1588年12月、アンリ3世はギーズ公アンリとマイエンヌ公シャルル(アンナと先夫フランソワとの間の次男)の暗殺、そしてアンナの投獄を命じた(ギーズ公アンリは暗殺されるが、シャルルは逃れ、翌1589年に軍を率いてパリへ入城した)。