Η επίδραση της ιλοπρόστης στην επούλωση αναστόμωσης παχέος εντέρου επίμυων υπό χημειοθεραπεία με 5-φθοριοουρακίλη και φυλλινικό ασβέστιο
Creators: name: Βασιλειάδης, Κωνσταντίνος Δ.
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2006
Subjects: Προστακυκλίνη
Ιλοπρόστη
5-Φθοριοουρκίλη
Prostacyclin
Iloprost
5-fluouracil

description: Η 5-φθοριοουρακίλη με το φυλλινικό ασβέστιο (5-FU/LV) αποτελούν έναν από τους βασικότερους χημειοθεραπευτικούς συνδυασμούς στο πλαίσιο της αντιμετώπισης του καρκίνου του παχέος εντέρου. Η άμεση, μετεγχειρητική, ενδοπεριτοναϊκή χορήγηση του συνδυασμού αυτού όμως, αναστέλει τη διαδικασία της επούλωσης, γεγονός το οποίο έχει ως αποτέλεσμα την αύξηση της συχνότητας διάσπασης των αναστομώσεων του παχέος εντέρου. Η διάσπαση των αναστομώσεων αποτελεί τη σοβαρότερη επιπλοκή της χειρουργικής του γαστρεντερικού σωλήνα, που αυξάνει τη συχνότητα της μετεγχειρητικής νοσηρότητας και θνητότητας. Η ιλοπρόστη, ένα σταθερό ανάλογο της προσταγλανδίνης I2 (προστακυκλίνη) είναι ισχυρός αγγειοδιασταλτικός παράγοντας και αναστολέας της συγκόλλησης των αιμοπεταλίων. Ασκεί επίσης κυτταροπροστατευτική και αντιμεταστατική δράση και βελτιώνει τη μικροκυκλοφορία και τη ροή αίματος στο βλεννογόνο του εντέρου. Οι ιδιότητες αυτές της ιλοπρόστης θα μπορούσαν να προάγουν τη διαδικασία της επούλωσης και να αντισταθμίσουν την αρνητική δράση της ενδοπεριτοναϊκής χορήγησης του συνδυασμού 5-FU/LV στη διαδικασία της επούλωσης των αναστομώσεων του παχέος εντέρου. Σκοπός της πειραματικής μελέτης μας είναι η διερεύνηση της πιθανής θετικής επίδρασης της ιλοπρόστης στην επούλωση αναστομώσεων του παχέος εντέρου σε επίμυες, που υποβάλλονται σε άμεση μετεγχειρητική, ενδοπεριτοναϊκή χημειοθεραπεία με 5-FU σε συνδυασμό με φυλλινικό ασβέστιο. Υλικό και Μέθοδοι Ογδόντα θηλυκοί επίμυες της ποικιλίας Wistar χωρίστηκαν τυχαία σε τέσσερις ομάδες (1, 2, 3 και 4) των 20 πειραματόζωων. Κάθε ομάδα χωρίστηκε επίσης τυχαία σε δύο υποομάδες των 10 πειραματοζώων. Οι επίμυες υποβάλλονταν σε λαπαροτομία, εκτομή τμήματος 1cm του εγκαρσίου κόλου και τελικο-τελική αναστόμωση. Στην ομάδα 1 (Ελέγχου) στους επίμυες χορηγήθηκε ενδοπεριτοναϊκά, 3cc φυσιολογικός ορός διεγχειρητικά, και στη συνέχεια καθημερινά, μία φορά ημερησίως έως την ημέρα της θυσίας. Στην ομάδα 2 (5FU/LV) στους επίμυες χορηγήθηκε 5-φθοριοουρακίλη σε δόση 20mg/kg Β.Σ. με φυλλινικό ασβέστιο σε δόση 2mg/kg Β.Σ. ενδοπεριτοναϊκά, διεγχειρητικά και στη συνέχεια καθημερινά, μία φορά ημερησίως έως την ημέρα της θυσίας. Στην ομάδα 3 (Ιλοπρόστης) στους επίμυες χορηγήθηκε ιλοπρόστη σε δόση 2μg/kg Β.Σ. ενδοπεριτοναϊκά, διεγχειρητικά και στη συνέχεια καθημερινά, μία φορά ημερησίως έως την ημέρα της θυσίας. Στην ομάδα 4 (5FU/LV με Ιλοπρόστη ) στους επίμυες χορηγήθηκε 5-φθοριοουρακίλη σε δόση 20mg/kg Β.Σ. με φυλλινικό ασβέστιο σε δόση 2mg/kg Β.Σ.και ιλοπρόστη σε δόση 2μg/kg Β.Σ. ενδοπεριτοναϊκά, διεγχειρητικά και στη συνέχεια καθημερινά, μία φορά ημερησίως έως την ημέρα της θυσίας. Η προγραμματισμένη θυσία των πειραματοζώων γινόταν την 5η (υποομάδα α) και την 8η (υποομάδα β) μετεγχειρητική ημέρα. Μετά τη θυσία ακολουθούσε νεκροτομή και επισκόπηση για ρήξη της αναστόμωσης, μακροσκοπικός έλεγχος των συμφύσεων και μέτρηση της πίεσης διάσπασης της αναστόμωσης. Στη συνέχεια τμήμα της αποστέλλονταν για ιστολογική εξέταση και εκτίμηση των λευκοκυττάρων, της νεοαγγειογένεσης, της σύνθεσης κολλαγόνου και των ινοβλαστών. Άλλο τμήμα της αναστόμωσης αποστέλλονταν για προσδιορισμό των επιπέδων υδροξυπρολίνης. Η στατιστική επεξεργασία των αποτελεσμάτων γινόταν με την ακριβή δοκιμασία