Ανοσοτροποποιητική δράση διαφόρων στελεχών Lactobacillus με προβιοτικές ιδιότητες σε ζωικό μοντέλο εντεροπάθειας από γλουτένη
Creators: name: Γερακόπουλος, Βασίλειος Νικολάου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2013
Subjects: Προβιοτικά
Κοιλιοκάκη
Γλοιαδίνες
Probiotics
Celiac Disease
Gliadins

description: Η κοιλιοκάκη, ή σύνδρομο δυσαπορρόφησης γλουτένης, είναι ένα αυτοάνοσο νόσημα και χαρακτηρίζεται από φλεγμονή στο βλεννογόνο του λεπτού εντέρου σε γενετικά προδιατεθειμένα άτομα. Η φλεγμονή επάγεται από μία οικογένεια πρωτεϊνών της γλουτένης που ονομάζονται γλοιαδίνες και περιέχονται σε δημητριακά, όπως το σιτάρι, κριθάρι κ.α. Στην παθογένεια της κοιλιοκάκης εμπλέκεται, η Th1 κυτταρική ανοσοαπόκριση καθώς και αυτοαντισώματα ενάντια στη γλοιαδίνη και στην τρανσγλουταμινάση. Δεν υπάρχει συγκεκριμένο θεραπευτικό πρωτόκολλο και η νόσος αντιμετωπίζεται μόνο με διατροφή ελευθέρη από γλοιαδίνη και αρχαίες ποικιλίες σιτηρών. Σε προηγούμενα πειράματά μας αναπτύξαμε το πρώτο ζωικό πειραματικό μοντέλο κοιλιοκάκης σε ποντίκια. Η ανάπτυξη ποντικών ανοχικών στη γλουτένη (G-) και στη συνέχεια η μεταφορά τους σε δίαιτα με γλουτένη (G+) οδηγεί σε ατροφία των λαχνών του εντέρου, αυξημένο τίτλο αυτοαντισωμάτων ενάντια στη γλοιαδίνη και στην τρανσγλουταμινάση στον ορό καθώς και αυξημένο αριθμό κυττάρων που παράγουν κυτοκίνες και IgA αντισώματα στο έντερο, κλινικά συμπτώματα της κοιλιοκάκης στον άνθρωπο. Το πιθανό προβιοτικό στέλεχος KK1 του Saccharomyces boulardii αποδομεί το α κλάσμα της γλοιαδίνης σίτου και με την ανοσοτροποποιητική δράση που ασκεί βελτιώνει τα κλινικά συμπτώματα της εντεροπάθειας σε ποντίκια. Στη διατριβή αυτή διερευνήθηκε κατά πόσο η αγωγή των G+ ποντικών με πιθανά-προβιοτικά στελέχη Lactobacillus μπορεί να περιορίσει τα κλινικά συμπτώματα της εντεροπάθειας. Με ανάλυση κατά Western βρέθηκε ότι τα στελέχη DC421, 2035 και DC411 αποδομούσαν το α και το γ κλάσμα της γλοιαδίνης, ενώ το στέλεχος DC423 αποδομούσε το γ κλάσμα. Η χορήγηση των στελεχών DC421 και 2035 σε G- ποντίκια μείωσε την παραγωγή TNFα στο έντερο ενώ η αγωγή των G+ ποντικών με τα στελέχη DC411, DC421, DC423 και 2035 είχε ως αποτέλεσμα τη βελτίωση τόσο των ιστοπαθολογικών συμπτωμάτων της εντεροπάθειας από γλουτένη όσο και ανοσοτροποποίηση όπως η αλλαγή του προτύπου παραγωγής κυτοκινών (TNFα, IFNγ, IL-10, IL-15) και IgA αντισωμάτων στον εντερικό βλεννογόνο.
description: Celiac disease (CD) is an autoimmune disease characterized by small bowel inflammatory disorder in genetically predisposed individuals. The inflammation is induced by gliadins (family of gluten), found in cereals. CD pathogenesis implicates the Th1 immune response, as well as autoantibodies against gliadin and tissue transglutaminase. So far, there is no specific therapeutic protocol for CD. We recently developed the first experimental animal model of CD in mice. The nutrition of mice with a gluten-free diet (G-) following their return in gluten-containing diet, leads to villous atrophy, increased title of anti-gliadin and anti-transglutaminase auto-antibodies in serum and increased cytokine and IgA production in the intestine : all those are clinical manifestations of CD. The potential probiotic immunomodulatory strain KK1 of Saccharomyces boulardii degrades the α fragment of wheat gliadin and ameliorates the symptoms of enteropathy. In this thesis we examined whether the treatment of G+ mice with potential probiotic Lactobacillus strains can ameliorate the clinical manifestations of enteropathy. Western blotting revealed that strains DC421, 2035 and DC411 degraded the α and γ fragments of gliadin, whereas strain DC423 degraded only the γ fragment. Treatment of G- mice with strains DC421 and 2035 resulted in a decrease in the production of TNFα in the intestine, whereas treatment of G+ mice with strains DC411, DC421, DC423 and 2035 resulted in the amelioration of CD histopathology. Furthermore, mice treated with the above strains demonstrated immunomodulatory activity concerning the cytokine (TNFα, IFNγ, IL-10 and IL-15) and IgA production in the intestine.