MOLECULAR BIOMARKERS OF WELFARE IN POULTRY
Creators: name: TOMAS MARQUES, ANDREIA FILIPA
Publisher: name: Universit� degli Studi di Milano
Year: 2017

description: La tesi si propone di esplorare il rapporto tra stress e risposta immunitaria nel pollame, concentrandosi su proteine di fase acuta (APPs) e microRNA (miRNAs) come biomarcatori per il transporto e le malattie correlate a stress. Abbiamo lavorato su due specie di pollame, tacchino e pollo. Il tacchino (Meleagris gallopavo) � stato studiato in modo da fornire nuove informazioni in merito a questa specie, che � scarsamente caratterizza per quanto riguarda l'immunit� e il benessere. Gli studi esistenti relativi alle specie aviarie sono stati effettuati sul pollo (Gallus gallus) e per completare le informazioni disponibili in letteratura, abbiamo descritto l'espressione extraepatica delle APPs in questa specie. Sono stati indagati gli effetti dello stress correlati al trasporto, studiando l?espressione genica di quattro APPs nel fegato e nel tessuto adiposo: ?1-acid glycoprotein (AGP), Serum Amyloid A (SAA), PIT54 (Haptoglobin-like) and C-Reactive Protein (CRP). L'espressione di mRNA di AGP e CRP � risultata essere aumentata nel fegato e nel tessuto adiposo degli uccelli dopo il trasporto su strada. � stata confermata la presenza della proteina AGP. Inoltre, l'espressione delle stesse APPs � stata studiata anche nella patologia causata dal virus della enterite emorragica (HEV) e associata allo stress. Come risultati preliminari, l'espressione di mRNA di AGP, PIT54 e SAA era aumentata nel fegato e nel tessuto adiposo di uccelli HEV positivi; al contrario, l'espressione di CRP era ridotta nel digiuno di uccelli HEV-positivi. Questi risultati hanno dimostrato che il trasporto su strada e la malattia HEV inducono l'espressione di mRNA di AGP, PIT54, SAA e CRP, suggerendo il loro uso come biomarcatori del welfare nel tacchino. Sebbene le APPs siano prodotte principalmente dal fegato, la produzione extraepatica � stata descritta in molte specie, ma non nel pollame. L'espressione e la localizzazione delle cinque APPs (AGP, SAA, PIT54, CRP e OVT) � stata studiata in 20 diversi tessuti di polli sani. L?espressione di mRNA di SAA, OVT e CRP era particolarmente elevata nel tratto gastrointestinale, nelle vie respiratorie e nel sistema linfatico. Le proteine AGP e OVT sono state trovate in diversi organi. Inoltre, l'espressione di cinque miRNAs (miR-22, miR-155-5p, miR-181a-3p, miR-204 e miR-365-3p) � stata studiata nei tacchini in condizioni di stress legate al trasporto. Il livelli di espressione di miR-22, miR-155 e miR-365 erano aumentati, suggerendo il loro utilizzo per discriminare animali stressati e non stressati. Per caratterizzare meglio la malattia e individuare una possibile fonte di biomarcatori, � stato determinato anche il proteoma intestinale dei tacchini per studiare gli effetti della malattia HEV sulla mucosa intestinale. Sono state identificate 523 proteine utilizzando la strategia di SWATH-MS confrontando tacchini sani e malati e 64 proteine sono risultate essere differenzialmente espresse. � stata quindi validata l?espressione genica di quindici proteine correlate con il sistema immunitario. Questi risultati possono aiutare a comprendere meglio l'effetto di HEV nei tacchini.