Νέο υπόστρωμα για την παραγωγή σπορίων του μύκητα Blakeslea trispora εφαρμόζοντας τη μεθοδολογία της επιφανειακής απόκρισης:
Creators: name: Νιουβή, Παναγιώτα-Κωνσταντίνα Αθανασίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2009
Subjects: Μύκητας Blateslea trispora
Αγενή σπόρια
Μεθοδολογία επιφανειακής απόκρισης
Υπόστρωμα
Blakeslea trispora
Asexual spores
Response surface methodology

description: Στην παρούσα εργασία μελετήθηκε η επίδραση της γλυκόζης, του εκχυλίσματος καλαμποκιού, του εκχυλίσματος ζύμης, του θειικού αμμωνίου και των ιχνοστοιχείων Cu2+, Fe2+, Co2+ και Mn2+ στην παραγωγή των σπορίων του μύκητα B. trispora. Η βελτιστοποίηση των συγκεντρώσεων των παραπάνω ουσιών πραγματοποιήθηκε με τη χρήση στατιστικού μοντέλου πρόβλεψης, το οποίο βασίζεται στη μεθοδολογία της επιφανειακής απόκρισης. Με το παραπάνω μοντέλο ερμηνεύτηκαν σε ικανοποιητικό βαθμό οι επιδράσεις των παραπάνω ουσιών στην παραγωγή των σπορίων του μύκητα B. trispora . Τέλος με το στατιστικό μοντέλο καθορίστηκε ο συνδυασμός των παραμέτρων που επιτυγχάνει τις μέγιστες τιμές των υπό μελέτη εξαρτημένων μεταβλητών. Αρχικά το μοντέλο εφαρμόστηκε για την αριστοποίηση των συστατικών του βασικού υποστρώματος που θα μας έδινε τη μέγιστη παραγωγή σπορίων του μύκητα. Το βασικό υπόστρωμα αυτό για το στέλεχος ATCC 14271 αποτελούνταν από: γλυκόζη (9,5 gr/l), εκχύλισμα καλαμποκιού (3,4 gr/l), εκχύλισμα ζύμης (2,0 gr/l), θειικό αμμώνιο (3,9 gr/l) και άγαρ (20 gr/l). Στην περίπτωση αυτή ο μέγιστος αριθμός παραγωγής σπορίων ήταν 2,5±0,3x107 σπόρια/τρυβλίο (ο αντίστοιχος αριθμός των σπορίων σε υπόστρωμα PDA ήταν 2,8±0,15 x 107 σπόρια/τρυβλίο). Επιπλέον για το στέλεχος ATCC 14272 το βασικό υπόστρωμα ήταν: γλυκόζη (6,0 gr/l), εκχύλισμα καλαμποκιού (3,5 gr/l), εκχύλισμα ζύμης (1,3 gr/l), θειικό αμμώνιο (4,3 gr/l) και άγαρ (20 gr/l). Στην περίπτωση αυτή ο μέγιστος αριθμός σπορίων ήταν 9,4±0,26 x 105 σπόρια/τρυβλίο (ο αντίστοιχος αριθμός των σπορίων σε υπόστρωμα PDA ήταν 1,0±0,25 x 106 σπόρια/τρυβλίο). Η μεθοδολογία της επιφανειακής απόκρισης επεκτάθηκε και στον εμπλουτισμό του βασικού υποστρώματος με ιχνοστοιχεία. Για το στέλεχος ATCC 14271 το προτεινόμενο υπόστρωμα είναι: γλυκόζη (9,5 gr/l), εκχύλισμα καλαμποκιού (3,4 gr/l), εκχύλισμα ζύμης (2,0 gr/l), θειικό αμμώνιο (3,9 gr/l), CuSO4•5H2O (8,62 mg/l), FeCl3•6H2O (268,86 mg/l), Co(NO3)2•6H2O (1,85 mg/l) και άγαρ (20 gr/l). Στην περίπτωση αυτή ο μέγιστος αριθμός των σπορίων ήταν 2,17±0,44 x 108 σπόρια/τρυβλίο (ο αντίστοιχος αριθμός των σπορίων σε PDA ήταν 2,8±0,15 x 107 σπόρια/τρυβλίο). Για το στέλεχς ATCC 14272 το προτεινόμενο υπόστρωμα είναι γλυκόζη (6,0 gr/l), εκχύλισμα καλαμποκιού (3,5 gr/l), εκχύλισμα ζύμης (1,3 gr/l), θειικό αμμώνιο (4,3 