Συμβολή κυτταρογενετικών μελετών στην επιλογή νέων δυνάμει αντινεοπλασματικών ουσιών
Creators: name: Καραγιάννη, Βενετία Ι.
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2005
Subjects: Χρωματιδιακές ανταλλαγές
Αλκυλιωτικοί παράγοντες
Sister chromatid exchanges
Alkylating agents

description: Στην παρούσα διατριβή μελετήθηκε in vitro και in vivo η συσχέτιση δομής και κυτταρογενετικής δράσης νεοσυντεθεισών ουσιών, δυνάμει αντινεοπλασματικών, σε σχέση με τα ήδη χρησιμοποιούμενα αντινεοπλασματικά φάρμακα. Μελετήθηκαν 28 νεοσυντεθέντες αστέρες στεροειδών με αλκυλιωτικό παράγοντα, οι οποίοι με βάση τη χημική τους δομή χωρίστηκαν σε 7 ομάδες. Αρχικά ελέχθηκε η πιθανή ικανότητά τους να αυξάνουν τη συχνότητα των χρωματιδιακών ανταλλαγών(SCEs-Sister Chromatid Exchanges) και να αναστέλουν το δείκτη ρυθμού πολλαπλασιασμού των κυττάρων(PRI-proliferation rate index) σε καλλιέργειες φυσιολογικών λεμφοκυττάρων περιφερικού αίματος ανθρώπου(in vitro). Διαπιστώθηκε ότι ορισμένες από αυτές εμφανίζουν στατιστικά αξιόλογη γονοτοξική(αύξηση των SCEs) και κυτταροστατική δράση(πτώση του PRI). Οι SCEs χαρακτηρίζονται ως ο πιο ευαίσθητος "δείκτης" πρόκλησης ή/και ανεπιδιόρθωτης βλάβης του DNA, ενώ ο PRI ως αξιόπιστος "δείκτης" κυτταροστατικότητας. Η θετική συσχέτιση της αύξησης των SCEs και της πτώσης του PRI υποδηλώνει πιθανή αντινεοπλασματική δράση. Ακολούθησαν πειράματα επιβίωσης σε μεταμοσχευμένα με λεμφοκυτταρική P388 ή λεμφοειδή L1210 λευχαιμία DBA/2 ποντίκια, ώστε να αξιολογηθεί και η in vino πιθανή αντιλευχαιμική δράση τουλάχιστον μέρους των ουσιών και να συσχετιστεί με την αποδεδειγμένη κυτταρογενετική τους δράση. Οι υπό μελέτη ουσίες επέφεραν παράταση της ζωής των καρκινοπαθών πειραματοζώων. Διευκρινίζεται ότι για πρώτη φορά τα αποτελέσματα των in vitro πειραμάτων με βάση τις μεταβολές της συχνότητας των SCEs σε καλλιέργειες φυσιολογικών λεμφοκυττάρων ανθρώπου, αποτέλεσαν το έναυσμα υπολογισμού της αντικαρκινικής δόσης δραστικών νεοσυντεθεισών ουσιών σε πειράματα επιβίωσης Ρ388 λευχαιμικών ποντικών DBA/2, δόσης υποπολλαπλάσιας της ήδη χορηγούμενης βάσει της LD^(10), ώστε να περιοριστούν οι παρενέργειες. Υποθέσαμε και προσπαθήσαμε να τεκμηριώσουμε ότι η συχνότητα των βλαβών στο DNA που προκαλείται από το αποδεκτό στην κλινική πράξη χημειοθεραπευτικό(Χ/Θ) σχήμα CHOP(Cyclophosphamide, Hydroxydaunorobicin, Oncovin, Prednisone) θα διατηρείται ή/και θα βελτιώνεται από το ΑΗΟΡ που προέκυψε μετά την στεροειδούς με αλκυλιωτικό παράγοντα(αντινεοπλασματικό μεγαλύτερης εξειδίκευσης και με περιορισμένες παρενέργειες). Πράγματι, το ΑΗΟΡ προκάλεσε μεγαλύτερη αύξηση στις SCEs και πτώση του PRI σε κύτταρα λεμφοκυτταρικής λευχαιμίας Ρ388 ποντικών DBA/2. Παράλληλα ογκολογικές παρατηρήσεις απέδειξαν ότι σε ισοτοξικές δόσεις τα δύο θεραπευτικά σχήματα(CHOP και ΑΗΟΡ) παρέτειναν το χρόνο επιβίωσης BDF^(1) ποντικών με λευχαιμίες P388 και L1210. Το θεραπευτικό σχήμα ΑΗΟΡ εμφανίστηκε νε υπερέχει σε γονοτοξικότητα, κυτταροστατικότητα και αντινεοπλασματική δράση σε σύγκριση με το CHOP
description: In this thesis the in vitro and in vivo relationship between structure and cytogenetic activity of newly synthesized compounds, potentially antineoplastic, was studied in comparison with the already used antineoplastic drugs. 28 newly syntesized esters of steroids with alkylating agents were studied, that were separated into 7 groups according to their chemical structure. First of all it was tested whether they could increase the SCEs(Sister Chromatid Exchanges) or decrease the PRI(Proliferation Rate Index) in normal human lymphocyte cultures(in vitro). It was proved that some of them show statistically significant inrease of genotoxic(increase of SCEs) and cytostatic(decrease of PRI) activity. The SCEs assay is considered to be the most sensitive indicator of unrepaired DNA damage while the RPI a reliable cytostatic indicator. A positive correlation between the increase of the SCEs and the decrease of the PRI is related to potent antineoplastic acticity. Experiments of measuring the lifespan of DBA/2 mice bearing lymphocytic P388 and lymphoid L1210 leukemia followed in order to evaluate the possible in vivo antileukemic activity, of at least part of the compounds and to correlate it with their proved cytogenetic activity. The compounds studied increased the lifespan of the mice. It is emphasized that for the first time results of the in vitro experiments based on the SCEs frequences in normal lymphocyte cultures directed us to calculate anticancer dose of active newly synthesized compounds in experiments of measuring the lifespan of P388 leukemia bearing mice DBA/2, dose that was lower of the one already administrated based on the LD10, aiming to reduce the side effects. We assumed and tried to prove that the frequency of DNA damage caused by the approved on clinical practice chemotherapeutic scheme CHOP(Cyclophosphamide, Hydroxydaunorobicin, Oncovin, Prednisone) would remain or would be improved by AHOP in which cyclophosphamide(CP) was replaced by ASE, a modified steroidal ester with alkylating agent(antineoplastic agent with higher selectivity and reduced side effects). Indeed, AHOP caused higher SCE increase and PRI decrease on lymphocytic leukemia P388 cells of DBA/2 mice. Additionally, antitumor observations proved that the therapeutic schemes CHOP and AHOP increased the lifespan of BDF1 mice bearing leukemia P388 and L1210. The therapeutic scheme AHOP was shown to be superior on genotoxicity, cytostatic activity and antineoplastic activity compared to CHOP