Immune Platelet Iso‐Antibodies
Authors: Dausset J. , Colin M. , Colombani J. 
Published: March 2009

Summary

A technique is described in detail [12] for detecting serological factors capable of agglutinating platelets at 37°C. It consists of a modification of the agglutination technique described by Dausset and Malinvaud [9] in which an agitator was used. The modification consists of heating the platelets to 56°C. for several seconds after they have been washed. It is thought that heat destroys some clotting factors that are present in the area immediately surrounding each platelet.
The characteristics of these agglutinins are as follows: The optimum temperature of reaction is 37°C., and they react best at physiological pH and ionic concentration. They are thermostable. They are inhibited by a thermolabile factor which is probably complement (the same inhibitor as in the case of leucocyte antibodies); but traces of complement enhance the reaction. They are present in the gamma globulin fraction. They cause lysis, and also fixation of complement. The strongest can be also detected by the anti‐globulin consumption test, the mixed antiglobulin agglutination test, or by thromboelastography.
Platelet agglutinins active at 37°C. have been found in 87 out of 1633 pathological sera studied. The role of transfusion has been proved by the fact that the incidence of these antibodies increases from 3.63 % in patients who had received from one to three transfusions, to 47.36 % in those who have received 101 to 200 transfusions. Two patients who had chorio‐epitheliomata developed platelet agglutinins. Pregnancy also plays a part in the development of platelet antibodies. With one exception, platelet warm agglutinins were not found in sera from patients with idiopathic thrombocytopenic purpura.
They are probably immune iso‐antibodies. They do not react with the platelet of the host, and react only with certain batches of platelets. They are not related to any known red cell antibodies, cold platelet agglutinins, or anti‐platelet gamma‐globulin substance detectable by the antiglobulin consumption test in the serum of some cases of thrombocytopenic purpura, pancytopenia, or DLE. They are closely related to leuco‐agglutinins appearing in the same patients.
They may enable us to define platelet groups that are independent of the red cell groups. They may be the cause of the diminishing haemostatic effect of repeated platelet transfusions, of certain transfusion reactions, and perhaps of some cases of thrombocytopenic purpura of the newborn.

Réumé

°Il est décrit une technique de recherche des substances sériques capables de provoquer à 37°C l'agglutination plaquettaire. Il s'agit d'une modification de la technique d'agglutination par agitation circulaire de Dausset et Malinvaud [9]. La modification essentielle consiste à chauffer à 56°C la suspension de plaquettes lavées. Il est supposé que ce chauffage agit par destruction des facteurs de la coagulation présents dans l'atmosphère plaquettaire.
°Des thrombo‐agglutinines actives à 37°C ont été rencontrées dans 87 sérums provenant de l'étude de 1633 sérums pathologipues. Le rôle des transfusions est prouvé par le fait que la fréquence relative croît avec le nombre des transfusions, passant de 3,63 % chez les malades ayant reçu de un à trois transfusions à 47,36% chez ceux qui ont reçu de 101 à 200 transfusions. Deux malades ont développé des thrombo‐agglutinines au cours d'un chorio‐epitheliome. De même le rôle des grossesses est probable puisque on note une nette prédominance féminine (70,11%) chez les porteurs de thrombo‐agglutinines.
°Les caractères sérologiques de ces thrombo‐agglutinines sont les suivants: Elles ont un optimum d'action à 37°C, sont actives au voisinage de pH et de l'ionisation physiologique. Elles sont thermostables. Elles sont inhibées par un facteur sérique thermolabile qui; est probablement le complément (système inhibiteur identique à celui des leuco‐agglutinines). Elles sont présentes dans les gamma‐globulines. Elles peuvent provoquer également la lyse, la fixation du complément. Elles peuvent êitre décelées encore par la réaction de consommation de l'antiglobuline, par le test mixte d'agglutination par l'antiglobuline ou par la thromboélastographie. Elles n'agissent pas sur les propres plaquettes du donneur et agissent sur certaines variétés de plaquettes. Elles sont sans rapport avec les substances anti‐éry‐throcytaires, avec les thrombo‐agglutinines froides, avec les substances anti‐plaquettaires décelées dans les sérums de purpura thrombopénique non transfusés et sans antécédents de grossesse.Leur rapport avec les leuco‐agglutinines sont étroits: ils apparaissent le plus souvent chez les mêmes malades.
Ce sont vraisemblablement des iso‐anticorps immuns d'origine transfusionnelle (ou éventuellement d'origine gravidique). Ils permettront de définir des groupes plaquettaires qui sont indépendants des groupes érythrocytaires. Ils sont responsables de certains chocs transfusionnels et sans doute de certains purpura thrombopéniques du nouveau‐né.