gr/l), CuSO4•5H2O (274,73 mg/l), FeCl3•6H2O (485,02 mg/l), MnCl2•4H2O (255,58 mg/l) και άγαρ (20gr/l). Στην περίπτωση αυτή ο μέγιστος αριθμός των σπορίων ήταν 2,0±0,17 x 107 σπόρια/τρυβλίο (ο αντίστοιχος αριθμός σπορίων σε PDA ήταν 1,0±0,25 x 106 σπόρια/τρυβλίο. Τα παραπάνω αποτελέσματα δείχνουν ότι το νέο - προτεινόμενο υπόστρωμα θα μπορούσε να υποκαταστήσει το PDA και να χρησιμοποιηθεί για την παραγωγή σπορίων του μύκητα B. trispora σε βιομηχανική κλίμακα.
description: In the present study was researched the effect of glucose, corn steep liquor, yeast extract, ammonium sulfate and trace elements Cu2+, Fe2+, Co2+ and Mn2+ on the production of asexual spores of Blakeslea trispora. The optimum concentrations of the above mentioned ingredients have been done by applying of central composite design and response surface methodology. By using the statistic model was determined the combination of independent variables that gives the maximum spores of Blakeslea trispora. Initially the model was done in order to find the optimum concentrations of the basal medium. For the strain ATCC 14271, the basal medium consisted of : glucose (9,5 gr/l), corn steep liquor (3,4 gr/l), yeast extract (2,0 gr/l), ammonium sulphate (3,9 gr/l) and agar (20 gr/l). In this case the number of spores was 2,5±0,3x107 spores/dish (the respective number in PDA was 2,8±0,15 x 107 spores/dish). For the strain ATCC 14272, the basal medium was composed of: glucose (6,0 gr/l), corn steep liquor (3,5 gr/l), yeast extract (1,3 gr/l), ammonium sulphate (4,3 gr/l) and agar (20 gr/l). In this case the number of spores was 9,4±0,26 x 105 spores/dish (the respective number in PDA was 1,0±0,25 x 106 spores/dish). Response surface methodology was expanded in the enrichment of the basal medium with trace elements. For the strain 14271 the new substrate consisted of: glucose (9,5 gr/l), corn steep liquor (3,4 gr/l), yeast extract (2,0 gr/l), ammonium sulphate (3,9 gr/l), CuSO4•5H2O (8,62 mg/l), FeCl3•6H2O (268,86 mg/l), Co(NO3)2•6H2O (1,85 mg/l) and agar (20 gr/l). ). In this case the number of spores was 2,17±0,44 x 108 spores/dish (the respective number in PDA was 2,8±0,15 x 107 spores/dish). For the strain 14272 the new substrate consisted of: glucose (6,0 gr/l), corn steep liquor (3,5 gr/l), yeast extract (1,3 gr/l), ammonium sulphate (4,3 gr/l), CuSO4•5H2O (274,73 mg/l), FeCl3•6H2O (485,02 mg/l), MnCl2•4H2O (255,58 mg/l) and agar (20 gr/l). In this case the number of spores was 2,0±0,17 x 107spores/dish (the respective number in PDA was 1,0±0,25 x 106 spores/dish). In conclusion it is proposed that the new substrate could replace the PDA, in order to produce asexual spores of Blakeslea trispora in the industry.