山中らは、es細胞の万能性維持に重要なnanog遺伝子の上流にgfpおよびピューロマイシン耐性遺伝子を挿入したを作製し、このマウス由来の線維芽細胞に上述の4遺伝子を導入して、nanogの発現レベルによってips細胞を選別、樹立した。