Effect of Milacemide on Audiogenic Seizures and Cortical (Na+, K+)‐ATPase of DBA/2J Mice
Authors: Laschet Jacques , Guillaume Daniel , Grisar Thierry , Vergniolle‐Burette Marilyn , Minet Arlette 
Published: November 2007

SUMMARY: Milacemide (MLM, CP 1552 S, 2‐JV‐pentylaminoacetamide), a glycinamide derivative, is currently being evaluated clinically for antiepileptic activity. Anticonvulsant properties have been shown in various animal models, but the mechanism of action of MLM is unclear. We studied its activity in audiogenic seizures of DBA/2J mice. MLM was effective in inhibiting the convulsions induced by sound with a biphasic dose‐effect relation. The ED50 was 109 mg/kg orally against tonic extension. Higher doses were necessary to abolish clonic convulsion and running response. Because impaired cerebral (Na+, K+)‐ATPase activity is supposed to play a role in epileptogenesis, we tested MLM on in vitro cortical enzymatic activity of DBA/2J mice. Basal (Na+, K+)‐ATPase activity was unchanged by several concentrations of MLM in normal C57BL/6J and audiogenic DBA/ 2J mice. K+ activation (from 3 to 18 mM) of (Na+, K+)‐ATPase is abolished in DBA/2J mice as compared with C57BL/6J mice, suggesting impaired glial (Na+, K+)‐ATPase. In the presence of MLM (from 30 to 1000 mg/L), cortical (Na+, K+)‐ATPase of DBA/2J mice is activated by high concentrations of K+, as in C57BL/6J mice. Results suggest that the antiepileptic activity of MLM in audiogenic mice may be secondary to an activation of a deficient glial (Na+, K +)‐ATPase.RÉSUMÉLe milacémide (MLM, CP 1552 S, 2‐N‐pentylaminoacétamide) est un dérivé glycinamide qui est actuellement testé au niveau clinique pour son activité antiépileptique. Le MLM a démontré des propriétés anticonvulsivantes dans différents modèles expérimentaux, alors que son mécanisme d'action demeure débattu. Nous avons étudié l'activité du MLM sur les crises audiogéniques de la souris DBA/2J. Le MLM inhibe les crises induites par le bruit avec un effet dose‐réponse biphasique. Le DE50 est de 109 mg/kg par administration orale en ce qui conceme la phase tonique. Des doses plus élevées sont nécessaires pour supprimer la phase clonique et la course sauvage. Etant donné le rôle éventuel d'une déficience de la (Na +, K +)‐ATPase cérébrale dans les mécanismes de l'épileptogenfèse, nous avons testé le MLM sur l'activité enzymatique corticale de la souris DBA/2J. L'activité basale (Na+, K+)‐ATPase n'est pas modifiée par dif‐férentes concentrations en MLM chez la souris contrôle C57BL/ 6J et chez la souris audiogénique DBA/2J. L'activation par l'ion K+ (de 3 à 18 mM) de la (Na +, K+)‐ATPase n'est pas présents chez la souris DBA/2J, contrairement à la souris C57BL/6J, ce qui permet de penser à l'existence d'une altération de l'enzyme gliale. En présence de MLM (de 30 à 1,000 mg/L), la (Na+, K +)‐ATPase corticale de la souris DBA/2J est activée par les concentrations élevées en ions K +, comme chez la souris C57BL/6J. Ces résultats suggèrent que l'activité antiépileptique du milacémide chez la souris DBA/2J pourrait s'exercer via l'activation d'une (Na +, K+)‐ATPase gliale déficiente.RESUMENLa milacemida (MLM) (2‐N‐pentylaminoacetamida), un derivativo de la glycinamida, se está evaluando en el momento actual con respecto a su actividad epileptogénica. Las propiedades anticonvulsivas han sido demostradas en varios modelos animales pero los mecanismos de acción permanecen oscuros. Hemos estudiado esta actividad en los ataques audiogénicos de los ratones DBA/2J. La MLM ha sido eficaz al inhibir las convulsiones inducidas por el sonido con una breve acción bifásica dosis‐efecto. Las ED50 fueron de 109 mg/kg por vía oral, controlando la extensión tónica. Fueron necesarias dosis mß altas para eliminarlas convulsiones clónicas y la respuesta de carrera del animal. Puesto que la alteratión de la actividad cerebral de la (Na +, K +)‐ATPasa parece jugar un papel en la epileptogenesis, los autores examinan la actividad enzimática de la MLM en preparaciones corticales in vitro de los ratones CBA/2J. La actividad básica de la (Na +, K +)‐ATPasa no se modificó tras varias concentraciones de MLM en los ratones normales C57BL/6J y audiogenicos DBA/2J. La activatión del K+ (de 3 a 18 mM) por la (Na+, K +)‐ATPasa se eliminó del K+ (de 3 a 18 mM) por la (Na+, K +)‐ATPasa se eliminó en los ratones DBA/2J comparándolos con los ratones C57BL/6J lo que sugiere una perturbación de la (Na+, K +)‐ATPasa glial. En presencia de la MLM (de 30 a 1,000 mg/1), la (Na +, K +)‐ATPasa de los ratones DBA/ 2J resulta activada en concentraciones altas de K+A, como ocurría en ratones C57BL/6J. Estos resultados sugieren que la actividad antiepiléptica de la MLM en ratones audiogénicos puede ser secundaria a una activación (Na +, K +)‐ATPasa glial previamente deficiente.ZUSAMMENFASSUNGMilacemid (MLM, 2‐N‐Pentylaminoacetamid), ein Glycinamidabkömmling, wurde kürzlich klinisch bzgl. seiner antiepileptischen Aktivität evaluiert. Die antikonvulsiven Eigenschaften wurden in verschiedenen Tiermodellen gezeigt, der Wirkungsmechanismus ist jedoch unklar. Wir untersuchten seine Aktivität bei audiogenen Anfällen von DBA/2J‐Mäusen. MLM war zur Unterdrückung von durch Geräusch ausgelösten Anfällen in einer biphasischen Dosiswirkungsrelation wirksam. Die ED50 betrug 109 mg/kg (oral) gegenüber tonischer Streckung. Höhere Dosierungen waren notwendig, um klonische Konvulsionen und die Renn‐Antwort zu verhinderen. Da eine gestörte cerebrale (Na+, K +)‐ATPase‐Aktivität bei der Epileptogenese vermutet wird, testeten wir MLM auf die kortikale in vitro Enzymaktivität bei DBA/2J‐Mäusen. Die basale (Na+, K +)‐ATPase‐Aktivität war unter verschiedenen MLM‐Konzentrationen bei normalen C57BL/6J‐ und audiogenen DBA/2J‐Mäusen unverändert. Die K +‐Aktivierung (von 3 auf 18 mM) der (NA +, K +)‐ATPase verschwand bei DBA/2J‐Mäusen verglichen mit C57BL/6J‐Mäusen, was eine gestörte gliale (Na+, K +)‐ATPase nahelegt. In der Gegenwart von MLM (von 30 bis 100 mg/l), wird die kortikale (Na+, K +)‐ATPase von DBA/2J‐Mäusen durch hohe Kalium‐Konzentrationen aktiviert wie beiC57BL/6J‐Mäusen. Die Ergebnisse legen nahe, daß die antiepileptische Aktivitat von MLM bei audiogenen Mäusen sekundär zu einer Aktivierung einer mangelnden glialen (Na+, K +)‐ATPase erfolgt.