Παρασκευή και ανοσοβιολογικός χαρακτηρισμός Dna-εμβολίου, βασισμένου στην γλυκοπρωτεϊνη Β του ιού έρπητα απλού τύπου 1 (HSV-1)
Creators: name: Καραβίδα, Πηνελόπη Νικολάου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2009
Subjects: DNA εμβόλιο
Γλυκοπρωτεΐνη Β
Ερπητας απλού τύπου 1 (HSV-1)
Dna vaccine
Glycoprotein B
Herpes simplex virus type 1 (HSV-1)

description: Τα τελευταία χρόνια γίνονται εντατικές μελέτες πάνω στην τεχνολογία των DNA εμβολίων, καθώς η τεχνολογία αυτή έρχεται να καλύψει το κενό στις ασθένειες που δεν καλύπτουν τα συμβατικά εμβόλια. Παρά τα αναμφίβολα πλεονεκτήματα των DNA εμβολίων και τα ενθαρρυντικά αποτελέσματα από τις πειραματικές και κλινικές εφαρμογές τους, η μέθοδος αυτή βρίσκεται ακόμη σε πειραματικό στάδιο.Συνοπτικά, ένα DNA εμβόλιο περιέχει γονίδια τα οποία κωδικοποιούν πρωτεΐνες παθογόνων μικροοργανισμών ή καρκινικών κυττάρων. Αποτελείται από ένα βακτηριακό πλασμίδιο που περιέχει το συγκεκριμένο γονίδιο και κατάλληλα ρυθμιστικά στοιχεία για την έκφρασή του και στη συνέχεια εισάγεται στους ιστούς- στόχους. Η μέθοδος αυτή αποσκοπεί στην κινητοποίηση του ανοσοποιητικού συστήματος ενάντια αρχικά, στις πρωτεΐνες που εκφράζονται στα κύτταρα στα οποία έχει εισαχθεί το πλασμιδιακό DNA και κατ’ επέκταση ενάντια στους παθογόνους εισβολείς σε επόμενες μολύνσεις. Η τεχνολογία των DNA εμβολίων πιστεύεται ότι μπορεί να συμβάλλει σημαντικά στον περιορισμό της εξάπλωσης του HSV-1. Συγκεκριμένα, η ικανότητα τους να μιμούνται το φυσικό τρόπο μόλυνσης και να ενεργοποιούν τα ίδια ανοσοβιολογικά μονοπάτια είναι δυνατόν να προσφέρει προστασία ενάντια στον ιό από τα πρώτα στάδια της μόλυνσης, πριν ακόμα παγιωθεί η παρουσία του στον οργανισμό. Τέτοιες μελέτες πραγματοποιούνται τα τελευταία χρόνια στοχεύοντας σε δύο γλυκοπρωτεΐνες του ιού, τη gB και τη gD. Στόχος της συγκεκριμένης μεταπτυχιακής εργασίας ήταν η κατασκευή ενός υποψήφιου DNA εμβολίου, το οποίο θα μπορούσε να προσφέρει προστασία ενάντια στον HSV-1. Συγκεκριμένα, το εμβόλιο αυτό αποτελείται από έναν πλασμιδιακό φορέα ο οποίος έχει ήδη χρησιμοποιηθεί επιτυχώς για ανοσοποίηση ενάντια στον HSV-1 και στον οποίο κλωνοποιείται μετά από μια σειρά μοριακών τεχνικών ένα ακόμα τμήμα του γονιδίου της gB (p675). Στο τελικό στάδιο το νέο πλασμίδιο ελέγχεται για την ικανότητα έκφρασης του in vitro, ανοίγοντας το δρόμο για περαιτέρω in vivo πειράματα, μέχρι να αποδειχτεί η αποτελεσματικότητα και η ασφάλεια του στην επαγωγή ανοσίας ενάντια στο HSV-1.
description: During the last years many studies have been taking place on the DNA vaccine technology, as it is cosidered to give answers where compatible vaccines failed. But despite the DNA vaccines’ undeniable benefits and their promising results during clinical trials they are still in an experimental level.Briefly, a DNA vaccine comprise of genes that code for tumor’s or pathogenic microorganisms’ proteins. It consists of a bacterial plasmid which codes for the target gene and regulatory elements and it is inserted into the target tissues. This method seeks for the activation of the immune system against the proteins that are expressed by the plasmid and afterwards for the elimination of the pathogenic during later infection. DNA vaccines are considered to contribute to HSV-1 restriction. In particular their ability to imitate natural infection and initiate the same immune paths is considered to offer protection against the virus during the first stages of infection, even before latency. Such studies are being held based on the use of gB or/and gD. The object of this study was the construction of a DNA vaccine which could offer protection against HSV-1. Specifically, this vaccine consists of a plasmid vector which has already been used successfully against HSV-1 and in which an other part of gB (p675) is being cloned. During the last phace its expression ability is being checked in vitro showing us the way for farther in vivo experiments till its efficacy and safety are being established.