κατά Fisher για τη σύγκριση ποσοστών και τη δοκιμασία κατά κατά Kruskal-Wallis για τη σύγκριση μέσων όρων. Σε όλες τις στατιστικές αναλύσεις το επίπεδο σημαντικότητας ορίστηκε ως 0.05 και αμφίπλευρο. Οι στατιστικές αναλύσεις εφαρμόστηκαν με το στατιστικό πακέτο SPSS 12.0. Αποτελέσματα Στην ομάδα 2 (5FU/LV) παρατηρήθηκε στατιστικά σημαντική μείωση του σωματικού βάρους των επίμυων, σε σύγκριση με την ομάδα 1 (Ελέγχου), (p=0,005 για τη υποομάδα α και p&lt;0.001 για τη β). Η μεγαλύτερη απώλεια βάρους παρατηρήθηκε στην ομάδα 2 (5FU/LV) ενώ η μικρότερη στην ομάδα 3 (Ιλοπρόστης). Η συχνότητα διάσπασης της αναστόμωσης ήταν μεγαλύτερη στην ομάδα 2 (5FU/LV) συγκρινόμενη με τις άλλες ομάδες (p=0.049). Η πίεση διάσπασης των αναστομώσεων ελαττώθηκε στατιστικά σημαντικά στην υποομάδα 2β (5FU/LV) συγκρινόμενη με τις άλλες υποομάδες. Αντίθετα η πίεση διάσπασης μετρήθηκε στατιστικά σημαντικά αυξημένη στην υποομάδα 3α (Ιλοπρόστης) συγκριτικά με τις ομάδες 1α (Ελέγχου) και 2α (5FU/LV), (p&lt;0,001). Η δημιουργία των συμφύσεων αυξήθηκε στατιστικά σημαντικά σε όλες τις β υποομάδες συγκρινόμενες με την υποομάδα 1β (Ελέγχου). Η ιστολογική εξέταση των ανατομώσεων έδειξε ελάττωση της φλεγμονώδους αντίδρασης και της νεοαγγειογένεσης στην ομάδα 2 (5FU/LV) σε σύγκριση με την ομάδα 1 (Ελέγχου). Η εναπόθεση κολλαγόνου και οι ινοβλάστες επίσης, εμφάνισαν στατιστικά σημαντική μείωση στην υποομάδα 2β (5FU/LV) συγκριτικά με την υποομάδα 1β (Ελέγχου). Αντίθετα, παρατηρήθηκε αύξηση της νεοαγγειογένεσης στις ομάδες 3 (Ιλοπρόστης) και 4 (5FU/LV με Ιλοπρόστη) συγκριτικά με την ομάδα 2(5FU/LV). Τα επίπεδα υδροξυπρολίνης, η εναπόθεση κολλαγόνου, οι ινοβλάστες και η λευκοκυττάρωση εμφάνισαν στατιστικά σημαντική αύξηση στην υποομάδα 4β (5FU/LV με Ιλοπρόστη) συγκριτικά με την υποομάδα 2β (5FU/LV). Επίσης η πίεση διάσπασης στην ομάδα 4 (5FU/LV με Ιλοπρόστη) εμφάνισε στατιστικά σημαντική αύξηση συγκριτικά με την 2 (5FU/LV), (p&lt;0,001 για τη υποομάδα α και p=0.002 για την β). Συμπέρασμα Η άμεση, μετεγχειρητική, ενδοπεριτοναϊκή χορήγηση του συνδυασμού 5FU/LV επηρεάζει αρνητικά τη διαδικασία επούλωσης των αναστομώσεων του παχέος εντέρου. Η ενδοπεριτοναϊκή χορήγηση ιλοπρόστης αντισταθμίζει και αναστρέφει την αρνητική δράση του συνδυασμού 5FU/LV στην επούλωση των αναστομώσεων του παχέος εντέρου εξασφαλίζοντας την επούλωσή τους στους επίμυες
description: 5-Fluorouracil with the addition of leucovorin represents one of the most effective chemotherapeutic combinations in the management of patients with colorectal cancer. This chemotherapeutic combination however, when introduced intraperitoneally, in the immediate postoperative period impairs wound healing on colonic anastomosis and results in higher incidence of anastomotic failure after colon resection. Besides, anastomotic dehiscence is the most serious complication after gastrointestinal tract surgery that increases postoperative morbidity and mortality rates. Iloprost, a stable analogue of prostaglandin I2 (prostacyclin), is a potent vasodilator and an inhibitor of platelet aggregation. It is also cytoprotective, antimetastatic and improves intestinal microcirculation and mucosal blood flow. These effects could enhance the healing process and counteract the impaired anastomotic healing caused by 5-fluorouracil in combination with leucovorin administration. The aim of our experimental study was to investigate the protective role of intraperitoneally injected iloprost on impaired colonic healing caused by intraperitoneal 5-fluorouracil in combination with leucovorin