Ανάπτυξη και επικύρωση HPLC μεθόδου για τον προσδιορισμό υδροχλωροθειαζίδης, διλτιαζέμης και προπρανολόλης σε δείγματα μελέτης διαλυτοποίησης δισκίων
Creators: name: Σαμαρά, Ειρήνη Μαρία Σταμάτη
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2024
Subjects: Προπρανολόλη
Διλτιαζέμη
Υδροχλωροθειαζίδη
Propranolol
Diltiazem hydrochloride
Hydrochlorothiazide

description: Στην παρούσα διπλωματική εργασία πραγματοποιήθηκε ανάπτυξη και επικύρωση μιας αναλυτικής μεθόδου υγρής χρωματογραφίας υψηλής απόδοσης (HPLC) για τον προσδιορισμό και ποσοτικοποίηση τριών αντιυπερτασικών φαρμάκων σε δισκία που παράχθηκαν μέσω τρισδιάστατης εκτύπωσης (3D-Printing). Tα δείγματα λήφθηκαν από δοκιμές διαλυτοποίησης των δισκίων αυτών (dissolution test) σε προσομοιωμένο γαστρικό υγρό με σκοπό τη δημιουργία του προφίλ διαλυτοποίησης in-vitro για την κάθε δραστική ουσία. Οι ενώσεις που εξετάστηκαν είναι η προπρανολόλη, η διλτιαζέμη και η υδροχλωροθειαζίδη. Για την ανάπτυξη και βελτιστοποίηση της χρωματογραφικής μεθόδου ακολουθήθηκαν τα βήματα του Analytical Quality by Deisgn (AQbD), δηλαδή της επίτευξης αναλυτικής ποιότητας μέσω πειραματικού σχεδιασμού. Έτσι, εξετάστηκε η επίδραση των κρίσιμων παραμέτρων της μεθόδου (Critical Method Parameters, CMPs , το pH της κινητής φάσης, το ποσοστό του οργανικού διαλύτη και η συγκέντρωση της υδατικής φάσης.) στα κρίσιμα χαρακτηριστικά της μεθόδου (Critical Method Attributes, CMAs) δηλαδή στον χρόνο έκλουσης, στην ικανότητα διαχωρισμού ,στον παράγοντα ουράς κορυφών και στον αριθμό θεωρητικών πλακών). Πραγματοποιήθηκαν προκαταρκτικά πειράματα με διαφορετικούς συνδυασμούς των παραπάνω παραγόντων, με σκοπό τον εντοπισμό των βέλτιστων χρωματογραφικών συνθηκών. Χρησιμοποιήθηκε χρωματογραφική στήλη μικτής φάσης με ιδιότητες ανταλλαγής κατιόντων και αντίστροφης φάσης και ανιχνευτής παράταξης φωτοδιόδων. Tέλος, ακολούθησε η επικύρωση της μεθόδου, η ποσοτικοποίηση των δραστικών ουσιών στα δείγματα και η κατασκευή των προφίλ διαλυτοποίησης (dissolution profiles).
description: This work presents the development and validation of a high-performance liquid chromatography (HPLC) analytical method for the determination and quantification of three antihypertensive drugs in tablets designed through 3D-Printing. Samples were obtained throughout the dissolution test of these tablets to create a dissolution profile for each active ingredient. The substances examined were propranolol, diltiazem hydrochloride and hydrochlorothiazide. Analytical Quality by Design (AQbD) was implemented to develop and optimize the chromatographic method. Thus, the effect of the critical method parameters (CMPs) on the critical method attributes (CMAs), mainly analysis time, resolution, tailing factor and number of theoretical plates) was examined. Preliminary experiments were carried out with different combinations of the critical parameters, to identify the optimal chromatographic conditions. A mixed mode HPLC column with weak cation exchange (Weak Cation Exchange, WCX) and reverse phase (RP) properties and a PDA detector was used for the analysis of the samples. The method was then validated, the APIs in the dissolution samples were quantified and the results were then used for the creation of the dissolution profiles.