Η επίδραση του ινσουλινικού αυξητικού παράγοντα Ι στην επούλωση της αναστόμωσης του παχέος εντέρου σε επιμύες υπό χημειοθεραπέια με 5-φθοριοουρακίλη
Creators: name: Ζαχαράκης, Εμμανουήλ Στ.
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2007
Subjects: Ινσουλινοειδής αυξητικός παράγοντας τύπου Ι
Επούλωση
Αναστομώσεις
Insoulin like growth factor I
Healing
Anastomoses

description: Η πειραματική αυτή μελέτη είχε σκοπό να μελετήσει την πιθανή θετική επίδραση του παράγοντα IGF-I στην επούλωση των αναστομώσεων του παχέος εντέρου σε επίμυες, που υποβάλλονται σε ενδοπεριτοναϊκή θεραπεία με 5-FU. Υλικό και Μέθοδος . Ογδόντα άρρενες επίμυες της ποικιλίας Wistar τυχαιοποιήθηκαν σε τέσσερις ομάδες (Α, Β, Γ και Δ) των 20 πειραματόζωων και υποβλήθηκαν σε εκτομή του παχέος εντέρου και αναστόμωση. Στην ομάδα Α (Ελέγχου) οι επίμυες ελάμβαναν ενδοπεριτοναϊκά φυσιολογικό ορό (3cc) διεγχειρητικά, καθώς και κάθε μέρα μετεγχειρητικά μέχρι τη θυσία τους. Επιπλέον, στους επίμυες χορηγούνταν ενδοπεριτοναϊκά φυσιολογικός ορός (2cc) διεγχειρητικά, έγχυση η οποία επαναλαμβανόταν την 2η ,4η και 6η μετεγχειρητική ημέρα. Στην ομάδα Β (5-FU) χορηγούνταν στους επίμυες διάλυμα 5-FU ( 20mg/kg Β.Σ.) σε ποσότητα 3cc ενδοπεριτοναϊκά διεγχειρητικά, καθώς και κάθε μέρα μετεγχειρητικά μέχρι τη θυσία τους. Στην ομάδα Γ (IGF-Ι) οι επίμυες ελάμβαναν ενδοπεριτοναϊκά 2cc διαλύματος IGF-1 (0.2mg/kg Β.Σ.) σε φυσιολογικό ορό διεγχειρητικά. Η έγχυση αυτή επαναλαμβανόταν την 2η ,4η και 6η μετεγχειρητική ημέρα. Στην ομάδα Δ (IGF-I και 5-FU) χορηγούνταν καθημερινά στους επίμυες διάλυμα 5-FU ( 20mg/kg Β.Σ.) σε ποσότητα 3cc ενδοπεριτοναϊκά διεγχειρητικά, καθώς και κάθε μέρα μετεγχειρητικά μέχρι τη θυσία τους. Επίσης, μετά την εκτέλεση της επέμβασης χορηγούνταν 2cc διαλύματος IGF-Ι (ποσότητας 0.2mg/kg Β.Σ.) ενδοπεριτοναϊκά, έγχυση που επαναλαμβανόταν την 2η ,4η και 6η μετεγχειρητική ημέρα. Την 7η μετεγχειρητική ημέρα γινόταν η προγραμματισμένη θυσία. Κατά τη θυσία πραγματοποιούταν νεκροτομή, έλεγχος για ρήξη της αναστόμωσης, μακροσκοπικός έλεγχος των συμφύσεων και μέτρηση της πίεσης διάσπασης της αναστόμωσης. Στη συνέχεια τμήμα της αποστελλόταν για προσδιορισμό υδροξυπρολίνης. Ένα άλλο τμήμα της αναστόμωσης αποστελλόταν για ιστολογική εξέταση και εκτίμηση της συγκέντρωσης λευκοκυττάρων, της νεοαγγειογέννεσης, της σύνθεσης κολλαγόνου και ινοβλαστών. Η στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων γινόταν με την ακριβή δοκιμασία κατά Fisher για τη σύγκριση ποσοστών και τη δοκιμασία κατά Kruskal-Wallis για τη σύγκριση μέσων όρων. Σε όλες τις στατιστικές αναλύσεις το επίπεδο σημαντικότητας ορίστηκε ως 0.05 και αμφίπλευρο. Οι στατιστικές αναλύσεις εφαρμόστηκαν με το στατιστικό πακέτο SPSS 13.00. Αποτελέσματα Στην ομάδα Β (5-FU) παρατηρήθηκε η μεγαλύτερη μείωση του σωματικού βάρους των επίμυων, ενώ στην ομάδα Γ (IGF-Ι) η μεγαλύτερη αύξηση (p=0.042) συγκρινόμενη με τις άλλες ομάδες. Η συχνότητα διάσπασης της αναστόμωσης ήταν μεγαλύτερη στην ομάδα Β (5-FU) συγκρινόμενη με τις άλλες ομάδες (p=0.020). H ομάδα Β (5-FU) παρουσίασε τη χαμηλότερη μέση πίεση διάσπασης συγκρινόμενη με τις άλλες ομάδες (p&lt;0.001). Αντίθετα η ομάδα Γ (ΙGF-I) παρουσίασε στατιστικά σημαντικά υψηλότερες τιμές πίεσης διάσπασης συγκρινόμενη με τις υπόλοιπες ομάδες. Δεν υπήρξε στατιστικά σημαντική διαφορά όσον αφορά την πίεση ρήξης της αναστόμωσης ανάμεσα στην ομάδα Α (Ελέγχου) και Δ (ΙGF-I+5-FU) (p=1.000). Η δημιουργία των συμφύσεων αυξήθηκε στατιστικά σημαντικά σε όλες τις ομάδες συγκρινόμενες με την ομάδα Α (Ελέγχου). Η ποσοτική αξιολόγηση της εναπόθεσης κολλαγόνου στην αναστόμωση, όπως αυτή εκφράστηκε με τη μέτρηση υδροξυπρολίνης έδειξε ότι η ομάδα Γ (ΙGF-I) παρουσίασε σημαντικά υψηλότερη μέση τιμή υδροξυπρολίνης συγκρινόμενη με όλες τις υπόλοιπες ομάδες. Το ίδιο ίσχυε και για την ομάδα Β (5-FU) που παρουσίασε σημαντικά χαμηλότερη μέση υδροξυπρολίνη συγκρινόμενη τόσο με την ομάδα Γ (ΙGF-I), όσο και με την ομάδα Δ (ΙGF-I+5-FU). Στην ομάδα Β (5-FU) παρατηρήθηκε μείωση της υδροξυπρολίνης σε σχέση με την ομάδα Α (Ελέγχου) αλλά η μεταβολή αυτή δεν ήταν στατιστικά σημαντική. Η ιστολογική εξέταση των αναστομώσεων έδειξε αύξηση της φλεγμονώδους αντίδρασης καθώς και ελάττωση της νεοαγγειογέννεσης και εναπόθεσης κολλαγόνου στην ομάδα Β (5-FU) συγκρινόμενη με την ομάδα Α (Ελέγχου). Αντίθετα παρατηρήθηκε αύξηση της νεοαγγειογέννεσης, του νεοκολλαγόνου και των ινοβλαστών στην ομάδα Γ (IGF-Ι) συγκρινόμενη με την ομάδα Α (Ελέγχου). Δεν παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική διαφορά στην νεοαγγειογέννεση, το νεοκολλαγόνο και τους ινοβλάστες ανάμεσα στην ομάδα Δ (ΙGF-I+5-FU) και Α (Ελέγχου). Συμπέρασμα. Η ενδοπεριτοναϊκή χορήγηση 5-φθοριοουρακίλης επηρεάζει αρνητικά την επούλωση των αναστομώσεων του παχέος εντέρου. Η χορήγηση του IGF-I όταν γίνεται σε υψηλές δόσεις, έχει ως αποτέλεσμα τον περιορισμό της αρνητικής δράσης της 5-φθοριοουρακίλης στην επούλωση των αναστομώσεων του παχέος εντέρου σε επίμυες
