Επίδραση της θερμοκρασίας αραίωσης στην ποιότητα του σπέρματος του κάπρου:
Creators: name: Αλεξίου, Βασιλική Γεωργίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2013
Subjects: Θερμοκρασία αραίωσης
Τεχνητή σπερματέγχυση
Σπέρμα κάπρου
Dilution Temperature
Artificial Insemination
Boar semen

description: Η παρούσα εργασία πραγματεύεται την επίδραση της θερμοκρασίας αραίωσης (23oC, 30oC) στα ποιοτικά χαρακτηριστικά του σπέρματος του κάπρου με την εφαρμογή πρωτόκολλου αραίωσης ενός σταδίου. Στην έρευνα συμπεριλήφθηκαν 7 κάπροι και συλλέχθηκαν 20 εκσπερματίσματα σε διάστημα 4 μηνών. Τα δείγματα σπέρματος αραιώνονταν σε τελική συγκέντρωση 30 x 106 σπερματοζωάρια/ml α) με προθερμασμένο αραιωτικό μέσης διάρκειας συντήρησης (Optimia, Magapor, Spain) στους 30oC (ομάδα A), β) με αραιωτικό μέσης διάρκειας συντήρησης (Optimia, Magapor, Spain) στους 23 oC (ομάδα B) και γ) με αραιωτικό κατά της καταπόνησης (Androhep plus, Minitube, Germany) στους 23 oC (ομάδα Γ). Κάθε δείγμα σπέρματος χρησιμοποιούταν άμεσα για την εφαρμογή διπλής συμβατικής Τεχνητής Σπερματέγχυσης. Συνολικά χρησιμοποιήθηκαν 70 σύες. Ταυτόχρονα, κλάσμα από κάθε ένα δείγμα σπέρματος μεταφέρονταν εντός 1 ώρας στην Κλινική Παραγωγικών Ζώων της Κτηνιατρικής Σχολής του ΑΠΘ σε ισοθερμικό δοχείο θερμοκρασίας 16-18οC και αποθηκεύονταν για 3 ημέρες. Την πρώτη και την τρίτη ημέρα λαμβάνονταν κλάσματα σπέρματος με σκοπό την εκτίμηση των κινητικών παραμέτρων των σπερματοζωαρίων (αυτόματος αναλυτής CASA), της μορφολογίας (χρώση SpermBlue), της ζωτικότητας (χρώση εωσίνης-νιγροσίνης) και της ακεραιότητας της χρωματίνης του πυρήνα των σπερματοζωαρίων (χρώση πορτοκαλόχρουν της ακριδίνης). Η στατιστική ανάλυση πραγματοποιήθηκε με τη χρήση ενός Γενικού Γραμμικού Μικτού Μοντέλου (PROC MIXED) στο στατιστικό πρόγραμμα Statistical Analysis Systems version 9.0 (SAS Institute Inc., 1996, Cary, N.C., U.S.A.). Δεν παρατηρήθηκαν στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων Α και Β στις κινητικές παραμέτρους που εκτιμήθηκαν με τον αναλυτή CASA. Παρομοίως δεν διαπιστώθηκαν σημαντικές διαφορές μεταξύ των ομάδων Α και Β στη μορφολογία των σπερματοζωαρίων, στη % ζωτικότητα και στην ακεραιότητα του DNA. Mετά την εφαρμογή ΤΣ σε 70 σύες, εκτιμήθηκε το ποσοστό των τοκετών και ο αριθμός των ζωντανών γεννηθέντων χοιριδίων ανά τοκετοομάδα. Δεν παρατηρήθηκαν στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των 2 διαφορετικών θερμοκρασιών αραίωσης σε ότι αφορά στον αριθμό των ζωντανών γεννηθέντων χοιριδίων μεταξύ των ομάδων Α και Β. Αντίθετα, παρατηρήθηκε στατιστική σημαντική διαφορά στο ποσοστό των τοκετών. Από τη στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων για τα 2 αραιωτικά που χρησιμοποιήθηκαν στη χαμηλή θερμοκρασία αραίωσης (ομάδες Β και Γ), δεν προέκυψαν σημαντικές διαφορές για τις κινητικές παραμέτρους του σπέρματος που εκτιμήθηκαν μέσω του αναλυτή CASA, για τη μορφολογία %, τη ζωτικότητα % και την ακεραιότητα του DNA %. Από την εκτίμηση των αναπαραγωγικών παραμέτρων μετά τη διενέργεια ΤΣ σε 50 σύες της εκτροφής (37 Androhep plus, 13 Optimia) διαπιστώθηκε σημαντικά μεγαλύτερο ποσοστό τοκετών στην ομάδα Γ, ενώ δεν προέκυψαν στατιστικές διαφορές στον αριθμό των ζωντανών γεννηθέντων χοιριδίων ανά τοκετοομάδα. Συμπερασματικά, κατά την αραίωση του σπέρματος του κάπρου με πρωτόκολλο αραίωσης 1 σταδίου, η θερμοκρασία αραίωσης των 23οC δεν επηρεάζει τις ποιοτικές του παραμέτρους (ζωτικότητα, κινητικότητα, επί μέρους μορφές κίνησης, μορφολογία, ακεραιότητα της χρωματίνης του πυρήνα των σπερματοζωαρίων) διαφορετικά από τη θερμοκρασία αραίωσης των 30οC. Επιπλέον, μετά από την εφαρμογή διπλής συμβατικής ΤΣ εντός 2 ημερών από τη συλλογή και την αραίωση του σπέρματος, το μέγεθος της τοκετοομάδας δεν επηρεάζεται από τη θερμοκρασία αραίωσης, σε αντίθεση με το ποσοστό των τοκετών που είναι σημαντικά υψηλότερο όταν το σπέρμα αραιώνεται στους 30οC, δράση που προλαμβάνεται από τη χρήση αραιωτικών έναντι της καταπόνησης.
