title: Developement of a half life prolonged Albumin
title: Die Entwicklung eines halbwertszeitverlängerten Albumins
Creators: name: Claar, Philipp
Publisher: name: Philipps-Universität Marburg
Year: 2011
Subjects: Albumin
Albumin ,FcRn ,Halbwertszeitverlängerung ,SPR
Naturwissenschaften
Albumin ,FcRn ,prolonged half life ,SPR

description: Die Entwicklung eines
      halbwertszeitverlängerten Albumins. Ausgehend von der bereits
      bekannten Bindung des FcRn an die dritte Domäne von Albumin
      und einer Prognose über die Bindestelle im Albumin von Seiten
      des „Molecular modelings“, konnte diese auf zwei Aminosäuren
      eingeschränkt und einen Bezug dieser zur Halbwertszeit von
      Albumin hergestellt werden. Durch die Herstellung dieses
      Bezuges wurde ein starkes Indiz für einen zuvor in der
      Literatur (Chaudhury C., 2003)* postulierten
      Recyclingmechanismus von Albumin durch den FcRn gewonnen. Der
      Bestimmung dieser Bindestelle gingen die Herstellung von
      dreizehn gentechnisch veränderten Varianten des humanen
      Albumins und des humanen FcRn als lösliches Protein voraus.
      Zur Analyse der Bindung zwischen den Albuminvarianten und dem
      FcRn wurde ein Bindungstest über das Prinzip der surface
      plasmon resonance etabliert und erfolgreich eingesetzt. Um
      einen Bezug zur der Halbwertszeit der Albumine im Blut
      herzustellen, wurden diese im Vergleich zum Albumin-Wildtyp
      Ratten appliziert und Abbaukinetiken erstellt. Das durch SPR
      charakterisierte Bindeverhalten der Albuminvarianten zum FcRn
      in vitro konnte so mit deren Abbau in vivo verglichen und ein
      Verhältnis zwischen der Bindung an den FcRn und der
      Halbwertszeit hergestellt werden. Das Ergebnis dieser Arbeit
      besteht in der Einschränkung einer Bindestelle des Albumins
      zum FcRn auf zwei Aminosäuren und der Beweis, dass diese
      einen Einfluss auf die Halbwertszeit von Albumin im Blut
      haben. Damit ist die Untersuchung der Bindung zwischen dem
      FcRn und Albumin einen wichtigen Schritt voran gekommen und
      das Ziel eines halbwertszeitverlängerten Albumins zur Fusion
      mit therapeutischen Proteinen einen Schritt näher gerückt.
      *Chaudhury C, Roopenian D. C, Anderson C . „The Major
      Histocompatibility Complex-related Fc Receptor for IgG (FcRn)
      binds Albumin and Prolongs its Lifespan.“ The Journal of
      Experimental Medicine, 2003: 315-322
description: Developement of a half life
      prolonged Albumin The topic of the thesis work is to
      understand the biology behind the long serum half-live of
      albumin, find ways to modulate the interaction between
      albumin and its receptor FcRn with the ultimate goal to
      modify and extend the half-life of a recombinant albumin. In
      the thesis the exact binding site of albumin to FcRn will be
      determined by alanine scanning mutagenesis and in vitro and
      in vivo tests. Once the amino acids involved in binding will
      be located, further mutations will be introduced to modify
      the binding towards a half life extended albumin molecule
      which could be used for second generation albumin fusion
      proteins in a variety of indications.