Διερεύνηση των βακτηριακών προκλήσεων με Vibrio alginolyticus στο είδος Mytilus galloprovincialis και διερεύνηση του μικροβιακού φορτίου του θαλάσσιου δίθυρου Pinna nobilis στον ελλαδικό χώρο
Creators: name: Λάττος, Αθανάσιος Δημητρίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2021
Subjects: Απλοσπορίδια
Πίνα
Βακτήρια
Haplosporidium pinnae
Pinna nobilis
Pathogens

description: Το πρωτόζωο Haplosporidium pinnae καθώς και είδη Μυκοβακτηρίων αποτελούν παρασιτικά είδη στα δίθυρα-μαλάκια, έχοντας μάλιστα εντοπιστεί για πρώτη φορά στον Θερμαϊκό κόλπο και στην Ελλάδα αντίστοιχα στη συγκεκριμένη εργασία. Τα τελευταία χρόνια το απειλούμενο με εξαφάνιση είδος Pinna Nobilis έχει υποστεί μεγάλη θνησιμότητα στη Μεσόγειο θάλασσα, που προκάλεσε απώλειες ως και το 90% των πληθυσμών του είδους, οι οποίες έχουν συνδεθεί με λοιμώξεις που προκαλούν οι συγκεκριμένοι παθογόνοι οργανισμοί. Στην Ελλάδα καταγράφηκαν τελευταία δύο περιπτώσεις μαζικής θνησιμότητας του είδους P. nobilis στον κόλπο της Καλλονής στην Λέσβο και στο νησί της Λήμνου. Στην συγκεκριμένη μελέτη ερευνήθηκαν και οι δύο παθογόνοι σε τρεις περιοχές δειγματοληψίας χρησιμοποιώντας μεθόδους ιστολογικές και μοριακές για τον εντοπισμό και την ταυτοποίηση των παθογόνων. Επιπλέον έγινε ποσοτικοποίηση του DNAπου ανιχνεύθηκε, με σκοπό την σύγκριση της παρουσίας των παθογόνων μεταξύ των δειγμάτων, χρησιμοποιώντας ποσοτική RT-PCR. Οι ιστοπαθολογικές εξετάσεις έδειξαν ως αποτέλεσμα την παρουσία Μυκοβακτηρίων παράλληλα με την ύπαρξη Απλοσποριδίων, το οποίο ανιχνεύθηκε σε όλες της καταγεγραμμένες θνησιμότητες στη Μεσόγειο. Το πρωτόζωο παράσιτο H. pinnaeστις περιπτώσεις που εντοπίστηκε, εμφανίστηκε σε όλα τα αναπτυξιακά του στάδια και περισσότερο στο επιθήλιο του πεπτικού αδένα. Η φυλογενετική ανάλυση επιβεβαίωσε την ταξινόμηση του Απλοσποριδίου που εντοπίστηκε ως το Haplosporidum pinnaeπου περιγράφηκε πρόσφατα ενώ απέτυχε να ταυτοποιήσει σε επίπεδο είδους τα Μυκοβακτήρια που εντοπίστηκαν. Τα Μυκοβακτήρια εντοπίστηκαν σε όλα τα δείγματα που εξετάστηκαν, ενώ σε αντίθεση το H. pinnaeδεν εντοπίστηκε σε όλα τα δείγματα. Ενδιαφέρον παρουσιάζει, ότι τα δείγματα P. nobilis που προήλθαν από τον Θερμαϊκό κόλπο, ο οποίος παρουσιάζει εξαιρετικά αποτελέσματα παραγωγής δίθυρων-μαλακίων, δεν έφεραν κλινικά συμπτώματα παρόλο που το DNAτων παθογόνων εντοπίστηκε στον πληθυσμό του Θερμαϊκού κόλπου σε μεγαλύτερη συγκέντρωση. Πέραν τούτου τα δείγματα που προήλθαν από το Θερμαϊκό κόλπο, εμφάνισαν φλεγμονώδεις αποκρίσεις παρόμοιες με αυτές τον ετοιμοθάνατων ατόμων που προήλθαν από τις δειγματοληψίες στις υπόλοιπες περιοχές
description: Mycobacterium sp. and Haplosporidium pinnae constitute invasive parasite species of bivalves, reported for the first time in the present study in the Aegean Sea and Thermaikos Gulf, respectively. During the last years, the endangered fan mussel (Pinna nobilis) experienced several mortality events in the Mediterranean Sea that caused deaths to 90% or more of their populations and have been attributed to infections by these pathogens. In Greece, two mass mortality events have been recently reported, namely in the Gulf of Kalloni and in Limnos island. In the present study we investigated the presence of both pathogens in P. nobilis from these marine areas as well as from Thermaikos Gulf using both histopathological microscopy and molecular markers. The detected parasite DNA was further quantified in the three populations utilizing a real time qPCR. Histopathological results indicated the presence of a Mycobacterium species alongside with the existence of the Haplosporidian parasite, which was identified in all mortality events in the Mediterranean Sea. The parasite was present in different phases mostly on the digestive gland epithelium. Phylogenetic analysis confirmed the taxonomy of the Haplosporidian parasite as the recently described Haplosporidium pinnae, whereas it failed to identify the Mycobacteria parasite at species level. While Mycobacterium sp. was detected in all examined specimens, H. pinnae was not detected in all diseased fan mussels. Interestingly, monitoring of P. nobilis population from Thermaikos Gulf, an estuary of extremely high importance for bivalve production, revealed the presence of both pathogens in a few specimens in higher quantity but with no symptoms of the disease. Besides, all the specimens from Thermaikos Gulf had inflammatory responses similarly to moribund specimens from mortality events.