Προσδιορισμός γενοτοξικών προσμίξεων στη φεμπουξοστάτη με χρωματογραφία αερίου και ανιχνευτή σύλληψης ηλεκτρονίων μετά από δειγματοληψία από αέριο υπερκείμενο χώρο
Creators: name: Καβρέντζος, Αλέξανδρος Γεώργιος Κωνσταντίνου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2024
Subjects: Γενοτοξικές προσμίξεις
Δειγματοληψία από αέριο υπερκείμενο χώρο
Φεμπουξοστάτη
Genotoxic impurity
Headspace sampling
Febuxostat

description: Στο πλαίσιο αυτό, αναπτύχθηκε και επικυρώθηκε μια ευαίσθητη και εκλεκτική μέθοδος χρωματογραφίας αερίου με ανιχνευτή σύλληψης ηλεκτρονίων (GC-ECD) για τον ποσοτικό προσδιορισμό ίχνους πέντε γενοτοξικών προσμίξεων αλκυλοβρωμιδίων που περιέχονται στη φαρμακευτική δραστική ουσία (API) Φεμπουξοστάτη μετά από δειγματοληψία από αέριο υπερκείμενο χώρο (HS). Πολυπαραμετρικοί πειραματικοί σχεδιασμοί για τη βελτιστοποίηση των παραμέτρων της δειγματοληψίας από αέριο υπερκείμενο χώρο διεξήχθησαν σε δύο στάδια χρησιμοποιώντας κλασματικό παραγοντικό σχεδιασμό (FFD) και κεντρικό σύνθετο σχεδιασμό (CCD). Οι βέλτιστες συνθήκες του αέριου υπερκείμενου χώρου ήταν 5 λεπτά χρόνος εκχύλισης και 120°C θερμοκρασία εκχύλισης. Ο διαχωρισμός των προσδιοριζόμενων ενώσεων έναντι των αλογονούχων διαλυτών πραγματοποιήθηκε χρησιμοποιώντας τη τριχοειδή χρωματογραφική στήλη DB-624 της εταιρείας Agilent, διαστάσεων (30 m × 0,32 mm, 1,8 μm) υπό ισοθερμικές συνθήκες. Η μέθοδος επικυρώθηκε σύμφωνα με τις οδηγίες του Διεθνές Συμβουλίου Εναρμόνισης (ICH) όσον αφορά την εκλεκτικότητα, τη γραμμικότητα, τα όρια ανίχνευσης και ποσοτικοποίησης, την επαναληψιμότητα, την πιστότητα και την ακρίβεια. Η γραμμικότητα αξιολογήθηκε στο εύρος συγκεντρώσεων 5-150% του ορίου προδιαγραφής. Οι τιμές των ορίων ανίχνευσης (LOD) και ποσοτικοποίησης (LOQ) κυμάνθηκαν στο εύρος 0,003-0,009 και 0,01-0,03 μg/mL, αντίστοιχα. Όσον αφορά την ακρίβεια της μεθόδου (εκφρασμένη ως σχετική ανάκτηση) τα ποσοστά ανάκτησης των γενοτοξικών προσμίξεων κυμάνθηκαν στο εύρος 81,5-118,2%, ενώ η επαναληψιμότητα (intraday precision) και η πιστότητα (inter-day precision) ήταν μικρότερες από 9,9% σε όλες τις περιπτώσεις. Το επικυρωμένο αναλυτικό πρωτόκολλο εφαρμόστηκε με επιτυχία για τον προσδιορισμό των προσμίξεων σε διάφορες παρτίδες δειγμάτων της φαρμακευτικής δραστικής ουσίας Φεμπουξοστάτης.
description: Herein, a sensitive and selective gas chromatography-electron capture detector (GC-ECD) method was developed and validated for the quantification of trace levels of five bromo-containing genotoxic impurities in Febuxostat active pharmaceutical ingredient (API) after headspace sampling (HS). Multivariate experimental designs for the optimization of static headspace parameters were conducted in two stages using fractional factorial design (FFD) and central composite design (CCD). The optimum headspace conditions were 5 min of extraction time and 120 oC of extraction temperature. Baseline separation on the analytes against halogated solvents were carried out using an Agilent DB-624 (30m × 0.32 mm I.D., 1.8 μm film thickness) stationary phase under isothermal conditions. The method was validated according to ICH guidelines in terms of specificity, linearity, the limits of detection and quantification, precision and accuracy. The linearity was assessed in the range of 5-150% with respect to the specification limit. The achieved LOD and LOQ values ranged between 0.003-0.009 and 0.01-0.03 μg mL-1, respectively. The accuracy of the method (expressed as relative recovery) was in the range of 81.5-118.2% while the precision (repeatability, inter-day) was less than 9.9% in all cases. The validated analytical protocol has been successfully applied to the determination of the impurities in various Febuxostat API batch samples.