English: After incubation of the primary sensory antibody, or at least one hour and 37 degree temperature, we need to wash again three times with the PBS and then we need to add the substrate.
Telugu: ముప్పై ఏడు డిగ్రీల ఉష్ణోగ్రత వద్ద కనీసం ఒక గంట పాటు ప్రాథమిక ద్వితీయ ప్రతిరోధకం ఇంక్యుబేషన్ తర్వాత, మనం PBSతో మళ్లీ మూడు సార్లు కడగాలి, ఆపై మనము సబ్‌స్ట్రేట్‌ను జోడించాలి.