Φυτοχημική ανάλυση του φυτού Amaranthus retroflexus και in vitro μελέτη αντιοξειδωτικής ικανότητας, αντιφλεγμονώδους δράσης και αναστολής της αναγωγάσης της αλδόζης.:
Creators: name: Σαββανάκη, Βασιλική Στέργιου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2014
Subjects: Βλήτο
Φλαβονοείδη
Φαινολικά παράγωγα
Amaranthus retroflexus
Flavonoids
Phenolics

description: Tο βλήτο (Amaranthus retroflexus) έχει προσελκύσει την παγκόσμια προσοχή, καθώς είναι ένα φυτό με ευεργετικές ιδιότητες για πολλαπλές χρήσεις. Τα φύλλα, οι σπόροι και τα άνθη (ταξιανθίες) του φυτού χρησιμοποιούνται ως φυτοθεραπευτικά. Διακρίνουμε ποικίλες φαρμακευτικές ιδιότητες όπως στυπτική, αιμοστατική, αντιδιαρροϊκή, διουρητική, ανθελμινθική, αντιμικροβιακή, αντιφλεγμονώδη και αντιοξειδωτική. Παρόλα αυτά δεν υπήρχε καμία επιστημονική αναφορά σχετικά με αυτές τις αναφερόμενες δράσεις. Στην παρούσα μεταπτυχιακή εργασία πραγματοποιήθηκε λεπτομερής ανάλυση του φαινολικού περιεχομένου της δρόγης, έλεγχος διαφόρων εκχυλισμάτων σχετικά με την αντιοξειδωτική ικανότητα (δοκιμή ρίζας DPPH∙), καθώς και έλεγχος αναστολής των ενζύμων αναγωγάση της λιποξυγονάσης και της αλδόζης. Η αναγωγάση της αλδόζης είναι υπεύθυνη για την εκδήλωση των δευτερογενών επιπλοκών σε διαβητικούς, όπου συγχρόνως έχουμε και γένεση ελευθέρων ριζών (κυτταρικό οξειδωτικό στρες).Για τους παραπάνω λόγους ελέχθησαν in vitro η αντιοξειδωτική, η αντιφλεγμονώδης και η ικανότητα αναστολής της αναγωγάσης της αλδόζης.Από τον αντιοξειδωτικό έλεγχο των διαφόρων εκχυλισμάτων φάνηκε ότι η δράση μειώνεται με την ακόλουθη σειρά: βουτανολικό κλάσμα&gt; διεθυλαιθερικό κλάσμα&gt; κλάσμα οξικού αιθυλεστέρα&gt; υδατικό κλάσμα Τα αποτελέσματα αυτά σχετίζονται με το φαινολικό περιεχόμενο των καρπών, αφού τα φλαβονοειδή είναι ισχυρότερα αντιοξειδωτικά από τα φαινολικά οξέα Το Amaranthus retroflexus δεν παρουσίασε σημαντική αντιφλεγμονώδη δραση. Η δράση των εκχυλισμάτων μειώνεται ως εξής: διεθυλαιθερικό κλάσμα&gt;βουτανολικό κλάσμα&gt;κλάσμα οξικού αιθυλεστέρα&gt;υδατικό κλάσμα.Στην περίπτωση ελέγχου της αναστολής του ενζύμου αναγωγάση της αλδόζης, όλα τα κλάσματα εμφάνισαν πολύ καλή δράση. Τα εκχυλίσματα του αιθέρα,οξικού αιθυλεστέρα και της βουτανόλης είχαν εξαιρετική ικανότητα αναστολής του ενζύμου. Από τα βιβλιογραφικά δεδομένα προκύπτει ότι φλαβονοειδή έχουν την ικανότητα να αναστέλλουν το ένζυμο αναγωγάση της αλδόζης in vitro. H δράση αυτή λοιπόν φαίνεται να σχετίζεται άμεσα με τις ενώσεις που απαντούν στα εκχυλίσματα Η ποιοτική και ποσοτική φυτοχημική ανάλυση των αρχικών εκχυλισμάτων πραγματοποιήθηκε σε σύστημα LC-DAD-MS (ESI+), όπου η διευκρίνιση της δομής έγινε με τον μηχανισμό θραυσμάτωσης. Η απομόνωση των ενώσεων πραγματοποιήθηκε με παρασκευαστικές τεχνικές όπως υγρή χρωματογραφία στήλης (CC), υγρή χρωματογραφία υψηλής πίεσης (HPLC), χρωματογραφία λεπτής στοιβάδας (TLC).Η φυτοχημική ανάλυση του Amaranthus retroflexus κατέληξε στη προσσέγιση της δομής 14 ενώσεων και στην ταυτοποίση της δομής 6 εξ’αυτών (2 με την τεχνική LC-DAD-MS και 4 με την τεχνική NMR).Αξίζει να σημειωθεί ότι καμία απο τις ταυτοποιημένες ουσίες δεν έχει απομονωθεί απο το Amaranthus Retroflexus. Δύο ουσίες, η ρουτίνη και η νικοτιφλορίνη, αναφέρονται στην βιβλιογραφία ως απομονωμένες απο άλλα ειδη της οικογένειας Amaranthaceae, όπως Amaranthus cruentus, Amaranthus hypochondriacus κ.α.Το παράγωγο του βενζοικού οξέος απομονώνεται για πρώτη φορά απο φυσικό προιόν. Παρόμοια ουσία έχει συντεθεί στο εργαστήριο, οπου τονίζεται η αντιφλεγμονώδης και αντιοξειδωτική της δράση.
