MOLECULAR BASIS OF THE DEMYELINATING DISEASES
Creators: name: CARLONI, CAMILLA
Publisher: name: Universit� degli Studi di Milano
Year: 2013

description: La sclerosi multipla (SM) � una patologia demielinizzante caratterizzata da neuro-degenerazione progressiva e causata da una risposta autoimmunitaria diretta contro auto-antigeni dell?organismo che si manifesta in soggetti geneticamente predisposti. Le terapie ad oggi disponibili riducono la severit� e l?incidenza degli attacchi, cos� da prevenire le ricadute e prevenire o ritardare la progressione della malattia. Recentemente, in aggiunta alle terapie immunomodulanti basate sulla somministrazione di Interferone-?, Glatimer Acetato o Mitoxantrone, � stato introdotto il farmaco natalizumab (Tysabri, Biogen Idec), un anticorpo monoclonale umanizzato diretto contro l?integrina ?4?1 (o VLA-4), che agisce impedendo l?adesione e l?extravasazione linfocitaria dal letto vascolare alla sede di infiammazione e, di conseguenza, previene i sintomi tipici della malattia e l?aggravamento della disabilit� nei soggetti affetti dalla forma recidivante-remittente di SM. E? stata identificata, tuttavia, un?associazione tra trattamento con natalizumab e insorgenza di Leucoencefalopatia Multifocale Progressiva (PML), una patologia opportunistica e demielinizzante della sostanza bianca cerebrale, spesso fatale. Tale patologia � causata dalla riattivazione, in condizioni di immunodepressione, del polyomavirus umano JC (JCV) dal suo stato di latenza, con conseguente infezione litica e distruzione degli oligodendrociti. Al mese di Ottobre 2012 sono stati riportati 298 casi di PML su 108,300 soggetti affetti da SM e trattati con natalizumab, con un tasso di mortalit� del 21.1% (63/298 soggetti con PML sono deceduti). Tre fattori, singolarmente o in combinazione, sono stati associati a distinti livelli di rischio di sviluppare PML: positivit� agli anticorpi contro JCV, precedente uso di farmaci immunosoppressori e lunga durata del trattamento con natalizumab (&gt; di 24 mesi). Al fine di comprendere le basi molecolari della demielinizzazione e di identificare possibili fattori di rischio per l?insorgenza di patologie opportunistiche e possibili marker di diagnosi precoce di PML nei soggetti trattati con natalizumab, � stato condotto un ampio studio longitudinale, riguardante tre differenti patologie demielinizzanti: SM, PML e LeucoEncefalopatia Non Determinata (NDLE). Quest?ultima patologia, a eziologia non ancora definita, � caratterizzata da lesioni simili a quelle associate a PML, insorge in soggetti HIV-1 positivi ed � caratterizzata dall?assenza del genoma di JCV e di altri virus neurotropi a livello del liquido cerebro-spinale (CSF). 76 soggetti affetti da SM e trattati con natalizumab o con terapia convenzionale di prima linea (questi ultimi arruolati come controlli), 28 soggetti affetti da PML e 22 affetti da NDLE sono stati arruolati nello studio e campioni biologici di CSF, sangue, siero ed urine sono stati prelevati a diversi momenti della malattia. Il genoma di JCV � stato ricercato in tutti i campioni biologici raccolti tramite Real-Time PCR quantitativa (Q-PCR) e, quando amplificato, � stato sottoposto a caratterizzazione molecolare, al fine di determinare se l?organizzazione genomica virale potesse rappresentare un fattore di rischio per lo sviluppo di PML. I risultati ottenuti hanno mostrato l?assenza del genoma di JCV nel CSF prelevato dai soggetti affetti da NDLE. Al contrario, la carica virale e l?organizzazione molecolare della regione di controllo trascrizionale virale (TCR) amplificata nel CSF dei soggetti affetti da PML sembrano rappresentare importanti fattori di prognosi. Relativamente all?analisi sui soggetti affetti da SM, � emerso un aumento dell?escrezione urinaria di JCV nel gruppo dei pazienti trattati con natalizumab, rispetto al gruppo di controllo (p&lt;0.05). In particolare, questo aumento si verifica fino alla 24a infusione mensile di natalizumab, mentre, a partire dalla 36a infusione, l?escrezione di JCV diminuisce fino a livelli pre-infusione. Nonostante la riattivazione di JCV nelle urine si sia dimostrata subclinica, l?aumento della prevalenza del virus nei soggetti trattati con natalizumab non pu� essere trascurato e il monitoraggio costante dell?eventuale presenza di JCV nelle urine di tali pazienti potrebbe permettere l?identificazione dei soggetti infettati dal virus e di verificare se la replicazione virale e l?escrezione nelle urine possano essere influenzate dal trattamento con l?anticorpo monoclonale. Inoltre, confrontando i risultati del test anticorpale contro JCV, a cui tutti i pazienti sono routinariamente sottoposti, con i risultati ottenuti attraverso l?analisi molecolare, � stato possibile verificare come il primo test sia affetto da una percentuale di errore (falsi-negativi) del 7.9%. Risulta, quindi, fondamentale affiancare sempre la ricerca del genoma virale nei fluidi biologici del paziente nel tempo al test per la ricerca degli anticorpi anti-JCV, al fine di identificare i pazienti a rischio PML, anche tra coloro i quali hanno mostrato negativit� al test anticorpale, e di trovare un marker biologico specifico, sensibile, riproducibile e facilmente determinabile in modo non invasivo di rischio di PML.