description: The aim of this study was to investigate the influence of dilution temperature (23oC, 30oC) in one step, using a common medium term (M) and a specific anti stress (AS) extender on boar semen quality and fertility.. Seven boars were included as semen donors. 20 ejaculates were collected and processed with the 2 extenders. Each semen sample was diluted to 30 x 106 spermatozoa/ml with M at 30oC (group A) and with M or AS at room temperature (23oC, groups B and C, respectively). After that, each sample was used for conventional artificial insemination (AI) in 70 sows, while a part of it was transferred to the lab in Farm Animal Clinic of the Veterinary Medicine School of A.U.Τh and stored at 16-18°C for 3 days. At the first and the last day of storage, motility parameters by CASA analyser (progressive, VCL, VSL, VAP, LIN, STR, WOB, ALH, BCF), morphology (MO) (SpermBLue stain), viability (V) (eosin-nigrosin) and DNA fragmentation (F) (acridine orange) evaluated. Data were analyzed with the use of a General Linear Mixed Model in the statistical program Statistical Analysis Systems version 9.0 (SAS Institute Inc., 1996, Cary, NC, USA). No significant differences were found between groups A and B in sperm motility % , progressive motility %, in the remaining CASA parameters (VCL, VSL, VAP, LIN, STR, WOB, ALH, BCF), in sperm morphology, vitality % and integrity of DNA %. After AI performance in 70 sows, the pregnacy rates and the rates of live piglets estimated, too. No statistically significant differences were found between the 2 different dilution temperatures in terms of the number of live born piglets between groups A and B. In contrast, there was statistically significant difference in farrowing rate. From the statistical analysis of the results for the two extenders which used at room temperature (groups B and C), there were no significant differences for the motility %, progressive motility % or any other CASA parameter (VCL, VSL, VAP, LIN, STR, WOB, ALH, BCF). Furthermore, no significant differences were found in morphology %, in vitality % and integrity of DNA%. As to the assessment of the reproductive parameters after AI in 50 sows (37 Androhep plus, 13 Optimia) observed significantly greater farrowing rate in group C compared to group B, while there were no statistical differences in the number of live born piglets. In conclusion, using one step dilution protocol for boar semen, the dilution temperature of 23°C does not affect its quality parameters (vitality, motility, individual forms of motility, morphology, integrity of nuclear chromatin of spermatozoa) differ from the temperature dilution of 30°C. Moreover, after conventional double AI within 2 days of the collection and dilution of the semen, the litter size is not affected by the dilution temperature, in contrast to the farrowing rate which is significantly higher when the semen dilution temperature is 30°C. In addition, this effect in farrowing rate can be avoided by the use of stress protective extenders.