title: Der Einfluss der Cyclohexadepsipepdide, Enniatin B und Beauvericin, auf die lysosomale Aktivität in KB-3-1 Zellen
Creators: name: Redinger, Theresa Valentina
Publisher: name: :none
Year: 2018

description: Die Cyclohexadepsipeptide, Beauvericin und Enniatin B, gelten als vielversprechende Substanzen in der Entwicklung neuer Zytostatika. Neben den antibiotischen, insektiziden und ionophoren Eigenschaften zeigen die Mykotoxine eine über den intrinsischen, mitochondrialen Weg initiierte Zytotoxizität auf Krebszellen. Allerdings scheint dieser Mechanismus nicht der alleinige Auslöser für deren Wirkung zu sein. Einige Studien weisen bereits auf ein mögliches Zusammenspiel zwischen den Mitochondrien und den Lysosomen, nach einer Destabilisierung der lysosomalen Membran, hin. Jedoch ist der zugrundeliegende Mechanismus der lysosomal vermittelten Apoptose noch nicht vollständig untersucht. Darauf aufbauend untersucht diese Arbeit, ob eine Verbindung zwischen den Lysosomen und der zytotoxischen Wirkung der Testsubstanzen besteht. Hierfür findet die Methode der Fluoreszenzfärbung und -mikroskopie Anwendung. Die sauren Lysosomen von KB- 3-1 Zellen werden mittels dem Farbstoff LysoTracker Red DND-99 angefärbt und so sichtbar gemacht. Auf diese Weise erfolgt die Überprüfung, ob es nach einer Behandlung mit den beiden Testsubstanzen zu einer lysosomalen Destabilisierung bzw. zu einer pH- Wert Erhöhung kommt. Da beide Mechanismen durch einen Verlust der Fluoreszenzfärbung gekennzeichnet sind, kann keine Unterscheidung diesbezüglich getroffen werden. Allerdings zeigt sich eine signifikante Reduktion der Anzahl der sauren Lysosomen nach der Behandlung. Zudem ist eine diffusere Verteilung des Farbstoffes erkennbar. Dies deutet auf eine Erniedrigung des zytosolischen pH-Wertes und somit auf eine lysosomale Membran-Permeabilisation (LMP) hin. Zusammengefasst lassen die Ergebnisse auf eine Beteiligung der Lysosomen an der durch Beauvericin bzw. Enniatin B vermitteleten Zytoxizität rückschließen.
description: The cyclohexadepsipeptides, Beauvericin and Enniatine B, are considered to be promising substances in the development of new cytotoxic drugs. In addition to the antibiotic, insecticidal and ionophoric properties, the mycotoxins show a cytotoxicity on cancer cells initiated via the intrinsic, mitochondrial pathway. However, this mechanism does not seem to be the sole trigger for their effect. Some studies already indicate a possible interaction between the mitochondria and the lysosomes, after a destabilization of the lysosomal membrane. However, the underlying mechanism of lysosomal-mediated apoptosis has not been fully investigated. Based on that previous work, this thesis investigates whether there is a connection between lysosomes and the cytotoxic effect of the test substances. The method of fluorescence staining and microscopy is used for this purpose. The acid lysosomes of KB-3-1 cells are stained using the dye LysoTracker Red DND-99 and made visible. Both substances can either cause a lysosomal destabilization or a pH increase. Since both mechanisms are characterized by a loss of fluorescence staining, no distinction can be made in this respect. However, there is a significant reduction in the number of acid lysosomes after treatment. In addition, a more diffuse distribution of the dye can be seen. This indicates a decrease of the cytosolic pH-value and, thus, a lysosomal membrane permeabilization (LMP). Taken together, the results suggest that lysosomes are involved in the lysosomal induced cytotoxicity of Beauvericin and Enniatin B, respectively.