Επίδραση του διαλύτη παραλαβής του πολικού κλάσματος του παρθένου ελαιολάδου στην εκτίμηση του περιεχομένου σε ολικές φαινόλες χρωματομετρικώς και μετά από υγροχρωματογραφικό διαχωρισμό με ανίχνευση σ
Creators: name: Μελίδου, Δάφνη Ανέστη
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2015
Subjects: Πολικές φαινόλες
Εξαιρετικά παρθένο ελαιόλαδο
Διαλύτης εκχύλισης
Polar phenols
Virgin olive oil
Extraction solvent

description: Οι πολικές φαινόλες αποτελούν ήσσονα συστατικά του παρθένου ελαιολάδου. Ο προσδιορισμός τους προϋποθέτει την παραλαβή τους από το παρθένο ελαιόλαδο με εκχύλιση, συνήθως υγρού-υγρού. Παρά το πλήθος δοκιμών εδώ και δεκαετίες, η επιλογή του κατάλληλου διαλύτη για την παραλαβή τους, κύρια παράμετρος της εκχύλισης, εξακολουθεί να είναι υπό διερεύνηση καθώς νέες προτάσεις εμφανίζονται κατά διαστήματα. Οι προτάσεις αυτές γίνονται συνήθως αξιοποιώντας μια μόνο αναλυτική τεχνική, χωρίς απαραίτητα να είναι βέλτιστες για κάποια άλλη. Λαμβάνοντας υπόψη τα παραπάνω, στην παρούσα εργασία διερευνήθηκε η επίδραση του διαλύτη παραλαβής των ολικών πολικών φαινολών στην εκτίμηση των επιπέδων τους τόσο χρωματομετρικώς, όσο και μετά από υγροχρωματογραφικό διαχωρισμό με ανίχνευση στο υπεριώδες. Δοκιμές παραλαβής έγιναν με μεθανόλη, μίγματα μεθανόλης-νερού που χρησιμοποιούνται κατεξοχήν στη βιβλιογραφία, αλλά και με ακετονιτρίλιο και μίγματά του με νερό. Η σύσταση των τελευταίων μιγμάτων επιλέχθηκε χρησιμοποιώντας δύο διαθέσιμες φυσικοχημικές προσεγγίσεις, ώστε να έχουν ανάλογη πολικότητα με εκείνη των υδατομεθανολικών μιγμάτων. Η μελέτη έγινε σε δείγμα παρθένου ελαιολάδου που περιείχε τόσο απλές όσο και σύνθετες φαινόλες. Η παραλαβή δεν ήταν εφικτή σε όλες τις περιπτώσεις. Το ποσοστό του οργανικού διαλύτη ήταν καθοριστικό για την παραλαβή των σύνθετων φαινολών, που απαντώνται και σε μεγαλύτερη συγκέντρωση. Επιλεγμένα μίγματα διαλυτών που ήταν εφικτό να αναλυθούν και με τις δύο τεχνικές εξετάστηκαν στη συνέχεια ως προς την επίδρασή τους παρουσία κάποιων ανόργανων και οργανικών οξέων που χρησιμοποιούνται στην υγρή χρωματογραφία για τη ρύθμιση της τιμής του pH (pH=2.5). Η προσθήκη οξέος δε βελτίωσε την παραλαβή, σε ορισμένες δε περιπτώσεις η επίδραση ήταν αρνητική καθώς φάνηκε να επηρεάζεται η σταθερότητα των συστατικών με το χρόνο. Η επίδραση του διαλύτη μεταβάλλοντας το χρόνο εκχύλισης είχε επίσης μικρή επίδραση καθώς τα επίπεδα αυξήθηκαν 3-6% ανάλογα με το διαλύτη. Για την επιβεβαίωση των ευρημάτων, τα επιλεγμένα μίγματα μεθανόλης ή ακετονιτριλίου με νερό εφαρμόστηκαν και σε άλλα 5 δείγματα παρθένου ελαιολάδου. Στο σημείο αυτό, αξιοποιήθηκε συμπληρωματικά και η φασματοσκοπία 1Η NMR βάσει συγκεκριμένου δημοσιευμένου πρωτόκολλου για τον ποσοτικό προσδιορισμό των φαινολών του παρθένου ελαιολάδου. Από τις δοκιμές που έγιναν συνολικά διαπιστώθηκε ότι η παραλαβή με επιλεγμένο μίγμα ακετονιτριλίου-νερού ήταν πιο αποτελεσματική από τα μίγματα μεθανόλης-νερού, τα οποία χρησιμοποιούνται εκτεταμένα στη βιβλιογραφία. Η παρατήρηση αυτή επιβεβαιώθηκε εν μέρει με την τεχνική 1Η NMR που εφαρμόστηκε ωστόσο σε μικρότερο αριθμό δειγμάτων, οπότε επιβάλλεται περαιτέρω διερεύνηση.
description: The polar phenols are minor components of virgin olive oil. Their estimation requires their extraction from virgin olive oil, usually with the technique of liquid-liquid extraction. Despite the number of trials for decades, the selection of an appropriate solvent for the extraction is still under investigation, as well as new proposals do appear. These proposals usually utilize a single analytical technique, not necessarily optimal for another. Considering the above, in the present thesis, the effect of the extraction solvent has been investigated in the total polar phenols estimation, by chromatometric determination and by liquid chromatographic separation. Pure methanol, methanol-water mixtures, pure acetonitrile and it’s mixtures with water have been used as extraction solvents. The composition of the acetonitrile-water mixtures was chosen by using two physicochemical approaches, so that they could have a similar polarity with the methanol-water mixtures. The experiments were performed in a sample of virgin olive oil containing both simple and complex phenols. The extraction was not possible in all cases. The proportion of the organic solvent was an essential parameter for the extraction of complex phenols. The effect of selected mixtures of solvents which were possible to be analyzed with both techniques was investigated, in the presence of common inorganic and organic acids used in liquid chromatography for adjusting the pH. The pH value was set at 2.5. The addition of acid did not improve the extraction, and in some cases the effect was negative as it seemed to affect the stability of the components over time. The effect of solvent by varying the extraction time had little effect, as levels increased only 3-6% depending on the solvent. To verify the results, selected mixtures of methanol or acetonitrile with water were applied to other 5 samples of virgin olive oil. Additionally, 1H NMR spectroscopy was performed with the use of a published protocol for the quantitative determination of phenols in virgin olive oil. In conclusion, the overall findings demonstrate that the extraction with the acetonitrile-water mixture was more effective than the methanol-water mixtures that have been used extensively in the literature. This observation was partially confirmed by 1H NMR technique, which however was applied to a smaller number of samples, therefore further investigation is needed.