Characterization of a Distinct Isolate of Tomato Spotted Wilt Virus (TSWV) from Impatiens sp. in The Netherlands
Authors: De ÁVila A. C. , Haan P. De , Kitajima E. W. , Kormelink R. , Resende R. De O. , Goldbach R. W. , Peters D. 
Published: May 2008

AbstractThis paper describes the characterization of a distinct tomato spotted wilt virus (TSWV) isolate from New Guinea impatiens (Impatiens sp.) in the Netherlands. Several plant species responded in a hypersensitive way to this isolate, denoted NL‐07, but the symptoms on Impatiens do not differ from those caused by other TSWV isolates. Except that the S RNA is slightly smaller, the protein and RNA composition is identical to that established for the isolates described. Comparative studies using ELISA, Western blotting and immunogold labelling techniques clearly demonstrate that NL‐07 has a distinct nucleocapsid protein from BR‐01 (common type TSWV), BR‐03 and SA‐05 and moreover it is very closely related to TSWV‐I. Northern blot analysis, supporting the serological data, revealed a lack of significant nucleotide sequence homology between BR‐01, NL‐07 and TSWV‐I Cytopathological studies of NL‐07 displayed clusters of virus particles in the cisternae of the endoplasmatic reticulum together with paracrystalline arrays of rigid rod‐like fibers, formed by the non‐structural protein. Our results show that TSWV classification based on ELISA using monoclonal and polyclonal antibodies against the nucleocapsid protein is stable and safe, even when deletions in the L RNA segment occur or when the virus becomes morphologically defective. We propose to name this virus Impatiens necrotic spot virus.Zusammenfassung Die Charakterisierung eines abgesonderten Isolats des tomato spotted wilt virus (TSWV) aus Impatiens sp. Beschrieben wird die Charakterisierung eines abgesonderten tomato spotted wilt virus (TSWV)‐Isolats aus Neuguinea Impatiens in den Niederlanden. Einige Pflanzenspezies reagieren mit einer hypersensitiven Reaktion gegen dieses Isolat, gekennzeichnet als NL‐07, aber die a Impatiens hervorgerufenen Symptome unterscheiden sich nicht von denen durch andere TSWV‐Isolate verursachte Symptome. Mit Ausnahme einer etwas kleineren S RNS ist die Protein‐ und RNS‐Zusammensetzung des NL‐07 Isolats mit der für andere beschriebene Isolate identisch. Vergleichende Untersuchungen, bei denen ELISA‐, Western blotting‐ und Immunogoldmarkierungsmethoden angewandt wurden, zeigten, daß NL‐07 ein Nucleokapsidprotein hat, das sich von dem des BR‐01 (Wildtyp TSWV), BR‐03 und SA‐05 deutlich unterscheidet. Außerdem ist NL‐07 mit TSWV‐I sehr nah verwandt. Eine Northern blot Analyse unterstützte die serologischen Ergebnisse, die keine signifikante Nukleotidsequenzübereinstimmung zwischen BR‐01, NL‐07 und TSWV‐I zeigten. Zytopathologische Untersuchungen von NL‐07 offenbarten Ansammlungen von Viruspartikeln in den Zisternen des endoplasmatischen Reticulums zusammen mit parakristallinischen Anordnungen von stabilen stabähnlichen Fasern, die aus dem nicht‐strukturellen Protein gebildet worden waren. Die hier vorgestelhen Ergebnisse deuten darauf hin, daß die auf ELISA nach Anwendung von monoklonalen und polyklonalen Antikörpern gegen das Nucleokapsidprotein basierende TSWV‐Klassifizierung stabil und sicher ist, auch dann, wenn Teile des L RNS‐Segments fehlen oder wenn das Virus morphologisch defekt wird. Es wird vorgeschlagen, das Virus Impatiens necrotic spot virus zu nennen.