Μελέτη της έκφρασης του brain-derived neurotrophic factor (BDNF) σε CD4+CD25+ T-κύτταρα, CD4+CD25- T-κύτταρα και CD4- peripheral blood mononuclear cells (PBMCs), ασθενών με υποτροπιάζουσα μορφή πολλαπλής σκλήρυνσης, κατά τη διάρκεια των υποτροπών και στην ύφεση.
Creators: name: Μπούρα, Ευαγγελία Αθανασίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2007
Subjects: Πολλαπλή σκλήρυνση
Ρυθμιστικά Τ-λεμφοκύτταρα
Κορτικοστεροειδή
Νευροπροστασία
CD4_+ Τ-κύτταρα
Brain derived neurotrophic factor (BDNF)
Multiple sclerosis
Regulatory T-cells
CD4_+ T-cells
Corticosteroids
Neuroprotection

description: Στόχος: Ο σκοπός της παρούσας μελέτης είναι η εκτίμηση της έκφρασης του BDNF στα CD4+CD25+ ρυθμιστικά T-λεμφοκύτταρα, στα CD4+CD25- T-λεμφοκύτταρα και στα CD4- PBMCs, ασθενών με υποτροπιάζουσα μορφή πολλαπλής σκλήρυνσης (RRMS), κατά τη διάρκεια των υποτροπών και στην ύφεση. Η μελέτη στοχεύει επίσης στην ανίχνευση πιθανών διακυμάνσεων της παραγωγής BDNF από τα παραπάνω κύτταρα, οφειλόμενων στην αγωγή με κορτικοστεροειδή.Μέθοδοι: 10 ml περιφερικού αίματος συλλέχθηκαν από 8 ασθενείς RRMS, κατά τα εξής χρονικά στιγμιότυπα: στην υποτροπή (πριν την έναρξη του σχήματος κορτικοστεροειδών), μετά 5 ημέρες, μετά 30 ημέρες (χρόνος απομάκρυνσης των κορτικοστεροειδών από το σώμα) και 6 μήνες μετά την υποτροπή, κατά την ύφεση. Όλοι οι ασθενείς ελάμβαναν αγωγή με ιντερφερόνη β ((IFN-β). Συλλογή αίματος έγινε και από 7 υγιείς μάρτυρες, με αντίστοιχο φύλο και ηλικία. Αρχικά, έγινε ο εμπλουτισμός των CD4+ T-κυττάρων από κάθε δείγμα και ακολούθησε η απομόνωση των CD4+CD25+ T-κυττάρων και ο εμπλουτισμός των CD4- PBMCs, από το ίζημα που προέκυψε με τον εμπλουτισμό των CD4+ κυττάρων. Η εκτίμηση των πρωτεϊνικών επιπέδων του BDNF έγινε με Western blotting.Αποτελέσματα: Ο BDNF δεν ανιχνεύθηκε στα CD4+CD25+ και στα CD4+ CD25- κύτταρα, με την τεχνική του Western blotting. Στα CD4- PBMCs, η παραγωγή του BDNF δεν έδειξε στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ των διαφόρων χρονικών στιγμιοτύπων. Ωστόσο, τα επίπεδα του BDNF στην ύφεση έτειναν να είναι χαμηλότερα, σε σύγκριση με αυτά των υγιών μαρτύρων.Συμπεράσματα: Τα CD4+CD25+ αλλά και τα CD4+CD25- T-κύτταρα δε φαίνεται να εκφράζουν BDNF, τουλάχιστον σε επίπεδα ανιχνεύσιμα με Western blotting, κάτω από τις συγκεκριμένες πειραματικές συνθήκες. Τα κύτταρα CD4- τείνουν να παράγουν BDNF σε χαμηλότερα επίπεδα από αυτά των υγιών μαρτύρων, κατά τη διάρκεια της ύφεσης. Λόγω της απουσίας στατιστικά σημαντικών αποτελεσμάτων, δεν μπορούν να εξαχθούν συγκεκριμένα συμπεράσματα ως προς την τυχόν επίδραση των κορτικοστεροειδών στην έκφραση του BDNF από τα προαναφερθέντα κύτταρα.
description: Objectives: the aim of the present study is to assess the expression of BDNF in CD4+CD25+ regulatory T-lymphocytes, CD4+CD25- T-lymphocytes and CD4- PBMCs, from relapsing-remitting multiple sclerosis (RRMS) patients, during relapses and in remission. The study also aims to detect possible corticosteroid-induced variations in BDNF production by the above mentioned cells.Methods: 10 ml of peripheral blood were collected from 8 RRMS patients at the following time points: at relapse (before the beginning of the corticosteroid course), 5 days later, 30 days later (after corticosteroid clearance from the body) and 6 months after the relapse, in remission. All patients were treated with interferon-beta (IFN-β). Blood was also collected from 7 healthy age- and sex-matched controls. CD4+ T-cells enrichment from each sample was followed by CD4+CD25+ T-cells isolation from CD4+ T-cells and CD4- PBMCs enrichment, from the pellet that occurred from CD4+ T-cells enrichment. BDNF protein levels were estimated with Western blotting.Results: BDNF was not detectable in CD4+CD25+ or CD4+ CD25- T-cells, with Western blotting. In CD4- PBMCs, BDNF production showed no statistically significant differences, among the various time points. However, BDNF levels in remission tended to be lower, compared to those of healthy controls.Conclusions: CD4+CD25+, as well as CD4+CD25- T-cells, do not seem to express BDNF, at least at levels detectable with Western blotting, under the specific experimental conditions. CD4- cells tend to produce BDNF at lower levels than those of healthy controls, during remission. Due to the absence of statistically significant results, no definite conclusions can be conferred as to the influence of corticosteroids on BDNF levels.