Συμβολή στη μελέτη των επιγενετικών μεταβολών στο ακανθοκυτταρικό καρκίνωμα της στοματικής κοιλότητας
Creators: name: Χατζηβασιλείου, Απόστολος Α.
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2024
Subjects: Μεθυλίωση
Γονίδιο DCC
Καρκίνωμα πλακώδους επιθηλίου
Λευκοπλακία
Methylation
DCC gene
Oral squamous cell carcinoma
Oral leukoplakia

description: Η μεθυλίωση του DNA έχει αποδειχτεί ότι διαδραματίζει σημαντικό ρόλο στην ανάπτυξη διαφόρων τύπων καρκίνου, μέσω μηχανισμών όπως η απενεργοποίηση ογοκατασταλτικών γονιδίων. Το DCC(18q21.2) είναι ένα δυνητικά ογκοκατασταλτικό γονίδιο και η μεθυλίωση του έχει συσχετιστεί με διάφορα νεοπλάσματα, όπως το καρκίνωμα από πλακώδη κύτταρα του στόματος (ΚΠΕ). Στην παρούσα μελέτη, διερευνήθηκε η DCC μεθυλίωση σε 20 περιστατικά Ομαλού λειχήνα, 62 λευκοπλακίας, 39 ΚΠΕ καθώς και 12 φυσιολογικού ιστού. Εφαρμόστηκε η τεχνική της δισουλφιδικής τροποποίησης/κατεργασίας του DNA σε συνδυασμό με την αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης ειδική στη μεθυλίωση. Επιπλέον εκτιμήθηκε ανοσοιστοχημικά και η έκφραση του DCC μορίου. Η DCC μεθυλίωση βρέθηκε αυξημένη στα περιστατικά ΚΠΕ εν συγκρίσει με τη λευκοπλακία και τους φυσιολογικούς ιστούς με στατιστική σημαντικότητα. Αντιθέτως δεν διαπιστώθηκε στατιστικά σημαντική διαφορά στη γονιδιακή έκφραση του DCC στα διάφορα περιστατικά. Τα αποτελέσματα επιβεβαιώνουν το ρόλο του DCC ως ογκοκατασταλτικού γονιδίου που αδρανοποιείται μέσω μεθυλίωσης στις περιπτώσεις ΚΠΕ, εύρημα που θα μπορούσε να συσχετιστεί με τη διάγνωση και πρόγνωση του καρκινώματος.
description: Epigenetic changes (including hypermethylation) are heritable modifications in gene expression without alterations of the DNA sequences. Epigenetics may play a key role in the initiation and progression of OSCC and hypermethylation was implicated as an effective mechanism of tumor suppressor gene inactivation. DCC(18q21.2) is a tumor suppresssor gene, associated with hypermethylation in different types of human cancers including OSCC .We evaluated DCC hypermethylation in samples taken from the laboratory of Oral Medicine of Dentistry School (Aristotle University of Thessaloniki): 20 samples of lichen planus-LP (subdivided into reticular and erosive forms) 62 samples of oral leukoplakia-OL (subdivided into groups: hyperkeratosis, mild, moderated and severe dysplasia) 39 samples of OSCC as well as 12 normal oral tissues .The DCC hypermethylation was evaluated using bisulfate conversion and Methylation specific PCR-MSP. Besides hypermethylation, DCC molecules’ tissue distribution in LP, OLs, OSCCs and normal tissues was evaluated using semiquantitative immunohistochemistry. Regarding DCC hypermethylation in LP, a statistically significant difference was observed between OSCC and LP (p&lt;0,001). Regarding OL, there was a significant statistical difference between OSCC and OL methylation (p&lt;0,0001) Comparing the various degrees of dysplasia in OL, it was also found that there was a statistical significance between: • OL with moderated-severe dysplasia and normal tissues (p=0,022 ) • OL with hyperkeratosis and OL with moderated-severe dysplasia (p= 0,041) • OL with mild dysplasia and OL with moderated-severe dysplasia (p= 0,011) Regarding OSCC, there was a significant statistical difference in DCC methylation between OSCC and normal tissues. (p&lt;0.001) Comparing OSCC and OLs with various degrees of dysplasia, there was also a statistical significant difference between OSCC samples and OL No dysplasia (p&lt;0,001) and between OSCC and OL with mild dysplasia (p&lt;0,001) DCC immunohistochemical staining was more intense in all epithelial layers except basal and suprabasal cell layers in OLs of various degrees of dysplasia as well as OSCCs. Moreover, a characteristic pattern of expression of DCC in OSCCs was observed with positive neoplastic cells in the center of neoplastic epithelial islands and especially around keratin pearls. The significant statistical difference in DCC hypermethylation between OSSC and normal tissues supports the hypothesis that hypermethylation is a possible mechanism of DCC inactivation in OSCC. Regarding OL, the results suggest the significance of hypermethylation as a mechanism of DCC inactivation in the procedure of oral tumorigenesis and also the possible use of DCC methylation as a biomarker to predict the biological behavior of OLs.