Zusammenfassung

Eine Technik zum Nachweis von Serumfaktoren, welche bei 37°C Plättchen agglutinieren, wird beschrieben. Es handelt sich um eine Modifikation der Agglutinationsmethode von Dausset und Malinvaud, bei welcher ein Schüttelapparat verwendet wird. Die Modifikation besteht darin, daß die gewaschenen Plättchen wahrend weniger Sekunden auf 56°C erwärmt werden. Es ist anzunehmen, daß durch diese Erwärmung an der Plättchenoberfläche haftende Gerinnungs‐faktoren zerstört werden.
Die Plättchenagglutinine zeigen folgende Eigenschaften: Ihr Wirkungsoptimum liegt bei 37°C, einem physiologischen pH und einer physiologischen Ionenkonzentration. Sie sind thermostabil. Sie werden durch einen thermolabilen Faktor, wahrscheinlich Komple‐ment, gehemmt. Derselbe Faktor hemmt auch die Leukozytenantikörper. Spuren von Komplement verstärken hingegen die Plättchen‐agglutination. Diese Agglutinine sind in der Gammaglobulinfraktion des Serums enthalten. Sie wirken lytisch und bewirken die Bindung von Komplement. Hochtitrige Plättchenagglutinine können auch mit dem Antiglobulinkonsumptionstest, der Antiglobulinmischzelagglutination sowie im Thrombelastogramm nachgewiesen werden.
Es gelang, in 87 von 1633 pathologischen Seren wärmeaktive Plättchenagglutinine nachzuweisen. Die Bedeutung der Bluttransfusionen für die Bildung dieser Antikörper ist daraus ersichtlich, daß diese nur bei 3,63% der Patienten, welche eine bis drei Transfusionen erhalten hatten, gefunden wurden, während anderseits 47,36% derjenigen Patienten, welche 101 bis 200 Transfusionen erhalten hatten, in ihrem Serum solche Antikörper aufwiesen. Zwei Patienten mit einem Chorioepitheliom entwickelten ebenfalls wärmeaktive Plättchenagglutinine. Auch Schwangerschaften spielen eine Rolle bei der Bildung von Plättchenagglutininen. Abgesehen von einer Ausnahme wurden wärmeaktive Plättchenagglutinine bei der idiopathischen thrombozytopenischen Purpura nicht gefunden.
Es handelt sich höchstwahrscheinlich urn Isoimmunantikörper. Sie reagieren nicht mit den «eigenen»d Plättchen; sie reagieren lediglich mit bestimmten, nicht aber mit allen Plättchenmustern. Sie haben keine Beziehung zu den heute bekannten antierythrozytären Antikärpern, zu den kälteaktiven Plättchenagglutininen und den durch den Antiglobulinkonsumptionstest nachweisbaren antithrombozytären Gammaglobulinen, welche bei gewissen Fällen von thrombopenischer Purpura, Pancytopenie oder Lupus erythematodes disseminatus vorkommen. Sie sind hingegen nahe verwandt mit den Leukoagglutininen, welche häufig bei denselben Patienten auftreten.
Es dürfte in Zukunft gelingen, mit Hilfe dieser Antikörper gruppenspezifische, von den Erythrozytenantigenen unabhängige, Plättcheneigenschaften darzustellen. Diese Plättchenagglutinine sind wahrscheinlich die Ursache für die Abnahme des hämostatischen Effektes bei wiederholten Plättchentransfusionen sowie für gewisse Transfusionsreaktionen und möglichenveise für gewisse Fälle von thrombopenischer Purpura bei Neugeborenen.