Αξιολόγηση της μεθοδολογίας MBT Sepsityper για την απευθείας αναγνώριση ζυμομυκήτων από τις θετικές καλλιέργειες αίματος
Creators: name: Βασιλάκη, Ελένη Σπυρίδωνα
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2025
Subjects: Μεθοδολογία MBT Sepsityper
Αναγνώριση ζυμομυκήτων
Θετικές φιάλες αίματος
MBT Sepsityper methodology
Yeast identification
Positive blood cultures

description: Οι διεισδυτικές μυκητιάσεις αποτελούν έναν σημαντικό παράγοντα νοσηρότητας και θνητότητας για τους νοσοκομειακούς ασθενείς. Με την αυξανόμενη επίπτωση των μυκηταιμιών καθίσταται αναγκαία η αξιολόγηση νέων μεθοδολογιών για την ταχύτερη και αξιόπιστη διάγνωση, καθώς και την αποτελεσματικότερη θεραπεία. Στην παρούσα μελέτη διερευνήθηκε η συμβολή της μεθοδολογίας MBT Sepsityper στη διάγνωση των μυκηταιμιών από ζυμομύκητες, απευθείας από τις θετικές καλλιέργειες αίματος. Η μελέτη περιλαμβάνει 30 θετικές αιμοκαλλιέργειες (πραγματικού χρόνου) από ασθενείς με μυκηταιμία οφειλόμενη σε ζυμομύκητα που συλλέχθηκαν μεταξύ Οκτωβρίου-Δεκεμβρίου 2023 στο Γενικό Νοσοκομείο Θεσσαλονίκης «Ιπποκράτειο». Η απόδοση της μεθόδου MBT Sepsityper εκτιμήθηκε συγκρινόμενη με τις μεθόδους του εργαστηρίου (VITEK2 και MALDI- TOF MS από άγαρ). Τα δεδομένα που προέκυψαν αναλύθηκαν στο στατιστικό πρόγραμμα SPSS. Όσον αφορά την ταυτοποίηση των ζυμομυκήτων, υπήρξε 96,7% (29/30) συμφωνία σε επίπεδο είδους μεταξύ των μεθόδων MBT Sepsityper και VITEK2. Η μοναδική απόκλιση προήλθε από την εσφαλμένη αναγνώριση ενός στελέχους C. auris ως C. duobushaemulonii στο σύστημα VITEK2. Οι ταυτοποιήσεις με τις μεθόδους MBT Sepsityper και MALDI-TOF MS από άγαρ εμφάνισαν 100% (30/30) συμφωνία ταυτοποίησης σε επίπεδο είδους. Ωστόσο, υπήρξε στατιστικά σημαντική διαφορά στο επίπεδο της ταυτοποίησης (score values) υπέρ της μεθόδου MALDI-TOF MS από άγαρ (p&lt;0,001). Το στάδιο εκχύλισης με φορμικό οξύ βελτίωσε την ακρίβεια και στις δύο μεθόδους ενώ η μέθοδος MBT Sepsityper επέτρεψε την ταυτοποίηση των ειδών και στις δύο (2/30) πολυμικροβιακές περιπτώσεις. Όσον αφορά τον χρόνο διεκπεραίωσης, η μέθοδος MBT Sepsityper παρείχε αποτελέσματα την ημέρα θετικοποίησης των αιμοκαλλιεργειών, ενώ οι άλλες μέθοδοι χρειάστηκαν 2-4 ημέρες λόγω της ανάγκης επώασης για την ανάπτυξη αποικιών. Συμπερασματικά, η μεθοδολογία MBT Sepsityper είναι μια ταχεία και ακριβής προσέγγιση για την ταυτοποίηση ζυμομυκήτων, επιτρέποντας την έγκαιρη έναρξη κατάλληλης αντιμυκητιασικής θεραπείας. Η ενσωμάτωση της μεθόδου στη διαγνωστική προσέγγιση θα μπορούσε να συμβάλλει θετικά στην κλινική έκβαση των ασθενών με λοιμώξεις του αίματος που προκαλούνται από ζύμες.
description: Invasive fungal infections represent a significant cause of morbidity and mortality among hospitalized patients. With the increasing incidence of candidaemia, there is a growing need to evaluate new technologies for faster, more reliable diagnosis and more effective treatment. The aim of this study is to evaluate the performance of the MBT Sepsityper® kit, which allows for identification by MALDI-TOF mass spectrometry directly from positive blood cultures. The study included 30 positive blood cultures (real-time positive) from patients with yeast-related fungemia, collected between October and December 2023 at the General Hospital of Thessaloniki "Ippokratio". The performance of the MBT Sepsityper method was assessed in comparison with routine laboratory methods (VITEK2 and MALDI- TOF MS from agar). The resulting data were analyzed using the SPSS statistical software. Concerning yeast identification, there was an agreement of 96.7% (29/30) at the species level between MBT Sepsityper and VITEK2. The discrepancy was attributed to a C. auris isolate, which VITEK2 misidentified as C. duobushaemulonii. Sepsityper and MALDI-TOF MS from agar revealed a 100% (30/30) consistency in species identification. However, there was a significant difference in the level of identification (score values) in favor of MALDI-TOF MS from agar (p&lt;0.001). Extraction step with formic acid enhanced performance in both MALDI-TOF MS-based methodologies, resulting in high-confidence identifications. For polymicrobial blood cultures, MBT Sepsityper provided complete organism identification in each case. In terms of turnaround time, MBT Sepsityper provided results on the day of blood culture positivity, whereas VITEK2 and MALDI-TOF MS from agar produced results between the second and fourth day after positivity due to the need for incubating cultures to obtain isolated colonies. In conclusion, the MBT Sepsityper methodology is a rapid and accurate assay for yeast identification, allowing for the early initiation of appropriate antifungal treatment based on the specific species’ identification. The integration of the MBT Sepsityper protocol could positively affect the clinical outcome of patients with bloodstream infections caused by yeasts.