Ανάπτυξη μεθόδου προσδιορισμού πολυκυκλικών αρωματικών υδρογονανθράκων σε δείγματα μελιού με χρωματογραφία υπερυψηλής πίεσης (UHPLC) μετά από μονοφασική μικροεκχύλιση υγρού.
Creators: name: Κολτσακίδου, Αναστασία Ηρακλή
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2014
Subjects: Πολυκυκλικοί αρωματικοί υδρογονάνθρακες
Εκχύλιση υγρού-υγρού με εξαλάτωση
Χρωματογραφία υγρού υπερυψηλής απόδοση
Polycyclic aromatic hydrocarbons
Salting-out assisted liquid liquid extraction
Ultra High Performance Liquid Chromatography( UHPLC)

description: Στην παρούσα εργασία προτείνεται μια νέα τεχνική προκατεργασίας δείγματος για τον προσδιορισμό πολυκυκλικών αρωματικών υδρογονανθράκων σε δείγματα μελιού. Η συγκεκριμένη τεχνική προκατεργασίας ονομάζεται εκχύλιση υγρού- υγρού με εξαλάτωση (salting out assisted liquid liquid extraction, SALLE) .Οι πολυκυκλικοί αρωματικοί υδρογονάνθρακες που χρησιμοποιήθηκαν ήταν, το Φλουορένιο , το Φαινανθρένιο ,το Ανθρακένιο, το Πυρένιο, το Χρυσένιο , το Βενζο [α] ανθρακένιο, το Βενζο [b] φθορανθένιο ,το Βενζο [k] φθορανθένιο , το Βενζο [a] πυρένιο, το Διβενζο [a, h] ανθρακένιο, το Βενζο (g,h,i)περυλένιο , και το Ινδενο [1,2,3-cd] πυρένιο .Ο διαχωρισμός και η ποσοτικοποίηση των παραπάνω πολυκυκλικών αρωματικών υδρογονανθράκων έγινε με χρωματογραφία υγρού σε σύζευξη με ανιχνευτή φθορισμού.Μελετήθηκαν οι παράμετροι που επηρεάζουν την απόδοση της εκχύλισης και συγκεκριμένα το είδος και ο όγκος του οργανικού διαλύτη εκχύλισης, το είδος και η συγκέντρωση του άλατος , ο τρόπος ανάδευσης , καθώς επίσης και η ταχύτητα και ο χρόνος φυγοκέντρησης. Το τελικό πρωτόκολλο της εκχύλισης SALLE περιλάμβανε την προσθήκη 1700 μL ακετονιτρίλιου σε 5 mL υδατικού διαλύματος μελιού (250 gL-1), και στη συνέχεια 1g NaCl. Μετά τη φυγοκέντρηση του δείγματος και το διαχωρισμό των φάσεων, παραλήφθηκε η στιβάδα του οργανικού διαλύτη , διηθήθηκε και ποσότητα αυτής εισήχθηκε στην αναλυτική στήλη για διαχωρισμό.Η προτεινόμενη μέθοδος επικυρώθηκε σε ότι αφορά την γραμμικότητα, την ακρίβεια, την επαναληψιμότητα, τα όρια ανίχνευσης και ποσοτικού προσδιορισμού καθώς και την εκλεκτικότητα. Το εύρος της γραμμικής περιοχής ελέγχθηκε στην περιοχή συγκεντρώσεων 0,1 - 10 μg L-1, ενώ ο συντελεστής συσχέτισης (r) κυμαίνονταν από 0,9919 μέχρι 0,9964. Η επαναληψιμότητα και η ακρίβεια της μεθόδου ήταν αρκετά ικανοποιητικές αφού οι τιμές της σχετικής τυπικής απόκλισης (RSD%) ήταν μικρότερες του 20%, ενώ οι ανακτήσεις κυμαίνονταν από 74-113% σε όλες τις αναλύσεις. Τα όρια ανίχνευσης που επιτεύχθηκαν ήταν στο εύρος 0,02-0,04 μg L-1 (ή 0,08-0,16 ng g-1)τα οποία ήταν αρκετά χαμηλότερα από αυτά που ορίζει η Ευρωπαϊκή νομοθεσία. Η μέθοδος χρησιμοποιήθηκε για την ανάλυση των συγκεκριμένων πολυκυκλικών αρωματικών υδρογονανθράκων σε δείγματα μελιού που προμηθεύτηκαν από την Ελληνική αγορά.
description: This study proposes a new technique for sample pretreatment of polycyclic aromatic hydrocarbons in honey samples. This pretreatment technique is called salting out assisted liquid liquid extraction (SALLE ). Polycyclic aromatic hydrocarbons used in this study, were: fluorene, phenanthrene, anthracene, pyrene, chrysene, benzo [a] anthracene, benzo [b] fluoranthene, benzo [k] fluoranthene, benzo [a] pyrene, the dibenzo [a, h] anthracene, benzo (g, h, i) perylene, and indeno [1,2,3-cd] pyrene. The separation and quantification of the above polycyclic aromatic hydrocarbons was made by liquid chromatography with fluorescence detector. The studied parameters affecting the efficiency of extraction , were the type and volume of the organic extraction solvent , the type and concentration of salt , the method of agitation and the speed and time of centrifugation . The final SALLE extraction protocol included :adding 1700 μL acetonitrile in 5 mL of aqueous solution of honey (250 gL-1), and then 1g NaCl. After agitation , centrifugation of the sample and separating the phases , the organic solvent layer was obtained , filtered, and part of it was inserted into the analytical column for separation.The proposed method was validated in terms of linearity, accuracy , repeatability ,limits of detection and quantification and selectivity. The range of linear area was tested in concentration range 0.1 to 10 μg L-1, while the correlation coefficient (r) ranged from 0.9919 to 0.9964. The repeatability and accuracy of the method were quite satisfactory ,since values of relevant standard deviation (RSD%) were less than 20%, while recoveries ranged from 74 to 113% in all analyzes. The detection limits obtained ,ranged from 0.02 to 0.04 μg L-1 (or 0.08-0.16 ng g-1) which were significantly lower than those set by the European legislation. The method was used for the determination of the above polycyclic aromatic hydrocarbons in honey samples, procured from Greek market.