title: Klonale Vermehrung der mongolischen Arzneipflanze Lancea tibetica Hook. f. et Thoms
Creators: name: Prenner, Katrin
Publisher: name: :none
Year: 2015

description: In der vorliegenden Arbeit wurde der Einfluss der Cytokinine BAP und Kinetin in den Konzentrationen 0,5 μM, 1 μM und 5 μM in MS Medien auf die Vermehrung verschiedener Genotypen von Lancea tibetica analysiert. Auf den BAP-haltigen Medien zeigte sich besonders oft Kallusbildung, und es kam kaum zu Sprossregenerierung. Die spärlich gebildeten Nodien, maximal 2 pro Explantat, waren aufgrund der glasigen, filigranen Morphologie oft für eine Subkultivierung ungeeignet. BAP schien daher für eine Vermehrung von L. tibetica weniger geeignet zu sein. Das Cytokinin Kinetin war dem Wuchsstoff BAP deutlich überlegen. Vor allem nach einer längeren Kultivierungsperiode von 11 Wochen wurden signifikant mehr Sprosse pro Nodium (5 - 8 im Gegensatz zu 0,5 - 0,8 Sprossen nach 7 Wochen Kultur) gebildet. Der Anteil an hyperhydratisierten Sprossen war allerdings auch nach 11 Wochen verhältnismäßig hoch. Kallusbildung trat weniger häufig auf. Die für die Versuche eingesetzten Genotypen zeigten unter Einfluss von BAP und Kinetin ein ähnliches Wachstumsverhalten. Zur Bewurzelung von Sprossen wurden Versuche mit dem Auxin NAA in den Konzentrationen von 1 μM und 5 μM in MS-Medien unternommen. Bei Einsatz von 5 μM NAA blieb die Wurzelbildung aus, es bildeten sich nur Kalli. Das Medium mit 1 μM NAA führte zur Regenerierung von Wurzeln, diese waren kürzer und dicker als Wurzeln, die auf Medien ohne Auxin generiert wurden. Bei den untersuchten Klonen betrug die Bewurzelungsrate auf Medien ohne NAA über 45 %, und die Wurzeln waren mit 18 – 25 mm signifikant länger als bei Bewurzelung auf NAA-Medien. Die Pulsbehandlung mit IBA resultierte in einer Bewurzelungsrate von 50 %, wobei der Zusatz von Aktivkohle zum Nährmedium keinen Einfluss hatte. Die Pulsbehandlung mit NAA induzierte das Wachstum von hyperhydratisierten Sprossen. Da diese die Akklimatisierung nicht überlebten, scheint NAA für die Bewurzelung über Pulsbehandlung nicht geeignet zu sein. Ein erster Akklimatisierungsversuch wurde mit einem Torf-Perlit–Substrat in einem Folientunnel bei einer anfänglichen Luftfeuchtigkeit von 80 % durchgeführt, innerhalb einer Woche verbräunten hier der Großteil der Explantate. Ein weiterer Versuch erfolgte in einem Mini-Gewächshaus bei reduzierter Substratfeuchtigkeit, die Pflanzen überlebten dort mit 18 Tagen schon etwas länger. Es konnten so erste Erkenntnisse zur Akklimatisierung von in vitro-vermehrten Pflanzen von Lancea tibetica gewonnen werden.
description: In the present thesis the influence of the cytokinins BAP and Kinetin in concentrations of 0.5 μM, 1 μM and 5 μM in MS media on the propagation of various genotypes of Lancea tibetica was investigated. On the media containing BAP the cultures exhibited excessive hyperhydration and callusing with poor shoot regeneration. In average, only two nodes per explant were regenerated and glassy filigreed morphology reduced the suitability for subcultivation. The results indicated that BAP is not an appropriate growth regulator for the multiplication of L. tibetica. The cytikinin kinetin proved to be more effective than BAP. While 0.5 - 0.8 shoots per node were detect on media with kinetin after a cultivation period of 7 weeks, significantly more shoots (5-8 shoots per node) were regenerated after a prolonged subculture of 11 weeks. On the other hand, no significant change was observed in the amount of hyperhydratisation which remained at a high level. Callusing did not occur as frequently as on media containing BAP.The genotypes used in the experiments responded in a similar way to BAP and kinetin. For rooting we investigated the effects of the auxin NAAat concentrations of 1 μM or 5 μM in MS media. No roots were formed with 5 μM NAA, but callus formation was induced. In contrast, on medium with 1 μM NAA roots were regenerated which were thicker and shorter than those generated on auxin-free medium. On auxin-free medium the rooting percentage was higher than 45 % with all genotypes, and the length of the roots was significantly longer (18 – 25 mm) than on media with NAA. Shoots which were pulse treated with IBA showed a rooting frequency of 50 %, the addition of charcoal to the nutrient medium did not have a significant influence. A pulse treatment with NAA led to hyperhydrated shoots which didn´t survive the hardening stage. Therefore NAA does not seem to be suitable for efficient rooting. A first experiment for acclimatization was performed using a peatperlite substrate in a polytunnel with automatic misting at an initial relative humidity of 80 %. However, most of the plants didn’t survive the hardening and died during the first week. Thus we tried the hardening in a mini-greenhouse with reduced watering of the substrate. Indeed the plants survived for 18 days which was longer than in the polytunnel. Thus, first insights into the hardening requirements of in vitro propagated Lancea tibetica plantlets could be gained.