Πειραματικό μοντέλο εστιακής απομυελίνωσης στο Κεντρικό Νευρικό Σύστημα
Creators: name: Ξηροφώτου, Αναστασία Βασιλείου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2016
Subjects: Νευρο-ανοσοβιολογία
In vivo πειραματικό μοντέλο
Απομυελίνωση
Neuro-immunobiology
In vivo experimental model
Demyelination

description: Η πολλαπλή σκλήρυνση είναι μια χρόνια αυτοάνοση ασθένεια που προκαλεί φλεγμονή και απομυελίνωση των νευρώνων. Στην παρούσα διπλωματική, αναπτύχθηκε ένα μοντέλο διάχυτης απομυελίνωσης σε πειραματόζωα μετά από έγχυση λιποπολυσακχαρίτη (LPS) στην περιοχή του ραβδωτού σώματος και μελετήθηκε η εξέλιξη των φλεγμονωδών μηχανισμών. Εγχύθηκε στερεοτακτικά LPS από E.coli (3μg/3μl) στην περιοχή του ραβδωτού σώματος ποντικιών της φυλής C57/Bl6. Τα πειραματόζωα θυσιάστηκαν σε διαφορετικές χρονικές στιγμές (3, 7 και 20 ημέρες) και αξιολογήθηκε η ανοσιακή απάντηση του εγκεφάλου μέσω ιστολογικών και ανοσοιστοχημικών τεχνικών. Την φλεγμονή που προκλήθηκε, ακολούθησε η εμφάνιση μιας μεγάλης εστίας πρωτογενούς απομυελίνωσης που αφορούσε κυρίως στην περιοχή του μεσολοβίου και των βασικών γαγγλίων και συνδέεται με την περιχαράκωση των τοπικών αστροκυττάρων γύρω από την εστία. Παράλληλα, ανιχνεύτηκε ένας μεγάλος αριθμός Iba-1 θετικών κυττάρων μικρογλοίας/μακροφάγων σε κάθε ένα από τα χρονικά σημεία. Μέχρι την 20η μέρα, οι εστίες είχαν επαναμυελινωθεί σε μεγάλο βαθμό. Επίσης την 3η μέρα ανιχνεύθηκε ένας μικρός αριθμός CD3 θετικών Τ λεμφοκυττάρων που αυξήθηκε μέχρι την 20η μέρα. Οι αλλαγές αυτές δεν παρατηρήθηκαν στην ομάδα ελέγχου που έλαβε φυσιολογικό ορό. Η έγχυση LPS στην περιοχή του ραβδωτού σώματος οδηγεί σε έντονη φλεγμονή και ακολούθως σε απομυελίνωση που εκτείνεται σε εγκεφαλικές περιοχές πέρα από το σημείο της έγχυσης. Η απομυελίνωση που προκαλείται από το LPS μπορεί να αποτελέσει ένα χρήσιμο εργαλείο για την έρευνα των πιθανών μηχανισμών που εμπλέκονται στη σκλήρυνση κατά πλάκας.
description: Multiple Sclerosis (MS) is a chronic autoimmune disease that causes neuroinflammation resulting in demyelination. Herein, we developed an animal model of diffuse demyelination after intrastriatal lipopolysaccharide (LPS) injection and we investigate the evolution of inflammatory changes. E.coli LPS (3μg/3μl) was stereotactically injected in the striatum of C57/Bl6 mice. Animals were sacrificed at different time points (day3, day7and day20) and brain immune responses were evaluated with histological and immunohistochemistry techniques. The inflammation was followed by the appearance of a large lesion of primary active demyelination mainly in the corpus callosum and basal ganglia, which was associated with entrenchment of local astrocytes around the lesion and a substantial number of Iba1 -positive microglia/macrophages was detected in each time point. By 20 days the lesions were largely remyelinated. At day 3 was also detected a small number CD3 positive T- cells that increased by day 20. These changes were not observed in control, saline-injected animals. Intrastriatal injection of LPS results in severe inflammation and subsequently in prominent demyelination, extending at remote areas from the injection site. LPS-induced demyelination may serve as a useful tool for future research on potential mechanisms of MS lesions.