LE ALTERAZIONI DELLA MATRICE EXTRACELLULARE NELLA PATOGENESI DELL'IPERTENSIONE: EFFETTI DELLA CARENZA DI EMILINA-1 A LIVELLO DELL'AORTA E DELLE ARTERIE MESENTERICHE DI TOPO
Creators: name: BARBALINI, LAURA
Publisher: name: Universit� degli Studi di Milano
Year: 2015

description: L?ipertensione arteriosa � uno dei principali fattori di rischio per le patologie cardiovascolari. Pi� del 90% dei soggetti ipertesi � affetto da ipertensione essenziale, cio� ad eziologia non definita a parte la possibile predisposizione genetica, in cui l?aumento dei valori pressori sembra essere associato ad un aumento della resistenza arteriolare. L?integrit� e l?elasticit� di questi vasi come anche la modulazione della pressione arteriosa sono determinate dalle cellule muscolari lisce ed endoteliali che ne rivestono la parete e dalle loro connessioni con la matrice extracellulare. In quest?ultima � stata individuata una glicoproteina secreta, l?Emilina-1, che regola la pressione arteriosa inibendo il processamento del fattore di crescita TGF-?. In seguito alla mancanza di Emilina-1 nelle cellule muscolari lisce dei vasi, topi knockout presentano elevati livelli di TGF-? e un aumento del tono miogeno. 
Con l?obiettivo di comprendere le alterazioni molecolari che portano ad ipertensione arteriosa in seguito alla carenza di Emilina-1 sono stati analizzati i profili proteomici dell?aorta e delle arterie mesenteriche di due modelli animali: i topi Emilina-1 knockout (KO) e i topi Emilina-1 condizionali indotti da Tamoxifen (flox-flox), utilizzando come controlli rispettivamente topi sani e topi trattati con Tamoxifen. Le differenze qualitative e quantitative del proteoma sono state ottenute mediante la combinazione di due tecniche: la 2D-DIGE (Two Dimensional Differential In Gel Electrophoresis) e l?ICPL (Isotope-Coded Protein Labeling). Inoltre per studiare la regolazione delle proteine differenzialmente espresse identificate, sui promotori dei relativi geni � stata effettuata un?analisi di arricchimento in silico dei siti di legame dei fattori di trascrizione.
I risultati ottenuti nel modello Emilina-1 KO mostrano una down-regolazione di gran parte delle proteine cellulari associata ad una disregolazione metabolica, alla perdita delle proteine citoscheletriche e all?attivazione di meccanismi per contrastare la rigidit� vasale. In questi topi la proteina Emilina-1 non si esprime n� nelle cellule endoteliali, n� nelle cellule della muscolatura liscia dei vasi e questi ultimi risultano costitutivamente pi� piccoli rispetto ai controlli. Questi risultati riflettono la presenza di una muscolatura liscia adattata ad una condizione di ipertensione congenita.
Il modello Emilina-1 flox-flox invece � caratterizzato da una up-regolazione di alcune proteine cellulari coinvolte nella produzione di energia, nell?attivit� contrattile e nella trascrizione genica di proteine del citoscheletro e della matrice extracellulare. Le variazioni riscontrate in questi topi, in cui l?espressione di Emilina-1 viene silenziata solo nelle cellule della muscolatura liscia dei vasi dopo la nascita, dimostrano che in questo modello � presente una correlazione tra l?instaurazione di uno stato ipertensivo e la carenza di Emilina-1. 
L?analisi dei siti di legame dei fattori di trascrizione ha invece messo in evidenza che in entrambi i modelli si verificano modificazioni della struttura della cromatina che portano alla trascrizione di geni specifici del fenotipo contrattile delle cellule muscolari lisce dei vasi. Queste cellule presentano infatti la capacit� di modificare il proprio fenotipo in seguito a cambiamenti della pressione arteriosa e ad aumenti dei livelli di TGF-?.
Ulteriori avanzamenti saranno possibili approfondendo i meccanismi patofisiologici associati alla carenza di Emilina-1, considerando i risultati ottenuti dall?analisi proteomica e di arricchimento dei siti di legame dei fattori di trascrizione. Tuttavia, perch� questi siano rilevanti per la salute umana, sono necessarie delle validazioni su soggetti ipertesi. In questo modo, sar� possibile identificare nuovi bersagli per la prevenzione e/o la terapia dell?ipertensione arteriosa.