Διαφοροποίηση βλαστοκυττάρων μικρών σιαλογόνων αδένων του στόματος προς ινσουλινοπαραγωγά κύτταρα παγκρέατος
Creators: name: Παύλου, Αχιλλεία-Μαρία Γεωργίου
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2018
Subjects: Βλαστοκύτταρα ελασσόνων σιελογόνων αδένων
Β παγκρεατικά κύτταρα
Σακχαρώδης διαβήτης
Minor salivary gland stem cells
B pancreatic cells
Diabetes mellitus

description: Σκοπός της παρούσας εργασίας είναι η διερεύνηση της δυνατότητας διαφοροποίησης αρχέγονων κυττάρων ελασσόνων σιελογόνων αδένων σε β-παγκρεατικά κύτταρα. Βλαστοκύτταρα ελασσόνων σιελογόνων αδένων απομονώθηκαν με τη βοήθεια της ενζυματικής μεθόδου και χαρακτηρίστηκαν φαινοτυπικά με κυτταρομετρία ροής. Ακολούθησε η καλλιέργεια αυτών σε κατάλληλο μέσο καλλιέργειας ενώ σε όλα τα στάδια αξιολογήθηκε η κυτταρική μορφολογία με τη βοήθεια οπτικού μικροσκοπίου. Η γονιδιακή έκφραση των παγκρεατικών μεταγραφικών παραγόντων: Pdx1 , Ngn3, Pax4 , και Nkx6.1 , των δεικτών παγκρεατικών βλαστοκυττάρων : c-Met και καρβονική ανυδράση ΙΙ ,καθώς και ινσουλίνης , Glut2 και AFP ανιχνεύθηκε με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης (Real time RT-PCR) .Τα βλαστοκύτταρα εξέφρασαν τον εμβρυϊκό δείκτη SSEA-4 , δείκτες μεσεγχυματικού (CD90/Thy1, CD105, νεστίνη) και επιθηλιακού φαινότυπου (κυτοκερατίνη 14 , κυτοκερατίνες 7/8, κυτοκερατίνη 18), ενώ μόνο λίγα εξέφρασαν αιμοποιητικούς δείκτες (CD34, CD45). Η αρχική μορφολογική κυτταρική ετερογένεια (τα περισσότερα κύτταρα προσομοίαζαν με ινοβλάστες ενώ λίγα έμοιαζαν με επιθηλιακά κύτταρα) ακολουθήθηκε από έντονο κυτταρικό πολλαπλασιασμό. Τα κύτταρα που προέκυψαν εξέφραζαν παγκρεατικούς μεταγραφικούς παράγοντες (Pdx1, Nkx6.1) αλλά και μόρια παγκρεατικών βλαστοκυττάρων (c-Met , καρβονική ανυδράση II). Για πρώτη φορά αρχέγονα κύτταρα μικρών σιελογόνων αδένων μπόρεσαν να μετατραπούν σε κύτταρα που εκφράζουν παγκρεατικούς παράγοντες μεταγραφής και μόρια παγκρεατικών βλαστοκυττάρων. Οι πολυάριθμοι μικροί σιαλογόνοι αδένες αποτελούν μία εύκολα προσβάσιμη πηγή βλαστοκυττάρων που θα μπορούσε να συμβάλλει στην βελτίωση της ποιότητας ζωής των πολυάριθμων ασθενών με σακχαρώδη διαβήτη
description: Aim of the present study is to investigate the potential of minor salivary glands stem cells to differentiate towards b pancreatic cells . Stem cells were isolated from minor salivary glands using the enzymatic method and were characterized phenotypically using flow cytometry . The cells were further cultured in differential culture medium whereas during the experiment an optical microscope was used to evaluate the cellular morphology. The gene expression of pancreatic transcriptional factors : Pdx1 , Ngn3 ,Pax4 , and Nkx6.1 , pancreatic stem cells markers : c-Met , and carbonic anhydrase II , as well as insulin , Glut2 and AFP was evaluated using Real time RT-PCR . The minor salivary gland stem cells were positive for the embryonic stem cell marker SSEA-4 , the mesenchymal stem cell markers CD90/Thy1 , CD105 and nestin and the epithelial markers cytokeratin 14 , cytokeratins 7/8, and cytokeratin 18 , whereas only few of them expressed the hematopoietic stem cell markers CD34 and CD45. The initial morphological cellular heterogeneity (the majority of the cells resembled fibroblasts and only few resembled epithelial cells) was followed by intense cellular proliferation. The cells that were produced from this proliferation expressed not only pancreatic transcriptional factors (Pdx1, Nkx6.1) but also pancreatic stem cells markers (c-Met ,carbonic anhydrase II). For the first time the present study verifies that stem cells derived from the minor salivary glands are able to differentiate towards cells that express pancreatic transcriptional factors and pancreatic stem cells markers. The numerous minor salivary glands are an easily accessible source of stem cells which could be of value for a better quality of life for the numerous patients suffering from diabetes mellitus