administration. Materials and Methods A total of eighty female Wistar rats were randomised into four groups (1, 2, 3, 4 of 20 rats for each group). Each group was further randomly divided into two subgroups (10 rats for each subgroup). Rats underwent laparotomy and after resection of 1 centimetre segment of transverse colon an end-to-end sutured anastomosis was generated. From the day of the operation group 1 (Control) received intraperitoneal 3cc saline solution once daily until sacrifice, group 2 (5FU/LV) received 5-fluorouracil in a dose of 20 mg/kg body weight in combination with leucovorin in a dose of 2 mg/kg body weight intraperitoneally once daily until sacrifice, group 3 (Iloprost) received iloprost in a dose of 2 μg/kg body weight intraperitoneally once daily until sacrifice and group 4 (5FU/LV plus Iloprost) received 5-fluorouracil in a dose of 20 mg/kg body weight in combination with leucovorin in a dose of 2 mg/kg body weight and iloprost in a dose of 2 μg/kg body weight intraperitoneally once daily until sacrifice. The subjects were sacrificed on the fifth (subgroup a) and eighth (subgroup b), postoperative days. After sacrifice anastomoses were examined macroscopically. In addition rats were measured for anastomose bursting pressures and tissue hydroxyproline levels and wound healing process was evaluated histopathologically. Statistic analysis employed Fischer's exact test for the comparison of proportions. Differences among groups with respect nonnormally distributed variables were tested using the Kruskall-Wallis test, whereas pair-wise differences were compared by the Mann-Whitney test. Analyses were conducted in SPSS12 (SPSS, Inc., Chicago, IL). All reported p values were two tailed. Results Body weight was significantly decreased in 5FU/LV group than in the Control group (p=0,005 for subgroup a and p&lt;0.001 for subgroup b). The greatest body weight decrease was observed in 5FU/LV group whereas the smallest in Iloprost group. The leakage rate of the anastomoses was significantly higher in 5FU/LV group compared to the other groups (p=0.049). Bursting pressures were also significantly lower in the 5FU/LV b subgroup compared to the other b subgroups. On the contrary, bursting pressures in the Iloprost a subgroup were significantly higher than in the Control and 5FU/LV a subgroups (p&lt;0.001). Adhesion formation was significantly higher in all b subgroups compared to the Control b subgroups. Histological examination of the anastomoses showed a significant decrease of white cell count and neoangiogenesis in the 5FU/LV group compared to the Control group. Collagen deposition and fibroblast proliferation were also significantly lower in the 5FU/LV b subgroup compared to the Control b subgroup. On the contrary, neoangiogenesis was significantly higher in Iloprost and Iloprost plus 5FU/LV groups compared to the 5FU/LV group. Hydroxyproline levels, collagen deposition, fibroblasts and white cell count were significantly higher in the Iloprost plus 5FU/LV b subgroup compared to the 5FU/LV b subgroup. In addition bursting pressures were significantly higher in the Iloprost plus 5FU/LV group compared to the 5FU/LV group (p&lt;0,001 for subgroup a and p=0.002 for subgroup b). Conclusion Intraperitoneal 5-fluorouracil in combination with leucovorin administration in the immediate postoperative period, impairs healing of colonic anastomoses. Iloprost administrated intraperitonealy, counteracts and reverses the negative effects of 5FU/LV chemotherapy and protects colonic healing in rats