Quantitative Aspects of the Antiglobulin Consumption Test1,2
Authors: Forster O. 
Published: March 2009

Summary

The inhibiting effect of soluble and tissue fixed human gamma globulin (HGG) on the hemagglutination of anti‐D (Rho) sensitized red blood cells by Coombs serum, called Antiglobulin Consumption Test (AGC‐test), have been compared.
The amount of HGG required to give a certain consumption was about five times larger for tissue fixed than for soluble HGG. The minimum amount of HGG detectable averaged 1.0 μg/ml solution for soluble and 5.1 μg/ml suspension for tissue fixed HGG. Steric hindrance, differences in time and rate of reaction are mentioned as possible explanations for this difference.
Statistical evaluation demonstrates the high variance of the total of our tests on the basis of 95% probability of occurrence. Individual test groups (tests performed simultaneously on one plate) seem to have less variability. The consequences for the practical performance of the AGC‐test are discussed and approximative amounts of tissue fixed gamma globulin for various results of a routine AGC‐test are calculated. The test is qualified as a semiquantitative technique.

Résumé

L'effet inhibiteur des gamma‐globulines humaines (GGH) en solution ou fixées aux tissus sur le test d'hémagglutination d'érythrocytes D (Rho) sensibilisés par l'anti‐D (Rho) incomplet et mis en présence de sérum anti‐globuline ou test de consommation de l'antiglobuline (test de CAG) ont été comparés.
La quantité nécessaire de GGH pour donner une certaine consommation est environ cinq fois plus grande pour les gamma‐globulines fixées aux tissus que pour les gamma‐globulines solubles. La quantité minimum de GGH décelable est de 1 μg/ml de solution pour les gamma‐globulines solubles et 5,1 μg/ml de suspension pour les gamma‐globulines fixées aux tissus. Un empêchement stérique, des modifications dans le temps et le degré de réaction sont mentionnés, comme des explications possibles à ce phénomène.
L'étude statistique démontre la haute variance du total de nos tests, sur la base d'un coefficient de sécurité de 95%. Les groupes de tests individuels (tests pratiqués simultanément sur une seule plaque) semblent présenter une variabilité moindre. Les conséquences pour la pratique habituelle du test de CAG sont discutées et les quantités approximatives de gamma‐globulines fixées aux tissus pour la pratique routinière du test de CAG sont calculées. Ce test est considéré comme une technique semi‐quantitative.

Zusammenfassung

Es wurde die Hemmwirkung von gelöstem und gewebsfixiertem menschlichem Gammaglobulin (HGG) auf die Hämagglutination Anti‐D‐(Rho)‐sensibilisierter Erythrozyten durch Coombs‐Serum [sog. Antiglobulinkonsumptionstest (AGC‐Test)] vergleichend untersucht.
Falls das HGG an Gewebe fixiert war, war die für einen gegebenen Antiglobulinverbrauch benötigte HGG‐Menge ca. fünfmal größer, als wenn sich das HGG in Lösung befand. Die Nachweisgrenze lag bei gelöstem HGG bei 1,0 μg/ml, bei gewebsfixiertem HGG bei 5,1 μg/ml. Dieser Unterschied beruht offensiehtlich auf sterischen Behinderungseffekten. Als weitere Ursachen sind aber auch Unterschiede im zeitlichen Ablauf der Reaktion in Erwägung zu ziehen.
Bei der statistischen Bearbeitung der Ergebnisse zeigte sich auf der Stufe der 95 %‐Wahrscheinlichkeit eine erhebliche Streuung. Einzelversuchsansätze auf derselben Platte zeigen jedoch eine geringere Streuung. Die vorliegenden Ergebnisse werden hinsichtlich ihrer praktischen Bedeutung bei der Durchführung des AGC‐Tests ausgewertet. Außerdem werden Annäherungswerte für die aus dem Routineverfahren ermittelbaren Mengen gewebsfixierten Gammaglobulins errechnet. Der Test ist unter die semi‐quantitativen Methoden einzureihen.