title: Vermehrung von Süßholz über somatische Embryogenese
Creators: name: Winter, Marina
Publisher: name: :none
Year: 2009

description: In der vorliegenden Arbeit wurden Untersuchungen zur indirekten somatischen Embryogenese bei Glycyrrhiza glabra L. durchgeführt. Als Ausgangsmaterial für die Etablierung einer embryogenen Kalluskultur dienten Kotyledonenexplantate von 7 Tage alten, unter sterilen Bedingungen gekeimten Sämlingen. Die Explantate wurden zur Kallusinduktion auf MS-Basalmedium mit 1 µM Thidiazuron kultiviert. Nach 9-wöchiger Kallusinduktionsphase wurden die erhaltenen Kalli auf Medien zur Embryobildung und –entwicklung subkultiviert. Dabei wurden 5 Nährmedienzusammensetzungen in jeweils flüssiger und halbfester Form getestet: MS-Basalmedium ohne Wuchsstoffe bzw. mit 0,01 µM TDZ, 0,1 µM TDZ, 25 µM Adeninsulfat oder 1 % Aktivkohle. Die Kulturen wurden sowohl im Licht (16 h-Photoperiode) als auch im Dunkeln inkubiert. Der Einfluss der Nährmedien, der verwendeten Genotypen, der Lichtverhältnisse und der Konsistenz des Nährmediums auf die somatische Embryogenese wurde ermittelt. Medien mit 1 % Aktivkohle bzw. 0,1 µM TDZ führten zur Bildung von wenigen somatischen Embryonen. Eine Reduktion der TDZ-Konzentration auf 0,01 µM begünstige die somatische Embryogenese. Die größte Anzahl an Embryos wurde bei Einsatz von Wuchsstoff-freien Medien bzw. Medien mit 25 µM Adeninsulfat gebildet. Das Kallusmaterial von 16 unterschiedlichen Genotypen wurde für die Versuche zur Embryobildung herangezogen. Zwischen den Klonen zeigten sich keine wesentlichen Unterschiede im Hinblick auf die somatische Embryogenese. Die Untersuchungen zum Einfluss der Lichtbedingungen ergaben signifikant bessere Ergebnisse für die Kulturen im Licht als unter Lichtausschluss. Ein Einfluss der Konsistenz des Nährmediums (fest/flüssig) auf die somatische Embryogenese konnte nur bei TDZ- bzw. Aktivkohle-hältigen Medien beobachtet werden. Bei den entsprechenden halbfesten Medien wurden meist mehr somatische Embryonen gebildet als in den Flüssigmedien. Neben der Induktion von somatischer Embryogenese wurde in allen Versuchen auch Adventivsprossbildung beobachtet. Besonders viele Sprosse wurden in Flüssigmedium mit 25 µM Adeninsulfat im Dunkeln, bzw. auf halbfesten Medien mit 0,1 µM TDZ gebildet. Es konnten somit wesentliche Faktoren wie die Nährmedienzusammensetzung, Lichtverhältnisse und Einfluss des Genotyps für die indirekte somatische Embryogenese bei Glycyrrhiza glabra L. identifiziert werden.
description: In the present study factors affecting indirect somatic embryogenesis in Glycyrrhiza glabra L. were investigated. Cotyledons obtained from 7 day-old aseptically germinated seedlings were used as explant source. For the establishment of embryogenic callus cultures explants were placed on basal MS medium containing 1 µM thidiazuron (TDZ). After 9 weeks on callus induction medium calli were transferred to different media for embryo formation and development. Five media containing different concentrations of TDZ (0.1 or 0.01 µM), 25 µM adenine sulfate, 1 % activated charcoal or no growth regulators or additives at all were tested. Both liquid and semi-solid media were used. Additionally, cultures were maintained in the dark or under a 16/8 h (light/dark) photoperiod. The effects of media modifications, different genotypes, light conditions and the addition of gelling agents to the media on somatic embryogenesis were evaluated. Media supplemented with 1 % activated charcoal or 0.1 µM TDZ were not effective in promoting embryogenesis. Formation of somatic embryos tended to increase on media containing lower concentrations of TDZ (0.01 µM). The highest mean number of somatic embryos was observed on growth regulator free media and media supplemented with 25 µM adenine sulfate. Among the 16 different genotypes used for embryo formation and development studies, no major differences were observed. Different light conditions significantly influenced somatic embryogenesis. Explants cultivated in the light produced more somatic embryos that explants grown in the dark. The promotive effect of adding a solidifying agent to the media on somatic embryogenesis was only observed on media supplemented with TDZ or activated charcoal. Beside embryo formation, adventitious shoot regeneration was observed in all tested treatments. Calli cultured in liquid media containing 25 µM adenine sulfate in the dark as well as calli formed on semi-solid media supplemented with 0.1 µM TDZ produced the highest mean number of shoots. Our results indicate that nutrient medium and light conditions are essential factors for the formation and maturation of somatic embryos in Glycyrrhiza glabra L., while no major variations occurred within different genotypes.