Η εφαρμογή της τεχνικής του ετερόλογου (αλλογενούς) prp σε συνδυασμό με την τεχνική του microneedling στο χειρουργικό τραύμα
Creators: name: Θεολόγου, Ζαφειρώ Δημητρίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2023
Subjects: Πλάσμα πλούσιο σε αιμοπετάλια
Μικροβελονισμός
Χειρουργική τομή
Platelet rich plasma
Microneedling
Surgical incision

description: Ο τομέας της αναγεννητικής ιατρικής αναπτύσσεται συνεχώς και στα πλαίσια της προόδου του έχουν αναπτυχθεί διάφορες τεχνικές κυτταρικών θεραπειών. Η εφαρμογή του πλάσματος πλούσιου σε αιμοπετάλια είναι μία από τις δημοφιλέστερες εφαρμογές, λόγω της πληθώρας των δυνατοτήτων της. Στην εργασία αυτή μελετούμε την εφαρμογή του ετερόλογου prp, στο οποίο η έρευνα δεν είναι τόσο διευρυμένη, σε συνδυασμό με την τεχνική του μικροβελονισμού σε χειρουργικό τραύμα που αφήνεται να κλείσει κατά 2° σκοπό. ΣΚΟΠΟΣ: Η διερεύνηση της εφαρμογής του ετερόλογου prp σε συνδυασμό με την τεχνική του μικροβελονισμού και το κατά πόσο μπορεί ο συνδυασμός τους να προάγει την επούλωση του τραύματος. ΜΕΘΟΔΟΙ: Στο πείραμα χρησιμοποιήθηκαν συνολικά 12 θηλυκοί επίμυες της φυλής Wistar Rat. Δημιουργήθηκαν δύο πειραματικές ομάδες με την πρώτη να αποτελείται από 2 ζωικά μοντέλα, η δεύτερη από 8 και τα 2 εναπομείναντα ζωικά μοντέλα χρησιμοποιήθηκαν για την δημιουργία του ετερόλογου prp. Η πρώτη ομάδα, που αποτελείται από τα δύο ζωικά μοντέλα, ονομάζεται ομάδα C. Σε αυτήν έγινε τραύμα στις ράχες των ζώων με διάμετρο 8 mm, το οποίο αφέθηκε να κλείσει κατά 2ο σκοπό. Καταγράψαμε, τη χρονική διάρκεια που χρειάστηκε για την επούλωση στο κάθε υποκείμενο και παράλληλα κάθε δύο ημέρες έγινε οπτική παρατήρηση με λήψη φωτογραφιών, δοκιμή της αισθητικότητας, καταγραφή της εμφάνισης πρωτογενούς πόνου και άγχους και μέτρηση της διαμέτρου των πληγών την ημέρα 7. Μετά την πλήρη επούλωση πάρθηκαν βιοψίες για ιστοπαθολογική ανάλυση. Η δεύτερη πειραματική ομάδα, που αποτελείται από τα οκτώ ζωικά μοντέλα, ονομάζεται ΄΄ομάδα μελέτης΄΄, χωρίζεται σε τέσσερις υποομάδες των δύο ζωικών μοντέλων και σε αυτήν μελετήθηκαν οι εφαρμογές των δύο τεχνικών. Το ετερόλογο prp δημιουργήθηκε από το αίμα των δύο εναπομείναντων, υγιών θηλυκών εργαστηριακών αρουραίων, μέσω λήψης από αιμοπερικαρδιακή παρακέντηση. Οι τέσσερις υποομάδες της ομάδας μελέτης, ονομάστηκαν, control group, prp group, prp+microneedling group και microneedling group. Η διενέργεια τραύματος και οι παρατηρήσεις έγιναν με τον ίδιο τρόπο, όπως και στην ομάδα C, μόνο που οι διεργασίες σταμάτησαν την ημέρα 7, μετά τη δημιουργία της πληγής, πάρθηκαν βιοψίες και στάλθηκαν για ιστολογικές αναλύσεις. ΑΠΟΤΕΛΕΣΜΑΤΑ: Σε μακροσκοπικό επίπεδο τον καλύτερο βαθμό επούλωσης φαίνεται πως εμφανίζει το microneedling group στo οποίo ο κοκκιώδης ιστός, την ημέρα 7, έχει αποκολληθεί κατά το μεγαλύτερο μέρος του. Σε μικροσκοπικό επίπεδο την καλύτερη επούλωση, βάση των ιστολογικών παρατηρήσεων, φαίνεται πως εμφανίζει η ομάδα prp+microneedling group. Από άποψη διαμέτρου η ομάδα με την καλύτερη σύγκλιση φαίνεται πως είναι αυτή του prp group, όμως η ομάδα C δίνει ακόμα μικρότερες τιμές. Επιπλέον, παρατηρείται συσχέτιση μεταξύ κοκκιώδους ιστού και αισθητικότητας, ωστόσο, δεν παρατηρείται συσχέτιση μεταξύ των μεταβλητών &lt;&lt;άγχους+πόνου&gt;&gt; και αισθητικότητας. ΣΥΜΠΕΡΑΣΜΑ: Ο συνδυασμός των δύο τεχνικών επάγει τη βέλτιστη επούλωση σε ιστολογικό επίπεδο ενώ η τεχνική του microneedling επάγει την καλύτερη ανάπτυξη του κοκκιώδους ιστού στο τραύμα. Ακόμα, το prp group και το microneedling group εμφανίζουν τις μικρότερες διαμέτρους την ημέρα 7 σε σχέση με το control group. Ενδέχεται, λοιπόν, εάν χρησιμοποιηθεί διαφορετικό πρωτόκολλο για τη δημιουργία του prp όλα αυτά τα χαρακτηριστικά να συγκεντρωθούν σε μία ομάδα. Συνεπώς, απαιτείται περαιτέρω έρευνα για τον τρόπο εφαρμογής του πλάσματος πλούσιου σε αιμοπετάλια στο πείραμά αυτό. Τέλος, δεν παρατηρήθηκε καμία παρενέργεια από τη χορήγηση του ετερόλογου prp στα ζωικά μας μοντέλα.