description: Amaranthus retroflexus has attracted a worldwide interest due to the fact that it is a cabbage (kale) with multiple benefits. The leaves, the seeds and the flowers of the plant are used in phytotherapy. The plant has a variation of pharmaceutical properties such as hemostatic, astringent, diuretic, anthelmintic, antidiarrheal, antimicrobial, anti-inflammatory and antioxidant. However, there is no scientific evidence regarding those properties. The current study held a detailed analysis of the phenolic index of dew and the control of the antioxidant properties in different extracts (test radical or root DPPH). Moreover, it has been studied the suspension of the enzyme reductase of lipoxygenase and aldose. The reductase of aldose is responsible for secondary complications in diabetes where there is observed the formation of free radicals (cellular oxidative stress).Therefore,, the antioxidant, antiinflammatory and inhibitory ability of the reductase of aldose where studied.The test of the antioxidant properties of different extracts show that the antioxidant effect is reduced in the following series: butanol&gt;diethyl ether&gt;ethyl acetate&gt;aqueous. The results are related to the phenolic index of seeds, as flavonoids have stronger antioxidant action compared to phenolic acids. Amarantus retroflexus does not have remarkable antiinflammatory action. The extracts’ action decreases in the following series diethyl ether&gt;butanol&gt;ethyl acetate&gt;aqueous.According to the inhibitory propertied of reductase of aldose all the extracts demonstrates important action. The extracts of ethyl acetate, diethyl ether and butanol had a great inhibitory ability. Moreover, the current evidence support that flavonoids have the ability to inhibit reductase of aldose in vitro. Therefore, the inhibitory ability is highly related to the combinations of the extracts.The qualitative and quantitative phytochemical analysis of the initial extracts was realized at an LC-DAD-MS (ESI+) system, were structure elucidation was achieved by the fragmentation mechanism. Preparative techniques, such as Column Chromatography (CC), High Pressure Liquid Chromatography (HPLC) and Thin Layer Chromatography (TLC), were applied for the isolation of the compounds.The phytochemical analysis of Amaranthus retroflexus approached the structure of 14 derivatives and resulted to the elucidation of 6 compounds (2 with LC-DAD-MS analysis and 4 with NMR)The remarkamble is that none of the identified substances has not been isolated from Amarantus retroflexus. Two substances, rutin and nikotiflorini, referred to in the literature as isolated from other species of the family Amaranthaceae, as Amaranthus cruentus, Amaranthus hypochondriacus etc. The derivative of benzoic acid was first isolated from natural products. A similar substance has been synthesized in the laboratory, where they emphasized the anti-inflammatory and antioxidant capacity of the compound.