Συμβολή στον έλεγχο Γνησιότητας του αρτύματος σαφράνι (Crocus sativus L.) με Μοριακές και Φυσικοχημικές τεχνικές : α) Πιστοποίηση του είδους C. sativus L. και β) Ανίχνευση νοθείας με κουρκουμά (Curcum
Creators: name: Μποσμαλή, Ειρήνη Ηλία
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2016
Subjects: Σαφράνι
Κουρκουμάς
Υγρή χρωματογραφία υψηλής πίεσης
C. sativus L.
Curcuma longa
HPLC

description: Το άρτυμα σαφράνι, προκύπτει από τα αποξηραμένα στίγματα του φυτού κρόκος (Crocus sativus Linnaeus) το οποίο ανήκει στην οικογένεια των ιριδοειδών (Iridaceae) και το γένος Crocus. Λόγω της απαιτητικής χειρονακτικής εργασίας που απαιτείται από τη συγκομιδή μέχρι και τη συσκευασία του, είναι το πιο ακριβό άρτυμα στον κόσμο και για το λόγο αυτό πολύ συχνά νοθεύεται με άλλα φυτικά υλικά, μεγαλύτερης διαθεσιμότητας και χαμηλότερης αξίας, που κυκλοφορούν στο εμπόριο. Η νοθεία του αρτύματος σε μορφή σκόνης ή όταν το άρτυμα προστίθεται σε μίγμα αρτυμάτων, δεν είναι εύκολα ανιχνεύσιμη. Για το λόγο αυτό κρίνεται αναγκαία η ενίσχυση των εργαλείων ελέγχου, τόσο για την πιστοποίηση της γνησιότητας του είδους όσο και για την ανίχνευση πιθανής νοθείας του και εκτίμησης του ποσοστού αυτής με άλλα είδη. Για το σκοπό αυτό στην παρούσα εργασία πραγματοποιήθηκε α) πιστοποίηση του είδους C. sativus L. με μοριακές μεθόδους που βασίζονται στην αλυσιδωτή αντίδραση της πολυμεράσης και συγκεκριμένα i) οι καμπύλες τήξης υψηλής ανάλυσης σε συνδυασμό με τις DNA barcoding περιοχές ii) οι μοριακοί δείκτες ISSR (inter-simple sequence repeat) και iii) τα MADs-box γονίδια και β) ανίχνευση του αρτύματος κουρκουμά στο σαφράνι σε επίπεδα προσθήκης που κυμαίνονται μεταξύ 50 και 1% w/w με τη χρήση των μοριακών δεικτών μικροδορυφόρων (ISSR), εντός απλών επαναλαμβανόμενων αλληλουχιών και τη μοριακή μέθοδο της υψηλής ανάλυσης καμπύλης τήξης (HRM) όσο και με φυσικοχημικές τεχνικές όπως η υγρή χρωματογραφία υψηλής απόδοσης αντίστροφης φάσης με ανιχνευτή συστοιχίας διόδων λυχνιών σε σειρά με φθορισμομετρικό ανιχνευτή (RP-HPLC-DAD-FL). Τα ευρήματα έδειξαν ότι η υγροχρωματογραφική ανάλυση με ανιχνευτή φθορισμού είναι δυνατό να εφαρμοστεί για την ανίχνευση των συστατικών του κουρκουμά σε πιθανώς νοθευμένα δείγματα του αρτύματος όταν το επίπεδο νοθείας είναι μεγαλύτερο από 5% w/w, ενώ η μοριακή ανάλυση HRM είναι δυνατό να εφαρμοστεί για την ανίχνευση νοθείας κουρκουμά στο άρτυμα σαφράνι σε επίπεδο νοθείας 0,5% w/w.
description: Crocus sativus L. belongs to Iridaceae family and the Crocus genus. The dried stigmas of Crocus sativus L. are commonly known as saffron. It is considered to be the most expensive spice in the world due to demanding manual labor from harvest to packaging. As a consequence, saffron has been frequently a target of adulteration, performed in both ground and whole stigma, with the most diverse plant materials and strategies. The fraud is not easily detectable therefore additional control tools are necessary for C. sativus L. both for authenticity fraud detection and also for the estimation of the adulterant percentage. For this reason, we applied PCR-based methods such as molecular markers ISSR (inter-simple sequence repeat) and MADs-boxes genes for the authenticity of C. sativus L. from allied Crocus species. Furthermore, using molecular and chemical analysis we detected turmeric adulteration in saffron in percentages varying from 50 to 1% by weight of each adulterant. Furthermore, we applied High Resolution Melting analysis HRM and RP-HPLC-DAD-FL (Reversed Phase-High Pressure Liquid Chromatography-Diode Array-Fluorescence) respectively in order to detect adulterants in saffron. The findings above showed that HPLC analysis with Fluorescent detector can be applied for detecting turmeric in saffron only in case the level of fraud is greater than 5% w/w while HRM analysis can be applied for detecting lower percentage adulteration of 0,5% w/w