description: The aim of this experimental study was to investigate if IGF-Ι can protect the colonic healing from the adverse effects of 5-FU therapy, when injected intraperitoneally after colon resection. Materials and Methods Eighty female Wistar rats were randomised into four groups (A, B, C, D of 20 rats for each group) in a blind fashion. After resection of 1-cm segment of transverse colon an end-to-end sutured anastomosis was performed. Rats of the Control group (A) were injected with 3 ml of solution 0.9% NaCl intraperitoneally immediately after the operation and once daily until the day of sacrifice. Besides, immediately after colonic anastomoses were performed, the rats in the control group were injected with 2 ml of solution 0.9% NaCl intraperitoneally. This was repeated on 2nd, 4th and 6th postoperative day. Rats of the 5-FU group (B) were injected with 3 ml of solution 5-FU (20mg/kg body weight) intraperitoneally immediately after the operation and once daily until the day of sacrifice. Rats of IGF-I group (C) received 2 ml of solution IGF-I (2 mg/kg body weight) intraperitoneally, immediately after the colonic anastomosis was performed and on 2nd, 4th and 6th postoperative day as well. Finally, rats of IGF-I + Cortisone were injected with 3 ml of solution 5-FU (20mg/kg body weight) intraperitoneally immediately after the operation and once daily until the day of sacrifice. These rats also received intraperitoneally IGF-I in a dose of 2mg/kgr body weight, immediately after operation which was repeated in the 2nd, 4th and 6th postoperative day. Rats were sacrificed on the 7th postoperative day and the anastomoses were examined macroscopically. The bursting pressures were recorded and the anastomoses were graded histologically. Hydroxyproline levels of the anastomotic site were also recorded. Statistic analysis employed Fischer's exact test for the comparison of proportions. Differences among groups with respect not normally distributed variables were tested using the Kruskall-Wallis test, whereas pair-wise differences were compared by the Mann-Whitney test. Analyses were conducted in SPSS 13.00 (SPSS, Inc., Chicago, IL). All reported p- values were two tailed. Results Body weight was significantly decreased in the 5-FU group than in the other groups (p&lt;0.001). The leakage rate of the anastomoses was significantly higher in Cortisone group compared to the other groups (p=0.020). Bursting pressures were also significantly lower in the 5-FU group compared to the other groups (p&lt;0.001). On the other hand bursting pressures in the IGF-I group were significantly higher than in the other groups. No difference in bursting pressures was detected between group Α (Control) και D (ΙGF-I+5-FU) (p=1.000). Adhesion formation was significantly higher in all groups compared to the Control group. Hydroxyproline levels were lower in the 5-FU group compared to the rest of the groups. However, collagen deposition according to hydroxyproline levels was significantly higher in IGF-I group compared to the other groups. Histological examination of the anastomoses showed a significant increase of white cell count and decrease in neoagiogenesis and fibroblast activity in the 5-FU group compared to the Control group. On the other hand, neoagiogenesis, collagen deposition and fibroblast activity were significantly higher in the IGF-I group compared to the Control group. No statistically significant difference in neoagiogenesis, collagen deposition and fibroblast activity was detected between the Α (Control) και D (ΙGF-I+5-FU) group. Conclusion 5-FU inhibits healing of colonic anastomoses. However, IGF-I when given intraperitoneally mediates the deleterious effects of 5-FU and protects colonic healing in rats