Φαρμακολογική αξιολόγηση συστατικών του ελαιόλαδου με τη χρήση κυτταροκαλλιεργειών και τεχνικές μοριακής ανάλυσης της γονιδιακής έκφρασης
Creators: name: Πεπανιάν, Μαίρη Γκάρνικ
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2024
Subjects: Ελαιόλαδο
Φαρμακολογική αξιολόγηση
Γονιδιακή έκφραση
Olive oil
Pharmacological evaluation
Gene expression

description: Η παρούσα διπλωματική μεταπτυχιακή εργασία στοχεύει τη φαρμακολογική αξιολόγηση τριών φυτικών δραστικών ουσιών του ελαιόλαδου, την ελαιοκανθάλη, την ελαιασίνη και το άγλυκο του λιγκστροσίδη. Με βάση τη βιβλιογραφία και την επιστημονική κοινότητα, οι δραστικές ουσίες του ελαιολάδου μέσω της εμπλοκής τους σε διάφορους μηχανισμούς, οι οποίοι αποτελούν μέρος της παθογένειας της νόσου Alzheimer’s, ενδεχομένως να παίζουν σημαντικό ρόλο στην αντιμετώπιση της νόσου. Η παραπάνω αξιολόγηση των φυτικών δραστικών ουσιών επιτεύχθηκε μέσω εφαρμογής μεθόδων κυτταροκαλλιέργειας και μοριακής ανάλυσης της γονιδιακής έκφρασης. Για τη μοριακή ανάλυση ακολουθήθηκε η τεχνική της αλυσιδωτής αντίδρασης πολυμεράσης σε πραγματικό χρόνο (RT-qPCR) χρησιμοποιώντας ως βιοδείκτες της έκφρασης ένα πάνελ 84 γονιδίων, τα οποία βάσει της βιβλιογραφίας, έχουν συσχετισθεί με τη νόσο Alzheimer’s. Παράλληλα με την γονιδιακή ανάλυση, είναι μείζονος σημασίας η επιβεβαίωση της έλλειψης κυτταροτοξικότητας και ιδιαίτερα της ηπατοτοξικότητας των παραπάνω προϊόντων, καθώς ο ηπατικός μεταβολισμός αποτελεί σημαντικό στάδιο του μεταβολισμού των ουσιών. Ο έλεγχος αυτός πραγματοποιήθηκε μέσω επωάσεων ηπατικών κυττάρων HepG2 με τα τρία φυτικά προϊόντα βασισμένα σε δοσοεξαρτώμενα και χρονοεξαρτώμενα σχήματα. Τα αποτελέσματα της εξής εργασίας μπορούν να αποτελέσουν έναυσμα για την ανακάλυψη και αυξημένη εφαρμογή νέων θεραπευτικών προσεγγίσεων έναντι διαφόρων νευρολογικών καταστάσεων, διαθέτοντας ως βάση το ελαιόλαδο και τις αντιοξειδωτικές και αντιφλεγμονώδεις ιδιότητές του. Παρ’ όλα αυτά, προτείνεται περαιτέρω φαρμακολογική έρευνα in vivo για την πιστοποίηση των ιδιοτήτων που παρουσιάστηκαν στις in vitro μελέτες που πραγματοποιήθηκαν. Τελικός στόχος αποτελεί η παροχή ενός σκευάσματος σε ασθενείς με νευρολογικές νόσους, ιδιαίτερα με νόσο Alzheimer’s, για την πρόληψη ή και μείωση των συμπτωμάτων τους.
description: This master’s dissertation aims to evaluate pharmacologically three natural active substances derived from olive oil, oleocanthal, oleacin and aglycone of ligstroside. Based on the literature and the scientific community, the active substances in olive oil, through their involvement in various mechanisms of action that are part of the pathogenesis of Alzheimer's disease, may play an important role in the treatment of the disease. The above evaluation of the plant active substances was achieved through the implementation of cell culture methods and molecular analysis of gene expression. For the molecular analysis, the real-time polymerase chain reaction (RT-qPCR) technique was followed using as expression biomarkers a panel of 84 genes, which according to the literature, have been associated with Alzheimer's disease. Along with the gene analysis process, it is of major importance to confirm the lack of cytotoxicity and especially hepatotoxicity of the above products, as liver metabolism is an important stage of the metabolism of substances. This test was performed by incubating HepG2 liver cells with the three plant products based on dose- and time-dependent regimens. The results from the following work may become the catalyst for the discovery and amplified application of new therapeutic approaches against various neurological conditions based on olive oil and its antioxidant and anti-inflammatory qualities. Nevertheless, further in vivo pharmacological research is suggested to validate the properties shown in the in vitro studies performed. The ultimate goal is to provide a formulation to patients with neurological diseases, particularly Alzheimer's disease, for the prevention and/or reduction of their symptoms.