本文研究了测定咖啡因的拟反相色谱法。采用极性色谱柱配以高水量的流动相，所测饮料样品均能在4min内快速完成测定。系统考察了影响咖啡因保留的多种因素。其最佳测定条件为高纯硅胶柱为固定相，流动相为乙腈-水（甲酸钠溶液0.03mol·L-1，pH2.9）（5∶95）。由于分析时间短，同时流动相中乙腈的比例只占5％，极大降低了有机溶剂的消耗和排放，兼具经济和环保的优点。将其用于功能性饮料中咖啡因的测定，操作简便，分离效果好，检测时间短。应用线性范围宽，在浓度范围0.2～1000μg·mL-1内，r＝0.9997（n＝5），方法的检测下限（S/N＝3）为0.05μg·mL-1，加标回收率95.6％～103.9％，相对标准偏差1.6％～2.3％，是检测咖啡因含量的理想方法。同时还对咖啡因的保留机理进行了探讨。
拟反相色谱法 功能性饮料 保留机理 咖啡因