Χαρακτηρισμός μικροοργανισμών με προβιοτικές ιδιότητες
Creators: name: Καλοδότη, Αυγουστή Αντωνάκη
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2018
Subjects: Προβιοτικά
Σαλιγκάρια
Παθογόνα
Cornu aspersum maxima
Probiotics
Microbiome

description: Τα προβιοτικά χρησιμοποιούνται όλο και περισσότερο στον τομέα της ζωικής παραγωγής με σκοπό το χειρισμό της εντερικής μικροχλωρίδας και τη βελτίωση της υγείας και της παραγωγικότητας των εκτρεφόμενων ζώων. Η χορήγηση προβιοτικών μικροοργανισμών σε εκτρεφόμενα ζώα έχει αποδειχθεί ότι συμβάλλει στην αύξηση του ρυθμού αύξησης, στη μείωση της θνησιμότητας και στη βελτίωση της απόδοσης μετατροπής της ζωοτροφής. Ωστόσο, αντίστοιχες πρακτικές δεν έχουν πραγματοποιηθεί μέχρι τώρα σε μονάδες εκτροφής χερσαίων γαστερόποδων, δηλαδή στη σαλιγκαροτροφία. Σκοπός της εργασίας αυτής είναι η ταυτοποίηση μικροοργανισμών που σχετίζονται με καταστάσεις ‘συμβίωσης’ και ‘δυσβίωσης’ καθώς και ο χαρακτηρισμός προβιοτικών μικροοργανισμών που μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως πρόσθετα στα σιτηρέσια των σαλιγκαριών, με στόχο την ενίσχυση της αύξησης των εκτρεφόμενων σαλιγκαριών και την πρόληψη και θεραπεία των μολυσματικών ασθενειών που πλήττουν τον τομέα της σαλιγκαροτροφίας. Στη παρούσα εργασία πραγματοποιήθηκε γενοτυπικός χαρακτηρισμός με αλληλούχιση του 16s rRNA και με ηλεκτροφόρηση παλλόμενου πεδίου για 14 βακτηριακά στελέχη τα οποία είχαν προηγουμένως απομονωθεί από τον εντερικό βλεννογόνο των σαλιγκαριών Cornu aspersum maxima και είχαν χαρακτηριστεί ως υποψήφιοι προβιοτικοί μικροοργανισμοί με βάση in vitro και in vivo ιδιότητές τους. Δυνητικά παθογόνα στελέχη του γένους Listeriaκαι Pseudomonas απομονώθηκαν από εκτρεφόμενα σαλιγκάρια και η παθογένεια τους ελέγχθηκε in vitro (έλεγχος παραγωγής πηκτινασών του πλάσματος και DNA-νουκλεασών) και in vivo έπειτα από χορήγηση τους απευθείας στο σώμα των σαλιγκαριών όσο και μέσω της τροφής. Η αντιβακτηριακή δράση των υποψήφιων προβιοτικών στελεχών έναντι παθογόνων βακτηρίων διερευνήθηκε in vivo και in vitro. Από τα παραπάνω πειράματα που πραγματοποιήθηκαν, το πιθανό προβιοτικό στέλεχος Sgs14 παρουσίασε έντονη αντιβακτηριακή δράση τόσο στα in vitro πειράματα όσο και στα in vivo πειράματα έναντι του δυνητικά παθογόνου στελέχους Listeria spp. το οποίο προκάλεσε υψηλά ποσοστά θνησιμότητας κατά τις δοκιμές.
description: Probiotics are increasingly used in commercial animal production operations to advantageously alter gastrointestinal flora, thereby improving animal health and productivity. The major outcomes from using probiotics include enhancement of growth, reduction of mortality, and improvement of feed conversion efficiency. However, there is little information concerning the application of probiotics in invertebrate animals’ farming, such as heliciculture. The purpose of this study is the identification of the gut microbial species that are responsible for both snail ‘symbiosis’ and ‘dysbiosis’ and the characterization of presumptive probiotic strains from snail’s gut microbiota that could be used as “Food Additives” there by improving animal’s health and prevent and control enteric pathogens. Five (5) bacterial strains, previously isolated from the intestinal tract of farmed snails Cornu aspersum maxima and characterized as presumptive probiotic microorganisms were identified at species level by sequencing of 16srRNA.Furthermore nine (9) lactic acid bacterial strains, previously isolated from the intestinal tract of farmed snails Cornu aspersum maxima, identified as Lactobacillus plantarum at species level and characterized as presumptive probiotic microorganisms, were identified at strain level with Pulsed-Field Gel Electrophoresis. Presumptive pathogenic bacteria of genus Listeria and Pseudomonas were isolated from farmed snails and their pathogenesis was evaluated in vitro (production of pectinases and DNAase) and in vivo by injection of pathogenic bacteria into snails’ body or through food. Antibacterial activity of presumptive probiotic bacteria was investigated in vitro and in vivo. From the above experiments performed, the probable probiotic strain Sgs14 exhibited strong antibacterial activity in both, in vitro and in vivo experiments against the potentially pathogenic strain of Listeria spp. which caused high mortality rates during the tests.