title: Auswirkung von antimikrobiellen Substanzen (Antibiotika) auf Biofilme von Staphylococcus aureus und Koagulase –negative Staphylokokken unter differentiellen Umweltbedingungen
Creators: name: Halimi, Jollmas
Publisher: name: :none
Year: 2012

description: Studien haben gezeigt, dass Staphylokokken (S. aureus und S. epidermidis) in den letzten drei Jahrzehnten zu den häufigsten Verursachern von verschiedenen Infektionen zählten, und ein weltweites Problem bei der Therapie während der Behandlung der Patienten, ist die zunehmende Resistenzhäufigkeit gegenüber Antibiotika. Ziel dieser Studie war den Unterschied in der Wirkungsstärke zwischen Vancomycin und Telavancin auf Biofilme von S.aureus und S.epidermidis zu untersuchen. In der vorliegenden Studie wurden die Keime (klinische Isolaten) der Gattung Staphylococcus (S. aureus und S. epidermidis) untersucht, wobei die Zahl der Keime gleich waren, 50 Prozent der verwendeten Isolate waren Staphylococcus aureus und 50 Prozent waren Staphylococcus epidermidis. Um die Empfindlichkeit von Staphylococcus aureus und Staphylococcus epidermidis gegenüber Antibiotika zu testen, wurden fünf Antibiotika (Vancomycin, Daptomycin, Linezolid, Tigecyclin, und Telavancin) verwendet. Es wurden die Empfindlichkeitstests gegenüber Antibiotika mit Standardlabormethoden durchgeführt, bezogen auf die Empfehlungen des National Committee on Clinical and Laboratory Standards (CLSI – Clinical and Laboratory Institute) (M02 – A6). Quantitative Aussagen zur Antibiotikaempfindlichkeit von klinischen Isolaten lieferten Untersuchungen zur minimale Hemmkonzentration (MHK). Dabei wurde die antimikrobielle Aktivität der verwendeten Antibiotika gemessen, indem man die niedrigste Konzentration des Antibiotikums ermittelt, die das Wachstum eines klinischen Isolates hemmt. Für die Untersuchung der Biofilme wurde eine standardisierte Form der Biofilmzüchtung verwendet. Die Biofilme wurden mit Hilfe eines statischen Flachboden – Mikrotiterplatten Modell, das von Christensen et al. 1985 (70) etabliert wurde, untersucht. Für die Auswirkung von Vancomycin und Telavancin auf die etablierten Biofilme der klinischen Isolate zu testen, wurden die Biofilme mit vier verschiedenen Antibiotikakonzentrationen (0,5µg/ml, 1µg/ml, 5µg/ml und 20µg/ml) inkubiert, und nach 18 – 24 Stunden Inkubationszeit wurden Biofilme am Boden der Näpfchen gebildet. In dieser Studie wurden Biofilmdichten mittels eines Mikrotiterplatten-Reader (Anthos Zenyth 340 S) bei einer Wellenlänge von 550 nm quantifiziert (Extinktion gemessen). Zwischen Biofilmdichten die mit Vancomycin bzw. Telavancin behandelt worden sind, wurden Vergleiche gemacht, und der Unterschied zwischen Biofilmdichten in Gegenwart der beiden Antibiotika bei 35°C bzw. 45°C ausgewertet. Es wurden auch Lebendkeimzahlzählungen (Wachstumskontrollen) durchgeführt. Bevor die behandelten Biofilme fixiert wurden, wurden mittels physiologischer Kochsalzlösung von den Böden der Näpfchen gelöst und darin resuspendiert. Von diesen Bakteriensuspensionen wurden dann Proben auf Mueller – Hinton – 2 – Agarplatten aufgetropft. Als Referenz für die Wachstumskontrolle dienten jeweils eine Bakteriensuspension eines unbehandelten Bakteriums und ein Leerwert, die auch auf den Platten mitgeführt wurden. Die Platten wurden für 44 – 48 Stunden (bei 35°C bzw. 45°C) inkubiert. Nach 44 – 48 Stunden Inkubationszeit im Brutschrank wurde die Lebendkeimzahlbestimmung von allen Kolonien bestimmt und die Ergebnisse protokolliert.