Ανάπτυξη και επικύρωση μεθόδου προσδιορισμού ψυχοτρόπων φαρμάκων και παρανόμως διακινούμενων εξαρτησιογόνων ουσιών με χρήση υγρής χρωματογραφίας υπερυψηλής απόδοσης συζευγμένης με φασματομετρία μαζών
Creators: name: Βελούτσου, Σοφία Χρήστου Αντωνιάδη
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2014
Subjects: Ψυχοτρόπες ενώσεις
Ανάλυση υγρών λυμάτων
Φασματομετρία μαζών
Psychotropic drugs
Wastewater analysis
UPLC-MS/MS

description: Η παρούσα μεταπτυχιακή διπλωματική εργασία πραγματεύτηκε την ανάπτυξη μίας μεθόδου υγρής χρωματογραφίας υπερυψηλής πίεσης (UPLC) σε σύζευξη με φασματομετρία μαζών τριπλού τετραπόλου (MS/MS) για τον ταυτόχρονο διαχωρισμό και προσδιορισμό παρανόμως διακινούμενων εξαρτησιογόνων ουσιών και ψυχοτρόπων φαρμάκων. Στη συνέχεια, η μέθοδος εφαρμόστηκε σε δείγματα που ελήφθησαν από την μονάδα επεξεργασίας υγρών αποβλήτων της Θεσσαλονίκης. Τέλος, στα αποτελέσματα έγινε επεξεργασία με τη μέθοδο της αντίστροφης ανάλυσης της επιδημιολογίας λυμάτων (sewage epidemiology). Οι 27 ενώσεις που επιλέχθηκαν διαχωρίστηκαν σε δύο ομάδες, ανάλογα με την πολικότητά τους. Οι ενώσεις της πρώτης ομάδας, στην οποία ανήκουν οι ενώσεις μεσαίας και μικρής πολικότητας, διαχωρίστηκαν με πρόγραμμα βαθμωτής έκλουσης 14min. Οι πολικές ενώσεις, δεύτερη ομάδα, διαχωρίστηκαν με πρόγραμμα 11min. Μετά τον χρωματογραφικό διαχωρισμό οι ενώσεις ανιχνεύονταν μέσω θυγατρικών θραυσμάτων των αρχικών μοριακών ιόντων. Τα δείγματα στα οποία εφαρμόσθηκε η μέθοδος ήταν αντιπροσωπευτικά 24-ώρου της εβδομάδας 11-17/3/2014. Η προκατεργασία των δειγμάτων έγινε την μέθοδο της εκχύλισης στερεής φάσης (SPE), όπου επιλέχθηκαν μικροστήλες τύπου Oasis HLB. Το σχήμα προκατεργασίας που ακολουθήθηκε έδωσε πολύ καλά αποτελέσματα ανάκτησης, γραμμικότητας, αναπαραγωγιμότητας και επαναληιμότητας σχεδόν για όλες τις ενώσεις που μελετήθηκαν, παρότι είχαν αρκετές φυσικοχημικές διαφορές μεταξύ τους. Από τις 27 ενώσεις που μελετήθηκαν, 17 ανιχνεύθηκαν στα δείγματα υγρών λυμάτων της εισόδου της μονάδας επεξεργασίας. Οι ενώσεις που ανιχνεύθηκαν σε συγκεντρώσεις μεγαλύτερες του ορίου ποσοτικής αποτίμησης της μεθόδου είναι οι: βενζοϋλοεγκονίνη (84-202 ng/L), 7-αμινοφθοριονιταζεπάμη (15-27 ng/L), κλοζαπίνη (102- 316 ng/L), κουετιαπίνη (34-110 ng/L), βρωμαζεπάμη (&lt;LOQ-17 ng/L), αλοπεριδόλη (16- 24 ng/L), μεθαδόνη (12-18 ng/L), οξαζεπάμη (&lt;LOQ-8 ng/L), φλουοξετίνη (21-124 ng/L), σερτραλίνη (12-28 ng/L), THC-COOH (80-172 ng/L), μορφίνη (144-264 ng/L), κωδεΐνη (94-130 ng/L) και MDEA (7-14 ng/L). Στα δείγματα εξόδου ωστόσο μόνο οι ενώσεις 7- αμινοφθοριονιταζεπάμη (10-15 ng/L), κλοζαπίνη (31-83 ng/L) και μεθαδόνη (7-18 ng/L) ανιχνεύθηκαν σε συγκεντρώσεις άνω του ορίου ποσοτικής αποτίμησης. Τέλος, τα αποτελέσματα των δειγμάτων εισόδου ανάγονται σε g και δόσεις ναρκωτικής ουσίας ανά ημέρα και ανά 1000 κατοίκους, ενώ έγινε σύγκριση με δεδομένα από την βιβλιογραφία.
description: The aim of this thesis is to present a method that was developed and validated for detecting 27 psychotropic and illicit drugs in urban wastewater using ultra pressure liquid chromatography tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS). The method was applied on influent and effluent samples taken from the Thessaloniki’s, Northern Greece, wastewater treatment plant (WWTP). The scope of the method included both polar and non-polar psychotropic pharmaceuticals and illicit drugs allowing their simultaneous determination, giving realistic information of the most widely consumed psychotropic pharmaceuticals and illicit drugs in Greece. An enrichment step based on solid-phase extraction using Oasis HLB cartridges was carried out, followed by UPLC-MS/MS measurement with a fast-acquisition triple quadrupole mass analyzer. The method was validated in influent and effluent urban wastewater at different concentrations from 5 ng/L to 200 ng/L. For almost all compounds recoveries, repeatability and reproducibility results were very good. The optimized method was applied to the analysis of 24-hour composite wastewater samples (influent and effluent) taken through a week’s period with the result that 17 out of 27 compounds monitored were detected in the samples. The compounds detected in the influent are benzoylecgonine (84-202 ng/L), 7-aminoflunitrazepam (15-27 ng/L), clozapine (102-316 ng/L), quetiapine (34-110 ng/L), bromazepam (&lt;LOQ-17 ng/L), haloperidol (16-24 ng/L), methadone (12-18 ng/L), oxazepam (&lt;LOQ-8 ng/L), fluoxetine (21-124 ng/L), sertraline (12-28 ng/L), THC-COOH (80-172 ng/L), morphine (144-264 ng/L), codeine (94-130 ng/L) and MDEA (7-14 ng/L). In the WWTP effluent only 3 compounds were detected above LOQ levels; 7-aminoflunitrazepam (10-15 ng/L), clozapine (31-83 ng/L) and methadone (7-18 ng/L).