In vivo πρωτεόλυση της ριβοσωμικής πρωτεϊνης S5 σε φυσιολογικά κύτταρα:
Creators: name: Τσιτουρούδη, Φανή Ηλία
Publisher: name: Aristotle University of Thessaloniki
Year: 2011
Subjects: Πρωτεόλυση
Ριβοσωμική
Πρωτεϊνη S5
Proteolysis
Ribosonal
Protein S5

description: Η ευκαρυωτική ριβοσωμική πρωτεΐνη S5 έχει μια περιοχή (37-50 αμινοξέα) στην αμινοτελική της περιοχή που συμπεριφερέται σαν σήμα πυρηνικού εντοπισμού (NLS) που οδηγεί την πρωτεΐνη στον πυρήνα. Μετά την μεταφορά της στον πυρήνα, η N-τελική περιοχή της (σερίνη 24) συνεργάζεται με την καρβοξυτελική της περιοχή (Thr-133) για να μεταφερθεί η πρωτεΐνη στον πυρηνίσκο. Μελέτες της rpS5 σε καρκινικά κύτταρα MEL σε διάφορες φάσεις ανάπτυξης τους αποκάλυψαν τυχαία την πρωτεόλυση της στη στατική φάση των κυττάρων αυτών (μετά από 96 ώρες καλλιέργειας), σύμφωνα με την παρατηρούμενη διπλή ζώνη με τη μέθοδο της ανοσοανίχνευσης (Western blot). Με τη χρήση εργαλείων βιοπληροφορικής βρέθηκε ότι στα πρώτα αμινοτελικά 18 αμινοξέα υπάρχει ένα ασθενές σήμα PEST (πρωτεολυτικό σήμα). Η αποικοδόμηση των ελεύθερων ριβοσωμικών πρωτεϊνών στον πυρήνα παρέχει έναν μηχανισμό ελέγχου στα κύτταρα των θηλαστικών, ώστε να μπορούν να εξασφαλίσουν μια ισορροπία ανάμεσα στον υψηλό ρυθμό παραγωγής τους στο κυτταρόπλασμα και στη συγκέντρωση των ελεύθερων και συνδεδεμένων σε ριβοσώματα πρωτεϊνών στον πυρήνα. Το μονοπάτι της NEDDυλίωσης προστατεύει κάποιες ριβοσωμικές πρωτεΐνες από την πρωτεόλυση τους στον πυρήνα, αλλά όχι την rpS5. Τα αποτελέσματα των πειραματικών διαδικασιών που εκπονήθηκαν στα πλαίσια της συγκεκριμένης εργασίας υποδεικνύουν ότι η πρωτεόλυση της rpS5 αρχίζει από τον πυρήνα μετά τις 72 ώρες καλλιέργειας σε φυσιολογικούς ινοβλάστες, γεγονός που ενισχύει τα προηγούμενα αποτελέσματα που συσχετίζουν την πρωτεόλυση της με τον κυτταρικό κύκλο. Ο ακριβής μηχανισμός της πρωτεόλυσης της rpS5 είναι ακόμη άγνωστος, όπως επίσης και η αιτία που οδηγεί την πρωτεΐνη αυτή στην αποικοδόμηση της και είναι φανερό ότι είναι αναγκαίες περαιτέρω έρευνες στο θέμα αυτό.
description: Eukaryotic ribosomal protein S5 (rpS5) has a region (aminoacids 37-50) at its N-terminal area, which behaves as a nuclear localization signal (NLS) and leads rpS5 to the nucleus. After its transportation to the nucleus, the N-terminal area ( Ser-24) cooperates with the C-terminal area (Thr-133) to transport the protein into the nucleolus. Studies using MEL cells from the early log or late stationary phase have accidently revealed that rpS5 is being degraded at the late stationary phase (after 96 hours), according to the two bands observed with Western-blot analysis and a poor PEST (proteolytic signal) sequence was revealed within the first NH2-terminal 18 amino acids. The degradation of unassembled ribosomal proteins in the nucleus provides a mechanism for mammalian cells to ensure that there is a balance between the high level of their production and their concentration in the nucleus, so that their number doesn’t go under the normal rate. The NEDD8 pathway protects some ribosomal proteins from their proteolysis in the nucleus, except from rpS5. The results from this work indicate that rpS5 starts being degraded in the nucleus after 72 hours of cultivation in normal fibroblasts and support the previous results that involve the proteolysis of rpS5 with the cell cycle. However, the accurate pathway of the proteolysis of rpS5 and the exact reasons that lead to this protein’s degradation still remain unknown and further investigation of this matter is needed in the future.