Επίδραση της σηματοδότησης μέσω ουβικιτίνης στην ενεργοποίηση κυττάρων της έμφυτης ανοσίας
Creators: name: Ρελάκης, Κωνσταντίνος Γεωργίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2023
Subjects: Κυλινδρομάτωση
Αποουβικουϊτινυλίωση
Ρύθμιση προφλεγμονωδών αντιδράσεων
CYLD
Deubiquitination
Proinflammatory responses regulation

description: Η πρωτεΐνη CYLD αποτελεί μέλος μιας οικογένειας ενζύμων αφαίρεσης γραμμικών πολυμερών ουβικουϊτίνης (DeUBquitinases, DUBs) που δημιουργούνται κυρίως μέσω ακολουθίας διασυνδέσεων λυσίνης στη θέση 63 (Κ63) ή αμινοτελικώνμεθειονινών (M1). Τα γραμμικά πολυμερή ουβικιτίνης εντοπίζονται σε πρωτεΐνες σηματοδότησης και δρουν ως ικριώματα ενίσχυσης/εξειδίκευσης ενδοκυτταρικών σηματοδοτήσεων ενώ η επιλεκτική αφαίρεση τους από DUBs καταστέλλει αυτές τις σηματοδοτήσεις. Ένα σύνολο σημαντικών βιβλιογραφικών αναφορών υποστηρίζει ότι η CYLD παίζει καθοριστικό ρόλο στη ρύθμιση των φλεγμονωδών αποκρίσεων που σχετίζονται με τη σηματοδότηση των υποδοχέων Toll-like (TLR) και Παραγόντων Νέκρωσης Όγκων (TNFreceptors). Αναφορικά με το ρόλο της στα κύτταρα της έμφυτης ανοσίας, η CYLD παρουσιάζεται ως πρωτεΐνη αντιφλεγμονώδους δράσης μέσω της μειορύθμισης του φλεγμονώδους μεταγραφικού παράγοντα NF-κΒ. Από την άλλη, η CYLD εμπλέκεται και στην υποστήριξη προγραμματισμένης νέκρωσης η οποία ενδέχεται να ενισχύει την ακολουθία των φλεγμονών. Παρά ταύτα η ανάλυση των δράσεων της σε κύτταρα της έμφυτης ανοσίας παραμένει ελλιπής. Η παρούσα εργασία επικεντρώθηκε στην ενδελεχή ανάλυση των λειτουργειών της CYLD προς την ενεργοποίηση των μακροφάγων κυττάρων. Για το σκοπό αυτό απομονώθηκαν μακροφάγα από διαγονιδιακά μυελικά μεταλλάγματα απώλειας των λειτουργειών της CYLD σε μύες. Ακολούθως αναλύθηκαν ως προς τις αντιδράσεις τους exvivo, και σε σήματα που καθοδηγούν κλασσικούς προφλεγμονώδεις, εναλλακτικούς/ανοσορυθμιστικούς ή μεικτούς φαινοτύπους τους. Τα παραχθέντα αποτελέσματα επιβεβαιώνουν τις δράσεις της CYLD στην προγραμματισμένη νέκρωση. Δεν συμφωνούν όμως με τις θεωρήσεις ως προς τις αντιφλεγμονώδεις δράσεις της. Αντίθετα, υποδεικνύουν ότι, στα μακροφάγα, η CYLD είναι απαραίτητη για τον προφλεγμονώδη καθορισμό των αντιδράσεων τους έναντι των εναλλακτικών-μέσω μηχανισμών που αντιτίθενται ή δεν σχετίζονται με την μειορύθμιση στου NF-κΒ. Ως εκ τούτου, οι τρέχουσες υποθέσεις για τον ρόλο της CYLD-αλλά και των γραμμικών πολυμερών ουβικιτίνης - στις φλεγμονώδεις αντιδράσεις χρήζουν αναθεώρησης και περαιτέρω διερεύνησης.
description: CYLD is a member of a family of deubiquitinating enzymes (DUBs) which remove linear ubiquitin chains connected via lysines at position 63 (Κ63) or aminoterminalmethionines (M1). Linear ubiquitin chains are usually attached in signaling proteins to enhance or restrict intracellular signaling adaptation. Conversely, their removal by DUBs can debilitate specific intracellular signals. Current literature suggests that CYLD plays a regulatory role in inflammatory reactions by promoting the downregulation of signals emanating from Toll-like (TLRs) and TNF receptors. With respect to its involvement in innate immunity, CYLD is proposed to act in an anti-inflammatory fashion by blocking the adaptation of signals activating the inflammatory transcription factor NF-κΒ. On the other hand, CYLD is also involved in the support of necrotic programs which act to enhance inflammatory progression. Still, the analysis of CYLD’s activities in innate immune cells is not conclusive. This project focused on the thorough analysis of CYLD’s requirement in the activation of macrophages. For this, macrophages were derived from transgenic myeloid mutants of CYLD’s function in mice. Subsequently, such macrophages were analyzed ex vivo, for their responses in signals that promote classical inflammatory, alternative immunoregulatory or mixed phenotypes. The data produced agrees with CYLD’s involvement necrotic programs. However, they contrast with suppositions for its anti-inflammatory activities. Instead, the data suggest that, in macrophages, CYLD is required for the determination of pro-inflammatory and against alternative responses-via mechanisms that oppose or do not relate to its effects against the activation of NF-κΒ. As such, the current hypothesis on the involvement of CYLD -and of linear ubiquitin chains- in inflammatory reactions need to re-examined and revisited.