Ανάπτυξη και επικύρωση μεθόδου προσδιορισμού έξι β-αναστολέων σε δείγματα ορού αίματος και ούρων με UHPLC-MS/MS, μετά από εκχύλιση FPSE
Creators: name: Μαζαράκη Κωνσταντίνα Χρήστου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2022
Subjects: β-αναστολείς
Υγρή χρωματογραφία
Carbowax
beta-blockers
Liquid chromatography

description: Σε αυτήν την έκθεση αναφέρεται η χρήση ενός νέου υφάσματος με carbowax λειτουργικότητα για την απομόνωση επιλεγμένων αναστολέων των β-αδρενεργικών υποδοχέων (β-blockers) από ανθρώπινο ορό και ούρα. Το διαπερατό υπόστρωμα κυτταρίνης τροποποιήθηκε με υβριδικό ανόργανο-οργανικό προσροφητικό sol-gel και χαρακτηρίστηκε μέσω φασματοσκοπίας υπερύθρων μετασχηματισμού Fourier (FTIR) και μικροσκοπίας σάρωσης ηλεκτρονίων (SEM). Λόγω την υψηλής μάζας των αναλυτών που μεταφέρονται στη μεμβράνη η εκχύλιση επιτυγχάνεται σε σχετικά σύντομο χρονικό διάστημα (15 λεπτά), ενώ η υψηλή διαπερατότητά της επιτρέπει την άμεση εκχύλιση βιολογικών δειγμάτων χωρίς καμία περαιτέρω προκατεργασία. Τα πλεονεκτήματα της εκχύλισης με τη χρήση αυτών των υφασμάτων αξιοποιήθηκαν για τον προσδιορισμό έξι β-αναστολέων (ατενολόλη, ναδολόλη, μετοπρολόλη, οξπρενολόλη, λαμπεταλόλη και προπρανολόλη) σε βιολογικά υποστρώματα σε συνδυασμό με UHPLC-ESI-MS/MS. Μετά την επιλογή του κατάλληλου υποστρώματος (sol-gel Carbowax 20M) διερευνήθηκαν συστηματικά διάφορες σημαντικές παράμετροι όπως: ο χρόνος εκχύλισης, ο όγκος του δείγματος, το μέγεθος του υφάσματος για την απορρόφηση, ο διαλύτης έκλουσης κλπ. που επηρεάζουν την απόδοση της εκχύλισης. Χρησιμοποιήθηκε θετικός ιονισμός με ηλεκτροψεκασμό και οι φαρμακευτικές ουσίες ποσοτικοποιήθηκαν χρησιμοποιώντας λειτουργία παρακολούθησης πολλαπλών αντιδράσεων (MRM). Η γραμμικότητα της μεθόδου αξιολογήθηκε σε εύρος 50-5000 ng mL-1 με την κατασκευή σταθμισμένων (1/Χ) καμπυλών για την βαθμονόμηση του υποστρώματος. Η ακρίβεια εντός της ίδιας ημέρας, αλλά και μεταξύ διαφορετικών ημερών κυμαινόταν μεταξύ 13,3 εώς και 17,2% και 10,8 εώς και 12,6% αντίστοιχα. Η επαναληψιμότητα εντός της ίδιας ημέρας και μεταξύ διαφορετικών ημερών ήταν μικρότερη από 11,5 και 14,5% αντιστοίχως. Το προτεινόμενο αναλυτικό σχέδιο εφαρμόστηκε με επιτυχία για τον προσδιορισμό των επιλεγμένων φαρμάκων σε ανθρώπινο ορό και ούρα
description: In this report, the utilization of a novel carbowax-functionalized fabric material for the isolation of selected beta-blocker drugs from human serum and urine was reported. The permeable cellulose substrate was modified with sol-gel hybrid inorganic-organic sorbent and characterized by means of Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and electron scanning microscopy (SEM). Due to the high mass transfer of the analytes on the membrane, the extraction is accomplished in relatively short time (15 min) while its high permeability permits the direct extraction of biological samples without any other pretreatment. The advantages of the fabricated extraction media were exploited for the determination of six beta-blockers (namely atenolol, nadolol, metoprolol, oxprenolol, labetalol and propranolol) in biological matrixes in combination with UHPLC-ESI-MS/MS. After the selection of the appropriate fabric material (sol-gel Carbowax 20M), important parameters including extraction time, sample volume, sorbent size, elution solvent, etc affecting the performance of the extraction were systematically investigated. Positive electrospray ionization was utilized and the drugs were quantitated using multi-reaction monitoring (MRM) mode. The linearity of the method was evaluated in the range of 50 – 5000 ng mL-1 by constructing weighted (1/X) matrix-matched calibration curves. The intra-day and inter-day accuracy were ranged between – 17.2 to 13.3% and – 10.8 to 12.6%, respectively. The intra-day and inter-day precision were less than 11.5 and 14.5 %, respectively. The proposed analytical scheme was successfully applied to the determination of the target drugs in human serum and urine