Γενετικοί και μοριακοί παράγοντες συσχετίσεως λοιμώξεως από Ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού και γλαυκώματος:
Creators: name: Ζαβός, Χρήστος Κ.
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2010
Subjects: Ελικοβακτηρίδιο του πυλωρού
Γλαύκωμα
Απόπτωση
Ιστολογία
Helicobacter pylori
Glaucoma
Apoptosis
Histology

description: Πρόσφατα δεδομένα μας δείχνουν αυξημένη συχνότητα της Helicobacter pylori λοιμώξεως σε Έλληνες ασθενείς με πρωτοπαθές γλαύκωμα ανοικτής γωνίας (POAG), η θεραπεία εκριζώσεως έχει θετική επίπτωση στην διετή πορεία του γλαυκώματος και ο αυξημένος τίτλος των anti-H. pylori IgG αντισωμάτων στο υδατοειδές υγρό γλαυκωματικών ασθενών δυνατόν να αντανακλά την βαρύτητα της γλαυκωματικής βλάβης. Σκοπός της διατριβής ήταν: (1) να επιβεβαιωθεί σε νέο δείγμα ασθενών η αρχική διαπίστωση ότι υφίσταται αυξημένη συχνότητα H. pylori λοιμώξεως σε ασθενείς με POAG, (2) να διερευνηθεί τυχόν εντόπιση του H. pylori σε οφθαλμικό ιστό (in situ), (3) να ελεγχθεί η υπόθεση ότι η απόπτωση δυνατόν να αποτελεί κοινό παθογενετικό μηχανισμό, εκτιμώντας ογκογονίδια, ογκοκατασταλτικά γονίδια ή αντι-αποπτωτικές πρωτεΐνες, και κυτταρικούς δείκτες ανοσιακής επιτηρήσεως, (4) να διερευνηθεί πιθανή γενετική επίπτωση στην εκδήλωση των δύο νόσων εκτιμώντας τη συσχέτιση των HLA αντιγόνων/αλληλίων στους ασθενείς με γλαύκωμα και H. pylori λοίμωξη, και (5) να διερευνηθεί ο ρόλος του οξειδωτικού στρες στην παθογένεια των δύο νόσων. Στην παρούσα μελέτη συμπεριελήφθησαν 51 ασθενείς που υπεβλήθησαν σε τραμπεκουλεκτομή εξαιτίας POAG που δεν απαντούσε σε τοπική αντι-γλαυκωματική αγωγή. Η παρουσία της H. pylori λοιμώξεως διαπιστώθηκε ιστολογικώς, ή με δοκιμασία ουρίας αναπνοής σε 8 ασθενείς που δεν κρίθηκαν ικανοί ή αρνήθηκαν να υποβληθούν σε ενδοσκόπηση ανωτέρου πεπτικού. Στην ομάδα των μαρτύρων συμπεριελήφθησαν 35 ασθενείς με ήπια σιδηροπενική αναιμία οι οποίοι επίσης υπεβλήθησαν σε ενδοσκόπηση ανωτέρου πεπτικού και ιστολογική εξέταση για παρουσία H. pylori λοιμώξεως. Επιπλέον, στους POAG ασθενείς, εκτιμήθηκαν: α) με ανοσοϊστοχημεία η έκφραση των ογκογονιδίων p53, Ki-67, Bcl-2 και παράμετροι των T-λεμφοκυττάρων (UCHL-1) (CD20) και B-λεμφοκυττάρων (CD20), β) οι ιντερλευκίνες -1β, -2, -6, -8, -10, η ιντερφερόνη-γ, ο tumor necrosis factor-α και η ενδοθηλίνη-1 του ορού με ELISA, γ) οι HLA υπότυποι με τεχνικές PCR και δ) οι δραστικοί μεταβολίτες οξυγόνου (ROMs) με σπεκτροφωτομετρία. Από την ανάλυση των ευρημάτων διαπιστώσαμε: Ι. Παρουσία H. pylori λοιμώξεως ιστολογικώς ή με δοκιμασία ουρίας αναπνοής σε μεγάλη αναλογία των ασθενών μας με POAG (84,3%). ΙΙ. Ιστολογική παρουσία H. pylori βακτηρίων σε 5 ασθενείς σε δείγματα βιοψιών από σκληροκερατοειδικό διηθητικό ηθμό (trabeculum) και ίριδα. ΙΙΙ. Θετική έκφραση UCHL-1 στο σύνολο των POAG ασθενών με H. pylori λοίμωξη και θετική έκφραση CD20 έκφραση μόνο σε έναν POAG ασθενή με H. pylori λοίμωξη. IV. Υπερέκφραση των Ki-67, p53 και Bcl-2 στο 19%, 25% και 37,5%, αντίστοιχα, των ασθενών με POAG και H. pylori λοίμωξη. V. Παρουσία κυτταροκινών ορού που δεν διέφεραν σημαντικά μεταξύ H. pylori θετικών και αρνητικών ασθενών. VΙ. Σημαντικά συχνότερη παρουσία υποτύπων HLA-A33 και HLA-B35 σε σύγκριση με υγιή πληθυσμό και συχνότερα αλλήλια HLA-DQB1*0301 και HLA-DQA1*0505 στους POAG ασθενείς της μελέτης. VIΙ. Σημαντική αύξηση των ROMs στους H. pylori-θετικούς έναντι των H. pylori-αρνητικών POAG ασθενών. Τα ευρήματα αυτά δείχνουν ότι H. pylori βακτήρια ανιχνεύονται ιστολογικώς σε δείγματα βιοψιών του διηθητικού ηθμού και ίριδας POAG ασθενών που σε συνδυασμό με την εντόπιση της λοιμώξεως στην γαστρεντερική οδό πιθανόν να επάγουν χυμικές και κυτταρικές ανοσιακές αποκρίσεις οι οποίες συμβάλλουν με ποικίλους μηχανισμούς στην παθοφυσιολογία του POAG όπου πιθανόν εμπλέκονται γονίδια αποπτωτικά ή αντιαποπτωτικά, κυρίως T-λεμφοκύτταρα, κυτταροκίνες, οξειδωτικό στρες και γενετικοί παράγοντες.
