GENETIC LCAT DEFICIENCY AND ATHEROSCLEROSIS: STUDIES ON ENDOTHELIAL CELLS AND MONOCYTES
Creators: name: PAVANELLO, CHIARA
Publisher: name: Universit� degli Studi di Milano
Year: 2018

description: Introduzione La lecitin:cholesterol aciltransferasi (LCAT) � l?unico enzima nell?uomo in grado di esterificare il colesterolo nel plasma. Il deficit genetico di LCAT influenza il metabolismo delle lipoproteine ad alta densit� (HDL), portando a concentrazioni plasmatiche ridotte di queste lipoproteine. Si ritiene che LCAT sia un?importante driving force per il trasporto inverso del colesterolo (RCT) nei macrofagi e che pertanto giochi un ruolo importante nell?ateroprotezione. Nonostante i bassi livelli plasmatici di HDL-C, il grado di aterosclerosi preclinica non � risulta aumentato nel deficit di LCAT che addirittura sembra essere protettivo. Abbiamo quindi ipotizzato che questa discrepanza potesse essere spiegata da un aumento della funzionalit� delle particelle HDL che sono pi� efficienti nel proteggere contro la disfunzione endoteliale. Metodi Le HDL sono state isolate da soggetti portatori di deficit di LCAT e testate in vitro per la loro capacit� di stimolare la produzione di NO e di inibire l?espressione di molecole di adesione in cellule endoteliali. La misura della vasodilatazione flusso-mediata (FMD) � stata utilizzata come indice in vivo di disfunzione endoteliale. HDL ricostituite, contenenti solo apoA-I (LpA-I) o apoA-I e apoA-II (LpA-I:A-II) sono state utilizzate per dimostrare come quali modifiche strutturali siano responsabili dell?aumentata funzionalit�. Analisi ex vivo del fenotipo e della funzionalit� di monociti isolati da portatori di deficit di LCAT sono stati condotti tramite citometria a flusso, stimolazione e saggi di transmigrazione endoteliale. Portatori di altri deficit genetici di HDL sono stati utilizzati come confronto. Risultati Il deficit di LCAT genetico � caratterizzato da una deplezione selettiva di LpA-I: A-II e da alte concentrazioni di pre?-HDL immature. Le HDL isolate dai portatori si sono dimostrate pi� efficaci nel promuovere l'attivazione di eNOS in vitro mediante fosforilazione e, di conseguenza, la produzione di NO nelle cellule endoteliali, rispetto ai controlli, con un effetto gene-dose. Inoltre, le HDL dei portatori hanno una maggiore capacit� di inibire l'espressione di VCAM-1. L'effetto � probabilmente dipendente dalla deplezione selettiva in lipoproteine LpA-I:A-II. Inoltre, i monociti dei portatori presentavano un fenotipo meno infiammatorio rispetto ai controlli, come evidenziato dalla ridotta espressione dell?integrina CD11c, dalla ridotta capacit� di trasmigrazione e dalla minore produzione di citochine dopo stimolazione. Al contrario, nessuna variazione � stata individuata nell?immunofenotipo di monociti isolati in soggetti con altri deficit genetici di HDL. A conferma in vivo di quanto individuato precedentemente non � stata trovata alcuna differenza nella FMD tra portatori di deficit genetico di LCAT e controlli. Conclusioni Nonostante le ridotte concentrazioni plasmatiche di HDL-C, il deficit di LCAT non � associato a una maggiore disfunzione endoteliale dovuta all'aumentata efficacia delle particelle HDL nella stimolazione della produzione di NO endoteliale e nell'inibizione dell'espressione delle molecole di adesione, nonch� al ridotto potenziale pro-infiammatorio dei monociti dei portatori.