description: The field of regenerative medicine is constantly developing and therefore several techniques of cellular therapies have been developed through its progress. The application of platelet rich plasma is one of the most popular due to its multiple capabilities. In this study we investigate the application of heterologous prp, which has not been researched enough, in combination with microneedling technique on a surgical wound that is allowed to heal by secondary intention. PURPOSE: To investigate the application of heterologous prp in combination with microneedling technique in order to record the results of a surgical wound which is allowed to heal by second intention. METHODS: In this experiment have been used 12 female Wistar Rats, in total. Two experimental groups have been created. The first one consists of 2 animal models, the second one of 8 and the last 2 have been used for the preparation of the heterologous prp. The first group is called group C . To this group, we created a wound on the spine’s skin with diameter of 8mm and allowed to heal by second intention. We record the following time which was necessary for the wound to heal in every subject and alongside, every two days, there were visual observation and photo taking, touch test, primary pain and stress recording. Also, the diameter of every wound was recorded on day 7. After wound healing process was completed, biopsy samples were taken for histopathological analysis. The second experimental group, which is consist of the eight animal models is called ΄΄study group΄΄, is separated into four subgroups of two animal models and in one we have been studying the applications of the techniques. The heterologous prp have been created, via hemopericardial puncture, by the whole blood of the two healthy rats, which have been left aside. The four subgroups of the ΄΄study group΄΄ were named as control group, prp group, prp+microneedling group and microneedling group. The surgical wound and the tests were done on the same way as the group C but the observation stopped on day 7 after the incision. This day, biopsy samples were taken and were sent for histopathological analysis. RESULTS: By the macroscopic point of view the best results of wound healing belong to the microneedling group because on day 7 the granulation tissue is mostly detached. By the microscopic point of view, after histopathological results, prp+microneedling group is the better one. According to the diameter the best group seems to be the prp group but C group appear to have smaller diameter values on day 7. Furthermore, there is a correlation between granulation tissue and sensibility but there is no correlation between pain+stress and sensibility. CONCLUSION: The combination of the two techniques gives the best histological results while microneedling brings the best creation of granulation tissue on the wound. Even more, prp group and microneedling group give the minor results about the diameter of the wound in comparison with control group. It is possible, if we use a different protocol for the preparation of prp, all the positive results concentrate in the prp+microneedling group. Therefore, further research is required about the application method of platelet rich plasma in this experiment. Finally, there were no side effects from the administration of heterologous prp to our animal models.