title: Effekte von Flavopiridol, Bortezomib und MG-115 in Kombination mit Carboplatin auf Ovarialkarzinom-Zelllinien in vitro
title: effects of flavopiridol, bortzezomib and MG-115 in combinations with carboplatin on ovarian cancer cells in vitro
Creators: name: Kranz, Julia
Publisher: name: Philipps-Universität Marburg
Year: 2015
Subjects: flavopiridol
carboplatin
Carboplatin
cell cycle
Zellzyklus
Proteasomeninhibitoren
Medizin, Gesundheit
apoptosis
Apoptose
NfkB
Synergismus
Ovarialkarzinom
ovarian cancer
Flavopiridol

description: An den beiden
      Ovarialkarzinomzelllinien SKOV-3 und BG1 wurden neben dem
      bereits in der Therapie etablierten Carboplatin die
      Proteasomen-Inhibitoren Bortezomib und MG-115 und der
      CDK-Inhibitor Flavopiridol mittels Durchflusszytometrie auf
      ihre antiproliferative Wirkung untersucht. Dabei konnte im
      Rahmen der Zellzyklusanalyse und des Annexin-V-Assays für
      alle vier Medikamente eine zeit- und konzentrationsabhängige
      antiproliferative Wirkung nachgewiesen werden. Da die
      Signaltransduktionswege der Apoptose mögliche Angriffpunkte
      in der modernen Tumortherapie darstellen, wurden aus den
      beiden Hauptsignalwegen exemplarisch Proteine ausgewählt,
      deren Detektion mittels Western Blot über eine mögliche
      Aktivierung durch die Medikamente Auskunft geben soll.
      Während bei beiden Zelllinien die zeit- und
      konzentrationsabhängige Apoptoseinduktion über den
      extrinsischen Weg durch Bortezomib nachgewiesen werden kann,
      gelingt dies nach Inkubation mit Flavopiridol lediglich bei
      den BG1-Zellen. Neben der Wirkung der Reinsubstanzen auf die
      Ovarialkarzinomzelllinien wurde der Frage nach einem
      möglichen Synergismus von Flavopiridol und den
      Proteasomeninhibitoren in Kombination mit Carboplatin
      nachgegangen. Dabei zeigt nur die Kombination von
      Flavopiridol mit Carboplatin konzentrationsabhängig eine
      signifikant synergistische antiproliferative Wirkung. Nach
      simultaner Behandlung mit Bortezomib und Carboplatin lässt
      sich bei der SKOV-3-Zelllinie, sowohl durchflusszytometrisch
      als auch im Western Blot, sogar ein deutlich antagonistischer
      Effekt dokumentieren. Als Schaltstelle vieler
      Signaltransduktionswege in der Zelle bietet die Interaktion
      mit dem NFκB-Protein einen viel versprechenden Ansatz in der
      Entwicklung neuer Strategien der Tumortherapie. Mittels ELISA
      wurde deshalb dessen Aktivität im Zytosol beider
      Karzinomzelllinien nach Inkubation mit den vier Substanzen
      untersucht. Während sich bei den BG1-Zellen eine Zunahme der
      NfĸB-Aktivität sowohl durch Carboplatin als Reinsubstanz, wie
      auch in Kombination mit Flavopiridol und den beiden
      Proteasomen-Inhibitoren abzeichnet, kommt es bei den
      SKOV-3-Zellen lediglich durch Flavopiridol zu einer
      signifikanten Modulation des Aktivitätslevels. Auch nach
      Kombination mit Carboplatin zeigt nur jener mit Flavopiridol
      inkubierte SKOV-3-Ansatz einen signifikanten Synergismus
      durch den Zusatz des Platinderivats.
description: In this study we examined the
      antiproliferating effect of carboplatin, which is already
      established in ovarian carcinomas as the first line therapy,
      as well as the proteasome-inhibitors bortezomib, MG-115 and
      the CDK-inhibitor flavopiridol using ovarian carcinoma cell
      lines like SKOV-3 and BG1. Cell cycle-analysis and
      apoptosis-assay show time- and dose-dependent
      antiproliferating effect for all four drugs. Signal
      transduction pathways of apoptosis are potential working
      points in modern tumour-therapy. Exemplary proteins from both
      main pathways of apoptosis were selected, whose detection in
      western blot provides information on the potential activation
      of the apoptosis cascade. While both cell lines show a time-
      and dose-dependend induction of apoptosis via the extrinsic
      pathway after treatment with bortezomib, the effectiveness of
      flavopiridol can only be established for BG1-cells. Apart
      from effects of pure substances on tumour cells potential
      synergies of flavopiridol and proteasome-inhibitors with
      carboplatin were analysed. While for BG1-cells a significant
      dose-dependent synergistic antiproliferating effect after
      incubation with both flavopridol and carboplatin was
      detected, the SKOV-3-cellline only showed a tendency of
      increasing apoptosis without any correlate in western blot
      analysis. After simultaneous treatment with bortezomib and
      carboplatin an antagonistic effect on SKOV-3-cells by means
      of flowcytometry as well as western blot analysis can be
      demonstrated. Flowcytometry detected only an additive effect
      of a combined application of bortezomib with carboplatin on
      modulation of cell cycle and induction of apoptosis in
      BG1-cells. As a switchpoint of many signal transduction
      pathways in cells, the interaction with NFκB seems to provide
      a promising approach for the development of new strategies in
      tumour therapy. Via ELISA, we investigated the activity of
      the NFκB-protein in cytoplasma of ovarian cancer cell lines
      after incubation with carboplatin, flavopridol and proteasome
      inhibitors. While both single agent carboplatin as well as a
      combination of carboplatin with flavopiridol and
      proteasome-inhibitors in BG1-cells lead to increasing
      activity of NfĸB, only the treatment with flavopiridol showed
      a significant modulation for the case of SKOV-3-cells.
      However, the combined application of flavopiridol with
      carboplatin yields a significant synergistc effect.