Ελεγχος ασθενών νοσηλευομένων στο Π.Γ.Ν.Θ. ΑΧΕΠΑ για την τοξίνη Α του Clostridium difficile
Creators: name: Παπαγεωργίου, Βασίλειος Βαρσάμη
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2006
Subjects: Κλωστηρίδιο
Ενδονοσοκομειακή διάρροια
Ψευδομεμβρανώδης κολίτιδα
Τοξίνη Α
Διάρροια από αντιβιοτικά
Clostridium difficile
Nosocomial diarrhea
Pseudomembranous colitis
Toxin A
Antibiotic associated diarrhea

description: Σκοπός της μελέτης αυτης είναι ο προσδιορισμός της συχνότητας ανίχνευσης τοξινογόνων στελεχών Clostridium difficile σε δείγματα κοπράνων ασθενών με διάρροια, στο Π.Γ.Ν.θ. ΑΧΕΠΑ. Επιπροσθέτως επιχειρήθηκε διερεύνηση ορισμένων επιδημιολογικών χαραχτηριστικών της κολίτιδας από C. Difficile. Υλικό της μελέτης αποτέλεσαν 80 δείγματα κοπράνων που συλλέχθησαν από 70 ασθενείς, νοσηλευόμενους σε διάφορες κλινικές του νοσοκομείου, μεταξύ 1/1/2006 και 30/6/2006. Εφαρμόστηκε αρχικά καλλιέργεια κοπράνων και ανίχνευση τοξίνης Α στα κόπρανα και ως πρόσθετη δοκιμασία ανίχνευση παραγωγής τοξίνης Α από αποικίες C. dif και προέκυψαν από θετικές καλλιέργειες. για την καλλιέργεια των δειγμάτων και την ταυτοποίηση των αποικιών του C.D. χρησιμοποιήθηκαν συμβατικές μέθοδοι. Ο έλεγχος έγινε με ανοσοχρωματογραφική μέθοδο (NoviView Toxin-A, Hiss Diagnostics Gmbh, Germany) και με μέθοδο ELISA (NOVITEC Clostridium dfficile Toxin A, HIss Diagnostics Gmbh Germany). Για κάθε εξεταζόμενο ασθενή, συμπληρώθηκε ειδικό επιδημιολογικό δελτίο με δημογραφικε΄ς και κλινικές πληροφορίες. Για την στατιστική επεξεργασία των στοιχείων που προέκυψαν χρησιμοποιήθηκε η δοκιμασία του Student για σύγκριση μέσων όρων μονάδν δειγμάτων. Απομονώθηκαν 8 στελέχη CD τα οποία διαπιστώθηκε ότι παρήγαγαν τοξίνη Α (ποσοστό 10%). Σε 64 δείγματα κοπράνων ο έλεγχος ήταν αρνητικός. Ενα δείγμα θεωρήθηκε πιθανώς θετικό και 7 δείγματα χαρακτηρίστηκαν ως πιθανώς αρνητικά. Η απομόνωση των στελεχών ήταν διασπαρμένη τοπικά και χρονικά. Από την επεξεργασία των στοιχείων των επιδημιολογικών δελτίων διαπιστώθηκε στατιστικά σημαντική διαφορά μόνο στον αριθμό διαφορετικών κατηγοριών αντιβιοτικών που ελάμβαναν οι εξεταζόμενοι. Το ποσοστό απομόνωσης τοξινογόνων στελεχών CD από τα κόπρανα ασθενών με διαρροϊκό σύνδρομο ενδονονοσοκομειακής προέλευσης υπολογίστηκε σε 10% και έρχεται σε συμφωνία με τα διεθνή βιβλιογραφικά δεδομένα. Ο συνδυασμός διαφόρων μεθόδων και ιδιαίτερα της τοξινογόνου καλλιέργειας κοπράνων είναι σημαντικότατος στη διαγνωστική προσέγγιση της CDAD παρά την πιθανή επιβάρυνση των εργαστηρίων σε χρόνο και χρήματα. Τέλος δεν βρέθηκε αξιοσημείωτη τοπική ή χρονική συρροή (clustering) των περιστατικων CDAD γεγονός που υποδηλώνει ότι τα κρούσματα ήταν πιθανότατα σποραδικά. Το συμπέρασμα αυτό για να τεκμηριωθεί απόλυτα απαιτεί τη χρήση μοριακών τεχνικών
description: This study investigates the frequency of toxigenic C. difficile isolation in diarrheic stool specimens from patients hospitalized in AHEPA University General Hospital, Thessaloniki Greece. Furthermore demographic and clinical information was collected for every tested individual, in order to conduct a research of CDAD epidemiological features. The presence of CD was investigated in 80 fresh feacal specimens collected from 70 impatients, hospitalized in various departments between 1/1/2006 and 31/8/2006. Faecal specimens for diagnosis of CD infection were accepted under the following conditions : the stools should be liquid or at least unformed and a history of anitbiotic therapy or chemotherapy during the last 6 weeks or a previous diagnosis of CD was required. Final identification was performed by API 20A biochemical identification system. The presence of CD toxin A in stools was investigate by a solid phase immunoassay and confirmed by a specific ELISA. the same ELISA was also used for testing isolated CD strains for toxin A production. Toxin A producing CD strains were isolated in 8 speciments (10%). Negative results by both immunoassay and culture examination were found in 64 specimens (80%). In one case a toxin A(-) strain was isolated, whereas 7 specimens were characterized possible negative, because toxin A was detected without isolation of CD in stool culture. Toxinogenic strains were not place or time clustered. Our study proved that CD exists and is disseminating in greek hospitals environment, despite opposite opinions that derive partly due to the lack of relative studies. it was also demonstrated that isolation and identification of Cd is not difficult. The frequency of CD toxinogenic strains isolation from feacal specimens of patients with nosocomial diarrhea was estimated in 10% (8 positive samples out of 80 examined) and agrees with literature. it was clearly shown the importance of different laboratory tests combination in diagnostic approach of CDAD regardless, of time and financial burden. Especially stool culture is of great value as it is necessary in CD isolation, thus permitting antibiotic susceptibility testing and epidemiological correlations. It was also indicated that CDAD is probably underestimated and underdiagnosed. Efforts have to be done in order to highlight the ways of managing and treating CD infections, as CD stand as the major microbial pathogen causing nosocomial diarrhea in industrialized countries. Finally the fact that there was not place and time clustering of CD strains speculates that all cases were sporadic. This conclusion needs further confirmation by use molecular techniques, which tend to be a necessity for laboratories because of the world dissemination of the new hypervirulent strain Cd, PCR ribotype 027