Einfluss von konjugierten Linolsäure-Isomeren auf atheroskleroserelevante Parameter in humanen Endothelzellen der Aorta
Creators: name: Schleser, Sabine
Publisher: name: Universitäts- und Landesbibliothek Sachsen-Anhalt
Year: 2006
Subjects: subject: Elektronische Publikation
subject: Hochschulschrift
subject: Online-Publikation
subject: Zsfassung in engl. Sprache
subject: 616.1

description: Mehrere Studien deuten darauf hin, dass die in Milch und Fleisch von Wiederkäuern vorkommenden konjugierten Linolsäuren (CLA) atherosklerotische Prozesse beeinflussen. Das Ziel der vorliegenden Arbeit war, den Einfluss der CLA-Isomere cis-9, trans-11 CLA und trans-10, cis-12 CLA auf atheroskleroserelevante Parameter - vasoaktive Substanzen und proinflammatorische Parameter - in humanen arteriellen Endothelzellen zu untersuchen. Für die Untersuchung der Wirkung von CLA auf die Freisetzung vasoaktiver Substanzen, die bei der Aufrechterhaltung des vaskulären Gleichgewichts eine bedeutende Rolle spielen, wurden humane Endothelzellen der Aorta (HAoEC) mit 5 bzw. 50 µmol/l der beiden CLA-Isomere für 24 h bei 37 °C inkubiert. Es wurden die Fettsäurezusammensetzung der Gesamtlipide und der Phospholipide, die Bildung konjugierter Metabolite der CLA in den Gesamtlipiden, Parameter der Eicosanoid- und der Stickstoffmonoxidsynthese sowie die Freisetzung von Endothelin-1 bestimmt. Durch die Inkubation der Endothelzellen mit dem jeweiligen CLA-Isomer war dessen Anteil sowie Anteile bestimmter konjugierter Dien (CD)-Fettsäuren CD16:2 und CD20:2, Metabolite der CLA, in Abhängigkeit von der Konzentration verglichen mit denen der unbehandelten Zellen erhöht. Zwar führte die CLA-Behandlung der HAoEC zu einer verminderten Konzentration der Arachidonsäure in den Membranphospholipiden, einer geringeren Aktivität der sekretorischen Phospholipase A2 sowie einer verminderten Freisetzung der Eicosanoide (PGI2, TXA2, PGE2, PGF2α), des Stickstoffmonooxids und des Endothelin-1. Das Verhältnis zwischen PGI2 und TXA2 blieb aber unverändert. Für die Untersuchung der Wirkung von CLA auf proinflammatorische Parameter der frühen Entstehungsphase der Atherosklerose, wurden die HAoEC nach 20 h Inkubationszeit mit 5 bzw. 50 µmol/l der beiden CLA-Isomere oder LA, als Referenzsubstanz, bei 37 °C mit 2 ng/ml Tumornekrosefaktor (TNF)α für 4 h stimuliert. Es wurden die Expression der Adhäsionsmoleküle ICAM-1, VCAM-1 und E-Selektin, die Freisetzung der Chemokine MCP-1 und IL-8 und die Adhäsion der Monozyten U937 an die Endothelzellen sowie die DNA-Bindungsaktivität der Transkriptionsfaktoren NF-κB und PPARγ untersucht. Die Behandlung der HAoEC mit den beiden CLA-Isomeren bzw. der LA führte zwar zu einer erhöhten Aktivität des PPARγ, aber zu keinen bzw. nur geringfügigen Veränderungen der TNFα-induzierten Expression der Adhäsionsmoleküle, der Freisetzung der Chemokine, der Monozyten-Endothelzell-Interaktion sowie der Aktivität des NF-κB. Es ist festzustellen, dass die beiden CLA-Isomere cis-9, trans-11 CLA und trans-10, cis-12 CLA keinen Einfluss auf atheroskleroserelevante Parameter in humanen arteriellen Endothelzellen ausübten.
description: Several studies suggest that conjugated linoleic acid (CLA) isomers occuring naturally in milk and meat of ruminants influence atherosclerotic processes. The aim of this study was to investigate the effects of cis-9, trans-11 CLA und trans-10, cis-12 CLA on atherosclerosis-relevant parameters, vasoactive substances and pro-inflammatory parameters, in human arterial endothelial cells. To investigate the effect of both CLA isomers on the release of vasoactive substances playing an important role for maintenance of vascular homeostasis, human aortic endothelial cells (HAoEC) were incubated with 5 or 50 µmol/L of cis-9, trans-11 CLA or trans-10, cis-12 CLA for 24 h at 37 °C. After incubation period, the fatty acid composition in total lipids and phospholipids, formation of conjugated metabolites of CLA in total lipids, parameters of the eicosanoid synthesis and the nitric oxide synthesis as well as the release of endothelin-1 were determined. Incubation of HAoEC with the CLA isomers resulted in a significant incorporation of either CLA isomer and a significant isomer-specific formation of conjugated metabolites of CLA (CD) such as CD16:2 and CD20:2 fatty acids in a concentration dependent manner when compared with untreated endothelial cells. CLA isomers lowered the concentration of aracidonic acid in membrane phospholipids, activity of secretory phospholipase A2 as well as the release of eicosanoids (PGI2, TXA2, PGE2, PGF2α), nitric oxide and endothelin-1. But the ratio between the amounts of PGI2 and TXA2 released did not differ between control and cells treated with CLA isomers. To investigate the effect of both CLA isomers on pro-inflammatory parameters of the early phase of atherosclerosis, endothelial cells were incubated in medium without or with 5 or 50 µmol/L of either cis-9, trans-11 CLA, trans-10, cis-12 CLA or LA (as reference substance) for 20 h at 37 °C followed by a 4 h treatment with 2 ng/mL tumor necrosis factor (TNF)α. After incubation periods, the expression of adhesion molecules ICAM-1, VCAM-1 and E-selectin, the release of chemokines MCP-1 and IL-8 and the U937 monocyte adhesion to endothelial cells as well as the DNA-binding activity of the transcription factors NFκB and PPARγ were determined. Treatment of HAoEC with either CLA isomer or LA increased activity of PPARγ, but the TNFα-induced expression of adhesion molecules, release of chemokines, monocyte adhesion and activity of NFκB were almost not modulate. In conclusion, both CLA isomers cis-9, trans-11 CLA and trans-10, cis-12 CLA had no effects on the investigated atherosclerosis-relevant parameters in human arterial endothelial cells.