title: Simultaneous quantification of modafinil, its main metabolite modafinil acid and the novel analog CE-123 in rat plasma by LC-HRMS
Creators: name: Sesinova, Dora
Publisher: name: :none
Year: 2021

description: Dopamin-Wiederaufnahmehemmer, wie Modafinil und seine Analoga, sind nützlich bei der Behandlung von Narkolepsie, „excessive shift work sleep disorder“, obstruktiven Schlafapnoe-Syndrom, Aufmerksamkeitsdefizit-/Hyperaktivitätsstörung, Depression, Schizophrenie sowie Kokain- und Amphetaminabhängigkeit. CE-123 ist ein vielversprechendes Analog von Modafinil, welches intensiv als potentieller Arzneistoff getestet wird. Obwohl CE-123 sowohl präklinische Effektivität ohne neurologische Nebenwirkungen demonstriert hat, als auch eine höhere Spezifität für Dopamin-Transporter besitzt, ist eine detaillierte Charakterisierung seiner pharmakokinetischen Eigenschaften wichtig. Während der chromatographischen Analyse der Standardlösungen – welche R-Modafinil und CE-123 beinhalten sowie von der Uppsala Universität vorbereitet wurde – wurde der Hauptmetabolit von R-Modafinil, Modafinilsäure, entdeckt. Dadurch war es notwendig eine Methode, um die Metabolisierung von R-Modafinil in Rattenblutplasma zu verhindern sowie eine LC-HRMS Methode für die simultane Quantifizierung von Modafinil. seinem Hauptmetabolit Modafinilsäure und seinem neuen Analog CE-123 in Rattenblutplasma zu entwickeln. Die Probenvorbereitung bestand aus Proteinfällung mit eisgekühltem Acetonitril, welches 0,2 % Ameisensäure beinhaltet hat. In dieser Arbeit wurde eine konstante Menge von CE-114, einem weiteren Modafinilderivat, als interner Standard verwendet. Die Trennung wurde an einer Kinetex Phenyl-Hexyl (50 x 2,1 mm, 2,6 µm) Säule durch eine mehrschrittige, zusammengesetzt lineare Gradientenelution durchgeführt. Als mobile Phase wurde Wasser mit 0,1 % Ameisensäure und Acetonitril bei einer Durchflussrate von 0,6 mL/min verwendet. Die Bestimmung wurde mit positiver Elektrospray Ionisierung im Bereich von m/z 50–2500 optimiert und durchgeführt. Lineare Kalibriergeraden für Modafinil und CE-123 wurden in einem Konzentrationsbereich von 10 – 2500 ng/mL und für Modafinilsäure im Bereich von 25 – 200 ng/mL erstellt. Die Methode wurde verwendet, um präklinische pharmakokinetische Studien in Rattenplasma zu untermauern.
description: Dopamine transport blockers such as modafinil and its analogs are considered to be useful for treating narcolepsy, excessive shift work sleep disorder, obstructive sleep apnea/hypopnea syndrome, attention deficit hyperactivity disorder, depression, schizophrenia, and addiction to cocaine and amphetamines. CE-123 is the most promising analog of modafinil, which is intensively tested as a potential drug. While CE-123 has shown preclinical effectiveness without neurological adverse side effects, and has a higher specificity for the dopamine transporter, it is important to provide a detailed characterization of pharmacokinetic properties. During the chromatographic analysis of standard solutions containing R-modafinil and S-CE-123 prepared by the Uppsala University, the main metabolite of R-modafinil, modafinil acid, was detected. Thus it was required to develop a method to inhibit a metabolization of R-modafinil in rat blood plasma and an LC-HRMS assay for simultaneous quantification of modafinil, its main metabolite modafinil acid and the novel analog CE-123 in rat plasma. Sample preparation consisted of protein precipitation with ice-cold acetonitrile containing 0.2 % formic acid. In this study a constant amount of another modafinil analog, CE-114, was applied as an internal standard. Separation was performed on a Kinetex Phenyl-Hexyl (50 x 2.1 mm, 2.6 µm) column by a multiple steep steps linear gradient elution with mobile phase consisting of water containing 0.1 % formic acid and acetonitrile, pumped at a flow rate of 0.6 mL/min. The determination was optimized and carried out with positive electrospray ionization in the range of m/z 50–2500. Linear calibration curves for modafinil, CE-123 and modafinil acid were obtained in the concentration range of 10 – 2500 ng/mL for modafinil as well as CE-123 and 25 – 200 ng/mL for modafinil acid, respectively. The method was utilized to support preclinical pharmacokinetic studies in rat plasma.