Profili di espressione genetica ed epigenetica ad impatto prognostico e predittivo nel carcinoma squamoso e nelle lesioni potenzialmente maligne del cavo orale
Genetic and epigenetic expression for early diagnosis and prognosis of squamuos cell carcinoma and potentially malignant lesions of the oral cavity
Creators: name: Gissi, Davide Bartolomeo <1981>
Publisher: name: Alma Mater Studiorum - Università di Bologna
Year: 2015
Subjects: MED/08 Anatomia patologica

description: Il carcinoma squamoso orale (CSO) è spesso preceduto da lesioni definite potenzialmente maligne tra cui la leucoplachia e il lichen ma una diagnosi precoce avviene ancora oggi in meno della metà dei casi. Inoltre spesso un paziente trattato per CSO svilupperà secondi tumori. Scopo del lavoro di ricerca è stato: 1) Studiare, mediante metodica di next generation sequencing,  lo stato di metilazione di un gruppo di geni a partire da prelievi brushing del cavo orale al fine di identificare CSO o lesioni ad alto rischio di trasformazione maligna. 2) Valurare la relazione esistente tra sovraespressione di p16INK4A e presenza di HPV in 35 pazienti affetti da lichen 3) Valutare la presenza di marker istopatologici predittivi di comparsa di seconde manifestazioni tumorali 4) valutare la relazione clonale tra tumore primitivo e metastasi linfonodale in 8 pazienti mediante 2 metodiche di clonalità differenti: l’analisi di mtDNA e delle mutazioni del gene TP53. I risultati hanno mostrato: 1) i geni ZAP70 e GP1BB hanno presentato un alterato stato di metilazione rispettivamente nel 100% e nel 90,9% di CSO e lesioni ad alto rischio, mentre non sono risultati metilati nei controlli sani; ipotizzando un ruolo come potenziali marcatori per la diagnosi precoce nel CSO. 2)Una sovraespressione di p16INK4A è risultata in 26/35 pazienti affetti da lichen ma HPV-DNA è stato identificato in soli 4 campioni. Nessuna relazione sembra essere tra sovraespressione di p16INK4A e virus HPV. 3)L’invasione perineurale è risultato un marker predittivo della comparsa di recidiva locale e metastasi linfonodale, mentre lo stato dei margini chirurgici si è rilevato un fattore predittivo per la comparsa di secondi tumori primitivi 4) Un totale accordo nei risultati c’è stato tra analisi di mtDNA e analisi di TP53 e le due metodiche hanno identificato la presenza di 4 metastasi linfonodali non clonalmente correlate al tumore primitivo.
description: Oral Squamous Cell Carcinoma (OSCC) is  often preceded by Potentially Malignant Lesions, Leukoplakia and Lichen Planus (LP), but still today is usually diagnosed in advanced stage. Additionally patients treated for OSCC have a good chance to develop a second primary OSCC. The purpose of the research was: 1) to assess, by bisulfite Next Generation Sequencing, the methylation status of a list of candidate genes obtained from oral brushing specimens to early detect OSCC using non-invasive procedures. 2) to yield more insights into the relationship between p16INK4A over-expression and the presence of HPV-DNA in 35 LP samples. 3) to identify the clinicopathologic parameters significantly related to a second loco-regional event in a population of 180 patients treated for primary OSCC 4) to evaluate the relationship between primary OSCC and lymph node metastasis in 8 patients using two different 2 clonality tests: mt-DNA D-loop and TP53 sequence analysis. The results showed that: 1) ZAP70 and GP1BB showed an aberrant methylation status respectively in 100% and 90,9%  of OSCC and High Risk lesions, while resulted unmethylated in normal healthy donors. DNA methylation analysis of GP1BB and ZAP70 seems to be a promising non invasive tool to early detect OSCC from oral brushing specimens.  2) p16INK4A over-expression was found in 26/35 LP samples, whereas HPV was found in 4/35 lesions: 3 low-risk HPV and 1 high-risk HPV. P16INK4A overexpression is not correlated with HPV in patients with LP. 3) Perineural invasion was significantly related to lymph-node metastasis (18% vs 8%) and Local Recurrence (15% vs 5%), while the status of the surgical margin resulted an independent factor influencing Second Primary Tumor. 4) The results from mtDNA analysis showed a good agreement with results of p53 mutation analysis and revealed the presence of 4/11 neck nodal metastases not phylogenetically related respect to primary tumor.