title: Speichel als Matrix zum Nachweis von Drogen und Medikamenten im Rahmen einer therapeutischen Behandlung
Creators: name: Halwachs, Lydia
Publisher: name: :none
Year: 2011

description: In der vorliegenden Arbeit wurde die Wiederfindungsrate von Drogen und Medikamenten aus einem neuen Speichelsammelsystem mit über 96% für 3H-Cocain, 14C-Codein, 14C-Methamphetamin, 14C-Morphin, 14C- Mycophenolatnatrium und 3H-Nicotin ermittelt. Die Wiederfindungsrate für 3H-∆9-Tetrahydrocannabidiol betrug 31%. Der DRI Cotinine Immonoassay zur Messung von Cotinin im Harn wurde so modifiziert, dass die Cotinin- Konzentration im Speichel bestimmt werden konnte. Als Bestätigungsanalyse wurde eine LC/MS-Methode mit vorangehender Festphasenextraktion entwickelt. Die Speichelproben wurden über ein mixed-mode- cation-exchange-Säulchen extrahiert. Die Analyten wurden anschließend in einem reversed-phase- Trennsystem auf einer Polymersäule mit einem Eluenten aus Acetonnitril und 20 mM Ammoniumacetat pH 9,50 getrennt und massenspektrometrisch detektiert. 199 Speichelproben von Rauchern und Nichtrauchern wurden mit dem modifizierten Immunoassay und der LC/MS-Methode vermessen. Der Cut-Off-Wert zur Unterscheidung zwischen Rauchern und Nichtrauchern wurde bei 40 ng/mL Cotinin im Speichel ermittelt. Weiters wurden Speichelproben von zehn Probanden nach dem Verzehr von Speisemohn einem neuen Immunoassay vermessen. Im Gegensatz zu den parallel abgenommenen Harnproben konnten in den meisten Speichelproben keine Opiate nachgewiesen werden. Dies liegt vermutlich daran, dass bei der Probenahme darauf geachtet wurde, dass keine Mohnsamen die Speichelproben verunreinigen, die sonst zu falsch positiven Ergebnissen führen würden. Zur Extraktion von Opiat-hältigen Speichelproben wurde eine gekoppelte Festphasen-extraktionsmethode über ein Anionaustauschersorbens und über ein mixed-mode-cation-exchange-Säulchen entwickelt. Das Retentionsverhalten von Opium-Alkaloiden des Morphinan-Typs wurde in verschiedenen chromatographischen Trennsystemen untersucht. Die beste Trennung von Thebain, Codein, Morphin, Morphin-6-Glucuronid und Morphin-3-Glucuronid wurde auf einer nicht modifizierten Silica-Säule mit 82% Acetontiril und 18% 20 mM Ammoniumacetat pH 3,80 als Eluenten erzielt.
description: In this work, a new saliva collection system was investigated and the recovery of some radioactive-labelled drugs of abuse and therapeutic drugs was determined. The recovery for 3H-cocaine, 14C-codeine, 14C- methamphetamine, 14C-morphine, 14C-myocphenolate-sodium and 3H-nicotine was more than 96%. For 3H- ∆9-tetrahydrocannabidiole it was 31%. The DRI® Cotinine immunoassay for detection of cotinine in urine was modified to be used for measuring cotinine-concentrations in saliva samples. A solid-phase-extraction- and LC/MS-method for reconfirmation was also developed. Saliva samples were extracted using mixed-mode-cation-exchange-columns. The analytes were separated on a reversed-phase-polymer-column using a mobile phase consisting of acetonitrile and 20 mM ammonium acetate pH 9,50. Using the newly established methods, 199 saliva samples of smokers and non-smokers were analysed. The cut-off-value to distinguish between smokers and non-smokers was set at 40 ng/mL cotinine in saliva. Furthermore, saliva samples of ten persons after consumption of large amounts of poppy seed were analysed using a new immunoassay. Compared to parallel drawn urine samples the results for most saliva samples were opiate-negative. The reason for this was presumably the elimination of sample contamination with poppy seeds, which would cause false positive results. A coupled solid-phase-extraction method using an anion-exchange-sorbent and a mixed-mode-cation- exchange-column for opiates in saliva was also developed. The retention of morphinan-type-alkaloids in different chromatographic systems was investigated. The best separation of thebaine, codeine, morphine, morphine-6-glucuronide and morphine-3-glucuronide was achieved on a non-modified silica-column using 82% acetonitrile and 18% 20 mM ammonium acetate pH 3,80 for elution.