description: Our recent data show a high prevalence of Helicobacter pylori infection in Greek patients with primary open-angle glaucoma (POAG), H. pylori eradication benefits glaucoma progression, and the elevated H. pylori-specific IgG antibody concentration found in the aqueous humor of POAG patients correlated with the degree of vertical cupping, possibly indicating the severity of glaucomatous damage. The aim of the present thesis was: (1) to reconfirm in a new POAG cohort the initial evidence that an increased prevalence of H. pylori infection is found in POAG patients, (2) to investigate the potential presence of H. pylori infection in ophthalmic tissue obtained from POAG patients during trabeculectomy (in situ), (3) to test the hypothesis that apoptosis may be a common pathogenetic mechanism of both diseases, by assessing oncogenes, oncosuppressive genes related to apoptosis or anti-apoptotic proteins, and cellular immune markers, (4) to investigate possible genetic factors associated with both diseases, by investigating the relationship between HLA antigens/alleles in patients with POAG and H. pylori infection, and (5) to investigate the role of oxidative stress in the pathogenesis of these two diseases. In the present study, 51 patients, who underwent trabeculectomy for POAG not responsive to topical anti-glaucoma therapy, were included. Presence of H. pylori was established by histology, or urea breath test in 8 patients not eligible or who refused to undergo endoscopy. Thirty-five participants with mild iron-deficiency anemia who underwent upper gastrointestinal endoscopy and histologic examination for H. pylori presence served as controls. Moreover, in POAG patients we evaluated: (a) the expression of oncogenes p53, Ki-67, Bcl-2, and parameters of T-lymphocytes (TLs) (UCHL-1) and B-lymphocytes (BLs) (CD20) by immunohistochemistry; (b) serum interleukins -1β, -2, -6, -8, -10, interferon-γ, tumor necrosis factor-α and endothelin-1 by ELISA; (c) HLA subtypes by PCR techniques; and (d) reactive oxygen metabolites (ROMs) by spectrophotometry. Our results show that: Ι. H. pylori infection was detected histologically or by urea breath test in a high rate of our POAG patients (84.3%). ΙΙ. H. pylori was detected in biopsy specimens from the trabeculum and iris of 5 POAG patients. ΙΙΙ. UCHL-1 was positively expressed in all, and CD20 was positively expressed only in one POAG patient with H. pylori infection. IV. Ki-67, p53 and Bcl-2 were over-expressed in 19%, 25% and 37.5%, respectively, of the POAG patients with H. pylori infection. V. Cytokine levels in serum did not differ statistically between H. pylori-positive and negative POAG patients. VΙ. HLA-A33 and HLA-B35 were statistically more frequent compared to a healthy population, and HLA-DQB1*0301 and HLA-DQA1*0505 were more frequent in this POAG cohort. VII. ROMs were significantly more increased in H. pylori-positive than in H. pylori-negative POAG patients. These results show that H. pylori bacteria are detected histologically in biopsy specimens obtained from the trabeculum and iris of POAG patients that, together with the presence of the infection in the gastrointestinal tract, may induce humoral and cellular immune responses, possibly suggesting a role of various apoptotic or anti-apoptotic genes, mainly TLs, cytokines, oxidative stress and genetic factors in the POAG pathophysiology.