεοσιδίων, ενώ εντονότερη ήταν η διαφορά στο ζεύγος UMP-ουριδίνη, όπου η συγκέντρωση του UMP ήταν 4-5πλάσια της ουριδίνης. Επίσης σημαντική ήταν και η υπεροχή των συνολικών πυριμιδινών σε σχέση με τις πουρίνες (5-17 προς 1), κυρίως στο πρόβειο γάλα. Τέλος, με βάση τη διακριτή ανάλυση, διαπιστώθηκε ότι η συγκέντρωση έξι από τις ενώσεις που προσδιορίστηκαν (αδενοσίνη, κυτιδίνη, CMP, UMP, AMP, GMP) επιτρέπει τη διάκριση των δύο ειδών γάλακτος με ποσοστά ορθής ταξινόμησης 97,22% για το πρόβειο και 89,82% για το αίγειο. Αλλά και μόνες οι συγκεντρώσεις της αδενοσίνης και του CMP αρκούν για τη διάκριση των δύο ειδών με ποσοστό επιτυχίας 91,2%.Επιπλέον βρέθηκε ότι η περιεκτικότητα σε οροτικό οξύ θα μπορούσε να χρησιμοποιηθεί ως κριτήριο διάκρισης του ώριμου γάλακτος (15 ημερών από τον τοκετό) από το πρωτόγαλα και το μεταβατικό γάλα (1-5 ημερών).
description: Nucleotides have long been recognized to be important especially for preterm and small gestational age infants, but only recently have they become of clear and attractive value to different clinical situations. It is therefore interesting to study the nucleoside and nucleotide content of the milk of small ruminants and to investigate the eventual use of this milk for specific clinical applications. The aim of this study was to monitor the nucleoside and nucleotide content in ovine and caprine milk at the colostral, transitorial and mature stages of lactation.Five nucleosides (cytidine, guanine, inosine, guanosine and adenosine), four nucleotides (cytidyl-5’-monophosphate, CMP; uridyl-5’-monophosphate, UMP; guanosyl-5’-monophosphate, GMP; adenosyl-5’-monophosphate, AMP) and orotic acid were determined by RP-HPLC. Samples from 18 dairy sheep and 18 dairy goats were collected on the 1st, 2nd, 3rd, 4th, 5th and 15th day after parturition. A high inter-individual variation was observed. Thus, the results were evaluated using three methods of statistical analysis(analysis of variance, factor analysis and discriminant analysis). All of them led to the same conclusions.The total nucleoside content ranged from 58 to 185 μmol/l and from 54 to 119 μmol/ in ovine and caprine colostrum and milk, respectively. The total nucleoside and the orotic acid contents did not differ between species (P&gt;0.05). The major nucleoside in both types of milk was uridine, representing per se more than 60% of the total nucleoside content. The mean level of inosine and guanosine was comparable in ewes and goats milk. However, the mean level of cytidine throughout all the sampling period was much higher in ewes milk (11.9 μmol/l} as compared to the goats milk (4.5 μmol/l) and exhibited a peak value on the 4th day post partum. In contrast, adenosine content was at least twofold higher in caprine milk compared to the ovine milk counterpart (average concentration 2,8 and 8.9 μmol/l for ovine and caprine milk, respectively).In respect of the total nucleotide content, inter-species differences were significant(P&lt;0.05) and ranged from 294 to 836 μmol/l in ovine colostrum and milk and from 166 to 366 μmol/l in caprine. Ewes milk samples were found to be richer in nucleotides than goats samples all over the sampling period. UMP was the dominant nucleotide in the milk of both species.The total nucleotide content was clearly higher than total nucleoside content, the difference being larger in the case of the pair UMP-uridine; UMP concentration was 4 to 5-fold higher than that of uridine. Total pyrimidine nucleoside and nucleotide content was 5 to 17 times higher than total purine nucleoside and nucleotide content, this fact being more prominent in sheep milk.Discriminant analysis indicated that the concentration of six of the compounds under examination (adenosine, cytidine, CMP, UMP, AMP, GMP) might be used as discriminating tool for the separation of ewes from goats milk samples: correct classification was 97,22% for ewes and 89,82% for goats milk. Furthermore, it was shown that the parameters needed for a successful prediction of the species could be reduced to only two; adenosine and CMP concentration enables a successful prediction of the species (91,2% correct classification). Furthermore, orotic acid content found to differentiate mature milk (15 days post partum) from colostrum and transitorial milk (1-5 days post partum).