title: Comparison of IgA and IgG antibodies regarding their capacity to induce NET formation
title: Vergleich von IgA und IgG Antikörpern hinsichtlich ihrer Effektivität in der Stimulation der NET-Bildung
Creators: name: Gimpel, Anna-Katharina
Publisher: name: Friedrich-Alexander-Universität Erlangen-Nürnberg (FAU)
Year: 2024

description: Neutrophile Granulozyten sind meist die ersten Zellen im Falle einer Immunreaktion. Eine ihrer wichtigsten Strategien, um Krankheitserreger unschädlich zu machen, ist die Freisetzung von „Neutrophil Extracellular Traps“ (NETs). NETs bestehen aus extrazellulärer DNA sowie antimikrobiellen Peptiden und sind in der Lage, Pathogene abzufangen. Daher spielen sie eine entscheidende Rolle in der angeborenen Immunabwehr. NETs können jedoch auch Gewebe schädigen und eine Quelle von Autoantigenen sein, die die Bildung von Autoantikörpern triggern. Insbesondere im Zusammenhang mit Autoimmunprozessen hat sich gezeigt, dass Immunkomplexe, die IgA oder IgG enthalten, durch Bindung an IgAoder IgG-spezifische Fc-Rezeptoren (FcRs), die auf der Oberfläche von neutrophilen Granulozyten exprimiert werden, die Bildung von NETs auslösen. Bislang ist nicht bekannt, ob beide Antikörperklassen die NET-Bildung gleichermaßen gut stimulieren können. Darüber hinaus ist es sehr wahrscheinlich, dass IgA und IgG, insbesondere bei Autoimmunerkrankungen, gemischte Komplexe bilden. Somit könnten sie synergistische Effekte auf die NET-Bildung haben. Ziel dieser Studie war es, die Effektivität von IgA und IgG hinsichtlich der Auslösung der NET-Bildung zu vergleichen. Gemessen wurde die Bildung von NETs als Maß für die Aktivierung von Neutrophilen durch Immunglobuline der Isotypen IgA und IgG. Die Antikörper wurden aus gepooltem Serum gesunder Spender isoliert. Um die Wirkung der Immunglobuline auf Neutrophile zu verstärken, wurden die Antikörper hitzeaggregiert. Anschließend wurden die Zellen mit hitzeaggregierten Antikörpern einer Immunglobulinklasse, gemischten Komplexen oder einer entsprechenden Kontrolle stimuliert. Die Blockierung von Fc-Rezeptoren auf der Membran der neutrophilen Granulozyten wurde mit Antikörpern gegen FcγR, FcαR oder der Isotypkontrolle durchgeführt. Vor allem bei chronisch entzündlichen Erkrankungen wie rheumatoider Arthritis ist bekannt, dass IgG Veränderungen in ihrem Glykosylierungsprofil aufweisen. Daher2 verglichen wir sialyliertes und desialyliertes IgG hinsichtlich seines Potenzials, die NETBildung zu induzieren. Die Sialinsäure der Fc-Region von IgG wurde mit dem Enzym Neuraminidase abgespalten. Die NET-Bildung wurde durch Anfärben der freigesetzten DNA mit Sytox Green und anschließende Fluoreszenzmessung quantifiziert. In unserer Studie zeigte komplexiertes IgA eine signifikant höhere Induktion der NET-Bildung im Vergleich zu komplexiertem IgG. Die Kombination von IgA und IgG in gemischten Komplexen führte nicht zu einer weiteren Steigerung der IgA-induzierten NET-Bildung. Im Gegenteil, höhere Konzentrationen von IgG schienen die IgA-induzierte NET-Bildung sogar zu hemmen. Die Blockierung von FcαRI (für IgA) und FcγRII (für IgG) hob jedoch sowohl die Stimulation der NET-Bildung durch reine Komplexe als auch durch gemischte Komplexe auf. Eine Desialylierung von IgG oder die Zugabe von autologem Serum erhöhte die IgGinduzierte NET-Bildung nicht. Insgesamt haben wir festgestellt, dass eine Stimulation neutrophiler Granulozyten mit IgA im Vergleich zu IgG zu erhöhter NET-Bildung führt. Unsere Ergebnisse deuten darauf hin, dass FcαRI und FcγRII die wichtigsten an der NET-Bildung beteiligten Fc-Rezeptoren sind. Die Veränderung des IgG-Glykosylierungsprofils im Sinne einer Desialylierung schien keinen Einfluss zu haben.